Способ прогнозирования исходов программ экстракорпорального оплодотворения и переноса эмбрионов Российский патент 2024 года по МПК G01N33/50 A61B5/00 

Изобретение относится к гинекологии и репродуктологии, и может быть использовано для прогнозирования исходов программ экстракорпорального оплодотворения (ЭКО) и переноса эмбрионов (ПЭ) в различных возрастных группах женщин. Разработка доступных и недорогих прогностических методов оценки эффективности ЭКО позволяет значимо повысить результативность и сократить материальные затраты за счет более строгого отбора женщин в программах вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ) и разработки клинических рекомендаций по дополнительной подготовке перед вступлением в протокол.

В настоящее время широко используемыми прогностическими показателями эффективности ЭКО и ПЭ являются: 1) возраст пациенток; 2) фолликулярный резерв, оцениваемый по уровню антимюллерова гормона (АМГ), фолликулостимулирующего гормона (ФСГ) и данным ультразвукового исследования; 3) толщина эндометрия на момент переноса [Лысенко О.В., Смирнова И.В. Медико-социальная характеристика женщин, направленных на эко и анализ неудачных попыток // Вестник ВГМУ. 2010. №-2].

Главным гормональным предиктором фолликулярного резерва, а следовательно, и возможного исхода ЭКО, считается АМГ. Предложен способ прогнозирования исходов программы ЭКО и ПЭ на основе уровня АМГ и уровня тревожности по Спилбергу-Ханну [патент РФ №2581027, 10.04.2016]. «Для этого определяют в венозной крови женщины уровень АМГ. При уровне АМГ 1,14 нг/мл и ниже дополнительно определяют уровень тревожности по Спилбергу-Ханну. В случае, если он 45 и выше баллов, прогнозируют неблагоприятный исход программы ЭКО» Недостатком является необходимость дополнительного опроса пациентки (два теста по двадцать вопросов), который не является объективным критерием и требует дополнительных затрат времени.

Известны и технически более сложные способы прогнозирования эффективности ЭКО и ПЭ на основе определения некоторых показателей в пунктате фолликулярной жидкости: 1) активности пептид-гидролаз [патент РФ №2193777, 27.11.2002]; 2) содержания ФНО-α и β-ФРФ с последующим расчетом прогностического индекса по формуле: ПИ=0,0027⋅X+Y⋅(+8,9626⋅10^-7⋅Y-3,0827⋅10^-6⋅X)-0,1448, где Х - количество ФНО-α, Y - количество β-ФРФ [патент РФ №2273031, 27.03.2006]. Основными недостатками этих методов являются инвазивный характер вмешательства, высокая стоимость и низкая доступность технических методик определения указанных показателей в лабораториях.

Предложенный метод количественной оценки прогестероновых рецепторов в мононуклеарной фракции клеток периферической крови [патент РФ №2430379, 27.09.2011] не является универсальным, т.к. подразумевает проведение длинного протокола стимуляции суперовуляции.

Наиболее близким прототипом предлагаемого изобретения является способ прогнозирования развития субоптимального ответа на контролируемую овариальную стимуляцию в программах эко/икси на основе балльной системы, оценивающей: 1) возраст пациентки ≥35 лет; 2) наличие субоптимального ответа в анамнезе; 3) уровень ФСГ в сыворотке крови ≥8,71 мМЕ/мл; 4) уровень АМГ в сыворотке крови <2,56 нг/мл; 5) количество антральных фолликулов <10 [патент РФ №2774145, 15.06. 2022]. Основными недостатками являются включение данных анамнеза о субоптимальном ответе в предыдущих протоколах, которые не могут быть предоставлены женщинами, впервые вступающими в программу ЭКО, завышенный уровень АМГ и антральных фолликулов. По данным других исследователей субоптимальный ответ следует ожидать при АМГ ≤1 нг/мл и количестве фолликулов менее 5 [патент РФ №2565449, 20.10.2015].

Техническим результатом настоящего изобретения является повышение прогностической точности исходов программ ЭКО и ПЭ на основе оценки показателей общего анализа крови, являющегося обязательным рутинным методом обследования.

Технический результат достигается тем, что выделяют группу женщин от 26 до 35 лет, оценивают показатели красной крови и, если концентрация эритроцитов более или равна 4,2×10¹²/л и концентрация гемоглобина более или равна 140 г/л, то прогнозируют толщину эндометрия менее 12 мм и низкую вероятность наступления беременности, а если концентрация эритроцитов от 3,7 до 4,2×10¹²/л и гемоглобина от 117 до 140 г/л, то, прогнозируют толщину эндометрия более 12 мм и высокую вероятность наступления беременности.

Изобретение поясняется фигурами.

Фиг. 1. График, демонстрирующий достоверную (r=0.117, p=0.043) положительную корреляционную зависимость количества овоцитов (по основной вертикальной оси) от концентрации гемоглобина (по основной горизонтальной оси).

Фиг. 2. График, демонстрирующий достоверную (r=-0.222, p=0.0002) отрицательную корреляционную зависимость толщины эндометрия (по основной вертикальной оси) от концентрации гемоглобина (по основной горизонтальной оси).

Способ основан на сравнительном исследовании клинико-анамнестических и лабораторно-инструментальных данных женщин (n=301), проходивших программы вспомогательных репродуктивных технологий в Областном Перинатальном Центре г.Курска в 2021 году. Согласно результатам, репродуктивные показатели, такие как количество овоцитов (Фиг.1) после стандартной стимуляции и толщина эндометрия на момент переноса (Фиг.2), находятся в тесной корреляционной зависимости от концентраций эритроцитов и гемоглобина. Причем в разных возрастных группах уровень значимости указанных корреляционных связей отличается. По этой причине пациентки были разделены на три возрастные группы: 1) до 25 лет (n=17), 2) от 26 до 35 лет (n=207) и 3) 36 лет и старше (n=77). Наиболее достоверные корреляционные связи отмечены во второй группе (р=0,01; р=0,0006). В третьей группе уровень их значимости снижался (р=0,058; р=0,163). Концентрации эритроцитов и гемоглобина были достоверно выше у женщин 36 лет и старше по сравнению с женщинами от 26 до 35 лет (таблица 1). При этом, репродуктивные показатели, а именно количество полученных овоцитов и толщина эндометрия, напротив, были значимо ниже (таблица 1). Т.к. повышение эритроцитов является в первую очередь проявлением тканевой гипоксии, то женщинам старше 36 лет может быть рекомендовано назначение оксигенотерапии и средств, улучшающих кровоснабжение тканей, например, актовегина, перед вступлением в протокол ЭКО. Эти мероприятия призваны обеспечить адекватную насыщаемость кислородом и оптимальный уровень обменно-метаболических процессов и трофики матки, что является необходимым условием достаточного роста эндометрия.

Во второй возрастной группе женщин от 26 до 35 лет, у которых установлено наличие достоверных корреляционных связей между показателями красной крови (концентрации гемоглобина и эритроциты) и репродуктивными показателями (количество овоцитов и толщина эндометрия), выделено две подгруппы в зависимости от концентрации гемоглобина и эритроцитов: 1) гемоглобин менее 140 г/л, эритроциты менее 4,2×10¹²/л; и 2) гемоглобин ≥140 г/л, эритроциты ≥4,2×10¹²/л. Репродуктивные показатели в этих группах достоверно отличаются (таблица 2). При максимальных значениях гемоглобина и эритроцитов на верхней границе физиологической нормы (вторая подгруппа), получают больше овоцитов, но менее пышный эндометрий, что ассоциируется с меньшей вероятностью наступления беременности (<10%). Этой группе женщин может потребоваться назначение оксигенотерапии и средств, улучшающих кровоснабжение и трофику матки, в следующем после пункции цикле и проведение криопереноса после коррекции показателей красной крови. У женщин старше 36 лет с изначально более высокими концентрациями эритроцитов и гемоглобина, назначение указанных средств может производиться без учета количественных характеристик красной крови. Репродуктивные показатели в этой группе от дифференциации уровня эритроцитов и гемоглобина на отметках 4,2×10¹²/л и 140 г/л не зависят (Таблица 2).

Таблица 1
Различия концетраций эритроцитов, гемоглобина, количества полученных овоцитов и толщины эндометрия в различных возрастных группах женщин. показатель возрастные группы женщин (Me [Q1;Q3]), n=301 Тест
Краскела-Уоллиса,
p Тест Манна-Уитни,
p <25 лет,
n=17 26-35,
n=207 ≥36 лет,
n=77 эритроциты 4,05 [3,93; 4,28] 4 [3,7; 4,45]¹ 4,1[3,85; 4,64]¹ 0,00005 ¹0,00001 гемоглобин 135[127,5;142,5] 132[117;144]¹ 138[124;148]¹ 0,00013 ¹0,00003 количество овоцитов 13 [7; 24]² 10 [5,5; 29]¹ 7 [3,5; 16]^1,2 0,00004 ¹<0,00001
²0,03303 количество эмбрионов 7 [4; 17,5]² 4 [2; 13,5]¹ 3 [1,5; 6,5]^1,2 0,00007 ¹0,00007
²0,00267

Таблица 2 Показатели
Me [Q1;Q3] Женщины 26-35 лет Женщины старше 36 лет гемоглобин <140 г/л,
эритроциты
<4,2×10¹²/л гемоглобин ≥140 г/л,
эритроциты
≥4,2×10¹²/л Значение
р гемоглобин <140 г/л,
эритроциты
<4,2×10¹²/л гемоглобин ≥140 г/л,
эритроциты
≥4,2×10¹²/л Значение
р Количество
овоцитов 10[5,5; 29] 15
[9,5; 23,5] 0,0009 7[3,5; 16] 8
[4,5; 15,5] 0,535 Толщина
эндометрия 11[8,8; 14,3] 10
[8,3; 12] 0,05 10,1
[9,1; 11,5] 9,95
[7,3; 11,2] 0,617

Различия количества овоцитов и толщины эндометрия у женщин в зависимости от возраста и уровня гемоглобина и концентрации эритроцитов.

Способ осуществляется следующим образом. Выделяют группу женщин от 26 до 35 лет и оценивают концентрации эритроцитов и гемоглобина. Если они составляют ≥4,2×10¹²/л и ≥140 г/л соответственно, то при оптимальном гормональном фоне (АМГ>1 нг/мл, ФСГ<12 мМЕ/мл в начале менструального цикла) и удовлетворительных результатах ультразвукового обследования (наличие фолликулов, отсутствие патологии), прогнозируют получение большего количества овоцитов, но более тонкий эндометрий и низкую вероятность наступления беременности (<10%) в свежем цикле. В этом случае беременность возможна при толщине эндометрия, близкой к 12 мм. После пункции рекомендуется обратить внимание на толщину эндометрия и рассмотреть возможность криопереноса после курса оксигенотерапии или средств, улучшающих кровоток.

Если концентрация эритроцитов и гемоглобина <4,2×10¹²/л и<140 г/л соответственно, то, напротив, прогнозируют меньше овоцитов, но большую толщину эндометрия и более высокую (на 250%) по сравнению с первой подгруппой вероятность наступления беременности.

Пример 1 конкретного выполнения.

Женщина 30 лет, вступила в программу ЭКО с показателями: эритроциты 4,4×10¹²/л, гемоглобин 145 г/л, АМГ-1,5 нг/мл, ФСГ - 10,2 мМЕ/мл. На пункции получено 24 овоцита. Толщина эндометрия на момент переноса в свежем цикле - 9 мм. Беременность не наступила.

В данном случае при высоких показателях красной крови (эритроциты ≥4,2×10¹²/л и гемоглобин ≥140 г/л) у женщины в возрастной группе 26-35 лет, получено достаточно много овоцитов (24). Однако при этих же показателях красной крови толщина эндометрия 9 мм, что менее 12 мм. Результат переноса эмбрионов в свежем цикле - отрицательный. Пример наглядно демонстрирует, что высокие показатели красной крови (≥4,2×10¹²/л и ≥140 г/л) ассоциируются с большим количеством овоцитов, но меньшей толщиной эндометрия в возрастной группе женщин 26-35 лет.Может быть рекомендовано прохождение оксигенотерапии и назначение средств, улучшающих кровоток и трофику матки перед последующим криопереносом.

Пример 2.

Женщина 34 года, вступила в программу ЭКО с показателями: эритроциты 3,8×10¹²/л, гемоглобин 126 г/л, АМГ - 1,9 нг/мл, ФСГ -3,5 мМЕ/мл. На пункции получено 15 овоцитов. Толщина эндометрия на момент переноса в свежем цикле - 13,5 мм. Беременность наступила.

В данном случае при более низких показателях красной крови (эритроциты<4,2×10¹²/л и гемоглобин<140 г/л) у женщины в возрастной группе 26-35 лет, получено меньше овоцитов (15). Однако при этих же показателях красной крови толщина эндометрия 13,5 мм, что более 12 мм. Результат переноса эмбрионов в свежем цикле - положительный. Пример наглядно демонстрирует корреляцию более низких показателей красной крови (<4,2×10¹²/л и<140 г/л) с меньшим количеством овоцитов, но большей толщиной эндометрия и более высокой вероятностью наступления беременности в возрастной группе женщин 26-35 лет.

Пример 3.

Женщина 31 год, вступила в программу ЭКО с показателями: эритроциты 3,9×10¹²/л, гемоглобин 131 г/л, АМГ - 2,1 нг/мл, ФСГ - 9,8 мМЕ/мл. На пункции получено 8 овоцитов. Толщина эндометрия на момент переноса в свежем цикле - 11,9 мм. Беременность наступила.

В данном случае при более низких показателях красной крови (эритроциты<4,2×10¹²/л и гемоглобин<140 г/л) у женщины в возрастной группе 26-35 лет, получено меньше овоцитов (8). Однако при этих же показателях красной крови толщина эндометрия 11,9 мм, что приблизительно равно 12 мм. Результат переноса эмбрионов в свежем цикле - положительный. Пример наглядно демонстрирует корреляцию более низких показателей красной крови (<4,2×10¹²/л и<140 г/л) с меньшим количеством овоцитов, но большей толщиной эндометрия и более высокой вероятностью наступления беременности в возрастной группе женщин 26-35 лет.

Пример 4.

Женщина 29 лет, вступила в программу ЭКО с показателями: эритроциты 4,3×10¹²/л, гемоглобин 144 г/л, АМГ - 15,4 нг/мл, ФСГ - 3,6 мМЕ/мл. На пункции получено 26 овоцитов. Толщина эндометрия на момент переноса в свежем цикле - 9,8 мм. Беременность не наступила.

В данном случае при высоких показателях красной крови (эритроциты ≥4,2×10¹²/л и гемоглобин ≥140 г/л) у женщины в возрастной группе 26-35 лет, получено достаточно много овоцитов (26). Однако при этих же показателях красной крови толщина эндометрия 9,8 мм, что менее 12 мм. Результат переноса эмбрионов в свежем цикле - отрицательный. Пример наглядно демонстрирует корреляцию высоких показателей красной крови (≥4,2×10¹²/л и ≥140 г/л) с большим количеством овоцитов, но меньшей толщиной эндометрия в возрастной группе женщин 26-35 лет. Может быть рекомендовано прохождение оксигенотерапии и назначение средств, улучшающих кровоток и трофику матки перед последующим криопереносом.

Таким образом, проведенные исследования демонстрируют, что предложенный нами новый способ является эффективным и экономичным, и позволяет выявить лабораторные критерии (концентрацию эритроцитов и гемоглобина), помогающие уточнить прогнозирование исходов программы эко и определить показания для назначения средств, улучшающих оксигенацию и кровоснабжение органов женской половой системы, перед проведением процедуры ЭКО и ПЭ.

Изобретение относится к гинекологии и репродуктологии, а именно к способам прогнозирования результативности программ экстракорпорального оплодотворения (ЭКО) и переноса эмбрионов (ПЭ). Способ включает использование данных общего анализа крови, а именно концентрации эритроцитов и гемоглобина, с учётом возраста женщин. При этом, если женщине от 26 до 35 лет, и концентрация эритроцитов более или равна 4,2×10¹²/л и концентрация гемоглобина более или равна 140 г/л, то прогнозируют толщину эндометрия менее 12 мм и низкую вероятность наступления беременности. Если концентрация эритроцитов от 3,7 до 4,2×10¹²/л и гемоглобина от 117 до 140 г/л, то прогнозируют толщину эндометрия более 12 мм и высокую вероятность наступления беременности. Изобретение обеспечивает повышение прогностической точности исходов программ ЭКО и ПЭ. 2 ил., 2 табл., 4 пр.

Способ прогнозирования исходов программ экстракорпорального оплодотворения (ЭКО) и переноса эмбрионов (ПЭ), отличающийся тем, что в качестве дополнительных прогностических факторов используются данные общего анализа крови, а именно концентрации эритроцитов и гемоглобина, с учётом возраста женщин, при этом, если женщине от 26 до 35 лет, и концентрация эритроцитов более или равна 4,2×10¹²/л и концентрация гемоглобина более или равна 140 г/л, то прогнозируют толщину эндометрия менее 12 мм и низкую вероятность наступления беременности, а если концентрация эритроцитов от 3,7 до 4,2×10¹²/л и гемоглобина от 117 до 140 г/л, то прогнозируют толщину эндометрия более 12 мм и высокую вероятность наступления беременности.