2-(3-ФЕНОКСИФЕНИЛ)ИМИДАЗОЛИН, ОБЛАДАЮЩИЙ ИНГИБИРУЮЩЕЙ АКТИВНОСТЬЮ В ОТНОШЕНИИ ЦИКЛООКСИГЕНАЗЫ Российский патент 2024 года по МПК C07D233/06 A61K31/4164 A61P29/00 

Изобретение относится к физиологически активным соединениям, а именно - к 2-(3-феноксифенил)имидазолину, обладающему ингибирующей активностью в отношении циклооксигеназы, который может быть использован в качестве действующего начала нестероидных противовоспалительных средств.

Известны представители химических соединений, содержащие бифенильные [Migliore M, Habrant D, Sasso O, Albani C, Bertozzi SM, Armirotti A, Piomelli D, Scarpelli R. (2016) Potent multitarget FAAH-COX inhibitors: Design and structure-activity relationship studies. Eur J Med Chem, 109: 216-37. PMID:26774927; Warner TD, Giuliano F, Vojnovic I, Bukasa A, Mitchell JA, Vane JR. (1999) Nonsteroid drug selectivities for cyclo-oxygenase-1 rather than cyclo-oxygenase-2 are associated with human gastrointestinal toxicity: a full in vitro analysis. Proc Natl Acad Sci USA, 96 (13): 7563-8. PMID:10377455] и оксибифенильные [Auerbach SS, DrugMatrix and ToxFX Coordinator National Toxicology Program. National Toxicology Program: Dept of Health and Human Services. Accessed on 02/05/2014. Modified on 02/05/2014. DrugMatrix, https://ntp.niehs.nih.gov/drugmatrix/index.html] фрагменты, для которых описаны свойства ингибиторов ферментов циколооксигеназы 1 и циклооксигеназы 2.

В медицинской практике используется препарат нимесулид [Auerbach SS, DrugMatrix and ToxFX Coordinator National Toxicology Program. National Toxicology Program: Dept of Health and Human Services. Accessed on 02/05/2014. Modified on 02/05/2014. DrugMatrix, https://ntp.niehs.nih.gov/drugmatrix/index.html], демонстрирующий ингибирующие свойства в отношении ферментов циколооксигеназы и используемый как противовоспалительное средство.

Задачей предлагаемого изобретения является разработка новых потенциально пригодных для использования в качестве действующих начал противовоспалительных препаратов.

Техническим результатом является расширение номенклатуры соединений, оказывающих противовоспалительное действие.

Технический результат достигается при использовании 2-(3-феноксифенил)имидазолина в качестве действующего начала лекарственного препарата, обладающего противовоспалительными свойствами.

Наличие у 2-(3-феноксифенил)имидазолина ингибирующей активности в отношении циклооксигеназы 1 и циклооксигеназы 2 подтверждает возможность использования его в качестве действующего начала лекарственного препарата, обладающего противовоспалительными свойствами.

2-(3-Феноксифенил)имидазолин является новым по структуре 3-феноксифенилсодержащим соединением, являющимся полупродуктом в синтезе биологически активных веществ.

2-(3-Феноксифенил)имидазолин получают следующим образом. В круглодонную трехгорлую колбу, оборудованную механической мешалкой, обратным холодильником и термометром, помещают 2,8 г (23 ммоль) гидрохлорида этилендиамина, 1,36 г (23 ммоль) этилендиамина и 50 мл диметилформамида. Колбу выдерживают при температуре 90°С в течение 30 мин. до растворения твердых веществ. Затем при помощи капельной воронки к реакционной массе по каплям, при перемешивании приливают 7,42 г (31 ммоль) этилового эфира 3-феноксибензойной. Температуру смеси повышают до 153°С и перемешивают в течение 3 часов. При этом реакционная масса приобретает желтый цвет. Далее отгоняют этиловый спирт, воду и диметилформамид, остаток охлаждают до 25°С и перекристаллизовывают из этилового спирта, кристаллы гидрохлорида 2-(3-феноксифенил)имидазолина отфильтровывают (белые игольчатые кристаллы). Выход – 8,51 г (31 ммоль, 95%). Т._пл. 146-149°С.

Для получения свободного 2-(3-феноксифенил)имидазолина к 8,51 г (31 ммоль) гидрохлорида 2-(3-феноксифенил)имидазолина в диметилформамиде добавляют 4,32 мл (31 ммоль) триэтиламина и нагревают при перемешивании до 60°С. Выпавшую соль триэтиламина отфильтровывают. Диметилформамид отгоняют. 2-(3-Феноксифенил)имидазолин очищают перекристаллизацией из этанола при низких температурах.

Хроматомасс-спектр, m/z (I, %): 238 (100) [M]⁺, чистота 100%. ИК-спектр характеризуется пиками в области Ar-O-Ar (1240-1024) и C=N (1660-1490), а также отсутствием пиков C=О (1740-1630).

Свойства 2-(3-феноксифенил)имидазолина в отношении циклооксигеназы 1 и циклооксигеназы 2 были исследованы in vitro с использованием наборов для определения активности соединений в отношении циклооксигеназы 1 (ЦОГ-1) и циклооксигеназы 2 (ЦОГ-2) флуорометрическим методом (Cyclooxygenase 1 Inhibitor Assay Kit (Fluorometric), COX2 Inhibitor Screening Kit (Fluorometric), BioVision).

Исследование проводили с помощью стандартного протокола, отраженного в инструкции к наборам реагентов. Исследовали ЦОГ-1 и ЦОГ-2 активность 2-(3-феноксифенил)имидазолина и вещества сравнения (нимесулид, Sigmaaldrich, США) в диапазоне концентраций 0,1 нмоль/л – 100 мкмоль/л.

После внесения исследуемых веществ, реакционной смеси и раствора арахидоновой кислоты производилось снятие значений флуоресценции и рассчитывается процент ингибирования с последующим построением графика зависимости процента ингибирования от концентрации исследуемого вещества с расчетом концентрации полумаксимального ингибирования (IC₅₀). Для определения избирательности действия веществ в отношении типа фермента (ЦОГ-1 или ЦОГ-2) рассчитывали индекс селективности как отношение IC_{50 (ЦОГ-1)} к IC_{50 (ЦОГ-2)}.

Статистическая обработка полученных данных проводится с использованием программного обеспечения MARS Data Analysis Software, Microsoft Office Excel 16 и GraphPad Prism v.7.0. с применением нелинейной регрессии.

Результаты исследования влияния 2-(3-феноксифенил)имидазолина и нимесулида на активность фермента циклооксигеназы 2 представлены в таблице 1.

Результаты исследования влияния 2-(3-феноксифенил)имидазолина и нимесулида на активность ферментов циклооксигеназы 1 и циклооксигеназы 2 представлены в таблице 2.

Таблица 1.

Вещество Ингибирующая активность в отношении ЦОГ-2, % (M±m) Концентрация, мкмоль/л 100 10 1 0.1 0.01 0.001 0.0001 2-(3-Феноксифенил)имидазолина 71,5±5,6 74,5±9,5 68,4± 5,6 70,0±5,0 69,5±13,5 66,0±7,0 9,0±4,0 Нимесулид 69,5±3,7 67,8±3,8 68,3±2,9 37,0±2,1 9,2±1,7 2,6±0,7 –

Примечания:

- различия достоверны относительно показателей группы нимесулида, t-тест (p<0,05).

- данные представлены в виде M±m (среднее ± стандартная ошибка), n=2-4.

- ЦОГ-2 ингибирующая активность в данной концентрации исследовалась.

Данные исследований подтверждают наличие у 2-(3-феноксифенил)имидазолина ингибирующей активности в отношении циклооксигеназы 1 и циклооксигеназы 2. При этом для 2-(3-феноксифенил)имидазолина характерна более высокая активность и избирательность в отношении ЦОГ-2, чем для применяемого в медицинской практике вещества сравнения нимесулида.

Таблица 2.

Вещество Ингибирующая активность в отношении ЦОГ-1 (IC₅₀) Ингибирующая активность в отношении ЦОГ-2 (IC₅₀) Индекс селективности,
IC_{50 (ЦОГ-1)}/IC_{50 (ЦОГ-2)} 2-(3-Феноксифенил)имидазолин 73 мкмоль/л 0,0003 мкмоль/л 243000 Нимесулид 0,8 мкмоль/л 0,09 мкмоль/л 9

Примечание:

- при индексе селективности большем, чем 1, активность в отношении ЦОГ-2 выше, чем ЦОГ-1;

- чем больше индекс селективности, тем больше избирательность в отношении ЦОГ-2.

Таким образом, использование 2-(3-феноксифенил)имидазолина, обладающего ингибирующей активностью в отношении циклооксигеназы, в качестве действующего начала лекарственного препарата, позволяет расширить номенклатуру противовоспалительных средств.

Изобретение относится к области химии и фармацевтики, а именно к применению 2-(3-феноксифенил)имидазолина, обладающего ингибирующей активностью в отношении циклооксигеназы 1 и 2, в качестве действующего начала лекарственного препарата, обладающего противовоспалительными свойствами. Изобретение обеспечивает эффективное противовоспалительное действие. 2 табл.

Применение 2-(3-феноксифенил)имидазолина в качестве действующего начала лекарственного препарата, обладающего противовоспалительными свойствами.