НОВЫЕ КОМПОЗИЦИИ АНТИТЕЛ ДЛЯ ИММУНОТЕРАПИИ РАКА Российский патент 2023 года по МПК C07K16/30 A61K39/395 A61P35/00 

[0001] Настоящая заявка испрашивает приоритет и преимущество на основании совместно рассматриваемой предварительной заявки на патент США № 62/720015, поданной 20 августа 2018 г., которая полностью включена в данный документ посредством ссылки.

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ

[0002] Настоящее изобретение относится к антигенсвязывающим полипептидам, которые связывают PD-L1 человека, фармацевтическим композициям и их применениям. Аспекты изобретения также относятся к экспрессионной системе, продуцирующей такие антигенсвязывающие полипептиды или антитела. Описанные в изобретении антигенсвязывающие полипептиды или фармацевтические композиции подходят для лечения субъекта, нуждающегося в этом, от патологического состояния, такого как рак млекопитающих, инфекция и так далее.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

[0003] Иммунные клетки имеют на поверхности костимулирующие и ингибирующие рецепторы, которые взаимодействуют с мембраносвязанными и растворимыми лигандами. Эти рецепторы служат для регуляции активности, продолжительности и типа иммунного ответа, путем изменения пороговых значений и продолжительности активации или ингибирования иммунной клетки. Их часто собирательно именуют иммунными контрольными точками. Многие молекулы таких контрольных точек являются членами суперсемейства молекул B7 или суперсемейства молекул фактора некроза опухолей (ФНО).

[0004] Семейство В7 включает как ингибирующие, так и стимулирующие корецепторы. Например, с одной стороны, лигирование белка запрограммированной (клеточной) гибели 1 (PD-1) и цитотоксического Т-лимфоцит-ассоциированного белка 4 (CTLA-4) с соответствующими им лигандами (PD-L1, PD-L2 и B7-1, B7-2, соответственно) приводит к подавлению активации или генерации регуляторных Т-клеток, анергии, истощению и апоптозу. С другой стороны, лигирование рецепторов кластера дифференцировки (CD28) и индуцируемого костимулятора T-лимфоцитов (ICOS) с соответствующими им лигандами ведет к повышенной пролиферации и продуцированию цитокина. И напротив, семейство костимулирующих рецепторов ФНО включает только стимулирующие молекулы, такие как OX40, 4-1BB, CD40, CD27 и их лиганды, способствующие пролиферации и дифференцировке эффекторной функции. Кроме того, существуют другие корецепторы, которые также принадлежат к любому из указанных семейств, например, Tim-3, LAG-3, Ceacam-1 и т.п.

[0005] За последние пару десятилетий стало ясно, что многие типы рака создают иммуносупрессивную среду внутри опухоли посредством множества механизмов. Ключевым моментом является эктопическая экспрессия ингибирующего лиганда иммунной контрольной точки (а именно PDL1), который подавляет внутриопухолевые Т-клетки. Также появляется все больше доказательств того, что блокирование указанной опосредованной опухолью супрессии иммунитета может дерепрессировать внутриопухолевые Т-клетки и позволить им убить опухоль. (Adachi K, Tamada K. Cancer Sci. 2015;106(8):945-50; Rafiq S, et al., Nat Biotechnol. 2018 Aug 13; Hargadon KM, et al., Int Immunopharmacol. 2018;62:29-39). Блокирование можно осуществить с помощью антитела или множеством других способов. Это отличается от традиционного лечения противораковыми антителами, когда антитело связывается с раковой клеткой и задействует комплементзависимую цитотоксичность (КЗЦ), а также антителозависимую клеточную цитотоксичность (АЗКЦ), чтобы напрямую убивать опухолевые клетки.

[0006] Антитела CTLA-4 были первыми из класса иммунотерапевтических средств, основанных на блокаде иммунных контрольных точек, получившими одобрение FDA. Другие мишени блокады, например, PD1 и связанные с ним молекулы, предлагают бóльшие и отличающиеся возможности для усиления противоопухолевого иммунитета в клинических условиях.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[0007] В настоящем изобретении предложены антигенсвязывающие полипептиды, которые связывают PD-L1 (или, взаимозаменяемо, «анти-PD-L1 полипептид(ы)», «PD-L1-связывающие полипептиды»), предпочтительно PD-L1 человека; полипептид имеет одну или обе из следующих характеристик: (a) связывается с PD-L1 и ингибирует его способность взаимодействовать с PD1; и (b) имеет изотип или константную область, который/которая может запускать АЗКЦ и/или КЗЦ. Итоговое антитело может убивать опухолевые клетки двумя синергетическими путями - за счет дерепрессии Т-клеток и прямой цитотоксичности. Полипептиды по настоящему изобретению могут применяться для лечения опухолей отдельно либо в комбинации с: (a) антителами, нацеленными на другие иммуносупрессивные пути; (b) химиотерапией или радиационной терапией; (c) другими механизмами блокирования иммуносупрессивных путей, например, аптамерами или РНК-интерференцией; или (d) другими иммунотерапевтическими агентами, например, цитокинами, нацеленной терапией, и т.д.

[0008] Согласно одному аспекту настоящего изобретения предложен антигенсвязывающий полипептид, например, антитело, его фрагмент, производное или аналог, который относится к изотипу IgG1 и связывается с эпитопом PD-L1, предпочтительно с аффинностью связывания, равной по меньшей мере 10^-6M, и имеющий последовательность вариабельного домена тяжелой цепи «состоящую по существу из» последовательностей аминокислот, выбранным из группы, состоящей из SEQ ID NO:2, SEQ ID NO:6, SEQ ID NO:10, SEQ ID NO:14, SEQ ID NO:18, SEQ ID NO:22, SEQ ID NO:26, SEQ ID NO:30, SEQ ID NO:34, SEQ ID NO:38, SEQ ID NO:42, SEQ ID NO:46, SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:54, SEQ ID NO:58, SEQ ID NO:62, SEQ ID NO:66, SEQ ID NO:70, SEQ ID NO:74, SEQ ID NO:78, SEQ ID NO:82, SEQ ID NO:86, SEQ ID NO:90, SEQ ID NO:94, SEQ ID NO:98, SEQ ID NO:102, SEQ ID NO:106 и их комбинаций, что означает, в настоящем документе, последовательность по меньшей мере на 80%, или, более предпочтительно, на 85%, 90%, 95% или даже 100% идентичную указанным последовательностям аминокислот; и последовательность вариабельного домена легкой цепи, состоящую по существу из последовательностей, то есть по меньшей мере на 80%, или, более предпочтительно, 85%, 90%, 95% или даже 100% идентичную последовательностям аминокислот, выбранным из группы, состоящей из SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:8, SEQ ID NO:12, SEQ ID NO:16, SEQ ID NO:20, SEQ ID NO:24, SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:32, SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:40, SEQ ID NO:44, SEQ ID NO:48, SEQ ID NO:52, SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:60, SEQ ID NO:64, SEQ ID NO:68, SEQ ID NO:72, SEQ ID NO: 76, SEQ ID NO:80, SEQ ID NO:84, SEQ ID NO:88, SEQ ID NO:92, SEQ ID NO:96, SEQ ID NO:100, SEQ ID NO:104, SEQ ID NO:108, и их комбинаций.

[0009] В предпочтительных вариантах осуществления антигенсвязывающие полипептид или антигенсвязывающее антитело по настоящему изобретению включает пару вариабельной области тяжелой цепи и вариабельной области легкой цепи, причем их соответствующие последовательности по существу состоят из следующих пар: (a) SEQ ID NO:18 и SEQ ID NO:20; (b) SEQ ID NO:42 и SEQ ID NO:44; или (c) SEQ ID NO:34 и SEQ ID NO:36.

[00010] В других предпочтительных вариантах осуществления антигенсвязывающий полипептид или антигенсвязывающее антитело по настоящему изобретению включает пару вариабельной области тяжелой цепи и вариабельной области легкой цепи, причем их соответствующие последовательности по существу состоят из следующих пар: (a) SEQ ID NO:22 и SEQ ID NO:24; (b) SEQ ID NO:2 и SEQ ID NO:4; (c) SEQ ID NO:62 и SEQ ID NO:64; или (d) SEQ ID NO:82 и SEQ ID NO:84.

[00011] В других предпочтительных вариантах осуществления антигенсвязывающий полипептид или антигенсвязывающее антитело по настоящему изобретению включает пару вариабельной области тяжелой цепи и вариабельной области легкой цепи, причем их соответствующие последовательности по существу состоят из следующих пар: (a) SEQ ID NO:70 и SEQ ID NO:72; (b) SEQ ID NO:50 и SEQ ID NO:52; (c) SEQ ID NO:102 и SEQ ID NO:104; или (d) SEQ ID NO:30 и SEQ ID NO:32.

[00012] В других предпочтительных вариантах осуществления антигенсвязывающий полипептид или антигенсвязывающее антитело по настоящему изобретению включает пару вариабельной области тяжелой цепи и вариабельной области легкой цепи, причем их соответствующие последовательности по существу состоят из следующих пар: (a) SEQ ID NO:6 и SEQ ID NO:8; (b) SEQ ID NO:10 и SEQ ID NO:12; (c) SEQ ID NO:14 и SEQ ID NO:16; (d) SEQ ID NO:26 и SEQ ID NO:28; (e) SEQ ID NO:38 и SEQ ID NO:40; (f) SEQ ID NO:46 и SEQ ID NO:48; (g) SEQ ID NO:54 и SEQ ID NO:56; или (h) SEQ ID NO:58 и SEQ ID NO:60.

[00013] В других предпочтительных вариантах осуществления антигенсвязывающий полипептид или антигенсвязывающее антитело по настоящему изобретению включает пару вариабельной области тяжелой цепи и вариабельной области легкой цепи, причем их соответствующие последовательности по существу состоят из следующих пар: (a) SEQ ID NO:66 и SEQ ID NO:68; (b) SEQ ID NO:74 и SEQ ID NO:76; (c) SEQ ID NO:78 и SEQ ID NO:80; (d) SEQ ID NO:86 и SEQ ID NO:88; (e) SEQ ID NO:90 и SEQ ID NO:92; (f) SEQ ID NO:94 и SEQ ID NO:96; (g) SEQ ID NO:98 и SEQ ID NO:100; или (h) SEQ ID NO:106 и SEQ ID NO:108.

[00014] Предпочтительно указанный антигенсвязывающий полипептид является полностью человеческим или иным образом гуманизированным. В предпочтительном варианте осуществления указанный антигенсвязывающий полипептид дополнительно содержит константную область человека. Согласно одному признаку указанной константной областью человека является IgG1. В некотором варианте осуществления антитело по настоящему изобретению дополнительно включает вторую пару вариабельных областей тяжелой и легкой цепей, которая, например, по существу идентична первой паре.

[00015] В предпочтительном варианте связывание анти-PD-L1 полипептида с PD-L1 блокирует взаимодействие PD-L1 с PD1. Это может быть связано либо с тем, что эпитоп для связывания с PD-L1 расположен в интерфейсе или рядом с интерфейсом взаимодействия PD1, либо с аллостерическим изменением конформации интерфейса взаимодействия PD1.

[00016] Согласно другому аспекту настоящего изобретения предложены молекулы нуклеиновой кислоты, которые кодируют вышеупомянутые полипептиды. Молекула нуклеиновой кислоты может быть молекулой ДНК или РНК. В предпочтительных вариантах осуществления молекула нуклеиновой кислоты является молекулой ДНК, кодирующей вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи антигенсвязывающих полипептида или антитела по настоящему изобретению, где последовательности ДНК состоят по существу, соответственно, из следующих пар: (a) SEQ ID NO:17 и SEQ ID NO:19; (b) SEQ ID NO:33 и SEQ ID NO:35; (c) SEQ ID NO:41 и SEQ ID NO:43.

[00017] В других предпочтительных вариантах осуществления молекула нуклеиновой кислоты является молекулой ДНК, кодирующей вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи антигенсвязывающих полипептида или антитела по настоящему изобретению, где последовательности ДНК состоят по существу, соответственно, из следующих пар (a) SEQ ID NO:21 и SEQ ID NO:23; (b) SEQ ID NO:1 и SEQ ID NO:3; (c) SEQ ID NO:61 и SEQ ID NO:63; или (d) SEQ ID NO:81 и SEQ ID NO:83.

[00018] В других предпочтительных вариантах осуществления молекула нуклеиновой кислоты является молекулой ДНК, кодирующей вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи антигенсвязывающих полипептида или антитела по настоящему изобретению, где последовательности ДНК состоят по существу, соответственно, из следующих пар: (a) SEQ ID NO:69 и SEQ ID NO:71; (b) SEQ ID NO:49 и SEQ ID NO:51; (c) SEQ ID NO:101 и SEQ ID NO:103; или (d) SEQ ID NO:29 и SEQ ID NO:31.

[00019] В других предпочтительных вариантах осуществления молекула нуклеиновой кислоты является молекулой ДНК, кодирующей вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи антигенсвязывающих полипептида или антитела по настоящему изобретению, где последовательности ДНК состоят по существу, соответственно, из следующих пар: (a) SEQ ID NO:5 и SEQ ID NO:7; (b) SEQ ID NO:9 и SEQ ID NO:11; (c) SEQ ID NO:13 и SEQ ID NO:15; (d) SEQ ID NO:25 и SEQ ID NO:27; (e) SEQ ID NO:37 и SEQ ID NO:39; (f) SEQ ID NO:45 и SEQ ID NO:47; (g) SEQ ID NO:53 и SEQ ID NO:55; или (h) SEQ ID NO:57 и SEQ ID NO:59.

[00020] В других предпочтительных вариантах осуществления молекула нуклеиновой кислоты является молекулой ДНК, кодирующей вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи антигенсвязывающих полипептида или антитела по настоящему изобретению, где последовательности ДНК состоят по существу, соответственно, из следующих пар: (a) SEQ ID NO:65 и SEQ ID NO:67; (b) SEQ ID NO:73 и SEQ ID NO:75; (c) SEQ ID NO:77 и SEQ ID NO:79; (d) SEQ ID NO:85 и SEQ ID NO:87; (e) SEQ ID NO:89 и SEQ ID NO:91; (f) SEQ ID NO:93 и SEQ ID NO:95; (g) SEQ ID NO:97 и SEQ ID NO:99; или (h) SEQ ID NO:105 и SEQ ID NO:107.

[00021] Согласно другому аспекту настоящего изобретения предложена фармацевтическая композиция, включающая антигенсвязывающий полипептид, например, анти-PD-L1 антитело, его фрагмент, производное или аналог согласно описанию в настоящем документе. Фармацевтическая композиция дополнительно включает фармацевтически приемлемые вспомогательное вещество, носитель или разбавитель.

[00022] Согласно сходному аспекту настоящего изобретения предложен способ терапевтического лечения субъекта, нуждающегося в этом, от патологического состояния, включающий введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества анти-PD-L1 полипептида или антитела, раскрытых в данном документе. Указанный способ может дополнительно включать этап введения второго, другого терапевтического антитела против по меньшей мере одного антигена клеточной поверхности, свидетельствующего об указанном состоянии. Состояние, которое лечат, может быть раком млекопитающих, инфекцией и т. п. В различных вариантах осуществления указанный анти-PD-L1 полипептид может быть антителом, фрагментом антитела, производным антитела или аналогом антитела.

[00023] Предпочтительно, спектр подлежащих лечению видов рака млекопитающих выбран из группы, состоящей из: рака яичников, рака толстого кишечника, рака молочной железы, рака легких, миелом, опухолей ЦНС нейробластного происхождения, моноцитарных лейкозов, B-клеточных лейкозов, Т-клеточных лейкозов, B-клеточных лимфом, Т-клеточных лимфом, опухолей, происходящих из тучных клеток, меланомы, рака мочевого пузыря, рака желудка, рака печени, уротелиальной карциномы, кожной карциномы, рака почек, рака головы и шеи, рака поджелудочной железы и их комбинаций. В более широком смысле предусмотрено, что любые виды рака, при которых по меньшей мере значительная часть опухолевых клеток экспрессирует детектируемое количество PD-L1, являются мишенью для лечения композицией по настоящему изобретению.

[00024] Согласно еще одному аспекту настоящего изобретения предложен способ профилактического лечения нуждающегося в этом субъекта при аналогичных состояниях, включающий введение указанному субъекту профилактически эффективного количества фармацевтической композиции по настоящему изобретению. Указанный способ может дополнительно включать этап введения вакцины против указанного состояния. В одном из вариантов осуществления указанное состояние представляет собой рак.

[00025] Согласно дополнительному аспекту настоящего изобретения предложена экспрессионная система млекопитающих, продуцирующая антигенсвязывающий полипептид, например, антитело, его фрагмент, производное или аналог, который связывается с эпитопом PD-L1 согласно описанию в настоящем документе.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ

[00026] На фиг. 1 схематически изображен скрининг на антигенсвязывающие полипептиды с использованием технологий твердофазного фагового пэннинга, в частности, с применением непрямого покрытия тестируемыми белками пробирок для иммуносорбции, согласно варианту осуществления настоящего изобретения.

[00027] На фиг. 2 схематически изображен скрининг антигенсвязывающих полипептидов с использованием технологий твердофазного фагового пэннинга, в частности, с применением прямого покрытия тестируемыми белками пробирок для иммуносорбции, согласно варианту осуществления настоящего изобретения.

[00028] Фиг. 3 представляет собой таблицу данных, которые характеризуют способность связывать hPDL1 репрезентативных одноцепочечных вариабельных фрагментов (scfv), полученных во варианте осуществления настоящего изобретения в непрямом анализе связывания ИФА ELISA. «ОК» означает отрицательный контроль.

[00029] Фиг. 4 представляет собой таблицу данных, которые характеризуют способность связывать hPDL1 репрезентативных одноцепочечных вариабельных фрагментов (scfv), полученных во варианте осуществления настоящего изобретения в FACS-анализе связывания. «ПК» означает положительный контроль с применением окрашенных APC-конъюгированным антителом против hPDL1 клеток hPDL1/293T (10 мкг/мл). «ОК» означает отрицательный контроль с неокрашенными клетками hPDL1/293T.

[00030] Фиг. 5 представляет собой таблицу данных, которые характеризуют способность блокировать взаимодействие между hPD1 и hPDL1 различных одноцепочечных вариабельных фрагментов (scfv), полученных во варианте осуществления настоящего изобретения в анализе блокирования рецепторов (планшеты, покрытые hPDL1). «ПК» означает положительный контроль с добавленным биотин-hPD1-Fc. «ОК» означает отрицательный контроль, в который добавляли только буфер.

[00031] Фиг. 6 представляет собой таблицу данных, которые характеризуют способность блокировать взаимодействие между hPD1 и hPDL1различных одноцепочечных вариабельных фрагментов (scfv), полученных во варианте осуществления настоящего изобретения в анализе блокирования рецепторов (планшеты, покрытые hPD1). «ПК» означает положительный контроль с добавленным биотин-hPDL1-Fc. «ОК» означает отрицательный контроль, в который добавляли только буфер.

[00032] Фиг. 7 иллюстрирует способность одноцепочечных вариабельных фрагментов (scfv), полученных во варианте осуществления настоящего изобретения в прямых ИФА ELISA, связывать hPDL1-Fc, mPDL1-Fc (PDL1 мыши) и hIgG1.

[00033] На фиг. 8A и 8B показано полноразмерное антитело 4-1E8, охарактеризованное с помощью ДСН-ПААГ (фиг. 8A) и эксклюзионной хроматографии (фиг. 8B).

[00034] На фиг. 9A и 9B показано полноразмерное антитело 3-1B11, охарактеризованное с помощью ДСН-ПААГ (фиг. 9A) и эксклюзионной хроматографии (фиг. 9B).

[00035] На фиг. 10A и 10B показано полноразмерное антитело 3-1E4, охарактеризованное с помощью ДСН-ПААГ (фиг. 10A) и эксклюзионной хроматографии (фиг. 10B).

[00036] На фиг. 11B и 11C показаны результаты количественного анализа связывания некоторых вариантов осуществления полноразмерного антитела по настоящему изобретению с hPDL1 в формате ИФА ELISA согласно фиг. 11A.

[00037] На фиг. 12A и 12B показаны результаты количественного FACS для некоторых вариантов осуществления полноразмерного антитела по настоящему изобретению, где происходит связывание с hPDL1-экспрессирующими клетками 293T (верхний график), и hPDL1-отрицательными клетками 293T (нижний график).

[00038] На фиг. 13B показаны результаты анализа блокирования рецепторов для наилучших кандидатных антител по настоящему изобретению в формате RBA 1 (фиг. 13A): с покрытием hPDL1-Fc и с добавлением Биотин-hPD1-Fc.

[00039] На фиг. 14B показаны результаты анализа блокирования рецепторов для наилучших кандидатных антител по настоящему изобретению в формате RBA 2 (фиг. 14A): с покрытием hPD1-Fc и с добавлением Биотин-hPDL1-Fc.

[00040] Фиг. 15 представляет собой таблицу данных, которые характеризуют различные полноразмерные антитела, полученные во варианте осуществления настоящего изобретения.

[00041] На фиг. 16A-16D показана аффинность в отношении PD-L1 лучших кандидатных антител при использовании BIAcore: на фиг. 16A схематично представлен формат BIAcore, используемый согласно примеру настоящего изобретения; на фиг. 16B перечислены результаты тестирования аффинности в отношении PD-L1 лучших кандидатных антител с использованием BIAcore; на фиг. 16C приведена кривая отклика антитела с кодовым названием 4-1E8 при тестировании аффинности BIAcore; и на фиг. 16D изображена кривая отклика антитела с кодовым названием 3-1B11 при тестировании аффинности BIAcore.

[00042] На фиг. 17A схематически изображен формат биннинга эпитопов, используемого в соответствии с примером настоящего изобретения. На фиг. 17B схематически изображены группы («бины») эпитопов для лучших кандидатных антител согласно варианту осуществления настоящего изобретения. На фиг. 17C перечислена матрица биннинга эпитопов для лучших кандидатных антител с применением формата, представленного на фиг. 17A.

[00043] На фиг. 18A-18D показана способность к связыванию: контролей (фиг. 18A), антител по настоящему изобретению с кодовыми названиями «4-1E8» (фиг. 18B), «3-1E4» (фиг. 18C) и «3-1B11» (фиг. 18D) с клетками 293T, трансфицированными экспрессирующей PDL1-GFP резуса конструкцией (наверху), и исходными клетками 293T (внизу) в FACS-анализах.

[00044] На фиг. 19A-19D показана способность к связыванию: контролей (фиг. 19A), антител по настоящему изобретению с кодовыми названиями «4-1E8» (фиг. 19B), «3-1E4» (фиг. 19C) и «3-1B11» (фиг. 19D) с клетками 293T, трансфицированными экспрессирующей PDL1 резуса конструкцией (наверху), и исходными клетками 293T (внизу) в FACS-анализах.

[00045] На фиг. 20 приведены репрезентативные данные EC50 для эксперимента с продуцированием ИЛ-2 согласно вариантам осуществления изобретения.

[00046] На фиг. 21 показана АЗКЦ-активность варианта осуществления полипептида с кодовым названием «4-1E8» в сравнении с коммерчески доступным антителом против PDL1 атезолизумабом.

[00047] На фиг. 22A-22C показана АЗКЦ-активность варианта осуществления полипептида с кодовым названием «4-1E8» в сравнении с вариантами осуществления с кодовыми названиями «3-1B11» (фиг. 22A) и «3-1E4» (фиг. 22B); в таблице обобщены основные точки данных (фиг. 22C).

[00048] На фиг. 23A, 23B и 23C представлены три группы экспериментальных данных по способности продуцировать ИЛ-2 для мононуклеарных клеток периферической крови (МКПК), совместно культивируемых с опухолевыми PDL1+ клетками MDA-MB-231, в присутствии наилучших антител по настоящему изобретению, в сравнении с коммерчески доступными антителами против PDL1.

[00049] На фиг. 24 представлены результаты анализа способности продуцировать ИФН-γ у CD8 Т-клеток, совместно культивируемых с опухолевыми клетками PDL1+ MDA-MB-231, в присутствии наилучших антител по настоящему изобретению, в сравнении с коммерчески доступными антителами против PDL1.

[00050] На фиг. 25A и 25B показаны результаты реакции смешанной культуры лимфоцитов для наилучших антител в соответствии с вариантами осуществления изобретения.

[00051] На фиг. 26A и 26B показана специфичность связывания антителами по настоящему изобретению с кодовыми названиями «4-1E8» (фиг. 26A) и «3-1B11» (фиг. 26B).

[00052] На фиг. 27A и 27B показана способность антител по настоящему изобретению E8 (фиг. 27A) и B11 (фиг. 27B) блокировать связывание CD80 с клетками, экспрессирующими PD-L1 (кривые, область под которыми закрашена серым цветом), в сравнении с CD80 по отдельности (сплошная линия) и вторичным антителом по отдельности (пунктирная линия).

[00053] На фиг. 28 показано измерение времени полужизни варианта осуществления антитела с применением мышей Tg32.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[00054] Если не указано иное, технические термины используются в соответствии с общепринятыми значениями.

[00055] В настоящем описании термины в единственном числе могут означать один или более. При использовании в настоящем описании термины в единственном числе вместе со словом «содержащий» могут означать один или более. Используемый в настоящем описании термин «другой» может означать второй или более. Более того, если иное не требуется по контексту, термины в единственном числе включают термины во множественном числе, а термины во множественном числе включают термины в единственном числе.

[00056] В настоящем описании «приблизительно» относится к числовому значению, включая, например, целые числа, дроби и проценты, независимо от того, указаны они явным образом или нет. Термин «приблизительно», в целом, относится к диапазону числовых значений (например, +/-5-10% относительно приведенного значения), которые рядовой специалист в данной области техники счел бы эквивалентными приведенному значению (например, имеющим ту же функцию или результат). В некоторых случаях термин «приблизительно» может включать числовые значения, округленные до ближайшего значащего числа. Если не указано иное, «приблизительно» представляет собой +/-10% от приведенного значения (значений).

[00057] «Антигенсвязывающий полипептид» представляет собой полипептид, содержащий часть, которая связывается с антигеном. Примеры антигенсвязывающих полипептидов включают антитела, фрагменты (например, антигенсвязывающий участок антитела), производные и аналоги антител.

[00058] Антигенсвязывающий полипептид или белок может иметь, например, структуру встречающегося в природе антитела (также известного как «иммуноглобулин»). Каждое встречающееся в природе антитело состоит из двух идентичных пар полипептидных цепей, каждая пара имеет одну «легкую» (приблизительно 25 кДа) и одну «тяжелую» цепь (приблизительно 50-70 кДа). Вариабельные области каждой пары легкой/тяжелой цепи образуют сайт связывания антитела таким образом, что интактное антитело имеет два сайта связывания.

[00059] Вариабельные области встречающихся в природе цепей антител демонстрируют одинаковую общую структуру относительно консервативных каркасных областей (FR), соединенных тремя гипервариабельными областями, также называемыми областями, определяющими комплементарность, или CDR. От N-конца до C-конца как легкая, так и тяжелая цепи содержат домены FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3 и FR4. Назначение аминокислот каждому домену соответствует определениям Kabat et al. в источнике: Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5^th Ed., US Dept. of Health and Human Services, PHS, NIH, NIH Publication no. 91-3242, 1991. Другие системы нумерации аминокислот в цепях иммуноглобулинов включают IMGT (международная информационная система ImMunoGeneTics; Lefranc et al., Dev. Comp. Immunol. 29:185-203; 2005) и AHo (Honegger and Pluckthun, J. Mol. Biol. 309(3):657-670; 2001).

[00060] Антитела могут быть получены из таких источников, как сыворотка или плазма, которые содержат иммуноглобулины с различной антигенной специфичностью. Если такие антитела подвергают аффинной очистке, они могут быть обогащены определенной антигенной специфичностью. Такие обогащенные составы с антителами обычно состоят из менее чем приблизительно 10% антител, обладающих специфической связывающей активностью в отношении конкретного антигена. Подвергая эти составы нескольким этапам аффинной очистки, можно увеличить долю антитела, обладающего специфической связывающей активностью в отношении антигена. Антитела, полученные таким образом, часто называют «моноспецифическими». Препараты моноспецифических антител могут состоять из приблизительно 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 97%, 99% или 99,9% антитела, обладающего специфической связывающей активностью в отношении конкретного антигена.

[00061] Термин «антитело» или «Аb» (и их формы во множественном числе) в настоящем описании в широком смысле относится к любой молекуле иммуноглобулина (Ig), состоящей из четырех полипептидных цепей, двух тяжелых (H) цепей и двух легких (L), или к любым функциональным фрагменту (фрагментам), мутанту (мутантам), варианту (вариантам), производному (производным) или аналогу (аналогам), которые сохраняют существенные и специфические признаки связывания эпитопа молекулой Ig. Такие форматы фрагментов, мутантов, вариантов, производных или аналогов антител известны в данной области техники и включают, среди прочего, Fab, F(ab'), F(ab')₂, Fv, одноцепочечные антитела (scFv), однодоменные антитела (sdAb), фрагменты определяющей комплементарность области (CDR), химерные антитела, диатела, триатела, тетратела, и полипептиды, которые содержат по меньшей мере часть иммуноглобулина, достаточную для обеспечения специфического связывания антигена с полипептидом. Фрагменты, производные и аналоги антител могут быть получены методами рекомбинантной ДНК, или путем ферментативного или химического расщепления интактных антител.

[00062] Фрагмент Fab представляет собой моновалентный фрагмент, имеющий домены V_L, V_H, C_L и C_H1; фрагмент F(ab')₂ представляет собой бивалентный фрагмент, содержащий два фрагмента Fab, связанных дисульфидным мостиком в шарнирной области; фрагмент Fd имеет домены V_H и C_H1; фрагмент Fv имеет домены V_L и V_H одного плеча антитела; и фрагмент dAb имеет домены V_H, домен V_L, или антигенсвязывающий фрагмент домена V_H или V_L (см., например, патенты США № 6846634; 6696245, опубликованные заявки на патент США 20/0202512; 2004/0202995; 2004/0038291; 2004/0009507; 2003/0039958, и Ward et al., Nature 341:544-546, 1989).

[00063] Одноцепочечное антитело (scFv) представляет собой антитело, в котором области V_L и V_H соединены через линкер (например, синтетическую последовательность аминокислотных остатков) с образованием непрерывной белковой цепи, при этом линкер достаточно длинный, чтобы позволять белковой цепи сворачиваться и формировать моновалентный антигенсвязывающий сайт (см., например, Bird et al., 1988, Science 242:423-26 и Huston et al., 1988, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-83). Диатела представляют собой бивалентные антитела, содержащие две полипептидные цепи, где каждая полипептидная цепь включает домены V_H и V_L, соединенные линкером, слишком коротким, чтобы позволять спаривание между двумя доменами одной цепи, что позволяет каждому домену спариваться с комплементарным доменом другой полипептидной цепи (см., например, Holliger et al., 1993, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:6444-48, и Poljak et al., 1994, Structure 2:1121-23). Если две полипептидные цепи диатела идентичны, то диатело, полученное в результате их спаривания, будет иметь два идентичных антигенсвязывающих сайта. Полипептидные цепи, имеющие разные последовательности, можно применять для получения диатела с двумя разными антигенсвязывающими сайтами. Аналогичным образом, триатела и тетратела представляют собой антитела, содержащие три и четыре полипептидных цепи, соответственно, и образующие, соответственно, три и четыре антигенсвязывающих сайта, которые могут быть одинаковыми или разными.

[00064] Определяющие комплементарность области (CDRи) и каркасные участки (FR) данного антитела могут быть идентифицированы с использованием системы, описанной в источниках: Kabat et al. выше; Lefranc et al., выше, и/или Honegger and Pluckthun, выше. Одна или несколько CDR могут быть включены в молекулу ковалентным или нековалентным образом, превращая ее в антигенсвязывающий белок. Антигенсвязывающий полипептид может включать область или области CDR в качестве части большей полипептидной цепи, может ковалентно связывать область или области CDR с другой полипептидной цепью или может нековалентным образом включать область или области CDR. CDR позволяют антигенсвязывающему белку специфически связываться с конкретным представляющим интерес антигеном.

[00065] Антигенсвязывающий полипептид может иметь один или более сайтов связывания. Если существует более одного сайта связывания, то сайты связывания могут быть идентичны друг другу или могут быть разными. Например, встречающийся в природе иммуноглобулин человека обычно имеет два идентичных сайта связывания, тогда как «биспецифическое» или «бифункциональное» антитело имеет два разных сайта связывания.

[00066] В настоящем документе термин «антитело человека» или «гуманизированное антитело» включает все антитела, которые имеют одну или несколько вариабельных и константных областей, происходящих из последовательностей иммуноглобулина человека. Согласно одному варианту осуществления все вариабельные и константные домены происходят из последовательностей иммуноглобулина человека (полностью человеческое или гуманизированное антитело). Эти антитела могут быть получены различными способами, в том числе путем иммунизации представляющим интерес антигеном мыши, которая была генетически модифицирована для экспрессии антител, происходящих из генов, кодирующих тяжелую и/или легкую цепь человека. Гуманизированное антитело имеет последовательность, которая отличается от последовательности антитела, происходящего от не являющегося человеком вида, одной или несколькими заменами, делециями и/или добавлениями аминокислот, такими, чтобы гуманизированное антитело с меньшей вероятностью вызывало иммунный ответ и/или вызывало менее тяжелый иммунный ответ по сравнению с антителом не являющегося человеком вида при введении субъекту-человеку. Согласно одному варианту осуществления определенные аминокислоты в каркасных и константных доменах тяжелой и/или легкой цепей антитела не являющегося человеком вида мутированы с образованием гуманизированного антитела. Согласно другому варианту осуществления константный домен (домены) из человеческого антитела сливают с вариабельным(и) доменом (доменами) от не являющегося человеком вида. Согласно другому варианту осуществления один или несколько аминокислотных остатков в одной или нескольких последовательностях CDR антитела не являющегося человеком вида изменяют для снижения вероятной иммуногенности указанного антитела не являющегося человеком вида при его введении субъекту-человеку, причем измененные аминокислотные остатки либо не являются критическими для иммуноспецифического связывания антитела с его антигеном, либо внесенные в аминокислотную последовательность изменения являются консервативными изменениями, так что связывание гуманизированного антитела с антигеном не является значимо худшим, чем связывание антитела не являющегося человеком вида с антигеном. Примеры получения гуманизированных антител можно найти в патентах США № 6054297, 5886152 и 5877293.

[00067] В настоящем документе термин «химерное антитело» относится к антителу, которое содержит одну или более областей одного антитела и одну или более областей по меньшей мере другого антитела. Согласно одному варианту осуществления области CDR от более чем одного антитела против PD-L1 человека свободно комбинируют в различных сочетаниях в химерном антителе.

[00068] Активированные Т-клетки экспрессируют PD1 на клеточной поверхности. Связывание PD-L1 с PD1 активирует PD1 и подавляет PD1⁺ Т-клетки. Термин «нейтрализующее антитело» или «ингибирующее антитело» в настоящем документе относится к антителу, блокирующему активацию PD1, когда избыток антитела против PD-L1 снижает уровень указанной активации по меньшей мере приблизительно на 20% в анализе, описанном здесь в примерах. Согласно различным вариантам осуществления антигенсвязывающий белок снижает уровень активации PD1 по меньшей мере на 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 97%, 99% и 99,9%.

[00069] Фрагменты или аналоги антител могут быть легко получены специалистами в данной области техники при следовании принципам, описанным в настоящем документе и использовании методов, известных в данной области техники. Предпочтительные аминоконцы и карбоксильные концы фрагментов или аналогов расположены вблизи границ функциональных доменов. Структурные и функциональные домены могут быть идентифицированы путем сравнения данных нуклеотидных и/или аминокислотных последовательностей с общедоступными или проприетарными базами данных последовательностей. Компьютеризированные методы сравнения могут применяться для идентификации мотивов последовательностей или доменов предсказанной конформации белка, которые встречаются в других белках известной структуры и/или функции. Известны методы идентификации белковых последовательностей, которые укладываются в известную трехмерную структуру. См. Bowie et al., 1991, Science 253:164.

[00070] В настоящем документе антигенсвязывающие полипептид «специфически связывается» с антигеном (например, PD-L1 человека), если он связывается с антигеном со 100-наномолярной или меньшей константой диссоциации.

[00071] В настоящем документе «антигенсвязывающий домен», «антигенсвязывающая область» или «антигенсвязывающий сайт» представляет собой участок антигенсвязывающего белка, который содержит аминокислотные остатки (или другие фрагменты), которые взаимодействуют с антигеном и вносят вклад в специфичность антигенсвязывающего белка и аффинность к антигену. Чтобы антитело специфически связывалось со своим антигеном, оно должно включать по меньшей мере часть по меньшей мере одного из его доменов CDR.

[00072] В настоящем документе «эпитоп» представляет собой часть молекулы, которую связывает антигенсвязывающий белок (например, антитело). Эпитоп может содержать несмежные части молекулы (например, аминокислотные остатки в полипептиде, которые не являются смежными в первичной последовательности полипептида, но в условиях третичной и четвертичной структуры полипептида находятся достаточно близко друг к другу, чтобы быть связанными антигенсвязывающим белком).

[00073] В настоящем документе термины «полинуклеотид», «олигонуклеотид» и «нуклеиновая кислота» применяются взаимозаменяемо и включают молекулы ДНК (например, кДНК или геномной ДНК), молекулы РНК (например, мРНК), аналоги ДНК или РНК, созданные с применением аналогов нуклеотидов (например, пептидных нуклеиновых кислот и не встречающихся в природе аналогов нуклеотидов), и их гибриды. Молекула нуклеиновой кислоты может быть одноцепочечной или двуцепочечной. Согласно одному варианту осуществления молекулы нуклеиновой кислоты по настоящему изобретению содержат непрерывную открытую рамку считывания, кодирующую антитело или его фрагмент, производное, мутант или вариант.

[00074] «Вектор» в контексте настоящего документа означает нуклеиновую кислоту, которую можно применять для введения другой, связанной с ней нуклеиновой кислоты в клетку. Одним из типов вектора является «плазмида», представляющая собой линейную или кольцевую двуцепочечную молекулу ДНК, в которую могут быть лигированы дополнительные сегменты нуклеиновой кислоты. Другой тип вектора представляет собой вирусный вектор (например, дефектные по репликации ретровирусы, аденовирусы и аденоассоциированные вирусы), при этом дополнительные сегменты ДНК могут быть введены в вирусный геном. Определенные векторы способны к автономной репликации в клетке-хозяине, в которую они введены (например, бактериальные векторы, содержащие бактериальную точку начала репликации, и эписомные векторы млекопитающих). Другие векторы (например, неэписомные векторы млекопитающих) интегрируются в геном клетки-хозяина после введения в клетку-хозяина и, таким образом, реплицируются вместе с геномом хозяина. «Экспрессионный вектор» - это тип вектора, который может управлять экспрессией выбранного полинуклеотида.

[00075] В настоящем документе нуклеотидная последовательность является «функционально связанной» с регуляторной последовательностью, если регуляторная последовательность влияет на экспрессию (например, уровень, временную динамику или локализацию экспрессии) указанной нуклеотидной последовательности. «Регуляторная последовательность» представляет собой нуклеиновую кислоту, влияющую на экспрессию (например, уровень, временную динамику или локализацию экспрессии) нуклеиновой кислоты, с которой она функционально связана. Регуляторная последовательность может, например, оказывать на регулируемую нуклеиновую кислоту действие непосредственно или через действие одной или нескольких других молекул (например, полипептидов, которые связываются с регуляторной последовательностью и/или нуклеиновой кислотой). Примеры регуляторных последовательностей включают промоторы, энхансеры и другие элементы контроля экспрессии (например, сигналы полиаденилирования). Дополнительные примеры регуляторных последовательностей описаны, например, в источниках: Goeddel, 1990, Gene Expression Technology: Methods in Enzymology 185, Academic Press, San Diego, Calif. и Baron et al., 1995, Nucleic Acids Res. 23:3605-06.

[00076] Предпочтительно, широкий спектр видов рака млекопитающих, подлежащих лечению композициями по настоящему изобретению, выбран из группы, состоящей из: рака яичников, рака толстого кишечника, рака молочной железы, рака легких, миелом, опухолей ЦНС нейробластного происхождения, моноцитарных лейкозов, B-клеточных лейкозов, Т-клеточных лейкозов, B-клеточных лимфом, Т-клеточных лимфом, опухолей, происходящих из тучных клеток, меланомы, рака мочевого пузыря, рака желудка, рака печени, уротелиальной карциномы, кожной карциномы, рака почек, рака головы и шеи, рака поджелудочной железы и их комбинации. В более широком смысле, любой рак, при котором по меньшей мере часть опухолевых клеток экспрессирует заметное количество PD-L1, потенциально можно лечить композицией по настоящему изобретению.

[00077] Полипептиды согласно настоящему описанию могут быть получены с применением любых стандартных методов, известных в данной области техники. В одном примере указанные полипептиды получают методами рекомбинантной ДНК путем инсерции последовательности нуклеиновой кислоты (например, кДНК), кодирующей полипептид, в рекомбинантный экспрессионный вектор, и экспрессирования указанной последовательности ДНК в условиях, способствующих экспрессии.

[00078] Нуклеиновые кислоты, кодирующие любой из множества полипептидов, раскрытых в настоящем документе, могут быть синтезированы химическим путем. Использование кодонов может быть подобрано так, чтобы улучшать экспрессию в клетке. Такое применение кодонов будет зависеть от выбранного типа клетки. Специализированные схемы использования кодонов были разработаны для E. coli и других бактерий, а также для клеток млекопитающих, клеток растений, дрожжевых клеток и клеток насекомых. См., например: Mayfield et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2003 100(2):438-42; Sinclair et al. Protein Expr. Purif. 2002 (1):96-105; Connell N D. Curr. Opin. Biotechnol. 2001 12(5):446-9; Makrides et al. Microbiol. Rev. 1996 60(3):512-38; и Sharp et al. Yeast. 1991 7(7):657-78.

[00079] Общие методы манипуляции с нуклеиновыми кислотами описаны, например, в источниках: Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Vols. 1-3, Cold Spring Harbor Laboratory Press, 2 ed., 1989, или F. Ausubel et al., Current Protocols in Molecular Biology (Green Publishing и Wiley-Interscience: New York, 1987), с периодическими обновлениями, включенных в настоящий документ посредством ссылки. ДНК, кодирующая полипептид, функционально связана с подходящими регуляторными элементами транскрипции или трансляции, полученными из генов млекопитающих, вирусов или насекомых. Такие регуляторные элементы включают транскрипционный промотор, необязательную последовательность оператора для контроля транскрипции, последовательность, кодирующую подходящие сайты связывания рибосомы с мРНК, и последовательности, которые контролируют терминацию транскрипции и трансляции. Дополнительно включают способность к репликации в хозяине, обычно обеспечиваемую точкой начала репликации, и селективный ген для облегчения распознавания трансформантов.

[00080] Рекомбинантная ДНК по настоящему изобретению может также включать любой тип последовательности белковой метки, которая может быть полезна для очистки белка. Примеры белковых меток включают, не ограничиваясь перечисленными, гистидиновую метку, метку FLAG, метку myc, HA-метку или GST-метку. Описание подходящих клонирующих и экспрессионных векторов для применения с бактериальными, грибными, дрожжевыми клетками-хозяевами и клетками-хозяевами млекопитающих можно найти в источнике: Cloning Vectors: A Laboratory Manual, (Elsevier, N. Y., 1985).

[00081] Экспрессионную конструкцию по настоящему изобретению вводят в клетку-хозяина с применением способа, подходящего указанной для клетки-хозяина. В данной области техники известны различные способы введения нуклеиновых кислот в клетки-хозяева, включающие, не ограничиваясь перечисленными: электропорацию; трансфекцию с использованием хлорида кальция, хлорида рубидия, фосфата кальция, DEAE-декстрана или других веществ; бомбардировку микрочастицами; липофекцию; и инфекцию (где вектор является инфекционным агентом). Подходящие клетки-хозяева включают клетки прокариот, дрожжей, млекопитающих, или бактериальные клетки.

[00082] Описанные в настоящем документе белки также могут быть получены с применением систем клеточной трансляции. Для таких целей нуклеиновые кислоты, кодирующие полипептид, должны быть модифицированы, чтобы позволять транскрипцию in vitro для продуцирования мРНК, и позволять бесклеточную трансляцию мРНК в конкретной используемой бесклеточной системе, эукариотической, такой как бесклеточная система трансляции млекопитающих или дрожжей, или прокариотической, такой как бесклеточная система трансляции бактерий.

[00083] PD-L1-связывающие полипептиды также могут быть получены химическим синтезом (например, способами, описанными в источнике: Solid Phase Peptide Synthesis, 2nd ed., 1984, The Pierce Chemical Co., Rockford, Ill.). Модификации в белке также могут быть получены путем химического синтеза.

[00084] Полипептиды по настоящему изобретению могут быть очищены методами выделения/очистки белков, широко известными в области химии белков. Неограничивающие примеры включают экстракцию, перекристаллизацию, высаливание (например, с сульфатом аммония или сульфатом натрия), центрифугирование, диализ, ультрафильтрацию, адсорбционную хроматографию, ионообменную хроматографию, гидрофобную хроматографию, нормально-фазовую хроматографию, обращенно-фазовую хроматографию, гель-фильтрацию, эксклюзионную хроматографию, аффинную хроматографию, электрофорез, противоточное распределение или любые их комбинации. После очистки буфер полипептидов может быть заменен на другие буферы и/или полипептиды могут быть сконцентрированы любым из множества способов, известных в данной области техники, включая, но не ограничиваясь указанными, фильтрацию и диализ.

[00085] Очищенный полипептид предпочтительно имеет чистоту по меньшей мере 85%, более предпочтительно по меньшей мере 90% или 95%, и наиболее предпочтительно по меньшей мере 98%. Независимо от точного числового значения чистоты, полипептид очищен достаточно для применения в качестве фармацевтического продукта.

Посттрансляционные модификации полипептидов

[00086] Согласно определенному варианту осуществления связывающие полипептиды изобретения могут дополнительно содержать посттрансляционные модификации. Примеры посттрансляционных модификаций белков включают фосфорилирование, ацетилирование, метилирование, АДФ-рибозилирование, убиквитинирование, гликозилирование, карбонилирование, сумоилирование, биотинилирование, или добавление боковой цепи полипептида, или гидрофобной группы. В результате модифицированные растворимые полипептиды могут содержать неаминокислотные элементы, такие как липиды, поли- или моносахариды и фосфаты. Предпочтительной формой гликозилирования является сиалирование, при котором один или более фрагментов сиаловой кислоты конъюгируют с полипептидом. Фрагменты сиаловой кислоты улучшают растворимость и увеличивают период полужизни в сыворотке, а также снижают возможную иммуногенность белка. См. Raju et al. Biochemistry. 2001 31; 40(30):8868-76. Действие таких неаминокислотных элементов на функциональность полипептида может быть протестировано применительно к его антагонизирующей роли в отношении функции PD-L1 или PD-1, например, его ингибирующего действия на ангиогенез или рост опухоли.

[00087] Согласно одному варианту осуществления модифицированные формы рассматриваемых полипептидов включают связывание рассматриваемых растворимых полипептидов с небелковыми полимерами. В одном конкретном варианте осуществления указанный полимер представляет собой полиэтиленгликоль («ПЭГ»), полипропиленгликоль или полиоксиалкилены, как изложено в патентах США №4640835; №4496689; №4301144; №4670417; №4791192 или №4179337.

[00088] Согласно одному признаку пегилированные варианты связывающих полипептидов по настоящему изобретению предпочтительно сохраняют по меньшей мере 25%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95% или 100% биологической активности, ассоциированной с немодифицированным белком. Согласно одному варианту осуществления биологическая активность относится к способности связываться с PD-L1, которую оценивают по скоростям KD, k_on или k_off. Согласно одному конкретному варианту осуществления пегилированный связывающий полипептид белок демонстрирует увеличение связывания с PD-L1 человека по сравнению с непегилированным аналогом. Согласно другому варианту осуществления биологическая активность относится к блокаде взаимодействия PD-L1/PD1.

Терапевтические средства, вакцины и введение

[00089] Настоящее изобретение также относится к способам лечения состояний или предотвращения предварительных состояний, которые откликаются на ингибирование биологической активности PD-L1. Предпочтительными примерами являются состояния, которые характеризуются клеточной гиперпролиферацией и длительной инфекцией. Методы и дозировки для введения варьируют в зависимости от типа конкретного полипептида и конкретного состояния, которое лечат. Поскольку регулирующие органы требуют, чтобы белковый реагент, используемый в качестве терапевтического средства, был представлен в составе с приемлемо низкими уровнями пирогенов, терапевтические составы по настоящему изобретению можно отличить от других составов по тому, что они по существу не содержат пирогенов или по меньшей мере содержат не более чем приемлемые уровни пирогенов, определенные соответствующим регулирующим органом (например, FDA в США).

[00090] Фармацевтические композиции по настоящему изобретению могут включать по меньшей мере один фармацевтически приемлемый разбавитель, носитель или вспомогательное вещество. Вспомогательные вещества, включенные в композиции, имеют разное назначение в зависимости, например, от типа используемой генной конструкции или эффекторных клеток, и от способа введения. Примеры широко используемых носителей включают, без ограничения: физиологический раствор, забуференный физиологический раствор, декстрозу, воду для инъекций, глицерин, этанол и их комбинации, стабилизирующие агенты, солюбилизирующие агенты и поверхностно-активные вещества, буферы и консерванты, агенты для регуляции тоничности, объемообразующие агенты и смазывающие агенты.

[00091] Согласно другому варианту осуществления изобретения фармацевтическую композицию по изобретению вводят пациенту. Примеры способов введения включают, не ограничиваясь указанным, внутривенную инъекцию. Другие способы включают, без ограничения, внутриопухолевый, внутрикожный, подкожный (п/к, п.к., sub-Q, Hypo), внутримышечный (в/м), внутрибрюшинный (в/б), внутриартериальный, внутрикостный, внутрисердечный, внутрисуставный (в сустав), внутрисуставной (в область синовиальной жидкости), внутричерепной, внутрипозвоночный и интратекальный (в спинномозговую жидкость). Любое известное устройство, пригодное для парентеральной инъекции или инфузии составов, может быть использовано для осуществления такого введения. В настоящем документе термины «лечить» и «лечение» имеют обычные и общепринятые значения, и включают одно или более из: блокирования, улучшения или уменьшения тяжести и/или частоты симптома заболевания (например, рака) у субъекта, и/или ингибирования роста, деления, распространения или пролиферации раковых клеток, или прогрессирования рака (например, появления новых опухолей) у субъекта. Лечение означает блокирование, улучшение, уменьшение или ингибирование приблизительно на 5-100% по сравнению с субъектом, у которого не применяли на практике способы по настоящему изобретению. Предпочтительно, блокирование, улучшение, уменьшение или ингибирование составляет приблизительно 100%, 99%, 95%, 90%, 80%, 70%, 60%, 50%, 40%, 30%, 20%, 10% или 5% по сравнению с субъектом, у которого не применяли на практике способы по настоящему изобретению.

[00092] Согласно настоящему изобретению предложен набор, включающий один или более контейнеров, заполненных некоторым количеством генных конструкций, кодирующих полипептиды по настоящему изобретению, с фармацевтически приемлемыми вспомогательными веществами. В набор также может быть включена инструкция по применению. Кроме того, с набором может быть предоставлено уведомление в форме, предписанной государственным органом, регулирующим производство, применение или продажу фармацевтических или биологических продуктов, отражающее одобрение указанным органом производства, применения или продажи для введения человеку.

ПРИМЕРЫ

[00093] Скрининг антигенсвязывающего полипептида с использованием методов фагового дисплея:

[00094] Непрямое покрытие: Фиг. 1 - PDL1-связывающие одноцепочечные вариабельные фрагменты (scFv) идентифицировали стандартным методом фагового дисплея. Наивные библиотеки scFv человека получали путем реконструкции на основе ПЦР из В-клеток от 50 здоровых доноров. Твердофазный пэннинг в пробирках для иммуносорбции проводили с применением слитого белка hPDL1-Fc и нерелевантного слитого с Fc белка, непрямо иммобилизованных в пробирке для иммуносорбции, покрытой антителом IgG к Fc человека. Чтобы отсортировать белки с сильным связыванием, сначала истощали Fc-связывающие scFv с использованием нерелевантных слитых с Fc белков, а затем несвязанные фаги отбирали для связывания со слитым белком hPDL1-Fc. Элюированные фаги амплифицировали в бактериях. Эти этапы повторяли 3-4 раза; титры фагов и вариабельность определяли после второго этапа и далее. После того, как была замечена конвергенция в последовательности (этапы 3 и 4), отдельные клоны фага были протестированы на способность связывать hPDL1 в ИФА ELISA.

[00095] Прямое покрытие: Проводили путем прямого нанесения Fc белков на пробирку для иммуносорбции без применения антитела против Fc человека (фиг. 2).

[00096] ИФА ELISA со связыванием фага:

[00097] ИФА ELISA выполняли с применением той же стратегии, что и для пэннинга. Для клонов, полученных при непрямом пэннинге, планшеты сначала покрывали антителом против Fc человека, а затем белком Fc. Для клонов, полученных в результате прямого пэннинга, планшеты непосредственно покрывали белком Fc. В непрямых ИФА ELISA фаги тестировали на способность связывать hPDL1-Fc и нерелевантный белок Fc (или hIgG1) в параллельных анализах. Фаги, которые показали незначительное связывание с нерелевантным белком Fc и высокое связывание с hPDL1, отбирали для дальнейшего секвенирования и вторичного скрининга. Данные представлены на фиг. 3. Неспецифическое связывание большинства клонов незначительно (величина сигнала для белка Fc (разведение 1:10) составляет менее 0,2). В прямых ИФА ELISA фаги тестировали на способность связывать hPDL1-Fc, mPDL1-Fc (PDL1 мыши) и hIgG1 в параллельных анализах. Фаги продемонстрировали отсутствие значимого связывания с PDL1 мыши ни одной из наилучших молекул согласно настоящему изобретению, а именно, ни одна из наилучших молекул не демонстрировала значимой перекрестной реактивности с PDL1 мыши. Данные представлены на фиг. 7.

[00098] Секвенирование:

[00099] Уникальные клоны идентифицировали, секвенируя сначала область CDR3 тяжелой цепи. Позже эти результаты подтверждали при секвенировании полной последовательности. Небольшая подгруппа клонов содержала одинаковые CDR3, но имела значимые расхождения в других частях их последовательностей.

[000100] Вторичный скрининг с помощью FACS:

[000101] Фаги, лизаты фагов или лизаты бактерий, экспрессирующих scFv, тестировали на способность преимущественно связываться с клетками 293T, которые экспрессируют hPDL1, но не с исходными клетками 293T. Отношение средней интенсивности флуоресценции (MFI) использовали в качестве основы для идентификации положительных клонов. Данные представлены на фиг. 4. Большинство клонов показало высокое отношение, что можно идентифицировать как положительные клоны.

[000102] Идентификация блокаторов:

[000103] Фаги, лизаты фагов или лизаты бактерий, экспрессирующих scFv, тестировали на способность блокировать взаимодействие между hPD1 и hPDL1. Анализы связывания проводили путем нанесения на планшеты hPD1-Fc или hPDL1-Fc. Связывание биотинилированного лиганда (hPDL1 или hPD1) детектировали с применением стрептавидина-HRP стандартными методами. Потерю связывания в присутствии scFv использовали для идентификации потенциальных блокаторов. Результаты представлены на фиг. 5 и 6.

[000104] Получение и характеризация слитых с Fc белков:

[000105] Поскольку scFv относительно нестабильны, некоторые scFv преобразовали в слитые Fc и экспрессировали в клетках млекопитающих. Их очищали на колонках с белком A и тестировали на способность блокировать взаимодействие PD1-PDL1, а также на способность связывать клетки 293T, экспрессирующие PDL1.

[000106] Получение полноразмерных антител:

[000107] Гены полноразмерного антитела конструировали с помощью ПЦР-амплификации областей VH и VL из индивидуальных клонов scFv и клонировали в соответствующие экспрессионные векторы с применением стандартных методов, известных специалистам в данной области техники. Белки полноразмерных антител получали путем временной трансфекции клеток 293T, выращенных в суспензии, и очищали на колонке с белком A стандартными методами, известными специалистам в данной области техники.

[000108] Характеризация полноразмерных антител:

[000109] Примеры полноразмерных антител были охарактеризованы с помощью ДСН-ПААГ и эксклюзионной хроматографии (результаты представлены на фиг. 8A, 8B, 9A, 9B, 10A и 10B), а также количественной оценки их активности при (a) специфическом связывании hPDL1 в ИФА ELISA (результаты показаны на фиг. 11B и 11C); (b) специфическом связывании экспрессирующих hPDL1 клеток 293T и неочищенных клеток 293T (результаты показаны на фиг. 12A и 12B); и (в) блокировании взаимодействия PD1-PDL1 в обеих версиях анализа блокирования. Полученные данные для примеров наилучших кандидатных антител в Формате 1 и Формате 2 показаны на фиг. 13B и 14B. Данные результатов для 27 вариантов осуществления антител по настоящему изобретению показаны на фиг. 15.

[000110] Аффинность взаимодействия PD-L1 в анализе BIAcore:

[000111] Наилучшие кандидатные антитела тестировали на аффинность к PD-L1, используя BIAcore (фиг. 16B-16D). Вкратце, биотинилированный hPDL1 захватывали за счет стрептавидина на поверхности сенсорного чипа. Антитело прогоняли по чипу, и рассчитывали параметры реакции с использованием одноциклового кинетического метода, основанного на стабильности взаимодействия. Значения KD оценивали с применением программного обеспечения для оценки BIAcore X100 2.0 в модели связывания бивалентного аналита.

[000112] Связывание PD-L1 резуса при FACS

[000113] (A) Клетки 293T временно трансфицировали конструкцией для экспрессии PDL1-GFP резуса. Варианты осуществления 4-1E8, 3-1E4 и 3-1B11 тестировали и сравнивали с контролем. Результаты показаны на фиг. 18A-18D: все три антитела связывали PDL1 резуса.

[000114] (b) Клетки 293T временно трансфицировали конструкцией для экспрессии PDL1 резуса экспрессирующей конструкцией PDL1. Варианты осуществления 4-1E8, 3-1E4 и 3-1B11 тестировали и сравнивали с контролем. Результаты показаны на фиг. 19A-19D: все три антитела связывали PDL1 резуса.

[000115] Индукция ИЛ-2 и определение EC50

[000116] Мононуклеарные клетки периферической крови (МКПК) выделяли из крови человека в градиенте фиколла с последующим лизисом эритроцитов, используя стандартные протоколы. Для анализа готовили среду RPMI+ следующим образом: 10% ФСБ, 1% антибиотик-антимикотик (Gibco) и 1% заменимых аминокислот (Gibco) добавляли в среду RPMI в модификации ATCC (Gibco). После выделения из крови МКПК ресуспендировали в 10-20 мл RPMI⁺ и культивировали в течение ночи при 37ºC с 5% CO₂. Затем МКПК высевали в 96-луночный планшет для тканевых культур (Corning) в концентрации 100 000 МКПК/96 лунок; конечный объем в каждой лунке составлял 200 мкл. Стафилококковый энтеротоксин B (SEB) добавляли в концентрации 1 нг/мл, а наилучшие антитела добавляли в концентрации 20 мкг/мл (для скрининга) или в диапазоне концентраций от 50 мкг/мл до 0,003 мкг/мл. В качестве контроля использовали клетки без SEB (например, без стимуляции); с SEB по отдельности или с SEB и изотипическим контролем (например, исходный уровень).

[000117] После 76-часовой инкубации при 37°C с 5% CO₂ МКПК центрифугировали при 1200 об/мин в течение 15 минут при комнатной температуре, супернатанты собирали и хранили при -20°C. ИФА ELISA на ИЛ-2 проводили с использованием коммерческого набора для ИФА ELISA на ИЛ-2 (Biolegend или Thermofisher), следуя инструкциям производителя. Для ИФА ELISA супернатанты разбавляли до 1/20 - 1/80. Поглощение измеряли с применением считывающего устройства для микропланшетов Spectramax3 M3 (Molecular Devices), и анализировали данные с использованием программного обеспечения Graphpad. Наилучшие кандидатные антитела сравнивали с коммерчески доступными антителами против PD1. Результаты показаны на фиг. 20. В экспериментах по совместному культивированию опухолей с клетками MDA-MB-231 (см. фиг. 23A-23C) 4-1E8 стабильно демонстрировал лучшие результаты, чем 3-1B11 и 3-1E4, в отношении инактивации ИЛ-2 (см. фиг. 23A-23C) и ИФН-γ (см. фиг. 24). Однако все три антитела были настолько же или более эффективны, чем коммерческие антитела против PDL1 - атезолизумаб («Atezo») и дурвалумаб («Durva»), в аналогичных экспериментах по совместному культивированию с Т-клетками и MDA-MB-231.

[000118] АЗКЦ-активность

[000119] Как показано на фиг. 21 и 22, все три наилучших антитела продемонстрировали выраженную АЗКЦ-активность, в то время как атезолизумаб (сконструированный так, чтобы быть отрицательным по АЗКЦ) продемонстрировал отсутствие активности. Из трех вариантов осуществления изобретения 4-1E8 продемонстрировал наибольшую АЗКЦ-активность.

[000120] Реакция смешанной культуры лимфоцитов

[000121] Мононуклеарные клетки периферической крови (МКПК) выделяли из крови человека в градиенте фиколла с последующим лизисом эритроцитов, используя стандартные протоколы. Клетки культивировали в бессывороточной среде RPMI 1640 в течение 1 часа при 37°C. Неадгезивные клетки удаляли и оставшиеся моноциты культивировали в RPMI 1640 с добавлением 5% AB сыворотки человека, 2 нг/мл ГМ-КСФ и 10 нг/мл ИЛ-4 (BD Biosciences). Свежую среду с добавлением цитокинов добавляли каждые 2-3 суток. Зрелые дендритные клетки индуцировали добавлением 20 нг/мл ФНО-альфа (BD Biosciences) на 6 день и культивировали в течение 24 часов.

[000122] Дендритные клетки собирали, определяли фенотип и замораживали для последующего применения. CD4 Т-клетки выделяли из МКПК с применением магнитных микроносителей (Dynal) в соответствии с инструкциями производителя. CD4 Т-клетки культивировали в 96-луночных планшетах с плоским дном (Costar) вместе с аллогенными дендритными клетками в соотношении 1:2,5, используя RPMI 1640 с добавлением 10% AB сыворотки человека. Перед добавлением дендритные клетки обрабатывали 100 мг/мл митомицина C (Sigma). Пролиферацию Т-клеток измеряли методом разведений CFSE (или аналогичного красителя). Высвобождение ИФН-g измеряли с использованием коммерческого набора для ИФА ELISA на ИФН-g, следуя инструкциям производителя. Поглощение измеряли с применением считывающего устройства для микропланшетов Spectramax3 M3 (Molecular Devices) и анализировали данные с использованием программного обеспечения Graphpad. В указанных исследованиях наилучшие кандидатные антитела согласно вариантам осуществления настоящего изобретения демонстрировали результаты, сопоставимые с другими коммерчески доступными антителами против PD1 и против PDL1. Примеры данных представлены на фиг. 25A и 25B.

[000123] Специфичность связывания

[000124] Получали линии клеток Expi293, которые стабильно экспрессировали множество членов семейства B7 и их рецепторов. Потенциал антител против PDL1 тестировали с помощью FACS с использованием флуоресцентных антител против IgG человека. Полученные данные для примеров наилучших кандидатных антител приведены на фиг. 26A и 26B.

[000125] Блокирование связывания CD80-PDL1

[000126] Клетки DLD1, сконструированные так, чтобы экспрессировать PDL1, применяли для детекции связывания биотинилированного CD80-Fc в присутствии или в отсутствие антител против PDL1 с последующей обработкой флуоресцентным стрептавидином. Полученные данные для примеров наилучших кандидатных антител по настоящему изобретению приведены на фиг. 27A и 27B.

[000127] Измерение времени полужизни

[000128] Время полужизни сыворотки измеряли с применением гомозиготных самцов мышей Tg32 (B6.Cg-Fcgrttm1Dcr Tg(FCGRT)32Dcr/DcrJ, Jackson Labs). 2 мг/кг антитела инъецировали внутривенно на 0 день; кровь брали на 1 день и в различные последующие моменты времени. Готовили плазму и измеряли титры антител с применением сэндвич-анализа ELISA. Титры нормировали по титрам 1 дня. Также измеряли ответ против антител, и образцы с высокими титрами исключали из анализа, поскольку в ИФА ELISA они часто демонстрировали неожиданные изменения. Полученные данные для примеров наилучших кандидатных антител по настоящему изобретению приведены на фиг. 28. Время полужизни разных антител варьировало от 6,9 дней (3-1E4, см. подробное описание последовательности в примере 9 ниже) до 10,5 дней (3-1B11, см. подробное описание последовательности в примере 11 ниже) и 12,3 дней (4-1E8, см. подробное описание последовательности в примере 5 ниже).

[000129] Последовательности полипептидов

[000130] Примеры последовательностей PD-L1-связывающих полипептидов по настоящему изобретению приведены ниже:

Пример 1: Код антитела: 4-1A2

VH

[000131] ДНК (SEQ ID NO:1)

CAGGTTCAGCTGGTGCAGTCTGGGACTGAGGTGAAGAAGCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTC

TCCTGCAAGGCTTCTGGATACACCTTCACCAGTTATGATATCAACTGGGTGCGACAGGCC

ACTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGATGGATCAACCCTAACAGTGGTGGCACAAACTAT

GCACAGAAGTTTCAGGGCAGGGTCACCATGACCACAGACACTTCTACGGGCACAGCCTAC

ATGGAGCTGAGGAGCCTGAGATCTGACGACACGGCCGTGTATTACTGTGCGAGATTTTTA

TGGGGTTCGGGGAGTTATGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCA

[000132] АМИНОКИСЛОТА (SEQ ID NO:2)

QVQLVQSGTEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSYDINWVRQATGQGLEWMGWINPNSGGTNY

AQKFQGRVTMTTDTSTGTAYMELRSLRSDDTAVYYCARFLWGSGSYDYWGQGTLVTVSS

VL

[000133] ДНК (SEQ ID NO:3)

GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACC

ATCACTTGCCGGGCAAGTCAGAGCATTAGCAGCTATTTAAATTGGTATCAGCAGAAACCA

GGGAAAGCCCCTAAGCTCCTGATCTATGCTGCATCCAGTTTGCAAAGTGGGGTCCCATCA

AGGTTCAGTGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAGTCTGCAACCT

GAAGATTTCGCAACTTACTACTGTCAACAGACTTACACATTCCCGCACACTTTTGCCCAG

GGGACCAACCTGGAGATCAAA

[000134] АМИНОКИСЛОТА (SEQ ID NO:4)

DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQTYTFPHTFAQGTNLEIK

Пример 2: Код антитела: 4-1A12

VH

[000135] ДНК (SEQ ID NO:5)

CAAGTCCAGCTGGTACAATCTGGAGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTC

TCCTGCAAGGCTTCTGGTTACACCTTTACCAGCTATGGTATCAGCTGGGTGCGACAGGCC

CCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGATGGATCAGCGCTTACAATGGTAACACAAACTAT

GCACAGAAGCTCCAGGGCAGAGTCACCATGACCACAGACACATCCACGAGCACAGCCTAC

ATGGAGCTGAGGAGCCTGAGATCTGACGACACGGCCGTGTATTACTGTGCGAGAGATTGG

ATACAGCTATGGTTACCCCTTGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCA

[000136] АМИНОКИСЛОТА (SEQ ID NO:6)

QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSYGISWVRQAPGQGLEWMGWISAYNGNTNY

AQKLQGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCARDWIQLWLPLDYWGQGTLVTVSS

VL

[000137] ДНК (SEQ ID NO:7)

GACATCCAGTTGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACC

ATCACTTGCCGGGCAAGTCAGAGCATTAGCAGCTATTTAAATTGGTATCAACAGAAACCA

GGGAAAGCCCCTAAGCTCCTGATCTATGGTGCATCCAGTTTGGAAAGTGGGGTCCCATCA

AGGTTCAGTGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAGTCTGCAACCT

GAAGATTTTGCAACTTACTACTGTCAACAGAGTCACAGTTCCCCCCTCACTTTCGGCGGA

GGGACCAAGGTGGACATCAAA

[000138] АМИНОКИСЛОТА (SEQ ID NO:8)

DIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYGASSLESGVPS

RFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQSHSSPLTFGGGTKVDIK

Пример 3: Код антитела: 4-1B9

VH

[00139] ДНК (SEQ ID NO:9)

GAAGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGGAGGCTTGGTCCAGCCTGGGAGGTCCCTGAGACTC

TCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCAGTAGCTATGGCATGCACTGGGTCCGCCAGGCT

CCAGGCAAGGGGCTGGAGTGGGTGGCAGTTATATCATATGATGGAAGTAATAAATACTAT

GCAGACTCCGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTAT

CTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCTGAGGACACGGCTGTGTATTACTGTGCGAAAGATTTG

ATCCCGTTGCGAGATAGTAGGGGGGGGTACTACTACGGTATGGACGTCTGGGGCCAAGGG

ACCACGGTCACCGTCTCCTCAGGGAGT

[000140] АМИНОКИСЛОТА (SEQ ID NO:10)

EVQLVQSGGGLVQPGRSLRLSCAASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVAVISYDGSNKYY

ADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKDLIPLRDSRGGYYYGMDVWGQG

TTVTVSS

VL

[000141] ДНК (SEQ ID NO:11)

TCTTCTGAGCTGACTCAGGACCCTGCTGTGTCTGTGGCCTTGGGACAGACAGTCAGGATC

ACATGCCAAGGAGACAGCCTCAGAGACTATTATGCAAGCTGGTACCAGCAGAAGCCAGGA

CAGGCCCCTGTACTTGTCATCTATGGTAAAAACAACCGGCCCTCAGGAATCCCAGACCGA

TTCTCTGGCTCCAGCTCAGGAAACACAGCTTCCTTGACCATCACTGGGACTCAGGCGGAA

GATGAGGCTGACTATTACTGTAACTCCCGTGACAGCGGTGCTTACCATTATGTCTTCGGA

ACTGGGACCAAGGTCACCGTCCTA

[000142] АМИНОКИСЛОТА

SSELTQDPAVSVALGQTVRITCQGDSLRDYYASWYQQKPGQAPVLVIYGKNNRPSGIPDR

FSGSSSGNTASLTITGTQAEDEADYYCNSRDSGAYHYVFGTGTKVTVL

Пример 4: Код антитела: 4-1B12

VH

[000143] ДНК (SEQ ID NO:13)

CAAATCCAGCTGGTGCAGTCTGGGGGAGGCGTGGTCCAGCCTGGGAGGTCCCTGAGACTC

TCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCAGTAGCTATGGCATGCACTGGGTCCGCCAGGCT

CCAGGCAAGGGGCTGGAGTGGGTGGCAGTTATATCATATGATGGAAGTAATAAATACTAT

GCAGACTCCGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTAT

CTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCTGAGGACACGGCTGTGTATTACTGTGCGAAAGGAAGT

ATTATAGGGGATGGTGCTTTTGATATCTGGGGCCAAGGGACAATGGTCACCGTCTCTTCA

[000144] АМИНОКИСЛОТА (SEQ ID NO:14)

QIQLVQSGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVAVISYDGSNKYY

ADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKGSIIGDGAFDIWGQGTMVTVSS

VL

[000145] ДНК (SEQ ID NO:15)

GATATTGTGATGACCCAGTCTCCACTCTCCCTGCCCGTCACCCTTGGAGAGCCGGCCTCC

ATCTCCTGCAGGTCTAGTCAGACCCTCCTGCATAATGGATTCAACTTTTTGGATTGGTAC

CTGCAGAAGCCAGGGCAGTCTCCACAACTCCTGATGTATTTGGCCTCTAGCCGGGCCTCC

GGGGTCCCTGACAGGTTCAGTGGCAGTGGATCGGGCACAGATTTCACACTGAAAATCAGC

AGAGTGGAGGCTGAGGATGTTGGGGTTTATTACTGCATGCAAGGTACACACTGGCCGTAC

ACTTTTGGCCAGGGGACCAAGCTGGATATCAAA

[000146] АМИНОКИСЛОТА (SEQ ID NO:16)

DIVMTQSPLSLPVTLGEPASISCRSSQTLLHNGFNFLDWYLQKPGQSPQLLMYLASSRAS

GVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCMQGTHWPYTFGQGTKLDIK

Пример 5: Код антитела: 4-1E8

VH

[000147] ДНК (SEQ ID NO:17)

CAAATCCAGCTGGTACAATCTGGGGCTGAGGTGAAGATGCCTGGGGCCTCAGTGACGATT

TCCTGCGAGGCGTCTGGATACAACTTCATCAGCTACTATATACACTGGGTGCGACAGGCC

CCTGGACAAGGCCTTGAGTGGATGGGATTCGTCGTCCCTAGTGGTGGTGCCGCAGGCTAC

ACACAGAAGTTCCAGGGCAGACTCACCGTGACCAGGGACACGTCCACGAGCACAGTCTAC

ATGGACCTGAACAGCCTGACATCTGACGACACGGCCGTGTATTACTGTGTGCGAGAAATG

AGTGGTGGCTGGTTTGATTTCTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCG

[000148] АМИНОКИСЛОТА (SEQ ID NO:18)

QIQLVQSGAEVKMPGASVTISCEASGYNFISYYIHWVRQAPGQGLEWMGFVVPSGGAAGY

TQKFQGRLTVTRDTSTSTVYMDLNSLTSDDTAVYYCVREMSGGWFDFWGQGTLVTVSS

VL

[000149] ДНК (SEQ ID NO:19)

GACATCGTGATGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACC

ATCACTTGCCGGGCAAGTCAGGGCATTAGAAATGATTTAGGCTGGTATCAGCAAAAACCA

GGGAAAGCCCCTAAGCTCCTGATCTATGCTGCATCCACTTTGCAAAGTGGGGTCCCATCA

AGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGGCT

GAAGATGTGGCAGTTTATTACTGTCAGCAATATTATAGTACTCCTCTCACTTTCGGCCCT

GGGACCAAAGTGGATATCAAA

[000150] АМИНОКИСЛОТА (SEQ ID NO:20)

DIVMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQGIRNDLGWYQQKPGKAPKLLIYAASTLQSGVPS

RFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQYYSTPLTFGPGTKVDIK

Пример 6: Код антитела: 4-1G7

VH

[000151] ДНК (SEQ ID NO:21)

GAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGTCCTCGGTGAAGGTC

TCCTGCAAGGCTTCTGGTTACACCTTTACCAGCTATGGTATCAGCTGGGTGCGACAGGCC

CCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGATGGATCAGCGCTTACAATGGTAACACAAACTAT

GCACAGAAGCTCCAGGGCAGAGTCACCATGACCACAGACACATCCACGAGCACAGCCTAC

ATGGAGCTGAGGAGCCTGAGATCTGACGACACGGCCGTGTATTACTGTGCGAGAGCCTCA

CCGGTACAGCAGCCCATATGGTGGGCGGAGTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTC

TCCTCA

[000152] АМИНОКИСЛОТА (SEQ ID NO:22)

EVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGYTFTSYGISWVRQAPGQGLEWMGWISAYNGNTNY

AQKLQGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCARASPVQQPIWWAEYWGQGTLVTV

SS

VL

[000153] ДНК (SEQ ID NO:23)

CAGTCTGCCCTGACTCAGCCTGCCTCCGTGTCTGGGTCTCCTGGACAGTCGATCACCATC

TCCTGCACTGGAACCAGCAGTGACGTTGGTGGTTATAACTATGTCTCCTGGTACCAACAG

CACCCAGGCAAAGCCCCCAAACTCATGATTTCTGATGTCAGTAAGCGGCCCTCAGGGGTT

TCTAATCGCTTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCAACACGGCCTCCCTGACCATCTCTGGGCTC

CAGGCTGAGGACGAGGCTGATTATTACTGCAGCTCATATACAAGCAACTACACTTTGGTA

TTCGGCGGAGGGACCAAGCTGACCGTCCTA

[000154] АМИНОКИСЛОТА (SEQ ID NO:24)

QSALTQPASVSGSPGQSITISCTGTSSDVGGYNYVSWYQQHPGKAPKLMISDVSKRPSGV

SNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSYTSNYTLVFGGGTKLTVL

Пример 7: Код антитела: 4-1H10

VH

[000155] ДНК (SEQ ID NO:25)

CAGCTGCAGCTACAGCAGTCCGGAGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGTCCTCGGTGAAGGTC

TCCTGCAAGGCTCCTGGAGGCACCTTCAGCAGCTATGCTATCAGCTGGGTGCGACAGGCC

CCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGAAGGATCATCCCTATCCTTGGTATAGCAAACTAC

GCACAGAAGTTCCAGGGCAGAGTCACGATTACCGCGGACAAATCCACGAGCACAGCCTAC

ATGGAGCTGAGCAGCCTGAGATCTGAAGACACGGCCGTGTATTACTGTGCGAGTCATGGT

CGGGCAGCAGCTGGTAGGTACGCTATGGACGTCTGGGGCCAAGGGACCACGGTCACCGTC

TCCTCA

[000156] АМИНОКИСЛОТА (SEQ ID NO:26)

QLQLQQSGAEVKKPGSSVKVSCKAPGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGRIIPILGIANY

AQKFQGRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCASHGRAAAGRYAMDVWGQGTTVTV

SS

VL

[000157] ДНК (SEQ ID NO:27)

AATTTTATGCTGACTCAGCCCCACTCTGTGTCGGATTCTCCGGGGAAGACGGTAACCATC

TCCTGCACCCGCAGCAGTGGCAGCATTGCCAGCAACTATGTGCAGTGGTACCAGCAGCGC

CCGGGCAGTGCCCCCACCACTGTGATCTATGACGATAAGCAAAGACCCTCTGGGGTCCCT

GATCGGTTCTCGGGCTCCATCGACAGCTCCTCCAACTCTGCCTCCCTCACCATCTCTGGA

CTGACGACTGAGGACGAGGCTGACTACTACTGTCAGTCCTTTGATGGCAGCAGTGTCATC

TTCGGCGGAGGGACCAAGCTGACCGTCCTG

[000158] АМИНОКИСЛОТА (SEQ ID NO:28)

NFMLTQPHSVSDSPGKTVTISCTRSSGSIASNYVQWYQQRPGSAPTTVIYDDKQRPSGVP

DRFSGSIDSSSNSASLTISGLTTEDEADYYCQSFDGSSVIFGGGTKLTVL

Пример 8: Код антитела: 3-1H2

VH

[000159] ДНК (SEQ ID NO:29)

CAGGTTCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGTCCTCGGTGAAGGTC

TCCTGCAAGGCTTCTGGAGGCACCTTCAGCAGCTATGCTATCAGCTGGGTGCGACAGGCC

CCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGAGGGATCATCCCTATCTTTGGTACAGCAAACTAC

GCACAGAAGTTCCAGGGCAGAGTCACGATTACCGCGGACGAATCCACGAGCACAGCCTAC

ATGGAGCTGAGCAGCCTGAGATCTGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCGAGAAAGGAG

CGTTTCTATGATAGTAGTGGTTATTACGATGCTTTTGATATCTGGGGCCAAGGGACAATG

GTCACCGTCTCTTCA

[000160] АМИНОКИСЛОТА (SEQ ID NO:30)

QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGGIIPIFGTANY

AQKFQGRVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARKERFYDSSGYYDAFDIWGQGTM

VTVSS

VL

[000161] ДНК (SEQ ID NO:31)

CAGTCTGCCCTGACTCAGCCTCGCTCAGTGTCCGGGTCTCCTGGGCAGTCAGTCACCATC

TCCTGCACTGGAACCAGCAATGATGTTGGTGGTTATAACTATGTCTCCTGGTACCAACAG

CACCCAGGCAAAGCCCCCAAACTCATGATTTATGATGTCACTAAGCGGCCCTCAGGGGTC

CCTGATCGCTTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCAACACGGCCTCCCTGACCGTCTCTGGCCTC

CAGCCTGAGGATGAGGCTGACTATTATTGCGCCTCTTATGGAGGCAGGAACAATTTGCTT

TTTGGCGGAGGGACTCAACTGACCGTCTTA

[000162] АМИНОКИСЛОТА (SEQ ID NO:32)

QSALTQPRSVSGSPGQSVTISCTGTSNDVGGYNYVSWYQQHPGKAPKLMIYDVTKRPSGV

PDRFSGSKSGNTASLTVSGLQPEDEADYYCASYGGRNNLLFGGGTQLTVL

Пример 9: Код антитела: 3-1E4

VH

[000163] ДНК (SEQ ID NO:33)

CAAATCCAGCTGGTACAATCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGTCCTCGGTGAAGGTC

TCCTGCAAGGCTTCTGGAGGCACCTTCAGCAGCTATGCTATCAGCTGGGTGCGACAGGCC

CCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGAGGGATCATCCCTATCTTTGGTACAGCAAACTAC

GCACAGAAGTTCCAGGGCAGAGTCACGATTACCGCGGACAAATCCACGAGCACAGCCTAC

ATGGAGCTGAGCAGCCTGAGATCTGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCCGGAGGGGGA

GCAGTGGCGGACAATAGTTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCA

[000164] АМИНОКИСЛОТА (SEQ ID NO:34)

QIQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGGIIPIFGTANY

AQKFQGRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCAGGGAVADNSYWGQGTLVTVSS

VL

[000165] ДНК (SEQ ID NO:35)

GACATCCGGATGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACC

ATCACTTGCCGGGCAAGTCAGGGCATTAGAAATGATTTAGGCTGGTATCAGCAGAAACCA

GGGAAAGCCCCTAAGCTCCTGATCTATGCTGCATCCAGTTTACAAAGTGGGGTCCCATCA

AGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGCACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCT

GAAGATTTTGCAACTTATTACTGTCTACAAGATTACAATTACCCTCGAACGTTCGGCCAA

GGGACCAAGGTGGAAATCAAA

[000166] АМИНОКИСЛОТА (SEQ ID NO:36)

DIRMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQGIRNDLGWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPS

RFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCLQDYNYPRTFGQGTKVEIK

Пример 10: Код антитела: 3-1A8

VH

[000167] ДНК (SEQ ID NO:37)

CAAATCCAGCTGGTACAATCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGTCCTCGGTGAAGGTC

TCCTGCAAGGCTTCTGGAGGCACCTTCAGCAGCTATGCTATCAGCTGGGTGCGACAGGCC

CCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGAGGGATCATCCCTATCTTTGGTACAGCAAACTAC

GCACAGAAGTTCCAGGGCAGAGTCACGATTACCGCGGACGAATCCACGAGCACGGCCTAC

ATGGAGCTGAGCAGCCTGAGATCTGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCGAGAGACGGT

TCGTATAGCAGCAGCTGGTACTCGTTTGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTC

TCCTCA

[000168] АМИНОКИСЛОТА (SEQ ID NO:38)

QIQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGGIIPIFGTANY

AQKFQGRVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARDGSYSSSWYSFDYWGQGTLVTV

SS

VL

[000169] ДНК (SEQ ID NO:39)

CAGTCTGCCCTGACTCAGCCTGCCTCCGTGTCTGGGTCTCCTGGACAGTCGATCACCATC

TCCTGCACTGGAACCAGCAGTGACGTCGGTGGTTATAACTATGTCTCCTGGTACCAACAG

CACCCAGGCAAAGCCCCCAAACTCATGATTTATGATGTCAGTAATCGGCCCTCAGGGGTT

TCTAATCGCTTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCAACACGGCCTCCCTGACCATCTCTGGGCTC

CAGGCTGAGGACGAGGCTGATTATTACTGCTCCTCATATGCAGGTGATATTAGTTATGTA

CTGTTCGGCGGCGGGACCAAGCTGACCGTCCTA

[000170] АМИНОКИСЛОТА (SEQ ID NO:40)

QSALTQPASVSGSPGQSITISCTGTSSDVGGYNYVSWYQQHPGKAPKLMIYDVSNRPSGV

SNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSYAGDISYVLFGGGTKLTVL

Пример 11: Код антитела: 3-1B11

VH

[000171] ДНК (SEQ ID NO:41)

GAAGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGAGGGTCCCTGAGACTC

TCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACTTTTAGTGACTATGACATGATCTGGGTCCGCCAGGCT

CCAGGCAAGGGGCTGGAGTGGGTGGCAGTTATATCATATGATGGAAGTAATAAATACTAT

GCAGACTCCGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTAT

CTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCTGAGGACACGGCTGTGTATTACTGTGCGAAAGAGTTC

TTTGGTGCTTTTGATATCTGGGGCCAAGGGACAATGGTCACCGTCTCTTCA

[000172] АМИНОКИСЛОТА (SEQ ID NO:42)

EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSDYDMIWVRQAPGKGLEWVAVISYDGSNKYY

ADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKEFFGAFDIWGQGTMVTVSS

VL

[000173] ДНК (SEQ ID NO:43)

TCTTCTGAGCTGACTCAGGACCCTGCTGTGTCGGTGGCCTTGGGACAGACAGTCACGATC

ACATGCCAAGGAGACAGCCTCAATTACTATTATGCAAACTGGTTCCAGCTGAAGCCAGGG

CAGGCCCCTGTACTTGTCCTCTTTGGTAAAAACAACCGGCCCTCAGGGATCCCAGACCGA

TTCTCTGGCTCCTACTCGGGAAGCACAGCTTCCTTGACCATCACTGGGGCTCAGGCGGAA

GATGACGCTGACTATTACTGTAATTCGCGGGACAGCGGTGGTAATCCTTGGGTGTTCGGC

GGAGGGACCAAGCTGACCGTCCTA

[000174] АМИНОКИСЛОТА (SEQ ID NO:44)

SSELTQDPAVSVALGQTVTITCQGDSLNYYYANWFQLKPGQAPVLVLFGKNNRPSGIPDR

FSGSYSGSTASLTITGAQAEDDADYYCNSRDSGGNPWVFGGGTKLTVL

Пример 12: Код антитела: 4-1F3

VH

[000175] ДНК (SEQ ID NO:45)

CAAATCCAGCTGGTACAATCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGTCCTCGGTGAAGGTC

TCCTGCAAGGCTTCTGGAGGCACCTTCAGCAGCTATGCTATCAGCTGGGTGCGACAGGCC

CCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGAAGGATCATCCCTATCCTTGGTATAGCAGACTAC

GCACAGAAGTTCCAGGGCAGAGTCACGATTACCGCGGACAAATCCACGAGCACAGCCTAC

ATGGAACTGAGTAGCCTGGGATCTGAGGACACGGCCGTGTATTTTTGTGCGAGAGAGGGG

GGATCCTTTAGGCACTTTGACTTCTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCA

[000176] АМИНОКИСЛОТА (SEQ ID NO:46)

QIQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGRIIPILGIADY

AQKFQGRVTITADKSTSTAYMELSSLGSEDTAVYFCAREGGSFRHFDFWGQGTLVTVSS

VL

[000177] ДНК (SEQ ID NO:47)

CAGCCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGTCTCTGGGGCCCCAGGGCAGAGGGTCACCATC

TCCTGCGCTGGGAGCGACCCCAACATCGGGACAGGTCATGATGTGCACTGGTACCAGCAA

CTTCCAGGAACAGCCCCCAAACTCGTCATCTATGGTAACACCAATCGGCCCTCAGGGGTC

CCTGAGCGATTCACTGCCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGGCCATCACTGGGCTC

CAGGCTGAGGATGAGGCTGATTATTACTGCCAGGCCTACGACAGGAGCCTGCGTGGTTAT

GTCTTCGGGACTGGGACCAAGGTCACCGTCCTG

[000178] АМИНОКИСЛОТА (SEQ ID NO:48)

QPVLTQPPSVSGAPGQRVTISCAGSDPNIGTGHDVHWYQQLPGTAPKLVIYGNTNRPSGV

PERFTASKSGTSASLAITGLQAEDEADYYCQAYDRSLRGYVFGTGTKVTVL

Пример 13: Код антитела: 4-1G5

VH

[000179] ДНК (SEQ ID NO:49)

CAAATCCAGCTGGTACAGTCTGGTGCTGAAGTGAAGAAGCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTC

TCCTGCAAGACTTCTGGTTACACCTTTACCAGCTATGGTATCAGCTGGGTGCGACAGGCC

CCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGATGGATCAGCGCTTACAATGGTAACACAAACTAT

GCACAGAAGCTCCAGGGCAGAGTCACCATGACCACAGACACATCCACGAGCACAGCCTAC

ATGGAGCTGAGGAGCCTGAGATCTGACGACACGGCCGTGTATTACTGTGCGAGAACTACA

GGTGACGAGTGGCTACGATTGGCTATAAATGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACC

GTCTCCTCA

[000180] АМИНОКИСЛОТА (SEQ ID NO:50)

QIQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKTSGYTFTSYGISWVRQAPGQGLEWMGWISAYNGNTNY

AQKLQGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCARTTGDEWLRLAINDYWGQGTLVT

VSS

VL

[000181] ДНК (SEQ ID NO:51)

GATATTGTGATGACACAGTCTCCCCTCTCCCTGCCCGTCACCCCTGGAGAGCCGGCCTCC

ATCTCCTGCAGGTCTAGTCTGCGCCTCATGCATCCTAATGGACTCAACTATTTGGATTGG

TACCTGCAGAAGCCAGGGCAGTCTCCACAGCTCCTAATCTTTTTGGGTTCTCAGCGGGCC

TCCGGGGTCCCTGACAGGTTCAGTGGCAGTGGATCAGGCACAGATTTTACACTGAAAATC

AGCAGAGTGGAGGCTGAGGATGTTGGCATTTATTACTGCATGCAAGCTCTAGAACCTCCG

TACACTTTTGGCCAGGGGACCAAGCTGGAGATCAAA

[000182] АМИНОКИСЛОТА (SEQ ID NO:52)

DIVMTQSPLSLPVTPGEPASISCRSSLRLMHPNGLNYLDWYLQKPGQSPQLLIFLGSQRA

SGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGIYYCMQALEPPYTFGQGTKLEIK

Пример 14: Код антитела: 4-1C9

VH

[000183] ДНК (SEQ ID NO:53)

CAGGTCCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGTCCTCGGTGAAGGTC

TCCTGCAAGGCTTCTGGAGGCACCTTCAGCAGCTATGCTATCAGCTGGGTGCGACAGGCC

CCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGAGGGATCATCCCTATCTTTGGTACAGCAAACTAC

GCACAGAAGTTCCAGGGCAGAGTCACGATTACCGCGGACGAATCCACGAGCACAGCCTAC

ATGGAGCTGAGCAGCCTGAGATCTGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCGAGAGATCCC

GGGTATAGCAGTGGCTGGAAAGATGATGCTTTTGATATCTGGGGCCAAGGGACAATGGTC

ACCGTCTCTTCA

[000184] АМИНОКИСЛОТНАЯ (SEQ ID NO:54)

QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGGIIPIFGTANY

AQKFQGRVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARDPGYSSGWKDDAFDIWGQGTMV

TVSS

VL

[000185] ДНК (SEQ ID NO:55)

GAAATTGTGATGACACAGTCTCCAGGCACCCTGTCTTTGTCTCCAGGGGATACAGCCTCC

CTCTCCTGCAGGGCCAGTCAGACTGTTAGCAGCAACTACTTAGCCTGGTACCAACAGAAA

CCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATGATACATCCAACAGGGCCGCTGGCATCCCG

GCCAGGTTCAGTGGCAGTGGGTCTGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGTAGCCTAGAG

CCTGAAGATTTTGCAGTGTATTACTGTCAGCAGTACGGTAGCTCACTCTGGACGTTCGGC

CAAGGGACCAAGGTGGAAATCAAA

[000186] АМИНОКИСЛОТНАЯ (SEQ ID NO:56)

EIVMTQSPGTLSLSPGDTASLSCRASQTVSSNYLAWYQQKPGQAPRLLIYDTSNRAAGIP

ARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQYGSSLWTFGQGTKVEIK

Пример 15: Код антитела 11-A4

VH

[000187] ДНК (SEQ ID NO:57)

CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGTCCTCGGTGAAGGTC

TCCTGCAAGGCTTCTGGAGGCACCTTCAGCAGCTATGCTATCAGCTGGGTGCGACAGGCC

CCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGAGGGATCATCCCTATCTTTGGTACAGCAAACTAC

GCACAGAAGTTCCAGGGCAGAGTCACGATTACCGCGGACGAATCCACGAGCACAGCCTAC

ATGGAGCTGAGCAGCCTGAGATCTGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCGAGAGCGGGG

CAGCAGCTGGTAGCCCTTTGGTACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCA

[000188] АМИНОКИСЛОТНАЯ (SEQ ID NO:58)

QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGGIIPIFGTANY

AQKFQGRVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARAGQQLVALWYYWGQGTLVTVSS

VL

[000189] ДНК (SEQ ID NO:59)

CAGTCTGCCCTGACTCAGCCTCCCTCCGCGTCCGGGTCTCGTGGACAGTCAGTCTCCATC

TCCTGCAGTGGAAGTCGCAGTGACATTGGATATTATAACTATGTCTCCTGGTATCAACAA

CACCCAGGCAAAGCCCCCAAACTCATCATTTTTGACGTCAATAAGCGGCCCTCAGGGGTC

CCTGATCGCTTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCAACACGGCCTCCCTGACCGTCTCTGGCCTC

CAGCCTGAGGATGAGGCTGACTATTATTGCGCCTCTTATGGAGGCAGGAACAATTTGCTT

TTTGGCGGAGGGACTCAACTGACCGTCTTA

[000190] АМИНОКИСЛОТНАЯ (SEQ ID NO:60)

QSALTQPPSASGSRGQSVSISCSGSRSDIGYYNYVSWYQQHPGKAPKLIIFDVNKRPSGV

PDRFSGSKSGNTASLTVSGLQPEDEADYYCASYGGRNNLLFGGGTQLTVL

Пример 16: Код антитела: 21-A1

VH

[000191] ДНК (SEQ ID NO:61)

CAGGTGCAACTGCAGGAGTCGGGCCCAGGACTGGTGGAGCCTTCGGAGACCCTGTCCCTC

ACCTGCACTGTCTCTGGTGGCTCCATCAGTAGTTTCTACTGGAGCTGGATCCGGCAGCCC

CCAGGGAAGGGACTGGAGTGGATTGGCTATATCAATTACAGTGGGAGCACCAACTACAAC

CCCTCCCTCAAGAGTCGAGTCACCATATCAGTAGACACGTCCAAGAACCAGTTCTCCCTG

AAGCTGAGCTCTGTGACCGCCGCAGACACGGCTGTGTATTACTGTGCGAGACAGATATTA

TGGTTCGGGGAGTTAAGGTGGTTCGACCCCTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCC

TCA

[000192] АМИНОКИСЛОТНАЯ (SEQ ID NO:62)

QVQLQESGPGLVEPSETLSLTCTVSGGSISSFYWSWIRQPPGKGLEWIGYINYSGSTNYN

PSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCARQILWFGELRWFDPWGQGTLVTVS

S

VL

[000193] ДНК (SEQ ID NO:63)

CAGTCTGCCCTGACTCAGCCTCCCTCCGCGTCCGGGTCTCCTGGACAGTCAGTCACCATC

TCCTGCACTGGAACCAGCAGTGACATTGGTGGTTATAACTATGTCTCCTGGTACCAACTG

CGCCCAGGCAAAGCCCCCAAACTCATGATTTATGACGTCACCAAGCGGCCCTCAGGGGTC

CCTGATCGCTTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCAACACGGCCTCCCTGACCGTCTCTGGGCTC

CAGGCTGAGGATGAGGCTGATTATTACTGCAGCTCATATGCAGGCAGCAACAATGTGGTA

TTCGGCGGAGGGACCAAGCTGACCGTCCTA

[000194] АМИНОКИСЛОТНАЯ (SEQ ID NO:64)

QSALTQPPSASGSPGQSVTISCTGTSSDIGGYNYVSWYQLRPGKAPKLMIYDVTKRPSGV

PDRFSGSKSGNTASLTVSGLQAEDEADYYCSSYAGSNNVVFGGGTKLTVL

Пример 17: Код антитела: 21-H12

VH

[000195] ДНК (SEQ ID NO:65)

CAAGTCCAGCTGGTACAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGGCCTCGGTGAAGGTC

TCCTGCAAGGCTTCTGGAGGCACCTTCAGCAGCTATGCTATCAGCTGGGTGCGACAGGCC

CCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGAGGGATCATCCCTATCTTTGGTACAGCAAACTAC

GCACAGAAGTTCCAGGGCAGAGTCACGATTACCGCGGACGAATCCACGAGCACAGCCTAC

ATGGAGCTGAGCAGCCTGAGATCTGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCGAGAAATCCC

TACGGTTTCAACTGGTTCGACCCCTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCA

[000196] АМИНОКИСЛОТНАЯ (SEQ ID NO:66)

QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGGIIPIFGTANY

AQKFQGRVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARNPYGFNWFDPWGQGTLVTVSS

VL

[000197] ДНК (SEQ ID NO:67)

AATTTTATGCTGACTCAGCCCCACTCTGTGTCGGAGTCTCCGGGGAAGACGGTAACCATC

TCCTGCACCCGCAGCAGTGGCAGCATTGCCAGCAACTATGTGCAGTGGTACCAGCAGCGC

CCGGGCAGTGCCCCCACCACTGTGATCTATGAGGATAACCAAAGACCCTCTGGGGTCCCT

GATCGGTTCTCTGGCTCCATCGACAGCTCCTCCAACTCTGCCTCCCTCACCATCTCCGGA

CTGAAGACTGAGGACGAGGCTGACTACTACTGTCAGTCTTATGATGGCTTCAATCAGGTG

TTCGGCGGAGGGACCAAGCTGACCGTCCTA

[000198] АМИНОКИСЛОТНАЯ (SEQ ID NO:68)

NFMLTQPHSVSESPGKTVTISCTRSSGSIASNYVQWYQQRPGSAPTTVIYEDNQRPSGVP

DRFSGSIDSSSNSASLTISGLKTEDEADYYCQSYDGFNQVFGGGTKLTVL

Пример 18: Код антитела: 7-D12

VH

[000199] ДНК (SEQ ID NO:69)

CAAATGCAGCTGGTACAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGTCCTCGGTGAAGGTC

TCCTGCAAGGCTTCTGGAGGCACCTTCAGCAGCTATGCTATCAGCTGGGTGCGACAGGCC

CCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGAGGGATCATCCCTATCTTTGGTACAGCAAACTAC

GCACAGAAGTTCCAGGGCAGAGTCACGATTACCGCGGACAAATCCACGAGCACAGCCTAC

ATGGAGCTGAGCAGCCTGAGATCTGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCGAGAACCGGT

AGTAGTGGTTATGTACGTTGGAGCAACTGGTTCGACCCCTGGGGCCAGGGAACCCTGGTC

ACCGTCTCCTCA

[000200] АМИНОКИСЛОТНАЯ (SEQ ID NO:70)

QMQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGGIIPIFGTANY

AQKFQGRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARTGSSGYVRWSNWFDPWGQGTLV

TVSS

VL

[000201] ДНК (SEQ ID NO:71)

GACATCCAGATGACCCAGTCTCCCTCCACCCTGTCTGCATTTGTAGGAGACAGAGTCACC

ATCACTTGCCGGGCCAGTGAGAGTATTAGTAGGTGGTTGGCCTGGTATCAGCAGAAACCA

GGGAAAGCCCCTAAACTCCTAATCTCTAAGACGTCTAATTTAGAAAGCGGGGTCCCGTCA

AGGTTCAGTGGCGCTGGATCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATTAGCAGTCTGCAACCT

GAGGATTTTGCAACTTACTTCTGTCAACAGGGTTCCAAAATGCCTCCGACTTTCGGCGGA

GGGACCAAGGTGGAGATCAAG

[000202] АМИНОКИСЛОТНАЯ (SEQ ID NO:72)

DIQMTQSPSTLSAFVGDRVTITCRASESISRWLAWYQQKPGKAPKLLISKTSNLESGVPS

RFSGAGSGTDFTLTISSLQPEDFATYFCQQGSKMPPTFGGGTKVEIK

Пример 19: Код антитела: 9-E3

VH

[000203] ДНК (SEQ ID NO:73)

CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGTCCTCGGTGAAGGTC

TCCTGCAAGGCTTCTGGAGGCACCTTCAGCAGCTATGCTATCAGCTGGGTGCGACAGGCC

CCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGAGGGATCATCCCTATCTTTGGTACAGCAAACTAC

GCACAGAAGTTCCAGGGCAGAGTCACGATTACCGCGGACGAATCCACGAGCACAGCCTAC

ATGGAGCTGAGCAGCCTGAGATCTGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCGAGAGGGGCC

TACGGTGGTAACTCCGCTTTTGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCA

[000204] АМИНОКИСЛОТНАЯ (SEQ ID NO:74)

QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGGIIPIFGTANY

AQKFQGRVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAYGGNSAFDYWGQGTLVTVSS

VL

[000205] ДНК (SEQ ID NO:75)

CAGTCTGTGCTGACGCAGCCGCCCTCAGTGTCTGGGGCCCCAGGGCAGAGGGTCACCATC

TCCTGCACTGGGAGCAGCTCCAACATCGGGGCAGGTTATGATGTACACTGGTACCAGCAG

CTTCCAGGAACAGCCCCCAAACTCCTCATGTACAGTAATGATCAGCGGCCCTCAGGGGTC

ACTGAGCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGGCCATCAGTGGGCTC

CAGTCTGAAGATGAGGGTGATTACTACTGCCAGTCCTATGACAGAAGCCTGAGAGGTTCG

GTCTTCGGCGGAGGGACCAAGCTGACCGTCCTC

[000206] АМИНОКИСЛОТНАЯ (SEQ ID NO:76)

QSVLTQPPSVSGAPGQRVTISCTGSSSNIGAGYDVHWYQQLPGTAPKLLMYSNDQRPSGV

TERFSGSKSGTSASLAISGLQSEDEGDYYCQSYDRSLRGSVFGGGTKLTVL

Пример 20: Код антитела: 10-A6

VH

[000207] ДНК (SEQ ID NO:77)

GAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTT

TCCTGCAAGGCTTCTGGTTACACCTTTACCAGCTATGGTATCAGCTGGGTGCGACAGGCC

CCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGATGGATCAGCGCTTACAATGGTAACACAAACTAT

GCACAGAAGCTCCAGGGCAGAGTCACCATGACCACAGACACATCCACGAGCACAGCCTAC

ATGGAGCTGAGGAGCCTGAGATCTGACGACACGGCCGTGTATTACTGTGCGAGAGATTCC

ATAGCAGCAGCTGGTACTCCGTTCGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCC

TCA

[000208] АМИНОКИСЛОТНАЯ (SEQ ID NO:78)

EVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSYGISWVRQAPGQGLEWMGWISAYNGNTNY

AQKLQGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCARDSIAAAGTPFDYWGQGTLVTVS

S

VL

[000209] ДНК (SEQ ID NO:79)

AATTTTATGCTGACTCAGCCCCACTCTGTGTCGGAGTCTCCGGGGAAGACGGTCACCATC

TCCTGCACCCGCAGCAGTGGCATCATTGCCAGCAAATATGTGCACTGGTACCAGCAGCGC

CCGGGCAGTGCCCCCACCACTGTGATCTATGAGGATAACCAAAGACCGTCTGGGGTCCCT

GATCGATTCTCTGGCTCCATCGACAACTCCTCCAACTCTGCCTCCCTCACCATCTCTGGA

CTGCAGACTGAGGACGAGGCTGACTACTACTGTCAGTCTCATGACGGCATCAATCAGGTT

TTCGGCGGAGGGACCAAGGTCACCGTCCTA

[000210] АМИНОКИСЛОТНАЯ (SEQ ID NO:80)

NFMLTQPHSVSESPGKTVTISCTRSSGIIASKYVHWYQQRPGSAPTTVIYEDNQRPSGVP

DRFSGSIDNSSNSASLTISGLQTEDEADYYCQSHDGINQVFGGGTKVTVL

Пример 21: Код антитела: 12-A4

VH

[000211] ДНК (SEQ ID NO:81)

GAGGTGCAGCTGGTGGAGTCCCGGGGAGGCTTGGTACAGCCGGGGGGGTCCCTGAGACTC

TCCTGTGTAACTTCTGGATTCAGCTTTAACAACTATGCCATGAACTGGGTCCGCCAGGCT

CCGGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGCTGTTAGTGGTAGTGGTGGTACCACATACTAC

GCAGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTTT

GTGCAGATGGACAGCCTGAGAGCTGAGGACACGGCTGTGTATTACTGTGCGAAAGGACTT

TTCCCTACGATTTTTGGAGTAGGAGCAATGTTTGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTC

ACCGTCTCCTCA

[000212] АМИНОКИСЛОТНАЯ (SEQ ID NO:82)

EVQLVESRGGLVQPGGSLRLSCVTSGFSFNNYAMNWVRQAPGKGLEWVSAVSGSGGTTYY

ADSVKGRFTISRDNSKNTLFVQMDSLRAEDTAVYYCAKGLFPTIFGVGAMFDYWGQGTLV

TVSS

VL

[000213] ДНК (SEQ ID NO:83)

TCTTCTGAGCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATC

TCTTGTTCTGGAAGCAGCTCCAACATCGGAAGTAATGCTGTTAACTGGTATCAGCAGCTC

CCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCATCTATGATAATAATCACCGGCCCTCAGGGGTCCCT

GACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGGCCATCAGTGGGCTCCAG

TCTGAGGATGAGGCTGATTATTATTGTGCAGCATGGGATGACACCATTCCTGGTGTGCTA

TTCGCCGGAGGGACCAAGCTGACCGTCCTA

[000214] АМИНОКИСЛОТНАЯ (SEQ ID NO:84)

SSELTQPPSASGTPGQRVTISCSGSSSNIGSNAVNWYQQLPGTAPKLLIYDNNHRPSGVP

DRFSGSKSGTSASLAISGLQSEDEADYYCAAWDDTIPGVLFAGGTKLTVL

Пример 22: Код антитела: 14-G10

VH

[000215] ДНК (SEQ ID NO:85)

GAAGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGTCCTCGGTGAAGGTC

TCCTGCAAGGCTTCTGGAGGCACCTTCAGCAGCTATGCTATCAGCTGGGTGCGACAGGCC

CCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGAGGGATCATCCCTATCTTTGGTACAGCAAACTAC

GCACAGAAGTTCCAGGGCAGAGTCACGATTACCGCGGACGAATCCACGAGCACAGCCTAC

ATGGAGCTGAGCAGCCTGAGATCTGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCGAGAGGTGTT

TCTTACTACTACGGTATGGACGTCTGGGGCCAAGGGACCACGGTCACCGTCTCCTCA

[000216] АМИНОКИСЛОТНАЯ (SEQ ID NO:86)

EVQLVESGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGGIIPIFGTANY

AQKFQGRVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGVSYYYGMDVWGQGTTVTVSS

VL

[000217] ДНК (SEQ ID NO:87)

CAGGCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCGGTGTCCGTGTCCCCAGGACAGACAGCCATCATC

TCCTGTTCTGGACATAAATTGGGTGATAAGTATGTTTCCTGGTATCAACAGCAGCCAGGC

CAGTCCCCTGTGCTGGTCCTCTTTCAGGATACCAAGCGGCCCTCAGGGATCCCTGAGCGA

TTCTCTGGCTCCAACTCTGGGAACACAGCCACTCTGACCATCAGCGCGACCCAGGCTGCG

GATGAGGCTGACTATTACTGTCAGGCGGGGGACACCAAGTCTGTGATCTTCGGCGGCGGG

ACCAAGCTGACCGTCCTA

[000218] АМИНОКИСЛОТНАЯ (SEQ ID NO:88)

QAVLTQPPSVSVSPGQTAIISCSGHKLGDKYVSWYQQQPGQSPVLVLFQDTKRPSGIPER

FSGSNSGNTATLTISATQAADEADYYCQAGDTKSVIFGGGTKLTVL

Пример 23: Код антитела: 22-A6

VH

[000219] ДНК (SEQ ID NO:89)

CAGGTTCAGGTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGTCCTCGGTGAAGGTC

TCCTGCAAGGCTTCTGGAGGCACCTTCAGCAGCTATGCTATCAGCTGGGTGCGGCAGGCC

CCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGAGGGATCATCCCTATCTTTGGTACAGCAAACTAC

GCACAGAAGTTCCAGGGCAGAGTCACGATTACCGCGGACGAATCCACGAGCACAGCCTAC

ATGGAGCTGAGCAGCCTGAGATCTGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCGAGAGGATAC

AGCTATGGTTCAGGACACCTTGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCA

[000220] АМИНОКИСЛОТНАЯ (SEQ ID NO:90)

QVQVVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGGIIPIFGTANY

AQKFQGRVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGYSYGSGHLDYWGQGTLVTVSS

VL

[000221] ДНК (SEQ ID NO:91)

GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACC

ATCACTTGCCAGGCGAGTCAGGACATTAGCAACTATTTAAATTGGTATCAGCAGAAACCA

GGGAAAGCCCCTAAGCTCCTGATCTACGATGCATCCAATTTGGAAACAGGGGTCCCATCA

AGGTTCAGTGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCGCTCTCACCATCAGCAGTCTCCAACCT

GAAGATTTTGCAACTTATTACTGTCTACAGCATAATAGTTACCCTCGGACTTTTGGCCAG

GGGACCAAGCTGGAGATCAAA

[000222] АМИНОКИСЛОТНАЯ (SEQ ID NO:92)

DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQASQDISNYLNWYQQKPGKAPKLLIYDASNLETGVPS

RFSGSGSGTDFALTISSLQPEDFATYYCLQHNSYPRTFGQGTKLEIK

Пример 24: Код антитела: 35-B1

VH

[000223] ДНК (SEQ ID NO:93)

GAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTC

TCCTGCAAGGCTTCTGGATACACCTTCACCGGCTACTATATGCACTGGGTGCGACAGGCC

CCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGATGGATGAACCCTAACAGTGGTGACACAGCCTAT

ACACAGAACTTCCAGGGCAGAGTCACCATGACCAGGAACCCCTCCATAAGCACAGCCTAC

ATGGAGCTGAGCAACCTGAGATCTGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCGAGAGGCCGG

GGGTTCGCGGAGAAGCCCCTTGGGTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCA

[000224] АМИНОКИСЛОТНАЯ (SEQ ID NO:94)

EVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTGYYMHWVRQAPGQGLEWMGWMNPNSGDTAY

TQNFQGRVTMTRNPSISTAYMELSNLRSEDTAVYYCARGRGFAEKPLGYWGQGTLVTVSS

VL

[000225] ДНК (SEQ ID NO:95)

GATATTGTGATGACTCAGTCTCCAGACTCCCTGGCTGTGTCTCTGGGCGGGAGGGCCACC

ATCAACTGCAAGTCCAGCCAGAGTATTTTATCCAGCTCCAATAATAAGAACTATTTAGCT

TGGTACCAGCAGAAACCAGGTCAGCCTCCTAAGCTGCTCATTTACTGGGCATCTACCCGG

GAATCCGGGGTCCCTGACCGGTTCAGCGGCAGCGGGTCTGGGACAGATTTCACTCTCACC

ATCAGCAGCCTGCAGGCTGAAGATGTGGCAGTTTATTACTGTCAGCAATATTATAGTACT

CCTCCGACATTCGGCCAAGGGACCAAGGTGGAAATCAAA

[000226] АМИНОКИСЛОТНАЯ (SEQ ID NO:96)

DIVMTQSPDSLAVSLGGRATINCKSSQSILSSSNNKNYLAWYQQKPGQPPKLLIYWASTR

ESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQYYSTPPTFGQGTKVEIK

Пример 25: Код антитела: 3-1F4

VH

[000227] ДНК (SEQ ID NO:97)

GAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGTCCTCGGTGAAGGTC

TCCTGCAAGGCTTCTGGAGGCACCTTCAGCAGCTATGCTATCAGCTGGGTGCGACAGGCC

CCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGAGGGATCATCCCTATCTTTGGTACAGCAAACTAC

GCACAGAAGTTCCAGGGCAGAGTCACGATTACCGCGGACGAATCCACGAGCACAGCCTAC

ATGGAGCTGAGCAGCCTGAGATCTGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCGAGGGCCCCT

CGAGGGCAGTGGCTGGTTCACTACTTTGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTC

TCCTCA

[000228] АМИНОКИСЛОТНАЯ (SEQ ID NO:98)

EVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGGIIPIFGTANY

AQKFQGRVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARAPRGQWLVHYFDYWGQGTLVTV

SS

VL

[000229] ДНК (SEQ ID NO:99)

GAAATTGTGTTGACGCAGTCTCCAGCCACCCTCTCTCTGTCTCCAGGGGAAAGAGCCACC

CTCTCCTGCTGGGCCAGTCAGGATGTTAGCAACTACTTAGCCTGGTACCAACAGAAGCCT

GGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATGATGCATCCAACAGGGCCACTGGCATCCCAGCC

AGGTTCAGCGGCAGTGGGTCTGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTAGAGCCT

GAAGATTTTGCAGTGTATTACTGTCAGCAACGTAGCAACTGGCCTCTCACTTTCGGCGGC

GGGACCAAGGTGGAGCTCAAA

[000230] АМИНОКИСЛОТНАЯ (SEQ ID NO:100)

EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCWASQDVSNYLAWYQQKPGQAPRLLIYDASNRATGIPA

RFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSNWPLTFGGGTKVELK

Пример 26: Код антитела: 4-1B3

VH

[000232] ДНК (SEQ ID NO:101)

CAGGTTCAGCTGGTGCAGTCTGGAGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTC

TCCTGCAAGGCTTCTGGTTACACCTTTACCAGCTATGGTATCAGCTGGGTGCGACAGGCC

CCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGATGGATCAGCGCTTACAATGGTAACACAAACTAT

GCACAGAAGCTCCAGGGCAGAGTCACCATGACCACAGACACATCCACGAGCACAGCCTAC

ATGGAGCTGAGGAGCCTGAGATCTGACGACACGGCCGTGTATTACTGTGCGAGAGAGTCC

TACTCGTCCGCAGGTATTGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCA

[000232] АМИНОКИСЛОТНАЯ (SEQ ID NO:102)

QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSYGISWVRQAPGQGLEWMGWISAYNGNTNY

AQKLQGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCARESYSSAGIDYWGQGTLVTVSS

VL

[000233] ДНК (SEQ ID NO:103)

GATATTGTGATGACTCAGTCTCCACTCTCCCTGCCCGTCACCCCTGGAGAGCCGGCCTCC

ATCTCCTGCAGGTCTAGTCAGACCCTCCTGCATAGTAATGGATTCAACTATTTGGATTGG

TACCTGCAGAAGCCAGGGCAGTCTCCACAACTCCTGATGTATTTGGGCTCTAGCCGGGCC

TCCGGGGTCCCTGACAGGTTCAGTGGCAGTGGATCGGGCACAGATTTCACACTGAAAATC

AGCAGAGTGGAGGCTGAGGATGTTGGGGTTTATTACTGCATGCAAACTCTACAAACTCCT

CCGGCTTTCGGCGGAGGGACCAAGGTGGAGATCAAA

[000234] АМИНОКИСЛОТНАЯ (SEQ ID NO:104)

DIVMTQSPLSLPVTPGEPASISCRSSQTLLHSNGFNYLDWYLQKPGQSPQLLMYLGSSRA

SGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCMQTLQTPPAFGGGTKVEIK

Пример 27: Код антитела: 21-G1

VH

[000235] ДНК (SEQ ID NO:105)

CAGGTCCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGGCCTCAGTGACGATT

TCCTGCGAGGCGTCTGGATACAACTTCATCAGCTACTATATACACTGGGTGCGACAGGCC

CCTGGACAAGGCCTTGAGTGGATGGGATTCGTCGTCCCTAGTGGTGGTGCCGCAGGCTAC

ACACAGAAGTTCCAGGGCAGACTCACCGTGACCAGGGACACGTCCACGAGCACAGTCTAC

ATGGACCTGAACAGCCTGACATCTGACGACACGGCCGTGTATTACTGTGTGCGAGAAATG

AGTGGTGGCTGGTTTGATTTCTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCG

[000236] АМИНОКИСЛОТНАЯ (SEQ ID NO:106)

QVQLVQSGAEVKKPGASVTISCEASGYNFISYYIHWVRQAPGQGLEWMGFVVPSGGAAGY

TQKFQGRLTVTRDTSTSTVYMDLNSLTSDDTAVYYCVREMSGGWFDFWGQGTLVTVSS

VL

[000237] ДНК (SEQ ID NO:107)

GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACC

ATCACTTGCCGGGCAAGTCAGAGCATTAGCAGCTATTTAAATTGGTATCAGCAGAAACCA

GGGAAAGCCCCTAAGCTCCTGATCTATGCTGCATCCAGTTTGCAAAGTGGGGTCCCATCA

AGGTTCAGTGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAGTCTGCAACCT

GAAGATTTTGCAACTTACTACTGTCAACAGAGTTACAGTACCCCGATCACCTTCGGCCAA

GGGACACGACTGGAGATTAAA

[000238] АМИНОКИСЛОТНАЯ (SEQ ID NO:108)

DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQSYSTPITFGQGTRLEIK

[000239] Для специалистов в данной области техники будет очевидно, что в настоящее изобретение могут быть внесены различные модификации и изменения, не выходящие за рамки объема или сущности изобретения. Другие варианты реализации изобретения будут очевидны для специалистов в данной области техники после изучения описания и практической реализации изобретения, раскрытого в настоящем документе. Предполагается, что настоящее описание и примеры являются исключительно иллюстративными, а истинные объем и сущность изобретения определены приведенной ниже формулой изобретения.

[000240] В тексте настоящей заявки приведены ссылки на различные публикации, патенты и/или патентные заявки для более полного описания уровня техники, к которой относится настоящее изобретение. Содержание этих публикаций, патентов и/или патентных заявок включено в настоящий документ посредством ссылок полностью в той же степени, как если бы каждая независимая публикация, патент и/или патентная заявка были конкретно и индивидуально указаны как включенные посредством ссылки.

--->

ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ

<110> 1GLOBE BIOMEDICAL CO., LTD./ 1ГЛОБ БИОМЕДИКАЛ КО., ЛТД.

1GLOBE HEALTH INSTITUTE LLC/ 1ГЛОБ ХЕЛС ИНСТИТЬЮТ ЛЛС

LI, Chiang J./ ЛИ, Чан Дж.

UNNIRAMAN, Shyam/ УННИРАМАН, Шьям

BADER, Hannah/ БЕЙДЕР, Ханна

JHA, Mithilesh/ ДЖА, Митилеш

<120> НОВЫЕ КОМПОЗИЦИИ АНТИТЕЛ ДЛЯ ИММУНОТЕРАПИИ РАКА

<130> PI19033299

<140> PCT/CN 2019/101659

<141> 2019-08-20

<150> US 62/720015

<151> 2018-08-20

<160> 108

<170> PatentIn, версия 3.5

<210> 1

<211> 357

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 4-1A2 VH

<400> 1

caggttcagc tggtgcagtc tgggactgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtc 60

tcctgcaagg cttctggata caccttcacc agttatgata tcaactgggt gcgacaggcc 120

actggacaag ggcttgagtg gatgggatgg atcaacccta acagtggtgg cacaaactat 180

gcacagaagt ttcagggcag ggtcaccatg accacagaca cttctacggg cacagcctac 240

atggagctga ggagcctgag atctgacgac acggccgtgt attactgtgc gagattttta 300

tggggttcgg ggagttatga ctactggggc cagggaaccc tggtcaccgt ctcctca 357

<210> 2

<211> 119

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 4-1A2 VH

<400> 2

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Thr Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

20 25 30

Asp Ile Asn Trp Val Arg Gln Ala Thr Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Trp Ile Asn Pro Asn Ser Gly Gly Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Gly Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Phe Leu Trp Gly Ser Gly Ser Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

100 105 110

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 3

<211> 321

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 4-1A2 VL

<400> 3

gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60

atcacttgcc gggcaagtca gagcattagc agctatttaa attggtatca gcagaaacca 120

gggaaagccc ctaagctcct gatctatgct gcatccagtt tgcaaagtgg ggtcccatca 180

aggttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240

gaagatttcg caacttacta ctgtcaacag acttacacat tcccgcacac ttttgcccag 300

gggaccaacc tggagatcaa a 321

<210> 4

<211> 107

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 4-1A2 VL

<400> 4

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Thr Tyr Thr Phe Pro His

85 90 95

Thr Phe Ala Gln Gly Thr Asn Leu Glu Ile Lys

100 105

<210> 5

<211> 360

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 4-1A12 VH

<400> 5

caagtccagc tggtacaatc tggagctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtc 60

tcctgcaagg cttctggtta cacctttacc agctatggta tcagctgggt gcgacaggcc 120

cctggacaag ggcttgagtg gatgggatgg atcagcgctt acaatggtaa cacaaactat 180

gcacagaagc tccagggcag agtcaccatg accacagaca catccacgag cacagcctac 240

atggagctga ggagcctgag atctgacgac acggccgtgt attactgtgc gagagattgg 300

atacagctat ggttacccct tgactactgg ggccagggaa ccctggtcac cgtctcctca 360

<210> 6

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 4-1A12 VH

<400> 6

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

20 25 30

Gly Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Trp Ile Ser Ala Tyr Asn Gly Asn Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Leu

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Asp Trp Ile Gln Leu Trp Leu Pro Leu Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 7

<211> 321

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 4-1A12 VL

<400> 7

gacatccagt tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60

atcacttgcc gggcaagtca gagcattagc agctatttaa attggtatca acagaaacca 120

gggaaagccc ctaagctcct gatctatggt gcatccagtt tggaaagtgg ggtcccatca 180

aggttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240

gaagattttg caacttacta ctgtcaacag agtcacagtt cccccctcac tttcggcgga 300

gggaccaagg tggacatcaa a 321

<210> 8

<211> 107

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 4-1A12 VL

<400> 8

Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Gly Ala Ser Ser Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser His Ser Ser Pro Leu

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys

100 105

<210> 9

<211> 387

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 4-1B9 VH

<400> 9

gaagtgcagc tggtgcagtc tgggggaggc ttggtccagc ctgggaggtc cctgagactc 60

tcctgtgcag cctctggatt caccttcagt agctatggca tgcactgggt ccgccaggct 120

ccaggcaagg ggctggagtg ggtggcagtt atatcatatg atggaagtaa taaatactat 180

gcagactccg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240

ctgcaaatga acagcctgag agctgaggac acggctgtgt attactgtgc gaaagatttg 300

atcccgttgc gagatagtag gggggggtac tactacggta tggacgtctg gggccaaggg 360

accacggtca ccgtctcctc agggagt 387

<210> 10

<211> 127

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 4-1B9 VH

<400> 10

Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr

20 25 30

Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Lys Asp Leu Ile Pro Leu Arg Asp Ser Arg Gly Gly Tyr Tyr Tyr

100 105 110

Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

115 120 125

<210> 11

<211> 324

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 4-1B9 VL

<400> 11

tcttctgagc tgactcagga ccctgctgtg tctgtggcct tgggacagac agtcaggatc 60

acatgccaag gagacagcct cagagactat tatgcaagct ggtaccagca gaagccagga 120

caggcccctg tacttgtcat ctatggtaaa aacaaccggc cctcaggaat cccagaccga 180

ttctctggct ccagctcagg aaacacagct tccttgacca tcactgggac tcaggcggaa 240

gatgaggctg actattactg taactcccgt gacagcggtg cttaccatta tgtcttcgga 300

actgggacca aggtcaccgt ccta 324

<210> 12

<211> 108

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 4-1B9 VL

<400> 12

Ser Ser Glu Leu Thr Gln Asp Pro Ala Val Ser Val Ala Leu Gly Gln

1 5 10 15

Thr Val Arg Ile Thr Cys Gln Gly Asp Ser Leu Arg Asp Tyr Tyr Ala

20 25 30

Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Val Leu Val Ile Tyr

35 40 45

Gly Lys Asn Asn Arg Pro Ser Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Ser Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Thr Gly Thr Gln Ala Glu

65 70 75 80

Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Asn Ser Arg Asp Ser Gly Ala Tyr His

85 90 95

Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu

100 105

<210> 13

<211> 360

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 4-1B12 VH

<400> 13

caaatccagc tggtgcagtc tgggggaggc gtggtccagc ctgggaggtc cctgagactc 60

tcctgtgcag cctctggatt caccttcagt agctatggca tgcactgggt ccgccaggct 120

ccaggcaagg ggctggagtg ggtggcagtt atatcatatg atggaagtaa taaatactat 180

gcagactccg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240

ctgcaaatga acagcctgag agctgaggac acggctgtgt attactgtgc gaaaggaagt 300

attatagggg atggtgcttt tgatatctgg ggccaaggga caatggtcac cgtctcttca 360

<210> 14

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 4-1B12 VH

<400> 14

Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr

20 25 30

Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Lys Gly Ser Ile Ile Gly Asp Gly Ala Phe Asp Ile Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 15

<211> 333

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 4-1B12 VL

<400> 15

gatattgtga tgacccagtc tccactctcc ctgcccgtca cccttggaga gccggcctcc 60

atctcctgca ggtctagtca gaccctcctg cataatggat tcaacttttt ggattggtac 120

ctgcagaagc cagggcagtc tccacaactc ctgatgtatt tggcctctag ccgggcctcc 180

ggggtccctg acaggttcag tggcagtgga tcgggcacag atttcacact gaaaatcagc 240

agagtggagg ctgaggatgt tggggtttat tactgcatgc aaggtacaca ctggccgtac 300

acttttggcc aggggaccaa gctggatatc aaa 333

<210> 16

<211> 111

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 4-1B12 VL

<400> 16

Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Leu Gly

1 5 10 15

Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Thr Leu Leu His Asn

20 25 30

Gly Phe Asn Phe Leu Asp Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro

35 40 45

Gln Leu Leu Met Tyr Leu Ala Ser Ser Arg Ala Ser Gly Val Pro Asp

50 55 60

Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile Ser

65 70 75 80

Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Met Gln Gly Thr

85 90 95

His Trp Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Asp Ile Lys

100 105 110

<210> 17

<211> 354

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 4-1E8 VH

<400> 17

caaatccagc tggtacaatc tggggctgag gtgaagatgc ctggggcctc agtgacgatt 60

tcctgcgagg cgtctggata caacttcatc agctactata tacactgggt gcgacaggcc 120

cctggacaag gccttgagtg gatgggattc gtcgtcccta gtggtggtgc cgcaggctac 180

acacagaagt tccagggcag actcaccgtg accagggaca cgtccacgag cacagtctac 240

atggacctga acagcctgac atctgacgac acggccgtgt attactgtgt gcgagaaatg 300

agtggtggct ggtttgattt ctggggccag ggaaccctgg tcaccgtctc ctcg 354

<210> 18

<211> 118

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 4-1E8 VH

<400> 18

Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Met Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Thr Ile Ser Cys Glu Ala Ser Gly Tyr Asn Phe Ile Ser Tyr

20 25 30

Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Phe Val Val Pro Ser Gly Gly Ala Ala Gly Tyr Thr Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Leu Thr Val Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr

65 70 75 80

Met Asp Leu Asn Ser Leu Thr Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Val Arg Glu Met Ser Gly Gly Trp Phe Asp Phe Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 19

<211> 321

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 4-1E8 VL

<400> 19

gacatcgtga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60

atcacttgcc gggcaagtca gggcattaga aatgatttag gctggtatca gcaaaaacca 120

gggaaagccc ctaagctcct gatctatgct gcatccactt tgcaaagtgg ggtcccatca 180

aggttcagcg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag cctgcaggct 240

gaagatgtgg cagtttatta ctgtcagcaa tattatagta ctcctctcac tttcggccct 300

gggaccaaag tggatatcaa a 321

<210> 20

<211> 107

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 4-1E8 VL

<400> 20

Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Asn Asp

20 25 30

Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Ala Ala Ser Thr Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ala

65 70 75 80

Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Tyr Ser Thr Pro Leu

85 90 95

Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys

100 105

<210> 21

<211> 366

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 4-1G7 VH

<400> 21

gaggtgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60

tcctgcaagg cttctggtta cacctttacc agctatggta tcagctgggt gcgacaggcc 120

cctggacaag ggcttgagtg gatgggatgg atcagcgctt acaatggtaa cacaaactat 180

gcacagaagc tccagggcag agtcaccatg accacagaca catccacgag cacagcctac 240

atggagctga ggagcctgag atctgacgac acggccgtgt attactgtgc gagagcctca 300

ccggtacagc agcccatatg gtgggcggag tactggggcc agggaaccct ggtcaccgtc 360

tcctca 366

<210> 22

<211> 122

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 4-1G7 VH

<400> 22

Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

20 25 30

Gly Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Trp Ile Ser Ala Tyr Asn Gly Asn Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Leu

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ala Ser Pro Val Gln Gln Pro Ile Trp Trp Ala Glu Tyr Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 23

<211> 330

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 4-1G7 VL

<400> 23

cagtctgccc tgactcagcc tgcctccgtg tctgggtctc ctggacagtc gatcaccatc 60

tcctgcactg gaaccagcag tgacgttggt ggttataact atgtctcctg gtaccaacag 120

cacccaggca aagcccccaa actcatgatt tctgatgtca gtaagcggcc ctcaggggtt 180

tctaatcgct tctctggctc caagtctggc aacacggcct ccctgaccat ctctgggctc 240

caggctgagg acgaggctga ttattactgc agctcatata caagcaacta cactttggta 300

ttcggcggag ggaccaagct gaccgtccta 330

<210> 24

<211> 110

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 4-1G7 VL

<400> 24

Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln

1 5 10 15

Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr

20 25 30

Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu

35 40 45

Met Ile Ser Asp Val Ser Lys Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe

50 55 60

Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu

65 70 75 80

Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Asn

85 90 95

Tyr Thr Leu Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu

100 105 110

<210> 25

<211> 366

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 4-1H10 VH

<400> 25

cagctgcagc tacagcagtc cggagctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60

tcctgcaagg ctcctggagg caccttcagc agctatgcta tcagctgggt gcgacaggcc 120

cctggacaag ggcttgagtg gatgggaagg atcatcccta tccttggtat agcaaactac 180

gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggaca aatccacgag cacagcctac 240

atggagctga gcagcctgag atctgaagac acggccgtgt attactgtgc gagtcatggt 300

cgggcagcag ctggtaggta cgctatggac gtctggggcc aagggaccac ggtcaccgtc 360

tcctca 366

<210> 26

<211> 122

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 4-1H10 VH

<400> 26

Gln Leu Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Pro Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr

20 25 30

Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Arg Ile Ile Pro Ile Leu Gly Ile Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Ser His Gly Arg Ala Ala Ala Gly Arg Tyr Ala Met Asp Val Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 27

<211> 330

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 4-1H10 VL

<400> 27

aattttatgc tgactcagcc ccactctgtg tcggattctc cggggaagac ggtaaccatc 60

tcctgcaccc gcagcagtgg cagcattgcc agcaactatg tgcagtggta ccagcagcgc 120

ccgggcagtg cccccaccac tgtgatctat gacgataagc aaagaccctc tggggtccct 180

gatcggttct cgggctccat cgacagctcc tccaactctg cctccctcac catctctgga 240

ctgacgactg aggacgaggc tgactactac tgtcagtcct ttgatggcag cagtgtcatc 300

ttcggcggag ggaccaagct gaccgtcctg 330

<210> 28

<211> 110

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 4-1H10 VL

<400> 28

Asn Phe Met Leu Thr Gln Pro His Ser Val Ser Asp Ser Pro Gly Lys

1 5 10 15

Thr Val Thr Ile Ser Cys Thr Arg Ser Ser Gly Ser Ile Ala Ser Asn

20 25 30

Tyr Val Gln Trp Tyr Gln Gln Arg Pro Gly Ser Ala Pro Thr Thr Val

35 40 45

Ile Tyr Asp Asp Lys Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser

50 55 60

Gly Ser Ile Asp Ser Ser Ser Asn Ser Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly

65 70 75 80

Leu Thr Thr Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Phe Asp Gly

85 90 95

Ser Ser Val Ile Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu

100 105 110

<210> 29

<211> 375

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 3-1H2 VH

<400> 29

caggttcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60

tcctgcaagg cttctggagg caccttcagc agctatgcta tcagctgggt gcgacaggcc 120

cctggacaag ggcttgagtg gatgggaggg atcatcccta tctttggtac agcaaactac 180

gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg aatccacgag cacagcctac 240

atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gagaaaggag 300

cgtttctatg atagtagtgg ttattacgat gcttttgata tctggggcca agggacaatg 360

gtcaccgtct cttca 375

<210> 30

<211> 125

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 3-1H2 VH

<400> 30

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr

20 25 30

Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Gly Ile Ile Pro Ile Phe Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Lys Glu Arg Phe Tyr Asp Ser Ser Gly Tyr Tyr Asp Ala Phe

100 105 110

Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser

115 120 125

<210> 31

<211> 330

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 3-1H2 VL

<400> 31

cagtctgccc tgactcagcc tcgctcagtg tccgggtctc ctgggcagtc agtcaccatc 60

tcctgcactg gaaccagcaa tgatgttggt ggttataact atgtctcctg gtaccaacag 120

cacccaggca aagcccccaa actcatgatt tatgatgtca ctaagcggcc ctcaggggtc 180

cctgatcgct tctctggctc caagtctggc aacacggcct ccctgaccgt ctctggcctc 240

cagcctgagg atgaggctga ctattattgc gcctcttatg gaggcaggaa caatttgctt 300

tttggcggag ggactcaact gaccgtctta 330

<210> 32

<211> 110

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 3-1H2 VL

<400> 32

Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Arg Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln

1 5 10 15

Ser Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Asn Asp Val Gly Gly Tyr

20 25 30

Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu

35 40 45

Met Ile Tyr Asp Val Thr Lys Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe

50 55 60

Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Val Ser Gly Leu

65 70 75 80

Gln Pro Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ser Tyr Gly Gly Arg

85 90 95

Asn Asn Leu Leu Phe Gly Gly Gly Thr Gln Leu Thr Val Leu

100 105 110

<210> 33

<211> 354

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 3-1E4 VH

<400> 33

caaatccagc tggtacaatc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60

tcctgcaagg cttctggagg caccttcagc agctatgcta tcagctgggt gcgacaggcc 120

cctggacaag ggcttgagtg gatgggaggg atcatcccta tctttggtac agcaaactac 180

gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggaca aatccacgag cacagcctac 240

atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc cggaggggga 300

gcagtggcgg acaatagtta ctggggccag ggaaccctgg tcaccgtctc ctca 354

<210> 34

<211> 118

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 3-1E4 VH

<400> 34

Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr

20 25 30

Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Gly Ile Ile Pro Ile Phe Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Gly Gly Gly Ala Val Ala Asp Asn Ser Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 35

<211> 321

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 3-1E4 VL

<400> 35

gacatccgga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60

atcacttgcc gggcaagtca gggcattaga aatgatttag gctggtatca gcagaaacca 120

gggaaagccc ctaagctcct gatctatgct gcatccagtt tacaaagtgg ggtcccatca 180

aggttcagcg gcagtggatc tggcacagat ttcactctca ccatcagcag cctgcagcct 240

gaagattttg caacttatta ctgtctacaa gattacaatt accctcgaac gttcggccaa 300

gggaccaagg tggaaatcaa a 321

<210> 36

<211> 107

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 3-1E4 VL

<400> 36

Asp Ile Arg Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Asn Asp

20 25 30

Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Asp Tyr Asn Tyr Pro Arg

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210> 37

<211> 366

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 3-1A8 VH

<400> 37

caaatccagc tggtacaatc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60

tcctgcaagg cttctggagg caccttcagc agctatgcta tcagctgggt gcgacaggcc 120

cctggacaag ggcttgagtg gatgggaggg atcatcccta tctttggtac agcaaactac 180

gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg aatccacgag cacggcctac 240

atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gagagacggt 300

tcgtatagca gcagctggta ctcgtttgac tactggggcc agggaaccct ggtcaccgtc 360

tcctca 366

<210> 38

<211> 122

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 3-1A8 VH

<400> 38

Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr

20 25 30

Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Gly Ile Ile Pro Ile Phe Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Asp Gly Ser Tyr Ser Ser Ser Trp Tyr Ser Phe Asp Tyr Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 39

<211> 333

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 3-1A8 VL

<400> 39

cagtctgccc tgactcagcc tgcctccgtg tctgggtctc ctggacagtc gatcaccatc 60

tcctgcactg gaaccagcag tgacgtcggt ggttataact atgtctcctg gtaccaacag 120

cacccaggca aagcccccaa actcatgatt tatgatgtca gtaatcggcc ctcaggggtt 180

tctaatcgct tctctggctc caagtctggc aacacggcct ccctgaccat ctctgggctc 240

caggctgagg acgaggctga ttattactgc tcctcatatg caggtgatat tagttatgta 300

ctgttcggcg gcgggaccaa gctgaccgtc cta 333

<210> 40

<211> 111

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 3-1A8 VL

<400> 40

Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln

1 5 10 15

Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr

20 25 30

Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu

35 40 45

Met Ile Tyr Asp Val Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe

50 55 60

Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu

65 70 75 80

Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Ala Gly Asp

85 90 95

Ile Ser Tyr Val Leu Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu

100 105 110

<210> 41

<211> 351

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 3-1B11 VH

<400> 41

gaagtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggagggtc cctgagactc 60

tcctgtgcag cctctggatt cacttttagt gactatgaca tgatctgggt ccgccaggct 120

ccaggcaagg ggctggagtg ggtggcagtt atatcatatg atggaagtaa taaatactat 180

gcagactccg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240

ctgcaaatga acagcctgag agctgaggac acggctgtgt attactgtgc gaaagagttc 300

tttggtgctt ttgatatctg gggccaaggg acaatggtca ccgtctcttc a 351

<210> 42

<211> 117

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 3-1B11 VH

<400> 42

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr

20 25 30

Asp Met Ile Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Lys Glu Phe Phe Gly Ala Phe Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr Met

100 105 110

Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 43

<211> 324

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 3-1B11 VL

<400> 43

tcttctgagc tgactcagga ccctgctgtg tcggtggcct tgggacagac agtcacgatc 60

acatgccaag gagacagcct caattactat tatgcaaact ggttccagct gaagccaggg 120

caggcccctg tacttgtcct ctttggtaaa aacaaccggc cctcagggat cccagaccga 180

ttctctggct cctactcggg aagcacagct tccttgacca tcactggggc tcaggcggaa 240

gatgacgctg actattactg taattcgcgg gacagcggtg gtaatccttg ggtgttcggc 300

ggagggacca agctgaccgt ccta 324

<210> 44

<211> 108

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 3-1B11 VL

<400> 44

Ser Ser Glu Leu Thr Gln Asp Pro Ala Val Ser Val Ala Leu Gly Gln

1 5 10 15

Thr Val Thr Ile Thr Cys Gln Gly Asp Ser Leu Asn Tyr Tyr Tyr Ala

20 25 30

Asn Trp Phe Gln Leu Lys Pro Gly Gln Ala Pro Val Leu Val Leu Phe

35 40 45

Gly Lys Asn Asn Arg Pro Ser Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Tyr Ser Gly Ser Thr Ala Ser Leu Thr Ile Thr Gly Ala Gln Ala Glu

65 70 75 80

Asp Asp Ala Asp Tyr Tyr Cys Asn Ser Arg Asp Ser Gly Gly Asn Pro

85 90 95

Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu

100 105

<210> 45

<211> 357

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 4-1F3 VH

<400> 45

caaatccagc tggtacaatc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60

tcctgcaagg cttctggagg caccttcagc agctatgcta tcagctgggt gcgacaggcc 120

cctggacaag ggcttgagtg gatgggaagg atcatcccta tccttggtat agcagactac 180

gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggaca aatccacgag cacagcctac 240

atggaactga gtagcctggg atctgaggac acggccgtgt atttttgtgc gagagagggg 300

ggatccttta ggcactttga cttctggggc cagggaaccc tggtcaccgt ctcctca 357

<210> 46

<211> 119

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 4-1F3 VH

<400> 46

Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr

20 25 30

Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Arg Ile Ile Pro Ile Leu Gly Ile Ala Asp Tyr Ala Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Gly Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys

85 90 95

Ala Arg Glu Gly Gly Ser Phe Arg His Phe Asp Phe Trp Gly Gln Gly

100 105 110

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 47

<211> 333

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 4-1F3 VL

<400> 47

cagcctgtgc tgactcagcc accctcagtc tctggggccc cagggcagag ggtcaccatc 60

tcctgcgctg ggagcgaccc caacatcggg acaggtcatg atgtgcactg gtaccagcaa 120

cttccaggaa cagcccccaa actcgtcatc tatggtaaca ccaatcggcc ctcaggggtc 180

cctgagcgat tcactgcctc caagtctggc acctcagcct ccctggccat cactgggctc 240

caggctgagg atgaggctga ttattactgc caggcctacg acaggagcct gcgtggttat 300

gtcttcggga ctgggaccaa ggtcaccgtc ctg 333

<210> 48

<211> 111

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 4-1F3 VL

<400> 48

Gln Pro Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Ala Gly Ser Asp Pro Asn Ile Gly Thr Gly

20 25 30

His Asp Val His Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu

35 40 45

Val Ile Tyr Gly Asn Thr Asn Arg Pro Ser Gly Val Pro Glu Arg Phe

50 55 60

Thr Ala Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu

65 70 75 80

Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ala Tyr Asp Arg Ser

85 90 95

Leu Arg Gly Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu

100 105 110

<210> 49

<211> 369

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 4-1G5 VH

<400> 49

caaatccagc tggtacagtc tggtgctgaa gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtc 60

tcctgcaaga cttctggtta cacctttacc agctatggta tcagctgggt gcgacaggcc 120

cctggacaag ggcttgagtg gatgggatgg atcagcgctt acaatggtaa cacaaactat 180

gcacagaagc tccagggcag agtcaccatg accacagaca catccacgag cacagcctac 240

atggagctga ggagcctgag atctgacgac acggccgtgt attactgtgc gagaactaca 300

ggtgacgagt ggctacgatt ggctataaat gactactggg gccagggaac cctggtcacc 360

gtctcctca 369

<210> 50

<211> 123

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 4-1G5 VH

<400> 50

Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Thr Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

20 25 30

Gly Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Trp Ile Ser Ala Tyr Asn Gly Asn Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Leu

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Thr Thr Gly Asp Glu Trp Leu Arg Leu Ala Ile Asn Asp Tyr

100 105 110

Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 51

<211> 336

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 4-1G5 VL

<400> 51

gatattgtga tgacacagtc tcccctctcc ctgcccgtca cccctggaga gccggcctcc 60

atctcctgca ggtctagtct gcgcctcatg catcctaatg gactcaacta tttggattgg 120

tacctgcaga agccagggca gtctccacag ctcctaatct ttttgggttc tcagcgggcc 180

tccggggtcc ctgacaggtt cagtggcagt ggatcaggca cagattttac actgaaaatc 240

agcagagtgg aggctgagga tgttggcatt tattactgca tgcaagctct agaacctccg 300

tacacttttg gccaggggac caagctggag atcaaa 336

<210> 52

<211> 112

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 4-1G5 VL

<400> 52

Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly

1 5 10 15

Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Leu Arg Leu Met His Pro

20 25 30

Asn Gly Leu Asn Tyr Leu Asp Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser

35 40 45

Pro Gln Leu Leu Ile Phe Leu Gly Ser Gln Arg Ala Ser Gly Val Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile

65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Ile Tyr Tyr Cys Met Gln Ala

85 90 95

Leu Glu Pro Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105 110

<210> 53

<211> 372

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 4-1C9 VH

<400> 53

caggtccagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60

tcctgcaagg cttctggagg caccttcagc agctatgcta tcagctgggt gcgacaggcc 120

cctggacaag ggcttgagtg gatgggaggg atcatcccta tctttggtac agcaaactac 180

gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg aatccacgag cacagcctac 240

atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gagagatccc 300

gggtatagca gtggctggaa agatgatgct tttgatatct ggggccaagg gacaatggtc 360

accgtctctt ca 372

<210> 54

<211> 124

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 4-1C9 VH

<400> 54

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr

20 25 30

Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Gly Ile Ile Pro Ile Phe Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Asp Pro Gly Tyr Ser Ser Gly Trp Lys Asp Asp Ala Phe Asp

100 105 110

Ile Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 55

<211> 324

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 4-1C9 VL

<400> 55

gaaattgtga tgacacagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga tacagcctcc 60

ctctcctgca gggccagtca gactgttagc agcaactact tagcctggta ccaacagaaa 120

cctggccagg ctcccaggct cctcatctat gatacatcca acagggccgc tggcatcccg 180

gccaggttca gtggcagtgg gtctgggaca gacttcactc tcaccatcag tagcctagag 240

cctgaagatt ttgcagtgta ttactgtcag cagtacggta gctcactctg gacgttcggc 300

caagggacca aggtggaaat caaa 324

<210> 56

<211> 108

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 4-1C9 VL

<400> 56

Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Asp Thr Ala Ser Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Thr Val Ser Ser Asn

20 25 30

Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu

35 40 45

Ile Tyr Asp Thr Ser Asn Arg Ala Ala Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser

50 55 60

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu

65 70 75 80

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Ser Ser Leu

85 90 95

Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210> 57

<211> 360

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 11-A4 VH

<400> 57

caggtgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60

tcctgcaagg cttctggagg caccttcagc agctatgcta tcagctgggt gcgacaggcc 120

cctggacaag ggcttgagtg gatgggaggg atcatcccta tctttggtac agcaaactac 180

gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg aatccacgag cacagcctac 240

atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gagagcgggg 300

cagcagctgg tagccctttg gtactactgg ggccagggaa ccctggtcac cgtctcctca 360

<210> 58

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 11-A4 VH

<400> 58

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr

20 25 30

Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Gly Ile Ile Pro Ile Phe Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ala Gly Gln Gln Leu Val Ala Leu Trp Tyr Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 59

<211> 330

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 11-A4 VL

<400> 59

cagtctgccc tgactcagcc tccctccgcg tccgggtctc gtggacagtc agtctccatc 60

tcctgcagtg gaagtcgcag tgacattgga tattataact atgtctcctg gtatcaacaa 120

cacccaggca aagcccccaa actcatcatt tttgacgtca ataagcggcc ctcaggggtc 180

cctgatcgct tctctggctc caagtctggc aacacggcct ccctgaccgt ctctggcctc 240

cagcctgagg atgaggctga ctattattgc gcctcttatg gaggcaggaa caatttgctt 300

tttggcggag ggactcaact gaccgtctta 330

<210> 60

<211> 110

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 11-A4 VL

<400> 60

Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Ser Arg Gly Gln

1 5 10 15

Ser Val Ser Ile Ser Cys Ser Gly Ser Arg Ser Asp Ile Gly Tyr Tyr

20 25 30

Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu

35 40 45

Ile Ile Phe Asp Val Asn Lys Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe

50 55 60

Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Val Ser Gly Leu

65 70 75 80

Gln Pro Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ser Tyr Gly Gly Arg

85 90 95

Asn Asn Leu Leu Phe Gly Gly Gly Thr Gln Leu Thr Val Leu

100 105 110

<210> 61

<211> 363

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 21-A1 VH

<400> 61

caggtgcaac tgcaggagtc gggcccagga ctggtggagc cttcggagac cctgtccctc 60

acctgcactg tctctggtgg ctccatcagt agtttctact ggagctggat ccggcagccc 120

ccagggaagg gactggagtg gattggctat atcaattaca gtgggagcac caactacaac 180

ccctccctca agagtcgagt caccatatca gtagacacgt ccaagaacca gttctccctg 240

aagctgagct ctgtgaccgc cgcagacacg gctgtgtatt actgtgcgag acagatatta 300

tggttcgggg agttaaggtg gttcgacccc tggggccagg gaaccctggt caccgtctcc 360

tca 363

<210> 62

<211> 121

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 21-A1 VH

<400> 62

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Glu Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Phe

20 25 30

Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Tyr Ile Asn Tyr Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys

50 55 60

Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu

65 70 75 80

Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Arg Gln Ile Leu Trp Phe Gly Glu Leu Arg Trp Phe Asp Pro Trp Gly

100 105 110

Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 63

<211> 330

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 21-A1 VL

<400> 63

cagtctgccc tgactcagcc tccctccgcg tccgggtctc ctggacagtc agtcaccatc 60

tcctgcactg gaaccagcag tgacattggt ggttataact atgtctcctg gtaccaactg 120

cgcccaggca aagcccccaa actcatgatt tatgacgtca ccaagcggcc ctcaggggtc 180

cctgatcgct tctctggctc caagtctggc aacacggcct ccctgaccgt ctctgggctc 240

caggctgagg atgaggctga ttattactgc agctcatatg caggcagcaa caatgtggta 300

ttcggcggag ggaccaagct gaccgtccta 330

<210> 64

<211> 110

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 21-A1 VL

<400> 64

Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Ser Pro Gly Gln

1 5 10 15

Ser Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Ile Gly Gly Tyr

20 25 30

Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Leu Arg Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu

35 40 45

Met Ile Tyr Asp Val Thr Lys Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe

50 55 60

Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Val Ser Gly Leu

65 70 75 80

Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Ala Gly Ser

85 90 95

Asn Asn Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu

100 105 110

<210> 65

<211> 357

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 21-H12 VH

<400> 65

caagtccagc tggtacagtc tggggctgag gtgaagaagc ctggggcctc ggtgaaggtc 60

tcctgcaagg cttctggagg caccttcagc agctatgcta tcagctgggt gcgacaggcc 120

cctggacaag ggcttgagtg gatgggaggg atcatcccta tctttggtac agcaaactac 180

gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg aatccacgag cacagcctac 240

atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gagaaatccc 300

tacggtttca actggttcga cccctggggc cagggaaccc tggtcaccgt ctcctca 357

<210> 66

<211> 119

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 21-H12 VH

<400> 66

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr

20 25 30

Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Gly Ile Ile Pro Ile Phe Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Asn Pro Tyr Gly Phe Asn Trp Phe Asp Pro Trp Gly Gln Gly

100 105 110

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 67

<211> 330

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 21-H12 VL

<400> 67

aattttatgc tgactcagcc ccactctgtg tcggagtctc cggggaagac ggtaaccatc 60

tcctgcaccc gcagcagtgg cagcattgcc agcaactatg tgcagtggta ccagcagcgc 120

ccgggcagtg cccccaccac tgtgatctat gaggataacc aaagaccctc tggggtccct 180

gatcggttct ctggctccat cgacagctcc tccaactctg cctccctcac catctccgga 240

ctgaagactg aggacgaggc tgactactac tgtcagtctt atgatggctt caatcaggtg 300

ttcggcggag ggaccaagct gaccgtccta 330

<210> 68

<211> 110

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 21-H12 VL

<400> 68

Asn Phe Met Leu Thr Gln Pro His Ser Val Ser Glu Ser Pro Gly Lys

1 5 10 15

Thr Val Thr Ile Ser Cys Thr Arg Ser Ser Gly Ser Ile Ala Ser Asn

20 25 30

Tyr Val Gln Trp Tyr Gln Gln Arg Pro Gly Ser Ala Pro Thr Thr Val

35 40 45

Ile Tyr Glu Asp Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser

50 55 60

Gly Ser Ile Asp Ser Ser Ser Asn Ser Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly

65 70 75 80

Leu Lys Thr Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Gly

85 90 95

Phe Asn Gln Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu

100 105 110

<210> 69

<211> 372

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 7-D12 VH

<400> 69

caaatgcagc tggtacagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60

tcctgcaagg cttctggagg caccttcagc agctatgcta tcagctgggt gcgacaggcc 120

cctggacaag ggcttgagtg gatgggaggg atcatcccta tctttggtac agcaaactac 180

gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggaca aatccacgag cacagcctac 240

atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gagaaccggt 300

agtagtggtt atgtacgttg gagcaactgg ttcgacccct ggggccaggg aaccctggtc 360

accgtctcct ca 372

<210> 70

<211> 124

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 7-D12 VH

<400> 70

Gln Met Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr

20 25 30

Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Gly Ile Ile Pro Ile Phe Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Thr Gly Ser Ser Gly Tyr Val Arg Trp Ser Asn Trp Phe Asp

100 105 110

Pro Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 71

<211> 321

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 7-D12 VL

<400> 71

gacatccaga tgacccagtc tccctccacc ctgtctgcat ttgtaggaga cagagtcacc 60

atcacttgcc gggccagtga gagtattagt aggtggttgg cctggtatca gcagaaacca 120

gggaaagccc ctaaactcct aatctctaag acgtctaatt tagaaagcgg ggtcccgtca 180

aggttcagtg gcgctggatc tgggacagat ttcactctca ccattagcag tctgcaacct 240

gaggattttg caacttactt ctgtcaacag ggttccaaaa tgcctccgac tttcggcgga 300

gggaccaagg tggagatcaa g 321

<210> 72

<211> 107

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 7-D12 VL

<400> 72

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Phe Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Glu Ser Ile Ser Arg Trp

20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Ser Lys Thr Ser Asn Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ala Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Ser Lys Met Pro Pro

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210> 73

<211> 360

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 9-E3 VH

<400> 73

caggtgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60

tcctgcaagg cttctggagg caccttcagc agctatgcta tcagctgggt gcgacaggcc 120

cctggacaag ggcttgagtg gatgggaggg atcatcccta tctttggtac agcaaactac 180

gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg aatccacgag cacagcctac 240

atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gagaggggcc 300

tacggtggta actccgcttt tgactactgg ggccagggaa ccctggtcac cgtctcctca 360

<210> 74

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 9-E3 VH

<400> 74

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr

20 25 30

Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Gly Ile Ile Pro Ile Phe Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Gly Ala Tyr Gly Gly Asn Ser Ala Phe Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 75

<211> 333

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 9-E3 VL

<400> 75

cagtctgtgc tgacgcagcc gccctcagtg tctggggccc cagggcagag ggtcaccatc 60

tcctgcactg ggagcagctc caacatcggg gcaggttatg atgtacactg gtaccagcag 120

cttccaggaa cagcccccaa actcctcatg tacagtaatg atcagcggcc ctcaggggtc 180

actgagcgat tctctggctc caagtctggc acctcagcct ccctggccat cagtgggctc 240

cagtctgaag atgagggtga ttactactgc cagtcctatg acagaagcct gagaggttcg 300

gtcttcggcg gagggaccaa gctgaccgtc ctc 333

<210> 76

<211> 111

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 9-E3 VL

<400> 76

Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly

20 25 30

Tyr Asp Val His Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu

35 40 45

Leu Met Tyr Ser Asn Asp Gln Arg Pro Ser Gly Val Thr Glu Arg Phe

50 55 60

Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu

65 70 75 80

Gln Ser Glu Asp Glu Gly Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Arg Ser

85 90 95

Leu Arg Gly Ser Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu

100 105 110

<210> 77

<211> 363

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 10-A6 VH

<400> 77

gaggtgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtt 60

tcctgcaagg cttctggtta cacctttacc agctatggta tcagctgggt gcgacaggcc 120

cctggacaag ggcttgagtg gatgggatgg atcagcgctt acaatggtaa cacaaactat 180

gcacagaagc tccagggcag agtcaccatg accacagaca catccacgag cacagcctac 240

atggagctga ggagcctgag atctgacgac acggccgtgt attactgtgc gagagattcc 300

atagcagcag ctggtactcc gttcgactac tggggccagg gaaccctggt caccgtctcc 360

tca 363

<210> 78

<211> 121

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 10-A6 VH

<400> 78

Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

20 25 30

Gly Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Trp Ile Ser Ala Tyr Asn Gly Asn Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Leu

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Asp Ser Ile Ala Ala Ala Gly Thr Pro Phe Asp Tyr Trp Gly

100 105 110

Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 79

<211> 330

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 10-A6 VL

<400> 79

aattttatgc tgactcagcc ccactctgtg tcggagtctc cggggaagac ggtcaccatc 60

tcctgcaccc gcagcagtgg catcattgcc agcaaatatg tgcactggta ccagcagcgc 120

ccgggcagtg cccccaccac tgtgatctat gaggataacc aaagaccgtc tggggtccct 180

gatcgattct ctggctccat cgacaactcc tccaactctg cctccctcac catctctgga 240

ctgcagactg aggacgaggc tgactactac tgtcagtctc atgacggcat caatcaggtt 300

ttcggcggag ggaccaaggt caccgtccta 330

<210> 80

<211> 110

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 10-A6 VL

<400> 80

Asn Phe Met Leu Thr Gln Pro His Ser Val Ser Glu Ser Pro Gly Lys

1 5 10 15

Thr Val Thr Ile Ser Cys Thr Arg Ser Ser Gly Ile Ile Ala Ser Lys

20 25 30

Tyr Val His Trp Tyr Gln Gln Arg Pro Gly Ser Ala Pro Thr Thr Val

35 40 45

Ile Tyr Glu Asp Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser

50 55 60

Gly Ser Ile Asp Asn Ser Ser Asn Ser Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly

65 70 75 80

Leu Gln Thr Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser His Asp Gly

85 90 95

Ile Asn Gln Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Thr Val Leu

100 105 110

<210> 81

<211> 372

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 12-A4 VH

<400> 81

gaggtgcagc tggtggagtc ccggggaggc ttggtacagc cgggggggtc cctgagactc 60

tcctgtgtaa cttctggatt cagctttaac aactatgcca tgaactgggt ccgccaggct 120

ccggggaagg ggctggagtg ggtctcagct gttagtggta gtggtggtac cacatactac 180

gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgttt 240

gtgcagatgg acagcctgag agctgaggac acggctgtgt attactgtgc gaaaggactt 300

ttccctacga tttttggagt aggagcaatg tttgactact ggggccaggg aaccctggtc 360

accgtctcct ca 372

<210> 82

<211> 124

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 12-A4 VH

<400> 82

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Arg Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Thr Ser Gly Phe Ser Phe Asn Asn Tyr

20 25 30

Ala Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Ala Val Ser Gly Ser Gly Gly Thr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Phe

65 70 75 80

Val Gln Met Asp Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Lys Gly Leu Phe Pro Thr Ile Phe Gly Val Gly Ala Met Phe Asp

100 105 110

Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 83

<211> 330

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 12-A4 VL

<400> 83

tcttctgagc tgactcagcc accctcagcg tctgggaccc ccgggcagag ggtcaccatc 60

tcttgttctg gaagcagctc caacatcgga agtaatgctg ttaactggta tcagcagctc 120

ccaggaacgg cccccaaact cctcatctat gataataatc accggccctc aggggtccct 180

gaccgattct ctggctccaa gtctggcacc tcagcctccc tggccatcag tgggctccag 240

tctgaggatg aggctgatta ttattgtgca gcatgggatg acaccattcc tggtgtgcta 300

ttcgccggag ggaccaagct gaccgtccta 330

<210> 84

<211> 110

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 12-A4 VL

<400> 84

Ser Ser Glu Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn

20 25 30

Ala Val Asn Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu

35 40 45

Ile Tyr Asp Asn Asn His Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser

50 55 60

Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Gln

65 70 75 80

Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Asp Thr Ile

85 90 95

Pro Gly Val Leu Phe Ala Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu

100 105 110

<210> 85

<211> 357

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 14-G10 VH

<400> 85

gaagtgcagc tggtggagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60

tcctgcaagg cttctggagg caccttcagc agctatgcta tcagctgggt gcgacaggcc 120

cctggacaag ggcttgagtg gatgggaggg atcatcccta tctttggtac agcaaactac 180

gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg aatccacgag cacagcctac 240

atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gagaggtgtt 300

tcttactact acggtatgga cgtctggggc caagggacca cggtcaccgt ctcctca 357

<210> 86

<211> 119

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 14-G10 VH

<400> 86

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr

20 25 30

Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Gly Ile Ile Pro Ile Phe Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Gly Val Ser Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly

100 105 110

Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 87

<211> 318

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 14-G10 VL

<400> 87

caggctgtgc tgactcagcc accctcggtg tccgtgtccc caggacagac agccatcatc 60

tcctgttctg gacataaatt gggtgataag tatgtttcct ggtatcaaca gcagccaggc 120

cagtcccctg tgctggtcct ctttcaggat accaagcggc cctcagggat ccctgagcga 180

ttctctggct ccaactctgg gaacacagcc actctgacca tcagcgcgac ccaggctgcg 240

gatgaggctg actattactg tcaggcgggg gacaccaagt ctgtgatctt cggcggcggg 300

accaagctga ccgtccta 318

<210> 88

<211> 106

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 14-G10 VL

<400> 88

Gln Ala Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Val Ser Pro Gly Gln

1 5 10 15

Thr Ala Ile Ile Ser Cys Ser Gly His Lys Leu Gly Asp Lys Tyr Val

20 25 30

Ser Trp Tyr Gln Gln Gln Pro Gly Gln Ser Pro Val Leu Val Leu Phe

35 40 45

Gln Asp Thr Lys Arg Pro Ser Gly Ile Pro Glu Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Asn Ser Gly Asn Thr Ala Thr Leu Thr Ile Ser Ala Thr Gln Ala Ala

65 70 75 80

Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ala Gly Asp Thr Lys Ser Val Ile

85 90 95

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu

100 105

<210> 89

<211> 360

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 22-A6 VH

<400> 89

caggttcagg tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60

tcctgcaagg cttctggagg caccttcagc agctatgcta tcagctgggt gcggcaggcc 120

cctggacaag ggcttgagtg gatgggaggg atcatcccta tctttggtac agcaaactac 180

gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg aatccacgag cacagcctac 240

atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gagaggatac 300

agctatggtt caggacacct tgactactgg ggccagggaa ccctggtcac cgtctcctca 360

<210> 90

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 22-A6 VH

<400> 90

Gln Val Gln Val Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr

20 25 30

Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Gly Ile Ile Pro Ile Phe Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Gly Tyr Ser Tyr Gly Ser Gly His Leu Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 91

<211> 321

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 22-A6 VL

<400> 91

gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60

atcacttgcc aggcgagtca ggacattagc aactatttaa attggtatca gcagaaacca 120

gggaaagccc ctaagctcct gatctacgat gcatccaatt tggaaacagg ggtcccatca 180

aggttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcgctctca ccatcagcag tctccaacct 240

gaagattttg caacttatta ctgtctacag cataatagtt accctcggac ttttggccag 300

gggaccaagc tggagatcaa a 321

<210> 92

<211> 107

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 22-A6 VL

<400> 92

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Ala Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln His Asn Ser Tyr Pro Arg

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105

<210> 93

<211> 360

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 35-B1 VH

<400> 93

gaggtgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtc 60

tcctgcaagg cttctggata caccttcacc ggctactata tgcactgggt gcgacaggcc 120

cctggacaag ggcttgagtg gatgggatgg atgaacccta acagtggtga cacagcctat 180

acacagaact tccagggcag agtcaccatg accaggaacc cctccataag cacagcctac 240

atggagctga gcaacctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gagaggccgg 300

gggttcgcgg agaagcccct tgggtactgg ggccagggaa ccctggtcac cgtctcctca 360

<210> 94

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 35-B1 VH

<400> 94

Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Gly Tyr

20 25 30

Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Trp Met Asn Pro Asn Ser Gly Asp Thr Ala Tyr Thr Gln Asn Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asn Pro Ser Ile Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Asn Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Gly Arg Gly Phe Ala Glu Lys Pro Leu Gly Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 95

<211> 339

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 35-B1 VL

<400> 95

gatattgtga tgactcagtc tccagactcc ctggctgtgt ctctgggcgg gagggccacc 60

atcaactgca agtccagcca gagtatttta tccagctcca ataataagaa ctatttagct 120

tggtaccagc agaaaccagg tcagcctcct aagctgctca tttactgggc atctacccgg 180

gaatccgggg tccctgaccg gttcagcggc agcgggtctg ggacagattt cactctcacc 240

atcagcagcc tgcaggctga agatgtggca gtttattact gtcagcaata ttatagtact 300

cctccgacat tcggccaagg gaccaaggtg gaaatcaaa 339

<210> 96

<211> 113

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 35-B1 VL

<400> 96

Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly

1 5 10 15

Gly Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Gln Ser Ile Leu Ser Ser

20 25 30

Ser Asn Asn Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln

35 40 45

Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val

50 55 60

Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr

65 70 75 80

Ile Ser Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln

85 90 95

Tyr Tyr Ser Thr Pro Pro Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile

100 105 110

Lys

<210> 97

<211> 366

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 3-1F4 VH

<400> 97

gaggtgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60

tcctgcaagg cttctggagg caccttcagc agctatgcta tcagctgggt gcgacaggcc 120

cctggacaag ggcttgagtg gatgggaggg atcatcccta tctttggtac agcaaactac 180

gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg aatccacgag cacagcctac 240

atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gagggcccct 300

cgagggcagt ggctggttca ctactttgac tactggggcc agggaaccct ggtcaccgtc 360

tcctca 366

<210> 98

<211> 122

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 3-1F4 VH

<400> 98

Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr

20 25 30

Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Gly Ile Ile Pro Ile Phe Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ala Pro Arg Gly Gln Trp Leu Val His Tyr Phe Asp Tyr Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 99

<211> 321

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 3-1F4 VL

<400> 99

gaaattgtgt tgacgcagtc tccagccacc ctctctctgt ctccagggga aagagccacc 60

ctctcctgct gggccagtca ggatgttagc aactacttag cctggtacca acagaagcct 120

ggccaggctc ccaggctcct catctatgat gcatccaaca gggccactgg catcccagcc 180

aggttcagcg gcagtgggtc tgggacagac ttcactctca ccatcagcag cctagagcct 240

gaagattttg cagtgtatta ctgtcagcaa cgtagcaact ggcctctcac tttcggcggc 300

gggaccaagg tggagctcaa a 321

<210> 100

<211> 107

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 3-1F4 VL

<400> 100

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Trp Ala Ser Gln Asp Val Ser Asn Tyr

20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Asn Trp Pro Leu

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Leu Lys

100 105

<210> 101

<211> 357

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 4-1B3 VH

<400> 101

caggttcagc tggtgcagtc tggagctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtc 60

tcctgcaagg cttctggtta cacctttacc agctatggta tcagctgggt gcgacaggcc 120

cctggacaag ggcttgagtg gatgggatgg atcagcgctt acaatggtaa cacaaactat 180

gcacagaagc tccagggcag agtcaccatg accacagaca catccacgag cacagcctac 240

atggagctga ggagcctgag atctgacgac acggccgtgt attactgtgc gagagagtcc 300

tactcgtccg caggtattga ctactggggc cagggaaccc tggtcaccgt ctcctca 357

<210> 102

<211> 119

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 4-1B3 VH

<400> 102

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

20 25 30

Gly Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Trp Ile Ser Ala Tyr Asn Gly Asn Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Leu

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Glu Ser Tyr Ser Ser Ala Gly Ile Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

100 105 110

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 103

<211> 336

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 4-1B3 VL

<400> 103

gatattgtga tgactcagtc tccactctcc ctgcccgtca cccctggaga gccggcctcc 60

atctcctgca ggtctagtca gaccctcctg catagtaatg gattcaacta tttggattgg 120

tacctgcaga agccagggca gtctccacaa ctcctgatgt atttgggctc tagccgggcc 180

tccggggtcc ctgacaggtt cagtggcagt ggatcgggca cagatttcac actgaaaatc 240

agcagagtgg aggctgagga tgttggggtt tattactgca tgcaaactct acaaactcct 300

ccggctttcg gcggagggac caaggtggag atcaaa 336

<210> 104

<211> 112

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 4-1B3 VL

<400> 104

Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly

1 5 10 15

Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Thr Leu Leu His Ser

20 25 30

Asn Gly Phe Asn Tyr Leu Asp Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser

35 40 45

Pro Gln Leu Leu Met Tyr Leu Gly Ser Ser Arg Ala Ser Gly Val Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile

65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Met Gln Thr

85 90 95

Leu Gln Thr Pro Pro Ala Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105 110

<210> 105

<211> 354

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 21-G1 VH

<400> 105

caggtccagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgacgatt 60

tcctgcgagg cgtctggata caacttcatc agctactata tacactgggt gcgacaggcc 120

cctggacaag gccttgagtg gatgggattc gtcgtcccta gtggtggtgc cgcaggctac 180

acacagaagt tccagggcag actcaccgtg accagggaca cgtccacgag cacagtctac 240

atggacctga acagcctgac atctgacgac acggccgtgt attactgtgt gcgagaaatg 300

agtggtggct ggtttgattt ctggggccag ggaaccctgg tcaccgtctc ctcg 354

<210> 106

<211> 118

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 21-G1 VH

<400> 106

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Thr Ile Ser Cys Glu Ala Ser Gly Tyr Asn Phe Ile Ser Tyr

20 25 30

Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Phe Val Val Pro Ser Gly Gly Ala Ala Gly Tyr Thr Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Leu Thr Val Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr

65 70 75 80

Met Asp Leu Asn Ser Leu Thr Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Val Arg Glu Met Ser Gly Gly Trp Phe Asp Phe Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 107

<211> 321

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 21-G1 VL

<400> 107

gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60

atcacttgcc gggcaagtca gagcattagc agctatttaa attggtatca gcagaaacca 120

gggaaagccc ctaagctcct gatctatgct gcatccagtt tgcaaagtgg ggtcccatca 180

aggttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240

gaagattttg caacttacta ctgtcaacag agttacagta ccccgatcac cttcggccaa 300

gggacacgac tggagattaa a 321

<210> 108

<211> 107

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 21-G1 VL

<400> 108

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Tyr Ser Thr Pro Ile

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys

100 105

<---

Группа изобретений относится к биотехнологии. Предложены: антигенсвязывающий полипептид, который связывается с эпитопом PD-L1 человека, содержащий вариабельный домен тяжелой цепи и вариабельный домен легкой цепи, причем их соответствующие последовательности по существу состоят из пар последовательностей, выбранных из определенной группы, молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая антигенсвязывающий полипептид, фармацевтическая композиция для применения в ингибировании биологической активности PD-L1, а также способ терапевтического лечения субъекта. Изобретение применяется для лечения рака, содержащего часть опухолевых клеток, экспрессирующих детектируемое количество PD-L1. 4 н. и 8 з.п. ф-лы, 28 ил., 27 пр.

1. Антигенсвязывающий полипептид, который связывается с эпитопом PD-L1 человека, содержащий вариабельный домен тяжелой цепи и вариабельный домен легкой цепи, причем их соответствующие последовательности по существу состоят из пар последовательностей, выбранных из группы, состоящей из:

(a) SEQ ID NO: 18 и SEQ ID NO: 20;

(b) SEQ ID NO: 42 и SEQ ID NO: 44;

(с) SEQ ID NO: 34 и SEQ ID NO: 36;

(d) SEQ ID NO: 22 и SEQ ID NO: 24;

(e) SEQ ID NO: 2 и SEQ ID NO: 4;

(f) SEQ ID NO: 62 и SEQ ID NO: 64;

(g) SEQ ID NO: 82 или SEQ ID NO: 84;

(h) SEQ ID NO: 70 и SEQ ID NO: 72;

(i) SEQ ID NO: 50 и SEQ ID NO: 52;

(j) SEQ ID NO: 102, и SEQ ID NO: 104;

(k) SEQ ID NO: 30 и SEQ ID NO: 32;

(l) SEQ ID NO: 6 и SEQ ID NO: 8;

(m) SEQ ID NO: 10 и SEQ ID NO: 12;

(n) SEQ ID NO: 14 и SEQ ID NO: 16;

(o) SEQ ID NO: 26 и SEQ ID NO: 28;

(p) SEQ ID NO: 38 и SEQ ID NO: 40;

(q) SEQ ID NO: 46 и SEQ ID NO: 48;

(r) SEQ ID NO: 54 и SEQ ID NO: 56;

(s) SEQ ID NO: 58 и SEQ ID NO: 60;

(t) SEQ ID NO: 66 и SEQ ID NO: 68;

(u) SEQ ID NO: 74 и SEQ ID NO: 76;

(v) SEQ ID NO: 78 и SEQ ID NO: 80;

(w) SEQ ID NO: 86 и SEQ ID NO: 88;

(x) SEQ ID NO: 90 и SEQ ID NO: 92;

(y) SEQ ID NO: 94 и SEQ ID NO: 96;

(z) SEQ ID NO: 98 и SEQ ID NO: 100;

и

(aa) SEQ ID NO: 106 и SEQ ID NO: 108.

2. Антигенсвязывающий полипептид по п. 1, отличающийся тем, что вариабельный домен тяжелой цепи и вариабельный домен легкой цепи указанного полипептида имеют аминокислотные последовательности, состоящие из SEQ ID NO: 18 и SEQ ID NO: 20.

3. Антигенсвязывающий полипептид по п. 1, отличающийся тем, что вариабельный домен тяжелой цепи и вариабельный домен легкой цепи имеют аминокислотные последовательности, состоящие из SEQ ID NO: 42 и SEQ ID NO: 44.

4. Антигенсвязывающий полипептид по п. 1, отличающийся тем, что вариабельный домен тяжелой цепи и вариабельный домен легкой цепи имеют аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 34 и SEQ ID NO: 36.

5. Антигенсвязывающий полипептид по пп. 1-4, отличающийся тем, что указанный полипептид является полностью человеческим антителом или гуманизированным антителом.

6. Антигенсвязывающий полипептид по п. 5, отличающийся тем, что указанное антитело содержит константную область человека, имеющую АЗКЦ-активность и/или КЗЦ-активность.

7. Молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая антигенсвязывающий полипептид по пп. 1-4, причем указанная молекула нуклеиновой кислоты представляет собой молекулу ДНК или молекулу РНК.

8. Молекула нуклеиновой кислоты по п. 7, отличающаяся тем, что указанная молекула нуклеиновой кислоты содержит последовательности ДНК, кодирующие вариабельный домен тяжелой цепи и вариабельный домен легкой цепи, причем указанные последовательности ДНК состоят по существу из пар последовательностей, выбранных из группы, состоящей из: (a) SEQ ID NO: 17 и SEQ ID NO:19; (b) SEQ ID NO:33 и SEQ ID NO:35; и (c) SEQ ID NO:41 и SEQ ID NO:43.

9. Фармацевтическая композиция для применения в ингибировании биологической активности PD-L1, содержащая эффективное количество антигенсвязывающего полипептида по любому из пп. 1-6 и фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество, фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель.

10. Способ терапевтического лечения субъекта, нуждающегося в этом, от состояния, причем указанный способ включает введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества антигенсвязывающего полипептида по любому из пп. 1-6, отличающийся тем, что состояние представляет собой рак, содержащий по меньшей мере часть опухолевых клеток, экспрессирующих детектируемое количество PD-L1.

11. Способ по п. 10, дополнительно включающий введение в комбинации с (a) антителами, нацеленными на другие иммуносупрессивные пути; (b) химиотерапией или радиационной терапией; (c) другими механизмами блокирования иммуносупрессивных путей; или (d) другими агентами для иммунотерапии.

12. Способ по любому из пп. 10, 11, отличающийся тем, что указанное состояние представляет собой рак млекопитающих, выбранный из группы, состоящей из: рака яичников, рака толстого кишечника, рака молочной железы, рака легких, миелом, опухолей ЦНС нейробластного происхождения, моноцитарных лейкозов, B-клеточных лейкозов, Т-клеточных лейкозов, B-клеточных лимфом, Т-клеточных лимфом, опухолей, происходящих из тучных клеток, меланомы, рака мочевого пузыря, рака желудка, рака печени, уротелиальной карциномы, кожной карциномы, рака почек, рака головы и шеи, рака поджелудочной железы и комбинаций перечисленного.