РЕЖИМЫ ДОЗИРОВАНИЯ АНТИТЕЛ АНТИ-LAG-3 И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ Российский патент 2023 года по МПК A61K39/395 A61P35/00 

Перекрестная ссылка на родственные заявки

Настоящая заявка испрашивает приоритет Временной заявки на патент США № 62/534798, поданной 20 июля 2017 года, и Временной заявки на патент США № 62/643992, поданной 16 марта 2018 года. Содержание рассмотренных выше заявок тем самым включается в качестве ссылок во всей своей полноте.

Список последовательностей

Настоящая заявка содержит список последовательностей, который подается в электронном виде в формате ASCII и тем самым включается в качестве ссылки во всей своей полноте. Указанная копия ASCII, созданная 17 июля 2018 года, именуется C2160-7019WO_SL.txt и имеет размер 233,727 байт.

Уровень техники

Ген-3 активации лимфоцитов или LAG-3 (известный также как CD223) представляет собой член супергенного семейства иммуноглобулинов и экспрессируется на активированных Т-лимфоцитах (Huard et al. (1994) Immunogenetics 39:213), NK клетках (Triebel et al. (1990) J. Exp. Med. 171:1393-1405), регуляторных Т-лимфоцитах (Huang et al. (2004) Иммунитет 21:503-513; Camisaschi et al. (2010) J Immunol. 184:6545-6551; Gagliani et al. (2013) Nat Med 19:739-746) и на плазмацитоидных дендритных клетках (DC) (Workman et al. (2009) J Immunol 182:1885-1891). LAG-3 представляет собой мембранный белок, кодируемый геном, расположенным на хромосоме 12, и является структурно и генетически родственным CD4.

Подобно CD4, LAG-3 может взаимодействовать с молекулами MHC класса II на клеточной поверхности (Baixeras et al. (1992) J. Exp. Med. 176:327-337; Huard et al. (1996) Eur. J. Immunol. 26:1180-1186). Предполагается, что прямое связывание LAG-3 с MHC класса II играет роль при даун-регулировании антиген-зависимого стимулирования T-лимфоцитов CD4⁺ (Huard et al. (1994) Eur. J. Immunol. 24:3216-3221), и блокада LAG-3 также, как показано, повышает активность лимфоцитов CD8⁺ как в моделях опухолей или эндоантигенов (Gross et al. (2007) J Clin Invest. 117:3383-3392), так и моделях вирусов (Blackburn et al. (2009) Nat. Immunol. 10:29-37). Кроме того, внутрицитоплазматическая область LAG-3 может взаимодействовать с LAP (LAG-3-ассоциированным белком), который представляет собой сигнальную молекулу, вовлеченную в даун-регулирование пути активации CD3/TCR (Iouzalen et al. (2001) Eur. J. Immunol. 31:2885-2891). Кроме того, регуляторные Т-лимфоциты CD4⁺CD25⁺ (T_reg), как показано, экспрессируют LAG-3 при активации, что вносит вклад в супрессорную активность T_reg лимфоцитов (Huang, C. et al. (2004) Иммунитет 21:503-513). LAG-3 могут также отрицательно регулировать гомеостаз T-лимфоцитов посредством T_reg лимфоцитов как по зависимому от T-лимфоцитов, так и по независимому механизму (Workman, C. J. and Vignali, D. A. (2005) J. Immunol. 174:688-695).

Следовательно, имеется необходимость в новых терапевтических подходах, которые регулируют функции LAG-3 и функции LAG-3-экспрессирующих клеток, включая режимы дозирования и препараты для молекул антитела анти-LAG-3 для лечения заболеваний, таких как рак.

Сущность изобретения

В настоящем изобретении описываются, по меньшей мере, частично, молекулы антитела (например, гуманизированные молекулы антитела), которые связываются с геном-3 активации лимфоцитов (LAG-3) с высокой аффинностью и специфичностью. Также предлагаются фармацевтические композиции и дозированные препараты, содержащие молекулы антитела анти-LAG-3. Молекулы антитела анти-LAG-3, описанные в настоящем изобретении, можно использовать (сами по себе или в сочетании с другими терапевтическими агентами, процедурами или воздействиями) для лечения или предотвращения расстройств, таких как злокачественные расстройства (например, плотные опухоли и гематологические раковые заболевания), а также инфекционных заболеваний (например, хронических инфекционных расстройств или сепсиса). Таким образом, в настоящем изобретении описываются способы, включая режимы дозирования, лечения различных расстройств с использованием молекул антитела анти-LAG-3. В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится или применяется при базовой или фиксированной дозе.

Соответственно, в одном из аспектов, изобретение описывает способ лечения (например, замедления, уменьшения, облегчения или предотвращения) расстройства, например, гиперпролиферативного состояния или расстройства (например, ракового заболевания) у субъекта.

В определенных вариантах осуществления, способ включает введение субъекту молекулы антитела анти-LAG-3, например, молекулы антитела анти-LAG-3, описанной в настоящем документе, при дозе примерно от 300 мг примерно до 500 мг, примерно от 500 мг примерно до 700 мг или примерно от 700 мг примерно до 900 мг один раз в три недели или один раз в четыре недели.

В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 300 мг примерно до 500 мг один раз в три недели или один раз в четыре недели. В других вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 500 мг примерно до 700 мг один раз в три недели или один раз в четыре недели. В других вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 700 мг примерно до 900 мг один раз в три недели или один раз в четыре недели. В других вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 300 мг примерно до 500 мг, примерно 500 мг примерно до 700 мг или примерно 700 мг примерно до 900 мг один раз в три недели. В других вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 300 мг примерно до 500 мг, примерно 500 мг примерно до 700 мг или примерно 700 мг примерно до 900 мг один раз в четыре недели.

В некоторых вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 300 мг примерно до 500 мг, например, примерно от 350 мг примерно до 450 мг, примерно от 300 мг примерно до 400 мг или примерно от 400 мг примерно до 500 мг, например, примерно 300 мг, примерно 350 мг, примерно 400 мг, примерно 450 мг или примерно 500 мг один раз в три недели. В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 350 мг примерно до 450 мг, например, примерно 400 мг один раз в три недели.

В некоторых вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 500 мг примерно до 700 мг, например, примерно от 550 мг примерно до 650 мг, примерно от 500 мг примерно до 600 мг или примерно от 600 мг примерно до 700 мг, например, примерно 500 мг, примерно 533 мг, примерно 550 мг, примерно 600 мг, примерно 650 мг или примерно 700 мг один раз в четыре недели. В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 500 мг примерно до 650 мг, например, примерно 533 мг или примерно 600 мг один раз в четыре недели.

В некоторых вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 700 мг примерно до 900 мг, например, примерно от 750 мг примерно до 850 мг, примерно от 700 мг примерно до 800 мг или примерно от 800 мг примерно до 900 мг, например, примерно 700 мг, примерно 750 мг, примерно 800 мг, примерно 850 мг или примерно 900 мг один раз в четыре недели. В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 750 мг примерно до 850 мг, например, примерно 800 мг один раз в четыре недели.

В некоторых вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе или при схеме дозирования, которая дает в результате либо один случай, либо оба случая из следующих далее:

(a) 50% или более (например, 60% или более, 70% или более, 80% или более, 85% или более, 90% или более, 95% или более, 99% или более) растворимого LAG-3 у субъекта (например, в крови) ассоциированы с молекулой антитела анти-LAG-3; или

(b) 50% или более (например, 60% или более, 70% или более, 80% или более, 85% или более, 90% или более, 95% или более, 99% или более) мембранно-связанного LAG-3 у субъекта (например, при раковом заболевании) ассоциированы с молекулой антитела анти-LAG-3.

В некоторых вариантах осуществления, связывание молекулы антитела анти-LAG-3 с растворимым LAG-3 определяется в образце крови (например, в образце сыворотки или образце плазмы). В некоторых вариантах осуществления, связывание молекулы антитела анти-LAG-3 с мембранно-связанным LAG-3 определяется при раковом заболевании (например, в образце раковой ткани).

В некоторых вариантах осуществления, связывание молекулы антитела анти-LAG-3 с растворимым LAG-3, связывание молекулы антитела анти-LAG-3 с мембранно-связанным LAG-3 или как то, так и другое, определяется, когда субъект имеет стационарный минимальный уровень молекулы антитела анти-LAG-3. В некоторых вариантах осуществления, минимальный уровень представляет собой концентрацию молекулы антитела анти-LAG-3 примерно через 24 недели после введения или самую низкую концентрацию, которой достигает молекула антитела анти-LAG-3 перед введением следующей дозы. В некоторых вариантах осуществления, связывание молекулы антитела анти-LAG-3 с растворимым LAG-3, связывание молекулы антитела анти-LAG-3 с мембранно-связанным LAG-3 или как то, так и другое, определяется, например, измеряется in vitro (например, с помощью ELISA или клеточного анализа) или in vivo (например, посредством обработки изображений) или предсказывается по модели PK/PD, например, по модели PK/PD, описанной в настоящем документе.

В некоторых вариантах осуществления, 60% или более растворимого LAG-3 в образце сыворотки от субъекта связано с молекулой антитела анти-LAG-3. В некоторых вариантах осуществления, 80% или более растворимого LAG-3 в образце сыворотки от субъекта связано с молекулой антитела анти-LAG-3. В некоторых вариантах осуществления, 90% или более растворимого LAG-3 в образце сыворотки от субъекта связано с молекулой антитела анти-LAG-3.

В некоторых вариантах осуществления, 85% или более мембранно-связанного LAG-3 при раковом заболевании или в образце раковой ткани от субъекта, связано с молекулой антитела анти-LAG-3. В некоторых вариантах осуществления, 90% или более мембранно-связанного LAG-3 при раковом заболевании или в образце раковой ткани от субъекта, связано с молекулой антитела анти-LAG-3. В некоторых вариантах осуществления, 95% или более мембранно-связанного LAG-3 при раковом заболевании или в образце раковой ткани от субъекта, связано с молекулой антитела анти-LAG-3.

В некоторых вариантах осуществления, 70% или более, 80% или более или 90% или более, растворимого LAG-3 в образце сыворотки от субъекта связано с молекулой антитела анти-LAG-3, и 85% или более, 90% или более или 95% или более, мембранно-связанного LAG-3 при раковом заболевании или в образце раковой ткани субъекта связано с молекулой антитела анти-LAG-3.

В некоторых вариантах осуществления, 70% или более растворимого LAG-3 в образце сыворотки от субъекта связано с молекулой антитела анти-LAG-3, и 90% или более мембранно-связанного LAG-3 при раковом заболевании или в образце раковой ткани от субъекта, связано с молекулой антитела анти-LAG-3. В некоторых вариантах осуществления, 80% или более растворимого LAG-3 в образце сыворотки от субъекта связано с молекулой антитела анти-LAG-3, и 90% или более мембранно-связанного LAG-3 при раковом заболевании или в образце раковой ткани субъекта связано с молекулой антитела анти-LAG-3. В некоторых вариантах осуществления, 90% или более растворимого LAG-3 в образце сыворотки от субъекта ассоциированы с молекулой антитела анти-LAG-3, и 90% или более мембранно-связанного LAG-3 при раковом заболевании или в образце раковой ткани субъекта связано с молекулой антитела анти-LAG-3.

В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 300 мг примерно до 800 мг, например, примерно 300 мг примерно до 500 мг (например, примерно 400 мг) или примерно 600 мг примерно до 800 мг (например, примерно 700 мг) один раз в три недели. В некоторых вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 300 мг примерно до 500 мг (например, примерно 400 мг) один раз в три недели.

В других вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 600 мг примерно до 1600 мг, например, примерно 600 мг примерно до 1000 мг (например, примерно 800 мг) или примерно 1200 мг примерно до 1600 мг (например, примерно 1400 мг) один раз в четыре недели. В некоторых вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 600 мг примерно до 1000 мг (например, примерно 800 мг) один раз в четыре недели.

В некоторых вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе или при схеме дозирования, которая понижает один или оба следующих далее параметра:

(a) уровень свободного растворимого LAG-3 у субъекта (например, в крови), например, до 50% или меньше (например, до 40% или меньше, 30% или меньше, 20% или меньше, 15% или меньше, 10% или меньше, 5% или меньше или 1% или меньше) от эталонного уровня свободного растворимого LAG-3; или

(b) уровень свободного мембранно-связанного LAG-3 у субъекта (например, при раке), например, до 50% или меньше (например, до 40% или меньше, 30% или меньше, 20% или меньше, 15% или меньше, 10% или меньше, 5% или меньше или 1% или меньше) от эталонного уровня мембранно-связанного LAG-3.

В некоторых вариантах осуществления, уровень свободного растворимого LAG-3 определяется в образце крови (например, образце сыворотки или образце плазмы). В некоторых вариантах осуществления, эталонный уровень свободного растворимого LAG-3 представляет собой фоновый уровень свободного растворимого LAG-3 у субъекта, например, до введения молекулы антитела анти-LAG-3, например, в соответствии со схемой дозирования.

В некоторых вариантах осуществления, уровень свободного мембранно-связанного LAG-3 определяется при раковом заболевании (например, в образце раковой ткани). В некоторых вариантах осуществления, эталонный уровень свободного мембранно-связанного LAG-3 представляет собой фоновый уровень свободного мембранно-связанного LAG-3 у субъекта, например, до введения молекулы антитела анти-LAG-3, например, в соответствии со схемой дозирования.

В некоторых вариантах осуществления, уровень свободного растворимого LAG-3, уровень свободного мембранно-связанного LAG-3 или как то, так и другое, определяется, когда субъект имеет стационарный минимальный уровень молекул антитела анти-LAG-3. В некоторых вариантах осуществления, минимальный уровень представляет собой концентрацию молекулы антитела анти-LAG-3 примерно через 24 недели после введения или самую низкую концентрацию, которой достигает молекула антитела анти-LAG-3 перед введением следующей дозы. В некоторых вариантах осуществления, определяется уровень свободного растворимого LAG-3, уровень свободного мембранно-связанного LAG-3 или как то, так и другое, , например, измеряется in vitro (например, с помощью ELISA или клеточного анализа) или in vivo (например, с помощью обработки изображения) или предсказывается по модели PK/PD, например, по модели PK/PD, описанной в настоящем документе.

В некоторых вариантах осуществления, уровень свободного растворимого LAG-3 понижается до 30% или меньше от эталонного уровня свободного растворимого LAG-3 в образце сыворотки от субъекта. В некоторых вариантах осуществления, уровень свободного растворимого LAG-3 понижается до 20% или меньше от эталонного уровня свободного растворимого LAG-3 в образце сыворотки от субъекта. В некоторых вариантах осуществления, уровень свободного растворимого LAG-3 понижается до 10% или меньше от эталонного уровня свободного растворимого LAG-3 в образце сыворотки от субъекта.

В некоторых вариантах осуществления, уровень свободного мембранно-связанного LAG-3 понижается до 15% или меньше от эталонного уровня свободного мембранно-связанного LAG-3 при раковом заболевании или в образце раковой ткани от субъекта. В некоторых вариантах осуществления, уровень свободного мембранно-связанного LAG-3 понижается до 10% или меньше от эталонного уровня свободного мембранно-связанного LAG-3 при раковом заболевании или в образце раковой ткани от субъекта. В некоторых вариантах осуществления, уровень свободного растворимого LAG-3 понижается до 5% или меньше от эталонного уровня свободного мембранно-связанного LAG-3 при раковом заболевании или в образце раковой ткани от субъекта.

В некоторых вариантах осуществления, уровень свободного растворимого LAG-3 понижается до 30% или меньше, 20% или меньше или 10% или меньше от эталонного уровня свободного растворимого LAG-3 в образце сыворотки от субъекта и уровень свободного мембранно-связанного LAG-3 понижается до 15% или меньше, 10% или меньше или 5% или меньше от эталонного уровня свободного мембранно-связанного LAG-3 при раковом заболевании или в образце раковой ткани от субъекта.

В некоторых вариантах осуществления, уровень свободного растворимого LAG-3 понижается до 30% или меньше от эталонного уровня свободного растворимого LAG-3 в образце сыворотки от субъекта и уровень свободного мембранно-связанного LAG-3 понижается до 10% или меньше от эталонного уровня свободного мембранно-связанного LAG-3 при раковом заболевании или в образце раковой ткани от субъекта. В некоторых вариантах осуществления, уровень свободного растворимого LAG-3 понижается до 20% или меньше от эталонного уровня свободного растворимого LAG-3 в образце сыворотки от субъекта и уровень свободного мембранно-связанного LAG-3 понижается до 10% или меньше от эталонного уровня свободного мембранно-связанного LAG-3 при раковом заболевании или в образце раковой ткани от субъекта. В некоторых вариантах осуществления, уровень свободного растворимого LAG-3 понижается до 10% или меньше от эталонного уровня свободного растворимого LAG-3 в образце сыворотки от субъекта и уровень свободного мембранно-связанного LAG-3 понижается до 10% или меньше от эталонного уровня свободного мембранно-связанного LAG-3 при раковом заболевании или в образце раковой ткани от субъекта.

В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 300 мг примерно до 800 мг, например, примерно от 300 мг примерно до 500 мг (например, примерно 400 мг) или примерно от 600 мг примерно до 800 мг (например, примерно 700 мг) один раз в три недели. В некоторых вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 300 мг примерно до 500 мг (например, примерно 400 мг) один раз в три недели.

В других вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 600 мг примерно до 1600 мг, например, примерно от 600 мг примерно до 1000 мг (например, примерно 800 мг) или примерно от 1200 мг примерно до 1600 мг (например, примерно 1400 мг) один раз в четыре недели. В некоторых вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 600 мг примерно до 1000 мг (например, примерно 800 мг) один раз в четыре недели.

В некоторых вариантах осуществления, расстройство представляет собой раковое заболевание, например, рак, описанный в настоящем документе. В определенных вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой плотную опухоль. В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой опухоль головного мозга, например, глиобластому, глиосаркому или рецидивирующую опухоль головного мозга. В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак поджелудочной железы, например, прогрессирующий рак поджелудочной железы. В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак кожи, например, меланому (например, меланому стадии II-IV, HLA-A2-положительную меланому, нерезектабельную меланому или метастатическую меланому) или карциному клеток Меркеля. В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак почек, например, почечноклеточную карциному (RCC) (например, метастатическую почечноклеточную карциному). В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак молочной железы, например, метастатическую карциному молочной железы или карциному молочной железы IV стадии, например, трижды негативный рак молочной железы (TNBC). В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой ассоциированное с вирусом раковое заболевание. В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак анального канала (например, плоскоклеточную карциному анального канала). В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак шейки матки (например, плоскоклеточную карциному шейки матки). В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак ЖКТ (например, рак ЖКТ положительный по вирусу Эпштейна-Барра или карциному желудочно-кишечного тракта или гастроэзофагеального соединения). В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак головы и шеи (например, HPV-положительный и отрицательный рак сквамовых клеток головы и шеи (SCCHN)). В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак носоглотки (NPC). В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак пениса (например, плоскоклеточную карциному пениса). В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой вагинальный или вульварный рак (например, плоскоклеточную карциному вагины или вульвы). В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак ободочной и прямой кишки, например, рецидивный рак ободочной и прямой кишки или метастатический рак ободочной и прямой кишки, например, рак ободочной и прямой кишки с микросателлитной нестабильностью, микросателлитно стабильный рак ободочной и прямой кишки, рак ободочной и прямой кишки профицитный относительно репарации неспаренных оснований или рак ободочной и прямой кишки дефицитный относительно репарации неспаренных оснований. В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак легких, например, немелкоклеточный рак легкого (NSCLC). В определенных вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой гематологическое раковое заболевание. В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой лейкоз. В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой лимфому, например, лимфому Ходжкина (HL) или диффузную В-крупноклеточную лимфому (DLBCL) (например, рецидивную или не поддающуюся лечению HL или DLBCL). В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой миелому.

В других вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак с высокой микросателлитной нестабильностью. В некоторых вариантах осуществления, рак представляет собой метастатическое раковое заболевание. В других вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой прогрессирующее раковое заболевание. В других вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рецидивный или не поддающийся лечению рак. В других вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рецидивирующий рак.

В некоторых вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится посредством инъекции (например, внутривенно или подкожно) при дозе (например, базовой дозе) примерно от 300 мг примерно до 500 мг (например, примерно 400 мг), примерно от 500 мг примерно до 700 мг (например, примерно 533 мг или примерно 600 мг) или примерно от 700 мг примерно до 900 мг (например, примерно 800 мг). Режим дозирования (например, базовый режим дозирования) может изменяться, например, от одного раз в три недели до одного раза в четыре недели. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится внутривенно при дозе примерно от 300 мг до 500 мг (например, примерно 400 мг) один раз в три недели. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится внутривенно при дозе примерно от 500 мг до 700 мг (например, примерно 533 мг или примерно 600 мг) один раз в четыре недели. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится внутривенно при дозе примерно от 700 мг до 900 мг (например, примерно 800 мг) один раз в четыре недели.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится внутривенно при дозе примерно 400 мг один раз в три недели для лечения ракового заболевания, описанного в настоящем изобретении. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится внутривенно при дозе примерно 533 мг или 600 мг один раз в четыре недели для лечения ракового заболевания, описанного в настоящем изобретении. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится внутривенно при дозе примерно 800 мг один раз в четыре недели для лечения ракового заболевания, описанного в настоящем изобретении.

В одном из вариантов осуществления, способ дополнительно включает введение субъекту ингибитора PD-1 (например, молекулы антитела анти-PD-1, описанной в настоящем документе) или ингибитора PD-L1 (например, молекулы антитела анти-PD-L1, описанной в настоящем документе). В одном из вариантов осуществления, ингибитор PD-1 (например, молекула антитела анти-PD-1, описанная в настоящем документе) вводится внутривенно при дозе примерно от 200 мг примерно до 400 мг (например, примерно 300 мг) один раз в три недели. В определенных вариантах осуществления, субъекту вводится молекула антитела анти-LAG-3 (например, молекула антитела анти-LAG-3, описанная в настоящем документе) вместе с молекулой антитела анти-PD-1 при дозе примерно от 200 мг примерно до 400 мг (например, примерно 300 мг) один раз в три недели. В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 (например, молекула антитела анти-LAG-3, описанная в настоящем документе) вводится при дозе примерно от 300 мг примерно до 500 мг (например, примерно 400 мг) один раз в три недели, и ингибитор PD-1 (например, молекула антитела анти-PD-1, описанная в настоящем документе) вводится при дозе примерно от 200 мг примерно до 400 мг (например, примерно 300 мг) один раз в три недели. В других вариантах осуществления, субъекту вводится молекула антитела анти-LAG-3 (например, молекула антитела анти-LAG-3, описанная в настоящем документе) вместе с молекулой антитела анти-PD-1 при дозе примерно от 300 мг примерно до 500 мг (например, примерно 400 мг) один раз в четыре недели. В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 (например, молекула антитела анти-LAG-3, описанная в настоящем документе) вводится при дозе примерно от 600 мг примерно до 1000 мг (например, примерно 800 мг) один раз в четыре недели и ингибитор PD-1 (например, молекула антитела анти-PD-1, описанная в настоящем документе) вводится при дозе примерно от 300 мг примерно до 500 мг (например, примерно 400 мг) один раз в четыре недели. В одном из вариантов осуществления, способ включает введение субъекту молекулы антитела анти-LAG-3 (например, молекулы антитела анти-LAG-3, описанной в настоящем документе) и химиотерапевтического агента (например, платинового агента (например, карбоплатина, цисплатина, оксалиплатина или тетраплатина) или нуклеотидного аналога или прекурсорного аналога (например, капецитабина)). В одном из вариантов осуществления, химиотерапевтический агент (например, платиновый агент, например, карбоплатин) вводится внутривенно при дозе для достижения площади под кривой (AUC) примерно от 4 примерно до 8 или примерно от 5 примерно до 7 (например, AUC примерно 6) один раз в три недели. В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 (например, молекула антитела анти-LAG-3, описанная в настоящем документе) вводится при дозе примерно от 300 мг примерно до 500 мг (например, примерно 400 мг) один раз в три недели и химиотерапевтический агент (например, платиновый агент, например, карбоплатин) вводится при дозе для достижения площади под кривой (AUC) примерно от 4 примерно до 8 или примерно от 5 примерно до 7 (например, AUC примерно 6) один раз в три недели.

В одном из вариантов осуществления, способ включает введение субъекту молекулы антитела анти-LAG-3 (например, молекулы антитела анти-LAG-3, описанной в настоящем документе), ингибитора PD-1 (например, молекулы антитела анти-PD-1, описанной в настоящем документе) и химиотерапевтического агента (например, платинового агента (например, карбоплатина, цисплатина, оксалиплатина или тетраплатина) или нуклеотидного аналога или прекурсорного аналога (например, капецитабина)). В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 (например, молекула антитела анти-LAG-3, описанная в настоящем документе) вводится при дозе примерно от 300 мг примерно до 500 мг (например, примерно 400 мг) один раз в три недели, ингибитор PD-1 (например, молекула антитела анти-PD-1, описанная в настоящем документе) вводится при дозе примерно от 200 мг примерно до 400 мг (например, примерно 300 мг) один раз в три недели и химиотерапевтический агент (например, платиновый агент, например, карбоплатин) вводится при дозе для достижения площади под кривой (AUC) примерно от 4 примерно до 8 или примерно от 5 примерно до 7 (например, AUC примерно 6) один раз в три недели.

В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 (например, молекула антитела анти-LAG-3, описанная в настоящем документе) или сочетание, содержащее молекулу антитела анти-LAG-3 (например, молекулу антитела анти-LAG-3 в сочетании с одним или двумя компонентами из ингибитора PD-1 или химиотерапевтического агента), применяется для лечения рака молочной железы, например, трижды негативного рака молочной железы (TNBC), например, согласно режиму дозирования, описанному в настоящем документе.

В определенных вариантах осуществления, субъекта не лечат с помощью терапии PD-1 или PD-L1 до приема молекулы антитела анти-LAG-3. В других вариантах осуществления, субъекта лечат с помощью терапии PD-1 или PD-L1 до приема молекулы антитела анти-LAG-3.

В определенных вариантах осуществления, субъекта не лечат с помощью химиотерапевтического агента (например, платинового агента (например, карбоплатина, цисплатина, оксалиплатина или тетраплатина) или нуклеотидного аналога или прекурсорного аналога (например, капецитабина)) до приема молекулы антитела анти-LAG-3. В других вариантах осуществления, субъекта лечат с помощью химиотерапевтического агента (например, платинового агента (например, карбоплатина, цисплатина, оксалиплатина или тетраплатина) или нуклеотидного аналога или прекурсорного аналога (например, капецитабина)) до приема молекулы антитела анти-LAG-3.

В других вариантах осуществления, субъект имеет или идентифицируется как имеющий экспрессирование LAG-3 в лимфоцитах, инфильтрующих опухоли (TIL).

В другом аспекте, изобретение описывает способ уменьшения активности (например, роста, выживаемости или жизнеспособности, или всего вместе) гиперпролиферативных (например, раковых) клеток. Способ включает приведение в контакт клетки с молекулой антитела анти-LAG-3, например, молекулой антитела анти-LAG-3, описанной в настоящем документе. Способ может осуществляться на субъекте, например, в качестве части терапевтического протокола, например, при дозе примерно от 300 мг примерно до 500 мг (например, примерно 400 мг), примерно от 500 мг примерно до 700 мг (например, примерно 533 мг или примерно 600 мг) или примерно от 700 мг примерно до 900 мг (например, примерно 800 мг) молекулы антитела анти-LAG-3 один раз в три недели или один раз в четыре недели. В определенных вариантах осуществления, доза составляет примерно от 300 мг примерно до 500 мг (например, примерно 400 мг) молекулы антитела анти-LAG-3 один раз в три недели. В других вариантах осуществления, доза составляет примерно от 500 мг примерно до 700 мг (например, примерно 533 мг или примерно 600 мг) молекулы антитела анти-LAG-3 один раз в четыре недели. В других вариантах осуществления, доза составляет примерно от 700 мг примерно до 900 мг (например, примерно 800 мг) молекулы антитела анти-LAG-3 один раз в четыре недели.

Раковая клетка может представлять собой, например, клетку из раковой ткани, описанной в настоящем документе, такой как плотная опухоль или гематологическое раковое заболевание, например, опухоль головного мозга (например, глиобластома, глиосаркома или рецидивирующая опухоль головного мозга), рак поджелудочной железы (например, прогрессирующий рак поджелудочной железы), рак кожи (например, меланома (например, меланома II-IV стадии, HLA-A2-положительная меланома, нерезектабельная меланома или метастатическая меланома) или карцинома клеток Меркеля), рак почек (например, почечноклеточную карциному (RCC) (например, метастатическую почечноклеточную карциному)), рак молочной железы (например, метастатическая карцинома молочной железы или карцинома молочной железы IV стадии, например, трижды негативный рак молочной железы (TNBC)), ассоциированное с вирусом раковое заболевание, рак анального канала (например, карцинома сквамовых клеток анального канала), рак шейки матки (например, карцинома сквамовых клеток шейки матки), рак ЖКТ (например, рак ЖКТ положительный по вирусу Эпштейна-Барра или карцинома желудочно-кишечного тракта или гастроэзофагеального соединения), рак головы и шеи (например, HPV положительный и отрицательный рак сквамовых клеток головы и шеи (SCCHN)), рак носоглотки (NPC), рак пениса (например, карцинома сквамовых клеток пениса), вагинальный или вульварный рак (например, карцинома сквамовых клеток вагины или вульвы), рак ободочной и прямой кишки (например, рецидивный рак ободочной и прямой кишки или метастатический рак ободочной и прямой кишки, например, рак ободочной и прямой кишки с микросателлитной нестабильностью, микросателлитно стабильный рак ободочной и прямой кишки, рак ободочной и прямой кишки профицитный относительно репарации неспаренных оснований или рак ободочной и прямой кишки дефицитный относительно репарации неспаренных оснований), рак легких (например, немелкоклеточный рак легкого (NSCLC)), лейкоз, лимфома (например, лимфома Ходжкина (HL) или диффузная В-крупноклеточная лимфома (DLBCL), например, рецидивный или не поддающийся лечению HL или DLBCL) или миелома.

В определенных вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой плотную опухоль. В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой опухоль головного мозга, например, глиобластому, глиосаркому или рецидивирующую опухоль головного мозга. В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак поджелудочной железы, например, прогрессирующий рак поджелудочной железы. В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак кожи, например, меланому (например, меланому II-IV стадии, HLA-A2-положительную меланому, нерезектабельную меланому или метастатическую меланому) или карциному клеток Меркеля. В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак почек, например, почечноклеточную карциному (RCC) (например, метастатическую почечноклеточную карциному). В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак молочной железы, например, метастатическую карциному молочной железы или карциному молочной железы IV стадии, например, трижды негативный рак молочной железы (TNBC). В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой ассоциированное с вирусом раковое заболевание. В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак анального канала (например, плоскоклеточную карциному анального канала). В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак шейки матки (например, плоскоклеточную карциному шейки матки). В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак ЖКТ (например, рак ЖКТ положительный по вирусу Эпштейна-Барра или карциному желудочно-кишечного тракта или гастроэзофагеального соединения). В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак головы и шеи (например, HPV положительный и отрицательный рак сквамовых клеток головы и шеи (SCCHN)). В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак носоглотки (NPC). В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак пениса (например, плоскоклеточную карциному пениса). В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой вагинальный или вульварный рак (например, плоскоклеточную карциному вагины или вульвы). В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак ободочной и прямой кишки, например, рецидивный рак ободочной и прямой кишки или метастатический рак ободочной и прямой кишки, например, рак ободочной и прямой кишки с микросателлитной нестабильностью, микросателлитно стабильный рак ободочной и прямой кишки, рак ободочной и прямой кишки профицитный относительно репарации неспаренных оснований или рак ободочной и прямой кишки дефицитный относительно репарации неспаренных оснований. В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак легких, например, немелкоклеточный рак легкого (NSCLC). В определенных вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой гематологическое раковое заболевание. В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой лейкоз. В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой лимфому, например, лимфому Ходжкина (HL) или диффузную В-крупноклеточную лимфому (DLBCL) (например, рецидивную или не поддающуюся лечению HL или DLBCL). В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой миелому.

В определенных вариантах осуществления, способ дополнительно включает приведение в контакт клеток с одним или обоими компонентами из ингибитора PD-1 (например, молекулы антитела анти-PD-1, описанной в настоящем документе) или химиотерапевтического агента (например, платинового агента (например, карбоплатина, цисплатина, оксалиплатина или тетраплатина) или нуклеотидного аналога или прекурсорного аналога (например, капецитабина)). Способ может осуществляться на субъекте, например, в качестве части терапевтического протокола, например, при дозе примерно от 300 мг примерно до 500 мг (например, примерно 400 мг) молекулы антитела анти-LAG-3 один раз в три недели и при дозе примерно от 200 мг примерно до 400 мг (например, примерно 300 мг) ингибитора PD-1 один раз в три недели. Способ может осуществляться на субъекте, например, в качестве части терапевтического протокола, например, при дозе примерно от 600 мг примерно до 1000 мг (например, примерно 800 мг) молекулы антитела анти-LAG-3 один раз в четыре недели и при дозе примерно от 300 мг примерно до 500 мг (например, примерно 400 мг) ингибитора PD-1 один раз в четыре недели. Способ может осуществляться на субъекте, например, в качестве части терапевтического протокола, например, при дозе примерно от 300 мг примерно до 500 мг (например, примерно 400 мг) молекулы антитела анти-LAG-3 один раз в три недели и при дозе для достижения площади под кривой (AUC) примерно от 4 примерно до 8 или примерно от 5 примерно до 7 (например, AUC примерно 6) химиотерапевтического агента один раз в три недели. Способ может осуществляться на субъекте, например, в качестве части терапевтического протокола, например, при дозе примерно от 300 мг примерно до 500 мг (например, примерно 400 мг) молекулы антитела анти-LAG-3 один раз в три недели, при дозе примерно от 200 мг примерно до 400 мг (например, примерно 300 мг) ингибитора PD-1 один раз в три недели и при дозе химиотерапевтического агента для достижения площади под кривой (AUC) примерно от 4 примерно до 8 или примерно от 5 примерно до 7 (например, AUC примерно 6) один раз в три недели. В некоторых вариантах осуществления, раковая клетка может представлять собой, например, клетку рака молочной железы, например, клетку TNBC. В определенных вариантах осуществления способов, описанных в настоящем изобретении, способ дополнительно включает определение уровней экспрессирования LAG-3 в лимфоцитах, инфильтрующих опухоли (TIL) у субъекта. В других вариантах осуществления, уровень экспрессирования LAG-3 определяется в образце (например, от биопсии опухоли) отбираемом у субъекта (например, с использованием иммуногистохимии). В определенных вариантах осуществления, когда имеется детектируемый уровень или повышенный уровень LAG-3 у субъекта, вводится молекула антитела анти-LAG-3 (например, вводится молекула антитела анти-LAG-3 чувствительная к детектируемому уровню или повышенному уровню LAG-3 у субъекта). Можно также использовать стадии детектирования, например, для мониторинга эффективности терапевтического агента, описанного в настоящем документе. Например, стадию детектирования можно использовать для мониторинга эффективности молекулы антитела анти-LAG-3.

В другом аспекте, изобретение описывает композицию (например, одну или несколько композиций или дозированных форм), которая содержит молекулу антитела анти-LAG-3 (например, молекулу антитела анти-LAG-3, как описано в настоящем документе). В настоящем документе также описываются препараты, например, дозированные препараты и наборы, например, терапевтические наборы, которые содержат молекулу антитела анти-LAG-3 (например, молекулу антитела анти-LAG-3, как описано в настоящем документе). В определенных вариантах осуществления, композиция или препарат содержит примерно от 300 мг примерно до 500 мг (например, примерно 400 мг), примерно от 500 мг примерно до 700 мг (например, примерно 533 мг или примерно 600 мг) или примерно от 700 мг примерно до 900 мг (например, примерно 800 мг) молекулы антитела анти-LAG-3 (например, молекула антитела анти-LAG-3, как описано в настоящем документе). В некоторых вариантах осуществления, композиция или препарат вводится или применяется один раз в три недели или один раз в четыре недели. В некоторых вариантах осуществления, композиция или препарат содержит примерно 400 мг молекулы антитела анти-LAG-3 (например, молекула антитела анти-LAG-3, как описано в настоящем документе) и вводится или применяется один раз в три недели. В некоторых вариантах осуществления, композиция или препарат содержит примерно 533 мг или 600 мг молекулы антитела анти-LAG-3 (например, молекула антитела анти-LAG-3, как описано в настоящем документе) и вводится или применяется один раз в четыре недели. В некоторых вариантах осуществления, композиция или препарат содержит примерно 800 мг молекулы антитела анти-LAG-3 (например, молекула антитела анти-LAG-3, как описано в настоящем документе) и вводится или применяется один раз в четыре недели. В определенных вариантах осуществления, композиция или препарат применяется для лечения ракового заболевания, например, ракового заболевания, описанного в настоящем изобретении.

Дополнительные признаки или варианты осуществления способов, композиций дозированных препаратов и наборов, описанных в настоящем документе, включают один или несколько из следующих далее элементов.

Молекулы антитела to LAG-3

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 содержит, по меньшей мере, одну, две, три, четыре, пять или шесть областей, определяющих комплементарность (CDR) (или коллективно все CDR) из вариабельной области тяжелой и легкой цепи, содержащей последовательность аминокислот, показанную в Таблице 5 (например, от последовательности вариабельной области тяжелой и легкой цепи из BAP050-Clone I или BAP050-Clone J, описанные в Таблице 5), или кодируется последовательностью нуклеотидов, показанных в Таблице 5. В некоторых вариантах осуществления, CDR соответствуют определению Kabat (например, как приведено в Таблице 5). В некоторых вариантах осуществления, CDR соответствуют определению Chothia (например, как приведено в Таблице 5). В некоторых вариантах осуществления, CDR соответствуют объединенным определениям CDR как Kabat, так и Chothia (например, как приведено в Таблице 5). В одном из вариантов осуществления, сочетание определений CDR согласно Kabat и Chothia для VH CDR1 содержит последовательность аминокислот GFTLTNYGMN (SEQ ID NO: 766). В одном из вариантов осуществления, одна или несколько CDR (или коллективно все CDR) имеют одно, два, три, четыре, пять, шесть или более изменений, например, замещений аминокислот (например, консервативных замещений аминокислот) или делеций, по сравнению с последовательностью аминокислот, показанной в Таблице 5 или кодируемой последовательностью нуклеотидов, показанной в Таблице 5.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую последовательность аминокислот VHCDR1 SEQ ID NO: 701, последовательность аминокислот VHCDR2 SEQ ID NO: 702 и последовательность аминокислот VHCDR3 SEQ ID NO: 703 и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую последовательность аминокислот VLCDR1 SEQ ID NO: 710, последовательность аминокислот VLCDR2 SEQ ID NO: 711 и последовательность аминокислот VLCDR3 SEQ ID NO: 712, каждая из них описана в Таблице 5.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 содержит VH, содержащую VHCDR1, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 736 или 737, VHCDR2, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 738 или 739 и VHCDR3, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 740 или 741; и VL, содержащую VLCDR1, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 746 или 747, VLCDR2, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 748 или 749, и VLCDR3, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 750 или 751, каждая из них описана в Таблице 5. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 содержит VH, содержащую VHCDR1, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 758 или 737, VHCDR2, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 759 или 739, и VHCDR3, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 760 или 741; и VL, содержащую VLCDR1, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 746 или 747, VLCDR2, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 748 или 749, и VLCDR3, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 750 или 751, каждая из них описана в Таблице 5.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 содержит VH, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 706 или последовательность аминокислот, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичную SEQ ID NO: 706. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 содержит VL, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 718 или последовательность аминокислот, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичную SEQ ID NO: 718. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 содержит VH, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 724 или последовательность аминокислот, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичную SEQ ID NO: 724. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 содержит VL, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 730, или последовательность аминокислот, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичную SEQ ID NO: 730. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 содержит VH, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 706, и VL, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 718. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 содержит VH, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 724 и VL, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 730,

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит VH, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 707 или 708, или последовательностью нуклеотидов, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше, идентичной SEQ ID NO: 707 или 708. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит VL, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 719 или 720, или последовательностью нуклеотидов, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичной SEQ ID NO: 719 или 720. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит VH, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 725 или 726 или последовательностью нуклеотидов, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичной SEQ ID NO: 725 или 726. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит VL, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 731 или 732 или последовательностью нуклеотидов, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичной SEQ ID NO: 731 или 732. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит VH, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 707 или 708, и VL, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 719 или 720, В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит VH, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 725 или 726, и VL, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 731 или 732.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 содержит тяжелую цепь, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 709, или последовательность аминокислот, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичную SEQ ID NO: 709. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 содержит легкую цепь, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 721 или последовательность аминокислот, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичную SEQ ID NO: 721. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 содержит тяжелую цепь, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 727 или последовательность аминокислот, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичную SEQ ID NO: 727. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 содержит легкую цепь, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 733 или последовательность аминокислот, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичную SEQ ID NO: 733. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 содержит тяжелую цепь, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 709, и легкую цепь, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 721. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 содержит тяжелую цепь, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 727, и легкую цепь, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 733.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит тяжелую цепь, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 716 или 717 или последовательностью нуклеотидов, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичной SEQ ID NO: 716 или 717. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит легкую цепь, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 722 или 723 или последовательностью нуклеотидов, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичной SEQ ID NO: 722 или 723. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит тяжелую цепь, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 728 или 729 или последовательностью нуклеотидов, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичной SEQ ID NO: 728 или 729. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит легкую цепь, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 734 или 735 или последовательностью нуклеотидов, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичной SEQ ID NO: 734 или 735. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит тяжелую цепь, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 716 или 717, и легкую цепь, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 722 или 723. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит тяжелую цепь, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 728 или 729, и легкую цепь, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 734 или 735.

Другие иллюстративные ингибиторы LAG-3

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 представляет собой BMS-986016 (Bristol-Myers Squibb) известную также как BMS986016. BMS-986016 и другие анти-LAG-3 антитела описаны в WO 2015/116539 и в патенте США 9505839, включенных в качестве ссылок во всей своей полноте. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или коллективно, все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи, или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи BMS-986016, например, как описано в Таблице 6.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 представляет собой TSR-033 (Tesaro). В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или коллективно, все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи, или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи TSR-033.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 представляет собой IMP731 или GSK2831781 (GSK и Prima BioMed). IMP731 и другие анти-LAG-3 антитела описаны в WO 2008/132601 и в патенте США 9244059, включенных в качестве ссылок во всей своей полноте. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или коллективно, все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи, или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи IMP731, например, как описано в Таблице 6. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или коллективно, все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи, или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи GSK2831781.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 представляет собой IMP761 (Prima BioMed). В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или коллективно, все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи, или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи IMP761.

Другие известные анти-LAG-3 антитела включают молекулы, описанные, например, в WO 2008/132601, WO 2010/019570, WO 2014/140180, WO 2015/116539, WO 2015/200119, WO 2016/028672, патенте США 9244059, патенте США 9505839, включенных в качестве ссылок во всей своей полноте.

В одном из вариантов осуществления, антитело анти-LAG-3 представляет собой антитело, которое конкурирует за связывание и/или связывается с таким же эпитопом на LAG-3 как одно из антител анти-LAG-3, описанных в настоящем документе.

В одном из вариантов осуществления, ингибитор анти-LAG-3 представляет собой растворимый белок LAG-3, например, IMP321 (Prima BioMed), например, как описано в WO 2009/044273, включаемой в качестве ссылки во всей своей полноте.

Препараты

Молекулы антитела анти-LAG-3, описанные в настоящем документе, могут приготавливаться в виде препарата (например, дозированного препарата или дозированной формы) пригодного для введения (например, внутривенного введения) субъекту, как описано в настоящем документе. Препарат, описанный в настоящем документе, может представлять собой жидкий препарат, лиофилизированный препарат или разбавленный препарат.

В определенных вариантах осуществления, препарат представляет собой жидкий препарат. В некоторых вариантах осуществления, препарат (например, жидкий препарат) содержит молекулу антитела анти-LAG-3 (например, молекулу антитела анти-LAG-3, описанную в настоящем документе) и буферный агент.

В некоторых вариантах осуществления, препарат (например, жидкий препарат) содержит молекулу антитела анти-LAG-3, присутствующую при концентрации от 25 мг/мл до 250 мг/мл, например, от 50 мг/мл до 200 мг/мл, от 60 мг/мл до 180 мг/мл, от 70 мг/мл до 150 мг/мл, от 80 мг/мл до 120 мг/мл, от 90 мг/мл до 110 мг/мл, от 50 мг/мл до 150 мг/мл, от 50 мг/мл до 100 мг/мл, от 150 мг/мл до 200 мг/мл или от 100 мг/мл до 200 мг/мл, например, при 50 мг/мл, 60 мг/мл, 70 мг/мл, 80 мг/мл, 90 мг/мл, 100 мг/мл, 110 мг/мл, 120 мг/мл, 130 мг/мл, 140 мг/мл или 150 мг/мл. В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3, присутствующую при концентрации от 80 мг/мл до 120 мг/мл, например, при 100 мг/мл.

В некоторых вариантах осуществления, препарат (например, жидкий препарат) содержит буферный агент, содержащий гистидин (например, гистидиновый буфер). В определенных вариантах осуществления, буферный агент (например, гистидиновый буфер) присутствует при концентрации от 1 мМ до 100 мМ, например, от 2 мМ до 50 мМ, от 5 мМ до 40 мМ, от 10 мМ до 30 мМ, от 15 до 25 мМ, от 5 мМ до 40 мМ, от 5 мМ до 30 мМ, от 5 мМ до 20 мМ, от 5 мМ до 10 мМ, от 40 мМ до 50 мМ, от 30 мМ до 50 мМ, от 20 мМ до 50 мМ, от 10 мМ до 50 мМ или от 5 мМ до 50 мМ, например, при 2 мМ, 5 мМ, 10 мМ, 15 мМ, 20 мМ, 25 мМ, 30 мМ, 35 мМ, 40 мМ, 45 мМ или 50 мМ. В некоторых вариантах осуществления, буферный агент (например, гистидиновый буфер) присутствует при концентрации от 15 мМ до 25 мМ, например, при 20 мМ. В других вариантах осуществления, буферный агент (например, гистидиновый буфер) или препарат имеет pH от 4 до 7, например, от 5 до 6, например, 5, 5,5 или 6. В некоторых вариантах осуществления, буферный агент (например, гистидиновый буфер) или препарат имеет pH от 5 до 6, например, 5,5. В определенных вариантах осуществления, буферный агент содержит гистидиновый буфер при концентрации от 15 мМ до 25 мМ (например, при 20 мМ) и имеет pH от 5 до 6 (например, 5,5). В определенных вариантах осуществления, буферный агент содержит гистидин и гистидин-HCl.

В некоторых вариантах осуществления, препарат (например, жидкий препарат) содержит молекулу антитела анти-LAG-3, присутствующую при концентрации от 80 до 120 мг/мл, например, при 100 мг/мл; и буферный агент, который содержит гистидиновый буфер при концентрации от 15 мМ до 25 мМ (например, при 20 мМ), при pH от 5 до 6 (например, при 5,5).

В некоторых вариантах осуществления, препарат (например, жидкий препарат) дополнительно содержит углевод. В определенных вариантах осуществления, углевод представляет собой сахарозу. В некоторых вариантах осуществления, углевод (например, сахароза) присутствует при концентрации от 50 мМ до 500 мМ, например, от 100 мМ до 400 мМ, от 150 мМ до 300 мМ, от 180 мМ до 250 мМ, от 200 мМ до 240 мМ, от 210 мМ до 230 мМ, от 100 мМ до 300 мМ, от 100 мМ до 250 мМ, от 100 мМ до 200 мМ, от 100 мМ до 150 мМ, от 300 мМ до 400 мМ, от 200 мМ до 400 мМ или от 100 мМ до 400 мМ, например, при 100 мМ, 150 мМ, 180 мМ, 200 мМ, 220 мМ, 250 мМ, 300 мМ, 350 мМ или 400 мМ. В некоторых вариантах осуществления, препарат содержит углевод или сахарозу, присутствующие при концентрации от 200 мМ до 250 мМ, например, при 220 мМ.

В некоторых вариантах осуществления, препарат (например, жидкий препарат) содержит молекулу антитела анти-LAG-3, присутствующую при концентрации от 80 до 120 мг/мл, например, при 100 мг/мл; буферный агент, который содержит гистидиновый буфер при концентрации от 15 мМ до 25 мМ (например, при 20 мМ); и углевод или сахарозу, присутствующие при концентрации от 200 мМ до 250 мМ, например, при 220 мМ, при pH от 5 до 6 (например, при 5,5).

В некоторых вариантах осуществления, препарат (например, жидкий препарат) дополнительно содержит поверхностно-активное вещество. В определенных вариантах осуществления, поверхностно-активное вещество представляет собой полисорбат 20. В некоторых вариантах осуществления, поверхностно-активное вещество или полисорбат 20) присутствует при концентрации от 0,005% до 0,1% (масс/масс), например, от 0,01% до 0,08%, от 0,02% до 0,06%, от 0,03% до 0,05%, от 0,01% до 0,06%, от 0,01% до 0,05%, от 0,01% до 0,03%, от 0,06% до 0,08%, от 0,04% до 0,08% или от 0,02% до 0,08% (масс/масс), например, при 0,01%, 0,02%, 0,03%, 0,04%, 0,05%, 0,06%, 0,07%, 0,08%, 0,09% или 0,1% (масс/масс). В некоторых вариантах осуществления, препарат содержит поверхностно-активное вещество или полисорбат 20, присутствующие при концентрации от 0,03% до 0,05%, например, при 0,04% (масс/масс).

В некоторых вариантах осуществления, препарат (например, жидкий препарат) содержит молекулу антитела анти-LAG-3, присутствующую при концентрации от 80 до 120 мг/мл, например, при 100 мг/мл; буферный агент, который содержит гистидиновый буфер при концентрации от 15 мМ до 25 мМ (например, при 20 мМ); углевод или сахарозу, присутствующие при концентрации от 200 мМ до 250 мМ, например, при 220 мМ; и поверхностно-активное вещество или полисорбат 20, присутствующий в при концентрации от 0,03% до 0,05%, например, при 0,04% (масс/масс), при pH от 5 до 6 (например, при 5,5).

В некоторых вариантах осуществления, препарат (например, жидкий препарат) содержит молекулу антитела анти-LAG-3, присутствующую при концентрации 100 мг/мл; буферный агент, который содержит гистидиновый буфер (например, гистидин/гистидин-HCl) при концентрации 20 мМ); углевод или сахарозу, присутствующую при концентрации 220 мМ; и поверхностно-активное вещество или полисорбат 20 присутствующее при концентрации 0,04% (масс/масс), при pH от 5 до 6 (например, при 5,5).

Препарат, описанный в настоящем документе, может храниться в контейнере. Контейнер используемый для любого из препаратов, описанных в настоящем документе, может содержать, например, флакон, и необязательно, пробку, колпачок или как то, так и другое. В определенных вариантах осуществления, флакон представляет сбой стеклянный флакон, например, флакон из белого стекла 6R. В других вариантах осуществления, пробка представляет собой каучуковую пробку, например, пробку из серого каучука. В других вариантах осуществления, колпачок представляет собой откидывающийся колпачок, например, алюминиевый откидывающийся колпачок. В некоторых вариантах осуществления, контейнер содержит флакон из белого стекла 6R, пробку из серого каучука и алюминиевый откидывающийся колпачок. В некоторых вариантах осуществления, контейнер (например, флакон) может представлять собой одноразовый контейнер. В определенных вариантах осуществления в контейнере (например, во флаконе) присутствует, от 25 мг/мл до 250 мг/мл, например, от 50 мг/мл до 200 мг/мл, от 60 мг/мл до 180 мг/мл, от 70 мг/мл до 150 мг/мл, от 80 мг/мл до 120 мг/мл, от 90 мг/мл до 110 мг/мл, от 50 мг/мл до 150 мг/мл, от 50 мг/мл до 100 мг/мл, от 150 мг/мл до 200 мг/мл или от 100 мг/мл до 200 мг/мл, например, 50 мг/мл, 60 мг/мл, 70 мг/мл, 80 мг/мл, 90 мг/мл, 100 мг/мл, 110 мг/мл, 120 мг/мл, 130 мг/мл, 140 мг/мл или 150 мг/мл молекул антитела анти-LAG-3,.

В другом аспекте, изобретение описывает терапевтические наборы, которые содержат молекулы антитела анти-LAG-3, композиции или препараты, описанные в настоящем документе, и инструкции для использования, например, согласно режимам дозирования, описанным в настоящем документе.

Терапевтическое применение

Молекулы антитела анти-LAG-3, описанные в настоящем документе, могут замедлять, уменьшать или нейтрализовать одну или несколько активностей LAG-3, приводя в результате к блокаде или уменьшению экспрессии иммунной контрольной точки. Таким образом, молекулы антитела анти-LAG-3, описанные в настоящем документе, можно использовать для лечения или предотвращения расстройства (например, рака), когда желательным является усиление иммунной реакции у субъекта.

Соответственно, в другом аспекте, способ предлагается модуляция иммунной реакции у субъекта. Способ включает введение субъекту молекулы антитела анти-LAG-3, описанной в настоящем документе, согласно режиму дозирования, описанному в настоящем документе, самой по себе или в сочетании с одним или несколькими терапевтическими агентами, процедурами или воздействиями, так что модулируется иммунная реакция у субъекта. В одном из вариантов осуществления, молекулы антитела усиливают, стимулируют или увеличивают иммунную реакцию у субъекта. Субъект может представлять собой млекопитающее, например, примата, предпочтительно, высшего примата, например, человека (например, пациента, имеющего расстройство, описанное в настоящем документе, или риск его возникновения). В одном из вариантов осуществления, субъект нуждается в усилении иммунной реакции. В одном из вариантов осуществления, субъект имеет расстройство, описанное в настоящем документе, или имеет риск его возникновения, например, раковое заболевание или инфекционное расстройство, как описано в настоящем документе. В определенных вариантах осуществления, субъект имеет ослабленный иммунитет или риск его возникновения. Например, субъект подвергается или должен подвергаться химиотерапевтическому лечению и/или радиационной терапии. Альтернативно или в сочетании с этим, субъект имеет ослабленный иммунитет или риск его возникновения, в результате инфекции.

В одном из аспектов, предлагается способ лечения (например, одного или нескольких воздействий из уменьшения, замедления или задержки развития) рака или опухоли у субъекта. Способ включает введение субъекту молекулы антитела анти-LAG-3, описанной в настоящем документе, согласно режиму дозирования, описанному в настоящем документе, самой по себе или в сочетании с одним или несколькими терапевтическими агентами, процедурами или воздействиями.

В определенных вариантах осуществления, раковое заболевание, излечиваемое с помощью молекулы антитела анти-LAG-3, включает, но, не ограничиваясь этим, плотную опухоль, гематологическое раковое заболевание (например, лейкоз, лимфому, миелому, например, множественную миелому) и метастатическое поражение. В одном из вариантов осуществления, раковое заболевание представляет собой плотную опухоль. Примеры плотных опухолей включают злокачественные новообразования, например, саркомы и карциномы, например, аденокарциномы различных систем органов, такие как те, которые воздействуют на легкие, молочную железу, яичники, лимфатические органы, желудочно-кишечный тракт (например, толстую кишку), прямую кишку, гениталии и мочеполовой тракт (например, почечные, уротелиальные клетки, клетки мочевого пузыря, простату), гортань, ЦНС (например, на головной мозг, нейральные или глиальные клетки), на голову и шею, кожу (например, меланома) и на поджелудочную железу, а также аденокарциномы, которые включают такие злокачественные новообразования, как рак толстой кишки, рак прямой кишки, рак почек (например, почечноклеточную карциному (светлоклеточная или несветлоклеточная почечноклеточная карцинома)), рак печени, рак легких (например, немелкоклеточный рак легкого (плоскоклеточный или неплоскоклеточный немелкоклеточный рак легкого)), рак тонкого кишечника и рак пищевода. Раковое заболевание может представлять собой раннюю, промежуточную, позднюю стадию или метастатический рак.

В одном из вариантов осуществления, раковое заболевание выбирается из рака легких (например, немелкоклеточного рака легкого (NSCLC) (например, NSCLC с плоскоклеточной и/или неплоскоклеточной гистологией или аденокарциномы NSCLC) или мелкоклеточного рака легкого (SCLC)), рака кожи (например, карциномы клеток Меркеля или меланомы (например, прогрессирующей меланомы)), рака яичников, мезотелиомы, рака мочевого пузыря, саркомы мягких тканей (например, гемангиоперицитомы (HPC)), рака костей (саркомы костей), рака почек (например, рака почки (например, почечноклеточной карциномы)), рака печени (например, гепатоцеллюлярной карциномы), холангиокарциномы, саркомы, миелодиспластического синдрома (MDS), рака простаты, рака молочной железы (например, рака молочной железы, который не экспрессирует одного, двух или всех рецепторов из рецептора эстрогена, рецептора прогестерона или Her2/neu, например, трижды негативного рака молочной железы), рака ободочной и прямой кишки, рака носоглотки, рака двенадцатиперстной кишки, рака эндометрия, рака поджелудочной железы, рака головы и шеи (например, плоскоклеточной карциномы головы и шеи (HNSCC)), рака анального канала, рака гастроэзофагеального перехода, рака щитовидной железы (например, анапластической карциномы щитовидной железы), рака шейки матки, нейроэндокринной опухоли (NET) (например, атипичной легочной карциноидной опухоли), лимфопролиферативного заболевания (например, пост-трансплантационного лимфопролиферативного заболевания), лимфомы (например, T-клеточной лимфомы, B-клеточной лимфомы или не-Ходжкинской лимфомы), миеломы (например, множественной миеломы) или лейкоза (например, миелоидного лейкоза или лимфоидного лейкоза).

В определенных вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой плотную опухоль. В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой опухоль головного мозга, например, глиобластому, глиосаркому или рецидивирующую опухоль головного мозга. В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак поджелудочной железы, например, прогрессирующий рак поджелудочной железы. В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак кожи, например, меланому (например, меланому II-IV стадии, HLA-A2-положительную меланому, нерезектабельную меланому или метастатическую меланому) или карциному клеток Меркеля. В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак почек, например, почечноклеточную карциному (RCC) (например, метастатическую почечноклеточную карциному). В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак молочной железы, например, метастатическую карциному молочной железы или карциному молочной железы IV стадии, например, трижды негативный рак молочной железы (TNBC). В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой ассоциированное с вирусом раковое заболевание. В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак анального канала (например, плоскоклеточную карциному анального канала). В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак шейки матки (например, плоскоклеточную карциному шейки матки). В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак ЖКТ (например, рак ЖКТ положительный по вирусу Эпштейна-Барра или карциному желудочно-кишечного тракта или гастроэзофагеального соединения). В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак головы и шеи (например, HPV положительный и отрицательный рак сквамовых клеток головы и шеи (SCCHN)). В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак носоглотки (NPC). В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак пениса (например, плоскоклеточную карциному пениса). В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой вагинальный или вульварный рак (например, плоскоклеточную карциному вагины или вульвы). В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак ободочной и прямой кишки, например, рецидивный рак ободочной и прямой кишки или метастатический рак ободочной и прямой кишки, например, рак ободочной и прямой кишки с микросателлитной нестабильностью, микросателлитно стабильный рак ободочной и прямой кишки, рак ободочной и прямой кишки профицитный относительно репарации неспаренных оснований или рак ободочной и прямой кишки дефицитный относительно репарации неспаренных оснований. В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак легких, например, немелкоклеточный рак легкого (NSCLC).

В определенных вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой гематологическое раковое заболевание. В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой лейкоз. В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой лимфому, например, лимфому Ходжкина (HL) или диффузную В-крупноклеточную лимфому (DLBCL) (например, рецидивную или не поддающуюся лечению HL или DLBCL). В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой миелому.

В другом варианте осуществления, рак выбирается из карциномы (например, прогрессирующей или метастатической карциномы), меланомы или карциномы легкого, например, немелкоклеточной карциномы легкого. В одном из вариантов осуществления, раковое заболевание представляет собой рак легких, например, немелкоклеточный рак легкого или мелкоклеточный рак легкого. В некоторых вариантах осуществления, немелкоклеточный рак легкого представляет собой немелкоклеточный рак легкого стадии I (например, стадии Ia или Ib), II стадии (например, стадии IIa или IIb), стадии III (например, стадии IIIa или IIIb) или стадии IV. В одном из вариантов осуществления, раковое заболевание представляет собой меланому, например, прогрессирующую меланому. В одном из вариантов осуществления, раковое заболевание представляет собой прогрессирующую или нерезектабельную меланому, которая не реагирует на другие виды терапии. В других вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой меланому с мутацией BRAF (например, с мутацией BRAF V600). В другом варианте осуществления, раковое заболевание представляет собой гепатокарциному, например, прогрессирующую гепатокарциному, с вирусной инфекцией или без нее, например, с хроническим вирусным гепатитом. В другом варианте осуществления, раковое заболевание представляет собой рак простаты, например, прогрессирующий рак простаты. Еще в одном варианте осуществления, раковое заболевание представляет собой миелому, например, множественную миелому. Еще в одном варианте осуществления, раковое заболевание представляет собой рак почек, например, почечноклеточную карциному (RCC) (например, метастатическую RCC, несветлоклеточную почечноклеточную карциному (nccRCC) или светлоклеточную почечноклеточную карциному (CCRCC)).

В одном из вариантов осуществления, раковая окружающая микросреда имеет повышенный уровень экспрессирования LAG-3. В одном из вариантов осуществления, раковая окружающая микросреда имеет повышенный уровень экспрессирования PD-L1. Альтернативно или в сочетании с этим, раковая окружающая микросреда может иметь повышенное экспрессирование IFNγ и/или CD8.

В некоторых вариантах осуществления, субъект имеет или идентифицируется как имеющий опухоль, которая имеет один или несколько факторов из высокого уровня или экспрессирования PD-L1 или как лимфоцит, инфильтрующий опухоль (TIL)+ (например, как имеющий повышенное количество TIL) или как то, так и другое. В определенных вариантах осуществления, субъект имеет или идентифицируется как имеющий опухоль, которая имеет высокий уровень или экспрессирование PD-L1, и которая является TIL+. В некоторых вариантах осуществления, способы, описанные в настоящем документе, дополнительно включают идентификацию субъекта относительно наличия опухоли, которая имеет один или несколько факторов из высокого уровня или экспрессирования PD-L1, или является TIL+, или как то, так и другое. В определенных вариантах осуществления, способы, описанные в настоящем документе, дополнительно включают идентификацию субъекта относительно наличия опухоли, которая имеет высокий уровень или экспрессирование PD-L1 и является TIL+. В некоторых вариантах осуществления, опухоли, которые представляют собой TIL+, являются положительными относительно CD8 и IFNγ. В некоторых вариантах осуществления, субъект имеет или идентифицируется как имеющий высокий процент клеток, которые являются положительными относительно одного, двух или более факторов из PD-L1, CD8 и/или IFNγ. В определенных вариантах осуществления, субъект имеет или идентифицируется как имеющий высокий процент клеток, которые являются положительными относительно всех белков из PD-L1, CD8 и IFNγ.

В некоторых вариантах осуществления, способы, описанные в настоящем документе, дополнительно включают идентификацию субъекта относительно наличия высокого процента клеток, которые являются положительными относительно одного, двух или более белков из PD-L1, CD8 и/или IFNγ. В определенных вариантах осуществления, способы, описанные в настоящем документе, дополнительно включают идентификацию субъекта относительно наличия высокого процента клеток, которые являются положительными относительно всех белков из PD-L1, CD8 и IFNγ. В некоторых вариантах осуществления, субъект имеет или идентифицируется как имеющий один, два или более факторов из PD-L1, CD8 и/или IFNγ, и одно или несколько заболеваний из рака легких, например, плоскоклеточного рака легких или аденокарциномы легких (например, NSCLC); рака головы и шеи; рака сквамовых клеток шейки матки; рака желудка; рака пищевода; рака щитовидной железы (например, анапластической тиреоидной карциномы); рака кожи (например, карциномы клеток Меркеля или меланомы), рака молочной железы (например, TNBC) и/или рака носоглотки (NPC). В определенных вариантах осуществления, способы, описанные в настоящем документе, дополнительно описывают идентификацию субъекта относительно наличия одного, двух или более факторов из PD-L1, CD8, и/или IFNγ, и одного или нескольких заболеваний из рака легких, например, плоскоклеточного рака легких или аденокарциномы легких (например, NSCLC); рака головы и шеи; рака сквамовых клеток шейки матки; рака желудка; рака щитовидной железы (например, анапластической тиреоидной карциномы); рака кожи (например, карциномы клеток Меркеля или меланомы), нейроэндокринной опухоли, рака молочной железы (например, TNBC) и/или рака носоглотки.

Способы, композиции и препараты, описанные в настоящем изобретении, являются пригодными для лечения метастатических поражений, связанных с рассмотренными выше раковыми заболеваниями.

В другом аспекте, изобретение предлагает способ лечения инфекционного заболевания (например, инфекционного заболевания, описанного в настоящем документе) у субъекта, включающий введение субъекту молекулы антитела анти-LAG-3, описанной в настоящем документе, согласно режиму дозирования, описанному в настоящем документе.

Кроме того, настоящее изобретение предлагает способ усиления иммунной реакции на антиген у субъекта, включающий введение субъекту: (i) антигена; и (ii) молекулы антитела анти-LAG-3, описанной в настоящем документе, согласно режиму дозирования, описанному в настоящем документе, так что усиливается иммунная реакция на антиген у субъекта. Антиген может представлять собой, например, антиген опухоли, вирусный антиген, бактериальный антиген или антиген из патогена.

Молекула антитела анти-LAG-3, описанная в настоящем документе, может вводиться субъекту системно (например, перорально, парентерально, подкожно, внутривенно, ректально, внутримышечно, внутрибрюшинно, интраназально, трансдермально или посредством ингаляции или внутриполостной инсталляции), местным образом или посредством нанесения на слизистые мембраны, например, в носу, глотке и бронхах. В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится внутривенно при базовой дозе, описанной в настоящем документе.

Сочетанная терапия

Молекулы антитела анти-LAG-3, описанные в настоящем документе, можно применять в сочетании с другими терапевтическими агентами, процедурами или воздействиями.

В одном из вариантов осуществления, способы, описанные в настоящем документе, включают введение субъекту сочетания, содержащего молекулу антитела анти-LAG-3, описанную в настоящем документе, в сочетании с терапевтическим агентом, процедурой или воздействием, в количестве, эффективном для лечения или предотвращения расстройства. В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится или применяется согласно режиму дозирования, описанному в настоящем документе. В других вариантах осуществления, молекула антитела вводится или применяется как композиция или препарат, описанный в настоящем документе.

Молекула антитела анти-LAG-3 и терапевтический агент, процедура или воздействие могут вводиться или применяться одновременно или последовательно в любом порядке. Может применяться любое сочетание и последовательность молекул антитела анти-LAG-3 и терапевтического агента, процедуры или воздействия (например, как описано в настоящем документе). Молекула антитела и/или терапевтический агент, процедура или воздействие могут вводиться или применяться в ходе периодов активного расстройства или в ходе периода ремиссии или менее активного заболевания. Молекула антитела может вводиться до лечения, одновременно с ним или после лечения с помощью терапевтического агента процедуры или воздействия.

В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3, описанная в настоящем документе, вводится в сочетании с одной или несколькими другими молекулами антител, химиотерапией, с другой противораковой терапией (например, с целевой противораковой терапией, генной терапией, вирусной терапией, РНК терапией, трансплантацией костного мозга, нанотерапией или онколитическими лекарственными средствами), цитотоксичными агентами, терапией на иммунной основе (например, иммунной терапией на основе цитокинов или клеточной иммунной терапией), хирургическими процедурами (например, лампэктомией или мастэктомией) или радиационными процедурами, или сочетанием любых рассмотренных выше процедур. Дополнительная терапия может осуществляться в форме вспомогательной или неоадъювантной терапии. В некоторых вариантах осуществления, дополнительная терапия представляет собой ферментативный ингибитор (например, низкомолекулярный ферментативный ингибитор) или метастатический ингибитор. Иллюстративные цитотоксичные агенты, которые могут вводиться в сочетании, включают агенты против образования микротрубочек, ингибиторы топоизомеразы, антиметаболиты, митотические ингибиторы, алкилирующие агенты, антрациклины, алкалоиды винка, интеркалирующие агенты, агенты способные взаимодействовать с путями передачи сигналов, агенты, которые способствуют апоптозу, протеасомные ингибиторы и радиацию (например, локальное облучение или облучение всего организма (например, гамма-облучение)). В других вариантах осуществления, дополнительная терапия представляет собой хирургию или облучение, или их сочетание. В других вариантах осуществления, дополнительная терапия представляет собой терапию, нацеленную на один или несколько объектов из пути PI3K/AKT/mTOR, ингибитора HSP90 или ингибитора тубулина.

Альтернативно или в сочетании с указанными выше сочетаниями, антитело анти-LAG-3, описанное в настоящем документе, может вводиться или применяться в сочетании с одним или несколькими факторами из: иммуномодулятора (например, активатора костимуляторной молекулы или ингибитора ингибиторной молекулы, например, молекулы иммунной контрольной точки); вакцины, например, терапевтической раковой вакцины; или других форм клеточной иммунотерапии.

В определенных вариантах осуществления, молекула анти-LAG-3, описанная в настоящем документе, вводится или применяется в сочетании с модулятором костимуляторной молекулы или ингибиторной молекулы, например, ко-ингибиторного лиганда или рецептора.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3, описанная в настоящем документе, вводится или применяется в сочетании с модулятором, например, агонистом костимуляторной молекулы. В одном из вариантов осуществления, агонист костимуляторной молекулы выбирается из агониста (например, агонистического антитела или его антиген-связывающего фрагмента, или белка слияния в растворе) лиганда OX40, CD2, CD27, CDS, ICAM-1, LFA-1 (CD11a/CD18), ICOS (CD278), 4-1BB (CD137), GITR, CD30, CD40, BAFFR, HVEM, CD7, LIGHT, NKG2C, SLAMF7, NKp80, CD160, B7-H3 или лиганда к CD83.

В другом варианте осуществления, молекула антитела анти-LAG-3, описанная в настоящем документе, вводится или применяется в сочетании с агонистом GITR, например, молекулой антитела анти-GITR.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3, описанная в настоящем документе, вводится или применяется в сочетании с ингибитором ингибиторной молекулы (или молекулы иммунной контрольной точки), выбранной из PD-1, PD-L1, PD-L2, CTLA-4, TIM-3, LAG-3, CEACAM (например, CEACAM-1, CEACAM-3, и/или CEACAM-5), VISTA, BTLA, TIGIT, LAIR1, CD160, 2B4 и/или TGF бета. В одном из вариантов осуществления, ингибитор представляет собой растворимый лиганд (например, CTLA-4-Ig) или антитело или фрагмент антитела, который связывается с PD-1, LAG-3, PD-L1, PD-L2 или CTLA-4.

В другом варианте осуществления, молекула антитела анти-LAG-3, описанная в настоящем документе, вводится или применяется в сочетании с ингибитором PD-1, например, молекулой антитела анти-PD-1. В другом варианте осуществления, молекула антитела анти-LAG-3, описанная в настоящем документе, вводится или применяется в сочетании с ингибитором TIM-3, например, молекулой антитела анти-TIM-3. В другом варианте осуществления, молекула антитела анти-LAG-3, описанная в настоящем документе, вводится или применяется в сочетании с ингибитором PD-L1, например, молекулой антитела анти-PD-L1.

В другом варианте осуществления, молекула антитела анти-LAG-3, описанная в настоящем документе, вводится или применяется в сочетании с химиотерапевтическим агентом. В определенных вариантах осуществления, химиотерапевтический агент содержит платиновый агент (например, карбоплатин, цисплатин, оксалиплатин или тетраплатин). В определенных вариантах осуществления, химиотерапевтический агент содержит цисплатин, перметрексед или как то, так и другое. Цисплатин известен также как цисплатин, платамин, неоплатин, цисмаплат или цис-диамминдихлоридоплатин (II) (CDDP). Перметрексед известен также как (S)-2-(4-(2-(2-амино-4-оксо-4,7-дигидро-3H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-ил)этил)бензамидо)глутаровая кислота. В определенных вариантах осуществления, химиотерапевтический агент содержит нуклеотидный аналог или прекурсорный аналог (например, капецитабин, азацитидин, азатиоприн, цитарабин, доксифлуридин, флуороурацил, гемцитабин, гидроксимочевину, меркаптопурин, метотрексат или тиогуанин (фиогуанин)). В определенных вариантах осуществления, химиотерапевтический агент содержит гипометилирующий агент (например, децитабин). В одном из вариантов осуществления, химиотерапевтический агент содержит nab-паклитаксель.

Другие иллюстративные химиотерапевтические агенты, которые можно использовать в сочетании с молекулой антитела анти-LAG-3, включают, но, не ограничиваясь этим, алкилирующий агент (например, бифункциональный алкилатор (например, циклофосфамид, мехлорэтамин, хлорамбуцил или мелфалан)), монофункциональный алкилатор (например, дакарбазин (DTIC), нитрозомочевины или темозоломид (пероральный дакарбазин)), антрациклин (например, даунорубицин, доксорубицин, эпирубицин, идарубицин, митоксантрон или валрубицин), разрушитель цитоскелета или таксан (например, паклитаксель, доцетаксель, абраксан или таксотер), эпотилон, ингибитор гистон-деацетилазы (например, вориностат или ромидеспин), ингибитор топоизомеразы I (например, иринотекан или топотекан), ингибитор топоизомеразы II (например, этопозид, тенипозид или тафлупозид), ингибитор киназы (например, бортезомиб, эрлотиниб, гефитиниб, иматиниб, вемурафениб или висмодегиб), пептидный антибиотик (например, блеомицин или актиномицин), ретиноид (например, третитноин, алитретиноин или бексаротен) или алкалоид винка, или его производное (например, винбластин, винкристин, виндезин или винорельбин).

В другом варианте осуществления, молекула антитела анти-LAG-3, описанная в настоящем документе, вводится или применяется в сочетании с ингибитором PD-1 (например, молекулой антитела анти-PD-1) и ингибитором TIM-3 (например, молекулой антитела анти-TIM-3). В другом варианте осуществления, молекула антитела анти-LAG-3, описанная в настоящем документе, вводится или применяется в сочетании с ингибитором PD-1 (например, молекулой антитела анти-PD-1) и ингибитором PD-L1 (например, молекулой антитела анти-PD-L1). В другом варианте осуществления, молекула антитела анти-LAG-3, описанная в настоящем документе, вводится или применяется в сочетании с ингибитором TIM-3 (например, молекулой антитела анти-TIM-3) и ингибитором PD-L1 (например, молекулой антитела анти-PD-L1). В другом варианте осуществления, молекула антитела анти-LAG-3, описанная в настоящем документе, вводится или применяется в сочетании с ингибитором PD-1 (например, молекула антитела анти-PD-1) и химиотерапевтическим агентом (например, платиновым агентом (например, карбоплатином, цисплатином, оксалиплатином или тетраплатином) или нуклеотидным аналогом или прекурсорным аналогом (например, капецитабином)). В другом варианте осуществления, молекула антитела анти-LAG-3, описанная в настоящем документе, вводится или применяется в сочетании с ингибитором CEACAM (например, ингибитором CEACAM-1, CEACAM-3 и/или CEACAM-5), например, молекулой антитела анти-CEACAM. В другом варианте осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится или применяется в сочетании с ингибитором CEACAM-1, например, молекулой антитела анти-CEACAM-1. В другом варианте осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится или применяется в сочетании с ингибитором CEACAM-3, например, молекулой антитела анти-CEACAM-3. В другом варианте осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится или применяется в сочетании с ингибитором CEACAM-5, например, молекулой антитела анти-CEACAM-5.

Сочетание молекул антител, описанное в настоящем изобретении, может вводиться по отдельности, например, как отдельные молекулы антитела, или связанным, например, как молекула биспецифичного или триспецифичного антитела. В одном из вариантов осуществления, вводится биспецифичное антитело, которое содержит молекулу антитела анти-LAG-3 и молекулу антитела анти-PD-1, анти-CEACAM (например, анти-CEACAM-1, CEACAM-3 и/или анти-CEACAM-5), анти-PD-L1 или анти-TIM-3. В определенных вариантах осуществления, сочетание антител, описанное в настоящем изобретении, применяется для лечения ракового заболевания, например, рака, как описано в настоящем документе (например, плотной опухоли или гематологического злокачественного новообразования).

В другом варианте осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится или применяется в сочетании с молекулой антитела анти-PD-1, например, для лечения рака головного мозга (например, глиобластомы), меланомы, рака почек (например, почечноклеточной карциномы), вирусного ракового заболевания (например, рака анального канала, рака шейки матки, рака ЖКТ, рака головы и шеи, рака носоглотки (NPC), рака пениса или вагинального или вульварного рака), рака ободочной и прямой кишки или рака легких (например, немелкоклеточного рака легкого (NSCLC)). В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится или применяется в сочетании с молекулой антитела анти-PD-1, например, для лечения рака молочной железы, например, трижды негативного рака молочной железы (TNBC).

В другом варианте осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится или применяется в сочетании с химиотерапевтическим агентом (например, гемцитабином, паклитакселем, например, для лечения рака поджелудочной железы или рака молочной железы.

В другом варианте осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится или применяется в сочетании с химиотерапевтическим агентом (например, платиновым агентом (например, карбоплатином, цисплатином, оксалиплатином или тетраплатином) или нуклеотидным аналогом или прекурсорным аналогом (например, капецитабином)), например, для лечения рака молочной железы, например, TNBC. В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится или применяется в сочетании с молекулой антитела анти-PD-1 и химиотерапевтическим агентом (например, платиновым агентом (например, карбоплатином, цисплатином, оксалиплатином или тетраплатином) или нуклеотидным аналогом или прекурсорным аналогом (например, капецитабином)), например, для лечения рака молочной железы, например, TNBC. В других вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится или применяется в сочетании с цитокином. Цитокин может вводиться как молекула слияния с молекулой антитела анти-LAG-3 или как отдельные композиции. В других вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится или применяется в сочетании с одним, двумя, тремя или более цитокинами, например, как молекула слияния или как отдельные композиции. В одном из вариантов осуществления, цитокин представляет собой интерлейкин (IL), выбранный из одного, двух, трех или более цитокинов из IL-1, IL-2, IL-12, IL-15 или IL-21. В одном из вариантов осуществления, молекула биспецифичного антитела имеет первую специфичность связывания с первой мишенью (например, с LAG-3), вторую специфичность связывания со второй мишенью (например, PD-1, TIM-3 или PD-L1) и необязательно связывается с доменом интерлейкина (например, IL-12), например, с полноразмерным IL-12 или его частью. В определенных вариантах осуществления, сочетание молекулы антитела анти-LAG-3 и цитокина, описанное в настоящем документе, применяется для лечения ракового заболевания, например, рака, как описано в настоящем документе (например, плотной опухоли).

В других вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится или применяется в сочетании с антителом специфичным к HLA C, например, антителом специфичным к иммуноглобулин-подобным рецепторам клеток-киллеров (также упоминаемых в настоящем документе как “антитело анти-KIR”). В определенных вариантах осуществления, сочетание молекулы антитела анти-LAG-3 и антитела анти-KIR применяется для лечения рака, например, рака, как описано в настоящем документе (например, плотной опухоли, например, прогрессирующей плотной опухоли).

В других вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится или применяется в сочетании с клеточной иммунотерапией (например, PROVENGE® (например, Sipuleucel-T)) и, необязательно, в сочетании с циклофосфамидом. В определенных вариантах осуществления, сочетание молекулы антитела анти-LAG-3, PROVENGE® и/или циклофосфамида применяется для лечения ракового заболевания, например, рака, как описано в настоящем документе (например, рака простаты, например, прогрессирующего рака простаты).

В других вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится или применяется в сочетании с вакциной, например, противораковой вакциной, (например, с вакциной дендритной почечноклеточной карциномы (DC-RCC)). В одном из вариантов осуществления, вакцина имеет пептидную основу, ДНК основу, РНК основу или антигенную основу, или их сочетание. В некоторых вариантах осуществления, вакцина содержит один или несколько пептидов, нуклеиновых кислот (например, ДНК или РНК), антигенов или их сочетание. В определенных вариантах осуществления, сочетание молекулы антитела анти-TIM-3 и вакцины DC-RCC применяется для лечения ракового заболевания, например, рака, как описано в настоящем документе (например, почечноклеточной карциномы, например, метастатической почечноклеточной карциномы (RCC) или светлоклеточной почечноклеточной карциномы (CCRCC)).

В других вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится или применяется в сочетании с вспомогательным веществом.

В других вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится или применяется в сочетании с химиотерапией и/или иммунотерапией. Например, молекула антитела анти-LAG-3 может применяться для лечения миеломы сама по себе или в сочетании с одним или несколькими факторов из: химиотерапии или других противораковых агентов (например, аналогов талидомида, например, леналидомида), молекул антитела анти-PD-1, сенсибилизированных антигеном опухоли дендритных клеток, продуктов слияния (например, электрослияния) клеток опухоли и дендритных клеток или вакцинации с помощью идиотипа иммуноглобулина, продуцируемого злокачественными клетками плазмы. В других вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится или применяется в сочетании с молекулой антитела анти-PD-1 для лечения миеломы, например, множественной миеломы.

В других вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится или применяется в сочетании с химиотерапией для лечения рака легких, например, немелкоклеточного рака легкого. В других вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится или применяется при стандартной, например, при NSCLC, химиотерапии легкого, например, платиновой дублетной терапии для лечения рака легкого. В других вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится или применяется в сочетании с ингибитором индоламин-пиррол 2,3-диоксигеназы (IDO) (например, (4E)-4-[(3-хлор-4-фторанилино)-нитрозометилиден]-1,2,5-оксадиазол-3-амином (также известным как INCB24360), индоксимод (1-метил-D-триптофаном), α-циклогексил-5H-имидазо[5,1-a]изоиндол-5-этанолом (известным также как NLG919) и тому подобное) у субъекта с прогрессирующим или метастатическим раком (например, у пациента с метастатическим и рецидивирующим раком NSCL).

В других вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится или применяется в сочетании с одним или несколькими факторами из: иммунной стратегии (например, интерлейкина-2 или интерферона-α), целевого агента (например, ингибитора VEGF, такого как моноклональное антитело на VEGF); ингибитора тирозинкиназы VEGF, такого как сунитиниб, сорафениб, акситиниб и пазопаниб; ингибитора RNAi; или ингибитора позднего медиатора передачи сигналов VEGF, например, ингибитора мишени млекопитающих для рапамицина (mTOR), например, эверолимуса и темсиролимуса. Любое из таких сочетаний может использоваться для лечения рака почек, например, почечноклеточной карциномы (RCC) (например, светлоклеточной почечноклеточной карциномы (CCRCC) или несветлоклеточной почечноклеточной карциномы (nccRCC) или метастатической RCC) или рака печени (например, гепатоцеллюлярной карциномы).

В других вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится или применяется в сочетании с ингибитором MEK (например, ингибитором MEK, как описано в настоящем документе). В некоторых вариантах осуществления, сочетание молекулы антитела анти-LAG-3 и ингибитора MEK применяется для лечения ракового заболевания (например, рака, описанного в настоящем документе). В некоторых вариантах осуществления, рак, излечиваемый с помощью этого сочетания, выбирается из меланомы, рака ободочной и прямой кишки, немелкоклеточного рака легкого, рака яичников, рака молочной железы, рака простаты, рака поджелудочной железы, гематологического злокачественного новообразования или почечноклеточной карциномы. В определенных вариантах осуществления, раковое заболевание включает мутацию BRAF (например, мутацию BRAF V600E), BRAF дикого типа, KRAS дикого типа или активирующую мутацию KRAS. Раковое заболевание может представлять собой раннюю, промежуточную или позднюю его стадию.

В других вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится или применяется в сочетании с одним, двумя или всеми химиотерапевтическими агентами (например, платиновым агентом (например, карбоплатином, оксалиплатином, цисплатином или тетраплатином) или нуклеотидным аналогом или прекурсорным аналогом (например, капецитабином)), лейковорином или 5-FU (например, при совместном лечении FOLFOX). Альтернативно или в сочетании, это сочетание дополнительно содержит ингибитор VEGF (например, ингибитор VEGF, как описано в настоящем изобретении). В некоторых вариантах осуществления, сочетание молекулы антитела анти-LAG-3, совместного лечения FOLFOX и ингибитора VEGF применяется для лечения ракового заболевания (например, рака, описанного в настоящем документе). В некоторых вариантах осуществления, рак, излечиваемый с помощью этого сочетания, выбирается из меланомы, рака ободочной и прямой кишки, немелкоклеточного рака легкого, рака яичников, рака молочной железы, рака простаты, рака поджелудочной железы, гематологического злокачественного новообразования или почечноклеточной карциномы. Раковое заболевание может представлять собой раннюю, промежуточную или позднюю его стадию.

В других вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится или применяется вместе с ингибитором тирозинкиназы (например, акситинибом) для лечения почечноклеточной карциномы и других плотных опухолей.

В других вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится или применяется вместе с агентом, нацеленным на рецептор 4-1BB (например, с антителом, которое стимулирует передачу сигналов через 4-1BB (CD-137), например, PF-2566). В других вариантах осуществления, молекула антитела анти-TIM-3 вводится или применяется в сочетании с ингибитором тирозинкиназы (например, акситинибом) и с агентом, нацеленным на рецептор 4-1BB.

Молекула антитела анти-LAG-3 может связываться с веществом, например, с цитотоксичным агентом или остатком (например, с терапевтическим лекарственным средством; с соединением, испускающим излучение; с молекулами растительного, грибкового или бактериального происхождения или с биологическим белком (например, белковым токсином) или с частицей (например, с рекомбинантной вирусной частицей, например, посредством белковой оболочки вируса). Например, антитело может связываться с радиоактивным изотопом, таким как α-, β- или γ-источник или β-и γ-источник.

Иммуномодуляторы

Молекулы антитела анти-LAG-3, описанные в настоящем документе, можно использовать в сочетании с одним или несколькими иммуномодуляторами.

В определенных вариантах осуществления, иммуномодулятор представляет собой ингибитор молекулы иммунной контрольной точки. В одном из вариантов осуществления, иммуномодулятор представляет собой ингибитор PD-1, PD-L1, PD-L2, CTLA-4, TIM-3, CEACAM (например, CEACAM-1, -3 и/или -5), VISTA, BTLA, TIGIT, LAIR1, CD160, 2B4 и/или TGF бета. В одном из вариантов осуществления, ингибитор молекулы иммунной контрольной точки ингибирует PD-1, PD-L1, TIM-3, CEACAM (например, CEACAM-1, -3 и/или -5), CTLA-4 или любое их сочетание.

Ингибирование ингибиторной молекулы может осуществляться на уровне ДНК, РНК или белка. В вариантах осуществления, ингибиторная нуклеиновая кислота (например, dsRNA, siRNA или shRNA) может использоваться для замедления экспрессии ингибиторной молекулы. В других вариантах осуществления, ингибитор ингибиторного сигнала представляет собой полипептид, например, растворимый лиганд (например, PD-1-Ig или CTLA-4 Ig) или молекулу антитела, которая связывается с ингибиторной молекулой; например, это молекула антитела, которая связывается с PD-1, PD-L1, PD-L2, CEACAM (например, CEACAM-1, -3 и/или -5), CTLA-4, TIM-3, VISTA, BTLA, TIGIT, LAIR1, CD160, 2B4 и/или TGF бета или с их сочетанием.

В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 находится в форме молекулы биспецифичного или мультиспецифичного антитела. В одном из вариантов осуществления, молекула биспецифичного антитела имеет первую специфичность связывания с LAG-3 и вторую специфичность связывания, например, вторую специфичность связывания с PD-1, PD-L1, CEACAM (например, CEACAM-1, -3 и/или -5), TIM-3 или PD-L2. В одном из вариантов осуществления, молекула биспецифичного антитела связывается (i) с PD-1 или PD-L1 (ii) и с LAG-3. В другом варианте осуществления, молекула биспецифичного антитела связывается с LAG-3 и TIM-3. В другом варианте осуществления, молекула биспецифичного антитела связывается с LAG-3 и CEACAM (например, CEACAM-1, -3 и/или -5). В другом варианте осуществления, молекула биспецифичного антитела связывается с LAG-3 и CEACAM-1. Еще в одном варианте осуществления, молекула биспецифичного антитела связывается с LAG-3 и CEACAM-3. Еще в одном варианте осуществления, молекула биспецифичного антитела связывается с LAG-3 и CEACAM-5.

В других вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 используется в сочетании с молекулой биспецифичного или мультиспецифичного антитела. В другом варианте осуществления, молекула биспецифичного антитела связывается с PD-1 или PD-L1. Еще в одном варианте осуществления, молекула биспецифичного антитела связывается с PD-1 и PD-L2. В другом варианте осуществления, биспецифичная молекула антитела связывается с CEACAM (например, с CEACAM-1, -3 и/или -5) и TIM-3.

Любое сочетание указанных выше молекул может быть преобразовано в молекулу мультиспецифичного антитела, например, триспецифичного антитела, которое имеет первую специфичность связывания с LAG-3, и вторую и третью специфичность связывания с двумя или более из: PD-1, PD-L1, CEACAM (например, с CEACAM-1, -3 и/или -5), TIM-3 или PD-L2.

В определенных вариантах осуществления, иммуномодулятор представляет собой ингибитор PD-1, например, PD-1 человека. В другом варианте осуществления, иммуномодулятор представляет собой ингибитор PD-L1, например, PD-L1 человека. В одном из вариантов осуществления, ингибитор PD-1 или PD-L1 представляет собой молекулу антитела к PD-1 или PD-L1 (например, молекулу антитела анти-PD-1 или анти-PD-L1, как описано в настоящем документе).

Сочетание ингибитора PD-1 или PD-L1 с молекулой антитела анти-LAG-3 может дополнительно содержать один или несколько дополнительных иммуномодуляторов, например, в сочетании с ингибитором TIM-3, CEACAM (например, CEACAM-1, -3 и/или -5) или CTLA-4. В одном из вариантов осуществления, ингибитор PD-1 или PD-L1 (например, молекула антитела анти-PD-1 или анти-PD-L1) вводится в сочетании с молекулой антитела анти-LAG-3 и ингибитором TIM-3 (например, молекулой антитела анти-TIM-3). В другом варианте осуществления, ингибитор PD-1 или PD-L1 (например, молекула антитела анти-PD-1 или анти-PD-L1) вводится в сочетании с молекулой антитела анти-LAG-3 и ингибитором CEACAM (например, ингибитором CEACAM-1, -3 и/или -5), например, молекулой антитела анти-CEACAM. В другом варианте осуществления, ингибитор PD-1 или PD-L1 (например, молекула антитела анти-PD-1 или анти-PD-L1) вводится в сочетании с молекулой антитела анти-LAG-3 и ингибитором CEACAM-1 (например, молекулой антитела анти-CEACAM-1). В другом варианте осуществления, ингибитор PD-1 или PD-L1 (например, молекула антитела анти-PD-1 или анти-PD-L1) вводится в сочетании с молекулой антитела анти-LAG-3 и ингибитором CEACAM-5 (например, молекулой антитела анти-CEACAM-5). Еще В одном из вариантов осуществления, ингибитор PD-1 или PD-L1 (например, молекула антитела анти-PD-1 или анти-PD-L1) вводится в сочетании с молекулой антитела анти-LAG-3 и ингибитором TIM-3 (например, молекулой антитела анти-TIM-3). Другие сочетания иммуномодуляторов с молекулой антитела анти-LAG-3 и ингибитором PD-1 включая, например, один или несколько из PD-L2, CTLA-4, LAG-3, CEACAM (например, CEACAM-1, -3 и/или -5), VISTA, BTLA, TIGIT, LAIR1, CD160, 2B4 и/или TGF бета), также охватываются настоящим изобретением. Любые из молекул антитела, известных в данной области или описанных в настоящем изобретении, можно использовать в указанных выше сочетаниях молекул ингибиторов контрольной точки.

В других вариантах осуществления, иммуномодулятор представляет собой ингибитор CEACAM (например, CEACAM-1, -3 и/или -5), например, CEACAM человека (например, CEACAM-1, -3 и/или -5). В одном из вариантов осуществления, иммуномодулятор представляет собой ингибитор CEACAM-1, например, CEACAM-1 человека. В другом варианте осуществления, иммуномодулятор представляет собой ингибитор CEACAM-3, например, CEACAM-3 человека. В другом варианте осуществления, иммуномодулятор представляет собой ингибитор CEACAM-5, например, CEACAM-5 человека. В одном из вариантов осуществления, ингибитор CEACAM (например, CEACAM-1, -3 и/или -5) представляет собой молекулу антитела к CEACAM (например, CEACAM-1, -3 и/или -5). Сочетание CEACAM (например, CEACAM-1, -3 и/или -5) ингибитора и молекулы антитела анти-LAG-3 может дополнительно содержать один или несколько дополнительных иммуномодуляторов, например, в сочетании с ингибитором TIM-3, PD-1, PD-L1 или CTLA-4.

В других вариантах осуществления, иммуномодулятор представляет собой ингибитор TIM-3, например, TIM-3 человека. В одном из вариантов осуществления, ингибитор TIM-3 представляет собой молекулу антитела к TIM-3. Сочетание ингибитора TIM-3 и молекулы антитела анти-LAG-3 может дополнительно содержать один или несколько дополнительных иммуномодуляторов, например, в сочетании с ингибитором CEACAM (например, CEACAM-1, -3 и/или -5), PD-1, PD-L1 или CTLA-4.

В определенных вариантах осуществления, иммуномодулятор, используемый в сочетаниях, описанных в настоящем изобретении (например, в сочетании с терапевтическим агентом, выбранным из антиген-презентирующего сочетания), представляет собой активатор или агонист костимуляторной молекулы. В одном из вариантов осуществления, агонист костимуляторной молекулы выбирается из агониста (например, агонистического антитела или его антиген-связывающего фрагмента или растворимого слияния) OX40, CD2, CD27, CD28, CDS, ICAM-1, LFA-1 (CD11a/CD18), ICOS (CD278), 4-1BB (CD137), GITR, CD30, CD40, BAFFR, HVEM, CD7, LIGHT, NKG2C, SLAMF7, NKp80, CD160, B7-H3 или лиганда к CD83.

В других вариантах осуществления, иммуномодулятор представляет собой агонист GITR. В одном из вариантов осуществления, агонист GITR представляет собой молекулу антитела к GITR. Молекула антитела анти-GITR и молекула антитела анти-LAG-3 могут находиться в форме отдельных композиций антител или молекулы биспецифичного антитела. Сочетание агониста GITR с молекулой антитела анти-LAG-3 может дополнительно содержать один или несколько дополнительных иммуномодуляторов, например, сочетаться с ингибитором PD-1, PD-L1, CTLA-4, CEACAM (например, CEACAM-1, -3 и/или -5) или TIM-3. В некоторых вариантах осуществления, молекула антитела анти-GITR представляет собой биспецифичное антитело, которое связывается с GITR и PD-1, PD-L1, CTLA-4, CEACAM (например, CEACAM-1, -3 и/или -5) или TIM-3. В других вариантах осуществления, агонист GITR может вводиться в сочетании с одним или несколькими дополнительными активаторами костимуляторных молекул, например, с агонистом OX40, CD2, CD27, CD28, CDS, ICAM-1, LFA-1 (CD11a/CD18), ICOS (CD278), 4-1BB (CD137), CD30, CD40, BAFFR, HVEM, CD7, ЛЕГК, NKG2C, SLAMF7, NKp80, CD160, B7-H3 или с лигандом к CD83.

В других вариантах осуществления, иммуномодулятор представляет собой агонист OX40. В одном из вариантов осуществления, агонист OX40 представляет собой молекулу антитела к OX40. Молекула антитела OX40 и молекула антитела анти-LAG-3 могут находиться в форме отдельных композиций антител или молекулы биспецифичного антитела. Сочетание агониста OX40 с молекулой антитела анти-LAG-3 может дополнительно содержать один или несколько дополнительных иммуномодуляторов, например, сочетаться с ингибитором PD-1, PD-L1, CTLA-4, CEACAM (например, CEACAM-1, -3 и/или -5) или TIM-3. В некоторых вариантах осуществления, молекула антитела анти-OX40 представляет собой биспецифичное антитело, которое связывается с OX40 и PD-1, PD-L1, CTLA-4, CEACAM (например, CEACAM-1, -3 и/или -5) или TIM-3. В других вариантах осуществления, агонист OX40 может вводиться в сочетании с другой костимуляторной молекулой, например, с агонистом GITR, CD2, CD27, CD28, CDS, ICAM-1, LFA-1 (CD11a/CD18), ICOS (CD278), 4-1BB (CD137), CD30, CD40, BAFFR, HVEM, CD7, ЛЕГК, NKG2C, SLAMF7, NKp80, CD160, B7-H3 или с лигандом к CD83.

Отметим, что в настоящем документе предлагаются только иллюстративные сочетания ингибиторов из ингибиторов или агонистов костимуляторных молекул контрольных точек. Дополнительные сочетания этих агентов охватываются настоящим изобретением.

Биомаркеры

В определенных вариантах осуществления, любые из способов, описанных в настоящем изобретении, дополнительно включают оценку или мониторинг эффективности терапии (например, монотерапии или сочетанной терапии), описанной в настоящем документе, для субъекта (например, субъекта, имеющего раковое заболевание, например, рак, описанный в настоящем документе). Способ включает получение величины оценки эффективности терапии, где указанная величина оценки является показателем эффективности терапии.

В вариантах осуществления, величина оценки эффективности терапии включает меру одного, двух, трех, четырех, пяти, шести, семи, восьми, девяти или более (например, всех) из следующих параметров:

(i) параметр фенотипа лимфоцита, инфильтрующего опухоль (TIL);

(ii) параметр популяции миелоидных клеток;

(iii) параметр маркера поверхностной экспрессии;

(iv) параметр биомаркера иммунологической реакции;

(v) параметр системной модуляции цитокинов;

(vi) параметр циркулирующей свободной ДНК (cfDNA);

(vii) параметр системной иммуномодуляции;

(viii) параметр микробиомы;

(ix) параметр маркера активирования для циркулирующих иммунных клеток или

(x) параметр циркулирующих цитокинов.

В некоторых вариантах осуществления, параметр фенотипа TIL включает уровень или активность одного, двух, трех, четырех или более (например, всех) компонентов гематоксилинового и эозинового (H&E) окрашивания для отсчетов TIL, CD8, FOXP3, CD4 или CD3, у субъекта, например, в образце от субъекта (например, в образце ткани опухоли).

В некоторых вариантах осуществления, параметр популяции миелоидных клеток включает уровень или активность одного или обоих компонентов из CD68 или CD163, у субъекта, например, в образце от субъекта (например, в образце ткани опухоли).

В некоторых вариантах осуществления, параметр маркера поверхностной экспрессии включает уровень или активность одного, двух, трех или более (например, всех) компонентов из TIM-3, PD-1, PD-L1 или LAG-3, у субъекта, например, в образце от субъекта (например, в образце ткани опухоли). В определенных вариантах осуществления, уровень TIM-3, PD-1, PD-L1 или LAG-3 определяется посредством иммуногистохимии (IHC). В определенных вариантах осуществления, определяется уровень TIM-3.

В некоторых вариантах осуществления, параметр биомаркера иммунологической реакции включает уровень или последовательность одного или нескольких маркеров на основе нуклеиновой кислоты, у субъекта, например, в образце от субъекта (например, в образце ткани опухоли).

В некоторых вариантах осуществления, параметр системной модуляции цитокинов включает уровень или активность одного, двух, трех, четырех, пяти, шести, семи, восьми или более (например, всех) компонентов из IL-18, IFN-γ, ITAC (CXCL11), IL-6, IL-10, IL-4, IL-17, IL-15 или TGF-бета, у субъекта, например, в образце от субъекта (например, в образце крови, например, в образце плазмы).

В некоторых вариантах осуществления, параметр cfDNA включает последовательность или уровень одного или нескольких компонентов из циркулирующих молекул ДНК опухоли (cfDNA), у субъекта, например, в образце от субъекта (например, в образце крови, например, в образце плазмы).

В некоторых вариантах осуществления, параметр системной иммунномодуляции включает фенотипическую характеризацию активированной иммунной клетки, например, CD3-экспрессирующей клетки, CD8-экспрессирующей клетки или как то, так и другое, у субъекта, например, в образце от субъекта (например, в образце крови, например, в образце PBMC).

В некоторых вариантах осуществления, параметр микробиомы включает последовательность или уровень экспрессии одного или нескольких генов в микробиоме у субъекта, например, в образце от субъекта (например, в образце стула).

В некоторых вариантах осуществления, параметр маркера активирования циркулирующих иммунных клеток включает уровень или активность одного, двух, трех, четырех, пяти или более (например, всех) компонентов из циркулирующих CD8+, HLA-DR+Ki67+, Т-лимфоцитов, IFN-γ, IL-18 или CXCL11 (IFN-γ-индуцированных CCK)-экспрессирующих клеток, в образце (например, в образце крови, например, в образце плазмы).

В некоторых вариантах осуществления, параметр циркулирующих цитокинов включает уровень или активность IL-6, у субъекта, например, в образце от субъекта (например, в образце крови, например, в образце плазмы).

В некоторых вариантах осуществления любых из способов, описанных в настоящем изобретении, терапия включает сочетание молекулы антитела анти-TIM-3, описанной в настоящем документе, и второго ингибитора молекулы иммунной контрольной точки, например, ингибитора PD-1 (например, молекулы антитела анти-PD-1) или ингибитора PD-L1 (например, молекулы антитела анти-PD-L1).

В некоторых вариантах осуществления любых из способов, описанных в настоящем изобретении, мера одного или нескольких параметров (i)-(x) получается из образца, отбираемого у субъекта. В некоторых вариантах осуществления, образец выбирается из образца опухоли, образца крови (например, образца плазмы или образца PBMC) или образца стула.

В некоторых вариантах осуществления любых способов, описанных в настоящем изобретении, субъект оценивается перед приемом, в ходе приема или после приема терапии.

В некоторых вариантах осуществления любых способов, описанных в настоящем изобретении, мера одного или нескольких параметров из (i)-(x) оценивает профиль для одного или нескольких параметров из экспрессии генов, проточной цитометрии или экспрессии белка.

В некоторых вариантах осуществления любых из способов, описанных в настоящем изобретении, присутствие повышенного уровня или активности одного, двух, трех, четырех, пяти или более (например, всех) компонентов из циркулирующих CD8+, HLA-DR+Ki67+, Т-лимфоцитов, IFN-γ, IL-18 или CXCL11 (IFN-γ-индуцированных CCK)-экспрессирующих клеток и/или присутствие пониженного уровня или активности IL-6 у субъекта или в образце представляет собой положительный показатель эффективности терапии.

Альтернативно или в сочетании со способами, описанными в настоящем изобретении, в ответ на указанную величину, осуществляют одно, два, три, четыре или более (например, все) действия из:

(i) введения субъекту терапии;

(ii) введения измененных доз терапии;

(iii) изменения схемы или временного хода терапии;

(iv) введения субъекту дополнительного агента (например, терапевтического агента, описанного в настоящем документе) в сочетании с терапией или

(v) введения субъекту альтернативной терапии.

Дополнительные варианты осуществления

В определенных вариантах осуществления, любой из способов, описанных в настоящем изобретении, дополнительно включает идентификацию у субъекта или в образце (например, в образце от субъекта, содержащем раковые клетки и/или иммунные клетки, такие как TIL) присутствия LAG-3, с получением при этом величины оценки для LAG-3. Способ может дополнительно включать сравнение величины оценки для LAG-3 с эталонной величиной, например, с контрольной величиной. Если величина оценки для LAG-3 больше, чем эталонная величина, например, контрольная величина, субъекту вводят терапевтически эффективное количество молекулы антитела анти-LAG-3, описанной в настоящем документе, и необязательно, в сочетании со вторым терапевтическим агентом, процедурой или воздействием, описанным в настоящем документе, для лечения тем самым рака.

В других вариантах осуществления любой из способов, описанных в настоящем изобретении, дополнительно включают идентификацию у субъекта или в образце (например, в образце от субъекта, содержащем раковые клетки и/или иммунные клетки, такие как TIL) присутствия PD-L1, с получением тем самым величины оценки для PD-L1. Способ может дополнительно включать сравнение величины оценки для PD-L1 с эталонной величиной, например, с контрольной величиной. Если величина оценки для PD-L1 больше, чем эталонная величина, например, контрольная величина, субъекту вводят терапевтически эффективное количество молекулы антитела анти-LAG-3, описанной в настоящем документе, и необязательно, в сочетании со вторым терапевтическим агентом, процедурой или воздействием, описанным в настоящем документе, для лечения тем самым рака.

В других вариантах осуществления, любой из способов, описанных в настоящем изобретении, дополнительно включает идентификацию у субъекта или в образце (например, в образце от субъекта, содержащем раковые клетки и, необязательно, иммунные клетки, такие как TIL) присутствия одного, двух или всех компонентов из PD-L1, CD8 или IFN-γ, с получением тем самым величины оценки для одного, двух или всех компонентов из PD-L1, CD8 и IFN-γ. Способ может дополнительно включать сравнение величин оценки для PD-L1, CD8 и/или IFN-γ с эталонной величиной, например, контрольной величиной. Если величины оценки для PD-L1, CD8 и/или IFN-γ больше, чем эталонная величина, например, контрольные величины, субъекту вводят терапевтически эффективное количество молекулы антитела анти-LAG-3, описанной в настоящем документе, и необязательно, в сочетании со вторым терапевтическим агентом, процедурой или воздействием, описанным в настоящем документе, для лечения тем самым рака.

Субъект может иметь раковое заболевание, описанное в настоящем документе, такое как плотная опухоль или гематологическое раковое заболевание, например, опухоль головного мозга (например, глиобластома, глиосаркома или рецидивирующая опухоль головного мозга), рак поджелудочной железы (например, прогрессирующий рак поджелудочной железы), рак кожи (например, меланома (например, меланома II-IV стадии, HLA-A2-положительная меланома, нерезектабельная меланома или метастатическая меланома) или карцинома клеток Меркеля), рак почек (например, почечноклеточная карцинома (RCC) (например, метастатическая почечноклеточная карцинома)), рак молочной железы (например, метастатическая карцинома молочной железы или карцинома молочной железы IV стадии, например, трижды негативный рак молочной железы (TNBC)), ассоциированное с вирусом раковое заболевание, рак анального канала (например, карцинома сквамовых клеток анального канала), рак шейки матки (например, карцинома сквамовых клеток шейки матки), рак ЖКТ (например, рак ЖКТ положительный по вирусу Эпштейна-Барра или карциному желудочно-кишечного тракта или гастроэзофагеального соединения), рак головы и шеи (например, HPV положительный и отрицательный рак сквамовых клеток головы и шеи (SCCHN)), рак носоглотки (NPC), рак пениса (например, карцинома сквамовых клеток пениса), вагинальный или вульварный рак (например, карцинома сквамовых клеток вагины или вульвы), рак ободочной и прямой кишки (например, рецидивный рак ободочной и прямой кишки или метастатический рак ободочной и прямой кишки, например, рак ободочной и прямой кишки с микросателлитной нестабильностью, микросателлитно стабильный рак ободочной и прямой кишки, рак ободочной и прямой кишки профицитный относительно репарации неспаренных оснований или рак ободочной и прямой кишки дефицитный относительно репарации неспаренных оснований), рак легких (например, немелкоклеточный рак легкого (NSCLC)), лейкоз, лимфома (например, лимфома Ходжкина (HL) или диффузная В-крупноклеточная лимфома (DLBCL), например, рецидивную или не поддающуюся лечению HL или DLBCL), миелома или метастатические поражения при раковом заболевании.

Все публикации, заявки на патенты, патенты и другие ссылки, рассмотренные в настоящем документе, включаются в качестве ссылок во всей своей полноте.

Другие признаки, цели и преимущества настоящего изобретения станут очевидны из описания и из формулы изобретения.

Подробное описание изобретения

LAG-3 (CD223) представляет собой ингибитор иммунной контрольной точки, который связывает MHC II, LSECtin и Galectin-3. LAG-3 экспрессируется на поверхности иммунных клеток, включая эффекторные Т-лимфоциты CD4+ и CD8+, регуляторные Т-лимфоциты (Treg), природные клетки киллеры (NK) и плазмацитоидные дендритные клетки. Зацепление с LAG-3, как показано, отрицательно регулирует передачу сигналов Т-лимфоцитов с повышением супрессивной функции Treg, что, как ожидается, затем понижает активность T-лимфоцитов против опухолевых клеток. Блокада LAG-3, как показано, активирует Т-лимфоциты, повышая пролиферацию и секретирование цитокинов (IFN-γ) Т-лимфоцитов.

Соответственно, в настоящем изобретении описываются, по меньшей мере, частично, молекулы антитела (например, гуманизированные молекулы антитела), которые связывают LAG-3 с высокой аффинностью и специфичностью. Также предлагаются фармацевтические композиции и дозированные препараты, содержащие молекулы антитела анти-LAG-3. Молекулы антитела анти-LAG-3, описанные в настоящем изобретении, можно использовать (сами по себе или в сочетании с другими терапевтическими агентами, процедурами или воздействиями) для лечения или предотвращения расстройств, таких как раковые расстройства (например, плотные опухоли и гематологические раковые заболевания), а также инфекционных заболеваний (например, хронических инфекционных расстройств или сепсиса). Например, молекулы антитела анти-LAG-3, описанные в настоящем документе, можно использовать в сочетании с другими терапевтическими агентами (например, с одним или обоими компонентами из ингибитора PD-1 (например, молекулой антитела анти-PD-1, описанной в настоящем документе) или химиотерапевтического агента (например, платинового агента (например, с карбоплатином, цисплатином, оксалиплатином или тетраплатином) или с нуклеотидным аналогом или прекурсорным аналогом (например, капецитабином))), например, для лечения или предотвращения рака (например, рака, описанного в настоящем документе), например, рака молочной железы, например, трижды негативного рака молочной железы (TNBC). Таким образом, в настоящем изобретении описываются способы, включая режимы дозирования, лечения различных расстройств с использованием молекулы антитела анти-LAG-3. В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится или применяется при базовой или фиксированной дозе.

Определения

Другие термины определяются ниже и по всей заявке.

Как используется в настоящем документе, определение единственного числа относится к одному или нескольким (например, по меньшей мере, к одному) грамматическому объекту.

Термин “или” используется в настоящем документе для обозначения и используется взаимозаменяемо с термином “и/или”, если контекст четко не диктует иного.

“Примерно” и “приблизительно”, как правило, должно означать приемлемую степень ошибки для измеряемой величины при данной природе или точности измерений. Иллюстративные степени ошибки находятся в пределах 20 процентов (%), как правило, в пределах 10%, а чаще, в пределах 5% от данной величины или диапазона величин.

Под “сочетанием” или “в сочетании с” не предполагается предположение, что терапия или терапевтические агенты должны вводиться одновременно и/или приготавливаться для доставки вместе, хотя эти способы доставки находятся в рамках, описанных в настоящем документе. Терапевтические агенты в сочетании могут вводиться одновременно с одним или несколькими другими дополнительными видами терапии или терапевтическими агентами, до них или после них. Терапевтические агенты или терапевтический протокол может вводиться в любом порядке. Как правило, каждый агент будет вводиться при дозе и/или по временной схеме, определенной для этого агента. Кроме того, будет очевидно, что дополнительный терапевтический агент, используемый в этом сочетании, может вводиться вместе в единой композиции или вводиться отдельно в различных композициях. Как правило, ожидается, что дополнительные терапевтические агенты, используемые в сочетании, должны использоваться при уровнях, которые не превышают уровней, при которых они используются индивидуально. В некоторых вариантах осуществления, уровни, используемые в сочетании, будут ниже уровней, используемых индивидуально.

В вариантах осуществления, дополнительный терапевтический агент вводится при терапевтической дозе или при дозе ниже терапевтической. В определенных вариантах осуществления, концентрация второго терапевтического агента, которая необходима для достижения ингибирования, например, ингибирования роста, ниже, когда второй терапевтический агент вводится в сочетании с первым терапевтическим агентом, например, с молекулой антитела анти-LAG-3, чем когда второй терапевтический агент вводится индивидуально. В определенных вариантах осуществления, концентрация первого терапевтического агента, которая необходима для достижения ингибирования, например, ингибирования роста, ниже, когда первый терапевтический агент вводится в сочетании со вторым терапевтическим агентом, чем когда первый терапевтический агент вводится индивидуально. В определенных вариантах осуществления, при сочетанной терапии, концентрация второго терапевтического агента, которая необходима для достижения ингибирования, например, ингибирования роста, ниже, чем терапевтическая доза второго терапевтического агента в качестве монотерапии, например, ниже на 10-20%, 20-30%, 30-40%, 40-50%, 50-60%, 60-70%, 70-80% или на 80-90%. В определенных вариантах осуществления, при сочетанной терапии, концентрация первого терапевтического агента, которая необходима для достижения ингибирования, например, ингибирования роста, ниже, чем терапевтическая доза первого терапевтического агента в качестве монотерапии, например, ниже на 10-20%, 20-30%, 30-40%, 40-50%, 50-60%, 60-70%, 70-80% или на 80-90%.

Термин “ингибирование”, “ингибитор” или “антагонист” включает уменьшение определенного параметра, например, активности, данной молекулы, например, ингибитора иммунной контрольной точки. Например, этот термин включает ингибирование активности, например, активности PD-1 или PD-L1, по меньшей мере, на 5%, 10%, 20%, 30%, 40% или более. Таким образом, ингибирование не должно составлять 100%.

Термин “активирование”, “активатор” или “агонист” включает увеличение определенного параметра, например, активности данной молекулы, например, костимуляторной молекулы. Например, этот термин включает увеличение активности, например, костимуляторной активности, по меньшей мере, на 5%, 10%, 25%, 50%, 75% или более.

Термин “противораковое воздействие” относится к биологическому воздействию, которое может проявляться различными средствами, включая, но, не ограничиваясь этим, например, уменьшение объема опухоли, уменьшение количества раковых клеток, уменьшение количества метастаз, увеличение ожидаемой продолжительности жизни, уменьшение пролиферации раковых клеток, уменьшение выживаемости раковых клеток или облегчение различных физиологических симптомов, связанных с злокачественным состоянием. “Противораковое воздействие” может также проявляться по способности пептидов, полинуклеотидов, клеток и антител к предотвращению возникновения рака в первый раз.

Термин “противоопухолевое воздействие” относится к биологическому воздействию, которое может проявляться с помощью различных средств, включая, но, не ограничиваясь этим, например, уменьшение объема опухоли, уменьшение количества клеток опухоли, уменьшение пролиферации опухолевых клеток или уменьшение выживаемости клеток опухоли.

Термин “рак” относится к заболеванию, отличающемуся быстрым и неконтролируемым ростом аберрантных клеток. Раковые клетки могут распространяться локально или через кровообращение и лимфатическую систему в другие части тела. Примеры различных раковых заболеваний, описанных в настоящем документе, включают, но, не ограничиваясь этим, плотные опухоли, например, рак легких, рак молочной железы, рак простаты, рак яичников, рак шейки матки, рак кожи, рак поджелудочной железы, рак ободочной и прямой кишки, рак почек, рак печени и рак головного мозга и гематологические злокачественные новообразования, например, лимфому и лейкоз, и тому подобное. Термины “опухоль” и “рак” используются в настоящем документе взаимозаменяемо, например, оба термина охватывают плотные и жидкие, например, диффузные или циркулирующие опухоли. Как используется в настоящем документе, термин “рак” или “опухоль” включает предзлокачественные, а также злокачественные раковые заболевания и опухоли.

Термин “антиген-презентирующая клетка” или “APC” относится к клетке иммунной системы, такой как А-клетка (например, B-клетка, дендритная клетка, и тому подобное), которая презентирует посторонний антиген, образующий комплекс с главными комплексами гистосовместимости (MHC) на их поверхности. T-лимфоциты могут распознавать эти комплексы с использованием их рецепторов T-лимфоцитов (TCR). APC процессирует антигены и презентирует их для T-лимфоцитов.

Термин “костимуляторная молекула” относится к партнеру по когнатному связыванию на Т-лимфоците, который специфично связывается с костимуляторным лигандом, тем самым медиируя костимуляторую реакцию Т-лимфоцита, такую как, но, не ограничиваясь этим, пролиферация. Костимуляторные молекулы представляют собой молекулы на поверхности клеток иные, чем рецепторы антигена или их лиганды, которые необходимы для эффективной иммунной реакции. Костимуляторные молекулы включают, но, не ограничиваясь этим, молекулы MHC класса I, белки рецепторы TNF, иммуноглобулиноподобные белки, рецепторы цитокинов, интегрины, сигнальные молекулы активирования лимфоцитов (белки SLAM), активирующие рецепторы NK клеток, BTLA, рецептор лиганда Толла, OX40, CD2, CD7, CD27, CD28, CD30, CD40, CDS, ICAM-1, LFA-1 (CD11a/CD18), 4-1BB (CD137), B7-H3, CDS, ICAM-1, ICOS (CD278), GITR, BAFFR, LIGHT, HVEM (LIGHTR), KIRDS2, SLAMF7, NKp80 (KLRF1), NKp44, NKp30, NKp46, CD19, CD4, CD8альфа, CD8бета, IL2R бета, IL2R гамма, IL7R альфа, ITGA4, VLA1, CD49a, ITGA4, IA4, CD49D, ITGA6, VLA-6, CD49f, ITGAD, CD11d, ITGAE, CD103, ITGAL, CD11a, LFA-1, ITGAM, CD11b, ITGAX, CD11c, ITGB1, CD29, ITGB2, CD18, LFA-1, ITGB7, NKG2D, NKG2C, TNFR2, TRANCE/RANKL, DNAM1 (CD226), SLAMF4 (CD244, 2B4), CD84, CD96 (Tactile), CEACAM1, CRTAM, Ly9 (CD229), CD160 (BY55), PSGL1, CD100 (SEMA4D), CD69, SLAMF6 (NTB-A, Ly108), SLAM (SLAMF1, CD150, IPO-3), BLAME (SLAMF8), SELPLG (CD162), LTBR, LAT, GADS, SLP-76, PAG/Cbp, CD19a и лиганд, который специфично связывается с CD83.

“Иммунная эффекторная клетка” или “эффекторная клетка”, когда такой термин используется в настоящем документе, относится к клетке, которая вовлечена в иммунную реакцию, например, в ускорение иммунной эффекторной реакции. Примеры иммунных эффекторных клеток включают Т-лимфоциты, например, альфа/бета Т-лимфоциты и гамма/дельта Т-лимфоциты, B-клетки, природные киллеры (NK), природные Т-лимфоциты киллеры (NKT), мастоциты и фагоциты миелоидного происхождения.

“Иммунный эффектор” или “эффектор”, “функция” или “реакция”, когда этот термин используется в настоящем документе, относится к функции или реакции, например, иммунной эффекторной клетки, которая усиливает или ускоряет иммунное воздействие целевой клетки. Например, иммунная эффекторная функция или реакция относится к свойству Т-лимфоцита или NK клетки, которое способствует уничтожению или ингибированию роста или пролиферации целевой клетки. В случае Т-лимфоцита, первичная стимуляция и ко-стимуляция представляют собой примеры иммунной эффекторной функции или реакции.

Термин “эффекторная функция” относится к специальной функции клетки. Эффекторная функция Т-лимфоцита может, например, представлять собой цитолитическую активность или хелперную активность, включая секретирование цитокинов.

Как используется в настоящем документе, термины “лечить”, “лечение” и “лечащий” относятся к уменьшению или облегчению развития, тяжести и/или продолжительности расстройства, например, пролиферативного расстройства, или к облегчению одного или нескольких симптомов (предпочтительно, одного или нескольких различимых симптомов) расстройства, в результате введения одного или нескольких видов терапии. В конкретных вариантах осуществления, термины “лечить”, “лечение” и “лечащий” относятся к облегчению, по меньшей мере, одного измеряемого физического параметра пролиферативного расстройства, такого как рост опухоли, необязательно различимого пациентом. В других вариантах осуществления термины “лечить”, “лечение” и “лечащий” относятся к замедлению развития пролиферативного расстройства, либо физически, например, посредством стабилизации различимого симптома, либо физиологически, например, посредством стабилизации физического параметра, либо как то, так и другое. В других вариантах осуществления, термины “лечить”, “лечение” и “лечащий” относятся к уменьшению или стабилизации размера опухоли или отсчетов раковых клеток.

Композиции, препараты и способы по настоящему изобретению охватывают полипептиды и нуклеиновые кислоты, имеющие указанные последовательности или последовательности по существу идентичные или сходные с ними, например, последовательности, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или выше идентичные указанной последовательности. В контексте последовательности аминокислот, термин “по существу идентичная” используется в настоящем документе для упоминания первой аминокислоты, которая содержит достаточное или минимальное количество остатков аминокислот, которые i) являются идентичными или ii) представляют собой консервативные замещения выравненных остатков аминокислот во второй последовательности аминокислот, так что первая и вторая последовательности аминокислот могут иметь общий структурный домен и/или общую функциональную активность. Например, это последовательности аминокислот, которые содержат общий структурный домен, имеющий, по меньшей мере, примерно 85%, 90%. 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичность с эталонной последовательностью, например, последовательностью, предложенной в настоящем документе.

В контексте последовательности нуклеотидов, термин “по существу идентичная” используется в настоящем документе для упоминания первой последовательности нуклеиновых кислот, которая содержит достаточное или минимальное количество нуклеотидов, которые идентичны выравненным нуклеотидам во второй последовательности нуклеиновых кислот, так что первая и вторая последовательности нуклеотидов кодируют полипептид, имеющий общую функциональную активность или кодируют общий структурный домена или общую функциональную активность полипептида. Например, эти последовательности нуклеотидов имеют по меньшей мере, примерно 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичность с эталонной последовательностью, например, с последовательностью, предложенной в настоящем документе.

Термин “функциональный вариант” относится к полипептидам, которые имеют последовательность аминокислот по существу идентичную последовательности, встречающейся в природе, или кодируются по существу идентичной последовательностью нуклеотидов, и могут иметь одну или несколько активностей встречающейся в природе последовательности.

Вычисление гомологии или идентичности последовательности между последовательностями (эти термины используются в настоящем документе взаимозаменяемо) осуществляются следующим образом.

Для определения процента идентичности двух последовательностей аминокислот или двух последовательностей нуклеиновых кислот, последовательности выравниваются для целей оптимального сравнения (например, могут вводиться разрывы в одну или обе из первой и второй последовательности аминокислот или нуклеиновых кислот для оптимального выравнивания и негомологичные последовательности могут игнорироваться для целей сравнения). В предпочтительном варианте осуществления, длина эталонной последовательности, выравниваемой для целей сравнения, составляет, по меньшей мере, 30%, предпочтительно, по меньшей мере, 40%, более предпочтительно, по меньшей мере, 50%, 60% и еще более предпочтительно, по меньшей мере, 70%, 80%, 90%, 100% от длины эталонной последовательности. Затем сравнивают остатки аминокислот или нуклеотиды в соответствующих положениях аминокислот или положениях нуклеотидов. Когда положение в первой последовательности занимается таким же остатком аминокислоты или нуклеотидом, как и соответствующее положение во второй последовательности, тогда молекулы являются идентичными в этом положении (как используется в настоящем документе “идентичность” аминокислоты или нуклеиновой кислоты является эквивалентом “гомологии” аминокислоты или нуклеиновой кислоты).

Процент идентичности между двумя последовательностями является функцией количества идентичных положений общих для последовательностей, учитывая количество разрывов и длину каждого разрыва, который необходим о ввести для оптимального выравнивания двух последовательностей.

Сравнение последовательностей и определение процента идентичности между двумя последовательностями можно осуществлять с использованием математического алгоритма. В предпочтительном варианте осуществления, процент идентичности между двумя последовательностями аминокислот определяется с использованием алгоритма Needleman и Wunsch ((1970) J. Mol. Biol. 48:444-453), который включен в программу GAP пакета программного обеспечения GCG (доступен на www.gcg.com), с использованием либо матрицы Blossum 62, либо матрицы PAM250, и весового коэффициента разрыва 16, 14, 12, 10, 8, 6 или 4, и весового коэффициента длины 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В другом предпочтительном варианте осуществления, процент идентичности между двумя последовательностями нуклеотидов определяется с использованием программы GAP пакета программного обеспечения GCG (доступного на www.gcg.com), с использованием матрицы NWSgapdna. CMP и весового коэффициента разрыва 40, 50, 60, 70 или 80 и весового коэффициента длины 1, 2, 3, 4, 5 или 6. Особенно предпочтительный набор параметров (которые необходимо использовать, если не указано иного) представляет собой матрицу оценок Blossum 62 и штраф за разрыв 12, штраф за продление разрыва 4 и штраф за сдвиг рамки считывания разрыва 5.

Процент идентичности между двумя последовательностями аминокислот или нуклеотидов можно определить с использованием алгоритма E. Meyers и W. Miller ((1989) CABIOS, 4:11-17), который включен в программу ALIGN (version 2.0), с использованием Таблицы весовых коэффициентов остатков PAM120, штрафа за продление разрыва 12 и штрафа за разрыв 4.

Последовательности нуклеиновых кислот и белков, описанные в настоящем документе, можно использовать как “запрашиваемую последовательность” для осуществления поиска в публичных базах данных, например, для идентификации других членов семейства или родственных последовательностей. Такой поиск можно осуществлять с использованием программ NBLAST и XBLAST (version 2.0) of Altschul, et al. (1990) J. Mol. Biol. 215:403-10. Поиск нуклеотидов с помощью BLAST можно осуществлять с помощью программы NBLAST: оценка=100, длина слова=12, для получения последовательностей нуклеотидов, гомологичных молекулам нуклеиновой кислоты (SEQ ID NO: 1) по настоящему изобретению. Поиск белков с помощью BLAST можно осуществлять с помощью программы XBLAST: оценка=50, длина слова=3, для получения последовательностей аминокислот гомологичных молекулам белка по настоящему изобретению. Для получения выравниваний с разрывами для целей сравнения, можно использовать Gapped BLAST, как описано в Altschul et al., (1997) Nucleic Acids Res. 25:3389-3402, когда используют программы BLAST и Gapped BLAST, можно использовать параметры по умолчанию соответствующих программ (например, XBLAST и NBLAST). Смотри www.ncbi.nlm.nih.gov.

Как используется в настоящем документе, термин “гибридизируется в условиях низкой строгости, средней строгости, высокой строгости или очень высокой строгости” описывает условия гибридизации и промывки. Инструкции для осуществления реакции гибридизации можно найти в Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons, N.Y. (1989), 6.3.1-6.3.6, которая включается в качестве ссылки. В этой ссылке описаны водные и неводные способы, и можно использовать как те, так и другие. Конкретные условия гибридизации, упоминаемые в настоящем документе, представляют собой следующее: 1) условия гибридизации низкой строгости в 6X хлориде натрия/цитрате натрия (SSC) примерно 45°C, с последующими двумя промывками в 0,2X SSC, 0,1% SDS, по меньшей мере, при температуре 50°C (температуру промывок можно повысить до 55°C для условий низкой строгости); 2) условия гибридизации средней строгости в 6X SSC примерно 45°C, с последующей одной или несколькими промывками в 0,2X SSC, 0,1% SDS при 60°C; 3) условия гибридизации высокой строгости в 6X SSC примерно 45°C, с последующими одной или несколькими промывками в 0,2X SSC, 0,1% SDS при 65°C; и предпочтительно, 4) условия гибридизации очень высокой строгости представляют собой 0,5M фосфата натрия, 7% SDS при 65°C, с последующими одной или несколькими промывками в 0,2X SSC, 1% SDS при 65°C. Условия очень высокой строгости (4) представляют собой предпочтительные условия, и они должны использоваться, если не указано иного.

Понятно, что молекулы по настоящему изобретению могут иметь дополнительные консервативные или не относящиеся к незаменимым замещения аминокислот, которые не оказывают существенного воздействия на их функции.

Термин "аминокислота", как предполагается, охватывает все молекулы, как природные, так и синтетические, которые содержат как функциональную аминогруппу, так и функциональную группу кислоты и могут включаться в полимер из встречающихся в природе аминокислот. Иллюстративные аминокислоты включают встречающиеся в природе аминокислоты; их аналоги, производные и конгенеры; аналоги аминокислот, имеющие варианты боковых цепей; и все стереоизомеры любого из указанных выше объектов. Как используется в настоящем документе термин "аминокислота" включает как D-, так или L- оптические изомеры и пептидомиметики.

“Консервативное замещение аминокислоты” представляет собой замещение, при котором остаток аминокислоты заменяется остатком аминокислоты, имеющим сходную боковую цепь. Семейства остатков аминокислот, имеющих сходные боковые цепи, определены в данной области. Эти семейства включают аминокислоты с основными боковыми цепями (например, лизин, аргинин, гистидин), кислотными боковыми цепями (например, аспарагиновая кислота, глутаминовая кислота), незаряженными полярными боковыми цепями (например, глицин, аспарагин, глютамин, серин, треонин, тирозин, цистеин), с неполярными боковыми цепями (например, аланин, валин, лейцин, изолейцин, пролин, фенилаланин, метионин, триптофан), бета-разветвленными боковыми цепями (например, треонин, валин, изолейцин) и ароматическими боковыми цепями (например, тирозин, фенилаланин, триптофан, гистидин).

Термины “полипептид”, “пептид” и “белок” (если цепь одна) используют в настоящем документе взаимозаменяемо для упоминания полимеров из аминокислот любой длины. Полимер может быть линейным или разветвленным, он может содержать модифицированные аминокислоты, и он может прерываться группами, отличными от аминокислот. Термины также охватывают полимер из аминокислот, который модифицируется; например, посредством образования дисульфидной связи, гликозилирования, липидизации, ацетилирования, фосфорилирования или любой другой манипуляции, такой как конъюгирование с компонентом метки. Полипептид может выделяться из природных источников, может быть получен с помощью рекомбинантных технологий от эукариотического или прокариотического хозяина или может представлять собой продукт процедур синтеза.

Термины "нуклеиновая кислота", "последовательность нуклеиновых кислот", "последовательность нуклеотидов" или "полинуклеотидная последовательность" и "полинуклеотид" используются взаимозаменяемо. Они относятся к полимерной форме нуклеотидов, либо деоксирибонуклеотидов, либо рибонуклеотидов, либо их аналогов любой длины. Полинуклеотид может быть либо однонитевым, либо двухнитевым, и если он однонитевый, то может представлять собой кодирующую нить или некодирующую нить (антисмысловую нить). Полинуклеотид может содержать модифицированные нуклеотиды, такие как метилированные нуклеотиды и нуклеотидные аналоги. Последовательность нуклеотидов может прерываться группами отличными от нуклеотидов. Полинуклеотид может дополнительно модифицироваться после полимеризации, например, посредством конъюгирования с компонентом метки. Нуклеиновая кислота может представлять собой рекомбинантный полинуклеотид или полинуклеотид геномного происхождения, полученный с помощью кДНК, полисинтетического или синтетического происхождения, полинуклеотид, который либо не встречается в природе, либо связывается с другим полинуклеотидом в расположении, не встречающемся в природе.

Термин “изолированный”, как используется в настоящем документе, относится к материалу, который удален из своей исходной или естественной окружающей среды, (например, из природной окружающей среды, если он встречается в природе). Например, встречающийся в природе полинуклеотид или полипептид, присутствующий в живом животном, не является изолированным, но этот же полинуклеотид или полипептид, отделенный посредством вмешательства человека от некоторых или от всех сосуществующих материалов в природной системе, является изолированным. Такие полинуклеотиды могут представлять собой часть вектора и/или такие полинуклеотиды или полипептиды могут представлять собой часть композиций, и при том по-прежнему быть изолированными, так что такой вектор или композиция не является частью окружающей среды, в которой находится в природе.

Различные аспекты настоящего изобретения описываются более подробно ниже. Дополнительные определения приведены по всему описанию.

Режимы дозирования

Молекулы антитела анти-LAG-3, описанные в настоящем документе, могут вводиться согласно режиму дозирования, описанному в настоящем документе, для лечения (например, замедления, уменьшения, облегчения или предотвращения) расстройства, например, гиперпролиферативного состояния или расстройства (например, ракового заболевания) у субъекта. В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится субъекту при дозе примерно от 200 мг примерно до 2000 мг, например, раз в две, три или четыре недели.

В некоторых аспектах, изобретение описывает способ лечения рака у субъекта, способ включает введение субъекту молекулы антитела анти-LAG-3 (например, молекулы антитела анти-LAG-3, описанной в настоящем документе) при дозе или при схеме дозирования, описанной в настоящем документе.

В некоторых вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе или при схеме дозирования, которая дает в результате связывание, например, насыщает растворимый LAG-3 у субъекта. В некоторых вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе или при схеме дозирования, которая дает в результате, по меньшей мере, в 50%, 60%, 70%, 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% связывание, например, насыщение растворимого LAG-3 у субъекта, например, в пределах 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, 24, 36 или 48 недель введения.

В некоторых вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе или при схеме дозирования, которая дает в результате, по меньшей мере, в 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 98% или 99% связывание, например, заполненность LAG-3 в опухоли у субъекта, например, в пределах 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 24, 36 или 48 недель введения.

В других вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе или при схеме дозирования, которая дает в результате, по меньшей мере, 50%, 60%, 70%, 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% связывание, например, насыщение, растворимого LAG-3 у субъекта; и которое дает в результате, по меньшей мере, в 50%, 60%, 70%, 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% связывание, например, заполненность LAG-3 в опухоли у субъекта. В вариантах осуществления, насыщение и/или полная заполненность происходит, например, в пределах 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 24, 36 или 48 недель введения.

В некоторых вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе или при схеме дозирования, которая дает в результате одно или оба из следующих воздействий:

(a) 40% или более (например, 50% или более, 60% или более, 70% или более, 80% или более, 85% или более, 90% или более, 95% или более, 99% или более) растворимого LAG-3 у субъекта (например, крови) связывается с молекулой антитела анти-LAG-3; или

(b) 50% или более (например, 60% или более, 70% или более, 80% или более, 85% или более, 90% или более, 95% или более, 99% или более) мембранно-связанного LAG-3 у субъекта (например, в раковой ткани) связывается с молекулой антитела анти-LAG-3.

В некоторых вариантах осуществления, связывание молекулы антитела анти-LAG-3 с растворимым LAG-3 определяется в образце крови (например, образце сыворотки или образце плазмы). В некоторых вариантах осуществления, связывание молекулы антитела анти-LAG-3 с мембранно-связанным LAG-3 определяется при раковом заболевании (например, в образце раковой ткани).

В некоторых вариантах осуществления, связывание молекулы антитела анти-LAG-3 с растворимым LAG-3, связывание молекулы антитела анти-LAG-3 с мембранно-связанным LAG-3 или как то, так и другое, определяется, когда субъект имеет стационарный минимальный уровень молекулы антитела анти-LAG-3. В некоторых вариантах осуществления, минимальный уровень представляет собой концентрацию молекулы антитела анти-LAG-3 примерно через 24 недели после введения или самую низкую концентрацию, которой молекула антитела анти-LAG-3 достигает перед введением следующей дозы. В некоторых вариантах осуществления, связывание молекулы антитела анти-LAG-3 с растворимым LAG-3, связывание молекулы антитела анти-LAG-3 с мембранно-связанным LAG-3 или как то, так и другое, определяется, например, измеряется in vitro (например, с помощью ELISA или клеточного анализа) или in vivo (например, с помощью обработки изображений) или предсказывается по модели PK/PD, например, по модели PK/PD, описанной в настоящем документе.

В некоторых вариантах осуществления, 50% или более растворимого LAG-3 в образце сыворотки от субъекта ассоциированы с молекулой антитела анти-LAG-3. В некоторых вариантах осуществления, 60% или более растворимого LAG-3 в образце сыворотки от субъекта ассоциированы с молекулой антитела анти-LAG-3. В некоторых вариантах осуществления, 70% или более растворимого LAG-3 в образце сыворотки от субъекта ассоциированы с молекулой антитела анти-LAG-3. В некоторых вариантах осуществления, 80% или более растворимого LAG-3 в образце сыворотки от субъекта ассоциированы с молекулой антитела анти-LAG-3. В некоторых вариантах осуществления, 90% или более растворимого LAG-3 в образце сыворотки от субъекта ассоциированы с молекулой антитела анти-LAG-3.

В некоторых вариантах осуществления, 85% или более мембранно-связанного LAG-3 при раковом заболевании или в образце раковой ткани субъекта ассоциированы с молекулой антитела анти-LAG-3. В некоторых вариантах осуществления, 90% или более мембранно-связанного LAG-3 при раковом заболевании или в образце раковой ткани субъекта ассоциированы с молекулой антитела анти-LAG-3. В некоторых вариантах осуществления, 95% или более мембранно-связанного LAG-3 при раковом заболевании или в образце раковой ткани субъекта ассоциированы с молекулой антитела анти-LAG-3.

В некоторых вариантах осуществления, 50% или более, 60% или более, 70% или более, 80% или более или 90% или более, растворимого LAG-3 в образце сыворотки от субъекта ассоциированы с молекулой антитела анти-LAG-3, и 85% или более, 90% или более или 95% или более, мембранно-связанного LAG-3 при раковом заболевании или в образце раковой ткани субъекта ассоциированы с молекулой антитела анти-LAG-3.

В некоторых вариантах осуществления, 50% или более растворимого LAG-3 в образце сыворотки от субъекта ассоциированы с молекулой антитела анти-LAG-3 и 90% или более мембранно-связанного LAG-3 при раковом заболевании или в образце раковой ткани субъекта ассоциированы с молекулой антитела анти-LAG-3. В некоторых вариантах осуществления, 60% или более растворимого LAG-3 в образце сыворотки от субъекта ассоциированы с молекулой антитела анти-LAG-3, и 90% или более мембранно-связанного LAG-3 при раковом заболевании или в образце раковой ткани субъекта ассоциированы с молекулой антитела анти-LAG-3. В некоторых вариантах осуществления, 70% или более растворимого LAG-3 в образце сыворотки от субъекта ассоциированы с молекулой антитела анти-LAG-3, и 90% или более мембранно-связанного LAG-3 при раковом заболевании или в образце раковой ткани субъекта ассоциированы с молекулой антитела анти-LAG-3. В некоторых вариантах осуществления, 80% или более растворимого LAG-3 в образце сыворотки от субъекта ассоциированы с молекулой антитела анти-LAG-3, и 90% или более мембранно-связанного LAG-3 при раковом заболевании или в образце раковой ткани субъекта ассоциированы с молекулой антитела анти-LAG-3. В некоторых вариантах осуществления, 90% или более растворимого LAG-3 в образце сыворотки от субъекта ассоциированы с молекулой антитела анти-LAG-3, и 90% или более мембранно-связанного LAG-3 при раковом заболевании или в образце раковой ткани субъекта ассоциированы с молекулой антитела анти-LAG-3.

В некоторых вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе или при схеме дозирования, которая уменьшает один или оба следующих далее параметра:

(a) уровень свободного растворимого LAG-3 у субъекта, например, до 40% или меньше (например, до 50% или меньше, 40% или меньше, 30% или меньше, 20% или меньше, 15% или меньше, 10% или меньше, 5% или меньше или 1% или меньше) от эталонного уровня свободного растворимого LAG-3; или

(b) уровень свободного мембранно-связанного LAG-3 у субъекта, например, до 50% или меньше (например, до 40% или меньше, 30% или меньше, 20% или меньше, 15% или меньше, 10% или меньше, 5% или меньше или 1% или меньше) от эталонного уровня мембранно-связанного LAG-3.

В некоторых вариантах осуществления, уровень свободного растворимого LAG-3 определяется в образце крови (например, в образце сыворотки или образце плазмы). В некоторых вариантах осуществления, эталонный уровень свободного растворимого LAG-3 представляет собой фоновый уровень свободного растворимого LAG-3 у субъекта, например, до введения молекулы антитела анти-LAG-3, например, в соответствии со схемой дозирования.

В некоторых вариантах осуществления, уровень свободного мембранно-связанного LAG-3 определяется в раковой ткани (например, в образце раковой ткани). В некоторых вариантах осуществления, эталонный уровень свободного мембранно-связанного LAG-3 представляет собой фоновый уровень свободного мембранно-связанного LAG-3 у субъекта, например, до введения молекулы антитела анти-LAG-3, например, в соответствии со схемой дозирования.

В некоторых вариантах осуществления, уровень свободного растворимого LAG-3, уровень свободного мембранно-связанного LAG-3 или как то, так и другое, определяется, когда субъект имеет стационарный минимальный уровень молекулы антитела анти-LAG-3. В некоторых вариантах осуществления, минимальный уровень представляет собой концентрацию молекулы антитела анти-LAG-3 примерно через 24 недели после введения или самую низкую концентрацию, которой молекула антитела анти-LAG-3 достигает перед введением следующей дозы. В некоторых вариантах осуществления, уровень свободного растворимого LAG-3, уровень свободного мембранно-связанного LAG-3 или как то, так и другое определяется, например, измеряется in vitro (например, с помощью ELISA или клеточного анализа) или in vivo (например, с помощью обработки изображения) или предсказывается по модели PK/PD, например, по модели PK/PD, описанной в настоящем документе.

В некоторых вариантах осуществления, уровень свободного растворимого LAG-3 понижается до 50% или меньше от эталонного уровня свободного растворимого LAG-3 в образце сыворотки от субъекта. В некоторых вариантах осуществления, уровень свободного растворимого LAG-3 понижается до 40% или меньше от эталонного уровня свободного растворимого LAG-3 в образце сыворотки от субъекта. В некоторых вариантах осуществления, уровень свободного растворимого LAG-3 понижается до 30% или меньше от эталонного уровня свободного растворимого LAG-3 в образце сыворотки от субъекта. В некоторых вариантах осуществления, уровень свободного растворимого LAG-3 понижается до 20% или меньше от эталонного уровня свободного растворимого LAG-3 в образце сыворотки от субъекта. В некоторых вариантах осуществления, уровень свободного растворимого LAG-3 понижается до 10% или меньше от эталонного уровня свободного растворимого LAG-3 в образце сыворотки от субъекта.

В некоторых вариантах осуществления, уровень свободного мембранно-связанного LAG-3 понижается до 15% или меньше от эталонного уровня свободного мембранно-связанного LAG-3 при раковом заболевании или в образце раковой ткани субъекта. В некоторых вариантах осуществления, уровень свободного мембранно-связанного LAG-3 понижается до 10% или меньше от эталонного уровня свободного мембранно-связанного LAG-3 при раковом заболевании или в образце раковой ткани субъекта. В некоторых вариантах осуществления, уровень свободного растворимого LAG-3 понижается до 5% или меньше от эталонного уровня свободного мембранно-связанного LAG-3 при раковом заболевании или в образце раковой ткани субъекта.

В некоторых вариантах осуществления, уровень свободного растворимого LAG-3 понижается до 50% или меньше, 40% или меньше, 30% или меньше, 20% или меньше или 10% или меньше от эталонного уровня свободного растворимого LAG-3 в образце сыворотки от субъекта и уровень свободного мембранно-связанного LAG-3 понижается до 15% или меньше, 10% или меньше или 5% или меньше от эталонного уровня свободного мембранно-связанного LAG-3 при раковом заболевании или в образце раковой ткани субъекта.

В некоторых вариантах осуществления, уровень свободного растворимого LAG-3 понижается до 50% или меньше от эталонного уровня свободного растворимого LAG-3 в образце сыворотки от субъекта и уровень свободного мембранно-связанного LAG-3 понижается до 10% или меньше от эталонного уровня свободного мембранно-связанного LAG-3 при раковом заболевании или в образце раковой ткани субъекта. В некоторых вариантах осуществления, уровень свободного растворимого LAG-3 понижается до 40% или меньше от эталонного уровня свободного растворимого LAG-3 в образце сыворотки от субъекта и уровень свободного мембранно-связанного LAG-3 понижается до 10% или меньше от эталонного уровня свободного мембранно-связанного LAG-3 при раковом заболевании или в образце раковой ткани субъекта. В некоторых вариантах осуществления, уровень свободного растворимого LAG-3 понижается до 30% или меньше от эталонного уровня свободного растворимого LAG-3 в образце сыворотки от субъекта и уровень свободного мембранно-связанного LAG-3 понижается до 10% или меньше от эталонного уровня свободного мембранно-связанного LAG-3 при раковом заболевании или в образце раковой ткани субъекта. В некоторых вариантах осуществления, уровень свободного растворимого LAG-3 понижается до 20% или меньше от эталонного уровня свободного растворимого LAG-3 в образце сыворотки от субъекта и уровень свободного мембранно-связанного LAG-3 понижается до 10% или меньше от эталонного уровня свободного мембранно-связанного LAG-3 при раковом заболевании или в образце раковой ткани субъекта. В некоторых вариантах осуществления, уровень свободного растворимого LAG-3 понижается до 10% или меньше от эталонного уровня свободного растворимого LAG-3 в образце сыворотки от субъекта и уровень свободного мембранно-связанного LAG-3 понижается до 10% или меньше от эталонного уровня свободного мембранно-связанного LAG-3 при раковом заболевании или в образце раковой ткани субъекта.

В определенных вариантах осуществления, доза или схема дозирования дает в результате минимальный уровень (например, стационарный минимальный уровень) молекулы антитела анти-LAG-3, который превышает C_crit (например, как описано в Примере 1). В некоторых вариантах осуществления, C_crit представляет собой концентрацию, ниже которой наблюдается нелинейный PK. В некоторых вариантах осуществления, C_crit составляет примерно 60 нМ.

В некоторых вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при режиме дозирования, описанном в настоящем изобретении.

В некоторых вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 200 мг примерно до 1600 мг, примерно 300 мг примерно до 1500 мг, примерно 400 мг примерно до 1400 мг, примерно 500 мг примерно до 1300 мг, примерно 600 мг примерно до 1200 мг, примерно 700 мг примерно до 1100 мг, примерно 800 мг примерно до 1000 мг, примерно 200 мг примерно до 1400 мг, примерно 200 мг примерно до 1200 мг, примерно 200 мг примерно до 1000 мг, примерно 200 мг примерно до 800 мг, примерно 200 мг примерно до 600 мг, примерно 200 мг примерно до 400 мг, примерно 1400 мг примерно до 1600 мг, примерно 1200 мг примерно до 1600 мг, примерно 1000 мг примерно до 1600 мг, примерно 800 мг примерно до 1600 мг, примерно 600 мг примерно до 1600 мг, примерно от 400 мг примерно до 1600 мг, примерно от 200 мг примерно до 600 мг, примерно от 300 мг примерно до 700 мг, примерно от 400 мг примерно до 800 мг, примерно от 500 мг примерно до 900 мг, примерно от 600 мг примерно до 1000 мг, примерно от 700 мг примерно до 1100 мг, примерно от 800 мг примерно до 1200 мг, примерно от 900 мг примерно до 1300 мг, примерно 1000 мг примерно до 1400 мг, примерно 1100 мг примерно до 1500 мг или примерно от 1200 мг примерно до 1600 мг, например, один раз в две недели, один раз в три недели или один раз в четыре недели.

В некоторых вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 200 мг примерно до 600 мг, примерно от 250 мг примерно до 550 мг, примерно от 300 мг примерно до 500 мг, примерно от 350 мг примерно до 450 мг, примерно от 200 мг примерно до 400 мг, примерно от 400 мг примерно до 600 мг, например, примерно 200 мг, примерно 250 мг, примерно 300 мг, примерно 350 мг, примерно 400 мг, примерно 450 мг, примерно 500 мг, примерно 550 мг, примерно 600 мг, например, один раз в три недели или один раз в четыре недели. В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 300 мг примерно до 500 мг, например, примерно 300 мг, примерно 320 мг, примерно 340 мг, примерно 360 мг, примерно 380 мг, примерно 400 мг, примерно 420 мг, примерно 440 мг, примерно 460 мг, примерно 480 мг или примерно 500 мг один раз в три недели. В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 350 мг примерно до 450 мг, например, примерно 400 мг один раз в три недели.

В некоторых вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 600 мг примерно до 1000 мг, примерно 650 мг примерно до 950 мг, примерно 700 мг примерно до 900 мг, примерно 750 мг примерно до 950 мг, примерно 600 мг примерно до 800 мг, примерно 800 мг примерно до 1000 мг, например, примерно 600 мг, примерно 650 мг, примерно 700 мг, примерно 750 мг, примерно 800 мг, примерно 850 мг, примерно 900 мг, примерно 950 мг, примерно 1000 мг, например, один раз в три недели или один раз в четыре недели. В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 900 мг примерно до 1100 мг, например, примерно 900 мг, примерно 920 мг, примерно 940 мг, примерно 960 мг, примерно 980 мг, примерно 900 мг, примерно 920 мг, примерно 940 мг, примерно 960 мг, примерно 980 мг или примерно 1000 мг один раз в четыре недели. В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 950 мг примерно до 1050 мг, например, примерно 1000 мг один раз в четыре недели.

В некоторых вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 500 мг примерно до 900 мг, примерно от 550 мг примерно до 850 мг, примерно от 600 мг примерно до 800 мг, примерно от 650 мг примерно до 750 мг, например, примерно 500 мг, примерно 550mg, примерно 600 мг, примерно 650 мг, примерно 700 мг, примерно 750 мг, примерно 800 мг, примерно 850 мг, примерно 900 мг, например, один раз в три недели или один раз в четыре недели. В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 600 мг примерно до 800 мг, например, примерно 600 мг, примерно 620 мг, примерно 640 мг, примерно 660 мг, примерно 680 мг, примерно 700 мг, примерно 720 мг, примерно 740 мг, примерно 760 мг, примерно 780 мг или примерно 800 мг один раз в три недели. В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 650 мг примерно до 750 мг, например, примерно 700 мг один раз в три недели.

В некоторых вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 1200 мг примерно до 1600 мг, примерно от 1250 мг примерно до 1550 мг, примерно от 1300 мг примерно до 1500 мг, примерно от 1350 мг примерно до 1450 мг, например, примерно 1200 мг, примерно 1250 мг, примерно 1300 мг, примерно 1350 мг, примерно 1400 мг, примерно 1450 мг, примерно 1500 мг, примерно 1550 мг, примерно 1600 мг, например, один раз в три недели или один раз в четыре недели. В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 1300 мг примерно до 1500 мг, например, примерно 1300 мг, примерно 1320 мг, примерно 1340 мг, примерно 1360 мг, примерно 1380 мг, примерно 1400 мг, примерно 1420 мг, примерно 1440 мг, примерно 1460 мг, примерно 1480 мг или примерно 1500 мг один раз в четыре недели. В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 1350 мг примерно до 1450 мг, например, примерно 1400 мг один раз в четыре недели.

В некоторых вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 400 мг примерно до 700 мг, примерно 450 мг примерно до 650 мг, примерно от 500 мг примерно до 600 мг, примерно от 450 мг примерно до 550 мг, примерно от 500 мг примерно до 600 мг, примерно от 550 мг примерно до 650 мг, примерно от 600 мг примерно до 700 мг, примерно от 500 мг примерно до 550 мг, примерно от 550 мг примерно до 600 мг, примерно от 600 мг примерно до 650 мг, например, примерно 400 мг, примерно 450 мг, примерно 500 мг, примерно 533 мг, примерно 550 мг, примерно 600 мг, примерно 650 мг, примерно 700 мг, например, раз в четыре недели. В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 450 мг примерно до 650 мг, например, примерно 450 мг, примерно 500 мг, примерно 533 мг, примерно 550 мг, примерно 600 мг или примерно 650 мг один раз в четыре недели. В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 500 мг примерно до 650 мг, например, примерно 533 мг или примерно 600 мг один раз в четыре недели.

В некоторых вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 2000 мг или меньше, примерно 1900 мг или меньше, примерно 1800 мг или меньше, примерно 1700 мг или меньше, примерно 1600 мг или меньше, примерно 1500 мг или меньше, примерно 1400 мг или меньше, примерно 1300 мг или меньше, примерно 1200 мг или меньше, примерно 1100 мг или меньше, примерно 1000 мг или меньше, примерно 900 мг или меньше, примерно 800 мг или меньше, примерно 700 мг или меньше, примерно 600 мг или меньше, примерно 533 мг или меньше, примерно 500 мг или меньше, примерно 400 мг или меньше, примерно 300 мг или меньше, примерно 250 мг или меньше или примерно 200 мг или меньше один раз в две недели, один раз в три недели или один раз в четыре недели.

В некоторых вариантах осуществления, расстройство представляет собой раковое заболевание, например, рак, описанный в настоящем документе. В определенных вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой плотную опухоль. В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой опухоль головного мозга, например, глиобластому, глиосаркому или рецидивирующую опухоль головного мозга. В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак поджелудочной железы, например, прогрессирующий рак поджелудочной железы. В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак кожи, например, меланому (например, меланому II-IV стадии, HLA-A2-положительную меланому, нерезектабельную меланому или метастатическую меланому) или карциному клеток Меркеля. В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак почек, например, почечноклеточную карциному (RCC) (например, метастатическую почечноклеточную карциному). В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак молочной железы, например, метастатическую карциному молочной железы или карциному молочной железы IV стадии, например, трижды негативный рак молочной железы (TNBC). В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой ассоциированное с вирусом раковое заболевание. В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак анального канала (например, плоскоклеточную карциному анального канала). В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак шейки матки (например, плоскоклеточную карциному шейки матки). В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак ЖКТ (например, рак ЖКТ положительный по вирусу Эпштейна-Барра или карциному желудочно-кишечного тракта или гастроэзофагеального соединения). В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак головы и шеи (например, HPV-положительный и -отрицательный рак сквамовых клеток головы и шеи (SCCHN)). В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак носоглотки (NPC). В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак пениса (например, плоскоклеточную карциному пениса). В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой вагинальный или вульварный рак (например, плоскоклеточную карциному вагины или вульвы). В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак ободочной и прямой кишки, например, рецидивный рак ободочной и прямой кишки или метастатический рак ободочной и прямой кишки, например, рак ободочной и прямой кишки с микросателлитной нестабильностью, микросателлитно стабильный рак ободочной и прямой кишки, рак ободочной и прямой кишки профицитный относительно репарации неспаренных оснований или рак ободочной и прямой кишки дефицитный относительно репарации неспаренных оснований. В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак легких, например, немелкоклеточный рак легкого (NSCLC). В определенных вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой гематологическое раковое заболевание. В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой лейкоз. В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой лимфому, например, лимфому Ходжкина (HL) или диффузную В-крупноклеточную лимфому (DLBCL) (например, рецидивную или не поддающуюся лечению HL или DLBCL). В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой миелому.

В других вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак с высокой микросателлитной нестабильностью. В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой метастатическое раковое заболевание. В других вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой прогрессирующий рак. В других вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рецидивный или не поддающуюся лечению рак. В других вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой нерезектабельный рак.

В одном из вариантов осуществления, раковое заболевание представляет собой карциному клеток Меркеля. В других вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой меланому. В других вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак молочной железы, например, трижды негативный рак молочной железы (TNBC) или HER2-отрицательный рак молочной железы. В других вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой почечноклеточную карциному (например, светлоклеточную почечноклеточную карциному (CCRCC) или несветлоклеточную почечноклеточную карциному (nccRCC)). В других вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак щитовидной железы, например, анапластическую карциному щитовидной железы (ATC). В других вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой нейроэндокринную опухоль (NET), например, атипичную пульмонарную карциноидную опухоль или NET в поджелудочной железе, желудочно-кишечном (GI) тракте или легких. В определенных вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой немелкоклеточный рак легкого (NSCLC) (например, NSCLC сквамовых клеток или неплоскоклеточный NSCLC). В определенных вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак фаллопиевых труб. В определенных вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак ободочной и прямой кишки с высокой микросателлитной нестабильностью (CRC с высокой MSI) или микросателлитно стабильный рак ободочной и прямой кишки (MSS CRC).

В некоторых вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится в сочетании с молекулой антитела анти-PD-1 (например, молекулой антитела анти-PD-1, описанной в настоящем документе). Без желания ограничиваться теорией, предполагается, что в некоторых вариантах осуществления, терапия анти-LAG-3, как ожидается, имеет дополнительное воздействие в сочетании с терапией анти-PD-1, как наблюдается на мышах (Woo et al. Cancer Research 72: 917-927 (2012)). Молекула антитела анти-PD-1 может вводиться вместе с химиотерапевтическим агентом или без него (например, с платиновым агентом (например, карбоплатином, цисплатином, оксалиплатином или тетраплатином) или с нуклеотидным аналогом или прекурсорным аналогом (например, капецитабином)). Без желания ограничиваться теорией, предполагается, что в некоторых вариантах осуществления, добавление химиотерапевтического агента будет дополнительно повышать эффективность иммунотерапии анти-LAG-3, отдельно или в сочетании с иммунотерапией анти-PD-1, делая опухоль более иммунно-реактивной и/или изменяя окружающую микросреду опухоли для достижения оптимальной противоопухолевой иммунной реакции.

В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-PD-1 вводится при дозе примерно от 300 мг примерно до 500 мг (например, примерно 400 мг) один раз в четыре недели или примерно от 200 мг примерно до 400 мг (например, примерно 300 мг) один раз в три недели. В некоторых вариантах осуществления, молекула антитела анти-PD-1 вводится при дозе примерно от 300 мг примерно до 500 мг (например, примерно 400 мг) один раз в четыре недели. В некоторых вариантах осуществления, молекула антитела анти-PD-1 вводится при дозе примерно от 200 мг примерно до 400 мг (например, примерно 300 мг) один раз в три недели.

В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 300 мг до 500 мг (например, примерно 400 мг) один раз в три недели и молекула антитела анти-PD-1 вводится при дозе примерно от 200 мг примерно до 400 мг (например, примерно 300 мг) один раз в три недели. В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 300 мг до 500 мг (например, примерно 400 мг) один раз в три недели и молекула антитела анти-PD-1 вводится при дозе примерно от 300 мг примерно до 500 мг (например, примерно 400 мг) один раз в четыре недели. В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 700 мг до 900 мг (например, примерно 800 мг) один раз в четыре недели и молекула антитела анти-PD-1 вводится при дозе примерно от 200 мг примерно до 400 мг (например, примерно 300 мг) один раз в три недели. В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 700 мг до 900 мг (например, примерно 800 мг) один раз в четыре недели и молекула антитела анти-PD-1 вводится при дозе примерно от 300 мг примерно до 500 мг (например, примерно 400 мг) один раз в четыре недели. В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 500 мг до 650 мг (например, примерно 533 мг или примерно 600 мг) один раз в четыре недели и молекула антитела анти-PD-1 вводится при дозе примерно от 200 мг примерно до 400 мг (например, примерно 300 мг) один раз в три недели. В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 500 мг до 650 мг (например, примерно 533 мг или примерно 600 мг) один раз в четыре недели и молекула антитела анти-PD-1 вводится при дозе примерно от 300 мг примерно до 500 мг (например, примерно 400 мг) один раз в четыре недели.

В некоторых вариантах осуществления, молекула антитела анти-TIM-3 вводится в сочетании с химиотерапевтическим агентом (например, платиновым агентом (например, карбоплатином, цисплатином, оксалиплатином или тетраплатином) или нуклеотидным аналогом или прекурсорным аналогом (например, капецитабином)). В некоторых вариантах осуществления, химиотерапевтический агент представляет собой платиновый агент. В определенных вариантах осуществления, платиновый агент представляет собой карбоплатин. В определенных вариантах осуществления, платиновый агент представляет собой цисплатин. В определенных вариантах осуществления, платиновый агент представляет собой оксалиплатин. В определенных вариантах осуществления, платиновый агент представляет собой тетраплатин.

В некоторых вариантах осуществления, химиотерапевтический агент представляет собой нуклеотидный аналог или прекурсорный аналог. В определенных вариантах осуществления, нуклеотидный аналог или прекурсорный аналог представляет собой капецитабин.

В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 300 мг до 500 мг (например, примерно 400 мг) один раз в три недели и химиотерапевтический агент (например, платиновый агент, например, карбоплатин) вводится при дозе для достижения площади под кривой (AUC) примерно от 4 примерно до 8 или примерно от 5 примерно до 7 (например, AUC примерно 6) один раз в три недели.

В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 300 мг до 500 мг (например, примерно 400 мг) один раз в три недели, молекула антитела анти-PD-1 вводится при дозе примерно от 200 мг примерно до 400 мг (например, примерно 300 мг) один раз в три недели, и химиотерапевтический агент (например, платиновый агент, например, карбоплатин) вводится при дозе для достижения площади под кривой (AUC) примерно от 4 примерно до 8 или примерно от 5 примерно до 7 (например, AUC примерно от 6) один раз в три недели.

В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 представляет собой LAG525, и молекула антитела анти-PD-1 представляет собой PDR001 (спартализумаб).

В некоторых вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 представляет собой LAG525, и химиотерапевтический агент представляет собой платиновый агент. В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 представляет собой LAG525, и платиновый агент представляет собой карбоплатин. В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 представляет собой LAG525, и платиновый агент представляет собой цисплатин. В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 представляет собой LAG525, и платиновый агент представляет собой оксалиплатин. В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 представляет собой LAG525, и платиновый агент представляет собой тетраплатин.

В некоторых вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 представляет собой LAG525, химиотерапевтический агент представляет собой платиновый агент и молекула антитела анти-PD-1 представляет собой PDR001 (спартализумаб). В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 представляет собой LAG525, платиновый агент представляет собой карбоплатин и молекула антитела анти-PD-1 представляет собой PDR001 (спартализумаб). В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 представляет собой LAG525, платиновый агент представляет собой цисплатин и молекула антитела анти-PD-1 представляет собой PDR001 (спартализумаб). В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 представляет собой LAG525, платиновый агент представляет собой оксалиплатин и молекула антитела анти-PD-1 представляет собой PDR001 (спартализумаб). В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 представляет собой LAG525, платиновый агент представляет собой тетраплатин и молекула антитела анти-PD-1 представляет собой PDR001 (спартализумаб).

В некоторых вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 представляет собой LAG525, и химиотерапевтический агент представляет собой нуклеотидный аналог или прекурсорный аналог. В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 представляет собой LAG525, и нуклеотидный аналог или прекурсорный аналог представляет собой капецитабин.

В некоторых вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 представляет собой LAG525, химиотерапевтический агент представляет собой нуклеотидный аналог или прекурсорный аналог и молекула антитела анти-PD-1 представляет собой PDR001 (спартализумаб). В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 представляет собой LAG525, нуклеотидный аналог или прекурсорный аналог представляет собой капецитабин и молекула антитела анти-PD-1 представляет собой PDR001 (спартализумаб).

Любая из дозировок, описанных в настоящем изобретении, может повторяться один раз, два раза, три раза, четыре раза, пять раз, шесть раз, семь раз, восемь раз, девять раз, десять раз или более.

Молекулы антитела

В настоящем изобретении описываются способы, композиции и препараты, которые содержат молекулу антитела, которая связывается с LAG-3 млекопитающего, например, человека. Например, молекула антитела связывается специфично с эпитопом, например, линейным или конформационным эпитопом (например, эпитопом, как описано в настоящем документе) с LAG-3.

Как используется в настоящем документе, термин “молекула антитела” относится к белку, например, к иммуноглобулиновой цепи или ее фрагменту, содержащему, по меньшей мере, одну последовательность вариабельного домена иммуноглобулина. Термин “молекула антитела” включает, например, моноклональное антитело (включая полноразмерное антитело, которое содержит Fc-область иммуноглобулина). В одном из вариантов осуществления, молекула антитела включает полноразмерное антитело или полноразмерную цепь иммуноглобулина. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит антиген-связывающий или функциональный фрагмент полноразмерного антитела или полноразмерную цепь иммуноглобулина. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела представляет собой молекулу мультиспецифичного антитела, например, она содержит множество последовательностей вариабельных доменов иммуноглобулинов, где первая последовательность вариабельного домена иммуноглобулина из этого множества имеет специфичность связывания с первым эпитопом, а вторая последовательность вариабельного домена иммуноглобулина этого множества имеет специфичность связывания со вторым эпитопом. В одном из вариантов осуществления, молекула мультиспецифичного антитела представляет собой молекулу биспецифичного антитела.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела представляет собой молекулу моноспецифичного антитела и связывается с одним эпитопом. Например, молекула моноспецифичного антитела может иметь множество последовательностей вариабельных доменов иммуноглобулинов, каждая из которых связывается с одним и тем же эпитопом.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела представляет собой молекулу мультиспецифичного антитела, например, она содержит множество последовательностей вариабельных доменов иммуноглобулинов, где первая последовательность вариабельного домена иммуноглобулина из этого множества имеет специфичность связывания с первым эпитопом, а вторая последовательность вариабельного домена иммуноглобулина из этого множества имеет специфичность связывания со вторым эпитопом. В одном из вариантов осуществления, первый и второй эпитопы находятся на одном и том же антигене, например, на одном и том же белке (или на субъединице мультимерного белка). В одном из вариантов осуществления, первый и второй эпитопы перекрываются. В одном из вариантов осуществления, первый и второй эпитопы не перекрываются. В одном из вариантов осуществления, первый и второй эпитопы находятся на различных антигенах, например, на различных белках (или на различных субъединицах мультимерного белка). В одном из вариантов осуществления, молекула мультиспецифичного антитела содержит третий, четвертый или пятый вариабельный домен иммуноглобулина. В одном из вариантов осуществления, молекула мультиспецифичного антитела представляет собой молекулу биспецифичного антитела, молекулу триспецифичного антитела или молекулу тетраспецифичного антитела.

В одном из вариантов осуществления, молекула мультиспецифичного антитела представляет собой молекулу биспецифичного антитела. Биспецифичное антитело имеет специфичность не более чем к двум антигенам. Молекула биспецифичного антитела отличается первой последовательностью вариабельного домена иммуноглобулина, которая имеет специфичность связывания с первым эпитопом, и второй последовательностью вариабельного домена иммуноглобулина, которая имеет специфичность связывания со вторым эпитопом. В одном из вариантов осуществления, первый и второй эпитопы находятся на одном и том же антигене, например, на одном и том же белке (или на субъединице мультимерного белка). В одном из вариантов осуществления, первый и второй эпитопы перекрываются. В одном из вариантов осуществления, первый и второй эпитопы не перекрываются. В одном из вариантов осуществления, первый и второй эпитопы находятся на различных антигенах, например, на различных белках (или на различных субъединицах мультимерного белка). В одном из вариантов осуществления, молекула биспецифичного антитела содержит последовательность вариабельного домена тяжелой цепи и последовательность вариабельного домена легкой цепи, которые имеют специфичность связывания с первым эпитопом, и последовательность вариабельного домена тяжелой цепи и последовательность вариабельного домена легкой цепи, которые имеют специфичность связывания со вторым эпитопом. В одном из вариантов осуществления, молекула биспецифичного антитела содержит половину антитела, имеющую специфичность связывания с первым эпитопом, и половину антитела, имеющую специфичность связывания со вторым эпитопом. В одном из вариантов осуществления, молекула биспецифичного антитела содержит половину антитела или его фрагмент, имеющий специфичность связывания с первым эпитопом, и половину антитела или его фрагмент, имеющий специфичность связывания со вторым эпитопом. В одном из вариантов осуществления, молекула биспецифичного антитела содержит scFv или его фрагмент, которые имеют специфичность связывания с первым эпитопом и scFv или его фрагмент, которые имеют специфичность связывания со вторым эпитопом. В одном из вариантов осуществления, первый эпитоп располагается на LAG-3, а второй эпитоп располагается на PD-1, TIM-3, CEACAM (например, CEACAM-1 и/или CEACAM-5), PD-L1 или PD-L2.

Протоколы для генерирования молекул мультиспецифичных (например, биспецифичных или триспецифичных) или гетеродимерных антител известны в данной области; включая, например, но, не ограничиваясь этим, подход “выступ-во-впадину” описанный, например, в патенте США № 5731168; электростатически управляемое Fc-спаривание, как описано, например, в WO 09/089004, WO 06/106905 и WO 2010/129304; формирование гетеродимеров генно-инженерных доменов с обменом нитей (SEED), как описано, например, в WO 07/110205; обмен Fab-фрагментами, как описано, например, в WO 08/119353, WO 2011/131746 и WO 2013/060867; сдвоенный конъюгат антител, например, посредством поперечной сшивки антител с генерированием биспецифичной структуры, с использованием гетеробифункционального реагента, содержащего амин-реактивную группу и сульфгидрил-реактивную группу, как описано, например, в патенте США № 4433059; детерминаты биспецифичных антител, генерируемые посредством рекомбинации половинок антител (пар тяжелая-легкая цепь или Fab) от различных антител посредством цикла восстановления и окисления дисульфидных связей между двумя тяжелыми цепями, как описано, например, в патенте США 4444878; трифункциональные антитела, например, три фрагмента Fab', поперечно сшитые посредством сульфгидрил-реактивных групп, как описано, например, в патенте США № 5273743; биосинтетические связывающие белки, например, пара scFv, поперечно сшитых с помощью C-конечных хвостов, предпочтительно посредством, дисульфид- или амин-реактивной химической сшивки, как описано, например, в патенте США № 5534254; бифункциональные антитела, например, фрагменты Fab с различными специфичностями связывания димеризованные с помощью лейциновых молний (например, c-fos и c-jun), у которых заменен константный домен, как описано, например, в патенте США № 5582996; биспецифичные и олигоспецифичные моно- и олиговалентные рецепторы, например, области VH-CH1 двух антител (два фрагмента Fab), связанных через полипептидный спейсер между областью CH1 одного антитела и областью VH другого антитела, как правило, с ассоциированными легкими цепями, как описано, например, в патенте США № 5591828; биспецифичные конъюгаты ДНК-антитело, например, поперечная сшивка антител или фрагментов Fab через двухнитевый кусок ДНК, как описано, например, в патенте США № 5635602; биспецифичные белки слияния, например, экспрессионный конструкт, содержащий два scFv с гидрофильным спиральным пептидным линкером между ними и полной константной областью, как описано, например, в патенте США № 5637481; мультивалентные и мультиспецифичные белки связывания, например, димер полипептидов, содержащий первый домен с областью связывания вариабельной области тяжелой цепи Ig, и второй домен со областью связывания вариабельной области легкой цепи Ig, обычно называемые диателами (описываются также структуры более высоких порядков, создающие биспецифичные, триспецифичные или тетраспецифичные молекулы, как описано, например, в патенте США № 5837242; конструкты минител со связанными цепями VL и VH, дополнительно присоединенные с помощью с пептидных спейсеров к шарнирной области антитела и области CH3, которые могут димеризоваться с образованием биспецифичных/мультивалентных молекул, как описано, например, в патенте США № 5837821; домены VH и VL, связанные с помощью короткого пептидного линкера (например, 5 или 10 аминокислот) или вообще без линкера при любой ориентации, которые могут формировать димеры с образованием биспецифичных диател; тримеры и тетрамеры, как описано, например, в патенте США № 5844094; нить из доменов VH (или доменов VL у членов семейства), соединенных пептидными связями с поперечно-сшиваемыми группами на C-окончании, дополнительно ассоциированных с доменами VL с образованием ряда FV (или scFv), как описано, например, в патенте США № 5864019; и одноцепочечные полипептиды связывания как с доменом VH, так и с доменом VL, связанными через пептидный линкер, которые объединены в мультивалентные структуры посредством нековалентной или химической поперечной сшивки с образованием, например, гомобивалентных, гетеробивалентных, трехвалентных и тетравалентных структур с использованием как формата типа scFV, так и формата типа диатела, как описано, например, в патенте США № 5869620. Дополнительные иллюстративные мультиспецифичные и биспецифичные молекулы и способы их получения находятся, например, в патентах США US5910573, US5932448, US5959083, US5989830, US6005079, US6239259, US6294353, US6333396, US6476198, US6511663, US6670453, US6743896, US6809185, US6833441, US7129330, US7183076, US7521056, US7527787, US7534866, US7612181, US2002/004587A1, US2002/076406A1, US2002/103345A1, US2003/207346A1, US2003/211078A1, US2004/219643A1, US2004/220388A1, US2004/242847A1, US2005/003403A1, US2005/004352A1, US2005/069552A1, US2005/079170A1, US2005/100543A1, US2005/136049A1, US2005/136051A1, US2005/163782A1, US2005/266425A1, US2006/083747A1, US2006/120960A1, US2006/204493A1, US2006/263367A1, US2007/004909A1, US2007/087381A1, US2007/128150A1, US2007/141049A1, US2007/154901A1, US2007/274985A1, US2008/050370A1, US2008/069820A1, US2008/152645A1, US2008/171855A1, US2008/241884A1, US2008/254512A1, US2008/260738A1, US2009/130106A1, US2009/148905A1, US2009/155275A1, US2009/162359A1, US2009/162360A1, US2009/175851A1, US2009/175867A1, US2009/232811A1, US2009/234105A1, US2009/263392A1, US2009/274649A1, в Европейском патенте EP346087A2, в заявках на патент WO00/06605A2, WO02/072635A2, WO04/081051A1, WO06/020258A2, WO2007/044887A2, WO2007/095338A2, WO2007/137760A2, WO2008/119353A1, WO2009/021754A2, WO2009/068630A1, WO91/03493A1, WO93/23537A1, WO94/09131A1, WO94/12625A2, WO95/09917A1, WO96/37621A2, WO99/64460A1. Содержание упомянутых выше заявок включается в настоящий документ в качестве ссылки во всей своей полноте.

В других вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 (например, молекула моноспецифичного, биспецифичного или мультиспецифичного антитела) ковалентно связывается, например, сливается, с другим партнером, например, белком, например, одним, двумя или более цитокинами, например, как молекула слияния, например, белок слияния. В других вариантах осуществления, молекула слияния содержит один или несколько белков, например, один, два или более цитокинов. В одном из вариантов осуществления, цитокин представляет собой интерлейкин (IL), выбранный из одного, двух, трех или более IL-1, IL-2, IL-12, IL-15 или IL-21. В одном из вариантов осуществления, молекула биспецифичного антитела имеет первую специфичность связывания с первой мишенью (например, с LAG-3), вторую специфичность связывания со второй мишенью (например, с PD-1 или TIM-3) и необязательно связана с доменом интерлейкина (например, IL-12), например, с полноразмерным IL-12 или его частью.

“Белок слияния” и “полипептид слияния” относится к полипептиду, имеющему, по меньшей мере, две части, ковалентно связанных вместе, где каждая из частей представляет собой полипептид, имеющий отличные свойства. Свойства могут представлять собой биологическое свойство, такое как активность in vitro или in vivo. Свойство может также представлять собой простое химическое или физическое свойство, такое как связывание с целевой молекулой, катализ реакции, и тому подобное. Две части могут связываться непосредственно с помощью одинарной пептидной связи или с помощью пептидного линкера, но находятся в рамке считывания друг другом.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела включает диатело, и одноцепочечную молекулу, а также антиген-связывающий фрагмент антитела (например, Fab, F(ab’)₂ и Fv). Например, молекула антитела может содержать последовательность вариабельного домена тяжелой (H) цепи (сокращенно упоминается в настоящем документе как VH) и последовательность вариабельного домена легкой (L) цепи (сокращенно упоминается в настоящем документе как VL). В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит, или состоит из нее, тяжелую цепь и легкую цепь (упоминается в настоящем документе как половина антитела. В другом примере молекула антитела содержит две последовательности вариабельных доменов тяжелых (H) цепе и две последовательности вариабельных доменов легких (L) цепей, образуя тем самым два сайта связывания антигена, такие как Fab, Fab’, F(ab’)₂, Fc, Fd, Fd’, Fv, одноцепочечные антитела (например, scFv), антитела с одним вариабельным доменом, диатела (Dab) (бивалентные и биспецифичные) и химерные (например, гуманизированные) антитела, которые могут быть получены посредством модификации цельных антител или антител, синтезируемых de novo с использованием рекомбинантных технологий ДНК. Эти функциональные фрагменты антител сохраняют способность селективно связывать свой соответствующий антиген или рецептор. Антитела и фрагменты антител могут происходить из любого класса антитела, включая, но, не ограничиваясь этим, IgG, IgA, IgM, IgD и IgE, и из любого подкласса (например, IgG1, IgG2, IgG3 и IgG4) антител. Препарат молекул антитела может быть моноклональным или поликлональным. Молекула антитела может также представлять собой антитело человека, германизированное, CDR-привитое или генерируемое in vitro антитело. Антитело может иметь константную область тяжелой цепи, выбранную, например, из IgG1, IgG2, IgG3 или IgG4. Антитело может также иметь легкую цепь, выбранную, например, из цепи каппа или лямбда. В настоящем документе термин “иммуноглобулин” (Ig) используется взаимозаменяемо с термином “антитело”.

Примеры антиген-связывающих фрагментов молекулы антитела включают: (i) фрагмент Fab, одновалентный фрагмент, состоящий из доменов VL, VH, CL и CH1; (ii) фрагмент F(ab')2, двухвалентный фрагмент, содержащий два фрагмента Fab, связанных дисульфидным мостиком в шарнирной области; (iii) фрагмент Fd, состоящий из доменов VH и CH1; (iv) фрагмент Fv, состоящий из доменов VL и VH единого фрагмента антитела, (v) фрагмент диатела (dAb), который состоит из домена VH; (vi) вариабельный домен верблюда или верблюжий вариабельный домен; (vii) одноцепочечный Fv (scFv), смотри, например, Bird et al. (1988) Science 242:423-426; и Huston et al. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883); (viii) однодоменное антитело. Эти фрагменты антител получают с использованием обычных технологий, известных специалистам в данной области, и фрагменты просматривают на полезность таким же образом, как и интактные антитела.

Термин “антитело” включает интактные молекулы, а также их функциональные фрагменты. Константные области антител могут изменяться, например, мутировать, для модификации свойств антитела (например, для увеличения или уменьшения одного или нескольких параметров из: связывания Fc-рецепторов, гликозилирования антитела, количества цистеиновых остатков, функции эффекторных клеток или функции комплемента).

Молекулы антител могут также представлять собой однодоменные антитела. Однодоменные антитела могут включать антитела, у которых области, определяющие комплементарность, являются частью однодоменного полипептида. Примеры включают, но, не ограничиваясь этим, антитела с тяжелой цепью, антитела, лишенные в природе легких цепей, однодоменные антитела, полученные из обычных 4-цепоченых антител, генно-инженерные антитела и однодоменные каркасы иные, чем полученные из антител. Однодоменные антитела могут представлять собой любые однодоменные антитела известные в данной области или любые будущие однодоменные антитела. Однодоменные антитела могут быть получены из любых видов, включая, но, не ограничиваясь этим, мышей, людей, верблюдов, лам, рыб, акул, коз, кроликов и крупный рогатый скот. В соответствии с другим аспектом настоящего изобретения, однодоменное антитело представляет собой встречающееся в природе однодоменное антитело, известное как антитело с тяжелыми цепями, лишенное легких цепей. Такие однодоменные антитела описаны, например, в WO 94/04678. Для ясности, этот вариабельный домен, полученный из антитела с тяжелой цепью, лишенного в природе легкой цепи, именуется в настоящем документе VHH или нанотело, чтобы отличить его от обычных VH четырехцепочечных иммуноглобулинов. Такая молекула VHH может быть получена из антител, выращенных в видах Camelidae, например, в верблюде, ламе, одногорбном верблюде, альпаке и гуанако. Другие виды, кроме Camelidae, могут продуцировать антитела с тяжелой цепью, лишенные в природе легкой цепи; такие VHH находятся в рамках настоящего изобретения.

Области VH и VL можно подразделить на области гипервариабельности, называемые "областями, определяющими комплементарность" (CDR), между которыми находятся области, которые являются более консервативными, называемые "областями рамок считывания (FR или FW).

Протяженности области рамки считывания и CDR точно определяются с помощью ряда методов (смотри, Kabat, E. A., et al. (1991) Sequences of Proteins of Immunological, Interest, Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242; Chothia, C. et al. (1987) J. Mol. Biol. 196:901-917; и определение AbM, используемое программным обеспечением для моделирования антител Oxford Molecular’s AbM. Смотри, в целом, например, Protein Sequence and Structure Analysis of Antibody Variable Domains. В: Antibody Engineering Lab Manual (Ed.: Duebel, S. and Kontermann, R., Springer-Verlag, Heidelberg).

Термины “область, определяющая комплементарность” и “CDR,” как используется в настоящем документе, относится к последовательности аминокислот в вариабельных областях антитела, которые придают специфичность к антигену и аффинность связывания. В целом, имеются три CDR в каждой из вариабельных областей тяжелых цепей (HCDR1, HCDR2, и HCDR3) и три CDR в каждой из вариабельных областей легких цепей (LCDR1, LCDR2 и LCDR3).

Точные границы последовательности аминокислот данной CDR можно определить с использованием любой из ряда хорошо известных схем, включая те, которые описаны Kabat et al. (1991), “Sequences of Proteins of Immunological Interest,” 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD (схема нумерации “Kabat”), Al-Lazikani et al., (1997) JMB 273,927-948 (схема нумерации “Chothia”). Как используется в настоящем документе, CDR, определенные согласно схеме нумерации “Chothia”, иногда также упоминаются как “гипервариабельные петли”.

Например, согласно Kabat, остатки аминокислот CDR в вариабельном домене тяжелой цепи (VH) нумеруются 31-35 (HCDR1), 50-65 (HCDR2) и 95-102 (HCDR3); а остатки аминокислот CDR в вариабельном домене легкой цепи (VL) нумеруются 24-34 (LCDR1), 50-56 (LCDR2) и 89-97 (LCDR3). Согласно Chothia, аминокислоты CDR в VH нумеруются 26-32 (HCDR1), 52-56 (HCDR2) и 95-102 (HCDR3); и остатки аминокислот в VL нумеруются 26-32 (LCDR1), 50-52 (LCDR2) и 91-96 (LCDR3). При объединении определений CDR, как Kabat, так и Chothia, CDR состоит из остатков аминокислот 26-35 (HCDR1), 50-65 (HCDR2) и 95-102 (HCDR3) в VH человека и из остатков аминокислот 24-34 (LCDR1), 50-56 (LCDR2) и 89-97 (LCDR3) в VL человека.

Как правило, если не указано конкретно, молекулы антитела анти-LAG-3 могут содержать любое сочетание одной или нескольких CDR по Kabat и/или гипервариабельных петель по Chothia. В одном из вариантов осуществления, для молекул антитела анти-LAG-3 используются следующие определения: для HCDR1 согласно объединенным определениям CDR как Kabat, так и Chothia, и для HCCDR 2-3 и LCCDR 1-3 согласно определению CDR Kabat. Согласно всем определениям, каждая VH и VL, как правило, содержит три CDR и четыре FR, расположенные от амино-окончания до карбокси-окончания в следующем порядке: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4.

Как используется в настоящем документе, “последовательность вариабельного домена иммуноглобулина” относится к последовательности аминокислот, которая может формировать структуру вариабельного домена иммуноглобулина. Например, последовательность может содержать всю последовательность аминокислот встречающегося в природе вариабельного домена или ее часть. Например, последовательность может содержать или не содержать одну, две или более N- или C-конечных аминокислот или может содержать другие изменения, которые совместимы с формированием структуры белка.

Термин "антиген-связывающий сайт" относится к той части молекулы антитела, которая содержит детерминанты, которые формируют границу раздела, которая связывается с полипептидом LAG-3 или его эпитопом. Относительно белков (или миметиков белков), антиген-связывающий сайт, как правило, содержит одну или несколько петель (по меньшей мере, из четырех аминокислот или имитаторов аминокислот), которые формируют границу раздела, которая связывается с полипептидом LAG-3. Как правило, антиген-связывающий сайт молекулы антитела содержит, по меньшей мере, одну или две CDR и/или гипервариабельных петли или чаще, по меньшей мере, три, четыре, пять или шесть CDR и/или гипервариабельных петель.

Термины “конкурировать” или “перекрестно конкурировать” используются в настоящем документе взаимозаменяемо для упоминания способности молекулы антитела влиять на связывание молекулы антитела анти-LAG-3, например, молекулы антитела анти-LAG-3, предлагаемой в настоящем документе, с мишенью, например, LAG-3 человека. Влияние на связывание может быть прямым или косвенным (например, через аллостерическую модуляцию молекулы антитела или мишени). Степень, до которой молекула антитела может влиять на связывание другой молекулы антитела с мишенью, и, следовательно, то, можно ли говорить о конкуренции, можно определить с использованием анализа конкурентного связывания, например, анализа FACS, анализа ELISA или анализа BIACORE. В некоторых вариантах осуществления, анализ конкурентного связывания представляет собой количественный конкурентный анализ. В некоторых вариантах осуществления, говорят, что первая молекула антитела анти-LAG-3 конкурирует за связывание с мишенью со второй молекулой антитела анти-LAG-3, когда связывание первой молекулы антитела с мишенью уменьшается на 10% или более, например, на 20% или более, на 30% или более, на 40% или более, на 50% или более, на 55% или более, на 60% или более, на 65% или более, на 70% или более, на 75% или более, на 80% или более, на 85% или более, на 90% или более, на 95% или более, на 98% или более, на 99% или более при анализе конкурентного связывания (например, в конкурентном анализе, описанном в настоящем документе).

Термины “моноклональное антитело” или “композиция моноклонального антитела”, как используется в настоящем документе, относится к препарату молекул антитела мономолекулярной композиции. Композиция моноклонального антитела демонстрирует одинарную специфичность и аффинность связывания к конкретному эпитопу. Моноклональное антитело может быть получено посредством гибридомной технологии или с помощью способов, которые не используют гибридомной технологии (например, рекомбинантных способов).

“Эффективно человеческий” белок представляет собой белок, который не вызывает нейтрализующей реакции антитела, например, реакции антитела анти-мышиные человека (HAMA). HAMA может представлять собой проблему в ряде обстоятельств, например, если молекула антитела вводится многократно, например, при лечении хронического или рецидивирующего болезненного состояния. Реакция HAMA может сделать многократное введение антитела потенциально неэффективным из-за повышенного выведения антитела из сыворотки (смотри, например, Saleh et al., Cancer Immunol. Immunother. 32:180-190 (1990)), а также из-за потенциальных аллергических реакций (смотри, например, LoBuglio et al., Hybridoma, 5:5117-5123 (1986)).

Молекула антитела может представлять собой поликлональное или моноклональное антитело. В других вариантах осуществления, антитело может продуцироваться рекомбинантно, например, продуцироваться с помощью фагового дисплея или комбинаторных способов.

Фаговый дисплей и комбинаторные способы генерирования антител известны в данной области (как описано, например, в Ladner et al. патент США № 5223409; Kang et al. Международная публикация № WO 92/18619; Dower et al. Международная публикация № WO 91/17271; Winter et al. Международная публикация № WO 92/20791; Markland et al. Международная публикация № WO 92/15679; Breitling et al. Международная публикация № WO 93/01288; McCafferty et al. Международная публикация №. WO 92/01047; Garrard et al. Международная публикация № WO 92/09690; Ladner et al. Международная публикация № WO 90/02809; Fuchs et al. (1991) Bio/Technology 9:1370-1372; Hay et al. (1992) Hum Antibody Hybridomas 3:81-85; Huse et al. (1989) Science 246:1275-1281; Griffths et al. (1993) EMBO J 12:725-734; Hawkins et al. (1992) J Mol Biol 226:889-896; Clackson et al. (1991) Nature 352:624-628; Gram et al. (1992) PNAS 89:3576-3580; Garrad et al. (1991) Bio/Technology 9:1373-1377; Hoogenboom et al. (1991) Nuc Acid Res 19:4133-4137; и Barbas et al. (1991) PNAS 88:7978-7982, содержание их всех включается в настоящий документ в качестве ссылок).

В одном из вариантов осуществления, антитело представляет собой полностью человеческое антитело (например, антитело, полученное у мыши, которую получают методами генной инженерии для продуцирования антитела из последовательности иммуноглобулина человека), или нечеловеческое антитело, например, антитело грызуна (мыши или крысы), козы, примата (например, обезьяны), верблюда. Предпочтительно, нечеловеческое антитело представляет собой антитело грызуна (антитело мыши или крысы). Способы получения антитела грызун известны в данной области.

Моноклональные антитела человека можно генерировать с использованием трансгенных мышей, несущих гены иммуноглобулина человека, вместо системы мышей. Спленоциты от этих трансгенных мышей, иммунизированные антигеном, представляющим интерес, используют для продуцирования гибридом, которые секретируют mAb человека, с конкретными аффиностями к эпитопам из белка человека (смотри, например, Wood et al. Международная заявка WO 91/00906, Kucherlapati et al. PCT публикация WO 91/10741; Lonberg et al. Международная заявка WO 92/03918; Kay et al. Международная заявка 92/03917; Lonberg, N. et al. 1994 Nature 368:856-859; Green, L.L. et al. 1994 Nature Genet. 7:13-21; Morrison, S.L. et al. 1994 Proc. Natl. Acad. Sci. USA 81:6851-6855; Bruggeman et al. 1993 Year Immunol 7:33-40; Tuaillon et al. 1993 PNAS 90:3720-3724; Bruggeman et al. 1991 Eur J Immunol 21:1323-1326).

Антитело может представлять собой антитело, в котором вариабельная область или ее часть, например, CDR, генерируется не в организме человека, а например, в крысе или мышей. Химерные, CDR-привитые и гуманизированные антитела охватываются настоящим изобретением. Антитела, генерируемые не в организме человека, например, в крысе или мыши, а затем модифицируются, например, в вариабельной рамке считывания или в константной области, для уменьшения антигенности для человека, охватываются настоящим изобретением.

Химерные антитела могут быть получены с помощью рекомбинантных технологий ДНК известных в данной области (смотри Robinson et al., публикацию Международного патента PCT/US86/02269; Akira, et al., заявку на Европейский патент 184,187; Taniguchi, M., заявку на Европейский патент 171,496; Morrison et al., заявку на Европейский патент 173,494; Neuberger et al., Международную заявку WO 86/01533; Cabilly et al. патент США № 4,816,567; Cabilly et al., заявку на Европейский патент 125,023; Better et al. (1988 Science 240:1041-1043); Liu et al. (1987) PNAS 84:3439-3443; Liu et al., 1987, J. Immunol. 139:3521-3526; Sun et al. (1987) PNAS 84:214-218; Nishimura et al., 1987, Canc. Res. 47:999-1005; Wood et al. (1985) Nature 314:446-449; и Shaw et al., 1988, J. Natl Cancer Inst. 80:1553-1559).

Гуманизированное или CDR-привитое антитело будет содержать, по меньшей мере, одну или две, но, как правило, все три CDR реципиента (из тяжелых и/или легких цепей иммуноглобулина), замененные CDR донора. Антитело может быть заменено, по меньшей мере, частью CDR не-человека, или только некоторые CDR могут быть заменены CDR не-человека. Необходимо только заменить количество CDR необходимое для связывания гуманизированного антитела с PD-1. Предпочтительно, донор будет представлять собой антитело грызуна, например, антитело крысы или мыши, и реципиент будет представлять собой рамку считывания человека или консенсусную рамку считывания человека. Как правило, иммуноглобулин, обеспечивающий CDR, называется "донор", а иммуноглобулин, обеспечивающий рамку считывания, называется "акцептор". В одном из вариантов осуществления, донорный иммуноглобулин получают не от человека (например, от грызуна). Акцепторная рамка считывания представляет собой встречающуюся в природе (например, человеческую) рамку считывания или консенсусную рамку считывания, или последовательность примерно на 85% или выше, предпочтительно, на 90%, 95%, 99% или выше идентичную с ней.

Как используется в настоящем документе, термин “консенсусная последовательность” относится к последовательности, сформированной из наиболее часто встречающихся аминокислот (или нуклеотидов) в семействе родственных последовательностей (смотри, например, Winnaker, From Genes to Clones (Verlagsgesellschaft, Weinheim, Germany 1987). В семействе белков, каждое положение в консенсусной последовательности занято аминокислотой, встречающейся чаще всего в этом положении семейства. Если две аминокислоты встречаются одинаково часто, в консенсусную последовательность может быть включена любая из них. “Консенсусная рамка считывания” относится к области рамки считывания в консенсусной последовательности иммуноглобулина.

Антитело может гуманизироваться с помощью способов известных в данной области (смотри, например, Morrison, S. L., 1985, Science 229:1202-1207, by Oi et al., 1986, BioTechniques 4:214, и by Queen et al. патент США 5585089, патент США 5693761 и патент США 5693762, содержание их всех тем самым включается в качестве ссылок).

Гуманизированные или CDR-привитые антитела можно получить с помощью прививки CDR или замещения CDR, где можно заменять одну, две или все CDR цепи иммуноглобулина. Смотри, например, патент США № 5225539; Jones et al. 1986 Nature 321:552-525; Verhoeyan et al. 1988 Science 239:1534; Beidler et al. 1988 J. Immunol. 141:4053-4060; Winter, патент США 5225539, содержание их всех тем самым включается в качестве ссылок в явном виде. Winter описывает способ прививки CDR, который можно использовать для приготовления гуманизированных антител по настоящему изобретению (заявка на патент UK GB 2188638A, поданная 26 марта 1987 года; Winter, патент США 5225539), содержание которых в явном виде включается в качестве ссылок.

Также в рамках настоящего изобретению находятся гуманизированные антитела, в которых замещаются, устраняются или добавляются конкретные аминокислоты. Критерии выбора аминокислот у донора описаны в патенте США 5585089, например, столбцы 12-16 патента США № 5585089, например, столбцы 12-16 патента США № 5585089, содержание которых тем самым включается в качестве ссылок. Другие технологии гуманизации антител описаны в Padlan et al. EP 519596 A1, опубликованном 23 декабря 1992 года.

Молекула антитела может представлять собой одноцепочечное антитело. Одноцепочечное антитело (scFV) может быть генно-инженерным (смотри, например, Colcher, D. et al. (1999) Ann N Y Acad Sci 880:263-80; и Reiter, Y. (1996) Clin Cancer Res 2:245-52). Одноцепочечное антитело может димеризоваться или мультимеризоваться с генерированием мультивалентных антител, имеющих специфичности к различным эпитопам одного и того же целевого белка.

Еще В одном из вариантов осуществления, молекула антитела имеет константную область тяжелой цепи, выбранную, например, из константных областей тяжелых цепей IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgM, IgA1, IgA2, IgD и IgE; в частности, выбранную, например, из константных областей тяжелых цепей IgG1, IgG2, IgG3 и IgG4 (например, человека). В другом варианте осуществления, молекула антитела имеет константную область легкой цепи, выбранную, например, из константных областей легких цепей каппа или лямбда (например, человека). Константная область может изменяться, например, мутировать, для модификации свойств антитела (например, для увеличения или уменьшения одного или нескольких параметров: связывания Fc-рецептора, гликозилирования антитела, количества цистеиновых остатков, функции эффекторных клеток и/или функции комплемента). В одном из вариантов осуществления, антитело имеет: эффекторную функцию и может фиксировать комплемент. В других вариантах осуществления антитело не рекрутирует эффекторные клетки или не фиксирует комплемента. В другом варианте осуществления, антитело имеет пониженную или нулевую способность связывания Fc-рецептора. Например, оно представляет собой изотип или субтип, фрагмент или другой мутант, который не поддерживает связывание с Fc-рецептором, например, оно имеет мутировавшую или устраненную область связывания Fc-рецептора.

Способы изменения константной области антитела известны в данной области. Антитела с измененной функцией, например, с измененной аффинностью к эффекторному лиганду, такому как FcR, на клетке или компонент C1 комплемента, может быть получено посредством замены, по меньшей мере, одного остатка аминокислоты в константной части антитела другим остатком (смотри, например, EP 388151 A1, патент США № 5624821 и патент США № 5648260, содержание их всех тем самым включается в качестве ссылок). Можно описать сходный тип изменений, который, если применить его к иммуноглобулину мышиных или других видов, уменьшил бы или устранил эти функции.

Молекула антитела может дериватизироваться или связываться с другой функциональной молекулой (например, с другим пептидом или белком). Как используется в настоящем документе, "дериватизированная" молекула антитела представляет собой молекулу, которая модифицируется. Способы дериватизации включают, но, не ограничиваясь этим, добавление флуоресцентного остатка, радионуклеотида, токсина, фермента или аффинного лиганда, такого как биотин. Соответственно, молекулы антител по настоящему изобретению как предполагается, включают дериватизированные и иным образом модифицированные формы антител, описанных в настоящем документе, включая иммуноадгезионные молекулы. Например, молекула антитела может функционально связываться (посредством химической связи, генетического слияния, нековалентной ассоциации или другим образом) с одним или несколькими другими молекулярными объектами, такими как другое антитело (например, биспецифичное антитело или диатело), детектируемый агент, цитотоксичный агент, фармацевтический агент и/или белок или пептид, который может медиировать ассоциацию антитела или части антитела с другой молекулой (такой как область стрептавидиновой сердцевины или полигистидиновая метка).

Один из типов молекул дериватизированных антител получают посредством поперечной сшивки двух или более антител (одного и того же типа или различных типов, например, для создания биспецифичных антител). Соответствующие кросслинкеры включают кросслинкеры, которые являются гетеробифункциональными, имея две различных реактивных группы, разделенных соответствующим спейсером (например, сложным м-малеимидобензоил-N-гидроксисукцинимидным эфиром) или гомобифункциональными (например, дисукцинимидилсуберат). Такие линкеры являются доступными от PierceChemical Company, Rockford, Ill.

Полезные детектируемые агенты, с помощью которых можно дериватизировать (или пометить) молекулу антителу по настоящему изобретению, включают флуоресцентные соединения, различные ферменты, простетические группы, люминисцентные материалы, биолюминисцентные материалы, испускающие флуоресценцию атомы металлов, например, европия (Eu) и других лантанидов, и радиоактивные материалы (описаны ниже). Иллюстративные флуоресцентные детектируемые агенты включают флуоресцеин, флуоресцеин изотиоцианат, родамин, 5-диметиламин-1-нафталинсульфонилхлорид, фикоэритрин, и тому подобное. Антитело может также дериватизироваться с помощью детектируемых ферментов, таких как щелочная фосфатаза, пероксидаза хрена, β-галактозидаза, ацетилхолинэстераза, глюкозаоксидаза, и тому подобное. Когда антитело дериватизируется с помощью детектируемого фермента, оно детектируется при добавлении дополнительных реагентов, которые фермент использует для продуцирования детектируемого продукта реакции. Например, когда присутствует детектируемый агент пероксидаза хрена, добавление перекиси водорода и диаминобензидина приводит к образованию окрашенного продукта реакции, который детектируется. Молекула антитела может также дериватизироваться с помощью простетической группы (например, стрептавидина/биотина и авидина/биотина). Например, антитело может дериватизироваться с помощью биотина, и детектироваться посредством косвенного измерения связывания авидина или стрептавидина. Примеры соответствующих флуоресцентных материалов включают умбеллиферон, флуоресцеин, флуоресцеин изотиоцианат, родамин, дихлортриазиниламин флуоресцеин, данзилхлорид или фикоэритрин; пример люминисцентного материала включает люминал; и примеры биолюминисцентных материалов включают люциферазу, люциферин и экворин.

Меченая молекула антитела может использоваться, например, диагностически и/или экспериментально в ряде контекстов, включая (i) выделение заданного антигена с помощью стандартных технологий, таких как аффинная хроматография или иммуннопреципитация; (ii) детектирование заданного антигена (например, в клеточном лизате или клеточном супернатанте) для оценки содержания и структуры экспрессии белка; (iii) мониторинг уровней белков в ткани как часть процедуры клинических исследований, например, для определения эффективности данного режима лечения.

Молекулы антител могут конъюгироваться с другим молекулярным объектом, как правило, с меткой, или с терапевтическим (например, цитотоксичным или статическим) агентом или остатком. Радиоактивные изотопы можно использовать в диагностических или терапевтических применениях.

Настоящее изобретение предлагает радиоактивно меченые молекулы антител и способы их мечения. В одном из вариантов осуществления, описан способ мечения молекулы антитела. Способ включает приведение в контакт молекулы антитела с хелатирующим агентом с получением тем самым конъюгированного антитела.

Как обсуждается выше, молекула антитела может конъюгироваться с терапевтическим агентом. Уже рассмотрены терапевтически активные радиоизотопы. Примеры других терапевтических агентов включают таксол, цитохалазин B, грамицидин D, этидийбромид, эметин, митомицин, этопозид, тенопозид, винкристин, винбластин, колхицин, доксорубицин, даунорубицин, дигидроксиантрациндион, митоксантрон, митрамицин, актиномицин D, 1-дегидротестостерон, глюкокортикоиды, прокаин, тетракаин, лидокаин, пропранолол, пуромицин, майтансиноиды, например, майтанснол (смотри, например, патент США № 5208020), CC-1065 (смотри, например, патенты США №№ 5475092, 5585499, 5846545) и их аналоги или гомологи. Терапевтические агенты включают, но, не ограничиваясь этим, антиметаболиты (например, метотрексат, 6-меркаптопурин, 6-тиогуанин, цитарабин, 5-флуороурацилдекарбазин), алкилирующие агенты (например, мехлорэтамин, тиотепа хлорамбуцил, CC-1065, мелфалан, кармустин (BSNU) и ломустин (CCNU), циклофосфамид, бусульфан, дибромоманнитол, стрептозотоцин, митомицин C и цис-дихлордиамин платину (II) (DDP) цисплатин), антрациклины (например, даунорубицин (ранее дауномицин) и доксорубицин), антибиотики (например, дактиномицин (ранее актиномицин), блеомицин, митрамицин и антрамицин (AMC)) и анти-митотические агенты (например, винкристин, винбластин, таксол и майтансиноиды).

В одном из аспектов, изобретение предлагает способ получения целевой связывающей молекулы, которая специфично связывается с мишенью, описанной в настоящем изобретении, например, LAG-3. Например, молекула связывания с мишенью представляет собой молекулу антитела. Способ включает: получение целевого белка, который содержит, по меньшей мере, часть не-человеческого белка, часть является гомологичной (идентичной, по меньшей мере, на 70, 75, 80, 85, 87, 90, 92, 94, 95, 96, 97, 98%) соответствующей части целевого белка человека, но отличается, по меньшей мере, на одну аминокислоту (например, по меньшей мере, на одну, две, три, четыре, пять, шесть, семь, восемь или девять аминокислот); получение молекулы антитела, которая специфично связывается с антигеном; и оценку эффективности связывающего агента по активности модуляции целевого белка. Способ может дополнительно включать введение связывающего агента (например, молекулы антитела) или производного (например, молекулы гуманизированного антитела) субъекту человеку.

Настоящее изобретение предлагает изолированную молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую указанную выше молекулу антитела, ее векторы и клетки хозяева. Молекула нуклеиновой кислоты включает, но, не ограничиваясь этим, РНК, геномную ДНК и кДНК.

Иллюстративные молекулы антитела анти-LAG-3

В одном из вариантов осуществления, ингибитор LAG-3 представляет собой молекулу антитела анти-LAG-3, как описано в патенте США 2015/0259420, опубликованном на 17 сентября 2015 года, озаглавленном “Antibody Molecules to LAG-3 and Uses Thereof”, который включается в качестве ссылки во всей своей полноте.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 содержит, по меньшей мере, одну, две, три, четыре, пять или шесть областей, определяющих комплементарность (CDR) (или коллективно все CDR), из вариабельной области тяжелой и легкой цепи, содержащие последовательность аминокислот, показанную в Таблице 5 (например, последовательности вариабельных областей тяжелой и легкой цепи из BAP050-Clone I или BAP050-Clone J, описанных в Таблице 5), или они кодируются последовательностью нуклеотидов, показанной в Таблице 5. В некоторых вариантах осуществления, CDR соответствуют определению Kabat (например, как приведено в Таблице 5). В некоторых вариантах осуществления, CDR соответствуют определению Chothia (например, как приведено в Таблице 5). В некоторых вариантах осуществления, CDR соответствуют объединенным определениям CDR как Kabat, так и Chothia (например, как приведено в Таблице 5). В одном из вариантов осуществления, сочетание Kabat и Chothia CDR of VH CDR1 содержит последовательность аминокислот GFTLTNYGMN (SEQ ID NO: 766). В одном из вариантов осуществления, один или несколько CDR (или коллективно все CDR) имеют одно, два, три, четыре, пять, шесть или более изменений, например, замещений аминокислот (например, консервативных замещений аминокислот) или делеций, по сравнению с последовательностью аминокислот, показанных в Таблице 5, или они кодируются последовательностью нуклеотидов, показанных в Таблице 5.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую последовательность аминокислот VHCDR1 of SEQ ID NO: 701, последовательность аминокислот VHCDR2 SEQ ID NO: 702, и последовательность аминокислот VHCDR3 SEQ ID NO: 703; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую последовательность аминокислот VLCDR1 SEQ ID NO: 710, последовательность аминокислот VLCDR2 SEQ ID NO: 711 и последовательность аминокислот VLCDR3 SEQ ID NO: 712, каждая из них описана в Таблице 5.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 содержит VH, содержащую VHCDR1, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 736 или 737, VHCDR2, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 738 или 739, и VHCDR3, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 740 или 741; и VL, содержащую VLCDR1, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 746 или 747, VLCDR2, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 748 или 749, и VLCDR3, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 750 или 751, каждая из них описана в Таблице 5. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 содержит VH, содержащую VHCDR1, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 758 или 737, VHCDR2, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 759 или 739, и VHCDR3, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 760 или 741; и VL, содержащую VLCDR1, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 746 или 747, VLCDR2, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 748 или 749, и VLCDR3, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 750 или 751, каждая описана в Таблице 5.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 содержит VH, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 706 или последовательность аминокислот, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичную SEQ ID NO: 706. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 содержит VL, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 718 или последовательность аминокислот, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичную SEQ ID NO: 718. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 содержит VH, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 724 или последовательность аминокислот, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичную SEQ ID NO: 724. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 содержит VL, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 730 или последовательность аминокислот, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичную SEQ ID NO: 730. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 содержит VH, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 706 и VL, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 718. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 содержит VH, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 724 и VL, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 730.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит VH, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 707 или 708, или последовательностью нуклеотидов, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичной SEQ ID NO: 707 или 708. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит VL, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 719 или 720, или последовательностью нуклеотидов, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичной SEQ ID NO: 719 или 720. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит VH, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 725 или 726, или последовательностью нуклеотидов, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичной SEQ ID NO: 725 или 726. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит VL, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 731 или 732, или последовательностью нуклеотидов, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичной SEQ ID NO: 731 или 732. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит VH, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 707 или 708, и VL, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 719 или 720. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит VH, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 725 или 726 и VL, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 731 или 732.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 содержит тяжелую цепь, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 709 или последовательность аминокислот, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичную SEQ ID NO: 709. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 содержит легкую цепь, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 721 или последовательность аминокислот, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичную SEQ ID NO: 721. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 содержит тяжелую цепь, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 727 или последовательность аминокислот, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичную SEQ ID NO: 727. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 содержит легкую цепь, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 733 или последовательность аминокислот, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичную SEQ ID NO: 733. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 содержит тяжелую цепь, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 709, и легкую цепь, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 721. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 содержит тяжелую цепь, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 727, и легкую цепь, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 733.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит тяжелую цепь, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 716 или 717 или последовательностью нуклеотидов, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичной SEQ ID NO: 716 или 717. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит легкую цепь, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 722 или 723, или последовательностью нуклеотидов, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичной SEQ ID NO: 722 или 723. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит тяжелую цепь, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 728 или 729 или последовательностью нуклеотидов, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичной SEQ ID NO: 728 или 729. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит легкую цепь, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 734 или 735 или последовательностью нуклеотидов, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичной SEQ ID NO: 734 или 735. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит тяжелую цепь, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 716 или 717, и легкую цепь, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 722 или 723. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит тяжелую цепь, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 728 или 729, и легкую цепь, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 734 или 735.

Молекулы антител, описанные в настоящем документе, могут быть получены с помощью векторов, клеток хозяев и способов, описанных в патенте США 2015/0259420, включенном в качестве ссылки во всей своей полноте.

Таблица 5. Последовательности аминокислот и нуклеотидов иллюстративных молекул антитела анти-LAG-3

BAP050-Clone I HC SEQ ID NO: 701 (Kabat) HCDR1 NYGMN SEQ ID NO: 702 (Kabat) HCDR2 WINTDTGEPTYADDFKG SEQ ID NO: 703 (Kabat) HCDR3 NPPYYYGTNNAEAMDY SEQ ID NO: 704 (Chothia) HCDR1 GFTLTNY SEQ ID NO: 705 (Chothia) HCDR2 NTDTGE SEQ ID NO: 703 (Chothia) HCDR3 NPPYYYGTNNAEAMDY SEQ ID NO:706 VH QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGFTLTNYGMNWVRQARGQRLEWIGWINTDTGEPTYADDFKGRFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCARNPPYYYGTNNAEAMDYWGQGTTVTVSS SEQ ID NO: 707 ДНК VH Caagtgcagctggtgcagtcgggagccgaagtgaagaagcctggagcctcggtgaaggtgtcgtgcaaggcatccggattcaccctcaccaattacgggatgaactgggtcagacaggcccggggtcaacggctggagtggatcggatggattaacaccgacaccggggagcctacctacgcggacgatttcaagggacggttcgtgttctccctcgacacctccgtgtccaccgcctacctccaaatctcctcactgaaagcggaggacaccgccgtgtactattgcgcgaggaacccgccctactactacggaaccaacaacgccgaagccatggactactggggccagggcaccactgtgactgtgtccagc SEQ ID NO: 708 ДНК VH CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGCGCCGAAGTGAAGAAACCTGGCGCCTCCGTGAAGGTGTCCTGCAAGGCCTCTGGCTTCACCCTGACCAACTACGGCATGAACTGGGTGCGACAGGCCAGGGGCCAGCGGCTGGAATGGATCGGCTGGATCAACACCGACACCGGCGAGCCTACCTACGCCGACGACTTCAAGGGCAGATTCGTGTTCTCCCTGGACACCTCCGTGTCCACCGCCTACCTGCAGATCTCCAGCCTGAAGGCCGAGGATACCGCCGTGTACTACTGCGCCCGGAACCCCCCTTACTACTACGGCACCAACAACGCCGAGGCCATGGACTATTGGGGCCAGGGCACCACCGTGACCGTGTCCTCT SEQ ID NO: 709 Тяжелая цепь QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGFTLTNYGMNWVRQARGQRLEWIGWINTDTGEPTYADDFKGRFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCARNPPYYYGTNNAEAMDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLG SEQ ID NO: 716 Тяжелая цепь ДНК caagtgcagctggtgcagtcgggagccgaagtgaagaagcctggagcctcggtgaaggtgtcgtgcaaggcatccggattcaccctcaccaattacgggatgaactgggtcagacaggcccggggtcaacggctggagtggatcggatggattaacaccgacaccggggagcctacctacgcggacgatttcaagggacggttcgtgttctccctcgacacctccgtgtccaccgcctacctccaaatctcctcactgaaagcggaggacaccgccgtgtactattgcgcgaggaacccgccctactactacggaaccaacaacgccgaagccatggactactggggccagggcaccactgtgactgtgtccagcgcgtccactaagggcccgtccgtgttccccctggcaccttgtagccggagcactagcgaatccaccgctgccctcggctgcctggtcaaggattacttcccggagcccgtgaccgtgtcctggaacagcggagccctgacctccggagtgcacaccttccccgctgtgctgcagagctccgggctgtactcgctgtcgtcggtggtcacggtgccttcatctagcctgggtaccaagacctacacttgcaacgtggaccacaagccttccaacactaaggtggacaagcgcgtcgaatcgaagtacggcccaccgtgcccgccttgtcccgcgccggagttcctcggcggtccctcggtctttctgttcccaccgaagcccaaggacactttgatgatttcccgcacccctgaagtgacatgcgtggtcgtggacgtgtcacaggaagatccggaggtgcagttcaattggtacgtggatggcgtcgaggtgcacaacgccaaaaccaagccgagggaggagcagttcaactccacttaccgcgtcgtgtccgtgctgacggtgctgcatcaggactggctgaacgggaaggagtacaagtgcaaagtgtccaacaagggacttcctagctcaatcgaaaagaccatctcgaaagccaagggacagccccgggaaccccaagtgtataccctgccaccgagccaggaagaaatgactaagaaccaagtctcattgacttgccttgtgaagggcttctacccatcggatatcgccgtggaatgggagtccaacggccagccggaaaacaactacaagaccacccctccggtgctggactcagacggatccttcttcctctactcgcggctgaccgtggataagagcagatggcaggagggaaatgtgttcagctgttctgtgatgcatgaagccctgcacaaccactacactcagaagtccctgtccctctccctggga SEQ ID NO: 717 Тяжелая цепь ДНК CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGCGCCGAAGTGAAGAAACCTGGCGCCTCCGTGAAGGTGTCCTGCAAGGCCTCTGGCTTCACCCTGACCAACTACGGCATGAACTGGGTGCGACAGGCCAGGGGCCAGCGGCTGGAATGGATCGGCTGGATCAACACCGACACCGGCGAGCCTACCTACGCCGACGACTTCAAGGGCAGATTCGTGTTCTCCCTGGACACCTCCGTGTCCACCGCCTACCTGCAGATCTCCAGCCTGAAGGCCGAGGATACCGCCGTGTACTACTGCGCCCGGAACCCCCCTTACTACTACGGCACCAACAACGCCGAGGCCATGGACTATTGGGGCCAGGGCACCACCGTGACCGTGTCCTCTGCTTCTACCAAGGGGCCCAGCGTGTTCCCCCTGGCCCCCTGCTCCAGAAGCACCAGCGAGAGCACAGCCGCCCTGGGCTGCCTGGTGAAGGACTACTTCCCCGAGCCCGTGACCGTGTCCTGGAACAGCGGAGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTTCCCCGCCGTGCTGCAGAGCAGCGGCCTGTACAGCCTGAGCAGCGTGGTGACCGTGCCCAGCAGCAGCCTGGGCACCAAGACCTACACCTGTAACGTGGACCACAAGCCCAGCAACACCAAGGTGGACAAGAGGGTGGAGAGCAAGTACGGCCCACCCTGCCCCCCCTGCCCAGCCCCCGAGTTCCTGGGCGGACCCAGCGTGTTCCTGTTCCCCCCCAAGCCCAAGGACACCCTGATGATCAGCAGAACCCCCGAGGTGACCTGTGTGGTGGTGGACGTGTCCCAGGAGGACCCCGAGGTCCAGTTCAACTGGTACGTGGACGGCGTGGAGGTGCACAACGCCAAGACCAAGCCCAGAGAGGAGCAGTTTAACAGCACCTACCGGGTGGTGTCCGTGCTGACCGTGCTGCACCAGGACTGGCTGAACGGCAAAGAGTACAAGTGTAAGGTCTCCAACAAGGGCCTGCCAAGCAGCATCGAAAAGACCATCAGCAAGGCCAAGGGCCAGCCTAGAGAGCCCCAGGTCTACACCCTGCCACCCAGCCAAGAGGAGATGACCAAGAACCAGGTGTCCCTGACCTGTCTGGTGAAGGGCTTCTACCCAAGCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGAGCAACGGCCAGCCCGAGAACAACTACAAGACCACCCCCCCAGTGCTGGACAGCGACGGCAGCTTCTTCCTGTACAGCAGGCTGACCGTGGACAAGTCCAGATGGCAGGAGGGCAACGTCTTTAGCTGCTCCGTGATGCACGAGGCCCTGCACAACCACTACACCCAGAAGAGCCTGAGCCTGTCCCTGGGC BAP050-Clone I LC SEQ ID NO: 710 (Kabat) LCDR1 SSSQDISNYLN SEQ ID NO: 711 (Kabat) LCDR2 YTSTLHL SEQ ID NO: 712 (Kabat) LCDR3 QQYYNLPWT SEQ ID NO: 713 (Chothia) LCDR1 SQDISNY SEQ ID NO: 714 (Chothia) LCDR2 YTS SEQ ID NO: 715 (Chothia) LCDR3 YYNLPW SEQ ID NO: 718 VL DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSSSQDISNYLNWYLQKPGQSPQLLIYYTSTLHLGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCQQYYNLPWTFGQGTKVEIK SEQ ID NO: 719 ДНК VL Gatattcagatgactcagtcacctagtagcctgagcgctagtgtgggcgatagagtgactatcacctgtagctctagtcaggatatctctaactacctgaactggtatctgcagaagcccggtcaatcacctcagctgctgatctactacactagcaccctgcacctgggcgtgccctctaggtttagcggtagcggtagtggcaccgagttcaccctgactatctctagcctgcagcccgacgacttcgctacctactactgtcagcagtactataacctgccctggaccttcggtcaaggcactaaggtcgagattaag SEQ ID NO: 720 ДНК VL GACATCCAGATGACCCAGTCCCCCTCCAGCCTGTCTGCTTCCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTGTTCCTCCAGCCAGGACATCTCCAACTACCTGAACTGGTATCTGCAGAAGCCCGGCCAGTCCCCTCAGCTGCTGATCTACTACACCTCCACCCTGCACCTGGGCGTGCCCTCCAGATTTTCCGGCTCTGGCTCTGGCACCGAGTTTACCCTGACCATCAGCTCCCTGCAGCCCGACGACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGTACTACAACCTGCCCTGGACCTTCGGCCAGGGCACCAAGGTGGAAATCAAG SEQ ID NO: 721 Легкая цепь DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSSSQDISNYLNWYLQKPGQSPQLLIYYTSTLHLGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCQQYYNLPWTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC SEQ ID NO: 722 Легкая цепь ДНК Gatattcagatgactcagtcacctagtagcctgagcgctagtgtgggcgatagagtgactatcacctgtagctctagtcaggatatctctaactacctgaactggtatctgcagaagcccggtcaatcacctcagctgctgatctactacactagcaccctgcacctgggcgtgccctctaggtttagcggtagcggtagtggcaccgagttcaccctgactatctctagcctgcagcccgacgacttcgctacctactactgtcagcagtactataacctgccctggaccttcggtcaaggcactaaggtcgagattaagcgtacggtggccgctcccagcgtgttcatcttcccccccagcgacgagcagctgaagagcggcaccgccagcgtggtgtgcctgctgaacaacttctacccccgggaggccaaggtgcagtggaaggtggacaacgccctgcagagcggcaacagccaggagagcgtcaccgagcaggacagcaaggactccacctacagcctgagcagcaccctgaccctgagcaaggccgactacgagaagcataaggtgtacgcctgcgaggtgacccaccagggcctgtccagccccgtgaccaagagcttcaacaggggcgagtgc SEQ ID NO: 723 Легкая цепь ДНК GACATCCAGATGACCCAGTCCCCCTCCAGCCTGTCTGCTTCCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTGTTCCTCCAGCCAGGACATCTCCAACTACCTGAACTGGTATCTGCAGAAGCCCGGCCAGTCCCCTCAGCTGCTGATCTACTACACCTCCACCCTGCACCTGGGCGTGCCCTCCAGATTTTCCGGCTCTGGCTCTGGCACCGAGTTTACCCTGACCATCAGCTCCCTGCAGCCCGACGACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGTACTACAACCTGCCCTGGACCTTCGGCCAGGGCACCAAGGTGGAAATCAAGCGTACGGTGGCCGCTCCCAGCGTGTTCATCTTCCCCCCAAGCGACGAGCAGCTGAAGAGCGGCACCGCCAGCGTGGTGTGTCTGCTGAACAACTTCTACCCCAGGGAGGCCAAGGTGCAGTGGAAGGTGGACAACGCCCTGCAGAGCGGCAACAGCCAGGAGAGCGTCACCGAGCAGGACAGCAAGGACTCCACCTACAGCCTGAGCAGCACCCTGACCCTGAGCAAGGCCGACTACGAGAAGCACAAGGTGTACGCCTGTGAGGTGACCCACCAGGGCCTGTCCAGCCCCGTGACCAAGAGCTTCAACAGGGGCGAGTGC BAP050-Clone J HC SEQ ID NO: 701 (Kabat) HCDR1 NYGMN SEQ ID NO: 702 (Kabat) HCDR2 WINTDTGEPTYADDFKG SEQ ID NO: 703 (Kabat) HCDR3 NPPYYYGTNNAEAMDY SEQ ID NO: 704 (Chothia) HCDR1 GFTLTNY SEQ ID NO: 705 (Chothia) HCDR2 NTDTGE SEQ ID NO: 703 (Chothia) HCDR3 NPPYYYGTNNAEAMDY SEQ ID NO: 724 VH QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGFTLTNYGMNWVRQAPGQGLEWMGWINTDTGEPTYADDFKGRFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCARNPPYYYGTNNAEAMDYWGQGTTVTVSS SEQ ID NO: 725 ДНК VH Caggtgcagctggtgcagtcaggcgccgaagtgaagaaacccggcgctagtgtgaaagtcagctgtaaagctagtggcttcaccctgactaactacgggatgaactgggtccgccaggccccaggtcaaggcctcgagtggatgggctggattaacaccgacaccggcgagcctacctacgccgacgactttaagggcagattcgtgtttagcctggacactagtgtgtctaccgcctacctgcagatctctagcctgaaggccgaggacaccgccgtctactactgcgctagaaaccccccctactactacggcactaacaacgccgaggctatggactactggggtcaaggcactaccgtgaccgtgtctagc SEQ ID NO: 726 ДНК VH CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGCGCCGAAGTGAAGAAACCTGGCGCCTCCGTGAAGGTGTCCTGCAAGGCCTCTGGCTTCACCCTGACCAACTACGGCATGAACTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAGGGCCTGGAATGGATGGGCTGGATCAACACCGACACCGGCGAGCCTACCTACGCCGACGACTTCAAGGGCAGATTCGTGTTCTCCCTGGACACCTCCGTGTCCACCGCCTACCTGCAGATCTCCAGCCTGAAGGCCGAGGATACCGCCGTGTACTACTGCGCCCGGAACCCCCCTTACTACTACGGCACCAACAACGCCGAGGCCATGGACTATTGGGGCCAGGGCACCACCGTGACCGTGTCCTCT SEQ ID NO: 727 Тяжелая цепь QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGFTLTNYGMNWVRQAPGQGLEWMGWINTDTGEPTYADDFKGRFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCARNPPYYYGTNNAEAMDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLG SEQ ID NO: 728 Тяжелая цепь ДНК caggtgcagctggtgcagtcaggcgccgaagtgaagaaacccggcgctagtgtgaaagtcagctgtaaagctagtggcttcaccctgactaactacgggatgaactgggtccgccaggccccaggtcaaggcctcgagtggatgggctggattaacaccgacaccggcgagcctacctacgccgacgactttaagggcagattcgtgtttagcctggacactagtgtgtctaccgcctacctgcagatctctagcctgaaggccgaggacaccgccgtctactactgcgctagaaaccccccctactactacggcactaacaacgccgaggctatggactactggggtcaaggcactaccgtgaccgtgtctagcgctagcactaagggcccgtccgtgttccccctggcaccttgtagccggagcactagcgaatccaccgctgccctcggctgcctggtcaaggattacttcccggagcccgtgaccgtgtcctggaacagcggagccctgacctccggagtgcacaccttccccgctgtgctgcagagctccgggctgtactcgctgtcgtcggtggtcacggtgccttcatctagcctgggtaccaagacctacacttgcaacgtggaccacaagccttccaacactaaggtggacaagcgcgtcgaatcgaagtacggcccaccgtgcccgccttgtcccgcgccggagttcctcggcggtccctcggtctttctgttcccaccgaagcccaaggacactttgatgatttcccgcacccctgaagtgacatgcgtggtcgtggacgtgtcacaggaagatccggaggtgcagttcaattggtacgtggatggcgtcgaggtgcacaacgccaaaaccaagccgagggaggagcagttcaactccacttaccgcgtcgtgtccgtgctgacggtgctgcatcaggactggctgaacgggaaggagtacaagtgcaaagtgtccaacaagggacttcctagctcaatcgaaaagaccatctcgaaagccaagggacagccccgggaaccccaagtgtataccctgccaccgagccaggaagaaatgactaagaaccaagtctcattgacttgccttgtgaagggcttctacccatcggatatcgccgtggaatgggagtccaacggccagccggaaaacaactacaagaccacccctccggtgctggactcagacggatccttcttcctctactcgcggctgaccgtggataagagcagatggcaggagggaaatgtgttcagctgttctgtgatgcatgaagccctgcacaaccactacactcagaagtccctgtccctctccctggga SEQ ID NO: 729 Тяжелая цепь ДНК CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGCGCCGAAGTGAAGAAACCTGGCGCCTCCGTGAAGGTGTCCTGCAAGGCCTCTGGCTTCACCCTGACCAACTACGGCATGAACTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAGGGCCTGGAATGGATGGGCTGGATCAACACCGACACCGGCGAGCCTACCTACGCCGACGACTTCAAGGGCAGATTCGTGTTCTCCCTGGACACCTCCGTGTCCACCGCCTACCTGCAGATCTCCAGCCTGAAGGCCGAGGATACCGCCGTGTACTACTGCGCCCGGAACCCCCCTTACTACTACGGCACCAACAACGCCGAGGCCATGGACTATTGGGGCCAGGGCACCACCGTGACCGTGTCCTCTGCTTCTACCAAGGGGCCCAGCGTGTTCCCCCTGGCCCCCTGCTCCAGAAGCACCAGCGAGAGCACAGCCGCCCTGGGCTGCCTGGTGAAGGACTACTTCCCCGAGCCCGTGACCGTGTCCTGGAACAGCGGAGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTTCCCCGCCGTGCTGCAGAGCAGCGGCCTGTACAGCCTGAGCAGCGTGGTGACCGTGCCCAGCAGCAGCCTGGGCACCAAGACCTACACCTGTAACGTGGACCACAAGCCCAGCAACACCAAGGTGGACAAGAGGGTGGAGAGCAAGTACGGCCCACCCTGCCCCCCCTGCCCAGCCCCCGAGTTCCTGGGCGGACCCAGCGTGTTCCTGTTCCCCCCCAAGCCCAAGGACACCCTGATGATCAGCAGAACCCCCGAGGTGACCTGTGTGGTGGTGGACGTGTCCCAGGAGGACCCCGAGGTCCAGTTCAACTGGTACGTGGACGGCGTGGAGGTGCACAACGCCAAGACCAAGCCCAGAGAGGAGCAGTTTAACAGCACCTACCGGGTGGTGTCCGTGCTGACCGTGCTGCACCAGGACTGGCTGAACGGCAAAGAGTACAAGTGTAAGGTCTCCAACAAGGGCCTGCCAAGCAGCATCGAAAAGACCATCAGCAAGGCCAAGGGCCAGCCTAGAGAGCCCCAGGTCTACACCCTGCCACCCAGCCAAGAGGAGATGACCAAGAACCAGGTGTCCCTGACCTGTCTGGTGAAGGGCTTCTACCCAAGCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGAGCAACGGCCAGCCCGAGAACAACTACAAGACCACCCCCCCAGTGCTGGACAGCGACGGCAGCTTCTTCCTGTACAGCAGGCTGACCGTGGACAAGTCCAGATGGCAGGAGGGCAACGTCTTTAGCTGCTCCGTGATGCACGAGGCCCTGCACAACCACTACACCCAGAAGAGCCTGAGCCTGTCCCTGGGC BAP050-Clone J LC SEQ ID NO: 710 (Kabat) LCDR1 SSSQDISNYLN SEQ ID NO: 711 (Kabat) LCDR2 YTSTLHL SEQ ID NO: 712 (Kabat) LCDR3 QQYYNLPWT SEQ ID NO: 713 (Chothia) LCDR1 SQDISNY SEQ ID NO: 714 (Chothia) LCDR2 YTS SEQ ID NO: 715 (Chothia) LCDR3 YYNLPW SEQ ID NO: 730 VL DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSSSQDISNYLNWYQQKPGKAPKLLIYYTSTLHLGIPPRFSGSGYGTDFTLTINNIESEDAAYYFCQQYYNLPWTFGQGTKVEIK SEQ ID NO: 731 ДНК VL Gatattcagatgactcagtcacctagtagcctgagcgctagtgtgggcgatagagtgactatcacctgtagctctagtcaggatatctctaactacctgaactggtatcagcagaagcccggtaaagcccctaagctgctgatctactacactagcaccctgcacctgggaatcccccctaggtttagcggtagcggctacggcaccgacttcaccctgactattaacaatatcgagtcagaggacgccgcctactacttctgtcagcagtactataacctgccctggaccttcggtcaaggcactaaggtcgagattaag SEQ ID NO: 732 ДНК VL GACATCCAGATGACCCAGTCCCCCTCCAGCCTGTCTGCTTCCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTGTTCCTCCAGCCAGGACATCTCCAACTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCAAGGCCCCCAAGCTGCTGATCTACTACACCTCCACCCTGCACCTGGGCATCCCCCCTAGATTCTCCGGCTCTGGCTACGGCACCGACTTCACCCTGACCATCAACAACATCGAGTCCGAGGACGCCGCCTACTACTTCTGCCAGCAGTACTACAACCTGCCCTGGACCTTCGGCCAGGGCACCAAGGTGGAAATCAAG SEQ ID NO: 733 Легкая цепь DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSSSQDISNYLNWYQQKPGKAPKLLIYYTSTLHLGIPPRFSGSGYGTDFTLTINNIESEDAAYYFCQQYYNLPWTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC SEQ ID NO: 734 Легкая цепь ДНК Gatattcagatgactcagtcacctagtagcctgagcgctagtgtgggcgatagagtgactatcacctgtagctctagtcaggatatctctaactacctgaactggtatcagcagaagcccggtaaagcccctaagctgctgatctactacactagcaccctgcacctgggaatcccccctaggtttagcggtagcggctacggcaccgacttcaccctgactattaacaatatcgagtcagaggacgccgcctactacttctgtcagcagtactataacctgccctggaccttcggtcaaggcactaaggtcgagattaagcgtacggtggccgctcccagcgtgttcatcttcccccccagcgacgagcagctgaagagcggcaccgccagcgtggtgtgcctgctgaacaacttctacccccgggaggccaaggtgcagtggaaggtggacaacgccctgcagagcggcaacagccaggagagcgtcaccgagcaggacagcaaggactccacctacagcctgagcagcaccctgaccctgagcaaggccgactacgagaagcataaggtgtacgcctgcgaggtgacccaccagggcctgtccagccccgtgaccaagagcttcaacaggggcgagtgc SEQ ID NO: 735 Легкая цепь ДНК GACATCCAGATGACCCAGTCCCCCTCCAGCCTGTCTGCTTCCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTGTTCCTCCAGCCAGGACATCTCCAACTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCAAGGCCCCCAAGCTGCTGATCTACTACACCTCCACCCTGCACCTGGGCATCCCCCCTAGATTCTCCGGCTCTGGCTACGGCACCGACTTCACCCTGACCATCAACAACATCGAGTCCGAGGACGCCGCCTACTACTTCTGCCAGCAGTACTACAACCTGCCCTGGACCTTCGGCCAGGGCACCAAGGTGGAAATCAAGCGTACGGTGGCCGCTCCCAGCGTGTTCATCTTCCCCCCAAGCGACGAGCAGCTGAAGAGCGGCACCGCCAGCGTGGTGTGTCTGCTGAACAACTTCTACCCCAGGGAGGCCAAGGTGCAGTGGAAGGTGGACAACGCCCTGCAGAGCGGCAACAGCCAGGAGAGCGTCACCGAGCAGGACAGCAAGGACTCCACCTACAGCCTGAGCAGCACCCTGACCCTGAGCAAGGCCGACTACGAGAAGCACAAGGTGTACGCCTGTGAGGTGACCCACCAGGGCCTGTCCAGCCCCGTGACCAAGAGCTTCAACAGGGGCGAGTGC BAP050-Clone I HC SEQ ID NO: 736 (Kabat) HCDR1 aattacgggatgaac SEQ ID NO: 737 (Kabat) HCDR1 AACTACGGCATGAAC SEQ ID NO: 738 (Kabat) HCDR2 tggattaacaccgacaccggggagcctacctacgcggacgatttcaaggga SEQ ID NO: 739 (Kabat) HCDR2 TGGATCAACACCGACACCGGCGAGCCTACCTACGCCGACGACTTCAAGGGC SEQ ID NO: 740 (Kabat) HCDR3 aacccgccctactactacggaaccaacaacgccgaagccatggactac SEQ ID NO: 741 (Kabat) HCDR3 AACCCCCCTTACTACTACGGCACCAACAACGCCGAGGCCATGGACTAT SEQ ID NO: 742 (Chothia) HCDR1 ggattcaccctcaccaattac SEQ ID NO: 743 (Chothia) HCDR1 GGCTTCACCCTGACCAACTAC SEQ ID NO: 744 (Chothia) HCDR2 aacaccgacaccggggag SEQ ID NO: 745 (Chothia) HCDR2 AACACCGACACCGGCGAG SEQ ID NO: 740 (Chothia) HCDR3 aacccgccctactactacggaaccaacaacgccgaagccatggactac SEQ ID NO: 741 (Chothia) HCDR3 AACCCCCCTTACTACTACGGCACCAACAACGCCGAGGCCATGGACTAT BAP050-Clone I LC SEQ ID NO: 746 (Kabat) LCDR1 agctctagtcaggatatctctaactacctgaac SEQ ID NO: 747 (Kabat) LCDR1 TCCTCCAGCCAGGACATCTCCAACTACCTGAAC SEQ ID NO: 748 (Kabat) LCDR2 tacactagcaccctgcacctg SEQ ID NO: 749 (Kabat) LCDR2 TACACCTCCACCCTGCACCTG SEQ ID NO: 750 (Kabat) LCDR3 cagcagtactataacctgccctggacc SEQ ID NO: 751 (Kabat) LCDR3 CAGCAGTACTACAACCTGCCCTGGACC SEQ ID NO: 752 (Chothia) LCDR1 agtcaggatatctctaactac SEQ ID NO: 753 (Chothia) LCDR1 AGCCAGGACATCTCCAACTAC SEQ ID NO: 754 (Chothia) LCDR2 tacactagc SEQ ID NO: 755 (Chothia) LCDR2 TACACCTCC SEQ ID NO: 756 (Chothia) LCDR3 tactataacctgccctgg SEQ ID NO: 757 (Chothia) LCDR3 TACTACAACCTGCCCTGG BAP050-Clone J HC SEQ ID NO: 758 (Kabat) HCDR1 aactacgggatgaac SEQ ID NO: 737 (Kabat) HCDR1 AACTACGGCATGAAC SEQ ID NO: 759 (Kabat) HCDR2 tggattaacaccgacaccggcgagcctacctacgccgacgactttaagggc SEQ ID NO: 739 (Kabat) HCDR2 TGGATCAACACCGACACCGGCGAGCCTACCTACGCCGACGACTTCAAGGGC SEQ ID NO: 760 (Kabat) HCDR3 aaccccccctactactacggcactaacaacgccgaggctatggactac SEQ ID NO: 741 (Kabat) HCDR3 AACCCCCCTTACTACTACGGCACCAACAACGCCGAGGCCATGGACTAT SEQ ID NO: 761 (Chothia) HCDR1 ggcttcaccctgactaactac SEQ ID NO: 743 (Chothia) HCDR1 GGCTTCACCCTGACCAACTAC SEQ ID NO: 744 (Chothia) HCDR2 aacaccgacaccggggag SEQ ID NO: 745 (Chothia) HCDR2 AACACCGACACCGGCGAG SEQ ID NO: 760 (Chothia) HCDR3 aaccccccctactactacggcactaacaacgccgaggctatggactac SEQ ID NO: 741 (Chothia) HCDR3 AACCCCCCTTACTACTACGGCACCAACAACGCCGAGGCCATGGACTAT BAP050-Clone J LC SEQ ID NO: 746 (Kabat) LCDR1 agctctagtcaggatatctctaactacctgaac SEQ ID NO: 747 (Kabat) LCDR1 TCCTCCAGCCAGGACATCTCCAACTACCTGAAC SEQ ID NO: 748 (Kabat) LCDR2 TACACTAGCACCCTGCACCTG SEQ ID NO: 749 (Kabat) LCDR2 TACACCTCCACCCTGCACCTG SEQ ID NO: 750 (Kabat) LCDR3 cagcagtactataacctgccctggacc SEQ ID NO: 751 (Kabat) LCDR3 CAGCAGTACTACAACCTGCCCTGGACC SEQ ID NO: 752 (Chothia) LCDR1 agtcaggatatctctaactac SEQ ID NO: 753 (Chothia) LCDR1 AGCCAGGACATCTCCAACTAC SEQ ID NO: 754 (Chothia) LCDR2 TACACTAGC SEQ ID NO: 755 (Chothia) LCDR2 TACACCTCC SEQ ID NO: 756 (Chothia) LCDR3 tactataacctgccctgg SEQ ID NO: 757 (Chothia) LCDR3 TACTACAACCTGCCCTGG

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 содержит, по меньшей мере, один или два вариабельных домена тяжелой цепи (необязательно содержащих константную область), по меньшей мере, один или два вариабельных домена легкой цепи (необязательно содержащих константную область) или как то, так и другое, содержащих последовательность аминокислот любого из BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (например, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser или BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clone-F, BAP050-Clone-G, BAP050-Clone-H, BAP050-Clone-I или BAP050-Clone-J; или как описано в Таблице 1 патента США 2015/0259420, или она кодируется последовательностью нуклеотидов в Таблице 1; или последовательность по существу идентичную (например, идентичную, по меньшей мере, на 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% или выше) любой из указанных выше последовательностей.

Еще в одном варианте осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 содержит, по меньшей мере, одну, две или три области, определяющей комплементарность (CDR) из вариабельной области тяжелой цепи и/или вариабельной области легкой цепи антитела, описанного в настоящем документе, например, антитела, выбранного из любого из BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (например, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser или BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clone-F, BAP050-Clone-G, BAP050-Clone-H, BAP050-Clone-I или BAP050-Clone-J; или как описано в Таблице 1 патента США 2015/0259420, или она кодируется последовательностью нуклеотидов в Таблице 1; или последовательность по существу идентичную (например, идентичную, по меньшей мере, 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% или выше) любой из указанных выше последовательностей.

Еще в одном варианте осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 содержит, по меньшей мере, одну, две или три CDR (или коллективно все CDR) из вариабельной области тяжелой цепи, содержащей последовательность аминокислот, как показано в Таблице 1 патента США 2015/0259420, или она кодируется последовательностью нуклеотидов, показанной в Таблице 1. В одном из вариантов осуществления, одна или несколько CDR (или коллективно все CDR) имеют один, два, три, четыре, пять, шесть или более изменений, например, замещений или делеций аминокислот, по сравнению с последовательностью аминокислот, показанной в Таблице 1, или она кодируется последовательностью нуклеотидов, показанной в Таблице 1.

Еще в одном варианте осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 содержит, по меньшей мере, одно, два или три CDR (или коллективно все CDR) из вариабельной области легкой цепи, содержащей последовательность аминокислот, показанную в Таблице 1 из патента США 2015/0259420, или она кодируется последовательностью нуклеотидов, показанной в Таблице 1. В одном из вариантов осуществления, одна или несколько CDR (или коллективно все CDR) имеют одно, два, три, четыре, пять, шесть или более изменений, например, замещений или делеций аминокислот, по сравнению с последовательностью аминокислот, показанной в Таблице 1, или она кодируется последовательностью нуклеотидов, показанной в Таблице 1. В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-PD-L1 содержит замещения в CDR легкой цепи, например, одно или несколько замещений в CDR1, CDR2 и/или CDR3 легкой цепи.

В другом варианте осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 содержит, по меньшей мере, одну, две, три, четыре, пять или шесть CDR (или коллективно все CDR) из вариабельных областей тяжелой и легкой цепи, содержащие последовательность аминокислот, показанную в Таблице 1, или она кодируется последовательностью нуклеотидов, показанной в Таблице 1 патента США 2015/0259420. В одном из вариантов осуществления, одна или несколько CDR (или коллективно все CDR) имеют одно, два, три, четыре, пять, шесть или более изменений, например, замещений или делеций аминокислот, по сравнению с последовательностью аминокислот, показанной в Таблице 1, или она кодируется последовательностью нуклеотидов, показанной в Таблице 1.

Другие иллюстративные молекулы антител анти-LAG-3

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 представляет собой BMS-986016 (Bristol-Myers Squibb), также известную как BMS986016. BMS-986016, и другие антитела анти-LAG-3 описаны в WO 2015/116539 и в патенте США 9,505,839, включенных в качестве ссылок во всей своей полноте. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или коллективно, все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи, или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи BMS-986016, например, как описано в Таблице 6.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 представляет собой TSR-033 (Tesaro). В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или коллективно, все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи, или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи TSR-033.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 представляет собой IMP731 или GSK2831781 (GSK и Prima BioMed). IMP731 и другие антитела анти-LAG-3 описаны в WO 2008/132601 и в патенте США 9,244,059, включенных в качестве ссылок во всей своей полноте. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или коллективно, все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи, или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи IMP731, например, как описано в Таблице 6. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или коллективно, все последовательности CDR), последовательностей вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи или последовательностей тяжелой цепи или легкой цепи из GSK2831781.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 представляет собой IMP761 (Prima BioMed). В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или коллективно, все последовательности CDR), последовательностей вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи, или последовательностей тяжелой цепи или легкой цепи IMP761.

Другие известные анти-LAG-3 антитела включают антитела, описанные, например, в WO 2008/132601, WO 2010/019570, WO 2014/140180, WO 2015/116539, WO 2015/200119, WO 2016/028672, в патенте США 9244059, патенте США 9505839, включенных в качестве ссылок во всей своей полноте.

В одном из вариантов осуществления, антитело анти-LAG-3 представляет собой антитело, которое конкурирует за связывание и/или связывается с таким же эпитопом на LAG-3 как одно из антител анти-LAG-3, описанных в настоящем документе.

В одном из вариантов осуществления, ингибитор анти-LAG-3 представляет собой растворимый белок LAG-3, например, IMP321 (Prima BioMed), например, как описано в WO 2009/044273, включенной в качестве ссылки во всей соей полноте.

Таблица 6. Последовательности аминокислот других иллюстративных молекул антитела анти-LAG-3

BMS-986016 SEQ ID NO: 762 Тяжелая цепь QVQLQQWGAGLLKPSETLSLTCAVYGGSFSDYYWNWIRQPPGKGLEWIGEINHRGSTNSNPSLKSRVTLSLDTSKNQFSLKLRSVTAADTAVYYCAFGYSDYEYNWFDPWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK SEQ ID NO: 763 Легкая цепь EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSISSYLAWYQQKPGQAPRLLIYDASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSNWPLTFGQGTNLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC IMP731 SEQ ID NO: 764 Тяжелая цепь QVQLKESGPGLVAPSQSLSITCTVSGFSLTAYGVNWVRQPPGKGLEWLGMIWDDGSTDYNSALKSRLSISKDNSKSQVFLKMNSLQTDDTARYYCAREGDVAFDYWGQGTTLTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK SEQ ID NO: 765 Легкая цепь DIVMTQSPSSLAVSVGQKVTMSCKSSQSLLNGSNQKNYLAWYQQKPGQSPKLLVYFASTRDSGVPDRFIGSGSGTDFTLTISSVQAEDLADYFCLQHFGTPPTFGGGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC

Ингибиторы PD-1

В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3, описанная в настоящем документе, вводится в сочетании с ингибитором PD-1. В некоторых вариантах осуществления, ингибитор PD-1 выбирают из PDR001 или Спартализумаба (Novartis), Ниволумаба (Bristol-Myers Squibb), Пембролизумаба (Merck & Co), Пидилизумаба (CureTech), MEDI0680 (Medimmune), REGN2810 (Regeneron), TSR-042 (Tesaro), PF-06801591 (Pfizer), BGB-A317 (Beigene), BGB-108 (Beigene), INCSHR1210 (Incyte) или AMP-224 (Amplimmune).

Иллюстративные ингибиторы PD-1

В одном из вариантов осуществления, ингибитор PD-1 представляет собой молекулу антитела анти-PD-1. В одном из вариантов осуществления, ингибитор PD-1 представляет собой молекулу антитела анти-PD-1, как описано в патенте США 2015/0210769, опубликованном 30 июля 2015 года, озаглавленном “Antibody Molecules to PD-1 and Uses Thereof”, включенном в качестве ссылки во всей своей полноте.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-PD-1 содержит, по меньшей мере, одну, две, три, четыре, пять или шесть областей, определяющих комплементарность (CDR) (или коллективно все CDR), из вариабельных областей тяжелой и легкой цепи, содержащих последовательность аминокислот, показанную в Таблице 1 (например, из последовательностей вариабельных областей тяжелой и легкой цепи BAP049-Clone-E или BAP049-Clone-B, описанных в Таблице 1), или она кодируется последовательностью нуклеотидов, показанной в Таблице 1. В некоторых вариантах осуществления, CDR соответствуют определению Kabat (например, как приведено в Таблице 1). В некоторых вариантах осуществления, CDR соответствуют определению Chothia (например, как приведено в Таблице 1). В некоторых вариантах осуществления, CDR соответствуют объединенным определениям CDR как Kabat, так и Chothia (например, как приведено в Таблице 1). В одном из вариантов осуществления, сочетание определений CDR согласно Kabat и Chothia VH CDR1 содержит последовательность аминокислот GYTFTTYWMH (SEQ ID NO: 541). В одном из вариантов осуществления, одна или несколько CDR (или коллективно все CDR) имеют одно, два, три, четыре, пять, шесть или более изменений, например, замещений аминокислот (например, консервативных замещений аминокислот) или делеций, по сравнению с последовательностью аминокислот, показанной в Таблице 1, или она кодируется последовательностью нуклеотидов, показанной в Таблице 1.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-PD-1 содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую последовательность аминокислот VHCDR1 SEQ ID NO: 501, последовательность аминокислот VHCDR2 SEQ ID NO: 502 и последовательность аминокислот VHCDR3 SEQ ID NO: 503; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую последовательность аминокислот VLCDR1 SEQ ID NO: 510, последовательность аминокислот VLCDR2 SEQ ID NO: 511 и последовательность аминокислот VLCDR3 SEQ ID NO: 512, каждая из них описана в Таблице 1.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит VH, содержащую VHCDR1, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 524, VHCDR2, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 525 и VHCDR3, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 526; и VL, содержащую VLCDR1, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 529, VLCDR2, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 530 и VLCDR3, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 531, каждая из них описана в Таблице 1.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-PD-1 содержит VH, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 506, или последовательность аминокислот, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичную SEQ ID NO: 506. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-PD-1 содержит VL, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 520, или последовательность аминокислот, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичную SEQ ID NO: 520. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-PD-1 содержит VL, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 516 или последовательность аминокислот, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичную SEQ ID NO: 516. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-PD-1 содержит VH, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 506 и VL, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 520. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-PD-1 содержит VH, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 506, и VL, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 516.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит VH, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 507, или последовательностью нуклеотидов, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичной SEQ ID NO: 507. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит VL, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 521 или 517 или последовательностью нуклеотидов, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичную SEQ ID NO: 521 или 517. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит VH, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 507 и VL, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 521 или 517.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-PD-1 содержит тяжелую цепь, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 508 или последовательность аминокислот, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичную SEQ ID NO: 508. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-PD-1 содержит легкую цепь, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 522 или последовательность аминокислот, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичную SEQ ID NO: 522. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-PD-1 содержит легкую цепь, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 518 или последовательность аминокислот, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичную SEQ ID NO: 518. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-PD-1 содержит тяжелую цепь, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 508, и легкую цепь, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 522. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-PD-1 содержит тяжелую цепь, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 508, и легкую цепь, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 518.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит тяжелую цепь, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 509 или последовательностью нуклеотидов, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичной SEQ ID NO: 509. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит легкую цепь, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 523 или 519 или последовательностью нуклеотидов, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичной SEQ ID NO: 523 или 519. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит тяжелую цепь, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 509, и легкую цепь, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 523 или 519.

Молекулы антител, описанные в настоящем документе, могут быть получены с помощью векторов, клеток хозяев и способов, описанных в патенте США 2015/0210769, включенном в качестве ссылки во всей своей полноте.

Таблица 1. Последовательности аминокислот и нуклеотидов иллюстративных молекул антитела анти-PD-1

BAP049-Clone-B HC SEQ ID NO: 501 (Kabat) HCDR1 TYWMH SEQ ID NO: 502 (Kabat) HCDR2 NIYPGTGGSNFDEKFKN SEQ ID NO: 503 (Kabat) HCDR3 WTTGTGAY SEQ ID NO: 504 (Chothia) HCDR1 GYTFTTY SEQ ID NO: 505 (Chothia) HCDR2 YPGTGG SEQ ID NO: 503 (Chothia) HCDR3 WTTGTGAY SEQ ID NO: 506 VH EVQLVQSGAEVKKPGESLRISCKGSGYTFTTYWMHWVRQATGQGLEWMGNIYPGTGGSNFDEKFKNRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCTRWTTGTGAYWGQGTTVTVSS SEQ ID NO: 507 ДНК VH Gaggtgcagctggtgcagtcaggcgccgaagtgaagaagcccggcgagtcactgagaattagctgtaaaggttcaggctacaccttcactacctactggatgcactgggtccgccaggctaccggtcaaggcctcgagtggatgggtaatatctaccccggcaccggcggctctaacttcgacgagaagtttaagaatagagtgactatcaccgccgataagtctactagcaccgcctatatggaactgtctagcctgagatcagaggacaccgccgtctactactgcactaggtggactaccggcacaggcgcctactggggtcaaggcactaccgtgaccgtgtctagc SEQ ID NO: 508 Тяжелая цепь EVQLVQSGAEVKKPGESLRISCKGSGYTFTTYWMHWVRQATGQGLEWMGNIYPGTGGSNFDEKFKNRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCTRWTTGTGAYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLG SEQ ID NO: 509 Тяжелая цепь ДНК gaggtgcagctggtgcagtcaggcgccgaagtgaagaagcccggcgagtcactgagaattagctgtaaaggttcaggctacaccttcactacctactggatgcactgggtccgccaggctaccggtcaaggcctcgagtggatgggtaatatctaccccggcaccggcggctctaacttcgacgagaagtttaagaatagagtgactatcaccgccgataagtctactagcaccgcctatatggaactgtctagcctgagatcagaggacaccgccgtctactactgcactaggtggactaccggcacaggcgcctactggggtcaaggcactaccgtgaccgtgtctagcgctagcactaagggcccgtccgtgttccccctggcaccttgtagccggagcactagcgaatccaccgctgccctcggctgcctggtcaaggattacttcccggagcccgtgaccgtgtcctggaacagcggagccctgacctccggagtgcacaccttccccgctgtgctgcagagctccgggctgtactcgctgtcgtcggtggtcacggtgccttcatctagcctgggtaccaagacctacacttgcaacgtggaccacaagccttccaacactaaggtggacaagcgcgtcgaatcgaagtacggcccaccgtgcccgccttgtcccgcgccggagttcctcggcggtccctcggtctttctgttcccaccgaagcccaaggacactttgatgatttcccgcacccctgaagtgacatgcgtggtcgtggacgtgtcacaggaagatccggaggtgcagttcaattggtacgtggatggcgtcgaggtgcacaacgccaaaaccaagccgagggaggagcagttcaactccacttaccgcgtcgtgtccgtgctgacggtgctgcatcaggactggctgaacgggaaggagtacaagtgcaaagtgtccaacaagggacttcctagctcaatcgaaaagaccatctcgaaagccaagggacagccccgggaaccccaagtgtataccctgccaccgagccaggaagaaatgactaagaaccaagtctcattgacttgccttgtgaagggcttctacccatcggatatcgccgtggaatgggagtccaacggccagccggaaaacaactacaagaccacccctccggtgctggactcagacggatccttcttcctctactcgcggctgaccgtggataagagcagatggcaggagggaaatgtgttcagctgttctgtgatgcatgaagccctgcacaaccactacactcagaagtccctgtccctctccctggga BAP049-Clone-B LC SEQ ID NO: 510 (Kabat) LCDR1 KSSQSLLDSGNQKNFLT SEQ ID NO: 511 (Kabat) LCDR2 WASTRES SEQ ID NO: 512 (Kabat) LCDR3 QNDYSYPYT SEQ ID NO: 513 (Chothia) LCDR1 SQSLLDSGNQKNF SEQ ID NO: 514 (Chothia) LCDR2 WAS SEQ ID NO: 515 (Chothia) LCDR3 DYSYPY SEQ ID NO: 516 VL EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCKSSQSLLDSGNQKNFLTWYQQKPGKAPKLLIYWASTRESGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQNDYSYPYTFGQGTKVEIK SEQ ID NO: 517 ДНК VL Gagatcgtcctgactcagtcacccgctaccctgagcctgagccctggcgagcgggctacactgagctgtaaatctagtcagtcactgctggatagcggtaatcagaagaacttcctgacctggtatcagcagaagcccggtaaagcccctaagctgctgatctactgggcctctactagagaatcaggcgtgccctctaggtttagcggtagcggtagtggcaccgacttcaccttcactatctctagcctgcagcccgaggatatcgctacctactactgtcagaacgactatagctacccctacaccttcggtcaaggcactaaggtcgagattaag SEQ ID NO: 518 Легкая цепь EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCKSSQSLLDSGNQKNFLTWYQQKPGKAPKLLIYWASTRESGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQNDYSYPYTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC SEQ ID NO: 519 Легкая цепь ДНК Gagatcgtcctgactcagtcacccgctaccctgagcctgagccctggcgagcgggctacactgagctgtaaatctagtcagtcactgctggatagcggtaatcagaagaacttcctgacctggtatcagcagaagcccggtaaagcccctaagctgctgatctactgggcctctactagagaatcaggcgtgccctctaggtttagcggtagcggtagtggcaccgacttcaccttcactatctctagcctgcagcccgaggatatcgctacctactactgtcagaacgactatagctacccctacaccttcggtcaaggcactaaggtcgagattaagcgtacggtggccgctcccagcgtgttcatcttcccccccagcgacgagcagctgaagagcggcaccgccagcgtggtgtgcctgctgaacaacttctacccccgggaggccaaggtgcagtggaaggtggacaacgccctgcagagcggcaacagccaggagagcgtcaccgagcaggacagcaaggactccacctacagcctgagcagcaccctgaccctgagcaaggccgactacgagaagcataaggtgtacgcctgcgaggtgacccaccagggcctgtccagccccgtgaccaagagcttcaacaggggcgagtgc BAP049-Clone-E HC SEQ ID NO: 501 (Kabat) HCDR1 TYWMH SEQ ID NO: 502 (Kabat) HCDR2 NIYPGTGGSNFDEKFKN SEQ ID NO: 503 (Kabat) HCDR3 WTTGTGAY SEQ ID NO: 504 (Chothia) HCDR1 GYTFTTY SEQ ID NO: 505 (Chothia) HCDR2 YPGTGG SEQ ID NO: 503 (Chothia) HCDR3 WTTGTGAY SEQ ID NO: 506 VH EVQLVQSGAEVKKPGESLRISCKGSGYTFTTYWMHWVRQATGQGLEWMGNIYPGTGGSNFDEKFKNRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCTRWTTGTGAYWGQGTTVTVSS SEQ ID NO: 507 ДНК VH Gaggtgcagctggtgcagtcaggcgccgaagtgaagaagcccggcgagtcactgagaattagctgtaaaggttcaggctacaccttcactacctactggatgcactgggtccgccaggctaccggtcaaggcctcgagtggatgggtaatatctaccccggcaccggcggctctaacttcgacgagaagtttaagaatagagtgactatcaccgccgataagtctactagcaccgcctatatggaactgtctagcctgagatcagaggacaccgccgtctactactgcactaggtggactaccggcacaggcgcctactggggtcaaggcactaccgtgaccgtgtctagc SEQ ID NO: 508 Тяжелая цепь EVQLVQSGAEVKKPGESLRISCKGSGYTFTTYWMHWVRQATGQGLEWMGNIYPGTGGSNFDEKFKNRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCTRWTTGTGAYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLG SEQ ID NO: 509 Тяжелая цепь ДНК gaggtgcagctggtgcagtcaggcgccgaagtgaagaagcccggcgagtcactgagaattagctgtaaaggttcaggctacaccttcactacctactggatgcactgggtccgccaggctaccggtcaaggcctcgagtggatgggtaatatctaccccggcaccggcggctctaacttcgacgagaagtttaagaatagagtgactatcaccgccgataagtctactagcaccgcctatatggaactgtctagcctgagatcagaggacaccgccgtctactactgcactaggtggactaccggcacaggcgcctactggggtcaaggcactaccgtgaccgtgtctagcgctagcactaagggcccgtccgtgttccccctggcaccttgtagccggagcactagcgaatccaccgctgccctcggctgcctggtcaaggattacttcccggagcccgtgaccgtgtcctggaacagcggagccctgacctccggagtgcacaccttccccgctgtgctgcagagctccgggctgtactcgctgtcgtcggtggtcacggtgccttcatctagcctgggtaccaagacctacacttgcaacgtggaccacaagccttccaacactaaggtggacaagcgcgtcgaatcgaagtacggcccaccgtgcccgccttgtcccgcgccggagttcctcggcggtccctcggtctttctgttcccaccgaagcccaaggacactttgatgatttcccgcacccctgaagtgacatgcgtggtcgtggacgtgtcacaggaagatccggaggtgcagttcaattggtacgtggatggcgtcgaggtgcacaacgccaaaaccaagccgagggaggagcagttcaactccacttaccgcgtcgtgtccgtgctgacggtgctgcatcaggactggctgaacgggaaggagtacaagtgcaaagtgtccaacaagggacttcctagctcaatcgaaaagaccatctcgaaagccaagggacagccccgggaaccccaagtgtataccctgccaccgagccaggaagaaatgactaagaaccaagtctcattgacttgccttgtgaagggcttctacccatcggatatcgccgtggaatgggagtccaacggccagccggaaaacaactacaagaccacccctccggtgctggactcagacggatccttcttcctctactcgcggctgaccgtggataagagcagatggcaggagggaaatgtgttcagctgttctgtgatgcatgaagccctgcacaaccactacactcagaagtccctgtccctctccctggga BAP049-Clone-E LC SEQ ID NO: 510 (Kabat) LCDR1 KSSQSLLDSGNQKNFLT SEQ ID NO: 511 (Kabat) LCDR2 WASTRES SEQ ID NO: 512 (Kabat) LCDR3 QNDYSYPYT SEQ ID NO: 513 (Chothia) LCDR1 SQSLLDSGNQKNF SEQ ID NO: 514 (Chothia) LCDR2 WAS SEQ ID NO: 515 (Chothia) LCDR3 DYSYPY SEQ ID NO: 520 VL EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCKSSQSLLDSGNQKNFLTWYQQKPGQAPRLLIYWASTRESGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLEAEDAATYYCQNDYSYPYTFGQGTKVEIK SEQ ID NO: 521 ДНК VL Gagatcgtcctgactcagtcacccgctaccctgagcctgagccctggcgagcgggctacactgagctgtaaatctagtcagtcactgctggatagcggtaatcagaagaacttcctgacctggtatcagcagaagcccggtcaagcccctagactgctgatctactgggcctctactagagaatcaggcgtgccctctaggtttagcggtagcggtagtggcaccgacttcaccttcactatctctagcctggaagccgaggacgccgctacctactactgtcagaacgactatagctacccctacaccttcggtcaaggcactaaggtcgagattaag SEQ ID NO: 522 Легкая цепь EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCKSSQSLLDSGNQKNFLTWYQQKPGQAPRLLIYWASTRESGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLEAEDAATYYCQNDYSYPYTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC SEQ ID NO: 523 Легкая цепь ДНК Gagatcgtcctgactcagtcacccgctaccctgagcctgagccctggcgagcgggctacactgagctgtaaatctagtcagtcactgctggatagcggtaatcagaagaacttcctgacctggtatcagcagaagcccggtcaagcccctagactgctgatctactgggcctctactagagaatcaggcgtgccctctaggtttagcggtagcggtagtggcaccgacttcaccttcactatctctagcctggaagccgaggacgccgctacctactactgtcagaacgactatagctacccctacaccttcggtcaaggcactaaggtcgagattaagcgtacggtggccgctcccagcgtgttcatcttcccccccagcgacgagcagctgaagagcggcaccgccagcgtggtgtgcctgctgaacaacttctacccccgggaggccaaggtgcagtggaaggtggacaacgccctgcagagcggcaacagccaggagagcgtcaccgagcaggacagcaaggactccacctacagcctgagcagcaccctgaccctgagcaaggccgactacgagaagcataaggtgtacgcctgcgaggtgacccaccagggcctgtccagccccgtgaccaagagcttcaacaggggcgagtgc BAP049-Clone-B HC SEQ ID NO: 524 (Kabat) HCDR1 ACCTACTGGATGCAC SEQ ID NO: 525 (Kabat) HCDR2 AATATCTACCCCGGCACCGGCGGCTCTAACTTCGACGAGAAGTTTAAGAAT SEQ ID NO: 526 (Kabat) HCDR3 TGGACTACCGGCACAGGCGCCTAC SEQ ID NO: 527 (Chothia) HCDR1 GGCTACACCTTCACTACCTAC SEQ ID NO: 528 (Chothia) HCDR2 TACCCCGGCACCGGCGGC SEQ ID NO: 526 (Chothia) HCDR3 TGGACTACCGGCACAGGCGCCTAC BAP049-Clone-B LC SEQ ID NO: 529 (Kabat) LCDR1 AAATCTAGTCAGTCACTGCTGGATAGCGGTAATCAGAAGAACTTCCTGACC SEQ ID NO: 530 (Kabat) LCDR2 TGGGCCTCTACTAGAGAATCA SEQ ID NO: 531 (Kabat) LCDR3 CAGAACGACTATAGCTACCCCTACACC SEQ ID NO: 532 (Chothia) LCDR1 AGTCAGTCACTGCTGGATAGCGGTAATCAGAAGAACTTC SEQ ID NO: 533 (Chothia) LCDR2 TGGGCCTCT SEQ ID NO: 534 (Chothia) LCDR3 GACTATAGCTACCCCTAC BAP049-Clone-E HC SEQ ID NO: 524 (Kabat) HCDR1 ACCTACTGGATGCAC SEQ ID NO: 525 (Kabat) HCDR2 AATATCTACCCCGGCACCGGCGGCTCTAACTTCGACGAGAAGTTTAAGAAT SEQ ID NO: 526 (Kabat) HCDR3 TGGACTACCGGCACAGGCGCCTAC SEQ ID NO: 527 (Chothia) HCDR1 GGCTACACCTTCACTACCTAC SEQ ID NO: 528 (Chothia) HCDR2 TACCCCGGCACCGGCGGC SEQ ID NO: 526 (Chothia) HCDR3 TGGACTACCGGCACAGGCGCCTAC BAP049-Clone-E LC SEQ ID NO: 529 (Kabat) LCDR1 AAATCTAGTCAGTCACTGCTGGATAGCGGTAATCAGAAGAACTTCCTGACC SEQ ID NO: 530 (Kabat) LCDR2 TGGGCCTCTACTAGAGAATCA SEQ ID NO: 531 (Kabat) LCDR3 CAGAACGACTATAGCTACCCCTACACC SEQ ID NO: 532 (Chothia) LCDR1 AGTCAGTCACTGCTGGATAGCGGTAATCAGAAGAACTTC SEQ ID NO: 533 (Chothia) LCDR2 TGGGCCTCT SEQ ID NO: 534 (Chothia) LCDR3 GACTATAGCTACCCCTAC

Другие иллюстративные ингибиторы PD-1

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-PD-1 представляет собой Ниволумаб (Bristol-Myers Squibb), также известный как MDX-1106, MDX-1106-04, ONO-4538, BMS-936558 или OPDIVO®. Ниволумаб (Clone 5C4) и другие антитела анти-PD-1 описаны в патенте США 8008449 и WO 2006/121168, включенных в качестве ссылок во всей своей полноте. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-PD-1 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или коллективно, все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи, или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи Ниволумаба, например, как описано в Таблице 2.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-PD-1 представляет собой Пембролизумаб (Merck & Co), также известный как Ламбролизумаб, MK-3475, MK03475, SCH-900475 или KEYTRUDA®. Пембролизумаб и другие антитела анти-PD-1 описаны в Hamid, O. et al. (2013) New England Journal of Medicine 369 (2): 134-44, в патенте США 8354509 и WO 2009/114335, включенных в качестве ссылок во всей своей полноте. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-PD-1 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или коллективно, все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи, или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи Пембролизумаба, например, как описано в Таблице 2.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-PD-1 представляет собой Пидилизумаб (CureTech), также известный как CT-011. Пидилизумаб, и другие антитела анти-PD-1 описаны в Rosenblatt, J. et al. (2011) J Immunotherapy 34(5): 409-18, в патенте США 7695715, патенте США 7332582 и патенте США 8686119, включенных в качестве ссылок во всей своей полноте. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-PD-1 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или коллективно, все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи, или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи Пидилизумаба, например, как описано в Таблице 2.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-PD-1 представляет собой MEDI0680 (Medimmune), известный также как AMP-514. MEDI0680, и другие антитела анти-PD-1 описаны в патенте США 9205148 и WO 2012/145493, включенных в качестве ссылок во всей своей полноте. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-PD-1 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или коллективно, все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи, или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи MEDI0680.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-PD-1 представляет собой REGN2810 (Regeneron). В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-PD-1 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или коллективно, все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи, или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи REGN2810.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-PD-1 представляет собой PF-06801591 (Pfizer). В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-PD-1 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или коллективно, все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи, или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи PF-06801591.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-PD-1 представляет собой BGB-A317 или BGB-108 (Beigene). В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-PD-1 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или коллективно, все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи, или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи BGB-A317 или BGB-108.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-PD-1 представляет собой INCSHR1210 (Incyte), также известный как INCSHR01210 или SHR-1210. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-PD-1 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или коллективно, все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи, или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи INCSHR1210.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-PD-1 представляет собой TSR-042 (Tesaro), также известный как ANB011. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-PD-1 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или коллективно, все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи, или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи TSR-042.

Другие известные антитела анти-PD-1 включают молекулы, описанные, например, в WO 2015/112800, WO 2016/092419, WO 2015/085847, WO 2014/179664, WO 2014/194302, WO 2014/209804, WO 2015/200119, в патенте США 8735553, патенте США 7488802, патенте США 8927697, патенте США 8993731 и патенте США 9102727, включенных в качестве ссылок во всей своей полноте.

В одном из вариантов осуществления, антитело анти-PD-1 представляет собой антитело, которое конкурирует за связывание и/или связывается с таким же эпитопом на PD-1, как и одно из антител анти-PD-1, описанных в настоящем документе.

В одном из вариантов осуществления, ингибитор PD-1 представляет собой пептид, который замедляет путь передачи сигнала PD-1, например, как описано в патенте США 8907053, включенном в качестве ссылки во всей своей полноте. В одном из вариантов осуществления, ингибитор PD-1 представляет собой иммуноадгезин (например, иммуноадгезин, содержащий внеклеточную часть или часть связывания PD-1 от PD-L1 или PD-L2, слитую с константной областью (например, Fc-областью последовательности иммуноглобулина). В одном из вариантов осуществления, ингибитор PD-1 представляет собой AMP-224 (B7-DCIg (Amplimmune), например, описанный в WO 2010/027827 и WO 2011/066342, включенных в качестве ссылок во всей своей полноте).

Таблица 2. Последовательности аминокислот других иллюстративных молекул антитела анти-PD-1

Ниволумаб SEQ ID NO: 535 Тяжелая цепь QVQLVESGGGVVQPGRSLRLDCKASGITFSNSGMHWVRQAPGKGLEWVAVIWYDGSKRYYADSVKGRFTISRDNSKNTLFLQMNSLRAEDTAVYYCATNDDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK SEQ ID NO: 536 Легкая цепь EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVSSYLAWYQQKPGQAPRLLIYDASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQSSNWPRTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC Пембролизумаб SEQ ID NO: 537 Тяжелая цепь QVQLVQSGVEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYYMYWVRQAPGQGLEWMGGINPSNGGTNFNEKFKNRVTLTTDSSTTTAYMELKSLQFDDTAVYYCARRDYRFDMGFDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK SEQ ID NO: 538 Легкая цепь EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASKGVSTSGYSYLHWYQQKPGQAPRLLIYLASYLESGVPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQHSRDLPLTFGGGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC Пидилизумаб SEQ ID NO: 539 Тяжелая цепь QVQLVQSGSELKKPGASVKISCKASGYTFTNYGMNWVRQAPGQGLQWMGWINTDSGESTYAEEFKGRFVFSLDTSVNTAYLQITSLTAEDTGMYFCVRVGYDALDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK SEQ ID NO: 540 Легкая цепь EIVLTQSPSSLSASVGDRVTITCSARSSVSYMHWFQQKPGKAPKLWIYRTSNLASGVPSRFSGSGSGTSYCLTINSLQPEDFATYYCQQRSSFPLTFGGGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC

Ингибиторы PD-L1

В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3, описанная в настоящем документе, вводится в сочетании с ингибитором PD-L1. В некоторых вариантах осуществления, ингибитор PD-L1 выбирается из FAZ053 (Novartis), Атезолизумаба (Genentech/Roche), Авелумаба (Merck Serono и Pfizer), Дурвалумаба (MedImmune/AstraZeneca) или BMS-936559 (Bristol-Myers Squibb).

Иллюстративные ингибиторы PD-L1

В одном из вариантов осуществления, ингибитор PD-L1 представляет собой молекулу антитела анти-PD-L1. В одном из вариантов осуществления, ингибитор PD-L1 представляет собой молекулу антитела анти-PD-L1, как описано в патенте США 2016/0108123, опубликованном на 21 апреля 2016 года, озаглавленном “Antibody Molecules to PD-L1 and Uses Thereof”, включенном в качестве ссылки во всей своей полноте.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-PD-L1 содержит, по меньшей мере, одну, две, три, четыре, пять или шесть областей, определяющих комплементарность (CDR) (или коллективно все CDR), из вариабельной области тяжелой и легкой цепи, содержащей последовательность аминокислот, показанную в Таблице 3 (например, из последовательности вариабельной области тяжелой и легкой цепи BAP058-Clone O или BAP058-Clone N, описанной в Таблице 3), или кодируется последовательностью нуклеотидов, показанной в Таблице 3. В некоторых вариантах осуществления, CDR соответствуют определению Kabat (например, как приведено в Таблице 3). В некоторых вариантах осуществления, CDR соответствуют определению Chothia (например, как приведено в Таблице 3). В некоторых вариантах осуществления, CDR соответствуют объединенным определениям CDR, как Kabat, так и Chothia (например, как приведено в Таблице 3). В одном из вариантов осуществления, сочетание определений CDR согласно Kabat и Chothia VH CDR1 содержит последовательность аминокислот GYTFTSYWMY (SEQ ID NO: 647). В одном из вариантов осуществления, одна или несколько CDR (или коллективно все CDR) имеют одно, два, три, четыре, пять, шесть или более изменений, например, замещений аминокислот (например, консервативных замещений аминокислот) или делеций, по сравнению с последовательностью аминокислот, показанной в Таблице 3, или они кодируются последовательностью нуклеотидов, показанной в Таблице 3.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-PD-L1 содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую последовательность аминокислот VHCDR1 SEQ ID NO: 601, последовательность аминокислот VHCDR2 SEQ ID NO: 602, и последовательность аминокислот VHCDR3 SEQ ID NO: 603; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую последовательность аминокислот VLCDR1 SEQ ID NO: 609, последовательность аминокислот VLCDR2 SEQ ID NO: 610 и последовательность аминокислот VLCDR3 SEQ ID NO: 611, каждая из них описана в Таблице 3.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-PD-L1 содержит VH, содержащую VHCDR1, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 628, VHCDR2, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 629, и VHCDR3, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 630; и VL, содержащую VLCDR1, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 633, VLCDR2, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 634, и VLCDR3, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 635, каждая из них описана в Таблице 3.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-PD-L1 содержит VH, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 606 или последовательность аминокислот, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичную SEQ ID NO: 606. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-PD-L1 содержит VL, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 616 или последовательность аминокислот, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичную SEQ ID NO: 616. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-PD-L1 содержит VH, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 620 или последовательность аминокислот, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичную SEQ ID NO: 620, В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-PD-L1 содержит VL, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 624 или последовательность аминокислот, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичную SEQ ID NO: 624. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-PD-L1 содержит VH, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 606 и VL, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 616. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-PD-L1 содержит VH, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 620 и VL, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 624.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит VH, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 607, или последовательность нуклеотидов, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичную SEQ ID NO: 607. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит VL, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 617, или последовательность нуклеотидов, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичную SEQ ID NO: 617. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит VH, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 621, или последовательность нуклеотидов, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичную SEQ ID NO: 621. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит VL, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 625, или последовательность нуклеотидов, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичную SEQ ID NO: 625. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит VH, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 607 и VL, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 617. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит VH, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 621 и VL, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 625.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-PD-L1 содержит тяжелую цепь, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 608 или последовательность аминокислот, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичную SEQ ID NO: 608. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-PD-L1 содержит легкую цепь, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 618 или последовательность аминокислот, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичную SEQ ID NO: 618. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-PD-L1 содержит тяжелую цепь, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 622 или последовательность аминокислот, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичную SEQ ID NO: 622. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-PD-L1 содержит легкую цепь, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 626 или последовательность аминокислот, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичную SEQ ID NO: 626. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-PD-L1 содержит тяжелую цепь, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 608, и легкую цепь, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 618. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-PD-L1 содержит тяжелую цепь, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 622, и легкую цепь, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 626.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит тяжелую цепь, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 615 или последовательностью нуклеотидов, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичной SEQ ID NO: 615. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит легкую цепь, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 619 или последовательностью нуклеотидов, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичной SEQ ID NO: 619. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит тяжелую цепь, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 623 или последовательностью нуклеотидов, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичной SEQ ID NO: 623. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит легкую цепь, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 627 или последовательностью нуклеотидов, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичной SEQ ID NO: 627. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит тяжелую цепь, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 615, и легкую цепь, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 619. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит тяжелую цепь, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 623, и легкую цепь, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 627.

Молекулы антител, описанные в настоящем документе, могут быть получены с помощью векторов, клеток хозяев и способов, описанных в патенте США 2016/0108123, включенном в качестве ссылки во всей своей полноте.

Таблица 3. Последовательности аминокислот и нуклеотидов иллюстративных молекул антитела анти-PD-L1

BAP058-Clone O HC SEQ ID NO: 601 (Kabat) HCDR1 SYWMY SEQ ID NO: 602 (Kabat) HCDR2 RIDPNSGSTKYNEKFKN SEQ ID NO: 603 (Kabat) HCDR3 DYRKGLYAMDY SEQ ID NO: 604 (Chothia) HCDR1 GYTFTSY SEQ ID NO: 605 (Chothia) HCDR2 DPNSGS SEQ ID NO: 603 (Chothia) HCDR3 DYRKGLYAMDY SEQ ID NO: 606 VH EVQLVQSGAEVKKPGATVKISCKVSGYTFTSYWMYWVRQARGQRLEWIGRIDPNSGSTKYNEKFKNRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWGQGTTVTVSS SEQ ID NO: 607 ДНК VH GAAGTGCAGCTGGTGCAGTCAGGCGCCGAAGTGAAGAAACCCGGCGCTACCGTGAAGATTAGCTGTAAAGTCTCAGGCTACACCTTCACTAGCTACTGGATGTACTGGGTCCGACAGGCTAGAGGGCAAAGACTGGAGTGGATCGGTAGAATCGACCCTAATAGCGGCTCTACTAAGTATAACGAGAAGTTTAAGAATAGGTTCACTATTAGTAGGGATAACTCTAAGAACACCCTGTACCTGCAGATGAATAGCCTGAGAGCCGAGGACACCGCCGTCTACTACTGCGCTAGAGACTATAGAAAGGGCCTGTACGCTATGGACTACTGGGGTCAAGGCACTACCGTGACCGTGTCTTCA SEQ ID NO: 608 Тяжелая цепь EVQLVQSGAEVKKPGATVKISCKVSGYTFTSYWMYWVRQARGQRLEWIGRIDPNSGSTKYNEKFKNRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLG SEQ ID NO: 615 Тяжелая цепь ДНК GAAGTGCAGCTGGTGCAGTCAGGCGCCGAAGTGAAGAAACCCGGCGCTACCGTGAAGATTAGCTGTAAAGTCTCAGGCTACACCTTCACTAGCTACTGGATGTACTGGGTCCGACAGGCTAGAGGGCAAAGACTGGAGTGGATCGGTAGAATCGACCCTAATAGCGGCTCTACTAAGTATAACGAGAAGTTTAAGAATAGGTTCACTATTAGTAGGGATAACTCTAAGAACACCCTGTACCTGCAGATGAATAGCCTGAGAGCCGAGGACACCGCCGTCTACTACTGCGCTAGAGACTATAGAAAGGGCCTGTACGCTATGGACTACTGGGGTCAAGGCACTACCGTGACCGTGTCTTCAGCTAGCACTAAGGGCCCGTCCGTGTTCCCCCTGGCACCTTGTAGCCGGAGCACTAGCGAATCCACCGCTGCCCTCGGCTGCCTGGTCAAGGATTACTTCCCGGAGCCCGTGACCGTGTCCTGGAACAGCGGAGCCCTGACCTCCGGAGTGCACACCTTCCCCGCTGTGCTGCAGAGCTCCGGGCTGTACTCGCTGTCGTCGGTGGTCACGGTGCCTTCATCTAGCCTGGGTACCAAGACCTACACTTGCAACGTGGACCACAAGCCTTCCAACACTAAGGTGGACAAGCGCGTCGAATCGAAGTACGGCCCACCGTGCCCGCCTTGTCCCGCGCCGGAGTTCCTCGGCGGTCCCTCGGTCTTTCTGTTCCCACCGAAGCCCAAGGACACTTTGATGATTTCCCGCACCCCTGAAGTGACATGCGTGGTCGTGGACGTGTCACAGGAAGATCCGGAGGTGCAGTTCAATTGGTACGTGGATGGCGTCGAGGTGCACAACGCCAAAACCAAGCCGAGGGAGGAGCAGTTCAACTCCACTTACCGCGTCGTGTCCGTGCTGACGGTGCTGCATCAGGACTGGCTGAACGGGAAGGAGTACAAGTGCAAAGTGTCCAACAAGGGACTTCCTAGCTCAATCGAAAAGACCATCTCGAAAGCCAAGGGACAGCCCCGGGAACCCCAAGTGTATACCCTGCCACCGAGCCAGGAAGAAATGACTAAGAACCAAGTCTCATTGACTTGCCTTGTGAAGGGCTTCTACCCATCGGATATCGCCGTGGAATGGGAGTCCAACGGCCAGCCGGAAAACAACTACAAGACCACCCCTCCGGTGCTGGACTCAGACGGATCCTTCTTCCTCTACTCGCGGCTGACCGTGGATAAGAGCAGATGGCAGGAGGGAAATGTGTTCAGCTGTTCTGTGATGCATGAAGCCCTGCACAACCACTACACTCAGAAGTCCCTGTCCCTCTCCCTGGGA BAP058-Clone O LC SEQ ID NO: 609 (Kabat) LCDR1 KASQDVGTAVA SEQ ID NO: 610 (Kabat) LCDR2 WASTRHT SEQ ID NO: 611(Kabat) LCDR3 QQYNSYPLT SEQ ID NO: 612 (Chothia) LCDR1 SQDVGTA SEQ ID NO: 613 (Chothia) LCDR2 WAS SEQ ID NO: 614 (Chothia) LCDR3 YNSYPL SEQ ID NO: 616 VL AIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCKASQDVGTAVAWYLQKPGQSPQLLIYWASTRHTGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLEAEDAATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIK SEQ ID NO: 617 ДНК VL GCTATTCAGCTGACTCAGTCACCTAGTAGCCTGAGCGCTAGTGTGGGCGATAGAGTGACTATCACCTGTAAAGCCTCTCAGGACGTGGGCACCGCCGTGGCCTGGTATCTGCAGAAGCCTGGTCAATCACCTCAGCTGCTGATCTACTGGGCCTCTACTAGACACACCGGCGTGCCCTCTAGGTTTAGCGGTAGCGGTAGTGGCACCGACTTCACCTTCACTATCTCTTCACTGGAAGCCGAGGACGCCGCTACCTACTACTGTCAGCAGTATAATAGCTACCCCCTGACCTTCGGTCAAGGCACTAAGGTCGAGATTAAG SEQ ID NO: 618 Легкая цепь AIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCKASQDVGTAVAWYLQKPGQSPQLLIYWASTRHTGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLEAEDAATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC SEQ ID NO: 619 Легкая цепь ДНК GCTATTCAGCTGACTCAGTCACCTAGTAGCCTGAGCGCTAGTGTGGGCGATAGAGTGACTATCACCTGTAAAGCCTCTCAGGACGTGGGCACCGCCGTGGCCTGGTATCTGCAGAAGCCTGGTCAATCACCTCAGCTGCTGATCTACTGGGCCTCTACTAGACACACCGGCGTGCCCTCTAGGTTTAGCGGTAGCGGTAGTGGCACCGACTTCACCTTCACTATCTCTTCACTGGAAGCCGAGGACGCCGCTACCTACTACTGTCAGCAGTATAATAGCTACCCCCTGACCTTCGGTCAAGGCACTAAGGTCGAGATTAAGCGTACGGTGGCCGCTCCCAGCGTGTTCATCTTCCCCCCCAGCGACGAGCAGCTGAAGAGCGGCACCGCCAGCGTGGTGTGCCTGCTGAACAACTTCTACCCCCGGGAGGCCAAGGTGCAGTGGAAGGTGGACAACGCCCTGCAGAGCGGCAACAGCCAGGAGAGCGTCACCGAGCAGGACAGCAAGGACTCCACCTACAGCCTGAGCAGCACCCTGACCCTGAGCAAGGCCGACTACGAGAAGCATAAGGTGTACGCCTGCGAGGTGACCCACCAGGGCCTGTCCAGCCCCGTGACCAAGAGCTTCAACAGGGGCGAGTGC BAP058-Clone N HC SEQ ID NO: 601 (Kabat) HCDR1 SYWMY SEQ ID NO: 602 (Kabat) HCDR2 RIDPNSGSTKYNEKFKN SEQ ID NO: 603 (Kabat) HCDR3 DYRKGLYAMDY SEQ ID NO: 604 (Chothia) HCDR1 GYTFTSY SEQ ID NO: 605 (Chothia) HCDR2 DPNSGS SEQ ID NO: 603 (Chothia) HCDR3 DYRKGLYAMDY SEQ ID NO: 620 VH EVQLVQSGAEVKKPGATVKISCKVSGYTFTSYWMYWVRQATGQGLEWMGRIDPNSGSTKYNEKFKNRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWGQGTTVTVSS SEQ ID NO: 621 ДНК VH GAAGTGCAGCTGGTGCAGTCAGGCGCCGAAGTGAAGAAACCCGGCGCTACCGTGAAGATTAGCTGTAAAGTCTCAGGCTACACCTTCACTAGCTACTGGATGTACTGGGTCCGACAGGCTACCGGTCAAGGCCTGGAGTGGATGGGTAGAATCGACCCTAATAGCGGCTCTACTAAGTATAACGAGAAGTTTAAGAATAGAGTGACTATCACCGCCGATAAGTCTACTAGCACCGCCTATATGGAACTGTCTAGCCTGAGATCAGAGGACACCGCCGTCTACTACTGCGCTAGAGACTATAGAAAGGGCCTGTACGCTATGGACTACTGGGGTCAAGGCACTACCGTGACCGTGTCTTCA SEQ ID NO: 622 Тяжелая цепь EVQLVQSGAEVKKPGATVKISCKVSGYTFTSYWMYWVRQATGQGLEWMGRIDPNSGSTKYNEKFKNRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLG SEQ ID NO: 623 Тяжелая цепь ДНК GAAGTGCAGCTGGTGCAGTCAGGCGCCGAAGTGAAGAAACCCGGCGCTACCGTGAAGATTAGCTGTAAAGTCTCAGGCTACACCTTCACTAGCTACTGGATGTACTGGGTCCGACAGGCTACCGGTCAAGGCCTGGAGTGGATGGGTAGAATCGACCCTAATAGCGGCTCTACTAAGTATAACGAGAAGTTTAAGAATAGAGTGACTATCACCGCCGATAAGTCTACTAGCACCGCCTATATGGAACTGTCTAGCCTGAGATCAGAGGACACCGCCGTCTACTACTGCGCTAGAGACTATAGAAAGGGCCTGTACGCTATGGACTACTGGGGTCAAGGCACTACCGTGACCGTGTCTTCAGCTAGCACTAAGGGCCCGTCCGTGTTCCCCCTGGCACCTTGTAGCCGGAGCACTAGCGAATCCACCGCTGCCCTCGGCTGCCTGGTCAAGGATTACTTCCCGGAGCCCGTGACCGTGTCCTGGAACAGCGGAGCCCTGACCTCCGGAGTGCACACCTTCCCCGCTGTGCTGCAGAGCTCCGGGCTGTACTCGCTGTCGTCGGTGGTCACGGTGCCTTCATCTAGCCTGGGTACCAAGACCTACACTTGCAACGTGGACCACAAGCCTTCCAACACTAAGGTGGACAAGCGCGTCGAATCGAAGTACGGCCCACCGTGCCCGCCTTGTCCCGCGCCGGAGTTCCTCGGCGGTCCCTCGGTCTTTCTGTTCCCACCGAAGCCCAAGGACACTTTGATGATTTCCCGCACCCCTGAAGTGACATGCGTGGTCGTGGACGTGTCACAGGAAGATCCGGAGGTGCAGTTCAATTGGTACGTGGATGGCGTCGAGGTGCACAACGCCAAAACCAAGCCGAGGGAGGAGCAGTTCAACTCCACTTACCGCGTCGTGTCCGTGCTGACGGTGCTGCATCAGGACTGGCTGAACGGGAAGGAGTACAAGTGCAAAGTGTCCAACAAGGGACTTCCTAGCTCAATCGAAAAGACCATCTCGAAAGCCAAGGGACAGCCCCGGGAACCCCAAGTGTATACCCTGCCACCGAGCCAGGAAGAAATGACTAAGAACCAAGTCTCATTGACTTGCCTTGTGAAGGGCTTCTACCCATCGGATATCGCCGTGGAATGGGAGTCCAACGGCCAGCCGGAAAACAACTACAAGACCACCCCTCCGGTGCTGGACTCAGACGGATCCTTCTTCCTCTACTCGCGGCTGACCGTGGATAAGAGCAGATGGCAGGAGGGAAATGTGTTCAGCTGTTCTGTGATGCATGAAGCCCTGCACAACCACTACACTCAGAAGTCCCTGTCCCTCTCCCTGGGA BAP058-Clone N LC SEQ ID NO: 609 (Kabat) LCDR1 KASQDVGTAVA SEQ ID NO: 610 (Kabat) LCDR2 WASTRHT SEQ ID NO: 611(Kabat) LCDR3 QQYNSYPLT SEQ ID NO: 612 (Chothia) LCDR1 SQDVGTA SEQ ID NO: 613 (Chothia) LCDR2 WAS SEQ ID NO: 614 (Chothia) LCDR3 YNSYPL SEQ ID NO: 624 VL DVVMTQSPLSLPVTLGQPASISCKASQDVGTAVAWYQQKPGQAPRLLIYWASTRHTGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIK SEQ ID NO: 625 ДНК VL GACGTCGTGATGACTCAGTCACCCCTGAGCCTGCCCGTGACCCTGGGGCAGCCCGCCTCTATTAGCTGTAAAGCCTCTCAGGACGTGGGCACCGCCGTGGCCTGGTATCAGCAGAAGCCAGGGCAAGCCCCTAGACTGCTGATCTACTGGGCCTCTACTAGACACACCGGCGTGCCCTCTAGGTTTAGCGGTAGCGGTAGTGGCACCGAGTTCACCCTGACTATCTCTTCACTGCAGCCCGACGACTTCGCTACCTACTACTGTCAGCAGTATAATAGCTACCCCCTGACCTTCGGTCAAGGCACTAAGGTCGAGATTAAG SEQ ID NO: 626 Легкая цепь DVVMTQSPLSLPVTLGQPASISCKASQDVGTAVAWYQQKPGQAPRLLIYWASTRHTGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC SEQ ID NO: 627 Легкая цепь ДНК GACGTCGTGATGACTCAGTCACCCCTGAGCCTGCCCGTGACCCTGGGGCAGCCCGCCTCTATTAGCTGTAAAGCCTCTCAGGACGTGGGCACCGCCGTGGCCTGGTATCAGCAGAAGCCAGGGCAAGCCCCTAGACTGCTGATCTACTGGGCCTCTACTAGACACACCGGCGTGCCCTCTAGGTTTAGCGGTAGCGGTAGTGGCACCGAGTTCACCCTGACTATCTCTTCACTGCAGCCCGACGACTTCGCTACCTACTACTGTCAGCAGTATAATAGCTACCCCCTGACCTTCGGTCAAGGCACTAAGGTCGAGATTAAGCGTACGGTGGCCGCTCCCAGCGTGTTCATCTTCCCCCCCAGCGACGAGCAGCTGAAGAGCGGCACCGCCAGCGTGGTGTGCCTGCTGAACAACTTCTACCCCCGGGAGGCCAAGGTGCAGTGGAAGGTGGACAACGCCCTGCAGAGCGGCAACAGCCAGGAGAGCGTCACCGAGCAGGACAGCAAGGACTCCACCTACAGCCTGAGCAGCACCCTGACCCTGAGCAAGGCCGACTACGAGAAGCATAAGGTGTACGCCTGCGAGGTGACCCACCAGGGCCTGTCCAGCCCCGTGACCAAGAGCTTCAACAGGGGCGAGTGC BAP058-Clone O HC SEQ ID NO: 628 (Kabat) HCDR1 AGCTACTGGATGTAC SEQ ID NO: 629 (Kabat) HCDR2 AGAATCGACCCTAATAGCGGCTCTACTAAGTATAACGAGAAGTTTAAGAAT SEQ ID NO: 630 (Kabat) HCDR3 GACTATAGAAAGGGCCTGTACGCTATGGACTAC SEQ ID NO: 631 (Chothia) HCDR1 GGCTACACCTTCACTAGCTAC SEQ ID NO: 632 (Chothia) HCDR2 GACCCTAATAGCGGCTCT SEQ ID NO: 630 (Chothia) HCDR3 GACTATAGAAAGGGCCTGTACGCTATGGACTAC BAP058-Clone O LC SEQ ID NO: 633 (Kabat) LCDR1 AAAGCCTCTCAGGACGTGGGCACCGCCGTGGCC SEQ ID NO: 634 (Kabat) LCDR2 TGGGCCTCTACTAGACACACC SEQ ID NO: 635 (Kabat) LCDR3 CAGCAGTATAATAGCTACCCCCTGACC SEQ ID NO: 636 (Chothia) LCDR1 TCTCAGGACGTGGGCACCGCC SEQ ID NO: 637 (Chothia) LCDR2 TGGGCCTCT SEQ ID NO: 638 (Chothia) LCDR3 TATAATAGCTACCCCCTG BAP058-Clone N HC SEQ ID NO: 628 (Kabat) HCDR1 AGCTACTGGATGTAC SEQ ID NO: 629 (Kabat) HCDR2 AGAATCGACCCTAATAGCGGCTCTACTAAGTATAACGAGAAGTTTAAGAAT SEQ ID NO: 630 (Kabat) HCDR3 GACTATAGAAAGGGCCTGTACGCTATGGACTAC SEQ ID NO: 631 (Chothia) HCDR1 GGCTACACCTTCACTAGCTAC SEQ ID NO: 632 (Chothia) HCDR2 GACCCTAATAGCGGCTCT SEQ ID NO: 630 (Chothia) HCDR3 GACTATAGAAAGGGCCTGTACGCTATGGACTAC BAP058-Clone N LC SEQ ID NO: 633 (Kabat) LCDR1 AAAGCCTCTCAGGACGTGGGCACCGCCGTGGCC SEQ ID NO: 634 (Kabat) LCDR2 TGGGCCTCTACTAGACACACC SEQ ID NO: 635 (Kabat) LCDR3 CAGCAGTATAATAGCTACCCCCTGACC SEQ ID NO: 636 (Chothia) LCDR1 TCTCAGGACGTGGGCACCGCC SEQ ID NO: 637 (Chothia) LCDR2 TGGGCCTCT SEQ ID NO: 638 (Chothia) LCDR3 TATAATAGCTACCCCCTG

Другие иллюстративные ингибиторы PD-L1

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-PD-L1 представляет собой Атезолизумаб (Genentech/Roche) известный также как MPDL3280A, RG7446, RO5541267, YW243.55.S70 или TECENTRIQ™. Атезолизумаб и другие антитела анти-PD-L1 описаны в патенте США 8217149, включенном в качестве ссылки во всей своей полноте. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-PD-L1 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или коллективно, все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи, или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи Атезолизумаба, например, как описано в Таблице 4.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-PD-L1 представляет собой Авелумаб (Merck Serono и Pfizer) также известный как MSB0010718C. Авелумаб и другие антитела анти-PD-L1 описан в WO 2013/079174, включенном в качестве ссылки во всей своей полноте. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-PD-L1 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или коллективно, все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи, или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи Авелумаба, например, как описано в Таблице 4.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-PD-L1 представляет собой Дурвалумаб (MedImmune/AstraZeneca), известный также как MEDI4736. Дурвалумаб и другие антитела анти-PD-L1 описаны в патенте США 8779108, включенном в качестве ссылки во всей своей полноте. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-PD-L1 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или коллективно, все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи, или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи Дурвалумаба, например, как описано в Таблице 4.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-PD-L1 представляет собой BMS-936559 (Bristol-Myers Squibb) также известный как MDX-1105 или 12A4. BMS-936559 и другие антитела анти-PD-L1 описаны в патенте США 7943743 и WO 2015/081158, включенных в качестве ссылок во всей своей полноте. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-PD-L1 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или коллективно, все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи, или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи BMS-936559, например, как описано в Таблице 4.

Другие известные антитела анти-PD-L1 включают антитела, описанные, например, в WO 2015/181342, WO 2014/100079, WO 2016/000619, WO 2014/022758, WO 2014/055897, WO 2015/061668, WO 2013/079174, WO 2012/145493, WO 2015/112805, WO 2015/109124, WO 2015/195163, в патенте США 8168179, патенте США 8552154, патенте США 8460927 и патенте США 9175082, включенных в качестве ссылок во всей своей полноте.

В одном из вариантов осуществления, анти-PD-L1 антитело представляет собой антитело, которое конкурирует за связывание и/или связывается с таким же эпитопом на PD-L1, как и одно из антител анти-PD-L1, описанных в настоящем документе.

Таблица 4. Последовательности аминокислот других иллюстративных молекул антитела анти-PD-L1

Атезолизумаб SEQ ID NO: 639 Тяжелая цепь EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSDSWIHWVRQAPGKGLEWVAWISPYGGSTYYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCARRHWPGGFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYASTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK SEQ ID NO: 640 Легкая цепь DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDVSTAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASFLYSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYLYHPATFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC Авелумаб SEQ ID NO: 641 Тяжелая цепь EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYIMMWVRQAPGKGLEWVSSIYPSGGITFYADTVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARIKLGTVTTVDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK SEQ ID NO: 642 Легкая цепь QSALTQPASVSGSPGQSITISCTGTSSDVGGYNYVSWYQQHPGKAPKLMIYDVSNRPSGVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSYTSSSTRVFGTGTKVTVLGQPKANPTVTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKADGSPVKAGVETTKPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVAPTECS SEQ ID NO: 643 Тяжелая цепь EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSRYWMSWVRQAPGKGLEWVANIKQDGSEKYYVDSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCAREGGWFGELAFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEFEGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPASIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK SEQ ID NO: 644 Легкая цепь EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQRVSSSYLAWYQQKPGQAPRLLIYDASSRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYCQQYGSLPWTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC BMS-936559 SEQ ID NO: 645 VH QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKTSGDTFSTYAISWVRQAPGQGLEWMGGIIPIFGKAHYAQKFQGRVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYFCARKFHFVSGSPFGMDVWGQGTTVTVSS SEQ ID NO: 646 VL EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVSSYLAWYQQKPGQAPRLLIYDASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSNWPTFGQGTKVEIK

Ингибиторы TIM-3

В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3, описанная в настоящем документе, вводится в сочетании с ингибитором TIM-3. В некоторых вариантах осуществления, ингибитор TIM-3 представляет собой MGB453 (Novartis) или TSR-022 (Tesaro).

Иллюстративные ингибиторы TIM-3

В одном из вариантов осуществления, ингибитор TIM-3 представляет собой молекулу антитела анти-TIM-3. В одном из вариантов осуществления, ингибитор TIM-3 представляет собой молекулу антитела анти-TIM-3, как описано в патенте США 2015/0218274, опубликованном 6 августа 2015 года, озаглавленном “Antibody Molecules to TIM-3 and Uses”, включенном в качестве ссылки во всей своей полноте.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-TIM-3 содержит, по меньшей мере, одну, две, три, четыре, пять или шесть областей, определяющих комплементарность (CDR) (или коллективно все CDR) из вариабельной области тяжелой и легкой цепи, содержащей последовательность аминокислот, как показано в Таблице 7 (например, из последовательности вариабельной области тяжелой и легкой цепи ABTIM3-hum11 или ABTIM3-hum03, описанного в Таблице 7), или она кодируется последовательностью нуклеотидов, показанной в Таблице 7. В некоторых вариантах осуществления, CDR соответствуют определению Kabat (например, как приведено в Таблице 7). В некоторых вариантах осуществления, CDR соответствуют определению Chothia (например, как приведено в Таблице 7). В одном из вариантов осуществления, одна или несколько CDR (или коллективно все CDR) имеют одно, два, три, четыре, пять, шесть или более изменений, например, замещений аминокислот (например, консервативных замещений аминокислот) или делеций, по сравнению с последовательностью аминокислот, показанной в Таблице 7, или они кодируются последовательностью нуклеотидов, показанной в Таблице 7.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-TIM-3 содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую последовательность аминокислот VHCDR1 SEQ ID NO: 801, последовательность аминокислот VHCDR2 SEQ ID NO: 802, и последовательность аминокислот VHCDR3 SEQ ID NO: 803 и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую последовательность аминокислот VLCDR1 SEQ ID NO: 810, последовательность аминокислот VLCDR2 SEQ ID NO: 811 и последовательность аминокислот VLCDR3 SEQ ID NO: 812, каждая из них описана в Таблице 7. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-TIM-3 содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую последовательность аминокислот VHCDR1 SEQ ID NO: 801, последовательность аминокислот VHCDR2 SEQ ID NO: 820 и последовательность аминокислот VHCDR3 SEQ ID NO: 803; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую последовательность аминокислот VLCDR1 SEQ ID NO: 810, последовательность аминокислот VLCDR2 SEQ ID NO: 811, и последовательность аминокислот VLCDR3 SEQ ID NO: 812, каждая из них описана в Таблице 7.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-TIM-3 содержит VH, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 806 или последовательность аминокислот, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичную SEQ ID NO: 806. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-TIM-3 содержит VL, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 816 или последовательность аминокислот, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичную SEQ ID NO: 816. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-TIM-3 содержит VH, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 822 или последовательность аминокислот, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичную SEQ ID NO: 822. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-TIM-3 содержит VL, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 826 или последовательность аминокислот, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичную SEQ ID NO: 826. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-TIM-3 содержит VH, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 806 и VL, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 816. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-TIM-3 содержит VH, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 822 и VL, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 826.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит VH, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 807 или последовательностью нуклеотидов, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичной SEQ ID NO: 807. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит VL, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 817 или последовательностью нуклеотидов, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичной SEQ ID NO: 817. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит VH, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 823 или последовательностью нуклеотидов, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичной SEQ ID NO: 823. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит VL, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 827 или последовательностью нуклеотидов, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичной SEQ ID NO: 827. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит VH, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 807, и VL, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 817. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит VH, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 823, и VL, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 827.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-TIM-3 содержит тяжелую цепь, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 808 или последовательность аминокислот, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичную SEQ ID NO: 808. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-TIM-3 содержит легкую цепь, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 818 или последовательность аминокислот, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичную SEQ ID NO: 818. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-TIM-3 содержит тяжелую цепь, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 824 или последовательность аминокислот, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичную SEQ ID NO: 824. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-TIM-3 содержит легкую цепь, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 828 или последовательность аминокислот, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичную SEQ ID NO: 828. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-TIM-3 содержит тяжелую цепь, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 808, и легкую цепь, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 818. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-TIM-3 содержит тяжелую цепь, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 824, и легкую цепь, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 828.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит тяжелую цепь, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 809 или последовательностью нуклеотидов, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичной SEQ ID NO: 809. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит легкую цепь, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 819 или последовательностью нуклеотидов, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичной SEQ ID NO: 819. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит тяжелую цепь, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 825 или последовательностью нуклеотидов, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичной SEQ ID NO: 825. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит легкую цепь, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 829 или последовательностью нуклеотидов, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичной SEQ ID NO: 829. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит тяжелую цепь, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 809, и легкую цепь, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 819. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит тяжелую цепь, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 825, и легкую цепь, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 829.

Молекулы антител, описанные в настоящем документе, могут быть получены с помощью векторов, клеток хозяев и способов, описанных в патенте США 2015/0218274, включенном в качестве ссылки во всей своей полноте.

Таблица 7. Последовательности аминокислот и нуклеотидов иллюстративных молекул антител анти-TIM-3

ABTIM3-hum11 SEQ ID NO: 801 (Kabat) HCDR1 SYNMH SEQ ID NO: 802 (Kabat) HCDR2 DIYPGNGDTSYNQKFKG SEQ ID NO: 803 (Kabat) HCDR3 VGGAFPMDY SEQ ID NO: 804 (Chothia) HCDR1 GYTFTSY SEQ ID NO: 805 (Chothia) HCDR2 YPGNGD SEQ ID NO: 803 (Chothia) HCDR3 VGGAFPMDY SEQ ID NO: 806 VH QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGYTFTSYNMHWVRQAPGQGLEWMGDIYPGNGDTSYNQKFKGRVTITADKSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCARVGGAFPMDYWGQGTTVTVSS SEQ ID NO: 807 ДНК VH CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCAGGCGCCGAAGTGAAGAAACCCGGCTCTAGCGTGAAAGTTTCTTGTAAAGCTAGTGGCTACACCTTCACTAGCTATAATATGCACTGGGTTCGCCAGGCCCCAGGGCAAGGCCTCGAGTGGATGGGCGATATCTACCCCGGGAACGGCGACACTAGTTATAATCAGAAGTTTAAGGGTAGAGTCACTATCACCGCCGATAAGTCTACTAGCACCGTCTATATGGAACTGAGTTCCCTGAGGTCTGAGGACACCGCCGTCTACTACTGCGCTAGAGTGGGCGGAGCCTTCCCTATGGACTACTGGGGTCAAGGCACTACCGTGACCGTGTCTAGC SEQ ID NO: 808 Тяжелая цепь QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGYTFTSYNMHWVRQAPGQGLEWMGDIYPGNGDTSYNQKFKGRVTITADKSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCARVGGAFPMDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLG SEQ ID NO: 809 Тяжелая цепь ДНК CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCAGGCGCCGAAGTGAAGAAACCCGGCTCTAGCGTGAAAGTTTCTTGTAAAGCTAGTGGCTACACCTTCACTAGCTATAATATGCACTGGGTTCGCCAGGCCCCAGGGCAAGGCCTCGAGTGGATGGGCGATATCTACCCCGGGAACGGCGACACTAGTTATAATCAGAAGTTTAAGGGTAGAGTCACTATCACCGCCGATAAGTCTACTAGCACCGTCTATATGGAACTGAGTTCCCTGAGGTCTGAGGACACCGCCGTCTACTACTGCGCTAGAGTGGGCGGAGCCTTCCCTATGGACTACTGGGGTCAAGGCACTACCGTGACCGTGTCTAGCGCTAGCACTAAGGGCCCGTCCGTGTTCCCCCTGGCACCTTGTAGCCGGAGCACTAGCGAATCCACCGCTGCCCTCGGCTGCCTGGTCAAGGATTACTTCCCGGAGCCCGTGACCGTGTCCTGGAACAGCGGAGCCCTGACCTCCGGAGTGCACACCTTCCCCGCTGTGCTGCAGAGCTCCGGGCTGTACTCGCTGTCGTCGGTGGTCACGGTGCCTTCATCTAGCCTGGGTACCAAGACCTACACTTGCAACGTGGACCACAAGCCTTCCAACACTAAGGTGGACAAGCGCGTCGAATCGAAGTACGGCCCACCGTGCCCGCCTTGTCCCGCGCCGGAGTTCCTCGGCGGTCCCTCGGTCTTTCTGTTCCCACCGAAGCCCAAGGACACTTTGATGATTTCCCGCACCCCTGAAGTGACATGCGTGGTCGTGGACGTGTCACAGGAAGATCCGGAGGTGCAGTTCAATTGGTACGTGGATGGCGTCGAGGTGCACAACGCCAAAACCAAGCCGAGGGAGGAGCAGTTCAACTCCACTTACCGCGTCGTGTCCGTGCTGACGGTGCTGCATCAGGACTGGCTGAACGGGAAGGAGTACAAGTGCAAAGTGTCCAACAAGGGACTTCCTAGCTCAATCGAAAAGACCATCTCGAAAGCCAAGGGACAGCCCCGGGAACCCCAAGTGTATACCCTGCCACCGAGCCAGGAAGAAATGACTAAGAACCAAGTCTCATTGACTTGCCTTGTGAAGGGCTTCTACCCATCGGATATCGCCGTGGAATGGGAGTCCAACGGCCAGCCGGAAAACAACTACAAGACCACCCCTCCGGTGCTGGACTCAGACGGATCCTTCTTCCTCTACTCGCGGCTGACCGTGGATAAGAGCAGATGGCAGGAGGGAAATGTGTTCAGCTGTTCTGTGATGCATGAAGCCCTGCACAACCACTACACTCAGAAGTCCCTGTCCCTCTCCCTGGGA SEQ ID NO: 810 (Kabat) LCDR1 RASESVEYYGTSLMQ SEQ ID NO: 811 (Kabat) LCDR2 AASNVES SEQ ID NO: 812 (Kabat) LCDR3 QQSRKDPST SEQ ID NO: 813 (Chothia) LCDR1 SESVEYYGTSL SEQ ID NO: 814 (Chothia) LCDR2 AAS SEQ ID NO: 815 (Chothia) LCDR3 SRKDPS SEQ ID NO: 816 VL AIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCRASESVEYYGTSLMQWYQQKPGKAPKLLIYAASNVESGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYFCQQSRKDPSTFGGGTKVEIK SEQ ID NO: 817 ДНК VL GCTATTCAGCTGACTCAGTCACCTAGTAGCCTGAGCGCTAGTGTGGGCGATAGAGTGACTATCACCTGTAGAGCTAGTGAATCAGTCGAGTACTACGGCACTAGCCTGATGCAGTGGTATCAGCAGAAGCCCGGGAAAGCCCCTAAGCTGCTGATCTACGCCGCCTCTAACGTGGAATCAGGCGTGCCCTCTAGGTTTAGCGGTAGCGGTAGTGGCACCGACTTCACCCTGACTATCTCTAGCCTGCAGCCCGAGGACTTCGCTACCTACTTCTGTCAGCAGTCTAGGAAGGACCCTAGCACCTTCGGCGGAGGCACTAAGGTCGAGATTAAG SEQ ID NO: 818 Легкая цепь AIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCRASESVEYYGTSLMQWYQQKPGKAPKLLIYAASNVESGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYFCQQSRKDPSTFGGGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC SEQ ID NO: 819 Легкая цепь ДНК GCTATTCAGCTGACTCAGTCACCTAGTAGCCTGAGCGCTAGTGTGGGCGATAGAGTGACTATCACCTGTAGAGCTAGTGAATCAGTCGAGTACTACGGCACTAGCCTGATGCAGTGGTATCAGCAGAAGCCCGGGAAAGCCCCTAAGCTGCTGATCTACGCCGCCTCTAACGTGGAATCAGGCGTGCCCTCTAGGTTTAGCGGTAGCGGTAGTGGCACCGACTTCACCCTGACTATCTCTAGCCTGCAGCCCGAGGACTTCGCTACCTACTTCTGTCAGCAGTCTAGGAAGGACCCTAGCACCTTCGGCGGAGGCACTAAGGTCGAGATTAAGCGTACGGTGGCCGCTCCCAGCGTGTTCATCTTCCCCCCCAGCGACGAGCAGCTGAAGAGCGGCACCGCCAGCGTGGTGTGCCTGCTGAACAACTTCTACCCCCGGGAGGCCAAGGTGCAGTGGAAGGTGGACAACGCCCTGCAGAGCGGCAACAGCCAGGAGAGCGTCACCGAGCAGGACAGCAAGGACTCCACCTACAGCCTGAGCAGCACCCTGACCCTGAGCAAGGCCGACTACGAGAAGCATAAGGTGTACGCCTGCGAGGTGACCCACCAGGGCCTGTCCAGCCCCGTGACCAAGAGCTTCAACAGGGGCGAGTGC ABTIM3-hum03 SEQ ID NO: 801 (Kabat) HCDR1 SYNMH SEQ ID NO: 820 (Kabat) HCDR2 DIYPGQGDTSYNQKFKG SEQ ID NO: 803 (Kabat) HCDR3 VGGAFPMDY SEQ ID NO: 804 (Chothia) HCDR1 GYTFTSY SEQ ID NO: 821 (Chothia) HCDR2 YPGQGD SEQ ID NO: 803 (Chothia) HCDR3 VGGAFPMDY SEQ ID NO: 822 VH QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSYNMHWVRQAPGQGLEWIGDIYPGQGDTSYNQKFKGRATMTADKSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCARVGGAFPMDYWGQGTLVTVSS SEQ ID NO: 823 ДНК VH CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCAGGCGCCGAAGTGAAGAAACCCGGCGCTAGTGTGAAAGTTAGCTGTAAAGCTAGTGGCTATACTTTCACTTCTTATAATATGCACTGGGTCCGCCAGGCCCCAGGTCAAGGCCTCGAGTGGATCGGCGATATCTACCCCGGTCAAGGCGACACTTCCTATAATCAGAAGTTTAAGGGTAGAGCTACTATGACCGCCGATAAGTCTACTTCTACCGTCTATATGGAACTGAGTTCCCTGAGGTCTGAGGACACCGCCGTCTACTACTGCGCTAGAGTGGGCGGAGCCTTCCCAATGGACTACTGGGGTCAAGGCACCCTGGTCACCGTGTCTAGC SEQ ID NO: 824 Тяжелая цепь QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSYNMHWVRQAPGQGLEWIGDIYPGQGDTSYNQKFKGRATMTADKSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCARVGGAFPMDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLG SEQ ID NO: 825 Тяжелая цепь ДНК CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCAGGCGCCGAAGTGAAGAAACCCGGCGCTAGTGTGAAAGTTAGCTGTAAAGCTAGTGGCTATACTTTCACTTCTTATAATATGCACTGGGTCCGCCAGGCCCCAGGTCAAGGCCTCGAGTGGATCGGCGATATCTACCCCGGTCAAGGCGACACTTCCTATAATCAGAAGTTTAAGGGTAGAGCTACTATGACCGCCGATAAGTCTACTTCTACCGTCTATATGGAACTGAGTTCCCTGAGGTCTGAGGACACCGCCGTCTACTACTGCGCTAGAGTGGGCGGAGCCTTCCCAATGGACTACTGGGGTCAAGGCACCCTGGTCACCGTGTCTAGCGCTAGCACTAAGGGCCCGTCCGTGTTCCCCCTGGCACCTTGTAGCCGGAGCACTAGCGAATCCACCGCTGCCCTCGGCTGCCTGGTCAAGGATTACTTCCCGGAGCCCGTGACCGTGTCCTGGAACAGCGGAGCCCTGACCTCCGGAGTGCACACCTTCCCCGCTGTGCTGCAGAGCTCCGGGCTGTACTCGCTGTCGTCGGTGGTCACGGTGCCTTCATCTAGCCTGGGTACCAAGACCTACACTTGCAACGTGGACCACAAGCCTTCCAACACTAAGGTGGACAAGCGCGTCGAATCGAAGTACGGCCCACCGTGCCCGCCTTGTCCCGCGCCGGAGTTCCTCGGCGGTCCCTCGGTCTTTCTGTTCCCACCGAAGCCCAAGGACACTTTGATGATTTCCCGCACCCCTGAAGTGACATGCGTGGTCGTGGACGTGTCACAGGAAGATCCGGAGGTGCAGTTCAATTGGTACGTGGATGGCGTCGAGGTGCACAACGCCAAAACCAAGCCGAGGGAGGAGCAGTTCAACTCCACTTACCGCGTCGTGTCCGTGCTGACGGTGCTGCATCAGGACTGGCTGAACGGGAAGGAGTACAAGTGCAAAGTGTCCAACAAGGGACTTCCTAGCTCAATCGAAAAGACCATCTCGAAAGCCAAGGGACAGCCCCGGGAACCCCAAGTGTATACCCTGCCACCGAGCCAGGAAGAAATGACTAAGAACCAAGTCTCATTGACTTGCCTTGTGAAGGGCTTCTACCCATCGGATATCGCCGTGGAATGGGAGTCCAACGGCCAGCCGGAAAACAACTACAAGACCACCCCTCCGGTGCTGGACTCAGACGGATCCTTCTTCCTCTACTCGCGGCTGACCGTGGATAAGAGCAGATGGCAGGAGGGAAATGTGTTCAGCTGTTCTGTGATGCATGAAGCCCTGCACAACCACTACACTCAGAAGTCCCTGTCCCTCTCCCTGGGA SEQ ID NO: 810 (Kabat) LCDR1 RASESVEYYGTSLMQ SEQ ID NO: 811 (Kabat) LCDR2 AASNVES SEQ ID NO: 812 (Kabat) LCDR3 QQSRKDPST SEQ ID NO: 813 (Chothia) LCDR1 SESVEYYGTSL SEQ ID NO: 814 (Chothia) LCDR2 AAS SEQ ID NO: 815 (Chothia) LCDR3 SRKDPS SEQ ID NO: 826 VL DIVLTQSPDSLAVSLGERATINCRASESVEYYGTSLMQWYQQKPGQPPKLLIYAASNVESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQSRKDPSTFGGGTKVEIK SEQ ID NO: 827 ДНК VL GATATCGTCCTGACTCAGTCACCCGATAGCCTGGCCGTCAGCCTGGGCGAGCGGGCTACTATTAACTGTAGAGCTAGTGAATCAGTCGAGTACTACGGCACTAGCCTGATGCAGTGGTATCAGCAGAAGCCCGGTCAACCCCCTAAGCTGCTGATCTACGCCGCCTCTAACGTGGAATCAGGCGTGCCCGATAGGTTTAGCGGTAGCGGTAGTGGCACCGACTTCACCCTGACTATTAGTAGCCTGCAGGCCGAGGACGTGGCCGTCTACTACTGTCAGCAGTCTAGGAAGGACCCTAGCACCTTCGGCGGAGGCACTAAGGTCGAGATTAAG SEQ ID NO: 828 Легкая цепь DIVLTQSPDSLAVSLGERATINCRASESVEYYGTSLMQWYQQKPGQPPKLLIYAASNVESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQSRKDPSTFGGGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC SEQ ID NO: 829 Легкая цепь ДНК GATATCGTCCTGACTCAGTCACCCGATAGCCTGGCCGTCAGCCTGGGCGAGCGGGCTACTATTAACTGTAGAGCTAGTGAATCAGTCGAGTACTACGGCACTAGCCTGATGCAGTGGTATCAGCAGAAGCCCGGTCAACCCCCTAAGCTGCTGATCTACGCCGCCTCTAACGTGGAATCAGGCGTGCCCGATAGGTTTAGCGGTAGCGGTAGTGGCACCGACTTCACCCTGACTATTAGTAGCCTGCAGGCCGAGGACGTGGCCGTCTACTACTGTCAGCAGTCTAGGAAGGACCCTAGCACCTTCGGCGGAGGCACTAAGGTCGAGATTAAGCGTACGGTGGCCGCTCCCAGCGTGTTCATCTTCCCCCCCAGCGACGAGCAGCTGAAGAGCGGCACCGCCAGCGTGGTGTGCCTGCTGAACAACTTCTACCCCCGGGAGGCCAAGGTGCAGTGGAAGGTGGACAACGCCCTGCAGAGCGGCAACAGCCAGGAGAGCGTCACCGAGCAGGACAGCAAGGACTCCACCTACAGCCTGAGCAGCACCCTGACCCTGAGCAAGGCCGACTACGAGAAGCATAAGGTGTACGCCTGCGAGGTGACCCACCAGGGCCTGTCCAGCCCCGTGACCAAGAGCTTCAACAGGGGCGAGTGC

Другие иллюстративные ингибиторы TIM-3

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-TIM-3 представляет собой TSR-022 (AnaptysBio/Tesaro). В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-TIM-3 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или коллективно, все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи TSR-022. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-TIM-3 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или коллективно, все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи, или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи APE5137 или APE5121, например, как описано в Таблице 8. APE5137, APE5121 и другие антитела анти-TIM-3 описаны в WO 2016/161270, включенной в качестве ссылки во всей своей полноте.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-TIM-3 представляет собой клон антитела F38-2E2. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-TIM-3 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или коллективно, все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи, или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи F38-2E2.

Другие известные антитела анти-TIM-3 включают антитела, описанные, например, в WO 2016/111947, WO 2016/071448, WO 2016/144803, в патенте США 8552156, в патенте США 8841418 и патенте США 9163087, включенных в качестве ссылок во всей своей полноте.

В одном из вариантов осуществления, антитело анти-TIM-3 представляет собой антитело, которое конкурирует за связывание и/или связывается с таким же эпитопом на TIM-3, как и одно из антител анти-TIM-3, описанных в настоящем документе.

Таблица 8. Последовательности аминокислот других иллюстративных молекул антител анти-TIM-3

APE5137 SEQ ID NO: 830 VH EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAAASGFTFSSYDMSWVRQAPGKGLDWVSTISGGGTYTYYQDSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCASMDYWGQGTTVTVSSA SEQ ID NO: 831 VL DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSIRRYLNWYHQKPGKAPKLLIYGASTLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFAVYYCQQSHSAPLTFGGGTKVEIKR APE5121 SEQ ID NO: 832 VH EVQVLESGGGLVQPGGSLRLYCVASGFTFSGSYAMSWVRQAPGKGLEWVSAISGSGGSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKKYYVGPADYWGQGTLVTVSSG SEQ ID NO: 833 VL DIVMTQSPDSLAVSLGERATINCKSSQSVLYSSNNKNYLAWYQHKPGQPPKLLIYWASTRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQYYSSPLTFGGGTKIEVK

Агонисты GITR

В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3, описанная в настоящем документе, вводится в сочетании с агонистом GITR. В некоторых вариантах осуществления, агонист GITR представляет собой GWN323 (NVS), BMS-986156, MK-4166 или MK-1248 (Merck), TRX518 (Leap Therapeutics), INCAGN1876 (Incyte/Agenus), AMG 228 (Amgen) или INBRX-110 (Inhibrx).

Иллюстративные агонисты GITR

В одном из вариантов осуществления, агонист GITR представляет собой молекулу антитела анти-GITR. В одном из вариантов осуществления, агонист GITR представляет собой молекулу антитела анти-GITR, как описано в WO 2016/057846, опубликованной 14 апреля 2016 года, озаглавленной “Compositions and Methods of Use for Augmented Immune Reaction and Cancer Therapy», включенной в качестве ссылки во всей своей полноте.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-GITR содержит, по меньшей мере, одну, две, три, четыре, пять или шесть областей, определяющих комплементарность (CDR) (или коллективно все CDR), из вариабельной области тяжелой и легкой цепи, содержащей последовательность аминокислот, показанную в Таблице 9 (например, из последовательности вариабельной области тяжелой и легкой цепи MAB7, описанной в Таблице 9), или кодируется последовательностью нуклеотидов, показанной в Таблице 9. В некоторых вариантах осуществления, CDR соответствуют определению Kabat (например, как приведено в Таблице 9). В некоторых вариантах осуществления, CDR соответствуют определению Chothia (например, как приведено в Таблице 9). В одном из вариантов осуществления, одна или несколько CDR (или коллективно все CDR) имеют одно, два, три, четыре, пять, шесть или более изменений, например, замещений аминокислот (например, консервативных замещений аминокислот) или делеций, по сравнению с последовательностью аминокислот, показанной в Таблице 9, или они кодируются последовательностью нуклеотидов, показанной в Таблице 9.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-GITR содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую последовательность аминокислот VHCDR1 of SEQ ID NO: 909, последовательность аминокислот VHCDR2 SEQ ID NO: 911 и последовательность аминокислот VHCDR3 SEQ ID NO: 913; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую последовательность аминокислот VLCDR1 SEQ ID NO: 914, последовательность аминокислот VLCDR2 SEQ ID NO: 916 и последовательность аминокислот VLCDR3 SEQ ID NO: 918, каждая из них описана в Таблице 9.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-GITR содержит VH, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 901 или последовательность аминокислот, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичную SEQ ID NO: 901. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-GITR содержит VL, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 902 или последовательность аминокислот, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичную SEQ ID NO: 902. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-GITR содержит VH, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 901, и VL, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 902.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит VH, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 905, или последовательность нуклеотидов, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичную SEQ ID NO: 905. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит VL, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 906, или последовательность нуклеотидов, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичную SEQ ID NO: 906. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит VH, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 905, и VL, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 906.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-GITR содержит тяжелую цепь, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 903 или последовательность аминокислот, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичную SEQ ID NO: 903. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-GITR содержит легкую цепь, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 904 или последовательность аминокислот, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичную SEQ ID NO: 904. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-GITR содержит тяжелую цепь, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 903, и легкую цепь, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 904.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит тяжелую цепь, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 907, или последовательностью нуклеотидов, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичной SEQ ID NO: 907. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит легкую цепь, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 908 или последовательностью нуклеотидов, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или 99% или выше идентичной SEQ ID NO: 908. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела содержит тяжелую цепь, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 907, и легкую цепь, кодируемую последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO: 908.

Молекулы антител, описанные в настоящем документе, могут быть получены с помощью векторов, клеток хозяев и способов, описанных в WO 2016/057846, включенной в качестве ссылки во всей своей полноте.

Таблица 9: Последовательности аминокислот и нуклеотидов иллюстративных молекул антител анти-GITR

MAB7 SEQ ID NO: 901 VH EVQLVESGGGLVQSGGSLRLSCAASGFSLSSYGVDWVRQAPGKGLEWVGVIWGGGGTYYASSLMGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARHAYGHDGGFAMDYWGQGTLVTVSS SEQ ID NO: 902 VL EIVMTQSPATLSVSPGERATLSCRASESVSSNVAWYQQRPGQAPRLLIYGASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYCGQSYSYPFTFGQGTKLEIK SEQ ID NO: 903 Тяжелая цепь EVQLVESGGGLVQSGGSLRLSCAASGFSLSSYGVDWVRQAPGKGLEWVGVIWGGGGTYYASSLMGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARHAYGHDGGFAMDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK SEQ ID NO: 904 Легкая цепь EIVMTQSPATLSVSPGERATLSCRASESVSSNVAWYQQRPGQAPRLLIYGASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYCGQSYSYPFTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC SEQ ID NO: 905 ДНК VH GAGGTGCAGCTGGTGGAATCTGGCGGCGGACTGGTGCAGTCCGGCGGCTCTCTGAGACTGTCTTGCGCTGCCTCCGGCTTCTCCCTGTCCTCTTACGGCGTGGACTGGGTGCGACAGGCCCCTGGCAAGGGCCTGGAATGGGTGGGAGTGATCTGGGGCGGAGGCGGCACCTACTACGCCTCTTCCCTGATGGGCCGGTTCACCATCTCCCGGGACAACTCCAAGAACACCCTGTACCTGCAGATGAACTCCCTGCGGGCCGAGGACACCGCCGTGTACTACTGCGCCAGACACGCCTACGGCCACGACGGCGGCTTCGCCATGGATTATTGGGGCCAGGGCACCCTGGTGACAGTGTCCTCC SEQ ID NO: 906 ДНК VL GAGATCGTGATGACCCAGTCCCCCGCCACCCTGTCTGTGTCTCCCGGCGAGAGAGCCACCCTGAGCTGCAGAGCCTCCGAGTCCGTGTCCTCCAACGTGGCCTGGTATCAGCAGAGACCTGGTCAGGCCCCTCGGCTGCTGATCTACGGCGCCTCTAACCGGGCCACCGGCATCCCTGCCAGATTCTCCGGCTCCGGCAGCGGCACCGACTTCACCCTGACCATCTCCCGGCTGGAACCCGAGGACTTCGCCGTGTACTACTGCGGCCAGTCCTACTCATACCCCTTCACCTTCGGCCAGGGCACCAAGCTGGAAATCAAG EQ ID NO: 907 Тяжелая цепь ДНК GAGGTGCAGCTGGTGGAATCTGGCGGCGGACTGGTGCAGTCCGGCGGCTCTCTGAGACTGTCTTGCGCTGCCTCCGGCTTCTCCCTGTCCTCTTACGGCGTGGACTGGGTGCGACAGGCCCCTGGCAAGGGCCTGGAATGGGTGGGAGTGATCTGGGGCGGAGGCGGCACCTACTACGCCTCTTCCCTGATGGGCCGGTTCACCATCTCCCGGGACAACTCCAAGAACACCCTGTACCTGCAGATGAACTCCCTGCGGGCCGAGGACACCGCCGTGTACTACTGCGCCAGACACGCCTACGGCCACGACGGCGGCTTCGCCATGGATTATTGGGGCCAGGGCACCCTGGTGACAGTGTCCTCCGCTAGCACCAAGGGCCCAAGTGTGTTTCCCCTGGCCCCCAGCAGCAAGTCTACTTCCGGCGGAACTGCTGCCCTGGGTTGCCTGGTGAAGGACTACTTCCCCGAGCCCGTGACAGTGTCCTGGAACTCTGGGGCTCTGACTTCCGGCGTGCACACCTTCCCCGCCGTGCTGCAGAGCAGCGGCCTGTACAGCCTGAGCAGCGTGGTGACAGTGCCCTCCAGCTCTCTGGGAACCCAGACCTATATCTGCAACGTGAACCACAAGCCCAGCAACACCAAGGTGGACAAGAGAGTGGAGCCCAAGAGCTGCGACAAGACCCACACCTGCCCCCCCTGCCCAGCTCCAGAACTGCTGGGAGGGCCTTCCGTGTTCCTGTTCCCCCCCAAGCCCAAGGACACCCTGATGATCAGCAGGACCCCCGAGGTGACCTGCGTGGTGGTGGACGTGTCCCACGAGGACCCAGAGGTGAAGTTCAACTGGTACGTGGACGGCGTGGAGGTGCACAACGCCAAGACCAAGCCCAGAGAGGAGCAGTACAACAGCACCTACAGGGTGGTGTCCGTGCTGACCGTGCTGCACCAGGACTGGCTGAACGGCAAAGAATACAAGTGCAAAGTCTCCAACAAGGCCCTGCCAGCCCCAATCGAAAAGACAATCAGCAAGGCCAAGGGCCAGCCACGGGAGCCCCAGGTGTACACCCTGCCCCCCAGCCGGGAGGAGATGACCAAGAACCAGGTGTCCCTGACCTGTCTGGTGAAGGGCTTCTACCCCAGCGATATCGCCGTGGAGTGGGAGAGCAACGGCCAGCCCGAGAACAACTACAAGACCACCCCCCCAGTGCTGGACAGCGACGGCAGCTTCTTCCTGTACAG
CAAGCTGACCGTGGACAAGTCCAGGTGGCAGCAGGGCAACGTGTTCAGCTGCAGCGTGATGCACGAGGCCCTGCACAACCACTACACCCAGAAGTCCCTGAGCCTGAGCCCCGGCAAG SEQ ID NO: 908 Легкая цепь ДНК GAGATCGTGATGACCCAGTCCCCCGCCACCCTGTCTGTGTCTCCCGGCGAGAGAGCCACCCTGAGCTGCAGAGCCTCCGAGTCCGTGTCCTCCAACGTGGCCTGGTATCAGCAGAGACCTGGTCAGGCCCCTCGGCTGCTGATCTACGGCGCCTCTAACCGGGCCACCGGCATCCCTGCCAGATTCTCCGGCTCCGGCAGCGGCACCGACTTCACCCTGACCATCTCCCGGCTGGAACCCGAGGACTTCGCCGTGTACTACTGCGGCCAGTCCTACTCATACCCCTTCACCTTCGGCCAGGGCACCAAGCTGGAAATCAAGCGTACGGTGGCCGCTCCCAGCGTGTTCATCTTCCCCCCCAGCGACGAGCAGCTGAAGAGCGGCACCGCCAGCGTGGTGTGCCTGCTGAACAACTTCTACCCCCGGGAGGCCAAGGTGCAGTGGAAGGTGGACAACGCCCTGCAGAGCGGCAACAGCCAGGAGAGCGTCACCGAGCAGGACAGCAAGGACTCCACCTACAGCCTGAGCAGCACCCTGACCCTGAGCAAGGCCGACTACGAGAAGCATAAGGTGTACGCCTGCGAGGTGACCCACCAGGGCCTGTCCAGCCCCGTGACCAAGAGCTTCAACAGGGGCGAGTGC SEQ ID NO: 909 (KABAT) HCDR1 SYGVD SEQ ID NO: 910 (CHOTHIA) HCDR1 GFSLSSY SEQ ID NO: 911 (KABAT) HCDR2 VIWGGGGTYYASSLMG SEQ ID NO: 912 (CHOTHIA) HCDR2 WGGGG SEQ ID NO: 913 (KABAT) HCDR3 HAYGHDGGFAMDY SEQ ID NO: 913 (CHOTHIA) HCDR3 HAYGHDGGFAMDY SEQ ID NO: 914 (KABAT) LCDR1 RASESVSSNVA SEQ ID NO: 915 (CHOTHIA) LCDR1 SESVSSN SEQ ID NO: 916 (KABAT) LCDR2 GASNRAT SEQ ID NO: 917 (CHOTHIA) LCDR2 GAS SEQ ID NO: 918 (KABAT) LCDR3 GQSYSYPFT SEQ ID NO: 919 (CHOTHIA) LCDR3 SYSYPF

Другие иллюстративные агонисты GITR

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-GITR представляет собой BMS-986156 (Bristol-Myers Squibb), известную также как BMS 986156 или BMS986156. BMS-986156, и другие антитела анти-GITR описанные, например, в патенте США 9228016 и WO 2016/196792, включенных в качестве ссылок во всей своей полноте. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-GITR содержит одну или несколько последовательностей CDR (или коллективно, все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи, или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи BMS-986156, например, как описано в Таблице 10.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-GITR представляет собой MK-4166 или MK-1248 (Merck). MK-4166, MK-1248 и другие антитела анти-GITR описаны, например, в патенте США 8709424, WO 2011/028683, WO 2015/026684 и Mahne et al. Cancer Res. 2017; 77(5):1108-1118, включенных в качестве ссылок во всей своей полноте. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-GITR содержит одну или несколько последовательностей CDR (или коллективно, все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи, или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи MK-4166 или MK-1248.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-GITR представляет собой TRX518 (Leap Therapeutics). TRX518 и другие антитела анти-GITR описаны, например, в патенте США 7812135, патенте США 8388967, патенте США 9028823, WO 2006/105021 и Ponte J et al. (2010) Clinical Immunology; 135:S96, включенных в качестве ссылок во всей своей полноте. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-GITR содержит одну или несколько последовательностей CDR (или коллективно, все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи, или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи TRX518.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-GITR представляет собой INCAGN1876 (Incyte/Agenus). INCAGN1876 и другие антитела анти-GITR описаны, например, в патенте США 2015/0368349 и WO 2015/184099, включенных в качестве ссылок во всей своей полноте. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-GITR содержит одну или несколько последовательностей CDR (или коллективно, все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи, или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи INCAGN1876.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-GITR представляет собой AMG 228 (Amgen). AMG 228 и другие антитела анти-GITR описаны, например, в патенте США 9464139 и WO 2015/031667, включенных в качестве ссылок во всей своей полноте. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-GITR содержит одну или несколько последовательностей CDR (или коллективно, все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи, или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи AMG 228.

В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-GITR представляет собой INBRX-110 (Inhibrx). INBRX-110 и другие антитела анти-GITR, описанные, например, в патенте США 2017/0022284 и WO 2017/015623, включенных в качестве ссылок во всей своей полноте. В одном из вариантов осуществления, агонист GITR содержит одну или несколько последовательностей CDR (или коллективно, все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи, или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи INBRX-110.

В одном из вариантов осуществления, агонист GITR (например, белок слияния) представляет собой MEDI 1873 (MedImmune), известный также как MEDI1873. MEDI 1873 и другие GITR агонисты описаны, например, в патенте США 2017/0073386, WO 2017/025610 и Ross et al. Cancer Res 2016; 76(14 Suppl): Abstract nr 561, включенных в качестве ссылок во всей своей полноте. В одном из вариантов осуществления, агонист GITR содержит один или несколько Fc-доменов IgG, домена функциональной мультимеризации и домена связывания рецептора глюкокортикоид-индуцированного лиганда рецептора TNF (GITRL) MEDI 1873.

Другие известные агонисты GITR (например, антитела анти-GITR) включают агонисты, описанные, например, в WO 2016/054638, включенной в качестве ссылки во всей своей полноте.

В одном из вариантов осуществления, анти-GITR антитело представляет собой антитело, которое конкурирует за связывание и/или связывается с таким же эпитопом на GITR, как и одно из антител анти-GITR, описанных в настоящем документе.

В одном из вариантов осуществления, агонист GITR представляет собой пептид, который активирует путь передачи сигналов GITR. В одном из вариантов осуществления, агонист GITR представляет собой фрагмент связывания иммуноадгезина (например, фрагмент связывания иммуноадгезина, содержащий внеклеточную часть или часть связывания GITR из GITRL), слитой с константной областью (например, Fc-областью последовательности иммуноглобулина).

Таблица 10: Последовательность аминокислот других иллюстративных молекул антител анти-GITR

BMS-986156 SEQ ID NO: 920 VH QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVAVIWYEGSNKYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARGGSMVRGDYYYGMDVWGQGTTVTVSS SEQ ID NO: 921 VL AIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQGISSALAWYQQKPGKAPKLLIYDASSLESGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFNSYPYTFGQGTKLEIK

Комплексы IL15/IL-15Ra

В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3, описанная в настоящем документе, вводится в сочетании с комплексом IL-15/IL-15Ra. В некоторых вариантах осуществления, комплекс IL-15/IL-15Ra выбирается из NIZ985 (Novartis), ATL-803 (Altor) или CYP0150 (Cytune).

Иллюстративные комплексы IL-15/IL-15Ra

В одном из вариантов осуществления, комплекс IL-15/IL-15Ra содержит IL-15 человека, образующий комплекс с растворимой формой IL-15Ra человека. Комплекс может содержать IL-15, ковалентно или нековалетно связанный с растворимой формой IL-15Ra. В конкретном варианте осуществления, IL-15 человека нековалетно связан с растворимой формой IL-15Ra. В конкретном варианте осуществления, IL-15 человека композиции содержит последовательность аминокислот SEQ ID NO: 1001 в Таблице 11 и растворимая форма IL-15Ra человека содержит последовательность аминокислот SEQ ID NO:1002 в Таблице 11, как описано в WO 2014/066527, включенной в качестве ссылки во всей своей полноте. Молекулы, описанные в настоящем документе, могут быть получены с помощью векторов, клеток хозяев и способов, описанных в WO 2007/084342, включенной в качестве ссылки во всей своей полноте.

Таблица 11. Последовательности аминокислот и нуклеотидов иллюстративных комплексов IL-15/IL-15Ra

NIZ985 SEQ ID NO: 1001 IL-15 человека NWVNVISDLKKIEDLIQSMHIDATLYTESDVHPSCKVTAMKCFLLELQVISLESGDASIHDTVENLIILANNSLSSNGNVTESGCKECEELEEKNIKEFLQSFVHIVQMFINTS SEQ ID NO: 1002 Растворимый IL-15Ra человека ITCPPPMSVEHADIWVKSYSLYSRERYICNSGFKRKAGTSSLTECVLNKATNVAHWTTPSLKCIRDPALVHQRPAPPSTVTTAGVTPQPESLSPSGKEPAASSPSSNNTAATTAAIVPGSQLMPSKSPSTGTTEISSHESSHGTPSQTTAKNWELTASASHQPPGVYPQG

Другие иллюстративные комплексы IL-15/IL-15Ra

В одном из вариантов осуществления, IL-15/IL-15Ra комплекс представляет собой ALT-803, белок слияния IL-15/IL-15Ra Fc (растворимый комплекс IL-15N72D:IL-15RaSu/Fc). ALT-803 описан в WO 2008/143794, включенной в качестве ссылки во всей своей полноте. В одном из вариантов осуществления, белок слияния IL-15/IL-15Ra Fc содержит последовательности, как описано в Таблице 12.

В одном из вариантов осуществления, комплекс IL-15/IL-15Ra содержит IL-15, слитой с доменом суши IL-15Ra (CYP0150, Cytune). Домен суши of IL-15Ra относится к домену, начинающемуся на первом цистеиновом остатке после сигнального пептида IL-15Ra, и заканчивающемуся на четвертом цистеиновом остатке после указанного сигнального пептида. Комплекс IL-15, слитой с доменом суши IL-15Ra, описан в WO 2007/04606 и WO 2012/175222, включенных в качестве ссылок во всей своей полноте. В одном из вариантов осуществления, белок слияния IL-15/домен суши IL-15Ra содержит последовательности, как описано в Таблице 12.

Таблица 12. Последовательности аминокислот других иллюстративных комплексов IL-15/IL-15Ra

ALT-803 (Altor) SEQ ID NO: 1003 IL-15N72D NWVNVISDLKKIEDLIQSMHIDATLYTESDVHPSCKVTAMKCFLLELQVISLESGDASIHDTVENLIILANDSLSSNGNVTESGCKECEELEEKNIKEFLQSFVHIVQMFINTS SEQ ID NO: 1004 IL-15RaSu/ Fc ITCPPPMSVEHADIWVKSYSLYSRERYICNSGFKRKAGTSSLTECVLNKATNVAHWTTPSLKCIREPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK Слияние IL-15 домен суши IL-15Ra (Cytune) SEQ ID NO:1005 IL-15 Человека NWVNVISDLKKIEDLIQSMHIDATLYTESDVHPSCKVTAMKCFLLELQVISLESGDASIHDTVENLIILANNSLSSNGNVTESGCKECEELEXKNIKEFLQSFVHIVQMFINTS
Где X представляет собй E или K SEQ ID NO:1006 домен суши и шарнирный домен IL-15Ra человека ITCPPPMSVEHADIWVKSYSLYSRERYICNSGFKRKAGTSSLTECVLNKATNVAHWTTPSLKCIRDPALVHQRPAPP

Фармацевтические композиции, препараты и наборы

В другом аспекте настоящее изобретение предлагает композиции, например, фармацевтически приемлемые композиции, которые содержат молекулу антитела анти-LAG-3, описанную в настоящем документе, приготовленную вместе с фармацевтически приемлемым носителем. Как используется в настоящем документе, “фармацевтически приемлемый носитель” включает любые и все растворители, дисперсионные среды, изотонические и замедляющие поглощение агенты, и тому подобное, которые являются физиологически совместимыми. Носитель может быть пригодным для внутривенного, внутримышечного, подкожного, парентерального, ректального, спинального или эпидермального введения (например, посредством инъекции или вливания).

Композиции, описанные в настоящем документе, могут находиться во множестве форм. Они включают, например, жидкие, полутвердые и твердые дозированные формы, такие как жидкие растворы (например, растворы для инъекций и вливаний), дисперсии или суспензии, липосомы и суппозитории. Предпочтительная форма зависит от предполагаемого режима введения и терапевтического применения. Типичные предпочтительные композиции находятся в форме растворов для инъекций или вливаний. Предпочтительный режим введения является парентеральным (например, внутривенным, подкожным, внутрибрюшинным, внутримышечным). В предпочтительном варианте осуществления, антитело вводится с помощью внутривенного вливания или инъекции. В другом предпочтительном варианте осуществления, антитело вводится с помощью внутримышечной или подкожной инъекции.

Фразы “парентеральное введение” и “вводится парентерально”, как используется в настоящем документе, означают режимы введения иные, чем энтеральное и местное введение, обычно, посредством инъекции, и включает, без ограничения, внутривенную, внутримышечную, интраартериальную, интратекальную, интракапсулярную, интраорбитальную, интракардиальную, интрадермальную, внутрибрюшинную, транстрахеальную, подкожную, субкутикулярную, внутрисуставную, подкапсулярную, субарахноидальную, интраспинальную, эпидуральную и интрастернальную инъекцию и вливание.

Как правило, терапевтические композиции должны быть стерильными и стабильными при условиях приготовления и хранения. Композиция может быть приготовлена в виде раствора, микроэмульсии, дисперсии, липосом или другой упорядоченной структуры, соответствующей высокой концентрации антитела. Стерильные растворы для инъекций можно приготовить посредством введения активного соединения (например, антитела или части антитела) в необходимом количестве в соответствующем растворителе с одним из ингредиентов или с их сочетанием, как перечислено выше, по потребности, с последующей стерилизацией фильтрованием. Как правило, дисперсии приготавливают посредством введения активного соединения в стерильную лекарственную среду, которая содержит основную дисперсионную среду и необходимые другие ингредиенты из тех, которые перечислены выше. В случае стерильных порошков для приготовления стерильных растворов для инъекций, предпочтительные способы приготовления представляют собой вакуумную сушку и сушку вымораживанием, которая дает порошок активного ингредиента плюс любой дополнительный желаемый ингредиент из заранее стерильно отфильтрованного их раствора. Соответствующая текучесть раствора может поддерживаться, например, посредством использования покрытия, такого как лецитин, посредством поддержания необходимого размера частиц в случае дисперсии и при использовании поверхностно-активных веществ. Пролонгированное поглощение композиций для инъекций может быть получено посредством введения в композицию агента, который замедляет поглощение, например, моностеаратных солей и желатина.

Молекула антитела анти-LAG-3 или композиция, описанная в настоящем документе, может быть приготовлена в виде препарата (например, дозированного препарата или дозированной формы) пригодного для введения (например, внутривенного введения) субъекту, как описано в настоящем документе. Препарат, описанный в настоящем документе, может представлять собой жидкий препарат, лиофилизированный препарат или разбавленный препарат.

В определенных вариантах осуществления, препарат представляет собой жидкий препарат. В некоторых вариантах осуществления, препарат (например, жидкий препарат) содержит молекулу антитела анти-LAG-3 (например, молекулу антитела анти-LAG-3, описанную в настоящем документе) и буферный агент.

В некоторых вариантах осуществления, препарат (например, жидкий препарат) содержит молекулу антитела анти-LAG-3, присутствующую при концентрации от 25 мг/мл до 250 мг/мл, например, от 50 мг/мл до 200 мг/мл, от 60 мг/мл до 180 мг/мл, от 70 мг/мл до 150 мг/мл, от 80 мг/мл до 120 мг/мл, от 90 мг/мл до 110 мг/мл, от 50 мг/мл до 150 мг/мл, от 50 мг/мл до 100 мг/мл, от 150 мг/мл до 200 мг/мл или от 100 мг/мл до 200 мг/мл, например, при 50 мг/мл, 60 мг/мл, 70 мг/мл, 80 мг/мл, 90 мг/мл, 100 мг/мл, 110 мг/мл, 120 мг/мл, 130 мг/мл, 140 мг/мл или 150 мг/мл. В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 присутствует при концентрации от 80 мг/мл до 120 мг/мл, например, при 100 мг/мл.

В некоторых вариантах осуществления, препарат (например, жидкий препарат) содержит буферный агент, содержащий гистидин (например, гистидиновый буфер). В определенных вариантах осуществления, буферный агент (например, гистидиновый буфер) присутствует при концентрации от 1 мМ до 100 мМ, например, от 2 мМ до 50 мМ, от 5 мМ до 40 мМ, от 10 мМ до 30 мМ, от 15 до 25 мМ, от 5 мМ до 40 мМ, от 5 мМ до 30 мМ, от 5 мМ до 20 мМ, от 5 мМ до 10 мМ, от 40 мМ до 50 мМ, от 30 мМ до 50 мМ, от 20 мМ до 50 мМ, от 10 мМ до 50 мМ или от 5 мМ до 50 мМ, например, при 2 мМ, 5 мМ, 10 мМ, 15 мМ, 20 мМ, 25 мМ, 30 мМ, 35 мМ, 40 мМ, 45 мМ или 50 мМ. В некоторых вариантах осуществления, буферный агент (например, гистидиновый буфер) присутствует при концентрации от 15 мМ до 25 мМ, например, при 20 мМ. В других вариантах осуществления, буферный агент (например, гистидиновый буфер) имеет pH от 4 до 7, например, от 5 до 6, например, при 5, 5,5 или 6. В некоторых вариантах осуществления, буферный агент (например, гистидиновый буфер) имеет pH от 5 до 6, например, 5,5. В определенных вариантах осуществления, буферный агент содержит гистидиновый буфер при концентрации от 15 мМ до 25 мМ (например, при 20 мМ) и имеет pH от 5 до 6 (например, при 5,5). В определенных вариантах осуществления, буферный агент содержит гистидин и гистидин-HCl.

В некоторых вариантах осуществления, препарат (например, жидкий препарат) содержит молекулу антитела анти-LAG-3, присутствующую при концентрации от 80 до 120 мг/мл, например, при 100 мг/мл; и буферный агент, который содержит гистидиновый буфер при концентрации от 15 мМ до 25 мМ (например, при 20 мМ) и имеет pH от 5 до 6 (например, 5,5).

В некоторых вариантах осуществления, препарат (например, жидкий препарат) дополнительно содержит углевод. В определенных вариантах осуществления, углевод представляет собой сахарозу. В некоторых вариантах осуществления, углевод (например, сахароза), присутствующую при концентрации от 50 мМ до 500 мМ, например, от 100 мМ до 400 мМ, от 150 мМ до 300 мМ, от 180 мМ до 250 мМ, от 200 мМ до 240 мМ, от 210 мМ до 230 мМ, от 100 мМ до 300 мМ, от 100 мМ до 250 мМ, от 100 мМ до 200 мМ, от 100 мМ до 150 мМ, от 300 мМ до 400 мМ, от 200 мМ до 400 мМ или от100 мМ до 400 мМ, например, при 100 мМ, 150 мМ, 180 мМ, 200 мМ, 220 мМ, 250 мМ, 300 мМ, 350 мМ или 400 мМ. В некоторых вариантах осуществления, препарат содержит углевод или сахарозу, присутствующую при концентрации от 200 мМ до 250 мМ, например, при 220 мМ.

В некоторых вариантах осуществления, препарат (например, жидкий препарат) содержит молекулу антитела анти-LAG-3, присутствующую при концентрации от 80 до 120 мг/мл, например, при 100 мг/мл; буферный агент, который содержит гистидиновый буфер при концентрации от 15 мМ до 25 мМ (например, при 20 мМ) и имеет pH от 5доo 6 (например, 5,5); и углевод или сахароза присутствуют при концентрации от 200 мМ до 250 мМ, например, при 220 мМ.

В некоторых вариантах осуществления, препарат (например, жидкий препарат) дополнительно содержит поверхностно-активное вещество. В определенных вариантах осуществления, поверхностно-активное вещество представляет собой полисорбат 20, В некоторых вариантах осуществления, поверхностно-активное вещество или полисорбат 20) присутствует при концентрации от 0,005% до 0,1% (масс/масс), например, от 0,01% до 0,08%, от 0,02% до 0,06%, от 0,03% до 0,05%, от 0,01% до 0,06%, от 0,01% до 0,05%, от 0,01% до 0,03%, от 0,06% до 0,08%, от 0,04% до 0,08% или от 0,02% до 0,08% (масс/масс), например, при 0,01%, 0,02%, 0,03%, 0,04%, 0,05%, 0,06%, 0,07%, 0,08%, 0,09% или 0,1% (масс/масс). В некоторых вариантах осуществления, препарат содержит поверхностно-активное вещество или полисорбат 20, присутствующий при концентрации от 0,03% до 0,05%, например, при 0,04% (масс/масс).

В некоторых вариантах осуществления, препарат (например, жидкий препарат) содержит молекулу антитела анти-LAG-3, присутствующую при концентрации от 80 до 120 мг/мл, например, при 100 мг/мл; буферный агент, который содержит гистидиновый буфер при концентрации от 15 мМ до 25 мМ (например, при 20 мМ) и имеет pH от 5до 6 (например, 5,5); углевод или сахарозу, присутствующую при концентрации от 200 мМ до 250 мМ, например, при 220 мМ; и поверхностно-активное вещество или полисорбат 20, присутствующий при концентрации от 0,03% до 0,05%, например, при 0,04% (масс/масс).

В некоторых вариантах осуществления, препарат (например, жидкий препарат) содержит молекулу антитела анти-LAG-3, присутствующую при концентрации 100 мг/мл; буферный агент, который содержит гистидиновый буфер (например, гистидин/гистидин-HCl) при концентрации от 20 мМ) и имеет pH 5,5; углевод или сахарозу, присутствующую при концентрации 220 мМ; и поверхностно-активное вещество или полисорбат 20, присутствующий при концентрации 0,04% (масс/масс).

В некоторых вариантах осуществления, жидкий препарат приготавливают посредством разбавления препарата, содержащего молекулу антитела анти-LAG-3, описанную в настоящем документе. Например, препарат лекарственного вещества может разбавляться раствором, содержащим один или несколько наполнителей (например, концентрированных наполнителей). В некоторых вариантах осуществления, раствор содержит один, два или все компоненты из гистидина, сахарозы или полисорбата 20. В определенных вариантах осуществления, раствор содержит такой же наполнитель (наполнители), как и препарат лекарственного вещества. Иллюстративные наполнители включают, но, не ограничиваясь этим, аминокислоту (например, гистидин), углевод (например, сахарозу) или поверхностно-активное вещество (например, полисорбат 20). В определенных вариантах осуществления, жидкий препарат представляет собой неразбавленный лиофилизированный препарат. В других вариантах осуществления, жидкий препарат представляет собой разбавленный лиофилизированный препарат. В некоторых вариантах осуществления, препарат хранится как жидкость. В других вариантах осуществления, препарат приготавливается в виде жидкости, а затем сушится, например, посредством лиофилизации или сушки распылением, перед хранением.

В определенных вариантах осуществления, от 0,5 мл до 10 мл (например, от 0,5 мл до 8 мл, от 1 мл до 6 мл или от 2 мл до 5 мл, например, 1 мл, 1.2 мл, 1.5 мл, 2 мл, 3 мл, 4 мл, 4,5 мл или 5 мл) жидкого препарата заполняют в каждый контейнер (например, флакон). В других вариантах осуществления, жидкий препарат заполняют в контейнер (например, флакон), так что извлекаемый объем, по меньшей мере, 1 мл (например, по меньшей мере, 1,2 мл, по меньшей мере, 1,5 мл, по меньшей мере, 2 мл, по меньшей мере, 3 мл, по меньшей мере, 4 мл или, по меньшей мере, 5 мл) жидкого препарата можно извлечь из каждого контейнера (например, флакона). В определенных вариантах осуществления, жидкий препарат извлекают из контейнера (например, флакона) без разбавления на месте проведения клинического исследования. В определенных вариантах осуществления, жидкий препарат разбавляется из препарата лекарственного вещества и извлекается из контейнера (например, флакона) на месте проведения клинического исследования. В определенных вариантах осуществления, препарат (например, жидкий препарат) вводят посредством инъекции в мешок для вливания, например, в пределах 1 часа (например, в пределах 45 минут, 30 минут или 15 минут) до начала вливания пациенту.

Препарат, описанный в настоящем документе, может храниться в контейнере. Контейнер, используемый для любых препаратов, описанных в настоящем документе, может включать, например, флакон и, необязательно, пробку, колпачок или как то, так и другое. В определенных вариантах осуществления, флакон представляет собой флакон из стекла, например, флакон из белого стекла 6R. В других вариантах осуществления, пробка представляет собой каучуковую пробку, например, пробку из серого каучука. В других вариантах осуществления, колпачок представляет собой откидывающийся колпачок, например, алюминиевый откидывающийся колпачок. В некоторых вариантах осуществления, контейнер содержит флакон из белого стекла 6R, пробку из серого каучука и алюминиевый откидывающийся колпачок. В некоторых вариантах осуществления, контейнер (например, флакон) представляет собой одноразовый контейнер. В определенных вариантах осуществления в контейнере (например, флаконе) присутствует от 25 мг/мл до 250 мг/мл, например, от 50 мг/мл до 200 мг/мл, от 60 мг/мл до 180 мг/мл, от 70 мг/мл до 150 мг/мл, от 80 мг/мл до 120 мг/мл, от 90 мг/мл до 110 мг/мл, от 50 мг/мл до 150 мг/мл, от 50 мг/мл до 100 мг/мл, от 150 мг/мл до 200 мг/мл или от 100 мг/мл до 200 мг/мл, например, 50 мг/мл, 60 мг/мл, 70 мг/мл, 80 мг/мл, 90 мг/мл, 100 мг/мл, 110 мг/мл, 120 мг/мл, 130 мг/мл, 140 мг/мл или 150 мг/мл молекулы антитела анти-LAG-3.

В некоторых вариантах осуществления, препарат представляет собой лиофилизированный препарат. В определенных вариантах осуществления, лиофилизированный препарат лиофилизируют или сушат из жидкого препарата, содержащего молекулу антитела анти-LAG-3, описанную в настоящем документе. Например, от 1 до 5 мл, например, от 1 до 2 мл, жидкого препарата можно заполнить в контейнер (например, флакон) и лиофилизировать.

В некоторых вариантах осуществления, препарат представляет собой разбавленный препарат. В определенных вариантах осуществления, разбавленный препарат разбавляют из лиофилизированного препарата, содержащего молекулу антитела анти-LAG-3, описанную в настоящем документе. Например, разбавленный препарат может быть приготовлен посредством растворения лиофилизированного препарата в разбавителе, таком что белок диспергируется в разбавленном препарате. В некоторых вариантах осуществления, лиофилизированный препарат разбавляется с помощью 1 мл 5 мл, например, 1 мл 2 мл, например, 1,2 мл, воды или буфера для инъекций. В определенных вариантах осуществления, лиофилизированный препарат разбавляется с помощью 1 мл 2 мл воды для инъекций, например, на месте проведения клинического исследования.

В некоторых вариантах осуществления, разбавленный препарат содержит молекулу антитела анти-LAG-3 (например, молекулу антитела анти-LAG-3, описанную в настоящем документе) и буферный агент.

В некоторых вариантах осуществления, разбавленный препарат содержит молекулу антитела анти-LAG-3, присутствующую при концентрации от 25 мг/мл до 250 мг/мл, например, от 50 мг/мл до 200 мг/мл, от 60 мг/мл до 180 мг/мл, от 70 мг/мл до 150 мг/мл, от 80 мг/мл до 120 мг/мл, от 90 мг/мл до 110 мг/мл, от 50 мг/мл до 150 мг/мл, от 50 мг/мл до 100 мг/мл, от 150 мг/мл до 200 мг/мл или от 100 мг/мл до 200 мг/мл, например, 50 мг/мл, 60 мг/мл, 70 мг/мл, 80 мг/мл, 90 мг/мл, 100 мг/мл, 110 мг/мл, 120 мг/мл, 130 мг/мл, 140 мг/мл или 150 мг/мл. В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 присутствует при концентрации от 80 мг/мл до 120 мг/мл, например, при 100 мг/мл.

В некоторых вариантах осуществления, разбавленный препарат содержит буферный агент, содержащий гистидин (например, гистидиновый буфер). В определенных вариантах осуществления, буферный агент (например, гистидиновый буфер) присутствует при концентрации от 1 мМ до 100 мМ, например, от 2 мМ до 50 мМ, от 5 мМ до 40 мМ, от 10 мМ до 30 мМ, от 15 до 25 мМ, от 5 мМ до 40 мМ, от 5 мМ до 30 мМ, от 5 мМ до 20 мМ, от 5 мМ до 10 мМ, от 40 мМ до 50 мМ, от 30 мМ до 50 мМ, от 20 мМ до 50 мМ, от 10 мМ до 50 мМ или от 5 мМ до 50 мМ, например, при 2 мМ, 5 мМ, 10 мМ, 15 мМ, 20 мМ, 25 мМ, 30 мМ, 35 мМ, 40 мМ, 45 мМ или 50 мМ. В некоторых вариантах осуществления, буферный агент (например, гистидиновый буфер) присутствует при концентрации от 15 мМ до 25 мМ, например, при 20 мМ. В других вариантах осуществления, буферный агент (например, гистидиновый буфер) имеет pH от 4 до 7, например, от 5 до 6, например, 5, 5,5 или 6. В некоторых вариантах осуществления, буферный агент (например, гистидиновый буфер) имеет pH от 5 до 6, например, 5,5. В определенных вариантах осуществления, буферный агент содержит гистидиновый буфер при концентрации от 15 мМ до 25 мМ (например, при 20 мМ) и имеет pH от 5 до 6 (например, 5,5). В определенных вариантах осуществления, буферный агент содержит гистидин и гистидин-HCl.

В некоторых вариантах осуществления, разбавленный препарат содержит молекулу антитела анти-LAG-3, присутствующую при концентрации от 80 до 120 мг/мл, например, при 100 мг/мл; и буферный агент, который содержит гистидиновый буфер при концентрации от 15 мМ до 25 мМ (например, при 20 мМ) и имеет pH от 5 до 6 (например, 5,5).

В некоторых вариантах осуществления, разбавленный препарат дополнительно содержит углевод. В определенных вариантах осуществления, углевод представляет собой сахарозу. В некоторых вариантах осуществления, углевод (например, сахароза) присутствует при концентрации от 50 мМ до 500 мМ, например, от 100 мМ до 400 мМ, от 150 мМ до 300 мМ, от 180 мМ до 250 мМ, от 200 мМ до 240 мМ, от 210 мМ до 230 мМ, от 100 мМ до 300 мМ, от 100 мМ до 250 мМ, от 100 мМ до 200 мМ, от 100 мМ до 150 мМ, от 300 мМ до 400 мМ, от 200 мМ до 400 мМ или от 100 мМ до 400 мМ, например, при 100 мМ, 150 мМ, 180 мМ, 200 мМ, 220 мМ, 250 мМ, 300 мМ, 350 мМ или 400 мМ. В некоторых вариантах осуществления, препарат содержит углевод или сахарозу, присутствующую при концентрации от 200 мМ до 250 мМ, например, при 220 мМ.

В некоторых вариантах осуществления, разбавленный препарат содержит молекулу антитела анти-LAG-3, присутствующую при концентрации от 80 до 120 мг/мл, например, при 100 мг/мл; буферный агент, который содержит гистидиновый буфер при концентрации от 15 мМ до 25 мМ (например, при 20 мМ) и имеет pH от 5 до 6 (например, 5,5); и углевод или сахарозу, присутствующую при концентрации от 200 мМ до 250 мМ, например, при 220 мМ.

В некоторых вариантах осуществления, разбавленный препарат дополнительно содержит поверхностно-активное вещество. В определенных вариантах осуществления, поверхностно-активное вещество представляет собой полисорбат 20, В некоторых вариантах осуществления, поверхностно-активное вещество или полисорбат 20 присутствуют при концентрации от 0,005% до 0,1% (масс/масс), например, от 0,01% до 0,08%, от 0,02% до 0,06%, от 0,03% до 0,05%, от 0,01% до 0,06%, от 0,01% до 0,05%, от 0,01% до 0,03%, от 0,06% до 0,08%, от 0,04% до 0,08% или от 0,02% до 0,08% (масс/масс), например, при 0,01%, 0,02%, 0,03%, 0,04%, 0,05%, 0,06%, 0,07%, 0,08%, 0,09% или 0,1% (масс/масс). В некоторых вариантах осуществления, препарат содержит поверхностно-активное вещество или полисорбат 20, присутствующий при концентрации от 0,03% до 0,05%, например, при 0,04% (масс/масс).

В некоторых вариантах осуществления, разбавленный препарат содержит молекулу антитела анти-LAG-3, присутствующую при концентрации от 80 до 120 мг/мл, например, при 100 мг/мл; буферный агент, который содержит гистидиновый буфер при концентрации от 15 мМ до 25 мМ (например, при 20 мМ) и имеет pH от 5 до 6 (например, 5,5); углевод или сахарозу, присутствующую при концентрации от 200 мМ до 250 мМ, например, при 220 мМ; и поверхностно-активное вещество или полисорбат 20, присутствующий при концентрации от 0,03% до 0,05%, например, при 0,04% (масс/масс).

В некоторых вариантах осуществления, разбавленный препарат содержит молекулу антитела анти-LAG-3, присутствующую при концентрации 100 мг/мл; буферный агент, который содержит гистидиновый буфер (например, гистидин/гистидин-HCl) при концентрации от 20 мМ и имеет pH 5,5; углевод или сахарозу, присутствующую при концентрации 220 мМ; и поверхностно-активное вещество или полисорбат 20, присутствующий при концентрации 0,04% (масс/масс).

В некоторых вариантах осуществления, препарат разбавляется, таким образом что извлекаемый объем, по меньшей мере, 1 мл (например, по меньшей мере, 1,2 мл, 1,5 мл, 2 мл, 2,5 мл или 3 мл) разбавленного препарата может извлекаться из контейнера (например, флакона), содержащего разбавленный препарат. В определенных вариантах осуществления, препарат разбавляется и/или извлекается из контейнера (например, флакона) на месте проведения клинического исследования. В определенных вариантах осуществления, препарат (например, разбавленный препарат) вводят в мешок для вливаний, например, в пределах 1 часа (например, в пределах 45 минут, 30 минут или 15 минут) до начала вливания пациенту.

Другие иллюстративные буферные агенты, которые можно использовать в препарате, описанном в настоящем документе, включают, но, не ограничиваясь этим, аргининовый буфер, цитратный буфер или фосфатный буфер. Другие иллюстративные углеводы, которые можно использовать в препарате, описанном в настоящем документе, включают, но, не ограничиваясь этим, трегалозу, маннитол, сорбитол или их сочетание. Препарат, описанный в настоящем документе, может также содержать регулятор тоничности, например, хлорид натрия и/или стабилизирующий агент, например, аминокислоту (например, глицин, аргинин, метионин или их сочетание).

Молекулы антител могут вводиться с помощью различных способов, известных в данной области, хотя для многих терапевтических применений, предпочтительный способ/режим введения представляет собой внутривенную инъекцию или вливание. Например, молекулы антитела можно вводить посредством внутривенного вливания при скорости более чем 20 мг/мин, например, при 20-40 мг/мин, а, как правило, при скорости равной или большей, чем 40 мг/мин для достижения дозы примерно от 35 до 440 мг/м², как правило, примерно от 70 до 310 мг/м², а чаще, примерно от 110 до 130 мг/м². В вариантах осуществления, молекулы антитела можно вводить посредством внутривенного вливания при скорости меньше, чем 10 мг/мин; предпочтительно, равной или меньше, чем 5 мг/мин для достижения дозы примерно от 1 до 100 мг/м², предпочтительно, примерно от 5 до 50 мг/м², примерно от 7 до 25 мг/м², а более предпочтительно, примерно 10 мг/м². Как будет очевидно специалисту в данной области, способ и/или режим введения будет изменяться в зависимости от желаемых результатов. В определенных вариантах осуществления, активное соединение может приготавливаться вместе с носителем, который будет защищать соединение от быстрого высвобождения, таким как препарат с контролируемым высвобождением, включая импланты, трансдермальные пластыри и микроинкапсулированные системы доставки. Можно использовать биодеградируемые, биологически совместимые полимеры, такие как этилен-винилацетат, полиангидриды, полигликолевая кислота, коллаген, сложные полиортоэфиры и полимолочная кислота. Множество способов приготовления таких препаратов запатентованы или, в целом, известны специалистам в данной области. Смотри, например, Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems, J. R. Robinson, ed., Marcel Dekker, Inc., New York, 1978.

В определенных вариантах осуществления, молекула антитела может вводиться перорально, например, с помощью инертного разбавителя или ассимилирующего съедобного носителя. Соединение (и другие ингредиенты, при желании) могут также заключаться в желатиновую капсулу в твердой или мягкой оболочке, прессоваться в виде таблеток или вводиться непосредственно в диету субъекта. Для перорального терапевтического введения, соединения могут снабжаться наполнителями и использоваться в форме заглатываемых таблеток, буккальных таблеток, драже, капсул, эликсиров, суспензий, сиропов, пластинок, и тому подобное. Для введения соединения по настоящему изобретению с помощью введения иного, чем парентеральное введение, может быть необходимым нанесение на соединение покрытия или совместное введение соединения с некоторым материалом для предотвращения его дезактивации. Терапевтические композиции можно также вводить с помощью медицинских устройств, известных в данной области.

Режимы дозирования регулируют для обеспечения оптимальной желаемой реакции (например, терапевтической реакции). Например, может вводиться один болюс, могут вводиться несколько разделенных доз с течением времени или доза может пропорционально уменьшаться или увеличиваться, как показывают потребности терапевтической ситуации. Особенно преимущественным является приготовление парентеральных композиций в стандартной дозированной форме для простоты введения и однородности дозирования. Стандартная дозированная форма, как используется в настоящем документе, относится к физически дискретным единицам пригодным для использования как унитарные дозировки для субъектов, которых необходимо лечить; каждая единица содержит заданное количество активного соединения, вычисленное для оказания желаемого терапевтического воздействия в ассоциации с необходимым фармацевтическим носителем. Спецификация стандартных дозированных форме по настоящему изобретению диктуется и непосредственно зависит от (a) уникальных характеристик активного соединения и конкретного терапевтического воздействия, которое должно быть достигнуто, и (b) ограничений, присущих данной области компаундирования такого активного соединения для лечения чувствительности у индивидуумов.

Иллюстративный, неограничивающий диапазон для терапевтически или профилактически эффективного количества молекулы антитела составляет от 50 мг до 1500 мг, как правило, от 80 мг до 1200 мг. В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится посредством инъекции (например, подкожно или внутривенно) при дозе (например, базовой дозе) примерно от 60 мг примерно до 100 мг (например, примерно 80 мг), примерно от 200 мг примерно до 300 мг (например, примерно 240 мг) или примерно от 1000 мг примерно до 1500 мг (например, примерно 1200 мг). Схема дозирования (например, базовая схема дозирования) может изменяться, например, от одного раза в неделю до одного раза в 2, 3, 4, 5 или 6 недель. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 60 мг до 100 мг (например, примерно 80 мг) один раз в две недели или один раз в четыре недели. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 200 мг примерно до 300 мг (например, примерно 240 мг) один раз в две недели или один раз в четыре недели. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 1000 мг примерно до 1500 мг (например, примерно 1200 мг) один раз в две недели или один раз в четыре недели. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно 80 мг один раз в четыре недели. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно 240 мг один раз в четыре недели. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно 1200 мг один раз в четыре недели. Хотя, и не имея желания ограничиваться теорией, в некоторых вариантах осуществления, базовое или фиксированное дозирование может быть выгодным для пациентов, например, для экономии поставки лекарственных средств и для уменьшения фармацевтических ошибок.

Молекула антитела может вводиться с помощью внутривенного вливания при скорости более чем 20 мг/мин, например, при 20-40 мг/мин, а, как правило, при скорости равной или большей, чем 40 мг/мин для достижения дозы примерно от 35 до 440 мг/м², как правило, примерно от 70 до 310 мг/м², а чаще, примерно от 110 до 130 мг/м². В вариантах осуществления, при скорости вливания примерно от 110 до 130 мг/м² достигается уровня примерно 3 мг/кг. В других вариантах осуществления, молекула антитела может вводиться с помощью внутривенного вливания при скорости меньше, чем 10 мг/мин, например, равной или меньше, чем 5 мг/мин для достижения дозы примерно от 1 до 100 мг/м², например, примерно от 5 до 50 мг/м², примерно от 7 до 25 мг/м² или, примерно 10 мг/м². В некоторых вариантах осуществления, антитело вливается в течение периода примерно 30 мин. Необходимо отметить, что величины дозирования могут изменяться вместе с типом и тяжестью состояния, которое должно облегчаться. Кроме того, необходимо понять, что для любого конкретного субъекта, конкретные режимы дозирования должны регулироваться со временем согласно потребностям индивидуума и профессиональному суждению лица, вводящего композиции или наблюдающего за введением композиций, и что диапазоны дозировок, приведенные в настоящем документе, являются только иллюстративными и не предназначены для ограничения рамок или осуществления заявляемой композиции.

Фармацевтические композиции по настоящему изобретению могут содержать "терапевтически эффективное количество" или "профилактически эффективное количество" антитела или части антитела по настоящему изобретению. "Терапевтически эффективное количество" относится к количеству эффективному при необходимых дозах и в течение необходимых периодов времени для достижения желаемого терапевтического результата. Терапевтически эффективное количество модифицированного антитела или фрагмента антитела может изменяться в соответствии с такими факторами, как болезненное состояние, возраст, пол и масса индивидуума, и от способности антитела или части антитела вызывать желаемую реакцию у индивидуума. Терапевтически эффективное количество также представляет собой такое количество, при котором любые токсичные или вредные воздействия модифицированного антитела или фрагмента антитела перевешиваются терапевтически полезными воздействиями. "Терапевтически эффективная дозировка" предпочтительно замедляет измеряемый параметр, например, скорость роста опухоли, по меньшей мере, примерно на 20%, более предпочтительно, по меньшей мере, примерно на 40%, еще более предпочтительно, по меньшей мере, примерно на 60% и даже более предпочтительно, по меньшей мере, примерно на 80% по сравнению с нелечеными субъектами. Способность соединения замедлять измеряемый параметр, например, рака, может оцениваться на системе моделей животных прогностичной для эффективности на опухолях человека. Альтернативно, это свойство композиции может оцениваться посредством исследования способности соединения к ингибированию, такое ингибирование оценивается in vitro с помощью анализов известных специалистам в данной области.

"Профилактически эффективное количество" относится к количеству эффективному при необходимых дозировках и в течение необходимых периодов времени для достижения желаемого профилактического результата. Как правило, поскольку профилактическая доза используется у субъектов до заболевания или на его ранней стадии, профилактически эффективное количество будет меньше, чем терапевтически эффективное количество.

Также в рамках настоящего изобретения находится набор, содержащий молекулу антитела анти-LAG-3, композицию или препарат, описанный в настоящем документе. Набор может содержать один или несколько других элементов, включая: инструкции для применения (например, согласно режиму дозирования, описанному в настоящем документе); другие реагенты, например, метку, терапевтический агент или агент полезный при хелатировании или для связывания иным образом антитела с меткой или терапевтическим агентом, или радиопротекторную композицию; устройства или другие материалы для приготовления антитела для введения; фармацевтически приемлемые носители и устройства или другие материалы для введения субъекту.

Применение молекул антитела анти-LAG-3

Молекулы антитела анти-LAG-3, описанные в настоящем документе, можно использовать для модификации иммунной реакции у субъекта. В некоторых вариантах осуществления, иммунная реакция усиливается, стимулируется или ап-регулируется. В определенных вариантах осуществления, иммунная реакция ингибируется, уменьшается или даун-регулируется. Например, эти молекулы антитела можно вводить в клетки в культуре, например, in vitro или ex vivo, или в субъекте, например, in vivo, для лечения, предотвращения и/или диагностики различных расстройств, таких как раковые заболевания, иммунные расстройства и инфекционные заболевания.

Как используется в настоящем документе, термин “субъект” предназначен для включения людей и животных, отличных от человека. В некоторых вариантах осуществления, субъект представляет собой субъекта человека, например, пациента человека, имеющего расстройство или состояние, отличающееся аномальным функционированием LAG-3. Как правило, субъект имеет, по меньшей мере, некоторое количество белка LAG-3, включая эпитоп LAG-3, который связывается с молекулой антитела, например, достаточно высокий уровень белка и эпитопа для поддержания связывания антитела и LAG-3. Термин “животное отличное от человека” включает млекопитающих и не-млекопитающих, таких как приматы отличные от человека. В некоторых вариантах осуществления, субъект представляет собой человека. В некоторых вариантах осуществления, субъект представляет собой пациента человека, имеющего необходимость в усилении иммунной реакции. Способы и композиции, описанные в настоящем документе, являются пригодными для лечения пациентов людей, имеющих расстройство, которое можно лечить посредством модуляции (например, усиления или замедления) иммунной реакции. В определенных вариантах осуществления, пациент имеет расстройство, описанное в настоящем документе, например, рак молочной железы, например, трижды негативный рак молочной железы (TNBC) или имеет риск его появления. В определенных вариантах осуществления, пациент с TNBC является более иммунногенным, чем при других субтипах рака молочной железы, имеет более высокую экспрессию PD-L1 и/или имеет повышенную инфильтрацию инфильтрующих опухоли лимфоцитов (TIL) (Loi et al. (2014) Ann Oncol; 25: 1544-50; Mittendorf et al. (2014) Cancer Immunol Res; 2:361-70). В одном из вариантов осуществления, пациент не демонстрирует метастаз в печени.

Подходы сочетанной иммунотерапии говорят, что синергическая блокада ко-ингибиторных рецепторов демонстрирует более высокую противоопухолевую активность чем отдельный агент (Wolchok et al. (2013) New Engl J Med; 369: 122-33). LAG-3 представляет собой ко-ингибиторный рецептор, который может взаимодействовать вместе с PD-1 для ингибирования иммунных реакций (Anderson et al. (2016) Immunity; 44: 989-1004). Объединенное ингибирование контрольных точек PD-1 и LAG-3 синергически усиливает противоопухолевые реакции по сравнению с ингибированием любой из контрольных точек самой по себе (Woo et al. (2012) Cancer Res; 72: 917-27).

Также, имеется все больше доказательств того, что цитотоксичные агенты влияют на окружающую среду опухоль-хозяин, делая ее более благоприятной для иммунной реакции, и как следствие, сочетание иммунотерапии с цитотоксичными агентами может оказывать синергическое воздействие для повышения терапевтической эффективности (Zitvogel et al. (2013) Immunity; 39: 74-88). Важно, что химиотерапия может индуцировать иммуногенную гибель клеток, которая облегчает эффективную презентацию антигена, и как было показано, запускает мощные реакции Т-лимфоцитов у преклинических моделей (Kroemer et al. (2013) Immunol; 31:51-72; Pfirschke et al. (2016) Immunity; 44:343-54; Lu et al. (2017) Biomedical Res; 28:828-34). Без желания ограничиваться теорией, предполагается, что в некоторых вариантах осуществления, химиотерапия (например, платиновый агент), будет создавать микроокружение на ранних стадиях в ходе активирования Т-лимфоцитов (например, повышенную концентрацию антигена и/или доступность антигена), что будет благоприятствовать возникновению Т-лимфоцитов LAG-3+CD8+, которые требуют только ингибирования LAG3 для дифференциации в эффекторные клетки специфичные для антигена опухоли. Хотя главный механизм действия платиновых агентов как предполагается, представляет собой индуцирование апоптоза раковых клеток как реакции на их ковалентное связывание с ДНК, последние исследования показывают, что клеточные молекулы иные, чем ДНК могут потенциально действовать как мишени и что часть противоопухолевых воздействий платиновых лекарственных средств осуществляется посредством модуляции иммунной системы (Hato et al. (2014) Clin Cancer Res; 20: 2831-7). Эти иммуногенные воздействия включают модуляцию передачи сигналов STAT (Lesterhuis et al. (2011) J Clin Invest; 121:3100-08); индуцирование иммунногенного типа гибели раковых клеток посредством экспонирования для кальретикулина и высвобождения ATP и белка группы высокой подвижности box-1 (HMGB-1) (Kroemer et al. (2013) Immunol; 31:51-72; Tesniere et al. (2010) Oncogenel; 29: 482-91); и усиления эффекторной иммунной реакции посредством модуляции лиганда рецептора 1 программируемой гибели и экспрессирование рецептора манноза-6-фосфата (Liu et al. (2010) Br J Cancer; 102:115-23). Без желания ограничиваться теорией, предполагается, что в некоторых вариантах осуществления, объединение платины с блокадой иммунной контрольной точки будет усиливать иммунотерапию, при этом платина может обеспечивать иммунногенную гибель клеток, сенсибилизацию опухолевых клеток для лизиса CTL и даун-регулирование PD-L.

В некоторых вариантах осуществления, субъекта не лечат с помощью терапевтического агента, процедуры или воздействия до приема молекулы антитела анти-LAG-3. В других вариантах осуществления, субъекта лечат с помощью терапевтического агента, процедуры или воздействия до приема молекулы антитела анти-LAG-3.

В определенных вариантах осуществления, субъекта не лечат анти-LAG-3 с помощью терапии до приема молекулы антитела анти-LAG-3. В других вариантах осуществления, субъекта лечат анти-LAG-3 с помощью терапии до приема молекулы антитела анти-LAG-3.

В определенных вариантах осуществления, субъекта не лечат с помощью терапии PD-1/PD-L1 до приема молекулы антитела анти-LAG-3. В других вариантах осуществления, субъекта лечат с помощью терапии PD-1/PD-L1 до приема молекулы антитела анти-LAG-3.

В определенных вариантах осуществления, субъекта не лечат с помощью химиотерапевтического агента (например, платинового агента (например, карбоплатина, цисплатина, оксалиплатина или тетраплатина) или нуклеотидного аналога или прекурсорного аналога (например, капецитабина)) до приема молекулы антитела анти-LAG-3. В других вариантах осуществления, субъекта лечат с помощью химиотерапевтического агента (например, платинового агента (например, карбоплатина, цисплатина, оксалиплатина или тетраплатина) или нуклеотидного аналога или прекурсорного аналога (например, капецитабина)) до приема молекулы антитела анти-LAG-3.

В определенных вариантах осуществления, субъект идентифицируется как имеющий экспрессирование LAG-3 в лимфоцитах, инфильтрующих опухоль. В других вариантах осуществления, субъект не имеет детектируемого уровня экспрессирования LAG-3 в лимфоцитах, инфильтрующих опухоль.

Способы лечения рака

В одном из аспектов, настоящее изобретение относится к лечению субъекта in vivo с использованием молекулы антитела анти-LAG-3 (например, молекулы антитела анти-LAG-3, описанной в настоящем документе), или композиции или препарата, содержащего молекулу антитела анти-LAG-3 (например, композицию или препарат, описанный в настоящем документе), так что рост злокачественных опухолей замедляется или уменьшается.

В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится в количестве эффективном для лечения рака или его метастатического поражения. В некоторых вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 100 мг примерно до 2000 мг один раз в две недели, один раз в три недели или один раз в четыре недели. Например, молекула антитела анти-LAG-3 может вводиться при дозе примерно от 200 мг примерно до 1000 мг, примерно от 300 мг примерно до 900 мг, примерно от 200 мг примерно до 600 мг, примерно от 300 мг примерно до 500 мг, примерно от 600 примерно до 1000 мг, примерно от 700 мг примерно до 900 мг или примерно от 400 мг примерно до 800 мг один раз в три недели или один раз в четыре недели. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 300 мг до 500 мг (например, примерно 400 мг) один раз в три недели. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 700 мг примерно до 900 мг (например, примерно 800 мг) один раз в четыре недели. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 500 мг примерно до 700 мг (например, примерно 533 мг или примерно 600 мг) один раз в четыре недели.

Антитело анти-LAG-3, или композицию или препарат, содержащий молекулу антитела анти-LAG-3, можно использовать отдельно для замедления роста злокачественных опухолей. Альтернативно, антитело анти-LAG-3 или композицию или препарат, содержащий молекулу антитела анти-LAG-3, можно использовать в сочетании с одним или несколькими подходами из: стандартного медицинского лечения (например, для раковых заболеваний или инфекционных расстройств), другого антитела или его антиген-связывающего фрагмента, иммуномодулятора (например, активатора костимуляторной молекулы или ингибитора ингибиторной молекулы); вакцины, например, терапевтической противораковой вакцины; или других форм клеточной иммунотерапии, как описано в настоящем документе.

Соответственно, в одном из вариантов осуществления, изобретение предлагает способ замедления роста опухолевых клеток у субъекта, включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества молекулы антитела анти-LAG-3, описанной в настоящем документе, например, согласно режиму дозирования, описанному в настоящем документе. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится в форме композиции или препарата, описанного в настоящем документе.

В одном из вариантов осуществления, способ является пригодным для лечения рака in vivo. Для достижения антиген-специфичного усиления иммунитета, молекула антитела анти-LAG-3 может вводиться вместе с антигеном, представляющим интерес. Когда антитело анти-LAG-3 вводится в сочетании с одним или несколькими агентами, сочетание может вводиться в любом порядке или одновременно.

В другом аспекте, предлагается способ лечения субъекта, например, уменьшения или облегчения гиперпролиферативного состояния или расстройства (например, рака), например, плотной опухоли, гематологического ракового заболевания, опухоли мягких тканей или метастатического поражения, у субъекта. Способ включает введение субъекту молекулы антитела анти-LAG-3, или композиции или препарата, содержащего молекулу антитела анти-LAG-3, как описано в настоящем изобретении, согласно режиму дозирования, описанному в настоящем изобретении.

Как используется в настоящем документе, термин “рак”, как подразумевается, включает все типы злокачественного роста или онкогенных процессов, метастатических тканей или злокачественно трансформированных клеток, тканей или органов, независимо от гистопатологического типа или стадии инвазивности. Примеры злокачественных расстройств включают, но, не ограничиваясь этим, плотные опухоли, гематологические раковые заболевания, опухоли мягких тканей и метастатические поражения. Примеры плотных опухолей включают злокачественные новообразования, например, саркомы и карциномы (включая аденокарциномы и плоскоклеточной карциномы), различных систем органов, такие как новообразования, воздействующие на печень, легкие, молочную железу, лимфатическую систему, желудочно-кишечный тракт (например, толстую кишку), мочеполовой тракт (например, почечные, уротелиальные клетки, клетки мочевого пузыря), простату, CNS (например, головной мозг, невральные или глиальные клетки), кожу, поджелудочную железу и гортань. Аденокарциномы включают злокачественные новообразования, такие как большинство видов раковых заболеваний толстой кишки, рак прямой кишки, почечно-клеточная карцинома, рак печени, немелкоклеточная карцинома легких, рак тонкой кишки и рак пищевода. Плоскоклеточной карциномы включают злокачественные новообразования, например, в легких, пищеводе, на коже, в области головы и шеи, в полости рта, в анусе и шейке матки. В одном из вариантов осуществления, раковое заболевание представляет собой меланому, например, прогрессирующую стадию меланомы. Метастатические поражения рассмотренных выше раковых заболеваний могут также лечиться или предотвращаться с использованием способов и композиций по настоящему изобретению.

Иллюстративные раковые заболевания, рост которых может замедляться с использованием молекул антител, композиций или препаратов, как описано в настоящем изобретении, включают, как правило, раковые заболевания, реагирующие на иммунотерапию. Неограничивающие примеры типичных раковых заболеваний для лечения включают меланому (например, метастатическую злокачественную меланому), рак почек (например, светлоклеточную карциному), рак простаты (например, не поддающуюся лечению гормонами аденокарциному простаты), рак молочной железы, рак толстой кишки и рак легких (например, немелкоклеточный рак легкого). В дополнение к этому, не поддающиеся лечению или рецидивирующие злокачественные новообразования могут лечиться с использованием молекул антитела, описанных в настоящем документе.

Примеры других раковых заболеваний, которые могут лечиться, включают, но, не ограничиваясь этим, карциному базальных клеток, рак желчного протока; рак мочевого пузыря; рак костей; рак головного мозга и CNS; первичную лимфому CNS; новообразования центральной нервной системы (CNS); рак молочной железы; рак шейки матки; хориокарциному; рак толстой и прямой кишки; рак соединительных тканей; рак пищеварительной системы; рак эндометрия; рак пищевода; рак глаз; рак головы и шеи; рак ЖКТ; интраэпителиальное новобразование; рак почек; рак гортани; лейкоз (включая острый миелоидный лейкоз, хронический миелоидный лейкоз, острый лимфобластический лейкоз, хронический лимфоцитарный лейкоз, хронический или острый лейкоз); рак печени; рак легких (например, мелкоклеточный и немелкоклеточный); лимфому, включая лимфому Ходжкина и не-Ходжкина; лимфоцитарную лимфому; меланому, например, кожную или внутриглазную злокачественную меланому; миелому; нейробластому; рак полости рта (например, губ, языка, рта и гортани); рак яичников; рак поджелудочной железы; рак простаты; ретинобластому; рабдомиосаркому; рак прямой кишки; рак респираторной системы; саркому; рак кожи; рак желудка; рак яичка; рак щитовидной железы; рак матки; рак мочевыделительной системы, гепатокарциному, рак анальной области, карциному фаллопиевых труб, карциному вагины, карцинома вульвы, рак тонкого кишечника, рак эндокринной системы, рак паратиреоидной железы, рак надпочечников, саркома мягких тканей, рак уретры, рак пениса, плотные опухоли у детей, опухоль оси позвоночника, глиому ствола головного мозга, аденому гипофиза, саркому Капоши, эпидермоидный рак, рак сквамовых клеток, лимфому T-лимфоцитов, раковые заболевания, вызываемые окружающей средой, включая заболевания, вызываемые асбестом, а также другие карциномы и саркомы, и сочетания указанных раковых заболеваний.

В некоторых вариантах осуществления, расстройство представляет собой рак, например, рак, описанный в настоящем документе. В определенных вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой плотную опухоль. В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой опухоль головного мозга, например, глиобластому, глиосаркому или рецидивирующую опухоль головного мозга. В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак поджелудочной железы, например, прогрессирующий рак поджелудочной железы. В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак кожи, например, меланому (например, меланому II-IV стадии, HLA-A2-положительную меланому, нерезектабельную меланому или метастатическую меланому) или карциному клеток Меркеля. В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак почек, например, почечноклеточную карциному (RCC) (например, метастатическую почечноклеточную карциному) или не леченный ранее метастатический рак почек. В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак молочной железы, например, метастатическую карциному молочной железы или карциному молочной железы IV стадии, например, трижды негативный рак молочной железы (TNBC). В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой ассоциированное с вирусом раковое заболевание. В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак анального канала (например, плоскоклеточную карциному анального канала). В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак шейки матки (например, плоскоклеточную карциному шейки матки). В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак ЖКТ (например, рак ЖКТ положительный по вирусу Эпштейна-Барра или карциному желудочно-кишечного тракта или гастроэзофагеального соединения). В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак головы и шеи (например, HPV-положительный и -отрицательный рак сквамовых клеток головы и шеи (SCCHN)). В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак носоглотки (NPC). В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак пениса (например, плоскоклеточную карциному пениса). В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой вагинальный или вульварный рак (например, плоскоклеточную карциному вагины или вульвы). В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак ободочной и прямой кишки, например, рецидивный рак ободочной и прямой кишки или метастатический рак ободочной и прямой кишки, например, рак ободочной и прямой кишки с микросателлитной нестабильностью, микросателлитно стабильный рак ободочной и прямой кишки, рак ободочной и прямой кишки профицитный относительно репарации неспаренных оснований или рак ободочной и прямой кишки дефицитный относительно репарации неспаренных оснований. В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак легких, например, немелкоклеточный рак легкого (NSCLC). В определенных вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой гематологическое раковое заболевание. В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой лейкоз. В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой лимфому, например, лимфому Ходжкина (HL) или диффузную В-крупноклеточную лимфому (DLBCL) (например, рецидивную или не поддающуюся лечению HL или DLBCL). В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой миелому. В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак с высокой микросателлитной нестабильностью. В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой метастатическое раковое заболевание. В других вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой прогрессирующий рак. В других вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рецидивный или не поддающийся лечению рак.

В одном из вариантов осуществления, раковое заболевание представляет собой карциному клеток Меркеля. В других вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой меланому. В других вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак молочной железы, например, трижды негативный рак молочной железы (TNBC) или HER2-отрицательный рак молочной железы. В других вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой почечноклеточную карциному (например, светлоклеточную почечноклеточную карциному (CCRCC) или несветлоклеточную почечноклеточную карциному (nccRCC)). В других вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак щитовидной железы, например, анапластическую карциному щитовидной железы (ATC). В других вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой нейроэндокринную опухоль (NET), например, атипичную пульмонарную карциноидную опухоль или NET в поджелудочной железе, желудочно-кишечном (GI) тракте или легких. В определенных вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой немелкоклеточный рак легкого (NSCLC) (например, плоскоклеточный NSCLC или неплоскоклеточный NSCLC). В определенных вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак фаллопиевых труб. В определенных вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак ободочной и прямой кишки с высокой микросателлитной нестабильностью (CRC с высокой MSI) или микросателлитно стабильный рак ободочной и прямой кишки (CRC MSS).

В других вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой гематологические злокачественные новообразования или рак, включая, но, не ограничиваясь этим лейкоз или лимфому. Например, молекула антитела анти-LAG-3 может использоваться для лечения раковых заболеваний и злокачественных новообразований, включая, но, не ограничиваясь этим, например, острый лейкоз, например, острый лимфоидный лейкоз B-клеток (“BALL”), острый лимфоидный лейкоз T-лимфоцитов (“TALL”), острый лимфоидный лейкоз (ALL); хронический лейкоз, например, хронический миелогенный лейкоз (CML), хронический лимфоцитарный лейкоз (CLL); дополнительное гематологической раковое заболевание или гематологическое состояние, например, пролимфоцитарный лейкоз B-клеток, новообразование бластных плазмоцитоидных дендритных клеток, лимфому Беркита, диффузную В-крупноклеточную лимфому, фолликулярную лимфому, волосатоклеточный лейкоз, мелкоклеточныую или немелкоклеточную фолликулярную лимфому, злокачественные лимфопролиферативные состояния, лимфому MALT, лимфому клеток мантийной ткани, лимфому маргинальной зоны, множественную миелому, миелодисплазию и миелодиспластический синдром, лимфому не-Ходжкина, плазмабластную лимфому, новообразование плазмацитоидных дендритных клеток, болезнь Вальденстрема и “предлейкоз”, которые представляют собой разнообразный набор гематологических состояний, объединенных неэффективным продуцированием (или дисплазией) миелоидных клеток кров, и тому подобное.

Как используется в настоящем документе, термин “субъект” как предполагается, включает человека и животных иных, чем человек. В некоторых вариантах осуществления, субъект представляет собой субъекта человека, например, пациента человека, имеющего расстройство или состояние, отличающееся аномальным функционированием LAG-3. Как правило, субъект имеет, по меньшей мере, какое-то количество белка LAG-3, содержащего эпитоп LAG-3, который связан с молекулой антитела, например, достаточно высокий уровень белка и эпитопа для поддержания связывания антитела с LAG-3. Термин “животные иные, чем человек” включает млекопитающих и не-млекопитающих, таких как приматы иные, чем человек. В некоторых вариантах осуществления, субъект представляет собой человека. В некоторых вариантах осуществления, субъект представляет собой пациента человека, нуждающегося в усилении иммунной реакции. Способы и композиции, описанные в настоящем документе, являются пригодными для лечения пациентов людей, имеющих расстройство, которое можно лечить посредством модуляции (например, усиления или замедления) иммунной реакции.

В некоторых вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3, или композиция или препарат, содержащий молекулу антитела анти-LAG-3, вводится как один агент. В других вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3, или композиция или препарат, содержащий молекулу антитела анти-LAG-3, вводится в сочетании со вторым терапевтическим агентом или воздействием, например, с ингибитором PD-1, ингибитором PD-L1 или химиотерапевтическим агентом. В некоторых вариантах осуществления, ингибитор PD-1 представляет собой молекулу антитела анти-PD-1, например, антитело анти-PD-1, описанное в настоящем документе. В некоторых вариантах осуществления, ингибитор PD-L1 представляет собой молекулу антитела анти-PD-L1, например, молекулу антитела анти-PD-L1, описанную в настоящем документе. В некоторых вариантах осуществления, химиотерапевтический агент представляет собой платиновый агент. В определенных вариантах осуществления, платиновый агент представляет собой карбоплатин. В определенных вариантах осуществления, платиновый агент представляет собой цисплатин. В определенных вариантах осуществления, платиновый агент представляет собой оксалиплатин. В определенных вариантах осуществления, платиновый агент представляет собой тетраплатин.

В некоторых вариантах осуществления, химиотерапевтический агент представляет собой нуклеотидный аналог или прекурсорный аналог. В определенных вариантах осуществления, нуклеотидный аналог или прекурсорный аналог представляет собой капецитабин.

В определенных вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой плотную опухоль. В некоторых вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3, или композиция или препарат, содержащий молекулу антитела анти-LAG-3, вводится как один агент для лечения плотной опухоли. В других вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3, или композиция или препарат, содержащий молекулу антитела анти-LAG-3, вводится в сочетании со вторым терапевтическим агентом или воздействием, например, ингибитором PD-1 или ингибитором PD-L1, для лечения плотной опухоли. В некоторых вариантах осуществления, ингибитор PD-1 представляет собой молекулу антитела анти-PD-1, например, антитела анти-PD-1, описанную в настоящем документе. В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-PD-1 представляет собой PDR001 (спартализумаб). В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-PD-1 представляет собой REGN2810. В других вариантах осуществления, молекула антитела анти-PD-1 представляет собой ниволумаб. В некоторых вариантах осуществления, ингибитор PD-L1 представляет собой молекулу антитела анти-PD-L1, например, молекулу антитела анти-PD-L1, описанную в настоящем документе.

В определенных вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак молочной железы, например, трижды негативный рак молочной железы (TNBC). В некоторых вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3, или композиция или препарат, содержащий молекулу антитела анти-LAG-3, вводится как один агент для лечения рака молочной железы (например, TNBC). В других вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3, или композиция или препарат, содержащий молекулу антитела анти-LAG-3, вводится в сочетании со вторым терапевтическим агентом, например, ингибитором PD-1, для лечения рака молочной железы (например, TNBC). В некоторых вариантах осуществления, ингибитор PD-1 представляет собой молекулу антитела анти-PD-1, например, антитела анти-PD-1, описанную в настоящем документе. В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-PD-1 представляет собой PDR001 (спартализумаб). В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-PD-1 представляет собой REGN2810. В других вариантах осуществления, молекула антитела анти-PD-1 представляет собой ниволумаб. В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 300 мг примерно до 500 мг (например, примерно 400 мг) один раз в три недели и ингибитор PD-1 вводится при дозе примерно от 200 мг примерно до 400 мг (например, примерно 300 мг) один раз в три недели для лечения рака молочной железы (например, TNBC). В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 (например, молекула антитела анти-LAG-3, описанная в настоящем документе) вводится при дозе примерно от 600 мг примерно до 1000 мг (например, примерно 800 мг) один раз в четыре недели, и ингибитор PD-1 (например, молекула антитела анти-PD-1, описанная в настоящем документе) вводится при дозе примерно от 300 мг примерно до 500 мг (например, примерно 400 мг) один раз в четыре недели для лечения рака молочной железы (например, TNBC).

В определенных вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак молочной железы, например, трижды негативный рак молочной железы (TNBC). В некоторых вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3, или композиция или препарат, содержащий молекулу антитела анти-LAG-3, вводится в сочетании со вторым терапевтическим агентом, например, с химиотерапевтическим агентом, для лечения рака молочной железы (например, TNBC). В некоторых вариантах осуществления, химиотерапевтический агент представляет собой платиновый агент. В определенных вариантах осуществления, платиновый агент представляет собой карбоплатин. В определенных вариантах осуществления, платиновый агент представляет собой цисплатин. В определенных вариантах осуществления, платиновый агент представляет собой оксалиплатин. В определенных вариантах осуществления, платиновый агент представляет собой тетраплатин. В некоторых вариантах осуществления, химиотерапевтический агент представляет собой нуклеотидный аналог или прекурсорный аналог. В определенных вариантах осуществления, нуклеотидный аналог или прекурсорный аналог представляет собой капецитабин. В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 300 мг примерно до 500 мг (например, примерно 400 мг) один раз в три недели, и химиотерапевтический агент вводится при дозе для достижения площади под кривой (AUC) примерно от 4 примерно до 8 или примерно от 5 примерно до 7 (например, AUC примерно 6) один раз в три недели для лечения рака молочной железы (например, TNBC).

В определенных вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак молочной железы, например, трижды негативный рак молочной железы (TNBC). В некоторых вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3, или композиция или препарат, содержащий молекулу антитела анти-LAG-3, вводится в сочетании с ингибитором PD-1 и химиотерапевтическим агентом для лечения рака молочной железы (например, TNBC). В некоторых вариантах осуществления, ингибитор PD-1 представляет собой молекулу антитела анти-PD-1, например, антитела анти-PD-1, описанную в настоящем документе. В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-PD-1 представляет собой PDR001 (спартализумаб). В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-PD-1 представляет собой REGN2810. В других вариантах осуществления, молекула антитела анти-PD-1 представляет собой ниволумаб. В некоторых вариантах осуществления, химиотерапевтический агент представляет собой платиновый агент. В определенных вариантах осуществления, платиновый агент представляет собой карбоплатин. В определенных вариантах осуществления, платиновый агент представляет собой цисплатин. В определенных вариантах осуществления, платиновый агент представляет собой оксалиплатин. В определенных вариантах осуществления, платиновый агент представляет собой тетраплатин. В некоторых вариантах осуществления, химиотерапевтический агент представляет собой нуклеотидный аналог или прекурсорный аналог. В определенных вариантах осуществления, нуклеотидный аналог или прекурсорный аналог представляет собой капецитабин. В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 300 мг примерно до 500 мг (например, примерно 400 мг) один раз в три недели, ингибитор PD-1 вводится при дозе примерно от 200 мг примерно до 400 мг (например, примерно 300 мг) один раз в три недели, и химиотерапевтический агент вводится при дозе для достижения AUC примерно от 4 примерно до 8 или примерно от 5 примерно до 7 (например, AUC примерно 6) один раз в три недели для лечения рака молочной железы (например, TNBC).

В определенных вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой опухоль головного мозга. В некоторых вариантах осуществления, опухоль головного мозга представляет собой глиобластому (например, рецидивирующую глиобластому). В некоторых вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3, или композиция или препарат, содержащий молекулу антитела анти-LAG-3, вводится как один агент для лечения опухоли головного мозга. В других вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3, или композиция или препарат, содержащий молекулу антитела анти-LAG-3, вводится в сочетании со вторым терапевтическим агентом или воздействием, например, ингибитором PD-1 или ингибитором PD-L1, для лечения опухоли головного мозга. В некоторых вариантах осуществления, ингибитор PD-1 представляет собой молекулу антитела анти-PD-1, например, антитела анти-PD-1, описанную в настоящем документе. В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-PD-1 представляет собой PDR001 (спартализумаб). В других вариантах осуществления, молекула антитела анти-PD-1 представляет собой ниволумаб. В некоторых вариантах осуществления, ингибитор PD-L1 представляет собой молекулу антитела анти-PD-L1, например, молекулу антитела анти-PD-L1, описанную в настоящем документе.

В определенных вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак поджелудочной железы. В некоторых вариантах осуществления, раковое заболевание поджелудочной железы представляет собой прогрессирующий рак поджелудочной железы. В некоторых вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3, или композиция или препарат, содержащий молекулу антитела анти-LAG-3, вводится как один агент для лечения рака поджелудочной железы. В других вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3, или композиция или препарат, содержащий молекулу антитела анти-LAG-3, вводится в сочетании со вторым терапевтическим агентом или воздействием, для лечения рака поджелудочной железы. В некоторых вариантах осуществления, второй терапевтический агент или воздействие содержит химиотерапевтический агент (например, гемцитабин).

В определенных вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой меланому. В некоторых вариантах осуществления, меланома является HLA-A2-положительной, представляет собой меланому стадии II, III или IV, нерезектабельную меланому или метастатическую меланому. В некоторых вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3, или композиция или препарат, содержащий молекулу антитела анти-LAG-3, вводится как один агент для лечения меланомы. В других вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3, или композиция или препарат, содержащий молекулу антитела анти-LAG-3, вводится в сочетании со вторым терапевтическим агентом или воздействием для лечения меланомы. В некоторых вариантах осуществления, второй терапевтический агент или метод представляет собой пептид HLA-A2. В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3, или композиция или препарат, содержащий молекулу антитела анти-LAG-3, и необязательно, пептид HLA-A2, вводится пациенту, не имеющему заболевания меланомы. В некоторых вариантах осуществления, второй терапевтический агент или метод содержит ингибитор PD-1 или ингибитор PD-L1. В некоторых вариантах осуществления, ингибитор PD-1 представляет собой молекулу антитела анти-PD-1, например, антитела анти-PD-1, описанную в настоящем документе. В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-PD-1 представляет собой PDR001. В некоторых вариантах осуществления, ингибитор PD-L1 представляет собой молекулу антитела анти-PD-L1, например, молекулу антитела анти-PD-L1, описанную в настоящем документе.

В определенных вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак почек. В некоторых вариантах осуществления, рак почек представляет собой почечноклеточную карциному (RCC), например, метастатическую почечноклеточную карциному. В некоторых вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3, или композиция или препарат, содержащий молекулу антитела анти-LAG-3, вводится как один агент для лечения рака почек. В других вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3, или композиция или препарат, содержащий молекулу антитела анти-LAG-3, вводится в сочетании со вторым терапевтическим агентом или воздействием, например, ингибитором PD-1 или ингибитором PD-L1, для лечения рака почек. В некоторых вариантах осуществления, ингибитор PD-1 представляет собой молекулу антитела анти-PD-1, например, антитела анти-PD-1, описанную в настоящем документе. В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-PD-1 представляет собой PDR001. В некоторых вариантах осуществления, ингибитор PD-L1 представляет собой молекулу антитела анти-PD-L1, например, молекулу антитела анти-PD-L1, описанную в настоящем документе.

В определенных вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак молочной железы. В некоторых вариантах осуществления, рак молочной железы представляет собой метастатическую карциному молочной железы. В некоторых вариантах осуществления, рак молочной железы представляет собой трижды негативный рак молочной железы (TNBC). В некоторых вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3, или композиция или препарат, содержащий молекулу антитела анти-LAG-3, вводится как один агент для лечения рака молочной железы. В других вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3, или композиция или препарат, содержащий молекулу антитела анти-LAG-3, вводится в сочетании со вторым терапевтическим агентом или воздействием, для лечения рака молочной железы. В определенных вариантах осуществления, второй терапевтический агент или метод представляет собой химиотерапевтический агент (например, паклитаксель). В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 700 мг примерно до 900 мг один раз в четыре недели для лечения рака молочной железы (например, TNBC).

В определенных вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой вирусную опухоль. В некоторых вариантах осуществления, вирусная опухоль выбирается из рака анального канала (например, плоскоклеточной карциномы анального канала), рака шейки матки (например, плоскоклеточной карциномы шейки матки), рака ЖКТ (например, рака ЖКТ положительного по вирусу Эпштейна-Барра или карциномы желудочно-кишечного тракта или гастроэзофагеального соединения), рака головы и шеи (например, HPV-положительного и отрицательного рака сквамовых клеток головы и шеи (SCCHN)), рака носоглотки (NPC), рака пениса (например, плоскоклеточной карциномы пениса), вагинального или вульварного рака (например, плоскоклеточной карциномы вагины или вульвы). В некоторых вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3, или композиция или препарат, содержащий молекулу антитела анти-LAG-3, вводится как один агент для лечения вирусной опухоли. В других вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3, или композиция или препарат, содержащий молекулу антитела анти-LAG-3, вводится в сочетании со вторым терапевтическим агентом или воздействием, например, ингибитором PD-1 или ингибитором PD-L1, для лечения для лечения вирусной опухоли. В некоторых вариантах осуществления, ингибитор PD-1 представляет собой молекулу антитела анти-PD-1, например, антитела анти-PD-1, описанную в настоящем документе. В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-PD-1 представляет собой PDR001. В других вариантах осуществления, молекула антитела анти-PD-1 представляет собой ниволумаб. В некоторых вариантах осуществления, ингибитор PD-L1 представляет собой молекулу антитела анти-PD-L1, например, молекулу антитела анти-PD-L1, описанную в настоящем документе.

В определенных вариантах осуществления, рак выбирается из рака анального канала (например, плоскоклеточной карциномы анального канала), рака шейки матки (например, плоскоклеточной карциномы шейки матки), рака ЖКТ (например, рака ЖКТ положительного по вирусу Эпштейна-Барра или карциномы желудочно-кишечного тракта или гастроэзофагеального соединения), рака головы и шеи (например, HPV положительного и отрицательного рака сквамовых клеток головы и шеи (SCCHN)), рака носоглотки (NPC), рака пениса (например, плоскоклеточной карциномы пениса) или вагинального или вульварного рака (например, плоскоклеточной карциномы вагины или вульвы). В некоторых вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3, или композиция или препарат, содержащий молекулу антитела анти-LAG-3, вводится как один агент для лечения рака. В других вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3, или композиция или препарат, содержащий молекулу антитела анти-LAG-3, вводится в сочетании со вторым терапевтическим агентом или воздействием, например, ингибитором PD-1 или ингибитором PD-L1, для лечения рака. В некоторых вариантах осуществления, ингибитор PD-1 представляет собой молекулу антитела анти-PD-1, например, антитела анти-PD-1, описанную в настоящем документе. В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-PD-1 представляет собой PDR001. В других вариантах осуществления, молекула антитела анти-PD-1 представляет собой ниволумаб. В некоторых вариантах осуществления, ингибитор PD-L1 представляет собой молекулу антитела анти-PD-L1, например, молекулу антитела анти-PD-L1, описанную в настоящем документе.

В определенных вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак ободочной и прямой кишки. В некоторых вариантах осуществления, рак ободочной и прямой кишки представляет собой рецидивный рак ободочной и прямой кишки, метастатический рак ободочной и прямой кишки, рак ободочной и прямой кишки с микросателлитной нестабильностью, микросателлитно стабильный рак ободочной и прямой кишки, рак ободочной и прямой кишки профицитный относительно репарации неспаренных оснований или рак ободочной и прямой кишки дефицитный относительно репарации неспаренных оснований. В некоторых вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3, или композиция или препарат, содержащий молекулу антитела анти-LAG-3, вводится как один агент для лечения рака ободочной и прямой кишки. В других вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3, или композиция или препарат, содержащий молекулу антитела анти-LAG-3, вводится в сочетании со вторым терапевтическим агентом или воздействием, например, ингибитором PD-1 или ингибитором PD-L1, для лечения рака ободочной и прямой кишки. В некоторых вариантах осуществления, ингибитор PD-1 представляет собой молекулу антитела анти-PD-1, например, антитела анти-PD-1, описанную в настоящем документе. В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-PD-1 представляет собой PDR001. В других вариантах осуществления, молекула антитела анти-PD-1 представляет собой ниволумаб. В некоторых вариантах осуществления, ингибитор PD-L1 представляет собой молекулу антитела анти-PD-L1, например, молекулу антитела анти-PD-L1, описанную в настоящем документе.

В определенных вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой рак легких. В некоторых вариантах осуществления, рак легкого представляет собой немелкоклеточный рак легкого (NSCLC). В некоторых вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3, или композиция или препарат, содержащий молекулу антитела анти-LAG-3, вводится как один агент для лечения рака легких. В других вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3, или композиция или препарат, содержащий молекулу антитела анти-LAG-3, вводится в сочетании со вторым терапевтическим агентом или воздействием, например, ингибитором PD-1 или ингибитором PD-L1, для лечения рака легких. В некоторых вариантах осуществления, ингибитор PD-1 представляет собой молекулу антитела анти-PD-1, например, антитела анти-PD-1, описанную в настоящем документе. В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-PD-1 представляет собой PDR001. В других вариантах осуществления, молекула антитела анти-PD-1 представляет собой ниволумаб. В некоторых вариантах осуществления, ингибитор PD-L1 представляет собой молекулу антитела анти-PD-L1, например, молекулу антитела анти-PD-L1, описанную в настоящем документе.

В определенных вариантах осуществления, раковое заболевание представляет собой гематологическое раковое заболевание. В некоторых вариантах осуществления, гематологическое раковое заболевание представляет собой лимфому, например, лимфому Ходжкина (HL) или диффузную В-крупноклеточную лимфому (DCBCL) (например, рецидивную или не поддающуюся лечению HL или DCBCL). В некоторых вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3, или композиция или препарат, содержащий молекулу антитела анти-LAG-3, вводится как один агент для лечения гематологического ракового заболевания. В других вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3, или композиция или препарат, содержащий молекулу антитела анти-LAG-3, вводится в сочетании со вторым терапевтическим агентом или воздействием, для лечения гематологического ракового заболевания.

Способы и композиции, описанные в настоящем изобретении, являются пригодными для использования при лечении метастатических поражений, связанных с рассмотренными выше раковыми заболеваниями.

В некоторых вариантах осуществления, способ дополнительно включает определение того, является ли образец ткани опухоли положительным относительно одного или нескольких маркеров из PD-L1, CD8 и IFN-γ, и если образец ткани опухоли является положительным относительно одного или нескольких, например, двух или всех трех маркеров, тогда пациенту вводят терапевтически эффективные количества молекул антитела анти-LAG-3, необязательно, в сочетании с одним или несколькими другими иммуномодуляторами или противораковыми агентами, как описано в настоящем документе.

В некоторых вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 применяется для лечения рака, который экспрессирует LAG-3. Раковые заболевания, экспрессирующие LAG-3 включают, например, рак ободочной и прямой кишки (Xiao and Freeman Cancer Discov. 2015; 5(1):16-8), рак молочной железы (Bottai et al. Breast Cancer Res. 2016; 18(1): 121), рак простаты (Sfanos et al. Clin Cancer Res. 2008; 14(11):3254-61), рак легких (He et al. J Thorac Oncol. 2017; 12(5): 814-823) и рак печени (Pedroza-Gonzalez et al. Oncoimmunology. 2015; 4(6):e1008355). Раковое заболевание, экспрессирующее LAG-3, может представлять собой метастатическое раковое заболевание.

В других вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 применяется для лечения рака, который отличается высокой микросателлитной нестабильностью (MSI-H) или является дефицитным относительно репарации неспаренных оснований (dMMR). Идентификация MSI-H или dMMR статуса опухоли для пациентов может определяться, например, с использованием исследований с помощью цепной реакции полимеразы (PCR) относительно статуса MSI-H или иммуногистохимических (IHC) исследований относительно dMMR. Способы идентификации статуса MSI-H или dMMR опухоли описаны, например, в Ryan et al. Crit Rev Oncol Hematol. 2017; 116:38-57; Dietmaier and Hofstadter. Lab Invest 2001, 81:1453-1456; Kawakami et al. Curr Treat Options Oncol. 2015; 16(7): 30).

Сочетанная терапия, описанная в настоящем документе, может включать композицию по настоящему изобретению, приготовленную совместно и/или вводимую совместно с одним или несколькими дополнительными терапевтическими агентами, например, одним или несколькими противораковыми агентами, цитотоксичными или цитостатическими агентами, с гормональным лечением, вакцинами и/или другой иммунотерапией. В других вариантах осуществления, молекулы антитела вводятся в сочетании с другими терапевтическими воздействиями лечения, включая хирургию, облучение, криохирургию и/или термотерапию. Такая сочетанная терапия может с преимуществом использовать более низкие дозировки вводимых терапевтических агентов, устраняя таким образом возможные токсичности или осложнения, связанные с различными видами монотерапии.

Способы, композиции и сочетания, описанные в настоящем документе (например, антитела анти-LAG-3 и способы их применения), можно использовать в сочетании с другими агентами или терапевтическими воздействиями, например, со вторым терапевтическим агентом, выбранным из одного или нескольких агентов, перечисленных в Таблице 6 WO 2017/019897, содержание которой включены в качестве ссылок во всей своей полноте. В одном из вариантов осуществления, способы, описанные в настоящем документе, включают введение субъекту молекулы антитела анти-LAG-3, как описано в WO2017/019894 (необязательно в сочетании с одним или несколькими ингибиторами PD-1, PD-L1, TIM-3, CEACAM (например, CEACAM-1 и/или CEACAM-5) или CTLA-4)), кроме того, они включают введение второго терапевтического агента, выбранного из одного или нескольких агентов, перечисленных в Таблице 6 WO 2017/019897, в количестве эффективном для лечения или предотвращения расстройства, например, расстройства, как описано в настоящем документе, например, рака. Когда их вводят в сочетании, молекула антитела анти-LAG-3, дополнительный агент (например, второй или третий агент) или все вместе, могут вводиться в количестве или при дозе, которая выше, ниже или такая же как и количество или дозировка каждого агента, используемого индивидуально, например, в качестве монотерапии. В определенных вариантах осуществления, вводимое количество или дозировка молекулы антитела анти-LAG-3, дополнительного агента (например, второго или третьего агента), или всего вместе, ниже (например, по меньшей мере, на 20%, по меньшей мере, на 30%, по меньшей мере, на 40% или, по меньшей мере, на 50%), чем количество или дозировка каждого агента, применяемого индивидуально, например, в качестве монотерапии. В других вариантах осуществления, количество или дозировка молекулы антитела анти-LAG-3, дополнительного агента (например, второго или третьего агента), или всего вместе, которая дает в результате желаемое воздействие (например, лечение рака) ниже (например, по меньшей мере, на 20%, по меньшей мере, на 30%, по меньшей мере, на 40% или, по меньшей мере, на 50% ниже).

В других вариантах осуществления, дополнительный терапевтический агент выбирается из одного или нескольких агентов, перечисленных в Таблице 6 WO 2017/019894. В некоторых вариантах осуществления, дополнительный терапевтический агент выбирается из одного или нескольких агентов из: 1) ингибитора протеинкиназы C (PKC); 2) ингибитора белка 90 теплового шока (HSP90); 3) ингибитора фосфоинозитид 3-киназы (PI3K) и/или мишени рапамицина (mTOR); 4) ингибитора цитохрома P450 (например, ингибитора CYP17 или ингибитора 17альфа-гидроксилазы/C17-20 лиазы); 5) агента, образующего комплексные соединения с железом; 6) ингибитора ароматазы; 7) ингибитора p53, например, ингибитора взаимодействия p53/Mdm2; 8) агента, индуцирующешго апоптоз; 9) ингибитора ангиогенеза; 10) ингибитора альдостеронсинтазы; 11) ингибитора рецептора белка Smoothened (SMO); 12) ингибитора рецептора пролактина (PRLR); 13) ингибитора передачи сигналов Wnt; 14) ингибитора CDK4/6; 15) ингибитора рецептора 2 фактора роста фибробластов (FGFR2)/рецептора 4 фактора роста фибробласт (FGFR4); 16) ингибитора колоние-стимулирующего фактора макрофагов (M-CSF); 17) ингибитора одного или нескольких процессов из c-KIT, высвобождения гистамина Flt3 (например, FLK2/STK1) или PKC; 18); ингибитора одного или нескольких из VEGFR-2 (например, FLK-1/KDR), PDGFRбета, c-KIT или Raf киназ C; 19) агониста соматостатина и/или ингибитора высвобождения гормона роста; 20) ингибитора анапластической лимфомакиназы (ALK); 21) ингибитора рецептора инсулиноподобого фактора 1 роста (IGF-1R); 22) ингибитора P-гликопротеина 1; 23) ингибитора рецептора фактора роста сосудов эндотелия (VEGFR); 24) ингибитора BCR-ABL киназы; 25) ингибитора FGFR; 26) ингибитора CYP11B2; 27) ингибитора HDM2, например, ингибитора взаимодействия HDM2-p53; 28) ингибитора тирозинкиназы; 29) ингибитора c-MET; 30) ингибитора JAK; 31) ингибитора DAC; 32) ингибитора 11β-гидроксилазы; 33) ингибитора IAP; 34) ингибитора PIM киназы; 35) ингибитора поркупина; 36) ингибитора BRAF, например, BRAF V600E или BRAF дикого типа; 37) ингибитора HER3; 38) ингибитора MEK; или 39) ингибитора липидкиназы, например, как описано в Таблице 6 WO 2017/019894.

Дополнительные варианты осуществления сочетанной терапии, включающих молекулу антитела анти-LAG-3, описанную в настоящем документе, описаны в WO 2017/019894, которая включена в качестве ссылки во всей своей полноте.

Способы лечения инфекционных заболеваний

В настоящем изобретении описываются способы лечения инфекционных заболеваний с использованием молекулы антитела анти-LAG-3 (например, молекулы антитела анти-LAG-3, описанной в настоящем документе), или композиции или препарата, содержащего молекулу антитела анти-LAG-3 (например, композицию или препарат, описанный в настоящем документе). В определенных вариантах осуществления, молекула антитела, композиция или препарат вводятся субъекту согласно режиму дозирования, описанному в настоящем документе.

В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится в количестве эффективном для лечения инфекционного заболевания или его симптомов. В некоторых вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 100 мг примерно до 2000 мг один раз в две недели, один раз в три недели или один раз в четыре недели. Например, молекула антитела анти-LAG-3 может вводиться при дозе примерно от 200 мг примерно до 1000 мг, примерно от 300 мг примерно до 900 мг, примерно от 200 мг примерно до 600 мг, примерно от 300 мг примерно до 500 мг, примерно от 600 примерно до 1000 мг, примерно от 700 мг примерно до 900 мг или примерно от 400 мг примерно до 800 мг один раз в три недели или один раз в четыре недели. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 300 мг до 500 мг (например, примерно 400 мг) один раз в три недели. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 700 мг примерно до 900 мг (например, примерно 800 мг) один раз в четыре недели. В одном из вариантов осуществления, молекула антитела анти-LAG-3 вводится при дозе примерно от 500 мг примерно до 700 мг (например, примерно 533 мг или примерно 600 мг) один раз в четыре недели.

Определенные способы, описанные в настоящем документе, используются для лечения субъектов, которые экспонируются для конкретных токсинов или патогенов. Без желания ограничиваться теорией, предполагается, что в некоторых вариантах осуществления, антитела анти-LAG-3 могут стимулировать уничтожение целевых клеток, медиируемое NK клетками, и могут усиливать секретирование IFN-гамма и пролиферацию Т-лимфоцитов CD4+. Соответственно, в определенных вариантах осуществления, молекулы антитела анти-LAG-3, композиции и препараты, описанные в настоящем документе, являются пригодными для использования при стимулировании иммунной реакции на инфекционный агент. Соответственно, другой аспект настоящего изобретения предлагает способ лечения инфекционного заболевания у субъекта, включающий введение субъекту молекулы антитела анти-LAG-3 или композиции или препарата, содержащего молекулу антитела анти-LAG-3, например, согласно режиму дозирования, описанному в настоящем документе, так что субъект излечивается от инфекционного заболевания. При лечении инфекции (например, острой и/или хронической), введение молекул антитела анти-LAG-3 может объединяться с обычными видами лечениями, в дополнение или вместо стимулирования природной иммунной защиты хозяина от инфекции. Природная иммунная защита хозяина от инфекции включает, но, не ограничиваясь этим воспаление, повышение температуры тела, медиируемую антителом защиту хозяина, защиту хозяина, медиируемую T-лимфоцитами, включая секрецию лимфокинов и цитотоксичные T-лимфоциты (особенно в ходе вирусной инфекции), медиируемый комплементом лизис и опсонизацию (облегченный фагоцитоз) и фагоцитоз. Способность молекул антитела анти-LAG-3 реактивировать дисфункциональные T-лимфоциты была бы полезной при лечении хронических инфекций, в особенности таких, при которых клеточно-медиируемый иммунитет является важным для полного выздоровления.

Подобно их применению к опухолям, как обсуждается в предыдущем разделе, молекулы антитела анти-LAG-3, композиции и препараты, описанные в настоящем документе, можно использовать сами по себе или в сочетании со вторым терапевтическим агентом или воздействием, или как вспомогательное средство, в сочетании с вакциной, для стимулирования иммунной реакции на патоген или токсин. Примеры патогенов, для которых терапевтический подход может быть особенно полезным, включают патогены, для которых в настоящее время нет эффективной вакцины или патогены, для которых обычные вакцины являются не полностью эффективными. Они включают, но, не ограничиваясь этим ВИЧ, гепатиты (A, B и C), грипп, герпес, гиардию, малярию, лейшманию, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa. Терапия с помощью молекул антитела анти-LAG-3 является также полезной против установленных инфекций под действием агентов, таких как ВИЧ, которые презентируют измененные антигены в ходе инфекций.

Соответственно, в некоторых вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3, композиция или препарат, описанный в настоящем документе, применяется для лечения субъекта, который имеет инфекцию или имеет риск инфицирования. Инфекция относится, например, к заболеванию или состоянию, приписываемому присутствию в хозяине постороннего организма или агента, который размножается в хозяине. Инфекции, как правило, включают преодоление нормальной слизистой или другого тканевого барьера инфицирующим организмом или агентом. Субъект, который имеет инфекцию, представляет собой субъекта, имеющего объективно измеряемые инфекционные организмы или агенты, присутствующие в организме субъекта. Субъект, имеющий риск инфицирования, представляет собой субъекта, который предрасположен к развитию инфекции. Такой субъект может включать, например, субъекта, который, как известно или как ожидается, экспонировался или будет экспонироваться для инфицирующего организма или агента. Субъект, имеющий риск инфицирования, также может включать субъекта с состоянием, ассоциируемым с ослабленной способностью к установлению иммунной реакции на инфицирующий организм или агент, например, субъекта с наследственным или приобретенным иммунодефицитом, субъекта, подвергающемуся радиационной терапии или химиотерапии, субъекта с ожоговым поражением, субъекта с травматическим поражением, субъекта, подвергающегося хирургической операции или другой инвазивной медицинской или зубоврачебной процедуре.

Инфекции в широком смысле классифицируются как бактериальные, вирусные, грибковые или паразитарные по отношению к категории вовлеченного инфицирующего организма или агента. Другие менее распространенные типы инфекции включают, например, инфекции, включающие риккетсии, микоплазму и агенты, вызывающие почесуху, губкообразную энцефалопатию крупного рогатого скота (BSE) и прионные заболевания (например, куру и болезнь Крейтцфельда-Якоба). Примеры бактерий, вирусов, грибков и паразитов, которые вызывают инфекцию, хорошо известны в данной области. Инфекция может быть острой, подострой, хронической или латентной, и она может быть местной или системной. Кроме того, инфекция может быть в основном внутриклеточной или внеклеточной, в ходе, по меньшей мере, одной фазы жизненного цикла инфицирующего организма или агента в хозяине.

Вирусы

В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3, композиция или препарат, описанный в настоящем документе, применяется для лечения вирусной инфекции или заболевания, ассоциируемого с вирусом.

Примеры вирусов, которые как обнаружено, вызывают инфекции у людей, включают, но, не ограничиваясь этим: Retroviridae (например, вирусы иммунодефицита человека, такие как ВИЧ-1 (также упоминается как HTLV-III), ВИЧ-2, LAV или HTLV-III/LAV или ВИЧ-III, и другие изоляты, такие как ВИЧ-LP; Picornaviridae (например, полиовирусы, вирус гепатита A; энтеровирусы, вирусы коксаки человека, риновирусы, ЕСНО-вирусы); Calciviridae (например, штаммы, которые вызывают гастроэнтерит); Togaviridae (например, вирусы лошадиного энцефалита, вирусы краснухи; Flaviviridae (например, вирусы лихорадка денге, вирусы энцефалита, вирусы желтой лихорадки); Coronaviridae (например, коронавирусы); Rhabdoviridae (например, вирусы везикулярного стоматита, вирусы бешенства); Filoviridae (например, вирусы Эбола); Paramyxoviridae (например, вирусы парагриппа, вирус эпидемического паротита, вирусы кори, респираторно-синцитиальный вирус); Orthomyxoviridae (например, вирусы гриппа); Bungaviridae (например, вирусы Хантаан, вирусы бунга, флебовирусы и найровирусы); Arena viridae (вирусы геморрагической лихорадки); Reoviridae (например, реовирусы, орбивирусы и ротавирусы); Birnaviridae; Hepadnaviridae (вирус гепатита B); Parvoviridae (парвовирусы); Papovaviridae (вирусы папилломы, вирусы полиомы); Adenoviridae (большинство аденовирусов); Herpesviridae (вирус простого герпеса (HSV) 1 и 2, вирус ветряной оспы, цитомегаловирус (CMV), вирус герпеса; Poxyiridae (вирусы оспы, вирусы коровьей оспы, поксвирусы); и Iridoviridae (например, вирус африканской лихорадки свиней); и неклассифицированные вирусы (например, этиологические агенты губкоообразных энцефалопатий, агент дельта гепатита (считается дефектным сателлитом вируса гепатита B), агенты гепатиты не-A, не-B (класс 1=переносится энтерально; класс 2=переносится парентерально (например, гепатит C); Norwalk и родственные вирусы и астровирусы). Некоторые примеров патогенных вирусов, вызывающих инфекции, излечиваемые с помощью способов по настоящему изобретению включают ВИЧ, гепатит (A, B или C), вирус герпеса (например, VZV, HSV-1, HAV-6, HSV-II, и CMV, вирус Эпштейна-Барра), аденовирус, вирус гриппа, флавивирусы, ЕСНО-вирус, риновирус, вирус коксаки, коронавирус, респираторно-синцитиальный вирус, вирус эпидемического паротита, ротавирус, вирус кори, вирус краснухи, парвовирус, вирус коровьей оспы, вирус HTLV, вирус денге, папилломавирус, вирус моллюска, полиовирус, вирус бешенства, вирус JC и арбовирусный энцефалит.

Для инфекций, возникающих в результате воздействия вирусов, молекулы антитела анти-LAG-3 могут объединяться посредством применения до, после или одновременно с применением стандартной терапии для лечения вирусных инфекций. Такая стандартная терапия изменяется в зависимости от типа вируса, хотя введение сыворотки человека, содержащей антитела (например, IgA, IgG) специфичные к вирусу, может быть эффективным в большинстве случаев.

Некоторые примеры патогенных вирусов, вызывающих инфекции, которые могут лечиться с помощью этих способов, включают ВИЧ, гепатиты (A, B или C), вирусы герпеса (например, VZV, HSV-1, HAV-6, HSV-II, и CMV, вирус Эпштейна-Барра), аденовирус, вирус гриппа, флавивирусы, эховирус, риновирус, вирус коксаки, коронавирус, респираторно-синцитиальный вирус, вирус эпидемического паротита, ротавирус, вирус кори, вирус краснухи, парвовирус, вирус коровьей оспы, вирус HTLV, вирус денге, папилломавирус, вирус моллюска, полиовирус, вирус бешенства, вирус JC, арбовирус энцефалита и эболавирус (например, BDBV, EBOV, RESTV, SUDV и TAFV).

В одном из вариантов осуществления, инфекция представляет собой инфекцию гриппа. Инфекция гриппа может давать в результате повышение температуры тела, кашель, боль в мышцах, головную боль и недомогание, которые часто происходят при сезонных эпидемиях. Грипп также ассоциируется с рядом постинфекционных расстройств, таких как энцефалит, миоперикардит, синдром Гудпасчера и синдром Рейе. Инфекция гриппа также подавляет нормальную пульмонарную антибактериальную защиту, так что пациенты, выздоравливающие от гриппа, имеют повышенный риск развития бактериальной пневмонии. Поверхностные белки вируса гриппа показывают заметную антигенную вариацию, возникающую в результате мутации и рекомбинации. Таким образом, цитолитические T-лимфоциты представляют собой главную лекарственную среду хозяина для устранения вируса после инфекции. Грипп классифицируется на три главных типа: A, B и C. Грипп типа A является уникальным в том, что он заражает как как людей, так и многих других животных (например, свиней, лошадей, птиц и тюленей), и представляет собой главную причину пандемического гриппа. Также, когда клетка инфицирована двумя различными штаммами грипп типа A, геномы сегментированной РНК двух исходных типов вируса смешиваются в ходе репликации, создавая гибридный репликант, дающий в результате новые эпидермические штаммы. Грипп типа B не реплицируется в животных и таким образом имеет меньшую генетическую вариацию, а грипп типа C имеет только один серотип.

Большинство обычных видов терапии представляют собой паллиативы для симптомов, возникающих в результате инфекции, в то время как иммунная реакция хозяина на самом деле полностью устраняет заболевание. Однако определенные штаммы (например, грипп типа A) могут вызывать более серьезные заболевания и смерть. Грипп типа A может лечиться как клинически, так и профилактически, посредством введения ингибиторов циклических аминов амантадина и ремантадина, которые замедляют репликацию вируса. Однако клиническая польза от этих лекарственных средств является ограниченной из-за относительно высокой частоты отрицательных реакций, их узкого антивирусного спектра (только грипп типа A) и склонности вируса к установлению резистентности. Введение сыворотки антитела IgG в главные поверхностные белки гриппа, гемагглютинина и нейраминидазы, может предотвратить пульмонарную инфекцию, в то время как для предотвращения инфицирования верхних дыхательных путей и трахеи требуется IgA слизистых. Наиболее эффективное современное лечение гриппа представляет собой вакцинацию с введением вируса, дезактивированного с помощью формалина или β-пропиолактона.

В другом варианте осуществления, инфекция представляет собой инфекцию гепатита, например, инфекцию гепатита B или C.

Вирус гепатита B (HB-V) является наиболее инфекционным известным гемоконтактным патогеном. Он представляет собой главную причину острого и хронического гепатита и печеночной карциномы, а также пожизненной хронической инфекции. После инфицирования, вирус реплицируется в гепатоцитах, которые затем также распространяют поверхностный антиген HBsAg. Детектирование избыточных уровней HBsAg в сыворотке используют как стандартный способ диагностики инфекции гепатита B. Острая инфекция может разрешиться или она может развиться в хроническую персистентную инфекцию. Современные способы лечения хронического HBV включают α-интерферон, который увеличивает экспрессирование антигена лейкоцита человека класса I (HLA) на поверхности гепатоцитов, тем самым облегчая их распознавание цитотоксическими T-лимфоцитами. В дополнение к этому, нуклеозидные аналоги ганцикловир, фамцикловир и ламивудин также показывают некоторую эффективность при лечении инфекции HBV при клинических исследованиях. Дополнительные виды лечения для HBV включают пегилированный α-интерферон, аденфовир, энтекавир и телбувидин. Хотя пассивный иммунитет может придаваться посредством парентерального введения антител анти-HBsAg сыворотки, вакцинация дезактивированным или рекомбинантным HBsAg также придает резистентность инфекции. Молекулы антитела анти-LAG-3 могут объединяться с обычными видами лечения инфекции гепатита B для получения терапевтического преимущества.

Инфекция вируса гепатита C (HC-V) может приводить к появлению хронической формы гепатита, дающей в результате цирроз. Хотя симптомы сходны с инфекциями, возникающими в результате инфицирования гепатитом B, в явную противоположность HB-V, инфицированные хозяева могут не иметь симптомов в течение 10-20 лет. Молекула антитела анти-LAG-3 может вводиться как монотерапия или в сочетании со стандартным лечением инфекции гепатита C. Например, молекула антитела анти-LAG-3 может вводиться вместе с одним или несколькими препаратами из Sovaldi (софосбувир), Olysio (симепревир), плюс рибавирин или пегилированный интерферон. Хотя одобрены также режимы, которые включают Incivek (телапревир) или Victrelis (боцепревир) плюс рибавирин и пегилированный интерферон, они ассоциируются с повышенными побочными воздействиями и более продолжительным лечением и, по этой причине, не считаются предпочтительными режимами.

Обычное лечение инфекции HC-V включает введение сочетания α-интерферона и рибавирина. Перспективная потенциальная терапия для инфекции HC-V представляет собой ингибитор протеазы телапревир (VX-960). Дополнительные виды лечения включают: антитело анти-PD-1 (MDX-1106, Medarex), бавитуксимаб (антитело, которое связывает анионный фосфолипид фосфатидилсерин способом зависимым от B2-гликопротеина I, Peregrine Pharmaceuticals), антитело (антитела) анти-HPV с покрытием из вирусного белка E2 (например, ATL 6865-Ab68+Ab65, XTL Pharmaceuticals) и Civacir® (поликлональный иммуннглобулин анти-HCV человека). Антитела анти-LAG-3 по настоящему изобретению могут объединяться с одним или несколькими этими видами лечения инфекции гепатита C для терапевтического преимущества. Ингибиторы протеазы, полимеразы и NS5A, которые можно использовать в сочетании с молекулами антитела анти-LAG-3 для специфичного лечения инфекции гепатита C, включают молекулы, описанные в патенте США 2013/0045202, включенном в настоящий документ в качестве ссылки.

В другом варианте осуществления, инфекция представляет собой вирус кори. После инкубационного периода 9-11 дней, у хозяев, инфицированных вирусом кори, развивается повышение температуры тела, кашель, насморк и конъюнктивит. В течение 1-2 дней развивается, эритематозная макулопапулезная сыпь, которая быстро распространяется по всему телу. Поскольку инфекция подавляет также клеточный иммунитет, хозяин имеет более высокий риск развития бактериальных суперинфекций, включая воспаление среднего уха, пневмонию и постинфекционный энцефаломиелит. Острая инфекция связана со значительной заболеваемостью и смертельностью, особенно, у плохо питающихся больных.

Лечение кори включает пассивное введение смешанного IgG человека, который может предотвратить инфекцию у неиммуннизированных субъектов, даже если его принимают через неделю после экспонирования. Однако предварительная иммунизация живым ослабленным вирусом является наиболее эффективным лечением и предотвращает заболевание у более 95% иммунизированных. Поскольку имеется один серотип этого вируса, одна иммунизация или инфекция, как правило, дает в результате защиту на всю жизнь после инфекции.

У малой доли инфицированных хозяев, корь может развиться в SSPE, которое представляет собой хроническое прогрессирующее неврологическое расстройство, возникающее в результате постоянного инфицирования центральной нервной системы. SSPE вызывается клональными вариантами вируса кори с дефектами, которые влияют на сборку и почкование вириона. Для этих пациентов была бы желательной реактивация T-лимфоцитов с помощью молекул антитела анти-LAG-3 таким образом, чтобы облегчить удаление вируса.

В другом варианте осуществления, инфекция представляет собой ВИЧ. ВИЧ воздействует на клетки CD4⁺, включая T-лимфоциты, моноциты-макрофаги, фолликулярные дендритные клетки и клетки Лангерганса, и хелперные/индукторые клетки CD4⁺ обедняются. В результате, хозяин приобретает острый дефект клеточно-медиируемого иммунитета. Инфицирование ВИЧ дает в результате СПИД, по меньшей мере, у 50% индивидуумов и переносится посредством полового контакта, введения инфицированной крови или продуктов крови, искусственного осеменения инфицированным семенем, экспонирования для содержащих кровь иголок или шприцов и передачи от инфицированной матери ребенку в ходе родов.

Хозяин, инфицированный ВИЧ, может быть бессимптомным или может развить острое заболевание, которое напоминает мононуклеоз: повышение температуры тела, головную боль, боль в горле, недомогание и сыпь. Симптомы могут прогрессировать до прогрессивной иммунной дисфункции, включая постоянное повышение температуры тела, ночную потливость, потерю веса, необъясненный понос, экзему, псориаз, себорейную экзему, опоясывающий герпес, кандидозный стоматит и волосистую лейкоплакию полости рта. Оппортунистические инфекции хозяина паразитов являются распространенными у пациентов, инфекции которых развиваются в СПИД.

Лечение ВИЧ включает противовирусную терапию, включая нуклеозидные аналоги, зидовудин (AST) либо сам по себе или в сочетании с диданозином или зальцитабином, дидеоксиинозином, дидеоксицитидином, ламидвудином, ставудином; ингибиторы обратной транскриптазы, такие как делавирдин, невирапин, ловирид, и ингибиторы протеиназы, такие как саквинавир, ритонавир, индинавир и нелфинавир. Молекулы антитела анти-LAG-3 могут объединяться с обычным лечением инфекции ВИЧ для получения терапевтического преимущества.

В другом варианте осуществления, инфекция представляет собой цитомегаловирус (CMV). Инфекция CMV часто ассоциируется со стойкой, латентной и рецидивирующей инфекцией. CMV инфицирует и остается латентным в моноцитах и прогениторных клетках гранулоцитов-моноцитов. Клинические симптомы CMV включают симптомы подобные мононуклеозу (то есть, повышение температуры тела, воспаленные гланды, недомогание) и тенденцию к развитию аллергической кожной сыпи на антибиотики. Вирус распространяется посредством прямого контакта. Вирус существует в моче, слюне, сперме и, до меньшей степени, в других телесных жидкостях. Передача может также осуществляться от инфицированной матери к ее плоду или новорожденному и посредством переливания крови и трансплантации органов. Инфекция CMV дает в результате общее ослабление клеточного иммунитета, отличающееся ослабленными бластогенными реакциями на неспецифичные митогены и на специфичные антигены CMV, уменьшением цитотоксичной способности и увеличением количества лимфоцитов CD8 среди лимфоцитов CD4⁺.

Лечение инфекции CMV включает антивирусные препараты ганцикловир, фоскарнет и цидовир, но эти лекарственные препараты, как правило, прописывают только пациентам с ослабленным иммунитетом. Молекулы антитела анти-LAG-3 могут объединяться с обычным лечением инфекций цитомегаловируса для терапевтического преимущества.

В другом варианте осуществления, инфекция представляет собой вирус Эпштейна-Барра (EBV). EBV может устанавливать стойкие и латентные инфекции и воздействует, прежде всего, на B-клетки. Инфицирование EBV дает в результате клиническое состояние инфекционного мононуклеоза, которое включает повышение температуры тела, боль в горле, часто с эксудатом, общую лимфаденопатию и спленомегалию. Присутствует также гепатит, который может развиваться в желтуху.

Хотя типичное лечение инфекции EBV является паллиативным для симптомов, EBV ассоциируется с развитием определенных раковых заболеваний, таких как лимфома Беркитта и рак носоглотки. Таким образом, устранение вирусной инфекции до этих осложнений представляло бы собой большую пользу. Молекулы антитела анти-LAG-3 могут объединяться с обычным лечением вируса инфекции Эпштейна-Барра для терапевтического преимущества.

В другом варианте осуществления, инфекция представляет собой вирус простого герпеса (HSV). HSV переносится посредством прямого контакта с инфицированным хозяином. Прямое инфицирование может быть бессимптомным, но, как правило, дает в результате пузырьки, содержащие инфекционные частицы. Заболевание проявляется как циклы активных периодов заболевания, при которых появляются и исчезают поражения, поскольку вирус латентно инфицирует нервный узел для последующей вспышки. Поражения могут быть на лице, гениталиях, глазах и/или на руках. В некоторых случаях, инфекция может также вызывать энцефалит.

Лечение инфекции герпеса направлено в основном на разрешение симптоматических вспышек и включает системные противовирусные лекарственные средства, такие как: ацикловир (например, Zovirax®), валацикловир, фамцикловир, пенцикловир, и местные лекрственные средства, такие как докосанол (Abreva®), тромантадин и зилактин. Удаление латентных инфекций герпеса имело бы большую клиническую пользу. Молекулы антитела анти-LAG-3 могут объединяться с обычным лечением инфекции вируса герпеса для терапевтического преимущества.

В другом варианте осуществления, инфекция представляет собой T-лимфотропный вирус человека (HTLV-1, HTLV-2). HTLV переносится посредством полового контакта, кормления грудью или экспонирования для зараженной крови. Вирус активирует подмножество T_H-леток, называемых Th1-клетками, приводя в результате к их сверхпролиферации и сверхпродуцированию, связанных с Th1 цитокинами (например, IFN-γ и TNF-α). Это, в свою очередь, дает в результате подавление Th2-лимфоцитов и уменьшение продуцирования Th2-цитокинов (например, IL-4, IL-5, IL-10 и IL-13), вызывая уменьшение способности инфицированного хозяина к установлению адекватной иммунной реакции на инвазивные организмы, требующей Th2-зависимой реакции для устранения (например, паразитарных инфекций, продуцирования антител слизистых и гуморальных антител).

Инфекции HTLV приводят к оппортунистическим инфекциям, приводящим в результате к бронхоэктазу, дерматиту и суперинфекциям Staphylococcus spp. и Strongyloides spp., приводящим в результате к смерти от полимикробного сепсиса. Инфекция HTLV может также непосредственно приводить к лейкозу/лимфоме взрослых T-лимфоцитов и к заболеванию прогрессирующей демиелинизации верхних мотонейронов, известному как HAM/TSP. Устранение латентных инфекций HTLV представляло бы собой большую клиническую пользу. Молекулы антитела анти-LAG-3 могут объединяться с обычным лечением инфекции HTLV для терапевтического преимущества.

В другом варианте осуществления, инфекция представляет собой вирус папилломы человека (HPV). HPV в основном воздействует на кератиноциты и существует в двух формах: кожной и генитальной. Передача, как предполагается, происходит посредством прямого контакта и/или сексуальной активности. Как кожная, так и генитальная инфекция HPV, могут давать в результате папилломы и латентные инфекции, а иногда - возобновляющиеся инфекции, которые контролируются иммунитетом хозяина, который контролирует симптомы и блокирует появление папиллом, но оставляет хозяина способным передавать инфекции другим.

Инфицирование HPV может также приводить к определенным видам рака, таким как рак шейки матки, анальный, вульварный, пенильный и орофарингиальный рак. Нет известного лечения для инфекции HPV, но современное лечение представляет собой местное нанесение имиквимода, который стимулирует иммунную систему для влияния на пораженную область. Устранение латентных инфекций HPV представляло бы собой большую клиническую пользу. Антитела анти-LAG-3 по настоящему изобретению могут объединяться с обычным лечением инфекции HPV для терапевтического преимущества.

В другом варианте осуществления, инфекция представляет собой вирус Эбола (EBOV). EBOV пре6дставляет собой один из пяти известных вирусов рода Ebolavirus. EBOV вызывает острую и часто фатальную геморрагическую лихорадку у людей и млекопитающих, известную как заболевание вируса Эбола (EVD). Передача происходит посредством контакта с кровью, выделениями, органами или другими телесными жидкостями инфицированных пациентов. В настоящее время, доказанного лечения или вакцины не существует.

Бактерии

В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3, композиция или препарат, описанный в настоящем документе, применяются для лечения бактериальной инфекции или заболевания, ассоциируемого с бактерией.

Бактерии включают как грамм-отрицательные, так грамм-положительные бактерии. Примеры грамм-положительных бактерий включают, но, не ограничиваясь этим, вид Pasteurella, вид Staphylococci и Streptococcus шейки матки. Примеры грамм-отрицательных бактерий включают, но, не ограничиваясь этим, Escherichia coli, cervical Pseudomonas и cervical Salmonella. Конкретные примеры инфекционных бактерий включают, но, не ограничиваясь этим: Helicobacter pyloris, Borrelia burgdorferi, Legionella pneumophilia, Mycobacteria spp. (например, M. tuberculosis, M. avium, M. intracellulare, M. kansasii, M. gordonae), Staphylococcus aureus, Neisseria gonorrhoeae, Neisseria meningitidis, Listeria monocytogenes, Streptococcus pyogenes (группа A Streptococcus), Streptococcus agalactiae (группа B Streptococcus), Streptococcus (группа viridans), Streptococcus faecalis, Streptococcus bovis, Streptococcus (анаэробные spp.), Streptococcus pneumoniae, pathogenic Campylobacter spp., Enterococcus spp., Haemophilus influenzae, Bacillus anthracis, Corynebacterium diphtheriae, Corynebacterium spp., Erysipelothrix rhusiopathiae, Clostridium perfringens, Clostridium tetani, Enterobacter aerogenes, Klebsiella pneumoniae, Pasturella multocida, Bacteroides spp., Fusobacterium nucleatum, Streptobacillus moniliformis, Treponema pallidum, Treponema pertenue, Leptospira, Mycobacterium leprae, Rickettsia и Actinomyces israelii. Некоторые примеры патогенных бактерий, вызывающих инфекции, излечиваемые способами, описанными в настоящем документе, включают хламидии, риккетсиозы бактерии, микобактерии, стафилококки, стрептококки, пневмококки, менингококки и гонококки, клебсиеллу, протей, серратию, синегнойную палочку, легионеллы, дифтерию, сальмонеллы, бациллы, холеру, тетанус, ботулизм, антракс, чуму, лептоспироз и бактерии болезни Лайма.

Некоторые примеры патогенных бактерий, вызывающих инфекции, излечиваемые с помощью способов по настоящему изобретению, включают сифилис, chlamydia, rickettsial bacteria, mycobacteria, staphylococci, streptococci, pneumonococci, meningococci и conococci, klebsiella, proteus, serratia, pseudomonas, legionella, diphtheria, salmonella, bacilli, cholera, tetanus, botulism, anthrax, plague, leptospirosis и Lymes disease. Молекулы антитела анти-LAG-3 можно использовать в сочетании с существующими воздействиями лечения указанных выше инфекций. Например, лечение для сифилиса включает пенициллин (например, пенициллин G), тетрациклин, доксициклин, цефтриаксон и азитромицин.

Болезнь Лайма, вызываемая Borrelia burgdorferi, передается людям посредством укусов клещей. Заболевание сначала проявляется как локальная сыпь, затем следуют симптомы, подобные гриппу, включая недомогание, повышение температуры тела, головную боль, ригидность затылка и боль в суставах. Более поздние проявления могут включать мигрирующий и многосуставный артрит, неврологические и сердечные поражения с параличом черепного нерва и радикулопатию, миокардит и аритмию. Некоторые случаи болезни Лайма становятся стойкими, давая в результате необратимые поражения подобные третичному сифилису. Современная терапия болезни Лайма включает в основном введение антибиотиков. Стойкие к антибиотикам штаммы могут лечиться гидроксихлорохином или метотрексатом. Пациенты, не поддающиеся лечению антибиотиками, пациенты с невропатической болью могут лечиться габапентином. Миноциклин может быть полезным при запущенной/хронической болезни Лайма с неврологическими или другими воспалительными проявлениями.

Другие формы боррелиоза, такие как возникающие в результате инфекции B. recurentis, B. hermsii, B. turicatae, B. parikeri., B. hispanica, B. duttonii и B. persica, а также лептоспироза (например, L. interrogans), как правило, разрешаются самопроизвольно, если только титры в крови не достигают концентраций, вызывающих внутрипеченочную обструкцию.

Грибки и паразиты

В определенных вариантах осуществления, молекула антитела анти-LAG-3, композиция или препарат, описанный в настоящем документе, применяется для лечения грибковой или паразитарной инфекции или заболевания, ассоциированного с грибком или паразитом.

Примеры грибков включают: Aspergillus spp., Blastomyces dermatitidis, Candida albicans, другие Candida spp., Coccidioides immitis, Cryptococcus neoformans, Histoplasma capsulatum, Chlamydia trachomatis, Nocardia spp., Pneumocystis carinii. Некоторые примеры патогенных грибков, вызывающих инфекции, которые могут лечиться с помощью способов по настоящему изобретению. включают Candida (albicans, krusei, glabrata, tropicalis, и тому подобное), Cryptococcus neoformans, Aspergillus (fumigatus, niger, и тому подобное), Genus Mucorales (mucor, absidia, rhizophus), Sporothrix schenkii, Blastomyces dermatitidis, Paracoccidioides brasiliensis, Coccidioides immitis и Histoplasma capsulatum.

Паразиты включают, но, не ограничиваясь этим, гемоконтактные и/или тканевые паразиты такие как Babesia microti, Babesia divergens, Entamoeba histolytica, Giardia lamblia, Leishmania tropica, Leishmania spp., Leishmania braziliensis, Leishmania donovani, Plasmodium falciparum, Plasmodium malariae, Plasmodium ovale, Plasmodium vivax, и Toxoplasma gondii, Trypanosoma gambiense и Trypanosoma rhodesiense (африканская сонная болезнь), Trypanosoma cruzi (болезнь Шагаса) и Toxoplasma gondii, плоские черви, круглые черви. Некоторые примеры патогенных паразитов, вызывающих инфекции, которые могут лечиться с помощью способов, описанных в настоящем документе, включают Entamoeba histolytica, Balantidium coli, Naegleriafowleri, Acanthamoeba sp., Giardia lambia, Cryptosporidium sp., Pneumocystis carinii, Plasmodium vivax, Babesia microti, Trypanosoma brucei, Trypanosoma cruzi, Leishmania donovani, Toxoplasma gondi и Nippostrongylus brasiliensis.

Некоторые примеры патогенных грибков, вызывающих инфекции, которые могут лечиться с помощью способов по настоящему изобретению, включают Candida (albicans, krusei, glabrata, tropicalis, и тому подобное), Cryptococcus neoformans, Aspergillus (fumigatus, niger, и тому подобное), Genus Mucorales (mucor, absidia, rhizophus), Sporothrix schenkii, Blastomyces dermatitidis, Paracoccidioides brasiliensis, Coccidioides immitis и Histoplasma capsulatum.

Некоторые примеры патогенных паразитов, вызывающие инфекции, которые могут лечиться с помощью способов, описанных в настоящем изобретении, включают Entamoeba histolytica, Balantidium coli, Naegleriafowleri, Acanthamoeba sp., Giardia lambia, Cryptosporidium sp., Pneumocystis carinii, Plasmodium vivax, Babesia microti, Trypanosoma brucei, Trypanosoma cruzi, Leishmania donovani, Toxoplasma gondi и Nippostrongylus brasiliensis.

Нуклеиновые кислоты

Молекулы антитела анти-LAG-3, описанные в настоящем документе, могут кодироваться нуклеиновыми кислотами, описанными в настоящем документе. Нуклеиновые кислоты можно использовать для продуцирования молекул антитела анти-LAG-3, описанных в настоящем документе.

В определенных вариантах осуществления, нуклеиновая кислота содержит последовательности нуклеотидов, которые кодируют вариабельные области тяжелой и легкой цепи и CDR молекул антитела анти-LAG-3, как описано в настоящем документе. Например, настоящее изобретение описывает первую и вторую нуклеиновую кислоту, кодирующую вариабельные области тяжелой и легкой цепи, соответственно, молекулы антитела анти-LAG-3, выбранной из одной или нескольких молекул антител, описанных в настоящем изобретении, например, антитела из Таблицы 1 патента США 2015/0259420. Нуклеиновая кислота может содержать последовательность нуклеотидов, кодирующую любую из последовательностей аминокислот в Таблицах в настоящем документе, или последовательность, по существу, идентичную ей (например, последовательность, по меньшей мере, примерно на 85%, 90%, 95%, 99% или более идентичную ей или отличающуюся не более чем на 3, 6, 15, 30 или 45 нуклеотидов от последовательностей, приведенных в Таблице 1. Например, в настоящем документе описаны первая и вторая нуклеиновая кислота, кодирующие вариабельные области тяжелых и легких цепей, соответственно, молекулы антитела анти-LAG-3 выбранной из одной или нескольких, молекул, например, любого из BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (например, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser или BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clone-F, BAP050-Clone-G, BAP050-Clone-H, BAP050-Clone-I или BAP050-Clone-J, как приведено в Таблице 1, или последовательности, по существу, идентичной ей.

В определенных вариантах осуществления, нуклеиновая кислота может содержать последовательность нуклеотидов, кодирующую, по меньшей мере, одну, две или три CDR из вариабельной области тяжелой цепи, имеющей последовательность аминокислот, как приведено в Таблице 1, или последовательность, по существу, гомологичную ей (например, последовательность, по меньшей мере, примерно на 85%, 90%, 95%, 99% или более идентичную ей и/или имеющую одно или несколько замещений, например, консервативных замещений). В некоторых вариантах осуществления, нуклеиновая кислота может содержать последовательность нуклеотидов, кодирующую, по меньшей мере, одну, две или три CDR из вариабельной области легкой цепи, имеющую последовательность аминокислот, как приведено в Таблице 1, или последовательность, по существу, гомологичную ей (например, последовательность, по меньшей мере, примерно на 85%, 90%, 95%, 99% или более идентичную ей и/или имеющую одно или несколько замещений, например, консервативных замещений). В некоторых вариантах осуществления, нуклеиновая кислота может содержать последовательность нуклеотидов кодирующую, по меньшей мере, одну, две, три, четыре, пять или шесть CDR из вариабельных областей тяжелых и легких цепей, имеющих последовательность аминокислот, как приведено в Таблице 1, или последовательность, по существу, гомологичную ей (например, последовательность, по меньшей мере, примерно на 85%, 90%, 95%, 99% или более идентичную ей и/или имеющую одно или несколько замещений, например, консервативных замещений).

В определенных вариантах осуществления, нуклеиновая кислота может содержать последовательность нуклеотидов, кодирующую, по меньшей мере, одну, две или три CDR из вариабельной области тяжелой цепи, имеющей последовательность нуклеотидов, как приведено в Таблице 1, последовательность, по существу, гомологичную ей (например, последовательность, по меньшей мере, примерно на 85%, 90%, 95%, 99% или более идентичную ей и/или способную гибридизироваться при условиях строгости, описанных в настоящем документе). В некоторых вариантах осуществления, нуклеиновая кислота может содержать последовательность нуклеотидов, кодирующую, по меньшей мере, одну, две или три CDR из вариабельной области легкой цепи, имеющей последовательность нуклеотидов, как приведено в Таблице 1, или последовательность, по существу, гомологичную ей (например, последовательность, по меньшей мере, примерно на 85%, 90%, 95%, 99% или более идентичную ей, и/или способную гибридизироваться при условиях строгости, описанных в настоящем документе). В определенных вариантах осуществления, нуклеиновая кислота может содержать последовательность нуклеотидов, кодирующую, по меньшей мере, одну, две, три, четыре, пять или шесть CDR из вариабельных областей тяжелой и легкой цепи, имеющих последовательность нуклеотидов, как приведено в Таблице 1, или последовательность, по существу, гомологичную ей (например, последовательность, по меньшей мере, примерно на 85%, 90%, 95%, 99% или более идентичную ей и/или способную гибридизироваться при условиях строгости, описанных в настоящем документе). Нуклеиновые кислоты, описанные в настоящем изобретении, включают деоксирибонуклеотиды или рибонуклеотиды, или их аналоги. Полинуклеотид может быть либо однонитевым, либо двухнитевым, и, если он однонитевый, он может представлять собой кодирующую нить или некодирующую (антисмысловую) нить. Полинуклеотид может содержать модифицированные нуклеотиды, такие как метилированные нуклеотиды и нуклеотидные аналоги. Последовательность нуклеотидов может прерываться ненуклеотидными компонентами. Полинуклеотид может дополнительно модифицироваться после полимеризации, например, посредством конъюгирования с метящим компонентом. Нуклеиновая кислота может представлять собой рекомбинантный полинуклеотид или полинуклеотид геномной кДНК полусинтетического или синтетического происхождения, который либо не встречается в природе, либо связан с другим полинуклеотидом в искусственном расположении.

В определенных вариантах осуществления, последовательность нуклеотидов, которая кодирует молекулу антитела анти-LAG-3, является кодон-оптимизированной.

В некоторых вариантах осуществления, описываются нуклеиновые кислоты, содержащие последовательности нуклеотидов, которые кодируют вариабельные области тяжелых и легких цепей и CDR молекул антитела анти-LAG-3, как описано в настоящем документе. Например, настоящее изобретение описывает первую и вторую нуклеиновую кислоту, кодирующие вариабельные области тяжелых и легких цепей, соответственно, молекулы антитела анти-LAG-3 согласно Таблице 1 или последовательность, по существу, идентичную ей. Например, нуклеиновая кислота может содержать последовательность нуклеотидов, кодирующую молекулу антитела анти-LAG-3 согласно Таблице 1 или последовательность, по существу, идентичную этой последовательности нуклеотидов (например, последовательность, по меньшей мере, примерно на 85%, 90%, 95%, 99% или более идентичную ей или отличающуюся не более чем на 3, 6, 15, 30 или 45 нуклеотидов от рассмотренной выше последовательности нуклеотидов.

В определенных вариантах осуществления, нуклеиновая кислота может содержать последовательность нуклеотидов, кодирующую, по меньшей мере, одну, две или три CDR или гипервариабельных петель из вариабельной области тяжелой цепи, имеющую последовательность аминокислот, как приведено в Таблице 1, или последовательность, по существу, гомологичную ей (например, последовательность, по меньшей мере, примерно на 85%, 90%, 95%, 99% или более идентичную ей и/или имеющую одно, два, три или более замещений, вставок или делеций, например, консервативных замещений).

В определенных вариантах осуществления, нуклеиновая кислота может содержать последовательность нуклеотидов, кодирующую, по меньшей мере, одну, две или три CDR или гипервариабельных петель из вариабельной области легкой цепи, имеющей последовательность аминокислот, как приведено в Таблице 1, или последовательность, по существу, гомологичную ей (например, последовательность, по меньшей мере, примерно на 85%, 90%, 95%, 99% или более идентичную ей и/или имеющую одно, два, три или более замещений, вставок или делеций, например, консервативных замещений).

В некоторых вариантах осуществления, нуклеиновая кислота может содержать последовательность нуклеотидов, кодирующую, по меньшей мере, одну, две, три, четыре, пять или шесть CDR или гипервариабельных петель из вариабельных областей тяжелых и легких цепей, имеющих последовательность аминокислот, как приведено в Таблице 1, или последовательность, по существу, гомологичную ей (например, последовательность, по меньшей мере, примерно на 85%, 90%, 95%, 99% или более идентичную ей, и/или имеющую одно, два, три или более замещений, вставок или делеций, например, консервативных замещений).

В некоторых вариантах осуществления, нуклеиновая кислота является изолированной или рекомбинантной.

Нуклеиновые кислоты, описанные в настоящем документе, могут присутствовать в одном векторе или в отдельных векторах, присутствующих в одной и той же клетке хозяине или в отдельных клетках хозяевах, как описано в настоящем документе более подробно.

Векторы и клетки хозяева

Молекулы антител анти-LAG-3, описанные в настоящем документе, могут продуцироваться с использованием клеток хозяев и векторов, содержащих нуклеиновые кислоты, описанные в настоящем документе. Нуклеиновые кислоты могут присутствовать в одном векторе или в отдельных векторах, присутствующих в одной и той же клетке хозяине или в отдельных клетках хозяевах.

В одном из вариантов осуществления, векторы содержат нуклеотиды, кодирующие молекулу антитела, описанную в настоящем документе. В одном из вариантов осуществления, векторы содержат последовательности нуклеотидов, описанные в настоящем документе. Векторы включают, но, не ограничиваясь этим, вирус, плазмиду, космиду, лямбда-фаг или искусственную хромосому дрожжей (YAC).

Можно использовать многочисленные системы векторов. Например, один класс векторов использует элементы ДНК, которые получают из вирусов животных, таких, например, как вирус папилломы крупного рогатого скота, вирус полиомы, аденовирус, вирус коровьей оспы, бакуловирус, ретровирус (вирус саркомы Рауса, MMTV или MOMLV) или вирус SV40. Другой класс векторов использует элементы РНК, полученные из вирусов РНК, таких как вирус леса Семлики, восточный конский энцефалит и флавивирусы.

В дополнение к этому, клетки, которые стабильно встраивают ДНК в свои хромосомы, могут выбираться посредством введения одного или нескольких маркеров, которые делают возможной селекцию трансфицированных клеток хозяев. Маркер может обеспечивать, например, прототропию относительно ауксотрофного хозяина, стойкость к биоциду (например, к антибиотикам) или стойкость к тяжелым металлам, таким как медь, или что-либо подобное. Селектируемый маркерный ген может либо непосредственно связываться с последовательностями ДНК, которые должны экспрессироваться, либо вводиться в ту же клетку посредством котрансформации. Также могут потребоваться дополнительные элементы для оптимального синтеза мРНК. Эти элементы могут включать сигналы сплайсирования, а также транскрипционные промоторы, энхансеры и стоп-кодоны.

После приготовления для экспрессии вектора экспрессии или последовательности ДНК, содержащей конструкты, векторы экспрессии могут трансфицироваться или вводиться в соответствующую клетку хозяина. Для достижения этого можно использовать различные технологии, такие, например, как слияние протопластов, кальций-фосфатная преципитация, электропорообразованаие, ретровирусная трансдукция, вирусное трансфицирование, генетическая пушка, трансфицирование на основе липидов или другие обычные технологии. В случае слияния протопластов, клетки выращивают в среде и проверяют на соответствующую активность. Способы и условия культивирования полученных в результате трансфицированных клеток и извлечение продуцируемых молекул антитела известны специалистам в данной области и могут изменяться или оптимизироваться в зависимости от конкретного вектора экспрессии и используемой клетки хозяина млекопитающего, на основе настоящего описания.

В определенных вариантах осуществления, клетка хозяин содержит нуклеиновую кислоту, кодирующую молекулу антитела анти-LAG-3, описанную в настоящем документе. В других вариантах осуществления, клетка хозяин создается методами генной инженерии, чтобы она содержала нуклеиновую кислоту, кодирующую молекулу антитела анти-LAG-3.

В одном из вариантов осуществления, клетка хозяин создается методами генной инженерии посредством использования кассеты экспрессии. Фраза “кассета экспрессии” относится к последовательностям нуклеотидов, которые могут осуществлять экспрессию гена в хозяевах совместимых с такими последовательностями. Такие кассеты могут содержать промотор, открытую рамку считывания с интронами или без них, и стоп-кодон. Может также использовать дополнительные факторы необходимые или полезные при осуществлении экспрессии, такие, например, как индуцируемый промотор. В определенных вариантах осуществления, клетка хозяин содержит вектор, описанный в настоящем документе.

Клетка может представлять собой, но, не ограничиваясь этим, эукариотическую клетку, бактериальную клетку, клетку насекомых или клетку человека. Пригодные для использования эукариотические клетки включают, но, не ограничиваясь этим, клетки Vero, клетки HeLa, клетки COS, клетки CHO, клетки HEK293, клетки BHK и клетки MDCKII. Пригодные для использования клетки насекомых включают, но, не ограничиваясь этим, клетки Sf9.

В некоторых вариантах осуществления, клетка хозяин представляет собой эукариотическую клетку, например, клетку млекопитающего, клетку насекомого, клетку дрожжей или прокариотическую клетку, например, E. coli. Например, клетка млекопитающего может представлять собой культивируемую клетку или линию клеток. Иллюстративные клетки млекопитающих включают линии лимфоцитарных клеток (например, NSO), клетки яичника китайского хомячка (CHO), клетки COS, клетки ооциты и клетки от трансгенного животного, например, маммарную эпителиальную клетку.

ПРИМЕРЫ

Примеры ниже приведены, чтобы помочь в понимании изобретения, но не предназначаются для ограничения его рамок каким-либо образом и не должны рассматриваться в этом качестве.

Пример 1: Популяционная фармакокинетика и фармакодинамика иллюстративного антитела анти-LAG-3 и растворимого LAG-3

Сущность

Цели настоящего исследования представляют собой предсказание соотношения между концентрацией антитела анти-LAG-3 в сыворотке и заполненностью LAG-3 в сыворотке (растворимый LAG-3) и в опухоли (мембранно-связанный LAG-3); для оценки соотношения между дозой антитела анти-LAG-3 и фармакокинетикой (PK) и определения того, зависит ли разброс PK от дозы; для оценки ожидаемого разброса стационарных минимальных уровней анти-LAG-3 в зависимости от фиксированного дозирования и дозирования по массе тела реципиента; и для оценки того, влияет ли совместное введение антитела анти-PD-1 на экспонирование антитела анти-LAG-3.

В этом исследовании используют следующие методы. Двухкамерную линейную модель популяционной PK используют для описания концентрации антитела анти-LAG-3. Стандартную модель связывания для описания медиируемого мишенью потребления лекарственного средства используют для описания данных для растворимого LAG-3; используют квазиравновесное приближение. Анализ независимых переменных используют для оценки воздействия массы на выведение и как на центральный, так и на периферический объем. Графический анализ используют для оценки влияния совместного введения антитела анти-PD-1 на выведение антитела анти-LAG-3. Осуществляют моделирование модели для идентификации соотношения между дозой антитела анти-LAG-3 и свободным LAG-3, как для растворимого LAG-3 в сыворотке, так и для мембранно-связанного LAG-3 в опухоли.

Из этого исследования получены следующие результаты. Характеризуется соотношение между дозой и свободным LAG-3 в сыворотке и в опухоли. PK антитела анти-LAG-3 выглядит нелинейной при дозах ниже 80 мг раз в 2-4 недели и линейной при дозах выше 240 мг раз в 3-4 недели. Фиксированный режим дозирования и режим дозирования по массе тела реципиента, как предсказано, должны давать сравнимый разброс минимальных концентраций в стационарном состоянии. Не наблюдается очевидного воздействия совместного введения с антителом анти-PD-1 на PK антитело анти-LAG-3.

Соотношение между дозой антитела анти-LAG-3 и заполненностью рецептора, как для растворимого LAG-3 в сыворотке, так и для внутриопухолевой заполненности мембранно-связанного рецептора LAG-3, при дозах 240 мг и выше, хорошо характеризуется моделью. При более низких дозах (например, 80 мг раз в 2-4 недели), у некоторых пациентов наблюдают нелинейность PK антитела анти-LAG-3. Выше 240 мг раз в 3-4 недели, PK антитела анти-LAG-3 выглядит линейной. Нелинейность, как считается, связана с медиируемым мишенью потреблением лекарственного средства, как наблюдается и для многих других моноклональных антител. Фиксированное дозирование и дозирование по массе тела реципиента, как предсказано, дают сравнимый разброс стационарных минимальных уровней антитела анти-LAG-3. Совместное введение антитела анти-PD-1 не показывает никакого очевидного влияния на PK антитела анти-LAG-3.

Наблюдения, иллюстрируемые в этом Примере, можно использовать для руководства при выборе дозы для молекул антитела анти-LAG-3, описанных в настоящем документе.

Данные

Настоящее исследование использует данные от исследования с повышением дозы у пациентов с прогрессирующими плотными опухолями, где иллюстративное антитело анти-LAG-3, LAG525, дается и как монотерапия, и в сочетании с иллюстративным антителом анти-PD-1, PDR001. Концентрацию антитела анти-LAG-3 и концентрацию растворимого LAG-3 измеряют в различные моменты времени (перед вливанием, в час 1, в день 1, 7, 10, 14).

Антитело анти-LAG-3 количественно определяют с помощью жидкостной хроматографии/масс-спектроскопии (LC/MS) с нижним пределом количественного определения 250 нг/мл (1,7 нМ). Общий растворимый LAG-3 количественно определяют с помощью иммунносвязанного иммуносорбентного анализа (ELISA) в сыворотке человека при нижнем пределе количественного определения 0,146 нг/мл (1 пМ).

Один массив данных генерируется и валидизируется на наиболее критичном уровне. Все измерения антитела анти-LAG-3 и растворимого LAG-3 включаются в этот анализ. Никакие данные не исключаются или не классифицируются как выбросы.

Методы

Это исследование осуществляют с использованием подхода нелинейного моделирования смешанных эффектов, где модель имеет два компонента: структурную модель, которая учитывает систематические тренды в данных, и модель случайных эффектов, которая учитывает, как разброс между субъектами, так и остаточный разброс около этих трендов. Модель независимых переменных описывает, как вводятся независимые переменные. Модель PopPKPD подгоняется одновременно к данным как относительно PK, так и относительно растворимого LAG-3. Затем осуществляют моделирование модели с дополнительными предположениями для получения предсказаний относительно ингибирования мембранно-связанного LAG-3 в опухоли.

Анализ осуществляют с использованием системы программного обеспечения Monolix, version 2016R1 с использованием среды для высокопроизводительных компьютерных вычислений MODESIM. Пакет для технических компьютерных вычислений R используют для исследования данных для помощи в построении модели и для представления конечных результатов.

Хотя при первом анализе этих данных исследуется множество моделей, используют только одну структурную модель, поскольку обнаружено, что эта модель является адекватной для целей исследования.

Структурная модель. Структурная модель PKPD для концентрации анти-LAG-3, растворимого LAG-3 и комплекса представляет собой стандартную модель связывания, используемую для описания, опосредуемого мишенью потребления лекарственных средств (TMDD) с квазиравновесным приближением (Mager & Krzyzanski. Pharmaceutical Research 22, 1589-1596 (2005)), так что дифференциальные уравнения описывают лекарственное средство в целом, мишень в целом и периферическую концентрацию лекарственного средства, и алгебраические выражения, ниже, используются для вычисления концентраций свободного лекарственного средства, свободной мишени и их комплекса.

Версия Михаэлиса-Ментен этой модели также используется для подгонки. При предварительном анализе, эта модель не улучшает подгонки и поэтому она больше не исследуется.

Модель случайных эффектов. Модель PK параметризуется с помощью следующих четырех параметров: выведение, центральный объем, периферический объем и межкамерное выведение, и модель PD (для растворимого LAG-3) добавляет следующие четыре параметра: начальный sLAG-3, стационарный sLAG-3 для большой дозы антитела анти-LAG-3, скорость выведения комплекса антитело-sLAG-3 и константу диссоциации. Распределенные по логарифмическому нормальному закону случайные эффекты добавляют ко всем восьми параметрам.

Модель независимых переменных. Анализ независимых переменных используют для оценки влияния массы на выведение и центральный объем. Графический анализ используют для оценки влияния антитела анти-PD-1 на PK антитело анти-LAG-3, посредством сравнения концентрации антитела анти-LAG-3 у пациентов, которые принимают идентичные режимы дозирования антитела анти-LAG-3 и либо принимают, либо не принимают антитело анти-PD-1. Формальный анализ независимых переменных не осуществляют, поскольку пациенты при самой низкой дозе антитела анти-LAG-3 (0,3 мг/кг q2w) имеют самую низкую скорость выведения и также всегда принимают антитело анти-PD-1. Считается, что более низкое выведение при самой низкой дозе связано с медиируемым мишенью потреблением лекарственного средства, но этот эффект, как наблюдается, мешает формальной оценке антитела анти-PD-1 как независимой переменной при выведении.

Сравнение режима фиксированного дозирования и режима дозирования, масштабируемого по массе тела. Минимальные уровни антитела анти-LAG-3 на неделе 24 (приблизительно 6 месяцев) моделируют для 1000 пациентов с использованием модели для 10 мг/кг или для 700 мг, принимаемых раз в 2, 3 или 4 недели. Предварительные подгонки модели показали, что конечное половинное время жизни антитела анти-LAG-3 составляет примерно 2 недели, так что все пациенты, как ожидается, находятся в стационарном состоянии к неделе 24; также, неделя 24 является минимальной для всех исследуемых режимов дозирования (q2w, q3w, q4w). Медианное значение и 95% предсказательный интервал изображаются на графике. Считается, что типичный пациент весит 80 кг, так что можно вычислить режим эквивалентной фиксированной дозы (например, 1 мг/кг соответствует 80 мг). Однако, медианная масса в популяции при этом исследовании близка к 70 кг. По этой причине, для конкретного моделирования, 10 мг/кг сравнивается с 700 мг.

Предсказание ингибирования LAG-3 в сыворотке и в опухоли. Моделирование с помощью приведенной выше модели PKPD используется для оценки заполненности LAG-3 при 6-месячных минимальных уровнях, когда PK находится в стационарном состоянии. Предлагаются два различных оценки заполненности LAG-3: (1) отношение свободного растворимого LAG-3 в сыворотке по сравнению с фоновым растворимым LAG-3, который вычисляется непосредственно из модели PKPD; и (2) заполненность мембранно-связанного LAG-3 в опухоли (RO).

Предсказание ингибирования внутриопухолевого LAG-3, как считается, является более релевантным для руководства при выборе дозы, поскольку это то самое место, в котором лимфоциты, инфильтрующие опухоль, взаимодействуют с опухолью.

Использование этого подхода для предсказания заполненности мишени в опухоли включает ряд предположений: (1) оцененная константа диссоциации антитела анти-LAG-3 и sLAG-3 в сыворотке такая же, как для диссоциации антитела анти-LAG-3 и мембранно-связанного LAG-3 в опухоли; (2) ABC_ISF=30% в опухолях человека, на основе данных для мышей (Deng et al. MAbs, vol. 8, 593-603 (2016)); (3) опухоль можно рассматривать подобно однородным тканям; (4) мембранно-связанный LAG-3 в опухоли не аккумулируется в присутствии лекарственного средства; (5) антитело анти-LAG-3 находится в большом избытке по отношению к концентрации мембранно-связанного LAG-3 в опухоли; и (6) связывание между LAG-3 и его эндогенными партнерами по связыванию (например, MHCII) не моделируется, и считается, что это не влияет значительно на предсказание подавления.

В дополнение к этим предположениям необходимо выбрать желаемый уровень ингибирования для желаемой доли популяции пациентов. Как правило, требуется 60-90% подавления для антагонистов, и таким образом, занятость 90-95% является целевой для этого анализа (Grimwood & Hartig. Pharmacology & Therapeutics 122, 281-301 (2009); Tiwari et al. AAPS Journal 1-10 (2016); Agoram. British Journal of Clinical Pharmacology 67, 153-160 (2009)).

Для этого моделирования опытов, исследуют следующие дозы в режимах q2w, q3w, и q4w для 1000 пациентов: 10, 20, 30, 50, 70, 100, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 1600, 1700, 1800, 1900, 2000 мг. Затем вычисляют 5, 25, 50, 75, 95 перцентиль для PK и для заполненности растворимого LAG-3 в сыворотке и для мембранно-связанного LAG-3 в опухоли.

Результаты

В целом 196 пациентов включены в этот анализ с медианными временами отслеживания 30 и 29,5 дней для оценок антитела анти-LAG-3 и растворимого LAG-3, соответственно. Сводка количества пациентов на каждый режим дозирования, рассортированных по общей ежемесячной дозе (средняя общая доза в течение четырех недель), показана в Таблице 13.

Таблица 13. Сводка режимов дозирования и количества пациентов

Средняя общая доза анти-LAG-3 за 4 недели (мг) Категория Режим анти-LAG-3 Режим анти-PD-1 Количество пациентов Количество пациентов с PK Количество пациентов с sLAG-3 2400 высокая 15 мг/кг q2w нет 6 6 6 1600 высокая 10 мг/кг q2w нет 6 6 6 1000 высокая 1000 мг q4w 400 мг q4w 6 6 1 800 высокая 10 мг/кг q4w нет 11 11 11 800 высокая 600 мг q3w 300 мг q3w 12 7 6 800 высокая 800 мг q4w 400 мг q4w 12 7 6 800 высокая 400 мг q2w нет 23 16 16 800 высокая 5 мг/кг q2w нет 6 6 6 600 средняя 300 мг q2w 400 мг q4w 6 5 5 533 средняя 400 мг q3w 300 мг q3w 6 5 4 480 средняя 240 мг q2w 400 мг q4w 6 4 3 480 средняя 240 мг q2w нет 23 15 15 480 средняя 240 мг q2w 240 мг q2w 6 6 6 480 средняя 3 мг/кг q2w нет 12 11 11 400 средняя 5 мг/кг q4w нет 6 6 6 400 средняя 400 мг q4w 400 мг q4w 6 3 3 400 средняя 400 мг q4w нет 5 5 5 320 средняя 240 мг q3w 300 мг q3w 20 12 9 240 средняя 3 мг/кг q4w нет 5 5 5 160 низкая 1 мг/кг q2w 1 мг/кг q2w 6 6 6 160 низкая 80 мг q2w 80 мг q2w 6 6 6 160 низкая 80 мг q2w 240 мг q2w 5 5 5 160 низкая 80 мг q2w 400 мг q4w 11 11 8 160 низкая 1 мг/кг q2w нет 13 13 13 80 низкая 80 мг q4w 240 мг q4w 7 7 7 48 очень низкая 0,3 мг/кг q2w 1 мг/кг q2w 6 6 6

Получают данные по антителу анти-LAG-3 и по растворимому LAG-3. Данные по концентрации антитела анти-LAG-3 в течение первых 4 недель нормируют на первую дозу в мг. Доза антитела анти-LAG-3 стратифицируется на четыре группы (очень низкая, низкая, средняя и высокая) по отношению к оцененной общей ежемесячной дозировке (в течение 28 дней, в мг). Для доз, масштабированных на массу тела, общая доза в мг вычисляется для 80-кг пациента. Наблюдается большее уменьшение концентрации антитела анти-LAG-3 для некоторых пациентов, для данных с очень низкими и низкими дозами, чем для данных со средними и высокими дозами, показывая нелинейность PK при более низких дозах. Группы стратификации выбирают для иллюстрации этой нелинейности.

Получают нормированные концентрации антитела анти-LAG-3 через две недели (все режимы) после первой дозы. При более низких дозах (80 мг и ниже), имеется уменьшение нормированной концентрации лекарственного средства у некоторых пациентов, указывая на нелинейность PK. Анализ данных на основе модели может также помочь лучше охарактеризовать эту нелинейность с использованием всех доступных данных.

Подгонки модели PKPD

Используемые параметры PK являются типичными для моноклонального антитела. При моделировании параметров, конечное половинное время жизни и его 5-95% предсказательный интервал, согласно оценкам, составляет 17,0 (7,0, 59,9) дней. Оцененная константа диссоциации 1,5 нМ (Kd) выше, чем измерено при анализе Biacore (0,1 нМ), но сравнима с тем, что измерено при клеточном анализе in vitro (1,9 2,3 нМ). Визуальный предсказательный контроль концентрации антитела анти-LAG-3, нормированной на общую ежемесячную дозу, показывает хорошее описание данных по PK, за исключением групп с низкой и очень низкой дозой, где наблюдается нелинейность PK. Осуществляют моделирование самой большой дозы антитела анти-LAG-3 в каждой панели. Моделирование хорошо описывает кривые для sLAG-3, для всех доз выше 3 мг/кг (или 240 мг) q4w. Для этих данных с низкими дозами, PK переоценена, и таким образом, sLAG-3 также переоценен.

При условии более быстрого удаления при более низких дозах, модель PK Михаэлиса-Ментен с нелинейным удалением исследована ранее. Однако подгонка не улучшалась значительно. Кроме того, дополнительная ошибка, согласно общим оценкам, составляет примерно 20 нМ, это гораздо больше, чем минимальные концентрации, наблюдаемые при 0,3 мг/кг q2w или 80 мг q4w, даже для моделей с нелинейным удалением. Таким образом, в этом Примере используется только линейная модель, при том условии, что модель переоценивает минимальные концентрации при более низких дозах (например, 80 мг q2w).

Для установления порога, когда нелинейность PK становится релевантной, исследуют предсказание для популяции относительно антитела анти-LAG-3 по сравнению с измерениями. Отметим, что ниже критической концентрации C_crit=60 нМ, предсказание для популяции предсказывает измерение с превышением; это ниже C_crit, когда начинает наблюдаться нелинейная PK. Используя моделирование опыта, доля пациентов, которые, как ожидается, будут выше C_crit на минимуме, оценивается в Таблице 14.

Сравнение предсказаний для фиксированного дозирования по сравнению с дозированием по массе

Моделирование минимального уровня антитела анти-LAG-3 через 6 месяцев для дозирования 700 мг и 10 мг/кг осуществляют как для фиксированного дозирования, так и для дозирования масштабируемого по массе тела. Поскольку показатель степени, связывающий массу с выведением, близок к 0,5, предсказываемый разброс минимального уровня антитела анти-LAG-3 сравним для пациентов, принимающих фиксированное дозирование или дозирование на основе массы тела, как наблюдается также и для других лекарственных средств (Bai et al. Clinical pharmacokinetics 51, 119-135 (2012); Wang et al., The Journal of Clinical Pharmacology 49, 1012-1024 (2009)). Поскольку модель PK антитела анти-LAG-3 является линейной выше 240 мг, сходные результаты должны наблюдаться для любой дозы выше 240 мг.

Предсказание заполненности LAG-3

Моделируемая концентрация свободного LAG-3 сравнивается с фоном по модели PKPD. Напомним, что это модель не охватывает нелинейности PK, наблюдаемой при более низких дохах, и таким образом, при дозах ниже 240 мг, вероятно, имеется более низкое ингибирование LAG-3, чем предсказано. Уменьшение свободного растворимого LAG-3 до 10% требует доз, которые более чем в 10 раз выше, чем для уменьшения внутриопухолевого мембранно-связанного LAG-3 до 10%. Это связано с тем, что растворимый LAG-3 в сыворотке аккумулируется примерно в 75 раз, при этом не ожидается, что будет аккумулироваться мембранно-связанный LAG-3.

Результаты моделирования выше приведены в Таблице 14, где приведена доза необходимая для 75, 90 и 95% пациентов, чтобы она удовлетворяла следующим трем критериям в стационарном состоянии:

1. Минимум LAG525 выше C_crit

2. Опухолевый мембранно-связанный рецептор свободный от LAG-3 ниже 10% от фона

3. Рецептор свободный от растворимого LAG-3 в сыворотке ниже 10% от фона

Таблица 14. Предсказанная доза (мг) необходимая для 75%, 90% и 95% пациентов в стационарном состоянии, чтобы она удовлетворяла критериям PK или PD, указанным для режимов q2w, q3w и q4w.

Доза для 75% пациентов, чтобы удовлетворять критериям: Критерии q2w q3w q4w Минимум LAG525 выше Ccrit 100 210 350 Свободный mLAG-3 в опухоли <10% от фона
Свободный sLAG-3 в сыворотке <10% от фона 100
>2000 200
>2000 400
>2000 Доза для 90% пациентов, чтобы удовлетворять критериям: Критерии q2w q3w q4w Минимум LAG525 выше Ccrit 170 410 740 Свободный mLAG-3 в опухоли <10% от фона
Свободный sLAG-3 в сыворотке <10% от фона 200
>2000 400
>2000 800
>2000 Доз для 95% пациентов, чтобы удовлетворять критериям: Критерии q2w q3w q4w Минимум LAG525 выше Ccrit 270 670 1190 Свободный mLAG-3 в опухоли <10% от фона
Свободный sLAG-3 в сыворотке <10% от фона 400
>2000 700
>2000 1400
>2000

Отметим, что дозы необходимые для линейной PK (минимум антитела анти-LAG-3 >C_crit) и доза необходимая для уменьшения концентрации свободного mLAG-3 в опухоли до <10% от фона являются сходными. Этот результат согласуется с гипотезой, что медиируемое мишенью потребление лекарственного средства лимфоцитами, инфильтрующими опухоли, является движущей силой быстрого удаления при низких дозах.

Для антагонистов, типичным является целевая заполненность рецепторов 90-95% (или 5-10% свободных мишеней по сравнению с фоном) по всему интервалу дозирования, но это эмпирическое правило не работает для LAG-3 или для ингибиторов в иммунной контрольной точке в целом. Если желательно достижение такой заполненности рецепторов у большинства пациентов, было бы важным давать достаточно большую дозу с тем, чтобы не наблюдалось быстрого удаления при более низких концентрациях. Визуальный предсказательный контроль концентрации антитела анти-LAG-3, нормированной на общую ежемесячную дозу, говорит, что дозы выше 240 мг q4w могут быть достаточными для устранения этой нелинейности. Таблица 14 предсказывает, что 400 мг q3w или 800 мг q4w давали бы 90% заполненность рецепторов (10% свободного LAG-3 по сравнению с фоном) у 90% пациентов.

Таким образом, это исследование показывает, что соотношение между дозой иллюстративного антитела анти-LAG-3, LAG525, и заполненностью рецептора, как для растворимого LAG-3 в сыворотке, так и для внутриопухолевого мембранно-связанного при дозах 240 мг и выше, хорошо характеризуется с помощью модели. При более низких дозах (например, 80 мг раз в 2-4 недели), у некоторых пациентов наблюдается нелинейность PK антитела анти-LAG-3. Выше 240 мг раз в 3-4 недели, PK антитела анти-LAG-3 выглядит линейной. Нелинейность как считается, связана с медиируемым мишенью потреблением лекарственного средства, как наблюдается и для многих других моноклональных антител. Фиксирование дозирование и дозирование по массе тела, как предсказано, дают сравнимый разброс стационарных минимальных уровней антитела анти-LAG-3. Совместное введение антитела анти-PD-1, PDR001 не показывает никакого очевидного влияния на PK антитела анти-LAG-3.

Включение в качестве ссылок

Все публикации, патенты и номера доступа, рассмотренные в настоящем документе, тем самым, включаются в качестве ссылок во всей своей полноте, как если бы каждая отдельная публикация или патент были конкретно и индивидуально указаны, как включаемые в качестве ссылки.

Эквиваленты

Хотя обсуждаются конкретные варианты осуществления рассматриваемого изобретения, приведенное выше описание является иллюстративным, а не ограничивающим. Многие варианты настоящего изобретения станут очевидны специалистам в данной области при просмотре настоящего описания и следующей далее формулы изобретения. Полные рамки настоящего изобретения должны определяться со ссылками на формулу изобретения, вместе с полными рамками ее эквивалентов, и на описание, вместе с такими вариантами.

--->

СПИСОК ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ

<110> NOVARTIS AG

<120> РЕЖИМЫ ДОЗИРОВАНИЯ АНТИТЕЛ АНТИ-LAG-3 И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ

<130> C2160-7019WO

<140>

<141>

<150> 62/534,798

<151> 2017-07-20

<150> 62/643,992

<151> 2018-03-16

<160> 1006

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<400> 1

000

<210> 2

<400> 2

000

<210> 3

<400> 3

000

<210> 4

<400> 4

000

<210> 5

<400> 5

000

<210> 6

<400> 6

000

<210> 7

<400> 7

000

<210> 8

<400> 8

000

<210> 9

<400> 9

000

<210> 10

<400> 10

000

<210> 11

<400> 11

000

<210> 12

<400> 12

000

<210> 13

<400> 13

000

<210> 14

<400> 14

000

<210> 15

<400> 15

000

<210> 16

<400> 16

000

<210> 17

<400> 17

000

<210> 18

<400> 18

000

<210> 19

<400> 19

000

<210> 20

<400> 20

000

<210> 21

<400> 21

000

<210> 22

<400> 22

000

<210> 23

<400> 23

000

<210> 24

<400> 24

000

<210> 25

<400> 25

000

<210> 26

<400> 26

000

<210> 27

<400> 27

000

<210> 28

<400> 28

000

<210> 29

<400> 29

000

<210> 30

<400> 30

000

<210> 31

<400> 31

000

<210> 32

<400> 32

000

<210> 33

<400> 33

000

<210> 34

<400> 34

000

<210> 35

<400> 35

000

<210> 36

<400> 36

000

<210> 37

<400> 37

000

<210> 38

<400> 38

000

<210> 39

<400> 39

000

<210> 40

<400> 40

000

<210> 41

<400> 41

000

<210> 42

<400> 42

000

<210> 43

<400> 43

000

<210> 44

<400> 44

000

<210> 45

<400> 45

000

<210> 46

<400> 46

000

<210> 47

<400> 47

000

<210> 48

<400> 48

000

<210> 49

<400> 49

000

<210> 50

<400> 50

000

<210> 51

<400> 51

000

<210> 52

<400> 52

000

<210> 53

<400> 53

000

<210> 54

<400> 54

000

<210> 55

<400> 55

000

<210> 56

<400> 56

000

<210> 57

<400> 57

000

<210> 58

<400> 58

000

<210> 59

<400> 59

000

<210> 60

<400> 60

000

<210> 61

<400> 61

000

<210> 62

<400> 62

000

<210> 63

<400> 63

000

<210> 64

<400> 64

000

<210> 65

<400> 65

000

<210> 66

<400> 66

000

<210> 67

<400> 67

000

<210> 68

<400> 68

000

<210> 69

<400> 69

000

<210> 70

<400> 70

000

<210> 71

<400> 71

000

<210> 72

<400> 72

000

<210> 73

<400> 73

000

<210> 74

<400> 74

000

<210> 75

<400> 75

000

<210> 76

<400> 76

000

<210> 77

<400> 77

000

<210> 78

<400> 78

000

<210> 79

<400> 79

000

<210> 80

<400> 80

000

<210> 81

<400> 81

000

<210> 82

<400> 82

000

<210> 83

<400> 83

000

<210> 84

<400> 84

000

<210> 85

<400> 85

000

<210> 86

<400> 86

000

<210> 87

<400> 87

000

<210> 88

<400> 88

000

<210> 89

<400> 89

000

<210> 90

<400> 90

000

<210> 91

<400> 91

000

<210> 92

<400> 92

000

<210> 93

<400> 93

000

<210> 94

<400> 94

000

<210> 95

<400> 95

000

<210> 96

<400> 96

000

<210> 97

<400> 97

000

<210> 98

<400> 98

000

<210> 99

<400> 99

000

<210> 100

<400> 100

000

<210> 101

<400> 101

000

<210> 102

<400> 102

000

<210> 103

<400> 103

000

<210> 104

<400> 104

000

<210> 105

<400> 105

000

<210> 106

<400> 106

000

<210> 107

<400> 107

000

<210> 108

<400> 108

000

<210> 109

<400> 109

000

<210> 110

<400> 110

000

<210> 111

<400> 111

000

<210> 112

<400> 112

000

<210> 113

<400> 113

000

<210> 114

<400> 114

000

<210> 115

<400> 115

000

<210> 116

<400> 116

000

<210> 117

<400> 117

000

<210> 118

<400> 118

000

<210> 119

<400> 119

000

<210> 120

<400> 120

000

<210> 121

<400> 121

000

<210> 122

<400> 122

000

<210> 123

<400> 123

000

<210> 124

<400> 124

000

<210> 125

<400> 125

000

<210> 126

<400> 126

000

<210> 127

<400> 127

000

<210> 128

<400> 128

000

<210> 129

<400> 129

000

<210> 130

<400> 130

000

<210> 131

<400> 131

000

<210> 132

<400> 132

000

<210> 133

<400> 133

000

<210> 134

<400> 134

000

<210> 135

<400> 135

000

<210> 136

<400> 136

000

<210> 137

<400> 137

000

<210> 138

<400> 138

000

<210> 139

<400> 139

000

<210> 140

<400> 140

000

<210> 141

<400> 141

000

<210> 142

<400> 142

000

<210> 143

<400> 143

000

<210> 144

<400> 144

000

<210> 145

<400> 145

000

<210> 146

<400> 146

000

<210> 147

<400> 147

000

<210> 148

<400> 148

000

<210> 149

<400> 149

000

<210> 150

<400> 150

000

<210> 151

<400> 151

000

<210> 152

<400> 152

000

<210> 153

<400> 153

000

<210> 154

<400> 154

000

<210> 155

<400> 155

000

<210> 156

<400> 156

000

<210> 157

<400> 157

000

<210> 158

<400> 158

000

<210> 159

<400> 159

000

<210> 160

<400> 160

000

<210> 161

<400> 161

000

<210> 162

<400> 162

000

<210> 163

<400> 163

000

<210> 164

<400> 164

000

<210> 165

<400> 165

000

<210> 166

<400> 166

000

<210> 167

<400> 167

000

<210> 168

<400> 168

000

<210> 169

<400> 169

000

<210> 170

<400> 170

000

<210> 171

<400> 171

000

<210> 172

<400> 172

000

<210> 173

<400> 173

000

<210> 174

<400> 174

000

<210> 175

<400> 175

000

<210> 176

<400> 176

000

<210> 177

<400> 177

000

<210> 178

<400> 178

000

<210> 179

<400> 179

000

<210> 180

<400> 180

000

<210> 181

<400> 181

000

<210> 182

<400> 182

000

<210> 183

<400> 183

000

<210> 184

<400> 184

000

<210> 185

<400> 185

000

<210> 186

<400> 186

000

<210> 187

<400> 187

000

<210> 188

<400> 188

000

<210> 189

<400> 189

000

<210> 190

<400> 190

000

<210> 191

<400> 191

000

<210> 192

<400> 192

000

<210> 193

<400> 193

000

<210> 194

<400> 194

000

<210> 195

<400> 195

000

<210> 196

<400> 196

000

<210> 197

<400> 197

000

<210> 198

<400> 198

000

<210> 199

<400> 199

000

<210> 200

<400> 200

000

<210> 201

<400> 201

000

<210> 202

<400> 202

000

<210> 203

<400> 203

000

<210> 204

<400> 204

000

<210> 205

<400> 205

000

<210> 206

<400> 206

000

<210> 207

<400> 207

000

<210> 208

<400> 208

000

<210> 209

<400> 209

000

<210> 210

<400> 210

000

<210> 211

<400> 211

000

<210> 212

<400> 212

000

<210> 213

<400> 213

000

<210> 214

<400> 214

000

<210> 215

<400> 215

000

<210> 216

<400> 216

000

<210> 217

<400> 217

000

<210> 218

<400> 218

000

<210> 219

<400> 219

000

<210> 220

<400> 220

000

<210> 221

<400> 221

000

<210> 222

<400> 222

000

<210> 223

<400> 223

000

<210> 224

<400> 224

000

<210> 225

<400> 225

000

<210> 226

<400> 226

000

<210> 227

<400> 227

000

<210> 228

<400> 228

000

<210> 229

<400> 229

000

<210> 230

<400> 230

000

<210> 231

<400> 231

000

<210> 232

<400> 232

000

<210> 233

<400> 233

000

<210> 234

<400> 234

000

<210> 235

<400> 235

000

<210> 236

<400> 236

000

<210> 237

<400> 237

000

<210> 238

<400> 238

000

<210> 239

<400> 239

000

<210> 240

<400> 240

000

<210> 241

<400> 241

000

<210> 242

<400> 242

000

<210> 243

<400> 243

000

<210> 244

<400> 244

000

<210> 245

<400> 245

000

<210> 246

<400> 246

000

<210> 247

<400> 247

000

<210> 248

<400> 248

000

<210> 249

<400> 249

000

<210> 250

<400> 250

000

<210> 251

<400> 251

000

<210> 252

<400> 252

000

<210> 253

<400> 253

000

<210> 254

<400> 254

000

<210> 255

<400> 255

000

<210> 256

<400> 256

000

<210> 257

<400> 257

000

<210> 258

<400> 258

000

<210> 259

<400> 259

000

<210> 260

<400> 260

000

<210> 261

<400> 261

000

<210> 262

<400> 262

000

<210> 263

<400> 263

000

<210> 264

<400> 264

000

<210> 265

<400> 265

000

<210> 266

<400> 266

000

<210> 267

<400> 267

000

<210> 268

<400> 268

000

<210> 269

<400> 269

000

<210> 270

<400> 270

000

<210> 271

<400> 271

000

<210> 272

<400> 272

000

<210> 273

<400> 273

000

<210> 274

<400> 274

000

<210> 275

<400> 275

000

<210> 276

<400> 276

000

<210> 277

<400> 277

000

<210> 278

<400> 278

000

<210> 279

<400> 279

000

<210> 280

<400> 280

000

<210> 281

<400> 281

000

<210> 282

<400> 282

000

<210> 283

<400> 283

000

<210> 284

<400> 284

000

<210> 285

<400> 285

000

<210> 286

<400> 286

000

<210> 287

<400> 287

000

<210> 288

<400> 288

000

<210> 289

<400> 289

000

<210> 290

<400> 290

000

<210> 291

<400> 291

000

<210> 292

<400> 292

000

<210> 293

<400> 293

000

<210> 294

<400> 294

000

<210> 295

<400> 295

000

<210> 296

<400> 296

000

<210> 297

<400> 297

000

<210> 298

<400> 298

000

<210> 299

<400> 299

000

<210> 300

<400> 300

000

<210> 301

<400> 301

000

<210> 302

<400> 302

000

<210> 303

<400> 303

000

<210> 304

<400> 304

000

<210> 305

<400> 305

000

<210> 306

<400> 306

000

<210> 307

<400> 307

000

<210> 308

<400> 308

000

<210> 309

<400> 309

000

<210> 310

<400> 310

000

<210> 311

<400> 311

000

<210> 312

<400> 312

000

<210> 313

<400> 313

000

<210> 314

<400> 314

000

<210> 315

<400> 315

000

<210> 316

<400> 316

000

<210> 317

<400> 317

000

<210> 318

<400> 318

000

<210> 319

<400> 319

000

<210> 320

<400> 320

000

<210> 321

<400> 321

000

<210> 322

<400> 322

000

<210> 323

<400> 323

000

<210> 324

<400> 324

000

<210> 325

<400> 325

000

<210> 326

<400> 326

000

<210> 327

<400> 327

000

<210> 328

<400> 328

000

<210> 329

<400> 329

000

<210> 330

<400> 330

000

<210> 331

<400> 331

000

<210> 332

<400> 332

000

<210> 333

<400> 333

000

<210> 334

<400> 334

000

<210> 335

<400> 335

000

<210> 336

<400> 336

000

<210> 337

<400> 337

000

<210> 338

<400> 338

000

<210> 339

<400> 339

000

<210> 340

<400> 340

000

<210> 341

<400> 341

000

<210> 342

<400> 342

000

<210> 343

<400> 343

000

<210> 344

<400> 344

000

<210> 345

<400> 345

000

<210> 346

<400> 346

000

<210> 347

<400> 347

000

<210> 348

<400> 348

000

<210> 349

<400> 349

000

<210> 350

<400> 350

000

<210> 351

<400> 351

000

<210> 352

<400> 352

000

<210> 353

<400> 353

000

<210> 354

<400> 354

000

<210> 355

<400> 355

000

<210> 356

<400> 356

000

<210> 357

<400> 357

000

<210> 358

<400> 358

000

<210> 359

<400> 359

000

<210> 360

<400> 360

000

<210> 361

<400> 361

000

<210> 362

<400> 362

000

<210> 363

<400> 363

000

<210> 364

<400> 364

000

<210> 365

<400> 365

000

<210> 366

<400> 366

000

<210> 367

<400> 367

000

<210> 368

<400> 368

000

<210> 369

<400> 369

000

<210> 370

<400> 370

000

<210> 371

<400> 371

000

<210> 372

<400> 372

000

<210> 373

<400> 373

000

<210> 374

<400> 374

000

<210> 375

<400> 375

000

<210> 376

<400> 376

000

<210> 377

<400> 377

000

<210> 378

<400> 378

000

<210> 379

<400> 379

000

<210> 380

<400> 380

000

<210> 381

<400> 381

000

<210> 382

<400> 382

000

<210> 383

<400> 383

000

<210> 384

<400> 384

000

<210> 385

<400> 385

000

<210> 386

<400> 386

000

<210> 387

<400> 387

000

<210> 388

<400> 388

000

<210> 389

<400> 389

000

<210> 390

<400> 390

000

<210> 391

<400> 391

000

<210> 392

<400> 392

000

<210> 393

<400> 393

000

<210> 394

<400> 394

000

<210> 395

<400> 395

000

<210> 396

<400> 396

000

<210> 397

<400> 397

000

<210> 398

<400> 398

000

<210> 399

<400> 399

000

<210> 400

<400> 400

000

<210> 401

<400> 401

000

<210> 402

<400> 402

000

<210> 403

<400> 403

000

<210> 404

<400> 404

000

<210> 405

<400> 405

000

<210> 406

<400> 406

000

<210> 407

<400> 407

000

<210> 408

<400> 408

000

<210> 409

<400> 409

000

<210> 410

<400> 410

000

<210> 411

<400> 411

000

<210> 412

<400> 412

000

<210> 413

<400> 413

000

<210> 414

<400> 414

000

<210> 415

<400> 415

000

<210> 416

<400> 416

000

<210> 417

<400> 417

000

<210> 418

<400> 418

000

<210> 419

<400> 419

000

<210> 420

<400> 420

000

<210> 421

<400> 421

000

<210> 422

<400> 422

000

<210> 423

<400> 423

000

<210> 424

<400> 424

000

<210> 425

<400> 425

000

<210> 426

<400> 426

000

<210> 427

<400> 427

000

<210> 428

<400> 428

000

<210> 429

<400> 429

000

<210> 430

<400> 430

000

<210> 431

<400> 431

000

<210> 432

<400> 432

000

<210> 433

<400> 433

000

<210> 434

<400> 434

000

<210> 435

<400> 435

000

<210> 436

<400> 436

000

<210> 437

<400> 437

000

<210> 438

<400> 438

000

<210> 439

<400> 439

000

<210> 440

<400> 440

000

<210> 441

<400> 441

000

<210> 442

<400> 442

000

<210> 443

<400> 443

000

<210> 444

<400> 444

000

<210> 445

<400> 445

000

<210> 446

<400> 446

000

<210> 447

<400> 447

000

<210> 448

<400> 448

000

<210> 449

<400> 449

000

<210> 450

<400> 450

000

<210> 451

<400> 451

000

<210> 452

<400> 452

000

<210> 453

<400> 453

000

<210> 454

<400> 454

000

<210> 455

<400> 455

000

<210> 456

<400> 456

000

<210> 457

<400> 457

000

<210> 458

<400> 458

000

<210> 459

<400> 459

000

<210> 460

<400> 460

000

<210> 461

<400> 461

000

<210> 462

<400> 462

000

<210> 463

<400> 463

000

<210> 464

<400> 464

000

<210> 465

<400> 465

000

<210> 466

<400> 466

000

<210> 467

<400> 467

000

<210> 468

<400> 468

000

<210> 469

<400> 469

000

<210> 470

<400> 470

000

<210> 471

<400> 471

000

<210> 472

<400> 472

000

<210> 473

<400> 473

000

<210> 474

<400> 474

000

<210> 475

<400> 475

000

<210> 476

<400> 476

000

<210> 477

<400> 477

000

<210> 478

<400> 478

000

<210> 479

<400> 479

000

<210> 480

<400> 480

000

<210> 481

<400> 481

000

<210> 482

<400> 482

000

<210> 483

<400> 483

000

<210> 484

<400> 484

000

<210> 485

<400> 485

000

<210> 486

<400> 486

000

<210> 487

<400> 487

000

<210> 488

<400> 488

000

<210> 489

<400> 489

000

<210> 490

<400> 490

000

<210> 491

<400> 491

000

<210> 492

<400> 492

000

<210> 493

<400> 493

000

<210> 494

<400> 494

000

<210> 495

<400> 495

000

<210> 496

<400> 496

000

<210> 497

<400> 497

000

<210> 498

<400> 498

000

<210> 499

<400> 499

000

<210> 500

<400> 500

000

<210> 501

<211> 5

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 501

Thr Tyr Trp Met His

1 5

<210> 502

<211> 17

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 502

Asn Ile Tyr Pro Gly Thr Gly Gly Ser Asn Phe Asp Glu Lys Phe Lys

1 5 10 15

Asn

<210> 503

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 503

Trp Thr Thr Gly Thr Gly Ala Tyr

1 5

<210> 504

<211> 7

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 504

Gly Tyr Thr Phe Thr Thr Tyr

1 5

<210> 505

<211> 6

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 505

Tyr Pro Gly Thr Gly Gly

1 5

<210> 506

<211> 117

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 506

Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu

1 5 10 15

Ser Leu Arg Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Thr Tyr

20 25 30

Trp Met His Trp Val Arg Gln Ala Thr Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Asn Ile Tyr Pro Gly Thr Gly Gly Ser Asn Phe Asp Glu Lys Phe

50 55 60

Lys Asn Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Thr Arg Trp Thr Thr Gly Thr Gly Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr

100 105 110

Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 507

<211> 351

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 507

gaggtgcagc tggtgcagtc aggcgccgaa gtgaagaagc ccggcgagtc actgagaatt

60

agctgtaaag gttcaggcta caccttcact acctactgga tgcactgggt ccgccaggct

120

accggtcaag gcctcgagtg gatgggtaat atctaccccg gcaccggcgg ctctaacttc

180

gacgagaagt ttaagaatag agtgactatc accgccgata agtctactag caccgcctat

240

atggaactgt ctagcctgag atcagaggac accgccgtct actactgcac taggtggact

300

accggcacag gcgcctactg gggtcaaggc actaccgtga ccgtgtctag c

351

<210> 508

<211> 443

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 508

Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu

1 5 10 15

Ser Leu Arg Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Thr Tyr

20 25 30

Trp Met His Trp Val Arg Gln Ala Thr Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Asn Ile Tyr Pro Gly Thr Gly Gly Ser Asn Phe Asp Glu Lys Phe

50 55 60

Lys Asn Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Thr Arg Trp Thr Thr Gly Thr Gly Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr

100 105 110

Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu

115 120 125

Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys

130 135 140

Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser

145 150 155 160

Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser

165 170 175

Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser

180 185 190

Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn

195 200 205

Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro

210 215 220

Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe

225 230 235 240

Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val

245 250 255

Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe

260 265 270

Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro

275 280 285

Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr

290 295 300

Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val

305 310 315 320

Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala

325 330 335

Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln

340 345 350

Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly

355 360 365

Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro

370 375 380

Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser

385 390 395 400

Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu

405 410 415

Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His

420 425 430

Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly

435 440

<210> 509

<211> 1329

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 509

gaggtgcagc tggtgcagtc aggcgccgaa gtgaagaagc ccggcgagtc actgagaatt 60

agctgtaaag gttcaggcta caccttcact acctactgga tgcactgggt ccgccaggct 120

accggtcaag gcctcgagtg gatgggtaat atctaccccg gcaccggcgg ctctaacttc 180

gacgagaagt ttaagaatag agtgactatc accgccgata agtctactag caccgcctat 240

atggaactgt ctagcctgag atcagaggac accgccgtct actactgcac taggtggact 300

accggcacag gcgcctactg gggtcaaggc actaccgtga ccgtgtctag cgctagcact 360

aagggcccgt ccgtgttccc cctggcacct tgtagccgga gcactagcga atccaccgct 420

gccctcggct gcctggtcaa ggattacttc ccggagcccg tgaccgtgtc ctggaacagc 480

ggagccctga cctccggagt gcacaccttc cccgctgtgc tgcagagctc cgggctgtac 540

tcgctgtcgt cggtggtcac ggtgccttca tctagcctgg gtaccaagac ctacacttgc 600

aacgtggacc acaagccttc caacactaag gtggacaagc gcgtcgaatc gaagtacggc 660

ccaccgtgcc cgccttgtcc cgcgccggag ttcctcggcg gtccctcggt ctttctgttc 720

ccaccgaagc ccaaggacac tttgatgatt tcccgcaccc ctgaagtgac atgcgtggtc 780

gtggacgtgt cacaggaaga tccggaggtg cagttcaatt ggtacgtgga tggcgtcgag 840

gtgcacaacg ccaaaaccaa gccgagggag gagcagttca actccactta ccgcgtcgtg 900

tccgtgctga cggtgctgca tcaggactgg ctgaacggga aggagtacaa gtgcaaagtg 960

tccaacaagg gacttcctag ctcaatcgaa aagaccatct cgaaagccaa gggacagccc

1020

cgggaacccc aagtgtatac cctgccaccg agccaggaag aaatgactaa gaaccaagtc

1080

tcattgactt gccttgtgaa gggcttctac ccatcggata tcgccgtgga atgggagtcc

1140

aacggccagc cggaaaacaa ctacaagacc acccctccgg tgctggactc agacggatcc

1200

ttcttcctct actcgcggct gaccgtggat aagagcagat ggcaggaggg aaatgtgttc

1260

agctgttctg tgatgcatga agccctgcac aaccactaca ctcagaagtc cctgtccctc

1320

tccctggga

1329

<210> 510

<211> 17

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 510

Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asp Ser Gly Asn Gln Lys Asn Phe Leu

1 5 10 15

Thr

<210> 511

<211> 7

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 511

Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser

1 5

<210> 512

<211> 9

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 512

Gln Asn Asp Tyr Ser Tyr Pro Tyr Thr

1 5

<210> 513

<211> 13

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 513

Ser Gln Ser Leu Leu Asp Ser Gly Asn Gln Lys Asn Phe

1 5 10

<210> 514

<211> 3

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 514

Trp Ala Ser

1

<210> 515

<211> 6

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 515

Asp Tyr Ser Tyr Pro Tyr

1 5

<210> 516

<211> 113

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 516

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asp Ser

20 25 30

Gly Asn Gln Lys Asn Phe Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys

35 40 45

Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val

50 55 60

Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr

65 70 75 80

Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Asn

85 90 95

Asp Tyr Ser Tyr Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile

100 105 110

Lys

<210> 517

<211> 339

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 517

gagatcgtcc tgactcagtc acccgctacc ctgagcctga gccctggcga gcgggctaca 60

ctgagctgta aatctagtca gtcactgctg gatagcggta atcagaagaa cttcctgacc 120

tggtatcagc agaagcccgg taaagcccct aagctgctga tctactgggc ctctactaga 180

gaatcaggcg tgccctctag gtttagcggt agcggtagtg gcaccgactt caccttcact 240

atctctagcc tgcagcccga ggatatcgct acctactact gtcagaacga ctatagctac 300

ccctacacct tcggtcaagg cactaaggtc gagattaag 339

<210> 518

<211> 220

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 518

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asp Ser

20 25 30

Gly Asn Gln Lys Asn Phe Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys

35 40 45

Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val

50 55 60

Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr

65 70 75 80

Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Asn

85 90 95

Asp Tyr Ser Tyr Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile

100 105 110

Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp

115 120 125

Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn

130 135 140

Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu

145 150 155 160

Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp

165 170 175

Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr

180 185 190

Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser

195 200 205

Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210 215 220

<210> 519

<211> 660

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 519

gagatcgtcc tgactcagtc acccgctacc ctgagcctga gccctggcga gcgggctaca 60

ctgagctgta aatctagtca gtcactgctg gatagcggta atcagaagaa cttcctgacc 120

tggtatcagc agaagcccgg taaagcccct aagctgctga tctactgggc ctctactaga 180

gaatcaggcg tgccctctag gtttagcggt agcggtagtg gcaccgactt caccttcact 240

atctctagcc tgcagcccga ggatatcgct acctactact gtcagaacga ctatagctac 300

ccctacacct tcggtcaagg cactaaggtc gagattaagc gtacggtggc cgctcccagc 360

gtgttcatct tcccccccag cgacgagcag ctgaagagcg gcaccgccag cgtggtgtgc 420

ctgctgaaca acttctaccc ccgggaggcc aaggtgcagt ggaaggtgga caacgccctg 480

cagagcggca acagccagga gagcgtcacc gagcaggaca gcaaggactc cacctacagc 540

ctgagcagca ccctgaccct gagcaaggcc gactacgaga agcataaggt gtacgcctgc 600

gaggtgaccc accagggcct gtccagcccc gtgaccaaga gcttcaacag gggcgagtgc 660

<210> 520

<211> 113

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 520

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asp Ser

20 25 30

Gly Asn Gln Lys Asn Phe Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln

35 40 45

Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val

50 55 60

Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr

65 70 75 80

Ile Ser Ser Leu Glu Ala Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Asn

85 90 95

Asp Tyr Ser Tyr Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile

100 105 110

Lys

<210> 521

<211> 339

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 521

gagatcgtcc tgactcagtc acccgctacc ctgagcctga gccctggcga gcgggctaca 60

ctgagctgta aatctagtca gtcactgctg gatagcggta atcagaagaa cttcctgacc 120

tggtatcagc agaagcccgg tcaagcccct agactgctga tctactgggc ctctactaga 180

gaatcaggcg tgccctctag gtttagcggt agcggtagtg gcaccgactt caccttcact 240

atctctagcc tggaagccga ggacgccgct acctactact gtcagaacga ctatagctac 300

ccctacacct tcggtcaagg cactaaggtc gagattaag 339

<210> 522

<211> 220

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 522

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asp Ser

20 25 30

Gly Asn Gln Lys Asn Phe Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln

35 40 45

Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val

50 55 60

Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr

65 70 75 80

Ile Ser Ser Leu Glu Ala Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Asn

85 90 95

Asp Tyr Ser Tyr Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile

100 105 110

Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp

115 120 125

Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn

130 135 140

Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu

145 150 155 160

Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp

165 170 175

Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr

180 185 190

Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser

195 200 205

Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210 215 220

<210> 523

<211> 660

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 523

gagatcgtcc tgactcagtc acccgctacc ctgagcctga gccctggcga gcgggctaca 60

ctgagctgta aatctagtca gtcactgctg gatagcggta atcagaagaa cttcctgacc 120

tggtatcagc agaagcccgg tcaagcccct agactgctga tctactgggc ctctactaga 180

gaatcaggcg tgccctctag gtttagcggt agcggtagtg gcaccgactt caccttcact 240

atctctagcc tggaagccga ggacgccgct acctactact gtcagaacga ctatagctac 300

ccctacacct tcggtcaagg cactaaggtc gagattaagc gtacggtggc cgctcccagc 360

gtgttcatct tcccccccag cgacgagcag ctgaagagcg gcaccgccag cgtggtgtgc 420

ctgctgaaca acttctaccc ccgggaggcc aaggtgcagt ggaaggtgga caacgccctg 480

cagagcggca acagccagga gagcgtcacc gagcaggaca gcaaggactc cacctacagc 540

ctgagcagca ccctgaccct gagcaaggcc gactacgaga agcataaggt gtacgcctgc 600

gaggtgaccc accagggcct gtccagcccc gtgaccaaga gcttcaacag gggcgagtgc 660

<210> 524

<211> 15

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический олигонуклеотид"

<400> 524

acctactgga tgcac 15

<210> 525

<211> 51

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический олигонуклеотид"

<400> 525

aatatctacc ccggcaccgg cggctctaac ttcgacgaga agtttaagaa t 51

<210> 526

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический олигонуклеотид"

<400> 526

tggactaccg gcacaggcgc ctac 24

<210> 527

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический олигонуклеотид"

<400> 527

ggctacacct tcactaccta c 21

<210> 528

<211> 18

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический олигонуклеотид"

<400> 528

taccccggca ccggcggc 18

<210> 529

<211> 51

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический олигонуклеотид"

<400> 529

aaatctagtc agtcactgct ggatagcggt aatcagaaga acttcctgac c 51

<210> 530

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический олигонуклеотид"

<400> 530

tgggcctcta ctagagaatc a 21

<210> 531

<211> 27

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический олигонуклеотид"

<400> 531

cagaacgact atagctaccc ctacacc 27

<210> 532

<211> 39

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический олигонуклеотид"

<400> 532

agtcagtcac tgctggatag cggtaatcag aagaacttc 39

<210> 533

<211> 9

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический олигонуклеотид"

<400> 533

tgggcctct

9

<210> 534

<211> 18

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический олигонуклеотид"

<400> 534

gactatagct acccctac 18

<210> 535

<211> 440

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 535

Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Asp Cys Lys Ala Ser Gly Ile Thr Phe Ser Asn Ser

20 25 30

Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Val Ile Trp Tyr Asp Gly Ser Lys Arg Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Phe

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Thr Asn Asp Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser

100 105 110

Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser

115 120 125

Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp

130 135 140

Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr

145 150 155 160

Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr

165 170 175

Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys

180 185 190

Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp

195 200 205

Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala

210 215 220

Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro

225 230 235 240

Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val

245 250 255

Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val

260 265 270

Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln

275 280 285

Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln

290 295 300

Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly

305 310 315 320

Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro

325 330 335

Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr

340 345 350

Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser

355 360 365

Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr

370 375 380

Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr

385 390 395 400

Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe

405 410 415

Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys

420 425 430

Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys

435 440

<210> 536

<211> 214

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 536

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Tyr

20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Ser Asn Trp Pro Arg

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala

100 105 110

Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly

115 120 125

Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala

130 135 140

Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln

145 150 155 160

Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser

165 170 175

Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr

180 185 190

Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser

195 200 205

Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210

<210> 537

<211> 447

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 537

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Val Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr

20 25 30

Tyr Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Gly Ile Asn Pro Ser Asn Gly Gly Thr Asn Phe Asn Glu Lys Phe

50 55 60

Lys Asn Arg Val Thr Leu Thr Thr Asp Ser Ser Thr Thr Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Lys Ser Leu Gln Phe Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Arg Asp Tyr Arg Phe Asp Met Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val

115 120 125

Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala

130 135 140

Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser

145 150 155 160

Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val

165 170 175

Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro

180 185 190

Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys

195 200 205

Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro

210 215 220

Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val

225 230 235 240

Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr

245 250 255

Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu

260 265 270

Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys

275 280 285

Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser

290 295 300

Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys

305 310 315 320

Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile

325 330 335

Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro

340 345 350

Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu

355 360 365

Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn

370 375 380

Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser

385 390 395 400

Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg

405 410 415

Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu

420 425 430

His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys

435 440 445

<210> 538

<211> 218

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 538

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Lys Gly Val Ser Thr Ser

20 25 30

Gly Tyr Ser Tyr Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro

35 40 45

Arg Leu Leu Ile Tyr Leu Ala Ser Tyr Leu Glu Ser Gly Val Pro Ala

50 55 60

Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser

65 70 75 80

Ser Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln His Ser Arg

85 90 95

Asp Leu Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg

100 105 110

Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln

115 120 125

Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr

130 135 140

Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser

145 150 155 160

Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr

165 170 175

Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys

180 185 190

His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro

195 200 205

Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210 215

<210> 539

<211> 447

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 539

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr

20 25 30

Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Gln Trp Met

35 40 45

Gly Trp Ile Asn Thr Asp Ser Gly Glu Ser Thr Tyr Ala Glu Glu Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Val Phe Ser Leu Asp Thr Ser Val Asn Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Ile Thr Ser Leu Thr Ala Glu Asp Thr Gly Met Tyr Phe Cys

85 90 95

Val Arg Val Gly Tyr Asp Ala Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu

100 105 110

Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu

115 120 125

Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys

130 135 140

Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser

145 150 155 160

Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser

165 170 175

Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser

180 185 190

Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn

195 200 205

Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His

210 215 220

Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val

225 230 235 240

Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr

245 250 255

Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu

260 265 270

Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys

275 280 285

Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser

290 295 300

Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys

305 310 315 320

Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile

325 330 335

Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro

340 345 350

Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu

355 360 365

Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn

370 375 380

Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser

385 390 395 400

Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg

405 410 415

Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu

420 425 430

His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

435 440 445

<210> 540

<211> 213

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 540

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Arg Ser Ser Val Ser Tyr Met

20 25 30

His Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Trp Ile Tyr

35 40 45

Arg Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Cys Leu Thr Ile Asn Ser Leu Gln Pro Glu

65 70 75 80

Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Ser Phe Pro Leu Thr

85 90 95

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro

100 105 110

Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr

115 120 125

Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys

130 135 140

Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu

145 150 155 160

Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser

165 170 175

Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala

180 185 190

Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe

195 200 205

Asn Arg Gly Glu Cys

210

<210> 541

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 541

Gly Tyr Thr Phe Thr Thr Tyr Trp Met His

1 5 10

<210> 542

<400> 542

000

<210> 543

<400> 543

000

<210> 544

<400> 544

000

<210> 545

<400> 545

000

<210> 546

<400> 546

000

<210> 547

<400> 547

000

<210> 548

<400> 548

000

<210> 549

<400> 549

000

<210> 550

<400> 550

000

<210> 551

<400> 551

000

<210> 552

<400> 552

000

<210> 553

<400> 553

000

<210> 554

<400> 554

000

<210> 555

<400> 555

000

<210> 556

<400> 556

000

<210> 557

<400> 557

000

<210> 558

<400> 558

000

<210> 559

<400> 559

000

<210> 560

<400> 560

000

<210> 561

<400> 561

000

<210> 562

<400> 562

000

<210> 563

<400> 563

000

<210> 564

<400> 564

000

<210> 565

<400> 565

000

<210> 566

<400> 566

000

<210> 567

<400> 567

000

<210> 568

<400> 568

000

<210> 569

<400> 569

000

<210> 570

<400> 570

000

<210> 571

<400> 571

000

<210> 572

<400> 572

000

<210> 573

<400> 573

000

<210> 574

<400> 574

000

<210> 575

<400> 575

000

<210> 576

<400> 576

000

<210> 577

<400> 577

000

<210> 578

<400> 578

000

<210> 579

<400> 579

000

<210> 580

<400> 580

000

<210> 581

<400> 581

000

<210> 582

<400> 582

000

<210> 583

<400> 583

000

<210> 584

<400> 584

000

<210> 585

<400> 585

000

<210> 586

<400> 586

000

<210> 587

<400> 587

000

<210> 588

<400> 588

000

<210> 589

<400> 589

000

<210> 590

<400> 590

000

<210> 591

<400> 591

000

<210> 592

<400> 592

000

<210> 593

<400> 593

000

<210> 594

<400> 594

000

<210> 595

<400> 595

000

<210> 596

<400> 596

000

<210> 597

<400> 597

000

<210> 598

<400> 598

000

<210> 599

<400> 599

000

<210> 600

<400> 600

000

<210> 601

<211> 5

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 601

Ser Tyr Trp Met Tyr

1 5

<210> 602

<211> 17

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 602

Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe Lys

1 5 10 15

Asn

<210> 603

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 603

Asp Tyr Arg Lys Gly Leu Tyr Ala Met Asp Tyr

1 5 10

<210> 604

<211> 7

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 604

Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

1 5

<210> 605

<211> 6

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 605

Asp Pro Asn Ser Gly Ser

1 5

<210> 606

<211> 120

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 606

Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Val Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

20 25 30

Trp Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Arg Gly Gln Arg Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe

50 55 60

Lys Asn Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Asp Tyr Arg Lys Gly Leu Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 607

<211> 360

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 607

gaagtgcagc tggtgcagtc aggcgccgaa gtgaagaaac ccggcgctac cgtgaagatt 60

agctgtaaag tctcaggcta caccttcact agctactgga tgtactgggt ccgacaggct 120

agagggcaaa gactggagtg gatcggtaga atcgacccta atagcggctc tactaagtat 180

aacgagaagt ttaagaatag gttcactatt agtagggata actctaagaa caccctgtac 240

ctgcagatga atagcctgag agccgaggac accgccgtct actactgcgc tagagactat 300

agaaagggcc tgtacgctat ggactactgg ggtcaaggca ctaccgtgac cgtgtcttca 360

<210> 608

<211> 446

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 608

Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Val Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

20 25 30

Trp Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Arg Gly Gln Arg Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe

50 55 60

Lys Asn Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Asp Tyr Arg Lys Gly Leu Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val

115 120 125

Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala

130 135 140

Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser

145 150 155 160

Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val

165 170 175

Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro

180 185 190

Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys

195 200 205

Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro

210 215 220

Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val

225 230 235 240

Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr

245 250 255

Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu

260 265 270

Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys

275 280 285

Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser

290 295 300

Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys

305 310 315 320

Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile

325 330 335

Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro

340 345 350

Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu

355 360 365

Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn

370 375 380

Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser

385 390 395 400

Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg

405 410 415

Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu

420 425 430

His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly

435 440 445

<210> 609

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 609

Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala Val Ala

1 5 10

<210> 610

<211> 7

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 610

Trp Ala Ser Thr Arg His Thr

1 5

<210> 611

<211> 9

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 611

Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Pro Leu Thr

1 5

<210> 612

<211> 7

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 612

Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala

1 5

<210> 613

<211> 3

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 613

Trp Ala Ser

1

<210> 614

<211> 6

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 614

Tyr Asn Ser Tyr Pro Leu

1 5

<210> 615

<211> 1338

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 615

gaagtgcagc tggtgcagtc aggcgccgaa gtgaagaaac ccggcgctac cgtgaagatt 60

agctgtaaag tctcaggcta caccttcact agctactgga tgtactgggt ccgacaggct 120

agagggcaaa gactggagtg gatcggtaga atcgacccta atagcggctc tactaagtat 180

aacgagaagt ttaagaatag gttcactatt agtagggata actctaagaa caccctgtac 240

ctgcagatga atagcctgag agccgaggac accgccgtct actactgcgc tagagactat 300

agaaagggcc tgtacgctat ggactactgg ggtcaaggca ctaccgtgac cgtgtcttca 360

gctagcacta agggcccgtc cgtgttcccc ctggcacctt gtagccggag cactagcgaa 420

tccaccgctg ccctcggctg cctggtcaag gattacttcc cggagcccgt gaccgtgtcc 480

tggaacagcg gagccctgac ctccggagtg cacaccttcc ccgctgtgct gcagagctcc 540

gggctgtact cgctgtcgtc ggtggtcacg gtgccttcat ctagcctggg taccaagacc 600

tacacttgca acgtggacca caagccttcc aacactaagg tggacaagcg cgtcgaatcg 660

aagtacggcc caccgtgccc gccttgtccc gcgccggagt tcctcggcgg tccctcggtc 720

tttctgttcc caccgaagcc caaggacact ttgatgattt cccgcacccc tgaagtgaca 780

tgcgtggtcg tggacgtgtc acaggaagat ccggaggtgc agttcaattg gtacgtggat 840

ggcgtcgagg tgcacaacgc caaaaccaag ccgagggagg agcagttcaa ctccacttac 900

cgcgtcgtgt ccgtgctgac ggtgctgcat caggactggc tgaacgggaa ggagtacaag 960

tgcaaagtgt ccaacaaggg acttcctagc tcaatcgaaa agaccatctc gaaagccaag

1020

ggacagcccc gggaacccca agtgtatacc ctgccaccga gccaggaaga aatgactaag

1080

aaccaagtct cattgacttg ccttgtgaag ggcttctacc catcggatat cgccgtggaa

1140

tgggagtcca acggccagcc ggaaaacaac tacaagacca cccctccggt gctggactca

1200

gacggatcct tcttcctcta ctcgcggctg accgtggata agagcagatg gcaggaggga

1260

aatgtgttca gctgttctgt gatgcatgaa gccctgcaca accactacac tcagaagtcc

1320

ctgtccctct ccctggga 1338

<210> 616

<211> 107

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 616

Ala Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala

20 25 30

Val Ala Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Trp Ala Ser Thr Arg His Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Glu Ala

65 70 75 80

Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Pro Leu

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210> 617

<211> 321

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 617

gctattcagc tgactcagtc acctagtagc ctgagcgcta gtgtgggcga tagagtgact 60

atcacctgta aagcctctca ggacgtgggc accgccgtgg cctggtatct gcagaagcct 120

ggtcaatcac ctcagctgct gatctactgg gcctctacta gacacaccgg cgtgccctct 180

aggtttagcg gtagcggtag tggcaccgac ttcaccttca ctatctcttc actggaagcc 240

gaggacgccg ctacctacta ctgtcagcag tataatagct accccctgac cttcggtcaa 300

ggcactaagg tcgagattaa g 321

<210> 618

<211> 214

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 618

Ala Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala

20 25 30

Val Ala Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Trp Ala Ser Thr Arg His Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Glu Ala

65 70 75 80

Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Pro Leu

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala

100 105 110

Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly

115 120 125

Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala

130 135 140

Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln

145 150 155 160

Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser

165 170 175

Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr

180 185 190

Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser

195 200 205

Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210

<210> 619

<211> 642

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 619

gctattcagc tgactcagtc acctagtagc ctgagcgcta gtgtgggcga tagagtgact 60

atcacctgta aagcctctca ggacgtgggc accgccgtgg cctggtatct gcagaagcct 120

ggtcaatcac ctcagctgct gatctactgg gcctctacta gacacaccgg cgtgccctct 180

aggtttagcg gtagcggtag tggcaccgac ttcaccttca ctatctcttc actggaagcc 240

gaggacgccg ctacctacta ctgtcagcag tataatagct accccctgac cttcggtcaa 300

ggcactaagg tcgagattaa gcgtacggtg gccgctccca gcgtgttcat cttccccccc 360

agcgacgagc agctgaagag cggcaccgcc agcgtggtgt gcctgctgaa caacttctac 420

ccccgggagg ccaaggtgca gtggaaggtg gacaacgccc tgcagagcgg caacagccag 480

gagagcgtca ccgagcagga cagcaaggac tccacctaca gcctgagcag caccctgacc 540

ctgagcaagg ccgactacga gaagcataag gtgtacgcct gcgaggtgac ccaccagggc 600

ctgtccagcc ccgtgaccaa gagcttcaac aggggcgagt gc 642

<210> 620

<211> 120

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 620

Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Val Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

20 25 30

Trp Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Thr Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe

50 55 60

Lys Asn Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Asp Tyr Arg Lys Gly Leu Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 621

<211> 360

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 621

gaagtgcagc tggtgcagtc aggcgccgaa gtgaagaaac ccggcgctac cgtgaagatt 60

agctgtaaag tctcaggcta caccttcact agctactgga tgtactgggt ccgacaggct 120

accggtcaag gcctggagtg gatgggtaga atcgacccta atagcggctc tactaagtat 180

aacgagaagt ttaagaatag agtgactatc accgccgata agtctactag caccgcctat 240

atggaactgt ctagcctgag atcagaggac accgccgtct actactgcgc tagagactat 300

agaaagggcc tgtacgctat ggactactgg ggtcaaggca ctaccgtgac cgtgtcttca 360

<210> 622

<211> 446

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 622

Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Val Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

20 25 30

Trp Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Thr Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe

50 55 60

Lys Asn Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Asp Tyr Arg Lys Gly Leu Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val

115 120 125

Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala

130 135 140

Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser

145 150 155 160

Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val

165 170 175

Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro

180 185 190

Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys

195 200 205

Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro

210 215 220

Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val

225 230 235 240

Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr

245 250 255

Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu

260 265 270

Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys

275 280 285

Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser

290 295 300

Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys

305 310 315 320

Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile

325 330 335

Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro

340 345 350

Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu

355 360 365

Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn

370 375 380

Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser

385 390 395 400

Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg

405 410 415

Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu

420 425 430

His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly

435 440 445

<210> 623

<211> 1338

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 623

gaagtgcagc tggtgcagtc aggcgccgaa gtgaagaaac ccggcgctac cgtgaagatt 60

agctgtaaag tctcaggcta caccttcact agctactgga tgtactgggt ccgacaggct 120

accggtcaag gcctggagtg gatgggtaga atcgacccta atagcggctc tactaagtat 180

aacgagaagt ttaagaatag agtgactatc accgccgata agtctactag caccgcctat 240

atggaactgt ctagcctgag atcagaggac accgccgtct actactgcgc tagagactat 300

agaaagggcc tgtacgctat ggactactgg ggtcaaggca ctaccgtgac cgtgtcttca 360

gctagcacta agggcccgtc cgtgttcccc ctggcacctt gtagccggag cactagcgaa 420

tccaccgctg ccctcggctg cctggtcaag gattacttcc cggagcccgt gaccgtgtcc 480

tggaacagcg gagccctgac ctccggagtg cacaccttcc ccgctgtgct gcagagctcc 540

gggctgtact cgctgtcgtc ggtggtcacg gtgccttcat ctagcctggg taccaagacc 600

tacacttgca acgtggacca caagccttcc aacactaagg tggacaagcg cgtcgaatcg 660

aagtacggcc caccgtgccc gccttgtccc gcgccggagt tcctcggcgg tccctcggtc 720

tttctgttcc caccgaagcc caaggacact ttgatgattt cccgcacccc tgaagtgaca 780

tgcgtggtcg tggacgtgtc acaggaagat ccggaggtgc agttcaattg gtacgtggat 840

ggcgtcgagg tgcacaacgc caaaaccaag ccgagggagg agcagttcaa ctccacttac 900

cgcgtcgtgt ccgtgctgac ggtgctgcat caggactggc tgaacgggaa ggagtacaag 960

tgcaaagtgt ccaacaaggg acttcctagc tcaatcgaaa agaccatctc gaaagccaag

1020

ggacagcccc gggaacccca agtgtatacc ctgccaccga gccaggaaga aatgactaag

1080

aaccaagtct cattgacttg ccttgtgaag ggcttctacc catcggatat cgccgtggaa

1140

tgggagtcca acggccagcc ggaaaacaac tacaagacca cccctccggt gctggactca

1200

gacggatcct tcttcctcta ctcgcggctg accgtggata agagcagatg gcaggaggga

1260

aatgtgttca gctgttctgt gatgcatgaa gccctgcaca accactacac tcagaagtcc

1320

ctgtccctct ccctggga 1338

<210> 624

<211> 107

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 624

Asp Val Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Leu Gly

1 5 10 15

Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala

20 25 30

Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Trp Ala Ser Thr Arg His Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Pro Leu

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210> 625

<211> 321

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 625

gacgtcgtga tgactcagtc acccctgagc ctgcccgtga ccctggggca gcccgcctct 60

attagctgta aagcctctca ggacgtgggc accgccgtgg cctggtatca gcagaagcca 120

gggcaagccc ctagactgct gatctactgg gcctctacta gacacaccgg cgtgccctct 180

aggtttagcg gtagcggtag tggcaccgag ttcaccctga ctatctcttc actgcagccc 240

gacgacttcg ctacctacta ctgtcagcag tataatagct accccctgac cttcggtcaa 300

ggcactaagg tcgagattaa g 321

<210> 626

<211> 214

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 626

Asp Val Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Leu Gly

1 5 10 15

Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala

20 25 30

Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Trp Ala Ser Thr Arg His Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Pro Leu

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala

100 105 110

Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly

115 120 125

Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala

130 135 140

Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln

145 150 155 160

Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser

165 170 175

Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr

180 185 190

Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser

195 200 205

Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210

<210> 627

<211> 642

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 627

gacgtcgtga tgactcagtc acccctgagc ctgcccgtga ccctggggca gcccgcctct 60

attagctgta aagcctctca ggacgtgggc accgccgtgg cctggtatca gcagaagcca 120

gggcaagccc ctagactgct gatctactgg gcctctacta gacacaccgg cgtgccctct 180

aggtttagcg gtagcggtag tggcaccgag ttcaccctga ctatctcttc actgcagccc 240

gacgacttcg ctacctacta ctgtcagcag tataatagct accccctgac cttcggtcaa 300

ggcactaagg tcgagattaa gcgtacggtg gccgctccca gcgtgttcat cttccccccc 360

agcgacgagc agctgaagag cggcaccgcc agcgtggtgt gcctgctgaa caacttctac 420

ccccgggagg ccaaggtgca gtggaaggtg gacaacgccc tgcagagcgg caacagccag 480

gagagcgtca ccgagcagga cagcaaggac tccacctaca gcctgagcag caccctgacc 540

ctgagcaagg ccgactacga gaagcataag gtgtacgcct gcgaggtgac ccaccagggc 600

ctgtccagcc ccgtgaccaa gagcttcaac aggggcgagt gc 642

<210> 628

<211> 15

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический олигонуклеотид"

<400> 628

agctactgga tgtac 15

<210> 629

<211> 51

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический олигонуклеотид"

<400> 629

agaatcgacc ctaatagcgg ctctactaag tataacgaga agtttaagaa t 51

<210> 630

<211> 33

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический олигонуклеотид"

<400> 630

gactatagaa agggcctgta cgctatggac tac 33

<210> 631

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический олигонуклеотид"

<400> 631

ggctacacct tcactagcta c 21

<210> 632

<211> 18

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический олигонуклеотид"

<400> 632

gaccctaata gcggctct 18

<210> 633

<211> 33

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический олигонуклеотид"

<400> 633

aaagcctctc aggacgtggg caccgccgtg gcc 33

<210> 634

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический олигонуклеотид"

<400> 634

tgggcctcta ctagacacac c 21

<210> 635

<211> 27

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический олигонуклеотид"

<400> 635

cagcagtata atagctaccc cctgacc 27

<210> 636

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический олигонуклеотид"

<400> 636

tctcaggacg tgggcaccgc c 21

<210> 637

<211> 9

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический олигонуклеотид"

<400> 637

tgggcctct

9

<210> 638

<211> 18

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический олигонуклеотид"

<400> 638

tataatagct accccctg 18

<210> 639

<211> 448

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 639

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Ser

20 25 30

Trp Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Trp Ile Ser Pro Tyr Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Arg His Trp Pro Gly Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro

115 120 125

Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly

130 135 140

Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn

145 150 155 160

Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln

165 170 175

Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser

180 185 190

Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser

195 200 205

Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr

210 215 220

His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser

225 230 235 240

Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg

245 250 255

Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro

260 265 270

Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala

275 280 285

Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Ala Ser Thr Tyr Arg Val Val

290 295 300

Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr

305 310 315 320

Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr

325 330 335

Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu

340 345 350

Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys

355 360 365

Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser

370 375 380

Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp

385 390 395 400

Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser

405 410 415

Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala

420 425 430

Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

435 440 445

<210> 640

<211> 214

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 640

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Val Ser Thr Ala

20 25 30

Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Ser Ala Ser Phe Leu Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Leu Tyr His Pro Ala

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala

100 105 110

Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly

115 120 125

Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala

130 135 140

Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln

145 150 155 160

Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser

165 170 175

Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr

180 185 190

Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser

195 200 205

Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210

<210> 641

<211> 450

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 641

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr

20 25 30

Ile Met Met Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Ser Ile Tyr Pro Ser Gly Gly Ile Thr Phe Tyr Ala Asp Thr Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ile Lys Leu Gly Thr Val Thr Thr Val Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val

115 120 125

Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala

130 135 140

Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser

145 150 155 160

Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val

165 170 175

Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro

180 185 190

Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys

195 200 205

Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp

210 215 220

Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly

225 230 235 240

Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile

245 250 255

Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu

260 265 270

Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His

275 280 285

Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg

290 295 300

Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys

305 310 315 320

Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu

325 330 335

Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr

340 345 350

Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu

355 360 365

Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp

370 375 380

Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val

385 390 395 400

Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp

405 410 415

Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His

420 425 430

Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro

435 440 445

Gly Lys

450

<210> 642

<211> 216

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 642

Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln

1 5 10 15

Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr

20 25 30

Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu

35 40 45

Met Ile Tyr Asp Val Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe

50 55 60

Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu

65 70 75 80

Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Ser

85 90 95

Ser Thr Arg Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly Gln

100 105 110

Pro Lys Ala Asn Pro Thr Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu

115 120 125

Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr

130 135 140

Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Gly Ser Pro Val Lys

145 150 155 160

Ala Gly Val Glu Thr Thr Lys Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr

165 170 175

Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His

180 185 190

Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys

195 200 205

Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser

210 215

<210> 643

<211> 451

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 643

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Tyr

20 25 30

Trp Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Asn Ile Lys Gln Asp Gly Ser Glu Lys Tyr Tyr Val Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Glu Gly Gly Trp Phe Gly Glu Leu Ala Phe Asp Tyr Trp Gly

100 105 110

Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser

115 120 125

Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala

130 135 140

Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val

145 150 155 160

Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala

165 170 175

Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val

180 185 190

Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His

195 200 205

Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys

210 215 220

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Glu Gly

225 230 235 240

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

245 250 255

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His

260 265 270

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

275 280 285

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr

290 295 300

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly

305 310 315 320

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Ser Ile

325 330 335

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

340 345 350

Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser

355 360 365

Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

370 375 380

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

385 390 395 400

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val

405 410 415

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

420 425 430

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

435 440 445

Pro Gly Lys

450

<210> 644

<211> 215

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 644

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Arg Val Ser Ser Ser

20 25 30

Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu

35 40 45

Ile Tyr Asp Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser

50 55 60

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu

65 70 75 80

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Ser Leu Pro

85 90 95

Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala

100 105 110

Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser

115 120 125

Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu

130 135 140

Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser

145 150 155 160

Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu

165 170 175

Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val

180 185 190

Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys

195 200 205

Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210 215

<210> 645

<211> 123

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 645

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Thr Ser Gly Asp Thr Phe Ser Thr Tyr

20 25 30

Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Gly Ile Ile Pro Ile Phe Gly Lys Ala His Tyr Ala Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys

85 90 95

Ala Arg Lys Phe His Phe Val Ser Gly Ser Pro Phe Gly Met Asp Val

100 105 110

Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 646

<211> 106

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 646

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Tyr

20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Asn Trp Pro Thr

85 90 95

Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210> 647

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 647

Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Trp Met Tyr

1 5 10

<210> 648

<400> 648

000

<210> 649

<400> 649

000

<210> 650

<400> 650

000

<210> 651

<400> 651

000

<210> 652

<400> 652

000

<210> 653

<400> 653

000

<210> 654

<400> 654

000

<210> 655

<400> 655

000

<210> 656

<400> 656

000

<210> 657

<400> 657

000

<210> 658

<400> 658

000

<210> 659

<400> 659

000

<210> 660

<400> 660

000

<210> 661

<400> 661

000

<210> 662

<400> 662

000

<210> 663

<400> 663

000

<210> 664

<400> 664

000

<210> 665

<400> 665

000

<210> 666

<400> 666

000

<210> 667

<400> 667

000

<210> 668

<400> 668

000

<210> 669

<400> 669

000

<210> 670

<400> 670

000

<210> 671

<400> 671

000

<210> 672

<400> 672

000

<210> 673

<400> 673

000

<210> 674

<400> 674

000

<210> 675

<400> 675

000

<210> 676

<400> 676

000

<210> 677

<400> 677

000

<210> 678

<400> 678

000

<210> 679

<400> 679

000

<210> 680

<400> 680

000

<210> 681

<400> 681

000

<210> 682

<400> 682

000

<210> 683

<400> 683

000

<210> 684

<400> 684

000

<210> 685

<400> 685

000

<210> 686

<400> 686

000

<210> 687

<400> 687

000

<210> 688

<400> 688

000

<210> 689

<400> 689

000

<210> 690

<400> 690

000

<210> 691

<400> 691

000

<210> 692

<400> 692

000

<210> 693

<400> 693

000

<210> 694

<400> 694

000

<210> 695

<400> 695

000

<210> 696

<400> 696

000

<210> 697

<400> 697

000

<210> 698

<400> 698

000

<210> 699

<400> 699

000

<210> 700

<400> 700

000

<210> 701

<211> 5

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 701

Asn Tyr Gly Met Asn

1 5

<210> 702

<211> 17

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 702

Trp Ile Asn Thr Asp Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Asp Asp Phe Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 703

<211> 16

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 703

Asn Pro Pro Tyr Tyr Tyr Gly Thr Asn Asn Ala Glu Ala Met Asp Tyr

1 5 10 15

<210> 704

<211> 7

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 704

Gly Phe Thr Leu Thr Asn Tyr

1 5

<210> 705

<211> 6

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 705

Asn Thr Asp Thr Gly Glu

1 5

<210> 706

<211> 125

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 706

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Phe Thr Leu Thr Asn Tyr

20 25 30

Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Arg Gly Gln Arg Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Trp Ile Asn Thr Asp Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Asp Asp Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Val Phe Ser Leu Asp Thr Ser Val Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Ile Ser Ser Leu Lys Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Asn Pro Pro Tyr Tyr Tyr Gly Thr Asn Asn Ala Glu Ala Met

100 105 110

Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

115 120 125

<210> 707

<211> 375

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 707

caagtgcagc tggtgcagtc gggagccgaa gtgaagaagc ctggagcctc ggtgaaggtg 60

tcgtgcaagg catccggatt caccctcacc aattacggga tgaactgggt cagacaggcc 120

cggggtcaac ggctggagtg gatcggatgg attaacaccg acaccgggga gcctacctac 180

gcggacgatt tcaagggacg gttcgtgttc tccctcgaca cctccgtgtc caccgcctac 240

ctccaaatct cctcactgaa agcggaggac accgccgtgt actattgcgc gaggaacccg 300

ccctactact acggaaccaa caacgccgaa gccatggact actggggcca gggcaccact 360

gtgactgtgt ccagc 375

<210> 708

<211> 375

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 708

caggtgcagc tggtgcagtc tggcgccgaa gtgaagaaac ctggcgcctc cgtgaaggtg 60

tcctgcaagg cctctggctt caccctgacc aactacggca tgaactgggt gcgacaggcc 120

aggggccagc ggctggaatg gatcggctgg atcaacaccg acaccggcga gcctacctac 180

gccgacgact tcaagggcag attcgtgttc tccctggaca cctccgtgtc caccgcctac 240

ctgcagatct ccagcctgaa ggccgaggat accgccgtgt actactgcgc ccggaacccc 300

ccttactact acggcaccaa caacgccgag gccatggact attggggcca gggcaccacc 360

gtgaccgtgt cctct 375

<210> 709

<211> 451

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 709

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Phe Thr Leu Thr Asn Tyr

20 25 30

Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Arg Gly Gln Arg Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Trp Ile Asn Thr Asp Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Asp Asp Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Val Phe Ser Leu Asp Thr Ser Val Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Ile Ser Ser Leu Lys Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Asn Pro Pro Tyr Tyr Tyr Gly Thr Asn Asn Ala Glu Ala Met

100 105 110

Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr

115 120 125

Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser

130 135 140

Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu

145 150 155 160

Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His

165 170 175

Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser

180 185 190

Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys

195 200 205

Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu

210 215 220

Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu

225 230 235 240

Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu

245 250 255

Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser

260 265 270

Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu

275 280 285

Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr

290 295 300

Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn

305 310 315 320

Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser

325 330 335

Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln

340 345 350

Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val

355 360 365

Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val

370 375 380

Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro

385 390 395 400

Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr

405 410 415

Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val

420 425 430

Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu

435 440 445

Ser Leu Gly

450

<210> 710

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 710

Ser Ser Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr Leu Asn

1 5 10

<210> 711

<211> 7

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 711

Tyr Thr Ser Thr Leu His Leu

1 5

<210> 712

<211> 9

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 712

Gln Gln Tyr Tyr Asn Leu Pro Trp Thr

1 5

<210> 713

<211> 7

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 713

Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr

1 5

<210> 714

<211> 3

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 714

Tyr Thr Ser

1

<210> 715

<211> 6

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 715

Tyr Tyr Asn Leu Pro Trp

1 5

<210> 716

<211> 1353

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 716

caagtgcagc tggtgcagtc gggagccgaa gtgaagaagc ctggagcctc ggtgaaggtg 60

tcgtgcaagg catccggatt caccctcacc aattacggga tgaactgggt cagacaggcc 120

cggggtcaac ggctggagtg gatcggatgg attaacaccg acaccgggga gcctacctac 180

gcggacgatt tcaagggacg gttcgtgttc tccctcgaca cctccgtgtc caccgcctac 240

ctccaaatct cctcactgaa agcggaggac accgccgtgt actattgcgc gaggaacccg 300

ccctactact acggaaccaa caacgccgaa gccatggact actggggcca gggcaccact 360

gtgactgtgt ccagcgcgtc cactaagggc ccgtccgtgt tccccctggc accttgtagc 420

cggagcacta gcgaatccac cgctgccctc ggctgcctgg tcaaggatta cttcccggag 480

cccgtgaccg tgtcctggaa cagcggagcc ctgacctccg gagtgcacac cttccccgct 540

gtgctgcaga gctccgggct gtactcgctg tcgtcggtgg tcacggtgcc ttcatctagc 600

ctgggtacca agacctacac ttgcaacgtg gaccacaagc cttccaacac taaggtggac 660

aagcgcgtcg aatcgaagta cggcccaccg tgcccgcctt gtcccgcgcc ggagttcctc 720

ggcggtccct cggtctttct gttcccaccg aagcccaagg acactttgat gatttcccgc 780

acccctgaag tgacatgcgt ggtcgtggac gtgtcacagg aagatccgga ggtgcagttc 840

aattggtacg tggatggcgt cgaggtgcac aacgccaaaa ccaagccgag ggaggagcag 900

ttcaactcca cttaccgcgt cgtgtccgtg ctgacggtgc tgcatcagga ctggctgaac 960

gggaaggagt acaagtgcaa agtgtccaac aagggacttc ctagctcaat cgaaaagacc

1020

atctcgaaag ccaagggaca gccccgggaa ccccaagtgt ataccctgcc accgagccag

1080

gaagaaatga ctaagaacca agtctcattg acttgccttg tgaagggctt ctacccatcg

1140

gatatcgccg tggaatggga gtccaacggc cagccggaaa acaactacaa gaccacccct

1200

ccggtgctgg actcagacgg atccttcttc ctctactcgc ggctgaccgt ggataagagc

1260

agatggcagg agggaaatgt gttcagctgt tctgtgatgc atgaagccct gcacaaccac

1320

tacactcaga agtccctgtc cctctccctg gga 1353

<210> 717

<211> 1353

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 717

caggtgcagc tggtgcagtc tggcgccgaa gtgaagaaac ctggcgcctc cgtgaaggtg 60

tcctgcaagg cctctggctt caccctgacc aactacggca tgaactgggt gcgacaggcc 120

aggggccagc ggctggaatg gatcggctgg atcaacaccg acaccggcga gcctacctac 180

gccgacgact tcaagggcag attcgtgttc tccctggaca cctccgtgtc caccgcctac 240

ctgcagatct ccagcctgaa ggccgaggat accgccgtgt actactgcgc ccggaacccc 300

ccttactact acggcaccaa caacgccgag gccatggact attggggcca gggcaccacc 360

gtgaccgtgt cctctgcttc taccaagggg cccagcgtgt tccccctggc cccctgctcc 420

agaagcacca gcgagagcac agccgccctg ggctgcctgg tgaaggacta cttccccgag 480

cccgtgaccg tgtcctggaa cagcggagcc ctgaccagcg gcgtgcacac cttccccgcc 540

gtgctgcaga gcagcggcct gtacagcctg agcagcgtgg tgaccgtgcc cagcagcagc 600

ctgggcacca agacctacac ctgtaacgtg gaccacaagc ccagcaacac caaggtggac 660

aagagggtgg agagcaagta cggcccaccc tgccccccct gcccagcccc cgagttcctg 720

ggcggaccca gcgtgttcct gttccccccc aagcccaagg acaccctgat gatcagcaga 780

acccccgagg tgacctgtgt ggtggtggac gtgtcccagg aggaccccga ggtccagttc 840

aactggtacg tggacggcgt ggaggtgcac aacgccaaga ccaagcccag agaggagcag 900

tttaacagca cctaccgggt ggtgtccgtg ctgaccgtgc tgcaccagga ctggctgaac 960

ggcaaagagt acaagtgtaa ggtctccaac aagggcctgc caagcagcat cgaaaagacc

1020

atcagcaagg ccaagggcca gcctagagag ccccaggtct acaccctgcc acccagccaa

1080

gaggagatga ccaagaacca ggtgtccctg acctgtctgg tgaagggctt ctacccaagc

1140

gacatcgccg tggagtggga gagcaacggc cagcccgaga acaactacaa gaccaccccc

1200

ccagtgctgg acagcgacgg cagcttcttc ctgtacagca ggctgaccgt ggacaagtcc

1260

agatggcagg agggcaacgt ctttagctgc tccgtgatgc acgaggccct gcacaaccac

1320

tacacccaga agagcctgag cctgtccctg ggc 1353

<210> 718

<211> 107

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 718

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ser Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Tyr Thr Ser Thr Leu His Leu Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Tyr Asn Leu Pro Trp

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210> 719

<211> 321

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 719

gatattcaga tgactcagtc acctagtagc ctgagcgcta gtgtgggcga tagagtgact 60

atcacctgta gctctagtca ggatatctct aactacctga actggtatct gcagaagccc 120

ggtcaatcac ctcagctgct gatctactac actagcaccc tgcacctggg cgtgccctct 180

aggtttagcg gtagcggtag tggcaccgag ttcaccctga ctatctctag cctgcagccc 240

gacgacttcg ctacctacta ctgtcagcag tactataacc tgccctggac cttcggtcaa 300

ggcactaagg tcgagattaa g 321

<210> 720

<211> 321

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 720

gacatccaga tgacccagtc cccctccagc ctgtctgctt ccgtgggcga cagagtgacc 60

atcacctgtt cctccagcca ggacatctcc aactacctga actggtatct gcagaagccc 120

ggccagtccc ctcagctgct gatctactac acctccaccc tgcacctggg cgtgccctcc 180

agattttccg gctctggctc tggcaccgag tttaccctga ccatcagctc cctgcagccc 240

gacgacttcg ccacctacta ctgccagcag tactacaacc tgccctggac cttcggccag 300

ggcaccaagg tggaaatcaa g 321

<210> 721

<211> 214

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 721

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ser Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Tyr Thr Ser Thr Leu His Leu Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Tyr Asn Leu Pro Trp

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala

100 105 110

Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly

115 120 125

Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala

130 135 140

Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln

145 150 155 160

Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser

165 170 175

Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr

180 185 190

Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser

195 200 205

Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210

<210> 722

<211> 642

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 722

gatattcaga tgactcagtc acctagtagc ctgagcgcta gtgtgggcga tagagtgact 60

atcacctgta gctctagtca ggatatctct aactacctga actggtatct gcagaagccc 120

ggtcaatcac ctcagctgct gatctactac actagcaccc tgcacctggg cgtgccctct 180

aggtttagcg gtagcggtag tggcaccgag ttcaccctga ctatctctag cctgcagccc 240

gacgacttcg ctacctacta ctgtcagcag tactataacc tgccctggac cttcggtcaa 300

ggcactaagg tcgagattaa gcgtacggtg gccgctccca gcgtgttcat cttccccccc 360

agcgacgagc agctgaagag cggcaccgcc agcgtggtgt gcctgctgaa caacttctac 420

ccccgggagg ccaaggtgca gtggaaggtg gacaacgccc tgcagagcgg caacagccag 480

gagagcgtca ccgagcagga cagcaaggac tccacctaca gcctgagcag caccctgacc 540

ctgagcaagg ccgactacga gaagcataag gtgtacgcct gcgaggtgac ccaccagggc 600

ctgtccagcc ccgtgaccaa gagcttcaac aggggcgagt gc 642

<210> 723

<211> 642

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 723

gacatccaga tgacccagtc cccctccagc ctgtctgctt ccgtgggcga cagagtgacc 60

atcacctgtt cctccagcca ggacatctcc aactacctga actggtatct gcagaagccc 120

ggccagtccc ctcagctgct gatctactac acctccaccc tgcacctggg cgtgccctcc 180

agattttccg gctctggctc tggcaccgag tttaccctga ccatcagctc cctgcagccc 240

gacgacttcg ccacctacta ctgccagcag tactacaacc tgccctggac cttcggccag 300

ggcaccaagg tggaaatcaa gcgtacggtg gccgctccca gcgtgttcat cttcccccca 360

agcgacgagc agctgaagag cggcaccgcc agcgtggtgt gtctgctgaa caacttctac 420

cccagggagg ccaaggtgca gtggaaggtg gacaacgccc tgcagagcgg caacagccag 480

gagagcgtca ccgagcagga cagcaaggac tccacctaca gcctgagcag caccctgacc 540

ctgagcaagg ccgactacga gaagcacaag gtgtacgcct gtgaggtgac ccaccagggc 600

ctgtccagcc ccgtgaccaa gagcttcaac aggggcgagt gc 642

<210> 724

<211> 125

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 724

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Phe Thr Leu Thr Asn Tyr

20 25 30

Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Trp Ile Asn Thr Asp Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Asp Asp Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Val Phe Ser Leu Asp Thr Ser Val Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Ile Ser Ser Leu Lys Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Asn Pro Pro Tyr Tyr Tyr Gly Thr Asn Asn Ala Glu Ala Met

100 105 110

Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

115 120 125

<210> 725

<211> 375

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 725

caggtgcagc tggtgcagtc aggcgccgaa gtgaagaaac ccggcgctag tgtgaaagtc 60

agctgtaaag ctagtggctt caccctgact aactacggga tgaactgggt ccgccaggcc 120

ccaggtcaag gcctcgagtg gatgggctgg attaacaccg acaccggcga gcctacctac 180

gccgacgact ttaagggcag attcgtgttt agcctggaca ctagtgtgtc taccgcctac 240

ctgcagatct ctagcctgaa ggccgaggac accgccgtct actactgcgc tagaaacccc 300

ccctactact acggcactaa caacgccgag gctatggact actggggtca aggcactacc 360

gtgaccgtgt ctagc 375

<210> 726

<211> 375

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 726

caggtgcagc tggtgcagtc tggcgccgaa gtgaagaaac ctggcgcctc cgtgaaggtg 60

tcctgcaagg cctctggctt caccctgacc aactacggca tgaactgggt gcgacaggcc 120

cctggacagg gcctggaatg gatgggctgg atcaacaccg acaccggcga gcctacctac 180

gccgacgact tcaagggcag attcgtgttc tccctggaca cctccgtgtc caccgcctac 240

ctgcagatct ccagcctgaa ggccgaggat accgccgtgt actactgcgc ccggaacccc 300

ccttactact acggcaccaa caacgccgag gccatggact attggggcca gggcaccacc 360

gtgaccgtgt cctct 375

<210> 727

<211> 451

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 727

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Phe Thr Leu Thr Asn Tyr

20 25 30

Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Trp Ile Asn Thr Asp Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Asp Asp Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Val Phe Ser Leu Asp Thr Ser Val Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Ile Ser Ser Leu Lys Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Asn Pro Pro Tyr Tyr Tyr Gly Thr Asn Asn Ala Glu Ala Met

100 105 110

Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr

115 120 125

Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser

130 135 140

Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu

145 150 155 160

Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His

165 170 175

Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser

180 185 190

Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys

195 200 205

Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu

210 215 220

Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu

225 230 235 240

Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu

245 250 255

Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser

260 265 270

Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu

275 280 285

Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr

290 295 300

Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn

305 310 315 320

Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser

325 330 335

Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln

340 345 350

Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val

355 360 365

Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val

370 375 380

Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro

385 390 395 400

Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr

405 410 415

Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val

420 425 430

Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu

435 440 445

Ser Leu Gly

450

<210> 728

<211> 1353

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 728

caggtgcagc tggtgcagtc aggcgccgaa gtgaagaaac ccggcgctag tgtgaaagtc 60

agctgtaaag ctagtggctt caccctgact aactacggga tgaactgggt ccgccaggcc 120

ccaggtcaag gcctcgagtg gatgggctgg attaacaccg acaccggcga gcctacctac 180

gccgacgact ttaagggcag attcgtgttt agcctggaca ctagtgtgtc taccgcctac 240

ctgcagatct ctagcctgaa ggccgaggac accgccgtct actactgcgc tagaaacccc 300

ccctactact acggcactaa caacgccgag gctatggact actggggtca aggcactacc 360

gtgaccgtgt ctagcgctag cactaagggc ccgtccgtgt tccccctggc accttgtagc 420

cggagcacta gcgaatccac cgctgccctc ggctgcctgg tcaaggatta cttcccggag 480

cccgtgaccg tgtcctggaa cagcggagcc ctgacctccg gagtgcacac cttccccgct 540

gtgctgcaga gctccgggct gtactcgctg tcgtcggtgg tcacggtgcc ttcatctagc 600

ctgggtacca agacctacac ttgcaacgtg gaccacaagc cttccaacac taaggtggac 660

aagcgcgtcg aatcgaagta cggcccaccg tgcccgcctt gtcccgcgcc ggagttcctc 720

ggcggtccct cggtctttct gttcccaccg aagcccaagg acactttgat gatttcccgc 780

acccctgaag tgacatgcgt ggtcgtggac gtgtcacagg aagatccgga ggtgcagttc 840

aattggtacg tggatggcgt cgaggtgcac aacgccaaaa ccaagccgag ggaggagcag 900

ttcaactcca cttaccgcgt cgtgtccgtg ctgacggtgc tgcatcagga ctggctgaac 960

gggaaggagt acaagtgcaa agtgtccaac aagggacttc ctagctcaat cgaaaagacc

1020

atctcgaaag ccaagggaca gccccgggaa ccccaagtgt ataccctgcc accgagccag

1080

gaagaaatga ctaagaacca agtctcattg acttgccttg tgaagggctt ctacccatcg

1140

gatatcgccg tggaatggga gtccaacggc cagccggaaa acaactacaa gaccacccct

1200

ccggtgctgg actcagacgg atccttcttc ctctactcgc ggctgaccgt ggataagagc

1260

agatggcagg agggaaatgt gttcagctgt tctgtgatgc atgaagccct gcacaaccac

1320

tacactcaga agtccctgtc cctctccctg gga 1353

<210> 729

<211> 1353

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 729

caggtgcagc tggtgcagtc tggcgccgaa gtgaagaaac ctggcgcctc cgtgaaggtg 60

tcctgcaagg cctctggctt caccctgacc aactacggca tgaactgggt gcgacaggcc 120

cctggacagg gcctggaatg gatgggctgg atcaacaccg acaccggcga gcctacctac 180

gccgacgact tcaagggcag attcgtgttc tccctggaca cctccgtgtc caccgcctac 240

ctgcagatct ccagcctgaa ggccgaggat accgccgtgt actactgcgc ccggaacccc 300

ccttactact acggcaccaa caacgccgag gccatggact attggggcca gggcaccacc 360

gtgaccgtgt cctctgcttc taccaagggg cccagcgtgt tccccctggc cccctgctcc 420

agaagcacca gcgagagcac agccgccctg ggctgcctgg tgaaggacta cttccccgag 480

cccgtgaccg tgtcctggaa cagcggagcc ctgaccagcg gcgtgcacac cttccccgcc 540

gtgctgcaga gcagcggcct gtacagcctg agcagcgtgg tgaccgtgcc cagcagcagc 600

ctgggcacca agacctacac ctgtaacgtg gaccacaagc ccagcaacac caaggtggac 660

aagagggtgg agagcaagta cggcccaccc tgccccccct gcccagcccc cgagttcctg 720

ggcggaccca gcgtgttcct gttccccccc aagcccaagg acaccctgat gatcagcaga 780

acccccgagg tgacctgtgt ggtggtggac gtgtcccagg aggaccccga ggtccagttc 840

aactggtacg tggacggcgt ggaggtgcac aacgccaaga ccaagcccag agaggagcag 900

tttaacagca cctaccgggt ggtgtccgtg ctgaccgtgc tgcaccagga ctggctgaac 960

ggcaaagagt acaagtgtaa ggtctccaac aagggcctgc caagcagcat cgaaaagacc

1020

atcagcaagg ccaagggcca gcctagagag ccccaggtct acaccctgcc acccagccaa

1080

gaggagatga ccaagaacca ggtgtccctg acctgtctgg tgaagggctt ctacccaagc

1140

gacatcgccg tggagtggga gagcaacggc cagcccgaga acaactacaa gaccaccccc

1200

ccagtgctgg acagcgacgg cagcttcttc ctgtacagca ggctgaccgt ggacaagtcc

1260

agatggcagg agggcaacgt ctttagctgc tccgtgatgc acgaggccct gcacaaccac

1320

tacacccaga agagcctgag cctgtccctg ggc 1353

<210> 730

<211> 107

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 730

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ser Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Tyr Thr Ser Thr Leu His Leu Gly Ile Pro Pro Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Asn Asn Ile Glu Ser

65 70 75 80

Glu Asp Ala Ala Tyr Tyr Phe Cys Gln Gln Tyr Tyr Asn Leu Pro Trp

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210> 731

<211> 321

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 731

gatattcaga tgactcagtc acctagtagc ctgagcgcta gtgtgggcga tagagtgact 60

atcacctgta gctctagtca ggatatctct aactacctga actggtatca gcagaagccc 120

ggtaaagccc ctaagctgct gatctactac actagcaccc tgcacctggg aatcccccct 180

aggtttagcg gtagcggcta cggcaccgac ttcaccctga ctattaacaa tatcgagtca 240

gaggacgccg cctactactt ctgtcagcag tactataacc tgccctggac cttcggtcaa 300

ggcactaagg tcgagattaa g 321

<210> 732

<211> 321

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 732

gacatccaga tgacccagtc cccctccagc ctgtctgctt ccgtgggcga cagagtgacc 60

atcacctgtt cctccagcca ggacatctcc aactacctga actggtatca gcagaagccc 120

ggcaaggccc ccaagctgct gatctactac acctccaccc tgcacctggg catcccccct 180

agattctccg gctctggcta cggcaccgac ttcaccctga ccatcaacaa catcgagtcc 240

gaggacgccg cctactactt ctgccagcag tactacaacc tgccctggac cttcggccag 300

ggcaccaagg tggaaatcaa g 321

<210> 733

<211> 214

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 733

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ser Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Tyr Thr Ser Thr Leu His Leu Gly Ile Pro Pro Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Asn Asn Ile Glu Ser

65 70 75 80

Glu Asp Ala Ala Tyr Tyr Phe Cys Gln Gln Tyr Tyr Asn Leu Pro Trp

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala

100 105 110

Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly

115 120 125

Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala

130 135 140

Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln

145 150 155 160

Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser

165 170 175

Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr

180 185 190

Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser

195 200 205

Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210

<210> 734

<211> 642

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 734

gatattcaga tgactcagtc acctagtagc ctgagcgcta gtgtgggcga tagagtgact 60

atcacctgta gctctagtca ggatatctct aactacctga actggtatca gcagaagccc 120

ggtaaagccc ctaagctgct gatctactac actagcaccc tgcacctggg aatcccccct 180

aggtttagcg gtagcggcta cggcaccgac ttcaccctga ctattaacaa tatcgagtca 240

gaggacgccg cctactactt ctgtcagcag tactataacc tgccctggac cttcggtcaa 300

ggcactaagg tcgagattaa gcgtacggtg gccgctccca gcgtgttcat cttccccccc 360

agcgacgagc agctgaagag cggcaccgcc agcgtggtgt gcctgctgaa caacttctac 420

ccccgggagg ccaaggtgca gtggaaggtg gacaacgccc tgcagagcgg caacagccag 480

gagagcgtca ccgagcagga cagcaaggac tccacctaca gcctgagcag caccctgacc 540

ctgagcaagg ccgactacga gaagcataag gtgtacgcct gcgaggtgac ccaccagggc 600

ctgtccagcc ccgtgaccaa gagcttcaac aggggcgagt gc 642

<210> 735

<211> 642

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 735

gacatccaga tgacccagtc cccctccagc ctgtctgctt ccgtgggcga cagagtgacc 60

atcacctgtt cctccagcca ggacatctcc aactacctga actggtatca gcagaagccc 120

ggcaaggccc ccaagctgct gatctactac acctccaccc tgcacctggg catcccccct 180

agattctccg gctctggcta cggcaccgac ttcaccctga ccatcaacaa catcgagtcc 240

gaggacgccg cctactactt ctgccagcag tactacaacc tgccctggac cttcggccag 300

ggcaccaagg tggaaatcaa gcgtacggtg gccgctccca gcgtgttcat cttcccccca 360

agcgacgagc agctgaagag cggcaccgcc agcgtggtgt gtctgctgaa caacttctac 420

cccagggagg ccaaggtgca gtggaaggtg gacaacgccc tgcagagcgg caacagccag 480

gagagcgtca ccgagcagga cagcaaggac tccacctaca gcctgagcag caccctgacc 540

ctgagcaagg ccgactacga gaagcacaag gtgtacgcct gtgaggtgac ccaccagggc 600

ctgtccagcc ccgtgaccaa gagcttcaac aggggcgagt gc 642

<210> 736

<211> 15

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический олигонуклеотид"

<400> 736

aattacggga tgaac 15

<210> 737

<211> 15

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический олигонуклеотид"

<400> 737

aactacggca tgaac 15

<210> 738

<211> 51

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический олигонуклеотид"

<400> 738

tggattaaca ccgacaccgg ggagcctacc tacgcggacg atttcaaggg a 51

<210> 739

<211> 51

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический олигонуклеотид"

<400> 739

tggatcaaca ccgacaccgg cgagcctacc tacgccgacg acttcaaggg c 51

<210> 740

<211> 48

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический олигонуклеотид"

<400> 740

aacccgccct actactacgg aaccaacaac gccgaagcca tggactac 48

<210> 741

<211> 48

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический олигонуклеотид"

<400> 741

aacccccctt actactacgg caccaacaac gccgaggcca tggactat 48

<210> 742

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический олигонуклеотид"

<400> 742

ggattcaccc tcaccaatta c 21

<210> 743

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический олигонуклеотид"

<400> 743

ggcttcaccc tgaccaacta c 21

<210> 744

<211> 18

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический олигонуклеотид"

<400> 744

aacaccgaca ccggggag 18

<210> 745

<211> 18

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический олигонуклеотид"

<400> 745

aacaccgaca ccggcgag 18

<210> 746

<211> 33

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический олигонуклеотид"

<400> 746

agctctagtc aggatatctc taactacctg aac 33

<210> 747

<211> 33

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический олигонуклеотид"

<400> 747

tcctccagcc aggacatctc caactacctg aac 33

<210> 748

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический олигонуклеотид"

<400> 748

tacactagca ccctgcacct g 21

<210> 749

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический олигонуклеотид"

<400> 749

tacacctcca ccctgcacct g 21

<210> 750

<211> 27

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический олигонуклеотид"

<400> 750

cagcagtact ataacctgcc ctggacc 27

<210> 751

<211> 27

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический олигонуклеотид"

<400> 751

cagcagtact acaacctgcc ctggacc 27

<210> 752

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический олигонуклеотид"

<400> 752

agtcaggata tctctaacta c 21

<210> 753

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический олигонуклеотид"

<400> 753

agccaggaca tctccaacta c 21

<210> 754

<211> 9

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический олигонуклеотид"

<400> 754

tacactagc

9

<210> 755

<211> 9

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический олигонуклеотид"

<400> 755

tacacctcc

9

<210> 756

<211> 18

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический олигонуклеотид"

<400> 756

tactataacc tgccctgg 18

<210> 757

<211> 18

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический олигонуклеотид"

<400> 757

tactacaacc tgccctgg 18

<210> 758

<211> 15

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический олигонуклеотид"

<400> 758

aactacggga tgaac 15

<210> 759

<211> 51

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический олигонуклеотид"

<400> 759

tggattaaca ccgacaccgg cgagcctacc tacgccgacg actttaaggg c 51

<210> 760

<211> 48

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический олигонуклеотид"

<400> 760

aaccccccct actactacgg cactaacaac gccgaggcta tggactac 48

<210> 761

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический олигонуклеотид"

<400> 761

ggcttcaccc tgactaacta c 21

<210> 762

<211> 447

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 762

Gln Val Gln Leu Gln Gln Trp Gly Ala Gly Leu Leu Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Val Tyr Gly Gly Ser Phe Ser Asp Tyr

20 25 30

Tyr Trp Asn Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Glu Ile Asn His Arg Gly Ser Thr Asn Ser Asn Pro Ser Leu Lys

50 55 60

Ser Arg Val Thr Leu Ser Leu Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu

65 70 75 80

Lys Leu Arg Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Phe Gly Tyr Ser Asp Tyr Glu Tyr Asn Trp Phe Asp Pro Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val

115 120 125

Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala

130 135 140

Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser

145 150 155 160

Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val

165 170 175

Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro

180 185 190

Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys

195 200 205

Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro

210 215 220

Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val

225 230 235 240

Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr

245 250 255

Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu

260 265 270

Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys

275 280 285

Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser

290 295 300

Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys

305 310 315 320

Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile

325 330 335

Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro

340 345 350

Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu

355 360 365

Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn

370 375 380

Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser

385 390 395 400

Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg

405 410 415

Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu

420 425 430

His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys

435 440 445

<210> 763

<211> 214

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 763

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr

20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Asn Trp Pro Leu

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Asn Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala

100 105 110

Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly

115 120 125

Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala

130 135 140

Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln

145 150 155 160

Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser

165 170 175

Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr

180 185 190

Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser

195 200 205

Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210

<210> 764

<211> 446

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 764

Gln Val Gln Leu Lys Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Ala Pro Ser Gln

1 5 10 15

Ser Leu Ser Ile Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ala Tyr

20 25 30

Gly Val Asn Trp Val Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu

35 40 45

Gly Met Ile Trp Asp Asp Gly Ser Thr Asp Tyr Asn Ser Ala Leu Lys

50 55 60

Ser Arg Leu Ser Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Phe Leu

65 70 75 80

Lys Met Asn Ser Leu Gln Thr Asp Asp Thr Ala Arg Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Arg Glu Gly Asp Val Ala Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu

100 105 110

Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala

115 120 125

Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu

130 135 140

Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly

145 150 155 160

Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser

165 170 175

Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu

180 185 190

Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr

195 200 205

Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr

210 215 220

Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe

225 230 235 240

Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro

245 250 255

Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val

260 265 270

Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr

275 280 285

Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val

290 295 300

Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys

305 310 315 320

Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser

325 330 335

Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro

340 345 350

Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val

355 360 365

Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly

370 375 380

Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp

385 390 395 400

Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp

405 410 415

Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His

420 425 430

Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

435 440 445

<210> 765

<211> 220

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 765

Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ala Val Ser Val Gly

1 5 10 15

Gln Lys Val Thr Met Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Gly

20 25 30

Ser Asn Gln Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln

35 40 45

Ser Pro Lys Leu Leu Val Tyr Phe Ala Ser Thr Arg Asp Ser Gly Val

50 55 60

Pro Asp Arg Phe Ile Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr

65 70 75 80

Ile Ser Ser Val Gln Ala Glu Asp Leu Ala Asp Tyr Phe Cys Leu Gln

85 90 95

His Phe Gly Thr Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile

100 105 110

Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp

115 120 125

Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn

130 135 140

Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu

145 150 155 160

Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp

165 170 175

Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr

180 185 190

Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser

195 200 205

Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210 215 220

<210> 766

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 766

Gly Phe Thr Leu Thr Asn Tyr Gly Met Asn

1 5 10

<210> 767

<400> 767

000

<210> 768

<400> 768

000

<210> 769

<400> 769

000

<210> 770

<400> 770

000

<210> 771

<400> 771

000

<210> 772

<400> 772

000

<210> 773

<400> 773

000

<210> 774

<400> 774

000

<210> 775

<400> 775

000

<210> 776

<400> 776

000

<210> 777

<400> 777

000

<210> 778

<400> 778

000

<210> 779

<400> 779

000

<210> 780

<400> 780

000

<210> 781

<400> 781

000

<210> 782

<400> 782

000

<210> 783

<400> 783

000

<210> 784

<400> 784

000

<210> 785

<400> 785

000

<210> 786

<400> 786

000

<210> 787

<400> 787

000

<210> 788

<400> 788

000

<210> 789

<400> 789

000

<210> 790

<400> 790

000

<210> 791

<400> 791

000

<210> 792

<400> 792

000

<210> 793

<400> 793

000

<210> 794

<400> 794

000

<210> 795

<400> 795

000

<210> 796

<400> 796

000

<210> 797

<400> 797

000

<210> 798

<400> 798

000

<210> 799

<400> 799

000

<210> 800

<400> 800

000

<210> 801

<211> 5

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 801

Ser Tyr Asn Met His

1 5

<210> 802

<211> 17

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 802

Asp Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser Tyr Asn Gln Lys Phe Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 803

<211> 9

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 803

Val Gly Gly Ala Phe Pro Met Asp Tyr

1 5

<210> 804

<211> 7

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 804

Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

1 5

<210> 805

<211> 6

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 805

Tyr Pro Gly Asn Gly Asp

1 5

<210> 806

<211> 118

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 806

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

20 25 30

Asn Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Asp Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser Tyr Asn Gln Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Val Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Val Gly Gly Ala Phe Pro Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Thr Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 807

<211> 354

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 807

caggtgcagc tggtgcagtc aggcgccgaa gtgaagaaac ccggctctag cgtgaaagtt

60

tcttgtaaag ctagtggcta caccttcact agctataata tgcactgggt tcgccaggcc

120

ccagggcaag gcctcgagtg gatgggcgat atctaccccg ggaacggcga cactagttat

180

aatcagaagt ttaagggtag agtcactatc accgccgata agtctactag caccgtctat

240

atggaactga gttccctgag gtctgaggac accgccgtct actactgcgc tagagtgggc

300

ggagccttcc ctatggacta ctggggtcaa ggcactaccg tgaccgtgtc tagc

354

<210> 808

<211> 444

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 808

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

20 25 30

Asn Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Asp Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser Tyr Asn Gln Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Val Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Val Gly Gly Ala Phe Pro Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro

115 120 125

Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly

130 135 140

Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn

145 150 155 160

Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln

165 170 175

Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser

180 185 190

Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser

195 200 205

Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys

210 215 220

Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu

225 230 235 240

Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu

245 250 255

Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln

260 265 270

Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys

275 280 285

Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu

290 295 300

Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys

305 310 315 320

Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys

325 330 335

Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser

340 345 350

Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys

355 360 365

Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln

370 375 380

Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly

385 390 395 400

Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln

405 410 415

Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn

420 425 430

His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly

435 440

<210> 809

<211> 1332

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 809

caggtgcagc tggtgcagtc aggcgccgaa gtgaagaaac ccggctctag cgtgaaagtt 60

tcttgtaaag ctagtggcta caccttcact agctataata tgcactgggt tcgccaggcc 120

ccagggcaag gcctcgagtg gatgggcgat atctaccccg ggaacggcga cactagttat 180

aatcagaagt ttaagggtag agtcactatc accgccgata agtctactag caccgtctat 240

atggaactga gttccctgag gtctgaggac accgccgtct actactgcgc tagagtgggc 300

ggagccttcc ctatggacta ctggggtcaa ggcactaccg tgaccgtgtc tagcgctagc 360

actaagggcc cgtccgtgtt ccccctggca ccttgtagcc ggagcactag cgaatccacc 420

gctgccctcg gctgcctggt caaggattac ttcccggagc ccgtgaccgt gtcctggaac 480

agcggagccc tgacctccgg agtgcacacc ttccccgctg tgctgcagag ctccgggctg 540

tactcgctgt cgtcggtggt cacggtgcct tcatctagcc tgggtaccaa gacctacact 600

tgcaacgtgg accacaagcc ttccaacact aaggtggaca agcgcgtcga atcgaagtac 660

ggcccaccgt gcccgccttg tcccgcgccg gagttcctcg gcggtccctc ggtctttctg 720

ttcccaccga agcccaagga cactttgatg atttcccgca cccctgaagt gacatgcgtg 780

gtcgtggacg tgtcacagga agatccggag gtgcagttca attggtacgt ggatggcgtc 840

gaggtgcaca acgccaaaac caagccgagg gaggagcagt tcaactccac ttaccgcgtc 900

gtgtccgtgc tgacggtgct gcatcaggac tggctgaacg ggaaggagta caagtgcaaa 960

gtgtccaaca agggacttcc tagctcaatc gaaaagacca tctcgaaagc caagggacag

1020

ccccgggaac cccaagtgta taccctgcca ccgagccagg aagaaatgac taagaaccaa

1080

gtctcattga cttgccttgt gaagggcttc tacccatcgg atatcgccgt ggaatgggag

1140

tccaacggcc agccggaaaa caactacaag accacccctc cggtgctgga ctcagacgga

1200

tccttcttcc tctactcgcg gctgaccgtg gataagagca gatggcagga gggaaatgtg

1260

ttcagctgtt ctgtgatgca tgaagccctg cacaaccact acactcagaa gtccctgtcc

1320

ctctccctgg ga 1332

<210> 810

<211> 15

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 810

Arg Ala Ser Glu Ser Val Glu Tyr Tyr Gly Thr Ser Leu Met Gln

1 5 10 15

<210> 811

<211> 7

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 811

Ala Ala Ser Asn Val Glu Ser

1 5

<210> 812

<211> 9

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 812

Gln Gln Ser Arg Lys Asp Pro Ser Thr

1 5

<210> 813

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 813

Ser Glu Ser Val Glu Tyr Tyr Gly Thr Ser Leu

1 5 10

<210> 814

<211> 3

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 814

Ala Ala Ser

1

<210> 815

<211> 6

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 815

Ser Arg Lys Asp Pro Ser

1 5

<210> 816

<211> 111

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 816

Ala Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Glu Tyr Tyr

20 25 30

Gly Thr Ser Leu Met Gln Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro

35 40 45

Lys Leu Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Asn Val Glu Ser Gly Val Pro Ser

50 55 60

Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser

65 70 75 80

Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Ser Arg

85 90 95

Lys Asp Pro Ser Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105 110

<210> 817

<211> 333

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 817

gctattcagc tgactcagtc acctagtagc ctgagcgcta gtgtgggcga tagagtgact 60

atcacctgta gagctagtga atcagtcgag tactacggca ctagcctgat gcagtggtat 120

cagcagaagc ccgggaaagc ccctaagctg ctgatctacg ccgcctctaa cgtggaatca 180

ggcgtgccct ctaggtttag cggtagcggt agtggcaccg acttcaccct gactatctct 240

agcctgcagc ccgaggactt cgctacctac ttctgtcagc agtctaggaa ggaccctagc 300

accttcggcg gaggcactaa ggtcgagatt aag 333

<210> 818

<211> 218

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 818

Ala Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Glu Tyr Tyr

20 25 30

Gly Thr Ser Leu Met Gln Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro

35 40 45

Lys Leu Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Asn Val Glu Ser Gly Val Pro Ser

50 55 60

Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser

65 70 75 80

Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Ser Arg

85 90 95

Lys Asp Pro Ser Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg

100 105 110

Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln

115 120 125

Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr

130 135 140

Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser

145 150 155 160

Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr

165 170 175

Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys

180 185 190

His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro

195 200 205

Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210 215

<210> 819

<211> 654

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 819

gctattcagc tgactcagtc acctagtagc ctgagcgcta gtgtgggcga tagagtgact 60

atcacctgta gagctagtga atcagtcgag tactacggca ctagcctgat gcagtggtat 120

cagcagaagc ccgggaaagc ccctaagctg ctgatctacg ccgcctctaa cgtggaatca 180

ggcgtgccct ctaggtttag cggtagcggt agtggcaccg acttcaccct gactatctct 240

agcctgcagc ccgaggactt cgctacctac ttctgtcagc agtctaggaa ggaccctagc 300

accttcggcg gaggcactaa ggtcgagatt aagcgtacgg tggccgctcc cagcgtgttc 360

atcttccccc ccagcgacga gcagctgaag agcggcaccg ccagcgtggt gtgcctgctg 420

aacaacttct acccccggga ggccaaggtg cagtggaagg tggacaacgc cctgcagagc 480

ggcaacagcc aggagagcgt caccgagcag gacagcaagg actccaccta cagcctgagc 540

agcaccctga ccctgagcaa ggccgactac gagaagcata aggtgtacgc ctgcgaggtg 600

acccaccagg gcctgtccag ccccgtgacc aagagcttca acaggggcga gtgc 654

<210> 820

<211> 17

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 820

Asp Ile Tyr Pro Gly Gln Gly Asp Thr Ser Tyr Asn Gln Lys Phe Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 821

<211> 6

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 821

Tyr Pro Gly Gln Gly Asp

1 5

<210> 822

<211> 118

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 822

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

20 25 30

Asn Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Asp Ile Tyr Pro Gly Gln Gly Asp Thr Ser Tyr Asn Gln Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Ala Thr Met Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Val Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Val Gly Gly Ala Phe Pro Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 823

<211> 354

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 823

caggtgcagc tggtgcagtc aggcgccgaa gtgaagaaac ccggcgctag tgtgaaagtt 60

agctgtaaag ctagtggcta tactttcact tcttataata tgcactgggt ccgccaggcc 120

ccaggtcaag gcctcgagtg gatcggcgat atctaccccg gtcaaggcga cacttcctat 180

aatcagaagt ttaagggtag agctactatg accgccgata agtctacttc taccgtctat 240

atggaactga gttccctgag gtctgaggac accgccgtct actactgcgc tagagtgggc 300

ggagccttcc caatggacta ctggggtcaa ggcaccctgg tcaccgtgtc tagc 354

<210> 824

<211> 444

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 824

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

20 25 30

Asn Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Asp Ile Tyr Pro Gly Gln Gly Asp Thr Ser Tyr Asn Gln Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Ala Thr Met Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Val Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Val Gly Gly Ala Phe Pro Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro

115 120 125

Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly

130 135 140

Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn

145 150 155 160

Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln

165 170 175

Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser

180 185 190

Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser

195 200 205

Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys

210 215 220

Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu

225 230 235 240

Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu

245 250 255

Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln

260 265 270

Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys

275 280 285

Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu

290 295 300

Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys

305 310 315 320

Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys

325 330 335

Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser

340 345 350

Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys

355 360 365

Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln

370 375 380

Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly

385 390 395 400

Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln

405 410 415

Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn

420 425 430

His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly

435 440

<210> 825

<211> 1332

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 825

caggtgcagc tggtgcagtc aggcgccgaa gtgaagaaac ccggcgctag tgtgaaagtt 60

agctgtaaag ctagtggcta tactttcact tcttataata tgcactgggt ccgccaggcc 120

ccaggtcaag gcctcgagtg gatcggcgat atctaccccg gtcaaggcga cacttcctat 180

aatcagaagt ttaagggtag agctactatg accgccgata agtctacttc taccgtctat 240

atggaactga gttccctgag gtctgaggac accgccgtct actactgcgc tagagtgggc 300

ggagccttcc caatggacta ctggggtcaa ggcaccctgg tcaccgtgtc tagcgctagc 360

actaagggcc cgtccgtgtt ccccctggca ccttgtagcc ggagcactag cgaatccacc 420

gctgccctcg gctgcctggt caaggattac ttcccggagc ccgtgaccgt gtcctggaac 480

agcggagccc tgacctccgg agtgcacacc ttccccgctg tgctgcagag ctccgggctg 540

tactcgctgt cgtcggtggt cacggtgcct tcatctagcc tgggtaccaa gacctacact 600

tgcaacgtgg accacaagcc ttccaacact aaggtggaca agcgcgtcga atcgaagtac 660

ggcccaccgt gcccgccttg tcccgcgccg gagttcctcg gcggtccctc ggtctttctg 720

ttcccaccga agcccaagga cactttgatg atttcccgca cccctgaagt gacatgcgtg 780

gtcgtggacg tgtcacagga agatccggag gtgcagttca attggtacgt ggatggcgtc 840

gaggtgcaca acgccaaaac caagccgagg gaggagcagt tcaactccac ttaccgcgtc 900

gtgtccgtgc tgacggtgct gcatcaggac tggctgaacg ggaaggagta caagtgcaaa 960

gtgtccaaca agggacttcc tagctcaatc gaaaagacca tctcgaaagc caagggacag

1020

ccccgggaac cccaagtgta taccctgcca ccgagccagg aagaaatgac taagaaccaa

1080

gtctcattga cttgccttgt gaagggcttc tacccatcgg atatcgccgt ggaatgggag

1140

tccaacggcc agccggaaaa caactacaag accacccctc cggtgctgga ctcagacgga

1200

tccttcttcc tctactcgcg gctgaccgtg gataagagca gatggcagga gggaaatgtg

1260

ttcagctgtt ctgtgatgca tgaagccctg cacaaccact acactcagaa gtccctgtcc

1320

ctctccctgg ga 1332

<210> 826

<211> 111

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 826

Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Glu Tyr Tyr

20 25 30

Gly Thr Ser Leu Met Gln Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro

35 40 45

Lys Leu Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Asn Val Glu Ser Gly Val Pro Asp

50 55 60

Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser

65 70 75 80

Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Arg

85 90 95

Lys Asp Pro Ser Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105 110

<210> 827

<211> 333

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 827

gatatcgtcc tgactcagtc acccgatagc ctggccgtca gcctgggcga gcgggctact 60

attaactgta gagctagtga atcagtcgag tactacggca ctagcctgat gcagtggtat 120

cagcagaagc ccggtcaacc ccctaagctg ctgatctacg ccgcctctaa cgtggaatca 180

ggcgtgcccg ataggtttag cggtagcggt agtggcaccg acttcaccct gactattagt 240

agcctgcagg ccgaggacgt ggccgtctac tactgtcagc agtctaggaa ggaccctagc 300

accttcggcg gaggcactaa ggtcgagatt aag 333

<210> 828

<211> 218

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 828

Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Glu Tyr Tyr

20 25 30

Gly Thr Ser Leu Met Gln Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro

35 40 45

Lys Leu Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Asn Val Glu Ser Gly Val Pro Asp

50 55 60

Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser

65 70 75 80

Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Arg

85 90 95

Lys Asp Pro Ser Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg

100 105 110

Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln

115 120 125

Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr

130 135 140

Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser

145 150 155 160

Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr

165 170 175

Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys

180 185 190

His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro

195 200 205

Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210 215

<210> 829

<211> 654

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 829

gatatcgtcc tgactcagtc acccgatagc ctggccgtca gcctgggcga gcgggctact 60

attaactgta gagctagtga atcagtcgag tactacggca ctagcctgat gcagtggtat 120

cagcagaagc ccggtcaacc ccctaagctg ctgatctacg ccgcctctaa cgtggaatca 180

ggcgtgcccg ataggtttag cggtagcggt agtggcaccg acttcaccct gactattagt 240

agcctgcagg ccgaggacgt ggccgtctac tactgtcagc agtctaggaa ggaccctagc 300

accttcggcg gaggcactaa ggtcgagatt aagcgtacgg tggccgctcc cagcgtgttc 360

atcttccccc ccagcgacga gcagctgaag agcggcaccg ccagcgtggt gtgcctgctg 420

aacaacttct acccccggga ggccaaggtg cagtggaagg tggacaacgc cctgcagagc 480

ggcaacagcc aggagagcgt caccgagcag gacagcaagg actccaccta cagcctgagc 540

agcaccctga ccctgagcaa ggccgactac gagaagcata aggtgtacgc ctgcgaggtg 600

acccaccagg gcctgtccag ccccgtgacc aagagcttca acaggggcga gtgc 654

<210> 830

<211> 114

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 830

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser

20 25 30

Tyr Asp Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Asp Trp

35 40 45

Val Ser Thr Ile Ser Gly Gly Gly Thr Tyr Thr Tyr Tyr Gln Asp Ser

50 55 60

Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu

65 70 75 80

Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr

85 90 95

Cys Ala Ser Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser

100 105 110

Ser Ala

<210> 831

<211> 108

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 831

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Arg Arg Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr His Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Gly Ala Ser Thr Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser His Ser Ala Pro Leu

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg

100 105

<210> 832

<211> 120

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 832

Glu Val Gln Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Tyr Cys Val Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Gly Ser

20 25 30

Tyr Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp

35 40 45

Val Ser Ala Ile Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser

50 55 60

Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu

65 70 75 80

Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr

85 90 95

Cys Ala Lys Lys Tyr Tyr Val Gly Pro Ala Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

100 105 110

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly

115 120

<210> 833

<211> 113

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 833

Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Gln Ser Val Leu Tyr Ser

20 25 30

Ser Asn Asn Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln His Lys Pro Gly Gln

35 40 45

Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val

50 55 60

Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr

65 70 75 80

Ile Ser Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln

85 90 95

Tyr Tyr Ser Ser Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Ile Glu Val

100 105 110

Lys

<210> 834

<400> 834

000

<210> 835

<400> 835

000

<210> 836

<400> 836

000

<210> 837

<400> 837

000

<210> 838

<400> 838

000

<210> 839

<400> 839

000

<210> 840

<400> 840

000

<210> 841

<400> 841

000

<210> 842

<400> 842

000

<210> 843

<400> 843

000

<210> 844

<400> 844

000

<210> 845

<400> 845

000

<210> 846

<400> 846

000

<210> 847

<400> 847

000

<210> 848

<400> 848

000

<210> 849

<400> 849

000

<210> 850

<400> 850

000

<210> 851

<400> 851

000

<210> 852

<400> 852

000

<210> 853

<400> 853

000

<210> 854

<400> 854

000

<210> 855

<400> 855

000

<210> 856

<400> 856

000

<210> 857

<400> 857

000

<210> 858

<400> 858

000

<210> 859

<400> 859

000

<210> 860

<400> 860

000

<210> 861

<400> 861

000

<210> 862

<400> 862

000

<210> 863

<400> 863

000

<210> 864

<400> 864

000

<210> 865

<400> 865

000

<210> 866

<400> 866

000

<210> 867

<400> 867

000

<210> 868

<400> 868

000

<210> 869

<400> 869

000

<210> 870

<400> 870

000

<210> 871

<400> 871

000

<210> 872

<400> 872

000

<210> 873

<400> 873

000

<210> 874

<400> 874

000

<210> 875

<400> 875

000

<210> 876

<400> 876

000

<210> 877

<400> 877

000

<210> 878

<400> 878

000

<210> 879

<400> 879

000

<210> 880

<400> 880

000

<210> 881

<400> 881

000

<210> 882

<400> 882

000

<210> 883

<400> 883

000

<210> 884

<400> 884

000

<210> 885

<400> 885

000

<210> 886

<400> 886

000

<210> 887

<400> 887

000

<210> 888

<400> 888

000

<210> 889

<400> 889

000

<210> 890

<400> 890

000

<210> 891

<400> 891

000

<210> 892

<400> 892

000

<210> 893

<400> 893

000

<210> 894

<400> 894

000

<210> 895

<400> 895

000

<210> 896

<400> 896

000

<210> 897

<400> 897

000

<210> 898

<400> 898

000

<210> 899

<400> 899

000

<210> 900

<400> 900

000

<210> 901

<211> 121

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 901

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ser Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Ser Leu Ser Ser Tyr

20 25 30

Gly Val Asp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Gly Val Ile Trp Gly Gly Gly Gly Thr Tyr Tyr Ala Ser Ser Leu Met

50 55 60

Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu

65 70 75 80

Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Arg His Ala Tyr Gly His Asp Gly Gly Phe Ala Met Asp Tyr Trp Gly

100 105 110

Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 902

<211> 107

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 902

Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Ser Ser Asn

20 25 30

Val Ala Trp Tyr Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Gly Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gly Gln Ser Tyr Ser Tyr Pro Phe

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105

<210> 903

<211> 451

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 903

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ser Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Ser Leu Ser Ser Tyr

20 25 30

Gly Val Asp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Gly Val Ile Trp Gly Gly Gly Gly Thr Tyr Tyr Ala Ser Ser Leu Met

50 55 60

Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu

65 70 75 80

Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Arg His Ala Tyr Gly His Asp Gly Gly Phe Ala Met Asp Tyr Trp Gly

100 105 110

Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser

115 120 125

Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala

130 135 140

Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val

145 150 155 160

Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala

165 170 175

Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val

180 185 190

Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His

195 200 205

Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys

210 215 220

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly

225 230 235 240

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

245 250 255

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His

260 265 270

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

275 280 285

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr

290 295 300

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly

305 310 315 320

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

325 330 335

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

340 345 350

Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser

355 360 365

Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

370 375 380

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

385 390 395 400

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val

405 410 415

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

420 425 430

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

435 440 445

Pro Gly Lys

450

<210> 904

<211> 214

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 904

Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Ser Ser Asn

20 25 30

Val Ala Trp Tyr Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Gly Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gly Gln Ser Tyr Ser Tyr Pro Phe

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala

100 105 110

Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly

115 120 125

Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala

130 135 140

Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln

145 150 155 160

Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser

165 170 175

Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr

180 185 190

Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser

195 200 205

Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210

<210> 905

<211> 363

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 905

gaggtgcagc tggtggaatc tggcggcgga ctggtgcagt ccggcggctc tctgagactg 60

tcttgcgctg cctccggctt ctccctgtcc tcttacggcg tggactgggt gcgacaggcc 120

cctggcaagg gcctggaatg ggtgggagtg atctggggcg gaggcggcac ctactacgcc 180

tcttccctga tgggccggtt caccatctcc cgggacaact ccaagaacac cctgtacctg 240

cagatgaact ccctgcgggc cgaggacacc gccgtgtact actgcgccag acacgcctac 300

ggccacgacg gcggcttcgc catggattat tggggccagg gcaccctggt gacagtgtcc 360

tcc

363

<210> 906

<211> 321

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 906

gagatcgtga tgacccagtc ccccgccacc ctgtctgtgt ctcccggcga gagagccacc 60

ctgagctgca gagcctccga gtccgtgtcc tccaacgtgg cctggtatca gcagagacct 120

ggtcaggccc ctcggctgct gatctacggc gcctctaacc gggccaccgg catccctgcc 180

agattctccg gctccggcag cggcaccgac ttcaccctga ccatctcccg gctggaaccc 240

gaggacttcg ccgtgtacta ctgcggccag tcctactcat accccttcac cttcggccag 300

ggcaccaagc tggaaatcaa g 321

<210> 907

<211> 1353

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 907

gaggtgcagc tggtggaatc tggcggcgga ctggtgcagt ccggcggctc tctgagactg 60

tcttgcgctg cctccggctt ctccctgtcc tcttacggcg tggactgggt gcgacaggcc 120

cctggcaagg gcctggaatg ggtgggagtg atctggggcg gaggcggcac ctactacgcc 180

tcttccctga tgggccggtt caccatctcc cgggacaact ccaagaacac cctgtacctg 240

cagatgaact ccctgcgggc cgaggacacc gccgtgtact actgcgccag acacgcctac 300

ggccacgacg gcggcttcgc catggattat tggggccagg gcaccctggt gacagtgtcc 360

tccgctagca ccaagggccc aagtgtgttt cccctggccc ccagcagcaa gtctacttcc 420

ggcggaactg ctgccctggg ttgcctggtg aaggactact tccccgagcc cgtgacagtg 480

tcctggaact ctggggctct gacttccggc gtgcacacct tccccgccgt gctgcagagc 540

agcggcctgt acagcctgag cagcgtggtg acagtgccct ccagctctct gggaacccag 600

acctatatct gcaacgtgaa ccacaagccc agcaacacca aggtggacaa gagagtggag 660

cccaagagct gcgacaagac ccacacctgc cccccctgcc cagctccaga actgctggga 720

gggccttccg tgttcctgtt cccccccaag cccaaggaca ccctgatgat cagcaggacc 780

cccgaggtga cctgcgtggt ggtggacgtg tcccacgagg acccagaggt gaagttcaac 840

tggtacgtgg acggcgtgga ggtgcacaac gccaagacca agcccagaga ggagcagtac 900

aacagcacct acagggtggt gtccgtgctg accgtgctgc accaggactg gctgaacggc 960

aaagaataca agtgcaaagt ctccaacaag gccctgccag ccccaatcga aaagacaatc

1020

agcaaggcca agggccagcc acgggagccc caggtgtaca ccctgccccc cagccgggag

1080

gagatgacca agaaccaggt gtccctgacc tgtctggtga agggcttcta ccccagcgat

1140

atcgccgtgg agtgggagag caacggccag cccgagaaca actacaagac caccccccca

1200

gtgctggaca gcgacggcag cttcttcctg tacagcaagc tgaccgtgga caagtccagg

1260

tggcagcagg gcaacgtgtt cagctgcagc gtgatgcacg aggccctgca caaccactac

1320

acccagaagt ccctgagcct gagccccggc aag 1353

<210> 908

<211> 642

<212> ДНК

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 908

gagatcgtga tgacccagtc ccccgccacc ctgtctgtgt ctcccggcga gagagccacc 60

ctgagctgca gagcctccga gtccgtgtcc tccaacgtgg cctggtatca gcagagacct 120

ggtcaggccc ctcggctgct gatctacggc gcctctaacc gggccaccgg catccctgcc 180

agattctccg gctccggcag cggcaccgac ttcaccctga ccatctcccg gctggaaccc 240

gaggacttcg ccgtgtacta ctgcggccag tcctactcat accccttcac cttcggccag 300

ggcaccaagc tggaaatcaa gcgtacggtg gccgctccca gcgtgttcat cttccccccc 360

agcgacgagc agctgaagag cggcaccgcc agcgtggtgt gcctgctgaa caacttctac 420

ccccgggagg ccaaggtgca gtggaaggtg gacaacgccc tgcagagcgg caacagccag 480

gagagcgtca ccgagcagga cagcaaggac tccacctaca gcctgagcag caccctgacc 540

ctgagcaagg ccgactacga gaagcataag gtgtacgcct gcgaggtgac ccaccagggc 600

ctgtccagcc ccgtgaccaa gagcttcaac aggggcgagt gc 642

<210> 909

<211> 5

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 909

Ser Tyr Gly Val Asp

1 5

<210> 910

<211> 7

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 910

Gly Phe Ser Leu Ser Ser Tyr

1 5

<210> 911

<211> 16

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 911

Val Ile Trp Gly Gly Gly Gly Thr Tyr Tyr Ala Ser Ser Leu Met Gly

1 5 10 15

<210> 912

<211> 5

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 912

Trp Gly Gly Gly Gly

1 5

<210> 913

<211> 13

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 913

His Ala Tyr Gly His Asp Gly Gly Phe Ala Met Asp Tyr

1 5 10

<210> 914

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 914

Arg Ala Ser Glu Ser Val Ser Ser Asn Val Ala

1 5 10

<210> 915

<211> 7

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 915

Ser Glu Ser Val Ser Ser Asn

1 5

<210> 916

<211> 7

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 916

Gly Ala Ser Asn Arg Ala Thr

1 5

<210> 917

<211> 3

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 917

Gly Ala Ser

1

<210> 918

<211> 9

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 918

Gly Gln Ser Tyr Ser Tyr Pro Phe Thr

1 5

<210> 919

<211> 6

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 919

Ser Tyr Ser Tyr Pro Phe

1 5

<210> 920

<211> 124

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 920

Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr

20 25 30

Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Val Ile Trp Tyr Glu Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Gly Gly Ser Met Val Arg Gly Asp Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp

100 105 110

Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 921

<211> 107

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 921

Ala Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Ser Ala

20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Asp Ala Ser Ser Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Phe Asn Ser Tyr Pro Tyr

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105

<210> 922

<400> 922

000

<210> 923

<400> 923

000

<210> 924

<400> 924

000

<210> 925

<400> 925

000

<210> 926

<400> 926

000

<210> 927

<400> 927

000

<210> 928

<400> 928

000

<210> 929

<400> 929

000

<210> 930

<400> 930

000

<210> 931

<400> 931

000

<210> 932

<400> 932

000

<210> 933

<400> 933

000

<210> 934

<400> 934

000

<210> 935

<400> 935

000

<210> 936

<400> 936

000

<210> 937

<400> 937

000

<210> 938

<400> 938

000

<210> 939

<400> 939

000

<210> 940

<400> 940

000

<210> 941

<400> 941

000

<210> 942

<400> 942

000

<210> 943

<400> 943

000

<210> 944

<400> 944

000

<210> 945

<400> 945

000

<210> 946

<400> 946

000

<210> 947

<400> 947

000

<210> 948

<400> 948

000

<210> 949

<400> 949

000

<210> 950

<400> 950

000

<210> 951

<400> 951

000

<210> 952

<400> 952

000

<210> 953

<400> 953

000

<210> 954

<400> 954

000

<210> 955

<400> 955

000

<210> 956

<400> 956

000

<210> 957

<400> 957

000

<210> 958

<400> 958

000

<210> 959

<400> 959

000

<210> 960

<400> 960

000

<210> 961

<400> 961

000

<210> 962

<400> 962

000

<210> 963

<400> 963

000

<210> 964

<400> 964

000

<210> 965

<400> 965

000

<210> 966

<400> 966

000

<210> 967

<400> 967

000

<210> 968

<400> 968

000

<210> 969

<400> 969

000

<210> 970

<400> 970

000

<210> 971

<400> 971

000

<210> 972

<400> 972

000

<210> 973

<400> 973

000

<210> 974

<400> 974

000

<210> 975

<400> 975

000

<210> 976

<400> 976

000

<210> 977

<400> 977

000

<210> 978

<400> 978

000

<210> 979

<400> 979

000

<210> 980

<400> 980

000

<210> 981

<400> 981

000

<210> 982

<400> 982

000

<210> 983

<400> 983

000

<210> 984

<400> 984

000

<210> 985

<400> 985

000

<210> 986

<400> 986

000

<210> 987

<400> 987

000

<210> 988

<400> 988

000

<210> 989

<400> 989

000

<210> 990

<400> 990

000

<210> 991

<400> 991

000

<210> 992

<400> 992

000

<210> 993

<400> 993

000

<210> 994

<400> 994

000

<210> 995

<400> 995

000

<210> 996

<400> 996

000

<210> 997

<400> 997

000

<210> 998

<400> 998

000

<210> 999

<400> 999

000

<210> 1000

<400> 1000

000

<210> 1001

<211> 114

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<400> 1001

Asn Trp Val Asn Val Ile Ser Asp Leu Lys Lys Ile Glu Asp Leu Ile

1 5 10 15

Gln Ser Met His Ile Asp Ala Thr Leu Tyr Thr Glu Ser Asp Val His

20 25 30

Pro Ser Cys Lys Val Thr Ala Met Lys Cys Phe Leu Leu Glu Leu Gln

35 40 45

Val Ile Ser Leu Glu Ser Gly Asp Ala Ser Ile His Asp Thr Val Glu

50 55 60

Asn Leu Ile Ile Leu Ala Asn Asn Ser Leu Ser Ser Asn Gly Asn Val

65 70 75 80

Thr Glu Ser Gly Cys Lys Glu Cys Glu Glu Leu Glu Glu Lys Asn Ile

85 90 95

Lys Glu Phe Leu Gln Ser Phe Val His Ile Val Gln Met Phe Ile Asn

100 105 110

Thr Ser

<210> 1002

<211> 170

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<400> 1002

Ile Thr Cys Pro Pro Pro Met Ser Val Glu His Ala Asp Ile Trp Val

1 5 10 15

Lys Ser Tyr Ser Leu Tyr Ser Arg Glu Arg Tyr Ile Cys Asn Ser Gly

20 25 30

Phe Lys Arg Lys Ala Gly Thr Ser Ser Leu Thr Glu Cys Val Leu Asn

35 40 45

Lys Ala Thr Asn Val Ala His Trp Thr Thr Pro Ser Leu Lys Cys Ile

50 55 60

Arg Asp Pro Ala Leu Val His Gln Arg Pro Ala Pro Pro Ser Thr Val

65 70 75 80

Thr Thr Ala Gly Val Thr Pro Gln Pro Glu Ser Leu Ser Pro Ser Gly

85 90 95

Lys Glu Pro Ala Ala Ser Ser Pro Ser Ser Asn Asn Thr Ala Ala Thr

100 105 110

Thr Ala Ala Ile Val Pro Gly Ser Gln Leu Met Pro Ser Lys Ser Pro

115 120 125

Ser Thr Gly Thr Thr Glu Ile Ser Ser His Glu Ser Ser His Gly Thr

130 135 140

Pro Ser Gln Thr Thr Ala Lys Asn Trp Glu Leu Thr Ala Ser Ala Ser

145 150 155 160

His Gln Pro Pro Gly Val Tyr Pro Gln Gly

165 170

<210> 1003

<211> 114

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 1003

Asn Trp Val Asn Val Ile Ser Asp Leu Lys Lys Ile Glu Asp Leu Ile

1 5 10 15

Gln Ser Met His Ile Asp Ala Thr Leu Tyr Thr Glu Ser Asp Val His

20 25 30

Pro Ser Cys Lys Val Thr Ala Met Lys Cys Phe Leu Leu Glu Leu Gln

35 40 45

Val Ile Ser Leu Glu Ser Gly Asp Ala Ser Ile His Asp Thr Val Glu

50 55 60

Asn Leu Ile Ile Leu Ala Asn Asp Ser Leu Ser Ser Asn Gly Asn Val

65 70 75 80

Thr Glu Ser Gly Cys Lys Glu Cys Glu Glu Leu Glu Glu Lys Asn Ile

85 90 95

Lys Glu Phe Leu Gln Ser Phe Val His Ile Val Gln Met Phe Ile Asn

100 105 110

Thr Ser

<210> 1004

<211> 297

<212> Белок

<213> Искусственная Последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический полипептид"

<400> 1004

Ile Thr Cys Pro Pro Pro Met Ser Val Glu His Ala Asp Ile Trp Val

1 5 10 15

Lys Ser Tyr Ser Leu Tyr Ser Arg Glu Arg Tyr Ile Cys Asn Ser Gly

20 25 30

Phe Lys Arg Lys Ala Gly Thr Ser Ser Leu Thr Glu Cys Val Leu Asn

35 40 45

Lys Ala Thr Asn Val Ala His Trp Thr Thr Pro Ser Leu Lys Cys Ile

50 55 60

Arg Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro

65 70 75 80

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys

85 90 95

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val

100 105 110

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr

115 120 125

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu

130 135 140

Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His

145 150 155 160

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys

165 170 175

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

180 185 190

Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu

195 200 205

Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro

210 215 220

Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn

225 230 235 240

Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu

245 250 255

Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val

260 265 270

Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln

275 280 285

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

290 295

<210> 1005

<211> 114

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> MOD_RES

<222> (93)..(93)

<223> Glu или Lys

<400> 1005

Asn Trp Val Asn Val Ile Ser Asp Leu Lys Lys Ile Glu Asp Leu Ile

1 5 10 15

Gln Ser Met His Ile Asp Ala Thr Leu Tyr Thr Glu Ser Asp Val His

20 25 30

Pro Ser Cys Lys Val Thr Ala Met Lys Cys Phe Leu Leu Glu Leu Gln

35 40 45

Val Ile Ser Leu Glu Ser Gly Asp Ala Ser Ile His Asp Thr Val Glu

50 55 60

Asn Leu Ile Ile Leu Ala Asn Asn Ser Leu Ser Ser Asn Gly Asn Val

65 70 75 80

Thr Glu Ser Gly Cys Lys Glu Cys Glu Glu Leu Glu Xaa Lys Asn Ile

85 90 95

Lys Glu Phe Leu Gln Ser Phe Val His Ile Val Gln Met Phe Ile Asn

100 105 110

Thr Ser

<210> 1006

<211> 77

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<400> 1006

Ile Thr Cys Pro Pro Pro Met Ser Val Glu His Ala Asp Ile Trp Val

1 5 10 15

Lys Ser Tyr Ser Leu Tyr Ser Arg Glu Arg Tyr Ile Cys Asn Ser Gly

20 25 30

Phe Lys Arg Lys Ala Gly Thr Ser Ser Leu Thr Glu Cys Val Leu Asn

35 40 45

Lys Ala Thr Asn Val Ala His Trp Thr Thr Pro Ser Leu Lys Cys Ile

50 55 60

Arg Asp Pro Ala Leu Val His Gln Arg Pro Ala Pro Pro

65 70 75

<---