Способ получения средства, обладающего антиоксидантной и иммуномодулирующей активностью Российский патент 2023 года по МПК A61K36/28 B01D11/02 A61P37/02 A61P39/06 

Изобретение относится к технологии получения средства, используемого в фармации, - натурального антиоксиданта, обладающего иммуномодулирующей активностью, которое может быть использовано для комплексного лечения воспалительных процессов, связанных с активацией Thl-зависимого типа иммунного ответа (острые воспалительные процессы инфекционной и неинфекционной природы).

Cichorium intybus L. является богатейшим источником биологически активных веществ. В траве Cichorium intybus L. обнаружено высокое содержание фенольных соединений (до 4,9% (масс.)), из которых 1,2% (масс.) составляют флавоноиды, 2,6% (масс.) составляют гидроксикоричные кислоты, а также витаминов, микроэлементов. Использование травы Cichorium intybus L. в качестве сырья для получения сухого экстракта позволяет получить качественно продукты с повышенным содержанием фенольных соединений, обладающих высокой антиоксидантной и иммуномодулирующей активностью.

Известен способ производства из растительного сырья цикория сухого заменителя кофе «Сухой заменитель кофейного напитка», авторами которого являются А.С. Венецианский, Е.С. Таранова, Е.А. Кузнецова, А.В. Панасенко, А.А. Щетинин (№2739808), патент получен в 2020 г. Недостатком данного способа является применение полученного средства исключительно в пищевой, а не в фармацевтической промышленности.

Известен способ производства средств из цикория, изложенный в патенте «Линия производства растворимого цикория», автором которого является В.А. Ломачинский (№2091034), патент получен в 1994 г.

Недостатком данного способа является применение в качестве сырьевого источника исключительно корня цикория, в то время как в нашем исследовании сырьем для получения экстракта является трава цикория.

Известен способ производства сухого экстракта из корней цикория, изложенный в патенте «Способ получения сухого экстракта цикория», авторами которого является А.А. Трубников, Н.С. Фурса, В.И. Литвитненко, А.С. Аммосов, Т.П. Попова, A.M. Дыгай (№2173557), патент получен в 2001 г. Недостатками данного способа являются многостадийность и использование в качестве основы для производства экстракта исключительно корня цикория, в то время как трава данного растения обладает высоким содержанием биологически активных веществ и может находить применение в качестве сырья для производства средств, обладающих биологической активностью.

Прототипом данного патента является способ экстракции биологически активных веществ из растительного сырья, представляющего собой высушенную траву дикорастущего цикория обыкновенного (Cichorium intybus L.), при котором экстракцию осуществляют трижды при температуре 40-60°С и постоянном перемешивании, объединенные извлечения концентрируют, очищают органическим растворителем и сушат, а готовый продукт представляет собой сухой экстракт с содержанием суммы фенольных соединений в пересчете на цикориевую кислоту 8-10% (масс.) (см. Патент РФ №2710270, авторов О.Л. Сайбель, Т.Д. Даргаева, А.И. Радимич, В.Н. Дул, СМ. Николаев, В.Б. Хобракова, П.Г. Мизина, Н.И. Сидельников «Средство, обладающее иммуномодулирующей активностью, и способ его получения», опубликованный 25 декабря 2019 г.).

Недостатком прототипа является низкая оперативность получения вытяжки из травы Cichorium intybus L. и использование токсичных дихлорэтана, дихлорметана и хлороформа для очистки получаемого сухого экстракта.

Одним из бурно развивающихся в последние годы направлений при создании лекарственных препаратов и биологически активных добавок является разработка таргетных фармпрепаратов, целенаправленно влияющих на различные звенья иммунной системы [8], что обусловило разработку большого количества препаратов. Было показано, что экстракт корня цикория уменьшает воспаление при воспалительных заболеваниях кишечника человека, а также снижает риск развития рака толстой кишки [12]. Известно, что развитие адекватного противомикробного и противоопухолевого ответа сопровождается активацией системы иммунитета по типу Th1-поляризации, основными характеристиками которой являются, синтез набора провоспалительных цитокинов (интерлейкин-6 (ИЛ-6), фактор некроза опухолей α (ФНОα), интерферон γ (ИФНγ)) и активацией иммунокомпетентных клеток. При развитии системной воспалительной реакции (острофазового ответа) цитокины оказывают влияние практически на все органы и системы организм [9]. Продукция ИФНγ Т-лимфоцитами запускается при распознавании комплекса антигенного пептида с собственными молекулами гистосовместимости (МНС 1 или 2 класса) соответствующим ТКР и регулируется другими цитокинами: типичным стимулятором -интерлейкином-2 (ИЛ-2) и типичным ингибитором - интерлейкином-10 (ИЛ-10). ФНОα - белок, который наряду с интерлейкинами усиливает воспалительный процесс в организме с целью защиты от чужеродных антигенов. Считается, что ФНОα - это основной цитокин острого воспаления. ИЛ-6 - провоспалительный цитокин, оказывающий влияние на многие органы и системы организма: кровь, печень, иммунную и эндокринную системы, обмен веществ. Он синтезируется активированными моноцитами/макрофагами, фибробластами, эндотелиальными клетками при воспалении, травмах, гипоксии, бактериальных инфекциях. Однако избыточная продукция провоспалительных цитокинов приводит к гипервоспалению с развитием полиорганной недостаточности. Показана роль цитокинов в формировании различной неинфекционной патологии (воспалительные заболевания кишечника, метаболические нарушения, аутоиммунные заболевания, онкология и др.) [9]. Таким образом, ИЛ-6, ФНОα и ИФНγ, которые вырабатываются антигенпрезентирующими клетками и являются основными медиаторами Th1-иммунного ответа, могут быть использованы в качестве «мишени» при создании растительных средств с иммуномодулирующей активностью таргетного действия. Иммуномодуляторы растительного происхождения обладают рядом преимуществ: минимальным количеством побочных эффектов и противопоказаний, возможностью применения в педиатрии, а также у пожилых лиц и при хронических воспалительных заболеваниях.

Задачей, на решение которой направлено предлагаемое техническое решение, является разработка способа получения природного антиоксиданта с иммуномодулирующей активностью растительного происхождения для фармации.

Технический результат, полученный при решении поставленной задачи, выражается в получении универсального антиоксиданта с иммуномодулирующей активностью растительного происхождения для фармации. Достоинством данного патента является получение экстракта, накапливающего фенольные соединения в концентрациях, соответствующих прототипу, при этом, в отличие от прототипа, использована оперативная одностадийная технология получения экстракта, а также минимизирован риск использования в технологическом процессе токсичных растворителей - хлорорганических соединений.

Раскрытие изобретения.

Поставленная задача решается тем, что способ получения средства, обладающего антиоксидантной и иммуномодулирующей активностью, из травы Cichorium intybus L. осуществляется путем измельчения воздушно-сухой травы Cichorium intybus L. до размера частиц 1 мм, смешивания измельченного растительного сырья с экстрагентом - смесью воды и спирта с содержанием последнего 70% (об.) в соотношении 1:10 при 80°С в течение 1,5 часов однократно, после чего фильтрат отделяют, отгоняют из него спирт, очищают этиловым спиртом 70% (об.) и фильтрованием, концентрируют и высушивают до состояния сухого экстракта при температуре 60°С.

Сравнительный анализ признаков предлагаемого технического решения с признаками аналогов и прототипа свидетельствует о его соответствии критерию «новизна».

При этом отличительные признаки формулы изобретения решают следующие функциональные задачи.

Признак, указывающий, что экстракт получен из травы Cichorium intybus L. обусловлен высоким содержанием в траве Cichorium intybus L. биологически активных веществ (фенольных соединений), обладающих выраженной антиоксидантной активностью.

Признак, указывающий, что траву Cichorium intybus L. «измельчают до размера частиц 1 мм», направлен на полноту извлечения активного компонента.

Признак, указывающий, что измельченную массу «смешивают с экстрагентом» «в соотношении 1:10», обеспечивает условия для максимального перехода биологически активных веществ (фенольных соединений), обладающих антиоксидантной активностью, в водно-спиртовое извлечение.

Признак, указывающий, что в качестве экстрагента используют «смесь воды и спирта», позволяет обеспечить максимальный выход биологически активных веществ (фенольных соединений), обладающих выраженной антиоксидантной активностью, для извлечения которых целесообразно применять в качестве экстрагента не воду очищенную, а водно-спиртовые смеси.

Признаки, указывающие, что используется экстрагент «с содержанием спирта 70% (об.)» и «экстрагирование осуществляют при 80°С в течение 1,5 часов однократно», обеспечивают режим, при котором происходит наиболее полное извлечение биологически активного экстракта. Дальнейшее повышение температуры не способствует увеличению выхода биологически активных веществ (фенольных соединений), вызывает разрушение биологически активных веществ (фенольных соединений) и поэтому нецелесообразно.

Признаки «... отделяют фильтрат, отгоняют из него спирт, очищают спиртом этиловым 70%) (об.) и фильтрованием, концентрируют и высушивают до состояния сухого экстракта при температуре 60°С...» направлены на подготовку биологически активного экстракта к употреблению. Фильтрация - удаление твердого остатка из экстракта, отгонка спирта - для эффективности последующего высушивания, очистка спиртом этиловым 70% (об.) - для удаления балластных веществ, высушивание - для более длительного хранения без боязни разрушения экстракта микроорганизмами.

Признак, указывающий, что фильтрат после отгонки спирта «высушивают до состояния сухого экстракта при температуре 60°С», обеспечивает оптимальный режим сушки. Дальнейшее повышение температуры не способствует увеличению выхода биологически активных веществ (фенольных соединений), вызывает разрушение биологически активных веществ (фенольных соединений) и поэтому нецелесообразно.

Способ осуществляют следующим образом.

В качестве исходного сырья используют воздушно-сухую траву Cichorium inybus L., которую измельчают с помощью мельницы лабораторной и просеивают через сито с диаметром 1 мм. 1 г измельченного сырья, свободно проходящего через сито с данным диаметром, смешивают с экстрагентом так, что на 1 г измельченного сырья приходится 10 мл экстрагента, причем в качестве экстрагента используют смесь воды и спирта с содержанием последнего 70% (об.). Сырье с экстрагентом в конической колбе вместимостью 200 мл помещают на водяную баню при температуре 80°С, присоединяя колбу к обратному холодильнику, и производят экстрагирование в течение 1,5 часов однократно, после чего колбу охлаждают до комнатной температуры, доводят растворителем до первоначальной массы, перемешивают и фильтруют. Затем отделяют фильтрат, отгоняют из него спирт, очищают спиртом этиловым 70%о (об.) и фильтрованием и высушивают до состояния сухого экстракта при температуре 60°С.

Для определения оптимальных режимных характеристик, которые были включены в технологию получения экстракта, были последовательно проведены следующие виды исследования.

1. Зависимость содержания суммы фенольных соединений, обладающих антиоксидантной активностью, в вытяжках из травы Cichorium intybus L. от концентрации экстрагента.

Важнейшим фактором, определяющим эффективность процесса экстракции, является подбор экстрагента [1; 3; 5; 7; 10]. В целях выбора экстрагента необходимой природы и концентрации трава Cichorium intybus L. экстрагировалась смесью воды и этилового спирта различной концентрации при комнатной температуре. Установлено, что наибольшее содержание суммы фенольных соединений, обладающих антиоксидантной активностью (1,40% (масс.)), отмечено в вытяжках из травы Cichorium intybus L., в которых в качестве экстрагента использована смесь воды и этанола с содержанием последнего 70% (об.). Следовательно, для получения антиокислительного экстракта на первом этапе - получении вытяжки из растительного сырья - целесообразно использовать смесь воды и этанола с содержанием последнего 70% (об.).

2. Зависимость содержания суммы фенольных соединений, обладающих антиоксидантной активностью, в вытяжках из травы Cichorium intybus L. от измельченности сырья.

Общеизвестным фактом является влияние степени измельчения лекарственного растительного сырья на выход действующих веществ при экстракции сырья соответствующим растворителем. Установлено, что наибольшее содержание суммы фенольных соединений, обладающих антиоксидантной активностью (1,40% (масс.)), отмечено в вытяжках из травы Cichorium intybus L., измельченной до размера частиц 1 мм. Следовательно, для получения антиокислительного экстракта на первом этапе - получении вытяжки из растительного сырья - целесообразно использовать сырье, измельченное до размера частиц 1 мм.

3. Зависимость содержания суммы фенольных соединений, обладающих антиоксидантной активностью, в вытяжках из травы Cichorium intybus L. от соотношения между массой сырья и объемом экстрагента.

Выход биологически активных веществ из растительного сырья определяется также соотношением между исследуемым сырьем и применяемым экстрагентом. В эксперименте был определен выход фенольных соединений травы Cichorium intybus L., взятой в следующих соотношениях с растворителем: 1:10, 1:30, 1:50, 1:100. Установлено, что наибольшее содержание суммы фенольных соединений, обладающих антиоксидантной активностью (1,22% (масс.)), отмечено в вытяжках из травы Cichorium intybus L., в которых соотношение между массой сырья и объемом экстрагента составляет 1:10. Следовательно, для получения антиокислительного экстракта на первом этапе - получении вытяжки из растительного сырья - целесообразно использовать сырье в соотношении с экстрагентом 1:10.

4. Зависимость содержания суммы фенольных соединений, обладающих антиоксидантной активностью, в вытяжках из травы Cichorium intybus L. от температуры экстракции.

Анализ выхода фенолов из растительного сырья проводился в четырех вариантах, различающихся температурными условиями экстракции: 20°С, 40°С, 60°С и 80°С соответственно. Экспериментально было определено влияние температуры водяной бани, при которой проводится экстракция, на степень извлечения фенольных соединений травы Cichorium intybus L. Установлено, что наибольшее содержание суммы фенольных соединений, обладающих антиоксидантной активностью (1,18% (масс.)), отмечено в вытяжках из травы Cichorium intybus L., для получения которых использовался температурный режим 80°С. Следовательно, для получения антиокислительного экстракта на первом этапе - получении вытяжки из растительного сырья -целесообразно поддерживать температуру экстракции 80°С.

5. Зависимость содержания суммы фенольных соединений, обладающих антиоксидантной активностью, в вытяжках из травы Cichorium intybus L. от времени экстракции.

Анализ выхода фенолов из растительного сырья проводился в двух вариантах, различающихся длительностью экстракции: 1 ч и 1,5 ч соответственно. Экспериментально было определено влияние времени экстракции на степень извлечения фенольных соединений травы Cichorium intybus L. Установлено, что наибольшее содержание суммы фенольных соединений, обладающих антиоксидантной активностью (1,53%) (масс.)), отмечено в вытяжках из травы Cichorium intybus L., для получения которых процесс экстракции продолжался 1,5 ч. Следовательно, для получения антиокислительного экстракта на первом этапе - получении вытяжки из растительного сырья - целесообразно проводить процесс экстракции в течение 1,5 ч.

6. Зависимость содержания суммы фенольных соединений, обладающих антиоксидантной активностью, в вытяжках из травы Cichorium intybus L. от кратности экстракции.

Анализ выхода фенолов из растительного сырья проводился в трех вариантах, различающихся кратностью процесса экстракции: однократная, двухкратная и трехкратная экстракции соответственно. Экспериментально было определено влияние кратности экстракции на степень извлечения фенольных соединений травы Cichorium intybus L. Установлено, что наибольшее содержание суммы фенольных соединений, обладающих антиоксидантной активностью (1,53% (масс.)), отмечено в вытяжках из травы Cichorium intybus L., для получения которых использована однократная экстракция. Следовательно, для получения антиокислительного экстракта на первом этапе - получении вытяжки из растительного сырья - целесообразна однократная экстракция.

7. Отгон спирта и доведение исследуемого образца до состояния сухого экстракта.

Также был произведен отгон спирта и дальнейшее высушивание до состояния сухого экстракта. Целесообразность сушки экстракта заключается в том, чтобы уменьшить объем вводимого в продукт препарата, не понижая при этом его концентрации.

Отгон спирта производился на водяной бане при температуре 80°С. Дальнейшее повышение температуры не способствует увеличению выхода биологически активных веществ (фенольных соединений), вызывает разрушение биологически активных веществ (фенольных соединений) и поэтому нецелесообразно.

Отгон спирта производится до концентрированного водного кубового остатка, который очищают спиртом этиловым 70%) (об.). Очищенное водное извлечение сушат при температуре 60°С.Дальнейшее повышение температуры не способствует увеличению выхода биологически активных веществ (фенольных соединений), вызывает

разрушение биологически активных веществ (фенольных соединений) и поэтому нецелесообразно.

8. Для определения целесообразности отгона спирта и высушивания было проведено сравнение содержания суммы фенольных соединений в пересчете на цикориевую кислоту вытяжки из травы Cichorium intybus L. с полученным из нее сухим веществом. Показано, что в сухом экстракте травы Cichorium intybus L. содержание суммы фенольных соединений в пересчете на цикориевую кислоту наибольшее, и оно составляет 8,24±0,01% (масс).

На основании полученных данных были сделаны выводы о целесообразности отгона спирта и высушивания, так как содержание суммы фенольных соединений в процентах в сухом экстракте достоверно превышает содержание суммы фенольных соединений в вытяжке из травы Cichorium intybus L.

Отгон спирта и высушивание при получении сухого экстракта травы Cichorium intybus L.:

- позволяют сохранить высокое содержание суммы фенольных соединений, обладающих антиоксидантными свойствами, в экстракте в сухом остатке;

- позволяют уменьшить объем антиокислительного экстракта при его использовании.

Пример 1. Были протестированы антиоксидантные свойства полученного экстракта в системах, моделирующих процессы выработки активных форм кислорода в Центральной научно-исследовательской лаборатории федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего образования «Башкирский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации. В качестве модельной системы, где генерировались активные формы кислорода, использовали 10 мл фосфатного буфера (20 мМ KH₂PO₄, 105 мМ KCl) с добавлением раствора люминола (10^-5 М) и цитрата натрия (50 мМ). Величину рН полученного раствора доводили до 7,45 ед. насыщенным раствором гидроксида калия. В 10 мл модельной системы вносили водный раствор сухого экстракта травы Cichorium intybus L. в объеме 0,5 мл. Для инициирования реакций, сопровождающихся образованием активных форм кислорода, вводили 1 мл 50 мМ раствора солей Fe²⁺. Регистрация свечения продолжалась в течение 5 минут при постоянном перемешивании. Хемилюминесценция модельной системы характеризовалась спонтанным свечением, быстрой вспышкой и развивающейся затем медленной вспышкой. Основными, наиболее информативными характеристиками хемилюминесценции служили светосумма свечения, определяющаяся по интенсивности излучения, и амплитуда максимального свечения.

Анализ выраженности суммарной антиоксидантной активности сухого экстракта травы Cichorium intybus L. установил, что изучаемый экстракт обладает выраженными антиоксидантными свойствами в сравнении с контролем. Влияние водного раствора сухого экстракта травы Cichorium intybus L. на процессы свободнорадикального окисления в модельной системе активных форм кислорода отмечено на фиг. 1, где 1 -значение светимости контроля, 2 - значение светимости водного раствора сухого экстракта травы Cichorium intybus L. Отмечено, что при добавлении в модельную систему водного раствора сухого экстракта травы Cichorium intybus L. снижалось значение максимальной светимости, медленная вспышка угасала раньше, удлинялся латентный период. Установлено, что светосумма свечения как самая показательная характеристика хемилюминесценции была меньшей для исследуемого образца водного раствора сухого экстракта травы Cichorium intybus L. по сравнению с контролем.

Показана высокая активность сухого экстракта травы Cichorium intybus L. в отношении процессов свободнорадикального окисления, что, по-видимому, связано с высоким содержанием разнообразных групп фенольных соединений и их способностью влиять на изучаемый процесс.Поскольку сухой экстракт травы Cichorium intybus L. обладает высокими показателями выраженности суммарной антиоксидантной активности, не исключено, что он способен улавливать свободные радикалы и за счет этого подавлять процессы пероксидации, выступая в роли прямого антиоксиданта.

Исходя из результатов, полученных из экспериментальных данных, можно сделать заключение о перспективности дальнейшего изучения антиоксидантных свойств травы Cichorium intybus L. и разработки технологии эффективного извлечения веществ из него, обладающих антиоксидантными свойствами, и их применении в фармации.

Оптимальные условия хранения сухого экстракта: в защищенном от света месте при температуре от 15 до 25°С.

Экстракт обладает выраженной антиоксидантной активностью в модельной системе (в сравнении с контролем). Антиоксид антная активность обусловлена содержанием фенольных соединений 8,24±0,01% (масс).

9. Иммуномодулирующую активность сухого экстракта травы цикория оценивали по количеству цитокинов, вырабатываемых мононуклеарами периферической крови человека, определяли в супернатантах клеток, получаемых следующим образом. Мононуклеарные лейкоциты выделяли в стерильных условиях из гепаринизированной крови доноров методом градиентного центрифугирования (400g) в градиенте плотности фиколл-верографин («Pharmacia», Швеция) плотностью 1,077 г/см³. Далее пробы центрифугировали 15 минут 1400 оборотов в минуту. Образовавшиеся кольца (преимущественно состоящие из лимфоцитов) отбирали в силиконированные пробирки, добавляли стерильный забуференный физиологический раствор и центрифугировали на холоду 7 минут при 1100 оборотов в минуту. Для подсчета лимфоцитов использовали 3% (об.) уксусную кислоту (0,9 мл уксусной кислоты +0,1 мл лимфоцитов). Выделенные лимфоциты доводили до концентрации 2*10⁶ клеток/мл. Сокультивирование взвеси лимфоцитов с раствором экстракта травы цикория на стерильной дистиллированной воде [10,0; 5,0; 2,5 мг/мл] проводили в 96-луночных полистероловых планшетах в соотношении 1:4 (опыт) в культуральной среде, содержащей RPMI (ПанЭко), 10% (масс.) инактивированной эмбриональной телячьей сыворотки («Sigma-Aldrich», США), 0,01%) (масс.) L-глутамин и 80 мкг/мл гентамицина. Пробы инкубировали 24 часа в СО₂-инкубаторе при 37°С. Исследование каждой клеточной культуры проводили в трех дублях. Контролем служили пробы: 1. контроль лимфоцитов в культуральной среде; 2. контроль лимфоцитов с добавлением стерильной дистиллированной воды. В культуральной среде лимфоцитов, стимулированных раствором экстракта травы цикория, измеряли провоспалительные (ИФНγ, ФНОα, ИЛ-6) цитокины методом ИФА (тест-систем «Цитокин», Россия). Регистрацию результатов проводили на фотометре Multiskan (Labsystems, Финляндия). Результат влияния раствора экстракта цикория на мононуклеары оценивали по изменению концентрации цитокинов в культуральной среде по сравнению с контролями.

Пример 2. На модели моноцитов периферической крови человека показано (табл.1), что растворы сухого экстракта травы цикория подавляли продукцию ИФНγ во всех разведениях [10,0; 5,0; 2,5 мг/мл]: 10,0 мг/мл - в 4,5 раза (25,3±1,3 пг/мл), 5,0 мг/мл - в 2,9 раза до 39,5±1,5 пг/мл, 2,5 и 1,0 мг/мл - в 2,5 раза (46,2±2,2 - 48,6±2,0 пг/мл). Концентрация ФНОα снижалась практически на три порядка при влиянии раствора экстракта 10,0 мг/мл с 58,3-63,7 пг/мл в контроле до 20,5±1,5 пг/мл в опытных пробах, при влиянии концентрации 5,0 мг/мл выраженность ингибирующего эффекта сохранялась; при влиянии концентраций 2,5 и 1,0 мг/мл отмечалось снижение цитокина в 1,5 раза до 38,6-42,2 пг/мл. Данное ингибирующее действие растворов экстракта сохранялось и при оценке влияния изучаемых концентраций на продукцию ИЛ-6 лимфоцитами: его концентрация снижалась в 2-3 раза.

Таким образом, экспериментально установлено, что растворы сухого экстракта, выделенного из травы цикория, подавляют выработку антигенпрезентирующими клетками ключевых цитокинов Th-1 иммунного ответа: ИЛ-6, ФНОα и ИФНγ лимфоцитами.

Литература

1. Бубенчикова В.Н., Старчак Ю.А. Изучение дубильных веществ растений рода Тимьян флоры средней полосы Европейской части России // Научные ведомости. 2015. №16(213). С. 174-179.

2. Венецианский А.С., Таранова Е.С., Кузнецова Е.А., Панасенко А.В., Щетинин А. А. Сухой заменитель кофейного напитка» (Патент РФ №2739808). 2020 г.

3. Груздев И.В., Зуева О.М., Титова Е.С., Сталюгин В.В., Кондратенок Б.М. Экстрагирование и определение фенола в почве методом газовой хроматографии // Аналитика и контроль. 2018. Т. 22. №1. С. 44-50.

4. Ломачинский В.А. Линия производства растворимого цикория (Патент РФ №2091034). 1994 г. Недостатком данного способа является недостаточно широкое применение в качестве сырьевой базы не корня, а травы цикория.

5. Попов И.В., Андреева И.Н., Гаврилин М.В. Определение танина в сырье и препаратах кровохлебки лекарственной методов ВЭЖХ // Химико-фармацевтический журнал. 2003. Т. 37. №7. С. 24-26.

6. Сайбель О.Л., Даргаева Т.Д., Радимич А.И., Дул В.Н., Николаев СМ., Хобракова В.Б., Мизина П.Г., Сидельников Н.И. Средство, обладающее иммуномодулирующей активностью, и способ его получения (Патент РФ №2710270). 2019 г.

7. Сайбель О.Л., Даргаева Т.Д., Фадеев Н.Б., Дул В.Н. Изучение динамики накопления фенольных соединений в траве цикория обыкновенного {Cichorium intybus L.) // Медицинский вестник Башкортостана. 2016. Т. 11. №5(65). С. 80-83.

8. Сепиашвили Р.И. От иммунотерапии к персонализированной таргетной иммуномодулирующей терапии и иммунореабилитации // Аллергология и иммунология. 2015. Т. 16. №4. С. 323-327.

9. Симбирцев А.С., Тотолян А.А. Цитокины в лабораторной диагностике // Инфекционные болезни: новости, мнения, обучение. 2015. №2. С. 82-98.

10. Сорокин В.В., Вайнштейн В.А., Каухова И.Е., Чибиляев Т.Х. Изучение экстрагирующей способности одно- и двухфазных систем экстрагентов для извлечения флавоноидов из травы клевера лугового // Химико-фармацевтический журнал. 2008. Т. 42. №8. С. 23-25.

11. Трубников А.А., Фурса Н.С., Литвитненко В.И., Аммосов А.С., Попова Т.П., Дыгай A.M. Способ получения сухого экстракта цикория (Патент РФ №2173557). 2001 г.

12. Pool-Zobel, В., Van Loo, J., Rowland, I., & Roberfroid, M. B. (2002). Experimental evidences on the potential of prebiotic fructans to reduce the risk of colon cancer // British Journal of Nutrition, 87(S2), S273-S281.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности и касается способа получения экстракта, обладающего антиоксидантной и иммуномодулирующей активностью, из травы Cichorium intybus L. Способ получения средства, обладающего антиоксидантной и иммуномодулирующей активностью, из травы Cichorium intybus L., заключающийся в получении экстракта, включающий настаивание измельченного растительного сырья в соотношении 1:10, фильтрование, концентрирование, очистку и сушку, при этом воздушно-сухую траву Cichorium intybus L. измельчают до размера частиц 1 мм, смешивают с экстрагентом - смесью воды и этилового спирта с содержанием последнего 70% об., экстрагирование осуществляют при 80°С в течение 1,5 часов однократно, после чего отделяют фильтрат, отгоняют из него спирт, очищают этиловым спиртом 70% об. и фильтрованием, концентрируют и высушивают до состояния сухого экстракта при температуре 60°С. Средство, полученное вышеописанным способом, является эффективным антиоксидантом и обладает иммуномодулирующими свойствами. 1 ил., 1 табл., 2 пр.

Способ получения средства, обладающего антиоксидантной и иммуномодулирующей активностью, из травы Cichorium intybus L., заключающийся в получении экстракта, включающий настаивание измельченного растительного сырья в соотношении 1:10, фильтрование, концентрирование, очистку и сушку, отличающийся тем, что воздушно-сухую траву Cichorium intybus L. измельчают до размера частиц 1 мм, смешивают с экстрагентом - смесью воды и этилового спирта с содержанием последнего 70% об., экстрагирование осуществляют при 80°С в течение 1,5 часов однократно, после чего отделяют фильтрат, отгоняют из него спирт, очищают этиловым спиртом 70% об. и фильтрованием, концентрируют и высушивают до состояния сухого экстракта при температуре 60°С.