СОСТАВ ИНГИБИТОРА BCL-2 НА ОСНОВЕ ЦИКЛОДЕКСТРИНА Российский патент 2023 года по МПК A61K9/19 A61K47/40 A61K47/69 A61K31/5377 A61P35/02 

Предпосылки создания изобретения

Изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей 5-(5-хлор-2-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил]карбонил}фенил)-N-(5-циано-1,2-диметил-1H-пиррол-3-ил)-N-(4-гидроксифенил)- 1,2-диметил- 1H-пиррол-3-карбоксамид, обозначаемый в настоящей заявке как 'Соединение А', или его фармацевтически приемлемую соль, и циклодекстрин. Более специфически, изобретение относится к твердой фармацевтической композиции, содержащей Соединение А и циклодекстрин, и фармацевтической композиции для парентерального введения, приготовленной путем растворения этой твердой фармацевтической композиции. Кроме того, изобретение относится к применению таких композиций для лечения злокачественного новообразования. 'Соединение А', как используется в настоящей заявке, необязательно включает его фармацевтически приемлемые соли.

Структура Соединения А представляет собой:

5-(5-хлор-2-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил]карбонил}фенил)-N-(5-циано-1,2-диметил-1H-пиррол-3-ил)-N-(4-гидроксифенил)-1,2-диметил-1H-пиррол-3-карбоксамид.

Приготовление Соединения А, его применение в качестве ингибитора Вс1-2 для лечения злокачественного новообразования и его фармацевтические составы, описаны в WO 2015/011400, содержание которой включено путем ссылки. Приготовление специфически раскрыто в Примере 386 заявки WO 2015/011400 в форме соли - гидрохлорида.

Соединение А имеет ограниченную растворимость в воде для всего диапазона рН (<0,01 мг/мл для свободного основания и 1,4 мг/мл для 'Соединения А, H₂SO₄' при рН=2,5), включая физиологически релевантные значения рН. Для обеспечения безопасного и эффективного введения Соединения А, и для проявления необходимых терапевтических эффектов, Соединение А должно быть растворено при более высокой концентрации, чем его растворимость в воде.

Существуют различные пути растворения плохо растворимых соединений для парентерального введения. Обычными подходами являются оптимизация значения рН или применение сорастворителей (например, PEG300, PEG400, пропиленгликоль, или этанол). Если эти подходы невозможны, независимо от причин, то можно рассматривать применение поверхностно-активных веществ (например, Tween® 80 или Kolliphor™ ELP). Тем не менее, эти типы поверхностно-активных веществ часто связаны с неблагоприятными явлениями и не всегда пригодны для растворения представляющих интерес соединений при целевых концентрациях. Циклодекстрины хорошо известны в качестве солюбилизирующих агентов, но с ограничениями, поскольку они не являются эффективными растворителями для всех соединений.

Задачей настоящего изобретения является обеспечение композиции, которая подходяще может использоваться для растворения и парентеральной доставки Соединения А при целевых концентрациях для предоставления клинической эффективности. В особенности, существует необходимость обеспечения фармацевтической композиции для Соединения А, которая является безопасной и эффективной. Дальнейшими задачами являются обеспечение композиции, которая является стабильной в релевантных условиях и контейнерах, что предоставляет возможность введения подходящей дозы Соединения А в течение разумно необходимого интервала времени. Согласно дальнейшей задаче, композицию можно будет приготовить надежным и устойчивым процессом для приготовления парентеральных дозированных форм.

Сущность изобретения

Настоящее изобретение обеспечивает композицию, содержащую Соединение А и циклодекстрин, подходящую для парентерального введения пациентам. В особенности, такое введение осуществляют путем внутривенной инъекции или инфузии. Изобретение также обеспечивает твердую композицию на основе циклодекстрина, которая может быть растворена в одном или нескольких растворителях незадолго до введения пациенту, для обеспечения композиции, подходящей для парентерального введения. Предпочтительно, твердая композиция на основе циклодекстрина в соответствии с изобретением помещена в водный раствор. В фармацевтической композиции, приготовленной таким образом, Соединение А растворено с помощью циклодекстрина.

Предпочтительно, изобретение обеспечивает композицию, содержащую Соединение А, которое имеет оптимальную физическую стабильность; например, предотвращено осаждение компонентов, когда твердая композиция помещена в водный раствор и дополнительно растворена в растворе глюкозы и когда полученную фармацевтическую композицию инъецируют в плазму.

Предпочтительно, изобретение обеспечивает фармацевтическую композицию на основе циклодекстрина, содержащую Соединение А, которая является химически и физически стабильной. При высоких концентрациях циклодекстрина, хорошо известно, что комплексы лекарственное средство/циклодекстрин имеют тенденцию к образованию крупных и видимых частиц (Saokham и др., Molecules 2018 23, стр. 1161). Эти твердые микрочастицы безусловно препятствуют процессу стерилизующей фильтрации. Чрезвычайно интересным является тот факт, что растворы лекарственное средство/циклодекстрин в соответствии с изобретением остаются совершенно прозрачными и легко могут быть отфильтрованы через фильтр 0,2 мкм.

Предпочтительно, изобретение обеспечивает твердую фармацевтическую композицию, имеющую приемлемое время восстановления в растворителях для инъекций (более предпочтительно в воде для инъекций), и, следовательно, предоставляя возможность легкого применения для приготовления фармацевтической композиции, которая будет доставляться парентерально.

Предпочтительно, изобретение обеспечивает фармацевтическую композицию на основе циклодекстрина, которая предоставляет возможность быстрой солюбилизации и хорошего распределения Соединения А после внутривенного введения.

В целом, изобретение раскрывает в настоящей заявке возможность эффективного введения Соединения А пациентам, несмотря на сложные физико-химические характеристики Соединения А.

Краткое описание фигур

На Фигуре 1 представлена эффективность Соединения А в составе на основе циклодекстрина после в/в введения в дозе 15 и 40 мг/кг один раз в неделю в течение двух недель RS4;11 привитым самкам SCID мышей.

На Фигуре 2 представлена переносимость Соединения А в составе на основе циклодекстрина после в/в введения в дозе 15 и 40 мг/кг один раз в неделю в течение двух недель RS4;11 привитым самкам SCID мышей. Потерю веса тела измеряли относительно времени после лечения.

Подробное описание изобретения

'Соединение А' обозначает 5-(5-хлор-2-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил]карбонил}фенил)-N-(5-циано-1,2-диметил-1Н-пиррол-3-ил)-N-(4-гидроксифенил)-1,2-диметил-1H-пиррол-3-карбоксамид.

'Соединение A, H₂SO₄' обозначает, что 5-(5-хлор-2-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил]карбонил}фенил)-N-(5-циано-1,2-диметил-1Н-пиррол-3-ил)-N-(4-гидроксифенил)-1,2-диметил-1H-пиррол-3-карбоксамид представлен в форме соли - гидросульфата.

'Свободная молекула' и 'свободное основание' используются взаимозаменяемо в настоящей заявке и относятся к Соединению А, когда оно не находится в форме соли.

Циклодекстрин, описанный в настоящей заявке, представляет собой природный или дериватизированный циклодекстрин. Природные циклодекстрины включают три хорошо известных промышленно вырабатываемых (главный и второстепенный) циклических олигосахарида. Наиболее распространенными природными циклодекстринами являются α, β и γ, состоящие из 6, 7 и 8 глюкопиранозных единиц. Дериватизированные циклодекстрины включают гидроксиалкилированные циклодекстрины, выбранные из группы, включающей гидроксиэтил циклодекстрин, гидроксипропил циклодекстрин и гидроксибутил циклодекстрин. В предпочтительном варианте осуществления, циклодекстрин представляет собой сам β-циклодекстрин или его производные. Производные в настоящей заявке обозначают β-циклодекстрины, имеющие различные заместители, включая метил-β-циклодекстрин, этил-β-циклодекстрин, (2-гидроксипропил)-β-циклодекстрин, (3-гидроксипропил)-β-циклодекстрин, (2-гидроксиэтил)-β-циклодекстрин, карбоксиметил-β-циклодекстрин, карбоксиметил-этил-β-циклодекстрин, диэтил-β-циклодекстрин, диметил-β-циклодекстрин, триметил-β-циклодекстрин, глюкозил-β-циклодекстрин, гидроксибутенил-β-циклодекстрин, мальтозил-β-циклодекстрин, случайно метилированный-β-циклодекстрин, сульфобутиловый эфир β-циклодекстрина, 2-селен-мостиковый β-циклодекстрин, и 2-теллур-мостиковый β-циклодекстрин. Кроме β-циклодекстрина, в настоящем изобретении можно применять 2-гидроксипропил-γ-циклодекстрин. Дериватизированные циклодекстрины также включают полимеризованные циклодекстрины, которые представляют собой высокомолекулярные соединения, либо растворимые в воде или нерастворимые. Примерами полимеризованных циклодекстринов являются растворимый анионный β-циклодекстриновый полимер, растворимый γ-циклодекстриновый полимер, и эпихлоргидриновый β-циклодекстриновый полимер.

'α-циклодекстрин', 'β-циклодекстрин' и 'γ-циклодекстрин' также называются 'альфадекс', 'бетадекс', и 'гаммадекс', соответственно.

'HP- β-циклодекстрин' также называется 'гидроксипропил- β-циклодекстрин' или '2-гидроксипропил- β-циклодекстрин' или 'гидроксипропилбетадекс'. В особенности, HP- β-циклодекстрин представлен на рынке следующими торговыми наименованиями: Cavitron™ W7HP7 (типичная степень замещения: 6,0-8,0; приблизительный молекулярный вес: 1520), Cavitron™ W7HP5 (типичная степень замещения: 4,1-5,1; приблизительный молекулярный вес: 1410), Kleptose™ НРВ или Kleptose™ HP.

'SBE- β-циклодекстрин' также называется как 'натрий сульфобутиловый эфир β-циклодекстрина' или 'бетадекс натрий сульфобутиловый эфир. В особенности, SBE- β-циклодекстрин представлен на рынке следующими торговыми наименованиями: Dexsolve™ или Captisol™.

Фармацевтическая композиция, описанная в настоящей заявке, в особенности представляет собой фармацевтическую композицию на основе циклодекстрина. 'Фармацевтическая композиция на основе циклодекстрина' обозначает композицию, содержащую циклодекстрин, которая является подходящей для фармацевтического введения.

'TPGS' обозначает d-α-токоферил полиэтилленгликоль сукцинат или токоферсолан. Он представляет собой водорастворимую форму витамина Е (α-токоферол).

'Агент, регулирующий тоничность', обозначает фармацевтически приемлемое соединение, которое может быть добавлено к препарату для придания изотоничности с плазмой человека. Агенты, регулирующие тоничность, включают, например, декстрозу, глюкозу, маннит, сахарозу, лактозу, трегалозу, глицерин и NaCl, в особенности сахарозу или глицерин, более предпочтительно сахароза. Тоничность представляет собой 'эффективную осмоляльность' и равна сумме концентраций растворенных веществ, которые имеют способность проявлять осмотическую силу через мембрану. Парентеральные составы должны быть изотоничными по отношению к плазме крови. Агенты, регулирующие тоничность, хорошо известны квалифицированному специалисту в данной области техники.

'Буфер' используется для предотвращения изменений значения рН раствора, и подходящие примеры хорошо известны специалисту, занимающемуся приготовлением составов, в данной области техники.

'Контейнер' обозначает ампулу или флакон с резиновой пробкой и крышкой, одно- или двухкамерный шприц, инфузионный мешок или сосуд, изготовленный из полимерных материалов или стекла, подходящий для хранения композиций для парентерального введения. Он также включает любой флакон для удерживания жидкостей.

Как используется в настоящей заявке, термин "растворитель" представляет собой растворитель, используемый для восстановления фармацевтической композиции, подходящей для парентерального введения, используя в качестве исходной твердую фармацевтическую композицию. Твердая фармацевтическая композиция предпочтительно представляет собой лиофилизат. предпочтительном варианте, растворитель представляет собой воду. В контексте настоящего изобретения, используемая вода представляет собой воду для инъекций.

Как используется в настоящей заявке, термин 'содержащий' обозначает 'включающий', и не предназначен для исключения присутствия любого дополнительного компонента, если из контекста не является очевидным обратное, например, когда компоненты совместно равны 100%.

Как используется в настоящей заявке, термин 'лечить', 'лечение' или 'терапия' любого заболевания или нарушения относится в одном варианте осуществления, к ослаблению заболевания или нарушения (то есть, замедлению или остановке или уменьшению развития заболевания или по меньшей мере одного из его клинических симптомов). В другом варианте осуществления, 'лечить', 'лечение' или 'терапия' относится к ослаблению или облегчению по меньшей мере одного физического параметра, включая те, которые могут не отличаться пациентов. В еще другом варианте осуществления, 'лечить', 'лечение' или 'терапия' относится к модуляции заболевания или нарушения, либо физически, (например, стабилизация различимого симптома), физиологически, (например, стабилизация физического параметра), или обоих.

Как используется в настоящей заявке, "терапевтически эффективное количество композиции" обозначает эффективное количество композиции в соответствии с изобретением, содержащее эффективную дозу активного начала для обеспечения терапевтического преимущества для пациента. Доза Соединения А, вводимого в соответствии с изобретением, составляет от 5 мг до 1000 мг (выражаемая в виде свободного основания).

Смешивания 'незадолго до введения пациенту' обозначает вплоть до трех дней до, в особенности вплоть до 24 часов до, и, например, вплоть до 6 часов до введения пациенту.

Варианты осуществления изобретения

Ниже представлены различные варианты осуществления изобретения.

Е1. Твердая фармацевтическая композиция, содержащая Соединение А, которое представляет собой 5-(5-хлор-2-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил]карбонил}фенил)-N-(5-циано-1,2-диметил-1Н-пиррол-3-ил)-N-(4-гидроксифенил)-1,2-диметил- 1H-пиррол-3-карбоксамид, или его фармацевтически приемлемую соль, и циклодекстрин.

Е2. Твердая фармацевтическая композиция в соответствии с Е1, где Соединение А представлено в форме соли - гидрохлорида.

Е3. Твердая фармацевтическая композиция в соответствии с Е1, где Соединение А представлено в форме соли - гидросульфата.

Е4. Твердая фармацевтическая композиция в соответствии с любым из вариантов осуществления Е1 - Е3, где циклодекстрин представляет собой натриевую соль сульфобутилового эфира β-циклодекстрина (SBE- β-циклодекстрин) или гидроксипропил- β-циклодекстрин (HP- β-циклодекстрин).

Е5. Твердая фармацевтическая композиция в соответствии с Е4, где сульфобутиловый эфир β-циклодекстрина выбирают из Dexsolve™ и Captisol™.

Е6. Твердая фармацевтическая композиция в соответствии с Е1 - Е3, где циклодекстрин представляет собой HP- β-циклодекстрин, более предпочтительно Cavitron™ W7HP7, Cavitron™ W7HP5, Kleptose™ НРB или Kleptose™ HP.

Е7. Твердая фармацевтическая композиция в соответствии с Е6, где молярное соотношение между HP- β-циклодекстрином и Соединением А составляет по меньшей мере 5: 1. В другом варианте осуществления, соотношение вес/вес между HP- β-циклодекстрином и Соединением А составляет по меньшей мере 10: 1 для твердых фармацевтических композиций в соответствии с изобретением.

Е8. Твердая фармацевтическая композиция в соответствии с Е7, где молярное соотношение между HP- β-циклодекстрином и Соединением А составляет 5:1. В другом варианте осуществления, соотношение вес/вес между HP- β-циклодекстрином и Соединением А составляет 10: 1 для твердых фармацевтических композиций в соответствии с изобретением.

Е9. Твердая фармацевтическая композиция в соответствии с любым из вариантов осуществления Е6 - Е8, где HP- β-циклодекстрин представляет собой Cavitron™ W7HP5.

Е10. Твердая фармацевтическая композиция в соответствии с любым из вариантов осуществления Е6 - Е8, где HP- β-циклодекстрин представляет собой Kleptose™ НРВ.

Е11. Твердая фармацевтическая композиция в соответствии с любым из вариантов осуществления El - Е10, которая дополнительно содержит один или несколько фармацевтически приемлемых наполнителей. В другом варианте осуществления, фармацевтически приемлемый наполнитель представляет собой поверхностно-активное вещество.

Е12. Твердая фармацевтическая композиция в соответствии с любым из вариантов осуществления Е1 - Е10, содержащая по меньшей мере один из фармацевтически приемлемых наполнителей, выбранных из глюкозы, маннита, сахарозы, трегалозы и сорбита.

Е13. Твердая фармацевтическая композиция в соответствии с любым из вариантов осуществления E1 - Е12, которая представляет собой лиофилизат.

Е14. Фармацевтическая композиция, содержащая Соединение А, которое представляет собой 5-(5-хлор-2-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил]карбонил}фенил)-N-(5-циано-1,2-диметил-1Н-пиррол-3-ил)-N-(4-гидроксифенил)-1,2-диметил-1H-пиррол-3-карбоксамид, или его фармацевтически приемлемую соль, циклодекстрин и один или несколько растворителей. В другом варианте осуществления, фармацевтическая композиция дополнительно содержит поверхностно-активное вещество.

Е15. Фармацевтическая композиция в соответствии с Е14 где растворитель представляет собой водный буфер или воду, и более предпочтительно воду.

Е16. Фармацевтическая композиция в соответствии с Е14 или Е15, где Соединение А представлено в форме соли - гидрохлорида.

Е17. Фармацевтическая композиция в соответствии с Е14 или Е15, где Соединение А представлено в форме соли - гидросульфата.

Е18. Фармацевтическая композиция в соответствии с Е17, имеющая значение рН, находящееся в диапазоне от 2,8 и 3,2, более предпочтительно значение рН находится в диапазоне от 2,9 до 3,1.

Е19. Фармацевтическая композиция в соответствии с Е17 имеющая значение рН, находящееся в диапазоне от 2,5 до 4,3, более предпочтительно значение рН находится в диапазоне от 2,5 до 3,5.

Е20. Фармацевтическая композиция в соответствии с любым из вариантов осуществления Е14 - Е19, где циклодекстрин представляет собой натриевую соль сульфобутилового эфира β-циклодекстрина (SBE- β-циклодекстрин) или гидроксипропил- β-циклодекстрин (HP- β-циклодекстрин).

Е21. Фармацевтическая композиция в соответствии с Е20, где сульфобутиловый эфир β-циклодекстрина выбирают из Dexsolve™ и Captisol™.

Е22. Фармацевтическая композиция в соответствии с любым из вариантов осуществления Е14 - Е19, где циклодекстрин представляет собой HP- β-циклодекстрин, более предпочтительно Cavitron™ W7HP7, Cavitron™ W7HP5, Kleptose™ НРВ или Kleptose™ HP.

Е23. Фармацевтическая композиция в соответствии с Е22, где молярное соотношение между HP- β-циклодекстрином и Соединением А составляет по меньшей мере 5: 1. В другом варианте осуществления, соотношение вес/вес между HP- β-циклодекстрином и Соединением А составляет по меньшей мере 10:1 для фармацевтических композиций в соответствии с изобретением.

Е24. Фармацевтическая композиция в соответствии с Е23, где молярное соотношение между HP- β-циклодекстрином и Соединением А составляет 5:1. В другом варианте осуществления, соотношение вес/вес между HP- β-циклодекстрином и Соединением А составляет 10:1 для фармацевтических композиций в соответствии с изобретением.

Е25. Фармацевтическая композиция в соответствии с любым из вариантов осуществления Е22 - Е24, где HP- β-циклодекстрин представляет собой Cavitron™ W7HP5.

Е26. Фармацевтическая композиция в соответствии с любым из вариантов осуществления Е22 - Е24, где HP- β-циклодекстрин представляет собой Kleptose™ НРВ.

Е27. Фармацевтическая композиция в соответствии с любым из вариантов осуществления Е22 - Е26, имеющая концентрацию, содержащую от 50 до 300 мг/мл HP- β-циклодекстрина.

Е28. Фармацевтическая композиция в соответствии с Е27, имеющая концентрацию 200 мг/мл HP- β-циклодекстрина.

Е29. Фармацевтическая композиция в соответствии с любым из вариантов осуществления Е22 - Е26 имеющая концентрацию 20 мг/мл Соединения А, свободное основание.

Е30. Фармацевтическая композиция в соответствии с любым из вариантов осуществления Е14 - Е29, которая дополнительно содержит агент, регулирующий тоничность.

Е31. Фармацевтическая композиция в соответствии с Е30, где агент, регулирующий тоничность, выбирают из глюкозы, маннита, сахарозы, трегалозы и сорбита.

Е32. Фармацевтическая композиция в соответствии с Е14, содержащая Соединение A, H₂SO₄' и Cavitron™ W7HP5, и имеющая значение рН, находящееся в диапазоне от 2,8 и 3,2, более предпочтительно значение рН находится в диапазоне от 2,9 до 3,1. В другом варианте осуществления, фармацевтическая композиция дополнительно содержит воду.

Е33. Фармацевтическая композиция в соответствии с Е14, содержащая 'Соединение A, H₂SO₄' и Cavitron™ W7HP5, и имеющая значение рН, находящееся в диапазоне от 2,5 до 4,3, более предпочтительно значение рН находится в диапазоне от 2,5 до 3,5. В другом варианте осуществления, растворитель, используемый в фармацевтической композиции, представляет собой воду.

Е34. Фармацевтическая композиция в соответствии с Е14:

- содержащая 'Соединение A, H₂SO₄', Cavitron™ W7HP5 и воду,

- и имеющая значение рН, находящееся в диапазоне от 2,5 до 4,3, более предпочтительно значение рН находится в диапазоне от 2,5 до 3,5,

- где молярное соотношение между Cavitron™ W7HP5 и Соединением А (свободное основание) составляет по меньшей мере 5:1.

Е35. Фармацевтическая композиция в соответствии с Е14:

- содержащая 'Соединение A, H₂SO₄', Cavitron™ W7HP5 и воду,

- и имеющая значение рН, находящееся в диапазоне от 2,5 до 4,3, более предпочтительно значение рН находится в диапазоне от 2,5 до 3,5,

- где молярное соотношение между Cavitron™ W7HP5 и Соединением А (свободное основание) составляет 5:1.

Е36. Фармацевтическая композиция в соответствии с Е14:

- содержащая 'Соединение A, H₂SO₄', Cavitron™ W7HP5 и воду,

- и имеющая значение рН, находящееся в диапазоне от 2,5 до 4,3, более предпочтительно значение рН находится в диапазоне от 2,5 до 3,5,

- где соотношение вес/вес между Cavitron™ W7HP5 и Соединением А (свободное основание) составляет по меньшей мере 10: 1.

Е37. Фармацевтическая композиция в соответствии с Е14:

- содержащая 'Соединение A, H₂SO₄', Cavitron™ W7HP5 и воду,

- и имеющая значение рН, находящееся в диапазоне от 2,5 до 4,3, более предпочтительно значение рН находится в диапазоне от 2,5 до 3,5,

- где соотношение вес/вес между Cavitron™ W7HP5 и Соединением А (свободное основание) составляет 10: 1.

Е38. Фармацевтическая композиция в соответствии с Е14, содержащая 'Соединение A, H₂SO₄', Cavitron™ W7HP5, воду и глюкозу, и имеющая значение рН, находящееся в диапазоне от 2,5 до 4,4, более предпочтительно значение рН находится в диапазоне от 3,3 до 4,4.

Е39. Фармацевтическая композиция в соответствии с Е14:

- содержащая 'Соединение A, H₂SO₄', Cavitron™ W7HP5, воду и глюкозу,

- и имеющая значение рН, находящееся в диапазоне от 2,5 до 4,4, более предпочтительно значение рН находится в диапазоне от 3,3 до 4,4,

- где молярное соотношение между Cavitron™ W7HP5 и Соединением А (свободное основание) составляет по меньшей мере 5:1.

Е40. Фармацевтическая композиция в соответствии с Е14:

- содержащая 'Соединение A, H₂SO₄', Cavitron™ W7HP5, воду и глюкозу,

- и имеющая значение рН, находящееся в диапазоне от 2,5 до 4,4, более предпочтительно значение рН находится в диапазоне от 3,3 до 4,4,

- где молярное соотношение между Cavitron™ W7HP5 и Соединением А (свободное основание) составляет 5:1.

Е41. Фармацевтическая композиция в соответствии с Е14:

- содержащая 'Соединение A, H₂SO₄', Cavitron™ W7HP5, воду и глюкозу,

- и имеющая значение рН, находящееся в диапазоне от 2,5 до 4,4, более предпочтительно значение рН находится в диапазоне от 3,3 до 4,4,

- где соотношение вес/вес между Cavitron™ W7HP5 и Соединением А (свободное основание) составляет по меньшей мере 10: 1.

Е42. Фармацевтическая композиция в соответствии с Е14:

- содержащая 'Соединение A, H₂SO₄', Cavitron™ W7HP5, воду и глюкозу,

- и имеющая значение рН, находящееся в диапазоне от 2,5 до 4,4, более предпочтительно значение рН находится в диапазоне от 3,3 до 4,4,

- где соотношение вес/вес между Cavitron™ W7HP5 и Соединением А (свободное основание) составляет 10: 1.

Е43. Фармацевтическая композиция в соответствии с любым из вариантов осуществления Е14 - Е42, для парентерального введения.

Е44. Фармацевтическая композиция в соответствии с Е43, для инфузии или внутривенной инъекции.

Е45. Способ приготовления фармацевтической композиции в соответствии с Е14, подходящей для парентерального введения, включающий растворение твердой фармацевтической композиции, как определено в E1 - Е13, в растворителе, более предпочтительно в воде.

Е46. Способ в соответствии с Е45, включающий дополнительную стадию разведения с применением инфузионного раствора, более предпочтительно раствора 5% глюкозы.

Е47. Способ в соответствии с Е45 или Е46, где растворение происходит непосредственно перед введением пациенту.

Е48. Способ модуляции активности Вс1-2 рецептора у субъекта, где способ включает введение субъекту терапевтически эффективного количества композиции в соответствии с любым из вариантов осуществления Е14 - Е44.

Е49. Способ лечения злокачественного новообразования, включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества композиции в соответствии с любым из вариантов осуществления Е14 - Е44.

Е50. Способ в соответствии с Е49, где злокачественное новообразование выбирают из злокачественных новообразований мочевого пузыря, головного мозга, молочной железы и матки, хронических лимфоидных лейкозов, рака ободочной и прямой кишки, злокачественных новообразований пищевода и печени, лимфобластных лейкозов, острого миелоидного лейкоза, лимфом, например, неходжкинской В-клеточной лимфомы и диффузной крупноклеточной В-клеточной лимфомы, меланом, злокачественных болезней крови, например, миелодиспластического синдрома, миелом, например, множественной миеломы, рака яичников, немелкоклеточного рака легких, рака предстательной железы, рака поджелудочной железы и мелкоклеточного рака легких.

Е51. Способ в соответствии с Е50, где злокачественное новообразование выбирают из неходжкинской В-клеточной лимфомы, диффузной крупноклеточной В-клеточной лимфомы, множественной миеломы, миелодиспластического синдрома, хронических лимфоидных лейкозов и острого миелоидного лейкоза, более предпочтительно неходжкинской В-клеточной лимфомы, множественной миеломы и острого миелоидного лейкоза.

Е52. Способ в соответствии с любым из вариантов осуществления Е48 - Е51, где композиция в соответствии с любым из вариантов осуществления Е14 - Е36, вводят один раз в неделю.

Е53. Фармацевтическая композиция в соответствии с любым из вариантов осуществления Е14 - Е44 для применения в качестве лекарственного средства.

Е54. Фармацевтическая композиция для применения в соответствии с Е53, где указанное применение предназначено для лечения злокачественного новообразования, в особенности, где злокачественное новообразование выбирают из злокачественных новообразований мочевого пузыря, головного мозга, молочной железы и матки, хронических лимфоидных лейкозов, рака ободочной и прямой кишки, злокачественных новообразований пищевода и печени, лимфобластных лейкозов, острого миелоидного лейкоза, лимфом, например, неходжкинской В-клеточной лимфомы и диффузной крупноклеточной В-клеточной лимфомы, меланом, злокачественных болезней крови, например, миелодиспластического синдрома, миелом, например, множественной миеломы, рака яичников, немелкоклеточного рака легких, рака предстательной железы, рака поджелудочной железы и мелкоклеточного рака легких.

Е55. Фармацевтическая композиция для применения в соответствии с вариантом осуществления Е54, где указанное злокачественное новообразование выбирают из неходжкинской В-клеточной лимфомы, диффузной крупноклеточной В-клеточной лимфомы, множественной миеломы, миелодиспластического синдрома, хронических лимфоидных лейкозов и острого миелоидного лейкоза, более предпочтительно неходжкинской В-клеточной лимфомы, множественной миеломы и острого миелоидного лейкоза.

Е56. Применение твердой фармацевтической композиции в соответствии с любым из El - Е13, для приготовления лекарственного средства для лечения злокачественного новообразования.

Е57. Применение в соответствии с Е56, где злокачественное новообразование выбирают из злокачественных новообразований мочевого пузыря, головного мозга, молочной железы и матки, хронических лимфоидных лейкозов, рака ободочной и прямой кишки, злокачественных новообразований пищевода и печени, лимфобластных лейкозов, острого миелоидного лейкоза, лимфом, например, неходжкинской В-клеточной лимфомы и диффузной крупноклеточной В-клеточной лимфомы, меланом, злокачественных болезней крови, например, миелодиспластического синдрома, миелом, например, множественной миеломы, рака яичников, немелкоклеточного рака легких, рака предстательной железы, рака поджелудочной железы и мелкоклеточного рака легких, в особенности неходжкинской В-клеточной лимфомы, диффузной крупноклеточной В-клеточной лимфомы, множественной миеломы, миелодиспластического синдрома, хронических лимфоидных лейкозов и острого миелоидного лейкоза, и более предпочтительно неходжкинской В-клеточной лимфомы, множественной миеломы и острого миелоидного лейкоза.

Е58. Комбинация, содержащая:

фармацевтическую композицию в соответствии с любым из вариантов осуществления Е14 - Е44, и

один или несколько терапевтически активных агентов, для одновременного, последовательного или раздельного применения.

Благоприятно, в предпочтительном варианте осуществления согласно изобретению, обеспечивается лиофилизат, содержащей Соединение А и Cavitron™ W7HP5, который может быть растворен в растворителе, предпочтительно воде, незадолго до введения для получения прозрачной композиции. В другом варианте осуществления, предварительный раствор может быть разведен раствором глюкозы 5%. В особенности, это достигают путем переноса фармацевтической композиции, содержащей Соединение А и Cavitron™ W7HP5, как описано в настоящей заявке, в мешок 250 мл глюкозы.

Приготовление твердой фармацевтической композиции в соответствии с изобретением может включать этап доведения значения рН исходного раствора перед высушиванием. В особенности, значение рН раствора доводят путем добавления по каплям, либо раствора НСl или раствора NaOH, в зависимости от концентрации Соединения А, содержащегося в исходном растворе.

ПРИМЕР 1: Исследования растворимости Соединения А в различных носителях для приготовления состава, подходящего для парентерального пути

Задачей данных исследований было определение растворимости при насыщении Соединения А с целью приготовления инъецируемого раствора, характеризующегося концентрацией активного компонента, являющейся достаточно высокой для удовлетворения терапевтических потребностей введения у людей. В особенности, необходимо иметь доступный носитель, который предоставляет возможность достижения высоких суточно вводимых доз активного компонента, принимая во внимание допустимые суточные дозы для самого носителя. В особенности, допустимая суточная доза для НР-β-циклодекстрина достигает 320 мг/кг/сутки.

Растворимость 'Соединения A, H₂SO₄' исследовали в различных средах, включая:

- цитратный буфер (рН=2; 50 мМ), ацетатный буфер (рН=4; 50 мМ) и фосфатный буфер (рН=6-7,4; 67,7 мМ);

- циклодекстрины типа сульфобутиловый эфир β-циклодекстрин (SBE-β-циклодекстрин) или гидроксипропил β-циклодекстрин (НР-β-циклодекстрин); более точно, тестированный SBE-β-циклодекстрин представляет собой Dexsolve™, выпускаемый на рынке Cyclolab, в то время как тестированные НР-β-циклодекстрины представляют собой Cavitron™ W7HP7 и Cavitron™ W7HP5, выпускаемые на рынке Wacker; Kleptose™ HP и Kleptose™ НРВ, выпускаемые на рынке Roquette;

- поверхностно-активные вещества, такие как полисорбат 80 и Kolliphor™ ELP;

- смесь РЕG400/этанол/0,9% NaCl (40/10/50).

Приготовление сред, содержащих различные носители, подвергаемые тестированию:

(I) 20% по весу раствора циклодекстрина 5 г исследуемого циклодекстрина (Dexsolve™, Cavitron™ W7HP7, Cavitron™ W7HP5, Kleptose™ HP или Kleptose™ НРВ) взвешивали в 20 мл мерной колбы. Добавляли приблизительно 15 мл воды и все полученное количество подвергали магнитному перемешиванию. Затем объем доводили вплоть до 25 мл путем добавления воды. Все полученное количество помещали под магнитное перемешивание в течение 10 минут.

(II) 2% по весу растворов поверхностно-активных веществ

1 г исследуемого поверхностно-активного вещества взвешивали в 50 мл мерной колбы. После этого объем доводили до 50 мл с помощью 0,9% раствора NaCl. Все полученное количество помещали под магнитное перемешивание в течение 1 часа.

(III) РЕG/этанол/0,9% раствор NaCl (40/10/50) об./об./об.

Брали 20 мл PEG 400, 5 мл этанола и 25 мл NaCl. Все количество помещали в 100 мл коническую колбу Эрленмейера и магнитно перемешивали в течение 30 минут.

Испытание на растворимость:

Приблизительно 340 мг 'Соединения A, H₂SO₄' взвешивали в пробирке объемом 5 мл. После этого добавляли 3 мл среды, содержащей носитель, подлежащий тестированию. Затем все полученное количество помещали под магнитное перемешивание в течение 2 часов или 24 часов. Таким образом полученную суспензию или раствор пропускали через фильтр 0,2 мкм (PVDF мембрана -Millipore) перед анализом с помощью ВЭЖХ. Дополнительно, исследовали присутствие продуктов разложения Соединения А в образцах, которые хранили в течение 72 часов при температуре окружающей среды.

Результаты:

Вывод:

5 носителей, которые позволяли существенное растворение Соединения А, представляют собой: Cavitron™ W7HP5 ≈ Kleptose™ НРВ > Kleptose™ HP ≈ Dexsolve™ ≈ Cavitron™ W7HP7 > PEG400 > PEG400/EtOH/0,9% NaCl (40/10/50). Растворимости в этих средах находятся в диапазоне от 10 до 30 мг/мл после перемешивания в течение 24 часов. Cavitron™ W7HP5 и Kleptose™ НРВ представляют собой наиболее эффективный носитель для солюбилизации Соединения А и предоставляет возможность приготовления растворов с достаточным содержанием активного компонента для парентерального введения людям. В особенности, растворы, в которых молярное соотношение между НР-β-циклодекстрином и Соединением А составляет 5:1, являются компромиссным решением между содержанием действующего вещества и содержанием НР-β-циклодекстрина в соответствии с допустимой суточной дозой. Более высокие соотношения также являются приемлемыми в пределах допустимой суточной дозы.

Растворимости, полученные после перемешивания в течение 2 часов, были величинами того же порядка. Не было обнаружено существенного количества (>0,1%) продукта разложения или побочного продукта в образцах.

ПРИМЕР 2: Исследования растворимости Соединения А в НР-β-циклодекстрине в зависимости от значения рН

Исследование 1, используя в качестве исходного вещества Соединение А, НСl

Растворимость Соединения А, НС1 исследовали в присутствии НР-β-циклодекстрина в зависимости от значения рН с помощью различных буферов (ацетат рН=4 и фосфат рН=7,4).

Приготовление сред, содержащих различные носители, подвергаемые тестированию:

(I) Ацетатный буфер рН 4

0,75 г натрия ацетата тригидрат (NаС₂Н₃О₂, 3Н₂О) вносили в мерную колбу объемом 250 мл. Добавляли 3,5 мл 2 н. раствора уксусной кислоты (приготовленного из ледяной уксусной кислоты). После этого объем доводили до 250 мл с помощью 0,9% раствора NaCl, и затем все количество перемешивали. После этого значение рН доводили до 4 с помощью 1 н. раствора НСl.

(II) Фосфатный буфер рН 7,4

2,075 г калия дигидрофосфата (KН₂РО₄) и 0,238 г натрия дигидрофосфата (Na₂HPO₄) растворяли в 100 мл воды. Все количество перемешивали до завершения солюбилизации. После этого объем доводили до 250 мл с помощью 0,9% раствора NaCl. Значение рН доводили до желательного значения (7,4) с помощью 1 н. раствора гидроксида натрия.

(III) 20% по весу раствора циклодекстрина 2 г исследуемого циклодекстрина (Cavitron™ W7HP5) взвешивали в 10 мл мерной колбы. После этого объем доводили до 10 мл с помощью смеси вода/0,9% NaCl (80/20) или раствора ацетатного или фосфатного буфера, в зависимости от желательного значения рН.

Исследование максимальной растворимости:

Взвешивали приблизительно 10 мг Соединения А, НСl. Затем перемешивали 1 мл среды, содержащей носитель, подлежащий тестированию, то есть Cavitron™ W7HP5 без доведения значения рН, Cavitron™ W7HP5 доведенное до рН=4 или Cavitron™ W7HP5 доведенное до рН=7,4. После этого все количество помещали под магнитное перемешивание. Затем добавляли 5 мг Соединения А, НСl. Операцию повторяли, если соединение солюбилизировалось. Смесь перемешивали в течение 24 часов. Суспензию затем пропускали через 0,45 мкм фильтр перед анализом с помощью ВЭЖХ хроматографии.

Результаты:

Исследование 2, используя в качестве исходного вещества Соединение А, H₂SO₄

Растворимость 'Соединения A, H₂SO₄' исследовали в присутствии НР-β-циклодекстрина в зависимости от значения рН.

Приготовление 20% мас./об раствора циклодекстрина (200 мг/мл) 10 г исследуемого циклодекстрина (Cavitron™ W7HP5) помещали в мерную колбу объемом 50 мл. Затем добавляли 40 мл воды. Все количество помещали под магнитное перемешивание. После этого объем доводили водой до 50 мл.

Испытание на растворимость:

Взвешивали приблизительно 856,7 мг 'Соединения A, H₂SO₄'. Затем добавляли 30 мл среды, содержащей носитель, подвергаемый тестированию, то есть Cavitron™ W7HP5. Все полученное количество помещали под магнитное перемешивание в течение 24 часов. Суспензию затем пропускали через фильтр 0,2 мкм (PALL - PES мембрана - диаметр 25 мм) перед анализом с помощью ВЭЖХ.

В других исследованиях, после этого модифицировали значение рН раствора с помощью 0,1 н. раствора NaOH до достижения значения 4 и 8,8, перед осуществлением анализа с помощью ВЭЖХ хроматографии.

Результаты:

Визуально наблюдали осадок от рН 3,2. Вывод:

Эти результаты подтверждают, что Соединение А эффективно растворяется с помощью Cavitron™ W7HP5. Растворимость существенным образом зависит от значения рН раствора. Для 'Соединения A, H₂SO₄', осаждение наблюдали от рН 3,2 и оно становилось более заметным при повышении значений рН. Это критическое значение рН зависит от параметров процесса. Осуществляли дальнейшие эксперименты с оптимизированным комплексообразованием и процессами растворения для определения точного значения рН, при котором происходит осаждение. Это исследование подробно представлено в Примере 9.

ПРИМЕР 3: Исследование феномена осаждения Соединения А, приготовленного в различных носителях, при разведении в плазме собак

Задачей этого исследования была оценка возможности осаждения Соединения А, приготовленного в НР-β-циклодекстрине (то есть Cavitron™ W7HP5) или в смеси PEG400/EtOH/0,9% NaCl (в присутствии или отсутствии TPGS) в плазме собак.

Тестировали следующие 7 составов:

- 3 мг/мл Соединения А в 200 мг/мл Cavitron™ W7HP5 раствора в смеси вода/0,9% NaCl (70/30),

- 6 мг/мл Соединения А в 200 мг/мл Cavitron™ W7HP5 раствора в смеси вода/0,9% NaCl (70/30),

- 3 мг/мл Соединения А в среде, полученной путем растворения в 5% растворе глюкозы для инфузии (G5 раствор) раствора, содержащего дозу 20 мг/мл Соединения А в 200 мг/мл Cavitron™ W7HP5 раствора в смеси вода/NaCl (70/30),

- 3 мг/мл Соединения А в смеси PEG 400/EtOH/0,9% NaCl (40/10/50),

- 6 мг/мл Соединения А в смеси PEG 400/EtOH/0,9% NaCl (40/10/50),

- 3 мг/мл Соединения А в смеси PEG 400/EtOH/0,9% NaCl/TPGS (40/10/49,5/0,5),

- 6 мг/мл Соединения А в смеси PEG 400/EtOH/0,9% NaCl/TPGS (40/10/49,5/0,5).

Тестировали два протокола добавления составов к плазме:

- 10 мкл/мин в течение 15 минут при 37°С,

- 7,5 мкл/мин в течение 10 минут при 37°С.

Приготовление сред, содержащих различные носители, подвергаемые тестированию:

(I) 200 мг/мл циклодекстринов

Взвешивали 4 г Cavitron™ W7HP5 в мерную колбу объемом 20 мл. Добавляли приблизительно 15 мл смеси вода /0,9% NaCl (70/30) об./об. Все количество помещали под магнитное перемешивание до полного растворения компонентов.

Объем среды доводили до 20 мл путем добавления необходимых количеств воды/0,9% NaCl и все количество магнитно перемешивали в течение 10 минут.

(II) PEG400/EtOH/0,9% раствора NaCl

Барли 8 мл PEG 400, 2 мл этанола и 10 мл 0,9% NaCl. Вносили их в коническую колбу Эрленмейера объемом 25 мл и все количество помещали под магнитное перемешивание в течение 1 часа.

(III) PEG/EtOH/0,9% раствора NaCl/TPGS

Брали 8 мл PEG 400, 2 мл этанола и 9,9 мл 0,9% NaCl. Вносили их в коническую колбу Эрленмейера объемом 25 мл и все количество помещали под магнитное перемешивание в течение 1 часа. Взвешивали 100 мг TPGS и добавляли его к вышеуказанной смеси. Магнитно перемешивали в течение 16 часов.

(IV) Приготовление смесей для испытания на растворимость Взвешивали желательное количество 'Соединения A, H₂SO₄' (X мг). Добавляли 5 мл среды, подлежащей тестированию (Cavitron™ W7HP5, PEG/EtOH/0,9% раствора NaCl, PEG/EtOH/0,9% раствора NaCl/TPGS). Помещали среду, полученную таким образом, под магнитное перемешивание при температуре окружающей среды в течение 24 часов. Следует отметить, что для приготовления 20 мг/мл раствора Соединения А в циклодекстрине, необходимо нагреть среду при 60°С в течение 2 часов. В тех случаях, когда растворы основаны на циклодекстрине, необходимо довести значение рН до 3. Пропускали растворы, полученные таким образом, через фильтр 0,2 мкм (PVDF мембрана - Millipore).

Для раствора, приготовленного при концентрации 20 мг/мл, затем осуществляли растворение в G5 растворе для получения конечной концентрации 3 мг/мл.

Растворение в плазме & результаты

Помещали 1,0 мл плазмы в сосуд подходящего объема. Помещали сосуд в печь, установленную на 37°С. После этого:

- добавляли при 10 мкл/мин каждого раствора, подлежащего тестированию, в течение 15 минут, или

- добавляли при 7,5 мкл/мин каждого раствора, подлежащего тестированию, в течение 10 минут.

Перемешивали вручную после добавления раствора, затем предоставляли смеси возможность отстояться.

Растворы, полученные таким образом, пропускали через фильтр 0,2 мкм (PVDF мембрана - Millipore).

Для 7 тестируемых составов, значение рН, измеренное после растворения в плазме, находилось в интервале от 7,5 до 8.

Независимо от применяемого протокола добавления, осаждение наблюдали для всех следующих образцов:

- PEG/EtOH/0,9% NaCl 3 и 6 мг/мл

- PEG/EtOH/0,9% NaCl/TPGS 3 и 6 мг/мл

Это осаждение немедленно происходит в образцах без TPGS и появляется немого позже в тех, которые содержат TPGS.

Осаждение наблюдали в течение времени от 8 минут с протоколом добавления при 10 мкл/мин в течение 15 минут с раствором Cavitron™ W7HP5, содержащим дозу 6 мг/мл активного компонента.

Визуально не наблюдали осаждения для других тестируемых образов, в которых Соединение А приготовлено в Cavitron™ W7HP5.

ПРИМЕР 4: Исследование физической стабильности лиофилизатов, приготовленных из Соединения А и НР-β-циклодекстрина, в присутствии или отсутствии других наполнителей

Приготовление 20% растворов циклодекстрина, содержащих дозу 20 мг/мл Соединения А, при отсутствии или в присутствии глюкозы

В колбу объемом 100 мл, вносили 20 г Cavitron™ W7HP5 и 2,26 г 'Соединение A, H₂SO₄'. Все количество нагревали при 60°С при интенсивном магнитном перемешивании до полной солюбилизации компонентов смеси. Предоставляли возможность вернуться до температуры окружающей среды, переносили в химический стакан и затем измеряли значение рН. Доводили значение рН до 3 с помощью 0,5 н. раствора NaOH. В случае целесообразности, добавляли 1,2 г безводной глюкозы.

Объем доводили водой до 100 мл. Затем проверяли значение рН и осмоляльность. Полученный раствор фильтровали через целлюлозный шприцевый фильтр. После этого растворы, полученные таким образом (с или без глюкозы), лиофилизировали.

Приготовление 20% растворов циклодекстрина, содержащих дозу 15 мг/мл Соединения А, при отсутствии или в присутствии различных сахаров, включая глюкозу, маннит. сахарозу, трегалозу и сорбит

В колбу объемом 100 мл, вносили 20 г Cavitron™ W7HP5 и 1,70 г 'Соединения A, H₂SO₄'. Все количество нагревали при 60°С при интенсивном магнитном перемешивании до полной солюбилизации компонентов смеси. Предоставляли возможность вернуться до температуры окружающей среды, переносили в химический стакан и затем измеряли значение рН. Доводили значение рН до 4,0 с помощью 1,0 н. раствора NaOH. В случае целесообразности, добавляли 1,0 или 2,0 г безводной глюкозы, маннита, сахарозы, трегалозы или сорбита. Объем доводили водой до 100 мл. Затем проверяли значение рН и осмоляльность. Полученный раствор фильтровали через целлюлозный шприцевый фильтр. После этого растворы, полученные таким образом (с или без глюкозы), лиофилизировали.

Результаты

Осмоляльность растворов, содержащих в интервале от 10 до 20 мг/мл глюкозы, маннита, сахарозы, трегалозы или сорбита, составляет больше, чем 400 мОсм/кг, в то время как растворов без глюкозы равна приблизительно 300 мОсм/кг. Факт исключения глюкозы из составов существенно уменьшает осмоляльность. Тем не менее, осмоляльность растворов без глюкозы является приемлемой для парентерального введения.

Полученные лиофилизаты, с и без глюкозы, маннита. сахарозы, трегалозы или сорбита, имеют очень хорошие физические свойства, а именно хороший вид материала и приемлемое время восстановления.

Выводы

В данном исследовании было показано, что присутствие глюкозы, маннита, сахарозы, трегалозы или сорбита, не является существенно важным для приготовления лиофилизатов, что предоставляет возможность преодолеть риски деградации, связанные с этим наполнителем. Дополнительные тесты в присутствии 5% глюкозы или 5% маннита в растворах, содержащих дозу 20 мг/мл Соединения А и 200 мг/мл НР-β-циклодекстрина, не приводили к улучшению физических свойств лиофилизатов.

ПРИМЕР 5: Приготовление лиофилизатов Соединения А, солюбилизированных в HР-β-циклодекстрине, во флаконах объемом 20 мл

Лиофилизаты приготавливали во флаконах объемом 20 мл, в которых будет возможно восстанавливать раствор для введения парентеральным путем. Их получали путем лиофилизации 20% раствора Cavitron™ W7HP5, содержащего дозу 20 мг/мл Соединения А (свободное основание).

Процедура

В реактор объемом 5 л, взвешивали 1500 г воды. При магнитном перемешивании, создавали вихрь и затем вливали в 600 г Cavitron™ W7HP5. Среду перемешивали при температуре окружающей среды до тех пор, пока циклодекстрин полостью не солюбилизировался, и добавляли 68,16 г 'Соединения A, H₂SO₄' и нагревали раствор не более, чем до 60°С. Помещали суспензию под магнитное перемешивание в течение нескольких часов и затем предоставляли возможность среде вернуться до температуры ниже 30°С. Измеряли значение рН раствора, полученного таким образом, затем доводили его до рН 3,0 с помощью 0,5М раствора NaOH, который вливали медленно. Объем раствора доводили до 3 л путем добавления воды, осуществляя при этом магнитное перемешивание.

Раствор, полученный таким образом, пропускали через фильтр 0,2 мкм. Флаконы объемом 20 мл заполняли отфильтрованным раствором таким образом, что каждый флакон содержал по меньшей мере 150 мг Соединения А (выраженного в виде свободного основания) и образцы подвергали стадии лиофилизации.

Полученный лиофилизат предназначен для применения для приготовления фармацевтической композиции для парентерального введения. В дальнейших экспериментах было показано, что значение рН фармацевтических композиций, содержащих дозу 20 мг/мл Соединения А, после восстановления в воде, используя в качестве исходного продукта вышеописанный лиофилизат, главным образом идентично значению рН раствора, наблюдаемому перед стадией лиофилизации, то есть находится в диапазоне от 2,9 до 3,1. Следовательно, спецификация значения рН для лекарственного продукта должна быть установлена в диапазоне от 2,5 до 3,5.

ПРИМЕР 6: Стабильность растворов Соединения А при разведении в 250 мл 5% раствора глюкозы (G5)

Задачей данного исследования было определение значения рН при 7 различных концентрациях Соединения А, солюбилизированного в Cavitron™ W7H5 и разведенного в мешке 250 мл глюкозы 5% (G5 раствор), и затем осуществляли визуальную проверку, чтобы исключить наличие осаждения при различных тестируемых концентрациях (12 мг, 25 мг, 50 мг, 100 мг, 250 мг, 500 мг и 1 г активного компонента в 250 мл G5). Соединение А использовали в форме соли - гидросульфата. Также контролировали контаминацию растворов невидимыми частицами путем исследования методом светотени.

Процедура

Приготавливали маточный раствор, содержащий дозу 200 мг/мл Cavitron™ W7H5 и 20 мг/мл Соединения А (выраженное для свободного основания) путем растворения лиофилизата, как описано в Примере 5, в необходимом количестве воды. После этого раствор, полученный таким образом, разводили с помощью 5% раствора глюкозы (G5).

Измеряли значение рН полученных растворов и наблюдали за внешним видом растворов. Значение рН повышали, используя 0,01 н. раствор NaOH до тех пор, пока не наблюдали осаждения.

Результаты

Значение рН G5 раствора находилось в диапазоне от 3,02 до 4,353.

Растворы Соединения А, солюбилизированные с помощью раствора Cavitron™ W7H5, не осаждались при разведении в G5 растворе при концентрациях в диапазоне от 12 до 1000 мг/250 мл G5 раствора. Следовательно, Соединение А, как приготовлено в виде состава в настоящем изобретении, может быть восстановлено в воде и разведено в мешке 250 мл глюкозы 5% в широком диапазоне концентраций перед введением парентеральным путем.

Кроме того, были проведены исследования физической стабильности в динамике (24 ч, 48 ч и 72 ч) на растворах, полученных выше. В особенности, эти исследования включают количество частиц тестируемых растворов в соответствии с методом, описанным в Европейской Фармакопее 2.9.19. Тесты 1. В (то есть определение количества частиц, невидимых невооруженным глазом, путем светоблокировки).

Также проводили исследования химической стабильности в динамике (24 ч, 48 ч и 72 ч) для обеспечения стабильности продукта при лабораторном освещении (1500 люкс) и различных температурных режимах (температура окружающей среды, 5°С). Эти исследования включают в особенности измерения количества активного компонента и продуктов разложения. Тестировали фармацевтические композиции Соединения А, солюбилизированные с помощью раствора Cavitron™ W7H5, разведенного в G5 растворе, для следующих концентраций: 12 мг/250 мл, 20 мг/250 мл и 1000 мг/250 мл G5 раствора. Не было обнаружено продуктов существенного химического разложения при всех тестируемых условиях в течение 72 ч. Кроме того, процент частиц, невидимых невооруженным глазом, обнаруженных с использование метода светоблокировки, находилось в соответствии с требованиями Европейской Фармакопее 2.9.19. В заключение следует отметить, что вышеописанные фармацевтические композиции стабильны в релевантных условиях и контейнерах для обеспечения введения подходящей дозы Соединения А в течение целесообразного временного диапазона.

ПРИМЕР 7: Эффективность Соединения А, приготовленного в НР-β-циклодекстрине, на модели RS4;11 ксенотрансплантата у мышей, используя схему внутривенного введения один раз в неделю

Терапевтический эффект в условиях in vivo Соединения А, приготовленного в растворе, содержащем 20% НР-β-циклодекстрина маc./об., определяли на модели RS4;11 после внутривенного введения.

Материалы и методы

RS4;11 Клеточную линию, полученную от АТСС, подкожно инъецировали самкам SCID мышей, поставляемых Charles River. Когда опухоли достигали подходящего объема опухоли, мышей рандомизировали, используя программное обеспечение Easy stat. Соединение А (15 мг/кг или 40 мг/кг, выраженное в виде свободного основания) инъецировали в/в один раз в неделю в течение двух недель.

Приготовление растворов для инъекций:

В колбу объемом 100 мл, вносили 20 г Cavitron™ W7HP5 и добавляли приблизительно 75 мл раствора вода/0,9% NaCl (70/30, об./об.). Перемешивали в течение 15 минут при комнатной температуре. Затем, объем раствора доводили до 100 мл путем добавления предыдущего раствора воду/0,9% NaCl, в то время как поддерживали магнитное перемешивание. Взвешивали необходимое количество 'Соединения A, H₂SO₄' и растворяли его с предыдущим раствором 20% маc. /об. Cavitron™ W7H5. Все количество нагревали при 60°С при интенсивном магнитном перемешивании до полной солюбилизации компонентов смеси. Осуществляли измерение значений рН раствора. Доводили значение рН до 3 путем добавления по каплям, либо НСl 0,1 н. или NaOH 0,1 н., в зависимости от концентрации Соединения А. Перемешивали смесь по меньшей мере в течение 1 часа. Полученный раствор фильтровали через фильтр 0,2 мкм. Приготавливали 20% маc./об. раствора Cavitron™ W7H5, содержащего дозу 4 мг/мл Соединения, согласно этой процедуре. Также приготавливали второй раствор, содержащий дозу 1,5 мг/мл Соединения А, путем дополнительного разведения предыдущего раствора с помощью 20% раствора маc./об. Cavitron™ W7H5.

За мышами осуществляли наблюдение относительно развития опухоли и веса тела три раза в неделю и размер опухоли измеряли, используя электронные циркули. Объем опухоли оценивали путем измерения минимального и максимального диаметров опухоли, используя формулу: (минимальный диаметр)²(максимальный диаметр)/2. В последний день, при котором еще все контрольные животные присутствовали в исследовании, рассчитывали ингибирование роста опухоли, используя формулу:

где 'DTV (дельта Объема опухоли) при Dx' рассчитывали следующим образом: TV при Dx - TV при рандомизации контрольной 'TV обозначает 'Объем опухоли'.

Мышей умертвляли при первом измерении, для которого объем опухоли превышал 2000 мм³ или ухудшении здоровья животного. Все эксперименты осуществляли в соответствии с законодательством Франции, действующим с 2018 г. SCID мышей содержали в соответствии с правилами, принятыми в учреждении.

Результаты

Было продемонстрировано, что Соединение А, приготовленное в 20% НР-β-растворе циклодекстрина и которое вводили внутривенно один раз в неделю в течение 2 недель, имеет противоопухолевую активность в дозе 15 мг/кг и 40 мг/кг на RS4;11 привитых самках SCID мышей (Фигура 1). После окончания исследования, в день 21, ингибирование роста опухоли составляло 57,83% при дозе 15 мг/кг и 75,52% при дозе 40 мг/кг, с экспозицией 20463 нг.ч/мл и 46509 нг.ч/мл соответственно. С_mах повышала дозу пропорционально от 14692 нг/мл до 23290 нг/мл (Таблица 1).

'AUC_t' соответствует площади под кривой наблюдаемой концентрацией в крови относительно времени введения до последней точки.

Не было обнаружено клинически релевантной потери веса тела вследствие лечения (Фигура 2) в течение исследования и мыши не имели никаких других клинических признаков, включая некроз для большинства мышей. В заключение следует отметить, что на основании изменения веса тела обе схемы дозирования препарата циклодекстрина характеризуются хорошей переносимостью.

ПРИМЕР 8: Протокол клинического исследования

Осуществляли А фазу I, без контроля плацебо, нерандомизированного, несравнительного, многоцентрового клинического испытания для оценки Соединения А, вводимого внутривенно, у пациентов с рецидивирующим или устойчивым острым миелоидным лейкозом, неходжкинской лимфомой или множественной миеломой. В исследование было включено приблизительно 60 пациентов. Это исследование было разделено на две части: первая часть для повышения дозы, вторая часть для применения максимально переносимой дозы, определенной в ходе этапа повышения доз.

Первичные цели:

Определение профиля безопасности (включая дозолимитирующую токсичность (DLT) и максимально переносимую дозу (MTD) и переносимость Соединения А у пациентов с острым миелоидным лейкозом (AML), неходжкинской лимфомой (NHL) или множественной миеломы (ММ) и рекомендация дозы для II фазы (RP2D) в соответствии с безопасностью, ФК и предварительными результатами эффективности.

Вторичные цели:

- Определить фармакокинетический (ФК) профиль Соединения А в плазме и в моче.

- Оценить предварительную противоопухолевую активность Соединения А, используя подходящие критерии ответа для каждой оцениваемой популяции (AML, NHL, ММ).

Тестируемое лекарственное средство:

- Соединение А будут вводить путем в/в инфузии через центральный или периферический венозный катетер.

- Раствор для инфузии готовили с применением флаконов объемом 20 мл, содержащих 150 мг Соединения А (выраженного в виде свободного основания), приготовленного с НР-β-циклодекстрином, как описано в Примере 5.

- Длительность инфузии, на основании предварительных данных безопасности и ФК, можно адаптировать.

Методология распределения дозы:

Байесовскую иерархическую модель (ВНМ), в комбинации со всеми показаниями и под руководством метода контроля избыточной дозы (EWOC), использовали для управления повышением дозы и оценки MTD на основе проявления DLT во время Цикла 1.

Альтернативно, адаптивную байесовскую регрессионную логистическую модель (BLRM), под руководством метода контроля избыточной дозы (EWOC), использовали для предоставления рекомендаций относительно доз на основе проявления DLT во время Цикла 1 и оценки MTD/RP2D для Соединения А, вводимого в качестве однокомпонентного средства.

Период лечения:

Период лечения был запланирован до прогрессирования заболевания. Пациенты могут прекратить лечение с применением исследуемого лекарственного средства ранее вследствие неприемлемой токсичности и/или лечение прекращают по инициативе исследователя или пациента.

ПРИМЕР 9: Исследование значения рН осаждения Соединения А путем добавления NaOH к раствору НР-β- циклодекстрина

Задачей этого исследования было определить значение рН осаждения Соединения А (гидросульфатная соль) из раствора НР-β-циклодекстрина для лучшего понимания риска осаждения и выбора значения рН для лекарственного продукта.

Приготовление раствора, содержащего НР-β-циклодекстрин и Соединение А

Взвешивали 10 г Cavitron™ W7H5 в колбе объ емом 50 мл. Добавляли 26 г воды и затем солюбилизировали Cavitron™ W7H5 при магнитном взбалтывании. Осторожно добавляли 1,14 г Соединения А при магнитном взбалтывании и затем добавляли 6,5 мл воды. Солюбилизировали Соединение А, используя магнитное взбалтывание при 60°С. После полной солюбилизации, раствор охлаждали при комнатной температуре, затем промывали верхние края колбы с помощью 0,5 мл воды. Общее количество добавленной воды составляли 35 мл.

Доведение рН, используя 0,5М раствор NaOH

Медленно добавляли 0,5М раствор NaOH при непрерывном взбалтывании (на каждой стадии добавления добавляли 100 мкл) вплоть до визуального наблюдения осаждения. Эксперимент осуществляли в двух повторах. Осажденное твердое вещество отделяли и высушивали для анализа с помощью RMN, XRPD, XRF и ВЭЖХ.

Результаты

Осаждение лекарственного средства наблюдали при рН 4,27. Объем добавленного NaOH соответствовал 5% объема конечного нерасфасованного раствора при достижении рН 3,0 и соответствовал 6% объема конечного нерасфасованного раствора при достижении рН 4,27.

На основании этого результата, значение рН фармацевтической композиции может быть повышено до 4,3.

Результаты ЯМР и XRPD продемонстрировали, что Соединение А осаждается в виде свободного основания в аморфной форме в присутствии НР-β-циклодекстрина при молярном соотношении 1: 1,4. Результаты ВЭЖХ подтвердили, осадок состоял на 25% мас./мас. Соединения А без присутствия дополнительных примесей, что согласуется с соотношением Соединение А:НР-β-циклодекстрин, обнаруженным с помощью ЯМР.

Изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей 5-(5-хлор-2-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил]карбонил}фенил)-N-(5-циано-1,2-диметил-1H-пиррол-3-ил)-N-(4-гидроксифенил)-1,2-диметил-1H-пиррол-3-карбоксамид, обозначаемый в настоящей заявке как 'Соединение А', или его фармацевтически приемлемую соль и циклодекстрин. Более специфически, изобретение относится к твердой фармацевтической композиции, содержащей Соединение А и циклодекстрин, и фармацевтической композиции для парентерального введения, приготовленной путем растворения этой твердой фармацевтической композиции. Кроме того, изобретение относится к применению таких композиций для лечения злокачественного новообразования. 7 н. и 24 з.п. ф-лы, 9 пр., 1 табл., 2 ил.

1. Твердая фармацевтическая композиция для модуляции активности Bcl-2 рецептора, содержащая Соединение А, которое представляет собой 5-(5-хлор-2-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил]карбонил}фенил)-N-(5-циано-1,2-диметил-1H-пиррол-3-ил)-N-(4-гидроксифенил)-1,2-диметил-1H-пиррол-3-карбоксамид, или его фармацевтически приемлемую соль и гидроксипропил-β-циклодекстрин (НР-β-циклодекстрин), где молярное соотношение между HP-β-циклодекстрином и Соединением А составляет по меньшей мере 5:1 и где твердая фармацевтическая композиция представляет собой лиофилизат.

2. Твердая фармацевтическая композиция по п. 1, где Соединение А представлено в форме соли - гидрохлорида или соли - гидросульфата.

3. Твердая фармацевтическая композиция по п. 1 или 2, где молярное соотношение между HP-β-циклодекстрином и Соединением А составляет 5:1.

4. Твердая фармацевтическая композиция по одному из пп. 1-3, где HP-β-циклодекстрин представляет собой Cavitron™ W7HP5 или Kleptose™ НРВ.

5. Твердая фармацевтическая композиция по одному из пп. 1-4, которая дополнительно содержит один или несколько фармацевтически приемлемых наполнителей.

6. Твердая фармацевтическая композиция по одному из пп. 1-5, содержащая по меньшей мере один из фармацевтически приемлемых наполнителей, выбранных из глюкозы, маннита, сахарозы, трегалозы и сорбита.

7. Фармацевтическая композиция для модуляции активности Bcl-2 рецептора, содержащая Соединение А, которое представляет собой 5-(5-хлор-2-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил]карбонил}фенил)-N-(5-циано-1,2-диметил-1H-пиррол-3-ил)-N-(4-гидроксифенил)-1,2-диметил-1H-пиррол-3-карбоксамид, или его фармацевтически приемлемую соль, гидроксипропил-β-циклодекстрин (HP-β-циклодекстрин), где молярное соотношение между HP-β-циклодекстрином и Соединением А составляет по меньшей мере 5:1, и растворитель, где растворитель представляет собой водный буфер или воду и где фармацевтическая композиция имеет значение рН, находящееся в диапазоне от 2,5 до 4,3.

8. Фармацевтическая композиция по п. 7, где растворитель представляет собой воду.

9. Фармацевтическая композиция по п. 7 или 8, где Соединение А представлено в форме соли - гидрохлорида или соли - гидросульфата.

10. Фармацевтическая композиция по одному из пп. 7-9, имеющая значение рН, находящееся в диапазоне от 2,5 до 3,5.

11. Фармацевтическая композиция по одному из пп. 7-10, где HP- р-циклодекстрин представляет собой Cavitron™ W7HP5 или Kleptose™ HPB.

12. Фармацевтическая композиция по одному из пп. 7-11, где молярное соотношение между HP-β-циклодекстрином и Соединением А составляет 5:1.

13. Фармацевтическая композиция по одному из пп. 7-12, имеющая концентрацию 200 мг/мл HP-β-циклодекстрина.

14. Фармацевтическая композиция по одному из пп. 7-12, имеющая концентрацию 20 мг/мл Соединения А, свободное основание.

15. Фармацевтическая композиция по одному из пп. 7-14, которая дополнительно содержит агент, регулирующий тоничность.

16. Фармацевтическая композиция по п. 15, где агент, регулирующий тоничность, выбирают из глюкозы, маннита, сахарозы, трегалозы и сорбита.

17. Фармацевтическая композиция по п. 7, содержащая 'Соединение А, H₂SO₄', Cavitron™ W7HP5 и имеющая значение рН, находящееся в диапазоне от 2,5 до 4,3, более предпочтительно значение рН находится в диапазоне от 2,5 до 3,5.

18. Фармацевтическая композиция по одному из пп. 7-17 для парентерального введения.

19. Фармацевтическая композиция по п. 18 для инфузии или внутривенной инъекции.

20. Способ приготовления фармацевтической композиции по п. 7, подходящей для парентерального введения, включающий растворение твердой фармацевтической композиции, как определено в пп. 1-6, в воде.

21. Способ по п. 20, включающий дополнительную стадию растворения с раствором 5% глюкозы.

22. Способ по п. 20 или 21, где растворение происходит непосредственно перед введением пациенту.

23. Способ модуляции активности Bcl-2 рецептора у субъекта, где способ включает введение субъекту терапевтически эффективного количества композиции по одному из пп. 7-19.

24. Способ лечения злокачественного новообразования, включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества композиции по одному из пп. 7-19.

25. Способ по п. 24, где злокачественное новообразование выбирают из злокачественных новообразований мочевого пузыря, головного мозга, молочной железы и матки, хронических лимфоидных лейкозов, рака ободочной и прямой кишки, злокачественных новообразований пищевода и печени, лимфобластных лейкозов, острого миелоидного лейкоза, лимфом, меланом, злокачественных болезней крови, миелом, рака яичников, немелкоклеточного рака легких, рака предстательной железы, рака поджелудочной железы и мелкоклеточного рака легких.

26. Способ по п. 24 или 25, где злокачественное новообразование выбирают из неходжкинской В-клеточной лимфомы, диффузной крупноклеточной В-клеточной лимфомы, множественной миеломы, миелодиспластического синдрома, хронических лимфоидных лейкозов и острого миелоидного лейкоза.

27. Способ по одному из пп. 23-26, где композицию по одному из пп. 7-17 вводят один раз в неделю.

28. Фармацевтическая композиция по одному из пп. 7-17 для применения в качестве лекарственного средства.

29. Фармацевтическая композиция для применения по п. 28, где указанное применение предназначено для лечения злокачественного новообразования, в особенности, где злокачественное новообразование выбирают из злокачественных новообразований мочевого пузыря, головного мозга, молочной железы и матки, хронических лимфоидных лейкозов, рака ободочной и прямой кишки, злокачественных новообразований пищевода и печени, лимфобластных лейкозов, острого миелоидного лейкоза, лимфом, например, неходжкинской В-клеточной лимфомы и диффузной крупноклеточной В-клеточной лимфомы, меланом, злокачественных болезней крови, например, миелодиспластического синдрома, миелом, например, множественной миеломы, рака яичников, немелкоклеточного рака легких, рака предстательной железы, рака поджелудочной железы и мелкоклеточного рака легких.

30. Применение твердой фармацевтической композиции по одному из пп. 1-6 для приготовления лекарственного средства для лечения злокачественного новообразования.

31. Применение по п. 30, где злокачественное новообразование выбирают из злокачественных новообразований мочевого пузыря, головного мозга, молочной железы и матки, хронических лимфоидных лейкозов, рака ободочной и прямой кишки, злокачественных новообразований пищевода и печени, лимфобластных лейкозов, острого миелоидного лейкоза, лимфом, например, неходжкинской В-клеточной лимфомы и диффузной крупноклеточной В-клеточной лимфомы, меланом, злокачественных болезней крови, например, миелодиспластического синдрома, миелом, например, множественной миеломы, рака яичников, немелкоклеточного рака легких, рака предстательной железы, рака поджелудочной железы и мелкоклеточного рака легких, в особенности неходжкинской В-клеточной лимфомы, диффузной крупноклеточной В-клеточной лимфомы, множественной миеломы, миелодиспластического синдрома, хронических лимфоидных лейкозов и острого миелоидного лейкоза.