Показать метаданные Скрыть метаданные

(19)

(11)

2 815 714

(13)

(51)

МПК

C07D401/04(2006-01-01)

C07D401/14(2006-01-01)

A61K31/454(2006-01-01)

A61K31/4545(2006-01-01)

A61P35/00(2006-01-01)

A61P35/02(2006-01-01)

(21) (22)

Заявка

2021102605, 2019-07-08

(24)

Дата начала отсчета патента

2019-07-08

(22)

дата подачи заявки

2019-07-08

(45)

опубликовано

2024-03-20

(72)

авторы

Беквит, Роан Эрик ДжонБонацци, СимонеЧерниенко, АртемМа, ФупэнУэр, Натаниэль Ф.

(73)

патентообладатели

Новартис Аг

(56)

Документы, цитированные в отчете о поиске

RU 2011121567 A, 10.12.2012EP 3214081 A1, 06.09.2017.

ПРОИЗВОДНЫЕ 3-(5-АМИНО-1-ОКСОИЗОИНДОЛИН-2-ИЛ)ПИПЕРИДИН-2,6-ДИОНА И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ В ЛЕЧЕНИИ ЗАБОЛЕВАНИЙ, СВЯЗАННЫХ С БЕЛКОМ С "ЦИНКОВЫМИ ПАЛЬЦАМИ" 2 СЕМЕЙСТВА IKAROS (IKZF2) Российский патент 2024 года по МПК C07D401/04 C07D401/14 A61K31/454 A61K31/4545 A61P35/00 A61P35/02

Описание патента на изобретение RU2815714C2

Родственные заявки

Данная заявка заявляет преимущество и приоритет предварительной заявки на патент США № 62/695922, поданной 10 июля 2018 г., полное содержание которой включено в настоящий документ посредством ссылки во всей своей полноте.

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к соединениям на основе 3-(5-амино-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-диона и композициям на их основе, и их применению в лечении заболеваний или нарушений, связанных с белком с "цинковыми пальцами" 2 семейства IKAROS (IKZF2) или при которых снижение уровней содержания белка IKZF2 или IKZF4 может обеспечивать уменьшение тяжести заболевания или нарушения.

Предпосылки изобретения

Белок с "цинковыми пальцами" 2 семейства IKAROS (IKZF2) (также называемый Helios) является одним из пяти членов семейства факторов транскрипции Ikaros, обнаруживаемых у млекопитающих. IKZF2 содержит четыре домена с "цинковыми пальцами" возле N-конца, которые участвуют в связывании ДНК, и два домена с "цинковыми пальцами" на С-конце, которые участвуют в димеризации белка. IKZF2 приблизительно на 50% идентичен членам семейства IKAROS - Ikaros (IKZF1), Aiolos (IKZF3) и Eos (IKZF4) с самой высокой гомологией в областях "цинкового пальца" (идентичность 80%+). Эти четыре фактора транскрипции семейства Ikaros связываются с одним и тем же консенсусным сайтом ДНК и могут гетеродимеризоваться друг с другом при совместной экспрессии в клетках. Пятый белок семейства Ikaros, Pegasus (IKZF5), только на 25% идентичен IKZF2, связывает другой сайт ДНК, в отличие от других членов семейства IKAROS, и не может легко гетеродимеризоваться с другими белками семейства IKAROS. IKZF2, IKZF1 и IKZF3 экспрессируются в основном в гематопоэтических клетках, тогда как IKZF4 и IKZF5 экспрессируются в широком разнообразии тканей. (John, L.B., et al., (2011), Mol. Immunol. 48:1272-1278; Perdomo, J., et al., (2000), J. Biol. Chem. 275:38347-38354.)

Считается, что IKZF2 играет важную роль в функционировании и стабильности регуляторных Т-клеток (Treg). IKZF2 экспрессируются на высоком уровне на уровне mRNA и белка в популяциях регуляторных Т-клеток. Было показано, что нокдаун IKZF2 с помощью siRNA приводит к понижающей регуляции FoxP3 и ослаблению способности изолированных человеческих CD4+ CD25+ Treg блокировать активацию T-клеток in vitro. Кроме того, было показано, что сверхэкспрессия IKZF2 в изолированных мышиных Treg увеличивает экспрессию связанных с Treg маркеров, таких как CD103 и GITR, а клетки со сверхэкспрессией IKZF2 демонстрируют повышенную супрессию T-клеток-респондеров. Также было обнаружено, что IKZF2 связывает промотор FoxP3, определяющий фактор транскрипции регуляторной линии Т-клеток, и влияет на экспрессию FoxP3.

Было показано, что нокаут IKZF2 в FoxP3-экспрессирующих Treg у мышей приводит к тому, что активированные Treg теряют свои ингибирующие свойства, экспрессируют T-эффекторные цитокины и принимают на себя T-эффекторные функции. У мышей-мутантов, нокаутированных по IKZF2, развивается аутоиммунное заболевание в возрасте 6-8 месяцев с повышенным числом активированных CD4 и CD8 Т-клеток, фолликулярных хелперных Т-клеток и В-клеток зародышевого центра. Полагают, что такой наблюдаемый эффект присущ клеткам, поскольку у мышей Rag2-/-, которым пересадили костный мозг от нокаутированных по IKZF2 мышей, но не костный мозг от IKZF2+/+, развивается аутоиммунное заболевание. Прямое доказательство того, что IKZF2 влияет на функцию регуляторных Т-клеток, было получено при исследовании на мышах, у которых IKZF2 был удален только в экспрессирующих FoxP3 клетках (FoxP3-YFP-Cre Heliosfl/fl). Результаты показали, что у этих мышей тоже развивается аутоиммунное заболевание с аналогичными признаками, которые наблюдаются при нокауте по IKZF2 во всем организме животного. Более того, анализ сигнальных путей в эксперименте CHIP-SEQ также позволил предположить, что IKZF2 влияет на экспрессию генов в сигнальном пути STAT5/IL-2Rα в регуляторных Т-клетках. Было показано, что этот эффект от утраты IKZF2 становится более очевидным после иммунизации (вирусная инфекция или инъекция овечьей крови), и было отмечено, что после иммуностимуляции отрицательные регуляторные по IKZF2 T-клетки стали приобретать свойства эффекторных T-клеток. (Getnet, D., et al., Mol. Immunol. (2010), 47:1595-1600; Bin Dhuban, K., et al., (2015), J. Immunol. 194:3687-96; Kim, H-J., et al., (2015), Science 350:334-339; Nakawaga, H., et al., (2016) PNAS, 113: 6248-6253).

Было показано, что сверхэкспрессия изоформ Ikaros, в которых отсутствуют области связывания ДНК, связана со многими гематологическими злокачественными опухолями человека. Недавно мутации в гене IKZF2, которые приводят к аномальным вариантам сплайсинга, были обнаружены при видах Т-клеточного лейкоза у взрослых и при остром лимфобластном лейкозе с низкой гиподиплоидностью. Было высказано предположение, что эти способные к димеризации изоформы оказывают доминирующее негативное влияние на факторы транскрипции семейства Ikaros, которые вызывают первичное развитие лимфом. У нокаутных по IKZF2 мутантов, выживших до зрелого возраста, лимфомы не развиваются, что подтверждает эту гипотезу (Asanuma, S., et al., (2013), Cancer Sci. 104:1097-1106; Zhang, Z., et al., (2007), Blood 109:2190-2197; Kataoka, D., et al., (2015), Nature Genetics 47:1304-1315.).

В настоящее время антитела к CTLA4 используют в клинической практике для нацеливания Treg в опухолях. Однако нацеливание на CTLA4 часто вызывает системную активацию T-эффекторных клеток, что приводит к чрезмерной токсичности и ограничению терапевтической пользы. Не более 3/4 пациентов, получавших комбинацию антител к PD1 и антител к CTLA4, сообщили о побочных эффектах 3 степени или выше (Национальный институт рака, Отдел лечения и диагностики рака, Общая терминология для побочных эффектов (CTCAE), https://ctep.cancer.gov/protocolDevelopment/electronic_applications/ctc.htm). Таким образом, существует острая необходимость в создании соединений, которые нацелены на Treg в опухолях и не вызывают системную активацию T-эффекторных клеток.

IKZF2-специфичное средство разрушения обладает способностью фокусировать усиленный иммунный ответ на области внутри или вблизи опухолей, обеспечивая потенциально более переносимое и менее токсичное терапевтическое средство для лечения рака.

Краткое описание изобретения

Соединения по настоящему изобретению находят применение в качестве терапевтических средств, в частности, для лечения видов рака и заболеваний, связанных с ними. В одном аспекте соединения по настоящему изобретению характеризуются активностью средства разрушения IKZF2, предпочтительно, они характеризуются такой активностью при уровне содержания 50 мкМ или ниже, и более предпочтительно они характеризуются такой активностью при уровне содержания 10 мкМ или ниже. В другом аспекте соединения по настоящему изобретению характеризуются активностью как средство разрушения в отношении IKZF2, причем эта активность является селективной относительно одного или нескольких из IKZF1, IKZF3, IKZF4 и/или IKZF5. В другом аспекте соединения по настоящему изобретению характеризуются активностью как средство разрушения как в отношении IKZF2, так и IKZF4. Соединения по настоящему изобретению полезны для лечения рака и других заболеваний, при которых такая активность средства разрушения обеспечивает преимущества для пациента. Например, безотносительно к какой-либо теории, авторы полагают, что уменьшение уровней содержания IKZF2 в Treg в опухоли может позволить иммунной системе пациента более эффективно атаковать заболевание. Таким образом, в настоящем изобретении предусмотрены новые средства разрушения IKZF2, пригодные для лечения рака и других заболеваний.

Первый аспект настоящего изобретения относится к соединениям формулы (I')

где:

каждый из X₁ и X₂ независимо представляет собой H, (C₁-C₄)алкил, (C₁-C₆)алкокси, (C₁-C₄)галогеналкил,

(C₁-C₆)галогеналкокси, (C₃-C₇)циклоалкил, галоген, CN, -OH или -NH₂;

R_x представляет собой H или D;

каждый из R_a и R_b независимо представляет собой H или D, или R_a и R_b вместе с атомом, к которому они присоединены, образуют =(O);

R₁ представляет собой

R₂ представляет собой H, (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₆)галогеналкил или (C₃-C₆)циклоалкил; или

R₂ и R₇ вместе с атомами азота, к которым они присоединены, образуют 6- или 7-членное гетероциклоалкильное кольцо;

каждый R₃ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₆)алкокси,

(C₁-C₆)галогеналкил, (C₁-C₆)галогеналкокси, галоген, CN, -OH или -NH₂; или

два R₃ вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, образуют (C₃-C₇)циклоалкил или 4-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S; или два R₃, когда они находятся при смежных атомах углерода, вместе образуют фенил или 5- или 6-членное гетероарильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S; или

R₃ и R₇ вместе с атомами азота и углерода, к которым они присоединены, образуют 5- или 6-членное гетероциклоалкильное кольцо, необязательно содержащее 1-2 дополнительных гетероатома, выбранные из O, N и S, необязательно замещенное одним - четырьмя заместителями, каждый из которых независимо выбран из (C₁-C₆)алкила, (C₁-C₆)галогеналкила, галогена, -OH, CN и -NH₂;

каждый R₄ представляет собой (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₆)алкокси, (C₁-C₆)галогеналкил, (C₁-C₆)галогеналкокси, галоген, -OH или

-NH₂;

R₅ представляет собой -OR₆ или -NR₇R_7';

R₆ представляет собой H, (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₆)галогеналкил, -C(O)(C₁-C₆)алкил, (C₃-C₇)циклоалкил, 5- или 6-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, (C₆-C₁₀)арил или 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом алкил необязательно замещен одним - тремя заместителями, каждый из которых независимо выбран из (C₆-C₁₀)арила и 5- или 6-членного гетероарила, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S;

каждый из R₇ и R_7' независимо представляет собой H, (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₆)галогеналкил, (C₃-C₇)циклоалкил, 5- или 6-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, (C₆-C₁₀)арил или 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом алкил необязательно замещен одним - тремя R₈, и при этом циклоалкил, гетероциклоалкил, арил и гетероарил необязательно замещены одним - четырьмя R₁₁; или

R₇ и R_7' вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 4-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, необязательно содержащее 1-2 дополнительных гетероатома, выбранные из O, N и S, необязательно замещенное одним - четырьмя R₉; или

R₂ и R₇ вместе с атомами азота, к которым они присоединены, образуют 6- или 7-членное гетероциклоалкильное кольцо; или

каждый R₈ представляет собой -C(O)OH, (C₃-C₇)циклоалкил, 4-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, (C₆-C₁₀)арил или 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом циклоалкил, гетероциклоалкил, арил и гетероарил необязательно замещены одним - четырьмя R₁₀;

каждый R₉ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₆)алкокси, (C₁-C₆)галогеналкил, (C₁-C₆)галогеналкокси, галоген, -OH, CN, -NR₁₂R₁₃ или -NH₂, при этом алкокси необязательно замещен одним - тремя заместителями, независимо выбранными из (C₃-C₇)циклоалкила, 4-7-членного гетероциклоалкильного кольца, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, (C₆-C₁₀)арила и 5- или 6-членного гетероарила, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S; или

два R₉ вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют (C₅-C₇)циклоалкил или 5-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-2 гетероатома, выбранные из O, N и S;

каждый R₁₀ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₆)галогеналкил, (C₁-C₆)алкокси,

(C₁-C₆)галогеналкокси, галоген, -OH, CN или -NH₂; или

два R₁₀ вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют (C₄-C₇)циклоалкил или 5-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-2 гетероатома, выбранные из O, N и S, необязательно замещенное одним - четырьмя заместителями, каждый из которых независимо выбран из (C₁-C₆)алкила, (C₁-C₆)галогеналкила, галогена, -OH, CN или -NH₂;

каждый R₁₁ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₆)галогеналкил, (C₁-C₆)алкокси,

(C₁-C₆)галогеналкокси, галоген, -OH, CN или -NH₂;

каждый из R₁₂ и R₁₃ независимо выбран из (C₁-C₆)алкила, (C₁-C₆)галогеналкила, (C₃-C₇)циклоалкила, 4-7-членного гетероциклоалкильного кольца, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, (C₆-C₁₀)арила и 5- или 6-членного гетероарила, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S;

каждый из m и m1 независимо равняется 0, 1 или 2;

n1 равняется 0, 1, 2 или 3;

каждый из n2 и n3 независимо равняется 1 или 2; и

каждый из s и n независимо равняется 1, 2 или 3, где s+n ≤ 4;

или их фармацевтически приемлемым солям, гидратам, сольватам, пролекарствам на их основе, их стереоизомерам и таутомерам.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединениям формулы (I'), характеризующимся структурой формулы (I):

где:

R_x представляет собой H или D;

R₁ представляет собой или ;

R₂ представляет собой H, (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₆)галогеналкил или (C₃-C₆)циклоалкил; или

каждый R₃ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₆)алкокси,

(C₁-C₆)галогеналкил, (C₁-C₆)галогеналкокси, галоген, CN, -OH или -NH₂; или

-NH₂;

R₅ представляет собой -OR₆ или -NR₇R_7';

каждый R₈ представляет собой (C₃-C₇)циклоалкил, 4-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, (C₆-C₁₀)арил или 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом циклоалкил, гетероциклоалкил, арил и гетероарил необязательно замещены одним - четырьмя R₁₀;

каждый R₉ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₆)галогеналкил, галоген, -OH, CN или

-NH₂; или

каждый R₁₀ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₆)галогеналкил, галоген, -OH, CN или -NH₂; или

два R₁₀ вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют (C₅-C₇)циклоалкил или 5-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-2 гетероатома, выбранные из O, N и S, необязательно замещенное одним - четырьмя заместителями, каждый из которых независимо выбран из (C₁-C₆)алкила, (C₁-C₆)галогеналкила, галогена, -OH, CN или -NH₂;

каждый из m и m1 независимо равняется 0, 1 или 2;

n1 равняется 0, 1, 2 или 3; и

каждый из s и n независимо равняется 1, 2 или 3, где s+n ≤ 4;

В одном аспекте настоящего изобретения атомы водорода в соединении формулы (I') или формулы (I) присутствуют в их нормальном изотопном составе. В предпочтительном аспекте настоящего изобретения атомы водорода изотопно обогащены дейтерием (D), и в особенно предпочтительном аспекте настоящего изобретения водород в положении R_x обогащен D, как более подробно обсуждается ниже в отношении изотопов и изотопного обогащения.

Другой аспект настоящего изобретения относится к фармацевтической композиции, содержащей терапевтически эффективное количество соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера и фармацевтически приемлемые носитель или вспомогательное вещество. Фармацевтическая композиция является пригодной в лечении связанных с IKZF2 заболеваний или нарушений. Фармацевтическая композиция может дополнительно содержать по меньшей мере одно дополнительное фармацевтическое средство.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей терапевтически эффективное количество соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера и фармацевтически приемлемые носитель или вспомогательное вещество, для применения в лечении связанных с IKZF2 заболевания или нарушения путем уменьшения уровней содержания белка IKZF2, где уменьшение уровней содержания белка IKZF2 обеспечивает лечение связанных с IKZF2 заболевания или нарушения. Фармацевтическая композиция является пригодной в лечении связанных с IKZF2 заболеваний или нарушений. Фармацевтическая композиция может дополнительно содержать по меньшей мере одно дополнительное фармацевтическое средство.

Другой аспект настоящего изобретения относится к фармацевтической композиции, содержащей терапевтически эффективное количество соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера и фармацевтически приемлемые носитель или вспомогательное вещество. Фармацевтическая композиция является пригодной в лечении заболеваний или нарушений, на которые влияет уменьшение уровней содержания белка IKZF2. Фармацевтическая композиция может дополнительно содержать по меньшей мере одно дополнительное фармацевтическое средство.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей терапевтически эффективное количество соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера и фармацевтически приемлемые носитель или вспомогательное вещество, для применения в лечении заболевания или нарушения, на которые влияет уменьшение уровней содержания белка IKZF2, где уменьшение уровней содержания белка IKZF2 обеспечивает лечение заболевания или нарушения. Фармацевтическая композиция может дополнительно содержать по меньшей мере одно дополнительное фармацевтическое средство.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу разрушения IKZF2. Способ включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера.

Другой аспект настоящего изобретения относится к способу модулирования уровней содержания белка IKZF2. Способ включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу снижения уровней содержания белка IKZF2. Способ включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера.

Другой аспект настоящего изобретения относится к способу уменьшения уровня пролиферации клетки. Способ включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера и обеспечение уменьшения уровней содержания белка IKZF2.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения рака. Способ включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера. В одном варианте осуществления рак выбран из рака предстательной железы, карциномы молочной железы, лимфом, лейкоза, миеломы, карциномы мочевого пузыря, рака толстой кишки, меланомы кожи, гепатоцеллюлярной карциномы, рака эндометрия, рака яичника, рака шейки матки, рака легкого, рака почки, мультиформной глиобластомы, глиомы, рака щитовидной железы, опухоли паращитовидной железы, рака носоглотки, рака языка, рака поджелудочной железы, рака пищевода, холангиокарциномы, рака желудка и сарком мягких тканей, выбранных из рабдомиосаркомы (RMS), синовиальной саркомы, остеосаркомы, видов рабдоидного рака и саркомы Юинга. В другом варианте осуществления рак выбран из немелкоклеточного рака легкого (NSCLC), меланомы, трижды негативного рака молочной железы (TNBC), рака носоглотки (NPC), колоректального рака с микросателлитной стабильностью (mssCRC), тимомы, карциноида, острого миелогенного лейкоза и стромальной опухоли желудочно-кишечного тракта (GIST). В еще одном варианте осуществления рак выбран из немелкоклеточного рака легкого (NSCLC), меланомы, трижды негативного рака молочной железы (TNBC), рака носоглотки (NPC) и колоректального рака с микросателлитной стабильностью (mssCRC). В другом варианте осуществления рак представляет собой рак, иммунный ответ на который недостаточен, или рак с иммуногенными свойствами.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению фармацевтической композиции, содержащей терапевтически эффективное количество соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера и фармацевтически приемлемые носитель или вспомогательное вещество, в изготовлении лекарственного препарата для лечения связанных с IKZF2 заболевания или нарушения.

Другой аспект настоящего изобретения относится к способу лечения связанных с IKZF2 заболевания или нарушения, включающему стадию введения субъекту, нуждающемуся в этом, фармацевтической композиции, содержащей терапевтически эффективное количество соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера и фармацевтически приемлемые носитель или вспомогательное вещество.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения связанных с IKZF2 заболевания или нарушения, включающему стадию введения субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера.

Другой аспект настоящего изобретения относится к способу лечения заболевания или нарушения, на которые влияет модулирование уровней содержания белка IKZF2, включающему стадию введения субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера.

Другой аспект настоящего изобретения относится к способу лечения заболевания или нарушения, на которое влияет обеспечение уменьшения уровней содержания белка IKZF2, включающему стадию введения субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера.

Другой аспект настоящего изобретения относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру для применения в лечении заболевания или нарушения, на которые влияет уменьшение уровней содержания белка IKZF2.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения рака, включающему стадию введения субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера, где рак представляет собой рак, иммунный ответ на который недостаточен, или рак с иммуногенными свойствами.

Другой аспект настоящего изобретения относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру для применения в изготовлении лекарственного препарата для лечения заболевания или нарушения, ассоциированных с модулированием уровней содержания белка IKZF2. В одном варианте осуществления заболевание или нарушение выбраны из рака предстательной железы, карциномы молочной железы, лимфом, лейкоза, миеломы, карциномы мочевого пузыря, рака толстой кишки, меланомы кожи, гепатоцеллюлярной карциномы, рака эндометрия, рака яичника, рака шейки матки, рака легкого, рака почки, мультиформной глиобластомы, глиомы, рака щитовидной железы, опухоли паращитовидной железы, рака носоглотки, рака языка, рака поджелудочной железы, рака пищевода, холангиокарциномы, рака желудка и сарком мягких тканей, выбранных из рабдомиосаркомы (RMS), синовиальной саркомы, остеосаркомы, видов рабдоидного рака и саркомы Юинга. В одном варианте осуществления заболевание или нарушение выбраны из немелкоклеточного рака легкого (NSCLC), меланомы, трижды негативного рака молочной железы (TNBC), рака носоглотки (NPC), колоректального рака с микросателлитной стабильностью (mssCRC), тимомы, карциноида, острого миелогенного лейкоза и стромальной опухоли желудочно-кишечного тракта (GIST). В другом варианте осуществления заболевание или нарушение выбраны из немелкоклеточного рака легкого (NSCLC), меланомы, трижды негативного рака молочной железы (TNBC), рака носоглотки (NPC) и колоректального рака с микросателлитной стабильностью (mssCRC).

В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера в лечении заболевания или нарушения, ассоциированных с модулированием уровней содержания белка IKZF2. В одном варианте осуществления заболевание или нарушение выбраны из рака предстательной железы, карциномы молочной железы, лимфом, лейкоза, миеломы, карциномы мочевого пузыря, рака толстой кишки, меланомы кожи, гепатоцеллюлярной карциномы, рака эндометрия, рака яичника, рака шейки матки, рака легкого, рака почки, мультиформной глиобластомы, глиомы, рака щитовидной железы, опухоли паращитовидной железы, рака носоглотки, рака языка, рака поджелудочной железы, рака пищевода, холангиокарциномы, рака желудка и сарком мягких тканей, выбранных из рабдомиосаркомы (RMS), синовиальной саркомы, остеосаркомы, видов рабдоидного рака и саркомы Юинга. В одном варианте осуществления заболевание или нарушение выбраны из немелкоклеточного рака легкого (NSCLC), меланомы, трижды негативного рака молочной железы (TNBC), рака носоглотки (NPC), колоректального рака с микросателлитной стабильностью (mssCRC), тимомы, карциноида, острого миелогенного лейкоза и стромальной опухоли желудочно-кишечного тракта (GIST). В другом варианте осуществления заболевание или нарушение выбраны из немелкоклеточного рака легкого (NSCLC), меланомы, трижды негативного рака молочной железы (TNBC), рака носоглотки (NPC) и колоректального рака с микросателлитной стабильностью (mssCRC).

Другой аспект настоящего изобретения относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру для применения в изготовлении лекарственного препарата для лечения заболевания или нарушения, ассоциированных с уменьшением уровней содержания белка IKZF2. В одном варианте осуществления заболевание или нарушение выбраны из рака предстательной железы, карциномы молочной железы, лимфом, лейкоза, миеломы, карциномы мочевого пузыря, рака толстой кишки, меланомы кожи, гепатоцеллюлярной карциномы, рака эндометрия, рака яичника, рака шейки матки, рака легкого, рака почки, мультиформной глиобластомы, глиомы, рака щитовидной железы, опухоли паращитовидной железы, рака носоглотки, рака языка, рака поджелудочной железы, рака пищевода, холангиокарциномы, рака желудка и сарком мягких тканей, выбранных из рабдомиосаркомы (RMS), синовиальной саркомы, остеосаркомы, видов рабдоидного рака и саркомы Юинга. В одном варианте осуществления заболевание или нарушение выбраны из немелкоклеточного рака легкого (NSCLC), меланомы, трижды негативного рака молочной железы (TNBC), рака носоглотки (NPC), колоректального рака с микросателлитной стабильностью (mssCRC), тимомы, карциноида, острого миелогенного лейкоза и стромальной опухоли желудочно-кишечного тракта (GIST). В другом варианте осуществления заболевание или нарушение выбраны из немелкоклеточного рака легкого (NSCLC), меланомы, трижды негативного рака молочной железы (TNBC), рака носоглотки (NPC) и колоректального рака с микросателлитной стабильностью (mssCRC).

В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера в лечении заболевания или нарушения, ассоциированных с уменьшением уровней содержания белка IKZF2. В одном варианте осуществления заболевание или нарушение выбраны из рака предстательной железы, карциномы молочной железы, лимфом, лейкоза, миеломы, карциномы мочевого пузыря, рака толстой кишки, меланомы кожи, гепатоцеллюлярной карциномы, рака эндометрия, рака яичника, рака шейки матки, рака легкого, рака почки, мультиформной глиобластомы, глиомы, рака щитовидной железы, опухоли паращитовидной железы, рака носоглотки, рака языка, рака поджелудочной железы, рака пищевода, холангиокарциномы, рака желудка и сарком мягких тканей, выбранных из рабдомиосаркомы (RMS), синовиальной саркомы, остеосаркомы, видов рабдоидного рака и саркомы Юинга. В одном варианте осуществления заболевание или нарушение выбраны из немелкоклеточного рака легкого (NSCLC), меланомы, трижды негативного рака молочной железы (TNBC), рака носоглотки (NPC), колоректального рака с микросателлитной стабильностью (mssCRC), тимомы, карциноида, острого миелогенного лейкоза и стромальной опухоли желудочно-кишечного тракта (GIST). В другом варианте осуществления заболевание или нарушение выбраны из немелкоклеточного рака легкого (NSCLC), меланомы, трижды негативного рака молочной железы (TNBC), рака носоглотки (NPC) и колоректального рака с микросателлитной стабильностью (mssCRC).

Другой аспект настоящего изобретения относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру для применения в изготовлении лекарственного препарата для лечения заболевания или нарушения, ассоциированных со снижением уровней содержания белка IKZF2. В одном варианте осуществления заболевание или нарушение выбраны из рака предстательной железы, карциномы молочной железы, лимфом, лейкоза, миеломы, карциномы мочевого пузыря, рака толстой кишки, меланомы кожи, гепатоцеллюлярной карциномы, рака эндометрия, рака яичника, рака шейки матки, рака легкого, рака почки, мультиформной глиобластомы, глиомы, рака щитовидной железы, опухоли паращитовидной железы, рака носоглотки, рака языка, рака поджелудочной железы, рака пищевода, холангиокарциномы, рака желудка и сарком мягких тканей, выбранных из рабдомиосаркомы (RMS), синовиальной саркомы, остеосаркомы, видов рабдоидного рака и саркомы Юинга. В одном варианте осуществления заболевание или нарушение выбраны из немелкоклеточного рака легкого (NSCLC), меланомы, трижды негативного рака молочной железы (TNBC), рака носоглотки (NPC), колоректального рака с микросателлитной стабильностью (mssCRC), тимомы, карциноида, острого миелогенного лейкоза и стромальной опухоли желудочно-кишечного тракта (GIST). В другом варианте осуществления заболевание или нарушение выбраны из немелкоклеточного рака легкого (NSCLC), меланомы, трижды негативного рака молочной железы (TNBC), рака носоглотки (NPC) и колоректального рака с микросателлитной стабильностью (mssCRC).

В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера в лечении заболевания или нарушения, ассоциированных со снижением уровней содержания белка IKZF2. В одном варианте осуществления заболевание или нарушение выбраны из рака предстательной железы, карциномы молочной железы, лимфом, лейкоза, миеломы, карциномы мочевого пузыря, рака толстой кишки, меланомы кожи, гепатоцеллюлярной карциномы, рака эндометрия, рака яичника, рака шейки матки, рака легкого, рака почки, мультиформной глиобластомы, глиомы, рака щитовидной железы, опухоли паращитовидной железы, рака носоглотки, рака языка, рака поджелудочной железы, рака пищевода, холангиокарциномы, рака желудка и сарком мягких тканей, выбранных из рабдомиосаркомы (RMS), синовиальной саркомы, остеосаркомы, видов рабдоидного рака и саркомы Юинга. В одном варианте осуществления заболевание или нарушение выбраны из немелкоклеточного рака легкого (NSCLC), меланомы, трижды негативного рака молочной железы (TNBC), рака носоглотки (NPC), колоректального рака с микросателлитной стабильностью (mssCRC), тимомы, карциноида, острого миелогенного лейкоза и стромальной опухоли желудочно-кишечного тракта (GIST). В другом варианте осуществления заболевание или нарушение выбраны из немелкоклеточного рака легкого (NSCLC), меланомы, трижды негативного рака молочной железы (TNBC), рака носоглотки (NPC) и колоректального рака с микросателлитной стабильностью (mssCRC).

Другой аспект настоящего изобретения относится к способу лечения рака, включающему стадию введения субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера, при этом рак выбран из рака предстательной железы, карциномы молочной железы, лимфом, лейкоза, миеломы, карциномы мочевого пузыря, рака толстой кишки, меланомы кожи, гепатоцеллюлярной карциномы, рака эндометрия, рака яичника, рака шейки матки, рака легкого, рака почки, мультиформной глиобластомы, глиомы, рака щитовидной железы, опухоли паращитовидной железы, рака носоглотки, рака языка, рака поджелудочной железы, рака пищевода, холангиокарциномы, рака желудка и сарком мягких тканей, выбранных из рабдомиосаркомы (RMS), синовиальной саркомы, остеосаркомы, видов рабдоидного рака и саркомы Юинга. В одном варианте осуществления рак выбран из немелкоклеточного рака легкого (NSCLC), меланомы, трижды негативного рака молочной железы (TNBC), рака носоглотки (NPC), колоректального рака с микросателлитной стабильностью (mssCRC), тимомы, карциноида, острого миелогенного лейкоза и стромальной опухоли желудочно-кишечного тракта (GIST). В другом варианте осуществления рак выбран из немелкоклеточного рака легкого (NSCLC), меланомы, трижды негативного рака молочной железы (TNBC), рака носоглотки (NPC) и колоректального рака с микросателлитной стабильностью (mssCRC).

В другом аспекте настоящее изобретение относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру для применения в лечении рака, при этом рак выбран из рака предстательной железы, карциномы молочной железы, лимфом, лейкоза, миеломы, карциномы мочевого пузыря, рака толстой кишки, меланомы кожи, гепатоцеллюлярной карциномы, рака эндометрия, рака яичника, рака шейки матки, рака легкого, рака почки, мультиформной глиобластомы, глиомы, рака щитовидной железы, опухоли паращитовидной железы, рака носоглотки, рака языка, рака поджелудочной железы, рака пищевода, холангиокарциномы, рака желудка и сарком мягких тканей, выбранных из рабдомиосаркомы (RMS), синовиальной саркомы, остеосаркомы, видов рабдоидного рака и саркомы Юинга. В одном варианте осуществления рак выбран из немелкоклеточного рака легкого (NSCLC), меланомы, трижды негативного рака молочной железы (TNBC), рака носоглотки (NPC), колоректального рака с микросателлитной стабильностью (mssCRC), тимомы, карциноида, острого миелогенного лейкоза и стромальной опухоли желудочно-кишечного тракта (GIST). В другом варианте осуществления рак выбран из немелкоклеточного рака легкого (NSCLC), меланомы, трижды негативного рака молочной железы (TNBC), рака носоглотки (NPC) и колоректального рака с микросателлитной стабильностью (mssCRC).

Другой аспект настоящего изобретения относится к применению соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера в изготовлении лекарственного препарата для лечения рака, при этом рак выбран из рака предстательной железы, карциномы молочной железы, лимфом, лейкоза, миеломы, карциномы мочевого пузыря, рака толстой кишки, меланомы кожи, гепатоцеллюлярной карциномы, рака эндометрия, рака яичника, рака шейки матки, рака легкого, рака почки, мультиформной глиобластомы, глиомы, рака щитовидной железы, опухоли паращитовидной железы, рака носоглотки, рака языка, рака поджелудочной железы, рака пищевода, холангиокарциномы, рака желудка и сарком мягких тканей, выбранных из рабдомиосаркомы (RMS), синовиальной саркомы, остеосаркомы, видов рабдоидного рака и саркомы Юинга. В одном варианте осуществления рак выбран из немелкоклеточного рака легкого (NSCLC), меланомы, трижды негативного рака молочной железы (TNBC), рака носоглотки (NPC), колоректального рака с микросателлитной стабильностью (mssCRC), тимомы, карциноида, острого миелогенного лейкоза и стромальной опухоли желудочно-кишечного тракта (GIST). В другом варианте осуществления рак выбран из немелкоклеточного рака легкого (NSCLC), меланомы, трижды негативного рака молочной железы (TNBC), рака носоглотки (NPC) и колоректального рака с микросателлитной стабильностью (mssCRC).

В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения заболевания или нарушения, на которые влияет модулирование уровней содержания белка IKZF2, включающему стадию введения субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера, при этом заболевание или нарушение выбраны из рака предстательной железы, карциномы молочной железы, лимфом, лейкоза, миеломы, карциномы мочевого пузыря, рака толстой кишки, меланомы кожи, гепатоцеллюлярной карциномы, рака эндометрия, рака яичника, рака шейки матки, рака легкого, рака почки, мультиформной глиобластомы, глиомы, рака щитовидной железы, опухоли паращитовидной железы, рака носоглотки, рака языка, рака поджелудочной железы, рака пищевода, холангиокарциномы, рака желудка и сарком мягких тканей, выбранных из рабдомиосаркомы (RMS), синовиальной саркомы, остеосаркомы, видов рабдоидного рака и саркомы Юинга. В одном варианте осуществления заболевание или нарушение выбраны из немелкоклеточного рака легкого (NSCLC), меланомы, трижды негативного рака молочной железы (TNBC), рака носоглотки (NPC), колоректального рака с микросателлитной стабильностью (mssCRC), тимомы, карциноида, острого миелогенного лейкоза и стромальной опухоли желудочно-кишечного тракта (GIST). В другом варианте осуществления заболевание или нарушение выбраны из немелкоклеточного рака легкого (NSCLC), меланомы, трижды негативного рака молочной железы (TNBC), рака носоглотки (NPC) и колоректального рака с микросателлитной стабильностью (mssCRC).

Другой аспект настоящего изобретения относится к способу лечения заболевания или нарушения, на которые влияет уменьшение уровней содержания белка IKZF2, включающему стадию введения субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера, при этом заболевание или нарушение выбраны из рака предстательной железы, карциномы молочной железы, лимфом, лейкоза, миеломы, карциномы мочевого пузыря, рака толстой кишки, меланомы кожи, гепатоцеллюлярной карциномы, рака эндометрия, рака яичника, рака шейки матки, рака легкого, рака почки, мультиформной глиобластомы, глиомы, рака щитовидной железы, опухоли паращитовидной железы, рака носоглотки, рака языка, рака поджелудочной железы, рака пищевода, холангиокарциномы, рака желудка и сарком мягких тканей, выбранных из рабдомиосаркомы (RMS), синовиальной саркомы, остеосаркомы, видов рабдоидного рака и саркомы Юинга. В одном варианте осуществления заболевание или нарушение выбраны из немелкоклеточного рака легкого (NSCLC), меланомы, трижды негативного рака молочной железы (TNBC), рака носоглотки (NPC), колоректального рака с микросателлитной стабильностью (mssCRC), тимомы, карциноида, острого миелогенного лейкоза и стромальной опухоли желудочно-кишечного тракта (GIST). В другом варианте осуществления заболевание или нарушение выбраны из немелкоклеточного рака легкого (NSCLC), меланомы, трижды негативного рака молочной железы (TNBC), рака носоглотки (NPC) и колоректального рака с микросателлитной стабильностью (mssCRC).

В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения заболевания или нарушения, на которые влияет снижение уровней содержания белка IKZF2, включающему стадию введения субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера, при этом заболевание или нарушение выбраны из рака предстательной железы, карциномы молочной железы, лимфом, лейкоза, миеломы, карциномы мочевого пузыря, рака толстой кишки, меланомы кожи, гепатоцеллюлярной карциномы, рака эндометрия, рака яичника, рака шейки матки, рака легкого, рака почки, мультиформной глиобластомы, глиомы, рака щитовидной железы, опухоли паращитовидной железы, рака носоглотки, рака языка, рака поджелудочной железы, рака пищевода, холангиокарциномы, рака желудка и сарком мягких тканей, выбранных из рабдомиосаркомы (RMS), синовиальной саркомы, остеосаркомы, видов рабдоидного рака и саркомы Юинга. В одном варианте осуществления заболевание или нарушение выбраны из немелкоклеточного рака легкого (NSCLC), меланомы, трижды негативного рака молочной железы (TNBC), рака носоглотки (NPC), колоректального рака с микросателлитной стабильностью (mssCRC), тимомы, карциноида, острого миелогенного лейкоза и стромальной опухоли желудочно-кишечного тракта (GIST). В другом варианте осуществления заболевание или нарушение выбраны из немелкоклеточного рака легкого (NSCLC), меланомы, трижды негативного рака молочной железы (TNBC), рака носоглотки (NPC) и колоректального рака с микросателлитной стабильностью (mssCRC).

В другом аспекте настоящее изобретение относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру для применения в лечении заболевания или нарушения, на которые влияет модулирование уровней содержания белка IKZF2, при этом заболевание или нарушение выбраны из рака предстательной железы, карциномы молочной железы, лимфом, лейкоза, миеломы, карциномы мочевого пузыря, рака толстой кишки, меланомы кожи, гепатоцеллюлярной карциномы, рака эндометрия, рака яичника, рака шейки матки, рака легкого, рака почки, мультиформной глиобластомы, глиомы, рака щитовидной железы, опухоли паращитовидной железы, рака носоглотки, рака языка, рака поджелудочной железы, рака пищевода, холангиокарциномы, рака желудка и сарком мягких тканей, выбранных из рабдомиосаркомы (RMS), синовиальной саркомы, остеосаркомы, видов рабдоидного рака и саркомы Юинга. В одном варианте осуществления заболевание или нарушение выбраны из немелкоклеточного рака легкого (NSCLC), меланомы, трижды негативного рака молочной железы (TNBC), рака носоглотки (NPC), колоректального рака с микросателлитной стабильностью (mssCRC), тимомы, карциноида, острого миелогенного лейкоза и стромальной опухоли желудочно-кишечного тракта (GIST). В другом варианте осуществления заболевание или нарушение выбраны из немелкоклеточного рака легкого (NSCLC), меланомы, трижды негативного рака молочной железы (TNBC), рака носоглотки (NPC) и колоректального рака с микросателлитной стабильностью (mssCRC).

В другом аспекте настоящее изобретение относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру для применения в лечении заболевания или нарушения, на которые влияет уменьшение уровней содержания белка IKZF2, при этом заболевание или нарушение выбраны из рака предстательной железы, карциномы молочной железы, лимфом, лейкоза, миеломы, карциномы мочевого пузыря, рака толстой кишки, меланомы кожи, гепатоцеллюлярной карциномы, рака эндометрия, рака яичника, рака шейки матки, рака легкого, рака почки, мультиформной глиобластомы, глиомы, рака щитовидной железы, опухоли паращитовидной железы, рака носоглотки, рака языка, рака поджелудочной железы, рака пищевода, холангиокарциномы, рака желудка и сарком мягких тканей, выбранных из рабдомиосаркомы (RMS), синовиальной саркомы, остеосаркомы, видов рабдоидного рака и саркомы Юинга. В одном варианте осуществления заболевание или нарушение выбраны из немелкоклеточного рака легкого (NSCLC), меланомы, трижды негативного рака молочной железы (TNBC), рака носоглотки (NPC), колоректального рака с микросателлитной стабильностью (mssCRC), тимомы, карциноида, острого миелогенного лейкоза и стромальной опухоли желудочно-кишечного тракта (GIST). В другом варианте осуществления заболевание или нарушение выбраны из немелкоклеточного рака легкого (NSCLC), меланомы, трижды негативного рака молочной железы (TNBC), рака носоглотки (NPC) и колоректального рака с микросателлитной стабильностью (mssCRC).

В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера в изготовлении лекарственного препарата для лечения заболевания или нарушения, на которые влияет модулирование уровней содержания IKZF2, при этом заболевание или нарушение выбраны из рака предстательной железы, карциномы молочной железы, лимфом, лейкоза, миеломы, карциномы мочевого пузыря, рака толстой кишки, меланомы кожи, гепатоцеллюлярной карциномы, рака эндометрия, рака яичника, рака шейки матки, рака легкого, рака почки, мультиформной глиобластомы, глиомы, рака щитовидной железы, опухоли паращитовидной железы, рака носоглотки, рака языка, рака поджелудочной железы, рака пищевода, холангиокарциномы, рака желудка и сарком мягких тканей, выбранных из рабдомиосаркомы (RMS), синовиальной саркомы, остеосаркомы, видов рабдоидного рака и саркомы Юинга. В одном варианте осуществления заболевание или нарушение выбраны из немелкоклеточного рака легкого (NSCLC), меланомы, трижды негативного рака молочной железы (TNBC), рака носоглотки (NPC), колоректального рака с микросателлитной стабильностью (mssCRC), тимомы, карциноида, острого миелогенного лейкоза и стромальной опухоли желудочно-кишечного тракта (GIST). В другом варианте осуществления заболевание или нарушение выбраны из немелкоклеточного рака легкого (NSCLC), меланомы, трижды негативного рака молочной железы (TNBC), рака носоглотки (NPC) и колоректального рака с микросателлитной стабильностью (mssCRC).

Другой аспект настоящего изобретения относится к применению соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера в изготовлении лекарственного препарата для лечения заболевания или нарушения, на которые влияет уменьшение уровней содержания белка IKZF2, при этом заболевание или нарушение выбраны из рака предстательной железы, карциномы молочной железы, лимфом, лейкоза, миеломы, карциномы мочевого пузыря, рака толстой кишки, меланомы кожи, гепатоцеллюлярной карциномы, рака эндометрия, рака яичника, рака шейки матки, рака легкого, рака почки, мультиформной глиобластомы, глиомы, рака щитовидной железы, опухоли паращитовидной железы, рака носоглотки, рака языка, рака поджелудочной железы, рака пищевода, холангиокарциномы, рака желудка и сарком мягких тканей, выбранных из рабдомиосаркомы (RMS), синовиальной саркомы, остеосаркомы, видов рабдоидного рака и саркомы Юинга. В одном варианте осуществления заболевание или нарушение выбраны из немелкоклеточного рака легкого (NSCLC), меланомы, трижды негативного рака молочной железы (TNBC), рака носоглотки (NPC), колоректального рака с микросателлитной стабильностью (mssCRC), тимомы, карциноида, острого миелогенного лейкоза и стромальной опухоли желудочно-кишечного тракта (GIST). В другом варианте осуществления заболевание или нарушение выбраны из немелкоклеточного рака легкого (NSCLC), меланомы, трижды негативного рака молочной железы (TNBC), рака носоглотки (NPC) и колоректального рака с микросателлитной стабильностью (mssCRC).

В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера в изготовлении лекарственного препарата для лечения заболевания или нарушения, на которые влияет снижение уровней содержания белка IKZF2, при этом заболевание или нарушение выбраны из рака предстательной железы, карциномы молочной железы, лимфом, лейкоза, миеломы, карциномы мочевого пузыря, рака толстой кишки, меланомы кожи, гепатоцеллюлярной карциномы, рака эндометрия, рака яичника, рака шейки матки, рака легкого, рака почки, мультиформной глиобластомы, глиомы, рака щитовидной железы, опухоли паращитовидной железы, рака носоглотки, рака языка, рака поджелудочной железы, рака пищевода, холангиокарциномы, рака желудка и сарком мягких тканей, выбранных из рабдомиосаркомы (RMS), синовиальной саркомы, остеосаркомы, видов рабдоидного рака и саркомы Юинга. В одном варианте осуществления заболевание или нарушение выбраны из немелкоклеточного рака легкого (NSCLC), меланомы, трижды негативного рака молочной железы (TNBC), рака носоглотки (NPC), колоректального рака с микросателлитной стабильностью (mssCRC), тимомы, карциноида, острого миелогенного лейкоза и стромальной опухоли желудочно-кишечного тракта (GIST). В другом варианте осуществления заболевание или нарушение выбраны из немелкоклеточного рака легкого (NSCLC), меланомы, трижды негативного рака молочной железы (TNBC), рака носоглотки (NPC) и колоректального рака с микросателлитной стабильностью (mssCRC).

Другой аспект настоящего изобретения относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру для применения в лечении заболевания или нарушения, на которые влияет уменьшение уровней содержания белка IKZF2, где заболевание или нарушение представляют собой рак, иммунный ответ на который недостаточен, или рак с иммуногенными свойствами.

Другой аспект настоящего изобретения относится к способу лечения связанных с IKZF2 заболевания или нарушения путем модулирования уровней содержания белка IKZF2, включающему стадию введения субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера, причем модулирование уровней содержания белка IKZF2 обеспечивает лечение связанных с IKZF2 заболевания или нарушения.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения связанных с IKZF2 заболевания или нарушения путем уменьшения уровней содержания белка IKZF2, включающему стадию введения субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера, причем уменьшение уровней содержания белка IKZF2 обеспечивает лечение связанных с IKZF2 заболевания или нарушения.

Другой аспект настоящего изобретения относится к способу лечения связанных с IKZF2 заболевания или нарушения путем снижения уровней содержания белка IKZF2, включающему стадию введения субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера, причем снижение уровней содержания белка IKZF2 обеспечивает лечение связанных с IKZF2 заболевания или нарушения.

Другой аспект настоящего изобретения относится к способу лечения связанных с IKZF2 заболевания или нарушения путем модулирования уровней содержания белка IKZF2, включающему стадию введения субъекту, нуждающемуся в этом, фармацевтической композиции, содержащей терапевтически эффективное количество соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера, причем модулирование уровней содержания белка IKZF2 обеспечивает лечение связанных с IKZF2 заболевания или нарушения.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения связанных с IKZF2 заболевания или нарушения путем уменьшения уровней содержания белка IKZF2, включающему стадию введения субъекту, нуждающемуся в этом, фармацевтической композиции, содержащей терапевтически эффективное количество соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера, причем уменьшение уровней содержания белка IKZF2 обеспечивает лечение связанных с IKZF2 заболевания или нарушения.

Другой аспект настоящего изобретения относится к способу лечения связанных с IKZF2 заболевания или нарушения путем снижения уровней содержания белка IKZF2, включающему стадию введения субъекту, нуждающемуся в этом, фармацевтической композиции, содержащей терапевтически эффективное количество соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера, причем снижение уровней содержания белка IKZF2 обеспечивает лечение связанных с IKZF2 заболевания или нарушения.

Другой аспект настоящего изобретения относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру для применения в лечении связанных с IKZF2 заболевания или нарушения путем уменьшения уровней содержания белка IKZF2, причем уменьшение уровней содержания белка IKZF2 обеспечивает лечение связанных с IKZF2 заболевания или нарушения.

Другой аспект настоящего изобретения относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру для применения в лечении связанных с IKZF2 заболевания или нарушения путем модулирования уровней содержания белка IKZF2, причем модулирование уровней содержания белка IKZF2 обеспечивает лечение связанных с IKZF2 заболевания или нарушения.

Другой аспект настоящего изобретения относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру для применения в лечении связанных с IKZF2 заболевания или нарушения путем снижения уровней содержания белка IKZF2, причем снижение уровней содержания белка IKZF2 обеспечивает лечение связанных с IKZF2 заболевания или нарушения.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера в лечении связанных с IKZF2 заболевания или нарушения путем уменьшения уровней содержания белка IKZF2, причем уменьшение уровней содержания белка IKZF2 обеспечивает лечение связанных с IKZF2 заболевания или нарушения.

Другой аспект настоящего изобретения относится к применению фармацевтической композиции, содержащей терапевтически эффективное количество соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера, в лечении связанных с IKZF2 заболевания или нарушения путем уменьшения уровней содержания белка IKZF2, причем уменьшение уровней содержания белка IKZF2 обеспечивает лечение связанных с IKZF2 заболевания или нарушения.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера в лечении связанных с IKZF2 заболевания или нарушения путем модулирования уровней содержания белка IKZF2, причем модулирование уровней содержания белка IKZF2 обеспечивает лечение связанных с IKZF2 заболевания или нарушения.

Другой аспект настоящего изобретения относится к применению фармацевтической композиции, содержащей терапевтически эффективное количество соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера, в лечении связанных с IKZF2 заболевания или нарушения путем модулирования уровней содержания белка IKZF2, причем модулирование уровней содержания белка IKZF2 обеспечивает лечение связанных с IKZF2 заболевания или нарушения.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера в лечении связанных с IKZF2 заболевания или нарушения путем снижения уровней содержания белка IKZF2, причем снижение уровней содержания белка IKZF2 обеспечивает лечение связанных с IKZF2 заболевания или нарушения.

Другой аспект настоящего изобретения относится к применению фармацевтической композиции, содержащей терапевтически эффективное количество соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера, в лечении связанных с IKZF2 заболевания или нарушения путем снижения уровней содержания белка IKZF2, причем снижение уровней содержания белка IKZF2 обеспечивает лечение связанных с IKZF2 заболевания или нарушения.

Другой аспект настоящего изобретения относится к способу лечения заболевания или нарушения путем уменьшения уровней содержания белка IKZF2, включающему стадию введения субъекту, нуждающемуся в этом, фармацевтической композиции, содержащей терапевтически эффективное количество соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера, причем уменьшение уровней содержания белка IKZF2 обеспечивает лечение заболевания или нарушения.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения заболевания или нарушения путем уменьшения уровней содержания белка IKZF2, включающему стадию введения субъекту, нуждающемуся в этом, соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера, причем уменьшение уровней содержания белка IKZF2 обеспечивает лечение заболевания или нарушения.

Другой аспект настоящего изобретения относится к способу лечения заболевания или нарушения путем модулирования уровней содержания белка IKZF2, включающему стадию введения субъекту, нуждающемуся в этом, фармацевтической композиции, содержащей терапевтически эффективное количество соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера, причем модулирование уровней содержания белка IKZF2 обеспечивает лечение заболевания или нарушения.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения заболевания или нарушения путем модулирования уровней содержания белка IKZF2, включающему стадию введения субъекту, нуждающемуся в этом, соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера, причем модулирование уровней содержания белка IKZF2 обеспечивает лечение заболевания или нарушения.

Другой аспект настоящего изобретения относится к способу лечения заболевания или нарушения путем снижения уровней содержания белка IKZF2, включающему стадию введения субъекту, нуждающемуся в этом, фармацевтической композиции, содержащей терапевтически эффективное количество соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера, причем снижение уровней содержания белка IKZF2 обеспечивает лечение заболевания или нарушения.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения заболевания или нарушения путем снижения уровней содержания белка IKZF2, включающему стадию введения субъекту, нуждающемуся в этом, соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера, причем снижение уровней содержания белка IKZF2 обеспечивает лечение заболевания или нарушения.

Другой аспект настоящего изобретения относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру для применения в лечении связанных с IKZF2 заболевания или нарушения путем уменьшения уровней содержания белка IKZF2, причем уменьшение уровней содержания белка IKZF2 обеспечивает лечение связанных с IKZF2 заболевания или нарушения.

Другой аспект настоящего изобретения относится к фармацевтической композиции, содержащей терапевтически эффективное количество соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера, для применения в лечении связанных с IKZF2 заболевания или нарушения путем модулирования уровней содержания белка IKZF2, причем модулирование уровней содержания белка IKZF2 обеспечивает лечение связанных с IKZF2 заболевания или нарушения.

Другой аспект настоящего изобретения относится к фармацевтической композиции, содержащей терапевтически эффективное количество соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера, для применения в лечении связанных с IKZF2 заболевания или нарушения путем снижения уровней содержания белка IKZF2, причем снижение уровней содержания белка IKZF2 обеспечивает лечение связанных с IKZF2 заболевания или нарушения.

Другой аспект настоящего изобретения относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру для применения в лечении заболевания или нарушения путем уменьшения уровней содержания белка IKZF2, причем уменьшение уровней содержания белка IKZF2 обеспечивает лечение заболевания или нарушения.

Другой аспект настоящего изобретения относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру для применения в лечении заболевания или нарушения путем снижения уровней содержания белка IKZF2, причем снижение уровней содержания белка IKZF2 обеспечивает лечение заболевания или нарушения.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению фармацевтической композиции, содержащей терапевтически эффективное количество соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера, в изготовлении лекарственного препарата для лечения связанных с IKZF2 заболевания или нарушения путем уменьшения уровней содержания белка IKZF2, причем уменьшение уровней содержания белка IKZF2 обеспечивает лечение связанных с IKZF2 заболевания или нарушения.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению фармацевтической композиции, содержащей терапевтически эффективное количество соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера, в изготовлении лекарственного препарата для лечения связанных с IKZF2 заболевания или нарушения путем модулирования уровней содержания белка IKZF2, причем модулирование уровней содержания белка IKZF2 обеспечивает лечение связанных с IKZF2 заболевания или нарушения.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению фармацевтической композиции, содержащей терапевтически эффективное количество соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера, в изготовлении лекарственного препарата для лечения связанных с IKZF2 заболевания или нарушения путем снижения уровней содержания белка IKZF2, причем снижение уровней содержания белка IKZF2 обеспечивает лечение связанных с IKZF2 заболевания или нарушения.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению фармацевтической композиции, содержащей терапевтически эффективное количество соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера, в изготовлении лекарственного препарата для лечения заболевания или нарушения путем уменьшения уровней содержания белка IKZF2, причем уменьшение уровней содержания белка IKZF2 обеспечивает лечение заболевания или нарушения.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению фармацевтической композиции, содержащей терапевтически эффективное количество соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера, в изготовлении лекарственного препарата для лечения заболевания или нарушения путем модулирования уровней содержания белка IKZF2, причем модулирование уровней содержания белка IKZF2 обеспечивает лечение заболевания или нарушения.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению фармацевтической композиции, содержащей терапевтически эффективное количество соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера, в изготовлении лекарственного препарата для лечения заболевания или нарушения путем снижения уровней содержания белка IKZF2, причем снижение уровней содержания белка IKZF2 обеспечивает лечение заболевания или нарушения.

Другой аспект настоящего изобретения относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру для применения в лечении заболевания или нарушения путем уменьшения уровней содержания белка IKZF2, причем уменьшение уровней содержания белка IKZF2 обеспечивает лечение заболевания или нарушения.

Другой аспект настоящего изобретения относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру для применения в лечении заболевания или нарушения путем снижения уровней содержания белка IKZF2, причем снижение уровней содержания белка IKZF2 обеспечивает лечение заболевания или нарушения.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера в лечении заболевания или нарушения путем модулирования уровней содержания белка IKZF2, причем модулирование уровней содержания белка IKZF2 обеспечивает лечение заболевания или нарушения.

Другой аспект настоящего изобретения относится к применению соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера в лечении заболевания или нарушения путем снижения уровней содержания белка IKZF2, причем снижение уровней содержания белка IKZF2 обеспечивает лечение заболевания или нарушения.

В другом аспекте данного изобретения соединения согласно изобретению составляют в фармацевтические композиции, содержащие эффективное количество, предпочтительно фармацевтически эффективное количество, соединения согласно изобретению или его соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера и фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество или носитель.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру для применения в изготовлении лекарственного препарата для лечения заболевания, ассоциированного с модулированием уровней содержания белка IKZF2.

Другой аспект настоящего изобретения относится к применению соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера в лечении заболевания, ассоциированного с модулированием уровней содержания белка IKZF2.

В некоторых вариантах осуществления способов, раскрытых в данном документе, введение соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера осуществляют перорально, парентерально, подкожно, путем инъекции или инфузии.

В настоящем изобретении предусмотрены средства разрушения IKZF2, которые являются терапевтическими средствами в лечении таких заболеваний, как рак и метастазирование, для лечения заболеваний, на которые влияет модулирование уровней содержания белка IKZF2, и для лечения связанных с IKZF2 заболеваний или нарушений.

В одном варианте осуществления заболевание или нарушение, которые можно лечить с помощью соединений по настоящему изобретению, выбраны из рака предстательной железы, карциномы молочной железы, лимфом, лейкоза, миеломы, карциномы мочевого пузыря, рака толстой кишки, меланомы кожи, гепатоцеллюлярной карциномы, рака эндометрия, рака яичника, рака шейки матки, рака легкого, рака почки, мультиформной глиобластомы, глиомы, рака щитовидной железы, опухоли паращитовидной железы, рака носоглотки, рака языка, рака поджелудочной железы, рака пищевода, холангиокарциномы, рака желудка и сарком мягких тканей, выбранных из рабдомиосаркомы (RMS), синовиальной саркомы, остеосаркомы, видов рабдоидного рака и саркомы Юинга. В другом варианте осуществления заболевание или нарушение, которые можно лечить с помощью соединений по настоящему изобретению, выбраны из немелкоклеточного рака легкого (NSCLC), меланомы, трижды негативного рака молочной железы (TNBC), рака носоглотки (NPC), колоректального рака с микросателлитной стабильностью (mssCRC), тимомы, карциноида, острого миелогенного лейкоза и стромальной опухоли желудочно-кишечного тракта (GIST). В другом варианте осуществления заболевание или нарушение, которые можно лечить с помощью соединений по настоящему изобретению, выбраны из немелкоклеточного рака легкого (NSCLC), меланомы, трижды негативного рака молочной железы (TNBC), рака носоглотки (NPC) и колоректального рака с микросателлитной стабильностью (mssCRC). В другом варианте осуществления связанное с IKZF2 заболевание или нарушение представляет собой рак, иммунный ответ на который недостаточен, или рак с иммуногенными свойствами.

В настоящем изобретении предусмотрены средства с новыми механизмами действия в отношении белков IKZF2 для лечения различных типов заболеваний, включая рак и метастазирование, для лечения заболеваний, на которые влияет модулирование уровней содержания белка IKZF2, и для лечения связанных с IKZF2 заболеваний или нарушений. В итоге, настоящее изобретение предоставляет медицинскому сообществу новую фармакологическую стратегию для лечения заболеваний и нарушений, ассоциированных с белками IKZF2.

Подробное описание изобретения

Настоящее изобретение относится к соединениям и композициям, способным модулировать уровни содержания белка IKZF2. В настоящем изобретении раскрыты способы лечения, предупреждения или уменьшения тяжести заболевания или нарушения, на которые влияет IKZF2, путем введения пациенту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера. Способы по настоящему изобретению можно использовать в лечении различных связанных с IKZF2 заболеваний или нарушений путем модулирования уровней содержания белка IKZF2. Модулирование уровней содержания белка IKZF2 посредством разрушения обеспечивает новый подход к лечению, предупреждению или уменьшению тяжести заболеваний, включая без ограничения рак и метастазирование, и других связанных с IKZF2 заболеваний или нарушений.

В одном аспекте соединения по настоящему изобретению находят применение в качестве терапевтических средств, в частности, для лечения видов рака и заболеваний, связанных с ними. В одном аспекте соединения по настоящему изобретению характеризуются активностью в отношении разрушения IKZF2, предпочтительно она характеризуются такой активностью на уровне 50 мкМ или меньше и более предпочтительно характеризуются такой активностью на уровне 10 мкМ или меньше. В другом аспекте соединения по настоящему изобретению характеризуются активностью как средство разрушения в отношении IKZF2, причем эта активность является селективной относительно одного или нескольких из IKZF1, IKZF3, IKZF4 и/или IKZF5. В другом аспекте соединения по настоящему изобретению характеризуются активностью как средство разрушения как в отношении IKZF2, так и IKZF4. Соединения по настоящему изобретению имеют пригодность в лечении рака и других заболеваний, при которых такая активность в отношении разрушения обеспечивает преимущества для пациента. Например, безотносительно к какой-либо теории, авторы полагают, что уменьшение уровней содержания IKZF2 в Treg в опухоли может позволить иммунной системе пациента более эффективно атаковать заболевание. Таким образом, в настоящем изобретении предусмотрены новые средства разрушения IKZF2, пригодные для лечения рака и других заболеваний.

В первом аспекте настоящего изобретения описаны соединения формулы (I'):

или их фармацевтически приемлемые соли, гидраты, сольваты, пролекарства на их основе, их стереоизомеры и таутомеры, где R_a, R_b, R_x, R₁, R₂, X₁ и X₂ описаны в данном документе.

Подробности настоящего изобретения представлены в сопутствующем описании, приведенном ниже. Хотя при осуществлении на практике или тестировании настоящего изобретения могут применяться способы и материалы, аналогичные или эквивалентные тем, которые описаны в данном документе, ниже описываются способы и материалы в качестве иллюстрации. Другие признаки, объекты и преимущества настоящего изобретения будут очевидны из описания и формулы изобретения. В описании и прилагаемой формуле изобретения форма единственного числа также включает множественное число, если контекст явно не предписывает иное. Если не указано иное, то все технические и научные термины, применяемые в данном документе, имеют то же значение, которое обычно понятно специалисту средней квалификации в данной области, к которой относится настоящее изобретение. Все патенты и публикации, процитированные в данном описании, включены в данный документ полностью посредством ссылки.

Определение используемых терминов и условных обозначений

Термины, которым не дается определение в данном документе, должны интерпретироваться так, как будет понятно специалисту в данной области техники на основании раскрытия и контекста. Тем не менее, в последующем описании и прилагаемой формуле изобретения будут использоваться следующие термины, общепринятые, если не указано иное, определения и условные обозначения которых приведены ниже.

А. Химическая номенклатура, термины и понятия

В группах, радикалах или фрагментах, определенных ниже, число атомов углерода часто указывается перед группой, например, (C₁-C₁₀)алкил означает алкильную группу или радикал, содержащие от 1 до 10 атомов углерода. Как правило, для групп, включающих две или более подгрупп, последняя названная группа является точкой присоединения радикала, например, "алкиларил" означает одновалентный радикал формулы алкиларил-, тогда как "арилалкил" означает одновалентный радикал формулы арилалкил-. Кроме того, использование термина, обозначающего одновалентный радикал, в случае, где является подходящим двухвалентный радикал, должно толковаться как обозначение соответствующего двухвалентного радикала и наоборот. Если не указано иное, превалируют общепринятые определения терминов, и подразумеваются общепринятые валентности стабильных атомов во всех полученных формулах и группах. Форма единственного числа относится к одному или нескольким (т. e. по меньшей мере к одному) грамматическим объектам формы. Например, "элемент" означает один элемент или несколько элементов.

Термин "и/или" означает либо "и", либо "или", если не указано иное.

Термин "необязательно замещенный" означает, что данный химический фрагмент (например, алкильная группа) может (но не обязательно) быть связан с другими заместителями (например, гетероатомами). Например, алкильная группа, которая необязательно замещена, может быть полностью насыщенной алкильной цепью (например, исключительно углеводородной). Альтернативно такая же необязательно замещенная алкильная группа может иметь заместители, отличные от водорода. Например, она в любой точке цепи может быть связана с атомом галогена, гидроксильной группой или любым другим описанным в данном документе заместителем. Таким образом, термин "необязательно замещенный" означает, что данный химический фрагмент может содержать другие функциональные группы, но не обязательно содержит любые дополнительные функциональные группы. Подходящие заместители, используемые при необязательном замещении описываемых групп, включают без ограничения галоген, оксо-, -OH, -CN, -COOH, -CH₂CN, -O-(C₁-C₆)алкил, (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₆)алкоксигруппу, (C₁-C₆)галогеналкил, (C₁-C₆)галогеналкоксигруппу, -O-(C₂-C₆)алкенил, -O-(C₂-C₆)алкинил, (C₂-C₆)алкенил, (C₂-C₆)алкинил, -OH, -OP(O)(OH)₂, -OC(O)(C₁-C₆)алкил, -C(O)(C₁-C₆)алкил, -OC(O)O(C₁-C₆)алкил, -NH₂, -NH((C₁-C₆)алкил), -N((C₁-C₆)алкил)₂, -NHC(O)(C₁-C₆)алкил, -C(O)NH(C₁-C₆)алкил, -S(O)₂(C₁-C₆)алкил, -S(O)NH(C₁-C₆)алкил и S(O)N((C₁-C₆)алкил)₂. Заместители сами могут быть необязательно замещенными. Как используется в данном документе, "необязательно замещенный" также означает замещенный или незамещенный, значение которых описано ниже.

Термин "замещенный" означает, что указанная группа или фрагмент имеют один или несколько подходящих заместителей, причем заместители могут соединяться с указанной группой или фрагментом в одном или нескольких положениях. Например, арил, замещенный циклоалкилом, может указывать на то, что циклоалкил присоединен к одному атому в ариле посредством связи или путем конденсирования с арилом, когда они имеют два или более общих атома.

Термин "незамещенный" означает, что указанная группа не имеет заместителей.

Если конкретно не указано иное, "арил" означает циклическую ароматическую углеводородную группу, содержащую 1-3 ароматических кольца, включая моноциклические или бициклические группы, такие как фенил, бифенил или нафтил. Если она содержит два ароматических кольца (бициклическая группа и т. д.), то ароматические кольца арильной группы необязательно соединены в одной точке (например, бифенил) или конденсированы (например, нафтил). Арильная группа необязательно замещена одним или несколькими заместителями, например 1-5 заместителями, в любой точке присоединения. Типичные заместители включают без ограничения -H, -галоген, -CN, -O-(C₁-C₆)алкил, (C₁-C₆)алкил, -O-(C₂-C₆)алкенил, -O-(C₂-C₆)алкинил, (C₂-C₆)алкенил, (C₂-C₆)алкинил, -OH, -OP(O)(OH)₂, -OC(O)(C₁-C₆)алкил, -C(O)(C₁-C₆)алкил, -OC(O)O(C₁-C₆)алкил, -NH₂, -NH((C₁-C₆)алкил), -N((C₁-C₆)алкил)₂, -S(O)₂-(C₁-C₆)алкил, -S(O)NH(C₁-C₆)алкил и S(O)N((C₁-C₆)алкил)₂. Заместители сами необязательно замещены. Кроме того, когда они содержат два конденсированных кольца, арильные группы необязательно имеют ненасыщенное или частично насыщенное кольцо, конденсированное с полностью насыщенным кольцом. Типичные кольцевые системы таких арильных групп включают без ограничения фенил, бифенил, нафтил, антраценил, феналенил, фенантренил, инданил, инденил, тетрагидронафталинил, тетрагидробензоаннуленил и т. п.

Если конкретно не указано иное, "гетероарил" означает одновалентный моноциклический ароматический радикал с 5-24 атомами в кольце или полициклический ароматический радикал, содержащий один или несколько гетероатомов в кольце, выбранных из N, О или S, остальные атомы в кольце представляют собой С. Как используется в данном документе, гетероарил также означает бициклическую гетероароматическую группу, в которой гетероатом выбран из N, O или S. Ароматический радикал необязательно независимо замещен одним или несколькими заместителями, описанными в данном документе. Примеры включают без ограничения фурил, тиенил, пирролил, пиридил, пиразолил, пиримидинил, имидазолил, изоксазолил, оксазолил, оксадиазолил, пиразинил, индолил, тиофен-2-ил, хинолил, бензопиранил, изотиазолил, тиазолил, тиадиазол, индазол, бензимидазолил, тиено[3,2-b]тиофен, триазолил, триазинил, имидазо[1,2-b]пиразолил, фуро[2,3-с]пиридинил, имидазо[1,2-а]пиридинил, индазолил, пирроло[2,3-с]пиридинил, пирроло[3,2-с]пиридинил, пиразоло[3,4-с]пиридинил, тиено[3,2-с]пиридинил, тиено[2,3-с]пиридинил, тиено[2,3-b]пиридинил, бензотиазолил, индолил, индолинил, индолинонил, дигидробензотиофенил, дигидробензофуранил, бензофуран, хроманил, тиохроманил, тетрагидрохинолинил, дигидробензотиазин, дигидробензоксанил, хинолинил, изохинолинил, 1,6-нафтиридинил, бенз[de]изохинолинил, пиридо[4,3-b][1,6]нафтиридинил, тиено[2,3-b]пиразинил, хиназолинил, тетразол[1,5-a]пиридинил, [1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридинил, изоиндолил, пирроло[2,3-b]пиридинил, пирроло[3,4-b]пиридинил, пирроло[3,2-b]пиридинил, имидазо[5,4-b]пиридинил, пирроло[1,2-a]пиримидинил, тетрагидропирроло[1,2-a]пиримидинил, 3,4-дигидро-2H-1δ²-пирроло[2,1-b]пиримидин, дибензо[b, d]тиофен, пиридин-2-он, фуро[3,2-c]пиридинил, фуро[2,3-c]пиридинил, 1H-пиридо[3,4-b][1,4]тиазинил, бензоксазолил, бензизоксазолил, фуро[2,3-b]пиридинил, бензтиофенил, 1,5-нафтиридинил, фуро[3,2-b]пиридин, [1,2,4]триазоло[l,5-a]пиридинил, бензо[1,2,3]триазолил, имидазо[1,2-a]пиримидинил, [1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазинил, бензо[c][1,2,5]тиадиазолил, бенз[c][1,2,5]оксадиазолил, 1,3-дигидро-2H-бенз[d]имидазол-2-он, 3,4-дигидро-2H-пиразоло[1,5-b][1,2]оксазинил, 4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиридинил, тиазоло[5,4-d]тиазолил, имидазо[2,1-b][1,3,4]тиадиазолил, тиено[2,3-b]пирролил, 3H-индолил и их производные. Кроме того, если они содержат два конденсированных кольца, арильные группы, определенные в данном документе, содержат ненасыщенное или частично насыщенное кольцо, конденсированное с полностью насыщенным кольцом. Примеры кольцевых систем этих гетероарильных групп включают индолинил, индолинонил, дигидробензотиофенил, дигидробензофуран, хроманил, тиохроманил, тетрагидрохинолинил, дигидробензотиазин, 3,4-дигидро-1H-изохинолинил, 2,3-дигидробензофуран, индолинил, индолил и дигидробензоксанил.

Галоген или "галогено" означает фтор, хлор, бром или йод.

"Алкил" означает насыщенный углеводород с прямой или разветвленной цепью, содержащий 1-12 атомов углерода. Примеры (C₁-C₆)алкильной группы включают без ограничения метил, этил, пропил, бутил, пентил, гексил, изопропил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил, изопентил, неопентил и изогексил.

"Алкоксигруппа" означает насыщенный углеводород с прямой или разветвленной цепью, содержащий 1-12 атомов углерода, содержащий концевой "О" в цепи, например -O(алкил). Примеры алкоксигрупп включают без ограничения метокси-, этокси-, пропокси-, бутокси-, трет-бутокси- или пентоксигруппы.

"Алкенил" означает ненасыщенный углеводород с линейной или разветвленной цепью, содержащий 2-12 атомов углерода. "Алкенильная" группа содержит по меньшей мере одну двойную связь в цепи. Двойная связь в алкенильной группе может быть неконъюгированной или конъюгированной с другой ненасыщенной группой. Примеры алкенильных групп включают этенил, пропенил, н-бутенил, изобутенил, пентенил или гексенил. Алкенильная группа может быть незамещенной или замещенной и может быть линейной или разветвленной.

"Алкинил" означает ненасыщенный углеводород с линейной или разветвленной цепью, содержащий 2-12 атомов углерода. "Алкинильная" группа содержит по меньшей мере одну тройную связь в цепи. Примеры алкенильных групп включают этинил, пропаргил, бутинил, н-изобутинил, пентинил или гексинил. Алкинильная группа может быть незамещенной или замещенной.

"Циклоалкил" или "карбоциклил" означает моноциклическое или полициклическое насыщенное углеродное кольцо, содержащее 3-18 атомов углерода. Примеры циклоалкильных групп включают без ограничения циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептанил, циклооктанил, норборанил, норборенил, бицикло[2.2.2]октанил или бицикло[2.2.2]октенил и их производные. (C₃-C₈)циклоалкил представляет собой циклоалкильную группу, содержащую от 3 до 8 атомов углерода. Циклоалкильная группа может быть конденсированной (например, декалин) или мостиковой (например, норборнан).

"Гетероциклил" или "гетероциклоалкил" означает насыщенное или частично насыщенное моноциклическое или полициклическое кольцо, содержащее углерод и по меньшей мере один гетероатом, выбранный из кислорода, азота или серы (O, N или S), и при этом в нем нет делокализованных n электронов (ароматичность), общих для атомов углерода или гетероатомов в кольце. Кольцевая структура гетероциклоалкила может быть замещена одним или несколькими заместителями. Заместители сами могут быть необязательно замещенными. Примеры гетероциклильных колец включают без ограничения оксетанил, азетадинил, тетрагидрофуранил, тетрагидропиранил, пирролидинил, оксазолинил, оксазолидинил, тиазолинил, тиазолидинил, пиранил, тиопиранил, тетрагидропиранил, диоксалинил, пипереденил, морфолинил, тиоморфолинил, тиоморфолинил S-оксид, тиоморфолинил S-диоксид, пиперазинил, азепинил, оксепинил, диазепинил, тропанил, оксазолидинонил, 1,4-диоксанил, дигидрофуранил, 1,3-диоксоланил, имидазолидинил, имидазолинил, дитиоланил и гомотропанил.

"Галогеналкил" означает алкильную группу, замещенную одним или несколькими атомами галогена. Примеры галогеналкильных групп включают без ограничения трифторметил, дифторметил, пентафторэтил, трихлорметил и т. д.

"Галогеналкоксигруппа" означает алкоксигруппу, замещенную одним или несколькими атомами галогена. Примеры галогеналкоксигрупп включают без ограничения трифторметокси-, дифторметокси-, пентафторэтокси-, трихлорметоксигруппы и т. д.

"Цианогруппа" означает заместитель, содержащий атом углерода, связанный с атомом азота тройной связью, например, C≡N.

"Амино" означает заместитель, содержащий по меньшей мере один атом азота (например, -NH₂).

B. Соль, пролекарство, производное и сольват - термины и понятия

"Пролекарство" или "производное пролекарства" означают ковалентно связанное производное или носитель исходного соединения или активного лекарственного вещества, которое претерпевает по меньшей мере некоторое биопревращение перед тем, как проявлять свой(свои) фармакологический(фармакологические) эффект(эффекты). Как правило, такие пролекарства имеют метаболически отщепляемые группы и быстро превращаются in vivo с образованием исходного соединения, например, путем гидролиза в крови, и обычно включают сложные эфиры и амидные аналоги исходных соединений. Пролекарство разработано с целью улучшения химической стабильности, улучшения переносимости и соблюдения пациентом режима приема, улучшения биодоступности, увеличения продолжительности действия, улучшения избирательности в отношении органов, улучшения состава (например, повышенной растворимости в воде) и/или уменьшения побочных эффектов (например, токсичности). Как правило, сами пролекарства имеют слабую биологическую активность или не имеют ее и являются стабильными в обычных условиях. Пролекарства могут быть легко получены из исходных соединений с использованием способов, известных в данной области, таких как способы, описанные в A Textbook of Drug Design and Development, Krogsgaard-Larsen and H. Bundgaard (eds.), Gordon & Breach, 1991, особенно глава 5: "Design and Applications of Prodrugs"; Design of Prodrugs, H. Bundgaard (ed.), Elsevier, 1985; Prodrugs: Topical and Ocular Drug Delivery, K.B. Sloan (ed.), Marcel Dekker, 1998; Methods in Enzymology, K. Widder et al. (eds.), Vol. 42, Academic Press, 1985, особенно стр. 309-396; Burger's Medicinal Chemistry and Drug Discovery, 5th Ed., M. Wolff (ed.), John Wiley & Sons, 1995, особенно том 1 и стр. 172-178 и стр. 949-982; Pro-Drugs as Novel Delivery Systems, T. Higuchi and V. Stella (eds.), Am. Chem. Soc., 1975; Bioreversible Carriers in Drug Design, E.B. Roche (ed.), Elsevier, 1987, каждый из этих источников полностью включен в данный документ ссылкой.

Как используется в данном документе, "фармацевтически приемлемое пролекарство" означает пролекарство на основе соединения по настоящему изобретению, которое с медицинской точки зрения является подходящим для использования для контакта с тканями людей и низших животных без чрезмерной токсичности, раздражения, аллергического ответа и т. п., соразмерно с разумным соотношением польза/риск, и при этом оно эффективно для его предполагаемого использования, а также включены цвиттерионные формы, где это возможно.

"Соль" означает ионную форму исходного соединения или продукт реакции исходного соединения с подходящей кислотой или основанием для получения кислотной соли или основной соли исходного соединения. Соли соединений по настоящему изобретению можно синтезировать из исходных соединений, которые содержат основный или кислотный фрагмент, обычными химическими способами. Обычно соли получают взаимодействием свободного основания или кислоты исходного соединения со стехиометрическими количествами или с избытком желаемой солеобразующей неорганической или органической кислоты или основания в подходящем растворителе или различных комбинациях растворителей.

"Фармацевтически приемлемая соль" означает соль соединения по настоящему изобретению, которая с медицинской точки зрения является подходящей для использования для контакта с тканями людей и низших животных без чрезмерной токсичности, раздражения, аллергического ответа и т. п. соразмерно с разумным соотношением польза/риск, обычно растворима или диспергируема в воде или масле, и эффективна для предполагаемого использования. Термин включает фармацевтически приемлемые соли присоединения кислоты и фармацевтически приемлемые соли присоединения основания. Поскольку соединения по настоящему изобретению являются пригодными как в форме свободного основания, так и в форме соли, на практике использование формы соли равнозначно применению формы основания. Перечни подходящих солей можно найти, например, в публикации S.M. Birge et al., J. Pharm. Sci., 1977, 66, pp. 1-19, которая включена в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте.

"Фармацевтически приемлемая соль присоединения кислоты" означает те соли, которые сохраняют биологическую эффективность и свойства свободных оснований и которые не являются биологически или иным образом нежелательными, образованные с неорганическими кислотами, такими как хлористоводородная кислота, бромистоводородная кислота, йодистоводородная кислота, серная кислота, сульфаминовая кислота, азотная кислота, фосфорная кислота и т. п., и органическими кислотами, такими как уксусная кислота, трихлоруксусная кислота, трифторуксусная кислота, адипиновая кислота, альгиновая кислота, аскорбиновая кислота, аспарагиновая кислота, бензолсульфокислота, бензойная кислота, 2-ацетоксибензойная кислота, масляная кислота, камфорная кислота, камфорсульфокислота, коричная кислота, лимонная кислота, диглюконовая кислота, этансульфокислота, глутаминовая кислота, гликолевая кислота, глицерофосфорная кислота, полусульфоновая кислота, гептановая кислота, гексановая кислота, муравьиная кислота, фумаровая кислота, 2-гидроксиэтансульфокислота (изетионовая кислота), молочная кислота, малеиновая кислота, гидроксималеиновая кислота, яблочная кислота, малоновая кислота, миндальная кислота, мезитиленсульфокислота, метансульфокислота, нафталинсульфокислота, никотиновая кислота, 2-нафталинсульфокислота, щавелевая кислота, памоевая кислота, пектиновая кислота, фенилуксусная кислота, 3-фенилпропионовая кислота, пикриновая кислота, пивалевая кислота, пропионовая кислота, пировиноградная кислота, пировиноградная кислота, салициловая кислота, стеариновая кислота, янтарная кислота, сульфаниловая кислота, винная кислота, п-толуолсульфокислота, ундекановая кислота и т. п.

"Фармацевтически приемлемая соль присоединения основания" означает те соли, которые сохраняют биологическую эффективность и свойства свободных кислот и не являются биологически или иным образом нежелательными, они образованы с неорганическими основаниями, такими как аммиак или гидроксид, карбонат или бикарбонат аммония или катиона металла, такого как натрий, калий, литий, кальций, магний, железо, цинк, медь, марганец, алюминий и т. п. Особенно предпочтительными являются соли аммония, калия, натрия, кальция и магния. Соли, полученные из фармацевтически приемлемых органических нетоксичных оснований, включают соли первичных, вторичных и третичных аминов, соединений четвертичного аммония, замещенных аминов, включая встречающиеся в природе замещенные амины, циклические амины и основные ионообменные смолы, такие как метиламин, диметиламин, триметиламин, этиламин, диэтиламин, триэтиламин, изопропиламин, трипропиламин, трибутиламин, этаноламин, диэтаноламин, 2-диметиламиноэтанол, 2-диэтиламиноэтанол, дициклогексиламин, лизин, аргинин, гистидин, кофеин, гидрабамин, холин, бетаин, этилендиамин, глюкозамин, метилглюкамин, теобромин, пурины, пиперазин, пиперидин, N-этилпиперидин, тетраметиламмониевые соединения, тетраэтиламмониевые соединения, пиридин, N, N-диметиланилин, N-метилпиперидин, N-метилморфолин, дициклогексиламин, дибензиламин, N, N-дибензилфенетиламин, 1-эфенамин, N, N-дибензилэтилендиамин, полиаминные смолы и т. п. Особенно предпочтительными органическими нетоксичными основаниями являются изопропиламин, диэтиламин, этаноламин, триметиламин, дициклогексиламин, холин и кофеин.

"Сольват" означает комплекс с переменной стехиометрией, образованный растворенным веществом, например, соединением формулы (I') или формулы (I) и растворителем, например, водой, этанолом или уксусной кислотой. Это физическое взаимодействие может включать различные степени ионной и ковалентной связи, включая водородную связь. В определенных случаях сольват можно выделять, например, в тех случаях, когда одна или несколько молекул растворителя включены в кристаллическую решетку кристаллического твердого вещества. Как правило, такие растворители, отобранные для целей настоящего изобретения, не влияют на биологическую активность растворенного вещества. Сольваты охватывают сольваты как в растворенной фазе, так и поддающиеся выделению. Типичные сольваты включают гидраты, этанолаты, метанолаты и т. п.

"Гидрат" означает сольват, в котором молекула(молекулы) растворителя представляет собой воду.

Соединения по настоящему изобретению, обсуждаемые ниже, включают их свободное основание или кислоту, их соли, сольваты и пролекарства на их основе и могут включать в свою структуру окисленные атомы серы или четвертичные атомы азота, хотя это явно не указано или не показано, особенно его фармацевтически приемлемые формы. Такие формы, в частности фармацевтически приемлемые формы, предназначены для вхождения в объем прилагаемой формулы изобретения.

C. Изомер - термины и понятия

"Изомеры" означают соединения, имеющие одинаковое количество и природу атомов и, следовательно, одинаковую молекулярную массу, но различающиеся расположением или конфигурацией атомов в пространстве. Термин включает стереоизомеры и геометрические изомеры.

"Стереоизомер" или "оптический изомер" означает стабильный изомер, который содержит по меньшей мере один хиральный атом или его вращение ограничено, что приводит к возникновению перпендикулярных плоскостей ассимметрии (например, к некоторым бифенилам, алленам и спиросоединениям), и способен вращать плоскость плоскополяризованного света. Поскольку в соединениях по настоящему изобретению существуют асимметрические центры и другая химическая структура, что может привести к стереоизомерии, то в настоящем изобретении рассматриваются стереоизомеры и их смеси. Соединения по настоящему изобретению и их соли содержат асимметрические атомы углерода и, следовательно, могут существовать в виде отдельных стереоизомеров, рацематов и в виде смесей энантиомеров и диастереомеров. Как правило, такие соединения получают в виде рацемической смеси. Однако, если необходимо, такие соединения можно получать или выделять в виде чистых стереоизомеров, т. е. виде отдельных энантиомеров или диастереомеров, или в виде смесей, обогащенных одним стереоизомером. Как более подробно обсуждается ниже, отдельные стереоизомеры соединений получают путем синтеза из оптически активных исходных материалов, содержащих требуемые хиральные центры, или путем приготовления смесей энантиомерных продуктов с последующим разделением или выделением, таким как превращение в смесь диастереомеров с последующим разделением или перекристаллизацией, хроматографические методы, использование хиральных разделяющих средств или непосредственное разделение энантиомеров на хиральных хроматографических колонках. Исходные соединения с определенной стереохимией либо поступают в продажу, либо их получают способами, описанными ниже, и отделяют методами, хорошо известными в данной области техники.

"Энантиомеры" означают пару стереоизомеров, которые являются несовпадающими зеркальными отображениями друг друга.

"Диастереоизомеры" или "диастереомеры" означают оптические изомеры, которые не являются зеркальным отображением друг друга.

"Рацемическая смесь" или "рацемат" означают смесь, содержащую равные части отдельных энантиомеров.

"Нерацемическая смесь" означает смесь, содержащую неравные части отдельных энантиомеров.

"Геометрический изомер" означает стабильный изомер, который возникает в результате ограниченной свободы вращения вокруг двойных связей (например, цис-2-бутен и транс-2-бутен) или в циклической структуре (например, цис-1,3-дихлорциклобутан и транс-1,3-дихлорциклобутан). Поскольку в соединениях по настоящему изобретению могут присутствовать двойные (олефиновые) углерод-углеродные связи, двойные связи C=N, циклические структуры и тому подобное, в настоящем изобретении рассматривается каждый из различных стабильных геометрических изомеров и их смеси, возникающие в результате определенного положения заместителей вокруг этих двойных связей и в этих циклических структурах. Заместители и изомеры обозначают с использованием цис/транс-обозначения или с использованием E- или Z-системы, где термин "Е" означает заместители более высокого порядка на противоположных сторонах двойной связи, а термин "Z" означает заместители более высокого порядка на той же стороне двойной связи. Подробное обсуждение E- и Z-изомерии приведено в публикации J. March, Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure, 4th ed., John Wiley & Sons, 1992, которое полностью включено в настоящее описание ссылкой. Некоторые из следующих примеров представляют отдельные E-изомеры, отдельные Z-изомеры и смеси E/Z-изомеров. Определение E- и Z-изомеров можно выполнять аналитическими методами, такими как рентгеновская кристаллография, ¹H ЯМР и ¹³C ЯМР.

Некоторые из соединений по настоящему изобретению могут существовать в более чем одной таутомерной форме. Как упомянуто выше, соединения по настоящему изобретению включают все такие таутомеры.

В данной области техники хорошо известно, что на биологическую и фармакологическую активность соединения влияет стереохимическое строение соединения. Таким образом, например, энантиомеры часто проявляют совершенно разную биологическую активность, включая различия в фармакокинетических свойствах, таких как метаболизм, связывание белка и тому подобное, и фармакологические свойства, включая тип проявляемого действия, степень активности, токсичность и тому подобное. Таким образом, специалист в данной области техники поймет, что один энантиомер может быть более активным или может проявлять благоприятный эффект при обогащении им по сравнению с другим энантиомером или при отделении его от другого энантиомера. Кроме того, специалист в данной области техники должен знать, как отделить, обогатить или селективно получить энантиомеры соединений по настоящему изобретению на основании данного раскрытия и знаний из предшествующего уровня техники.

Таким образом, хотя рацемическая форма лекарственного средства и может использоваться, она часто менее эффективна, чем введение такого же количества энантиомерно чистого лекарственного средства; действительно, в некоторых случаях один энантиомер может быть фармакологически неактивным и всего лишь быть разбавителем. Например, хотя ибупрофен ранее вводили в качестве рацемата, было показано, что только S-изомер ибупрофена эффективен в качестве противовоспалительного средства (однако в случае ибупрофена, хотя R-изомер и неактивен, но он in vivo превращается в S-изомер, таким образом, скорость действия рацемической формы лекарственного средства ниже, чем у чистого S-изомера). Кроме того, фармакологическое действие энантиомеров может иметь определенную биологическую активность. Например, S-пеницилламин является терапевтическим средством при хроническом артрите, тогда как R-пеницилламин токсичен. Действительно, некоторые очищенные энантиомеры имеют преимущества перед рацематами, так как сообщалось, что очищенные отдельные изомеры имеют более высокие скорости проникновения через кожу по сравнению с рацемической смесью. См. патенты США №№ 5114946 и 4818541.

Таким образом, если один энантиомер является фармакологически более активным, менее токсичным или обладает предпочтительным действием в организме, по сравнению с другим энантиомером, то с терапевтической точки зрения будет предпочтительно вводить этот энантиомер. Таким образом, пациент, проходящий лечение, будет подвергаться воздействию более низкой суммарной дозы лекарственного средства и более низкой дозы энантиомера, который может быть токсичным, или ингибитора другого энантиомера.

Получение чистых энантиомеров или смесей с необходимым энантиомерным избытком (ее) или энантиомерной чистоты осуществляют одним или несколькими из множества способов (a) разделения или отделения энантиомеров или (b) энантиоселективного синтеза, известных специалистам в данной области техники, или их комбинацией. Эти способы разделения обычно основаны на хиральном распознавании и включают, например, хроматографию с использованием хиральных стационарных фаз, энантиоселективное комплексообразование хозяин-гость, разделение или синтез с использованием хиральных вспомогательных веществ, энантиоселективный синтез, ферментативное и неферментативное кинетическое разделение или спонтанную энантиоселективную кристаллизацию. Такие способы в целом описаны в Chiral Separation Techniques: A Practical Approach (2nd Ed.), G. Subramanian (ed.), Wiley-VCH, 2000; T.E. Beesley and R.P.W. Scott, Chiral Chromatography, John Wiley & Sons, 1999 и Satinder Ahuja, Chiral Separations by Chromatography, Am. Chem. Soc., 2000. Кроме того, существуют столь же хорошо известные способы количественного определения энантиомерного избытка или чистоты, например, GC, HPLC, CE или ЯМР, и определения абсолютной конфигурации и конформации, например, CD ORD, рентгеновская кристаллография или ЯМР.

В общем, подразумеваются все таутомерные формы и изомерные формы и смеси, будь то отдельные геометрические изомеры или стереоизомеры или рацемические или нерацемические смеси, химической структуры или соединения, если только конкретная стереохимия или изомерная форма конкретно не указана в названии или структуре соединения.

D. Фармацевтическое введение и термины и понятия лечения

"Пациент" или "субъект" представляет собой млекопитающее, например человек, мышь, крыса, морская свинка, собака, кошка, лошадь, корова, свинья или примат, отличный от человека, такой как обезьяна, шимпанзе, павиан или резус. В определенных вариантах осуществления субъектом является примат. В еще одних вариантах осуществления субъектом является человек.

"Эффективное количество" или "терапевтически эффективное количество" при использовании в сочетании с соединением означает количество соединения по настоящему изобретению, которое (i) обеспечивает лечение или предупреждение конкретного заболевания, состояния или нарушения, (ii) ослабляет, уменьшает тяжесть или устраняет один или несколько симптомов конкретного заболевания, состояния или нарушения или (iii) предупреждает или задерживает появление одного или нескольких симптомов конкретного заболевания, состояния или нарушения, описанных в данном документе.

Термины "фармацевтически эффективное количество" или "терапевтически эффективное количество" означают количество соединения согласно настоящему изобретению, которое при введении пациенту, нуждающемуся в этом, является достаточным для обеспечения лечения заболеваний, состояний или нарушений, при которых полезно использование соединений. Такое количество будет достаточно, чтобы вызвать биологический или медицинский ответ ткани, системы или пациента, который ожидает исследователь или врач. Количество соединения согласно настоящему изобретению, которое составляет терапевтически эффективное количество, будет варьироваться в зависимости от таких факторов, как соединение и его биологическая активность, композиция, используемая для введения, время введения, путь введения, скорость выведения соединения, длительность лечения, тип болезненного состояния или нарушения, подвергаемого лечению, и его тяжесть, лекарства, используемые в комбинации с соединениями по настоящему изобретению или одновременно с ними, а также возраст, масса тела, общее состояние здоровья, пол и диета пациента. Такое терапевтически эффективное количество обычно может быть определено специалистом средней квалификации в данной области с учетом его/ее собственных знаний, предшествующего уровня техники и данного раскрытия.

Используемый здесь термин "фармацевтический состав" относится к соединению данного изобретения или его фармацевтически приемлемой соли, гидрату, сольвату, пролекарству, стереоизомеру или таутомеру вместе с по меньшей мере одним фармацевтически приемлемым носителем в форме, подходящей для перорального или парентерального введения.

"Носитель" охватывает носители, вспомогательные вещества и разбавители и означает материал, композицию или среду-носитель, такой как жидкий или твердый наполнитель, разбавитель, вспомогательное вещество, растворитель или инкапсулирующий материал, участвующие в переносе или транспортировке фармацевтического средства из одного органа или части тела, в другой орган или часть тела субъекта.

Субъект "нуждается" в лечении, если от такого лечения данный субъект (предпочтительно человек) получит пользу с биологической, медицинской точки зрения или улучшится качество его жизни.

Используемые в данном документе термины "подавлять", "подавление" или "подавляющий" означают снижение или ослабление данного состояния, симптома, или нарушения, или заболевания или значительное снижение изначального уровня активности биологической активности или процесса.

Используемый в данном документе термин "лечить", "осуществление лечения" или "лечение" любых заболевания или нарушения относится к облегчению или уменьшению тяжести заболевания или нарушения (т. е. замедлению или остановке развития заболевания или по меньшей мере одного из его клинических симптомов); или облегчению или уменьшению по меньшей мере одного физического параметра или биомаркера, ассоциированного с заболеванием или нарушением, включая таковые, которые могут быть не очевидными для пациента.

Используемый в данном документе термин "предупреждать", "предупреждающий" или "предупреждение" любых заболевания или нарушения относится к профилактическому лечению заболевания или нарушения или замедлению начала или прогрессирования заболевания или нарушения.

"Фармацевтически приемлемый" означает, что вещество или композиция должны быть совместимы химически и/или токсикологически с другими ингредиентами, содержащимися в составе, и/или с млекопитающим, подвергающимся лечению с помощью них.

"Нарушение" означает и используется взаимозаменяемо с терминами заболевание, состояние или болезнь, если не указано иное.

"Прием", "вводить" или "введение" означает либо непосредственное введение раскрываемого соединения или фармацевтически приемлемой соли раскрытого соединения или композиции субъекту, либо введение производного пролекарства или аналога соединения или фармацевтически приемлемой соли соединения или композиции субъекту, которые могут образовывать эквивалентное количество активного соединения в организме субъекта.

"Пролекарство" означает соединение, которое in vivo превращается метаболическим образом (например, гидролизом) в раскрытое соединение.

"Соединения по настоящему изобретению", "соединения формулы (I')", "соединения согласно данному изобретению" и эквивалентные выражения (если конкретно не указано иное) относятся к соединениям формулы (I'), (I), (Ia), (Ib), (Ic), (Id), (Ie), (If), (Ig), (Ih), (Ii), (Ij), (Ik), (Il), (Im) (In), (Io), (Ip), (Iq), (Ir), (Is), (It), (Ia-1), (Ib-1), (Ic-1), (Id-1), (Ie-1), (If-1), (Ig-1), (Ih-1), (Ii-1), (Ij-1), (Ik-1), (Il-1), (Im-1), (In-1), (Io-1), (Ip-1), (Iq-1), (Ir-1), (Is-1), (It-1), (Ia-2), (Ia-3), (Ib-2), и/или (Ib-3), описанным в данном документе, включая их таутомеры, пролекарства на их основе, их соли, в частности фармацевтически приемлемые соли, и сольваты и гидраты, где это допускается контекстом, а также все стереоизомеры (включая диастереоизомеры и энантиомеры), ротамеры, таутомеры и изотопно-меченные соединения (включая дейтериевые замещения), а также частицы, образующиеся естественным образом (например, полиморфы, сольваты и/или гидраты). Для целей настоящего изобретения сольваты и гидраты обычно подразумевают композиции. В общем и предпочтительно, соединения по настоящему изобретению и формулы, обозначающие соединения по настоящему изобретению, подразумевают, что они включают только их стабильные соединения и исключают нестабильные соединения, даже если нестабильное соединение может считаться формально охваченным формулой соединения. Аналогичным образом, ссылка на промежуточные соединения, независимо от того, заявлены они сами или нет, предназначена для того, чтобы охватывать их соли и сольваты, где это позволяет контекст. Для ясности, конкретные случаи, если позволяет контекст, иногда указываются в тексте, но эти примеры являются исключительно иллюстративными и не предназначены для исключения других случаев, когда это позволяет контекст.

"Стабильное соединение" или "стабильная структура" означает соединение, которое является достаточно устойчивым для того, чтобы выдержать выделение из реакционной смеси с необходимой степенью чистоты и составление в эффективное терапевтическое или диагностическое средство. Например, соединение, которое будет иметь "свободную валентность" или представляет собой карбанион, не является соединением, рассматриваемым в настоящем изобретении.

В конкретном варианте осуществления термин "примерно" или "приблизительно" означает величину в пределах 20%, предпочтительно в пределах 10% и более предпочтительно в пределах 5% от данного значения или интервала.

Выход каждой из реакций, описанных в данном документе, выражен в процентах от теоретического выхода. "Рак" означает любой рак, вызванный пролиферацией злокачественных опухолевых клеток, таких как опухоли, новообразования, карциномы, саркомы, виды лейкоза, лимфомы и т. п. Например, виды рака включают без ограничения мезотелиому, виды лейкоза и лимфомы, такие как кожные Т-клеточные лимфомы (CTCL), некожные периферические Т-клеточные лимфомы, лимфомы, ассоциированные с человеческим Т-клеточным лимфотрофическим вирусом (HTLV), такие как Т-клеточный лейкоз/лимфому у взрослых (ATLL), В-клеточную лимфому, виды острого нелимфоцитарного лейкоза, хронический лимфолейкоз, хронический миелогенный лейкоз, острый миелогенный лейкоз, лимфомы и множественную миелому, неходжкинскую лимфому, острый лимфоцитарный лейкоз (ALL), хронический лимфолейкоз (CLL), лимфому Ходжкина, лимфому Беркитта, Т-клеточный лейкоз/лимфому у взрослых, острый миелоидный лейкоз (AML), хронический миелоидный лейкоз (CML) или гепатоцеллюлярную карциному. Дополнительные примеры включают миелодиспластический синдром, солидные опухоли у детей, такие как опухоли головного мозга, нейробластома, ретинобластома, опухоль Вильмса, опухоли костей и саркомы мягких тканей, распространенные солидные опухоли у взрослых, такие как виды рака головы и шеи (например, рак ротовой полости, гортани, носоглотки, пищевода), рак мочеполовой системы (например, предстательной железы, мочевого пузыря, почки, матки, яичника, яичек), рак легкого (например, мелкоклеточный и немелкоклеточный), рак молочной железы (трижды негативный рак молочной железы (TNBC)), рак поджелудочной железы, меланому и другие виды рака кожи, рак желудка, опухоли головного мозга, опухоли, связанные с синдромом Горлина (например, медуллобластома, менингиома и т. д.) и рак печени. Дополнительные примеры форм рака, которые можно лечить с помощью рассматриваемых соединений, включают без ограничения рак скелетной или гладкой мышц, рак желудка, рак тонкой кишки, карцинома прямой кишки, рак слюнной железы, рак эндометрия, рак надпочечника, рак анального канала, рак прямой кишки, рак паращитовидной железы и рак гипофиза.

Дополнительные виды рака в предупреждении, лечении и изучении которых могут быть пригодны описанные в данном документе соединения, представляют собой, например, карциному толстой кишки, семейную аденоматозную полипозную карциному и наследственный неполипозный колоректальный рак или меланому. Кроме того, виды рака включают без ограничения лабиальную карциному, карциному гортани, карциному подглоточника, карциному языка, карциному слюнной железы, карциному желудка, аденокарциному, рак щитовидной железы (медуллярную и папиллярную карциному щитовидной железы), карциному почки, карциному перенхимы почки, карциному шейки матки, карциному тела матки, карциному эндометрия, хориокарциному, карциному яичка, карциному мочевых путей, меланому, опухоли головного мозга, такие как глиобластома, астроцитома, менингиома, медуллобластома и периферические нейроэктодермальные опухоли, карциному желчного пузыря, бронхиальную карциному, множественную миелому, базалиому, тератому, ретинобластому, меланому хориоидеи, семиному, рабдомиосаркому, краниофарингеому, остеосаркому, хондросаркому, миосаркому, липосаркому, фибросаркому, саркому Юинга, плазмоцитому, немелкоклеточный рак легкого (NSCLC), меланому, трижды негативный рак молочной железы (TNBC), рак носоглотки (NPC), колоректальный рак с микросателлитной стабильностью (mssCRC), тимому, карциноид, острый миелогенный лейкоз и стромальную опухоль желудочно-кишечного тракта (GIST).

Термин "одновременно" или "одновременный" в отношении способа лечения или терапевтического применения касательно комбинации соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера и одного или нескольких других средств означает введение соединения и одного или нескольких других средств одним и тем же путем и в одно и то же время.

Термин "по отдельности" или "отдельный" в отношении способа лечения или терапевтического применения касательно комбинации соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера и одного или нескольких других средств означает введение соединения и одного или нескольких других средств разными путями и в приблизительно одно и то же время.

Подразумевается, что терапевтическое введение "в течении определенного периода времени" в отношении способа лечения или терапевтического применения касательно комбинации соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера и одного или нескольких других средств означает введение соединения и одного или нескольких других средств одним и тем же или разными путями и в разное время. В некоторых вариантах осуществления введение соединения или одного или нескольких других средств осуществляют до начала введения другого. Таким образом, можно вводить один из активных ингредиентов (т. е. соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер или одно или несколько вторых средств) в течение нескольких месяцев до введения другого активного ингредиента или ингредиентов. В данном случае одновременное введение не происходит. Другой тип терапевтического введения в течение определенного периода времени заключается в введении в течение определенного периода времени двух или более активных ингредиентов комбинации с применением разных частот введения для каждого из активных ингредиентов, посредством чего в определенные моменты времени имеет место одновременное введение всех активных ингредиентов, тогда как в другие моменты времени может быть введена только часть активных ингредиентов комбинации (например, для соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера и одного или нескольких других средств терапевтическое введение в течение определенного периода времени может быть таким, что соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер вводят один раз в день и одно или несколько других средств вводят один раз каждые четыре недели).

"Связанные с IKZF2 заболевание или нарушение" означает любые заболевание или нарушение, на которые непосредственно или косвенно влияет модулирование уровней содержания белка IKZF2.

"Связанные с IKZF4 заболевание или нарушение" означает любые заболевание или нарушение, на которые непосредственно или косвенно влияет модулирование уровней содержания белка IKZF4.

D. Конкретные варианты осуществления и способы тестирования соединений формулы (I') или формулы (I)

Настоящее изобретение относится к соединениям или их фармацевтически приемлемым солям, гидратам, сольватам, пролекарствам на их основе, их стереоизомерам или таутомерам, способным модулировать уровни содержания белка IKZF2, которые являются пригодными для лечения заболеваний и нарушений, ассоциированных с модулированием уровней содержания белка IKZF2. Настоящее изобретение дополнительно относится к соединениям или их фармацевтически приемлемым солям, гидратам, сольватам, пролекарствам на их основе, их стереоизомерам или таутомерам, которые являются пригодными для уменьшения или снижения уровней содержания белка IKZF2.

В одном варианте осуществления соединения формулы (I') или формулы (I) характеризуются структурой формулы (Ia) или формулы (Ia-1):

или

или их фармацевтически приемлемые соли, гидраты, сольваты, пролекарства на их основе, их стереоизомеры и таутомеры.

В другом варианте осуществления соединения формулы (I') или формулы (I) характеризуются структурой формулы (Ib) или формулы (Ib-1):

В одном варианте осуществления соединения формулы (I') характеризуются структурой формулы (Ia-2) или формулы (Ia-3):

В другом варианте осуществления соединения формулы (I') характеризуются структурой формулы (Ib-2) или формулы (Ib-3):

В еще одном варианте осуществления соединения формулы (I') или формулы (I) характеризуются структурой формулы (lc) или формулы (lc-1):

В другом варианте осуществления соединения формулы (I') или формулы (I) характеризуются структурой формулы (Id) или формулы (Id-1):

В другом варианте осуществления соединения формулы (I') или формулы (I) характеризуются структурой формулы (Ie) или формулы (Ie-1):

В другом варианте осуществления соединения формулы (I') или формулы (I) характеризуются структурой формулы (If) или формулы (If-1):

В другом варианте осуществления соединения формулы (I') или формулы (I) характеризуются структурой формулы (Ig) или формулы (Ig-1):

В другом варианте осуществления соединения формулы (I') или формулы (I) характеризуются структурой формулы (Ih) или формулы (Ih-1):

В другом варианте осуществления соединения формулы (I') или формулы (I) характеризуются структурой формулы (Ii) или формулы (Ii-1):

В другом варианте осуществления соединения формулы (I') или формулы (I) характеризуются структурой формулы (Ij) или формулы (Ij-1):

В другом варианте осуществления соединения формулы (I') или формулы (I) характеризуются структурой формулы (Ik) или формулы (Ik-1):

В другом варианте осуществления соединения формулы (I') или формулы (I) характеризуются структурой формулы (Il) или формулы (Il-1):

В другом варианте осуществления соединения формулы (I') или формулы (I) характеризуются структурой формулы (Im) или формулы (Im-1):

В другом варианте осуществления соединения формулы (I') или формулы (I) характеризуются структурой формулы (In) или формулы (In-1):

В другом варианте осуществления соединения формулы (I') или формулы (I) характеризуются структурой формулы (Io) или формулы (Io-1):

В другом варианте осуществления соединения формулы (I') или формулы (I) характеризуются структурой формулы (Ip) или формулы (Ip-1):

В другом варианте осуществления соединения формулы (I') или формулы (I) характеризуются структурой формулы (Iq) или формулы (Iq-1):

В другом варианте осуществления соединения формулы (I') или формулы (I) характеризуются структурой формулы (Ir) или формулы (Ir-1):

В другом варианте осуществления соединения формулы (I') или формулы (I) характеризуются структурой формулы (Is) или формулы (Is-1):

В другом варианте осуществления соединения формулы (I') или формулы (I) характеризуются структурой формулы (It) или формулы (It-1):

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул (например, формул (I'), (I), (Ia), (Ib), (Ic), (Id), (Ie), (If), (Ig), (Ih), (Ii), (Ij), (Ik), (Il), (Im), (In), (Io), (Ip), (Iq), (Ir), (Is), (It), (Ia-1), (Ib-1), (Ic-1), (Id-1), (Ie-1), (If-1), (Ig-1), (Ih-1), (Ii-1), (Ij-1), (Ik-1), (Il-1), (Im-1), (In-1), (Io-1), (Ip-1), (Iq-1), (Ir-1), (Is-1), (It-1), (Ia-2), (Ia-3), (Ib-2), и/или (Ib-3),

), R₁ представляет собой или . В другом варианте осуществления R₁ представляет собой или . В еще одном варианте осуществления R₁ представляет собой или .

В другом варианте осуществления R₁ представляет собой . В еще одном варианте осуществления R₁ представляет собой . В другом варианте осуществления R₁ представляет собой .

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул каждый из R_a и R_b независимо представляет собой H или D. В другом варианте осуществления каждый из R_a и R_b независимо представляет собой H, или R_a и R_b вместе с атомом, к которому они присоединены, образуют =(O). В еще одном варианте осуществления каждый R_a и R_b независимо представляет собой H. В другом варианте осуществления R_a и R_b вместе с атомом, к которому они присоединены, образуют =(O).

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул X₁ представляет собой H, (C₁-C₃)алкил, (C₁-C₆)алкокси, (C₁-C₃)галогеналкил, (C₁-C₆)галогеналкокси, (C₃-C₇)циклоалкил, галоген, CN, -OH или -NH₂. В другом варианте осуществления X₁ представляет собой H, (C₁-C₃)алкил, (C₁-C₆)алкокси, (C₁-C₃)галогеналкил, (C₁-C₃)галогеналкокси, галоген, CN, -OH или -NH₂. В еще одном варианте осуществления X₁ представляет собой H, (C₁-C₄)алкил, (C₁-C₆)алкокси, (C₁-C₄)галогеналкил, (C₁-C₄)галогеналкокси, (C₃-C₇)циклоалкил или галоген. В другом варианте осуществления X₁ представляет собой H, (C₁-C₄)алкил, (C₁-C₆)алкокси, (C₁-C₄)галогеналкил, (C₁-C₄)галогеналкокси или галоген. В еще одном варианте осуществления X₁ представляет собой H, галоген, CN, -OH или -NH₂. В другом варианте осуществления X₁ представляет собой H, (C₁-C₄)алкил, (C₁-C₄)галогеналкил, галоген, CN, -OH или -NH₂. В еще одном варианте осуществления X₁ представляет собой H, (C₁-C₄)алкил, (C₁-C₄)галогеналкил, галоген, -OH или -NH₂. В другом варианте осуществления X₁ представляет собой H, (C₁-C₄)алкил, галоген, -OH или -NH₂. В еще одном варианте осуществления X₁ представляет собой H, галоген, -OH или -NH₂. В другом варианте осуществления X₁ представляет собой H.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул X₂ представляет собой H, (C₁-C₃)алкил, (C₁-C₆)алкокси, (C₁-C₃)галогеналкил, (C₁-C₆)галогеналкокси, (C₃-C₇)циклоалкил, галоген, CN, -OH или -NH₂. В другом варианте осуществления X₂ представляет собой H, (C₁-C₃)алкил, (C₁-C₆)алкокси, (C₁-C₃)галогеналкил, (C₁-C₃)галогеналкокси, галоген, CN, -OH или -NH₂. В еще одном варианте осуществления X₂ представляет собой H, (C₁-C₄)алкил, (C₁-C₆)алкокси, (C₁-C₄)галогеналкил, (C₁-C₄)галогеналкокси, (C₃-C₇)циклоалкил или галоген. В другом варианте осуществления X₂ представляет собой H, (C₁-C₄)алкил, (C₁-C₆)алкокси, (C₁-C₄)галогеналкил, (C₁-C₄)галогеналкокси или галоген. В еще одном варианте осуществления X₂ представляет собой H, галоген, CN, -OH или -NH₂. В другом варианте осуществления X₂ представляет собой H, (C₁-C₄)алкил, (C₁-C₄)галогеналкил, галоген, CN, -OH или -NH₂. В еще одном варианте осуществления X₂ представляет собой H, (C₁-C₄)алкил, (C₁-C₄)галогеналкил, галоген, -OH или -NH₂. В другом варианте осуществления X₂ представляет собой H, (C₁-C₄)алкил, галоген, -OH или -NH₂. В еще одном варианте осуществления X₂ представляет собой H, галоген, -OH или -NH₂. В другом варианте осуществления X₂ представляет собой H.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул X₁ представляет собой H, и X₂ представляет собой (C₁-C₃)алкил, (C₁-C₆)алкокси, (C₁-C₃)галогеналкил, (C₁-C₆)галогеналкокси, (C₃-C₇)циклоалкил, галоген, CN, -OH или -NH₂. В другом варианте осуществления X₁ представляет собой (C₁-C₃)алкил, (C₁-C₆)алкокси, (C₁-C₃)галогеналкил, (C₁-C₆)галогеналкокси, (C₃-C₇)циклоалкил, галоген, CN, -OH или -NH₂, и X₂ представляет собой H. В еще одном варианте осуществления X₁ представляет собой H, и X₂ представляет собой H.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R_x представляет собой D. В другом варианте осуществления R_x представляет собой H.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₂ представляет собой H, (C₁-C₃)алкил, (C₁-C₃)галогеналкил или (C₃-C₆)циклоалкил. В другом варианте осуществления R₂ представляет собой (C₁-C₃)алкил, (C₁-C₃)галогеналкил или (C₃-C₆)циклоалкил. В еще одном варианте осуществления R₂ представляет собой H, (C₁-C₃)алкил или (C₃-C₆)циклоалкил. В другом варианте осуществления R₂ представляет собой H, (C₁-C₃)алкил или (C₁-C₃)галогеналкил. В еще одном варианте осуществления R₂ представляет собой H или (C₁-C₃)алкил. В другом варианте осуществления R₂ представляет собой H, метил, этил, н-пропил или изопропил. В еще одном варианте осуществления R₂ представляет собой H, метил или этил. В другом варианте осуществления R₂ представляет собой H или метил.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₂ и R₇ вместе с атомами азота, к которым они присоединены, образуют 7-членное гетероциклоалкильное кольцо. В другом варианте осуществления R₂ и R₇ вместе с атомами азота, к которым они присоединены, образуют 6-членное гетероциклоалкильное кольцо.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул каждый R₃ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₃)алкил, (C₁-C₃)алкокси, (C₁-C₃)галогеналкил, (C₁-C₃)галогеналкокси, галоген, CN, -OH или -NH₂. В другом варианте осуществления R₃ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₃)алкил, (C₁-C₃)алкокси, (C₁-C₃)галогеналкил, (C₁-C₃)галогеналкокси или галоген. В еще одном варианте осуществления R₃ независимо в каждом случае представляет собой галоген, CN, -OH или -NH₂. В другом варианте осуществления R₃ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₃)алкил, (C₁-C₃)алкокси, (C₁-C₃)галогеналкил или (C₁-C₃)галогеналкокси. В еще одном варианте осуществления R₃ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₃)алкил, (C₁-C₃)галогеналкил, галоген, CN, -OH или -NH₂. В другом варианте осуществления R₃ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₃)алкил, (C₁-C₃)галогеналкил, галоген или CN. В еще одном варианте осуществления R₃ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₃)алкил, галоген или CN. В другом варианте осуществления R₃ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₃)алкил или (C₁-C₃)галогеналкил. В еще одном варианте осуществления R₃ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₃)алкил или CN. В другом варианте осуществления R₃ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₃)алкил. В еще одном варианте осуществления R₃ независимо в каждом случае представляет собой метил, этил, н-пропил или изопропил.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул два R₃ вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, образуют (C₃-C₇)циклоалкил или 4-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S; или два R₃, когда они находятся при смежных атомах углерода, вместе образуют фенил или 5- или 6-членное гетероарильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S. В другом варианте осуществления два R₃ вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, образуют (C₃-C₇)циклоалкил или 4-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S. В еще одном варианте осуществления два R₃ вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, образуют (C₃-C₇)циклоалкил или 5-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S. В другом варианте осуществления два R₃ вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, образуют (C₃-C₇)циклоалкил или 5- или 6-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S. В еще одном варианте осуществления два R₃ вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, образуют (C₄-C₇)циклоалкил или 5- или 6-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S. В другом варианте осуществления два R₃ вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, образуют (C₅-C₇)циклоалкил или 5- или 6-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S.

В другом варианте осуществления два R₃ вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, образуют (C₃-C₇)циклоалкил. В другом варианте осуществления два R₃ вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, образуют (C₄-C₇)циклоалкил. В еще одном варианте осуществления два R₃ вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, образуют (C₅-C₇)циклоалкил. В другом варианте осуществления два R₃ вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, образуют 4-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S. В другом варианте осуществления два R₃ вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, образуют 5-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S. В другом варианте осуществления два R₃ вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, образуют 5- или 6-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S.

В другом варианте осуществления два R₃, когда они находятся при смежных атомах углерода, вместе образуют фенил или 5- или 6-членное гетероарильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S. В другом варианте осуществления два R₃, когда они находятся при смежных атомах углерода, вместе образуют фенил или 5-членное гетероарильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S. В еще одном варианте осуществления два R₃, когда они находятся при смежных атомах углерода, вместе образуют фенил или a 6-членное гетероарильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S. В другом варианте осуществления два R₃, когда они находятся при смежных атомах углерода, вместе образуют фенил. В еще одном варианте осуществления два R₃, когда они находятся при смежных атомах углерода, вместе образуют 5- или 6-членное гетероарильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S. В другом варианте осуществления два R₃, когда они находятся при смежных атомах углерода, вместе образуют 5-членное гетероарильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S. В еще одном варианте осуществления два R₃, когда они находятся при смежных атомах углерода, вместе образуют 6-членное гетероарильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S.

В другом варианте осуществления два R₃ вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, образуют (C₃-C₇)циклоалкил или два R₃, когда они находятся при смежных атомах углерода, вместе образуют фенил или 5- или 6-членное гетероарильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S. В еще одном варианте осуществления два R₃ вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, образуют 4-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, или два R₃, когда они находятся при смежных атомах углерода, вместе образуют фенил или 5- или 6-членное гетероарильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S. В другом варианте осуществления два R₃ вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, образуют (C₃-C₇)циклоалкил или 4-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, или два R₃, когда они находятся при смежных атомах углерода, вместе образуют фенил. В еще одном варианте осуществления два R₃ вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, образуют (C₃-C₇)циклоалкил или 4-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, или два R₃, когда они находятся при смежных атомах углерода, вместе образуют 5- или 6-членное гетероарильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S.

В другом варианте осуществления два R₃ вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, образуют (C₃-C₇)циклоалкил или два R₃, когда они находятся при смежных атомах углерода, вместе образуют фенил. В другом варианте осуществления два R₃ вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, образуют (C₄-C₇)циклоалкил или два R₃, когда они находятся при смежных атомах углерода, вместе образуют фенил. В другом варианте осуществления два R₃ вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, образуют (C₅-C₇)циклоалкил или два R₃, когда они находятся при смежных атомах углерода, вместе образуют фенил.

В другом варианте осуществления два R₃ вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, образуют 4-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, или два R₃, когда они находятся при смежных атомах углерода, вместе образуют 5- или 6-членное гетероарильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S. В еще одном варианте осуществления два R₃ вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, образуют 5-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, или два R₃, когда они находятся при смежных атомах углерода, вместе образуют 5- или 6-членное гетероарильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S. В другом варианте осуществления два R₃ вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, образуют 5- или 6-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, или два R₃, когда они находятся при смежных атомах углерода, вместе образуют 5- или 6-членное гетероарильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S.

В другом варианте осуществления два R₃, когда они присоединены к одному и тому же атому углерода, вместе образуют (C₃-C₇)спироциклоалкил или 4-7-членное спирогетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S. В другом варианте осуществления два R₃, когда они находятся при смежных атомах углерода, образуют (C₃-C₇)циклоалкил или 4-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S. В другом варианте осуществления два R₃ вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, образуют мостиковый (C₃-C₇)циклоалкил или 4-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₃ и R₇ вместе с атомами азота и углерода, к которым они присоединены, образуют 5- или 6-членное гетероциклоалкильное кольцо, необязательно содержащее 1-2 дополнительных гетероатома, выбранные из O, N и S, необязательно замещенное одним - четырьмя заместителями, каждый из которых независимо выбран из (C₁-C₆)алкила, (C₁-C₆)галогеналкила и галогена. В другом варианте осуществления R₃ и R₇ вместе с атомами азота и углерода, к которым они присоединены, образуют 5- или 6-членное гетероциклоалкильное кольцо, необязательно содержащее 1-2 дополнительных гетероатома, выбранные из O, N и S, замещенное одним - четырьмя заместителями, каждый из которых независимо выбран из (C₁-C₆)алкила, (C₁-C₆)галогеналкила и галогена. В другом варианте осуществления R₃ и R₇ вместе с атомами азота и углерода, к которым они присоединены, образуют 5- или 6-членное гетероциклоалкильное кольцо, необязательно содержащее 1-2 дополнительных гетероатома, выбранные из O, N и S.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул каждый R₄ представляет собой (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₃)алкокси, (C₁-C₃)галогеналкил, (C₁-C₃)галогеналкокси, галоген, -OH или -NH₂. В другом варианте осуществления R₄ представляет собой (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₃)алкокси, (C₁-C₃)галогеналкил, (C₁-C₃)галогеналкокси или галоген. В другом варианте осуществления R₄ представляет собой (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₃)алкокси, (C₁-C₃)галогеналкил или (C₁-C₃)галогеналкокси. В другом варианте осуществления R₄ представляет собой (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₃)галогеналкил или галоген. В другом варианте осуществления R₄ представляет собой галоген, -OH или -NH₂. В другом варианте осуществления R₄ представляет собой (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₃)галогеналкил, галоген, -OH или -NH₂. В другом варианте осуществления R₄ представляет собой (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₃)галогеналкил, галоген или -OH. В другом варианте осуществления R₄ представляет собой (C₁-C₆)алкил или (C₁-C₃)галогеналкил. В другом варианте осуществления R₄ представляет собой (C₁-C₆)алкил.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₅ представляет собой -OR₆. В другом варианте осуществления R₅ представляет собой -NR₇R_7'.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₆ представляет собой H, (C₁-C₃)алкил, (C₁-C₃)галогеналкил, -C(O)(C₁-C₃)алкил, (C₃-C₇)циклоалкил, 5- или 6-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, (C₆-C₁₀)арил или 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом алкил необязательно замещен одним - тремя заместителями, каждый из которых независимо выбран из (C₆-C₁₀)арила и 5- или 6-членного гетероарила, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S. В другом варианте осуществления R₆ представляет собой (C₁-C₃)алкил, (C₁-C₃)галогеналкил, -C(O)(C₁-C₃)алкил, (C₃-C₇)циклоалкил, 5- или 6-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, (C₆-C₁₀)арил или 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом алкил необязательно замещен одним - тремя заместителями, каждый из которых независимо выбран из (C₆-C₁₀)арила и 5- или 6-членного гетероарила, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S.

В другом варианте осуществления R₆ представляет собой H, (C₁-C₃)алкил, (C₁-C₃)галогеналкил, -C(O)(C₁-C₃)алкил, (C₃-C₇)циклоалкил, 5- или 6-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, (C₆-C₁₀)арил или 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом алкил замещен одним - тремя заместителями, каждый из которых независимо выбран из (C₆-C₁₀)арила и 5- или 6-членного гетероарила, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S. В еще одном варианте осуществления R₆ представляет собой (C₁-C₃)алкил, (C₁-C₃)галогеналкил, -C(O)(C₁-C₃)алкил, (C₃-C₇)циклоалкил, 5- или 6-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, (C₆-C₁₀)арил или 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом алкил замещен одним - тремя заместителями, каждый из которых независимо выбран из (C₆-C₁₀)арила и 5- или 6-членного гетероарила, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S.

В другом варианте осуществления R₆ представляет собой H, (C₁-C₃)алкил, (C₁-C₃)галогеналкил или -C(O)(C₁-C₃)алкил, при этом алкил необязательно замещен одним - тремя заместителями, каждый из которых независимо выбран из (C₆-C₁₀)арила и 5- или 6-членного гетероарила, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S. В еще одном варианте осуществления R₆ представляет собой (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₃)галогеналкил или -C(O)(C₁-C₃)алкил, при этом алкил необязательно замещен одним - тремя заместителями, каждый из которых независимо выбран из (C₆-C₁₀)арила и 5- или 6-членного гетероарила, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S. В другом варианте осуществления R₆ представляет собой (C₃-C₇)циклоалкил, 5- или 6-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, (C₆-C₁₀)арил или 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S.

В другом варианте осуществления R₆ представляет собой H, (C₁-C₃)алкил, (C₃-C₇)циклоалкил, 5- или 6-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, (C₆-C₁₀)арил или 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом алкил необязательно замещен одним - тремя заместителями, каждый из которых независимо выбран из (C₆-C₁₀)арила и 5- или 6-членного гетероарила, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S. В еще одном варианте осуществления R₆ представляет собой H, (C₁-C₃)алкил, (C₃-C₇)циклоалкил или 5- или 6-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом алкил необязательно замещен одним - тремя заместителями, каждый из которых независимо выбран из (C₆-C₁₀)арила и 5- или 6-членного гетероарила, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S.

В другом варианте осуществления R₆ представляет собой H, (C₁-C₃)алкил, (C₆-C₁₀)арил или 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом алкил необязательно замещен одним - тремя заместителями, каждый из которых независимо выбран из (C₆-C₁₀)арила и 5- или 6-членного гетероарила, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S. В еще одном варианте осуществления R₆ представляет собой H, (C₁-C₃)алкил, (C₃-C₇)циклоалкил или (C₆-C₁₀)арил, при этом алкил необязательно замещен одним - тремя заместителями, каждый из которых независимо выбран из (C₆-C₁₀)арила и 5- или 6-членного гетероарила, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S.

В другом варианте осуществления R₆ представляет собой H, (C₁-C₃)алкил, (C₃-C₇)циклоалкил или (C₆-C₁₀)арил, при этом алкил необязательно замещен одним - тремя (C₆-C₁₀)арилами. В еще одном варианте осуществления R₆ представляет собой H, (C₁-C₃)алкил, 5- или 6-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, или 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом алкил необязательно замещен одним - тремя заместителями, каждый из которых независимо выбран из (C₆-C₁₀)арила и 5- или 6-членного гетероарила, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S. В другом варианте осуществления R₆ представляет собой H, (C₁-C₃)алкил, (C₃-C₇)циклоалкил или (C₆-C₁₀)арил, при этом алкил необязательно замещен одним - тремя (C₆-C₁₀)арилами.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₇ представляет собой H, (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₆)галогеналкил, (C₃-C₇)циклоалкил, 5- или 6-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, (C₆-C₁₀)арил или 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом алкил необязательно замещен одним - тремя R₈, и при этом циклоалкил, гетероциклоалкил, арил и гетероарил необязательно замещены одним - четырьмя R₁₁. В другом варианте осуществления R₇ представляет собой H, (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₃)галогеналкил, (C₃-C₇)циклоалкил, 5- или 6-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, (C₆-C₁₀)арил или 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом алкил необязательно замещен одним - тремя R₈, и при этом циклоалкил, гетероциклоалкил, арил и гетероарил необязательно замещены одним - четырьмя R₁₁. В еще одном варианте осуществления R₇ представляет собой (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₃)галогеналкил, (C₃-C₇)циклоалкил, 5- или 6-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, (C₆-C₁₀)арил или 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом алкил необязательно замещен одним - тремя R₈, и при этом циклоалкил, гетероциклоалкил, арил и гетероарил необязательно замещены одним - четырьмя R₁₁. В другом варианте осуществления R₇ представляет собой H, (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₃)галогеналкил, (C₃-C₇)циклоалкил, 5- или 6-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, (C₆-C₁₀)арил или 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом алкил замещен одним - тремя R₈, и при этом циклоалкил, гетероциклоалкил, арил и гетероарил необязательно замещены одним - четырьмя R₁₁.

В другом варианте осуществления R₇ представляет собой H, (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₆)галогеналкил, (C₃-C₇)циклоалкил, 5- или 6-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, (C₆-C₁₀)арил или 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом алкил необязательно замещен одним - тремя R₈. В другом варианте осуществления R₇ представляет собой H, (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₃)галогеналкил, (C₃-C₇)циклоалкил, 5- или 6-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, (C₆-C₁₀)арил или 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом алкил необязательно замещен одним - тремя R₈. В другом варианте осуществления R₇ представляет (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₃)галогеналкил, (C₃-C₇)циклоалкил, 5- или 6-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, (C₆-C₁₀)арил или 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом алкил необязательно замещен одним - тремя R₈. В другом варианте осуществления R₇ представляет собой H, (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₃)галогеналкил, (C₃-C₇)циклоалкил, 5- или 6-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, (C₆-C₁₀)арил или 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом алкил замещен одним - тремя R₈.

В другом варианте осуществления R₇ представляет собой (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₃)галогеналкил, (C₃-C₇)циклоалкил, 5- или 6-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, (C₆-C₁₀)арил или 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом алкил необязательно замещен одним - тремя R₈, и при этом циклоалкил, гетероциклоалкил, арил и гетероарил необязательно замещены одним - четырьмя R₁₁. В еще одном варианте осуществления R₇ представляет собой H, (C₁-C₆)алкил, (C₃-C₇)циклоалкил, 5- или 6-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, (C₆-C₁₀)арил или 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом алкил необязательно замещен одним - тремя R₈, и при этом циклоалкил, гетероциклоалкил, арил и гетероарил необязательно замещены одним - четырьмя R₁₁. В другом варианте осуществления R₇ представляет собой H, (C₁-C₆)алкил, (C₃-C₇)циклоалкил или 5- или 6-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом алкил необязательно замещен одним - тремя R₈, и при этом циклоалкил, гетероциклоалкил, арил и гетероарил необязательно замещены одним - четырьмя R₁₁. В еще одном варианте осуществления R₇ представляет собой H, (C₁-C₆)алкил, (C₆-C₁₀)арил или 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом алкил необязательно замещен одним - тремя R₈, и при этом арил и гетероарил необязательно замещены одним - четырьмя R₁₁.

В другом варианте осуществления R₇ представляет собой (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₃)галогеналкил, (C₃-C₇)циклоалкил, 5- или 6-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, (C₆-C₁₀)арил или 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом алкил необязательно замещен одним - тремя R₈. В еще одном варианте осуществления R₇ представляет собой H, (C₁-C₆)алкил, (C₃-C₇)циклоалкил, 5- или 6-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, (C₆-C₁₀)арил или 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом алкил необязательно замещен одним - тремя R₈. В другом варианте осуществления R₇ представляет собой H, (C₁-C₆)алкил, (C₃-C₇)циклоалкил или 5- или 6-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом алкил необязательно замещен одним - тремя R₈. В еще одном варианте осуществления R₇ представляет собой H, (C₁-C₆)алкил, (C₆-C₁₀)арил или 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом алкил необязательно замещен одним - тремя R₈.

В другом варианте осуществления R₇ представляет собой H, (C₁-C₆)алкил, 5- или 6-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, или 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом алкил необязательно замещен одним - тремя R₈, и при этом гетероциклоалкил и гетероарил необязательно замещены одним - четырьмя R₁₁. В еще одном варианте осуществления R₇ представляет собой H, (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₃)галогеналкил, (C₃-C₇)циклоалкил или (C₆-C₁₀)арил, при этом алкил необязательно замещен одним - тремя R₈. В другом варианте осуществления R₇ представляет собой H, (C₁-C₆)алкил, (C₃-C₇)циклоалкил или (C₆-C₁₀)арил, при этом алкил необязательно замещен одним - тремя R₈, и при этом циклоалкил и арил необязательно замещены одним - четырьмя R₁₁.

В другом варианте осуществления R₇ представляет собой H, (C₁-C₆)алкил, 5- или 6-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, или 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом алкил необязательно замещен одним - тремя R₈. В еще одном варианте осуществления R₇ представляет собой H, (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₃)галогеналкил, (C₃-C₇)циклоалкил или (C₆-C₁₀)арил, при этом алкил необязательно замещен одним - тремя R₈. В другом варианте осуществления R₇ представляет собой H, (C₁-C₆)алкил, (C₃-C₇)циклоалкил или (C₆-C₁₀)арил, при этом алкил необязательно замещен одним - тремя R₈.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R_7' представляет собой H, (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₆)галогеналкил, (C₃-C₇)циклоалкил, 5- или 6-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, (C₆-C₁₀)арил или 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом алкил необязательно замещен одним - тремя R₈, и при этом циклоалкил, гетероциклоалкил, арил и гетероарил необязательно замещены одним - четырьмя R₁₁. В другом варианте осуществления R_7' представляет собой H, (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₃)галогеналкил, (C₃-C₇)циклоалкил, 5- или 6-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, (C₆-C₁₀)арил или 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом алкил необязательно замещен одним - тремя R₈, и при этом циклоалкил, гетероциклоалкил, арил и гетероарил необязательно замещены одним - четырьмя R₁₁. В другом варианте осуществления R_7' представляет собой (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₃)галогеналкил, (C₃-C₇)циклоалкил, 5- или 6-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, (C₆-C₁₀)арил или 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом алкил необязательно замещен одним - тремя R₈, и при этом циклоалкил, гетероциклоалкил, арил и гетероарил необязательно замещены одним - четырьмя R₁₁. В другом варианте осуществления R_7' представляет собой H, (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₃)галогеналкил, (C₃-C₇)циклоалкил, 5- или 6-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, (C₆-C₁₀)арил или 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом алкил замещен одним - тремя R₈, и при этом циклоалкил, гетероциклоалкил, арил и гетероарил необязательно замещены одним - четырьмя R₁₁.

В другом варианте осуществления R_7' представляет собой H, (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₆)галогеналкил, (C₃-C₇)циклоалкил, 5- или 6-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, (C₆-C₁₀)арил или 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом алкил необязательно замещен одним - тремя R₈. В другом варианте осуществления R_7' представляет собой H, (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₃)галогеналкил, (C₃-C₇)циклоалкил, 5- или 6-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, (C₆-C₁₀)арил или 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом алкил необязательно замещен одним - тремя R₈. В еще одном варианте осуществления R_7' представляет собой (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₃)галогеналкил, (C₃-C₇)циклоалкил, 5- или 6-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, (C₆-C₁₀)арил или 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом алкил необязательно замещен одним - тремя R₈. В другом варианте осуществления R_7' представляет собой H, (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₃)галогеналкил, (C₃-C₇)циклоалкил, 5- или 6-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, (C₆-C₁₀)арил или 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом алкил замещен одним - тремя R₈.

В другом варианте осуществления R_7' представляет собой (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₃)галогеналкил, (C₃-C₇)циклоалкил, 5- или 6-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, (C₆-C₁₀)арил или 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом алкил замещен одним - тремя R₈, и при этом циклоалкил, гетероциклоалкил, арил и гетероарил необязательно замещены одним - четырьмя R₁₁. В еще одном варианте осуществления R_7' представляет собой H, (C₁-C₆)алкил, (C₃-C₇)циклоалкил, 5- или 6-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, (C₆-C₁₀)арил или 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом алкил необязательно замещен одним - тремя R₈, и при этом циклоалкил, гетероциклоалкил, арил и гетероарил необязательно замещены одним - четырьмя R₁₁. В другом варианте осуществления R_7' представляет собой H, (C₁-C₆)алкил, (C₃-C₇)циклоалкил или 5- или 6-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом алкил необязательно замещен одним - тремя R₈, и при этом циклоалкил, гетероциклоалкил, арил и гетероарил необязательно замещены одним - четырьмя R₁₁. В еще одном варианте осуществления R_7' представляет собой H, (C₁-C₆)алкил, (C₆-C₁₀)арил или 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом алкил необязательно замещен одним - тремя R₈, и при этом арил и гетероарил необязательно замещены одним - четырьмя R₁₁.

В другом варианте осуществления R_7' представляет собой (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₃)галогеналкил, (C₃-C₇)циклоалкил, 5- или 6-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, (C₆-C₁₀)арил или 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом алкил необязательно замещен одним - тремя R₈. В еще одном варианте осуществления R_7' представляет собой H, (C₁-C₆)алкил, (C₃-C₇)циклоалкил, 5- или 6-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, (C₆-C₁₀)арил или 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом алкил необязательно замещен одним - тремя R₈. В другом варианте осуществления R_7' представляет собой H, (C₁-C₆)алкил, (C₃-C₇)циклоалкил или 5- или 6-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом алкил необязательно замещен одним - тремя R₈. В еще одном варианте осуществления R_7' представляет собой H, (C₁-C₆)алкил, (C₆-C₁₀)арил или 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом алкил необязательно замещен одним - тремя R₈.

В другом варианте осуществления R_7' представляет собой H, (C₁-C₆)алкил, 5- или 6-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, или 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом алкил необязательно замещен одним - тремя R₈, и при этом гетероциклоалкил и гетероарил необязательно замещены одним - четырьмя R₁₁. В еще одном варианте осуществления R_7' представляет собой H, (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₃)галогеналкил, (C₃-C₇)циклоалкил или (C₆-C₁₀)арил, при этом алкил необязательно замещен одним - тремя R₈. В другом варианте осуществления R_7' представляет собой H, (C₁-C₆)алкил, (C₃-C₇)циклоалкил или (C₆-C₁₀)арил, при этом алкил необязательно замещен одним - тремя R₈, и при этом циклоалкил и арил необязательно замещены одним - четырьмя R₁₁.

В другом варианте осуществления R_7' представляет собой H, (C₁-C₆)алкил, 5- или 6-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, или 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом алкил необязательно замещен одним - тремя R₈. В еще одном варианте осуществления R_7' представляет собой H, (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₃)галогеналкил, (C₃-C₇)циклоалкил или (C₆-C₁₀)арил, при этом алкил необязательно замещен одним - тремя R₈. В другом варианте осуществления R_7' представляет собой H, (C₁-C₆)алкил, (C₃-C₇)циклоалкил или (C₆-C₁₀)арил, при этом алкил необязательно замещен одним - тремя R₈. В еще одном варианте осуществления R_7' представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, при этом алкил необязательно замещен одним - тремя R₈. В другом варианте осуществления R_7' представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, при этом алкил замещен одним - тремя R₈. В еще одном варианте осуществления R_7' представляет собой H или (C₁-C₆)алкил.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₇ и R_7' вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 4-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, необязательно содержащее 1-2 дополнительных гетероатома, выбранные из O, N и S, необязательно замещенное одним - четырьмя R₉. В другом варианте осуществления R₇ и R_7' вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 4-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, необязательно содержащее 1-2 дополнительных гетероатома, выбранные из O, N и S, необязательно замещенное одним - тремя R₉. В еще одном варианте осуществления R₇ и R_7' вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 5-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, необязательно содержащее 1-2 дополнительных гетероатома, выбранные из O, N и S, необязательно замещенное одним - тремя R₉. В еще одном варианте осуществления R₇ и R_7' вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 4- или 5-членное гетероциклоалкильное кольцо, необязательно содержащее 1-2 дополнительных гетероатома, выбранные из O, N и S, необязательно замещенное одним - тремя R₉. В еще одном варианте осуществления R₇ и R_7' вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 5- или 6-членное гетероциклоалкильное кольцо, необязательно содержащее 1-2 дополнительных гетероатома, выбранные из O, N и S, необязательно замещенное одним - тремя R₉.

В еще одном варианте осуществления R₇ и R_7' вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 6- или 7-членное гетероциклоалкильное кольцо, необязательно содержащее 1-2 дополнительных гетероатома, выбранные из O, N и S, необязательно замещенное одним - тремя R₉. В еще одном варианте осуществления R₇ и R_7' вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 4-членное гетероциклоалкильное кольцо, необязательно содержащее 1-2 дополнительных гетероатома, выбранные из O, N и S, необязательно замещенное одним - тремя R₉. В другом варианте осуществления R₇ и R_7' вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 5-членное гетероциклоалкильное кольцо, необязательно содержащее 1-2 дополнительных гетероатома, выбранные из O, N и S, необязательно замещенное одним - тремя R₉. В еще одном варианте осуществления R₇ и R_7' вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 6-членное гетероциклоалкильное кольцо, необязательно содержащее 1-2 дополнительных гетероатома, выбранные из O, N и S, необязательно замещенное одним - тремя R₉. В другом варианте осуществления R₇ и R_7' вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 7-членное гетероциклоалкильное кольцо, необязательно содержащее 1-2 дополнительных гетероатома, выбранные из O, N и S, необязательно замещенное одним - тремя R₉.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₃ и R₇ вместе с атомами азота и углерода, к которым они присоединены, образуют 5- или 6-членное гетероциклоалкильное кольцо, необязательно содержащее 1-2 дополнительных гетероатома, выбранные из O, N и S, необязательно замещенное одним - четырьмя заместителями, каждый из которых независимо выбран из (C₁-C₆)алкила, (C₁-C₆)галогеналкила и галогена. В другом варианте осуществления R₃ и R₇ вместе с атомами азота и углерода, к которым они присоединены, образуют 5- или 6-членное гетероциклоалкильное кольцо, необязательно содержащее 1-2 дополнительных гетероатома, выбранные из O, N и S, замещенное одним - четырьмя заместителями, каждый из которых независимо выбран из (C₁-C₆)алкила, (C₁-C₆)галогеналкила и галогена. В еще одном варианте осуществления R₃ и R₇ вместе с атомами азота и углерода, к которым они присоединены, образуют 5- или 6-членное гетероциклоалкильное кольцо, необязательно содержащее 1-2 дополнительных гетероатома, выбранные из O, N и S.

В другом варианте осуществления R₃ и R₇ вместе с атомами азота и углерода, к которым они присоединены, образуют 5-членное гетероциклоалкильное кольцо, необязательно содержащее 1-2 дополнительных гетероатома, выбранные из O, N и S, необязательно замещенное одним - четырьмя заместителями, каждый из которых независимо выбран из (C₁-C₆)алкила, (C₁-C₆)галогеналкила и галогена. В еще одном варианте осуществления R₃ и R₇ вместе с атомами азота и углерода, к которым они присоединены, образуют 5-членное гетероциклоалкильное кольцо, необязательно содержащее 1-2 дополнительных гетероатома, выбранные из O, N и S, замещенное одним - четырьмя заместителями, каждый из которых независимо выбран из (C₁-C₆)алкила, (C₁-C₆)галогеналкила и галогена. В другом варианте осуществления R₃ и R₇ вместе с атомами азота и углерода, к которым они присоединены, образуют 5-членное гетероциклоалкильное кольцо, необязательно содержащее 1-2 дополнительных гетероатома, выбранные из O, N и S.

В другом варианте осуществления R₃ и R₇ вместе с атомами азота и углерода, к которым они присоединены, образуют 6-членное гетероциклоалкильное кольцо, необязательно содержащее 1-2 дополнительных гетероатома, выбранные из O, N и S, необязательно замещенное одним - четырьмя заместителями, каждый из которых независимо выбран из (C₁-C₆)алкила, (C₁-C₆)галогеналкила и галогена. В еще одном варианте осуществления R₃ и R₇ вместе с атомами азота и углерода, к которым они присоединены, образуют 6-членное гетероциклоалкильное кольцо, необязательно содержащее 1-2 дополнительных гетероатома, выбранные из O, N и S, замещенное одним - четырьмя заместителями, каждый из которых независимо выбран из (C₁-C₆)алкила, (C₁-C₆)галогеналкила и галогена. В другом варианте осуществления R₃ и R₇ вместе с атомами азота и углерода, к которым они присоединены, образуют 6-членное гетероциклоалкильное кольцо, необязательно содержащее 1-2 дополнительных гетероатома, выбранные из O, N и S.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул каждый R₈ представляет собой -C(O)OH, (C₃-C₇)циклоалкил, 4-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, (C₆-C₁₀)арил или 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом циклоалкил, гетероциклоалкил, арил и гетероарил необязательно замещены одним - тремя R₁₀. В другом варианте осуществления каждый R₈ представляет собой -C(O)OH, (C₃-C₇)циклоалкил или 4-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом циклоалкил и гетероциклоалкил необязательно замещены одним - тремя R₁₀. В еще одном варианте осуществления каждый R₈ представляет собой -C(O)OH, (C₆-C₁₀)арил или 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом арил и гетероарил необязательно замещены одним - тремя R₁₀.

В другом варианте осуществления каждый R₈ представляет собой (C₃-C₇)циклоалкил, 4-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, (C₆-C₁₀)арил или 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом циклоалкил, гетероциклоалкил, арил и гетероарил необязательно замещены одним - тремя R₁₀. В другом варианте осуществления каждый R₈ представляет собой (C₃-C₇)циклоалкил или 4-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом циклоалкил и гетероциклоалкил необязательно замещены одним - тремя R₁₀. В еще одном варианте осуществления каждый R₈ представляет собой (C₆-C₁₀)арил или 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом арил и гетероарил необязательно замещены одним - тремя R₁₀.

В другом варианте осуществления каждый R₈ представляет собой -C(O)OH, (C₃-C₇)циклоалкил или (C₆-C₁₀)арил, при этом циклоалкил и арил необязательно замещены одним - тремя R₁₀. В еще одном варианте осуществления каждый R₈ представляет собой 4-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, или 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом гетероциклоалкил и гетероарил необязательно замещены одним - тремя R₁₀. В другом варианте осуществления каждый R₈ представляет собой -C(O)OH, (C₃-C₇)циклоалкил или 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом циклоалкил и гетероарил необязательно замещены одним - тремя R₁₀. В еще одном варианте осуществления каждый R₈ представляет собой -C(O)OH, 4-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, или (C₆-C₁₀)арил, при этом гетероциклоалкил и арил необязательно замещены одним - тремя R₁₀.

В другом варианте осуществления каждый R₈ представляет собой (C₃-C₇)циклоалкил или (C₆-C₁₀)арил, при этом циклоалкил и арил необязательно замещены одним - тремя R₁₀. В еще одном варианте осуществления каждый R₈ представляет собой 4-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, или 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом гетероциклоалкил и гетероарил необязательно замещены одним - тремя R₁₀. В другом варианте осуществления каждый R₈ представляет собой (C₃-C₇)циклоалкил или 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом циклоалкил и гетероарил необязательно замещены одним - тремя R₁₀. В еще одном варианте осуществления каждый R₈ представляет собой 4-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, или (C₆-C₁₀)арил, при этом гетероциклоалкил и арил необязательно замещены одним - тремя R₁₀.

В другом варианте осуществления каждый R₈ представляет собой -C(O)OH или (C₃-C₇)циклоалкил, необязательно замещенный одним - тремя R₁₀. В еще одном варианте осуществления каждый R₈ представляет собой (C₃-C₇)циклоалкил, замещенный одним - тремя R₁₀. В другом варианте осуществления каждый R₈ представляет собой -C(O)OH или (C₃-C₇)циклоалкил. В еще одном варианте осуществления каждый R₈ представляет собой (C₆-C₁₀)арил, необязательно замещенный одним - тремя R₁₀. В другом варианте осуществления каждый R₈ представляет собой -C(O)OH или (C₆-C₁₀)арил, замещенный одним - тремя R₁₀. В еще одном варианте осуществления каждый R₈ представляет собой -C(O)OH или (C₆-C₁₀)арил. В другом варианте осуществления каждый R₈ представляет собой -C(O)OH.

В другом варианте осуществления каждый R₈ представляет собой (C₃-C₇)циклоалкил, необязательно замещенный одним - тремя R₁₀. В еще одном варианте осуществления каждый R₈ представляет собой (C₃-C₇)циклоалкил, замещенный одним - тремя R₁₀. В другом варианте осуществления каждый R₈ представляет собой (C₃-C₇)циклоалкил. В еще одном варианте осуществления каждый R₈ представляет собой (C₆-C₁₀)арил, необязательно замещенный одним - тремя R₁₀. В другом варианте осуществления каждый R₈ представляет собой (C₆-C₁₀)арил, замещенный одним - тремя R₁₀. В еще одном варианте осуществления каждый R₈ представляет собой (C₆-C₁₀)арил.

В другом варианте осуществления каждый R₈ представляет собой -C(O)OH или 4-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, необязательно замещенное одним - тремя R₁₀. В еще одном варианте осуществления каждый R₈ представляет собой -C(O)OH или 4-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, замещенное одним - тремя R₁₀. В другом варианте осуществления каждый R₈ представляет собой -C(O)OH или 4-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S. В еще одном варианте осуществления каждый R₈ представляет собой -C(O)OH или 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, необязательно замещенный одним - тремя R₁₀. В другом варианте осуществления каждый R₈ представляет собой -C(O)OH или 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, замещенный одним - тремя R₁₀. В еще одном варианте осуществления каждый R₈ представляет собой -C(O)OH или 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S.

В другом варианте осуществления каждый R₈ представляет собой 4-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, необязательно замещенное одним - тремя R₁₀. В еще одном варианте осуществления каждый R₈ представляет собой 4-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, замещенное одним - тремя R₁₀. В другом варианте осуществления каждый R₈ представляет собой 4-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S. В еще одном варианте осуществления каждый R₈ представляет собой 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, необязательно замещенный одним - тремя R₁₀. В другом варианте осуществления каждый R₈ представляет собой 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, замещенный одним - тремя R₁₀. В еще одном варианте осуществления каждый R₈ представляет собой 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул каждый R₉ независимо в каждом случае представляет собой галоген, (C₁-C₄)алкил, (C₁-C₄)алкокси, (C₁-C₄)галогеналкил, (C₁-C₄)галогеналкокси, -OH, CN, -NR₁₂R₁₃ или -NH₂, при этом алкокси необязательно замещен одним - тремя заместителями, независимо выбранными из (C₃-C₇)циклоалкила, 4-7-членного гетероциклоалкильного кольца, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, (C₆-C₁₀)арила и 5- или 6-членного гетероарила, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S. В другом варианте осуществления каждый R₉ независимо в каждом случае представляет собой галоген, (C₁-C₄)алкил, (C₁-C₄)алкокси, (C₁-C₄)галогеналкил, (C₁-C₄)галогеналкокси, CN, -OH или -NH₂, при этом алкокси необязательно замещен одним - тремя заместителями, независимо выбранными из (C₃-C₇)циклоалкила, 4-7-членного гетероциклоалкильного кольца, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, (C₆-C₁₀)арила и 5- или 6-членного гетероарила, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S. В другом варианте осуществления каждый R₉ независимо в каждом случае представляет собой галоген, (C₁-C₄)алкил, (C₁-C₄)алкокси, (C₁-C₄)галогеналкил, (C₁-C₄)галогеналкокси, CN, -NR₁₂R₁₃ или -OH, при этом алкокси необязательно замещен одним - тремя заместителями, независимо выбранными из (C₃-C₇)циклоалкила, 4-7-членного гетероциклоалкильного кольца, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, (C₆-C₁₀)арила и 5- или 6-членного гетероарила, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S.

В другом варианте осуществления каждый R₉ независимо в каждом случае представляет собой галоген, (C₁-C₄)алкил, (C₁-C₄)алкокси, (C₁-C₄)галогеналкил, (C₁-C₄)галогеналкокси, CN или -OH, при этом алкокси необязательно замещен одним - тремя заместителями, независимо выбранными из (C₃-C₇)циклоалкила, 4-7-членного гетероциклоалкильного кольца, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, (C₆-C₁₀)арила и 5- или 6-членного гетероарила, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S. В еще одном варианте осуществления каждый R₉ независимо в каждом случае представляет собой галоген, (C₁-C₄)алкил, (C₁-C₄)алкокси, (C₁-C₄)галогеналкил, (C₁-C₄)галогеналкокси, галоген, CN, -NR₁₂R₁₃ или -OH, при этом алкокси необязательно замещен (C₃-C₇)циклоалкилом, 4-7-членным гетероциклоалкильным кольцом, содержащим 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, и (C₆-C₁₀)арилом. В другом варианте осуществления каждый R₉ независимо в каждом случае представляет собой галоген, (C₁-C₄)алкил, (C₁-C₄)алкокси, (C₁-C₄)галогеналкил, (C₁-C₄)галогеналкокси, галоген, CN или -OH, при этом алкокси необязательно замещен (C₃-C₇)циклоалкилом, 4-7-членным гетероциклоалкильным кольцом, содержащим 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, и (C₆-C₁₀)арилом.

В другом варианте осуществления каждый R₉ независимо в каждом случае представляет собой галоген, (C₁-C₄)алкил, (C₁-C₄)алкокси, (C₁-C₄)галогеналкил, (C₁-C₄)галогеналкокси, галоген, CN или -OH, при этом алкокси необязательно замещен одним - тремя заместителями, независимо выбранными из (C₃-C₇)циклоалкила, 4-7-членного гетероциклоалкильного кольца, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, и 5- или 6-членного гетероарила, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S. В другом варианте осуществления каждый R₉ независимо в каждом случае представляет собой галоген, (C₁-C₄)алкил, (C₁-C₄)алкокси, (C₁-C₄)галогеналкил, (C₁-C₄)галогеналкокси, галоген, CN или -OH, при этом алкокси необязательно замещен одним - тремя заместителями, независимо выбранными из (C₃-C₇)циклоалкила, (C₆-C₁₀)арила и 5- или 6-членного гетероарила, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S. В другом варианте осуществления каждый R₉ независимо в каждом случае представляет собой галоген, (C₁-C₄)алкил, (C₁-C₄)алкокси, (C₁-C₄)галогеналкил, (C₁-C₄)галогеналкокси, галоген, CN или -OH, при этом алкокси необязательно замещен одним - тремя заместителями, независимо выбранными из 4-7-членного гетероциклоалкильного кольца, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, (C₆-C₁₀)арила и 5- или 6-членного гетероарила, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S.

В другом варианте осуществления каждый R₉ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₃)алкил, (C₁-C₃)галогеналкил, галоген, CN, -OH или -NH₂. В другом варианте осуществления каждый R₉ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₆)галогеналкил, галоген, -OH или -NH₂. В еще одном варианте осуществления каждый R₉ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₆)галогеналкил или галоген. В другом варианте осуществления каждый R₉ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₆)галогеналкил, галоген или -OH. В еще одном варианте осуществления каждый R₉ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₆)галогеналкил, галоген или -NH₂. В другом варианте осуществления каждый R₉ независимо в каждом случае представляет собой галоген, -OH или -NH₂. В еще одном варианте осуществления каждый R₉ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₃)алкил, (C₁-C₃)галогеналкил или галоген. В другом варианте осуществления каждый R₉ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₆)алкил или галоген. В еще одном варианте осуществления каждый R₉ независимо в каждом случае представляет собой галоген.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул два R₉ вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют (C₅-C₇)циклоалкил или 5-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-2 гетероатома, выбранные из O, N и S. В другом варианте осуществления два R₉ вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют (C₅-C₇)циклоалкил. В еще одном варианте осуществления два R₉ вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют (C₅-C₆)циклоалкил. В другом варианте осуществления два R₉ вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют (C₆-C₇)циклоалкил. В еще одном варианте осуществления два R₉ вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют (C₅)циклоалкил. В другом варианте осуществления два R₉ вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют (C₆)циклоалкил. В еще одном варианте осуществления два R₉ вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют (C₇)циклоалкил.

В другом варианте осуществления два R₉ вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют 5-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-2 гетероатома, выбранные из O, N и S. В еще одном варианте осуществления два R₉ вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют 5- или 6-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-2 гетероатома, выбранные из O, N и S. В другом варианте осуществления два R₉ вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют 6- или 7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-2 гетероатома, выбранные из O, N и S. В еще одном варианте осуществления два R₉ вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют 5-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-2 гетероатома, выбранные из O, N и S. В другом варианте осуществления два R₉ вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют 6-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-2 гетероатома, выбранные из O, N и S. В еще одном варианте осуществления два R₉ вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют 7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-2 гетероатома, выбранные из O, N и S.

В другом варианте осуществления два R₉, когда они присоединены к одному и тому же атому углерода, вместе образуют (C₅-C₇)спироциклоалкил или 5-7-членное спирогетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S. В другом варианте осуществления два R₉, когда они находятся при смежных атомах, образуют (C₅-C₇)циклоалкил или 5-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S. В другом варианте осуществления два R₉ вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, образуют мостиковый (C₅-C₇)циклоалкил или 5-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул каждый R₁₀ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₆)галогеналкил, (C₁-C₆)алкокси, (C₁-C₆)галогеналкокси, галоген, -OH, CN или -NH₂. В другом варианте осуществления каждый R₁₀ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₃)алкил, (C₁-C₃)галогеналкил, (C₁-C₆)алкокси, (C₁-C₆)галогеналкокси, галоген или CN. В другом варианте осуществления каждый R₁₀ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₃)алкил, (C₁-C₃)галогеналкил, (C₁-C₆)алкокси, галоген или CN. В еще одном варианте осуществления каждый R₁₀ независимо в каждом случае представляет собой галоген, -OH, CN или -NH₂. В другом варианте осуществления каждый R₁₀ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₃)алкил, (C₁-C₃)галогеналкил, (C₁-C₆)алкокси, (C₁-C₆)галогеналкокси или галоген. В другом варианте осуществления каждый R₁₀ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₃)алкил, (C₁-C₃)галогеналкил, (C₁-C₆)алкокси или галоген. В другом варианте осуществления каждый R₁₀ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₃)алкил, (C₁-C₃)галогеналкил или галоген. В еще одном варианте осуществления каждый R₁₀ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₃)алкил, (C₁-C₃)галогеналкил или CN. В другом варианте осуществления каждый R₁₀ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₃)алкил или (C₁-C₃)галогеналкил. В еще одном варианте осуществления каждый R₁₀ независимо в каждом случае представляет собой галоген или CN. В другом варианте осуществления каждый R₁₀ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₃)алкил или галоген. В еще одном варианте осуществления каждый R₁₀ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₃)галогеналкил.

В другом варианте осуществления каждый R₁₀ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₆)галогеналкил, галоген, -OH, CN или -NH₂. В другом варианте осуществления каждый R₁₀ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₃)алкил, (C₁-C₃)галогеналкил, галоген или CN. В еще одном варианте осуществления каждый R₁₀ независимо в каждом случае представляет собой галоген, -OH, CN или -NH₂. В другом варианте осуществления каждый R₁₀ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₃)алкил, (C₁-C₃)галогеналкил или галоген. В еще одном варианте осуществления каждый R₁₀ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₃)алкил, (C₁-C₃)галогеналкил или CN. В другом варианте осуществления каждый R₁₀ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₃)алкил или (C₁-C₃)галогеналкил. В еще одном варианте осуществления каждый R₁₀ независимо в каждом случае представляет собой галоген или CN. В другом варианте осуществления каждый R₁₀ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₃)алкил или галоген. В еще одном варианте осуществления каждый R₁₀ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₃)галогеналкил.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул два R₁₀ вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют (C₅-C₇)циклоалкил или 5-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-2 гетероатома, выбранные из O, N и S, необязательно замещенное одним - тремя заместителями, каждый из которых независимо выбран из (C₁-C₆)алкила, (C₁-C₆)галогеналкила, галогена, -OH, CN или -NH₂. В другом варианте осуществления два R₁₀ вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют (C₅-C₇)циклоалкил или 5-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-2 гетероатома, выбранные из O, N и S. В другом варианте осуществления два R₁₀ вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют (C₅-C₇)циклоалкил. В другом варианте осуществления два R₁₀ вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют (C₅-C₆)циклоалкил. В еще одном варианте осуществления два R₁₀ вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют (C₆-C₇)циклоалкил. В другом варианте осуществления два R₁₀ вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют (C₅)циклоалкил. В еще одном варианте осуществления два R₁₀ вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют (C₆)циклоалкил. В другом варианте осуществления два R₁₀ вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют (C₇)циклоалкил.

В другом варианте осуществления два R₁₀ вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют 5-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-2 гетероатома, выбранные из O, N и S. В другом варианте осуществления два R₁₀ вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют 5- или 6-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-2 гетероатома, выбранные из O, N и S. В другом варианте осуществления два R₁₀ вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют 6- или 7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-2 гетероатома, выбранные из O, N и S. В другом варианте осуществления два R₁₀ вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют 5-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-2 гетероатома, выбранные из O, N и S. В другом варианте осуществления два R₁₀ вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют 6-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-2 гетероатома, выбранные из O, N и S. В другом варианте осуществления два R₁₀ вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют 7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-2 гетероатома, выбранные из O, N и S.

В другом варианте осуществления два R₁₀, когда они присоединены к одному и тому же атому углерода, вместе образуют (C₅-C₇)спироциклоалкил или 5-7-членное спирогетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, необязательно замещенное одним - тремя заместителями, каждый из которых независимо выбран из (C₁-C₆)алкила, (C₁-C₆)галогеналкила, галогена, -OH, CN или -NH₂. В другом варианте осуществления два R₁₀, когда они находятся при смежных атомах, образуют (C₅-C₇)циклоалкил или 5-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, необязательно замещенное одним - тремя заместителями, каждый из которых независимо выбран из (C₁-C₆)алкила, (C₁-C₆)галогеналкила, галогена, -OH, CN или -NH₂. В другом варианте осуществления два R₁₀ вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, образуют мостиковый (C₅-C₇)циклоалкил или 5-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, необязательно замещенное одним - тремя заместителями, каждый из которых независимо выбран из (C₁-C₆)алкила, (C₁-C₆)галогеналкила, галогена, -OH, CN или -NH₂.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул каждый R₁₁ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₄)алкил, (C₁-C₄)галогеналкил, галоген, -OH, CN или -NH₂. В другом варианте осуществления каждый R₁₁ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₄)алкил, (C₁-C₄)галогеналкил или галоген. В другом варианте осуществления каждый R₁₁ независимо в каждом случае представляет собой галоген, -OH, CN или -NH₂. В другом варианте осуществления каждый R₁₁ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₄)алкил, (C₁-C₄)галогеналкил, галоген, -OH или -NH₂. В другом варианте осуществления каждый R₁₁ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₄)алкил, галоген, -OH, CN или -NH₂. В другом варианте осуществления каждый R₁₁ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₄)алкил или галоген. В другом варианте осуществления каждый R₁₁ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₄)галогеналкил или галоген. В другом варианте осуществления каждый R₁₁ независимо в каждом случае представляет собой галоген.

В другом варианте осуществления каждый R₁₁ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₄)алкил, (C₁-C₄)галогеналкил, (C₁-C₆)алкокси, (C₁-C₆)галогеналкокси, галоген, -OH, CN или -NH₂. Каждый из R₁₁ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₄)алкил, (C₁-C₄)галогеналкил, (C₁-C₄)алкокси, (C₁-C₄)галогеналкокси, галоген, -OH, CN или -NH₂. В другом варианте осуществления каждый R₁₁ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₄)алкил, (C₁-C₄)галогеналкил, (C₁-C₄)алкокси, (C₁-C₄)галогеналкокси или галоген. В другом варианте осуществления каждый R₁₁ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₄)алкил, (C₁-C₄)галогеналкил или галоген. В другом варианте осуществления каждый R₁₁ независимо в каждом случае представляет собой галоген, -OH, CN или -NH₂. В другом варианте осуществления каждый R₁₁ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₄)алкил, (C₁-C₄)галогеналкил, галоген, -OH или -NH₂. В другом варианте осуществления каждый R₁₁ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₄)алкил, галоген, -OH, CN или -NH₂. В другом варианте осуществления каждый R₁₁ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₄)алкил или галоген. В другом варианте осуществления каждый R₁₁ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₄)галогеналкил или галоген. В другом варианте осуществления каждый R₁₁ независимо в каждом случае представляет собой галоген.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁₂ выбран из (C₁-C₆)алкила и (C₁-C₆)галогеналкила. В другом варианте осуществления R₁₂ выбран из (C₃-C₇)циклоалкила, 4-7-членного гетероциклоалкильного кольца, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, и (C₆-C₁₀)арила. В другом варианте осуществления R₁₂ выбран из (C₃-C₇)циклоалкила, 4-7-членного гетероциклоалкильного кольца, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, и 5- или 6-членного гетероарила, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S. В другом варианте осуществления R₁₂ выбран из (C₃-C₇)циклоалкила, (C₆-C₁₀)арила и 5- или 6-членного гетероарила, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S. В другом варианте осуществления R₁₂ выбран из 4-7-членного гетероциклоалкильного кольца, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, (C₆-C₁₀)арила и 5- или 6-членного гетероарила, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S.

В другом варианте осуществления R₁₂ выбран из (C₃-C₇)циклоалкила и 4-7-членного гетероциклоалкильного кольца, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S. В еще одном варианте осуществления R₁₂ выбран из (C₆-C₁₀)арила и 5- или 6-членного гетероарила, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S. В другом варианте осуществления R₁₂ выбран из (C₃-C₇)циклоалкила и (C₆-C₁₀)арила. В еще одном варианте осуществления R₁₂ выбран из 4-7-членного гетероциклоалкильного кольца, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, и 5- или 6-членного гетероарила, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S. В другом варианте осуществления R₁₂ выбран из (C₃-C₇)циклоалкила и 5- или 6-членного гетероарила, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S. В еще одном варианте осуществления R₁₂ выбран из 4-7-членного гетероциклоалкильного кольца, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, и (C₆-C₁₀)арила. В другом варианте осуществления R₁₂ представляет собой (C₃-C₇)циклоалкил. В еще одном варианте осуществления R₁₂ представляет собой 4-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S. В другом варианте осуществления R₁₂ представляет собой (C₆-C₁₀)арил. В еще одном варианте осуществления R₁₂ представляет собой 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁₃ выбран из (C₁-C₆)алкила и (C₁-C₆)галогеналкила. В другом варианте осуществления R₁₃ выбран из (C₃-C₇)циклоалкила, 4-7-членного гетероциклоалкильного кольца, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, и (C₆-C₁₀)арила. В другом варианте осуществления R₁₃ выбран из (C₃-C₇)циклоалкила, 4-7-членного гетероциклоалкильного кольца, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, и 5- или 6-членного гетероарила, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S. В другом варианте осуществления R₁₃ выбран из (C₃-C₇)циклоалкила, (C₆-C₁₀)арила и 5- или 6-членного гетероарила, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S. В другом варианте осуществления R₁₃ выбран из 4-7-членного гетероциклоалкильного кольца, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, (C₆-C₁₀)арила и 5- или 6-членного гетероарила, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S.

В другом варианте осуществления R₁₃ выбран из (C₃-C₇)циклоалкила и 4-7-членного гетероциклоалкильного кольца, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S. В еще одном варианте осуществления R₁₃ выбран из (C₆-C₁₀)арила и 5- или 6-членного гетероарила, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S. В другом варианте осуществления R₁₃ выбран из (C₃-C₇)циклоалкила и (C₆-C₁₀)арила. В еще одном варианте осуществления R₁₃ выбран из 4-7-членного гетероциклоалкильного кольца, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, и 5- или 6-членного гетероарила, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S. В другом варианте осуществления R₁₃ выбран из (C₃-C₇)циклоалкила и 5- или 6-членного гетероарила, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S. В еще одном варианте осуществления R₁₃ выбран из 4-7-членного гетероциклоалкильного кольца, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, и (C₆-C₁₀)арила. В другом варианте осуществления R₁₃ представляет собой (C₃-C₇)циклоалкил. В еще одном варианте осуществления R₁₃ представляет собой 4-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S. В другом варианте осуществления R₁₃ представляет собой (C₆-C₁₀)арил. В еще одном варианте осуществления R₁₃ представляет собой 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул m равняется 0, 1 или 2. В другом варианте осуществления m равняется 0 или 1. В еще одном варианте осуществления m равняется 1 или 2. В другом варианте осуществления m равняется 0. В еще одном варианте осуществления m равняется 1. В другом варианте осуществления m равняется 2.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул m1 равняется 0, 1 или 2. В другом варианте осуществления m1 равняется 0 или 1. В еще одном варианте осуществления m1 равняется 1 или 2. В другом варианте осуществления m1 равняется 0. В еще одном варианте осуществления m1 равняется 1. В другом варианте осуществления m1 равняется 2.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул n1 равняется 0, 1 или 2. В другом варианте осуществления n1 равняется 1, 2 или 3. В другом варианте осуществления n1 равняется 0 или 1. В другом варианте осуществления n1 равняется 1 или 2. В другом варианте осуществления n1 равняется 2 или 3. В другом варианте осуществления n1 равняется 0. В другом варианте осуществления n1 равняется 1. В другом варианте осуществления n1 равняется 2. В другом варианте осуществления n1 равняется 3.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул n2 равняется 1. В другом варианте осуществления n2 равняется 2.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул n3 равняется 1. В другом варианте осуществления n3 равняется 2.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул n2 равняется 1, и n3 равняется 1. В другом варианте осуществления n2 равняется 2, и n3 равняется 1. В еще одном варианте осуществления n2 равняется 1, и n3 равняется 2. В другом варианте осуществления n2 равняется 1 или 2, и n3 равняется 1. В еще одном варианте осуществления n2 равняется 1 или 2, и n3 равняется 2. В другом варианте осуществления n2 равняется 1, и n3 равняется 1 или 2. В еще одном варианте осуществления n2 равняется 2, и n3 равняется 1 или 2.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул каждый из s и n независимо равняется 1, 2 или 3, где s+n ≤ 4. В другом варианте осуществления каждый из s и n независимо равняется 1 или 2, где s+n ≤ 4. В другом варианте осуществления каждый из s и n независимо равняется 2 или 3, где s+n ≤ 4. В другом варианте осуществления s равняется 1, и n равняется 1. В другом варианте осуществления s равняется 2, и n равняется 2. В другом варианте осуществления s равняется 1, и n равняется 2. В другом варианте осуществления s равняется 2, и n равняется 1. В другом варианте осуществления s равняется 3, и n равняется 1. В другом варианте осуществления s равняется 1, и n равняется 3.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁ представляет собой , и R₂ представляет собой H или метил.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁ представляет собой , и R₅ представляет собой -OR₆.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁ представляет собой , и R₅ представляет собой -NR₇R_7'.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H или метил, и R₅ представляет собой -OR₆.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H или метил, и R₅ представляет собой -NR₇R_7'.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁ представляет собой , и n1 равняется 1 или 2.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁ представляет собой , n1 равняется 1 или 2, и R₂ представляет собой H или метил.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁ представляет собой , n1 равняется 1 или 2, R₂ представляет собой H или метил, и R₅ представляет собой -OR₆.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁ представляет собой , n1 равняется 1 или 2, R₂ представляет собой H или метил, R₅ представляет собой -OR₆, X₁ представляет собой H, и X₂ представляет собой H.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁ представляет собой , n1 равняется 1 или 2, R₂ представляет собой H или метил, R₅ представляет собой -OR₆, и X₁ представляет собой H.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁ представляет собой , n1 равняется 1 или 2, R₂ представляет собой H или метил, R₅ представляет собой -OR₆, и X₂ представляет собой H.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁ представляет собой , n1 равняется 1 или 2, R₂ представляет собой H или метил, и R₅ представляет собой -NR₇R_7'.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁ представляет собой , n1 равняется 1 или 2, R₂ представляет собой H или метил, R₅ представляет собой -NR₇R_7', X₁ представляет собой H, и X₂ представляет собой H.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁ представляет собой , n1 равняется 1 или 2, R₂ представляет собой H или метил, R₅ представляет собой -NR₇R_7', и X₁ представляет собой H.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁ представляет собой , n1 равняется 1 или 2, R₂ представляет собой H или метил, R₅ представляет собой -NR₇R_7', и X₂ представляет собой H.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул n1 равняется 1 или 2, и R₂ представляет собой H или метил.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул n1 равняется 1 или 2, R₂ представляет собой H или метил, и R₅ представляет собой -OR₆.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул n1 равняется 1 или 2, R₂ представляет собой H или метил, и R₅ представляет собой -NR₇R_7'.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул n1 равняется 1 или 2, и R₅ представляет собой -OR₆.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул n1 равняется 1 или 2, и R₅ представляет собой -NR₇R_7'.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁ представляет собой , n1 равняется 1 или 2, и m1 равняется 0.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁ представляет собой , n1 равняется 1 или 2, m1 равняется 0, и R₅ представляет собой -OR₆.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁ представляет собой , n1 равняется 1 или 2, m1 равняется 0, и R₅ представляет собой -NR₇R_7'.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₂ представляет собой H или метил, и R₅ представляет собой -NR₇R_7'.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₂ представляет собой H или метил, и R₅ представляет собой -OR₆.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул m1 равняется 0, и R₅ представляет собой -NR₇R_7'.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул m1 равняется 0, и R₅ представляет собой -OR₆.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁ представляет собой , n1 равняется 1 или 2, m1 равняется 0, и R₂ представляет собой H или метил.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁ представляет собой , n1 равняется 1 или 2, m1 равняется 0, R₂ представляет собой H или метил, и R₅ представляет собой -OR₆.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁ представляет собой , и m1 равняется 0.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁ представляет собой , m1 равняется 0, и R₅ представляет собой -OR₆.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁ представляет собой , m1 равняется 0, и R₅ представляет собой -NR₇R_7'.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁ представляет собой , m1 равняется 0, и R₂ представляет собой H или метил.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁ представляет собой , m1 равняется 0, R₂ представляет собой H или метил, и R₅ представляет собой -OR₆.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁ представляет собой , m1 равняется 0, R₂ представляет собой H или метил, и R₅ представляет собой -NR₇R_7'.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул n1 равняется 1 или 2, и m1 равняется 0.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул n1 равняется 1 или 2, m1 равняется 0, и R₅ представляет собой -OR₆.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул n1 равняется 1 или 2, m1 равняется 0, и R₅ представляет собой -NR₇R_7'.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул n1 равняется 1 или 2, m1 равняется 0, и R₂ представляет собой H или метил.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул n1 равняется 1 или 2, m1 равняется 0, R₂ представляет собой H или метил, и R₅ представляет собой -OR₆.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул n1 равняется 1 или 2, m1 равняется 0, R₂ представляет собой H или метил, и R₅ равняется -NR₇R_7'.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул m1 равняется 0, и R₂ представляет собой H или метил.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул m1 равняется 0, R₂ представляет собой H или метил, и R₅ равняется -OR₆.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул m1 равняется 0, R₂ представляет собой H или метил, и R₅ представляет собой -NR₇R_7'.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁ представляет собой , n1 равняется 1 или 2, и m1 равняется 2.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁ представляет собой , n1 равняется 1 или 2, m1 равняется 2, и R₅ представляет собой -OR₆.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁ представляет собой , n1 равняется 1 или 2, m1 равняется 2, и R₅ представляет собой -NR₇R_7'.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁ представляет собой , и m1 равняется 2.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁ представляет собой , m1 равняется 2, и R₅ представляет собой -OR₆.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁ представляет собой , m1 равняется 2, и R₅ представляет собой -NR₇R_7'.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул n1 равняется 1 или 2, и m1 равняется 2.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул n1 равняется 1 или 2, m1 равняется 2, и R₅ представляет собой -OR₆.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул n1 равняется 1 или 2, m1 равняется 2, и R₅ представляет собой -NR₇R_7'.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул m1 равняется 2, и R₅ представляет собой -OR₆.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул m1 равняется 2, и R₅ представляет собой -NR₇R_7'.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁ представляет собой , n равняется 2, и s равняется 1 или 2.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁ представляет собой , n равняется 2, s равняется 1 или 2, и m равняется 0 или 1.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁ представляет собой , n равняется 2, s равняется 1 или 2, m равняется 0 или 1, и R₂ представляет собой H или метил.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁ представляет собой , n равняется 2, s равняется 1 или 2, m равняется 0 или 1, R₂ представляет собой H или метил, и R₅ представляет собой -OR₆.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁ представляет собой , n равняется 2, s равняется 1 или 2, m равняется 0 или 1, и R₅ представляет собой -OR₆.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁ представляет собой , n равняется 2, s равняется 1 или 2, m равняется 0 или 1, и R₅ представляет собой -NR₇R_7'.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁ представляет собой , и m равняется 0 или 1.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁ представляет собой , m равняется 0 или 1, и R₂ представляет собой H или метил.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁ представляет собой , m равняется 0 или 1, R₂ представляет собой H или метил, и R₅ представляет собой -OR₆.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁ представляет собой , m равняется 0 или 1, R₂ представляет собой H или метил, и R₅ представляет собой -NR₇R_7'.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁ представляет собой , m равняется 0 или 1, и R₅ представляет собой -OR₆.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁ представляет собой , m равняется 0 или 1, и R₅ представляет собой -NR₇R_7'.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул n равняется 2, s равняется 1 или 2, и m равняется 0 или 1.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул n равняется 2, s равняется 1 или 2, m равняется 0 или 1, и R₂ представляет собой H или метил.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул n равняется 2, s равняется 1 или 2, m равняется 0 или 1, и R₅ представляет собой -OR₆.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул n равняется 2, s равняется 1 или 2, m равняется 0 или 1, и R₅ представляет собой -NR₇R_7'.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул n равняется 2, s равняется 1 или 2, m равняется 0 или 1, R₂ представляет собой H или метил, и R₅ представляет собой -OR₆.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул n равняется 2, s равняется 1 или 2, m равняется 0 или 1, R₂ представляет собой H или метил, и R₅ представляет собой -NR₇R_7'.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул n равняется 2, s равняется 1 или 2, и R₂ представляет собой H или метил.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул n равняется 2, s равняется 1 или 2, и R₅ представляет собой -OR₆.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул n равняется 2, s равняется 1 или 2, и R₅ представляет собой -NR₇R_7'.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул n равняется 2, s равняется 1 или 2, R₂ представляет собой H или метил, и R₅ представляет собой -OR₆.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул n равняется 2, s равняется 1 или 2, R₂ представляет собой H или метил, и R₅ представляет собой -NR₇R_7'.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул m равняется 0 или 1, и R₂ представляет собой H или метил.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул m равняется 0 или 1, R₂ представляет собой H или метил, и R₅ представляет собой -OR₆.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул m равняется 0 или 1, R₂ представляет собой H или метил, и R₅ представляет собой -NR₇R_7'.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул m равняется 0 или 1, и R₅ представляет собой -OR₆.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул m равняется 0 или 1, и R₅ представляет собой -NR₇R_7'.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁ представляет собой , и R₂ представляет собой H. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H, и m1 равняется 0. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H, m1 равняется 0, и R₅ представляет собой -OR₆. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H, m1 равняется 0, R₅ представляет собой -OR₆, и R₆ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя заместителями, каждый из которых независимо выбран из (C₆-C₁₀)арила и 5- или 6-членного гетероарила, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H, m1 равняется 0, R₅ представляет собой -OR₆, и R₆ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя (C₆-C₁₀)арилами. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H, m1 равняется 0, R₅ представляет собой -OR₆, R₆ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя заместителями, каждый из которых независимо выбран из (C₆-C₁₀)арила и 5- или 6-членного гетероарила, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, и n1 равняется 1 или 2. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H, m1 равняется 0, R₅ представляет собой -OR₆, R₆ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя (C₆-C₁₀)арилами, и n1 равняется 1 или 2. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H, m1 равняется 0, R₅ представляет собой -OR₆, R₆ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя (C₆-C₁₀)арилами, и n1 равняется 1. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H, m1 равняется 0, R₅ представляет собой -OR₆, R₆ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя (C₆-C₁₀)арилами, и n1 равняется 2.

В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H, m1 равняется 0, и R₅ представляет собой -NR₇R_7'. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H, m1 равняется 0, R₅ представляет собой -NR₇R_7', и R₇ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H, m1 равняется 0, R₅ представляет собой -NR₇R_7', R₇ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈, и R_7' представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H, m1 равняется 0, R₅ представляет собой -NR₇R_7', R₇ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈, R_7' представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈, и R₈ представляет собой (C₆-C₁₀)арил, необязательно замещенный одним или двумя R₁₀.

В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H, m1 равняется 0, R₅ представляет собой -NR₇R_7', R₇ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈, R_7' представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈, R₈ представляет собой (C₆-C₁₀)арил, необязательно замещенный одним или двумя R₁₀, и n1 равняется 1 или 2. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H, m1 равняется 0, R₅ представляет собой -NR₇R_7', R₇ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈, R_7' представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈, R₈ представляет собой (C₆-C₁₀)арил, необязательно замещенный одним или двумя R₁₀, и n1 равняется 1. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H, m1 равняется 0, R₅ представляет собой -NR₇R_7', R₇ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈, R_7' представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈, R₈ представляет собой (C₆-C₁₀)арил, необязательно замещенный одним или двумя R₁₀, и n1 равняется 2.

В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H, m1 равняется 0, R₅ представляет собой -NR₇R_7', R₇ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈, R_7' представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈, и R₈ представляет собой (C₆-C₁₀)арил. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H, m1 равняется 0, R₅ представляет собой -NR₇R_7', R₇ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈, R_7' представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈, R₈ представляет собой (C₆-C₁₀)арил, и n1 равняется 1 или 2. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H, m1 равняется 0, R₅ представляет собой -NR₇R_7', R₇ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈, R_7' представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈, R₈ представляет собой (C₆-C₁₀)арил, и n1 равняется 1. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H, m1 равняется 0, R₅ представляет собой -NR₇R_7', R₇ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈, R_7' представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈, R₈ представляет собой (C₆-C₁₀)арил, и n1 равняется 2.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁ представляет собой , и R₂ представляет собой метил. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой метил, и m1 равняется 0. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой метил, m1 равняется 0, и R₅ представляет собой -OR₆. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой метил, m1 равняется 0, R₅ представляет собой -OR₆, и R₆ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя заместителями, каждый из которых независимо выбран из (C₆-C₁₀)арила и 5- или 6-членного гетероарила, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой метил, m1 равняется 0, R₅ представляет собой -OR₆, R₆ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя заместителями, каждый из которых независимо выбран из (C₆-C₁₀)арила и 5- или 6-членного гетероарила, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, и n1 равняется 1 или 2. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой метил, m1 равняется 0, R₅ представляет собой -OR₆, R₆ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя заместителями, каждый из которых независимо выбран из (C₆-C₁₀)арила и 5- или 6-членного гетероарила, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, и n1 равняется 1. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой метил, m1 равняется 0, R₅ представляет собой -OR₆, R₆ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя заместителями, каждый из которых независимо выбран из (C₆-C₁₀)арила и 5- или 6-членного гетероарила, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, и n1 равняется 2.

В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой метил, m1 равняется 0, R₅ представляет собой -OR₆, и R₆ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя (C₆-C₁₀)арилами. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой метил, m1 равняется 0, R₅ представляет собой -OR₆, R₆ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя (C₆-C₁₀)арилами, и n1 равняется 1 или 2. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой метил, m1 равняется 0, R₅ представляет собой -OR₆, R₆ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя (C₆-C₁₀)арилами, и n1 равняется 1. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой метил, m1 равняется 0, R₅ представляет собой -OR₆, R₆ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя (C₆-C₁₀)арилами, и n1 равняется 2.

В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой метил, m1 равняется 0, и R₅ представляет собой -NR₇R_7'. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой метил, m1 равняется 0, R₅ представляет собой -NR₇R_7', и R₇ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой метил, m1 равняется 0, R₅ представляет собой -NR₇R_7', R₇ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈, и R_7' представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой метил, m1 равняется 0, R₅ представляет собой -NR₇R_7', R₇ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈, R_7' представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈, и R₈ представляет собой (C₆-C₁₀)арил, необязательно замещенный одним или двумя R₁₀. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой метил, m1 равняется 0, R₅ представляет собой -NR₇R_7', R₇ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈, R_7' представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈, R₈ представляет собой (C₆-C₁₀)арил, необязательно замещенный одним или двумя R₁₀, и n1 равняется 1 или 2. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой метил, m1 равняется 0, R₅ представляет собой -NR₇R_7', R₇ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈, R_7' представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈, R₈ представляет собой (C₆-C₁₀)арил, необязательно замещенный одним или двумя R₁₀, и n1 равняется 1. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой метил, m1 равняется 0, R₅ представляет собой -NR₇R_7', R₇ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈, R_7' представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈, R₈ представляет собой (C₆-C₁₀)арил, необязательно замещенный одним или двумя R₁₀, и n1 равняется 2.

В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой метил, m1 равняется 0, R₅ представляет собой -NR₇R_7', R₇ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈, R_7' представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈, и R₈ представляет собой (C₆-C₁₀)арил. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой метил, m1 равняется 0, R₅ представляет собой -NR₇R_7', R₇ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈, R_7' представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈, R₈ представляет собой (C₆-C₁₀)арил, и n1 равняется 1 или 2. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой метил, m1 равняется 0, R₅ представляет собой -NR₇R_7', R₇ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈, R_7' представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈, R₈ представляет собой (C₆-C₁₀)арил, и n1 равняется 1. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой метил, m1 равняется 0, R₅ представляет собой -NR₇R_7', R₇ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈, R_7' представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈, R₈ представляет собой (C₆-C₁₀)арил, и n1 равняется 2.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H или метил, и m1 равняется 0. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H или метил, m1 равняется 0, и R₅ представляет собой -OR₆. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H или метил, m1 равняется 0, R₅ представляет собой -OR₆, и R₆ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя заместителями, каждый из которых независимо выбран из (C₆-C₁₀)арила и 5- или 6-членного гетероарила, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H или метил, m1 равняется 0, R₅ представляет собой -OR₆, и R₆ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя (C₆-C₁₀)арилами. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H или метил, m1 равняется 0, R₅ представляет собой -OR₆, R₆ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя (C₆-C₁₀)арилами, и n1 равняется 1 или 2. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H или метил, m1 равняется 0, R₅ представляет собой -OR₆, R₆ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя (C₆-C₁₀)арилами, и n1 равняется 1. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H или метил, m1 равняется 0, R₅ представляет собой -OR₆, R₆ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя (C₆-C₁₀)арилами, и n1 равняется 2.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H или метил, m1 равняется 0, и R₅ представляет собой -NR₇R_7'. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H или метил, m1 равняется 0, R₅ представляет собой -NR₇R_7', и R₇ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H или метил, m1 равняется 0, R₅ представляет собой -NR₇R_7', R₇ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈, и R_7' представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H или метил, m1 равняется 0, R₅ представляет собой -NR₇R_7', R₇ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈, и R₈ представляет собой (C₆-C₁₀)арил, необязательно замещенный одним или двумя R₁₀.

В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H или метил, m1 равняется 0, R₅ представляет собой -NR₇R_7', R₇ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈, R₈ представляет собой (C₆-C₁₀)арил, необязательно замещенный одним или двумя R₁₀, и n1 равняется 1 или 2. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H или метил, m1 равняется 0, R₅ представляет собой -NR₇R_7', R₇ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈, R₈ представляет собой (C₆-C₁₀)арил, необязательно замещенный одним или двумя R₁₀, и n1 равняется 1. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H или метил, m1 равняется 0, R₅ представляет собой -NR₇R_7', R₇ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈, R₈ представляет собой (C₆-C₁₀)арил, необязательно замещенный одним или двумя R₁₀, и n1 равняется 2.

В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H или метил, m1 равняется 0, R₅ представляет собой -NR₇R_7', R₇ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈, R_7' представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈, R₈ представляет собой (C₆-C₁₀)арил, и n1 равняется 1 или 2. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H или метил, m1 равняется 0, R₅ представляет собой -NR₇R_7', R₇ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈, R_7' представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈, R₈ представляет собой (C₆-C₁₀)арил, и n1 равняется 1. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H или метил, m1 равняется 0, R₅ представляет собой -NR₇R_7', R₇ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈, R_7' представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈, R₈ представляет собой (C₆-C₁₀)арил, и n1 равняется 2.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H или метил, m равняется 0, n равняется 1, и s равняется 1. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H или метил, m равняется 0, n равняется 1, s равняется 1, и R₅ представляет собой -OR₆. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H или метил, m равняется 0, n равняется 1, s равняется 1, R₅ представляет собой -OR₆, и R₆ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя (C₆-C₁₀)арилами.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H или метил, m равняется 0, n равняется 1, s равняется 1, и R₅ представляет собой -NR₇R_7'. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H или метил, m равняется 0, n равняется 1, s равняется 1, R₅ представляет собой -NR₇R_7', и R₇ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H или метил, m равняется 0, n равняется 1, s равняется 1, R₅ представляет собой -NR₇R_7', R₇ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈, и R_7' представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H или метил, m равняется 0, n равняется 1, s равняется 1, R₅ представляет собой -NR₇R_7', R₇ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈, R_7' представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈, и R₈ представляет собой (C₆-C₁₀)арил.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H или метил, m равняется 0, n равняется 2, и s равняется 1. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H или метил, m равняется 0, n равняется 2, s равняется 1, и R₅ представляет собой -OR₆. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H или метил, m равняется 0, n равняется 2, s равняется 1, R₅ представляет собой -OR₆, и R₆ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя (C₆-C₁₀)арилами.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H или метил, m равняется 0, n равняется 2, s равняется 1, и R₅ представляет собой -NR₇R_7'. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H или метил, m равняется 0, n равняется 2, s равняется 1, R₅ представляет собой -NR₇R_7', и R₇ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H или метил, m равняется 0, n равняется 2, s равняется 1, R₅ представляет собой -NR₇R_7', R₇ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈, и R_7' представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H или метил, m равняется 0, n равняется 2, s равняется 1, R₅ представляет собой -NR₇R_7', R₇ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈, R_7' представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈, и R₈ представляет собой (C₆-C₁₀)арил.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H или метил, m равняется 0, n равняется 2, и s равняется 2. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H или метил, m равняется 0, n равняется 2, s равняется 2, и R₅ представляет собой -OR₆. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H или метил, m равняется 0, n равняется 2, s равняется 2, R₅ представляет собой -OR₆, и R₆ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя (C₆-C₁₀)арилами.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H или метил, m равняется 0, n равняется 2, s равняется 2, и R₅ представляет собой -NR₇R_7'. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H или метил, m равняется 0, n равняется 2, s равняется 2, R₅ представляет собой -NR₇R_7', и R₇ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H или метил, m равняется 0, n равняется 2, s равняется 2, R₅ представляет собой -NR₇R_7', R₇ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈, и R_7' представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H или метил, m равняется 0, n равняется 2, s равняется 2, R₅ представляет собой -NR₇R_7', R₇ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈, R_7' представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈, и R₈ представляет собой (C₆-C₁₀)арил.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H или метил, m равняется 0, n равняется 2, s равняется 1 или 2, и R₅ представляет собой -NR₇R_7'. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H или метил, m равняется 0, n равняется 2, s равняется 1 или 2, R₅ представляет собой -NR₇R_7', и R₇ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H или метил, m равняется 0, n равняется 2, s равняется 1 или 2, R₅ представляет собой -NR₇R_7', R₇ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈, и R_7' представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H или метил, m равняется 0, n равняется 2, s равняется 1 или 2, R₅ представляет собой -NR₇R_7', R₇ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈, R_7' представляет собой H или (C₁-C₆)алкил, необязательно замещенный одним - тремя R₈, и R₈ представляет собой (C₆-C₁₀)арил.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше формул R₁ представляет собой , и R₂ представляет собой H или (C₁-C₃)алкил. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H или (C₁-C₃)алкил, и m1 равняется 0. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H или (C₁-C₃)алкил, m1 равняется 0, и R₅ представляет собой -NR₇R_7'. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H или (C₁-C₃)алкил, m1 равняется 0, и R₅ представляет собой -OR₆.

В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H, m1 равняется 0, R₅ представляет собой -NR₇R_7', R₇ и R_7' вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 4-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, необязательно содержащее 1-2 дополнительных гетероатома, выбранные из O, N и S, необязательно замещенное одним - четырьмя R₉, и n1 равняется 1 или 2. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H, m1 равняется 0, R₅ представляет собой -NR₇R_7', R₇ и R_7' вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 4-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, необязательно содержащее 1-2 дополнительных гетероатома, выбранные из O, N и S, необязательно замещенное одним - четырьмя R₉, и n1 равняется 1. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой , R₂ представляет собой H, m1 равняется 0, R₅ представляет собой -NR₇R_7', R₇ и R_7' вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 4-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, необязательно содержащее 1-2 дополнительных гетероатома, выбранные из O, N и S, необязательно замещенное одним - четырьмя R₉, и n1 равняется 2.

Вариант осуществления 1. Соединение формулы (I'), где

каждый из X₁ и X₂ независимо представляет собой H, (C₁-C₄)алкил, (C₁-C₆)алкокси, (C₁-C₄)галогеналкил,

(C₁-C₆)галогеналкокси, (C₃-C₇)циклоалкил, галоген, CN, -OH или -NH₂;

R_x представляет собой H или D;

R₁ представляет собой , или ;

R₂ представляет собой H, (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₆)галогеналкил или (C₃-C₆)циклоалкил; или

каждый R₃ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₆)алкокси,

(C₁-C₆)галогеналкил, (C₁-C₆)галогеналкокси, галоген, CN, -OH или -NH₂; или

-NH₂;

R₅ представляет собой -OR₆ или -NR₇R_7';

каждый R₁₀ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₆)галогеналкил, (C₁-C₆)алкокси,

(C₁-C₆)галогеналкокси, галоген, -OH, CN или -NH₂; или

каждый R₁₁ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₆)галогеналкил, (C₁-C₆)алкокси,

(C₁-C₆)галогеналкокси, галоген, -OH, CN или -NH₂;

каждый из m и m1 независимо равняется 0, 1 или 2;

n1 равняется 0, 1, 2 или 3;

каждый из n2 и n3 независимо равняется 1 или 2; и

каждый из s и n независимо равняется 1, 2 или 3, где s+n ≤ 4;

или его фармацевтически приемлемые соли, гидраты, сольваты, пролекарства на его основе, его стереоизомеры и таутомеры.

Вариант осуществления 2. Соединение согласно варианту осуществления 1, характеризующееся формулой (I), где:

R_x представляет собой H или D;

R₁ представляет собой или ;

R₂ представляет собой H, (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₆)галогеналкил или (C₃-C₆)циклоалкил; или

каждый R₃ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₆)алкокси, (C₁-C₆)галогеналкил,

(C₁-C₆)галогеналкокси, галоген, CN, -OH или -NH₂; или

-NH₂;

R₅ представляет собой -OR₆ или -NR₇R_7';

(C₆-C₁₀)арил или 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из O, N и S, при этом алкил необязательно замещен одним - тремя R₈; или

каждый R₉ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₆)галогеналкил, галоген, -OH, CN или

-NH₂; или

каждый из m и m1 независимо равняется 0, 1 или 2;

n1 равняется 0, 1, 2 или 3; и

каждый из s и n независимо равняется 1, 2 или 3, где s+n ≤ 4;

Вариант осуществления 3. Соединение согласно варианту осуществления 1 или 2, где R₁ представляет собой .

Вариант осуществления 4. Соединение согласно любому из вариантов осуществления 1-3, где n1 равняется 1 или 2.

Вариант осуществления 5. Соединение согласно любому из вариантов осуществления 1-4, где m1 равняется 0.

Вариант осуществления 6. Соединение согласно любому из вариантов осуществления 1-5, где m1 равняется 2.

Вариант осуществления 7. Соединение согласно варианту осуществления 1, где R₁ представляет собой .

Вариант осуществления 8. Соединение согласно варианту осуществления 7, где n равняется 2, и s равняется 1 или 2.

Вариант осуществления 9. Соединение согласно варианту осуществления 7 или 8, где m равняется 0 или 1.

Вариант осуществления 10. Соединение согласно варианту осуществления 1 или 2, характеризующееся формулой (Ia), формулой (Ib), формулой (Ia-1) или формулой (Ib-1); или его фармацевтически приемлемые соли, гидраты, сольваты, пролекарства на его основе, его стереоизомеры и таутомеры.

Вариант осуществления 11. Соединение согласно варианту осуществления 1 или 2, характеризующееся формулой (Ic), формулой (Id), формулой (Ie), формулой (If), формулой (Ig), формулой (Ih), формулой (Ii), формулой (Ij), формулой (Ic-1), формулой (Id-1), формулой (Ie-1), формулой (If-1), формулой (Ig-1), формулой (Ih-1), формулой (Ii-1) или формулой (Ij-1); или его фармацевтически приемлемые соли, гидраты, сольваты, пролекарства на его основе, его стереоизомеры и таутомеры.

Вариант осуществления 12. Соединение согласно варианту осуществления 1 или 2, характеризующееся формулой (Ik), формулой (Il), формулой (Im), формулой (In), формулой (Io), формулой (Ip), формулой (Ik-1), формулой (Il-1), формулой (Im-1), формулой (In-1), формулой (Io-1) или формулой (Ip-1), или его фармацевтически приемлемые соли, гидраты, сольваты, пролекарства на его основе, его стереоизомеры и таутомеры.

Вариант осуществления 13. Соединение согласно любому из вариантов осуществления 1-12, где R₅ представляет собой -OR₆.

Вариант осуществления 14. Соединение согласно любому из вариантов осуществления 1-12, где R₅ представляет собой -NR₇R_7'.

Вариант осуществления 15. Соединение согласно варианту осуществления 1 или 2, характеризующееся формулой (Iq), формулой (Ir), формулой (Is), формулой (It), формулой (Iq-1), формулой (Ir-1), формулой (Is-1) или формулы (It-1); или его фармацевтически приемлемые соли, гидраты, сольваты, пролекарства на его основе, его стереоизомеры и таутомеры.

Вариант осуществления 16. Соединение согласно любому из вариантов осуществления 1-15, где R₂представляет собой H или метил.

Вариант осуществления 17. Соединение согласно варианту осуществления 1, выбранное из следующих соединений:

№ соед. Структура соединения Название соединения I-1 3-(5-(((1S,2S)-2-гидроксициклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-5 3-(5-(((1R,2S)-2-гидроксициклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-18 3-(5-(((1S,2R)-2-гидроксициклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-19 3-(5-(((1R,2R)-2-гидроксициклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-20 3-(5-((2-гидроксициклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-2 3-(5-(метил((1R,2R)-2-(метиламино)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-21 3-(5-(метил((1S,2R)-2-(метиламино)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-22 3-(5-(метил((1R,2S)-2-(метиламино)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-8 3-(5-(метил((1S,2S)-2-(метиламино)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-23 3-(5-(метил(2-(метиламино)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-3 3-(5-(((1S,2S)-2-(бензиламино)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-24 3-(5-(((1R,2S)-2-(бензиламино)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-25 3-(5-(((1S,2R)-2-(бензиламино)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-26 3-(5-(((1R,2R)-2-(бензиламино)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-27 3-(5-((2-(бензиламино)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-4 3-(5-(((1S,2S)-2-(бензилокси)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-28 3-(5-(((1R,2S)-2-(бензилокси)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-29 3-(5-(((1S,2R)-2-(бензилокси)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-30 3-(5-(((1R,2R)-2-(бензилокси)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-31 3-(5-((2-(бензилокси)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-6 3-(5-(((1S,2S)-2-(бензил(метил)амино)циклогексил)(метил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-32 3-(5-(((1R,2S)-2-(бензил(метил)амино)циклогексил)(метил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-33 3-(5-(((1S,2R)-2-(бензил(метил)амино)циклогексил)(метил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-34 3-(5-(((1R,2R)-2-(бензил(метил)амино)циклогексил)(метил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-35 3-(5-((2-(бензил(метил)амино)циклогексил)(метил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-7 3-(5-(((1S,2S)-2-аминоциклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-36 3-(5-(((1R,2S)-2-аминоциклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-37 3-(5-(((1S,2R)-2-аминоциклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-38 3-(5-(((1R,2R)-2-аминоциклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-39 3-(5-((2-аминоциклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-40 3-(5-(((1S,2S)-2-(этиламино)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-41 3-(5-(((1S,2R)-2-(этиламино)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-42 3-(5-(((1R,2R)-2-(этиламино)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-43 3-(5-(((1R,2S)-2-(этиламино)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-44 3-(5-((2-(этиламино)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-45 3-(5-(((1S,2S)-2-(изопропиламино)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-46 3-(5-(((1S,2R)-2-(изопропиламино)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-47 3-(5-(((1R,2R)-2-(изопропиламино)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-48 3-(5-(((1R,2S)-2-(изопропиламино)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-49 3-(5-((2-(изопропиламино)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-50 3-(5-((4aS,8aS)-октагидрохиноксалин-1(2H)-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-51 3-(5-((4aR,8aS)-октагидрохиноксалин-1(2H)-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-52 3-(5-((4aR,8aR)-октагидрохиноксалин-1(2H)-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-53 3-(5-((4aS,8aR)-октагидрохиноксалин-1(2H)-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-54 3-(5-(октагидрохиноксалин-1(2H)-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-55 3-(5-(этил((1S,2S)-2-(этиламино)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-56 3-(5-(этил((1S,2R)-2-(этиламино)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-57 3-(5-(этил((1R,2R)-2-(этиламино)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-58 3-(5-(этил((1R,2S)-2-(этиламино)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-59 3-(5-(этил(2-(этиламино)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-60 3-(5-(((1S,2S)-2-(этиламино)циклопентил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-61 3-(5-(((1S,2R)-2-(этиламино)циклопентил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-62 3-(5-(((1R,2R)-2-(этиламино)циклопентил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-63 3-(5-(((1R,2S)-2-(этиламино)циклопентил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-64 3-(5-((2-(этиламино)циклопентил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-65 3-(5-(метил((1S,2S)-2-(метиламино)циклопентил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-66 3-(5-(метил((1S,2R)-2-(метиламино)циклопентил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-67 3-(5-(метил((1R,2R)-2-(метиламино)циклопентил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-68 3-(5-(метил((1R,2S)-2-(метиламино)циклопентил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-69 3-(5-(метил(2-(метиламино)циклопентил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-70 3-(5-(этил((1S,2S)-2-(этиламино)циклопентил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-71 3-(5-(этил((1S,2R)-2-(этиламино)циклопентил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-72 3-(5-(этил((1R,2R)-2-(этиламино)циклопентил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-73 3-(5-(этил((1R,2S)-2-(этиламино)циклопентил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-74 3-(5-(этил(2-(этиламино)циклопентил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-11 3-(5-(((1S,2S)-2-(бензил(метил)амино)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-10 3-(5-(((1S,2S)-2-(метиламино)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-75 3-(5-(((1S,2R)-2-(метиламино)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-76 3-(5-(((1R,2R)-2-(метиламино)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-77 3-(5-(((1R,2S)-2-(метиламино)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-78 3-(5-((2-(метиламино)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-12 3-(5-(((1S,2S)-2-((циклогексилметил)амино)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-79 3-(5-(((1S,2R)-2-((циклогексилметил)амино)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-80 3-(5-(((1R,2R)-2-((циклогексилметил)амино)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-81 3-(5-(((1R,2S)-2-((циклогексилметил)амино)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-82 3-(5-((2-((циклогексилметил)амино)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-14 3-(1-оксо-5-(((1S,2S)-2-(пиперидин-1-ил)циклопентил)амино)изоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-83 3-(1-оксо-5-(((1S,2R)-2-(пиперидин-1-ил)циклопентил)амино)изоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-84 3-(1-оксо-5-(((1R,2R)-2-(пиперидин-1-ил)циклопентил)амино)изоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-85 3-(1-оксо-5-(((1R,2S)-2-(пиперидин-1-ил)циклопентил)амино)изоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-86 3-(1-оксо-5-((2-(пиперидин-1-ил)циклопентил)амино)изоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-15 3-(5-(((1S,2S)-2-(изобутиламино)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-87 3-(5-(((1S,2R)-2-(изобутиламино)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-88 3-(5-(((1R,2R)-2-(изобутиламино)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-89 3-(5-(((1R,2S)-2-(изобутиламино)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-90 3-(5-((2-(изобутиламино)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-16 3-(5-(метил((1S,6S)-6-(метиламино)циклогекс-3-ен-1-ил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-91 3-(5-(метил((1S,6R)-6-(метиламино)циклогекс-3-ен-1-ил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-17 3-(5-(метил((1R,6R)-6-(метиламино)циклогекс-3-ен-1-ил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-92 3-(5-(метил((1R,6S)-6-(метиламино)циклогекс-3-ен-1-ил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-93 3-(5-(метил(6-(метиламино)циклогекс-3-ен-1-ил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-94 5-(((1R,2R)-2-(диметиламино)циклогексил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-дион; I-95 5-(((1R,2S)-2-(диметиламино)циклогексил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-дион; I-96 5-(((1S,2S)-2-(диметиламино)циклогексил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-дион; I-97 5-(((1S,2R)-2-(диметиламино)циклогексил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-дион; I-98 5-((2-(диметиламино)циклогексил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-дион; I-99 5-(((1S,2S)-2-аминоциклогексил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-дион; I-100 5-(((1S,2R)-2-аминоциклогексил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-дион; I-101 5-(((1R,2R)-2-аминоциклогексил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-дион; I-102 5-(((1R,2S)-2-аминоциклогексил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-дион; I-103 5-((2-аминоциклогексил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-дион; I-104 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(((1S,2S)-2-(этиламино)циклогексил)(метил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-105 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(((1S,2R)-2-(этиламино)циклогексил)(метил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-106 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(((1R,2R)-2-(этиламино)циклогексил)(метил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-107 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(((1R,2S)-2-(этиламино)циклогексил)(метил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-108 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-((2-(этиламино)циклогексил)(метил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-109 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил((1S,2S)-2-(метиламино)циклогептил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-110 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил((1S,2R)-2-(метиламино)циклогептил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-111 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил((1R,2R)-2-(метиламино)циклогептил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-112 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил((1R,2S)-2-(метиламино)циклогептил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-113 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил(2-(метиламино)циклогептил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-114 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил((1S,2S)-2-(метиламино)циклогексил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-115 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил((1S,2R)-2-(метиламино)циклогексил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-116 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил((1R,2R)-2-(метиламино)циклогексил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-117 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил((1R,2S)-2-(метиламино)циклогексил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-118 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил(2-(метиламино)циклогексил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-119 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил((1S,6S)-6-(метиламино)циклогекс-3-ен-1-ил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-120 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил((1S,6R)-6-(метиламино)циклогекс-3-ен-1-ил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-121 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил((1R,6R)-6-(метиламино)циклогекс-3-ен-1-ил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-122 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил((1R,6S)-6-(метиламино)циклогекс-3-ен-1-ил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-123 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил(6-(метиламино)циклогекс-3-ен-1-ил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-13 3-(5-(((1S,2S)-2-аминоциклопентил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-124 3-(5-(((1S,2R)-2-аминоциклопентил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-125 3-(5-(((1R,2R)-2-аминоциклопентил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-126 3-(5-(((1R,2S)-2-аминоциклопентил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-127 3-(5-((2-аминоциклопентил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-128 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил((1S,2S)-2-(метиламино)циклопентил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-129 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил((1S,2R)-2-(метиламино)циклопентил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-130 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил((1R,2R)-2-(метиламино)циклопентил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-131 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил((1R,2S)-2-(метиламино)циклопентил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-132 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил(2-(метиламино)циклопентил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-133 5-(((1S,2S)-2-(бензиламино)циклогексил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-дион; I-134 5-(((1S,2R)-2-(бензиламино)циклогексил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-дион; I-135 5-(((1R,2R)-2-(бензиламино)циклогексил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-дион; I-136 5-(((1R,2S)-2-(бензиламино)циклогексил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-дион; I-137 5-((2-(бензиламино)циклогексил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-дион; I-138 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил((1S,2S)-2-(((1-(трифторметил)циклопропил)метил)амино)циклогексил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-139 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил((1S,2R)-2-(((1-(трифторметил)циклопропил)метил)амино)циклогексил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-140 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил((1R,2R)-2-(((1-(трифторметил)циклопропил)метил)амино)циклогексил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-141 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил((1R,2S)-2-(((1-(трифторметил)циклопропил)метил)амино)циклогексил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-142 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил(2-(((1-(трифторметил)циклопропил)метил)амино)циклогексил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-143 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил((1S,2S)-2-((пиридин-3-илметил)амино)циклогексил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-144 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил((1S,2R)-2-((пиридин-3-илметил)амино)циклогексил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-145 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил((1R,2R)-2-((пиридин-3-илметил)амино)циклогексил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-146 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил((1R,2S)-2-((пиридин-3-илметил)амино)циклогексил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-147 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил(2-((пиридин-3-илметил)амино)циклогексил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-148 ((1S,2S)-2-((2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-1,3-диоксоизоиндолин-5-ил)(метил)амино)циклогексил)глицин; I-149 ((1R,2S)-2-((2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-1,3-диоксоизоиндолин-5-ил)(метил)амино)циклогексил)глицин; I-150 ((1R,2R)-2-((2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-1,3-диоксоизоиндолин-5-ил)(метил)амино)циклогексил)глицин; I-151 ((1S,2R)-2-((2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-1,3-диоксоизоиндолин-5-ил)(метил)амино)циклогексил)глицин; I-152 (2-((2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-1,3-диоксоизоиндолин-5-ил)(метил)амино)циклогексил)глицин; I-153 5-(((1S,2S)-2-(диметиламино)циклогексил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-дион; I-154 5-(((1S,2R)-2-(диметиламино)циклогексил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-дион; I-155 5-(((1R,2R)-2-(диметиламино)циклогексил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-дион; I-156 5-(((1R,2S)-2-(диметиламино)циклогексил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-дион; I-157 5-((2-(диметиламино)циклогексил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-дион; I-158 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил(3-(метиламино)бицикло[2.2.1]гепт-5-ен-2-ил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-159 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил((2S,3S)-3-(метиламино)бицикло[2.2.1]гепт-5-ен-2-ил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-160 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил((2S,3R)-3-(метиламино)бицикло[2.2.1]гепт-5-ен-2-ил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-161 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил((2R,3R)-3-(метиламино)бицикло[2.2.1]гепт-5-ен-2-ил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-162 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил((2R,3S)-3-(метиламино)бицикло[2.2.1]гепт-5-ен-2-ил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-163 3-(4-фтор-5-(метил((1S,2S)-2-(метиламино)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-164 3-(4-фтор-5-(метил((1S,2R)-2-(метиламино)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-165 3-(4-фтор-5-(метил((1R,2R)-2-(метиламино)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-166 3-(4-фтор-5-(метил((1R,2S)-2-(метиламино)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-167 3-(4-фтор-5-(метил(2-(метиламино)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-168 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-фтор-6-(метил((1S,2S)-2-(метиламино)циклогексил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-169 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-фтор-6-(метил((1S,2R)-2-(метиламино)циклогексил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-170 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-фтор-6-(метил((1R,2R)-2-(метиламино)циклогексил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-171 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-фтор-6-(метил((1R,2S)-2-(метиламино)циклогексил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-172 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-фтор-6-(метил(2-(метиламино)циклогексил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-173 3-(5-(((1S,2S)-2-(3-этоксиазетидин-1-ил)циклогексил)(метил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-174 3-(5-(((1S,2R)-2-(3-этоксиазетидин-1-ил)циклогексил)(метил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-175 3-(5-(((1R,2R)-2-(3-этоксиазетидин-1-ил)циклогексил)(метил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-176 3-(5-(((1R,2S)-2-(3-этоксиазетидин-1-ил)циклогексил)(метил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-177 3-(5-((2-(3-этоксиазетидин-1-ил)циклогексил)(метил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-178 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(((1S,2S)-2-(3-этоксиазетидин-1-ил)циклогексил)(метил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-179 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(((1S,2R)-2-(3-этоксиазетидин-1-ил)циклогексил)(метил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-180 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(((1R,2R)-2-(3-этоксиазетидин-1-ил)циклогексил)(метил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-181 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(((1R,2S)-2-(3-этоксиазетидин-1-ил)циклогексил)(метил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-182 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-((2-(3-этоксиазетидин-1-ил)циклогексил)(метил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-183 3-(5-(((1S,2S)-2-((4,4-дифторциклогексил)амино)циклогексил)(метил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-184 3-(5-(((1S,2R)-2-((4,4-дифторциклогексил)амино)циклогексил)(метил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-185 3-(5-(((1R,2R)-2-((4,4-дифторциклогексил)амино)циклогексил)(метил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-186 3-(5-(((1R,2S)-2-((4,4-дифторциклогексил)амино)циклогексил)(метил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-187 3-(5-((2-((4,4-дифторциклогексил)амино)циклогексил)(метил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-188 5-(((1S,2S)-2-((4,4-дифторциклогексил)амино)циклогексил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-дион; I-189 5-(((1S,2R)-2-((4,4-дифторциклогексил)амино)циклогексил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-дион; I-190 5-(((1R,2R)-2-((4,4-дифторциклогексил)амино)циклогексил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-дион; I-191 5-(((1R,2S)-2-((4,4-дифторциклогексил)амино)циклогексил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-дион; I-192 5-((2-((4,4-дифторциклогексил)амино)циклогексил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-дион; I-193 3-(5-(((1S,2S)-2-(((3,3-дифторциклобутил)метил)амино)циклогексил)(метил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-194 3-(5-(((1S,2R)-2-(((3,3-дифторциклобутил)метил)амино)циклогексил)(метил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-195 3-(5-(((1R,2R)-2-(((3,3-дифторциклобутил)метил)амино)циклогексил)(метил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-196 3-(5-(((1R,2S)-2-(((3,3-дифторциклобутил)метил)амино)циклогексил)(метил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-197 3-(5-((2-(((3,3-дифторциклобутил)метил)амино)циклогексил)(метил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-198 5-(((1S,2S)-2-(((3,3-дифторциклобутил)метил)амино)циклогексил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-дион; I-199 5-(((1S,2R)-2-(((3,3-дифторциклобутил)метил)амино)циклогексил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-дион; I-200 5-(((1R,2R)-2-(((3,3-дифторциклобутил)метил)амино)циклогексил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-дион; I-201 5-(((1R,2S)-2-(((3,3-дифторциклобутил)метил)амино)циклогексил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-дион; I-202 5-((2-(((3,3-дифторциклобутил)метил)амино)циклогексил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-дион; I-203 3-(5-(метил((1S,2S)-2-(пиперидин-1-ил)циклопентил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-204 3-(5-(метил((1S,2R)-2-(пиперидин-1-ил)циклопентил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-205 3-(5-(метил((1R,2R)-2-(пиперидин-1-ил)циклопентил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-206 3-(5-(метил((1R,2S)-2-(пиперидин-1-ил)циклопентил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-207 3-(5-(метил(2-(пиперидин-1-ил)циклопентил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-208 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил((1S,2S)-2-(пиперидин-1-ил)циклопентил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-209 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил((1S,2R)-2-(пиперидин-1-ил)циклопентил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-210 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил((1R,2R)-2-(пиперидин-1-ил)циклопентил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-211 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил((1R,2S)-2-(пиперидин-1-ил)циклопентил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-212 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил(2-(пиперидин-1-ил)циклопентил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-213 5-(((1S,2S)-2-(диэтиламино)циклопентил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-дион; I-214 5-(((1S,2R)-2-(диэтиламино)циклопентил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-дион; I-215 5-(((1R,2R)-2-(диэтиламино)циклопентил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-дион; I-216 5-(((1R,2S)-2-(диэтиламино)циклопентил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-дион; I-217 5-((2-(диэтиламино)циклопентил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-дион; I-218 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(((1S,2S)-2-(3-этоксиазетидин-1-ил)циклопентил)(метил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-219 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(((1S,2R)-2-(3-этоксиазетидин-1-ил)циклопентил)(метил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-220 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(((1R,2R)-2-(3-этоксиазетидин-1-ил)циклопентил)(метил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-221 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(((1R,2S)-2-(3-этоксиазетидин-1-ил)циклопентил)(метил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-222 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-((2-(3-этоксиазетидин-1-ил)циклопентил)(метил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-223 5-(((1S,2S)-1-амино-2,3-дигидро-1H-инден-2-ил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-дион; I-224 5-(((1R,2S)-1-амино-2,3-дигидро-1H-инден-2-ил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-дион; I-225 5-(((1R,2R)-1-амино-2,3-дигидро-1H-инден-2-ил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-дион; I-226 5-(((1S,2R)-1-амино-2,3-дигидро-1H-инден-2-ил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-дион; I-227 5-((1-амино-2,3-дигидро-1H-инден-2-ил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-дион; I-228 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(((1S,2S)-1-(этиламино)-2,3-дигидро-1H-инден-2-ил)(метил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-229 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(((1R,2S)-1-(этиламино)-2,3-дигидро-1H-инден-2-ил)(метил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-230 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(((1R,2R)-1-(этиламино)-2,3-дигидро-1H-инден-2-ил)(метил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-231 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(((1S,2R)-1-(этиламино)-2,3-дигидро-1H-инден-2-ил)(метил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-232 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-((1-(этиламино)-2,3-дигидро-1H-инден-2-ил)(метил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-233 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил((1S,2S)-1-(метиламино)-2,3-дигидро-1H-инден-2-ил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-234 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил((1R,2S)-1-(метиламино)-2,3-дигидро-1H-инден-2-ил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-235 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил((1R,2R)-1-(метиламино)-2,3-дигидро-1H-инден-2-ил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-236 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил((1S,2R)-1-(метиламино)-2,3-дигидро-1H-инден-2-ил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-237 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил(1-(метиламино)-2,3-дигидро-1H-инден-2-ил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-238 5-(((1S,2S)-2-амино-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-дион; I-239 5-(((1S,2R)-2-амино-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-дион; I-240 5-(((1R,2R)-2-амино-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-дион; I-241 5-(((1R,2S)-2-амино-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-дион; I-242 5-((2-амино-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-дион; I-243 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил((1S,2S)-2-(метиламино)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-244 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил((1S,2R)-2-(метиламино)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-245 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил((1R,2R)-2-(метиламино)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-246 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил((1R,2S)-2-(метиламино)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-247 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил(2-(метиламино)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-248 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(((1S,2S)-2-(этиламино)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)(метил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-249 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(((1S,2R)-2-(этиламино)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)(метил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-250 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(((1R,2R)-2-(этиламино)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)(метил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-251 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(((1R,2S)-2-(этиламино)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)(метил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-252 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-((2-(этиламино)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)(метил)амино)изоиндолин-1,3-дион; I-253 3-(4-амино-5-(((1S,2S)-2-((4,4-дифторциклогексил)амино)циклогексил)(метил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-254 3-(4-амино-5-(((1S,2R)-2-((4,4-дифторциклогексил)амино)циклогексил)(метил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-255 3-(4-амино-5-(((1R,2R)-2-((4,4-дифторциклогексил)амино)циклогексил)(метил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-256 3-(4-амино-5-(((1R,2S)-2-((4,4-дифторциклогексил)амино)циклогексил)(метил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-257 3-(4-амино-5-((2-((4,4-дифторциклогексил)амино)циклогексил)(метил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-258 3-(5-(((1S,2S)-2-((4,4-дифторциклогексил)амино)циклогексил)(метил)амино)-4-гидрокси-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-259 3-(5-(((1S,2R)-2-((4,4-дифторциклогексил)амино)циклогексил)(метил)амино)-4-гидрокси-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-260 3-(5-(((1R,2R)-2-((4,4-дифторциклогексил)амино)циклогексил)(метил)амино)-4-гидрокси-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-261 3-(5-(((1R,2S)-2-((4,4-дифторциклогексил)амино)циклогексил)(метил)амино)-4-гидрокси-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-262 3-(5-((2-((4,4-дифторциклогексил)амино)циклогексил)(метил)амино)-4-гидрокси-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-263 4-амино-5-(((1S,2S)-2-((4,4-дифторциклогексил)амино)циклогексил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-дион; I-264 4-амино-5-(((1S,2R)-2-((4,4-дифторциклогексил)амино)циклогексил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-дион; I-265 4-амино-5-(((1R,2R)-2-((4,4-дифторциклогексил)амино)циклогексил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-дион; I-266 4-амино-5-(((1R,2S)-2-((4,4-дифторциклогексил)амино)циклогексил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-дион; I-267 4-амино-5-((2-((4,4-дифторциклогексил)амино)циклогексил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-дион; I-268 5-(((1S,2S)-2-((4,4-дифторциклогексил)амино)циклогексил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-4-гидроксиизоиндолин-1,3-дион; I-269 5-(((1S,2R)-2-((4,4-дифторциклогексил)амино)циклогексил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-4-гидроксиизоиндолин-1,3-дион; I-270 5-(((1R,2R)-2-((4,4-дифторциклогексил)амино)циклогексил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-4-гидроксиизоиндолин-1,3-дион; I-271 5-(((1R,2S)-2-((4,4-дифторциклогексил)амино)циклогексил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-4-гидроксиизоиндолин-1,3-дион; I-271 5-((2-((4,4-дифторциклогексил)амино)циклогексил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-4-гидроксиизоиндолин-1,3-дион; I-272 3-(5-(((1S,2S)-2-(3-этоксиазетидин-1-ил)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-273 3-(5-(((1S,2R)-2-(3-этоксиазетидин-1-ил)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-274 3-(5-(((1R,2R)-2-(3-этоксиазетидин-1-ил)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-275 3-(5-(((1R,2S)-2-(3-этоксиазетидин-1-ил)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-276 3-(5-((2-(3-этоксиазетидин-1-ил)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-277 3-(5-(((1S,2S)-2-((4,4-дифторциклогексил)амино)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-278 3-(5-(((1S,2R)-2-((4,4-дифторциклогексил)амино)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-279 3-(5-(((1R,2R)-2-((4,4-дифторциклогексил)амино)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-280 3-(5-(((1R,2S)-2-((4,4-дифторциклогексил)амино)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; и I-281 3-(5-((2-((4,4-дифторциклогексил)амино)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион; I-282 rac-транс-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(октагидрохиноксалин-1(2H)-ил)изоиндолин-1,3-дион и I-9 транс-3-(5-(метил(-2-(метиламино)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион.

Вариант осуществления 18. Фармацевтическая композиция, содержащая терапевтически эффективное количество соединения согласно любому из вариантов осуществления 1-17 или его фармацевтически приемлемой соли и фармацевтически приемлемые носитель или вспомогательное вещество.

Вариант осуществления 19. Фармацевтическая композиция согласно варианту осуществления 18, дополнительно содержащая по меньшей мере одно дополнительное фармацевтическое средство.

Вариант осуществления 20. Фармацевтическая композиция согласно варианту осуществления 18 или варианту осуществления 19 для применения в лечении заболевания или нарушения, на которое влияет обеспечение уменьшения уровней содержания белка IKZF2.

Вариант осуществления 21. Способ разрушения IKZF2, включающий введение пациенту, нуждающемуся в этом, соединения согласно любому из вариантов осуществления 1-17 или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера.

Вариант осуществления 22. Способ лечения заболевания или нарушения, на которые влияет модулирование уровней содержания белка IKZF2, включающий введение пациенту, нуждающемуся в этом, соединения согласно любому из вариантов осуществления 1-17 или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера.

Вариант осуществления 23. Способ модулирования уровней содержания белка IKZF2, включающий введение пациенту, нуждающемуся в этом, соединения согласно любому из вариантов осуществления 1-17 или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера.

Вариант осуществления 24. Способ уменьшения уровня пролиферации клетки, при этом способ включает приведение клетки в контакт с соединением согласно любому из вариантов осуществления 1-17 или его фармацевтически приемлемыми солью, гидратом, сольватом, пролекарством на его основе, его стереоизомером или таутомером и обеспечение уменьшения уровней содержания белка IKZF2.

Вариант осуществления 25. Способ лечения рака, включающий в себя введение пациенту, нуждающемуся в этом, соединения согласно любому из вариантов осуществления 1-17 или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера.

Вариант осуществления 26. Способ согласно варианту осуществления 25, где рак выбран из рака предстательной железы, карциномы молочной железы, лимфом, лейкоза, миеломы, карциномы мочевого пузыря, рака толстой кишки, меланомы кожи, гепатоцеллюлярной карциномы, рака эндометрия, рака яичника, рака шейки матки, рака легкого, рака почки, мультиформной глиобластомы, глиомы, рака щитовидной железы, опухоли паращитовидной железы, рака носоглотки, рака языка, рака поджелудочной железы, рака пищевода, холангиокарциномы, рака желудка и сарком мягких тканей, выбранных из рабдомиосаркомы (RMS), синовиальной саркомы, остеосаркомы, видов рабдоидного рака и саркомы Юинга.

Вариант осуществления 27. Способ согласно варианту осуществления 25, где рак представляет собой рак, иммунный ответ на который недостаточен, или рак с иммуногенными свойствами.

Вариант осуществления 28. Способ уменьшения уровней содержания белка IKZF2 у субъекта, включающий стадию введения субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества соединения согласно любому из вариантов осуществления 1-17 или его фармацевтически приемлемой соли.

Вариант осуществления 29. Способ согласно любому из вариантов осуществления 21-28, где введение проводят перорально, парентерально, подкожно, путем инъекции или инфузии.

Вариант осуществления 30. Соединение согласно любому из вариантов осуществления 1-17 или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер для применения в лечении заболевания или нарушения, на которые влияет уменьшение уровней содержания белка IKZF2.

Вариант осуществления 31. Применение соединения согласно любому из вариантов осуществления 1-17 или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера в изготовлении лекарственного препарата для лечения заболевания или нарушения, на которые влияет уменьшение уровней содержания белка IKZF2.

Вариант осуществления 32. Соединение согласно любому из вариантов осуществления 1-17 или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер для применения в изготовлении лекарственного препарата для лечения заболевания или нарушения, ассоциированных с уменьшением уровней содержания белка IKZF2.

Вариант осуществления 33. Соединение согласно варианту осуществления 32, где заболевание или нарушение выбраны из рака предстательной железы, карциномы молочной железы, лимфом, лейкоза, миеломы, карциномы мочевого пузыря, рака толстой кишки, меланомы кожи, гепатоцеллюлярной карциномы, рака эндометрия, рака яичника, рака шейки матки, рака легкого, рака почки, мультиформной глиобластомы, глиомы, рака щитовидной железы, опухоли паращитовидной железы, рака носоглотки, рака языка, рака поджелудочной железы, рака пищевода, холангиокарциномы, рака желудка и сарком мягких тканей, выбранных из рабдомиосаркомы (RMS), синовиальной саркомы, остеосаркомы, видов рабдоидного рака и саркомы Юинга.

Вариант осуществления 34. Применение соединения согласно любому из вариантов осуществления 1-17 или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера в лечении заболевания или нарушения, ассоциированных с уменьшением уровней содержания белка IKZF2.

Вариант осуществления 35. Соединение согласно варианту осуществления 34, где заболевание или нарушение выбраны из рака предстательной железы, карциномы молочной железы, лимфом, лейкоза, миеломы, карциномы мочевого пузыря, рака толстой кишки, меланомы кожи, гепатоцеллюлярной карциномы, рака эндометрия, рака яичника, рака шейки матки, рака легкого, рака почки, мультиформной глиобластомы, глиомы, рака щитовидной железы, опухоли паращитовидной железы, рака носоглотки, рака языка, рака поджелудочной железы, рака пищевода, холангиокарциномы, рака желудка и сарком мягких тканей, выбранных из рабдомиосаркомы (RMS), синовиальной саркомы, остеосаркомы, видов рабдоидного рака и саркомы Юинга.

Вариант осуществления 36. Способ согласно варианту осуществления 25, где рак выбран из немелкоклеточного рака легкого (NSCLC), меланомы, трижды негативного рака молочной железы (TNBC), рака носоглотки (NPC), колоректального рака с микросателлитной стабильностью (mssCRC), тимомы, карциноида, острого миелогенного лейкоза и стромальной опухоли желудочно-кишечного тракта (GIST).

Вариант осуществления 37. Соединение согласно варианту осуществления 32, где заболевание или нарушение выбраны из немелкоклеточного рака легкого (NSCLC), меланомы, трижды негативного рака молочной железы (TNBC), рака носоглотки (NPC), колоректального рака с микросателлитной стабильностью (mssCRC), тимомы, карциноида, острого миелогенного лейкоза и стромальной опухоли желудочно-кишечного тракта (GIST).

Вариант осуществления 38. Применение согласно варианту осуществления 34, где заболевание или нарушение выбраны из немелкоклеточного рака легкого (NSCLC), меланомы, трижды негативного рака молочной железы (TNBC), рака носоглотки (NPC), колоректального рака с микросателлитной стабильностью (mssCRC), тимомы, карциноида, острого миелогенного лейкоза и стромальной опухоли желудочно-кишечного тракта (GIST).

В другом варианте осуществления изобретения соединения по настоящему изобретению представляют собой энантиомеры. В некоторых вариантах осуществления соединения представляют собой (S)-энантиомер. В других вариантах осуществления соединения представляют собой (R)-энантиомер. В еще одних вариантах осуществления соединения по настоящему изобретению могут представлять собой (+) или (-) энантиомеры.

Следует понимать, что в настоящее изобретение включены все изомерные формы, включая их смеси. Если соединение содержит двойную связь, заместитель может находиться в E- или Z-конфигурации. Если соединение содержит двузамещенный циклоалкил, циклоалкильный заместитель может иметь цис- или транс-конфигурацию. Также предполагается, что охвачены все таутомерные формы.

Соединения по настоящему изобретению и их фармацевтически приемлемые соли, гидраты, сольваты, стереоизомеры и пролекарства на их основе могут существовать в их таутомерной форме (например, в виде амида или иминоэфира). Все такие таутомерные формы рассматриваются в данном документе как часть настоящего изобретения.

Соединения по настоящему изобретению могут содержать асимметрические или хиральные центры и, следовательно, существуют в различных стереоизомерных формах. Предполагается, что все стереоизомерные формы соединений по настоящему изобретению, а также их смеси, включая рацемические смеси, составляют часть настоящего изобретения. Кроме того, настоящее изобретение охватывает все геометрические и позиционные изомеры. Например, если соединение по настоящему изобретению включает двойную связь или конденсированное кольцо, то в объем настоящего изобретения включены как цис-, так и транс-формы, а также смеси. Каждое раскрытое в данном документе соединение включает все энантиомеры, которые соответствуют общей структуре соединения. С точки зрения стереохимии соединения могут находится в рацемической или энантиомерно чистой форме или в любой другой форме. Результаты анализа могут отражать данные, полученные для рацемической формы, энантиомерно чистой формы или любой другой формы с точки зрения стереохимии.

Диастереомерные смеси можно разделять на их отдельные диастереоизомеры на основании их физико-химических различий с помощью хорошо известных специалистам в данной области техники способов, таких как, например, хроматография и/или фракционная кристаллизация. Энантиомеры можно разделять посредством превращения энантиомерной смеси в диастереомерную смесь путем проведения реакции с подходящим оптически активным соединением (например, с хиральным вспомогательным веществом, таким как хиральный спирт или хлорангидрид Мошера), разделения диастереоизомеров и превращения (например, посредством гидролиза) отдельных диастереоизомеров в соответствующие чистые энантиомеры. Кроме того, некоторые из соединений по настоящему изобретению могут представлять собой атропоизомеры (например, замещенные биарилы) и рассматриваются как часть настоящего изобретения. Энантиомеры можно также разделять посредством применения колонки для хиральной HPLC.

Также возможно, что соединения по настоящему изобретению могут существовать в различных таутомерных формах, и все такие формы охватываются объемом настоящего изобретения, а также химическими структурами и названиями. Также, например, все кетоенольные и имин-енаминовые формы соединений включены в настоящее изобретение.

Все стереоизомеры (например, геометрические изомеры, оптические изомеры и т. п.) соединений по настоящему изобретению (включая таковые для солей, сольватов, сложных эфиров соединений и пролекарств на их основе , а также солей, сольватов и сложных эфиров пролекарств), такие как те, которые могут существовать из-за асимметрических атомов углерода на различных заместителях, включая энантиомерные формы (которые могут существовать даже в отсутствие асимметрических атомов углерода), ротамерные формы, атропоизомеры и диастереомерные формы, также рассматриваются в объеме данного раскрытия, как и позиционные изомеры (такие как, например, 4-пиридил и 3-пиридил). (Например, если соединение формулы (I') или формулы (I) содержит двойную связь или конденсированное кольцо, то в объем настоящего изобретения включены как цис-, так и транс-формы, а также смеси. Также, например, все кетоенольные и имин-енаминовые формы соединений включены в настоящее изобретение.) Отдельные стереоизомеры соединений по настоящему изобретению могут, например, по сути не содержать других изомеров или находиться в смеси, например, в виде рацематов или находиться в смеси со всеми другими стереоизомерами или другими выбранными стереоизомерами.

Хиральные центры соединений по настоящему изобретению могут характеризоваться S- или R-конфигурацией, как определено Рекомендациями IUPAC 1974. В определенных вариантах осуществления каждый асимметрический атом характеризуется по меньшей мере 50% энантиомерным избытком, по меньшей мере 60% энантиомерным избытком, по меньшей мере 70% энантиомерным избытком, по меньшей мере 80% энантиомерным избытком, по меньшей мере 90% энантиомерным избытком, по меньшей мере 95% энантиомерным избытком или по меньшей мере 99% энантиомерным избытком в (R)- или (S)-конфигурации. Заместители при атомах с ненасыщенными двойными связями могут, если это возможно, находиться в цис- (Z)- или транс- (E)-форме.

Применение терминов "соль", "сольват", "сложный эфир", "пролекарство" и т. п. в равной мере относится к соли, сольвату, сложному эфиру и пролекарству энантиомеров, стереоизомеров, ротамеров, таутомеров, позиционных изомеров, рацематов или пролекарств соединений по настоящему изобретению.

Соединения по настоящему изобретению могут образовывать соли, которые также входят в объем этого изобретения. Ссылку на соединение формулы в данном документе обычно следует рассматривать как ссылку на его соли, если не указано иное.

Соединения и промежуточные соединения можно выделять и применять в виде соединения как такового. Любая формула, приведенная в данном документе, предназначена для представления немеченых форм, а также изотопно-меченых форм соединений. Меченные изотопом соединения характеризуются структурами, изображенными посредством формул, приведенных в данном документе, за исключением того, что один или несколько атомов заменены на атом, характеризующийся выбранной атомной массой или массовым числом. Примеры изотопов, которые могут быть включены в соединения по настоящему изобретению, включают изотопы водорода, углерода, азота, кислорода, фосфора, фтора и такие, как ²H, ³H, ¹¹C, ¹³C, ¹⁴C, ¹⁵N, ¹⁸F, ³¹P, ³²P, соответственно. В настоящее изобретение включены различные изотопно-меченые соединения, определенные в данном документе, например соединения, в которых присутствуют такие радиоактивные изотопы, как ³H, ¹³C и ¹⁴C. Такие изотопно-меченные соединения применимы в исследованиях относительно метаболизма (с использованием ¹⁴C), исследованиях кинетики реакций (например, с использованием ²H или ³H), методиках обнаружения или визуализации, таких как позитронно-эмиссионная томография (PET) или однофотонная эмиссионная компьютерная томография (SPECT), включая анализы распределения лекарственного средства или субстрата в тканях, или при лучевой терапии пациентов. В частности, ¹⁸F, ¹¹C или меченое соединение могут быть особенно востребованными для исследований с помощью PET или SPECT.

Кроме того, замещение более тяжелыми изотопами, в частности дейтерием (т. е. ²H или D), может давать определенные терапевтические преимущества, что обусловлено более высокой метаболической стабильностью, например, увеличенным периодом полувыведения in vivo, снижением требуемой дозы, уменьшением ингибирования CYP450 (конкурентного или зависящего от времени) или улучшением терапевтического индекса. Например, замещение дейтерием может изменять нежелательные побочные эффекты недейтерированного соединения, такие как конкурентное ингибирование CYP450, зависящая от времени инактивация CYP450 и т. д. Понятно, что дейтерий в этом контексте рассматривается как заместитель в соединениях по настоящему изобретению. Концентрация такого более тяжелого изотопа, конкретно дейтерия, может быть определена посредством коэффициента изотопного обогащения. Используемый в данном документе термин "коэффициент изотопного обогащения" означает соотношение распространенности изотопа и распространенности в природе указанного изотопа. В случае если заместитель в соединении по настоящему изобретению представляет собой указанный дейтерий, такое соединение характеризуется коэффициентом изотопного обогащения для каждого обозначенного атома дейтерия, составляющим по меньшей мере 3500 (введение 52,5% дейтерия при каждом обозначенном атоме дейтерия), по меньшей мере 4000 (введение 60% дейтерия), по меньшей мере 4500 (введение 67,5% дейтерия), по меньшей мере 5000 (введение 75% дейтерия), по меньшей мере 5500 (введение 82,5% дейтерия), по меньшей мере 6000 (введение 90% дейтерия), по меньшей мере 6333,3 (введение 95% дейтерия), по меньшей мере 6466,7 (введение 97% дейтерия), по меньшей мере 6600 (введение 99% дейтерия) или по меньшей мере 6633,3 (введение 99,5% дейтерия).

Изотопно-меченые соединения по настоящему изобретению, как правило, можно получать обычными способами, известными специалистам в данной области техники, или путем проведения процедур, описанных на схемах, или в примерах и процедурах, описанных ниже, с использованием подходящего изотопно-меченого реагента вместо немеченого изотопами реагента.

Фармацевтически приемлемые сольваты в соответствии с настоящим изобретением включают таковые, где растворитель для кристаллизации может быть замещен изотопом, например, D₂O, d₆-ацетон, d₆-DMSO.

Настоящее изобретение относится к соединениям, которые являются модуляторами уровней содержания белка IKZF2. В одном варианте осуществления соединения по настоящему изобретению снижают уровни содержания белка IKZF2. В еще одном варианте осуществления соединения по настоящему изобретению уменьшают уровни содержания белка IKZF2. В другом варианте осуществления соединения по настоящему изобретению являются средствами разрушения IKZF2.

Настоящее изобретение относится к соединениям, которые являются модуляторами уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4. В одном варианте осуществления соединения по настоящему изобретению снижают уровни содержания белков IKZF2 и IKZF4. В одном варианте осуществления соединения по настоящему изобретению уменьшают уровни содержания белков IKZF2 и IKZF4. В другом варианте осуществления соединения по настоящему изобретению являются средствами разрушения IKZF2.

В некоторых вариантах осуществления соединения по настоящему изобретению являются селективными относительно других белков. Используемый в данном документе термин "селективный модулятор", "селективное средство разрушения" или "селективное соединение" означает, например, соединение по настоящему изобретению, которое эффективно модулирует, уменьшает или снижает уровни содержания конкретного белка или разрушает конкретный белок в большей степени, чем любой другой белок. "Селективный модулятор", "селективное средство разрушения" или "селективное соединение" можно идентифицировать, например, путем сравнения способности соединения модулировать, уменьшать или снижать уровни содержания конкретного белка или разрушать конкретный белок с его способностью модулировать, уменьшать или снижать уровни содержания других белков или разрушать другие белки. В некоторых вариантах осуществления селективность можно определить путем измерения EC₅₀ или IC₅₀ соединений.

В некоторых вариантах осуществления соединения по настоящему изобретению являются селективными модуляторами IKZF2. Используемый в данном документе термин "селективный модулятор IKZF2", "селективное средство разрушения IKZF2" или "соединение, селективное в отношении IKZF2" относится к соединению по настоящему изобретению, например, которое эффективно модулирует, уменьшает или снижает уровни содержания белка IKZF2 или разрушает белок IKZF2 в большей степени, чем любой другой белок, особенно любой белок (фактор транскрипции) из семейства белков Ikaros (например, IKZF1, IKZF3, IKZF4 и IKZF5).

"Селективный модулятор IKZF2", "селективное средство разрушения IKZF2" или "соединение, селективное в отношении IKZF2" можно идентифицировать, например, путем сравнения способности соединения модулировать уровни содержания белка IKZF2 с его способностью модулировать уровни содержания других членов семейства белков Ikaros или других белков. Например, вещество может быть проанализировано на его способность модулировать уровни содержания белка IKZF2, а также IKZF1, IKZF3, IKZF4, IKZF5 и других белков. В некоторых вариантах осуществления селективность можно определить путем измерения EC₅₀ соединений. В некоторых вариантах осуществления селективное средство разрушения IKZF2 идентифицируют путем сравнения способности соединения разрушать IKZF2 с его способностью разрушать другие члены семейства белков Ikaros или другие белки.

В определенных вариантах осуществления соединения по настоящему изобретению являются средствами разрушения IKZF2, которые характеризуются селективностью в отношении разрушения IKZF2, которая по меньшей мере в 2 раза, 3 раза, 5 раз, 10 раз, 25 раз, 50 раз или 100 раз выше таковой для других белков (например, IKZF1, IKZF3, IKZF4 и IKZF5). В различных вариантах осуществления соединения по настоящему изобретению характеризуются селективностью в отношении разрушения IKZF2, которая в не более 1000 раз выше таковой для других белков.

В определенных вариантах осуществления соединения по настоящему изобретению характеризуются селективностью в отношении разрушения IKZF2, которая в по меньшей мере 2 раза, 3 раза, 5 раз, 10 раз, 25 раз, 50 раз или 100 раз выше таковой для других членов семейства белков Ikaros (например, IKZF1, IKZF3, IKZF4 и IKZF5). В различных вариантах осуществления соединения по настоящему изобретению характеризуются селективностью в отношении разрушения IKZF2, которая в не более 1000 раз выше таковой для других членов семейства белков Ikaros (например, IKZF1, IKZF3, IKZF4 и IKZF5).

В определенных вариантах осуществления соединения по настоящему изобретению характеризуются селективностью в отношении разрушения IKZF2, которая в по меньшей мере 2 раза, 3 раза, 5 раз, 10 раз, 25 раз, 50 раз или 100 раз выше таковой для IKZF1. В различных вариантах осуществления соединения по настоящему изобретению характеризуются селективностью в отношении разрушения IKZF2, которая в не более 1000 раз выше таковой для IKZF1.

В определенных вариантах осуществления соединения по настоящему изобретению характеризуются селективностью в отношении разрушения IKZF2, которая в по меньшей мере 2 раза, 3 раза, 5 раз, 10 раз, 25 раз, 50 раз или 100 раз выше таковой для IKZF3. В различных вариантах осуществления соединения по настоящему изобретению характеризуются селективностью в отношении разрушения IKZF2, которая в не более 1000 раз выше таковой для IKZF3.

В определенных вариантах осуществления соединения по настоящему изобретению характеризуются селективностью в отношении разрушения IKZF2, которая в по меньшей мере 2 раза, 3 раза, 5 раз, 10 раз, 25 раз, 50 раз или 100 раз выше таковой для IKZF4. В различных вариантах осуществления соединения по настоящему изобретению характеризуются селективностью в отношении разрушения IKZF2, которая в не более 1000 раз выше таковой для IKZF4.

В определенных вариантах осуществления соединения по настоящему изобретению характеризуются селективностью в отношении разрушения IKZF2, которая в по меньшей мере 2 раза, 3 раза, 5 раз, 10 раз, 25 раз, 50 раз или 100 раз выше таковой для IKZF5. В различных вариантах осуществления соединения по настоящему изобретению характеризуются селективностью в отношении разрушения IKZF2, которая в не более 1000 раз выше таковой для IKZF5.

В определенных вариантах осуществления соединения по настоящему изобретению характеризуются селективностью в отношении разрушения IKZF2 и IKZF4, которая в по меньшей мере в 2 раза, 3 раза, 5 раз, 10 раз, 25 раз, 50 раз или 100 раз выше таковой для других членов семейства белков Ikaros (например, IKZF1, IKZF3 и IKZF5). В различных вариантах осуществления соединения по настоящему изобретению характеризуются селективностью в отношении разрушения IKZF2 и IKZF4, которая в не более 1000 раз выше таковой для других членов семейства белков Ikaros (например, IKZF1, IKZF3 и IKZF5).

В определенных вариантах осуществления соединения по настоящему изобретению характеризуются селективностью в отношении разрушения IKZF2 и IKZF4, которая в по меньшей мере 2 раза, 3 раза, 5 раз, 10 раз, 25 раз, 50 раз или 100 раз выше таковой для IKZF1. В различных вариантах осуществления соединения по настоящему изобретению характеризуются селективностью в отношении разрушения IKZF2 и IKZF4, которая в не более 1000 раз выше таковой для IKZF1.

В определенных вариантах осуществления соединения по настоящему изобретению характеризуются селективностью в отношении разрушения IKZF2 и IKZF4, которая в по меньшей мере 2 раза, 3 раза, 5 раз, 10 раз, 25 раз, 50 раз или 100 раз выше таковой для IKZF3. В различных вариантах осуществления соединения по настоящему изобретению характеризуются селективностью в отношении разрушения IKZF2 и IKZF4, которая в не более 1000 раз выше таковой для IKZF3.

В определенных вариантах осуществления соединения по настоящему изобретению характеризуются селективностью в отношении разрушения IKZF2 и IKZF4, которая в по меньшей мере 2 раза, 3 раза, 5 раз, 10 раз, 25 раз, 50 раз или 100 раз выше таковой для IKZF5. В различных вариантах осуществления соединения по настоящему изобретению характеризуются селективностью в отношении разрушения IKZF2 и IKZF4, которая в не более 1000 раз выше таковой для IKZF5.

В различных вариантах осуществления разрушение IKZF2 измеряют с помощью EC₅₀.

Эффективность можно определять по значению EC₅₀. Соединение с более низким значением EC₅₀, определенным в по сути аналогичных условиях, является более эффективным средством разрушения по сравнению с соединением с более высоким значением EC₅₀. В некоторых вариантах осуществления по сути аналогичные условия включают определение уменьшение уровней содержания белка в клетках, экспрессирующих определенный белок или фрагмент любого из них.

Настоящее изобретение направлено на соединения, описанные в данном документе, и их фармацевтически приемлемые соли, гидраты, сольваты, пролекарства на их основе, их стереоизомеры или таутомеры и фармацевтические композиции, содержащие одно или несколько соединений, описанных в данном документе, или их фармацевтически приемлемые соли, гидраты, сольваты, пролекарства на их основе, их стереоизомеры или таутомеры.

Е. Способы синтеза соединений формулы (I') или формулы (I)

Соединения по настоящему изобретению можно получать различными способами, включая стандартные химические методы. Подходящие пути синтеза указаны на схемах, приведенных ниже.

Соединения по настоящему изобретению можно получать способами, известными в области органического синтеза, как изложено в следующих схемах синтеза. В описанных ниже схемах само собой подразумевается, что при необходимости применяются защитные группы для неустойчивых или реакционноспособных групп в соответствии с общими принципами или химией. С защитными группами обращаются в соответствии со стандартными методиками органического синтеза (T.W. Greene and P.G.M. Wuts, "Protective Groups in Organic Synthesis", Third edition, Wiley, New York 1999). Эти группы удаляют на подходящей стадии синтеза соединения с использованием способов, очевидных для специалистов в данной области техники. Способы отбора, а также условия реакции и порядок их проведения должны соответствовать получению соединений формулы (I') или формулы (I).

Специалисты в данной области техники смогут определить наличие стереоцентра в соединениях по настоящему изобретению. Соответственно, настоящее изобретение включает все возможные стереоизомеры (если это не указано в синтезе), а также включает не только рацемические соединения, но и отдельные энантиомеры и/или диастереоизомеры. Если соединение необходимо в виде отдельного энантиомера или диастереоизомера, его можно получать с помощью стереоспецифического синтеза или разделения конечного продукта или любого подходящего промежуточного соединения. Разделение конечного продукта, промежуточного соединения или исходного материала можно выполнять любым подходящим способом, известным из уровня техники. См., например, "Stereochemistry of Organic Compounds" by E.L. Eliel, S.H. Wilen, and L.N. Mander (Wiley-Interscience, 1994).

Описанные в данном документе соединения можно получать из коммерчески доступных исходных материалов или синтезировать с применением известных органических, неорганических и/или ферментативных способов.

Получение соединений

Соединения по настоящему изобретению можно получать множеством способов, широко известных специалистам в области органического синтеза. В качестве примера, соединения по настоящему изобретению можно синтезировать с применением способов, описанных ниже, вместе со способами синтеза, известными в области химии органического синтеза, или вариациями на их основе, как понятно специалисту в данной области техники. Предпочтительные способы включают без ограничения такие способы, описанные ниже.

Соединения по настоящему изобретению можно синтезировать с помощью стадий, кратко изложенных на общих схемах I, II, III, IV и V, которые содержат разные последовательности синтеза промежуточных соединений I-a, I-b, I-c, I-d, II-b, IIIa, IV-a, IV-b, IV-c, IV-d, V-a, V-b, V-c и V-d. Исходные материалы являются либо коммерчески доступными, либо изготовлены с помощью известных процедур в упомянутых литературных источниках или проиллюстрированных в данном документе.

Общая схема I

где R_a, R_b, R_x, R₂, R₃, R₇, R₈, X₁, X₂, m1 и n1 являются такими, как определено для формулы (I').

Общий способ получения соединений формулы (I'), где R₁ представляет собой , и R_7'представляет собой H или необязательнозамещенный алкил (необязательно замещенный одним или несколькими R₈), с применением промежуточных соединений I-a, I-b, I-c и I-d приведен на общей схеме I. Если R_a и R_b представляют собой H, то осуществление реакции сочетания соединения I-a с 1,2-диамином I-b с применением катализатора (например, CuI или RuPhos Palladacycle), основания (например, карбоната цезия (Cs₂CO₃) или трет-бутоксида натрия (t-BuONa)) в растворителе (например, N, N-диметилформамиде (DMF) или 1,4-диоксане), необязательно при повышенной температуре, обеспечивает получение требуемых соединений формулы (I'), где R_7' представляет собой H. Если R_a и R_b вместе с атомом, к которому они присоединены, образуют =(O), то можно осуществлять реакцию сочетания соединения I-a с 1,2-диамином I-b с применением основания (например, i-Pr₂Net) в растворителе (например, N-метил-2-пирролидоне (NMP)), необязательно при повышенной температуре, с получением требуемых соединений формулы (I'), где R_7' представляет собой H. Восстановительное аминирование соединения (I'), где R_7' представляет собой H, с помощью альдегида I-d обеспечивает получение требуемых соединений формулы (I), где R_7' представляет собой алкил, необязательно замещенный R₈. В качестве альтернативы соединения формулы (I'), где R_7' представляет собой алкил, необязательно замещенный R₈, можно получать путем алкилирования соединения (I'), где R_7' представляет собой H, алкилгалогенидом, тозилатом или мезилатом I-c в присутствии основания (например, Et₃N, i-Pr₂NEt, Cs₂CO₃ и т. д.) в растворителе (например, MeCN, N, N-диметилформамиде (DMF) и т. д.) и необязательно при повышенной температуре.

Общая схема II

где R_a, R_b, R_x, R₂, R₄, R₇, R₈, X₁, X₂, m, s и n являются такими, как определено для формулы (I').

Общий способ получения соединений формулы (I'), где R₁ представляет собой , и R_7'представляет собой H или необязательнозамещенный алкил (необязательно замещенный одним или несколькими R₈), с применением промежуточных соединений I-a, I-c, I-d и II-b приведен на общей схеме II. Если R_a и R_b представляет собой H, то осуществление реакции сочетания соединения I-a с 1,2-диамином II-b с применением катализатора (например, CuI или RuPhos Palladacycle), основания (например, карбонат цезия (Cs₂CO₃) или трет-бутоксида натрия (t-BuONa)) в растворителе (например, N, N-диметилформамиде (DMF) или 1,4-диоксане), необязательно при повышенной температуре, обеспечивает получение требуемых соединений формулы (I'), где R_7' представляет собой H. Если R_a и R_b вместе с атомом, к которому они присоединены, образуют =(O), то можно осуществлять реакцию сочетания соединения I-a с 1,2-диамином II-b с применением основания (например, i-Pr₂NEt) в растворителе (например, N-метил-2-пирролидоне (NMP)), необязательно при повышенной температуре, с получением требуемых соединений формулы (I'), где R_7' представляет собой H. Восстановительное аминирование соединения (I), где R_7' представляет собой H, альдегидом I-d обеспечивает получение требуемых соединений формулы (I'), где R_7' представляет собой алкил, необязательно замещенный R₈. В качестве альтернативы соединения формулы (I'), где R_7' представляет собой алкил, необязательно замещенный R₈, можно получать путем алкилирования соединения (I'), где R_7' представляет собой H, алкилгалогенидом, тозилатом или мезилатом I-c в присутствии основания (например, Et₃N, i-Pr₂NEt, Cs₂CO₃ и т. д.) в растворителе (например, MeCN, N, N-диметилформамиде (DMF) и т. д.) и необязательно при повышенной температуре.

Общая схема III

где R_a, R_b, R_x, R₂, R₃, R₆, X₁, X₂, m1 и n1 являются такими, как определено для формулы (I').

Общий способ получения соединений формулы (I'), где R₁ представляет собой , и R₅представляет собой -OR₆, с применением промежуточных соединений I-a и III-a приведен на общей схеме III. Осуществление реакции сочетания соединения I-a с 1,2-аминоэфиром III-a, где R₆ представляет собой бензил, с применением катализатора (например, RuPhos Palladacycle), основания (например, карбоната цезия (Cs₂CO₃) или трет-бутоксида натрия (t-BuONa)) в растворителе (например, N, N-диметилформамиде (DMF) или 1,4-диоксане), необязательно при повышенной температуре, обеспечивает получение требуемых соединений формулы (I'), где R₅ представляет собой -OR₆, и R₆ представляет собой бензил. Соединения формулы (I'), где R₆ представляет собой H, можно получать путем гидрогенизации соединения (I'), где R₆ представляет собой бензил, в присутствии подходящего катализатора (например, Pd/C или PtO₂) в растворителе (например, DMF или EtOH) и в атмосфере газообразного водорода.

Общая схема IV

где R_x, R₂, R₃, R₇, R₈, X₁, X₂, m1 и n1 являются такими, как определено для формулы (I').

В качестве альтернативы соединения формулы (I'), где R₁ представляет собой , R_a и R_b представляют собой H, и R_7'представляет собой H или необязательнозамещенный алкил (необязательно замещенный одним или несколькими R₈), можно получать с применением промежуточных соединений I-b, I-c, I-d, IV-a, IV-b, IV-c и IV-d, что приведено на общей схеме IV. Алкилирование соединения IV-a диметилформамидом (DMF) в присутствии основания (например, LiTMP, LDA, TMPMgCl•LiCl и т.д.) в растворителе (например, тетрагидрофуране (THF) и т. д.) и необязательно при низкой температуре обеспечивает получение IV-b. Осуществление реакции соединения IV-b и соединения IV-c в присутствии восстановителя (например, триацетоксиборогидрида натрия (NaB(OAc)₃H), цианоборогидрида натрия (NaBH₃CN) и т. д.) и в растворителе (например, DMF, THF и т. д.) обеспечивает получение IV-d. Осуществление реакции сочетания соединения IV-d с 1,2-диамином I-b с применением катализатора (например, CuI или RuPhos Palladacycle), основания (например, карбоната цезия (Cs₂CO₃) или трет-бутоксида натрия (t-BuONa)) в растворителе (например, N, N-диметилформамиде (DMF) или 1,4-диоксане), необязательно при повышенной температуре, обеспечивает получение требуемых соединений формулы (I'), где R_7' представляет собой H. Восстановительное аминирование соединения (I'), где R_7' представляет собой H, альдегидом I-d обеспечивает получение требуемых соединений формулы (I'), где R_7' представляет собой алкил, необязательно замещенный R₈. В качестве альтернативы соединения формулы (I'), где R_7' представляет собой алкил, необязательно замещенный R₈, можно получать путем алкилирования соединения (I'), где R_7' представляет собой H, алкилгалогенидом, тозилатом или мезилатом I-c в присутствии основания (например, Et₃N, i-Pr₂NEt, Cs₂CO₃ и т. д.) в растворителе (например, MeCN, N, N-диметилформамиде (DMF) и т. д.) и необязательно при повышенной температуре.

Общая схема V

где R_x, R₂, R₃, R₇, R₈, X₁, X₂, m1 и n1 являются такими, как определено для формулы (I').

Общий способ получения соединений формулы (I'), где R₁ представляет собой , R_a и R_b вместе с атомом, к которому они присоединены, образуют =(O), и R_7' представляет собой H или необязательнозамещенный алкил (необязательно замещенный одним или несколькими R₈), с применением промежуточных соединений IV-c, V-a, V-b, V-c и V-d приведен на общей схеме V. Осуществление реакции соединения V-a с соединением IV-c в присутствии слабого основания (например, KOAc) в растворителе (например, HOAc), необязательно при повышенной температуре, обеспечивает получение промежуточного соединения V-b. Осуществление реакции сочетания соединения V-b с 1,2-диамином V-c, при необходимости защищенным подходящей защитной группой амина (например, Boc, Cbz и т. д.), можно обеспечивать с применением основания (например, i-Pr₂NEt) в растворителе (например, N-метил-2-пирролидоне (NMP), изопропаноле (i-PrOH), необязательно при повышенной температуре, с получением V-d, где R_7' представляет собой H. В качестве альтернативы такую реакцию сочетания можно осуществлять с применением катализатора (например, CuI или RuPhos Palladacycle), основания (например, карбоната цезия (Cs₂CO₃) или трет-бутоксида натрия (t-BuONa)) в растворителе (например, N, N-диметилформамиде (DMF) или 1,4-диоксане) необязательно при повышенной температуре. Если защитная группа амина на V-d представляет собой Boc-группу, то удаление защитной группы можно осуществлять с применением сильной кислоты (например, HCl или трифторуксусной кислоты (TFA)) в растворителе (например, тетрагидрофуране (THF),1,4-диоксане и т. д.) с получением соединений (I'), где R_7' представляет собой H. Восстановительное аминирование соединения (I'), где R_7' представляет собой H, альдегидом I-d обеспечивает получение требуемых соединений формулы (I'), где R_7' представляет собой алкил, необязательно замещенный R₈. В качестве альтернативы соединения формулы (I'), где R_7' представляет собой алкил, необязательно замещенный R₈, можно получать путем алкилирования соединения (I'), где R_7' представляет собой H, алкилгалогенидом, тозилатом или мезилатом I-c в присутствии основания (например, Et₃N, i-Pr₂NEt, Cs₂CO₃ и т. д.) в растворителе (например, MeCN, N, N-диметилформамиде (DMF) и т. д.) и необязательно при повышенной температуре.

Смесь энантиомеров, диастереоизомеров и цис/транс-изомеров, полученных в результате описанного выше способа, может быть разделена на отдельные компоненты методом применения хиральной соли, хроматографией с использованием нормальной фазы, обращенной фазы или хиральной колонки, в зависимости от характера разделения.

Любые полученные в результате рацематы соединений по настоящему изобретению или промежуточных соединений можно разделять на оптические антиподы посредством известных способов, например, путем разделения их диастереоизомерных солей, полученных на основе оптически активных кислоты или основания, и выделения оптически активного кислотного или основного соединения. В частности, таким образом, можно использовать основный фрагмент для разделения соединений по настоящему изобретению на их оптические антиподы, например, путем фракционной кристаллизации соли, образованной с помощью оптически активной кислоты, например, винной кислоты, дибензоилвинной кислоты, диацетилвинной кислоты, ди-O, O'-п-толуоилвинной кислоты, миндальной кислоты, яблочной кислоты или камфор-10-сульфокислоты. Рацемические соединения по настоящему изобретению или рацемические промежуточные соединения также можно разделять хиральной хроматографией, например жидкостной хроматографией высокого давления (HPLC) с применением хирального адсорбента.

Любые полученные в результате смеси стереоизомеров могут быть разделены на основании физико-химических отличий составляющих на чистые или практически чистые геометрические или оптические изомеры, диастереомеры, рацематы, например, посредством хроматографии и/или фракционной кристаллизации.

Следует понимать, что в указанных выше описании и формуле, различные группы R_x, R₂, R₃, R₄, R₆, R₇, R₈, X₁, X₂, m, m1, n, n1 и s и другие переменные являются такими, как определено выше, если не указано иное. Кроме того, для целей синтеза соединения, получаемые согласно общим схемам I, II, III, IV и V, представлены с выбранными радикалами только для иллюстрации общей методики синтеза соединений формулы (I'), как определено в данном документе.

F. Способы применения соединений формулы (I') или формулы (I)

В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения, предупреждения, подавления симптомов или устранения заболевания или нарушения, на которые влияет модулирование уровней содержания белка IKZF2. Способ включает введение пациенту, нуждающемуся в лечении заболеваний или нарушений, на которые влияет модулирование уровней содержания белка IKZF2, эффективного количества соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения, предупреждения, подавления симптомов или устранения заболевания или нарушения, на которые влияет уменьшение уровней содержания белка IKZF2. Способ включает введение пациенту, нуждающемуся в лечении заболеваний или нарушений, на которые влияет уменьшение уровней содержания белка IKZF2, эффективного количества соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер.

Другой аспект настоящего изобретения относится к способу лечения, предупреждения, подавления симптомов или устранения заболевания или нарушения, на которые влияет снижение уровней содержания белка IKZF2. Способ включает введение пациенту, нуждающемуся в лечении заболеваний или нарушений, на которые влияет уменьшение или снижение уровней содержания белка IKZF2, эффективного количества соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, в изготовлении лекарственного препарата для лечения, предупреждения, подавления симптомов или устранения заболевания или нарушения, на которые влияет модулирование уровней содержания белка IKZF2.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, в изготовлении лекарственного препарата для лечения, предупреждения, подавления симптомов или устранения заболевания или нарушения, на которые влияет уменьшение уровней содержания белка IKZF2.

Другой аспект настоящего изобретения относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения в изготовлении лекарственного препарата для лечения, предупреждения, подавления симптомов или устранения заболевания или нарушения, на которые влияет модулирование уровней содержания белка IKZF2.

Другой аспект настоящего изобретения относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения в изготовлении лекарственного препарата для лечения, предупреждения, подавления симптомов или устранения заболевания или нарушения, на которые влияет уменьшение или снижение уровней содержания белка IKZF2.

В другом аспекте настоящее изобретение направлено на способ модулирования уровней содержания белка IKZF2. Способ включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер. В некоторых вариантах осуществления модулирование уровней содержания белка IKZF2 обеспечивают посредством разрушения белка IKZF2. В других вариантах осуществления модулирование уровней содержания белка IKZF2 обеспечивают посредством разрушения белка IKZF2, опосредованного лигазой Е3.

Другой аспект изобретения относится к способу лечения, предупреждения, подавления симптомов или устранения заболевания или нарушения, ассоциированных с уменьшением или снижением уровней содержания белка IKZF2, у пациента, причем способ включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер.

Настоящее изобретение также относится к применению средства разрушения IKZF2 для получения лекарственного препарата, применяемого в лечении, предупреждении, подавлении симптомов или устранении связанных с IKZF2 заболевания или нарушения, причем лекарственный препарат содержит соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер или композицию, содержащую соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения, предупреждения, подавления симптомов или устранения связанных с IKZF2 заболевания или нарушения, причем лекарственный препарат содержит соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер или композицию, содержащую соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу изготовления лекарственного препарата для лечения, предупреждения, подавления симптомов или устранения связанных с IKZF2 заболевания или нарушения, причем лекарственный препарат содержит соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер или композицию, содержащую соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер.

Другой аспект настоящего изобретения относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения в изготовлении лекарственного препарата для лечения заболевания или нарушения, ассоциированных с модулированием уровней содержания белка IKZF2. В некоторых вариантах осуществления модулирование уровней содержания IKZF2 обеспечивают посредством разрушения белка IKZF2. В некоторых вариантах осуществления модулирование уровней содержания белка IKZF2 обеспечивают посредством разрушения белка IKZF2, опосредованного лигазой Е3.

Другой аспект настоящего изобретения относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения в лечении заболевания, ассоциированного с модулированием уровней содержания белка IKZF2. В некоторых вариантах осуществления модулирование уровней содержания IKZF2 обеспечивают посредством разрушения белка IKZF2. В некоторых вариантах осуществления модулирование уровней содержания белка IKZF2 обеспечивают посредством разрушения белка IKZF2, опосредованного лигазой Е3.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, в лечении заболевания, ассоциированного с модулированием уровней содержания белка IKZF2. В некоторых вариантах осуществления модулирование уровней содержания белка IKZF2 обеспечивают посредством разрушения белка IKZF2. В некоторых вариантах осуществления модулирование уровней содержания белка IKZF2 обеспечивают посредством разрушения белка IKZF2, опосредованного лигазой Е3.

Другой аспект настоящего изобретения относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения в изготовлении лекарственного препарата для лечения заболевания или нарушения, ассоциированных с уменьшением уровней содержания белка IKZF2. В некоторых вариантах осуществления уменьшение уровней содержания IKZF2 обеспечивают посредством разрушения белка IKZF2. В некоторых вариантах осуществления уменьшение уровней содержания IKZF2 обеспечивают посредством разрушения белка IKZF2, опосредованного лигазой Е3.

Другой аспект настоящего изобретения относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения в лечении заболевания, ассоциированного с уменьшением уровней содержания белка IKZF2. В некоторых вариантах осуществления уменьшение уровней содержания IKZF2 обеспечивают посредством разрушения белка IKZF2. В некоторых вариантах осуществления уменьшение уровней содержания IKZF2 обеспечивают посредством разрушения белка IKZF2, опосредованного лигазой Е3.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, в лечении заболевания, ассоциированного с уменьшением уровней содержания белка IKZF2. В некоторых вариантах осуществления уменьшение уровней содержания белка IKZF2 обеспечивают посредством разрушения белка IKZF2. В некоторых вариантах осуществления уменьшение уровней содержания IKZF2 обеспечивают посредством разрушения белка IKZF2, опосредованного лигазой Е3.

Другой аспект настоящего изобретения относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения в изготовлении лекарственного препарата для лечения заболевания или нарушения, ассоциированных со снижением уровней содержания белка IKZF2. В некоторых вариантах осуществления снижение уровней содержания IKZF2 обеспечивают посредством разрушения белка IKZF2. В некоторых вариантах осуществления снижение уровней содержания белка IKZF2 обеспечивают посредством разрушения белка IKZF2, опосредованного лигазой Е3.

Другой аспект настоящего изобретения относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения в лечении заболевания, ассоциированного со снижением уровней содержания белка IKZF2. В некоторых вариантах осуществления снижение уровней содержания IKZF2 обеспечивают посредством разрушения белка IKZF2. В некоторых вариантах осуществления снижение уровней содержания белка IKZF2 обеспечивают посредством разрушения белка IKZF2, опосредованного лигазой Е3.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, в лечении заболевания, ассоциированного со снижением уровней содержания белка IKZF2. В некоторых вариантах осуществления уменьшение уровней содержания белка IKZF2 обеспечивают посредством разрушения белка IKZF2. В некоторых вариантах осуществления снижение уровней содержания белка IKZF2 обеспечивают посредством разрушения белка IKZF2, опосредованного лигазой Е3.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу ингибирования активности IKZF2 посредством разрушения IKZF2. В некоторых вариантах осуществления разрушение белков IKZF2 и IKZF4 опосредовано лигазой E3.

Другой аспект настоящего изобретения относится к применению соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для ингибирования активности IKZF2 посредством разрушения IKZF2. В некоторых вариантах осуществления разрушение белка IKZF2 опосредовано лигазой E3.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения с целью ингибирования активности IKZF2 посредством разрушения IKZF2. В некоторых вариантах осуществления разрушение белка IKZF2 опосредовано лигазой E3.

Другой аспект настоящего изобретения относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения в изготовлении лекарственного препарата для ингибирования активности IKZF2 посредством разрушения IKZF2. В некоторых вариантах осуществления разрушение белка IKZF2 опосредовано лигазой E3.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу ингибирования активности IKZF2 и IKZF4 посредством разрушения IKZF2 и IKZF4. В некоторых вариантах осуществления разрушение белков IKZF2 и IKZF4 опосредовано лигазой E3.

Другой аспект настоящего изобретения относится к применению соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для ингибирования активности IKZF2 и IKZF4 посредством разрушения IKZF2 и IKZF4. В некоторых вариантах осуществления разрушение белков IKZF2 и IKZF4 опосредовано лигазой E3.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения с целью ингибирования активности IKZF2 и IKZF4 посредством разрушения IKZF2 и IKZF4. В некоторых вариантах осуществления разрушение белков IKZF2 и IKZF4 опосредовано лигазой E3.

Другой аспект настоящего изобретения относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения в изготовлении лекарственного препарата для ингибирования активности IKZF2 и IKZF4 посредством разрушения IKZF2 и IKZF4. В некоторых вариантах осуществления разрушение белков IKZF2 и IKZF4 опосредовано лигазой E3.

В другом аспекте настоящее изобретение направлено на способ модулирования уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4. Способ включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер. В некоторых вариантах осуществления модулирование уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4 обеспечивают посредством разрушения белков IKZF2 и IKZF4. В других вариантах осуществления модулирование уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4 обеспечивают посредством разрушения белков IKZF2 и IKZF4, опосредованного лигазой Е3.

Другой аспект настоящего изобретения относится к способу лечения, предупреждения, подавления симптомов или устранения заболевания или нарушения, ассоциированных с модулированием, уменьшением или снижением уровней содержания белка IKZF4. Способ включает введение пациенту, нуждающемуся в лечении заболеваний или нарушений, ассоциированных с модулированием, уменьшением или снижением уровней содержания белка IKZF4, эффективного количества соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер. В некоторых вариантах осуществления модулирование, уменьшение или снижение уровней содержания белка IKZF4 обеспечивают посредством разрушения белка IKZF4. В некоторых вариантах осуществления модулирование, уменьшение или снижение уровней содержания белка IKZF4 обеспечивают посредством разрушения белка IKZF4, опосредованного лигазой Е3.

В другом аспекте настоящее изобретение направлено на способ модулирования, уменьшения или снижения уровней содержания белка IKZF4. Способ включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер. В некоторых вариантах осуществления модулирование, уменьшение или снижение уровней содержания белка IKZF4 обеспечивают посредством разрушения белка IKZF4. В других вариантах осуществления модулирование, уменьшение или снижение уровней содержания белка IKZF4 обеспечивают посредством разрушения белка IKZF4, опосредованного лигазой Е3.

Другой аспект настоящего изобретения относится к применению соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для лечения, предупреждения, подавления симптомов или устранения заболевания или нарушения, ассоциированных с модулированием, уменьшением или снижением уровней содержания белка IKZF4. В некоторых вариантах осуществления модулирование, уменьшение или снижение уровней содержания белка IKZF4 обеспечивают посредством разрушения белка IKZF4. В некоторых вариантах осуществления модулирование, уменьшение или снижение уровней содержания белка IKZF4 обеспечивают посредством разрушения белка IKZF4, опосредованного лигазой Е3.

Другой аспект настоящего изобретения относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения в лечении, предупреждении, подавлении симптомов или устранении заболевания или нарушения, ассоциированных с модулированием, уменьшением или снижением уровней содержания белка IKZF4. В некоторых вариантах осуществления модулирование, уменьшение или снижение уровней содержания белка IKZF4 обеспечивают посредством разрушения белка IKZF4. В некоторых вариантах осуществления модулирование, уменьшение или снижение уровней содержания белка IKZF4 обеспечивают посредством разрушения белка IKZF4, опосредованного лигазой Е3.

В другом аспекте настоящее изобретение направлено на соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер или композицию, содержащую соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения в изготовлении лекарственного препарата для лечения, предупреждения, подавления симптомов или устранения заболевания или нарушения, ассоциированных с модулированием, уменьшением или снижением уровней содержания белка IKZF4. В некоторых вариантах осуществления модулирование, уменьшение или снижение уровней содержания белка IKZF4 обеспечивают посредством разрушения белка IKZF4. В некоторых вариантах осуществления модулирование, уменьшение или снижение уровней содержания белка IKZF4 обеспечивают посредством разрушения белка IKZF4, опосредованного лигазой Е3.

Другой аспект настоящего изобретения относится к способу лечения, предупреждения, подавления симптомов или устранения заболевания или нарушения, ассоциированных с уменьшением уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4. Способ включает введение пациенту, нуждающемуся в лечении заболеваний или нарушений, ассоциированных с уменьшением уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4, эффективного количества соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер.

В другом аспекте настоящее изобретение направлено на способ уменьшения уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4. Способ включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер. В некоторых вариантах осуществления уменьшение уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4 обеспечивают посредством разрушения белков IKZF2 и IKZF4. В других вариантах осуществления уменьшение уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4 обеспечивают посредством разрушения белков IKZF2 и IKZF4, опосредованного лигазой Е3.

Другой аспект настоящего изобретения относится к способу лечения, предупреждения, подавления симптомов или устранения заболевания или нарушения, ассоциированных со снижением уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4. Способ включает введение пациенту, нуждающемуся в лечении заболеваний или нарушений, ассоциированных со снижением уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4, эффективного количества соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер.

В другом аспекте настоящее изобретение направлено на способ снижения уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4. Способ включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер. В некоторых вариантах осуществления снижение уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4 обеспечивают посредством разрушения белков IKZF2 и IKZF4. В других вариантах осуществления снижение уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4 обеспечивают посредством разрушения белков IKZF2 и IKZF4, опосредованного лигазой Е3.

Другой аспект настоящего изобретения относится к способу лечения, предупреждения, подавления симптомов или устранения заболевания или нарушения, ассоциированных с модулированием уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4 у пациента, причем способ включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер. В одном варианте осуществления заболевание или нарушение выбраны из группы, состоящей из рака и метастазирования.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения, предупреждения, подавления симптомов или устранения заболевания или нарушения, ассоциированных с уменьшением уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4 у пациента, причем способ включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер. В одном варианте осуществления заболевание или нарушение выбраны из группы, состоящей из рака и метастазирования.

Другой аспект настоящего изобретения относится к способу лечения, предупреждения, подавления симптомов или устранения заболевания или нарушения, ассоциированных со снижением уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4 у пациента, причем способ включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер. В одном варианте осуществления заболевание или нарушение выбраны из группы, состоящей из рака и метастазирования.

Настоящее изобретение также относится к применению модулятора уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4 для получения лекарственного препарата, применяемого в лечении, предупреждении, подавлении симптомов или устранении связанных с IKZF2 и IKZF4 заболевания или нарушения, причем лекарственный препарат содержит соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер или композицию, содержащую соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер. В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу изготовления лекарственного препарата для лечения, предупреждения, подавления симптомов или устранения связанных с IKZF2 и IKZF4 заболевания или нарушения, причем лекарственный препарат содержит соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер или композицию, содержащую соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер.

Другой аспект настоящего изобретения относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения в изготовлении лекарственного препарата для лечения заболевания, ассоциированного с модулированием уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4. В некоторых вариантах осуществления модулирование уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4 обеспечивают посредством разрушения белков IKZF2 и IKZF4. В других вариантах осуществления модулирование уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4 обеспечивают посредством разрушения белков IKZF2 и IKZF4, опосредованного лигазой Е3.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения в лечении заболевания, ассоциированного с модулированием уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4. В некоторых вариантах осуществления модулирование уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4 обеспечивают посредством разрушения белков IKZF2 и IKZF4. В других вариантах осуществления модулирование уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4 обеспечивают посредством разрушения белков IKZF2 и IKZF4, опосредованного лигазой Е3.

Другой аспект настоящего изобретения относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения в изготовлении лекарственного препарата для лечения заболевания, ассоциированного с уменьшением уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4. В некоторых вариантах осуществления уменьшение уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4 обеспечивают посредством разрушения белков IKZF2 и IKZF4. В других вариантах осуществления уменьшение уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4 обеспечивают посредством разрушения белков IKZF2 и IKZF4, опосредованного лигазой Е3.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения в лечении заболевания, ассоциированного с уменьшением уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4. В некоторых вариантах осуществления уменьшение IKZF2 и IKZF4 обеспечивают посредством разрушения белков IKZF2 и IKZF4. В других вариантах осуществления уменьшение уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4 обеспечивают посредством разрушения белков IKZF2 и IKZF4, опосредованного лигазой Е3.

Другой аспект настоящего изобретения относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения в изготовлении лекарственного препарата для лечения заболевания, ассоциированного со снижением уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4. В некоторых вариантах осуществления снижение уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4 обеспечивают посредством разрушения белков IKZF2 и IKZF4. В других вариантах осуществления снижение уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4 обеспечивают посредством разрушения белков IKZF2 и IKZF4, опосредованного лигазой Е3.

В другом аспекте настоящего изобретения относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения в лечении заболевания, ассоциированного со снижением уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4. В некоторых вариантах осуществления снижение уровней содержания IKZF2 и IKZF4 обеспечивают посредством разрушения белков IKZF2 и IKZF4. В других вариантах осуществления снижение уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4 обеспечивают посредством разрушения белков IKZF2 и IKZF4, опосредованного лигазой Е3.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, в лечении заболевания, ассоциированного с модулированием уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4. В некоторых вариантах осуществления модулирование уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4 обеспечивают посредством разрушения белков IKZF2 и IKZF4. В других вариантах осуществления модулирование уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4 обеспечивают посредством разрушения белков IKZF2 и IKZF4, опосредованного лигазой Е3.

Другой аспект настоящего изобретения относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения в лечении связанных с IKZF2 заболевания или нарушения путем уменьшения или снижения уровней содержания белка IKZF2, причем уменьшение или снижение уровней содержания белка IKZF2 обеспечивает лечение связанных с IKZF2 заболевания или нарушения.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, в лечении связанных с IKZF2 заболевания или нарушения путем уменьшения или снижения уровней содержания белка IKZF2, причем уменьшение или снижение уровней содержания белка IKZF2 обеспечивает лечение связанных с IKZF2 заболевания или нарушения.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, в изготовлении лекарственного препарата для лечения связанных с IKZF2 заболевания или нарушения путем уменьшения или снижения уровней содержания белка IKZF2, причем уменьшение или снижение уровней содержания белка IKZF2 обеспечивает лечение связанных с IKZF2 заболевания или нарушения.

Другой аспект настоящего изобретения относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения в лечении связанных с IKZF2 и IKZF4 заболевания или нарушения путем уменьшения или снижения уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4, причем уменьшение или снижение уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4 обеспечивает лечение связанных с IKZF2 и IKZF4 заболевания или нарушения.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, в лечении связанных с IKZF2 и IKZF4 заболевания или нарушения путем уменьшения или снижения уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4, причем уменьшение или снижение уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4 обеспечивает лечение связанных с IKZF2 и IKZF4 заболевания или нарушения.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, в изготовлении лекарственного препарата для лечения связанных с IKZF2 и IKZF4 заболевания или нарушения путем уменьшения или снижения уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4, причем уменьшение или снижение уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4 обеспечивает лечение связанных с IKZF2 и IKZF4 заболевания или нарушения.

Другой аспект настоящего изобретения относится к способу лечения рака. Способ включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, в лечении рака.

Другой аспект настоящего изобретения относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения в изготовлении лекарственного препарата для лечения рака.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения в лечении рака.

Другой аспект настоящего изобретения относится к способу лечения связанного с IKZF2 рака. Способ включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, в лечении связанного с IKZF2 рака.

Другой аспект настоящего изобретения относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения в изготовлении лекарственного препарата для лечения связанного с IKZF2 рака.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения в лечении связанного с IKZF2 рака.

Другой аспект настоящего изобретения относится к способу лечения связанного с IKZF2 и связанного с IKZF4 рака. Способ включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, в лечении связанного с IKZF2 и связанного с IKZF4 рака.

Другой аспект настоящего изобретения относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения в изготовлении лекарственного препарата для лечения связанного с IKZF2 и связанного с IKZF4 рака.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения в лечении связанного с IKZF2 и связанного с IKZF4 рака.

Другой аспект настоящего изобретения относится к способу лечения рака, на который влияет модулирование, уменьшение или снижение уровней содержания белка IKZF2. Способ включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, в лечении рака, на который влияет модулирование, уменьшение или снижение уровней содержания белка IKZF2.

Другой аспект настоящего изобретения относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения в изготовлении лекарственного препарата для лечения рака, на который влияет модулирование, уменьшение или снижение уровней содержания белка IKZF2.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения в лечении рака, на который влияет модулирование, уменьшение или снижение уровней содержания белка IKZF2.

Другой аспект настоящего изобретения относится к способу лечения рака, на который влияет модулирование, уменьшение или снижение уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4. Способ включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, в лечении рака, на который влияет модулирование, уменьшение или снижение уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4.

Другой аспект настоящего изобретения относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения в изготовлении лекарственного препарата для лечения рака, на который влияет модулирование, уменьшение или снижение уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения в лечении рака, на который влияет модулирование, уменьшение или снижение уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4.

Другой аспект настоящего изобретения относится к способу разрушения IKZF2. Способ включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер. В некоторых вариантах осуществления разрушение белка IKZF2 опосредовано лигазой E3.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, с целью разрушения IKZF2. В некоторых вариантах осуществления разрушение белка IKZF2 опосредовано лигазой E3.

Другой аспект настоящего изобретения относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения с целью разрушения IKZF2. В некоторых вариантах осуществления разрушение белка IKZF2 опосредовано лигазой E3.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения в изготовлении лекарственного препарата для разрушения IKZF2. В некоторых вариантах осуществления разрушение белка IKZF2 опосредовано лигазой E3.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу модулирования уровней содержания белка IKZF2 посредством разрушения IKZF2. В некоторых вариантах осуществления разрушение белка IKZF2 опосредовано лигазой E3.

Другой аспект настоящего изобретения относится к применению соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, с целью модулирования уровней содержания белка IKZF2 посредством разрушения IKZF2. В некоторых вариантах осуществления разрушение белка IKZF2 опосредовано лигазой E3.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения с целью модулирования уровней содержания белка IKZF2 посредством разрушения IKZF2. В некоторых вариантах осуществления разрушение белка IKZF2 опосредовано лигазой E3.

Другой аспект настоящего изобретения относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения в изготовлении лекарственного препарата для модулирования уровней содержания белка IKZF2 посредством разрушения IKZF2. В некоторых вариантах осуществления разрушение белка IKZF2 опосредовано лигазой E3.

Другой аспект настоящего изобретения относится к способу лечения связанных с IKZF2 заболевания или нарушения у пациента, нуждающегося в этом, путем модулирования уровней содержания белка IKZF2 посредством разрушения IKZF2. В некоторых вариантах осуществления разрушение белка IKZF2 опосредовано лигазой E3.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для лечения связанных с IKZF2 заболевания или нарушения у пациента, нуждающегося в этом, путем модулирования уровней содержания белка IKZF2 посредством разрушения IKZF2. В некоторых вариантах осуществления разрушение белка IKZF2 опосредовано лигазой E3.

Другой аспект настоящего изобретения относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения в лечении связанных с IKZF2 заболевания или нарушения у пациента, нуждающегося в этом, путем модулирования уровней содержания белка IKZF2 посредством разрушения IKZF2. В некоторых вариантах осуществления разрушение белка IKZF2 опосредовано лигазой E3.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения в изготовлении лекарственного препарата для лечения связанных с IKZF2 заболевания или нарушения у пациента, нуждающегося в этом, путем модулирования уровней содержания белка IKZF2 посредством разрушения IKZF2. В некоторых вариантах осуществления разрушение белка IKZF2 опосредовано лигазой E3.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу разрушения IKZF2. Способ включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер. В некоторых вариантах осуществления разрушение белка IKZF2 опосредовано лигазой E3.

Другой аспект настоящего изобретения относится к применению соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера с целью разрушения IKZF2. В некоторых вариантах осуществления разрушение белка IKZF2 опосредовано лигазой E3.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения с целью разрушения IKZF2. В некоторых вариантах осуществления разрушение белка IKZF2 опосредовано лигазой E3.

Другой аспект настоящего изобретения относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения в изготовлении лекарственного препарата для разрушения IKZF2. В некоторых вариантах осуществления разрушение белка IKZF2 опосредовано лигазой E3.

Другой аспект настоящего изобретения относится к способу уменьшения уровня пролиферации клетки, причем способ включает приведение клетки в контакт с соединением формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемыми солью, гидратом, сольватом, пролекарством на его основе, его стереоизомером или таутомером или композицией, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, что обеспечивает уменьшение уровней содержания белка IKZF2. В некоторых вариантах осуществления уменьшение уровней содержания белка IKZF2 обеспечивают посредством разрушения белка IKZF2. В некоторых вариантах осуществления уменьшение уровней содержания белка IKZF2 обеспечивают посредством разрушения белка IKZF2, опосредованного лигазой Е3.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для уменьшения уровня пролиферации клетки путем уменьшения уровней содержания белка IKZF2. В некоторых вариантах осуществления уменьшение уровней содержания белка IKZF2 обеспечивают посредством разрушения белка IKZF2. В некоторых вариантах осуществления уменьшение уровней содержания белка IKZF2 обеспечивают посредством разрушения белка IKZF2, опосредованного лигазой Е3.

Другой аспект настоящего изобретения относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения с целью уменьшения уровня пролиферации клетки с помощью уровней содержания белка IKZF 2. В некоторых вариантах осуществления уменьшение уровней содержания белка IKZF2 обеспечивают посредством разрушения белка IKZF2. В некоторых вариантах осуществления уменьшение уровней содержания белка IKZF2 обеспечивают посредством разрушения белка IKZF2, опосредованного лигазой Е3.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения в изготовлении лекарственного препарата для уменьшения уровня пролиферации клетки путем уменьшения уровней содержания белка IKZF2. В некоторых вариантах осуществления уменьшение уровней содержания белка IKZF2 обеспечивают посредством разрушения белка IKZF2. В некоторых вариантах осуществления уменьшение уровней содержания белка IKZF2 обеспечивают посредством разрушения белка IKZF2, опосредованного лигазой Е3.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения, предупреждения, подавления симптомов или устранения заболевания или нарушения, на которые влияет модулирование уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4. Способ включает введение пациенту, нуждающемуся в лечении заболеваний или нарушений, на которые влияет модулирование уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4, эффективного количества соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер.

Другой аспект настоящего изобретения относится к способу лечения, предупреждения, подавления симптомов или устранения заболевания или нарушения, на которые влияет уменьшение или снижение уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4. Способ включает введение пациенту, нуждающемуся в лечении заболеваний или нарушений, на которые влияет уменьшение или снижение уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4, эффективного количества соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, в изготовлении лекарственного препарата для лечения, предупреждения, подавления симптомов или устранения заболевания или нарушения, на которые влияет модулирование уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4.

Другой аспект настоящего изобретения относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения в изготовлении лекарственного препарата для лечения, предупреждения, подавления симптомов или устранения заболевания или нарушения, на которые влияет модулирование уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, в изготовлении лекарственного препарата для лечения, предупреждения, подавления симптомов или устранения заболевания или нарушения, на которые влияет уменьшение уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4.

Другой аспект настоящего изобретения относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения в изготовлении лекарственного препарата для лечения, предупреждения, подавления симптомов или устранения заболевания или нарушения, на которые влияет уменьшение уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4.

Другой аспект настоящего изобретения относится к способу разрушения IKZF2 и IKZF4. Способ включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер. В некоторых вариантах осуществления разрушение белков IKZF2 и IKZF4 опосредовано лигазой E3.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, с целью разрушения IKZF2 и IKZF4. В некоторых вариантах осуществления разрушение белков IKZF2 и IKZF4 опосредовано лигазой E3.

Другой аспект настоящего изобретения относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения с целью разрушения IKZF2 и IKZF4. В некоторых вариантах осуществления разрушение белков IKZF2 и IKZF4 опосредовано лигазой E3.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения в изготовлении лекарственного препарата для разрушения IKZF2 и IKZF4. В некоторых вариантах осуществления разрушение белков IKZF2 и IKZF4 опосредовано лигазой E3.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу модулирования уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4 посредством разрушения IKZF2 и IKZF4. В некоторых вариантах осуществления разрушение белков IKZF2 и IKZF4 опосредовано лигазой E3.

Другой аспект настоящего изобретения относится к применению соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, с целью модулирования уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4 посредством разрушения IKZF2 и IKZF4. В некоторых вариантах осуществления разрушение белков IKZF2 и IKZF4 опосредовано лигазой E3.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения с целью модулирования уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4 посредством разрушения IKZF2 и IKZF4. В некоторых вариантах осуществления разрушение белков IKZF2 и IKZF4 опосредовано лигазой E3.

Другой аспект настоящего изобретения относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения в изготовлении лекарственного препарата для модулирования уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4 посредством разрушения IKZF2 и IKZF4. В некоторых вариантах осуществления разрушение белков IKZF2 и IKZF4 опосредовано лигазой E3.

Другой аспект настоящего изобретения относится к способу лечения связанных с IKZF2 и связанных с IKZF4 заболевания или нарушения у пациента, нуждающегося в этом, путем модулирования уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4 посредством разрушения IKZF2 и IKZF4. В некоторых вариантах осуществления разрушение белков IKZF2 и IKZF4 опосредовано лигазой E3.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для лечения связанных с IKZF2 и связанных с IKZF4 заболевания или нарушения у пациента, нуждающегося в этом, путем модулирования уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4 посредством разрушения IKZF2 и IKZF4. В некоторых вариантах осуществления разрушение белков IKZF2 и IKZF4 опосредовано лигазой E3.

Другой аспект настоящего изобретения относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения в лечении связанных с IKZF2 и связанных с IKZF4 заболевания или нарушения у пациента, нуждающегося в этом, путем модулирования уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4 посредством разрушения IKZF2 и IKZF4. В некоторых вариантах осуществления разрушение белков IKZF2 и IKZF4 опосредовано лигазой E3.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения в изготовлении лекарственного препарата для лечения связанных с IKZF2 или связанных с IKZF4 заболевания или нарушения у пациента, нуждающегося в этом, путем модулирования уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4 посредством разрушения IKZF2 и IKZF4. В некоторых вариантах осуществления разрушение белков IKZF2 и IKZF4 опосредовано лигазой E3.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу разрушения IKZF2 и IKZF4. Способ включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер. В некоторых вариантах осуществления разрушение белков IKZF2 и IKZF4 опосредовано лигазой E3.

Другой аспект настоящего изобретения относится к применению соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, с целью разрушения IKZF2 и IKZF4. В некоторых вариантах осуществления разрушение белков IKZF2 и IKZF4 опосредовано лигазой E3.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения с целью разрушения IKZF2 и IKZF4. В некоторых вариантах осуществления разрушение белков IKZF2 и IKZF4 опосредовано лигазой E3.

Другой аспект настоящего изобретения относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения в изготовлении лекарственного препарата для разрушения IKZF2 и IKZF4. В некоторых вариантах осуществления разрушение белков IKZF2 и IKZF4 опосредовано лигазой E3.

Другой аспект настоящего изобретения относится к способу уменьшения уровня пролиферации клетки, причем способ включает приведение клетки в контакт с соединением формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемыми солью, гидратом, сольватом, пролекарством на его основе, его стереоизомером или таутомером или композицией, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, и обеспечения уменьшения уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4. В некоторых вариантах осуществления уменьшение уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4 обеспечивают посредством разрушения белков IKZF2 и IKZF4. В других вариантах осуществления уменьшение уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4 обеспечивают посредством разрушения белков IKZF2 и IKZF4, опосредованного лигазой Е3.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для уменьшения уровня пролиферации клетки путем уменьшения уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4. В некоторых вариантах осуществления уменьшение уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4 обеспечивают посредством разрушения белков IKZF2 и IKZF4. В других вариантах осуществления уменьшение уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4 обеспечивают посредством разрушения белков IKZF2 и IKZF4, опосредованного лигазой Е3.

Другой аспект настоящего изобретения относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения с целью уменьшения уровня пролиферации клетки путем уменьшения уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4. В некоторых вариантах осуществления уменьшение уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4 обеспечивают посредством разрушения белков IKZF2 и IKZF4. В других вариантах осуществления уменьшение уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4 обеспечивают посредством разрушения белков IKZF2 и IKZF4, опосредованного лигазой Е3.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения в изготовлении лекарственного препарата для уменьшения уровня пролиферации клетки путем уменьшения уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4. В некоторых вариантах осуществления уменьшение уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4 обеспечивают посредством разрушения белков IKZF2 и IKZF4. В других вариантах осуществления уменьшение уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4 обеспечивают посредством разрушения белков IKZF2 и IKZF4, опосредованного лигазой Е3.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения связанных с IKZF2 заболевания или нарушения. Способ включает стадию введения субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер.

Другой аспект настоящего изобретения относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения в лечении связанных с IKZF2 заболевания или нарушения.

Другой аспект настоящего изобретения относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения в изготовлении лекарственного препарата для лечения связанных с IKZF2 заболевания или нарушения.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения связанных с IKZF2 и связанных с IKZF4 заболевания или нарушения. Способ включает стадию введения субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер.

Другой аспект настоящего изобретения относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения в лечении связанных с IKZF2 и связанных с IKZF4 заболевания или нарушения.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, в изготовлении лекарственного препарата для лечения связанных с IKZF2 и связанных с IKZF4 заболевания или нарушения.

Другой аспект настоящего изобретения относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения в изготовлении лекарственного препарата для лечения связанных с IKZF2 и связанных с IKZF4 заболевания или нарушения.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу уменьшения уровней содержания белка IKZF2. Способ включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер.

Другой аспект настоящего изобретения относится к способу уменьшения уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4. Способ включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения с целью уменьшения уровней содержания белка IKZF2.

Другой аспект настоящего изобретения относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения с целью уменьшения уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4.

Другой аспект настоящего изобретения относится к применению соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, в изготовлении лекарственного препарата для уменьшения уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу уменьшения уровней содержания белка IKZF2, причем уменьшение уровней содержания белка IKZF2 обеспечивает лечение или уменьшение тяжести заболевания или нарушения. Способ включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер.

Другой аспект настоящего изобретения относится к способу уменьшения уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4, причем уменьшение уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4 обеспечивает лечение или уменьшение тяжести заболевания или нарушения. Способ включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения с целью уменьшения уровней содержания белка IKZF2, причем уменьшение уровней содержания белка IKZF2 обеспечивает лечение или уменьшение тяжести заболевания или нарушения.

Другой аспект настоящего изобретения относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения с целью уменьшения уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4, причем уменьшение уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4 обеспечивает лечение или уменьшение тяжести заболевания или нарушения.

Другой аспект настоящего изобретения относится к применению соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, в изготовлении лекарственного препарата для уменьшения уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4, причем уменьшение уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4 обеспечивает лечение или уменьшение тяжести заболевания или нарушения.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения заболевания или нарушения путем уменьшения уровней содержания белка IKZF2, причем уменьшение уровней содержания белка IKZF2 обеспечивает лечение или уменьшение тяжести заболевания или нарушения. Способ включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер.

Другой аспект настоящего изобретения относится к способу лечения заболевания или нарушения путем уменьшения уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4, причем уменьшение уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4 обеспечивает лечение или уменьшение тяжести заболевания или нарушения. Способ включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения в лечении заболевания или нарушения путем уменьшения уровней содержания белка IKZF2, причем уменьшение уровней содержания белка IKZF2 обеспечивает лечение или уменьшение тяжести заболевания или нарушения.

Другой аспект настоящего изобретения относится к соединению формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемым соли, гидрату, сольвату, пролекарству на его основе, его стереоизомеру или таутомеру или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, для применения в лечении заболевания или нарушения путем уменьшения уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4, причем уменьшение уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4 обеспечивает лечение или уменьшение тяжести заболевания или нарушения.

Другой аспект настоящего изобретения относится к применению соединения формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата, пролекарства на его основе, его стереоизомера или таутомера или композиции, содержащей соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер, в изготовлении лекарственного препарата для лечения заболевания или нарушения путем уменьшения уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4, причем уменьшение уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4 обеспечивает лечение или уменьшение тяжести заболевания или нарушения.

Соединения по настоящему изобретению можно использовать для лечения видов рака, включающих без ограничения липосаркому, нейробластому, глиобластому, рак мочевого пузыря, рак надпочечников, множественную миелому, колоректальный рак, немелкоклеточный рак легкого, ассоциированный с вирусом папилломы человека рак шейки матки, рак ротоглотки, рак полового члена, анального канала, щитовидной железы или влагалища или ассоциированную с вирусом Эпшетейна-Барр носоглоточную карциному, рак желудка, рак прямой кишки, рак щитовидной железы, лимфому Ходжкина или диффузную крупноклеточную В-клеточную лимфому, рак предстательной железы, карциному молочной железы, лимфомы, лейкоз, миелому, карциному мочевого пузыря, рак толстой кишки, меланому кожи, гепатоцеллюлярную карциному, рак эндометрия, рак яичников, рак шейки матки, рак легкого, рак почки, мультиформную глиобластому, глиому, рак щитовидной железы, опухоль паращитовидной железы, рак носоглотки, рак языка, рак поджелудочной железы, рак пищевода, холангиокарциному, рак желудка и саркомы мягких тканей, выбранные из рабдомиосаркомы (RMS), синовиальной саркомы, остеосаркомы, видов рабдоидного рака, рака, иммунный ответ на который недостаточен, рака с иммуногенными свойствами, саркомы Юинга, немелкоклеточный рак легкого (NSCLC), трижды негативный рак молочной железы (TNBC), рак носоглотки (NPC), колоректальный рак с микросателлитной стабильностью (mssCRC), тимому, карциноид, острый миелогенный лейкоз и стромальную опухоль желудочно-кишечного тракта (GIST).

В некоторых вариантах осуществления способов, указанных выше, связанное с IKZF2 заболевание или нарушение представляет собой заболевание или нарушение, включающее без ограничения липосаркому, нейробластому, глиобластому, рак мочевого пузыря, рак надпочечников, множественную миелому, колоректальный рак, немелкоклеточный рак легкого, ассоциированный с вирусом папилломы человека рак шейки матки, рак ротоглотки, рак полового члена, анального канала, щитовидной железы или влагалища или ассоциированную с вирусом Эпшетейна-Барр носоглоточную карциному, рак желудка, рак прямой кишки, рак щитовидной железы, лимфому Ходжкина или диффузную крупноклеточную В-клеточную лимфому, рак предстательной железы, карциному молочной железы, лимфомы, лейкоз, миелому, карциному мочевого пузыря, рак толстой кишки, меланому кожи, гепатоцеллюлярную карциному, рак эндометрия, рак яичников, рак шейки матки, рак легкого, рак почки, мультиформную глиобластому, глиому, рак щитовидной железы, опухоль паращитовидной железы, рак носоглотки, рак языка, рак поджелудочной железы, рак пищевода, холангиокарциному, рак желудка и саркому мягких тканей, выбранную из рабдомиосаркомы (RMS), синовиальной саркомы, остеосаркомы, видов рабдоидного рака, рака, иммунный ответ на который недостаточен, рака с иммуногенными свойствами, саркомы Юинга, немелкоклеточный рак легкого (NSCLC), трижды негативный рак молочной железы (TNBC), рак носоглотки (NPC), колоректальный рак с микросателлитной стабильностью (mssCRC), тимому, карциноид, острый миелогенный лейкоз и стромальную опухоль желудочно-кишечного тракта (GIST).

В некоторых вариантах осуществления способов, указанных выше, заболевание или нарушение, на которые влияет модулирование, уменьшение или снижение уровней содержания белка IKZF2 и/или IKZF4, представляет собой заболевание или нарушение, включающее без ограничения липосаркому, нейробластому, глиобластому, рак мочевого пузыря, рак надпочечников, множественную миелому, колоректальный рак, немелкоклеточный рак легкого, ассоциированный с вирусом папилломы человека рак шейки матки, рак ротоглотки, рак полового члена, анального канала, щитовидной железы или влагалища или ассоциированную с вирусом Эпшетейна-Барр носоглоточную карциному, рак желудка, рак прямой кишки, рак щитовидной железы, лимфому Ходжкина или диффузную крупноклеточную В-клеточную лимфому, рак предстательной железы, карциному молочной железы, лимфомы, лейкоз, миелому, карциному мочевого пузыря, рак толстой кишки, меланому кожи, гепатоцеллюлярную карциному, рак эндометрия, рак яичников, рак шейки матки, рак легкого, рак почки, мультиформную глиобластому, глиому, рак щитовидной железы, опухоль паращитовидной железы, рак носоглотки, рак языка, рак поджелудочной железы, рак пищевода, холангиокарциному, рак желудка и саркому мягких тканей, выбранную из рабдомиосаркомы (RMS), синовиальной саркомы, остеосаркомы, видов рабдоидного рака, рака, иммунный ответ на который недостаточен, рака с иммуногенными свойствами, саркомы Юинга, немелкоклеточный рак легкого (NSCLC), трижды негативный рак молочной железы (TNBC), рак носоглотки (NPC), колоректальный рак с микросателлитной стабильностью (mssCRC), тимому, карциноид, острый миелогенный лейкоз и стромальную опухоль желудочно-кишечного тракта (GIST).

В некоторых вариантах осуществления способов, указанных выше, связанный с IKZF2 рак и связанный с IKZF2 и связанный с IKZF4 рак представляют собой рак, выбранный из липосаркомы, нейробластомы, глиобластомы, рака мочевого пузыря, рака надпочечников, множественной миеломы, колоректального рака, немелкоклеточного рака легкого, ассоциированного с вирусом папилломы человека рака шейки матки, рака ротоглотки, рака полового члена, анального канала, щитовидной железы или влагалища или ассоциированной с вирусом Эпшетейна-Барр носоглоточной карциномы, рака желудка, рака прямой кишки, рака щитовидной железы, лимфомы Ходжкина или диффузной крупноклеточной В-клеточной лимфомы, рака предстательной железы, карциномы молочной железы, лимфом, лейкоза, миеломы, карциномы мочевого пузыря, рака толстой кишки, меланомы кожи, гепатоцеллюлярной карциномы, рака эндометрия, рака яичников, рака шейки матки, рака легкого, рака почек, мультиформной глиобластомы, глиомы, рака щитовидной железы, опухоли паращитовидной железы, рака носоглотки, рака языка, рака поджелудочной железы, рака пищевода, холангиокарциномы, рака желудка и саркомы мягких тканей, выбранной из рабдомиосаркомы (RMS), синовиальной саркомы, остеосаркомы, видов рабдоидного рака, рака, иммунный ответ на который недостаточен, рака с иммуногенными свойствами, саркомы Юинга, немелкоклеточного рака легкого (NSCLC), трижды негативного рака молочной железы (TNBC), рака носоглотки (NPC), колоректального рака с микросателлитной стабильностью (mssCRC), тимомы, карциноида, острого миелогенного лейкоза и стромальной опухоли желудочно-кишечного тракта (GIST).

В некоторых вариантах осуществления указанных выше способов обеспечивают модулирование уровней содержания белка IKZF2 посредством разрушения IKZF2. В некоторых вариантах осуществления указанных выше способов обеспечивают уменьшение уровней содержания белка IKZF2 посредством разрушения IKZF2. В некоторых вариантах осуществления указанных выше способов обеспечивают снижение уровней содержания белка IKZF2 посредством разрушения IKZF2.

В некоторых вариантах осуществления указанных выше способов обеспечивают модулирование уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4 посредством разрушения IKZF2 и IKZF4. В некоторых вариантах осуществления указанных выше способов обеспечивают уменьшение уровней содержания белков IKZF2 и IKZF4 посредством разрушения IKZF2 и IKZF4. В некоторых вариантах осуществления указанных выше способов обеспечивают снижение уровней содержания белка IKZF2 посредством разрушения IKZF2 и IKZF4.

Одним терапевтическим применением соединений или композиций по настоящему изобретению, которые модулируют уровни содержания белка IKZF2 и/или IKZF4 посредством разрушения IKZF2 и/или IKZF4, является обеспечение лечения пациентов или субъектов, страдающих раком и метастазированием.

Раскрытые соединения по настоящему изобретению можно вводить в эффективных количествах для лечения или предупреждения нарушения и/или предупреждения его развития у субъектов.

Соединения по настоящему изобретению можно вводить в терапевтически эффективных количествах при комбинированной терапии с одним или несколькими терапевтическими средствами (фармацевтическими комбинациями) или способами лечения, например, видами немедикаментозной терапии. Например, синергетические эффекты могут возникать с другими антипролиферативными, противораковыми, иммуномодулирующими или противовоспалительными веществами. Если соединения по настоящему изобретению вводят в сочетании с другими средствами терапии, дозировки совместно вводимых соединений, разумеется, будут варьироваться в зависимости от типа применяемого дополнительного лекарственного средства, от конкретного применяемого лекарственного средства, от состояния, подвергаемого лечению, и т. д.

Комбинированная терапия включает введение рассматриваемых соединений в дополнительной комбинации с другими биологически активными ингредиентами (такими как без ограничения второе и другое противоопухолевое средство или второе средство, которое нацелено на Helios или другую онкологическую мишень) и видами немедикаментозной терапии (такими как без ограничения хирургическое вмешательство или лучевая терапия). Например, соединения по настоящему изобретению могут быть использованы в комбинации с другими фармацевтически активными соединениями, предпочтительно соединениями, которые способны усиливать действие соединений по настоящему изобретению. Соединения по настоящему изобретению можно вводить одновременно (в виде единого препарата или отдельного препарата) или последовательно с другим лекарственным средством терапии или способом лечения. Как правило, комбинированная терапия предусматривает введение двух или более лекарственных средств в течение одного цикла или курса терапии.

G. Пути введения, фармацевтические композиции и дозировка соединений формулы (I') или формулы (I)

Введение раскрытых соединений можно осуществлять любым способом введения терапевтических средств. Данные способы включают системное или местное введение, такое как пероральное, назальное, парентеральное, чрескожное, подкожное, вагинальное, буккальное, ректальное или местное введение.

В зависимости от предполагаемого способа введения раскрытые композиции могут находиться в твердой, полутвердой или жидкой лекарственной форме, такой как, например, препараты для инъекций, таблетки, суппозитории, пилюли, капсулы с замедленным высвобождением, эликсиры, настойки, эмульсии, сиропы. порошки, жидкости, суспензии или тому подобное, иногда в стандартных дозах и в соответствии с обычной фармацевтической практикой. Аналогичным образом, их также можно вводить в форме для внутривенного (как болюсного, так и инфузионного), внутрибрюшинного, подкожного или внутримышечного введения и во всех используемых формах, хорошо известных специалистам в области фармацевтики.

Иллюстративными фармацевтическими композициями являются таблетки и желатиновые капсулы, содержащие соединение данного изобретения и фармацевтически приемлемый носитель, такой как а) разбавитель, например очищенную воду, триглицеридные масла, такие как гидрогенизированное или частично гидрогенизированное растительное масло, или их смеси, кукурузное масло, оливковое масло, подсолнечное масло, сафлоровое масло, рыбий жир, такой как EPA или DHA, или их сложные эфиры или триглицериды или их смеси, омега-3 жирные кислоты или их производные, лактоза, декстроза, сахароза, маннит, сорбит, целлюлоза, сахарин натрия, глюкоза и/или глицин; b) смазывающее вещество, например диоксид кремния, тальк, стеариновая кислота, ее магниевая или кальциевая соль, олеат натрия, стеарат натрия, стеарат магния, бензоат натрия, ацетат натрия, хлорид натрия и/или полиэтиленгликоль; для таблеток также; c) связующее вещество, например, алюмосиликат магния, крахмальная паста, желатин, трагакант, метилцеллюлоза, карбоксиметилцеллюлоза натрия, карбонат магния, натуральные сахара, такие как глюкоза или бета-лактоза, кукурузные подсластители, натуральные и синтетические смолы, такие как акация, трагакант или натрия альгинат, воски и/или поливинилпирролидон, если желательно; d) разрыхлитель, например крахмалы, агар, метилцеллюлоза, бентонит, ксантановая камедь, альгиновая кислота или ее натриевая соль или шипучие смеси; е) абсорбент, краситель, ароматизатор и подсластитель; f) эмульгатор или диспергирующее средство, такое как Tween 80, Labrasol, HPMC, DOSS, Caproyl 909, Labrafac, Labrafil, Peceol, Transcutol, Capmul MCM, Capmul PG-12, Captex 355, Gelucire, витамин E TGPS или другой приемлемый эмульгатор; и/или g) средство, которое усиливает абсорбцию соединения, такой как циклодекстрин, гидроксипропилциклодекстрин, PEG400, PEG200.

Жидкие композиции, особенно композиции для инъекций, можно, например, получить посредством растворения, диспергирования и т. п. Например, раскрытое соединение растворяют или смешивают с фармацевтически приемлемым растворителем, таким как, например, вода, физиологический раствор, водный раствор декстрозы, глицерин, этанол и т. п., чтобы тем самым образовать изотонический раствор или суспензию для инъекции. Для солюбилизации раскрытых соединений можно использовать белки, такие как альбумин, частицы хиломикрона или сывороточные белки.

Раскрытые соединения также можно составлять в виде суппозитория, который может быть приготовлен из жирных эмульсий или суспензий; с использованием полиалкиленгликолей, таких как пропиленгликоль, в качестве носителя.

Раскрытые соединения также можно вводить в форме систем липосомной доставки, таких как небольшие моноламеллярные везикулы, большие моноламелярные везикулы и мультиламеллярные везикулы. Липосомы можно образовывать из различных фосфолипидов, содержащих холестерин, стеариламин или фосфатидилхолины.

В некоторых вариантах осуществления пленка липидных компонентов гидратируется водным раствором лекарственного средства до образования липидного слоя, инкапсулирующего лекарственное средство, как описано в патенте США № № 5262564, который включен в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте.

Раскрытые соединения также могут быть доставлены с использованием моноклональных антител в качестве индивидуальных носителей, с которыми связаны раскрытые соединения. Раскрытые соединения также могут быть связаны с растворимыми полимерами в качестве нацеленных лекарственных носителей. Такие полимеры могут включать поливинилпирролидон, пирановый сополимер, полигидроксипропилметакриламид-фенол, полигидроксиэтиласпанамидфенол или полиэтиленоксидполилизин, замещенный пальмитоильными остатками. Кроме того, раскрытые соединения могут быть соединены с биоразлагаемыми полимерами, которые используются для достижения контролируемого высвобождения лекарственного средства, например, полимолочной кислотой, полиэпсилон-капролактоном, полигидроксимасляной кислотой, полиортоэфирами, полиацеталями, полидигидропиранами, полицианоакрилатами и сшитыми или амфипатическими блок-сополимерами гидрогелей. В одном варианте осуществления раскрытые соединения ковалентно не связаны с полимером, например полимером, представляющим собой поликарбоновую кислоту, или полиакрилатом.

Инъекционное парентеральное введение обычно используется для подкожных, внутримышечных или внутривенных инъекций и инфузий. Препараты для инъекций можно готовить в обычных формах, либо в виде жидких растворов или суспензий, либо в твердых формах, подходящих для растворения в жидкости перед инъекцией.

Другой аспект настоящего изобретения относится к фармацевтическим композициям, содержащим соединение формулы (I') или формулы (I) и фармацевтически приемлемый носитель. Фармацевтически приемлемый носитель может дополнительно включать вспомогательное вещество, разбавитель или поверхностно-активное вещество.

Композиции можно получать в соответствии с традиционными способами смешивания, гранулирования или нанесения покрытия соответственно, и фармацевтические композиции по настоящему изобретению могут содержать от приблизительно 0,1% до приблизительно 99%, от приблизительно 5% до приблизительно 90% или от приблизительно 1% до приблизительно 20% раскрытого соединения по весу или объему.

В одном варианте осуществления в настоящем изобретении предусмотрен набор, содержащий две или более отдельные фармацевтические композиции, по меньшей мере одна из которых содержит соединение по настоящему изобретению. В одном варианте осуществления набор содержит средства для раздельного вмещения указанных композиций, такие как контейнер, разделенная бутылка или разделенный пакет из фольги. Примером такого набора является блистерная упаковка, как правило, применяемая для упаковки таблеток, капсул и т. п.

Набор по настоящему изобретению можно применять для введения различных лекарственных форм, например, для перорального и парентерального применения, для введения отдельных композиций с различными интервалами между введениями доз или для титрования отдельных композиций одна относительно другой. В целях содействия соблюдению режима лечения набор по настоящему изобретению, как правило, содержит инструкции по введению.

Режим дозирования с использованием раскрытого соединения выбирают в соответствии с различными факторами, включая тип, вид, возраст, вес, пол и состояние здоровья пациента; тяжесть состояния, подлежащего лечению; путь введения; почечная или печеночная функция пациента и конкретное используемое раскрытое соединение. Лечащий врач или ветеринар средней квалификации может легко определить и назначить эффективное количество лекарственного средства, необходимое для предупреждения, противодействия или приостановки прогрессирования состояния.

Эффективные количества для дозировки раскрытых соединений, если они используются с целью получения указанного действия, находятся в диапазоне от приблизительно 0,5 мг до приблизительно 5000 мг раскрытого соединения, как необходимо для лечения состояния. Композиции для применения in vivo или in vitro могут содержать приблизительно 0,5, 5, 20, 50, 75, 100, 150, 250, 500, 750, 1000, 1250, 2500, 3500 или 5000 мг раскрытого соединения или в диапазоне от одного количества до другого количества в перечне доз. В одном варианте осуществления композиции находятся в форме таблетки, которая может быть делимой.

H. Комбинированная терапия

Соединения по настоящему изобретению можно вводить в терапевтически эффективных количествах в комбинированной терапии с одним или несколькими терапевтическими средствами (фармацевтические комбинации) или способами, например видами немедикаментозной терапии. Например, синергетические эффекты могут возникать в случае применения других противораковых средств. Если соединения по настоящему изобретению вводят в сочетании с другими средствами терапии, дозировки совместно вводимых соединений, разумеется, будут варьироваться в зависимости от типа применяемого дополнительного лекарственного средства, от конкретного применяемого лекарственного средства, от состояния, подвергаемого лечению, и т. д.

Соединения можно вводить одновременно (в виде одного препарата или отдельных препаратов), последовательно, по отдельности или в течение определенного периода времени с другим лекарственным средством терапии или способом лечения. Как правило, комбинированная терапия предусматривает введение двух или более лекарственных средств в течение одного цикла или курса терапии. Терапевтическое средство представляет собой, например, химическое соединение, пептид, антитело, фрагмент антитела или нуклеиновую кислоту, которые являются терапевтически активными или повышают терапевтическую активность при введении пациенту в комбинации с соединением по настоящему изобретению.

В одном аспекте, соединение формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на его основе, его стереоизомер или таутомер по настоящему изобретению можно объединять с другими терапевтическими средствами, такими как другие противораковые средства, противоаллергические средства, средства против тошноты (или противорвотные средства), обезболивающие средства, цитопротекторные средства и их комбинации.

В некоторых вариантах осуществления соединения формулы (I') или формулы (I) или их фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на их основе, их стереоизомер или таутомер по настоящему изобретению вводят в комбинации с одним или несколькими другими средствами, выбранными из ингибитора PD-1, ингибитора PD-L1, ингибитора LAG-3, цитокина, антагониста A2A, агониста GITR, ингибитора TIM-3, агониста STING и агониста TLR7, для лечения заболевания, например рака.

В другом варианте осуществления одно или несколько химиотерапевтических средств применяют в комбинации с соединениями формулы (I') или формулы (I) или их фармацевтически приемлемыми солями, гидратами, сольватами, пролекарствами на их основе, их стереоизомерами или таутомерами для лечения заболевания, например рака, где указанные химиотерапевтические средства включают без ограничения анастрозол (Arimidex®), бикалутамид (Casodex®), блеомицина сульфат (Blenoxane®), бусульфан (Myleran®), бусульфан для инъекций (Busulfex®), капецитабин (Xeloda®), N4-пентоксикарбонил-5-дезокси-5-фторцитидин, карбоплатин (Paraplatin®), кармустин (BiCNU®), хлорамбуцил (Leukeran®), цисплатин (Platinol®), кладрибин (Leustatin®), циклофосфамид (Cytoxan® или Neosar®), цитарабин, цитозин-арабинозид (Cytosar-U®), липосомальный цитарабин для инъекций (DepoCyt®), дакарбазин (DTIC-Dome®), дактиномицин (актиномицин D, Cosmegan), даунорубицина гидрохлорид (Cerubidine®), липосомальный даунорубицина цитрат для инъекций (DaunoXome®), дексаметазон, доцетаксел (Taxotere®), доксорубицина гидрохлорид (Adriamycin®, Rubex®), этопозид (Vepesid®), флударабина фосфат (Fludara®), 5-фторурацил (Adrucil®, Efudex®), флутамид (Eulexin®), тезацитибин, гемцитабин (дифтордезоксицитидин), гидроксимочевину (Hydrea®), идарубицин (Idamycin®), ифосфамид (IFEX®), иринотекан (Camptosar®), L-аспарагиназу (ELSPAR®), лейковорин кальция, мелфалан (Alkeran®), 6-меркаптопурин (Purinethol®), метотрексат (Folex®), митоксантрон (Novantrone®), милотарг, паклитаксел (Taxol®), феникс (иттрий-90/MX-DTPA), пентостатин, полифепрозан 20 с кармустином для имплантации (Gliadel®), цитрат тамоксифена (Nolvadex®), тенипозид (Vumon®), 6-тиогуанин, тиотепу, тирапазамин (Tirazone®), топотекана гидрохлорид для инъекций (Hycamptin®), винбластин (Velban®), винкристин (Oncovin®), винорелбин (Navelbine®), эпирубицин (Ellence®), оксалиплатин (Eloxatin®), эксеместан (Aromasin®), летрозол (Femara®) и фулвестрант (Faslodex®).

В других вариантах осуществления соединения формулы (I') или формулы (I) или их фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на их основе, их стереоизомер или таутомер по настоящему изобретению применяют в комбинации с одним или несколькими другими антителами к HER2, например, трастузумабом, пертузумабом, маргетуксимабом или HT-19, описанными выше, или другими конъюгатами на основе антитела к HER2, например, адо-трастузумаб-эмтанзином (также известным как Kadcyla® или T-DM1).

В других вариантах осуществления соединения формулы (I') или формулы (I) или их фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на их основе, стереоизомер или таутомер по настоящему изобретению применяют в комбинации с одним или несколькими ингибиторами тирозинкиназы, включающими без ограничения ингибиторы EGFR, ингибиторы Her3, ингибиторы IGFR и ингибиторы Met, для лечения заболевания, например рака.

Например, ингибиторы тирозинкиназы включают без ограничения эрлотиниба гидрохлорид (Tarceva®); линифаниб (N-[4-(3-амино-1H-индазол-4-ил)фенил]-N'-(2-фтор-5-метилфенил)мочевина, также известная как ABT 869, доступная от Genentech); сунитиниба малат (Sutent®); босутиниб (4-[(2,4-дихлор-5-метоксифенил)амино]-6-метокси-7-[3-(4-метилпиперазин-1-ил)пропокси]хинолин-3-карбонитрил, также известный как SKI-606 и описанный в патенте США № 6780996); дазатиниб (Sprycel®); пазопаниб (Votrient®); сорафениб (Nexavar®); зактиму (ZD6474) и иматиниб или иматиниба мезилат (Gilvec® и Gleevec®).

Ингибиторы рецептора эпидермального фактора роста (EGFR) включают без ограничения эрлотиниба гидрохлорид (Tarceva®), гефитиниб (Iressa®); N-[4-[(3-хлор-4-фторфенил)амино]-7-[[(3''S'')-тетрагидро-3-фуранил]окси]-6-хиназолинил]-4(диметиламино)-2-бутенамид, Tovok®); вандетаниб (Caprelsa®); лапатиниб (Tykerb®); (3R,4R)-4-амино-1-((4-((3-метоксифенил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-5-ил)метил)пиперидин-3-ол (BMS690514); канертиниба дигидрохлорид (CI-1033); 6-[4-[(4-этил-1-пиперазинил)метил]фенил]-N-[(1R)-1-фенилэтил]-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-амин (AEE788, CAS 497839-62-0); мубритиниб (TAK165); пелитиниб (EKB569); афатиниб (Gilotrif®); нератиниб (HKI-272); N-[4-[[1-[(3-фторфенил)метил]-1H-индазол-5-ил]амино]-5-метилпирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-ил]-карбаминовую кислоту, сложный (3S)-3-морфолинилметиловый эфир (BMS599626); N-(3,4-дихлор-2-фторфенил)-6-метокси-7-[[(3aα,5β,6aα)-октагидро-2-метилциклопента[c]пиррол-5-ил]метокси]-4-хиназолинамин (XL647, CAS 781613-23-8) и 4-[4-[[(1R)-1-фенилэтил]амино]-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-6-ил]-фенол (PKI166, CAS 187724-61-4).

Антитела к EGFR, включают без ограничения цетуксимаб (Erbitux®); панитумумаб (Vectibix®); матузумаб (EMD-72000); нимотузумаб (hR3); залутумумаб; TheraCIM h-R3; MDX0447 (CAS 339151-96-1) и ch806 (mAb-806, CAS 946414-09-1).

Другие ингибиторы HER2 включают без ограничения нератиниб (HKI-272, (2E)-N-[4-[[3-хлор-4-[(пиридин-2-ил)метокси]фенил]амино]-3-циано-7-этоксихинолин-6-ил]-4-(диметиламино)бут-2-енамид и описанный в публикации согласно PCT № WO 05/028443); лапатиниб или лапатиниба дитозилат (Tykerb®); (3R,4R)-4-амино-1-((4-((3-метоксифенил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-5-ил)метил)пиперидин-3-ол (BMS690514); (2E)-N-[4-[(3-хлор-4-фторфенил)амино]-7-[[(3S)-тетрагидро-3-фуранил]окси]-6-хиназолинил]-4-(диметиламино)-2-бутенамид (BIBW-2992, CAS 850140-72-6); N-[4-[[1-[(3-фторфенил)метил]-1H-индазол-5-ил]амино]-5-метилпирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-ил]-карбаминовую кислоту, сложный (3S)-3-морфолинилметиловый эфир (BMS 599626, CAS 714971-09-2); канертиниба дигидрохлорид (PD183805 или CI-1033) и N-(3,4-дихлор-2-фторфенил)-6-метокси-7-[[(3aα,5β,6aα)-октагидро-2-метилциклопента[c]пиррол-5-ил]метокси]-4-хиназолинамин (XL647, CAS 781613-23-8).

Ингибиторы HER3 включают без ограничения LJM716, MM-121, AMG-888, RG7116, REGN-1400, AV-203, MP-RM-1, MM-111 и MEHD-7945A.

Ингибиторы MET включают без ограничения кабозатиниб (XL184, CAS 849217-68-1); форетиниб (GSK1363089, ранее XL880, CAS 849217-64-7); тивантиниб (ARQ197, CAS 1000873-98-2); 1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-N-(5-(7-метоксихинолин-4-илокси)пиридин-2-ил)-5-метил-3-оксо-2-фенил-2,3-дигидро-1H-пиразол-4-карбоксамид (AMG 458); кризотиниб (Xalkori®, PF-02341066); (3Z)-5-(2,3-дигидро-1H-индол-1-илсульфонил)-3-({3,5-диметил-4-[(4-метилпиперазин-1-ил)карбонил]-1H-пиррол-2-ил}метилен)-1,3-дигидро-2H-индол-2-он (SU11271); (3Z)-N-(3-хлорфенил)-3-({3,5-диметил-4-[(4-метилпиперазин-1-ил)карбонил]-1H-пиррол-2-ил}метилен)-N-метил-2-оксоиндолин-5-сульфонамид (SU11274); (3Z)-N-(3-хлорфенил)-3-{[3,5-диметил-4-(3-морфолин-4-илпропил)-1H-пиррол-2-ил]метилен}-N-метил-2-оксоиндолин-5-сульфонамид (SU11606); 6-[дифтор[6-(1-метил-1H-пиразол-4-ил)-1,2,4-триазоло[4,3-b]пиридазин-3-ил]метил]-хинолин (JNJ38877605, CAS 943540-75-8); 2-[4-[1-(хинолин-6-илметил)-1H-[1,2,3]триазоло[4,5-b]пиразин-6-ил]-1H-пиразол-1-ил]этанол (PF04217903, CAS 956905-27-4); N-((2R)-1,4-диоксан-2-илметил)-N-метил-N'-[3-(1-метил-1H-пиразол-4-ил)-5-оксо-5H-бензо[4,5]циклогепта[1,2-b]пиридин-7-ил]сульфамид (MK2461, CAS 917879-39-1); 6-[[6-(1-метил-1H-пиразол-4-ил)-1,2,4-триазоло[4,3-b]пиридазин-3-ил]тио]-хинолин (SGX523, CAS 1022150-57-7) и (3Z)-5-[[(2,6-дихлорфенил)метил]сульфонил]-3-[[3,5-диметил-4-[[(2R)-2-(1-пирролидинилметил)-1-пирролидинил]карбонил]-1H-пиррол-2-ил]метилен]-1,3-дигидро-2H-индол-2-он (PHA665752, CAS 477575-56-7).

Ингибиторы IGFR включают без ограничения BMS-754807, XL-228, OSI-906, GSK0904529A, A-928605, AXL1717, KW-2450, MK0646, AMG479, IMCA12, MEDI-573 и BI836845. Обзор см., например, в Yee, JNCI, 104; 975 (2012).

В другом варианте осуществления соединения формулы (I') или формулы (I) по настоящему изобретению применяют в комбинации с одним или несколькими ингибиторами пути передачи сигнала, связанного с пролиферацией, включая без ограничения ингибиторы MEK, ингибиторы BRAF, ингибиторы PI3K/Akt, ингибиторы SHP2, а также ингибиторы mTOR и ингибиторы CDK для лечения заболевания, например рака.

Например, ингибиторы митоген-активируемой протеинкиназы (MEK) включают без ограничения XL-518 (также известный как GDC-0973, CAS № 1029872-29-4, доступный от ACC Corp.); 2-[(2-хлор-4-йодфенил)амино]-N-(циклопропилметокси)-3,4-дифторбензамид (также известный как CI-1040 или PD184352 и описан в публикации согласно PCT № WO2000035436); N-[(2R)-2,3-дигидроксипропокси]-3,4-дифтор-2-[(2-фтор-4-йодфенил)амино]бензамид (также известный как PD0325901 и описанный в публикации согласно PCT № WO2002006213); 2,3-бис[амино[(2-аминофенил)тио]метилен]бутандинитрил (также известный как U0126 и описанный в патенте США № 2779780); N-[3,4-дифтор-2-[(2-фтор-4-йодфенил)амино]-6-метоксифенил]-1-[(2R)-2,3-дигидроксипропил]циклопропансульфонамид (также известный как RDEA119 или BAY869766 и описанный в публикации согласно PCT № WO2007014011); (3S,4R,5Z,8S,9S,11E)-14-(этиламино)-8,9,16-тригидрокси-3,4-диметил-3,4,9,19-тетрагидро-1H-2-бензоксациклотетрадецин-1,7(8H)-дион] (также известный как E6201 и описанный в публикации согласно PCT № WO2003076424); 2'-амино-3'-метоксифлавон (также известный как PD98059, доступный от Biaffin GmbH & Co., KG, Германия); вемурафениб (PLX-4032, CAS 918504-65-1); (R)-3-(2,3-дигидроксипропил)-6-фтор-5-(2-фтор-4-йодфениламино)-8-метилпиридо[2,3-d]пиримидин-4,7(3H,8H)-дион (TAK-733, CAS 1035555-63-5); пимасертиб (AS-703026, CAS 1204531-26-9) и траметиниба диметилсульфоксид (GSK-1120212, CAS 1204531-25-80).

Ингибиторы BRAF включают без ограничения вемурафениб (или Zelboraf®), GDC-0879, PLX-4720 (доступный от Symansis), дабрафениб (или GSK2118436), LGX 818, CEP-32496, UI-152, RAF 265, регорафениб (BAY 73-4506), CCT239065 или сорафениб (или сорафениба тозилат, или Nexavar®), или ипилимумаб (или MDX-010, MDX-101, или Yervoy).

Ингибиторы фосфоинозитид-3-киназы (PI3K) включают без ограничения 4-[2-(1H-индазол-4-ил)-6-[[4-(метилсульфонил)пиперазин-1-ил]метил]тиено[3,2-d]пиримидин-4-ил]морфолин (также известный как GDC0941, RG7321, GNE0941, пиктрелисиб или пиктилисиб и описанный в публикациях согласно PCT №№ WO 09/036082 и WO 09/055730); тозасертиб (VX680 или MK-0457, CAS 639089-54-6); (5Z)-5-[[4-(4-пиридинил)-6-хинолинил]метилен]-2,4-тиазолидиндион (GSK1059615, CAS 958852-01-2); (1E,4S,4aR,5R,6aS,9aR)-5-(ацетилокси)-1-[(ди-2-пропениламино)метилен]-4,4a,5,6,6a,8,9,9a-октагидро-11-гидрокси-4-(метоксиметил)-4a,6a-диметилциклопента[5,6]нафто[1,2-c]пиран-2,7,10(1H)-трион (PX866, CAS 502632-66-8); 8-фенил-2-(морфолин-4-ил)-хромен-4-он (LY294002, CAS 154447-36-6); (S)-N1-(4-метил-5-(2-(1,1,1-трифтор-2-метилпропан-2-ил)пиридин-4-ил)тиазол-2-ил)пирролидин-1,2-дикарбоксамид (также известный как BYL719 или алпелисиб); 2-(4-(2-(1-изопропил-3-метил-1H-1,2,4-триазол-5-ил)-5,6-дигидробензo[f]имидазо[1,2-d][1,4]оксазепин-9-ил)-1H-пиразол-1-ил)-2-метилпропанамид (также известный как GDC0032, RG7604 или тазелисиб).

Ингибиторы mTOR включают без ограничения темсиролимус (Torisel®); ридафоролимус (ранее известный как деферолимус, (1R,2R,4S)-4-[(2R)-2 [(1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28Z,30S,32S,35R)-1,18-дигидрокси-19,30-диметокси-15,17,21,23,29,35-гексаметил-2,3,10,14,20-пентаоксо-11,36-диокса-4-азатрицикло[30.3.1.04,9]гексатриаконта-16,24,26,28-тетраен-12-ил]пропил]-2-метоксициклогексилдиметилфосфинат, также известный как AP23573 и MK8669 и описанный в публикации согласно PCT № WO 03/064383); эверолимус (Afinitor® или RAD001); рапамицин (AY22989, Sirolimus®); симапимод (CAS 164301-51-3); (5-{2,4-бис[(3S)-3-метилморфолин-4-ил]пиридо[2,3-d]пиримидин-7-ил}-2-метоксифенил)метанол (AZD8055); 2-амино-8-[транс-4-(2-гидроксиэтокси)циклогексил]-6-(6-метокси-3-пиридинил)-4-метилпиридо[2,3-d]пиримидин-7(8H)-он (PF04691502, CAS 1013101-36-4) и N²-[1,4-диоксо-4-[[4-(4-оксо-8-фенил-4H-1-бензoпиран-2-ил)морфолиний-4-ил]метокси]бутил]-L-аргинилглицил-L-α-аспартил-L-серин-, внутренняя соль (SF1126, CAS 936487-67-1).

Ингибиторы CDK включают без ограничения палбоциклиб (также известный как PD-0332991, Ibrance®, 6-ацетил-8-циклопентил-5-метил-2-{[5-(1-пиперазинил)-2-пиридинил]амино}пиридо[2,3-d]пиримидин-7(8H)-он).

Например, ингибиторы IAP включают без ограничения LCL161, GDC-0917, AEG-35156, AT406 и TL32711. Другие примеры ингибиторов IAP включают без ограничения раскрытые в WO04/005284, WO 04/007529, WO05/097791, WO 05/069894, WO 05/069888, WO 05/094818, US2006/0014700, US2006/0025347, WO 06/069063, WO 06/010118, WO 06/017295 и WO08/134679, все из которых включены в данный документ посредством ссылки.

Ингибиторы BCL-2 включают без ограничения 4-[4-[[2-(4-хлорфенил)-5,5-диметил-1-циклогексен-1-ил]метил]-1-пиперазинил]-N-[[4-[[(1R)-3-(4-морфолинил)-1-[(фенилтио)метил]пропил]амино]-3-[(трифторметил)сульфонил]фенил]сульфонил]бензамид (также известный как ABT-263 и описанный в публикации согласно PCT № WO 09/155386); тетрокарцин A; антимицин; госсипол ((-)BL-193); обатоклакс; этил-2-амино-6-циклопентил-4-(1-циано-2-этокси-2-оксоэтил)-4H-хромон-3-карбоксилат (HA14 -1); облимерсен (G3139, Genasense®); пептид Bak BH3; (-)-госсиполуксусную кислоту (AT-101); 4-[4-[(4'-хлор[1,1'-бифенил]-2-ил)метил]-1-пиперазинил]-N-[[4-[[(1R)-3-(диметиламино)-1-[(фенилтио)метил]пропил]амино]-3-нитрофенил]сульфонил]-бензамид (ABT-737, CAS 852808-04-9) и навитоклакс (ABT-263, CAS 923564-51-6).

Агонисты проапоптических рецепторов (PARA), в том числе DR4 (TRAILR1) и DR5 (TRAILR2), включают без ограничения дуланермин (AMG-951, RhApo2L/TRAIL); мапатумумаб (HRS-ETR1, CAS 658052-09-6); лексатумумаб (HGS-ETR2, CAS 845816-02-6); апомаб (Apomab®); конатумумаб (AMG655, CAS 896731-82-1) и тигатузумаб (CS1008, CAS 946415-34-5, доступен от Daiichi Sankyo).

Ингибиторы киназы контрольных точек (CHK) включают без ограничения 7-гидроксистауроспорин (UCN-01); 6-бром-3-(1-метил-1H-пиразол-4-ил)-5-(3R)-3-пиперидинилпиразоло[1,5-a]пиримидин-7-амин (SCH900776, CAS 891494-63-6); 5-(3-фторфенил)-3-уреидотиофен-2-карбоновой кислоты N-[(S)-пиперидин-3-ил]амид (AZD7762, CAS 860352-01-8); 4-[((3S)-1-азабицикло[2.2.2]окт-3-ил)амино]-3-(1H-бензимидазол-2-ил)-6-хлорхинолин-2(1H)-он (CHIR 124, CAS 405168-58-3); 7-аминодактиномицин (7-AAD), изогранулатимид, дебромгимениалдизин; N-[5-бром-4-метил-2-[(2S)-2-морфолинилметокси]-фенил]-N'-(5-метил-2-пиразинил)мочевину (LY2603618, CAS 911222-45-2); сульфорафан (CAS 4478-93-7, 4-метилсульфинилбутилизотиоцианат); 9,10,11,12-тетрагидро-9,12-эпокси-1H-дииндолo[1,2,3-fg:3',2',1'-kl]пирроло[3,4-i][1,6]бензодиазоцин-1,3(2H)-дион (SB-218078, CAS 135897-06-2), и TAT-S216A (YGRKKRRQRRRLYRSPAMPENL (SEQ ID NO: 33)), и CBP501 ((d-Bpa)sws(d-Phe-F5)(d-Cha)rrrqrr).

В дополнительном варианте осуществления соединения формулы (I') или формулы (I) или их фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на их основе, их стереоизомер или таутомер по настоящему изобретению применяют в комбинации с одним или несколькими иммуномодуляторами (например, одним или несколькими активаторами костимулирующей молекулы или ингибитором молекулы контрольных точек иммунного ответа) для лечения заболевания, например рака.

В определенных вариантах осуществления иммуномодулятор представляет собой активатор костимулирующей молекулы. В одном варианте осуществления агонист костимулирующей молекулы выбран из агониста (например, агонистического антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, или растворимой формы слитого белка) OX40, CD2, CD27, CDS, ICAM-1, LFA-1 (CD11a/CD18), ICOS (CD278), 4-1BB (CD137), GITR, CD30, CD40, BAFFR, HVEM, CD7, LIGHT, NKG2C, SLAMF7, NKp80, CD160, B7-H3 или лиганда CD83.

Агонисты GITR

В некоторых вариантах осуществления агонист GITR применяют в комбинации с соединением формулы (I') или формулы (I) или его фармацевтически приемлемыми солью, гидратом, сольватом, пролекарством на его основе, его стереоизомером или таутомером для лечения заболевания, например рака. В некоторых вариантах осуществления агонист GITR представляет собой GWN323 (Novartis), BMS-986156, MK-4166 или MK-1248 (Merck), TRX518 (Leap Therapeutics), INCAGN1876 (Incyte/Agenus), AMG 228 (Amgen) или INBRX-110 (Inhibrx).

Иллюстративные агонисты GITR

В одном варианте осуществления агонист GITR представляет собой молекулу антитела к GITR. В одном варианте осуществления агонист GITR представляет собой молекулу антитела к GITR, описанную в WO 2016/057846, опубликованной 14 апреля 2016 г. под названием "Compositions and Methods of Use for Augmented Immune Response and Cancer Therapy", включенной посредством ссылки во всей своей полноте.

В одном варианте осуществления молекула антитела к GITR содержит по меньшей мере одну, две, три, четыре, пять или шесть областей, определяющих комплементарность (CDR) (или в совокупности все CDR) из вариабельной области тяжелой и легкой цепей, содержащей аминокислотную последовательность, показанную в таблице 1 (например, из последовательностей вариабельной области тяжелой и легкой цепей MAB7, раскрытых в таблице 1), или кодируемой нуклеотидной последовательностью, показанной в таблице 1. В некоторых вариантах осуществления CDR указаны согласно определению по Kabat (например, как изложено в таблице 1). В некоторых вариантах осуществления CDR указаны согласно определению по Chothia (например, как изложено в таблице 1). В одном варианте осуществления одна или несколько CDR (или в совокупности все CDR) имеют одно, два, три, четыре, пять, шесть или больше изменений, например, аминокислотных замен (например, консервативных аминокислотных замен) или делеций, по сравнению с аминокислотной последовательностью, показанной в таблице 1 или кодируемой нуклеотидной последовательностью, показанной в таблице 1.

В одном варианте осуществления молекула антитела к GITR содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 9, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 11 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 13; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 16 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 18, каждая из которых раскрыта в таблице 1.

В одном варианте осуществления молекула антитела к GITR содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 1 или аминокислотную последовательность, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичную по отношению к SEQ ID NO: 1. В одном варианте осуществления молекула антитела к GITR содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 2 или аминокислотную последовательность, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичную по отношению к SEQ ID NO: 2. В одном варианте осуществления молекула антитела к GITR содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 1, и VL, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 2.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 5 или нуклеотидной последовательностью, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичной по отношению к SEQ ID NO: 5. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VL, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 6 или нуклеотидной последовательностью, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичной по отношению к SEQ ID NO: 6. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 5, и VL, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 6.

В одном варианте осуществления молекула антитела к GITR содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 3 или аминокислотную последовательность, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичную по отношению к SEQ ID NO: 3. В одном варианте осуществления молекула антитела к GITR содержит легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 4 или аминокислотную последовательность, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичную по отношению к SEQ ID NO: 4. В одном варианте осуществления молекула антитела к GITR содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 3, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 4.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит тяжелую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 7 или нуклеотидной последовательностью, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичной по отношению к SEQ ID NO: 7. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит легкую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 8 или нуклеотидной последовательностью, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичной по отношению к SEQ ID NO: 8. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит тяжелую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 7, и легкую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 8.

Молекулы антител, описанные в данном документе, можно получать с использованием векторов, клеток-хозяев и способов, описанных в WO 2016/057846, включенной посредством ссылки во всей своей полноте.

Таблица 1. Аминокислотные и нуклеотидные последовательности иллюстративной молекулы антитела к GITR MAB7 SEQ ID NO: 1 VH EVQLVESGGGLVQSGGSLRLSCAASGFSLSSYGVDWVRQAPGKGLEWVGVIWGGGGTYYASSLMGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARHAYGHDGGFAMDYWGQGTLVTVSS SEQ ID NO: 2 VL EIVMTQSPATLSVSPGERATLSCRASESVSSNVAWYQQRPGQAPRLLIYGASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYCGQSYSYPFTFGQGTKLEIK SEQ ID NO: 3 Тяжелая цепь EVQLVESGGGLVQSGGSLRLSCAASGFSLSSYGVDWVRQAPGKGLEWVGVIWGGGGTYYASSLMGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARHAYGHDGGFAMDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK SEQ ID NO: 4 Легкая цепь EIVMTQSPATLSVSPGERATLSCRASESVSSNVAWYQQRPGQAPRLLIYGASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYCGQSYSYPFTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC SEQ ID NO: 5 ДНК, кодирующая VH GAGGTGCAGCTGGTGGAATCTGGCGGCGGACTGGTGCAGTCCGGCGGCTCTCTGAGACTGTCTTGCGCTGCCTCCGGCTTCTCCCTGTCCTCTTACGGCGTGGACTGGGTGCGACAGGCCCCTGGCAAGGGCCTGGAATGGGTGGGAGTGATCTGGGGCGGAGGCGGCACCTACTACGCCTCTTCCCTGATGGGCCGGTTCACCATCTCCCGGGACAACTCCAAGAACACCCTGTACCTGCAGATGAACTCCCTGCGGGCCGAGGACACCGCCGTGTACTACTGCGCCAGACACGCCTACGGCCACGACGGCGGCTTCGCCATGGATTATTGGGGCCAGGGCACCCTGGTGACAGTGTCCTCC SEQ ID NO: 6 ДНК, кодирующая VL GAGATCGTGATGACCCAGTCCCCCGCCACCCTGTCTGTGTCTCCCGGCGAGAGAGCCACCCTGAGCTGCAGAGCCTCCGAGTCCGTGTCCTCCAACGTGGCCTGGTATCAGCAGAGACCTGGTCAGGCCCCTCGGCTGCTGATCTACGGCGCCTCTAACCGGGCCACCGGCATCCCTGCCAGATTCTCCGGCTCCGGCAGCGGCACCGACTTCACCCTGACCATCTCCCGGCTGGAACCCGAGGACTTCGCCGTGTACTACTGCGGCCAGTCCTACTCATACCCCTTCACCTTCGGCCAGGGCACCAAGCTGGAAATCAAG SEQ ID NO: 7 ДНК, кодирующая тяжелую цепь GAGGTGCAGCTGGTGGAATCTGGCGGCGGACTGGTGCAGTCCGGCGGCTCTCTGAGACTGTCTTGCGCTGCCTCCGGCTTCTCCCTGTCCTCTTACGGCGTGGACTGGGTGCGACAGGCCCCTGGCAAGGGCCTGGAATGGGTGGGAGTGATCTGGGGCGGAGGCGGCACCTACTACGCCTCTTCCCTGATGGGCCGGTTCACCATCTCCCGGGACAACTCCAAGAACACCCTGTACCTGCAGATGAACTCCCTGCGGGCCGAGGACACCGCCGTGTACTACTGCGCCAGACACGCCTACGGCCACGACGGCGGCTTCGCCATGGATTATTGGGGCCAGGGCACCCTGGTGACAGTGTCCTCCGCTAGCACCAAGGGCCCAAGTGTGTTTCCCCTGGCCCCCAGCAGCAAGTCTACTTCCGGCGGAACTGCTGCCCTGGGTTGCCTGGTGAAGGACTACTTCCCCGAGCCCGTGACAGTGTCCTGGAACTCTGGGGCTCTGACTTCCGGCGTGCACACCTTCCCCGCCGTGCTGCAGAGCAGCGGCCTGTACAGCCTGAGCAGCGTGGTGACAGTGCCCTCCAGCTCTCTGGGAACCCAGACCTATATCTGCAACGTGAACCACAAGCCCAGCAACACCAAGGTGGACAAGAGAGTGGAGCCCAAGAGCTGCGACAAGACCCACACCTGCCCCCCCTGCCCAGCTCCAGAACTGCTGGGAGGGCCTTCCGTGTTCCTGTTCCCCCCCAAGCCCAAGGACACCCTGATGATCAGCAGGACCCCCGAGGTGACCTGCGTGGTGGTGGACGTGTCCCACGAGGACCCAGAGGTGAAGTTCAACTGGTACGTGGACGGCGTGGAGGTGCACAACGCCAAGACCAAGCCCAGAGAGGAGCAGTACAACAGCACCTACAGGGTGGTGTCCGTGCTGACCGTGCTGCACCAGGACTGGCTGAACGGCAAAGAATACAAGTGCAAAGTCTCCAACAAGGCCCTGCCAGCCCCAATCGAAAAGACAATCAGCAAGGCCAAGGGCCAGCCACGGGAGCCCCAGGTGTACACCCTGCCCCCCAGCCGGGAGGAGATGACCAAGAACCAGGTGTCCCTGACCTGTCTGGTGAAGGGCTTCTACCCCAGCGATATCGCCGTGGAGTGGGAGAGCAACGGCCAGCCCGAGAACAACTACAAGACCACCCCCCCAGTGCTGGACAGCGACGGCAGCTTCTTCCTGTACAGCAAGCTGACCGTGGACAAGTCCAGGTGGCAGCAGGGCAACGTGTTCAGCTGCAGCGTGATGCACGAGGCCCTGCACAACCACTACACCCAGAAGTCCCTGAGCCTGAGCCCCGGCAAG SEQ ID NO: 8 ДНК, кодирующая легкую цепь GAGATCGTGATGACCCAGTCCCCCGCCACCCTGTCTGTGTCTCCCGGCGAGAGAGCCACCCTGAGCTGCAGAGCCTCCGAGTCCGTGTCCTCCAACGTGGCCTGGTATCAGCAGAGACCTGGTCAGGCCCCTCGGCTGCTGATCTACGGCGCCTCTAACCGGGCCACCGGCATCCCTGCCAGATTCTCCGGCTCCGGCAGCGGCACCGACTTCACCCTGACCATCTCCCGGCTGGAACCCGAGGACTTCGCCGTGTACTACTGCGGCCAGTCCTACTCATACCCCTTCACCTTCGGCCAGGGCACCAAGCTGGAAATCAAGCGTACGGTGGCCGCTCCCAGCGTGTTCATCTTCCCCCCCAGCGACGAGCAGCTGAAGAGCGGCACCGCCAGCGTGGTGTGCCTGCTGAACAACTTCTACCCCCGGGAGGCCAAGGTGCAGTGGAAGGTGGACAACGCCCTGCAGAGCGGCAACAGCCAGGAGAGCGTCACCGAGCAGGACAGCAAGGACTCCACCTACAGCCTGAGCAGCACCCTGACCCTGAGCAAGGCCGACTACGAGAAGCATAAGGTGTACGCCTGCGAGGTGACCCACCAGGGCCTGTCCAGCCCCGTGACCAAGAGCTTCAACAGGGGCGAGTGC SEQ ID NO: 9 (KABAT) HCDR1 SYGVD SEQ ID NO: 10 (CHOTHIA) HCDR1 GFSLSSY SEQ ID NO: 11 (KABAT) HCDR2 VIWGGGGTYYASSLMG SEQ ID NO: 12 (CHOTHIA) HCDR2 WGGGG SEQ ID NO: 13 (KABAT) HCDR3 HAYGHDGGFAMDY SEQ ID NO: 13 (CHOTHIA) HCDR3 HAYGHDGGFAMDY SEQ ID NO: 14 (KABAT) LCDR1 RASESVSSNVA SEQ ID NO: 15 (CHOTHIA) LCDR1 SESVSSN SEQ ID NO: 16 (KABAT) LCDR2 GASNRAT SEQ ID NO: 17 (CHOTHIA) LCDR2 GAS SEQ ID NO: 18 (KABAT) LCDR3 GQSYSYPFT SEQ ID NO: 19 (CHOTHIA) LCDR3 SYSYPF

Другие иллюстративные агонисты GITR

В одном варианте осуществления молекула антитела к GITR представляет собой BMS-986156 (Bristol-Myers Squibb), также известный как BMS 986156 или BMS986156. BMS-986156 и другие антитела к GITR раскрыты, например, в US 9228016 и WO 2016/196792, включенных посредством ссылки во всей своей полноте. В одном варианте осуществления молекула антитела к GITR содержит одну или несколько последовательностей CDR (или в совокупности все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи BMS-986156, например, раскрытые в таблице 2.

В одном варианте осуществления молекула антитела к GITR представляет собой MK-4166 или MK-1248 (Merck). MK-4166, MK-1248 и другие антитела к GITR раскрыты, например, в US 8709424, WO 2011/028683, WO 2015/026684 и Mahne et al. Cancer Res. 2017; 77(5):1108-1118, включенных посредством ссылки во всей своей полноте. В одном варианте осуществления молекула антитела к GITR содержит одну или несколько последовательностей CDR (или в совокупности все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи MK-4166 или MK-1248.

В одном варианте осуществления молекула антитела к GITR представляет собой TRX518 (Leap Therapeutics). TRX518 и другие антитела к GITR раскрыты, например, в US 7812135, US 8388967, US 9028823, WO 2006/105021 и Ponte J et al. (2010) Clinical Immunology; 135:S96, включенных посредством ссылки во всей своей полноте. В одном варианте осуществления молекула антитела к GITR содержит одну или несколько последовательностей CDR (или в совокупности все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи TRX518.

В одном варианте осуществления молекула антитела к GITR представляет собой INCAGN1876 (Incyte/Agenus). INCAGN1876 и другие антитела к GITR раскрыты, например, в US 2015/0368349 и WO 2015/184099, включенных посредством ссылки во всей своей полноте. В одном варианте осуществления молекула антитела к GITR содержит одну или несколько последовательностей CDR (или в совокупности все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи INCAGN1876.

В одном варианте осуществления молекула антитела к GITR представляет собой AMG 228 (Amgen). AMG 228 и другие антитела к GITR раскрыты, например, в US 9464139 и WO 2015/031667, включенных посредством ссылки во всей своей полноте. В одном варианте осуществления молекула антитела к GITR содержит одну или несколько последовательностей CDR (или в совокупности все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи AMG 228.

В одном варианте осуществления молекула антитела к GITR представляет собой INBRX-110 (Inhibrx). INBRX-110 и другие антитела к GITR раскрыты, например, в US 2017/0022284 и WO 2017/015623, включенных посредством ссылки во всей своей полноте. В одном варианте осуществления агонист GITR содержит одну или несколько последовательностей CDR (или в совокупности все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи INBRX-110.

В одном варианте осуществления агонист GITR (например, слитый белок) представляет собой MEDI 1873 (MedImmune), также известный как MEDI1873. MEDI 1873 и другие агонисты GITR раскрыты, например, в US 2017/0073386, WO 2017/025610 и Ross et al. Cancer Res 2016; 76(14 Suppl): Abstract № 561, включенных посредством ссылки во всей своей полноте. В одном варианте осуществления агонист GITR содержит один или несколько из Fc-домена IgG, функционального мультимеризационного домена и рецепторсвязывающего домена лиганда глюкокортикоид-индуцируемого рецептора TNF (GITRL) в MEDI 1873.

Дополнительные известные агонисты GITR (например, антитела к GITR) включают агонисты, описанные, например, в WO 2016/054638, включенной посредством ссылки во всей своей полноте.

В одном варианте осуществления антитело к GITR представляет собой антитело, которое конкурирует за связывание и/или связывается с тем же эпитопом в GITR, что и одно из антител к GITR, описанных в данном документе.

В одном варианте осуществления агонист GITR представляет собой пептид, который активирует сигнальный путь GITR. В одном варианте осуществления агонист GITR представляет собой связывающий фрагмент иммуноадгезина (например, связывающий фрагмент иммуноадгезина, содержащий внеклеточную или GITR-связывающую часть GITRL), слитый с константной областью (например, Fc-областью последовательности иммуноглобулина).

Таблица 2. Аминокислотная последовательность других иллюстративных молекул антител к GITR BMS-986156 SEQ ID NO: 20 VH QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVAVIWYEGSNKYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARGGSMVRGDYYYGMDVWGQGTTVTVSS SEQ ID NO: 21 VL AIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQGISSALAWYQQKPGKAPKLLIYDASSLESGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFNSYPYTFGQGTKLEIK

В определенных вариантах осуществления иммуномодулятор представляет собой ингибитор молекулы контрольных точек иммунного ответа. В одном варианте осуществления иммуномодулятор представляет собой ингибитор PD-1, PD-L1, PD-L2, CTLA4, TIM3, LAG3, VISTA, BTLA, TIGIT, LAIR1, CD160, 2B4 и/или TGFRbeta. В одном варианте осуществления ингибитор молекулы контрольных точек иммунного ответа ингибирует PD-1, PD-L1, LAG-3, TIM-3 или CTLA4 или любую их комбинацию. Термин "ингибирование" или "ингибитор" подразумевает снижение определенного параметра, например, активности данной молекулы, например, ингибитора контрольных точек иммунного ответа. Например, данный термин подразумевает ингибирование активности, например, активности PD-1 или PD-L1, на по меньшей мере 5%, 10%, 20%, 30%, 40%, 50% или больше. Таким образом, ингибирование не обязательно должно составлять 100%.

Ингибирование ингибирующей молекулы может происходить на уровне ДНК, РНК или белка. В некоторых вариантах осуществления для подавления экспрессии ингибирующей молекулы может применяться ингибирующая нуклеиновая кислота (например, dsRNA, siRNA или shRNA). В других вариантах осуществления ингибитор ингибирующего сигнала представляет собой полипептид, например, растворимую форму лиганда (например, Ig, связывающий PD-1, или Ig, связывающий CTLA-4), или антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, которые связываются с ингибирующей молекулой; например, антитело или его фрагмент (также обозначаемые в данном документе как "молекула антитела"), которые связываются с PD-1, PD-L1, PD-L2, CTLA4, TIM3, LAG3, VISTA, BTLA, TIGIT, LAIR1, CD160, 2B4 и/или TGFR-бета или их комбинацией.

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой полное антитело или его фрагмент (например, Fab, F(ab')2, Fv или одноцепочечный Fv-фрагмент (scFv)). В еще одних вариантах осуществления молекула антитела имеет константную область тяжелой цепи (Fc), выбранную, например, из константных областей тяжелой цепи IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgM, IgA1, IgA2, IgD и IgE; в частности, выбранную, например, из константных областей тяжелой цепи IgG1, IgG2, IgG3 и IgG4, более конкретно константной области тяжелой цепи IgG1 или IgG4 (например, IgG1 или IgG4 человека). В одном варианте осуществления константная область тяжелой цепи получена из IgG1 человека или IgG4 человека. В одном варианте осуществления константная область изменена, например, подвергнута мутации, для модификации свойств молекулы антитела (например, для увеличения или уменьшения одного или нескольких из связывания с Fc-рецептором, гликозилирования антитела, числа цистеиновых остатков, функции эффекторных клеток или функции комплемента).

В определенных вариантах осуществления молекула антитела находится в форме биспецифической или полиспецифической молекулы антитела. В одном варианте осуществления молекула биспецифического антитела характеризуется первой специфичностью связывания с PD-1 или PD-L1 и второй специфичностью связывания, например, второй специфичностью связывания с TIM-3, LAG-3 или PD-L2. В одном варианте осуществления молекула биспецифического антитела связывается с PD-1 или PD-L1 и TIM-3. В другом варианте осуществления молекула биспецифического антитела связывается с PD-1 или PD-L1 и LAG-3. В другом варианте осуществления молекула биспецифического антитела связывается с PD-1 и PD-L1. В еще одном варианте осуществления молекула биспецифического антитела связывается с PD-1 и PD-L2. В другом варианте осуществления молекула биспецифического антитела связывается с TIM-3 и LAG-3. Любая комбинация вышеуказанных молекул может быть составлена в молекулу полиспецифического антитела, например, триспецифическое антитело, которое предусматривает первую специфичность связывания с PD-1 или PD-1, а также вторую и третью специфичности связывания с двумя или более из TIM-3, LAG-3 или PD-L2.

В определенных вариантах осуществления иммуномодулятор представляет собой ингибитор PD-1, например, PD-1 человека. В другом варианте осуществления иммуномодулятор представляет собой ингибитор PD-L1, например, PD-L1 человека. В одном варианте осуществления ингибитор PD-1 или PD-L1 представляет собой молекулу антитела к PD-1 или PD-L1. Ингибитор PD-1 или PD-L1 может вводиться отдельно или в комбинации с другими иммуномодуляторами, например, в комбинации с ингибитором LAG-3, TIM-3 или CTLA4. В иллюстративном варианте осуществления ингибитор PD-1 или PD-L1, например, молекула антитела к PD-1 или PD-L1, вводится в комбинации с ингибитором LAG-3, например, молекулой антитела к LAG-3. В другом варианте осуществления ингибитор PD-1 или PD-L1, например, молекула антитела к PD-1 или PD-L1, вводится в комбинации с ингибитором TIM-3, например, молекулой антитела к TIM-3. В еще одних вариантах осуществления ингибитор PD-1 или PD-L1, например, молекула антитела к PD-1, вводится в комбинации с ингибитором LAG-3, например, молекулой антитела к LAG-3, и ингибитором TIM-3, например, молекулой антитела к TIM-3.

Другие комбинации иммуномодуляторов с ингибитором PD-1 (например, с одним или несколькими из PD-L2, CTLA4, TIM3, LAG3, VISTA, BTLA, TIGIT, LAIR1, CD160, 2B4 и/или TGFR) также находятся в пределах объема настоящего изобретения. Любая из молекул антитела, известная из уровня техники или раскрытая в данном документе, может использоваться в вышеуказанных комбинациях ингибиторов молекулы контрольных точек.

Ингибиторы PD-1

В некоторых вариантах осуществления соединения формулы (I') или формулы (I) или их фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на их основе, их стереоизомер или таутомер по настоящему изобретению применяют в комбинации с ингибитором PD-1 для лечения заболевания, например рака. В некоторых вариантах осуществления ингибитор PD-1 выбран из PDR001 (Novartis), ниволумаба (Bristol-Myers Squibb), пембролизумаба (Merck & Co), пидилизумаба (CureTech), MEDI0680 (Medimmune), REGN2810 (Regeneron), TSR-042 (Tesaro), PF-06801591 (Pfizer), BGB-A317 (Beigene), BGB-108 (Beigene), INCSHR1210 (Incyte) или AMP-224 (Amplimmune).

Иллюстративные ингибиторы PD-1

В одном варианте осуществления ингибитор PD-1 представляет собой молекулу антитела к PD-1. В одном варианте осуществления ингибитор PD-1 представляет собой молекулу антитела к PD-1, описанную в US 2015/0210769, опубликованной 30 июля 2015 г. под названием "Antibody Molecules to PD-1 and Uses Thereof", включенной посредством ссылки во всей своей полноте.

В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 содержит по меньшей мере одну, две, три, четыре, пять или шесть областей, определяющих комплементарность (CDR) (или в совокупности все CDR), из вариабельной области тяжелой и легкой цепей, содержащей аминокислотную последовательность, показанную в таблице 3 (например, из последовательностей вариабельной области тяжелой и легкой цепей BAP049 клона E или BAP049 клона B, раскрытых в таблице 3), или кодируемой нуклеотидной последовательностью, показанной в таблице 3. В некоторых вариантах осуществления CDR указаны согласно определению по Kabat (например, как изложено в таблице 3). В некоторых вариантах осуществления CDR указаны согласно определению по Chothia (например, как изложено в таблице 3). В некоторых вариантах осуществления CDR указаны согласно комбинации определений CDR как по Kabat, так и по Chothia (например, как изложено в таблице 3). В одном варианте осуществления CDR1 VH согласно комбинации определений CDR по Kabat и Chothia содержит аминокислотную последовательность GYTFTTYWMH (SEQ ID NO: 213). В одном варианте осуществления одна или несколько CDR (или в совокупности все CDR) имеют одно, два, три, четыре, пять, шесть или больше изменений, например, аминокислотних замен (например, консервативных аминокислотных замен) или делеций, по сравнению с аминокислотной последовательностью, показанной в таблице 3 или кодируемой нуклеотидной последовательностью, показанной в таблице 3.

В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 22, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 23 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 24; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 31, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 32 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 286, каждая из которых раскрыта в таблице 3.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, содержащую VHCDR1, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 45, VHCDR2, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 46, и VHCDR3, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 47; и VL, содержащую VLCDR1, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 50, VLCDR2, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 51, и VLCDR3, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 52, каждая из которых раскрыта в таблице 3.

В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 27 или аминокислотную последовательность, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичную по отношению к SEQ ID NO: 27. В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 41 или аминокислотную последовательность, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичную по отношению к SEQ ID NO: 41. В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 37 или аминокислотную последовательность, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичную по отношению к SEQ ID NO: 37. В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 27, и VL, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 41. В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 27, и VL, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 37.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 28 или нуклеотидной последовательностью, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичной по отношению к SEQ ID NO: 28. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VL, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 42 или 38 или нуклеотидной последовательностью, на по меньшей мере 85%, 90%, 95%, или 99% или больше идентичной по отношению к SEQ ID NO: 42 или 38. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 28, и VL, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 42 или 38.

В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 29 или аминокислотную последовательность, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичную по отношению к SEQ ID NO: 29. В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 содержит легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 43 или аминокислотную последовательность, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичную по отношению к SEQ ID NO: 43. В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 содержит легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 39 или аминокислотную последовательность, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичную по отношению к SEQ ID NO: 39. В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 29, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 43. В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 29, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 39.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит тяжелую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 30 или нуклеотидной последовательностью, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичной по отношению к SEQ ID NO: 30. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит легкую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 44 или 40 или нуклеотидной последовательностью, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичной по отношению к SEQ ID NO: 44 или 40. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит тяжелую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 30, и легкую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 44 или 40.

Молекулы антител, описанные в данном документе, можно получать с использованием векторов, клеток-хозяев и способов, описанных в US 2015/0210769, включенной посредством ссылки во всей своей полноте.

Таблица 3. Аминокислотные и нуклеотидные последовательности иллюстративных молекул антител к PD-1 HC BAP049 клона B SEQ ID NO: 22 (Kabat) HCDR1 TYWMH SEQ ID NO: 23 (Kabat) HCDR2 NIYPGTGGSNFDEKFKN SEQ ID NO: 24 (Kabat) HCDR3 WTTGTGAY SEQ ID NO: 25 (Chothia) HCDR1 GYTFTTY SEQ ID NO: 26 (Chothia) HCDR2 YPGTGG SEQ ID NO: 24 (Chothia) HCDR3 WTTGTGAY SEQ ID NO: 27 VH EVQLVQSGAEVKKPGESLRISCKGSGYTFTTYWMHWVRQATGQGLEWMGNIYPGTGGSNFDEKFKNRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCTRWTTGTGAYWGQGTTVTVSS SEQ ID NO: 28 ДНК, кодирующая VH Gaggtgcagctggtgcagtcaggcgccgaagtgaagaagcccggcgagtcactgagaattagctgtaaaggttcaggctacaccttcactacctactggatgcactgggtccgccaggctaccggtcaaggcctcgagtggatgggtaatatctaccccggcaccggcggctctaacttcgacgagaagtttaagaatagagtgactatcaccgccgataagtctactagcaccgcctatatggaactgtctagcctgagatcagaggacaccgccgtctactactgcactaggtggactaccggcacaggcgcctactggggtcaaggcactaccgtgaccgtgtctagc SEQ ID NO: 29 Тяжелая цепь EVQLVQSGAEVKKPGESLRISCKGSGYTFTTYWMHWVRQATGQGLEWMGNIYPGTGGSNFDEKFKNRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCTRWTTGTGAYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLG SEQ ID NO: 30 ДНК, кодирующая тяжелую цепь gaggtgcagctggtgcagtcaggcgccgaagtgaagaagcccggcgagtcactgagaattagctgtaaaggttcaggctacaccttcactacctactggatgcactgggtccgccaggctaccggtcaaggcctcgagtggatgggtaatatctaccccggcaccggcggctctaacttcgacgagaagtttaagaatagagtgactatcaccgccgataagtctactagcaccgcctatatggaactgtctagcctgagatcagaggacaccgccgtctactactgcactaggtggactaccggcacaggcgcctactggggtcaaggcactaccgtgaccgtgtctagcgctagcactaagggcccgtccgtgttccccctggcaccttgtagccggagcactagcgaatccaccgctgccctcggctgcctggtcaaggattacttcccggagcccgtgaccgtgtcctggaacagcggagccctgacctccggagtgcacaccttccccgctgtgctgcagagctccgggctgtactcgctgtcgtcggtggtcacggtgccttcatctagcctgggtaccaagacctacacttgcaacgtggaccacaagccttccaacactaaggtggacaagcgcgtcgaatcgaagtacggcccaccgtgcccgccttgtcccgcgccggagttcctcggcggtccctcggtctttctgttcccaccgaagcccaaggacactttgatgatttcccgcacccctgaagtgacatgcgtggtcgtggacgtgtcacaggaagatccggaggtgcagttcaattggtacgtggatggcgtcgaggtgcacaacgccaaaaccaagccgagggaggagcagttcaactccacttaccgcgtcgtgtccgtgctgacggtgctgcatcaggactggctgaacgggaaggagtacaagtgcaaagtgtccaacaagggacttcctagctcaatcgaaaagaccatctcgaaagccaagggacagccccgggaaccccaagtgtataccctgccaccgagccaggaagaaatgactaagaaccaagtctcattgacttgccttgtgaagggcttctacccatcggatatcgccgtggaatgggagtccaacggccagccggaaaacaactacaagaccacccctccggtgctggactcagacggatccttcttcctctactcgcggctgaccgtggataagagcagatggcaggagggaaatgtgttcagctgttctgtgatgcatgaagccctgcacaaccactacactcagaagtccctgtccctctccctggga LC BAP049 клона B SEQ ID NO: 31 (Kabat) LCDR1 KSSQSLLDSGNQKNFLT SEQ ID NO: 32 (Kabat) LCDR2 WASTRES SEQ ID NO: 286 (Kabat) LCDR3 QNDYSYPYT SEQ ID NO: 34 (Chothia) LCDR1 SQSLLDSGNQKNF SEQ ID NO: 35 (Chothia) LCDR2 WAS SEQ ID NO: 36 (Chothia) LCDR3 DYSYPY SEQ ID NO: 37 VL EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCKSSQSLLDSGNQKNFLTWYQQKPGKAPKLLIYWASTRESGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQNDYSYPYTFGQGTKVEIK SEQ ID NO: 38 ДНК, кодирующая VL Gagatcgtcctgactcagtcacccgctaccctgagcctgagccctggcgagcgggctacactgagctgtaaatctagtcagtcactgctggatagcggtaatcagaagaacttcctgacctggtatcagcagaagcccggtaaagcccctaagctgctgatctactgggcctctactagagaatcaggcgtgccctctaggtttagcggtagcggtagtggcaccgacttcaccttcactatctctagcctgcagcccgaggatatcgctacctactactgtcagaacgactatagctacccctacaccttcggtcaaggcactaaggtcgagattaag SEQ ID NO: 39 Легкая цепь EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCKSSQSLLDSGNQKNFLTWYQQKPGKAPKLLIYWASTRESGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQNDYSYPYTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC SEQ ID NO: 40 ДНК, кодирующая легкую цепь Gagatcgtcctgactcagtcacccgctaccctgagcctgagccctggcgagcgggctacactgagctgtaaatctagtcagtcactgctggatagcggtaatcagaagaacttcctgacctggtatcagcagaagcccggtaaagcccctaagctgctgatctactgggcctctactagagaatcaggcgtgccctctaggtttagcggtagcggtagtggcaccgacttcaccttcactatctctagcctgcagcccgaggatatcgctacctactactgtcagaacgactatagctacccctacaccttcggtcaaggcactaaggtcgagattaagcgtacggtggccgctcccagcgtgttcatcttcccccccagcgacgagcagctgaagagcggcaccgccagcgtggtgtgcctgctgaacaacttctacccccgggaggccaaggtgcagtggaaggtggacaacgccctgcagagcggcaacagccaggagagcgtcaccgagcaggacagcaaggactccacctacagcctgagcagcaccctgaccctgagcaaggccgactacgagaagcataaggtgtacgcctgcgaggtgacccaccagggcctgtccagccccgtgaccaagagcttcaacaggggcgagtgc HC BAP049 клона E SEQ ID NO: 22 (Kabat) HCDR1 TYWMH SEQ ID NO: 23 (Kabat) HCDR2 NIYPGTGGSNFDEKFKN SEQ ID NO: 24 (Kabat) HCDR3 WTTGTGAY SEQ ID NO: 25 (Chothia) HCDR1 GYTFTTY SEQ ID NO: 26 (Chothia) HCDR2 YPGTGG SEQ ID NO: 24 (Chothia) HCDR3 WTTGTGAY SEQ ID NO: 27 VH EVQLVQSGAEVKKPGESLRISCKGSGYTFTTYWMHWVRQATGQGLEWMGNIYPGTGGSNFDEKFKNRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCTRWTTGTGAYWGQGTTVTVSS SEQ ID NO: 28 ДНК, кодирующая VH Gaggtgcagctggtgcagtcaggcgccgaagtgaagaagcccggcgagtcactgagaattagctgtaaaggttcaggctacaccttcactacctactggatgcactgggtccgccaggctaccggtcaaggcctcgagtggatgggtaatatctaccccggcaccggcggctctaacttcgacgagaagtttaagaatagagtgactatcaccgccgataagtctactagcaccgcctatatggaactgtctagcctgagatcagaggacaccgccgtctactactgcactaggtggactaccggcacaggcgcctactggggtcaaggcactaccgtgaccgtgtctagc SEQ ID NO: 29 Тяжелая цепь EVQLVQSGAEVKKPGESLRISCKGSGYTFTTYWMHWVRQATGQGLEWMGNIYPGTGGSNFDEKFKNRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCTRWTTGTGAYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLG SEQ ID NO: 30 ДНК, кодирующая тяжелую цепь gaggtgcagctggtgcagtcaggcgccgaagtgaagaagcccggcgagtcactgagaattagctgtaaaggttcaggctacaccttcactacctactggatgcactgggtccgccaggctaccggtcaaggcctcgagtggatgggtaatatctaccccggcaccggcggctctaacttcgacgagaagtttaagaatagagtgactatcaccgccgataagtctactagcaccgcctatatggaactgtctagcctgagatcagaggacaccgccgtctactactgcactaggtggactaccggcacaggcgcctactggggtcaaggcactaccgtgaccgtgtctagcgctagcactaagggcccgtccgtgttccccctggcaccttgtagccggagcactagcgaatccaccgctgccctcggctgcctggtcaaggattacttcccggagcccgtgaccgtgtcctggaacagcggagccctgacctccggagtgcacaccttccccgctgtgctgcagagctccgggctgtactcgctgtcgtcggtggtcacggtgccttcatctagcctgggtaccaagacctacacttgcaacgtggaccacaagccttccaacactaaggtggacaagcgcgtcgaatcgaagtacggcccaccgtgcccgccttgtcccgcgccggagttcctcggcggtccctcggtctttctgttcccaccgaagcccaaggacactttgatgatttcccgcacccctgaagtgacatgcgtggtcgtggacgtgtcacaggaagatccggaggtgcagttcaattggtacgtggatggcgtcgaggtgcacaacgccaaaaccaagccgagggaggagcagttcaactccacttaccgcgtcgtgtccgtgctgacggtgctgcatcaggactggctgaacgggaaggagtacaagtgcaaagtgtccaacaagggacttcctagctcaatcgaaaagaccatctcgaaagccaagggacagccccgggaaccccaagtgtataccctgccaccgagccaggaagaaatgactaagaaccaagtctcattgacttgccttgtgaagggcttctacccatcggatatcgccgtggaatgggagtccaacggccagccggaaaacaactacaagaccacccctccggtgctggactcagacggatccttcttcctctactcgcggctgaccgtggataagagcagatggcaggagggaaatgtgttcagctgttctgtgatgcatgaagccctgcacaaccactacactcagaagtccctgtccctctccctggga LC BAP049 клона E SEQ ID NO: 31 (Kabat) LCDR1 KSSQSLLDSGNQKNFLT SEQ ID NO: 32 (Kabat) LCDR2 WASTRES SEQ ID NO: 286 (Kabat) LCDR3 QNDYSYPYT SEQ ID NO: 34 (Chothia) LCDR1 SQSLLDSGNQKNF SEQ ID NO: 35 (Chothia) LCDR2 WAS SEQ ID NO: 36 (Chothia) LCDR3 DYSYPY SEQ ID NO: 41 VL EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCKSSQSLLDSGNQKNFLTWYQQKPGQAPRLLIYWASTRESGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLEAEDAATYYCQNDYSYPYTFGQGTKVEIK SEQ ID NO: 42 ДНК, кодирующая VL Gagatcgtcctgactcagtcacccgctaccctgagcctgagccctggcgagcgggctacactgagctgtaaatctagtcagtcactgctggatagcggtaatcagaagaacttcctgacctggtatcagcagaagcccggtcaagcccctagactgctgatctactgggcctctactagagaatcaggcgtgccctctaggtttagcggtagcggtagtggcaccgacttcaccttcactatctctagcctggaagccgaggacgccgctacctactactgtcagaacgactatagctacccctacaccttcggtcaaggcactaaggtcgagattaag SEQ ID NO: 43 Легкая цепь EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCKSSQSLLDSGNQKNFLTWYQQKPGQAPRLLIYWASTRESGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLEAEDAATYYCQNDYSYPYTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC SEQ ID NO: 44 ДНК, кодирующая легкую цепь Gagatcgtcctgactcagtcacccgctaccctgagcctgagccctggcgagcgggctacactgagctgtaaatctagtcagtcactgctggatagcggtaatcagaagaacttcctgacctggtatcagcagaagcccggtcaagcccctagactgctgatctactgggcctctactagagaatcaggcgtgccctctaggtttagcggtagcggtagtggcaccgacttcaccttcactatctctagcctggaagccgaggacgccgctacctactactgtcagaacgactatagctacccctacaccttcggtcaaggcactaaggtcgagattaagcgtacggtggccgctcccagcgtgttcatcttcccccccagcgacgagcagctgaagagcggcaccgccagcgtggtgtgcctgctgaacaacttctacccccgggaggccaaggtgcagtggaaggtggacaacgccctgcagagcggcaacagccaggagagcgtcaccgagcaggacagcaaggactccacctacagcctgagcagcaccctgaccctgagcaaggccgactacgagaagcataaggtgtacgcctgcgaggtgacccaccagggcctgtccagccccgtgaccaagagcttcaacaggggcgagtgc HC BAP049 клона B SEQ ID NO: 45 (Kabat) HCDR1 ACCTACTGGATGCAC SEQ ID NO: 46 (Kabat) HCDR2 AATATCTACCCCGGCACCGGCGGCTCTAACTTCGACGAGAAGTTTAAGAAT SEQ ID NO: 47 (Kabat) HCDR3 TGGACTACCGGCACAGGCGCCTAC SEQ ID NO: 48 (Chothia) HCDR1 GGCTACACCTTCACTACCTAC SEQ ID NO: 49 (Chothia) HCDR2 TACCCCGGCACCGGCGGC SEQ ID NO: 47 (Chothia) HCDR3 TGGACTACCGGCACAGGCGCCTAC LC BAP049 клона B SEQ ID NO: 50 (Kabat) LCDR1 AAATCTAGTCAGTCACTGCTGGATAGCGGTAATCAGAAGAACTTCCTGACC SEQ ID NO: 51 (Kabat) LCDR2 TGGGCCTCTACTAGAGAATCA SEQ ID NO: 52 (Kabat) LCDR3 CAGAACGACTATAGCTACCCCTACACC SEQ ID NO: 53 (Chothia) LCDR1 AGTCAGTCACTGCTGGATAGCGGTAATCAGAAGAACTTC SEQ ID NO: 54 (Chothia) LCDR2 TGGGCCTCT SEQ ID NO: 55 (Chothia) LCDR3 GACTATAGCTACCCCTAC HC BAP049 клона E SEQ ID NO: 45 (Kabat) HCDR1 ACCTACTGGATGCAC SEQ ID NO: 46 (Kabat) HCDR2 AATATCTACCCCGGCACCGGCGGCTCTAACTTCGACGAGAAGTTTAAGAAT SEQ ID NO: 47 (Kabat) HCDR3 TGGACTACCGGCACAGGCGCCTAC SEQ ID NO: 48 (Chothia) HCDR1 GGCTACACCTTCACTACCTAC SEQ ID NO: 49 (Chothia) HCDR2 TACCCCGGCACCGGCGGC SEQ ID NO: 47 (Chothia) HCDR3 TGGACTACCGGCACAGGCGCCTAC LC BAP049 клона E SEQ ID NO: 50 (Kabat) LCDR1 AAATCTAGTCAGTCACTGCTGGATAGCGGTAATCAGAAGAACTTCCTGACC SEQ ID NO: 51 (Kabat) LCDR2 TGGGCCTCTACTAGAGAATCA SEQ ID NO: 52 (Kabat) LCDR3 CAGAACGACTATAGCTACCCCTACACC SEQ ID NO: 53 (Chothia) LCDR1 AGTCAGTCACTGCTGGATAGCGGTAATCAGAAGAACTTC SEQ ID NO: 54 (Chothia) LCDR2 TGGGCCTCT SEQ ID NO: 55 (Chothia) LCDR3 GACTATAGCTACCCCTAC

Другие иллюстративные ингибиторы PD-1

В некоторых вариантах осуществления антитело к PD-1 представляет собой ниволумаб (регистрационный номер CAS: 946414-94-4). Альтернативные названия ниволумаба включают MDX-1106, MDX-1106-04, ONO-4538, BMS-936558 или OPDIVO®. Nivolumab представляет собой полностью человеческое моноклональное антитело IgG4, которое специфически блокирует PD1. Ниволумаб (клон 5C4) и другие человеческие моноклональные антитела, которые специфически связываются с PD1, раскрыты в патенте США № 8008449 и публикации согласно PCT № WO2006/121168, включенных посредством ссылки во всей своей полноте. В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или в совокупности все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи ниволумаба, например, раскрытые в таблице 4.

В других вариантах осуществления антитело к PD-1 представляет собой пембролизумаб. Пембролизумаб (торговое наименование KEYTRUDA, ранее ламбролизумаб, также известен как Merck 3745, MK-3475 или SCH-900475) представляет собой гуманизированное моноклональное антитело IgG4, которое связывается с PD1. Пембролизумаб раскрыт, например, в Hamid, O. et al. (2013) New England Journal of Medicine 369 (2): 134-44, публикации согласно PCT № WO2009/114335 и патенте США № 8354509, включенных посредством ссылки во всей своей полноте. В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или в совокупности все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи пембролизумаба, например, раскрытые в таблице 4.

В некоторых вариантах осуществления антитело к PD-1 представляет собой пидилизумаб. Пидилизумаб (CT-011; Cure Tech) представляет собой гуманизированное моноклональное антитело IgG1k, которое связывается с PD1. Пидилизумаб и другие гуманизированные моноклональные антитела к PD-1 раскрыты в публикации согласно PCT № WO2009/101611, включенной посредством ссылки во всей своей полноте. В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или в совокупности все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи пидилизумаба, например, раскрытые в таблице 4.

Другие антитела к PD1 раскрыты в патенте США № 8609089, публикации заявки на патент США № 2010028330 и/или публикации заявки на патент США № 20120114649, включенных посредством ссылки во всей своей полноте. Другие антитела к PD1 включают AMP 514 (Amplimmune).

В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 представляет собой MEDI0680 (Medimmune), также известный как AMP-514. MEDI0680 и другие антитела к PD-1 раскрыты в US 9205148 и WO 2012/145493, включенных посредством ссылки во всей своей полноте. В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или в совокупности все последовательности CDR), последовательность вариабельного участка тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи MEDI0680.

В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 представляет собой REGN2810 (Regeneron). В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или в совокупности все последовательности CDR), последовательность вариабельного участка тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи REGN2810.

В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 представляет собой PF-06801591 (Pfizer). В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или в совокупности все последовательности CDR), последовательность вариабельного участка тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи PF-06801591.

В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 представляет собой BGB-A317 или BGB-108 (Beigene). В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или в совокупности все последовательности CDR), последовательность вариабельного участка тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи BGB-A317 или BGB-108.

В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 представляет собой INCSHR1210 (Incyte), также известный как INCSHR01210 или SHR-1210. В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или в совокупности все последовательности CDR), последовательность вариабельного участка тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи INCSHR1210.

В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 представляет собой TSR-042 (Tesaro), также известный как ANB011. В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или в совокупности все последовательности CDR), последовательность вариабельного участка тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи TSR-042.

Дополнительные известные антитела к PD-1 включают антитела, описанные, например, в WO 2015/112800, WO 2016/092419, WO 2015/085847, WO 2014/179664, WO 2014/194302, WO 2014/209804, WO 2015/200119, US 8735553, US 7488802, US 8927697, US 8993731 и US 9102727, включенных посредством ссылки во всей своей полноте.

В одном варианте осуществления антитело к PD-1 представляет собой антитело, которое конкурирует за связывание и/или связывается с тем же эпитопом в PD-1, что и одно из антител к PD-1, описанных в данном документе.

В одном варианте осуществления ингибитор PD-1 представляет собой пептид, который ингибирует сигнальный путь PD-1, например, как описано в US 8907053, включенной посредством ссылки во всей своей полноте. В некоторых вариантах осуществления ингибитор PD-1 представляет собой иммуноадгезин (например, иммуноадгезин, который содержит внеклеточную или PD-1-связывающую часть PD-L1 или PD-L2, слитую с константной областью (например, последовательностью Fc-области иммуноглобулина)). В некоторых вариантах осуществления ингибитор PD-1 представляет собой AMP-224 (B7-DCIg (Amplimmune), например, раскрытый в WO 2010/027827 и WO 2011/066342, включенных посредством ссылки во всей своей полноте).

Таблица 4. Аминокислотные последовательности других иллюстративных молекул антител к PD-1 Nivolumab SEQ ID NO: 56 Тяжелая цепь QVQLVESGGGVVQPGRSLRLDCKASGITFSNSGMHWVRQAPGKGLEWVAVIWYDGSKRYYADSVKGRFTISRDNSKNTLFLQMNSLRAEDTAVYYCATNDDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK SEQ ID NO: 57 Легкая цепь EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVSSYLAWYQQKPGQAPRLLIYDASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQSSNWPRTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC Пембролизумаб SEQ ID NO: 58 Тяжелая цепь QVQLVQSGVEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYYMYWVRQAPGQGLEWMGGINPSNGGTNFNEKFKNRVTLTTDSSTTTAYMELKSLQFDDTAVYYCARRDYRFDMGFDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK SEQ ID NO: 59 Легкая цепь EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASKGVSTSGYSYLHWYQQKPGQAPRLLIYLASYLESGVPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQHSRDLPLTFGGGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC Пидилизумаб SEQ ID NO: 60 Тяжелая цепь QVQLVQSGSELKKPGASVKISCKASGYTFTNYGMNWVRQAPGQGLQWMGWINTDSGESTYAEEFKGRFVFSLDTSVNTAYLQITSLTAEDTGMYFCVRVGYDALDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK SEQ ID NO: 61 Легкая цепь EIVLTQSPSSLSASVGDRVTITCSARSSVSYMHWFQQKPGKAPKLWIYRTSNLASGVPSRFSGSGSGTSYCLTINSLQPEDFATYYCQQRSSFPLTFGGGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC

Ингибиторы PD-L1

В некоторых вариантах осуществления соединения формулы (I') или формулы (I) или их фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на их основе, их стереоизомер или таутомер по настоящему изобретению применяют в комбинации с ингибитором PD-L1 для лечения заболевания, например рака. В некоторых вариантах осуществления ингибитор PD-L1 выбран из FAZ053 (Novartis), атезолизумаба (Genentech/Roche), авелумаба (Merck Serono и Pfizer), дурвалумаба (MedImmune/AstraZeneca) или BMS-936559 (Bristol-Myers Squibb).

Иллюстративные ингибиторы PD-L1

В одном варианте осуществления ингибитор PD-L1 представляет собой молекулу антитела к PD-L1. В одном варианте осуществления ингибитор PD-L1 представляет собой молекулу антитела к PD-L1, раскрытую в US 2016/0108123, опубликованной 21 апреля 2016 г. под названием "Antibody Molecules to PD-L1 and Uses Thereof", включенной посредством ссылки во всей своей полноте.

В одном варианте осуществления молекула антитела PD-L1 содержит по меньшей мере одну, две, три, четыре, пять или шесть областей, определяющих комплементарность (CDR) (или в совокупности все CDR), из вариабельной области тяжелой и легкой цепей, содержащей аминокислотную последовательность, показанную в таблице 5 (например, из последовательностей вариабельной области тяжелой и легкой цепей BAP058 клона O или BAP058 клона N, раскрытых в таблице 5), или кодируемой нуклеотидной последовательностью, показанной в таблице 5. В некоторых вариантах осуществления CDR указаны согласно определению по Kabat (например, как изложено в таблице 5). В некоторых вариантах осуществления CDR указаны согласно определению по Chothia (например, как изложено в таблице 5). В некоторых вариантах осуществления CDR указаны согласно комбинации определений CDR как по Kabat, так и по Chothia (например, как изложено в таблице 5). В одном варианте осуществления CDR1 VH согласно комбинации определений CDR по Kabat и Chothia содержит аминокислотную последовательность GYTFTSYWMY (SEQ ID NO: 214). В одном варианте осуществления одна или несколько CDR (или в совокупности все CDR) имеют одно, два, три, четыре, пять, шесть или больше изменений, например, аминокислотних замен (например, консервативных аминокислотных замен) или делеций, по сравнению с аминокислотной последовательностью, показанной в таблице 5 или кодируемой нуклеотидной последовательностью, показанной в таблице 5.

В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-L1 содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 62, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 63 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 64; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 70, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 71 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 72, каждая из которых раскрыта в таблице 5.

В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-L1 содержит VH, содержащую VHCDR1, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 89, VHCDR2, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 90, и VHCDR3, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 91; и VL, содержащую VLCDR1, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 94, VLCDR2, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 95, и VLCDR3, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 96, каждая из которых раскрыта в таблице 5.

В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-L1 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 67 или аминокислотную последовательность, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичную по отношению к SEQ ID NO: 67. В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-L1 содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 77 или аминокислотную последовательность, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичную по отношению к SEQ ID NO: 77. В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-L1 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 81 или аминокислотную последовательность, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичную по отношению к SEQ ID NO: 81. В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-L1 содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 85 или аминокислотную последовательность, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичную по отношению к SEQ ID NO: 85. В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-L1 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 67, и VL, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 77. В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-L1 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 81, и VL, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 85.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 68 или нуклеотидной последовательностью, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичной по отношению к SEQ ID NO: 68. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VL, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 78 или нуклеотидной последовательностью, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичной по отношению к SEQ ID NO: 78. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 82 или нуклеотидной последовательностью, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичной по отношению к SEQ ID NO: 82. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VL, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 86 или нуклеотидной последовательностью, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичной по отношению к SEQ ID NO: 86. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 68, и VL, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 78. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 82, и VL, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 86.

В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-L1 содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 69 или аминокислотную последовательность, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичную по отношению к SEQ ID NO: 69. В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-L1 содержит легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 79 или аминокислотную последовательность, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичную по отношению к SEQ ID NO: 79. В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-L1 содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 83 или аминокислотную последовательность, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичную по отношению к SEQ ID NO: 83. В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-L1 содержит легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 87 или аминокислотную последовательность, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичную по отношению к SEQ ID NO: 87. В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-L1 содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 69, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 79. В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-L1 содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 83, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 87.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит тяжелую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 76 или нуклеотидной последовательностью, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичной по отношению к SEQ ID NO: 76. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит легкую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 80 или нуклеотидной последовательностью, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичной по отношению к SEQ ID NO: 80. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит тяжелую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 84 или нуклеотидной последовательностью, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичной по отношению к SEQ ID NO: 84. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит легкую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 88 или нуклеотидной последовательностью, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичной по отношению к SEQ ID NO: 88. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит тяжелую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 76, и легкую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 80. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит тяжелую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 84, и легкую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 88.

Молекулы антител, описанные в данном документе, можно получать с помощью векторов, клеток-хозяев и способов, описанных в US 2016/0108123, включенной посредством ссылки во всей своей полноте.

Таблица 5. Аминокислотные и нуклеотидные последовательности иллюстративных молекул антител к PD-L1 HC BAP058 клона O SEQ ID NO: 62 (Kabat) HCDR1 SYWMY SEQ ID NO: 63 (Kabat) HCDR2 RIDPNSGSTKYNEKFKN SEQ ID NO: 64 (Kabat) HCDR3 DYRKGLYAMDY SEQ ID NO: 65 (Chothia) HCDR1 GYTFTSY SEQ ID NO: 66 (Chothia) HCDR2 DPNSGS SEQ ID NO: 64 (Chothia) HCDR3 DYRKGLYAMDY SEQ ID NO: 67 VH EVQLVQSGAEVKKPGATVKISCKVSGYTFTSYWMYWVRQARGQRLEWIGRIDPNSGSTKYNEKFKNRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWGQGTTVTVSS SEQ ID NO: 68 ДНК, кодирующая VH GAAGTGCAGCTGGTGCAGTCAGGCGCCGAAGTGAAGAAACCCGGCGCTACCGTGAAGATTAGCTGTAAAGTCTCAGGCTACACCTTCACTAGCTACTGGATGTACTGGGTCCGACAGGCTAGAGGGCAAAGACTGGAGTGGATCGGTAGAATCGACCCTAATAGCGGCTCTACTAAGTATAACGAGAAGTTTAAGAATAGGTTCACTATTAGTAGGGATAACTCTAAGAACACCCTGTACCTGCAGATGAATAGCCTGAGAGCCGAGGACACCGCCGTCTACTACTGCGCTAGAGACTATAGAAAGGGCCTGTACGCTATGGACTACTGGGGTCAAGGCACTACCGTGACCGTGTCTTCA SEQ ID NO: 69 Тяжелая цепь EVQLVQSGAEVKKPGATVKISCKVSGYTFTSYWMYWVRQARGQRLEWIGRIDPNSGSTKYNEKFKNRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLG SEQ ID NO: 76 ДНК, кодирующая тяжелую цепь GAAGTGCAGCTGGTGCAGTCAGGCGCCGAAGTGAAGAAACCCGGCGCTACCGTGAAGATTAGCTGTAAAGTCTCAGGCTACACCTTCACTAGCTACTGGATGTACTGGGTCCGACAGGCTAGAGGGCAAAGACTGGAGTGGATCGGTAGAATCGACCCTAATAGCGGCTCTACTAAGTATAACGAGAAGTTTAAGAATAGGTTCACTATTAGTAGGGATAACTCTAAGAACACCCTGTACCTGCAGATGAATAGCCTGAGAGCCGAGGACACCGCCGTCTACTACTGCGCTAGAGACTATAGAAAGGGCCTGTACGCTATGGACTACTGGGGTCAAGGCACTACCGTGACCGTGTCTTCAGCTAGCACTAAGGGCCCGTCCGTGTTCCCCCTGGCACCTTGTAGCCGGAGCACTAGCGAATCCACCGCTGCCCTCGGCTGCCTGGTCAAGGATTACTTCCCGGAGCCCGTGACCGTGTCCTGGAACAGCGGAGCCCTGACCTCCGGAGTGCACACCTTCCCCGCTGTGCTGCAGAGCTCCGGGCTGTACTCGCTGTCGTCGGTGGTCACGGTGCCTTCATCTAGCCTGGGTACCAAGACCTACACTTGCAACGTGGACCACAAGCCTTCCAACACTAAGGTGGACAAGCGCGTCGAATCGAAGTACGGCCCACCGTGCCCGCCTTGTCCCGCGCCGGAGTTCCTCGGCGGTCCCTCGGTCTTTCTGTTCCCACCGAAGCCCAAGGACACTTTGATGATTTCCCGCACCCCTGAAGTGACATGCGTGGTCGTGGACGTGTCACAGGAAGATCCGGAGGTGCAGTTCAATTGGTACGTGGATGGCGTCGAGGTGCACAACGCCAAAACCAAGCCGAGGGAGGAGCAGTTCAACTCCACTTACCGCGTCGTGTCCGTGCTGACGGTGCTGCATCAGGACTGGCTGAACGGGAAGGAGTACAAGTGCAAAGTGTCCAACAAGGGACTTCCTAGCTCAATCGAAAAGACCATCTCGAAAGCCAAGGGACAGCCCCGGGAACCCCAAGTGTATACCCTGCCACCGAGCCAGGAAGAAATGACTAAGAACCAAGTCTCATTGACTTGCCTTGTGAAGGGCTTCTACCCATCGGATATCGCCGTGGAATGGGAGTCCAACGGCCAGCCGGAAAACAACTACAAGACCACCCCTCCGGTGCTGGACTCAGACGGATCCTTCTTCCTCTACTCGCGGCTGACCGTGGATAAGAGCAGATGGCAGGAGGGAAATGTGTTCAGCTGTTCTGTGATGCATGAAGCCCTGCACAACCACTACACTCAGAAGTCCCTGTCCCTCTCCCTGGGA LC BAP058 клона O SEQ ID NO: 70 (Kabat) LCDR1 KASQDVGTAVA SEQ ID NO: 71 (Kabat) LCDR2 WASTRHT SEQ ID NO: 72 (Kabat) LCDR3 QQYNSYPLT SEQ ID NO: 73 (Chothia) LCDR1 SQDVGTA SEQ ID NO: 74 (Chothia) LCDR2 WAS SEQ ID NO: 75 (Chothia) LCDR3 YNSYPL SEQ ID NO: 77 VL AIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCKASQDVGTAVAWYLQKPGQSPQLLIYWASTRHTGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLEAEDAATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIK SEQ ID NO: 78 ДНК, кодирующая VL GCTATTCAGCTGACTCAGTCACCTAGTAGCCTGAGCGCTAGTGTGGGCGATAGAGTGACTATCACCTGTAAAGCCTCTCAGGACGTGGGCACCGCCGTGGCCTGGTATCTGCAGAAGCCTGGTCAATCACCTCAGCTGCTGATCTACTGGGCCTCTACTAGACACACCGGCGTGCCCTCTAGGTTTAGCGGTAGCGGTAGTGGCACCGACTTCACCTTCACTATCTCTTCACTGGAAGCCGAGGACGCCGCTACCTACTACTGTCAGCAGTATAATAGCTACCCCCTGACCTTCGGTCAAGGCACTAAGGTCGAGATTAAG SEQ ID NO: 79 Легкая цепь AIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCKASQDVGTAVAWYLQKPGQSPQLLIYWASTRHTGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLEAEDAATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC SEQ ID NO: 80 ДНК, кодирующая легкую цепь GCTATTCAGCTGACTCAGTCACCTAGTAGCCTGAGCGCTAGTGTGGGCGATAGAGTGACTATCACCTGTAAAGCCTCTCAGGACGTGGGCACCGCCGTGGCCTGGTATCTGCAGAAGCCTGGTCAATCACCTCAGCTGCTGATCTACTGGGCCTCTACTAGACACACCGGCGTGCCCTCTAGGTTTAGCGGTAGCGGTAGTGGCACCGACTTCACCTTCACTATCTCTTCACTGGAAGCCGAGGACGCCGCTACCTACTACTGTCAGCAGTATAATAGCTACCCCCTGACCTTCGGTCAAGGCACTAAGGTCGAGATTAAGCGTACGGTGGCCGCTCCCAGCGTGTTCATCTTCCCCCCCAGCGACGAGCAGCTGAAGAGCGGCACCGCCAGCGTGGTGTGCCTGCTGAACAACTTCTACCCCCGGGAGGCCAAGGTGCAGTGGAAGGTGGACAACGCCCTGCAGAGCGGCAACAGCCAGGAGAGCGTCACCGAGCAGGACAGCAAGGACTCCACCTACAGCCTGAGCAGCACCCTGACCCTGAGCAAGGCCGACTACGAGAAGCATAAGGTGTACGCCTGCGAGGTGACCCACCAGGGCCTGTCCAGCCCCGTGACCAAGAGCTTCAACAGGGGCGAGTGC HC BAP058 клона N SEQ ID NO: 62 (Kabat) HCDR1 SYWMY SEQ ID NO: 63 (Kabat) HCDR2 RIDPNSGSTKYNEKFKN SEQ ID NO: 64 (Kabat) HCDR3 DYRKGLYAMDY SEQ ID NO: 65 (Chothia) HCDR1 GYTFTSY SEQ ID NO: 66 (Chothia) HCDR2 DPNSGS SEQ ID NO: 64 (Chothia) HCDR3 DYRKGLYAMDY SEQ ID NO: 81 VH EVQLVQSGAEVKKPGATVKISCKVSGYTFTSYWMYWVRQATGQGLEWMGRIDPNSGSTKYNEKFKNRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWGQGTTVTVSS SEQ ID NO: 82 ДНК, кодирующая VH GAAGTGCAGCTGGTGCAGTCAGGCGCCGAAGTGAAGAAACCCGGCGCTACCGTGAAGATTAGCTGTAAAGTCTCAGGCTACACCTTCACTAGCTACTGGATGTACTGGGTCCGACAGGCTACCGGTCAAGGCCTGGAGTGGATGGGTAGAATCGACCCTAATAGCGGCTCTACTAAGTATAACGAGAAGTTTAAGAATAGAGTGACTATCACCGCCGATAAGTCTACTAGCACCGCCTATATGGAACTGTCTAGCCTGAGATCAGAGGACACCGCCGTCTACTACTGCGCTAGAGACTATAGAAAGGGCCTGTACGCTATGGACTACTGGGGTCAAGGCACTACCGTGACCGTGTCTTCA SEQ ID NO: 83 Тяжелая цепь EVQLVQSGAEVKKPGATVKISCKVSGYTFTSYWMYWVRQATGQGLEWMGRIDPNSGSTKYNEKFKNRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLG SEQ ID NO: 84 ДНК, кодирующая тяжелую цепь GAAGTGCAGCTGGTGCAGTCAGGCGCCGAAGTGAAGAAACCCGGCGCTACCGTGAAGATTAGCTGTAAAGTCTCAGGCTACACCTTCACTAGCTACTGGATGTACTGGGTCCGACAGGCTACCGGTCAAGGCCTGGAGTGGATGGGTAGAATCGACCCTAATAGCGGCTCTACTAAGTATAACGAGAAGTTTAAGAATAGAGTGACTATCACCGCCGATAAGTCTACTAGCACCGCCTATATGGAACTGTCTAGCCTGAGATCAGAGGACACCGCCGTCTACTACTGCGCTAGAGACTATAGAAAGGGCCTGTACGCTATGGACTACTGGGGTCAAGGCACTACCGTGACCGTGTCTTCAGCTAGCACTAAGGGCCCGTCCGTGTTCCCCCTGGCACCTTGTAGCCGGAGCACTAGCGAATCCACCGCTGCCCTCGGCTGCCTGGTCAAGGATTACTTCCCGGAGCCCGTGACCGTGTCCTGGAACAGCGGAGCCCTGACCTCCGGAGTGCACACCTTCCCCGCTGTGCTGCAGAGCTCCGGGCTGTACTCGCTGTCGTCGGTGGTCACGGTGCCTTCATCTAGCCTGGGTACCAAGACCTACACTTGCAACGTGGACCACAAGCCTTCCAACACTAAGGTGGACAAGCGCGTCGAATCGAAGTACGGCCCACCGTGCCCGCCTTGTCCCGCGCCGGAGTTCCTCGGCGGTCCCTCGGTCTTTCTGTTCCCACCGAAGCCCAAGGACACTTTGATGATTTCCCGCACCCCTGAAGTGACATGCGTGGTCGTGGACGTGTCACAGGAAGATCCGGAGGTGCAGTTCAATTGGTACGTGGATGGCGTCGAGGTGCACAACGCCAAAACCAAGCCGAGGGAGGAGCAGTTCAACTCCACTTACCGCGTCGTGTCCGTGCTGACGGTGCTGCATCAGGACTGGCTGAACGGGAAGGAGTACAAGTGCAAAGTGTCCAACAAGGGACTTCCTAGCTCAATCGAAAAGACCATCTCGAAAGCCAAGGGACAGCCCCGGGAACCCCAAGTGTATACCCTGCCACCGAGCCAGGAAGAAATGACTAAGAACCAAGTCTCATTGACTTGCCTTGTGAAGGGCTTCTACCCATCGGATATCGCCGTGGAATGGGAGTCCAACGGCCAGCCGGAAAACAACTACAAGACCACCCCTCCGGTGCTGGACTCAGACGGATCCTTCTTCCTCTACTCGCGGCTGACCGTGGATAAGAGCAGATGGCAGGAGGGAAATGTGTTCAGCTGTTCTGTGATGCATGAAGCCCTGCACAACCACTACACTCAGAAGTCCCTGTCCCTCTCCCTGGGA LC BAP058 клона N SEQ ID NO: 70 (Kabat) LCDR1 KASQDVGTAVA SEQ ID NO: 71 (Kabat) LCDR2 WASTRHT SEQ ID NO: 72(Kabat) LCDR3 QQYNSYPLT SEQ ID NO: 73 (Chothia) LCDR1 SQDVGTA SEQ ID NO: 74 (Chothia) LCDR2 WAS SEQ ID NO: 75 (Chothia) LCDR3 YNSYPL SEQ ID NO: 85 VL DVVMTQSPLSLPVTLGQPASISCKASQDVGTAVAWYQQKPGQAPRLLIYWASTRHTGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIK SEQ ID NO: 86 ДНК, кодирующая VL GACGTCGTGATGACTCAGTCACCCCTGAGCCTGCCCGTGACCCTGGGGCAGCCCGCCTCTATTAGCTGTAAAGCCTCTCAGGACGTGGGCACCGCCGTGGCCTGGTATCAGCAGAAGCCAGGGCAAGCCCCTAGACTGCTGATCTACTGGGCCTCTACTAGACACACCGGCGTGCCCTCTAGGTTTAGCGGTAGCGGTAGTGGCACCGAGTTCACCCTGACTATCTCTTCACTGCAGCCCGACGACTTCGCTACCTACTACTGTCAGCAGTATAATAGCTACCCCCTGACCTTCGGTCAAGGCACTAAGGTCGAGATTAAG SEQ ID NO: 87 Легкая цепь DVVMTQSPLSLPVTLGQPASISCKASQDVGTAVAWYQQKPGQAPRLLIYWASTRHTGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC SEQ ID NO: 88 ДНК, кодирующая легкую цепь GACGTCGTGATGACTCAGTCACCCCTGAGCCTGCCCGTGACCCTGGGGCAGCCCGCCTCTATTAGCTGTAAAGCCTCTCAGGACGTGGGCACCGCCGTGGCCTGGTATCAGCAGAAGCCAGGGCAAGCCCCTAGACTGCTGATCTACTGGGCCTCTACTAGACACACCGGCGTGCCCTCTAGGTTTAGCGGTAGCGGTAGTGGCACCGAGTTCACCCTGACTATCTCTTCACTGCAGCCCGACGACTTCGCTACCTACTACTGTCAGCAGTATAATAGCTACCCCCTGACCTTCGGTCAAGGCACTAAGGTCGAGATTAAGCGTACGGTGGCCGCTCCCAGCGTGTTCATCTTCCCCCCCAGCGACGAGCAGCTGAAGAGCGGCACCGCCAGCGTGGTGTGCCTGCTGAACAACTTCTACCCCCGGGAGGCCAAGGTGCAGTGGAAGGTGGACAACGCCCTGCAGAGCGGCAACAGCCAGGAGAGCGTCACCGAGCAGGACAGCAAGGACTCCACCTACAGCCTGAGCAGCACCCTGACCCTGAGCAAGGCCGACTACGAGAAGCATAAGGTGTACGCCTGCGAGGTGACCCACCAGGGCCTGTCCAGCCCCGTGACCAAGAGCTTCAACAGGGGCGAGTGC HC BAP058 клона O SEQ ID NO: 89 (Kabat) HCDR1 agctactggatgtac SEQ ID NO: 90 (Kabat) HCDR2 agaatcgaccctaatagcggctctactaagtataacgagaagtttaagaat SEQ ID NO: 91 (Kabat) HCDR3 gactatagaaagggcctgtacgctatggactac SEQ ID NO: 92 (Chothia) HCDR1 ggctacaccttcactagctac SEQ ID NO: 93 (Chothia) HCDR2 gaccctaatagcggctct SEQ ID NO: 91 (Chothia) HCDR3 gactatagaaagggcctgtacgctatggactac LC BAP058 клона O SEQ ID NO: 94 (Kabat) LCDR1 aaagcctctcaggacgtgggcaccgccgtggcc SEQ ID NO: 95 (Kabat) LCDR2 tgggcctctactagacacacc SEQ ID NO: 96 (Kabat) LCDR3 cagcagtataatagctaccccctgacc SEQ ID NO: 97 (Chothia) LCDR1 tctcaggacgtgggcaccgcc SEQ ID NO: 98 (Chothia) LCDR2 tgggcctct SEQ ID NO: 99 (Chothia) LCDR3 tataatagctaccccctg HC BAP058 клона N SEQ ID NO: 89 (Kabat) HCDR1 agctactggatgtac SEQ ID NO: 90 (Kabat) HCDR2 agaatcgaccctaatagcggctctactaagtataacgagaagtttaagaat SEQ ID NO: 91 (Kabat) HCDR3 gactatagaaagggcctgtacgctatggactac SEQ ID NO: 92 (Chothia) HCDR1 ggctacaccttcactagctac SEQ ID NO: 93 (Chothia) HCDR2 gaccctaatagcggctct SEQ ID NO: 91 (Chothia) HCDR3 gactatagaaagggcctgtacgctatggactac LC BAP058 клона N SEQ ID NO: 94 (Kabat) LCDR1 aaagcctctcaggacgtgggcaccgccgtggcc SEQ ID NO: 95 (Kabat) LCDR2 tgggcctctactagacacacc SEQ ID NO: 96 (Kabat) LCDR3 cagcagtataatagctaccccctgacc SEQ ID NO: 97 (Chothia) LCDR1 tctcaggacgtgggcaccgcc SEQ ID NO: 98 (Chothia) LCDR2 tgggcctct SEQ ID NO: 99 (Chothia) LCDR3 tataatagctaccccctg

Другие иллюстративные ингибиторы PD-L1

В некоторых вариантах осуществления ингибитор PD-L1 представляет собой антитело к PD-L1. В некоторых вариантах осуществления ингибитор, представляющий собой антитело к PD-L1, выбран из YW243.55.S70, MPDL3280A, MEDI-4736 или MDX-1105MSB-0010718C (также называемого A09-246-2), раскрытого, например, в WO 2013/0179174, и имеет последовательность, раскрытую в данном документе (или последовательность, по сути идентичную ей или сходную с ней, например, последовательность, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или больше идентичную по отношению к указанной последовательности).

В одном варианте осуществления ингибитор PD-L1 представляет собой MDX-1105. MDX-1105, также известный как BMS-936559, представляет собой антитело к PD-L1, описанное в публикации согласно PCT № WO 2007/005874.

В одном варианте осуществления ингибитор PD-L1 представляет собой YW243.55.S70. Антитело YW243.55.S70 представляет собой антитело к PD-L1, описанное в публикации согласно PCT № WO 2010/077634.

В одном варианте осуществления ингибитор PD-L1 представляет собой MDPL3280A (Genentech/Roche), также известный как атезолизумаб, RG7446, RO5541267, YW243.55.S70 или TECENTRIQ™. MDPL3280A представляет собой человеческое моноклональное антитело IgG1 с оптимизированным Fc, которое связывается с PD-L1. MDPL3280A и другие человеческие моноклональные антитела к PD-L1 раскрыты в патенте США № 7943743 и публикации заявки на патент США № 20120039906, включенных посредством ссылки во всей своей полноте. В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-L1 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или в совокупности все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи атезолизумаба, например, раскрытые в таблице 6.

В других вариантах осуществления ингибитор PD-L2 представляет собой AMP-224. AMP-224 представляет собой растворимую форму рецептора на основе слитого белка PD-L2 и Fc, который блокирует взаимодействие между PD1 и B7-H1 (B7-DCIg; Amplimmune; например, раскрытый в публикациях согласно PCT №№ WO2010/027827 и WO2011/066342).

В одном варианте осуществления ингибитор PD-L1 представляет собой молекулу антитела к PD-L1. В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-L1 представляет собой авелумаб (Merck Serono и Pfizer), также известный как MSB0010718C. Авелумаб и другие антитела к PD-L1 раскрыты в WO 2013/079174, включенной посредством ссылки во всей своей полноте. В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-L1 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или в совокупности все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи авелумаба, например, раскрытые в таблице 6.

В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-L1 представляет собой дурвалумаб (MedImmune/AstraZeneca), также известный как MEDI4736. Дурвалумаб и другие антитела к PD-L1 раскрыты в US 8779108, включенной посредством ссылки во всей своей полноте. В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-L1 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или в совокупности все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи дурвалумаба, например, раскрытые в таблице 6.

В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-L1 представляет собой BMS-936559 (Bristol-Myers Squibb), также известный как MDX-1105 или 12A4. BMS-936559 и другие антитела к PD-L1 раскрыты в US 7943743 и WO 2015/081158, включенных посредством ссылки во всей своей полноте. В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-L1 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или в совокупности все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи BMS-936559, например, раскрытые в таблице 6.

Дополнительные известные антитела к PD-L1 включают антитела, описанные, например, в WO 2015/181342, WO 2014/100079, WO 2016/000619, WO 2014/022758, WO 2014/055897, WO 2015/061668, WO 2013/079174, WO 2012/145493, WO 2015/112805, WO 2015/109124, WO 2015/195163, US 8168179, US 8552154, US 8460927 и US 9175082, включенных посредством ссылки во всей своей полноте.

В одном варианте осуществления антитело к PD-L1 представляет собой антитело, которое конкурирует за связывание и/или связывается с тем же эпитопом в PD-L1, что и одно из антител к PD-L1, описанных в данном документе.

Таблица 6. Аминокислотные последовательности других иллюстративных молекул антител к PD-L1 Атезолизумаб SEQ ID NO: 100 Тяжелая цепь EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSDSWIHWVRQAPGKGLEWVAWISPYGGSTYYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCARRHWPGGFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYASTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK SEQ ID NO: 101 Легкая цепь DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDVSTAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASFLYSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYLYHPATFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC Авелумаб SEQ ID NO: 102 Тяжелая цепь EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYIMMWVRQAPGKGLEWVSSIYPSGGITFYADTVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARIKLGTVTTVDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK SEQ ID NO: 103 Легкая цепь QSALTQPASVSGSPGQSITISCTGTSSDVGGYNYVSWYQQHPGKAPKLMIYDVSNRPSGVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSYTSSSTRVFGTGTKVTVLGQPKANPTVTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKADGSPVKAGVETTKPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVAPTECS Дурвалумаб SEQ ID NO: 104 Тяжелая цепь EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSRYWMSWVRQAPGKGLEWVANIKQDGSEKYYVDSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCAREGGWFGELAFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEFEGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPASIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK SEQ ID NO: 105 Легкая цепь EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQRVSSSYLAWYQQKPGQAPRLLIYDASSRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYCQQYGSLPWTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC BMS-936559 SEQ ID NO: 106 VH QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKTSGDTFSTYAISWVRQAPGQGLEWMGGIIPIFGKAHYAQKFQGRVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYFCARKFHFVSGSPFGMDVWGQGTTVTVSS SEQ ID NO: 107 VL EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVSSYLAWYQQKPGQAPRLLIYDASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSNWPTFGQGTKVEIK

Ингибиторы LAG-3

В некоторых вариантах осуществления соединения формулы (I') или формулы (I) или их фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на их основе, их стереоизомер или таутомер по настоящему изобретению применяют в комбинации с ингибитором LAG-3 для лечения заболевания, например рака. В некоторых вариантах осуществления ингибитор LAG-3 выбран из LAG525 (Novartis), BMS-986016 (Bristol-Myers Squibb) или TSR-033 (Tesaro).

Иллюстративные ингибиторы LAG-3

В одном варианте осуществления ингибитор LAG-3 представляет собой молекулу антитела к LAG-3. В одном варианте осуществления ингибитор LAG-3 представляет собой молекулу антитела к LAG-3, раскрытую в US 2015/0259420, опубликованной 17 сентября 2015 г. под названием "Antibody Molecules to LAG-3 and Uses Thereof", включенной посредством ссылки во всей своей полноте.

В одном варианте осуществления молекула антитела к LAG-3 содержит по меньшей мере одну, две, три, четыре, пять или шесть областей, определяющих комплементарность (CDR) (или в совокупности все CDR), из вариабельной области тяжелой и легкой цепей, содержащей аминокислотную последовательность, показанную в таблице 7 (например, из последовательностей вариабельной области тяжелой и легкой цепей BAP050 клона I или BAP050 клона J, раскрытых в таблице 7), или кодируемой нуклеотидной последовательностью, показанной в таблице 7. В некоторых вариантах осуществления CDR указаны согласно определению по Kabat (например, как изложено в таблице 7). В некоторых вариантах осуществления CDR указаны согласно определению по Chothia (например, как изложено в таблице 7). В некоторых вариантах осуществления CDR указаны согласно комбинации определений CDR как по Kabat, так и по Chothia (например, как изложено в таблице 7). В одном варианте осуществления CDR1 VH согласно комбинации определений CDR по Kabat и Chothia содержит аминокислотную последовательность GFTLTNYGMN (SEQ ID NO: 173). В одном варианте осуществления одна или несколько CDR (или в совокупности все CDR) имеют одно, два, три, четыре, пять, шесть или больше изменений, например, аминокислотних замен (например, консервативных аминокислотных замен) или делеций, по сравнению с аминокислотной последовательностью, показанной в таблице 7 или кодируемой нуклеотидной последовательностью, показанной в таблице 7.

В одном варианте осуществления молекула антитела к LAG-3 содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 108, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 109 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 110; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 117, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 118 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 119, каждая из которых раскрыта в таблице 7.

В одном варианте осуществления молекула антитела к LAG-3 содержит VH, содержащую VHCDR1, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 143 или 144, VHCDR2, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 145 или 146, и VHCDR3, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 147 или 148; и VL, содержащую VLCDR1, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 153 или 154, VLCDR2, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 155 или 156, и VLCDR3, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 157 или 158, каждая из которых раскрыта в таблице 7. В одном варианте осуществления молекула антитела к LAG-3 содержит VH, содержащую VHCDR1, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 165 или 144, VHCDR2, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 166 или 146, и VHCDR3, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 167 или 148; и VL, содержащую VLCDR1, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 153 или 154, VLCDR2, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 155 или 156, и VLCDR3, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 157 или 158, каждая из которых раскрыта в таблице 7.

В одном варианте осуществления молекула антитела к LAG-3 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 113 или аминокислотную последовательность, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичную по отношению к SEQ ID NO: 113. В одном варианте осуществления молекула антитела к LAG-3 содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 125 или аминокислотную последовательность, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичную по отношению к SEQ ID NO: 125. В одном варианте осуществления молекула антитела к LAG-3 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 131 или аминокислотную последовательность, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичную по отношению к SEQ ID NO: 131. В одном варианте осуществления молекула антитела к LAG-3 содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 137 или аминокислотную последовательность, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичную по отношению к SEQ ID NO: 137. В одном варианте осуществления молекула антитела к LAG-3 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 113, и VL, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 125. В одном варианте осуществления молекула антитела к LAG-3 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 131, и VL, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 137.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 114 или 115 или нуклеотидной последовательностью, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичной по отношению к SEQ ID NO: 114 или 115. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VL, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 126 или 127 или нуклеотидной последовательностью, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичной по отношению к SEQ ID NO: 126 или 127. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 132 или 133 или нуклеотидной последовательностью, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичной по отношению к SEQ ID NO: 132 или 133. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VL, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 138 или 139 или нуклеотидной последовательностью, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичной по отношению к SEQ ID NO: 138 или 139. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 114 или 115, и VL, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 126 или 127. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 132 или 133, и VL, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 138 или 139.

В одном варианте осуществления молекула антитела к LAG-3 содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 116 или аминокислотную последовательность, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичную по отношению к SEQ ID NO: 116. В одном варианте осуществления молекула антитела к LAG-3 содержит легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 128 или аминокислотную последовательность, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичную по отношению к SEQ ID NO: 128. В одном варианте осуществления молекула антитела к LAG-3 содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 134 или аминокислотную последовательность, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичную по отношению к SEQ ID NO: 134. В одном варианте осуществления молекула антитела к LAG-3 содержит легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 140 или аминокислотную последовательность, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичную по отношению к SEQ ID NO: 140. В одном варианте осуществления молекула антитела к LAG-3 содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 116, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 128. В одном варианте осуществления молекула антитела к LAG-3 содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 134, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 140.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит тяжелую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 123 или 124 или нуклеотидной последовательностью, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичной по отношению к SEQ ID NO: 123 или 124. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит легкую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 129 или 130 или нуклеотидной последовательностью, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичной по отношению к SEQ ID NO: 129 или 130. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит тяжелую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 135 или 136 или нуклеотидной последовательностью, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичной по отношению к SEQ ID NO: 135 или 136. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит легкую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 141 или 142 или нуклеотидной последовательностью, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичной по отношению к SEQ ID NO: 141 или 142. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит тяжелую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 123 или 124, и легкую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 129 или 130. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит тяжелую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 135 или 136, и легкую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 141 или 142.

Молекулы антител, описанные в данном документе, можно получать с использованием векторов, клеток-хозяев и способов, описанных в US 2015/0259420, включенной посредством ссылки во всей своей полноте.

Таблица 7. Аминокислотные и нуклеотидные последовательности иллюстративных молекул антител к LAG-3 HC BAP050 клона I SEQ ID NO: 108 (Kabat) HCDR1 NYGMN SEQ ID NO: 109 (Kabat) HCDR2 WINTDTGEPTYADDFKG SEQ ID NO: 110 (Kabat) HCDR3 NPPYYYGTNNAEAMDY SEQ ID NO: 111 (Chothia) HCDR1 GFTLTNY SEQ ID NO: 112 (Chothia) HCDR2 NTDTGE SEQ ID NO: 110 (Chothia) HCDR3 NPPYYYGTNNAEAMDY SEQ ID NO: 113 VH QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGFTLTNYGMNWVRQARGQRLEWIGWINTDTGEPTYADDFKGRFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCARNPPYYYGTNNAEAMDYWGQGTTVTVSS SEQ ID NO: 114 ДНК, кодирующая VH Caagtgcagctggtgcagtcgggagccgaagtgaagaagcctggagcctcggtgaaggtgtcgtgcaaggcatccggattcaccctcaccaattacgggatgaactgggtcagacaggcccggggtcaacggctggagtggatcggatggattaacaccgacaccggggagcctacctacgcggacgatttcaagggacggttcgtgttctccctcgacacctccgtgtccaccgcctacctccaaatctcctcactgaaagcggaggacaccgccgtgtactattgcgcgaggaacccgccctactactacggaaccaacaacgccgaagccatggactactggggccagggcaccactgtgactgtgtccagc SEQ ID NO: 115 ДНК, кодирующая VH CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGCGCCGAAGTGAAGAAACCTGGCGCCTCCGTGAAGGTGTCCTGCAAGGCCTCTGGCTTCACCCTGACCAACTACGGCATGAACTGGGTGCGACAGGCCAGGGGCCAGCGGCTGGAATGGATCGGCTGGATCAACACCGACACCGGCGAGCCTACCTACGCCGACGACTTCAAGGGCAGATTCGTGTTCTCCCTGGACACCTCCGTGTCCACCGCCTACCTGCAGATCTCCAGCCTGAAGGCCGAGGATACCGCCGTGTACTACTGCGCCCGGAACCCCCCTTACTACTACGGCACCAACAACGCCGAGGCCATGGACTATTGGGGCCAGGGCACCACCGTGACCGTGTCCTCT SEQ ID NO: 116 Тяжелая цепь QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGFTLTNYGMNWVRQARGQRLEWIGWINTDTGEPTYADDFKGRFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCARNPPYYYGTNNAEAMDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLG SEQ ID NO: 123 ДНК, кодирующая тяжелую цепь caagtgcagctggtgcagtcgggagccgaagtgaagaagcctggagcctcggtgaaggtgtcgtgcaaggcatccggattcaccctcaccaattacgggatgaactgggtcagacaggcccggggtcaacggctggagtggatcggatggattaacaccgacaccggggagcctacctacgcggacgatttcaagggacggttcgtgttctccctcgacacctccgtgtccaccgcctacctccaaatctcctcactgaaagcggaggacaccgccgtgtactattgcgcgaggaacccgccctactactacggaaccaacaacgccgaagccatggactactggggccagggcaccactgtgactgtgtccagcgcgtccactaagggcccgtccgtgttccccctggcaccttgtagccggagcactagcgaatccaccgctgccctcggctgcctggtcaaggattacttcccggagcccgtgaccgtgtcctggaacagcggagccctgacctccggagtgcacaccttccccgctgtgctgcagagctccgggctgtactcgctgtcgtcggtggtcacggtgccttcatctagcctgggtaccaagacctacacttgcaacgtggaccacaagccttccaacactaaggtggacaagcgcgtcgaatcgaagtacggcccaccgtgcccgccttgtcccgcgccggagttcctcggcggtccctcggtctttctgttcccaccgaagcccaaggacactttgatgatttcccgcacccctgaagtgacatgcgtggtcgtggacgtgtcacaggaagatccggaggtgcagttcaattggtacgtggatggcgtcgaggtgcacaacgccaaaaccaagccgagggaggagcagttcaactccacttaccgcgtcgtgtccgtgctgacggtgctgcatcaggactggctgaacgggaaggagtacaagtgcaaagtgtccaacaagggacttcctagctcaatcgaaaagaccatctcgaaagccaagggacagccccgggaaccccaagtgtataccctgccaccgagccaggaagaaatgactaagaaccaagtctcattgacttgccttgtgaagggcttctacccatcggatatcgccgtggaatgggagtccaacggccagccggaaaacaactacaagaccacccctccggtgctggactcagacggatccttcttcctctactcgcggctgaccgtggataagagcagatggcaggagggaaatgtgttcagctgttctgtgatgcatgaagccctgcacaaccactacactcagaagtccctgtccctctccctggga SEQ ID NO: 124 ДНК, кодирующая тяжелую цепь CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGCGCCGAAGTGAAGAAACCTGGCGCCTCCGTGAAGGTGTCCTGCAAGGCCTCTGGCTTCACCCTGACCAACTACGGCATGAACTGGGTGCGACAGGCCAGGGGCCAGCGGCTGGAATGGATCGGCTGGATCAACACCGACACCGGCGAGCCTACCTACGCCGACGACTTCAAGGGCAGATTCGTGTTCTCCCTGGACACCTCCGTGTCCACCGCCTACCTGCAGATCTCCAGCCTGAAGGCCGAGGATACCGCCGTGTACTACTGCGCCCGGAACCCCCCTTACTACTACGGCACCAACAACGCCGAGGCCATGGACTATTGGGGCCAGGGCACCACCGTGACCGTGTCCTCTGCTTCTACCAAGGGGCCCAGCGTGTTCCCCCTGGCCCCCTGCTCCAGAAGCACCAGCGAGAGCACAGCCGCCCTGGGCTGCCTGGTGAAGGACTACTTCCCCGAGCCCGTGACCGTGTCCTGGAACAGCGGAGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTTCCCCGCCGTGCTGCAGAGCAGCGGCCTGTACAGCCTGAGCAGCGTGGTGACCGTGCCCAGCAGCAGCCTGGGCACCAAGACCTACACCTGTAACGTGGACCACAAGCCCAGCAACACCAAGGTGGACAAGAGGGTGGAGAGCAAGTACGGCCCACCCTGCCCCCCCTGCCCAGCCCCCGAGTTCCTGGGCGGACCCAGCGTGTTCCTGTTCCCCCCCAAGCCCAAGGACACCCTGATGATCAGCAGAACCCCCGAGGTGACCTGTGTGGTGGTGGACGTGTCCCAGGAGGACCCCGAGGTCCAGTTCAACTGGTACGTGGACGGCGTGGAGGTGCACAACGCCAAGACCAAGCCCAGAGAGGAGCAGTTTAACAGCACCTACCGGGTGGTGTCCGTGCTGACCGTGCTGCACCAGGACTGGCTGAACGGCAAAGAGTACAAGTGTAAGGTCTCCAACAAGGGCCTGCCAAGCAGCATCGAAAAGACCATCAGCAAGGCCAAGGGCCAGCCTAGAGAGCCCCAGGTCTACACCCTGCCACCCAGCCAAGAGGAGATGACCAAGAACCAGGTGTCCCTGACCTGTCTGGTGAAGGGCTTCTACCCAAGCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGAGCAACGGCCAGCCCGAGAACAACTACAAGACCACCCCCCCAGTGCTGGACAGCGACGGCAGCTTCTTCCTGTACAGCAGGCTGACCGTGGACAAGTCCAGATGGCAGGAGGGCAACGTCTTTAGCTGCTCCGTGATGCACGAGGCCCTGCACAACCACTACACCCAGAAGAGCCTGAGCCTGTCCCTGGGC LC BAP050 клона I SEQ ID NO: 117 (Kabat) LCDR1 SSSQDISNYLN SEQ ID NO: 118 (Kabat) LCDR2 YTSTLHL SEQ ID NO: 119 (Kabat) LCDR3 QQYYNLPWT SEQ ID NO: 120 (Chothia) LCDR1 SQDISNY SEQ ID NO: 121 (Chothia) LCDR2 YTS SEQ ID NO: 122 (Chothia) LCDR3 YYNLPW SEQ ID NO: 125 VL DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSSSQDISNYLNWYLQKPGQSPQLLIYYTSTLHLGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCQQYYNLPWTFGQGTKVEIK SEQ ID NO: 126 ДНК, кодирующая VL Gatattcagatgactcagtcacctagtagcctgagcgctagtgtgggcgatagagtgactatcacctgtagctctagtcaggatatctctaactacctgaactggtatctgcagaagcccggtcaatcacctcagctgctgatctactacactagcaccctgcacctgggcgtgccctctaggtttagcggtagcggtagtggcaccgagttcaccctgactatctctagcctgcagcccgacgacttcgctacctactactgtcagcagtactataacctgccctggaccttcggtcaaggcactaaggtcgagattaag SEQ ID NO: 127 ДНК, кодирующая VL GACATCCAGATGACCCAGTCCCCCTCCAGCCTGTCTGCTTCCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTGTTCCTCCAGCCAGGACATCTCCAACTACCTGAACTGGTATCTGCAGAAGCCCGGCCAGTCCCCTCAGCTGCTGATCTACTACACCTCCACCCTGCACCTGGGCGTGCCCTCCAGATTTTCCGGCTCTGGCTCTGGCACCGAGTTTACCCTGACCATCAGCTCCCTGCAGCCCGACGACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGTACTACAACCTGCCCTGGACCTTCGGCCAGGGCACCAAGGTGGAAATCAAG SEQ ID NO: 128 Легкая цепь DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSSSQDISNYLNWYLQKPGQSPQLLIYYTSTLHLGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCQQYYNLPWTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC SEQ ID NO: 129 ДНК, кодирующая легкую цепь Gatattcagatgactcagtcacctagtagcctgagcgctagtgtgggcgatagagtgactatcacctgtagctctagtcaggatatctctaactacctgaactggtatctgcagaagcccggtcaatcacctcagctgctgatctactacactagcaccctgcacctgggcgtgccctctaggtttagcggtagcggtagtggcaccgagttcaccctgactatctctagcctgcagcccgacgacttcgctacctactactgtcagcagtactataacctgccctggaccttcggtcaaggcactaaggtcgagattaagcgtacggtggccgctcccagcgtgttcatcttcccccccagcgacgagcagctgaagagcggcaccgccagcgtggtgtgcctgctgaacaacttctacccccgggaggccaaggtgcagtggaaggtggacaacgccctgcagagcggcaacagccaggagagcgtcaccgagcaggacagcaaggactccacctacagcctgagcagcaccctgaccctgagcaaggccgactacgagaagcataaggtgtacgcctgcgaggtgacccaccagggcctgtccagccccgtgaccaagagcttcaacaggggcgagtgc SEQ ID NO: 130 ДНК, кодирующая легкую цепь GACATCCAGATGACCCAGTCCCCCTCCAGCCTGTCTGCTTCCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTGTTCCTCCAGCCAGGACATCTCCAACTACCTGAACTGGTATCTGCAGAAGCCCGGCCAGTCCCCTCAGCTGCTGATCTACTACACCTCCACCCTGCACCTGGGCGTGCCCTCCAGATTTTCCGGCTCTGGCTCTGGCACCGAGTTTACCCTGACCATCAGCTCCCTGCAGCCCGACGACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGTACTACAACCTGCCCTGGACCTTCGGCCAGGGCACCAAGGTGGAAATCAAGCGTACGGTGGCCGCTCCCAGCGTGTTCATCTTCCCCCCAAGCGACGAGCAGCTGAAGAGCGGCACCGCCAGCGTGGTGTGTCTGCTGAACAACTTCTACCCCAGGGAGGCCAAGGTGCAGTGGAAGGTGGACAACGCCCTGCAGAGCGGCAACAGCCAGGAGAGCGTCACCGAGCAGGACAGCAAGGACTCCACCTACAGCCTGAGCAGCACCCTGACCCTGAGCAAGGCCGACTACGAGAAGCACAAGGTGTACGCCTGTGAGGTGACCCACCAGGGCCTGTCCAGCCCCGTGACCAAGAGCTTCAACAGGGGCGAGTGC HC BAP050 клона J SEQ ID NO: 108 (Kabat) HCDR1 NYGMN SEQ ID NO: 109 (Kabat) HCDR2 WINTDTGEPTYADDFKG SEQ ID NO: 110 (Kabat) HCDR3 NPPYYYGTNNAEAMDY SEQ ID NO: 111 (Chothia) HCDR1 GFTLTNY SEQ ID NO: 112 (Chothia) HCDR2 NTDTGE SEQ ID NO: 110 (Chothia) HCDR3 NPPYYYGTNNAEAMDY SEQ ID NO: 131 VH QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGFTLTNYGMNWVRQAPGQGLEWMGWINTDTGEPTYADDFKGRFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCARNPPYYYGTNNAEAMDYWGQGTTVTVSS SEQ ID NO: 132 ДНК, кодирующая VH Caggtgcagctggtgcagtcaggcgccgaagtgaagaaacccggcgctagtgtgaaagtcagctgtaaagctagtggcttcaccctgactaactacgggatgaactgggtccgccaggccccaggtcaaggcctcgagtggatgggctggattaacaccgacaccggcgagcctacctacgccgacgactttaagggcagattcgtgtttagcctggacactagtgtgtctaccgcctacctgcagatctctagcctgaaggccgaggacaccgccgtctactactgcgctagaaaccccccctactactacggcactaacaacgccgaggctatggactactggggtcaaggcactaccgtgaccgtgtctagc SEQ ID NO: 133 ДНК, кодирующая VH CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGCGCCGAAGTGAAGAAACCTGGCGCCTCCGTGAAGGTGTCCTGCAAGGCCTCTGGCTTCACCCTGACCAACTACGGCATGAACTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAGGGCCTGGAATGGATGGGCTGGATCAACACCGACACCGGCGAGCCTACCTACGCCGACGACTTCAAGGGCAGATTCGTGTTCTCCCTGGACACCTCCGTGTCCACCGCCTACCTGCAGATCTCCAGCCTGAAGGCCGAGGATACCGCCGTGTACTACTGCGCCCGGAACCCCCCTTACTACTACGGCACCAACAACGCCGAGGCCATGGACTATTGGGGCCAGGGCACCACCGTGACCGTGTCCTCT SEQ ID NO: 134 Тяжелая цепь QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGFTLTNYGMNWVRQAPGQGLEWMGWINTDTGEPTYADDFKGRFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCARNPPYYYGTNNAEAMDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLG SEQ ID NO: 135 ДНК, кодирующая тяжелую цепь caggtgcagctggtgcagtcaggcgccgaagtgaagaaacccggcgctagtgtgaaagtcagctgtaaagctagtggcttcaccctgactaactacgggatgaactgggtccgccaggccccaggtcaaggcctcgagtggatgggctggattaacaccgacaccggcgagcctacctacgccgacgactttaagggcagattcgtgtttagcctggacactagtgtgtctaccgcctacctgcagatctctagcctgaaggccgaggacaccgccgtctactactgcgctagaaaccccccctactactacggcactaacaacgccgaggctatggactactggggtcaaggcactaccgtgaccgtgtctagcgctagcactaagggcccgtccgtgttccccctggcaccttgtagccggagcactagcgaatccaccgctgccctcggctgcctggtcaaggattacttcccggagcccgtgaccgtgtcctggaacagcggagccctgacctccggagtgcacaccttccccgctgtgctgcagagctccgggctgtactcgctgtcgtcggtggtcacggtgccttcatctagcctgggtaccaagacctacacttgcaacgtggaccacaagccttccaacactaaggtggacaagcgcgtcgaatcgaagtacggcccaccgtgcccgccttgtcccgcgccggagttcctcggcggtccctcggtctttctgttcccaccgaagcccaaggacactttgatgatttcccgcacccctgaagtgacatgcgtggtcgtggacgtgtcacaggaagatccggaggtgcagttcaattggtacgtggatggcgtcgaggtgcacaacgccaaaaccaagccgagggaggagcagttcaactccacttaccgcgtcgtgtccgtgctgacggtgctgcatcaggactggctgaacgggaaggagtacaagtgcaaagtgtccaacaagggacttcctagctcaatcgaaaagaccatctcgaaagccaagggacagccccgggaaccccaagtgtataccctgccaccgagccaggaagaaatgactaagaaccaagtctcattgacttgccttgtgaagggcttctacccatcggatatcgccgtggaatgggagtccaacggccagccggaaaacaactacaagaccacccctccggtgctggactcagacggatccttcttcctctactcgcggctgaccgtggataagagcagatggcaggagggaaatgtgttcagctgttctgtgatgcatgaagccctgcacaaccactacactcagaagtccctgtccctctccctggga SEQ ID NO: 136 ДНК, кодирующая тяжелую цепь CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGCGCCGAAGTGAAGAAACCTGGCGCCTCCGTGAAGGTGTCCTGCAAGGCCTCTGGCTTCACCCTGACCAACTACGGCATGAACTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAGGGCCTGGAATGGATGGGCTGGATCAACACCGACACCGGCGAGCCTACCTACGCCGACGACTTCAAGGGCAGATTCGTGTTCTCCCTGGACACCTCCGTGTCCACCGCCTACCTGCAGATCTCCAGCCTGAAGGCCGAGGATACCGCCGTGTACTACTGCGCCCGGAACCCCCCTTACTACTACGGCACCAACAACGCCGAGGCCATGGACTATTGGGGCCAGGGCACCACCGTGACCGTGTCCTCTGCTTCTACCAAGGGGCCCAGCGTGTTCCCCCTGGCCCCCTGCTCCAGAAGCACCAGCGAGAGCACAGCCGCCCTGGGCTGCCTGGTGAAGGACTACTTCCCCGAGCCCGTGACCGTGTCCTGGAACAGCGGAGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTTCCCCGCCGTGCTGCAGAGCAGCGGCCTGTACAGCCTGAGCAGCGTGGTGACCGTGCCCAGCAGCAGCCTGGGCACCAAGACCTACACCTGTAACGTGGACCACAAGCCCAGCAACACCAAGGTGGACAAGAGGGTGGAGAGCAAGTACGGCCCACCCTGCCCCCCCTGCCCAGCCCCCGAGTTCCTGGGCGGACCCAGCGTGTTCCTGTTCCCCCCCAAGCCCAAGGACACCCTGATGATCAGCAGAACCCCCGAGGTGACCTGTGTGGTGGTGGACGTGTCCCAGGAGGACCCCGAGGTCCAGTTCAACTGGTACGTGGACGGCGTGGAGGTGCACAACGCCAAGACCAAGCCCAGAGAGGAGCAGTTTAACAGCACCTACCGGGTGGTGTCCGTGCTGACCGTGCTGCACCAGGACTGGCTGAACGGCAAAGAGTACAAGTGTAAGGTCTCCAACAAGGGCCTGCCAAGCAGCATCGAAAAGACCATCAGCAAGGCCAAGGGCCAGCCTAGAGAGCCCCAGGTCTACACCCTGCCACCCAGCCAAGAGGAGATGACCAAGAACCAGGTGTCCCTGACCTGTCTGGTGAAGGGCTTCTACCCAAGCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGAGCAACGGCCAGCCCGAGAACAACTACAAGACCACCCCCCCAGTGCTGGACAGCGACGGCAGCTTCTTCCTGTACAGCAGGCTGACCGTGGACAAGTCCAGATGGCAGGAGGGCAACGTCTTTAGCTGCTCCGTGATGCACGAGGCCCTGCACAACCACTACACCCAGAAGAGCCTGAGCCTGTCCCTGGGC LC BAP050 клона J SEQ ID NO: 117 (Kabat) LCDR1 SSSQDISNYLN SEQ ID NO: 118 (Kabat) LCDR2 YTSTLHL SEQ ID NO: 119 (Kabat) LCDR3 QQYYNLPWT SEQ ID NO: 120 (Chothia) LCDR1 SQDISNY SEQ ID NO: 121 (Chothia) LCDR2 YTS SEQ ID NO: 122 (Chothia) LCDR3 YYNLPW SEQ ID NO: 137 VL DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSSSQDISNYLNWYQQKPGKAPKLLIYYTSTLHLGIPPRFSGSGYGTDFTLTINNIESEDAAYYFCQQYYNLPWTFGQGTKVEIK SEQ ID NO: 138 ДНК, кодирующая VL Gatattcagatgactcagtcacctagtagcctgagcgctagtgtgggcgatagagtgactatcacctgtagctctagtcaggatatctctaactacctgaactggtatcagcagaagcccggtaaagcccctaagctgctgatctactacactagcaccctgcacctgggaatcccccctaggtttagcggtagcggctacggcaccgacttcaccctgactattaacaatatcgagtcagaggacgccgcctactacttctgtcagcagtactataacctgccctggaccttcggtcaaggcactaaggtcgagattaag SEQ ID NO: 139 ДНК, кодирующая VL GACATCCAGATGACCCAGTCCCCCTCCAGCCTGTCTGCTTCCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTGTTCCTCCAGCCAGGACATCTCCAACTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCAAGGCCCCCAAGCTGCTGATCTACTACACCTCCACCCTGCACCTGGGCATCCCCCCTAGATTCTCCGGCTCTGGCTACGGCACCGACTTCACCCTGACCATCAACAACATCGAGTCCGAGGACGCCGCCTACTACTTCTGCCAGCAGTACTACAACCTGCCCTGGACCTTCGGCCAGGGCACCAAGGTGGAAATCAAG SEQ ID NO: 140 Легкая цепь DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSSSQDISNYLNWYQQKPGKAPKLLIYYTSTLHLGIPPRFSGSGYGTDFTLTINNIESEDAAYYFCQQYYNLPWTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC SEQ ID NO: 141 ДНК, кодирующая легкую цепь Gatattcagatgactcagtcacctagtagcctgagcgctagtgtgggcgatagagtgactatcacctgtagctctagtcaggatatctctaactacctgaactggtatcagcagaagcccggtaaagcccctaagctgctgatctactacactagcaccctgcacctgggaatcccccctaggtttagcggtagcggctacggcaccgacttcaccctgactattaacaatatcgagtcagaggacgccgcctactacttctgtcagcagtactataacctgccctggaccttcggtcaaggcactaaggtcgagattaagcgtacggtggccgctcccagcgtgttcatcttcccccccagcgacgagcagctgaagagcggcaccgccagcgtggtgtgcctgctgaacaacttctacccccgggaggccaaggtgcagtggaaggtggacaacgccctgcagagcggcaacagccaggagagcgtcaccgagcaggacagcaaggactccacctacagcctgagcagcaccctgaccctgagcaaggccgactacgagaagcataaggtgtacgcctgcgaggtgacccaccagggcctgtccagccccgtgaccaagagcttcaacaggggcgagtgc SEQ ID NO: 142 ДНК, кодирующая легкую цепь GACATCCAGATGACCCAGTCCCCCTCCAGCCTGTCTGCTTCCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTGTTCCTCCAGCCAGGACATCTCCAACTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCAAGGCCCCCAAGCTGCTGATCTACTACACCTCCACCCTGCACCTGGGCATCCCCCCTAGATTCTCCGGCTCTGGCTACGGCACCGACTTCACCCTGACCATCAACAACATCGAGTCCGAGGACGCCGCCTACTACTTCTGCCAGCAGTACTACAACCTGCCCTGGACCTTCGGCCAGGGCACCAAGGTGGAAATCAAGCGTACGGTGGCCGCTCCCAGCGTGTTCATCTTCCCCCCAAGCGACGAGCAGCTGAAGAGCGGCACCGCCAGCGTGGTGTGTCTGCTGAACAACTTCTACCCCAGGGAGGCCAAGGTGCAGTGGAAGGTGGACAACGCCCTGCAGAGCGGCAACAGCCAGGAGAGCGTCACCGAGCAGGACAGCAAGGACTCCACCTACAGCCTGAGCAGCACCCTGACCCTGAGCAAGGCCGACTACGAGAAGCACAAGGTGTACGCCTGTGAGGTGACCCACCAGGGCCTGTCCAGCCCCGTGACCAAGAGCTTCAACAGGGGCGAGTGC HC BAP050 клона I SEQ ID NO: 143 (Kabat) HCDR1 aattacgggatgaac SEQ ID NO: 144 (Kabat) HCDR1 AACTACGGCATGAAC SEQ ID NO: 145 (Kabat) HCDR2 tggattaacaccgacaccggggagcctacctacgcggacgatttcaaggga SEQ ID NO: 146 (Kabat) HCDR2 TGGATCAACACCGACACCGGCGAGCCTACCTACGCCGACGACTTCAAGGGC SEQ ID NO: 147 (Kabat) HCDR3 aacccgccctactactacggaaccaacaacgccgaagccatggactac SEQ ID NO: 148 (Kabat) HCDR3 AACCCCCCTTACTACTACGGCACCAACAACGCCGAGGCCATGGACTAT SEQ ID NO: 149 (Chothia) HCDR1 ggattcaccctcaccaattac SEQ ID NO: 150 (Chothia) HCDR1 GGCTTCACCCTGACCAACTAC SEQ ID NO: 151 (Chothia) HCDR2 aacaccgacaccggggag SEQ ID NO: 152 (Chothia) HCDR2 AACACCGACACCGGCGAG SEQ ID NO: 147 (Chothia) HCDR3 aacccgccctactactacggaaccaacaacgccgaagccatggactac SEQ ID NO: 148 (Chothia) HCDR3 AACCCCCCTTACTACTACGGCACCAACAACGCCGAGGCCATGGACTAT LC BAP050 клона I SEQ ID NO: 153 (Kabat) LCDR1 agctctagtcaggatatctctaactacctgaac SEQ ID NO: 154 (Kabat) LCDR1 TCCTCCAGCCAGGACATCTCCAACTACCTGAAC SEQ ID NO: 155 (Kabat) LCDR2 tacactagcaccctgcacctg SEQ ID NO: 156 (Kabat) LCDR2 TACACCTCCACCCTGCACCTG SEQ ID NO: 157 (Kabat) LCDR3 cagcagtactataacctgccctggacc SEQ ID NO: 158 (Kabat) LCDR3 CAGCAGTACTACAACCTGCCCTGGACC SEQ ID NO: 159 (Chothia) LCDR1 agtcaggatatctctaactac SEQ ID NO: 160 (Chothia) LCDR1 AGCCAGGACATCTCCAACTAC SEQ ID NO: 161 (Chothia) LCDR2 tacactagc SEQ ID NO: 162 (Chothia) LCDR2 TACACCTCC SEQ ID NO: 163 (Chothia) LCDR3 tactataacctgccctgg SEQ ID NO: 164 (Chothia) LCDR3 TACTACAACCTGCCCTGG HC BAP050 клона J SEQ ID NO: 165 (Kabat) HCDR1 aactacgggatgaac SEQ ID NO: 144 (Kabat) HCDR1 AACTACGGCATGAAC SEQ ID NO: 166 (Kabat) HCDR2 tggattaacaccgacaccggcgagcctacctacgccgacgactttaagggc SEQ ID NO: 146 (Kabat) HCDR2 TGGATCAACACCGACACCGGCGAGCCTACCTACGCCGACGACTTCAAGGGC SEQ ID NO: 167 (Kabat) HCDR3 aaccccccctactactacggcactaacaacgccgaggctatggactac SEQ ID NO: 148 (Kabat) HCDR3 AACCCCCCTTACTACTACGGCACCAACAACGCCGAGGCCATGGACTAT SEQ ID NO: 168 (Chothia) HCDR1 ggcttcaccctgactaactac SEQ ID NO: 150 (Chothia) HCDR1 GGCTTCACCCTGACCAACTAC SEQ ID NO: 151 (Chothia) HCDR2 aacaccgacaccggggag SEQ ID NO: 152 (Chothia) HCDR2 AACACCGACACCGGCGAG SEQ ID NO: 167 (Chothia) HCDR3 aaccccccctactactacggcactaacaacgccgaggctatggactac SEQ ID NO: 148 (Chothia) HCDR3 AACCCCCCTTACTACTACGGCACCAACAACGCCGAGGCCATGGACTAT LC BAP050 клона J SEQ ID NO: 153 (Kabat) LCDR1 agctctagtcaggatatctctaactacctgaac SEQ ID NO: 154 (Kabat) LCDR1 TCCTCCAGCCAGGACATCTCCAACTACCTGAAC SEQ ID NO: 155 (Kabat) LCDR2 TACACTAGCACCCTGCACCTG SEQ ID NO: 156 (Kabat) LCDR2 TACACCTCCACCCTGCACCTG SEQ ID NO: 157 (Kabat) LCDR3 cagcagtactataacctgccctggacc SEQ ID NO: 158 (Kabat) LCDR3 CAGCAGTACTACAACCTGCCCTGGACC SEQ ID NO: 159 (Chothia) LCDR1 agtcaggatatctctaactac SEQ ID NO: 160 (Chothia) LCDR1 AGCCAGGACATCTCCAACTAC SEQ ID NO: 161 (Chothia) LCDR2 TACACTAGC SEQ ID NO: 162 (Chothia) LCDR2 TACACCTCC SEQ ID NO: 163 (Chothia) LCDR3 tactataacctgccctgg SEQ ID NO: 164 (Chothia) LCDR3 TACTACAACCTGCCCTGG

Другие иллюстративные ингибиторы LAG-3

В одном варианте осуществления ингибитор LAG-3 представляет собой молекулу антитела к LAG-3. В одном варианте осуществления ингибитор LAG-3 представляет собой BMS-986016 (Bristol-Myers Squibb), также известный как BMS986016. BMS-986016 и другие антитела к LAG-3 раскрыты в WO 2015/116539 и US 9505839, включенных посредством ссылки во всей своей полноте. В одном варианте осуществления молекула антитела к LAG-3 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или в совокупности все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи BMS-986016, например, раскрытые в таблице 8.

В одном варианте осуществления молекула антитела к LAG-3 представляет собой TSR-033 (Tesaro). В одном варианте осуществления молекула антитела к LAG-3 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или в совокупности все последовательности CDR), последовательность вариабельного участка тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи TSR-033.

В одном варианте осуществления молекула антитела к LAG-3 представляет собой IMP731 или GSK2831781 (GSK и Prima BioMed). IMP731 и другие антитела к LAG-3 раскрыты в WO 2008/132601 и US 9244059, включенных посредством ссылки во всей своей полноте. В одном варианте осуществления молекула антитела к LAG-3 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или в совокупности все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи IMP731, например, раскрытые в таблице 8. В одном варианте осуществления молекула антитела к LAG-3 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или в совокупности все последовательности CDR), последовательность вариабельного участка тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи GSK2831781.

В одном варианте осуществления молекула антитела к LAG-3 представляет собой IMP761 (Prima BioMed). В одном варианте осуществления молекула антитела к LAG-3 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или в совокупности все последовательности CDR), последовательность вариабельного участка тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи IMP761.

Дополнительные известные антитела к LAG-3 включают антитела, описанные, например, в WO 2008/132601, WO 2010/019570, WO 2014/140180, WO 2015/116539, WO 2015/200119, WO 2016/028672, US 9244059, US 9505839, включенных посредством ссылки во всей своей полноте.

В одном варианте осуществления антитело к LAG-3 представляет собой антитело, которое конкурирует за связывание и/или связывается с тем же эпитопом в LAG-3, что и одно из антител к LAG-3, описанных в данном документе.

В одном варианте осуществления ингибитор, представляющий собой антитело к LAG-3, представляет собой растворимую форму белка LAG-3, например, IMP321 (Prima BioMed), например, раскрытый в WO 2009/044273, включенной посредством ссылки во всей своей полноте.

Таблица 8. Аминокислотные последовательности других иллюстративных молекул антител к LAG-3 BMS-986016 SEQ ID NO: 169 Тяжелая цепь QVQLQQWGAGLLKPSETLSLTCAVYGGSFSDYYWNWIRQPPGKGLEWIGEINHRGSTNSNPSLKSRVTLSLDTSKNQFSLKLRSVTAADTAVYYCAFGYSDYEYNWFDPWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK SEQ ID NO: 170 Легкая цепь EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSISSYLAWYQQKPGQAPRLLIYDASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSNWPLTFGQGTNLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC IMP731 SEQ ID NO: 171 Тяжелая цепь QVQLKESGPGLVAPSQSLSITCTVSGFSLTAYGVNWVRQPPGKGLEWLGMIWDDGSTDYNSALKSRLSISKDNSKSQVFLKMNSLQTDDTARYYCAREGDVAFDYWGQGTTLTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK SEQ ID NO: 172 Легкая цепь DIVMTQSPSSLAVSVGQKVTMSCKSSQSLLNGSNQKNYLAWYQQKPGQSPKLLVYFASTRDSGVPDRFIGSGSGTDFTLTISSVQAEDLADYFCLQHFGTPPTFGGGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC

Ингибиторы TIM-3

В определенных вариантах осуществления ингибитор молекулы контрольных точек иммунного ответа представляет собой ингибитор TIM-3. В некоторых вариантах осуществления соединения формулы (I') или формулы (I) или их фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на их основе, их стереоизомер или таутомер по настоящему изобретению применяют в комбинации с ингибитором TIM-3 для лечения заболевания, например рака. В некоторых вариантах осуществления ингибитор TIM-3 представляет собой MGB453 (Novartis) или TSR-022 (Tesaro).

Иллюстративные ингибиторы TIM-3

В одном варианте осуществления ингибитор TIM-3 представляет собой молекулу антитела к TIM-3. В одном варианте осуществления ингибитор TIM-3 представляет собой молекулу антитела к TIM-3, раскрытую в US 2015/0218274, опубликованной 6 августа 2015 г. под названием "Antibody Molecules to TIM-3 and Uses Thereof", включенной посредством ссылки во всей своей полноте.

В одном варианте осуществления молекула антитела к TIM-3 содержит по меньшей мере одну, две, три, четыре, пять или шесть областей, определяющих комплементарность (CDR) (или в совокупности все CDR), из вариабельной области тяжелой и легкой цепей, содержащей аминокислотную последовательность, показанную в таблице 9 (например, из последовательностей вариабельной области тяжелой и легкой цепей ABTIM3-hum11 или ABTIM3-hum03, раскрытых в таблице 9), или кодируемой нуклеотидной последовательностью, показанной в таблице 9. В некоторых вариантах осуществления CDR указаны согласно определению по Kabat (например, как изложено в таблице 9). В некоторых вариантах осуществления CDR указаны согласно определению по Chothia (например, как изложено в таблице 9). В одном варианте осуществления одна или несколько CDR (или в совокупности все CDR) имеют одно, два, три, четыре, пять, шесть или больше изменений, например, аминокислотних замен (например, консервативных аминокислотных замен) или делеций, по сравнению с аминокислотной последовательностью, показанной в таблице 9 или кодируемой нуклеотидной последовательностью, показанной в таблице 9.

В одном варианте осуществления молекула антитела к TIM-3 содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 174, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 175 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 176; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 183, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 184 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 185, каждая из которых раскрыта в таблице 9. В одном варианте осуществления молекула антитела к TIM-3 содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 174, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 193 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 176; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 183, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 184 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 185, каждая из которых раскрыта в таблице 9.

В одном варианте осуществления молекула антитела к TIM-3 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 179 или аминокислотную последовательность, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичную по отношению к SEQ ID NO: 179. В одном варианте осуществления молекула антитела к TIM-3 содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 189 или аминокислотную последовательность, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичную по отношению к SEQ ID NO: 189. В одном варианте осуществления молекула антитела к TIM-3 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 195 или аминокислотную последовательность, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичную по отношению к SEQ ID NO: 195. В одном варианте осуществления молекула антитела к TIM-3 содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 199 или аминокислотную последовательность, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичную по отношению к SEQ ID NO: 199. В одном варианте осуществления молекула антитела к TIM-3 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 179, и VL, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 189. В одном варианте осуществления молекула антитела к TIM-3 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 195, и VL, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 199.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 180 или нуклеотидной последовательностью, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичной по отношению к SEQ ID NO: 180. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VL, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 190 или нуклеотидной последовательностью, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичной по отношению к SEQ ID NO: 190. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 196 или нуклеотидной последовательностью, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичной по отношению к SEQ ID NO: 196. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VL, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 200 или нуклеотидной последовательностью, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичной по отношению к SEQ ID NO: 200. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 180, и VL, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 190. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 196, и VL, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 200.

В одном варианте осуществления молекула антитела к TIM-3 содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 181 или аминокислотную последовательность, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичную по отношению к SEQ ID NO: 181. В одном варианте осуществления молекула антитела к TIM-3 содержит легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 191 или аминокислотную последовательность, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичную по отношению к SEQ ID NO: 191. В одном варианте осуществления молекула антитела к TIM-3 содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 197 или аминокислотную последовательность, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичную по отношению к SEQ ID NO: 197. В одном варианте осуществления молекула антитела к TIM-3 содержит легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 201 или аминокислотную последовательность, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичную по отношению к SEQ ID NO: 201. В одном варианте осуществления молекула антитела к TIM-3 содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 181, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 191. В одном варианте осуществления молекула антитела к TIM-3 содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 197, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 201.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит тяжелую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 182 или нуклеотидной последовательностью, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичной по отношению к SEQ ID NO: 182. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит легкую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 192 или нуклеотидной последовательностью, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичной по отношению к SEQ ID NO: 192. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит тяжелую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 198 или нуклеотидной последовательностью, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичной по отношению к SEQ ID NO: 198. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит легкую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 202 или нуклеотидной последовательностью, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичной по отношению к SEQ ID NO: 202. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит тяжелую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 182, и легкую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 192. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит тяжелую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 198, и легкую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 202.

Молекулы антител, описанные в данном документе, можно получать с помощью векторов, клеток-хозяев и способов, описанных в US 2015/0218274, включенной посредством ссылки во всей своей полноте.

Таблица 9. Аминокислотные и нуклеотидные последовательности иллюстративных молекул антител к TIM-3 ABTIM3-hum11 SEQ ID NO: 174 (Kabat) HCDR1 SYNMH SEQ ID NO: 175 (Kabat) HCDR2 DIYPGNGDTSYNQKFKG SEQ ID NO: 176 (Kabat) HCDR3 VGGAFPMDY SEQ ID NO: 177 (Chothia) HCDR1 GYTFTSY SEQ ID NO: 178 (Chothia) HCDR2 YPGNGD SEQ ID NO: 176 (Chothia) HCDR3 VGGAFPMDY SEQ ID NO: 179 VH QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGYTFTSYNMHWVRQAPGQGLEWMGDIYPGNGDTSYNQKFKGRVTITADKSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCARVGGAFPMDYWGQGTTVTVSS SEQ ID NO: 180 ДНК, кодирующая VH CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCAGGCGCCGAAGTGAAGAAACCCGGCTCTAGCGTGAAAGTTTCTTGTAAAGCTAGTGGCTACACCTTCACTAGCTATAATATGCACTGGGTTCGCCAGGCCCCAGGGCAAGGCCTCGAGTGGATGGGCGATATCTACCCCGGGAACGGCGACACTAGTTATAATCAGAAGTTTAAGGGTAGAGTCACTATCACCGCCGATAAGTCTACTAGCACCGTCTATATGGAACTGAGTTCCCTGAGGTCTGAGGACACCGCCGTCTACTACTGCGCTAGAGTGGGCGGAGCCTTCCCTATGGACTACTGGGGTCAAGGCACTACCGTGACCGTGTCTAGC SEQ ID NO: 181 Тяжелая цепь QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGYTFTSYNMHWVRQAPGQGLEWMGDIYPGNGDTSYNQKFKGRVTITADKSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCARVGGAFPMDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLG SEQ ID NO: 182 ДНК, кодирующая тяжелую цепь CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCAGGCGCCGAAGTGAAGAAACCCGGCTCTAGCGTGAAAGTTTCTTGTAAAGCTAGTGGCTACACCTTCACTAGCTATAATATGCACTGGGTTCGCCAGGCCCCAGGGCAAGGCCTCGAGTGGATGGGCGATATCTACCCCGGGAACGGCGACACTAGTTATAATCAGAAGTTTAAGGGTAGAGTCACTATCACCGCCGATAAGTCTACTAGCACCGTCTATATGGAACTGAGTTCCCTGAGGTCTGAGGACACCGCCGTCTACTACTGCGCTAGAGTGGGCGGAGCCTTCCCTATGGACTACTGGGGTCAAGGCACTACCGTGACCGTGTCTAGCGCTAGCACTAAGGGCCCGTCCGTGTTCCCCCTGGCACCTTGTAGCCGGAGCACTAGCGAATCCACCGCTGCCCTCGGCTGCCTGGTCAAGGATTACTTCCCGGAGCCCGTGACCGTGTCCTGGAACAGCGGAGCCCTGACCTCCGGAGTGCACACCTTCCCCGCTGTGCTGCAGAGCTCCGGGCTGTACTCGCTGTCGTCGGTGGTCACGGTGCCTTCATCTAGCCTGGGTACCAAGACCTACACTTGCAACGTGGACCACAAGCCTTCCAACACTAAGGTGGACAAGCGCGTCGAATCGAAGTACGGCCCACCGTGCCCGCCTTGTCCCGCGCCGGAGTTCCTCGGCGGTCCCTCGGTCTTTCTGTTCCCACCGAAGCCCAAGGACACTTTGATGATTTCCCGCACCCCTGAAGTGACATGCGTGGTCGTGGACGTGTCACAGGAAGATCCGGAGGTGCAGTTCAATTGGTACGTGGATGGCGTCGAGGTGCACAACGCCAAAACCAAGCCGAGGGAGGAGCAGTTCAACTCCACTTACCGCGTCGTGTCCGTGCTGACGGTGCTGCATCAGGACTGGCTGAACGGGAAGGAGTACAAGTGCAAAGTGTCCAACAAGGGACTTCCTAGCTCAATCGAAAAGACCATCTCGAAAGCCAAGGGACAGCCCCGGGAACCCCAAGTGTATACCCTGCCACCGAGCCAGGAAGAAATGACTAAGAACCAAGTCTCATTGACTTGCCTTGTGAAGGGCTTCTACCCATCGGATATCGCCGTGGAATGGGAGTCCAACGGCCAGCCGGAAAACAACTACAAGACCACCCCTCCGGTGCTGGACTCAGACGGATCCTTCTTCCTCTACTCGCGGCTGACCGTGGATAAGAGCAGATGGCAGGAGGGAAATGTGTTCAGCTGTTCTGTGATGCATGAAGCCCTGCACAACCACTACACTCAGAAGTCCCTGTCCCTCTCCCTGGGA SEQ ID NO: 183 (Kabat) LCDR1 RASESVEYYGTSLMQ SEQ ID NO: 184 (Kabat) LCDR2 AASNVES SEQ ID NO: 185 (Kabat) LCDR3 QQSRKDPST SEQ ID NO: 186 (Chothia) LCDR1 SESVEYYGTSL SEQ ID NO: 187 (Chothia) LCDR2 AAS SEQ ID NO: 188 (Chothia) LCDR3 SRKDPS SEQ ID NO: 189 VL AIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCRASESVEYYGTSLMQWYQQKPGKAPKLLIYAASNVESGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYFCQQSRKDPSTFGGGTKVEIK SEQ ID NO: 190 ДНК, кодирующая VL GCTATTCAGCTGACTCAGTCACCTAGTAGCCTGAGCGCTAGTGTGGGCGATAGAGTGACTATCACCTGTAGAGCTAGTGAATCAGTCGAGTACTACGGCACTAGCCTGATGCAGTGGTATCAGCAGAAGCCCGGGAAAGCCCCTAAGCTGCTGATCTACGCCGCCTCTAACGTGGAATCAGGCGTGCCCTCTAGGTTTAGCGGTAGCGGTAGTGGCACCGACTTCACCCTGACTATCTCTAGCCTGCAGCCCGAGGACTTCGCTACCTACTTCTGTCAGCAGTCTAGGAAGGACCCTAGCACCTTCGGCGGAGGCACTAAGGTCGAGATTAAG SEQ ID NO: 191 Легкая цепь AIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCRASESVEYYGTSLMQWYQQKPGKAPKLLIYAASNVESGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYFCQQSRKDPSTFGGGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC SEQ ID NO: 192 ДНК, кодирующая легкую цепь GCTATTCAGCTGACTCAGTCACCTAGTAGCCTGAGCGCTAGTGTGGGCGATAGAGTGACTATCACCTGTAGAGCTAGTGAATCAGTCGAGTACTACGGCACTAGCCTGATGCAGTGGTATCAGCAGAAGCCCGGGAAAGCCCCTAAGCTGCTGATCTACGCCGCCTCTAACGTGGAATCAGGCGTGCCCTCTAGGTTTAGCGGTAGCGGTAGTGGCACCGACTTCACCCTGACTATCTCTAGCCTGCAGCCCGAGGACTTCGCTACCTACTTCTGTCAGCAGTCTAGGAAGGACCCTAGCACCTTCGGCGGAGGCACTAAGGTCGAGATTAAGCGTACGGTGGCCGCTCCCAGCGTGTTCATCTTCCCCCCCAGCGACGAGCAGCTGAAGAGCGGCACCGCCAGCGTGGTGTGCCTGCTGAACAACTTCTACCCCCGGGAGGCCAAGGTGCAGTGGAAGGTGGACAACGCCCTGCAGAGCGGCAACAGCCAGGAGAGCGTCACCGAGCAGGACAGCAAGGACTCCACCTACAGCCTGAGCAGCACCCTGACCCTGAGCAAGGCCGACTACGAGAAGCATAAGGTGTACGCCTGCGAGGTGACCCACCAGGGCCTGTCCAGCCCCGTGACCAAGAGCTTCAACAGGGGCGAGTGC ABTIM3-hum03 SEQ ID NO: 174 (Kabat) HCDR1 SYNMH SEQ ID NO: 193 (Kabat) HCDR2 DIYPGQGDTSYNQKFKG SEQ ID NO: 176 (Kabat) HCDR3 VGGAFPMDY SEQ ID NO: 177 (Chothia) HCDR1 GYTFTSY SEQ ID NO: 194 (Chothia) HCDR2 YPGQGD SEQ ID NO: 176 (Chothia) HCDR3 VGGAFPMDY SEQ ID NO: 195 VH QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSYNMHWVRQAPGQGLEWIGDIYPGQGDTSYNQKFKGRATMTADKSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCARVGGAFPMDYWGQGTLVTVSS SEQ ID NO: 196 ДНК, кодирующая VH CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCAGGCGCCGAAGTGAAGAAACCCGGCGCTAGTGTGAAAGTTAGCTGTAAAGCTAGTGGCTATACTTTCACTTCTTATAATATGCACTGGGTCCGCCAGGCCCCAGGTCAAGGCCTCGAGTGGATCGGCGATATCTACCCCGGTCAAGGCGACACTTCCTATAATCAGAAGTTTAAGGGTAGAGCTACTATGACCGCCGATAAGTCTACTTCTACCGTCTATATGGAACTGAGTTCCCTGAGGTCTGAGGACACCGCCGTCTACTACTGCGCTAGAGTGGGCGGAGCCTTCCCAATGGACTACTGGGGTCAAGGCACCCTGGTCACCGTGTCTAGC SEQ ID NO: 197 Тяжелая цепь QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSYNMHWVRQAPGQGLEWIGDIYPGQGDTSYNQKFKGRATMTADKSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCARVGGAFPMDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLG SEQ ID NO: 198 ДНК, кодирующая тяжелую цепь CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCAGGCGCCGAAGTGAAGAAACCCGGCGCTAGTGTGAAAGTTAGCTGTAAAGCTAGTGGCTATACTTTCACTTCTTATAATATGCACTGGGTCCGCCAGGCCCCAGGTCAAGGCCTCGAGTGGATCGGCGATATCTACCCCGGTCAAGGCGACACTTCCTATAATCAGAAGTTTAAGGGTAGAGCTACTATGACCGCCGATAAGTCTACTTCTACCGTCTATATGGAACTGAGTTCCCTGAGGTCTGAGGACACCGCCGTCTACTACTGCGCTAGAGTGGGCGGAGCCTTCCCAATGGACTACTGGGGTCAAGGCACCCTGGTCACCGTGTCTAGCGCTAGCACTAAGGGCCCGTCCGTGTTCCCCCTGGCACCTTGTAGCCGGAGCACTAGCGAATCCACCGCTGCCCTCGGCTGCCTGGTCAAGGATTACTTCCCGGAGCCCGTGACCGTGTCCTGGAACAGCGGAGCCCTGACCTCCGGAGTGCACACCTTCCCCGCTGTGCTGCAGAGCTCCGGGCTGTACTCGCTGTCGTCGGTGGTCACGGTGCCTTCATCTAGCCTGGGTACCAAGACCTACACTTGCAACGTGGACCACAAGCCTTCCAACACTAAGGTGGACAAGCGCGTCGAATCGAAGTACGGCCCACCGTGCCCGCCTTGTCCCGCGCCGGAGTTCCTCGGCGGTCCCTCGGTCTTTCTGTTCCCACCGAAGCCCAAGGACACTTTGATGATTTCCCGCACCCCTGAAGTGACATGCGTGGTCGTGGACGTGTCACAGGAAGATCCGGAGGTGCAGTTCAATTGGTACGTGGATGGCGTCGAGGTGCACAACGCCAAAACCAAGCCGAGGGAGGAGCAGTTCAACTCCACTTACCGCGTCGTGTCCGTGCTGACGGTGCTGCATCAGGACTGGCTGAACGGGAAGGAGTACAAGTGCAAAGTGTCCAACAAGGGACTTCCTAGCTCAATCGAAAAGACCATCTCGAAAGCCAAGGGACAGCCCCGGGAACCCCAAGTGTATACCCTGCCACCGAGCCAGGAAGAAATGACTAAGAACCAAGTCTCATTGACTTGCCTTGTGAAGGGCTTCTACCCATCGGATATCGCCGTGGAATGGGAGTCCAACGGCCAGCCGGAAAACAACTACAAGACCACCCCTCCGGTGCTGGACTCAGACGGATCCTTCTTCCTCTACTCGCGGCTGACCGTGGATAAGAGCAGATGGCAGGAGGGAAATGTGTTCAGCTGTTCTGTGATGCATGAAGCCCTGCACAACCACTACACTCAGAAGTCCCTGTCCCTCTCCCTGGGA SEQ ID NO: 183 (Kabat) LCDR1 RASESVEYYGTSLMQ SEQ ID NO: 184 (Kabat) LCDR2 AASNVES SEQ ID NO: 185 (Kabat) LCDR3 QQSRKDPST SEQ ID NO: 186 (Chothia) LCDR1 SESVEYYGTSL SEQ ID NO: 187 (Chothia) LCDR2 AAS SEQ ID NO: 188 (Chothia) LCDR3 SRKDPS SEQ ID NO: 199 VL DIVLTQSPDSLAVSLGERATINCRASESVEYYGTSLMQWYQQKPGQPPKLLIYAASNVESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQSRKDPSTFGGGTKVEIK SEQ ID NO: 200 ДНК, кодирующая VL GATATCGTCCTGACTCAGTCACCCGATAGCCTGGCCGTCAGCCTGGGCGAGCGGGCTACTATTAACTGTAGAGCTAGTGAATCAGTCGAGTACTACGGCACTAGCCTGATGCAGTGGTATCAGCAGAAGCCCGGTCAACCCCCTAAGCTGCTGATCTACGCCGCCTCTAACGTGGAATCAGGCGTGCCCGATAGGTTTAGCGGTAGCGGTAGTGGCACCGACTTCACCCTGACTATTAGTAGCCTGCAGGCCGAGGACGTGGCCGTCTACTACTGTCAGCAGTCTAGGAAGGACCCTAGCACCTTCGGCGGAGGCACTAAGGTCGAGATTAAG SEQ ID NO: 201 Легкая цепь DIVLTQSPDSLAVSLGERATINCRASESVEYYGTSLMQWYQQKPGQPPKLLIYAASNVESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQSRKDPSTFGGGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC SEQ ID NO: 202 ДНК, кодирующая легкую цепь GATATCGTCCTGACTCAGTCACCCGATAGCCTGGCCGTCAGCCTGGGCGAGCGGGCTACTATTAACTGTAGAGCTAGTGAATCAGTCGAGTACTACGGCACTAGCCTGATGCAGTGGTATCAGCAGAAGCCCGGTCAACCCCCTAAGCTGCTGATCTACGCCGCCTCTAACGTGGAATCAGGCGTGCCCGATAGGTTTAGCGGTAGCGGTAGTGGCACCGACTTCACCCTGACTATTAGTAGCCTGCAGGCCGAGGACGTGGCCGTCTACTACTGTCAGCAGTCTAGGAAGGACCCTAGCACCTTCGGCGGAGGCACTAAGGTCGAGATTAAGCGTACGGTGGCCGCTCCCAGCGTGTTCATCTTCCCCCCCAGCGACGAGCAGCTGAAGAGCGGCACCGCCAGCGTGGTGTGCCTGCTGAACAACTTCTACCCCCGGGAGGCCAAGGTGCAGTGGAAGGTGGACAACGCCCTGCAGAGCGGCAACAGCCAGGAGAGCGTCACCGAGCAGGACAGCAAGGACTCCACCTACAGCCTGAGCAGCACCCTGACCCTGAGCAAGGCCGACTACGAGAAGCATAAGGTGTACGCCTGCGAGGTGACCCACCAGGGCCTGTCCAGCCCCGTGACCAAGAGCTTCAACAGGGGCGAGTGC

Другие иллюстративные ингибиторы TIM-3

В одном варианте осуществления молекула антитела к TIM-3 представляет собой TSR-022 (AnaptysBio/Tesaro). В одном варианте осуществления молекула антитела к TIM-3 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или в совокупности все последовательности CDR), последовательность вариабельного участка тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи TSR-022. В одном варианте осуществления молекула антитела к TIM-3 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или в совокупности все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи APE5137 или APE5121, например, раскрытые в таблице 10. APE5137, APE5121 и другие антитела к TIM-3 раскрыты в WO 2016/161270, включенной посредством ссылки во всей своей полноте.

В одном варианте осуществления молекула антитела к TIM-3 представляет собой антитело клона F38-2E2. В одном варианте осуществления молекула антитела к TIM-3 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или в совокупности все последовательности CDR), последовательность вариабельного участка тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи F38-2E2.

Дополнительные известные антитела к TIM-3 включают антитела, описанные, например, в WO 2016/111947, WO 2016/071448, WO 2016/144803, US 8552156, US 8841418 и US 9163087, включенных посредством ссылки во всей своей полноте.

В одном варианте осуществления антитело к TIM-3 представляет собой антитело, которое конкурирует за связывание и/или связывается с тем же эпитопом в TIM-3, что и одно из антител к TIM-3, описанных в данном документе.

Таблица 10. Аминокислотные последовательности других иллюстративных молекул антител к TIM-3 APE5137 SEQ ID NO: 203 VH EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAAASGFTFSSYDMSWVRQAPGKGLDWVSTISGGGTYTYYQDSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCASMDYWGQGTTVTVSSA SEQ ID NO: 204 VL DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSIRRYLNWYHQKPGKAPKLLIYGASTLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFAVYYCQQSHSAPLTFGGGTKVEIKR APE5121 SEQ ID NO: 205 VH EVQVLESGGGLVQPGGSLRLYCVASGFTFSGSYAMSWVRQAPGKGLEWVSAISGSGGSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKKYYVGPADYWGQGTLVTVSSG SEQ ID NO: 206 VL DIVMTQSPDSLAVSLGERATINCKSSQSVLYSSNNKNYLAWYQHKPGQPPKLLIYWASTRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQYYSSPLTFGGGTKIEVK

Цитокины

Иллюстративные комплексы IL-15/IL-15Ra

В одном варианте осуществления цитокин представляет собой IL-15, образующий комплекс с растворимой формой альфа-рецептора IL-15 (IL-15Ra). Комплекс IL-15/IL-15Ra может содержать IL-15, ковалентно или нековалентно связанный с растворимой формой IL-15Ra. В конкретном варианте осуществления IL-15 человека нековалентно связан с растворимой формой IL-15Ra. В конкретном варианте осуществления IL-15 человека в составе содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 207 в таблице 11 или аминокислотную последовательность, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичную по отношению к SEQ ID NO: 207, и растворимая форма IL-15Ra человека содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 208 в таблице 11 или аминокислотную последовательность, на по меньшей мере 85%, 90%, 95% или 99% или больше идентичную по отношению к SEQ ID NO: 208, описанные в WO 2014/066527, включенной посредством ссылки во всей своей полноте. Молекулы, описанные в данном документе, можно получать с использованием векторов, клеток-хозяев и способов, описанных в WO 2007084342, включенной посредством ссылки во всей своей полноте.

Таблица 11. Аминокислотные и нуклеотидные последовательности иллюстративных комплексов IL-15/IL-15Ra NIZ985 SEQ ID NO: 207 IL-15 человека NWVNVISDLKKIEDLIQSMHIDATLYTESDVHPSCKVTAMKCFLLELQVISLESGDASIHDTVENLIILANNSLSSNGNVTESGCKECEELEEKNIKEFLQSFVHIVQMFINTS SEQ ID NO: 208 Растворимая форма IL-15Ra человека ITCPPPMSVEHADIWVKSYSLYSRERYICNSGFKRKAGTSSLTECVLNKATNVAHWTTPSLKCIRDPALVHQRPAPPSTVTTAGVTPQPESLSPSGKEPAASSPSSNNTAATTAAIVPGSQLMPSKSPSTGTTEISSHESSHGTPSQTTAKNWELTASASHQPPGVYPQG

Другие иллюстративные комплексы IL-15/IL-15Ra

В одном варианте осуществления комплекс IL-15/IL-15Ra представляет собой ALT-803 - слитый белок на основе IL-15/IL-15Ra и Fc (растворимый комплекс IL-15N72D:IL-15RaSu/Fc). ALT-803 описан в WO 2008/143794, включенной посредством ссылки во всей своей полноте. В одном варианте осуществления слитый белок на основе IL-15/IL-15Ra и Fc содержит последовательности, раскрытые в таблице 12.

В одном варианте осуществления комплекс IL-15/IL-15Ra содержит IL-15, слитый с доменом Sushi IL-15Ra (CYP0150, Cytune). Домен Sushi IL-15Ra относится к домену, начинающемуся с первого цистеинового остатка после сигнального пептида IL-15Ra и заканчивающемуся четвертым цистеиновым остатком после указанного сигнального пептида. Комплекс IL-15, слитого с доменом Sushi IL-15Ra, описан в WO 2007/04606 и WO 2012/175222, включенных посредством ссылки во всей своей полноте. В одном варианте осуществления слитый белок IL-15/домен Sushi IL-15Ra содержит последовательности, раскрытые в таблице 12.

Таблица 12. Аминокислотные последовательности других иллюстративных комплексов IL-15/IL-15Ra ALT-803 SEQ ID NO: 209 IL-15N72D NWVNVISDLKKIEDLIQSMHIDATLYTESDVHPSCKVTAMKCFLLELQVISLESGDASIHDTVENLIILANDSLSSNGNVTESGCKECEELEEKNIKEFLQSFVHIVQMFINTS SEQ ID NO: 210 IL-15RaSu/Fc ITCPPPMSVEHADIWVKSYSLYSRERYICNSGFKRKAGTSSLTECVLNKATNVAHWTTPSLKCIREPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK Слитый белок IL-15/домен Sushi IL-15Ra (CYP0150) SEQ ID NO: 211 IL-15 человека NWVNVISDLKKIEDLIQSMHIDATLYTESDVHPSCKVTAMKCFLLELQVISLESGDASIHDTVENLIILANNSLSSNGNVTESGCKECEELEXKNIKEFLQSFVHIVQMFINTS
Где X представляет собой E или K SEQ ID NO: 212 Домен Sushi и шарнирный домен IL-15Ra человека ITCPPPMSVEHADIWVKSYSLYSRERYICNSGFKRKAGTSSLTECVLNKATNVAHWTTPSLKCIRDPALVHQRPAPP

В некоторых вариантах осуществления агонист TLR7 включает соединение, раскрытое в публикации международной заявки № WO2011/049677, которая включена посредством ссылки во всей своей полноте. В некоторых вариантах осуществления агонист TLR7 включает 3-(5-амино-2-(4-(2-(3,3-дифтор-3-фосфонопропокси)этокси)-2-метилфенэтил)бензо[f][1,7]нафтиридин-8-ил)пропановую кислоту. В некоторых вариантах осуществления агонист TLR7 включает соединение формулы:

В другом варианте осуществления соединения формулы (I') или формулы (I) или их фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на их основе, их стереоизомер или таутомер по настоящему описания применяют в комбинации с одним или несколькими ингибиторами ангиогенеза для лечения рака, например, бевацизумабом (Avastin®), акситинибом (Inlyta®); бриваниба аланинатом (BMS-582664, (S)-((R)-1-(4-(4-фтор-2-метил-1H-индол-5-илокси)-5-метилпирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-илокси)пропан-2-ил)2-аминопропанoат); сорафенибом (Nexavar®); пазопанибом (Votrient®); сунитиниба малатом (Sutent®); цедиранибом (AZD2171, CAS 288383-20-1); варгатефом (BIBF1120, CAS 928326-83-4); форетинибом (GSK1363089); телатинибом (BAY57-9352, CAS 332012-40-5); апатинибом (YN968D1, CAS 811803-05-1); иматинибом (Gleevec®); понатинибом (AP24534, CAS 943319-70-8); тивозанибом (AV951, CAS 475108-18-0); регорафенибом (BAY73-4506, CAS 755037-03-7); ваталаниба дигидрохлоридом (PTK787, CAS 212141-51-0); бриванибом (BMS-540215, CAS 649735-46-6); вандетанибом (Caprelsa® или AZD6474); мотесаниба дифосфатом (AMG706, CAS 857876-30-3, N-(2,3-дигидро-3,3-диметил-1H-индол-6-ил)-2-[(4-пиридинилметил)амино]-3-пиридинкарбоксамид, описанный в публикации согласно PCT № WO 02/066470); довитинибом с лактилмолочной кислотой (TKI258, CAS 852433-84-2); линфанибом (ABT869, CAS 796967-16-3); кабозантинибом (XL184, CAS 849217-68-1); лестауртинибом (CAS 111358-88-4); N-[5-[[[5-(1,1-диметилэтил)-2-оксазолил]метил]тио]-2-тиазолил]-4-пиперидинкарбоксамидом (BMS38703, CAS 345627-80-7); (3R,4R)-4-амино-1-((4-((3-метоксифенил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-5-ил)метил)пиперидин-3-олом (BMS690514); N-(3,4-дихлор-2-фторфенил)-6-метокси-7-[[(3aα,5β,6aα)-октагидро-2-метилциклопента[c]пиррол-5-ил]метокси]-4-хиназолинамином (XL647, CAS 781613-23-8); 4-метил-3-[[1-метил-6-(3-пиридинил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-4-ил]амино]-N-[3-(трифторметил)фенил]-бензамидом (BHG712, CAS 940310-85-0) или афлиберцептом (Eylea®).

В еще одном варианте осуществления соединения формулы (I') или формулы (I) или их фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на их основе, их стереоизомер или таутомер по настоящему изобретению применяют в комбинации с одним или несколькими ингибиторами HDAC или другими эпигенетическими модификаторами. Иллюстративные ингибиторы HDAC включают без ограничения вониностат (Zolinza®); ромидепсин (Istodax®); трейхостатин A (TSA); оксамфлатин; вориностат (Zolinza®, субероиланилидгидроксамовая кислота); пироксамид (сибероил-3-аминопиридинамидгидроксамовая кислота); трапоксин A (RF-1023A); трапоксин B (RF-10238); цикло[(αS,2S)-α-амино-η-оксо-2-оксираноктаноил-O-метил-D-тирозил-L-изолейцил-L-пролил] (Cyl-1); цикло[(αS,2S)-α-амино-η-оксо-2-оксираноктаноил-O-метил-D-тирозил-L-изолейцил-(2S)-2-пиперидинкарбонил] (Cyl-2); циклический[L-аланил-D-аланил-(2S)-η-оксо-L-α-аминооксираноктаноил-D-пролил] (HC-токсин); цикло[(αS,2S)-α-амино-η-оксо-2-оксираноктаноил-D-фенилаланил-L-лейцил-(2S)-2-пиперидинкарбонил] (WF-3161); хламидоцин ((S)-циклический(2-метилаланил-L-фенилаланил-D-пролил-η-оксо-L-α-аминооксираноктаноил); апицидин (цикло(8-оксо-L-2-аминодеканоил-1-метокси-L-триптофил-L-изолейцил-D-2-пиперидинкарбонил); ромидепсин (Istodax®, FR-901228); 4-фенилбутират; спирухостатин A; милпроин (вальпроевая кислота); энтиностат (MS-275, N-(2-аминофенил)-4-[N-(пиридин-3-илметоксикарбонил)-аминометил]бензамид); депудецин (4,5:8,9-диангидро-1,2,6,7,11-пентадезокси-D-трео-D-идо-ундека-1,6-диенитол); 4-(ацетиламино)-N-(2-аминофенил)-бензамид (также известен как CI-994); N1-(2-аминофенил)-N8-фенилоктандиамид (также известен как BML-210); 4-(диметиламино)-N-(7-(гидроксиамино)-7-оксогептил)бензамид (также известен как M344); (E)-3-(4-(((2-(1H-индол-3-ил)этил)(2-гидроксиэтил)амино)-метил)фенил)-N-гидроксиакриламид; панобиностат (Farydak®); моцетиностат и белиностат (также известен как PXD101, Beleodaq® или (2E)-N-гидрокси-3-[3-(фенилсульфамоил)фенил]проп-2-енамид) или хидамид (также известен как CS055 или HBI-8000, (E)-N-(2-амино-5-фторфенил)-4-((3-(пиридин-3-ил)акриламидо)метил)бензамид). Другие эпигенетические модификаторы включают без ограничения ингибиторы EZH2 (энхансера гомолога zeste 2), EED (белка, отвечающего за развитие эмбриональной эктодермы) или LSD1 (лизин-специфической гистондеметилaзы 1A или KDM1A).

Химерные антигенные рецепторы

В настоящем изобретении предусмотрены соединения формулы (I') или формулы (I) или их фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на их основе, их стереоизомер или таутомер для применения в комбинации со способами адоптивной иммунотерапии и реагентами, такими как иммунные эффекторные клетки с химерным антигенным рецептором (CAR), например, T-клетки или химерные TCR-трансдуцированные иммунные эффекторные клетки, например, T-клетки. В данном разделе описывается технология CAR, которая в общем применима в комбинации с соединениями формулы (I') или формулы (I) или их фармацевтически приемлемыми солями, гидратами, сольватами, пролекарствами на их основе, их стереоизомерами или таутомерами, и описываются реагенты CAR, например клетки и композиции, и способы.

В целом, аспекты настоящего изобретения относятся к молекуле выделенной нуклеиновой кислоты, кодирующей химерный антигенный рецептор (CAR), или предусматривают ее, где CAR содержит антигенсвязывающий домен (например, антитело или фрагмент антитела, TCR или фрагмент TCR), который связывается с опухолевым антигеном, описанным в данном документе, трансмембранный домен (например, трансмембранный домен, описанный в данном документе) и внутриклеточный сигнальный домен (например, внутриклеточный сигнальный домен, описанный в данном документе) (например, внутриклеточный сигнальный домен, содержащий костимулирующий домен (например, костимулирующий домен, описанный в данном документе) и/или первичный сигнальный домен (например, первичный сигнальный домен, описанный в данном документе)). В других аспектах настоящее изобретение включает клетки-хозяева, содержащие вышеуказанные нуклеиновые кислоты, и выделенные белки, кодируемые такими молекулами нуклеиновой кислоты. Конструкции нуклеиновой кислоты для CAR, кодируемые ими белки, содержащие их векторы, клетки-хозяева, фармацевтические композиции и способы введения и лечения, связанные с настоящим изобретением раскрыты подробно в публикации международной патентной заявки № WO2015142675, которая включена посредством ссылки во всей своей полноте.

В одном аспекте изобретение относится к молекуле выделенной нуклеиновой кислоты, кодирующей химерный антигенный рецептор (CAR), где CAR содержит антигенсвязывающий домен (например, антитело или фрагмент антитела, TCR или фрагмент TCR), который связывается с антигеном, обеспечивающим поддержание опухоли (например, антигеном, обеспечивающим поддержание опухоли, описанным в данном документе), трансмембранный домен (например, трансмембранный домен, описанный в данном документе) и внутриклеточный сигнальный домен (например, внутриклеточный сигнальный домен, описанный в данном документе) (например, внутриклеточный сигнальный домен, содержащий костимулирующий домен (например, костимулирующий домен, описанный в данном документе) и/или первичный сигнальный домен (например, первичный сигнальный домен, описанный в данном документе)). В некоторых вариантах осуществления антиген, обеспечивающий поддержание опухоли, представляет собой антиген, присутствующий на стромальной клетке или супрессорной клетке миелоидного происхождения (MDSC). В других аспектах настоящего изобретения описаны полипептиды, кодируемые такими нуклеиновыми кислотами, и клетки-хозяева, содержащие такие нуклеиновые кислоты и/или полипептиды.

Альтернативно аспекты настоящего изобретения относятся к выделенной нуклеиновой кислоте, кодирующей химерный T-клеточный рецептор (TCR), содержащий вариабельный домен альфа-цепи TCR и/или бета-цепи TCR со специфичностью в отношении ракового антигена, описанного в данном документе. См. например, Dembic et al., Nature, 320, 232-238 (1986), Schumacher, Nat. Rev. Immunol., 2, 512-519 (2002), Kershaw et al., Nat. Rev. Immunol., 5, 928-940 (2005), Xue et al., Clin. Exp. Immunol., 139, 167-172 (2005), Rossig et al., Mol. Ther., 10, 5-18 (2004) и Murphy et al., Immunity, 22, 403-414 (2005); (Morgan et al. J. Immunol., 171, 3287-3295 (2003), Hughes et al., Hum. Gene Ther., 16, 1-16 (2005), Zhao et al., J. Immunol., 174, 4415-4423 (2005), Roszkowski et al., Cancer Res, 65, 1570-1576 (2005) и Engels et al., Hum. Gene Ther., 16, 799-810 (2005); US2009/03046557, содержания которых включены в данный документ посредством ссылки во всей их полноте. Такие химерные TCR могут распознавать, например, раковые антигены, такие как MART-1, gp-100, p53 и NY-ESO-1, MAGE A3/A6, MAGEA3, SSX2, HPV-16 E6 или HPV-16 E7. В других аспектах настоящего изобретения описаны полипептиды, кодируемые такими нуклеиновыми кислотами, и клетки-хозяева, содержащие такие нуклеиновые кислоты и/или полипептиды.

Последовательности неограничивающих примеров различных компонентов, которые могут быть частью CAR, указаны в таблице 11a, где "а. к." обозначает аминокислоты, а "н. к." обозначает нуклеиновые кислоты, которые кодируют соответствующий пептид.

Таблица 11a. Последовательности различных компонентов CAR (а. к. - аминокислотная последовательность, н. к. - последовательность нуклеиновой кислоты) SEQ ID NO: Описание Последовательность SEQ ID NO: 270 Промотор EF-1 (н. к.) CGTGAGGCTCCGGTGCCCGTCAGTGGGCAGAGCGCACATCGCCCACAGTCCCCGAGAAGTTGGGGGGAGGGGTCGGCAATTGAACCGGTGCCTAGAGAAGGTGGCGCGGGGTAAACTGGGAAAGTGATGTCGTGTACTGGCTCCGCCTTTTTCCCGAGGGTGGGGGAGAACCGTATATAAGTGCAGTAGTCGCCGTGAACGTTCTTTTTCGCAACGGGTTTGCCGCCAGAACACAGGTAAGTGCCGTGTGTGGTTCCCGCGGGCCTGGCCTCTTTACGGGTTATGGCCCTTGCGTGCCTTGAATTACTTCCACCTGGCTGCAGTACGTGATTCTTGATCCCGAGCTTCGGGTTGGAAGTGGGTGGGAGAGTTCGAGGCCTTGCGCTTAAGGAGCCCCTTCGCCTCGTGCTTGAGTTGAGGCCTGGCCTGGGCGCTGGGGCCGCCGCGTGCGAATCTGGTGGCACCTTCGCGCCTGTCTCGCTGCTTTCGATAAGTCTCTAGCCATTTAAAATTTTTGATGACCTGCTGCGACGCTTTTTTTCTGGCAAGATAGTCTTGTAAATGCGGGCCAAGATCTGCACACTGGTATTTCGGTTTTTGGGGCCGCGGGCGGCGACGGGGCCCGTGCGTCCCAGCGCACATGTTCGGCGAGGCGGGGCCTGCGAGCGCGGCCACCGAGAATCGGACGGGGGTAGTCTCAAGCTGGCCGGCCTGCTCTGGTGCCTGGCCTCGCGCCGCCGTGTATCGCCCCGCCCTGGGCGGCAAGGCTGGCCCGGTCGGCACCAGTTGCGTGAGCGGAAAGATGGCCGCTTCCCGGCCCTGCTGCAGGGAGCTCAAAATGGAGGACGCGGCGCTCGGGAGAGCGGGCGGGTGAGTCACCCACACAAAGGAAAAGGGCCTTTCCGTCCTCAGCCGTCGCTTCATGTGACTCCACGGAGTACCGGGCGCCGTCCAGGCACCTCGATTAGTTCTCGAGCTTTTGGAGTACGTCGTCTTTAGGTTGGGGGGAGGGGTTTTATGCGATGGAGTTTCCCCACACTGAGTGGGTGGAGACTGAAGTTAGGCCAGCTTGGCACTTGATGTAATTCTCCTTGGAATTTGCCCTTTTTGAGTTTGGATCTTGGTTCATTCTCAAGCCTCAGACAGTGGTTCAAAGTTTTTTTCTTCCATTTCAGGTGTCGTGA SEQ ID NO: 268 Лидерная последовательность (а. к.) MALPVTALLLPLALLLHAARP SEQ ID NO:
287 Лидерная последовательность (н. к.) ATGGCCCTGCCTGTGACAGCCCTGCTGCTGCCTCTGGCTCTGCTGCTGCATGCCGCTAGACCC SEQ ID NO:
288 Лидерная последовательность (н. к.) atggccctccctgtcaccgccctgctgcttccgctggctcttctgctccacgccgctcggccc SEQ ID NO: 250 Шарнирная область CD8 (а. к.) TTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACD SEQ ID NO: 254 Шарнирная область CD8 (н. к.) ACCACGACGCCAGCGCCGCGACCACCAACACCGGCGCCCACCATCGCGTCGCAGCCCCTGTCCCTGCGCCCAGAGGCGTGCCGGCCAGCGGCGGGGGGCGCAGTGCACACGAGGGGGCTGGACTTCGCCTGTGAT SEQ ID NO: 253 Шарнирная область IgG4 (а. к.) ESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGKM SEQ ID NO: 255 Шарнирная область IgG4 (н. к.) GAGAGCAAGTACGGCCCTCCCTGCCCCCCTTGCCCTGCCCCCGAGTTCCTGGGCGGACCCAGCGTGTTCCTGTTCCCCCCCAAGCCCAAGGACACCCTGATGATCAGCCGGACCCCCGAGGTGACCTGTGTGGTGGTGGACGTGTCCCAGGAGGACCCCGAGGTCCAGTTCAACTGGTACGTGGACGGCGTGGAGGTGCACAACGCCAAGACCAAGCCCCGGGAGGAGCAGTTCAATAGCACCTACCGGGTGGTGTCCGTGCTGACCGTGCTGCACCAGGACTGGCTGAACGGCAAGGAATACAAGTGTAAGGTGTCCAACAAGGGCCTGCCCAGCAGCATCGAGAAAACCATCAGCAAGGCCAAGGGCCAGCCTCGGGAGCCCCAGGTGTACACCCTGCCCCCTAGCCAAGAGGAGATGACCAAGAACCAGGTGTCCCTGACCTGCCTGGTGAAGGGCTTCTACCCCAGCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGAGCAACGGCCAGCCCGAGAACAACTACAAGACCACCCCCCCTGTGCTGGACAGCGACGGCAGCTTCTTCCTGTACAGCCGGCTGACCGTGGACAAGAGCCGGTGGCAGGAGGGCAACGTCTTTAGCTGCTCCGTGATGCACGAGGCCCTGCACAACCACTACACCCAGAAGAGCCTGAGCCTGTCCCTGGGCAAGATG SEQ ID NO: 256 Шарнирная область IgD (а. к.) RWPESPKAQASSVPTAQPQAEGSLAKATTAPATTRNTGRGGEEKKKEKEKEEQEERETKTPECPSHTQPLGVYLLTPAVQDLWLRDKATFTCFVVGSDLKDAHLTWEVAGKVPTGGVEEGLLERHSNGSQSQHSRLTLPRSLWNAGTSVTCTLNHPSLPPQRLMALREPAAQAPVKLSLNLLASSDPPEAASWLLCEVSGFSPPNILLMWLEDQREVNTSGFAPARPPPQPGSTTFWAWSVLRVPAPPSPQPATYTCVVSHEDSRTLLNASRSLEVSYVTDH SEQ ID NO: 257 Шарнирная область IgD (н. к.) AGGTGGCCCGAAAGTCCCAAGGCCCAGGCATCTAGTGTTCCTACTGCACAGCCCCAGGCAGAAGGCAGCCTAGCCAAAGCTACTACTGCACCTGCCACTACGCGCAATACTGGCCGTGGCGGGGAGGAGAAGAAAAAGGAGAAAGAGAAAGAAGAACAGGAAGAGAGGGAGACCAAGACCCCTGAATGTCCATCCCATACCCAGCCGCTGGGCGTCTATCTCTTGACTCCCGCAGTACAGGACTTGTGGCTTAGAGATAAGGCCACCTTTACATGTTTCGTCGTGGGCTCTGACCTGAAGGATGCCCATTTGACTTGGGAGGTTGCCGGAAAGGTACCCACAGGGGGGGTTGAGGAAGGGTTGCTGGAGCGCCATTCCAATGGCTCTCAGAGCCAGCACTCAAGACTCACCCTTCCGAGATCCCTGTGGAACGCCGGGACCTCTGTCACATGTACTCTAAATCATCCTAGCCTGCCCCCACAGCGTCTGATGGCCCTTAGAGAGCCAGCCGCCCAGGCACCAGTTAAGCTTAGCCTGAATCTGCTCGCCAGTAGTGATCCCCCAGAGGCCGCCAGCTGGCTCTTATGCGAAGTGTCCGGCTTTAGCCCGCCCAACATCTTGCTCATGTGGCTGGAGGACCAGCGAGAAGTGAACACCAGCGGCTTCGCTCCAGCCCGGCCCCCACCCCAGCCGGGTTCTACCACATTCTGGGCCTGGAGTGTCTTAAGGGTCCCAGCACCACCTAGCCCCCAGCCAGCCACATACACCTGTGTTGTGTCCCATGAAGATAGCAGGACCCTGCTAAATGCTTCTAGGAGTCTGGAGGTTTCCTACGTGACTGACCATT SEQ ID NO: 258 Шарнирная область/линкер GS (а. к.) GGGGSGGGGS SEQ ID NO: 259 Шарнирная область/линкер GS (н. к.) GGTGGCGGAGGTTCTGGAGGTGGAGGTTCC SEQ ID NO: 251 Трансмембранный домен CD8 (а. к.) IYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYC SEQ ID NO: 252 Трансмембранный домен CD8 (н. к.) ATCTACATCTGGGCGCCCTTGGCCGGGACTTGTGGGGTCCTTCTCCTGTCACTGGTTATCACCCTTTACTGC SEQ ID NO: 289 Трансмембранный домен CD8 (н. к.) ATCTACATTTGGGCCCCTCTGGCTGGTACTTGCGGGGTCCTGCTGCTTTCACTCGTGATCACTCTTTACTGT SEQ ID NO: 264 Внутриклеточный домен 4-1BB (а. к) KRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCEL SEQ ID NO: 266 Внутриклеточный домен 4-1BB (н. к.) AAACGGGGCAGAAAGAAACTCCTGTATATATTCAAACAACCATTTATGAGACCAGTACAAACTACTCAAGAGGAAGATGGCTGTAGCTGCCGATTTCCAGAAGAAGAAGAAGGAGGATGTGAACTG SEQ ID NO: 290 Внутриклеточный домен 4-1BB (н. к.) aagcgcggtcggaagaagctgctgtacatctttaagcaacccttcatgaggcctgtgcagactactcaagaggaggacggctgttcatgccggttcccagaggaggaggaaggcggctgcgaactg SEQ ID NO: 265 CD27 (а. к.) QRRKYRSNKGESPVEPAEPCRYSCPREEEGSTIPIQEDYRKPEPACSP SEQ ID NO: 267 CD27 (н. к.) Caacgaaggaaatatagatcaaacaaaggagaaagtcctgtggagcctgcagagccttgtcgttacagctgccccagggaggaggagggcagcaccatccccatccaggaggattaccgaaaaccggagcctgcctgctccccc SEQ ID NO: 260 CD3-дзета (а. к.) RVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 262 CD3-дзета (н. к.) AGAGTGAAGTTCAGCAGGAGCGCAGACGCCCCCGCGTACAAGCAGGGCCAGAACCAGCTCTATAACGAGCTCAATCTAGGACGAAGAGAGGAGTACGATGTTTTGGACAAGAGACGTGGCCGGGACCCTGAGATGGGGGGAAAGCCGAGAAGGAAGAACCCTCAGGAAGGCCTGTACAATGAACTGCAGAAAGATAAGATGGCGGAGGCCTACAGTGAGATTGGGATGAAAGGCGAGCGCCGGAGGGGCAAGGGGCACGATGGCCTTTACCAGGGTCTCAGTACAGCCACCAAGGACACCTACGACGCCCTTCACATGCAGGCCCTGCCCCCTCGC SEQ ID NO: 291 CD3-дзета (н. к.) CGCGTGAAATTCAGCCGCAGCGCAGATGCTCCAGCCTACAAGCAGGGGCAGAACCAGCTCTACAACGAACTCAATCTTGGTCGGAGAGAGGAGTACGACGTGCTGGACAAGCGGAGAGGACGGGACCCAGAAATGGGCGGGAAGCCGCGCAGAAAGAATCCCCAAGAGGGCCTGTACAACGAGCTCCAAAAGGATAAGATGGCAGAAGCCTATAGCGAGATTGGTATGAAAGGGGAACGCAGAAGAGGCAAAGGCCACGACGGACTGTACCAGGGACTCAGCACCGCCACCAAGGACACCTATGACGCTCTTCACATGCAGGCCCTGCCGCCTCGG SEQ ID NO: 261 CD3-дзета (а. к.) RVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 263 CD3-дзета (н. к.) AGAGTGAAGTTCAGCAGGAGCGCAGACGCCCCCGCGTACCAGCAGGGCCAGAACCAGCTCTATAACGAGCTCAATCTAGGACGAAGAGAGGAGTACGATGTTTTGGACAAGAGACGTGGCCGGGACCCTGAGATGGGGGGAAAGCCGAGAAGGAAGAACCCTCAGGAAGGCCTGTACAATGAACTGCAGAAAGATAAGATGGCGGAGGCCTACAGTGAGATTGGGATGAAAGGCGAGCGCCGGAGGGGCAAGGGGCACGATGGCCTTTACCAGGGTCTCAGTACAGCCACCAAGGACACCTACGACGCCCTTCACATGCAGGCCCTGCCCCCTCGC SEQ ID NO: 292 Линкер (а. к.) GGGGS SEQ ID NO: 293 Внеклеточный домен PD-1 (а. к.) Pgwfldspdrpwnpptfspallvvtegdnatftcsfsntsesfvlnwyrmspsnqtdklaafpedrsqpgqdcrfrvtqlpngrdfhmsvvrarrndsgtylcgaislapkaqikeslraelrvterraevptahpspsprpagqfqtlv SEQ ID NO: 294 Внеклеточный домен PD-1 (н. к.) Cccggatggtttctggactctccggatcgcccgtggaatcccccaaccttctcaccggcactcttggttgtgactgagggcgataatgcgaccttcacgtgctcgttctccaacacctccgaatcattcgtgctgaactggtaccgcatgagcccgtcaaaccagaccgacaagctcgccgcgtttccggaagatcggtcgcaaccgggacaggattgtcggttccgcgtgactcaactgccgaatggcagagacttccacatgagcgtggtccgcgctaggcgaaacgactccgggacctacctgtgcggagccatctcgctggcgcctaaggcccaaatcaaagagagcttgagggccgaactgagagtgaccgagcgcagagctgaggtgccaactgcacatccatccccatcgcctcggcctgcggggcagtttcagaccctggtc SEQ ID NO: 295 CAR для PD-1 с сигнальной последовательностью (а. к.) Malpvtalllplalllhaarppgwfldspdrpwnpptfspallvvtegdnatftcsfsntsesfvlnwyrmspsnqtdklaafpedrsqpgqdcrfrvtqlpngrdfhmsvvrarrndsgtylcgaislapkaqikeslraelrvterraevptahpspsprpagqfqtlvtttpaprpptpaptiasqplslrpeacrpaaggavhtrgldfacdiyiwaplagtcgvlllslvitlyckrgrkkllyifkqpfmrpvqttqeedgcscrfpeeeeggcelrvkfsrsadapaykqgqnqlynelnlgrreeydvldkrrgrdpemggkprrknpqeglynelqkdkmaeayseigmkgerrrgkghdglyqglstatkdtydalhmqalppr SEQ ID NO: 296 CAR для PD-1 (н. к.) Atggccctccctgtcactgccctgcttctccccctcgcactcctgctccacgccgctagaccacccggatggtttctggactctccggatcgcccgtggaatcccccaaccttctcaccggcactcttggttgtgactgagggcgataatgcgaccttcacgtgctcgttctccaacacctccgaatcattcgtgctgaactggtaccgcatgagcccgtcaaaccagaccgacaagctcgccgcgtttccggaagatcggtcgcaaccgggacaggattgtcggttccgcgtgactcaactgccgaatggcagagacttccacatgagcgtggtccgcgctaggcgaaacgactccgggacctacctgtgcggagccatctcgctggcgcctaaggcccaaatcaaagagagcttgagggccgaactgagagtgaccgagcgcagagctgaggtgccaactgcacatccatccccatcgcctcggcctgcggggcagtttcagaccctggtcacgaccactccggcgccgcgcccaccgactccggccccaactatcgcgagccagcccctgtcgctgaggccggaagcatgccgccctgccgccggaggtgctgtgcatacccggggattggacttcgcatgcgacatctacatttgggctcctctcgccggaacttgtggcgtgctccttctgtccctggtcatcaccctgtactgcaagcggggtcggaaaaagcttctgtacattttcaagcagcccttcatgaggcccgtgcaaaccacccaggaggaggacggttgctcctgccggttccccgaagaggaagaaggaggttgcgagctgcgcgtgaagttctcccggagcgccgacgcccccgcctataagcagggccagaaccagctgtacaacgaactgaacctgggacggcgggaagagtacgatgtgctggacaagcggcgcggccgggaccccgaaatgggcgggaagcctagaagaaagaaccctcaggaaggcctgtataacgagctgcagaaggacaagatggccgaggcctactccgaaattgggatgaagggagagcggcggaggggaaaggggcacgacggcctgtaccaaggactgtccaccgccaccaaggacacatacgatgccctgcacatgcaggcccttccccctcgc SEQ ID NO: 297 Линкер (а. к.) (Gly-Gly-Gly-Ser)n, где n=1-10 SEQ ID NO: 215 Линкер (а. к.) (Gly4 Ser)4 SEQ ID NO: 216 Линкер (а. к.) (Gly4 Ser)3 SEQ ID NO: 297 Линкер (а. к.) (Gly3Ser) SEQ ID NO: 298 полиA (н. к.) [a]_50-5000 SEQ ID NO: 299 CAR для PD1 (а. к.) Pgwfldspdrpwnpptfspallvvtegdnatftcsfsntsesfvlnwyrmspsnqtdklaafpedrsqpgqdcrfrvtqlpngrdfhmsvvrarrndsgtylcgaislapkaqikeslraelrvterraevptahpspsprpagqfqtlvtttpaprpptpaptiasqplslrpeacrpaaggavhtrgldfacdiyiwaplagtcgvlllslvitlyckrgrkkllyifkqpfmrpvqttqeedgcscrfpeeeeggcelrvkfsrsadapaykqgqnqlynelnlgrreeydvldkrrgrdpemggkprrknpqeglynelqkdkmaeayseigmkgerrrgkghdglyqglstatkdtydalhmqalppr SEQ ID NO: 300 Внутриклеточный домен ICOS (a. к.) TKKKYSSSVHDPNGEYMFMRAVNTAKKSRLTDVTL SEQ ID NO: 301 Внутриклеточный домен ICOS (н. к.) ACAAAAAAGAAGTATTCATCCAGTGTGCACGACCCTAACGGTGAATACATGTTCATGAGAGCAGTGAACACAGCCAAAAAATCCAGACTCACAGATGTGACCCTA SEQ ID NO: 302 TM-домен ICOS (а. к.) TTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDFWLPIGCAAFVVVCILGCILICWL SEQ ID NO: 303 TM-домен ICOS (н. к.) ACCACGACGCCAGCGCCGCGACCACCAACACCGGCGCCCACCATCGCGTCGCAGCCCCTGTCCCTGCGCCCAGAGGCGTGCCGGCCAGCGGCGGGGGGCGCAGTGCACACGAGGGGGCTGGACTTCGCCTGTGATTTCTGGTTACCCATAGGATGTGCAGCCTTTGTTGTAGTCTGCATTTTGGGATGCATACTTATTTGTTGGCTT SEQ ID NO: 304 Внутриклеточный домен CD28 (а. к) RSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRS SEQ ID NO: 305 Внутриклеточный домен CD28 (н. к.) AGGAGTAAGAGGAGCAGGCTCCTGCACAGTGACTACATGAACATGACTCCCCGCCGCCCCGGGCCCACCCGCAAGCATTACCAGCCCTATGCCCCACCACGCGACTTCGCAGCCTATCGCTCC

Мишени

В настоящем изобретении предусмотрены клетки, например, иммунные эффектoрные клетки (например, T-клетки, NK-клетки), которые содержат или в любое время содержали молекулу gRNA или систему CRISPR, описанные в данном документе, которые дополнительно сконструированы таким образом, чтобы содержать один или несколько CAR, которые направляют иммунные эффектoрные клетки на нежелательные клетки (например, раковые клетки). Это достигается с помощью антигенсвязывающего домена в CAR, который является специфичным в отношении антигена, ассоциированного с раком. Существует два класса антигенов, ассоциированных с раком (опухолевых антигенов), на которые можно нацеливаться с помощью CAR по настоящему изобретению: (1) антигены, ассоциированные с раком, которые экспрессируются на поверхности раковых клеток; и (2) антигены, ассоциированные с раком, которые сами по себе являются внутриклеточными, однако фрагмент такого антигена (пептида) презентируется на поверхности раковых клеток с помощью MHC (главного комплекса гистосовместимости).

В некоторых вариантах осуществления опухолевый антиген выбран из одного или нескольких из CD19; CD123; CD22; CD30; CD171; CS-1 (также называемого белком 1 подгруппы CD2, CRACC, SLAMF7, CD319 и 19A24); молекулы 1, подобной лектинам С-типа (CLL-1 или CLECL1); CD33; варианта III рецептора эпидермального фактора роста (EGFRvIII); ганглиозида G2 (GD2); ганглиозида GD3 (aNeu5Ac(2-8)aNeu5Ac(2-3)bDGalp(1-4)bDGlcp(1-1)Cer); антигена созревания В-клеток (BCMA), являющегося представителем семейства рецепторов TNF; Tn-антигена ((Ag Tn) или (GalNAcα-Ser/Thr)); простатического специфического мембранного антигена (PSMA); орфанного рецептора 1, подобного рецепторной тирозинкиназе (ROR1); Fms-подобной тирозинкиназы 3 (FLT3); опухолеассоциированного гликопротеина 72 (TAG72); CD38; CD44v6; раково-эмбрионального антигена (СЕА); молекулы адгезии эпителиальных клеток (ЕРСАМ); В7Н3 (CD276); KIT (CD117); альфа-2-субъединицы рецептора интерлейкина-13 (IL-13Ra2 или CD213A2); мезотелина; альфа-субъединицы рецептора интерлейкина 11 (IL-11Ra); антигена стволовых клеток предстательной железы (PSCA); сериновой протеазы 21 (тестизина или PRSS21); рецептора 2 фактора роста эндотелия сосудов (VEGFR2); антигена системы Льюис (Y); CD24; рецептора фактора роста тромбоцитов бета-типа (PDGFR-бета); стадиеспецифического эмбрионального антигена 4 (SSEA-4); CD20; рецептора фолиевой кислоты альфа; рецепторной тирозинпротеинкиназы ERBB2 (Her2/neu); муцина 1, ассоциированного с клеточной поверхностью (MUC1); рецептора эпидермального фактора роста (EGFR); молекулы адгезии нервных клеток (NCAM); простазы; простатической кислой фосфатазы (РАР); мутантного фактора элонгации 2 (ELF2M); эфрина В2; белка активации фибробластов альфа (FAP); рецептора инсулиноподобного фактора роста 1 (рецептора IGF-I), карбоангидразы IX (CAIX); субъединицы бета-типа 9 протеасомы (просомы, мультикаталитической протеазы) (LMP2); гликопротеина 100 (gp100); онкогенного слитого белка, состоящего из кластерного региона точечных разрывов (BCR) и гомолога 1 онкогена вируса лейкоза мышей Абельсона (Abl) (bcr-abl); тирозиназы; рецептора 2 эфрина А-типа (EphA2); фукозил-GM1; молекулы адгезии, представляющей собой сиалилированный антиген системы Льюис (sLe); ганглиозида GM3 (aNeu5Ac(2-3)bDGalp(1-4)bDGlcp(1-1)Cer); трансглутаминазы 5 (TGS5); высокомолекулярного антигена, ассоциированного с меланомой (HMWMAA); ганглиозида о-ацетил-GD2 (OAcGD2); рецептора фолиевой кислоты бета; опухолевого эндотелиального маркера 1 (TEM1/CD248); белка, родственного опухолевому эндотелиальному маркеру 7 (TEM7R); клаудина 6 (CLDN6); рецептора тиреотропного гормона (TSHR); представителя D группы 5 класса С рецепторов, сопряженных с G-белками (GPRC5D); белка, кодируемого открытой рамкой считывания 61 X-хромосомы (CXORF61); CD97; CD179a; киназы анапластической лимфомы (ALK); полисиаловой кислоты; плацентоспецифического белка 1 (PLAC1); гексасахаридной части гликоцерамида globoH (GloboH); дифференцировочного антигена молочной железы (NY-BR-1); уроплакина 2 (UPK2); клеточного рецептора 1 вируса гепатита A (HAVCR1); бета-3-адренорецептора (ADRB3); паннексина 3 (PANX3); рецептора 20, сопряженного с G-белком (GPR20); антигена локуса K9 комплекса лимфоцитарных антигенов 6 (LY6K); обонятельного рецептора 51Е2 (OR51E2); белка, кодируемого альтернативной рамкой считывания гена TCR-гамма (TARP); белка опухоли Вильмса (WT1); раково-тестикулярного антигена 1 (NY-ESO-1); раково-тестикулярного антигена 2 (LAGE-1a); антигена 1, ассоциированного с меланомой (MAGE-A1); белка, кодируемого транслокационным вариантом 6 гена ETS, локализованным в р-плече 12 хромосомы (ETV6-AML); белка сперматозоидов 17 (SPA17); представителя 1А семейства X-антигенов (XAGE1); ангиопоэтин-связывающего рецептора клеточной поверхности 2 (TIE-2); раково-тестикулярного антигена меланомы 1 (MAD-CT-1); раково-тестикулярного антигена меланомы 2 (MAD-CT-2); Fos-родственного антигена 1; опухолевого белка р53 (р53); мутантного р53; простеина; сурвивина; теломеразы; опухолевого антигена 1 карциномы предстательной железы (РСТА-1 или галектина 8), антигена меланомы 1, распознаваемого Т-клетками (MelanA или MART1); мутантного антигена саркомы крыс (Ras); теломеразной обратной транскриптазы человека (hTERT); антигена саркомы с точечными разрывами при транслокации; меланомного ингибитора апоптоза (ML-IAP); ERG (продукта слитого гена трансмембранной сериновой протеазы 2 (TMPRSS2) и ETS); N-ацетилглюкозаминилтрансферазы V (NA17); белка с парным box-доменом Рах-3 (РАХ3); андрогенового рецептора; циклина В1; нейробластомного гомолога онкогена вируса миелоцитоматоза птиц v-myc (MYCN); представителя С семейства гомологов Ras (RhoC); белка 2, родственного тирозиназе (TRP-2); цитохрома Р450 1В1 (CYP1B1); белка, подобного CCCTC-связывающему фактору (белку с "цинковыми пальцами") (BORIS или "брата регулятора импринтированных сайтов"), антигена плоскоклеточной карциномы 3, распознаваемого Т-клетками (SART3); белка с парным box-доменом Рах-5 (РАХ5); проакрозин-связывающего белка sp32 (OY-TES1); лимфоцитоспецифической протеинтирозинкиназы (LCK); якорного белка 4 киназы A (AKAP-4); антигена 2 синовиальной саркомы с точечным разрывом в X-хромосоме (SSX2); рецептора конечных продуктов гликирования (RAGE-1); почечного убиквитарного белка 1 (RU1); почечного убиквитарного белка 2 (RU2); легумаина; Е6 вируса папилломы человека (Е6 HPV); Е7 вируса папилломы человека (Е7 HPV); кишечной карбоксилэстеразы; мутантного белка теплового шока 70-2 (mut-hsp70-2); CD79a; CD79b; CD72; иммуноглобулиноподобного рецептора 1, ассоциированного с лейкоцитами (LAIR1); рецептора Fc-фрагмента IgA (FCAR или CD89); представителя 2 подсемейства А лейкоцитарных иммуноглобулиноподобных рецепторов (LILRA2); представителя f семейства белков, подобных молекулам CD300 (CD300LF); представителя А семейства 12 лектиновых доменов С-типа (CLEC12A); антигена 2 стромальных клеток костного мозга (BST2); белка 2, подобного муциноподобному рецептору гормона, содержащему EGF-подобный модуль (EMR2); лимфоцитарного антигена 75 (LY75); глипикана-3 (GPC3); антигена 5, подобного Fc-рецептору (FCRL5); и полипептида 1, подобного иммуноглобулину лямбда (IGLL1).

CAR, описанный в данном документе, может содержать антигенсвязывающий домен (например, антитело или фрагмент антитела, TCR или фрагмент TCR), который связывается с антигеном, обеспечивающим поддержание опухоли, (например, антигеном, обеспечивающим поддержание опухоли, описанным в данном документе). В некоторых вариантах осуществления антиген, обеспечивающий поддержание опухоли, представляет собой антиген, присутствующий на стромальной клетке или супрессорной клетке миелоидного происхождения (MDSC). Стромальные клетки могут секретировать факторы роста для обеспечения деления клеток в микроокружении. Клетки MDSC могут подавлять пролиферацию и активацию T-клеток. Не ограничиваясь теорией, в некоторых вариантах осуществления CAR-экспрессирующие клетки разрушают клетки, обеспечивающие поддержание опухоли, тем самым опосредованно подавляя рост или выживаемость опухоли.

В вариантах осуществления антиген, экспрессируемый стромальными клетками, выбран из одного или нескольких из антигена 2, экспрессируемого стромальными клетками костного мозга (BST2), белка активации фибробластов (FAP) и тенасцина. В одном варианте осуществления FAP-специфическое антитело представляет собой сибротузумаб, конкурирует с ним за связывание или содержит такие же CDR. В вариантах осуществления антиген, экспрессируемый MDSC, выбран из одного или нескольких из CD33, CD11b, C14, CD15 и CD66b. Соответственно, в некоторых вариантах осуществления антиген, обеспечивающий поддержание опухоли, выбран из одного или нескольких из антигена 2, экспрессируемого стромальными клетками костного мозга (BST2), белка активации фибробластов (FAP) или тенасцина, CD33, CD11b, C14, CD15 и CD66b.

Структуры антигенсвязывающего домена

В некоторых вариантах осуществления антигенсвязывающий домен кодируемой молекулы CAR содержит антитело, фрагмент антитела, scFv, Fv, Fab, (Fab')2, однодоменное антитело (SDAB), VH- или VL-домен, VHH-домен верблюдовых или бифункциональное (например, биспецифическое) гибридное антитело (например, Lanzavecchia et al., Eur. J. Immunol. 17, 105 (1987)).

В некоторых случаях scFv можно получить в соответствии со способом, известным из уровня техники (см., например, Bird et al., (1988) Science 242:423-426 и Huston et al., (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883). Молекулы scFv можно получить путем связывания VH- и VL-областей друг с другом с помощью гибких полипептидных линкеров. Молекулы scFv содержат линкер (например, линкер Ser-Gly) с оптимизированными длиной и/или аминокислотным составом. Длина линкера может сильно влиять на укладку и взаимодействие вариабельных областей scFv. В действительности, если используют короткий полипептидный линкер (например, длиной 5-10 аминокислот), то предотвращается укладка внутри одной цепи. Межцепочечная укладка также необходима для объединения двух вариабельных областей вместе с образованием функционального эпитопсвязывающего участка. Примеры ориентации и размера линкеров см., например, в Hollinger et al. 1993 Proc Natl Acad. Sci. U.S.A. 90:6444-6448, публикациях заявок на патент США №№ 2005/0100543, 2005/0175606, 2007/0014794 и публикациях согласно PCT №№ WO2006/020258 и WO2007/024715, включенных в данный документ посредством ссылки.

scFv может содержать линкер из по меньшей мере 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50 или более аминокислотных остатков между его VL- и VH-областями. Линкерная последовательность может содержать любую встречающуюся в природе аминокислоту. В некоторых вариантах осуществления линкерная последовательность содержит аминокислоты глицин и серин. В другом варианте осуществления линкерная последовательность содержит группы глициновых и сериновых повторов, таких как (Gly₄Ser)n, где n представляет собой положительное целое число, равное 1 или больше (SEQ ID NO: 217). В одном варианте осуществления линкер может представлять собой (Gly₄Ser)₄ (SEQ ID NO: 215) или (Gly₄Ser)₃(SEQ ID NO: 216). При изменении длины линкера может сохраняться или усиливаться активность, что приводит к улучшению эффективности в исследованиях активности.

В другом аспекте антигенсвязывающий домен представляет собой T-клеточный рецептор ("TCR") или его фрагмент, например, одноцепочечный TCR (scTCR). Способы получения таких TCR известны из уровня техники. См., например, Willemsen RA et al, Gene Therapy 7: 1369-1377 (2000); Zhang T et al, Cancer Gene Ther 11: 487-496 (2004); Aggen et al, Gene Ther. 19(4):365-74 (2012) (литературные источники включены в данный документ во всей своей полноте). Например, может быть сконструирован scTCR, который содержит гены Vα и Vβ из клона Т-клеток, связанные с помощью линкера (например, гибкого пептида). Этот подход является весьма пригодным для ассоциированной с раком мишени, которая сама является внутриклеточной, однако фрагмент такого антигена (пептида) презентируется на поверхности раковых клеток с помощью MHC.

В определенных вариантах осуществления кодируемый антигенсвязывающий домен характеризуется аффинностью связывания с KD, составляющей от 10^-4 M до 10^-8 M.

В одном варианте осуществления кодируемая молекула CAR содержит антигенсвязывающий домен, который характеризуется аффинностью связывания с KD в отношении антигена-мишени, составляющей от 10^-4 M до 10^-8 M, например, от 10^-5 M до 10^-7 M, например, 10^-6 M или 10^-7 M. В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен характеризуется аффинностью связывания, в по меньшей мере пять раз, 10 раз, 20 раз, 30 раз, 50 раз, 100 раз или 1000 раз меньшей, чем у эталонного антитела, например, антитела, описанного в данном документе. В одном варианте осуществления кодируемый антигенсвязывающий домен характеризуется аффинностью связывания, в по меньшей мере 5 раз меньшей, чем у эталонного антитела (например, антитела, из которого получен антигенсвязывающий домен). В одном аспекте такие фрагменты антитела являются функциональными в том смысле, что они обеспечивают биологический ответ, который может включать без ограничения активацию иммунного ответа, подавление начала передачи сигнала от их антигена-мишени, подавление активности киназы и т. п., как будет понятно специалисту в данной области техники.

В одном аспекте антигенсвязывающий домен CAR представляет собой scFv-фрагмент антитела, который является гуманизированным по сравнению с мышиной последовательностью scFv, из которой он получен.

В одном аспекте антигенсвязывающий домен CAR по настоящему изобретению (например, scFv) кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, последовательность которой была кодон-оптимизирована для экспрессии в клетке млекопитающего. В одном аспекте целая конструкция CAR по настоящему изобретению кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, целая последовательность которой была кодон-оптимизирована для экспрессии в клетке млекопитающего. Оптимизация кодонов относится к обнаружению того, что частота встречаемости синонимичных кодонов (т. е. кодонов, кодирующих одну и ту же аминокислоту) в кодирующей ДНК смещена у разных видов. Такая вырожденность кодонов обеспечивает возможность кодирования идентичного полипептида различными нуклеотидными последовательностями. Из уровня техники известны различные способы оптимизации кодонов, и они включают, например, способы, раскрытые по меньшей мере в патентах США №№ 5786464 и 6114148.

Антигенсвязывающие домены (и таргетные антигены)

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для CD19 представляет собой антигенсвязывающую часть, например CDR, CAR, антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, описанных, например, в публикации согласно РСТ WO2012/079000; публикации согласно РСТ WO2014/153270; Kochenderfer, J.N. et al., J. Immunother. 32 (7), 689-702 (2009); Kochenderfer, J.N., et al., Blood, 116 (20), 4099-4102 (2010); публикации согласно PCT WO2014/031687; Bejcek, Cancer Research, 55, 2346-2351, 1995 или патенте США № 7446190.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для мезотелина представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела, антигенсвязывающего фрагмента или CAR, описанных, например, в публикации согласно PCT WO2015/090230. В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для мезотелина представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела, антигенсвязывающего фрагмента или CAR, описанных, например, в публикации согласно PCT WO1997/025068, WO1999/028471, WO2005/014652, WO2006/099141, WO2009/045957, WO2009/068204, WO2013/142034, WO2013/040557 или WO2013/063419. В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для мезотелина представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела, антигенсвязывающего фрагмента или CAR, описанных в WO/2015/090230.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для CD123 представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела, антигенсвязывающего фрагмента или CAR, описанных, например, в публикации согласно PCT WO2014/130635. В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для CD123 представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела, антигенсвязывающего фрагмента или CAR, описанных, например, в публикации согласно PCT WO2014/138805, WO2014/138819, WO2013/173820, WO2014/144622, WO2001/66139, WO2010/126066, WO2014/144622 или US2009/0252742. В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для CD123 представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела, антигенсвязывающего фрагмента или CAR, описанных в WO/2016/028896.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для EGFRvIII представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела, антигенсвязывающего фрагмента или CAR, описанных, например, в WO/2014/130657.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для CD22 представляет собой антигенсвязывающую часть, например CDR, антитела, описанного, например, в Haso et al., Blood, 121(7): 1165-1174 (2013); Wayne et al., Clin Cancer Res 16(6): 1894-1903 (2010); Kato et al., Leuk Res 37(1):83-88 (2013); Creative BioMart (creativebiomart.net): MOM-18047-S(P).

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для CS-1 представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, элотузумаба (BMS), см., например, Tai et al., 2008, Blood 112(4):1329-37; Tai et al., 2007, Blood. 110(5):1656-63.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для CLL-1 представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела, доступных от R&D, ebiosciences, Abcam, например, PE-CLL1-hu с кат. № 353604 (BioLegend) и PE-CLL1 (CLEC12A) с кат. № 562566 (BD). В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для CLL-1 представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела, антигенсвязывающего фрагмента или CAR, описанных в WO/2016/014535.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для CD33 представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела, описанного, например, в Bross et al., Clin Cancer Res 7(6):1490-1496 (2001) (гемтузумаб-озогамицин, hP67.6), Caron et al., Cancer Res 52(24):6761-6767 (1992) (линтузумаб, HuM195), Lapusan et al., Invest New Drugs 30(3):1121-1131 (2012) (AVE9633), Aigner et al., Leukemia 27(5): 1107-1115 (2013) (AMG330, CD33 BiTE), Dutour et al., Adv hematol 2012:683065 (2012), и Pizzitola et al., Leukemia doi:10.1038/Lue.2014.62 (2014). В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для CD33 представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела, антигенсвязывающего фрагмента или CAR, описанных в WO/2016/014576.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для GD2 представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела, описанного, например, в Mujoo et al., Cancer Res. 47(4):1098-1104 (1987); Cheung et al., Cancer Res 45(6):2642-2649 (1985), Cheung et al., J Clin Oncol 5(9):1430-1440 (1987), Cheung et al., J Clin Oncol 16(9):3053-3060 (1998), Handgretinger et al., Cancer Immunol Immunother 35(3):199-204 (1992). В некоторых вариантах осуществления антигенсвязывающий домен для GD2 представляет собой антигенсвязывающую часть антитела, выбранного из mAb 14.18, 14G2a, ch14.18, hu14.18, 3F8, hu3F8, 3G6, 8B6, 60C3, 10B8, ME36.1 и 8H9, см., например, WO2012033885, WO2013040371, WO2013192294, WO2013061273, WO2013123061, WO2013074916 и WO201385552. В некоторых вариантах осуществления антигенсвязывающий домен для GD2 представляет собой антигенсвязывающую часть антитела, описанного в публикации заявки на патент США № 20100150910 или публикации согласно PCT № WO 2011160119.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для BCMA представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела, описанного, например, в WO2012163805, WO200112812 и WO2003062401. В одном варианте осуществления, антигенсвязывающий домен для BCMA представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела, антигенсвязывающего фрагмента или CAR, описанных в WO/2016/014565.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для Tn-антигена представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела, описанного, например, в US 8440798, Brooks et al., PNAS 107(22):10056-10061 (2010) и Stone et al., OncoImmunology 1(6):863-873(2012).

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для PSMA представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела, описанного, например, в Parker et al., Protein Expr Purif 89(2):136-145 (2013), US 20110268656 (J591 ScFv); Frigerio et al., European J. Cancer 49(9):2223-2232 (2013) (scFvD2B); WO 2006125481 (mAb 3/A12, 3/E7 и 3/F11), и одноцепочечные фрагменты антител (scFv A5 и D7).

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для ROR1 представляет собой антигенсвязывающую часть, например CDR, антитела, описанного, например, в Hudecek et al., Clin Cancer Res 19(12):3153-3164 (2013); WO 2011159847 и US20130101607.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для FLT3 представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела, описанного, например, в WO2011076922, US5777084, EP0754230, US20090297529 и нескольких коммерческих каталогах антител (R&D, Ebiosciences, Abcam).

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для TAG72 представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела, описанного, например, в Hombach et al., Gastroenterology 113(4):1163-1170 (1997); и ab691 от Abcam.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для FAP представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела, описанного, например, в Ostermann et al., Clinical Cancer Research 14:4584-4592 (2008) (FAP5), публикации заявки на патент США № 2009/0304718; сибротузумаба (см., например, Hofheinz et al., Oncology Research and Treatment 26(1), 2003); и Tran et al., J Exp Med 210(6):1125-1135 (2013).

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для CD38 представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, даратумумаба (см., например, Groen et al., Blood 116(21):1261-1262 (2010); MOR202 (см., например, US 8263746); или антител, описанных в US 8362211.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для CD44v6 представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела, описанного, например, в Casucci et al., Blood 122(20):3461-3472 (2013).

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для СЕА представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела, описанного, например, в Chmielewski et al., Gastoenterology 143(4):1095-1107 (2012).

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для EPCAM представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела, выбранного из MT110, биспецифического Ab к EpCAM-CD3 (см., например, clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT00635596); эдреколомаба; 3622W94; ING-1 и адекатумумаба (MT201).

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для PRSS21 представляет собой антигенсвязывающую часть, например CDR, антитела, описанного в патенте США № 8080650.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для B7H3 представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела MGA271 (Macrogenics).

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для KIT представляет собой антигенсвязывающую часть, например CDR, антитела, описанного, например, в US7915391, US20120288506 и нескольких коммерческих каталогах антител.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для IL-13Ra2 представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела, описанного, например, в WO2008/146911, WO2004087758, нескольких коммерческих каталогах антител и WO2004087758.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для CD30 представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела, описанного, например, в US7090843 B1 и EP0805871.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для GD3 представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела, описанного, например, в US7253263; US 8207308; US 20120276046; EP1013761; WO2005035577 и US6437098.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для CD171 представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела, описанного, например, в Hong et al., J Immunother 37(2):93-104 (2014).

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для IL-11Ra представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела, доступного от Abcam (кат. № ab55262) или Novus Biologicals (кат. № EPR5446). В другом варианте осуществления антигенсвязывающий домен для IL-11Ra представляет собой пептид, см., например, Huang et al., Cancer Res 72(1):271-281 (2012).

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для PSCA представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела, описанного, например, в Morgenroth et al., Prostate 67(10):1121-1131 (2007) (scFv 7F5); Nejatollahi et al., J of Oncology 2013(2013), ID статьи 839831 (scFv C5-II); и публикации заявки на патент США № 20090311181.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для VEGFR2 представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела, описанного, например, в Chinnasamy et al., J Clin Invest 120(11):3953-3968 (2010).

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для Y системы Льюис представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела, описанного, например, в Kelly et al., Cancer Biother Radiopharm 23(4):411-423 (2008) (Ab hu3S193 (scFvs)); Dolezal et al., Protein Engineering 16(1):47-56 (2003) (NC10 scFv).

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для CD24 представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела, описанного, например, в Maliar et al., Gastroenterology 143(5):1375-1384 (2012).

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для PDGFR-бета представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела ab32570 от Abcam.

В одном варианте осуществления, антигенсвязывающий домен для SSEA-4 представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела MC813 (Cell Signalling) или других коммерчески доступных антител.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для CD20 представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела ритуксимаба, офатумумаба, окрелизумаба, вельтузумаба или GA101.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для рецептора фолиевой кислоты альфа представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела IMGN853 или антитела, описанного в US20120009181; US4851332, LK26: US5952484.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для ERBB2 (Her2/neu) представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела трастузумаба или пертузумаба.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для MUC1 представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела SAR566658.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для EGFR представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела цетуксимаба, панитумумаба, залутумумаба, нимотузумаба или матузумаба.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для NCAM представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, клона антитела 2-2B: MAB5324 (EMD Millipore).

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для эфрина B2 представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела, описанного, например, в Abengozar et al., Blood 119(19):4565-4576 (2012).

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для рецептора IGF-I представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела, описанного, например, в US8344112 B2; EP2322550 A1; WO 2006/138315 или PCT/US2006/022995.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для CAIX представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела клона 303123 (R&D Systems).

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для LMP2 представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела, описанного, например, в US7410640 или US20050129701.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для gp100 представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела HMB45, NKI/бета-В или антитела, описанного в WO2013165940 или US20130295007.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для тирозиназы представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела, описанного, например, в US5843674 или US19950504048.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для EphA2 представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела, описанного, например, в Yu et al., Mol Ther 22(1):102-111 (2014).

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для фукозил-GM1 представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела, описанного, например, в US20100297138 или WO2007/067992.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для sLe представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела G193 (для антигена Y системы Льюис), см. Scott AM et al, Cancer Res 60: 3254-61 (2000), также описанного в Neeson et al, J Immunol May 2013 190 (Meeting Abstract Supplement) 177.10.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для GM3 представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела CA 2523449 (mAb 14F7).

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для HMWMAA представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела, описанного, например, в Kmiecik et al., Oncoimmunology 3(1):e27185 (2014) (PMID: 24575382) (mAb9.2.27); US6528481; WO2010033866 или US 20140004124.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для o-ацетил-GD2 представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела 8B6.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для TEM1/CD248 представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела, описанного, например, в Marty et al., Cancer Lett 235(2):298-308 (2006); Zhao et al., J Immunol Methods 363(2):221-232 (2011).

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для CLDN6 представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела IMAB027 (Ganymed Pharmaceuticals), см., например, clinicaltrial.gov/show/NCT02054351.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для TSHR представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела, описанного, например, в US8603466, US8501415 или US8309693.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для GPRC5D представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела FAB6300A (R&D Systems) или LS-A4180 (Lifespan Biosciences).

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для CD97 представляет собой антигенсвязывающую часть, например CDR, антитела, описанного, например, в US6846911; de Groot et al., J. Immunol. 183(6):4127-4134 (2009); или антитела от R&D: MAB3734.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для ALK представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела, описанного, например, в Mino-Kenudson et al., Clin Cancer Res 16(5):1561-1571 (2010).

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для полисиаловой кислоты представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела, описанного, например, в Nagae et al., J Biol Chem 288(47):33784-33796 (2013).

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для PLAC1 представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела, описанного, например, в Ghods et al., Biotechnol Appl Biochem 2013 doi:10.1002/bab.1177.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для GloboH представляет собой антигенсвязывающую часть антитела VK9 или антитела, описанного, например, в Kudryashov V et al., Glycoconj J.15(3):243-9 (1998), Lou et al., Proc Natl Acad Sci USA 111(7):2482-2487 (2014); MBr1: Bremer E-G et al. J Biol Chem 259:14773-14777 (1984).

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для NY-BR-1 представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела, описанного, например, в Jager et al., Appl Immunohistochem Mol Morphol 15(1):77-83 (2007).

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для WT-1 представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела, описанного, например, в Dao et al., Sci Transl Med 5(176):176ra33 (2013) или WO2012/135854.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для MAGE-A1 представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела, описанного, например, в Willemsen et al., J Immunol 174(12):7853-7858 (2005) (TCR-подобного scFv).

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для белка 17 сперматозоидов представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела, описанного, например, в Song et al., Target Oncol 2013 Aug 14 (PMID: 23943313); Song et al., Med Oncol 29(4):2923-2931 (2012).

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для Tie 2 представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела AB33 (Cell Signalling Technology).

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для MAD-CT-2 представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела, описанного, например, в PMID: 2450952; US7635753.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для Fos-родственного антигена 1 представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела 12F9 (Novus Biologicals).

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для MelanA/MART1 представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела, описанного в EP2514766 A2 или US 7749719.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для антигенов саркомы с точечными разрывами при транслокации представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела, описанного, например, в Luo et al, EMBO Mol. Med. 4(6):453-461 (2012).

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для TRP-2 представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела, описанного, например, в Wang et al, J Exp Med. 184(6):2207-16 (1996).

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для CYP1B1 представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела, описанного, например, в Maecker et al, Blood 102 (9): 3287-3294 (2003).

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для RAGE-1 представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела MAB5328 (EMD Millipore).

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для обратной транскриптазы, представляющей собой теломеразу человека, представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела с № по кат. LS-B95-100 (Lifespan Biosciences)

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для кишечной карбоксилэстеразы представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела 4F12 с № по кат. LS-B6190-50 (Lifespan Biosciences).

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для mut hsp70-2 представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, моноклонального антитела от Lifespan Biosciences с № по кат. LS-C133261-100 (Lifespan Biosciences).

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для CD79a представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела [HM47/A9], представляющего собой антитело к CD79a (ab3121), доступного от Abcam; антитела № 3351, представляющего собой антитело к CD79A, доступного от Cell Signalling Technology; или антитела HPA017748, представляющего собой антитело к CD79A, вырабатываемого у кролика, доступного от Sigma Aldrich.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для CD79b представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела полатузумаба ведотина, представляющего собой антитело к CD79b, описанного в Dornan et al., "Therapeutic potential of an anti-CD79b antibody-drug conjugate, anti-CD79b-vc-MMAE, for the treatment of non-Hodgkin lymphoma" Blood. 2009 Sep 24;114(13):2721-9. doi: 10.1182/blood-2009-02-205500. Epub 2009 Jul 24 или биспецифического антитела к CD79b/CD3, описанного в "4507 Pre-Clinical Characterization of T Cell-Dependent Bispecific Antibody Anti-CD79b/CD3 As a Potential Therapy for B Cell Malignancies" Abstracts of 56^th ASH Annual Meeting and Exposition, San Francisco, CA December 6-9 2014.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для CD72 представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела J3-109, описанного в Myers and Uckun, "An anti-CD72 immunotoxin against therapy-refractory B-lineage acute lymphoblastic leukemia." Leuk Lymphoma. 1995 Jun;18(1-2):119-22, или антитела к CD72 (10D6.8.1, mIgG1), описанного в Polson et al., "Antibody-Drug Conjugates for the Treatment of Non-Hodgkin's Lymphoma: Target and Linker-Drug Selection" Cancer Res March 15, 2009 69; 2358.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для LAIR1 представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела ANT-301, представляющего собой антитело к LAIR1, доступного от ProSpec; или антитела к CD305 (LAIR1) человека, доступного от BioLegend.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для FCAR представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела к CD89/антитела к FCAR (№ по кат. 10414-H08H), доступного от Sino Biological Inc.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для LILRA2 представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, моноклонального антитела к LILRA2 (M17), клона 3C7, доступного от Abnova, или моноклонального антитела мыши к LILRA2 (2D7), доступного от Lifespan Biosciences.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для CD300LF представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, моноклонального антитела мыши к CMRF35-подобной молекуле 1 [UP-D2], доступного от BioLegend, или моноклонального антитела крысы к CMRF35-подобной молекуле 1 [234903], доступного от R&D Systems.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для CLEC12A представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, scFv-антитела в формате биспецифического активатора, привлекающего T-клетки (BiTE), и ADC, описанных в Noordhuis et al., "Targeting of CLEC12A In Acute Myeloid Leukemia by Antibody-Drug-Conjugates and Bispecific CLL-1xCD3 BiTE Antibody" 53^rd ASH Annual Meeting and Exposition, December 10-13, 2011, и MCLA-117 (Merus).

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для BST2 (также называемого CD317) представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, моноклонального антитела мыши к CD317 [3H4], доступного от Antibodies-Online, или моноклонального антитела мыши к CD317 [696739], доступного от R&D Systems.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для EMR2 (также называемого CD312) представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, моноклонального антитела мыши к CD312 [LS-B8033], доступного от LifeSpan Biosciences, или моноклонального антитела мыши к CD312 [494025], доступного от R&D Systems.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для LY75 представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, моноклонального антитела мыши к лимфоцитарному антигену 75 [HD30], доступного от EMD Millipore, или моноклонального антитела мыши к лимфоцитарному антигену 75 [A15797], доступного от Life Technologies.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для GPC3 представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела hGC33, описанного в Nakano K, Ishiguro T, Konishi H, et al. Generation of a humanized anti-glypican 3 antibody by CDR grafting and stability optimization. Anticancer Drugs. 2010 Nov;21(10):907-916, или MDX-1414, HN3 или YP7, все три из которых описаны в Feng et al., "Glypican-3 antibodies: a new therapeutic target for liver cancer." FEBS Lett. 2014 Jan 21;588(2):377-82.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для FCRL5 представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела к FcRL5, описанного в Elkins et al., "FcRL5 as a target of antibody-drug conjugates for the treatment of multiple myeloma" Mol Cancer Ther. 2012 Oct;11(10):2222-32. В одном варианте осуществления, антигенсвязывающий домен для FCRL5 представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, антитела к FcRL5, описанного, например, в WO2001/038490, WO/2005/117986, WO2006/039238, WO2006/076691, WO2010/114940, WO2010/120561 или WO2014/210064.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для IGLL1 представляет собой антигенсвязывающую часть, например, CDR, моноклонального антитела мыши к полипептиду 1, подобному иммуноглобулину лямбда [AT1G4], доступного от LifeSpan Biosciences, моноклонального антитела мыши к полипептиду 1, подобному иммуноглобулину лямбда [HSL11], доступного от BioLegend.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен содержит одну, две, три (например, все три) CDR тяжелой цепи, CDR1 HC, CDR2 HC и CDR3 HC, из антитела, указанного выше, и/или одну, две, три (например, все три) CDR легкой цепи, CDR1 LC, CDR2 LC и CDR3 LC, из антитела, указанного выше. В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен содержит вариабельную область тяжелой цепи и/или вариабельную область легкой цепи антитела, указанного выше.

В другом аспекте антигенсвязывающий домен предусматривает гуманизированное антитело или фрагмент антитела. В некоторых аспектах антитело, отличное от человеческого, является гуманизированным, если конкретные последовательности или области антитела модифицированы для увеличения сходства с антителом, естественным образом вырабатываемым у человека, или его фрагментом. В одном аспекте антигенсвязывающий домен является гуманизированным.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен CAR, например, CAR, экспрессируемого клеткой по настоящему изобретению, связывается с CD19. CD19 обнаруживается на В-клетках во время дифференцировки линии от стадии про/пре-В-клеток до стадии терминально дифференцированных плазматических клеток. В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен представляет собой scFv-домен мыши, который связывается с CD19 человека, например, антигенсвязывающий домен CTL019 (например, SEQ ID NO: 218). В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен представляет собой гуманизированное антитело или фрагмент антитела, например, scFv-домен, полученный из scFv CTL019 мыши. В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен представляет собой антитело человека или фрагмент антитела, которые связываются с CD19 человека. Иллюстративные scFv-домены (и их последовательности, например, CDR, последовательности VL и VH), которые связываются с CD19, представлены в таблице 12a. Последовательности scFv-домена, представленные в таблице 12, включают вариабельную область легкой цепи (VL) и вариабельную область тяжелой цепи (VH). VL и VH присоединены с помощью линкера, содержащих последовательность GGGGSGGGGSGGGGS (SEQ ID NO: 216), например, в следующей ориентации: VL-линкер-VH.

Таблица 12a. Антигенсвязывающие домены, которые связывают CD19 Антиген Название Аминокислотная последовательность SEQ ID NO: CD19 muCTL019 DIQMTQTTSSLSASLGDRVTISCRASQDISKYLNWYQQKPDGTVKLLIYHTSRLHSGVPSRFSGSGSGTDYSLTISNLEQEDIATYFCQQGNTLPYTFGGGTKLEITGGGGSGGGGSGGGGSEVKLQESGPGLVAPSQSLSVTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPRKGLEWLGVIWGSETTYYNSALKSRLTIIKDNSKSQVFLKMNSLQTDDTAIYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTSVTVSS 218 CD19 huscFv1 EIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIKGGGGSGGGGSGGGGSQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYSSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSS 219 CD19 huscFv2 EIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIKGGGGSGGGGSGGGGSQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYQSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSS 220 CD19 huscFv3 QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYSSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSEIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIK 221 CD19 huscFv4 QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYQSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSEIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIK 222 CD19 huscFv5 EIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYSSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSS 223 CD19 huscFv6 EIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYQSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSS 224 CD19 huscFv7 QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYSSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIK 225 CD19 huscFv8 QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYQSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIK 226 CD19 huscFv9 EIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYNSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSS 227 CD19 Hu
scFv10 QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYNSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIK 228 CD19 Hu
scFv11 EIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIKGGGGSGGGGSGGGGSQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYNSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSS 229 CD19 Hu scFv12 QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYNSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSEIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIK 230

Последовательности CDR scFv-доменов из доменов, связывающихся с антигеном CD19, представленных в таблице 12a, показаны в таблице 12b для вариабельных доменов тяжелой цепи и в таблице 12c для вариабельных доменов легкой цепи. "ID" обозначает соответствующий SEQ ID NO для каждой CDR.

Таблица 12b. CDR вариабельных доменов тяжелой цепи Описание FW HCDR1 ID HCDR2 ID HCDR3 ID Мышиный_CART19 GVSLPDYGVS 306 VIWGSETTYYNSALKS 307 HYYYGGSYAMDY 231 Гуманизированный CART19 a VH4 GVSLPDYGVS 306 VIWGSETTYYSSSLKS 308 HYYYGGSYAMDY 231 Гуманизированный CART19 b VH4 GVSLPDYGVS 306 VIWGSETTYYQSSLKS 309 HYYYGGSYAMDY 231 Гуманизированный CART19 c VH4 GVSLPDYGVS 306 VIWGSETTYYNSSLKS 310 HYYYGGSYAMDY 231

Таблица 12c. CDR вариабельного домена легкой цепи Описание FW LCDR1 ID LCDR2 ID LCDR3 ID Мышиный_CART19 RASQDISKYLN 311 HTSRLHS 312 QQGNTLPYT 232 Гуманизированный CART19 a VK3 RASQDISKYLN 311 HTSRLHS 312 QQGNTLPYT 232 Гуманизированный CART19 b VK3 RASQDISKYLN 311 HTSRLHS 312 QQGNTLPYT 232 Гуманизированный CART19 c VK3 RASQDISKYLN 311 HTSRLHS 312 QQGNTLPYT 232

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен предусматривает антитело к CD19 или его фрагмент, например, scFv. Например, антигенсвязывающий домен содержит вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи, приведенные в таблице 12d. Линкерная последовательность, соединяющая вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи, может представлять собой любую из линкерных последовательностей, описанных в данном документе, или альтернативно может представлять собой GSTSGSGKPGSGEGSTKG (SEQ ID NO: 233). Вариабельная область легкой цепи и вариабельная область тяжелой цепи scFv могут находиться, например, в любой из следующих ориентаций: вариабельная область легкой цепи-линкер-вариабельная область тяжелой цепи или вариабельная область тяжелой цепи-линкер-вариабельная область легкой цепи.

Таблица 12d. Дополнительные CD19-связывающие домены антитела Название Ab Последовательность VH Последовательность VL SJ25-C1 QVQLLESGAELVRPGSSVKISCKASGYAFSSYWMNWVKQRPGQGLEWIGQIYPGDGDTNYNGKFKGQATLTADKSSSTAYMQLSGLTSEDSAVYSCARKTISSVVDFYFDYWGQGTTVT (SEQ ID NO: 234) ELVLTQSPKFMSTSVGDRVSVTCKASQNVGTNVAWYQQKPGQSPKPLIYSATYRNSGVPDRFTGSGSGTDFTLTITNVQSKDLADYFYFCQYNRYPYTSGGGTKLEIKRRS (SEQ ID NO: 235) Последовательность ScFv SJ25-C1
scFv QVQLLESGAELVRPGSSVKISCKASGYAFSSYWMNWVKQRPGQGLEWIGQIYPGDGDTNYNGKFKGQATLTADKSSSTAYMQLSGLTSEDSAVYSCARKTISSVVDFYFDYWGQGTTVTGSTSGSGKPGSGEGSTKGELVLTQSPKFMSTSVGDRVSVTCKASQNVGTNVAWYQQKPGQSPKPLIYSATYRNSGVPDRFTGSGSGTDFTLTITNVQSKDLADYFYFCQYNRYPYTSGGGTKLEIKRRS (SEQ ID NO: 236)

В одном варианте осуществления CD19-связывающий домен содержит одну или несколько (например, все три) из области 1, определяющей комплементарность, легкой цепи (CDR1 LC), области 2, определяющей комплементарность, легкой цепи (CDR2 LC) и области 3, определяющей комплементарность, легкой цепи (CDR3 LC) CD19-связывающего домена, описанного в данном документе, например, представленного в таблице 12a или 15, и/или одну или несколько (например, все три) из области 1, определяющей комплементарность, тяжелой цепи (CDR1 HC), области 2, определяющей комплементарность, тяжелой цепи (CDR2 HC) и области 3, определяющей комплементарность, тяжелой цепи (CDR3 HC) CD19-связывающего домена, описанного в данном документе, например, представленного в таблице 12a или 16. В одном варианте осуществления CD19-связывающий домен содержит одну, две или все из CDR1 LC, CDR2 LC и CDR3 LC с любыми аминокислотными последовательностями, представленными в таблице 12c, включенной в данный документ посредством ссылки; и одну, две или все из CDR1 HC, CDR2 HC и CDR3 HC с любыми аминокислотными последовательностями, представленными в таблице 12b.

Для конструирования CAR в соответствии с настоящим изобретением можно применять любой известный в данной области CAR для CD19, например, антигенсвязывающий домен для CD19 из любого известного CAR для CD19. Например, CAR для CD19, LG-740, описан в патенте США № 8399645; патенте США № 7446190; Xu et al., Leuk Lymphoma. 2013 54(2):255-260(2012); Cruz et al., Blood 122(17):2965-2973 (2013); Brentjens et al., Blood, 118(18):4817-4828 (2011); Kochenderfer et al., Blood 116(20):4099-102 (2010); Kochenderfer et al., Blood 122 (25):4129-39 (2013) и 16th Annu Meet Am Soc Gen Cell Ther (ASGCT) (May 15-18, Salt Lake City) 2013, Abst 10. В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен для CD19 представляет собой антигенсвязывающую часть, например CDR, CAR, антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, описанных, например, в публикации согласно РСТ WO2012/079000; публикации согласно РСТ WO2014/153270; Kochenderfer, J.N. et al., J. Immunother. 32 (7), 689-702 (2009); Kochenderfer, J.N., et al., Blood, 116 (20), 4099-4102 (2010); публикации согласно PCT WO2014/031687; Bejcek, Cancer Research, 55, 2346-2351, 1995 или патенте США № 7446190.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен CAR, например, CAR, экспрессируемого клеткой по настоящему изобретению, связывается с BCMA. BCMA обнаруживается преимущественно в зрелых В-лимфоцитах. В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен представляет собой scFv-домен мыши, который связывается с BCMA человека. В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен представляет собой гуманизированное антитело или фрагмент антитела, например, scFv-домен, который связывается с BCMA человека. В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен представляет собой антитело человека или фрагмент антитела, которые связываются с BCMA человека. В вариантах осуществления иллюстративные конструкции CAR для BCMA получают с применением последовательностей VH и VL из публикации согласно PCT WO2012/0163805 (содержание которой включено в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте). В вариантах осуществления дополнительные иллюстративные конструкции CAR для BCMA получают с применением последовательностей VH и VL из публикации согласно PCT WO2016/014565 (содержание которой включено в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте). В вариантах осуществления дополнительные иллюстративные конструкции CAR для BCMA получают с применением последовательностей VH и VL из публикации согласно PCT WO2014/122144 (содержание которой включено в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте). В вариантах осуществления дополнительные иллюстративные конструкции CAR для BCMA получают с применением молекул CAR и/или последовательностей VH и VL из публикации согласно PCT WO2016/014789 (содержание которой включено в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте). В вариантах осуществления дополнительные иллюстративные конструкции CAR для BCMA получают с применением молекул CAR и/или последовательностей VH и VL из публикации согласно PCT WO2014/089335 (содержание которой включено в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте). В вариантах осуществления дополнительные иллюстративные конструкции CAR для BCMA получают с применением молекул CAR и/или последовательностей VH и VL из публикации согласно PCT WO2014/140248 (содержание которой включено в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте).

В соответствии с настоящим изобретением можно применять любой известный CAR для BMCA, например, антигенсвязывающий домен для BMCA из любого известного из уровня техники CAR для BMCA. Например, те, что описаны в данном документе.

Иллюстративные молекулы CAR

В одном варианте осуществления CAR предусматривает молекулу CAR, содержащую антигенсвязывающий домен для CD19 (например, мышиное, человеческое или гуманизированное антитело или фрагмент антитела, которые специфично связываются с CD19), трансмембранный домен и внутриклеточный сигнальный домен (например, внутриклеточный сигнальный домен, содержащий костимулирующий домен и/или первичный сигнальный домен).

Иллюстративные молекулы CAR, описанные в данном документе, представлены в таблице 12e. Молекулы CAR в таблице 12e содержат антигенсвязывающий домен для CD19, например, с аминокислотной последовательностью любого антигенсвязывающего домена для CD19, представленного в таблице 12a.

Таблица 12e. Иллюстративные молекулы CAR для CD19 Антиген Название Аминокислотная последовательность SEQ ID NO: CD19 CTL019 MALPVTALLLPLALLLHAARPDIQMTQTTSSLSASLGDRVTISCRASQDISKYLNWYQQKPDGTVKLLIYHTSRLHSGVPSRFSGSGSGTDYSLTISNLEQEDIATYFCQQGNTLPYTFGGGTKLEITGGGGSGGGGSGGGGSEVKLQESGPGLVAPSQSLSVTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPRKGLEWLGVIWGSETTYYNSALKSRLTIIKDNSKSQVFLKMNSLQTDDTAIYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTSVTVSSTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR 237 CD19 CAR 1 MALPVTALLLPLALLLHAARPEIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIKGGGGSGGGGSGGGGSQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYSSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSSTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR 238 CD19 CAR 2 MALPVTALLLPLALLLHAARPEIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIKGGGGSGGGGSGGGGSQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYQSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSSTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR 239 CD19 CAR 3 MALPVTALLLPLALLLHAARPQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYSSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSEIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIKTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR 240 CD19 CAR 4 MALPVTALLLPLALLLHAARPQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYQSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSEIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIKTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR 241 CD19 CAR 5 MALPVTALLLPLALLLHAARPEIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYSSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSSTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR 242 CD19 CAR 6 MALPVTALLLPLALLLHAARPEIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYQSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSSTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR 243 CD19 CAR 7 MALPVTALLLPLALLLHAARPQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYSSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIKTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR 244 CD19 CAR 8 MALPVTALLLPLALLLHAARPQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYQSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIKTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR 245 CD19 CAR 9 MALPVTALLLPLALLLHAARPEIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYNSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSSTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR 246 CD19 CAR 10 MALPVTALLLPLALLLHAARPEIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYNSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSSTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR 247 CD19 CAR 11 MALPVTALLLPLALLLHAARPQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYNSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIKTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR 248 CD19 CAR 12 MALPVTALLLPLALLLHAARPEIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIKGGGGSGGGGSGGGGSQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYNSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSSTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR 249

В одном аспекте CAR, например, CAR, экспрессируемый клеткой по настоящему изобретению, предусматривает молекулу CAR, содержащую антигенсвязывающий домен, который связывается с BCMA, например, содержит антигенсвязывающий домен BCMA (например, мышиное, человеческое или гуманизированное антитело или фрагмент антитела, которые специфично связываются с BCMA, например, BCMA человека), трансмембранный домен и внутриклеточный сигнальный домен (например, внутриклеточный сигнальный домен, содержащий костимулирующий домен и/или первичный сигнальный домен).

Иллюстративные молекулы CAR для молекулы CAR, описанного в данном документе, представлены в таблице 1 WO2016/014565, которая включена в данный документ посредством ссылки.

Трансмембранные домены

Что касается трансмембранного домена, в различных вариантах осуществления CAR можно разработать так, чтобы он содержал трансмембранный домен, присоединенный к внеклеточному домену CAR. Трансмембранный домен может содержать одну или несколько дополнительных аминокислот, прилегающих к трансмембранной области, например, одну или несколько аминокислот, относящихся к внеклеточной области белка, из которого получен трансмембранный домен (например, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 и до 15 аминокислот внеклеточной области), и/или одну или несколько дополнительных аминокислот, относящихся к внутриклеточной области белка, из которого получен трансмембранный домен (например, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 и до 15 аминокислот внутриклеточной области). В одном аспекте трансмембранный домен представляет собой домен, ассоциированный с одним из остальных доменов CAR, например, в одном варианте осуществления трансмембранный домен может быть получен из того же белка, из которого получен сигнальный домен, костимулирующий домен или шарнирный домен. В другом аспекте трансмембранный домен не получен из того же белка, из которого получен какой-либо другой домен CAR. В некоторых случаях трансмембранный домен можно выбрать или модифицировать с помощью аминокислотной замены, чтобы избежать связывания таких доменов с трансмембранными доменами тех же или других поверхностных белков мембран, например, чтобы свести к минимуму взаимодействия с другими компонентами рецепторного комплекса. В одном аспекте трансмембранный домен способен к гомодимеризации с другим CAR на клеточной поверхности клетки, экспрессирующей CAR. В другом аспекте аминокислотную последовательность трансмембранного домена можно модифицировать или подвергнуть замене таким образом, чтобы свести к минимуму взаимодействия со связывающими доменами нативного партнера по связыванию, присутствующего в той же самой клетке, экспрессирующей CAR.

Трансмембранный домен может быть получен из природного либо из рекомбинантного источника. Если источник является природным, то домен может быть получен из любого мембраносвязанного или трансмембранного белка. В одном аспекте трансмембранный домен способен передавать сигнал внутриклеточному(внутриклеточным) домену(доменам) всякий раз, когда CAR связался с мишенью. Трансмембранный домен, особенно применимый в настоящем изобретении, может включать по меньшей мере трансмембранную(трансмембранные) область(области), например, альфа-, бета- или дзета-цепи Т-клеточного рецептора, CD28, CD27, CD3-эпсилон, CD45, CD4, CD5, CD8, CD9, CD16, CD22, CD33, CD37, CD64, CD80, CD86, CD134, CD137, CD154. В некоторых вариантах осуществления трансмембранный домен может включать по меньшей мере трансмембранную(трансмембранные) область(области), например, KIRDS2, OX40, CD2, CD27, LFA-1 (CD11a, CD18), ICOS (CD278), 4-1BB (CD137), GITR, CD40, BAFFR, HVEM (LIGHTR), SLAMF7, NKp80 (KLRF1), NKp44, NKp30, NKp46, CD160, CD19, IL2R-бета, IL2R-гамма, IL7R-α, ITGA1, VLA1, CD49a, ITGA4, IA4, CD49D, ITGA6, VLA-6, CD49f, ITGAD, CD11d, ITGAE, CD103, ITGAL, CD11a, LFA-1, ITGAM, CD11b, ITGAX, CD11c, ITGB1, CD29, ITGB2, CD18, LFA-1, ITGB7, TNFR2, DNAM1 (CD226), SLAMF4 (CD244, 2B4), CD84, CD96 (Tactile), CEACAM1, CRTAM, Ly9 (CD229), CD160 (BY55), PSGL1, CD100 (SEMA4D), SLAMF6 (NTB-A, Ly108), SLAM (SLAMF1, CD150, IPO-3), BLAME (SLAMF8), SELPLG (CD162), LTBR, PAG/Cbp, NKG2D, NKG2C.

В некоторых случаях трансмембранный домен может быть присоединен к внеклеточной области CAR, например, антигенсвязывающему домену CAR, посредством шарнирной области, например, шарнирной области из белка человека. Например, в одном варианте осуществления шарнирная область может представлять собой шарнирную область Ig (иммуноглобулина) человека (например, шарнирную область IgG4, шарнирную область IgD), линкер GS (например, линкер GS, описанный в данном документе), шарнирную область KIR2DS2 или шарнирную область CD8a. В одном варианте осуществления шарнирная область или спейсер содержит (например, состоит из нее) аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 250. В одном аспекте трансмембранный домен содержит (например, состоит из) трансмембранный домен под SEQ ID NO: 251.

В определенных вариантах осуществления кодируемый трансмембранный домен содержит аминокислотную последовательность трансмембранного домена CD8, содержащую по меньшей мере одну, две или три модификации, но не более 20, 10 или 5 модификаций аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 251 или последовательности, на по меньшей мере 95% идентичной аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 251. В одном варианте осуществления кодируемый трансмембранный домен содержит последовательность под SEQ ID NO: 251.

В других вариантах осуществления молекула нуклеиновой кислоты, кодирующей CAR, содержит нуклеотидную последовательность трансмембранного домена CD8, например, содержит последовательность под SEQ ID NO: 252 или SEQ ID NO: 289 или последовательность, на по меньшей мере 95% идентичную ей.

В определенных вариантах осуществления кодируемый антигенсвязывающий домен соединен с трансмембранным доменом с помощью шарнирной области. В одном варианте осуществления кодируемая шарнирная область содержит аминокислотную последовательность шарнирной области CD8, например, SEQ ID NO: 250; или аминокислотную последовательность шарнирной области IgG4, например, SEQ ID NO: 253, или последовательность, на по меньшей мере 95% идентичную SEQ ID NO: 250 или SEQ ID NO: 253. В других вариантах осуществления последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая шарнирную область, предусматривает последовательность под SEQ ID NO: 254 или SEQ ID NO: 255, соответствующую шарнирной области CD8 или шарнирной области IgG4 соответственно, или последовательность, на по меньшей мере 95% идентичную SEQ ID NO: 254 или 255.

В одном аспекте шарнирная область или спейсер предусматривают шарнирную область IgG4. Например, в одном варианте осуществления шарнирная область или спейсер содержат шарнирную область с аминокислотной последовательностью ESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGKM (SEQ ID NO: 253). В некоторых вариантах осуществления шарнирная область или спейсер содержат шарнирную область, кодируемую нуклеотидной последовательностью GAGAGCAAGTACGGCCCTCCCTGCCCCCCTTGCCCTGCCCCCGAGTTCCTGGGCGGACCCAGCGTGTTCCTGTTCCCCCCCAAGCCCAAGGACACCCTGATGATCAGCCGGACCCCCGAGGTGACCTGTGTGGTGGTGGACGTGTCCCAGGAGGACCCCGAGGTCCAGTTCAACTGGTACGTGGACGGCGTGGAGGTGCACAACGCCAAGACCAAGCCCCGGGAGGAGCAGTTCAATAGCACCTACCGGGTGGTGTCCGTGCTGACCGTGCTGCACCAGGACTGGCTGAACGGCAAGGAATACAAGTGTAAGGTGTCCAACAAGGGCCTGCCCAGCAGCATCGAGAAAACCATCAGCAAGGCCAAGGGCCAGCCTCGGGAGCCCCAGGTGTACACCCTGCCCCCTAGCCAAGAGGAGATGACCAAGAACCAGGTGTCCCTGACCTGCCTGGTGAAGGGCTTCTACCCCAGCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGAGCAACGGCCAGCCCGAGAACAACTACAAGACCACCCCCCCTGTGCTGGACAGCGACGGCAGCTTCTTCCTGTACAGCCGGCTGACCGTGGACAAGAGCCGGTGGCAGGAGGGCAACGTCTTTAGCTGCTCCGTGATGCACGAGGCCCTGCACAACCACTACACCCAGAAGAGCCTGAGCCTGTCCCTGGGCAAGATG (SEQ ID NO: 255).

В одном аспекте шарнирная область или спейсер предусматривают шарнирную область IgD. Например, в одном варианте осуществления шарнирная область или спейсер содержат шарнирную область с аминокислотной последовательностью RWPESPKAQASSVPTAQPQAEGSLAKATTAPATTRNTGRGGEEKKKEKEKEEQEERETKTPECPSHTQPLGVYLLTPAVQDLWLRDKATFTCFVVGSDLKDAHLTWEVAGKVPTGGVEEGLLERHSNGSQSQHSRLTLPRSLWNAGTSVTCTLNHPSLPPQRLMALREPAAQAPVKLSLNLLASSDPPEAASWLLCEVSGFSPPNILLMWLEDQREVNTSGFAPARPPPQPGSTTFWAWSVLRVPAPPSPQPATYTCVVSHEDSRTLLNASRSLEVSYVTDH (SEQ ID NO: 256). В некоторых вариантах осуществления шарнирная область или спейсер содержат шарнирную область, кодируемую нуклеотидной последовательностью AGGTGGCCCGAAAGTCCCAAGGCCCAGGCATCTAGTGTTCCTACTGCACAGCCCCAGGCAGAAGGCAGCCTAGCCAAAGCTACTACTGCACCTGCCACTACGCGCAATACTGGCCGTGGCGGGGAGGAGAAGAAAAAGGAGAAAGAGAAAGAAGAACAGGAAGAGAGGGAGACCAAGACCCCTGAATGTCCATCCCATACCCAGCCGCTGGGCGTCTATCTCTTGACTCCCGCAGTACAGGACTTGTGGCTTAGAGATAAGGCCACCTTTACATGTTTCGTCGTGGGCTCTGACCTGAAGGATGCCCATTTGACTTGGGAGGTTGCCGGAAAGGTACCCACAGGGGGGGTTGAGGAAGGGTTGCTGGAGCGCCATTCCAATGGCTCTCAGAGCCAGCACTCAAGACTCACCCTTCCGAGATCCCTGTGGAACGCCGGGACCTCTGTCACATGTACTCTAAATCATCCTAGCCTGCCCCCACAGCGTCTGATGGCCCTTAGAGAGCCAGCCGCCCAGGCACCAGTTAAGCTTAGCCTGAATCTGCTCGCCAGTAGTGATCCCCCAGAGGCCGCCAGCTGGCTCTTATGCGAAGTGTCCGGCTTTAGCCCGCCCAACATCTTGCTCATGTGGCTGGAGGACCAGCGAGAAGTGAACACCAGCGGCTTCGCTCCAGCCCGGCCCCCACCCCAGCCGGGTTCTACCACATTCTGGGCCTGGAGTGTCTTAAGGGTCCCAGCACCACCTAGCCCCCAGCCAGCCACATACACCTGTGTTGTGTCCCATGAAGATAGCAGGACCCTGCTAAATGCTTCTAGGAGTCTGGAGGTTTCCTACGTGACTGACCATT (SEQ ID NO: 257).

В одном аспекте трансмембранный домен может быть рекомбинантным, и в этом случае он будет содержать главным образом гидрофобные остатки, такие как лейцин и валин. В одном аспекте на каждом конце рекомбинантного трансмембранного домена может находиться триплет из фенилаланина, триптофана и валина.

Короткий олиго- или полипептидный линкер длиной от 2 до 10 аминокислот необязательно может образовывать связь между трансмембранным доменом и цитоплазматической областью CAR. Глицин-сериновый дублет является особенно подходящим линкером. Например, в одном аспекте линкер содержит аминокислотную последовательность GGGGSGGGGS (SEQ ID NO: 258). В некоторых вариантах осуществления линкер кодируется нуклеотидной последовательностью GGTGGCGGAGGTTCTGGAGGTGGAGGTTCC (SEQ ID NO: 259).

В одном аспекте шарнирная область или спейсер предусматривают шарнирную область KIR2DS2.

Сигнальные домены

В вариантах осуществления настоящего изобретения представлен внутриклеточный сигнальный домен, такой как домен, который может содержать, например, один или несколько из первичного сигнального домена и/или костимулирующего сигнального домена. В некоторых вариантах осуществления внутриклеточный сигнальный домен содержит последовательность, кодирующую первичный сигнальный домен. В некоторых вариантах осуществления внутриклеточный сигнальный домен содержит костимулирующий сигнальный домен. В некоторых вариантах осуществления внутриклеточный сигнальный домен содержит первичный сигнальный домен и костимулирующий сигнальный домен.

Внутриклеточные сигнальные последовательности в цитоплазматической части CAR по настоящему изобретению могут быть связаны друг с другом в случайном или установленном порядке. Короткий олиго- или полипептидный линкер, например, длиной от 2 до 10 аминокислот (например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10 аминокислот) необязательно может образовывать связь между внутриклеточными сигнальными последовательностями. В одном варианте осуществления в качестве подходящего линкера может применяться глицин-сериновый дублет. В одном варианте осуществления в качестве подходящего линкера может применяться одна аминокислота, например, аланин, глицин.

В одном аспекте внутриклеточный сигнальный домен разработан таким образом, что он содержит два или более, например, 2, 3, 4, 5 или больше, костимулирующих сигнальных доменов. В одном варианте осуществления два или более, например, 2, 3, 4, 5, или больше, костимулирующих сигнальных доменов разделены линкерной молекулой, например, линкерной молекулой, описанной в данном документе. В одном варианте осуществления внутриклеточный сигнальный домен содержит два костимулирующих сигнальных домена. В некоторых вариантах осуществления линкерная молекула представляет собой глициновый остаток. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой аланиновый остаток.

Первичные сигнальные домены

Первичный сигнальный домен регулирует первичную активацию комплекса TCR либо стимулирующим образом, либо ингибирующим образом. Первичные внутриклеточные сигнальные домены, которые действуют стимулирующим образом, могут содержать сигнальные мотивы, известные как иммунорецепторные тирозиновые активирующие мотивы или ITAM.

Примеры первичных внутриклеточных сигнальных доменов, содержащих ITAM, которые являются особенно применимыми в настоящем изобретении, включают домены CD3-дзета, общей гамма-цепи FcR (FCER1G), Fc-гамма RIIa, FcR-бета (Fc-эпсилон R1b), CD3-гамма, CD3-дельта, CD3-эпсилон, CD79a, CD79b, DAP10 и DAP12. В одном варианте осуществления CAR по настоящему изобретению содержит внутриклеточный сигнальный домен, например, первичный сигнальный домен CD3-дзета.

В одном варианте осуществления кодируемый первичный сигнальный домен содержит функциональный сигнальный домен CD3-дзета. Кодируемый первичный сигнальный домен CD3 дзета может содержать аминокислотную последовательность, содержащую по меньшей мере одну, две или три модификации, но не более 20, 10 или 5 модификаций аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 260 или SEQ ID NO: 261 или последовательности, на по меньшей мере 95% идентичной аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 260 или SEQ ID NO: 261. В некоторых вариантах осуществления кодируемый первичный сигнальный домен содержит последовательность под SEQ ID NO: 260 или SEQ ID NO: 261. В других вариантах осуществления последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая первичный сигнальный домен, предусматривает последовательность под SEQ ID NO: 262, SEQ ID NO: 291 или SEQ ID NO: 263 или последовательность, на по меньшей мере 95% идентичную ей.

Костимулирующие сигнальные домены

В некоторых вариантах осуществления кодируемый внутриклеточный сигнальный домен содержит костимулирующий сигнальный домен. Например, внутриклеточный сигнальный домен может содержать первичный сигнальный домен и костимулирующий сигнальный домен. В некоторых вариантах осуществления кодируемый костимулирующий сигнальный домен содержит функциональный сигнальный домен белка, выбранного из одного или нескольких из CD27, CD28, 4-1BB (CD137), OX40, CD30, CD40, PD-1, ICOS, лимфоцитарного функционально-ассоциированного антигена 1 (LFA-1), CD2, CD7, LIGHT, NKG2C, B7-H3, лиганда, который специфично связывается с CD83, CDS, ICAM-1, GITR, BAFFR, HVEM (LIGHTR), SLAMF7, NKp80 (KLRF1), CD160, CD19, CD4, CD8-альфа, CD8-бета, IL2R-бета, IL2R-гамма, IL7R-альфа, ITGA4, VLA1, CD49a, ITGA4, IA4, CD49D, ITGA6, VLA-6, CD49f, ITGAD, CD11d, ITGAE, CD103, ITGAL, CD11a, LFA-1, ITGAM, CD11b, ITGAX, CD11c, ITGB1, CD29, ITGB2, CD18, LFA-1, ITGB7, TNFR2, TRANCE/RANKL, DNAM1 (CD226), SLAMF4 (CD244, 2B4), CD84, CD96 (Tactile), CEACAM1, CRTAM, Ly9 (CD229), CD160 (BY55), PSGL1, CD100 (SEMA4D), CD69, SLAMF6 (NTB-A, Ly108), SLAM (SLAMF1, CD150, IPO-3), BLAME (SLAMF8), SELPLG (CD162), LTBR, LAT, GADS, SLP-76, PAG/Cbp, NKp44, NKp30, NKp46 или NKG2D.

В определенных вариантах осуществления кодируемый костимулирующий сигнальный домен содержит аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере одну, две или три модификации, но не более 20, 10 или 5 модификаций аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 264 или SEQ ID NO: 265 или последовательности, на по меньшей мере 95% идентичной аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 264 или SEQ ID NO: 265. В одном варианте осуществления кодируемый костимулирующий сигнальный домен содержит последовательность под SEQ ID NO: 264 или SEQ ID NO: 265. В других вариантах осуществления последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая костимулирующий сигнальный домен, содержит последовательность под SEQ ID NO: 266, SEQ ID NO: 290 или SEQ ID NO: 267 или последовательность, на по меньшей мере 95% идентичную ей.

В других вариантах осуществления кодируемый внутриклеточный домен содержит последовательность под SEQ ID NO: 264 или SEQ ID NO: 265 и последовательность под SEQ ID NO: 260 или SEQ ID NO: 261, где последовательности, образующие внутриклеточный сигнальный домен, экспрессируются в одной и той же рамке считывания и в виде одной полипептидной цепи.

В определенных вариантах осуществления последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая внутриклеточный сигнальный домен, содержит последовательность под SEQ ID NO: 266, SEQ ID NO: 290 или SEQ ID NO: 267 или последовательность, на по меньшей мере 95% идентичную ей, и последовательность под SEQ ID NO: 262, SEQ ID NO: 291 или SEQ ID NO: 263 или последовательность, на по меньшей мере 95% идентичную ей.

В некоторых вариантах осуществления молекула нуклеиновой кислоты дополнительно кодирует лидерную последовательность. В одном варианте осуществления лидерная последовательность предусматривает последовательность под SEQ ID NO: 268.

В одном аспекте внутриклеточный сигнальный домен разработан таким образом, что он содержит сигнальный домен CD3-дзета и сигнальный домен CD28. В одном аспекте внутриклеточный сигнальный домен разработан таким образом, что он содержит сигнальный домен CD3-дзета и сигнальный домен 4-1BB. В одном аспекте сигнальный домен 4-1BB представляет собой сигнальный домен под SEQ ID NO: 264. В одном аспекте сигнальный домен CD3-дзета представляет собой сигнальный домен под SEQ ID NO: 260.

В одном аспекте внутриклеточный сигнальный домен разработан таким образом, что он содержит сигнальный домен CD3-дзета и сигнальный домен CD27. В одном аспекте сигнальный домен CD27 содержит аминокислотную последовательность QRRKYRSNKGESPVEPAEPCRYSCPREEEGSTIPIQEDYRKPEPACSP (SEQ ID NO: 265). В одном аспекте сигнальный домен CD27 кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты Caacgaaggaaatatagatcaaacaaaggagaaagtcctgtggagcctgcagagccttgtcgttacagctgccccagggaggaggagggcagcaccatccccatccaggaggattaccgaaaaccggagcctgcctgctccccc (SEQ ID NO: 267).

Векторы

В другом аспекте настоящее изобретение относится к вектору, содержащему последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую CAR, описанный в данном документе. В одном варианте осуществления вектор выбран из ДНК-вектора, РНК-вектора, плазмиды, лентивирусного вектора, аденовирусного вектора или ретровирусного вектора. В одном варианте осуществления вектор представляет собой лентивирусный вектор. Такие векторы или их части могут, помимо прочего, применяться для создания нуклеиновых кислот, представляющих собой матрицы, описанные в данном документе, для применения с системами CRISPR, описанными в данном документе. Альтернативно векторы могут применяться для доставки нуклеиновой кислоты непосредственно в клетку, например, иммунную эффектoрную клетку, например, T-клетку, например, алогенную T-клетку, независимо от системы CRISPR.

В настоящем изобретении также предусмотрены векторы, в которые вставлена ДНК по настоящему изобретению. Векторы, полученные из ретровирусов, таких как лентивирус, являются подходящими инструментами для достижения долгосрочного переноса генов, поскольку они обеспечивают долгосрочную стабильную интеграцию трансгена и его размножение в дочерних клетках. Лентивирусные векторы обладают дополнительным преимуществом по сравнению с векторами, полученными из онкоретровирусов, таких как вирусы лейкоза мышей, заключающимся в том, что ими можно трансдуцировать непролиферирующие клетки, такие как гепатоциты. Они также обладают дополнительным преимуществом низкой иммуногенности. Ретровирусный вектор также может представлять собой, например, гамма-ретровирусный вектор. Гамма-ретровирусный вектор может содержать, например, промотор, сигнал упаковки (ψ), сайт связывания праймера (PBS), один или несколько (например, два) длинных концевых повторов (LTR) и трансген, представляющий интерес, например, ген, кодирующий CAR. В гамма-ретровирусном векторе могут отсутствовать структурные гены вирусов, такие как gag, pol и env. Иллюстративные гамма-ретровирусные векторы включают вирус лейкоза мышей (MLV), вирус некроза селезенки (SFFV) и вирус миелопролиферативной саркомы (MPSV), а также векторы, полученные из них. Другие гамма-ретровирусные векторы описаны, например, в Tobias Maetzig et al., "Gammaretroviral Vectors: Biology, Technology and Application" Viruses. 2011 Jun; 3(6): 677-713.

В другом варианте осуществления вектор, содержащий нуклеиновую кислоту, кодирующую необходимый CAR по настоящему изобретению, представляет собой аденовирусный вектор (A5/35). В другом варианте осуществления экспрессии нуклеиновых кислот, кодирующих CAR, можно достичь с помощью транспозонов, таких как "Спящая красавица", CRISPR, CAS9 и нуклеазы с "цинковыми пальцами". См. ниже June et al. 2009 Nature Reviews Immunology 9.10: 704-716, включенную в данный документ посредством ссылки.

Нуклеиновую кислоту можно клонировать в векторы множества типов. Например, нуклеиновую кислоту можно клонировать в вектор, включающий без ограничения плазмиду, фагмиду, производное фага, вирус животных и космиду. Векторы, представляющие особый интерес, включают экспрессионные векторы, репликационные векторы, векторы для образования зондов и векторы для секвенирования.

В данном документе раскрыты способы получения РНК, транскрибированной in vitro, кодирующей CAR. Настоящее изобретение также охватывает РНК-конструкцию, кодирующую CAR, которую можно вводить путем прямой трансфекции в клетку. Способ получения mRNA для применения в трансфекции может предусматривать транскрипцию in vitro (IVT) матрицы с использованием специально разработанных праймеров с последующим добавлением поли(А) с получением конструкции, содержащей 3'- и 5'-нетранслируемые последовательности ("UTR"), 5'-кэп и/или участок внутренней посадки рибосомы (IRES), нуклеиновую кислоту, которая должна экспрессироваться, и поли(A)-хвост, обычно длиной 50-2000 оснований (SEQ ID NO: 269). С помощью РНК, полученной таким образом, можно эффективно трансфицировать различные типы клеток. В одном аспекте матрица содержит последовательности для CAR.

Невирусные способы доставки

В некоторых аспектах можно применять невирусные способы для доставки нуклеиновой кислоты, кодирующей CAR, описанный в данном документе, в клетку, или ткань, или организм субъекта.

В некоторых вариантах осуществления невирусный способ включает применение транспозона (также называемого мобильным генетическим элементом). В некоторых вариантах осуществления транспозон представляет собой фрагмент ДНК, который может самостоятельно вставляться в определенное местоположение в геноме, например, фрагмент ДНК, который способен к саморепликации и вставке своей копии в геном, или фрагмент ДНК, который с помощью сплайсинга может быть вырезан из более длинной нуклеиновой кислоты и вставлен в другое место в геноме. Например, транспозон содержит последовательность ДНК, состоящую из инвертированных повторов, фланкирующих гены для транспозиции.

В некоторых вариантах осуществления клетки, например, T- или NK-клетки, которые экспрессируют CAR, описанный в данном документе, получают с помощью комбинации вставки гена с помощью SBTS и генетического редактирования с помощью нуклеазы (например, нуклеаз с "цинковыми пальцами" (ZFN), эффекторных нуклеаз, подобных активаторам транскрипции (TALEN), системы CRISPR/Cas или сконструированных мегануклеаз, представляющих собой реконструированные хоминг-эндонуклеазы).

В некоторых вариантах осуществления клетки по настоящему изобретению, например, T- или NK-клетки, например, алогенные T-клетки, например, описанные в данном документе (например, которые экспрессируют CAR, описанный в данном документе), получают посредством приведения клеток в контакт с (a) композицией, содержащей одну или несколько молекул gRNA, например, описанных в данном документе, и одну или несколько молекул Cas, например, молекулу Cas9, например, описанную в данном документе, и (b) нуклеиновой кислотой, содержащей последовательность, кодирующую CAR, например, описанный в данном документе (такой как молекула нуклеиновой кислоты, представляющая собой матрицу, описанная в данном документе). Не ограничиваясь какой-либо теорией, указанная композиция (a) выше будет индуцировать разрыв в или возле геномной ДНК, на которую нацеливается нацеливающий домен молекулы(молекул) gRNA, и нуклеиновая кислота (b) будет включаться, например, частично или полностью, в геном в месте указанного разрыва или возле него, так, чтобы при интеграции, экспрессировалась молекула кодируемого CAR. В вариантах осуществления экспрессия CAR будет контролироваться промоторами или другими регуляторными элементами, эндогенными в отношении генома (например, контролируемая промотором экспрессия из гена, в который была вставлена нуклеиновая кислота (b)). В других вариантах осуществления нуклеиновая кислота (b) дополнительно содержит промотор и/или другие регуляторные элементы, например, описанные в данном документе, например, промотор EF1-альфа, функционально связанный с последовательностью, кодирующей CAR, так, чтобы при интеграции, экспрессия CAR контролировалась этим промотором и/или другими регуляторными элементами. Дополнительные признаки настоящего изобретения относятся к применению систем CRISPR/Cas9, например, описанных в данном документе, к прямому включению последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей CAR, например, описанный в данном документе, описаны в другом месте в данной заявке, например, в разделе, относящемся к вставке гена и гомологичной рекомбинации. В вариантах осуществления композиция a) выше представляет собой композицию, содержащую RNP, содержащие одну или несколько молекул gRNA. В вариантах осуществления RNP, содержащие gRNA, нацеливающиеся на уникальные последовательности-мишени, вводят в клетку одновременно, например, в виде смеси RNP, содержащих одну или несколько gRNA. В вариантах осуществления RNP, содержащие gRNA, нацеливающиеся на уникальные последовательности-мишени, вводят в клетку последовательно.

В некоторых вариантах осуществления применение невирусного способа доставки делает возможным перепрограммирование клеток, например, Т- или NK-клеток, и прямую инфузию клеток в организм субъекта. Преимущества невирусных векторов включают без ограничения простоту и относительно низкую стоимость получения достаточных количеств, необходимых для удовлетворения требованиям популяции пациентов, стабильности при хранении и отсутствия иммуногенности.

Промоторы

В одном варианте осуществления вектор дополнительно содержит промотор. В некоторых вариантах осуществления промотор выбран из промотора EF-1, промотора гена IE CMV, промотора EF-1α, промотора убиквитина C или промотора фосфоглицераткиназы (PGK). В одном варианте осуществления промотор представляет собой промотор EF-1. В одном варианте осуществления промотор EF-1 содержит последовательность под SEQ ID NO: 270.

Клетки-хозяева для экспрессии CAR

Как указано выше, в некоторых аспектах настоящее изобретение относится к клетке, например, иммунной эффектoрной клетке (например, популяции клеток, например, популяции иммунных эффектoрных клеток), содержащей молекулу нуклеиновой кислоты, молекулу полипептида CAR или вектор, описанные в данном документе.

В определенных аспектах настоящего изобретения иммунные эффекторные клетки, например, Т-клетки, можно получить из единицы крови, собранной у субъекта, с применением любого количества методик, известных специалисту в данной области техники, таких как разделение с помощью Ficoll™. В одном предпочтительном аспекте клетки из циркулирующей крови индивидуума получают путем афереза. Продукт афереза обычно содержит лимфоциты, в том числе Т-клетки, моноциты, гранулоциты, В-клетки, другие ядросодержащие лейкоциты, эритроциты и тромбоциты. В одном аспекте клетки, собранные путем афереза, можно промыть, чтобы удалить фракцию плазмы крови и необязательно поместить клетки в соответствующий буфер или среду для последующих стадий обработки. В одном варианте осуществления клетки промывают фосфатно-солевым буферным раствором (PBS). В альтернативном варианте осуществления в промывочном растворе отсутствует кальций и может отсутствовать магний или могут отсутствовать многие, если не все, двухвалентные катионы.

Начальные стадии активации в отсутствие кальция могут приводить к усиленной активации. Как будет очевидно для специалистов средней квалификации в данной области, стадию промывания можно осуществлять с помощью способов, известных специалистам в данной области техники, как, например, с применением полуавтоматической "проточной" центрифуги (например, устройства для обработки клеток Cobe 2991, CytoMate от Baxter или Cell Saver 5 от Haemonetics) в соответствии с инструкциями производителя. После промывки клетки можно ресуспендировать в различных биосовместимых буферах, таких как, например, PBS, не содержащий Ca и не содержащий Mg, PlasmaLyte A или другой солевой раствор с буфером или без него. Альтернативно нежелательные компоненты из образца, полученного путем афереза, можно удалить, и клетки можно непосредственно ресуспендировать в культуральной среде.

Признано, что в способах применения можно использовать условия для культуральных сред, включающих человеческую сыворотку крови AB с концентрацией 5% или меньше, например, 2%, и использовать известные условия и составы культуральных сред, например, описанные в Smith et al., "Ex vivo expansion of human T cells for adoptive immunotherapy using the novel Xeno-free CTS Immune Cell Serum Replacement", Clinical & Translational Immunology (2015) 4, e31; doi:10.1038/cti.2014.31.

В одном аспекте Т-клетки выделяют из лимфоцитов периферической крови путем лизиса эритроцитов и истощения популяции моноцитов, например, посредством центрифугирования в градиенте PERCOLL™ или посредством противоточного элютриационного центрифугирования.

Способы, описанные в данном документе, могут включать, например, отбор конкретной субпопуляции иммунных эффекторных клеток, например, Т-клеток, которая представляет собой популяцию клеток, истощенную по регуляторным Т-клеткам с истощением по CD25+ клеткам, с помощью, например, методики отрицательного отбора, например, описанной в данном документе. Популяция, истощенная по регуляторным Т-клеткам, предпочтительно содержит менее 30%, 25%, 20%, 15%, 10%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1% CD25+ клеток.

В одном варианте осуществления регуляторные T-клетки, например, CD25+ T-клетки, удаляют из популяции с помощью антитела к CD25 или его фрагмента или CD25-связывающего лиганда IL-2. В одном варианте осуществления антитело к CD25 или его фрагмент или CD25-связывающий лиганд конъюгированы с субстратом, например, микрогранулой, или иным образом нанесены на субстрат, например, микрогранулу. В одном варианте осуществления антитело к CD25 или его фрагмент конъюгированы с субстратом, описанным в данном документе.

В одном варианте осуществления регуляторные T-клетки, например, CD25+ T-клетки, удаляют из популяции с помощью реагента для истощения по CD25 от Miltenyi™. В одном варианте осуществления соотношение клеток и реагента для истощения по CD25 составляет 1e7 клеток на 20 мкл, или 1e7 клеток на 15 мкл, или 1e7 клеток на 10 мкл, или 1e7 клеток на 5 мкл, или 1e7 клеток на 2,5 мкл, или 1e7 клеток на 1,25 мкл. В одном варианте осуществления, например, для истощения регуляторных Т-клеток, например, CD25+, используют более 500 миллионов клеток/мл. В дополнительном аспекте используют концентрацию клеток, составляющую 600, 700, 800 или 900 миллионов клеток/мл.

В одном варианте осуществления популяция иммунных эффекторных клеток, подлежащая истощению, содержит приблизительно 6×10⁹ CD25+ T-клеток. В других аспектах популяция иммунных эффекторных клеток, подлежащая истощению, содержит от приблизительно 1×10⁹до 1×10¹⁰ CD25+ Т-клеток с включением любого целочисленного значения в данном промежутке. В одном варианте осуществления полученная популяция, истощенная по регуляторным T-клеткам, содержит 2×10⁹ регуляторных T-клеток, например, CD25+ клеток, или меньше (например, 1×10⁹, 5×10⁸, 1×10⁸, 5×10⁷, 1×10⁷ или меньше CD25+ клеток).

В одном варианте осуществления регуляторные Т-клетки, например, CD25+ клетки, удаляют из популяции с помощью системы CliniMACS с набором трубок для истощения, таким как, например, трубки 162-01. В одном варианте осуществления система CliniMACS работает с установленными параметрами истощения, например, такими как DEPLETION2.1.

Не желая ограничиваться какой-либо конкретной теорией, полагают, что посредством снижения уровня отрицательных регуляторов иммунных клеток (например, уменьшения количества нежелательных иммунных клеток, например, T_REG-клеток) у субъекта до афереза или в ходе изготовления продукта на основе клетки, экспрессирующей CAR, можно снизить риск рецидива у субъекта. Например, способы истощения популяции T_REG-клеток известны из уровня техники. Способы уменьшения количества T_REG-клеток включают без ограничения применение циклофосфамида, антитела к GITR (антитела к GITR, описанного в данном документе), реагента для истощения по CD25 и их комбинаций.

В некоторых вариантах осуществления способы изготовления включают снижение количества (например, истощение популяции) T_REG-клеток до изготовления клетки, экспрессирующей CAR. Например, способы изготовления предусматривают приведение образца, например, образца, полученного путем афереза, в контакт с антителом к GITR и/или антителом к CD25 (или его фрагментом или CD25-связывающим лигандом), например, для истощения T_REG-клеток до изготовленияпродукта на основе клетки (например, T-клетки, NK-клетки), экспрессирующей CAR.

В одном варианте осуществления субъект получает предварительное лечение с помощью одного или нескольких средств терапии, которые обеспечивают снижение количества T_REG-клеток, перед сбором клеток для изготовления продукта на основе клетки, экспрессирующей CAR, за счет чего обеспечивается снижение риска рецидива у субъекта при лечении с помощью клеток, экспрессирующих CAR. В одном варианте осуществления способы уменьшения количества T_REG-клеток включают без ограничения введение субъекту одного или нескольких из циклофосфамида, антитела к GITR, реагента для истощения по CD25 или их комбинации. Введение одного или нескольких из циклофосфамида, антитела к GITR, реагента для истощения по CD25 или их комбинации может происходить до, во время или после инфузии продукта на основе клетки, экспрессирующей CAR.

В одном варианте осуществления субъект получает предварительное лечение с помощью циклофосфамида перед сбором клеток для изготовления продукта на основе клетки, экспрессирующей CAR, за счет чего обеспечивается снижение риска рецидива у субъекта при лечении с помощью клеток, экспрессирующих CAR. В одном варианте осуществления субъект получает предварительное лечение с помощью антитела к GITR перед сбором клеток для изготовления продукта на основе клетки, экспрессирующей CAR, за счет чего обеспечивается снижение риска рецидива у субъекта при лечении с помощью клеток, экспрессирующих CAR.

В одном варианте осуществления популяция клеток, подлежащая удалению, не представляет собой ни регуляторные Т-клетки, ни опухолевые клетки, а представляет собой клетки, которые в иных отношениях отрицательно влияют на размножение и/или функцию CAR-T-клеток, например, клетки, экспрессирующие CD14, CD11b, CD33, CD15 или другие маркеры, экспрессируемые потенциально иммуносупрессорными клетками. В одном варианте осуществления предполагается, что такие клетки удаляют параллельно с регуляторными Т-клетками и/или опухолевыми клетками, или после указанного истощения, или в другом порядке.

Способы, описанные в данном документе, могут включать более одной стадии отбора, например, более одной стадии истощения. Обогащение популяции Т-клеток путем отрицательного отбора можно осуществлять, например, с помощью комбинации антител, направленных на поверхностные маркеры, уникальные для клеток, подвергаемых отрицательному отбору. Один из способов представляет собой сортировку и/или отбор клеток с помощью отрицательной магнитной иммуноадгезии или проточной цитометрии, в которых используется коктейль моноклональных антител, направленных на маркеры клеточной поверхности, присутствующие на клетках, подвергаемых отрицательному отбору. Например, для обогащения CD4+ клетками путем отрицательного отбора смесь моноклональных антител может содержать антитела к CD14, CD20, CD11b, CD16, HLA-DR и CD8.

Способы, описанные в данном документе, могут дополнительно включать удаление из популяции клеток, экспрессирующих опухолевый антиген, например, опухолевый антиген, который не включает CD25, например, CD19, CD30, CD38, CD123, CD20, CD14 или CD11b, за счет чего обеспечивается получение популяции клеток, истощенной по регуляторным Т-клеткам, например, истощенной по CD25+ клеткам и истощенной по клеткам с опухолевым антигеном, которые подходят для экспрессии CAR, например, CAR, описанного в данном документе. В одном варианте осуществления клетки, экспрессирующие опухолевый антиген, удаляют одновременно с регуляторными Т-клетками, например, CD25+ клетками. Например, антитело к CD25 или его фрагмент и антитело к опухолевому антигену или его фрагмент могут быть присоединены к одному и тому же субстрату, например, микрогрануле, который можно использовать для удаления клеток, или антитело к CD25 или его фрагмент или антитело к опухолевому антигену или его фрагмент могут быть присоединены к отдельным микрогранулам, смесь которых можно использовать для удаления клеток. В других вариантах осуществления удаление регуляторных Т-клеток, например, CD25+ клеток, и удаление клеток, экспрессирующих опухолевый антиген, является последовательным и может происходить, например, в любом порядке.

Также представлены способы, которые включают удаление из популяции клеток, экспрессирующих ингибитор контрольных точек иммунного ответа, например, ингибитор контрольных точек иммунного ответа, описанный в данном документе, например, одного или нескольких из PD1+ клеток, LAG3+ клеток и TIM3+ клеток, за счет чего получают популяцию, истощенную по регуляторным Т-клеткам, например, истощенную по CD25+ клеткам и истощенную по клеткам с ингибитором контрольных точек иммунного ответа, например, истощенную по PD1+, LAG3+ и/или TIM3+ клеткам. Иллюстративные ингибиторы контрольных точек иммунного ответа включают B7-H1, B7-1, CD160, P1H, 2B4, PD1, TIM3, CEACAM (например, CEACAM-1, CEACAM-3 и/или CEACAM-5), LAG3, TIGIT, CTLA-4, BTLA и LAIR1. В одном варианте осуществления клетки, экспрессирующие ингибитор контрольных точек иммунного ответа, удаляют одновременно с регуляторными Т-клетками, например, CD25+ клетками. Например, антитело к CD25 или его фрагмент и антитело к ингибитору контрольных точек иммунного ответа или его фрагмент могут быть присоединены к одной и той же микрогрануле, которую можно использовать для удаления клеток, или антитело к CD25 или его фрагмент и антитело к ингибитору контрольных точек иммунного ответа или его фрагмент могут быть присоединены к отдельным микрогранулам, смесь которых можно использовать для удаления клеток. В других вариантах осуществления удаление регуляторных Т-клеток, например, CD25+ клеток, и удаление клеток, экспрессирующих ингибитор контрольных точек иммунного ответа, является последовательным и может происходить, например, в любом порядке.

Способы, описанные в данном документе, могут включать стадию положительного отбора. Например, Т-клетки можно выделять путем инкубирования с микрогранулами, конъюгированными с антителом к CD3/антителом к CD28 (например, 3×28), такими как DYNABEADS® M-450 CD3/CD28 T, в течение периода времени, достаточного для положительного отбора требуемых Т-клеток. В одном варианте осуществления период времени составляет приблизительно 30 минут. В дополнительном варианте осуществления период времени находится в диапазоне от 30 минут до 36 часов или большее и включает все целочисленные значения в данном промежутке. В дополнительном варианте осуществления период времени составляет по меньшей мере 1, 2, 3, 4, 5 или 6 часов. В еще одном варианте осуществления период времени составляет от 10 до 24 часов, например, 24 часа. Более длительное время инкубирования можно использовать для выделения Т-клеток в любой ситуации, при которой Т-клеток немного по сравнению с другими типами клеток, как, например, при выделении лимфоцитов, инфильтрирующих опухоль (TIL), из опухолевой ткани или у индивидуумов с ослабленным иммунитетом. Кроме того, при использовании более длительного времени инкубирования может увеличиваться эффективность улавливания CD8+ Т-клеток. Таким образом, просто сокращая или удлиняя время, в течение которого Т-клетки имеют возможность связываться с микрогранулами с антителами к CD3/CD28, и/или увеличивая или уменьшая соотношение микрогранул и Т-клеток (как описано дополнительно в данном документе), можно предпочтительно производить положительный или отрицательный отбор субпопуляций Т-клеток в начале культивирования или в другие моменты времени в ходе процесса. Кроме того, путем увеличения или уменьшения относительного количества антител к CD3 и/или антител к CD28 на микрогранулах или другой поверхности можно предпочтительно осуществлять положительный или отрицательный отбор субпопуляций Т-клеток в начале культивирования или в другие требуемые моменты времени.

В одном варианте осуществления можно выбрать популяцию Т-клеток, которые экспрессируют один или несколько из IFN-γ, TNFα, IL-17A, IL-2, IL-3, IL-4, GM-CSF, IL-10, IL-13, гранзима В и перфорина или других соответствующих молекул, например, других цитокинов. Способы скрининга в отношении клеточной экспрессии можно определить, например, с помощью способов, описанных в публикации согласно PCT № WO 2013/126712

Для выделения необходимой популяции клеток путем положительного или отрицательного отбора можно изменять концентрацию клеток и поверхность (например, частицы, такие как микрогранулы). В определенных аспектах может быть желательно значительно уменьшить объем, в котором микрогранулы и клетки смешиваются друг с другом (например, увеличить концентрацию клеток), чтобы обеспечить максимальный контакт клеток и микрогранул. Например, в одном аспекте используют концентрацию, составляющую 10 миллиардов клеток/мл, 9 миллиардов/мл, 8 миллиардов/мл, 7 миллиардов/мл, 6 миллиардов/мл или 5 миллиардов/мл. В одном аспекте используют концентрацию, составляющую 1 миллиард клеток/мл. В еще одном аспекте используют концентрацию клеток, составляющую 75, 80, 85, 90, 95 или 100 миллионов клеток/мл. В дополнительных аспектах можно использовать концентрации, составляющие 125 или 150 миллионов клеток/мл.

Использование высоких концентраций может приводить к увеличению выхода клеток, активации клеток и интенсивности размножения клеток. Кроме того, использование высоких концентраций клеток позволяет более эффективно захватывать клетки, которые могут характеризоваться слабой экспрессией антигенов-мишеней, представляющих интерес, такие как CD28-отрицательные Т-клетки, или клетки из образцов, в которых присутствует много опухолевых клеток (например, лейкозной крови, опухолевой ткани и т. д.). Такие популяции клеток могут иметь терапевтическую ценность, и может потребоваться их получение. Например, использование высокой концентрации клеток позволяет проводить более эффективный отбор CD8+ Т-клеток, которые обычно характеризуются более слабой экспрессией CD28.

В связанном аспекте может потребоваться использование более низких концентраций клеток. Благодаря значительному разбавлению смеси Т-клеток и поверхности (например, частиц, таких как микрогранулы) взаимодействие между частицами и клетками сводится к минимуму. При этом отбираются клетки, в высоких количествах экспрессирующие требуемые антигены, которые должны будут связываться с частицами. Например, CD4+ T-клетки экспрессируют CD28 на более высоких уровнях и захватываются в слабых концентрациях более эффективно, чем CD8+ T-клетки. В одном аспекте используемая концентрация клеток составляет 5×10⁶/мл. В других аспектах используемая концентрация может составлять от приблизительно 1×10⁵/мл до 1×10⁶/мл с включением любого целочисленного значения в данном промежутке.

В других аспектах клетки можно инкубировать на ротаторе в течение различных промежутков времени с различными скоростями при 2-10°C либо при комнатной температуре.

Т-клетки для стимуляции также можно замораживать после стадии промывания. Не ограничиваясь какой-либо теорией, полагают, что стадия замораживания и последующего размораживания обеспечивает получение более однородного продукта за счет удаления гранулоцитов и в некоторой степени моноцитов из популяции клеток. После стадии промывания, на которой удаляют плазму крови и тромбоциты, клетки можно суспендировать в замораживающем растворе. Хотя многие замораживающие растворы и параметры для замораживания известны из уровня техники и будут применимыми в данном случае, один способ предусматривает использование PBS, содержащего 20% DMSO и 8% человеческий сывороточный альбумин, или культуральных сред, содержащих 10% декстран 40 в 5% декстрозе, 20% человеческий сывороточный альбумин и 7,5% DMSO или 31,25% PlasmaLyte-А, 31,25% раствор с 5% декстрозой в 0,45% NaCl, 10% декстран 40 в 5% декстрозе, 20% человеческий сывороточный альбумин и 7,5% DMSO, или других подходящих сред для замораживания клеток, содержащих, например, Hespan и PlasmaLyte A, и затем клетки замораживают до -80°C со скоростью 1° в минуту и хранят в паровой фазе в резервуаре для хранения жидкого азота. Можно применять другие способы контролируемого замораживания, а также неконтролируемого замораживания немедленно при -20°C или в жидком азоте.

В определенных аспектах криоконсервированные клетки размораживают и промывают, как описано в данном документе, и оставляют на один час при комнатной температуре перед активацией с помощью способов по настоящему изобретению.

В контексте настоящего изобретения также предусмотрен сбор образцов крови или продукта афереза у субъекта в период времени до того, как могут понадобиться размноженные клетки, описанные в данном документе. Ввиду этого источник клеток, подлежащих размножению, можно собирать в любой необходимый момент времени, и необходимые клетки, такие как Т-клетки, можно выделять и замораживать для последующего применения в терапии с использованием иммунных эффекторных клеток для любых заболеваний или состояний, при которых будет благоприятной терапия с использованием иммунных эффекторных клеток, таких как описанные в данном документе. В одном аспекте образец крови или образец, полученный путем афереза, берут у в целом здорового субъекта. В определенных аспектах образец крови или образец, полученный путем афереза, берут у в целом здорового субъекта, который имеет риск развития заболевания, но у которого заболевание еще не развилось, и клетки, представляющие интерес, выделяют и замораживают для последующего применения. В определенных аспектах Т-клетки можно размножать, замораживать и использовать позднее. В определенных аспектах образцы собирают у пациента вскоре после диагностирования конкретного заболевания, описанного в данном документе, однако до проведения каких-либо видов лечения. В дополнительном аспекте клетки выделяют из образца крови или образца, полученного путем афереза, у субъекта до осуществления какого-либо количества соответствующих способов лечения, в том числе без ограничения лечения такими средствами, как натализумаб, эфализумаб, противовирусные средства, химиотерапия, лучевая терапия, иммуносупрессивные средства, такие как циклоспорин, азатиоприн, метотрексат, микофенолят и FK506, антитела или другие иммунодеструктивные средства, такие как CAMPATH, антитела к CD3, цитоксан, флударабин, циклоспорин, FK506, рапамицин, микофеноловая кислота, стероиды, FR901228 и облучение.

В дополнительном аспекте настоящего изобретения Т-клетки получают от пациента непосредственно после лечения, при котором у субъекта остаются функциональные Т-клетки. В этом отношении наблюдалось, что после определенных видов лечения рака, в частности, видов лечения лекарственными средствами, которые повреждают иммунную систему, вскоре после лечения в течение периода, когда пациенты обычно восстанавливаются после лечения, качество полученных Т-клеток может быть оптимальным или улучшенным в отношении их способности размножаться ex vivo. Аналогично, после манипуляций ex vivo с применением способов, описанных в данном документе, эти клетки могут находиться в состоянии, предпочтительном для улучшенного приживления и размножения in vivo. Таким образом, в контексте настоящего изобретения предусматривается сбор клеток крови, в том числе Т-клеток, дендритных клеток или других клеток гемопоэтической линии дифференцировки, во время этой фазы восстановления. Дополнительно, в определенных аспектах можно использовать режимы мобилизации (например, мобилизации с помощью GM-CSF) и кондиционирования для создания состояния у субъекта, при котором репопуляция, рециркуляция, регенерация и/или размножение определенных типов клеток являются благоприятными, особенно в течение определенного временного окна после терапии. Иллюстративные типы клеток включают Т-клетки, В-клетки, дендритные клетки и другие клетки иммунной системы.

В одном варианте осуществления иммунные эффекторные клетки, экспрессирующие молекулу CAR, например, молекулу CAR, описанную в данном документе, получают от субъекта, который получал низкую дозу, усиливающую иммунный ответ, ингибитора mTOR. В одном варианте осуществления популяцию иммунных эффекторных клеток, например, Т-клеток, подлежащих конструированию для экспрессии CAR, собирают спустя достаточное количество времени или после достаточного введения низкой дозы, усиливающей иммунный ответ, ингибитора mTOR так, чтобы уровень PD1-отрицательных иммунных эффекторных клеток, например, Т-клеток, или соотношение PD1-отрицательных иммунных эффекторных клеток, например, Т-клеток, и PD1-положительных иммунных эффекторных клеток, например, Т-клеток, у субъекта или в материале, собранном у субъекта, по меньшей мере временно были повышены.

В других вариантах осуществления популяция иммунных эффекторных клеток, например, Т-клеток, которые были сконструированы или будут сконструированы для экспрессии CAR, может быть обработана ex vivo путем приведения ее в контакт с таким количеством ингибитора mTOR, которое обеспечивает увеличение количества PD1-отрицательных иммунных эффекторных клеток, например, Т-клеток, или обеспечивает увеличение соотношения PD1-отрицательных иммунных эффекторных клеток, например, Т-клеток, и PD1-положительных иммунных эффекторных клеток, например, Т-клеток.

В одном варианте осуществления Т-клетки в популяции характеризуются дефицитом диацилглицеринкиназы (DGK). Клетки с дефицитом DGK включают клетки, которые не экспрессируют DGK в виде РНК или белка или характеризуются пониженной или ингибированной активностью DGK. Клетки с дефицитом DGK можно получить с помощью генетических подходов, например, путем введения средств для РНК-интерференции, например, siRNA, shRNA, miRNA, для снижения или предотвращения экспрессии DGK. Альтернативно клетки с дефицитом DGK можно получить путем обработки ингибиторами DGK, описанными в данном документе.

В одном варианте осуществления Т-клетки в популяции характеризуются дефицитом Ikaros. Клетки с дефицитом Ikaros включают клетки, которые не экспрессируют Ikaros в виде РНК или белка или характеризуются пониженной или ингибированной активностью Ikaros; клетки с дефицитом Ikaros можно получить с помощью генетических подходов, например, путем введения средств для РНК-интерференции, например, siRNA, shRNA, miRNA, для снижения или предотвращения экспрессии Ikaros. Альтернативно клетки с дефицитом Ikaros можно получить путем обработки ингибиторами Ikaros, например, леналидомидом.

В вариантах осуществления Т-клетки в популяции характеризуются дефицитом DGK и дефицитом Ikaros, например, не экспрессируют DGK и Ikaros или характеризуются сниженной или ингибированной активностью DGK и Ikaros. Такие клетки с дефицитом DGK и Ikaros можно получить любым из способов, описанных в данном документе.

В одном варианте осуществления NK-клетки получают от субъекта. В другом варианте осуществления NK-клетки представляют собой линию NK-клеток, например, линию клеток NK-92 (Conkwest).

В некоторых аспектах клетки по настоящему изобретению (например, иммунные эффектoрные клетки по настоящему изобретению, например, клетки, экспрессирующие CAR, по настоящему изобретению) представляют собой индуцированные плюрипотентные стволовые клетки ("iPSC") или эмбриональные стволовые клетки (ESC) или представляют собой T-клетки, полученные из (например, дифференцированные из) указанных iPSC и/или ESC. iPSC могут быть получены, например, с помощью способов, известных из уровня техники, из T-лимфоцитов периферической крови, например, T-лимфоцитов периферической крови, выделенных у здорового добровольца. Также такие клетки могут быть дифференцированы в T-клетки с помощью способов, известных из уровня техники. См., например, Themeli M. et al., Nat. Biotechnol., 31, pp. 928-933 (2013); doi:10.1038/nbt.2678; WO2014/165707, содержание каждой из которых включено в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте.

В другом варианте осуществления соединения формулы (I') или формулы (I) или их фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват, пролекарство на их основе, их стереоизомер или таутомер по настоящему изобретению применяют в комбинации с одним или несколькими из терапевтических средств, перечисленных в таблице 13, или перечисленных в патенте и заявках на патент, процитированных в таблице 13, для лечения рака. Каждая публикация, перечисленная в таблице 13, включена в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте, включая все структурные формулы в ней.

Таблица 13. № второго средства Непатентованное наименование
Торговое наименование Структура соединения Патенты/публикации заявок на патент A1 Сотрастаурин EP 1682103
US 2007/142401
WO 2005/039549 A2 Моногидрат нилотиниба-HCl
TASIGNA®
HCl • H₂O WO 2004/005281
US 7169791 A3 WO2011/023773 A4 WO2012/149413 A6 WO 2010/029082 A7 WO2015/107493 A8 WO2015/107495 A9 WO 2011/076786 A10 Деферазирокс
EXJADE® WO 1997/049395 A11 Летрозол
FEMARA® US 4978672 A12 WO 2013/124826 US 2013/0225574 A13 WO 2013/111105 A14 WO2007/121484 A15 Мезилат иматиниба
GLEEVEC®
Мезилат WO 1999/003854 A16 Капматиниб
Дигидрохлоридная соль EP 2099447
US 7767675
US 8420645 A17 Фосфат руксолитиниба JAKAFI® H₃PO₄ WO 2007/070514 EP 2474545 US 7598257 WO 2014/018632 A18 Панобиностат WO 2014/072493
WO 2002/022577
EP 1870399 A20 WO 2008/016893 EP 2051990
US 8552003 A21 WO2015/022662 A22 Церитиниб
ZYKADIA™ WO 2008/073687
US 8039479 A23 Рибоциклиб
KISQALI® US 8415355
US 8685980 A24 WO 2010/007120 A26 WO 2011/101409 A27 Моноклональное антитело человека к HER3 WO 2012/022814 EP 2606070
US 8735551 A28 Конъюгат антитела и лекарственного средства (ADC) WO 2014/160160 A29 Моноклональное антитело или Fab, направленные против M-CSF WO 2004/045532 A30 Мидостаурин WO 2003/037347 EP 1441737
US 2012/252785 A31 Эверолимус AFINITOR® WO 1994/009010
WO 2014/085318 A32 WO 2007/030377 US 7482367 A34 WO 2006/122806 A35 WO 2008/073687 US 8372858 A36 Валсподар
AMDRAY™ EP 296122 A37 Сукцинат ваталаниба
Сукцинат WO 98/35958 A38 WO2014/141104 A39 Асциминиб WO2013/171639 WO2013/171640 WO2013/171641 WO2013/171642 A42
или его холиновая соль WO2010/015613 WO2013030803
US 7989497 A43 WO 2017/025918
WO2011/121418
US 8796284 A44 WO2010/101849 A45 WO2014/130310 A46 Траметиниб WO2005/121142
US 7378423 A47 Дабрафениб WO 2009/137391
US 7994185 A49 Октреотид US 4395403
EP 0029579 A50 WO 2016/103155
US 9580437
EP 3237418 A51 US 9512084
WO/2015/079417 A52 WO 2010/002655
US 8519129 A53 WO 2010/002655 US 8519129 A54 WO 2010/002655

Антагонисты эстрогеновых рецепторов

В некоторых вариантах осуществления антагонист эстрогенового рецептора (ER) применяют в комбинации с соединениями формулы (I') или формулы (I) или их фармацевтически приемлемыми солью, гидратом, сольватом, пролекарством на их основе, их стереоизомером или таутомером для лечения заболевания, например рака. В некоторых вариантах осуществления антагонист эстрогенового рецептора представляет собой селективное средство разрушения эстрогенового рецептора (SERD). SERD представляют собой антагонисты эстрогенового рецептора, которые связываются с рецептором и приводят к, например, разрушению или супрессии функции рецептора (Boer K. et al., (2017) Therapeutic Advances in Medical Oncology 9(7): 465-479). ER представляет собой активируемый гормонами фактор транскрипции, важный, например, для роста, развития и физиологии репродуктивной системы человека. ER активируется, например, гормоном эстрогеном (17-бета-эстрадиолом). Экспрессия и передача сигнала ER задействованы при видах рака (например, рака молочной железы), например, при ER-положительном (ER+) раке молочной железы. В некоторых вариантах осуществления SERD выбран из LSZ102, фулвестранта, бриланестранта или элацестранта.

Иллюстративные антагонисты эстрогеновых рецепторов

В некоторых вариантах осуществления SERD предусматривает соединение, раскрытое в публикации международной заявки № WO 2014/130310, которая включена в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте. В некоторых вариантах осуществления SERD предусматривает LSZ102. LSZ102 имеет химическое название (E)-3-(4-((2-(2-(1,1-дифторэтил)-4-фторфенил)-6-гидроксибензo[b]тиофен-3-ил)окси)фенил)акриловая кислота.

Другие иллюстративные антагонисты эстрогеновых рецепторов

В некоторых вариантах осуществления SERD предусматривает фулвестрант (регистрационный номер по CAS: 129453-61-8) или соединение, раскрытое в публикации международной заявки № WO 2001/051056, которая включена в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте. Фулвестрант также известен как ICI 182780, ZM 182780, FASLODEX® или (7α,17β)-7-{9-[(4,4,5,5,5-пентафторпентил)сульфинил]нонил}эстра-1,3,5(10)-триен-3,17-диол. Фулвестрант представляет собой высокоаффинный антагонист эстрогенового рецептора с IC50, составляющей 0,29 нМ.

В некоторых вариантах осуществления SERD предусматривает элацестрант (регистрационный номер по CAS: 722533-56-4) или соединение, раскрытое в патенте США № 7612114, который включен посредством ссылки во всей своей полноте. Элацестрант также известен как RAD1901, ER-306323 или (6R)-6-{2-[этил({4-[2-(этиламино)этил]фенил}метил)амино]-4-метоксифенил}-5,6,7,8-тетрагидронафталин-2-ол. Элацестрант представляет собой нестероидный комбинированный селективный модулятор эстрогенового рецептора (SERM) и SERD, характеризующийся биодоступностью при пероральном применении. Элацестрант также раскрыт, например, в Garner F et al., (2015) Anticancer Drugs 26(9):948-56.

В некоторых вариантах осуществления SERD представляет собой бриланестрант (регистрационный номер по CAS: 1365888-06-7) или соединение, раскрытое в публикации международной заявки № WO 2015/136017, которая включена посредством ссылки во всей своей полноте. Бриланестрант также известен как GDC-0810, ARN810, RG-6046, RO-7056118 или (2E)-3-{4-[(1E)-2-(2-хлор-4-фторфенил)-1-(1H-индазол-5-ил)бут-1-ен-1-ил]фенил}проп-2-еновая кислота. Бриланестрант представляет собой селективный SERD нового поколения, характеризующийся биодоступностью при пероральном применении, с IC50, составляющей 0,7 нМ. Бриланестрант также раскрыт, например, в Lai A. et al. (2015) Journal of Medicinal Chemistry 58 (12): 4888-4904.

В некоторых вариантах осуществления SERD выбран из RU 58668, GW7604, AZD9496, базедоксифена, пипендоксифена, арзоксифена, OP-1074 или аколбифена, например, как раскрыто в McDonell et al. (2015) Journal of Medicinal Chemistry 58(12) 4883-4887. Другие иллюстративные антагонисты эстрогенового рецептора раскрыты, например, в WO 2011/156518, WO 2011/159769, WO 2012/037410, WO 2012/037411 и US 2012/0071535, все из которых включены в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте.

Ингибиторы CDK4/6

В некоторых вариантах осуществления ингибитор циклин-зависимых киназ 4 или 6 (CDK4/6) применяют в комбинации с соединениями формулы (I') или формулы (I) или их фармацевтически приемлемыми солью, гидратом, сольватом, пролекарством на их основе, их стереоизомером или таутомером для лечения заболевания, например рака. В некоторых вариантах осуществления ингибитор CDK4/6 выбран из рибоциклиба, абемациклиба (Eli Lilly) или палбоциклиба.

Иллюстративные ингибиторы CDK4/6

В некоторых вариантах осуществления ингибитор CDK4/6 предусматривает рибоциклиб (регистрационный номер по CAS: 1211441-98-3) или соединение, раскрытое в патентах США №№ 8415355 и 8685980, которые включены посредством ссылки во всей своей полноте.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор CDK4/6 предусматривает соединение, раскрытое в публикации международной заявки № WO 2010/020675 и патентах США №№ 8415355 и 8685980, которые включены посредством ссылки во всей своей полноте.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор CDK4/6 предусматривает рибоциклиб (регистрационный номер по CAS: 1211441-98-3). Рибоциклиб также известен как LEE011, KISQALI® или 7-циклопентил-N, N-диметил-2-((5-(пиперазин-1-ил)пиридин-2-ил)амино)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-6-карбоксамид.

Другие иллюстративные ингибиторы CDK4/6

В некоторых вариантах осуществления ингибитор CDK4/6 предусматривает абемациклиб (регистрационный номер по CAS: 1231929-97-7). Абемациклиб также известен как LY835219 или N-[5-[(4-этил-1-пиперазинил)метил]-2-пиридинил]-5-фтор-4-[4-фтор-2-метил-1-(1-метилэтил)-1H-бензимидазол-6-ил]-2-пиримидинамин. Абемациклиб представляет собой ингибитор CDK, селективный в отношении CDK4 и CDK6, и раскрытый, например, в Torres-Guzman R et al. (2017) Oncotarget 10.18632/oncotarget.17778.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор CDK4/6 предусматривает палбоциклиб (регистрационный номер по CAS: 571190-30-2). Палбоциклиб также известен как PD-0332991, IBRANCE® или 6-ацетил-8-циклопентил-5-метил-2-{[5-(1-пиперазинил)-2-пиридинил]амино}пиридо[2,3-d]пиримидин-7(8H)-он. Палбоциклиб ингибирует CDK4 с IC50, составляющей 11 нМ, и ингибирует CDK6 с IC50, составляющей 16 нМ, и раскрыт, например, в Finn et al. (2009) Breast Cancer Research 11(5):R77.

Ингибиторы CXCR2

В некоторых вариантах осуществления ингибитор хемокинового (мотив C-X-C) рецептора 2 (CXCR2) применяют в комбинации с соединениями формулы (I') или формулы (I) или их фармацевтически приемлемыми солью, гидратом, сольватом, пролекарством на их основе, их стереоизомером или таутомером для лечения заболевания, например рака. В некоторых вариантах осуществления ингибитор CXCR2 выбран из 6-хлор-3-((3,4-диоксо-2-(пентан-3-иламино)циклобут-1-ен-1-ил)амино)-2-гидрокси-N-метокси-N-метилбензолсульфонамида, данириксина, репариксина или навариксина.

Иллюстративные ингибиторы CXCR2

В некоторых вариантах осуществления ингибитор CXCR2 содержит соединение, раскрытое в патентах США №№ 7989497, 8288588, 8329754, 8722925, 9115087, публикациях заявок на патенты США №№ US 2010/0152205, US 2011/0251205 и US 2011/0251206 и публикациях международных заявок №№ WO 2008/061740, WO 2008/061741, WO 2008/062026, WO 2009/106539, WO 2010/063802, WO 2012/062713, WO 2013/168108, WO 2010/015613 и WO 2013/030803. В некоторых вариантах осуществления ингибитор CXCR2 предусматривает 6-хлор-3-((3,4-диоксо-2-(пентан-3-иламино)циклобут-1-ен-1-ил)амино)-2-гидрокси-N-метокси-N-метилбензолсульфонамид или его холиновую соль. В некоторых вариантах осуществления игибитор CXCR2 предусматривает холиновую соль 6-хлор-3-((3,4-диоксо-2-(пентан-3-иламино)циклобут-1-ен-1-ил)амино)-2-гидрокси-N-метокси-N-метилбензолсульфонамида. В некоторых вариантах осуществления ингибитор CXCR2 представляет собой 2-гидрокси-N, N,N-триметилэтан-1-аминий-3-хлор-6-({3,4-диоксо-2-[(пентан-3-ил)амино]циклобут-1-ен-1-ил}амино)-2-(N-метокси-N-метилсульфамоил)фенолат (т. е. холиновую соль 6-хлор-3-((3,4-диоксо-2-(пентан-3-иламино)циклобут-1-ен-1-ил)амино)-2-гидрокси-N-метокси-N-метилбензолсульфонамида) и имеет следующую химическую структуру:

Другие иллюстративные ингибиторы CXCR2

В некоторых вариантах осуществления ингибитор CXCR2 предусматривает данириксин (регистрационный номер по CAS: 954126-98-8). Данириксин также известен как GSK1325756 или 1-(4-хлор-2-гидрокси-3-пиперидин-3-илсульфонилфенил)-3-(3-фтор-2-метилфенил)мочевина. Данириксин раскрыт, например, в Miller et al. Eur J Drug Metab Pharmacokinet (2014) 39:173-181; и Miller et al. BMC Pharmacology and Toxicology (2015), 16:18.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор CXCR2 предусматривает репариксин (регистрационный номер по CAS: 266359-83-5). Репариксин также известен как репертаксин или (2R)-2-[4-(2-метилпропил)фенил]-N-метилсульфонилпропанамид. Репариксин представляет собой неконкурентный аллостерический ингибитор CXCR1/2. Репариксин раскрыт, например, в Zarbock et al. Br J Pharmacol. 2008; 155(3):357-64.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор CXCR2 предусматривает навариксин. Навариксин также известен как MK-7123, SCH 527123, PS291822 или 2-гидрокси-N, N-диметил-3-[[2-[[(1R)-1-(5-метилфуран-2-ил)пропил]амино]-3,4-диоксоциклобутен-1-ил]амино]бензамид. Навариксин раскрыт, например, в Ning et al. Mol Cancer Ther. 2012; 11(6):1353-64.

Средства, связывающие CSF-1/1R

В некоторых вариантах осуществления средство, связывающее CSF-1/1R, применяют в комбинации с соединениями формулы (I') или формулы (I) или их фармацевтически приемлемыми солью, гидратом, сольватом, пролекарством на их основе, их стереоизомером или таутомером для лечения заболевания, например рака. В некоторых вариантах осуществления средство, связывающее CSF-1/1R, выбрано из ингибитора макрофагального колониестимулирующего фактора (M-CSF), например моноклонального антитела или Fab к M-CSF (например, MCS110), ингибитора тирозинкиназы CSF-1R (например, 4-((2-(((1R,2R)-2-гидроксициклогексил)амино)бензо[d]тиазол-6-ил)окси)-N-метилпиколинамида или BLZ945), ингибитора рецепторной тирозинкиназы (RTK) (например, пексидартиниба) или антитела, целенаправленно воздействующего на CSF-1R (например, эмактузумаба или FPA008). В некоторых вариантах осуществления ингибитор CSF-1/1R представляет собой BLZ945. В некоторых вариантах осуществления средство, связывающее CSF-1/1R, представляет собой MCS110. В других вариантах осуществления средство, связывающее CSF-1/1R, представляет собой пексидартиниб.

Иллюстративные средства, связывающие CSF-1

В некоторых вариантах осуществления средство, связывающее CSF-1/1R, предусматривает ингибитор макрофагального колониестимулирующего фактора (M-CSF). M-CSF также иногда известен как CSF-1. В определенных вариантах осуществления средство, связывающее CSF-1/1R, представляет собой антитело к CSF-1 (например, MCS110). В других вариантах осуществления средство, связывающее CSF-1/1R, представляет собой ингибитор CSF-1R (например, BLZ945).

В некоторых вариантах осуществления средство, связывающее CSF-1/1R, предусматривает моноклональное антитело или Fab к M-CSF (например, MCS110/H-RX1) или средство, связывающее CSF-1, раскрытое в публикациях международных заявок №№ WO 2004/045532 и WO 2005/068503, включая H-RX1 или 5H4 (например, молекулу или Fab-фрагмент антитела к M-CSF), и US9079956, причем указанные заявки и патент включены посредством ссылки во всей своей полноте.

Таблица 13a. Аминокислотные и нуклеотидные последовательности иллюстративной молекулы антитела к M-CSF (MCS110) (H-RX1) HC QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCTVSDYSITSDYAWNWIRQFPGKGLEWMGYISYSGSTSYNPSLKSRITISRDTSKNQFSLQLNSVTAADTAVYYCASFDYAHAMDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (SEQ ID NO: 271 ) (H-RX1) LC DIVLTQSPAFLSVTPGEKVTFTCQASQSIGTSIHWYQQKTDQAPKLLIKYASESISGIPSRFSGSGSGTDFTLTISSVEAEDAADYYCQQINSWPTTFGGGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC (SEQ ID NO: 272) Тяжелая цепь
CDR1 (Kabat) SDYAWN (SEQ ID NO: 273) Тяжелая цепь
CDR2 (Kabat) YISYSGSTSYNPSLKS (SEQ ID NO: 274) Тяжелая цепь
CDR3 (Kabat) FDYAHAMDY (SEQ ID NO: 275) Легкая цепь
CDR1 (Kabat) QASQSIGTSIH (SEQ ID NO: 276) Легкая цепь
CDR2 (Kabat) YASESIS (SEQ ID NO: 277) Легкая цепь
CDR3 (Kabat) QQINSWPTT (SEQ ID NO: 278)

В другом варианте осуществления средство, связывающее CSF-1/1R, предусматривает ингибитор тирозинкиназы CSF-1R, 4-((2-(((1R,2R)-2-гидроксициклогексил)амино)бензо[d]тиазол-6-ил)окси)-N-метилпиколинамид (BLZ945), или соединение, раскрытое в публикации международной заявки № WO 2007/121484 и патентах США №№ 7553854, 8173689 и 8710048, которые включены посредством ссылки во всей своей полноте.

Другие иллюстративные средства, связывающие CSF-1/1R

В некоторых вариантах осуществления средство, связывающее CSF-1/1R, предусматривает пексидартиниб (регистрационный номер по CAS 1029044-16-3). Пексидартиниб также известен как PLX3397 или 5-((5-хлор-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-3-ил)метил)-N-((6-(трифторметил)пиридин-3-ил)метил)пиридин-2-амин. Пексидартиниб является низкомолекулярным ингибитором рецепторных тирозинкиназ (RTK) KIT, CSF1R и FLT3. FLT3, CSF1R и FLT3 сверхэкспрессируются или являются мутировавшими во множестве типов раковых клеток и играют важные роли в пролиферации и метастазировании опухолевых клеток. PLX3397 может связываться с рецептором фактора роста стволовых клеток (KIT), рецептором колониестимулирующего фактора-1 (CSF1R) и FMS-подобной тирозинкиназой 3 (FLT3) и ингибировать их фосфорилирование, что может привести к подавлению пролиферации опухолевых клеток и отрицательному модулированию макрофагов, остеокластов и тучных клеток, вовлеченных в остеолитическое метастатическое заболевание.

В некоторых вариантах осуществления средство, связывающее CSF-1/1R, представляет собой эмактузумаб. Эмактузумаб также известен как RG7155 или RO5509554. Эмактузумаб представляет собой гуманизированное антитело mAb IgG1, целенаправленно воздействующее на CSF1R. В некоторых вариантах осуществления средство, связывающее CSF-1/1R, представляет собой FPA008. FPA008 представляет собой гуманизированное антитело mAb, которое ингибирует CSF1R.

Антагонисты A2aR

В некоторых вариантах осуществления антагонист аденозинового рецептора A2a (A2aR) (например, ингибитор пути A2aR, например, ингибитор аденозина, например, ингибитор A2aR или CD-73) применяют в комбинации с соединениями формулы (I') или формулы (I) или их фармацевтически приемлемыми солью, гидратом, сольватом, пролекарством на их основе, их стереоизомером или таутомером для лечения заболевания, например рака. В некоторых вариантах осуществления антагонист A2aR выбран из PBF509 (NIR178) (Palobiofarma/Novartis), CPI444/V81444 (Corvus/Genentech), AZD4635/HTL-1071 (AstraZeneca/Heptares), випаденанта (Redox/Juno), GBV-2034 (Globavir), AB928 (Arcus Biosciences), теофиллина, истрадефиллина (Kyowa Hakko Kogyo), тозаденанта/SYN-115 (Acorda), KW-6356 (Kyowa Hakko Kogyo), ST-4206 (Leadiant Biosciences) и преладенанта/SCH 420814 (Merck/Schering).

Иллюстративные антагонисты A2aR

В некоторых вариантах осуществления антагонист A2aR предусматривает PBF509 (NIR178) или соединение, раскрытое в патенте США № 8796284 или в публикации международной заявки № WO 2017/025918, включенных в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте. PBF509 (NIR178) также известен как NIR178.

Другие иллюстративные антагонисты A2aR

В определенных вариантах осуществления антагонист A2aR предусматривает CPI444/V81444. CPI-444 и другие антагонисты A2aR раскрыты в публикации международной заявки № WO 2009/156737, включенной в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте. В определенных вариантах осуществления антагонист A2aR представляет собой (S)-7-(5-метилфуран-2-ил)-3-((6-(((тетрагидрофуран-3-ил)окси)метил)пиридин-2-ил)метил)-3H-[1,2,3]триазоло[4,5-d]пиримидин-5-амин. В определенных вариантах осуществления антагонист A2aR представляет собой (R)-7-(5-метилфуран-2-ил)-3-((6-(((тетрагидрофуран-3-ил)окси)метил)пиридин-2-ил)метил)-3H-[1,2,3]триазоло[4,5-d]пиримидин-5-амин или его рацемат. В определенных вариантах осуществления антагонист A2aR представляет собой 7-(5-метилфуран-2-ил)-3-((6-(((тетрагидрофуран-3-ил)окси)метил)пиридин-2-ил)метил)-3H-[1,2,3]триазоло[4,5-d]пиримидин-5-амин.

В определенных вариантах осуществления антагонист A2aR представляет собой AZD4635/HTL-1071. Антагонисты A2aR раскрыты в публикации международной заявки № WO 2011/095625, включенной в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте. В определенных вариантах осуществления антагонист A2aR представляет собой 6-(2-хлор-6-метилпиридин-4-ил)-5-(4-фторфенил)-1,2,4-триазин-3-амин.

В определенных вариантах осуществления антагонист A2aR представляет собой ST-4206 (Leadiant Biosciences). В определенных вариантах осуществления антагонист A2aR является антагонистом A2aR, описанным в патенте США № 9133197, включенном в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте.

В определенных вариантах осуществления антагонист A2aR является антагонистом A2aR, описанным в патентах США №№ 8114845 и 9029393, публикациях заявок на патент США №№ 2017/0015758 и 2016/0129108, включенных в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте.

В некоторых вариантах осуществления антагонист A2aR представляет собой истрадефиллин (регистрационный номер по CAS: 155270-99-8). Истрадефиллин также известен как KW-6002 или 8-[(E)-2-(3,4-диметоксифенил)винил]-1,3-диэтил-7-метил-3,7-дигидро-1H-пурин-2,6-дион. Истрадефиллин раскрыт, например, в LeWitt et al. (2008) Annals of Neurology 63 (3): 295-302.

В определенных вариантах осуществления антагонист A2aR представляет собой тозаденант (Biotie). Тозаденант также известен как SYN115 или 4-гидрокси-N-(4-метокси-7-морфолин-4-ил-1,3-бензотиазол-2-ил)-4-метилпиперидин-1-карбоксамид. Тозаденант блокирует эффект эндогенного аденозина в отношении рецепторов А2a, что приводит к усилению эффекта дофамина в отношении рецептора D2 и подавлению эффекта глутамата в отношении рецептора mGluR5. В некоторых вариантах осуществления антагонист A2aR представляет собой преладенант (регистрационный номер по CAS: 377727-87-2). Преладенант также известен как SCH 420814 или 2-(2-фуранил)-7-[2-[4-[4-(2-метоксиэтокси)фенил]-1-пиперазинил]этил]7H-пиразоло[4,3-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-5-амин. Преладенант был разработан как лекарственное средство, действующее в качестве эффективного и селективного антагониста аденозинового рецептора А2А.

В некоторых вариантах осуществления антагонист A2aR представляет собой випаденант. Випаденант также известен как BIIB014, V2006 или 3-[(4-амино-3-метилфенил)метил]-7-(фуран-2-ил)триазоло[4,5-d]пиримидин-5-амин. Другие иллюстративные антагонисты A2aR включают, например, ATL-444, MSX-3, SCH-58261, SCH-412,348, SCH-442,416, VER-6623, VER-6947, VER-7835, CGS-15943, и ZM-241,385.

В некоторых вариантах осуществления антагонист A2aR представляет собой антагонист пути с участием A2aR (например, ингибитор CD-73, например, антител к CD73), представляет собой MEDI9447. MEDI9447 представляет собой моноклональное антитело, специфичное к CD73. Целенаправленное воздействие на внеклеточное продуцирование аденозина под действием CD73 может ослаблять иммуносупрессивные эффекты аденозина. Сообщалось, что MEDI9447 обладает рядом форм активности, например, ингибированием активности эктонуклеотидазы CD73, ослаблением AMP-опосредованной супрессии лимфоцитов и подавлением роста сингенных опухолей. MEDI9447 может управлять изменениями как в миелоидных, так и лимфоидных популяциях инфильтрирующих лейкоцитов в микроокружении опухоли. Эти изменения включают, например, увеличение количества CD8 эффекторных клеток и активированных макрофагов, а также снижение доли супрессорных клеток миелоидного происхождения (MDSC) и регуляторных Т-лимфоцитов.

Ингибиторы IDO

В некоторых вариантах осуществления ингибитор индоламин-2,3-диоксигеназы (IDO) и/или триптофан-2,3-диоксигеназы (TDO) применяют в комбинации с соединениями формулы (I') или формулы (I) или их фармацевтически приемлемыми солью, гидратом, сольватом, пролекарством на их основе, их стереоизомером или таутомером для лечения заболевания, например рака. В некоторых вариантах осуществления ингибитор IDO выбран из (4E)-4-[(3-хлор-4-фторанилино)-нитрозометилиден]-1,2,5-оксадиазол-3-амина (также известного как эпакадостат или INCB24360), индоксимода (), (1-метил-D-триптофан), α-циклогексил-5H-имидазо[5,1-a]изоиндол-5-этанола (также известного как NLG919), индоксимода и BMS-986205 (ранее F001287).

Иллюстративные ингибиторы IDO

В некоторых вариантах осуществления ингибитор IDO/TDO представляет собой индоксимод (New Link Genetics). Индоксимод, который представляет собой D-изомер 1-метилтриптофана, является перорально вводимым низкомолекулярным ингибитором метаболического пути с участием индоламин-2,3-диоксигеназы (IDO), который нарушает механизмы, благодаря которым опухоли избегают иммуноопосредованного разрушения.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор IDO/TDO представляет собой NLG919 (New Link Genetics). NLG919 является эффективным ингибитором пути с участием IDO (индоламин-(2,3)-диоксигеназы) с Ki/EC50, составляющей 7 нМ/75 нМ в бесклеточных анализах.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор IDO/TDO представляет собой эпакадостат (регистрационный номер по CAS: 1204669-58-8). Эпакадостат также известен как INCB24360 или INCB024360 (Incyte). Эпакадостат является эффективным и селективным ингибитором индоламин-2,3-диоксигеназы (IDO1) с IC50, составляющей 10 нМ, с высокой селективностью по сравнению с другими родственными ферментами, такими как IDO2 или триптофан-2,3-диоксигеназа (TDO).

В некоторых вариантах осуществления ингибитор IDO/TDO представляет собой F001287 (Flexus/BMS). F001287 является низкомолекулярным ингибитором индоламин-2,3-диоксигеназы 1 (IDO1).

Агонисты STING

В некоторых вариантах осуществления агонист STING применяют в комбинации с соединениями формулы (I') или формулы (I) или их фармацевтически приемлемыми солью, гидратом, сольватом, пролекарством на их основе, их стереоизомером или таутомером для лечения заболевания, например рака. В некоторых вариантах осуществления агонист STING представляет собой циклический динуклеотид, например, циклический динуклеотид, который содержит пуриновые или пиримидиновые нуклеотидные основания (например, аденозиновые, гуаниновые, урациловые, тиминовые или цитозиновые нуклеотидные основания). В некоторых вариантах осуществления нуклеотидные основания циклического динуклеотида предусматривают одно и то же нуклеотидное основание или разные нуклеотидные основания.

В некоторых вариантах осуществления агонист STING содержит аденозиновое или гуанозиновое нуклеотидное основание. В некоторых вариантах осуществления агонист STING содержит одно аденозиновое нуклеотидное основание и одно гуанозиновое нуклеотидное основание. В некоторых вариантах осуществления агонист STING содержит два аденозиновых нуклеотидных основания или два гуанозиновых нуклеотидных основания.

В некоторых вариантах осуществления агонист STING предусматривает модифицированный циклический динуклеотид, например, содержащий модифицированное нуклеотидное основание, модифицированную рибозу или модифицированную фосфатную связь. В некоторых вариантах осуществления модифицированный циклический динуклеотид содержит модифицированную фосфатную связь, например, тиофосфат.

В некоторых вариантах осуществления агонист STING содержит циклический динуклеотид (например, модифицированный циклический динуклеотид) с 2',5'- или 3',5'-фосфатными связями. В некоторых вариантах осуществления агонист STING предусматривает циклический динуклеотид (например, модифицированный циклический динуклеотид) со стереохимией Rp или Sp вокруг фосфатных связей.

В некоторых вариантах осуществления агонист STING представляет собой MK-1454 (Merck). MK-1454 представляет собой циклический динуклеотид, стимулятор генов интерферона (STING), агонист, который активирует путь STING. Иллюстративный агонист STING раскрыт, например, в публикации поданной согласно PCT заявки № WO 2017/027645.

Ингибиторы галектина

В некоторых вариантах осуществления ингибитор галектина, например галектина-1 или галектина-3, применяют в комбинации с соединениями формулы (I') или формулы (I) или их фармацевтически приемлемыми солью, гидратом, сольватом, пролекарством на их основе, их стереоизомером или таутомером для лечения заболевания, например рака. В некоторых вариантах осуществления комбинация содержит ингибитор галектина-1 и ингибитор галектина-3. В некоторых вариантах осуществления комбинация содержит биспецифический ингибитор (например, молекулу биспецифического антитела), целенаправленно воздействующий как на галектин-1, так и на галектин-3. В некоторых вариантах осуществления ингибитор галектина выбран из молекулы антитела к галектину, GR-MD-02 (Galectin Therapeutics), галектин-3C (Mandal Med), ангинекса или OTX-008 (OncoEthix, Merck). Галектины представляют собой семейство белков, которые связываются с бета-галактозидазными сахарами.

Семейство белков галектинов включает по меньшей мере галектин-1, галектин-2, галектин-3, галектин-4, галектин-7 и галектин-8. Галектины также называют лектинами S-типа, и они являются растворимыми белками, обладающими, например, внутриклеточными и внеклеточными функциями.

Галектин-1 и галектин-3 экспрессируются на высоком уровне в различных типах опухолей. Галектин-1 и галектин-3 могут стимулировать ангиогенез и/или перепрограммировать миелоидные клетки в направлении проопухолевого фенотипа, например, усиливать иммуносупрессию от миелоидных клеток. Растворимая форма галектина-3 может также инактивировать инфильтрирующие T-клетки и/или связываться с ними.

Иллюстративные ингибиторы галектина

В некоторых вариантах осуществления ингибитор галектина представляет собой молекулу антитела. В одном варианте осуществления молекула антитела является молекулой моноспецифического антитела и связывает один эпитоп. Например, молекула моноспецифического антитела, характеризующаяся множеством последовательностей вариабельного домена иммуноглобулина, каждая из которых связывает один и тот же эпитоп. В одном варианте осуществления ингибитор галектина представляет собой молекулу антитела к галектину, например, антитела к галектину-1 или антитела к галектину-3. В некоторых вариантах осуществления ингибитор галектина представляет собой молекулу антитела к галектину-1. В некоторых вариантах осуществления ингибитор галектина представляет собой молекулу антитела к галектину-3.

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой молекулу полиспецифического антитела, например, она содержит множество последовательностей вариабельных доменов иммуноглобулина, причем первая последовательность вариабельного домена иммуноглобулина из множества характеризуется специфичностью связывания с первым эпитопом, а вторая последовательность вариабельного домена иммуноглобулина из множества характеризуется специфичностью связывания со вторым эпитопом. В одном варианте осуществления первый и второй эпитопы находятся на одном и том же антигене, например, на одном и том же белке (или субъединице мультимерного белка). В одном варианте осуществления первый и второй эпитопы перекрываются. В одном варианте осуществления первый и второй эпитопы не перекрываются. В одном варианте осуществления первый и второй эпитопы находятся на разных антигенах, например, разных белках (или разных субъединицах мультимерного белка). В одном варианте осуществления молекула полиспецифического антитела содержит третий, четвертый или пятый вариабельные домены иммуноглобулина. В одном варианте осуществления молекула полиспецифического антитела представляет собой молекулу биспецифического антитела, молекулу триспецифического антитела или молекулу тетраспецифического антитела.

В одном варианте осуществления ингибитор галектина представляет собой молекулу полиспецифического антитела. В одном варианте осуществления молекула полиспецифического антитела представляет собой молекулу биспецифического антитела. Биспецифическое антитело характеризуется специфичностью в отношении не более двух антигенов. Молекула биспецифического антитела характеризуется наличием первой последовательности вариабельного домена иммуноглобулина, которая характеризуется специфичностью связывания с первым эпитопом, и второй последовательности вариабельного домена иммуноглобулина, которая характеризуется специфичностью связывания со вторым эпитопом. В одном варианте осуществления первый и второй эпитопы находятся на одном и том же антигене, например, на одном и том же белке (или субъединице мультимерного белка). В одном варианте осуществления первый и второй эпитопы перекрываются. В одном варианте осуществления первый и второй эпитопы не перекрываются. В одном варианте осуществления первый и второй эпитопы находятся на разных антигенах, например, разных белках (или разных субъединицах мультимерного белка). В одном варианте осуществления молекула биспецифического антитела содержит последовательность вариабельного домена тяжелой цепи и последовательность вариабельного домена легкой цепи, которые характеризуются специфичностью связывания с первым эпитопом, и последовательность вариабельного домена тяжелой цепи и последовательность вариабельного домена легкой цепи, которые характеризуются специфичностью связывания со вторым эпитопом. В одном варианте осуществления молекула биспецифического антитела содержит полуантитело, характеризующееся специфичностью связывания с первым эпитопом, и полуантитело, характеризующееся специфичностью связывания со вторым эпитопом. В одном варианте осуществления молекула биспецифического антитела содержит полуантитело или его фрагмент, характеризующиеся специфичностью связывания с первым эпитопом, и полуантитело или его фрагмент, характеризующиеся специфичностью связывания со вторым эпитопом. В одном варианте осуществления молекула биспецифического антитела содержит scFv или его фрагмент, характеризующиеся специфичностью связывания с первым эпитопом, и scFv или его фрагмент, характеризующиеся специфичностью связывания со вторым эпитопом. В одном варианте осуществления ингибитор галектина представляет собой молекулу биспецифического антитела. В одном варианте осуществления первый эпитоп размещен на галектине-1 и второй эпитоп размещен на галектине-3.

Протоколы для получения молекул биспецифического или гетеродимерного антител известны из уровня техники, включая без ограничения, например, подход "выступ во впадину", описанный, например, в US5731168; спаривание Fc с использованием направленного электростатического взаимодействия, как описано, например, в WO 09/089004, WO 06/106905 и WO 2010/129304; образование гетеродимеров путем конструирования доменов с обменом нитей (SEED), как описано, например, в WO 07/110205; обмен Fab-фрагментами, как описано, например, в WO 08/119353, WO 2011/131746 и WO 2013/060867; двойные конъюгаты антител, например, получаемые путем сшивания антител с созданием биспецифической структуры с помощью гетеробифункционального реагента, содержащего реакционноспособную аминогруппу и реакционноспособную сульфгидрильную группу, как описано, например, в US4433059; детерминанты биспецифических антител, создаваемые путем рекомбинации полуантител (пары тяжелая-легкая цепь или Fab) из разных антител посредством цикла восстановления и окисления дисульфидных связей между двумя тяжелыми цепями, как описано, например, в US 4444878; трифункциональные антитела, например, три Fab'-фрагмента, сшитые с помощью реакционноспособных сульфгидрильных групп, как описано, например, в US5273743; биосинтетические связывающие белки, например, пара scFv, сшитых на С-концевых хвостах, предпочтительно посредством химической сшивки посредством дисульфидных связей или реакционноспособных аминогрупп, как описано, например, в US5534254; бифункциональные антитела, например, Fab-фрагменты с различной специфичностью связывания, димеризованные с помощью лейциновых "застежек" (например, c-fos и c-jun), заменивших константный домен, как описано, например, в US5582996; биспецифические и олигоспецифические моно- и олиговалентные рецепторы, например, VH-CH1-области двух антител (два Fab-фрагмента), связанные полипептидным спейсером между CH1-областью одного антитела и VH-областью другого антитела, обычно с ассоциированными легкими цепями, как описано, например, в US5591828; биспецифические конъюгаты ДНК-антитело, например, получаемые путем сшивки антител или Fab-фрагментов двухнитевым фрагментом ДНК, как описано, например, в US5635602; биспецифические слитые белки, например, экспрессионную конструкцию, содержащую два scFv с гидрофильным спиральным пептидным линкером между ними и полной константной областью, как описано, например, в US5637481; поливалентные и полиспецифические связывающие белки, например, димер полипептидов, имеющий первый домен со связывающей областью вариабельной области тяжелой цепи Ig и второй домен со связывающей областью вариабельной области легкой цепи Ig, как правило, называемые диателами (также охватываются структуры более высокого порядка для создания биспецифических, триспецифических или тетраспецифических молекул, как описано, например, в US5837242; конструкции миниантител со связанными VL- и VH-цепями, дополнительно соединенными пептидными спейсерами с шарнирной областью антитела и СН3-областью, которые могут быть димеризованы с образованием биспецифических/поливалентных молекул, как описано, например, в US5837821; VH- и VL-домены, связанные коротким пептидным линкером (например, 5 или 10 аминокислот) или вовсе не имеющие линкера, в любой ориентации, которые могут образовывать димеры с образованием биспецифических диател; тримеры и тетрамеры, как описано, например, в US5844094; нить из VH-доменов (или VL-доменов у представителей семейства), соединенных пептидными связями со сшиваемыми группами на С-конце, дополнительно ассоциированных с VL-доменами с образованием последовательно соединенных Fv (или scFv), как описано, например, в US5864019; и одноцепочечные связывающие полипептиды как с VH-, так и с VL-доменами, связанными пептидным линкером, объединенные в поливалентные структуры посредством нековалентной или химической сшивки с образованием, например, гомобивалентных, гетеробивалентных, тривалентных и тетравалентных структур с использованием формата как типа scFv, так и типа диатела, как описано, например, в US5869620. Дополнительные иллюстративные полиспецифические и биспецифические молекулы и способы их получения можно найти, например, в US5910573, US5932448, US5959083, US5989830, US6005079, US6239259, US6294353, US6333396, US6476198, US6511663, US6670453, US6743896, US6809185, US6833441, US7129330, US7183076, US7521056, US7527787, US7534866, US7612181, US2002/004587A1, US2002/076406A1, US2002/103345A1, US2003/207346A1, US2003/211078A1, US2004/219643A1, US2004/220388A1, US2004/242847A1, US2005/003403A1, US2005/004352A1, US2005/069552A1, US2005/079170A1, US2005/100543A1, US2005/136049A1, US2005/136051A1, US2005/163782A1, US2005/266425A1, US2006/083747A1, US2006/120960A1, US2006/204493A1, US2006/263367A1, US2007/004909A1, US2007/087381A1, US2007/128150A1, US2007/141049A1, US2007/154901A1, US2007/274985A1, US2008/050370A1, US2008/069820A1, US2008/152645A1, US2008/171855A1, US2008/241884A1, US2008/254512A1, US2008/260738A1, US2009/130106A1, US2009/148905A1, US2009/155275A1, US2009/162359A1, US2009/162360A1, US2009/175851A1, US2009/175867A1, US2009/232811A1, US2009/234105A1, US2009/263392A1, US2009/274649A1, EP346087A2, WO00/06605A2, WO02/072635A2, WO04/081051A1, WO06/020258A2, WO2007/044887A2, WO2007/095338A2, WO2007/137760A2, WO2008/119353A1, WO2009/021754A2, WO2009/068630A1, WO91/03493A1, WO93/23537A1, WO94/09131A1, WO94/12625A2, WO95/09917A1, WO96/37621A2, WO99/64460A1. Содержание вышеупомянутых заявок включено в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте.

В других вариантах осуществления молекула антитела к галектину, например, антитела к галектину-1 или антитела к галектину-3, (например, молекула моноспецифического, биспецифического или полиспецифического антитела) ковалентно связана, например, слита, с другим партнером, например, с белком, например, в виде слитой молекулы, например, слитого белка. В одном варианте осуществления молекула биспецифического антитела характеризуется первой специфичностью связывания с первой мишенью (например, галектином-1) и второй специфичностью связывания со второй мишенью (например, галектином-3).

В настоящем изобретении предусмотрена выделенная молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая любую из вышеупомянутых молекул антитела, векторы и их клетки-хозяева. Молекула нуклеиновой кислоты включает без ограничения РНК, геномную ДНК и cDNA.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор галектина представляет собой пептид, например, белок, который может связываться с галектином, например, галектином-1 или галектином-3, и ингибировать его функцию. В некоторых вариантах осуществления ингибитор галектина представляет собой пептид, который может связываться с галектином-3 и ингибировать его функцию. В некоторых вариантах осуществления ингибитор галектина представляет собой пептид галектин-3C. В некоторых вариантах осуществления ингибитор галектина представляет собой ингибитор галектина-3, раскрытый в патенте США № 6770622, который включен в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте.

Галектин-3C представляет собой усеченный на N-конце белок галектина-3 и действует, например, как конкурентный ингибитор галектина-3. Галектин-3C предотвращает связывание эндогенного галектина-3, например, с ламинином на поверхности, например, раковых клеток и другими бета-галактозидазными гликоконъюгатами во внеклеточном матриксе (ECM). Галектин-3C и другие иллюстративные пептиды, ингибирующие галектин, раскрыты в патенте США № 6770622.

В некоторых вариантах осуществления галектин-3C содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 279 или аминокислоту, по сути идентичную (например, на 90, 95 или 99%) ей.

GAPAGPLIVPYNLPLPGGVVPRMLITILGTVKPNANRIALDFQRGNDVAFHFNPRFNENNRRVIVCNTKLDNNWGREERQSVFPFESGKPFKIQVLVEPDHFKVAVNDAHLLQYNHRVKKLNEISKLGISGDIDITSASYTMI (SEQ ID NO: 279).

В некоторых вариантах осуществления ингибитор галектина представляет собой пептид, который может связываться с галектином-1 и ингибировать его функцию. В некоторых вариантах осуществления ингибитор галектина представляет собой пептид ангинекс: ангинекс представляет собой антиангиогенный пептид, который связывается с галектином-1 (Salomonsson E, et al., (2011) Journal of Biological Chemistry, 286(16):13801-13804). Связывание ангинекса с галектином-1 может препятствовать, например, проангиогенным эффектам галектина-1.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор галектина, например, галектина-1 или галектина-3, представляет собой молекулу непептидного топомиметика. В некоторых вариантах осуществления ингибитор галектина, представляющий собой непептидный топомиметик, представляет собой OTX-008 (OncoEthix). В некоторых вариантах осуществления непептидный топомиметик представляет собой непептидный топомиметик, раскрытый в патенте США № 8207228, который включен в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте. OTX-008, также известный как PTX-008 или каликсарен 0118, представляет собой селективный аллостерический ингибитор галектина-1. OTX-008 имеет химическое название: N-[2-(диметиламино)этил]-2-{[26,27,28-трис({[2-(диметиламино)этил]карбамоил}метокси)пентацикло[19.3.1.1,7.1,.15,]октакоза-1(25),3(28),4,6,9(27),1012,15,17,19(26),21,23-додекан-25-ил]окси}ацетамид.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор галектина, например, галектина-1 или галектина-3, представляет собой соединение на основе углевода. В некоторых вариантах осуществления ингибитор галектина представляет собой GR-MD-02 (Galectin Therapeutics).

В некоторых вариантах осуществления GR-MD-02 представляет собой ингибитор галектина-3. GR-MD-02 представляет собой полисахарид с наличием галактозы, также называемый, например, галактоарабино-рамногалактуронатом. GR-MD-02 и другие полимеры с наличием галактозы, например, галактоарабино-рамногалактуронаты, раскрыты в патенте США № 8236780 и публикации заявки на патент США № 2014/0086932, содержание которых включено в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте.

Ингибиторы MEK

В некоторых вариантах осуществления ингибитор MEK применяют в комбинации с соединениями формулы (I') или формулы (I) или их фармацевтически приемлемыми солью, гидратом, сольватом, пролекарством на их основе, их стереоизомером или таутомером для лечения заболевания, например рака. В некоторых вариантах осуществления ингибитор MEK выбран из траметиниба, селуметиниба, AS703026, BIX 02189, BIX 02188, CI-1040, PD0325901, PD98059, U0126, XL-518, G-38963 или G02443714. В некоторых вариантах осуществления ингибитор MEK представляет собой траметиниб.

Иллюстративные ингибиторы MEK

В некоторых вариантах осуществления ингибитор MEK представляет собой траметиниб. Траметиниб также известен как JTP-74057, TMT212, N-(3-{3-циклопропил-5-[(2-фтор-4-йодфенил)амино]-6,8-диметил-2,4,7-триоксо-3,4,6,7-тетрагидропиридо[4,3-d]пиримидин-1(2H)-ил}фенил)ацетамид или Mekinist (номер по CAS 871700-17-3).

Другие иллюстративные ингибиторы MEK

В некоторых вариантах осуществления ингибитор MEK предусматривает селуметиниб, который имеет химическое название: (5-[(4-бром-2-хлорфенил)амино]-4-фтор-N-(2-гидроксиэтокси)-1-метил-1H-бензимидазол-6-карбоксамид. Селуметиниб также известен как AZD6244 или ARRY 142886, например, описанный в публикации поданной согласно PCT заявки № WO2003077914.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор MEK предусматривает AS703026, BIX 02189 или BIX 02188.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор MEK предусматривает 2-[(2-хлор-4-йодфенил)амино]-N-(циклопропилметокси)-3,4-дифтор-бензамид (также известный как CI-1040 или PD184352), например, описанный в публикации поданной согласно PCT заявки № WO2000035436).

В некоторых вариантах осуществления ингибитор MEK предусматривает N-[(2R)-2,3-дигидроксипропокси]-3,4-дифтор-2-[(2-фтор-4-йодфенил)амино]-бензамид (также известный как PD0325901), например, описанный в публикации поданной согласно PCT заявки № WO2002006213).

В некоторых вариантах осуществления ингибитор MEK предусматривает 2'-амино-3'-метоксифлавон (также известный как PD98059), который доступен от Biaffin GmbH & Co., KG, Германия.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор MEK предусматривает 2,3-бис[амино[(2-аминофенил)тио]метилен]-бутандинитрил (также известный как U0126), например, описанный в патенте США № 2779780).

В некоторых вариантах осуществления ингибитор MEK предусматривает XL-518 (также известный как GDC-0973) который имеет № по CAS 1029872-29-4 и является доступным от ACC Corp.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор MEK включает G-38963.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор MEK включает G02443714 (также известный как AS703206)

Дополнительные примеры ингибиторов MEK раскрыты в WO 2013/019906, WO 03/077914, WO 2005/121142, WO 2007/04415, WO 2008/024725 и WO 2009/085983, содержание которых включено в данный документ посредством ссылки. Дополнительные примеры ингибиторов MEK предусматривают без ограничения 2,3-бис[амино[(2-аминофенил)тио]метилен]-бутандинитрил (также известный как U0126 и описанный в патенте США № 2779780); (3S,4R,5Z,8S,9S,11E)-14-(этиламино)-8,9,16-тригидрокси-3,4-диметил-3,4,9, 19-тетрагидро-1H-2-бензоксациклотетрадецин-1,7(8H)-дион] (также известный как E6201, описанный в публикации поданной согласно PCT заявки № WO2003076424); вемурафениб (PLX-4032, CAS 918504-65-1); (R)-3-(2,3-дигидроксипропил)-6-фтор-5-(2-фтор-4-йодфениламино)-8-метилпиридо[2,3-d]пиримидин-4,7(3H,8H)-дион (TAK-733, CAS 1035555-63-5); пимасертиб (AS-703026, CAS 1204531-26-9); 2-(2-фтор-4-йодфениламино)-N-(2-гидроксиэтокси)-1,5-диметил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-карбоксамид (AZD 8330) и 3,4-дифтор-2-[(2-фтор-4-йодфенил)амино]-N-(2-гидроксиэтокси)-5-[(3-оксо-[1,2]оксазинан-2-ил)метил]бензамид (CH 4987655 или Ro 4987655).

Ингибиторы c-MET

В некоторых вариантах осуществления ингибитор c-MET применяют в комбинации с соединениями формулы (I') или формулы (I) или их фармацевтически приемлемыми солью, гидратом, сольватом, пролекарством на их основе, их стереоизомером или таутомером для лечения заболевания, например рака. c-MET, рецепторная тирозинкиназа, сверхэкспрессируемая или мутировавшая во множестве типов опухолевых клеток, выполняет ключевые функции в пролиферации опухолевых клеток, выживаемости, инвазии, метастазировании и ангиогенезе опухоли. Ингибирование c-MET может индуцировать гибель клеток среди опухолевых клеток, сверхэкспрессирующих белок c-MET или экспрессирующих конститутивно активируемый белок c-MET.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор c-MET выбран из капматиниба (INC280), JNJ-3887605, AMG 337, LY2801653, MSC2156119J, кризотиниба, тивантиниба или голватиниба.

Иллюстративные ингибиторы c-MET

В некоторых вариантах осуществления ингибитор c-MET предусматривает капматиниб (INC280) или соединение, описанное в патентах США №№ 7767675 и US 8461330, которые включены посредством ссылки во всей своей полноте.

Другие иллюстративные ингибиторы c-MET

В некоторых вариантах осуществления ингибитор c-MET предусматривает JNJ-38877605. JNJ-38877605 является низкомолекулярным ингибитором c-MET, характеризующимся доступностью при пероральном применении. JNJ-38877605 селективно связывается с c-MET, таким образом ингибируя фосфорилирование c-MET и нарушая пути передачи сигнала, опосредованной c-MET.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор c-MET представляет собой AMG 208. AMG 208 является селективным низкомолекулярным ингибитором c-MET. AMG 208 ингибирует лигандзависимую и лиганднезависимую активацию c-MET, ингибируя его тирозинкиназную активность, что может приводить к ингибированию роста клеток в опухолях, которые сверхэкспрессируют c-MET.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор c-Met предусматривает AMG 337. AMG 337 является ингибитором c-MET, характеризующимся биодоступностью при пероральном применении. AMG 337 избирательно связывается с c-MET, таким образом нарушая пути передачи сигнала, опосредованной c-MET.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор c-Met предусматривает LY2801653. LY2801653 является низкомолекулярным ингибитором c-MET, характеризующимся доступностью при пероральном применении. LY2801653 избирательно связывается с c-MET, таким образом ингибируя фосфорилирование c-MET и нарушая пути передачи сигнала, опосредованной c-MET.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор c-Met предусматривает MSC2156119J. MSC2156119J является ингибитором c-MET, характеризующимся биодоступностью при пероральном применении. MSC2156119J избирательно связывается с c-MET, в результате чего происходит ингибирование фосфорилирования c-MET и нарушение путей передачи сигнала, опосредованной c-MET.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор c-MET представляет собой капматиниб. Капматиниб также известен как INCB028060. Капматиниб является ингибитором c-MET, характеризующимся биодоступностью при пероральном применении. Капматиниб избирательно связывается с c-MET, таким образом ингибируя фосфорилирование c-MET и нарушая пути передачи сигнала, опосредованной c-MET.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор c-MET предусматривает кризотиниб. Кризотиниб также известен как PF-02341066. Кризотиниб является аминопиридиновым ингибитором рецепторной тирозинкиназы, являющейся киназой анапластической лимфомы (ALK), и c-MET/рецептора фактора роста гепатоцитов (HGFR), характеризующимся доступностью при пероральном применении. Кризотиниб ATP-конкурентным образом связывается с ALK-киназой и слитыми белками на основе ALK и ингибирует их. Кроме того, кризотиниб ингибирует киназу c-MET и нарушает сигнальный путь c-MET. В целом это средство подавляет рост опухолевых клеток.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор c-MET включает голватиниб. Голватиниб является двойным ингибитором киназ c-MET и VEGFR-2 с потенциальной противоопухолевой активностью, характеризующимся биодоступностью при пероральном применении. Голватиниб связывается как с c-MET, так и с VEGFR-2 и ингибирует их активность, в результате чего может подавляться рост опухолевых клеток и выживание опухолевых клеток, которые сверхэкспрессируют эти рецепторные тирозинкиназы.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор c-MET представляет собой тивантиниб. Тивантиниб также известен как ARQ 197. Тивантиниб является низкомолекулярным ингибитором c-MET, характеризующимся биодоступностью при пероральном применении. Тивантиниб связывается с белком c-MET и нарушает пути передачи сигнала, опосредованной c-MET, что может индуцировать клеточную гибель опухолевых клеток, сверхэкспрессирующих белок c-MET или экспрессирующих конститутивно активируемый белок c-MET.

Ингибиторы TGF-β

В некоторых вариантах осуществления ингибитор трансформирующего фактора роста бета (также известного как TGF-β TGFβ, TGFb или TGF-бета, применяемые взаимозаменяемо в данном документе) применяют в комбинации с соединениями формулы (I') или формулы (I) или их фармацевтически приемлемыми солью, гидратом, сольватом, пролекарством на их основе, их стереоизомером или таутомером для лечения заболевания, например рака. В определенных вариантах осуществления комбинация, описанная в данном документе, содержит ингибитор трансформирующего фактора роста бета (также известного как TGF-β TGFβ, TGFb или TGF-бета, применяемые взаимозаменяемо в данном документе).

TGF-β принадлежит к большому семейству структурно родственных цитокинов, включающему, например, костные морфогенетические белки (BMP), факторы роста и дифференцировки, активины и ингибины. В некоторых вариантах осуществления ингибиторы TGF-β, описанные в данном документе, могут связывать и/или ингибировать одну или несколько изоформ TGF-β (например, одну, две или все из TGF-β1, TGF-β2 или TGF-β3).

При нормальных условиях TGF-β поддерживает гомеостаз и ограничивает рост эпителиальных, эндотелиальных, нейронных и гематопоэтических клеточных линий, например, посредством индуцирования антипролиферативных и апоптических ответов. Канонические и неканонические сигнальные пути вовлечены в клеточные ответы на TGF-β. Активация канонического пути TGF-β/Smad может опосредовать антипролиферативные эффекты TGF-β. Неканонический TGF-β путь может активировать дополнительные внутриклеточные пути, например митоген-активируемые протеинкиназы (MAPK), фосфатидилинозитол-3-киназы/протеинкиназы B, Rho-подобные GTPазы (Tian et al. Cell Signal. 2011; 23(6):951-62; Blobe et al. N Engl J Med. 2000; 342(18):1350-8), таким образом осуществляя модулирование эпителиально-мезенхимального перехода (EMT) и/или подвижности клеток.

Изменения сигнального пути TGF-β ассоциированы с заболеваниями человека, например видами рака, сердечно-сосудистыми заболеваниями, фиброзом, репродуктивными нарушениями и заживлением ран. Не ограничиваясь теорией, полагают, что в некоторых вариантах осуществления роль TGF-β при раке зависит от условий заболевания (например, стадии опухоли и генетического изменения) и/или клеточного окружения. Например, на поздних стадиях рака TGF-β может модулировать относящийся к раку процесс, например, посредством стимулирования роста опухоли (например, индуцируя EMT), блокирования противоопухолевых иммунных ответов, усиливая опухолеассоциированный фиброз или усиливая ангиогенез (Wakefield and Hill Nat Rev Cancer. 2013; 13(5):328-41). В определенных вариантах осуществления комбинацию, содержащую ингибитор TGF-β, описанный в данном документе, применяют для лечения рака на поздней стадии, метастатического рака или прогрессирующего рака.

Доклинические данные указывают на то, что TGF-β выполняет важную функцию в иммунной регуляции (Wojtowicz-Praga Invest New Drugs. 2003; 21(1):21-32; Yang et al. Trends Immunol. 2010; 31(6):220-7). TGF-β может осуществлять отрицательную регуляцию иммунного ответа хозяина посредством нескольких механизмов, например, сдвига баланса T-хелперов в направлении иммунного фенотипа Th2; ингибирования противоопухолевых ответов макрофагов Th1-типа и M1-типа; подавления функций цитотоксических CD8+ T-лимфоцитов (CTL), NK-лимфоцитов и дендритных клеток, образования регуляторных CD4+CD25+ T-клеток или стимулирования макрофагов M2-типа посредством проопухолевой активности, опосредованной секрецией иммуносупрессивных цитокинов (например, IL10 или VEGF), провоспалительных цитокинов (например, IL6, TNFα или IL1), и образования активных форм кислорода (ROS) с генотоксической активностью (Yang et al. Trends Immunol. 2010; 31(6):220-7; Truty and Urrutia Pancreatology. 2007; 7(5-6):423-35; Achyut et al Gastroenterology. 2011; 141(4):1167-78).

Иллюстративные ингибиторы TGF-β

В некоторых вариантах осуществления ингибитор TGF-β предусматривает XOMA 089 или соединение, раскрытое в публикации международной заявки № WO 2012/167143, которая включена посредством ссылки во всей своей полноте.

XOMA 089 также известен как XPA.42.089. XOMA 089 представляет собой полностью человеческое моноклональное антитело, которое специфично связывает и нейтрализует лиганды TGF-бета 1 и 2.

Вариабельная область тяжелой цепи XOMA 089 имеет следующую аминокислотную последовательность: QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGGIIPIFGTANYAQKFQGRVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGLWEVRALPSVYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 284) (раскрытую под SEQ ID NO: 6 в WO 2012/167143). Вариабельная область легкой цепи XOMA 089 имеет следующую аминокислотную последовательность: SYELTQPPSVSVAPGQTARITCGANDIGSKSVHWYQQKAGQAPVLVVSEDIIRPSGIPERISGSNSGNTATLTISRVEAGDEADYYCQVWDRDSDQYVFGTGTKVTVLG (SEQ ID NO: 285) (раскрытую под SEQ ID NO: 8 в WO 2012/167143).

XOMA 089 связывается с изоформами TGF-β человека с высокой аффинностью. Как правило, XOMA 089 связывается с высокой аффинностью с TGF-β1 и TGF-β2 и в меньшей степени с TGF-β3. В анализах на Biacore K_D XOMA 089 при взаимодействии с TGF-β человека составляет 14,6 пМ для TGF-β1, 67,3 пМ для TGF-β2 и 948 пМ для TGF-β3. С учетом высокой аффинности связывания со всеми тремя изоформами TGF-β в определенных вариантах осуществления ожидается, что XOMA 089 будет связываться с TGF-β1, 2 и 3 при дозе XOMA 089, описанной в данном документе. XOMA 089 перекрестно реагирует с TGF-β грызунов и макака-крабоеда и демонстрирует функциональную активность in vitro и in vivo, что делает грызунов и макака-крабоеда релевантными видами для токсикологических исследований.

Другие иллюстративные ингибиторы TGF-β

В некоторых вариантах осуществления ингибитор TGF-β предусматривает фрезолимумаб (регистрационный номер по CAS: 948564-73-6). Фрезолимумаб также известен как GC1008. Фрезолимумаб представляет собой человеческое моноклональное антитело, которое связывается с изоформами 1, 2 и 3 TGF-бета и ингибирует их.

Тяжелая цепь фрезолимумаба имеет аминокислотную последовательность: QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGYTFSSNVISWVRQAPGQGLEWMGGVIPIVDIANYAQRFKGRVTITADESTSTTYMELSSLRSEDTAVYYCASTLGLVLDAMDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (SEQ ID NO: 280).

Легкая цепь фрезолимумаба имеет аминокислотную последовательность: ETVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSLGSSYLAWYQQKPGQAPRLLIYGASSRAPGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYCQQYADSPITFGQGTRLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC (SEQ ID NO: 281).

Фрезолимумаб раскрыт, например, в публикации международной заявки № WO 2006/086469 и патентах США №№ 8383780 и 8591901, которые включены посредством ссылки во всей своей полноте.

Ингибиторы IL-1β

Цитокины из семейства интерлейкина-1 (IL-1) представляют собой группу секретируемых плейотропных цитокинов, играющих центральную роль в воспалении и иммунном ответе. Повышение уровней IL-1 наблюдается при нескольких клинических ситуациях, в том числе при раке (Apte et al. (2006) Cancer Metastasis Rev. p. 387-408; Dinarello (2010) Eur. J. Immunol. p. 599-606). Семейство IL-1 включает, среди прочих, IL-1-бета (IL-1b) и IL-1-альфа (IL-1a). Уровень IL-1b повышен при раке легкого, раке молочной железы и колоректальном раке (Voronov et al. (2014) Front Physiol. p. 114) и ассоциирован с неблагоприятным прогнозом (Apte et al. (2000) Adv. Exp. Med. Biol. p. 277-88). Не ограничиваясь теорией, полагают, что в некоторых вариантах осуществления секретируемый IL-1b, происходящий из микроокружения опухоли и злокачественных клеток, способствует пролиферации опухолевых клеток, повышает инвазивность и ослабляет противоопухолевый иммунный ответ, частично благодаря привлечению ингибирующих нейтрофилов (Apte et al. (2006) Cancer Metastasis Rev. p. 387-408; Miller et al. (2007) J. Immunol. p. 6933-42). Экспериментальные данные указывают на то, что ингибирование IL-1b приводит к уменьшению опухолевой нагрузки и метастазирования (Voronov et al. (2003) Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. p. 2645-50).

В некоторых вариантах осуществления ингибитор интерлейкина-1-бета (IL-1β) применяют в комбинации с соединениями формулы (I') или формулы (I) или их фармацевтически приемлемыми солью, гидратом, сольватом, пролекарством на их основе, их стереоизомером или таутомером для лечения заболевания, например рака. В некоторых вариантах осуществления ингибитор IL-1β выбран из канакинумаба, гевокизумаба, анакинры или рилонацепта. В некоторых вариантах осуществления ингибитор IL-1β представляет собой канакинумаб.

Иллюстративные ингибиторы IL-1β

В некоторых вариантах осуществления ингибитор IL-1β представляет собой канакинумаб. Канакинумаб также известен как ACZ885 или ILARIS®. Канакинумаб представляет собой человеческое моноклональное антитело IgG1/κ, которое нейтрализует биоактивность IL-1β человека.

Канакинумаб раскрыт, например, в WO 2002/16436, US 7446175 и EP 1313769. Вариабельная область тяжелой цепи канакинумаба имеет следующую аминокислотную последовательность: MEFGLSWVFLVALLRGVQCQVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSVYGMNWVRQAPGKGLEWVAIIWYDGDNQYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNGLRAEDTAVYYCARDLRTGPFDYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 282) (раскрытую под SEQ ID NO: 1 в US 7446175). Вариабельная область легкой цепи канакинумаба имеет следующую аминокислотную последовательность: MLPSQLIGFLLLWVPASRGEIVLTQSPDFQSVTPKEKVTITCRASQSIGSSLHWYQQKPDQSPKLLIKYASQSFSGVPSRFSGSGSGTDFTLTINSLEAEDAAAYYCHQSSSLPFTFGPGTKVDIK (SEQ ID NO: 283) (раскрытую под SEQ ID NO: 2 в US 7446175).

Канакинумаб применяли, например, для лечения криопирин-ассоциированных периодических синдромов (CAPS) у взрослых и детей, для лечения системного ювенильного идиопатического артрита (SJIA), для симптоматического лечения приступов острого подагрического артрита у взрослых и для других воспалительных заболеваний, обусловленных IL-1β. Не ограничиваясь теорией, полагают, что в некоторых вариантах осуществления ингибиторы IL-1β, например, канакинумаб, могут усиливать противоопухолевый иммунный ответ, например, посредством блокирования одной или нескольких функций IL-1b, включая, например, привлечение иммуносупрессивных нейтрофилов в микроокружение опухоли, стимуляции ангиогенеза опухоли и/или содействия метастазированию (Dinarello (2010) Eur. J. Immunol. p. 599-606).

В некоторых вариантах осуществления комбинация, описанная в данном документе, включает ингибитор IL-1β, канакинумаб, или соединение, раскрытое в WO 2002/16436, и ингибитор молекулы контрольных точек иммунного ответа, например, ингибитор PD-1 (например, молекулу антитела к PD-1). IL-1 представляет собой секретируемый плейотропный цитокин, играющий центральную роль в воспалении и иммунном ответе. Повышение уровней IL-1 наблюдается при нескольких клинических ситуациях, в том числе при раке (Apte et al. (2006) Cancer Metastasis Rev. p. 387-408; Dinarello (2010) Eur. J. Immunol. p. 599-606). Уровень IL-1b повышен при раке легкого, раке молочной железы и колоректальном раке (Voronov et al. (2014) Front Physiol. p. 114) и ассоциирован с неблагоприятным прогнозом (Apte et al. (2000) Adv. Exp. Med. Biol. p. 277-88). Не ограничиваясь теорией, полагают, что в некоторых вариантах осуществления секретируемый IL-1b, происходящий из микроокружения опухоли и злокачественных клеток, способствует пролиферации опухолевых клеток, повышает инвазивность и ослабляет противоопухолевый иммунный ответ, частично благодаря привлечению ингибирующих нейтрофилов (Apte et al. (2006) Cancer Metastasis Rev. p. 387-408; Miller et al. (2007) J. Immunol. p. 6933-42). Экспериментальные данные указывают на то, что ингибирование IL-1b приводит к уменьшению опухолевой нагрузки и метастазирования (Voronov et al. (2003) Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. p. 2645-50). Канакинумаб может связывать IL-1b и ингибировать передачу сигнала, опосредованную IL-1. Соответственно, в определенных вариантах осуществления ингибитор IL-1β, например, канакинумаб, усиливает иммуноопосредованный противоопухолевый эффект ингибитора PD-1 (например, молекулы антитела к PD-1) или применяется для его усиления.

В некоторых вариантах осуществления каждый из ингибитора IL-1β, канакинумаба или соединения, раскрытого в WO 2002/16436 и ингибитора молекулы контрольных точек иммунного ответа, например, ингибитора PD-1 (например, молекулы антитела к PD-1), вводят в дозе и/или по временному графику, которые в комбинации позволяют достичь необходимой противоопухолевой активности.

Ингибиторы MDM2

В некоторых вариантах осуществления ингибитор гомолога мышиного двойного микробелка 2 (MDM2) применяют в комбинации с соединениями формулы (I') или формулы (I) или их фармацевтически приемлемыми солью, гидратом, сольватом, пролекарством на их основе, их стереоизомером или таутомером для лечения заболевания, например рака. Гомолог MDM2 человека также известен как HDM2. В некоторых вариантах осуществления ингибитор MDM2, описанный в данном документе, также известен как ингибитор HDM2. В некоторых вариантах осуществления ингибитор MDM2 выбран из HDM201 или CGM097.

В одном варианте осуществления ингибитор MDM2 включает (S)-1-(4-хлорфенил)-7-изопропокси-6-метокси-2-(4-(метил(((1r,4S)-4-(4-метил-3-оксопиперазин-1-ил)циклогексил)метил)амино)фенил)-1,2-дигидроизохинолин-3(4H)-он (также известен как CGM097) или соединение, раскрытое в публикации согласно PCT № WO 2011/076786, для лечения нарушения, например, нарушения, описанного в данном документе). В одном варианте осуществления терапевтическое средство, раскрытое в данном документе, применяют в комбинации с CGM097.

В одном варианте осуществления ингибитор MDM2 предусматривает взаимодействие ингибитора p53 и/или p53/Mdm2. В одном варианте осуществления ингибитор MDM2 включает (S)-5-(5-хлор-1-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)-6-(4-хлорфенил)-2-(2,4-диметоксипиримидин-5-ил)-1-изопропил-5,6-дигидропирроло[3,4-d]имидазол-4(1H)-он (также известен как HDM201) или соединение, раскрытое в публикации согласно PCT № WO2013/111105, для лечения нарушения, например, нарушения, описанного в данном документе. В одном варианте осуществления терапевтическое средство, раскрытое в данном документе, применяют в комбинации с HDM201. В некоторых вариантах осуществления HDM201 вводят перорально.

В одном варианте осуществления комбинация, раскрытая в данном документе, является подходящей для лечения рака in vivo. Например, комбинация может использоваться для подавления роста раковых опухолей. Комбинацию также можно применять в комбинации с одним или несколькими из следующего: средства лечения, представляющие собой стандарт оказания медицинской помощи (например, в отношении видов рака или инфекционных нарушений), вакцина (например, терапевтическая противораковая вакцина), терапия на основе клеток, лучевая терапия, хирургия или любое другое терапевтическое средство или способ лечения для лечения нарушения, описанного в данном документе. Например, для достижения антиген-специфического усиления иммунитета комбинацию можно вводить вместе с антигеном, представляющим интерес.

ПРИМЕРЫ

Изобретение дополнительно проиллюстрировано с помощью следующих примеров и схем синтеза, которые не следует истолковывать как ограничение объема или сущности настоящего изобретения конкретными процедурами, описанными в данном документе. Следует понимать, что примеры предоставлены для иллюстрации определенных вариантов осуществления, и что это не накладывает каких-либо ограничений на объем изобретения. Кроме того понятно, что можно прибегнуть к различным другим вариантам осуществления, модификациям и их эквивалентам, о которых смогут предположить специалисты в данной области техники, не отступая от сущности настоящего изобретения и/или объема прилагаемой формулы изобретения.

Соединения по настоящему изобретению можно получать с помощью способов, известных в области органического синтеза. Во всех способах подразумевается, что при необходимости можно применять защитные группы для неустойчивых или реакционноспособных групп в соответствии с общими принципами химии. Защитные группы обрабатываются в соответствии со стандартными методами органического синтеза (T. W. Green and P. G. M. Wuts (1999) Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd edition, John Wiley & Sons). Эти группы удаляют на подходящей стадии синтеза соединения с использованием способов, очевидных для специалистов в данной области техники.

Аналитические методы, материалы и приборы

Если не указано иное, реагенты и растворители использовали в том виде, в котором их получали от поставщиков. Спектры протонного ядерного магнитного резонанса (ЯМР) получали либо на спектрометре Bruker Avance, либо на спектрометре Varian Oxford 400 МГц, если не указано иное. Спектры приведены в ppm (δ), а константы взаимодействия, J, приведены в герцах. В качестве внутреннего стандарта использовали тетраметилсилан (ТМС). Химические сдвиги приведены в ppm относительно диметилсульфоксида (δ 2,50), метанола (δ 3,31), хлороформа (δ 7,26) или другого растворителя, указанного в данных ЯМР-спектра. Небольшое количество сухого образца (2-5 мг) растворяли в подходящем дейтерированном растворителе (1 мл). Химические названия генерировали с применением ChemBioDraw Ultra v14 от CambridgeSoft.

Масс-спектры (МС с электрораспылительной ионизацией) снимали, используя Waters System (Acquity UPLC и масс-спектрометр Micromass ZQ) или Agilent-1260 Infinity (6120 Quadrupole); все указанные массы представляют собой отношение масса/заряд протонированных исходных ионов, если не указано иное. Образец растворяли в приобретаемом растворителе, таком как MeCN, DMSO или MeOH, и вводили непосредственно в колонку с применением устройства для автоматической подачи образцов.

Сокращения, используемые в следующих примерах и других разделах:

AIBN азо-бис-изобутиронитрил

водн. водный

Bn бензил

Br широкий

d дублет

DCE 1,2-дихлорэтан

DCM дихлорметан

dd дублет дублетов

ddd дублет дублета дублетов

DIPEA N, N-диизопропилэтиламин

DPPA дифенилфосфорилазид

DMF N, N-диметилформамид

DMSO диметилсульфоксид

dq дублет квартетов

dt дублет триплетов

dtd дублет триплета дублетов

EC₅₀ полумаксимальная эффективная концентрация (относительная)

Et этил

Et₂O диэтиловый эфир

EtOAc этилацетат

EtOH этанол или этиловый спирт

Et₃N триэтиламин

экв. эквиваленты

ч. час

hept гептет

HPLC высокоэффективная жидкостная хроматография

HRMS высокорезонансная масс-спектрометрия

г грамм

i-Pr изопропил

i-PrOH изопропанол или изопропиловый спирт

i-Pr₂NEt N, N-диизопропилэтиламин

LCMS жидкостная хроматография с масс-спектрометрией

LiAlH₄ алюмогидрид лития

MeCN ацетонитрил

MeOH метанол

m мультиплет

М молярный

Me метил

MeCN ацетонитрил

мг миллиграмм

МГц мегагерц

мин. минуты

мл миллилитр

ммоль миллимоль

MS масс-спектрометрия

MTBE метил-трет-бутиловый эфир

NaBH(OAc)₃ триацетоксиборогидрид натрия

NBS N-бромсукцинимид

ЯМР ядерный магнитный резонанс

NMP N-метил-2-пирролидон

PhMe толуол

q квартет

quint квинтет

quintd квинтет дублетов

к. т. комнатная температура

Rt время удерживания

RuPhos 2-дициклогексилфосфино-2',6'-диизопропоксибифенил

RuPhos Pd G2 хлор-(2-дициклогексилфосфино-2',6'-диизопропокси-1,1'-

бифенил)-[2-(2'-амино-1,1'-бифенил)]палладий(II)

s синглет

насыщ. насыщенный

SFC сверхкритическая флюидная хроматография

SPA сцинтилляционный анализ сближения

t-Bu трет-бутил

t триплет

t-BuONa трет-бутоксид натрия

tdd триплет дублета дублетов

TEA триэтиламин

TFA трифторуксусная кислота

TFE 2,2,2-трифторэтанол

THF тетрагидрофуран

TMP 2,2,6,6-тетраметилпиперидин

ttd триплет триплета дублетов

UPLC сверхэффективная жидкостная хроматография

Пример 1. Рацемическая соль HC(O)OH и транс-3-(5-(метил-(2-(метиламино)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-диона (I-9)

Стадия 1. 3-(5-Йод-1-оксо-изоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион (1-2a)

В трехгорлую круглодонную колбу объемом 3 л, которую продували азотом и удерживали в инертной атмосфере азота, помещали метил-4-йод-2-метилбензоат (1-1a, 170 г, 616 ммоль), MeCN (1,0 л), AIBN (10,1 г, 61,5 ммоль) и NBS (131,56 г, 739,18 ммоль). Полученный раствор перемешивали в течение ночи при 80°C. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и твердые вещества отфильтровывали. Затем полученную смесь концентрировали до сухого состояния. Неочищенный материал очищали с помощью хроматографии на силикагеле с элюированием от 0% до 10% EtOAc/петролейный эфир и собранные фракции концентрировали при пониженном давлении с получением 1-2a (50 г, 141 ммоль, выход 23%) в виде белого твердого вещества. ¹H ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆) δ 8,04-8,01 (m, 1H), 7,88-7,81 (m, 1H), 7,67-7,59 (m, 1H), 4,96 (s, 2H), 3,87 (s, 3H).

Стадия 2. 3-(5-Йод-1-оксо-изоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион (1-4a)

В трехгорлую круглодонную колбу объемом 1 л загружали соединение 1-2a (50 г, 141 ммоль), соль CF₃CO₂H и 3-аминопиперидин-2,6-диона (1-3a, 34,18 г, 141,2 ммоль), DMF (500 мл) и Et₃N (42,4 г, 419 ммоль) и полученный раствор перемешивали в течение 48 ч. при 60°C. Затем реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и гасили путем добавления 500 мл смеси вода/лед. Значение pH раствора доводили до 5 с помощью 1 М водн. HCl. Полученные твердые вещества собирали посредством фильтрации, промывали с помощью 3 × 500 мл EtOAc и высушивали в вакууме с получением соединения 1-4a (13 г, 35 ммоль, выход 25%) в виде серого твердого вещества. [M+H]⁺ = 371,0. ¹H ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆) δ 11,00 (s, 1H), 8,06 (s, 1H), 7,90 (d, J=7,8 Гц, 1H), 7,52 (d, J=7,8 Гц, 1H), 5,14-5,08 (m, 1H), 4,47-4,28 (m, 2H), 2,97-2,85 (m, 1H), 2,73-2,01 (m, 2H), 1,98-1,20 (m, 1H).

Стадия 3. Рацемическая соль HC(O)OH и транс-3-(5-(метил-(2-(метиламино)циклогексил)амино)-1-оксо-изоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-диона (I-9)

К соединению 1-4a (60 мг, 0,16 ммоль), CuI (9 мг, 0,05 ммоль) и Cs₂CO₃ (106 мг, 0,324 ммоль) в атмосфере азота добавляли DMF (4 мл) и рацемический транс--N1,N2-диметилциклогексан-1,2-диамин (1-5a, 132 мг, 0,928 ммоль) и полученную реакционную смесь перемешивали в течение 48 ч. при комнатной температуре. Затем реакционную смесь разбавляли с помощью MeCN:DCM (об./об. = 2:1), фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный материал очищали с помощью HPLC с обращенной фазой (элюирование с помощью MeCN/H₂O с 0,1% муравьиной кислоты). Фракции, содержащие продукт, объединяли и лиофилизировали с получением формиатной соли соединения I-9 (5,0 мг, 0,011 ммоль, 7%) в виде белого порошка. MS [M+H]⁺ = 385,1. ¹H ЯМР (400 МГц, ацетонитрил-d₃) δ 8,36 (s, 1H), 7,52 (dd, J=8,6, 1,3 Гц, 1H), 7,08 (dd, J=7,2, 2,3 Гц, 1H), 7,03 (dt, J=8,6, 2,4 Гц, 1H), 5,00 (dd, J=13,4, 5,1 Гц, 1H), 4,29 (d, J=16,5 Гц, 1H), 4,19 (d, J=16,4 Гц, 1H), 3,90 (td, J=11,1, 4,0 Гц, 1H), 2,99-2,89 (m, 1H), 2,81 (s, 3H), 2,80-2,66 (m, 2H), 2,44 (s, 3H), 2,42-2,30 (m, 1H), 2,24-2,14 (m, 1H), 2,13-2,03 (m, 1H), 1,84-1,64 (m, 3H), 1,64-1,50 (m, 1H), 1,50-1,20 (m, 3H).

Пример 2. Соль HC(O)OH и 3-(5-(метил((1S,2S)-2-(метиламино)циклогексил)амино)-1-оксо-изоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-диона (I-8)

Стадия 1. Этил-4-бром-2-(хлорметил)бензоат (2-2)

В перемешиваемую суспензию 5-бромфталида (2-1, 1200 г, 5,633 моль) в EtOH (12 л), нагретую до 68-72°C, добавляли по каплям SOCl₂ (2,40 л, 33,0 моль) в течение периода времени, составляющего 7 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении до приблизительно 4 л и затем добавляли воду (5 л) с последующим добавлением MTBE (5 л) и полученную смесь перемешивали в течение 40 мин. Слои разделяли и водный слой экстрагировали с помощью MTBE (1 × 5 л). Объединенные органические слои промывали с помощью 5% водн. NaHCO₃ (5 л), высушивали над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали до сухого состояния с получением соединения 2-2 (1450 г, 5,25 моль, выход 93%) в виде бледно-коричневого твердого вещества. MS [M+Na]⁺ = 298,9. ¹H ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 7,85 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7,72 (d, J=2,0 Гц, 1H), 7,52 (dd, J=8,3, 2,0 Гц, 1H), 5,00 (s, 2H), 4,38 (q, J=7,1 Гц, 2H), 1,40 (t, J=7,1 Гц, 3H).

Стадия 2. 3-(5-Бром-1-оксо-изоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион (2-3)

В перемешиваемую суспензию гидрохлорида 3-аминопиперидин-2,6-диона (1-3a, 596,3 г, 3,623 моль) и

i-Pr₂NEt (2,50 л, 14,3 моль) в DMF (5,0 л) добавляли соединение 2-2 (1000 г, 3,623 ммоль) и полученную реакционную смесь перемешивали при 85-90°C в течение 24 ч. Обеспечивали охлаждение реакционной смеси до комнатной температуры, затем добавляли воду (20 л) и полученную смесь перемешивали в течение 12 ч. Полученный осадок фильтровали и промывали водой (5 л), затем с помощью MeOH (2 л). Неочищенное твердое вещество суспендировали в MeOH (5 л) в течение 1 ч., фильтровали и промывали с помощью MeOH (2 л). Твердое вещество поглощали с помощью EtOAc (10 л) и перемешивали в течение 1 ч. Затем полученную суспензию фильтровали, промывали с помощью EtOAc (5 л) и высушивали при пониженном давлении при 45-50°C с получением соединения 2-3 (740 г, 2,29 моль, выход 63%) в виде грязно-белого твердого вещества. MS [M+H]⁺ = 323,2. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,99 (s, 1H), 7,91-7,88 (m, 1H), 7,72 (dd, J=8,1, 1,6 Гц, 1H), 7,67 (d, J=8,0 Гц, 1H), 5,11 (dd, J=13,3, 5,1 Гц, 1H), 4,47 (d, J=17,7 Гц, 1H), 4,34 (d, J=17,7 Гц, 1H), 2,98-2,83 (m, 1H), 2,65-2,55 (m, 1H), 2,45-2,29 (m, 1H), 2,01 (dtd, J=12,7, 5,3, 2,3 Гц, 1H).

Стадия 3. Соль HC(O)OH и 3-(5-(метил((1S,2S)-2-(метиламино)циклогексил)амино)-1-оксо-изоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-диона (I-8)

К 3-(5-бром-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-диону (2-3, 200 мг, 0,619 ммоль), CuI (35,4 мг, 0,186 ммоль), Cs₂CO₃ (403 мг, 1,24 ммоль) и (1S,2S)-N1,N2-диметилциклогексан-1,2-диамину ((S, S)-1-5a, 132 мг, 0,928 ммоль) в атмосфере азота добавляли DMF (4 мл) и полученную реакционную смесь перемешивали в течение 72 ч. при комнатной температуре. Затем реакционную смесь нагревали до 85°C и перемешивали при данной температуре дополнительно в течение 72 часов. Затем полученную смесь фильтровали, концентрировали и повторно растворяли в DMSO. Полученный раствор в DMSO непосредственно очищали с помощью HPLC с обращенной фазой (элюирование с помощью MeCN/H₂O с 0,1% муравьиной кислоты). Фракции, содержащие продукт, объединяли и лиофилизировали с получением формиатной соли соединения I-8 (14,1 мг, 0,032 ммоль, выход 5%) в виде белого порошка. MS [M+H]⁺ = 385,1. ¹H ЯМР (400 МГц, оксид дейтерия) δ 7,73-7,67 (m, 1H), 7,16-7,10 (m, 2H), 5,12 (dd, J=13,3, 5,3 Гц, 1H), 4,65-4,38 (m, 2H), 3,95 (td, J=11,2, 4,0 Гц, 1H), 3,50 (td, J=11,2, 4,2 Гц, 1H), 3,00-2,83 (m, 2H), 2,89 (s, 3H), 2,71 (s, 3H), 2,57-2,45 (m, 1H), 2,40-2,32 (m, 1H), 2,29-2,22 (m, 1H), 1,94-1,76 (m, 3H), 1,72-1,61 (m, 1H), 1,57-1,44 (m, 1H), 1,43-1,32 (m, 2H).

Пример 3. Соль HC(O)OH и 3-(5-(метил-((1R,2R)-2-(метиламино)циклогексил)амино)-1-оксоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-диона (I-2)

В перемешиваемую суспензию 3-(5-йод-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-диона (1-4a, 60 мг, 0,16 ммоль), CuI (9 мг, 0,05 ммоль), Cs₂CO₃ (106 мг, 0,324 ммоль) и DMF (1 мл) в атмосфере азота добавляли (1R,2R)-N1,N2-диметилциклогексан-1,2-диамин ((R, R)-1-5a, 69 мг, 0,49 ммоль) и полученную реакционную смесь перемешивали в течение 48 ч. при комнатной температуре. Затем реакционную смесь разбавляли смесью MeCN:DCM (об./об. = 3:1), фильтровали и концентрировали до сухого состояния. Полученный неочищенный материал очищали с помощью HPLC с обращенной фазой (элюирование с помощью MeCN/H₂O с 0,1% муравьиной кислоты). Фракции, содержащие требуемый продукт, объединяли и лиофилизировали с получением формиатной соли соединения I-2 (15,1 мг, 0,034 ммоль, выход 21%) в виде белого твердого вещества. MS [M+H]⁺ = 385,3. ¹H ЯМР (400 МГц, оксид дейтерия) δ 8,46 (s, 1H), 7,69 (d, J=7,5 Гц, 1H), 7,20-7,07 (m, 2H), 5,11 (dd, J=13,3, 5,2 Гц, 1H), 4,54 (dd, J=17,3, 4,3 Гц, 1H), 4,44 (dd, J=17,3, 5,2 Гц, 1H), 3,94 (td, J=11,2, 3,9 Гц, 1H), 3,47 (td, J=11,1, 4,1 Гц, 1H), 2,99-2,84 (m, 2H), 2,89 (s, 3H), 2,70 (s, 3H), 2,52 (qd, J=13,0, 5,3 Гц, 1H), 2,39-2,31 (m, 1H), 2,29-2,20 (m, 1H), 2,01-1,74 (m, 3H), 1,72-1,60 (m, 1H), 1,55-1,43 (m, 1H), 1,43-1,31 (m, 2H).

Пример 4. Соль HC(O)OH и 3-(5-(((1S,2S)-2-(бензил(метил)амино)циклогексил)(метил)амино)-1-оксоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-диона (I-6)

В перемешиваемый раствор соединения I-8 (62,3 мг, 0,162 ммоль) и бензальдегида (4-1, 0,10 мл, 0,97 ммоль) в DMF (2 мл) добавляли одной порцией NaBH(OAc)₃ (206 мг, 0,972 ммоль) и полученную реакционную смесь энергично перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Затем реакционную смесь концентрировали до сухого состояния. Полученный неочищенный материал очищали с помощью HPLC с обращенной фазой (элюирование с помощью MeCN/H₂O с 0,1% муравьиной кислоты). Фракции, содержащие требуемый продукт, объединяли и лиофилизировали с получением формиатной соли соединения I-6 (7,1 мг, 0,014 ммоль, выход 8%) в виде белого твердого вещества. MS [M+H]⁺ = 475,4. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,92 (s, 1H), 7,44 (dd, J=8,5, 2,3 Гц, 1H), 7,21-7,10 (m, 3H), 7,10-7,02 (m, 2H), 6,97-6,86 (m, 2H), 5,13-4,89 (m, 1H), 4,29 (dd, J=21,7, 16,6 Гц, 1H), 4,18 (dd, J=16,6, 9,3 Гц, 1H), 3,98-3,88 (m, 1H), 3,56 (d, J=13,2 Гц, 1H), 2,95-2,84 (m, 1H), 2,83 (s, 3H), 2,64-2,53 (m, 1H), 2,42-2,27 (m, 1H), 2,00-1,95 (m, 1H), 1,94 (s, 3H), 1,82-1,65 (m, 3H), 1,59-1,29 (m, 3H), 1,30-1,16 (m, 1H).

Пример 5. Соль HC(O)OH и 3-(5-(((1S,2S)-2-аминоциклогексил)амино)-1-оксоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-диона (I-7)

К 3-(5-бром-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-диону (2-3, 100 мг, 0,309 ммоль), CuI (17,7 мг, 0,093 ммоль), Cs₂CO₃ (202 мг, 0,619 ммоль) и (1S,2S)-циклогексан-1,2-диамину (5-1, 70,7 мг, 0,619 ммоль) в атмосфере азота добавляли DMF (2 мл) и полученную реакционную смесь перемешивали в течение 24 ч. при 70°C. Реакционную смесь разбавляли с помощью MeCN и добавляли муравьиную кислоту (0,05 мл). Затем реакционную смесь фильтровали и концентрировали до сухого состояния. Полученный неочищенный материал очищали с помощью HPLC с обращенной фазой (элюирование с помощью MeCN/H₂O с 0,1% муравьиной кислоты). Фракции, содержащие требуемый продукт, объединяли и лиофилизировали с получением формиатной соли соединения I-7 (43,1 мг, 0,107 ммоль, выход 35%) в виде белого твердого вещества. MS [M+H]⁺ = 357,2. ¹H ЯМР (400 МГц, оксид дейтерия) δ 8,36 (s, 1H), 7,51 (d, J=8,5 Гц, 1H), 6,89-6,70 (m, 2H), 4,99 (dd, J=13,3, 5,2 Гц, 1H), 4,40 (d, J=17,4 Гц, 1H), 4,30 (d, J=17,1 Гц, 1H), 3,53-3,35 (m, 1H), 3,02 (td, J=11,1, 3,8 Гц, 1H), 2,91-2,70 (m, 2H), 2,40 (qd, J=12,9, 5,2 Гц, 1H), 2,19-1,99 (m, 3H), 1,82-1,62 (m, 2H), 1,52-1,37 (m, 1H), 1,35-1,25 (m, 2H), 1,23-1,08 (m, 1H).

Пример 6. Соль HC(O)OH и 3-(5-(((1S,2S)-2-(бензиламино)циклогексил)амино)-1-оксоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-диона (I-3)

В перемешиваемый раствор соединения I-7 (55 мг, 0,14 ммоль) и бензальдегида (4-1, 0,014 мл, 0,14 ммоль) в DMF (1 мл) добавляли NaBH(OAc)₃ (87 мг, 0,41 ммоль) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Затем реакционную смесь гасили с помощью 1 М водн. муравьиной кислоты (0,4 мл) и полученный раствор непосредственно очищали с помощью HPLC с обращенной фазой (элюирование с помощью MeCN/H₂O с 0,1% муравьиной кислоты). Фракции, содержащие требуемый продукт, объединяли и лиофилизировали с получением формиатной соли соединения I-3 (5,4 мг, 0,011 ммоль, выход 8%) в виде белого порошка. MS [M+H]⁺ = 447,2. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆ и 1 капля D₂O) δ 7,42 (d, J=8,9 Гц, 1H), 7,35-7,18 (m, 5H), 6,84-6,63 (m, 2H), 5,05-4,92 (m, 1H), 4,29 (dd, J=16,9, 11,5 Гц, 1H), 4,15 (dd, J=16,9, 7,4 Гц, 1H), 3,85 (dd, J=13,1, 2,6 Гц, 1H), 3,47-3,26 (m, 1H), 2,87 (ddd, J=18,0, 13,6, 5,4 Гц, 1H), 2,72-2,55 (m, 2H), 2,35 (qd, J=13,2, 4,5 Гц, 1H), 2,12-1,90 (m, 3H), 1,78-1,59 (m, 2H), 1,48-1,06 (m, 4H).

Пример 7. Соль HC(O)OH и 3-(5-(((1S,2S)-2-(бензилокси)циклогексил)амино)-1-оксоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-диона (I-4)

В перемешиваемую смесь соединения 2-3 (120 мг, 0,371 ммоль), (1S,2S)-2-(бензилокси)циклогексан-1-амина (7-1, 107 мг, 0,520 ммоль) и катализатора RuPhos Pd G2 (28,8 мг, 0,037 ммоль) в 1,4-диоксане (6 мл) в атмосфере азота добавляли 1 М t-BuONa в THF (0,85 мл, 0,85 ммоль) и полученную реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 80°C. Затем реакционную смесь фильтровали через Celite® и промывали с помощью EtOAc и затем с помощью DCM/i-PrOH. Затем раствор фильтрата концентрировали до сухого состояния и полученный неочищенный материал очищали с помощью HPLC с обращенной фазой (с элюированием смесью MeCN/H₂O с 0,1% муравьиной кислоты). Фракции, содержащие требуемый продукт, объединяли и лиофилизировали с получением соединения I-4 (18 мг, 0,037 ммоль, выход 10%) в виде белого твердого вещества. MS [M+H]⁺ = 448,5. ¹H ЯМР (400 МГц, Ацетонитрил-d₃) δ 8,82 (br s, 1H), 7,54-7,39 (m, 1H), 7,30-7,15 (m, 5H), 6,83-6,62 (m, 2H), 5,13-4,87 (m, 2H), 4,65-4,62 (m, 1H), 4,49-4,45 (m, 1H), 4,29-4,25 (m, 1H), 3,59-3,22 (m, 2H), 3,00-2,68 (m, 2H), 2,50-2,26 (m, 2H), 2,14-2,06 (m, 2H), 1,83-1,65 (m, 2H), 1,48-1,27 (m, 4H).

Пример 8. 3-(5-(((1S,2S)-2-Гидроксициклогексил)амино)-1-оксоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион (I-1)

Раствор соединения I-4 (6 мг, 0,013 ммоль) в EtOH (6 мл) пропускали через H-Cube (25°C, 5 атм., 1 ч., Pd/C, 1 мл/мин). Полученный раствор, содержащий требуемый продукт, концентрировали до сухого состояния. Неочищенный материал очищали с помощью хроматографии на силикагеле с градиентом элюирования от 0% до 100% EtOAc в гептане с получением соединения I-1 (1,4 мг, 3,7 мкмоль, выход 29%) в виде белого твердого вещества. MS [M+H]⁺ = 358,5. ¹H ЯМР (400 МГц, ацетонитрил-d₃) δ 8,65 (br s, 1H), 7,34 (d, J=8,31 Гц, 1H), 6,76-6,49(m, 2H), 5,03-4,71 (m, 2H), 4,24-3,98 (m, 2H), 3,38-3,22 (m, 1H), 3,17-3,01 (m, 1H), 2,63-2,52 (m, 2H), 2,28-2,25 (m, 2H), 1,99-1,92 (m, 3H), 1,63-1,50 (m, 2H), 1,38-1,15 (m, 3H).

Пример 9. Соль HC(O)OH и 3-(5-(((1S,2S)-2-(метиламино)циклогексил)амино)-1-оксоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-диона (I-10)

Стадия 1. 3-(5-(((1S,2S)-2-Аминоциклогексил)амино)-1-оксоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион (I-7)

Объединяли 3-(5-бром-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион (2-3, 2000 мг, 6,19 ммоль), CuI (354 мг, 1,86 ммоль), Cs₂CO₃ (4,03 г, 12,4 ммоль) и (1S,2S)-циклогексан-1,2-диамин (5-1, 1,41 г, 12,4 ммоль) в атмосфере азота и добавляли DMF (25 мл). Полученную смесь перемешивали при 70°C в течение ночи и затем фильтровали через слой Celite®, и концентрировали до сухого состояния. Неочищенный материал очищали с помощью хроматографии на силикагеле с градиентом элюирования от 0 до 100% EtOH (с 1% Et₃N в качестве модификатора) в DCM с получением соединения I-7 (1273 мг, 3,45 ммоль, выход 56%) в виде светло-зеленого твердого вещества. MS [M+H]⁺ = 357,1.

Стадия 2. 3-(5-(((1S,2S)-2-(Бензил(метил)амино)циклогексил)амино)-1-оксоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион (I-11)

К 3-(5-(((1S,2S)-2-аминоциклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-диону (I-7, 100 мг, 0,281 ммоль) и NaBH(OAc)₃ (119 мг, 0,561 ммоль) в TFE (1,0 мл) в атмосфере азота добавляли одной порцией бензальдегид (4-1, 0,086 мл, 0,84 ммоль). Полученную смесь перемешивали при к. т. в течение ночи и затем добавляли формальдегид в H₂O (37 вес. %, 0,031 мл, 0,42 ммоль) с последующим добавлением другой порции NaBH(OAc)₃ (89 мг, 0,42 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при к. т. в течение 30 минут и затем разбавляли с помощью DCM и H₂O. Водную фазу обрабатывали насыщенным водным раствором NaHCO₃ для доведения pH до ~8-9. Полученную смесь экстрагировали с помощью DCM (×3) и объединенные органические экстракты концентрировали до сухого состояния. Неочищенный материал очищали с помощью хроматографии на силикагеле с градиентом элюирования от 0 до 100% EtOAc:EtOH (об./об.= 3:1) в DCM с получением соединения I-11 (26 мг, 0,056 ммоль, выход 20%) в виде белого твердого вещества. MS [M+H]⁺ = 461,5.

Стадия 3. 3-(5-(((1S,2S)-2-(Метиламино)циклогексил)амино)-1-оксоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион (I-10)

К 3-(5-(((1S,2S)-2-(бензил(метил)амино)циклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-диону (I-11, 24 мг, 0,052 ммоль) в уксусной кислоте (6 мкл, 0,1 ммоль) и DMF (1,0 мл) в атмосфере азота добавляли Pd/C (10 вес. %, 10,1 мг, 9,5 мкмоль) с последующим добавлением триэтилсилана (0,025 мл, 0,16 ммоль). Полученную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и затем фильтровали через слой Celite®. Осадок на Celite® промывали с помощью DCM (2 × 5 мл) и фильтрат концентрировали до сухого состояния. Неочищенный материал очищали с помощью HPLC с обращенной фазой (колонка: Xbridge C18 OBD 5 мкм, 30 × 50 мм; условия: вода/ацетонитрил с 5 мМ NH₄OH при 75 мл/мин; вводимый объем 1,5 мл; градиент: от 15 до 40% MeCN за 3,5 мин) с собиранием в пробирки, содержащие ~2 капли муравьиной кислоты, с получением формиатной соли соединения I-10 (2,4 мг, 5,5 мкмоль, выход 11%) в виде белого порошка. MS [M+H]⁺ = 371,1. ¹H ЯМР (400 МГц, оксид дейтерия) δ 8,44 (s, 2H), 7,63 (d, J=8,3 Гц, 1H), 6,96-6,83 (m, 2H), 5,14-5,07 (m, 1H), 4,51 (d, J=17,3 Гц, 1H), 4,41 (d, J=17,3 Гц, 1H), 3,62 (td, J=10,8, 4,2 Гц, 1H), 3,09 (td, J=11,1, 4,0 Гц, 1H), 3,00-2,82 (m, 2H), 2,72 (s, 3H), 2,51 (qd, J=13,0, 5,3 Гц, 1H), 2,37-2,11 (m, 3H), 1,97-1,85 (m, 1H), 1,86-1,72 (m, 1H), 1,59-1,44 (m, 1H), 1,44-1,33 (m, 2H), 1,34-1,19 (m, 1H).

Пример 10. Соль HC(O)OH и 3-(5-(((1S,2S)-2-((циклогексилметил)амино)циклогексил)амино)-1-оксоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-диона (I-12)

В раствор 3-(5-(((1S,2S)-2-аминоциклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-диона (I-7, 100 мг, 0,281 ммоль) в DMF (1,4 мл) добавляли циклогексанкарбальдегид (0,041 мл, 0,34 ммоль). Полученную смесь перемешивали при к. т. в течение 15 минут и затем добавляли триацетоксиборогидрид натрия (0,089 г, 0,42 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при к. т. в течение 1 ч. и затем концентрировали на Celite®. Неочищенный материал очищали с помощью хроматографии на силикагеле с элюированием от 0 до 100% EtOAc:EtOH (об./об. = 3:1, с 1% Et₃N в качестве модификатора) в гептане. Полученный материал дополнительно очищали с помощью HPLC с обращенной фазой (колонка: X-bridge C18 OBD 5 мкм 30 × 50 мм; условия: вода/ацетонитрил с 0,1% муравьиной кислоты при 75 мл/мин; вводимый объем 1,5 мл; градиент: от 10 до 30% MeCN, 3,5 мин. градиента) с получением формиатной соли соединения I-12 (23 мг, 0,041 ммоль, выход 15%) в виде белого твердого вещества. MS [M+H]⁺ = 453,3. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,92 (s, 1H), 8,19 (s, 1H), 7,38 (d, J=8,8 Гц, 1H), 6,77-6,64 (m, 2H), 6,12 (d, J=8,9 Гц, 1H), 5,01 (dd, J=13,2, 5,0 Гц, 1H), 4,26 (dd, J=16,7, 10,0 Гц, 1H), 4,13 (dd, J=16,7, 8,1 Гц, 1H), 3,25-3,17 (m, 1H), 2,89 (ddd, J=17,2, 13,6, 5,5 Гц, 1H), 2,63-2,54 (m, 1H), 2,46-2,26 (m, 4H), 2,01-1,88 (m, 3H), 1,75-1,53 (m, 7H), 1,36-1,03 (m, 8H), 0,90-0,72 (m, 2H).

Пример 11. Соль HC(O)OH и 3-(1-оксо-5-(((1S,2S)-2-(пиперидин-1-ил)циклопентил)амино)изоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-диона (I-14)

Стадия 1. 3-(5-(((1S,2S)-2-Аминоциклопентил)амино)-1-оксоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион (I-13)

Объединяли 3-(5-бром-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион (2-3, 1000 мг, 3,09 ммоль), CuI (177 мг, 0,928 ммоль), Cs₂CO₃ (3025 мг, 9,28 ммоль) и (1S,2S)-циклопентан-1,2-диамин (11-1, 803 мг, 4,64 ммоль) в атмосфере азота и добавляли DMF (12 мл). Полученную смесь перемешивали при 70°C в течение 2 дней и затем концентрировали на Celite®. Неочищенный продукт очищали с помощью хроматографии на силикагеле с градиентом элюирования от 0 до 100% EtOH (с 1% TEA в качестве модификатора) в DCM с получением соединения I-13 (174 мг, 0,508 ммоль, выход 16%) в виде зеленого твердого вещества. MS [M+H]⁺ = 343,1.

Стадия 2. 3-(1-Оксо-5-(((1S,2S)-2-(пиперидин-1-ил)циклопентил)амино)изоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион (I-14)

К 3-(5-(((1S,2S)-2-аминоциклопентил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-диону (I-13, 173 мг, 0,457 ммоль) и NaBH(OAc)₃ (290 мг, 1,37 ммоль) в DMF (1,0 мл) в атмосфере азота добавляли одной порцией глутаральдегид в H₂O (0,10 мл, 0,55 ммоль). Полученную смесь перемешивали при к. т. в течение 5 минут и затем концентрировали до сухого состояния. Неочищенный материал очищали с помощью HPLC с обращенной фазой (колонка: X-bridge C18 OBD, 5 мкм, 30 × 50 мм; условия: вода/ацетонитрил с 0,1% муравьиной кислоты при 75 мл/мин; вводимый объем 1,5 мл; градиент: от 2 до 12% MeCN, 3,5 мин. градиента) с получением формиатной соли соединения I-14 (11,2 мг, 0,025 ммоль, выход 5%) в виде белого порошка. MS [M+H]⁺ = 411,3. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,92 (s, 1H), 8,15 (s, 1H), 7,37 (d, J=8,8 Гц, 1H), 6,72-6,63 (m, 2H), 6,41 (d, J=7,1 Гц, 1H), 5,01 (dd, J=13,3, 5,1 Гц, 1H), 4,27 (dd, J=16,7, 7,4 Гц, 1H), 4,13 (dd, J=16,7, 6,1 Гц, 1H), 3,74-3,65 (m, 1H), 2,89 (ddd, J=18,0, 13,5, 5,4 Гц, 1H), 2,80-2,72 (m, 1H), 2,60 (s, 1H), 2,57-2,42 (Асимметричный сигнал DMSO указывает на неинтергированный 1H), 2,34 (qd, J=13,2, 4,5 Гц, 1H), 2,04-1,89 (m, 2H), 1,89-1,79 (m, 1H), 1,70-1,43 (m, 7H), 1,42-1,29 (m, 3H).

Пример 12. 3-(5-(((1S,2S)-2-(Изобутиламино)циклогексил)амино)-1-оксоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион (I-15)

В раствор 3-(5-(((1S,2S)-2-аминоциклогексил)амино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-диона (I-7, 100 мг, 0,281 ммоль) в DMF (1,4 мл) добавляли изобутиральдегид (0,031 мл, 0,34 ммоль). Полученную смесь перемешивали при к. т. в течение 15 минут и затем добавляли триацетоксиборогидрид натрия (0,089 г, 0,42 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при к. т. в течение 1 ч. и концентрировали на Celite®. Неочищенный материал очищали с помощью хроматографии на силикагеле с градиентом элюирования от 0 до 100% EtOAc:EtOH (об./об. = 3:1, с 1% Et₃N в качестве модификатора) в гептане с получением соединения I-15 (29,9 мг, 0,067 ммоль, выход 24%) в виде белого твердого вещества. MS [M+H]⁺ = 413,3. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,92 (s, 1H), 7,38 (d, J=8,8 Гц, 1H), 6,81-6,63 (m, 2H), 6,12 (d, J=8,8 Гц, 1H), 5,01 (dd, J=13,2, 5,2 Гц, 1H), 4,26 (dd, J=16,7, 9,2 Гц, 1H), 4,13 (dd, J=16,7, 7,8 Гц, 1H), 3,25-3,15 (m, 1H), 2,89 (ddd, J=17,4, 13,6, 5,4 Гц, 1H), 2,58 (ddd, J=17,3, 4,3, 2,2 Гц, 1H), 2,47-2,26 (m, 4H), 2,02-1,90 (m, 3H), 1,72-1,49 (m, 3H), 1,36-1,07 (m, 4H), 0,81 (dd, J=6,6, 5,1 Гц, 6H).

Пример 13. Соль HC(O)OH и 3-(5-(метил-((1S,6S)-6-(метиламино)циклогекс-3-ен-1-ил)амино)-1-оксоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-диона (I-16) и соль HC(O)OH и 3-(5-(метил-((1R,6R)-6-(метиламино)циклогекс-3-ен-1-ил)амино)-1-оксоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-диона (I-17)

Стадия 1. rac-Ди-трет-бутил-((транс)-циклогекс-4-ен-1,2-диил)дикарбамат (13-2)

Добавляли ди-трет-бутил-дикарбонат (1,57 мл, 6,75 ммоль) в смесь rac-(транс)-циклогекс-4-ен-1,2-диаминдигидрохлорида (13-1a и 13-1b, 500 мг, 2,70 ммоль) и Et₃N (2,0 мл, 14 ммоль) в DCM (20 мл). Полученную смесь перемешивали при к. т. в течение 2 дней. Затем реакционный раствор выливали в насыщенный водный раствор NH₄Cl (20 мл). Фазы разделяли и водную фазу экстрагировали с помощью DCM (3 × 20 мл). Объединенные органические фазы промывали солевым раствором, пропускали через колонку для разделения фаз и концентрировали до сухого состояния с получением 13-2 (908 мг, 2,70 ммоль, количественный выход) в виде коричневого бежевого вещества. Продукт переносили на следующую стадию без дополнительной очистки. ¹H ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 5,62-5,52 (m, 2H), 4,87 (s, 2H), 3,66 (s, 2H), 2,48 (d, J=16,7 Гц, 2H), 1,97 (dt, J=15,5, 4,8 Гц, 2H), 1,43 (s, 18H).

Стадия 2. rac-Ди-трет-бутил-((транс)-циклогекс-4-ен-1,2-диил)бис(метилкарбамат) (13-3)

Добавляли LiHMDS (1 М в THF) (4,60 мл, 4,60 ммоль) в раствор ди-трет-бутил-rac-((транс)-циклогекс-4-ен-1,2-диил)дикарбамата (13-2, 575 мг, 1,84 ммоль) в THF (12,0 мл) при 0°C и перемешивали в течение 15 мин. Затем добавляли MeI (0,35 мл, 5,5 ммоль) и обеспечивали нагревание полученной смеси до к. т., и затем ее перемешивали при к. т. в течение 17 ч. Реакционный раствор охлаждали до 0°C, гасили с помощью насыщенного водного раствора NH₄Cl (10 мл) и фазы разделяли. Водную фазу экстрагировали с помощью EtOAc (3 × 10 мл). Объединенные органические фазы промывали солевым раствором, высушивали над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали до сухого состояния. Неочищенный материал очищали с помощью хроматографии на силикагеле с градиентом элюирования от 0 до 60% EtOAc в гептане с получением соединения 13-3 (254 мг, 0,747 ммоль, выход 41%) в виде белого твердого вещества. ¹H ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 5,65-5,50 (m, 2H), 4,44 (s, 1H), 4,22 (s, 1H), 2,77-2,62 (m, 6H), 2,22 (s, 4H), 1,46 (d, J=4,7 Гц, 18H).

Стадия 3. rac-транс-N1,N2-Диметилциклогекс-4-ен-1,2-диамина дигидрохлорид (13-4)

Добавляли 1 М HCl в Et₂O (2,04 мл, 2,04 ммоль) в раствор ди-трет-бутил-((транс)-циклогекс-4-ен-1,2-диил)бис(метилкарбамата) (13-3, 139 мг, 0,408 ммоль) в Et₂O (2 мл). Полученную смесь перемешивали при к. т. в течение 17 ч. Затем добавляли дополнительное количество 1 М HCl в Et₂O (2,0 мл, 2,0 ммоль) и раствор перемешивали при к. т. в течение 24 ч. Смесь концентрировали, добавляли 4 М HCl в диоксане (2,0 мл, 8,0 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при к. т. в течение 5 дней. Реакционную смесь разбавляли с помощью Et₂O и фильтровали. Полученный осадок промывали с помощью Et₂O и высушивали в вакууме при50°C с получением дигидрохлоридной соли соединения 13-4 (83 мг, 0,39 ммоль, выход 96%) в виде белого твердого вещества. MS [M+H]⁺ = 141,1. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 9,32 (s, 4H), 5,67 (d, J=1,6 Гц, 2H), 3,67 (s, 2H), 2,62 (s, 8H), 2,40 (d, J=18,6 Гц, 2H).

Стадия 4. Соль HC(O)OH и 3-(5-(метил-((1S,2S)-6-(метиламино)циклогекс-3-ен-1-ил)амино)-1-оксоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-диона (I-16) и соль HC(O)OH и 3-(5-(метил-((1R,6R)-6-(метиламино)циклогекс-3-ен-1-ил)амино)-1-оксоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-диона (I-17)

Объединяли 3-(5-бром-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион (2-3, 50 мг, 0,155 ммоль), rac-транс-N1,N2-диметилциклогекс-4-ен-1,2-диамин (13-4, 83 мг, 0,39 ммоль), йодид меди(I) (8,8 мг, 0,046 ммоль) и Cs₂CO₃ (202 мг, 0,619 ммоль) и продували с помощью газообразного азота. Добавляли DMF (1 мл) и полученную смесь перемешивали при 70°C в течение 22 ч. Затем реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали на Celite®. Неочищенный материал очищали с помощью хроматографии на силикагеле с градиентом элюирования от 0 до 100% EtOAc/EtOH (об./об. = 3:1, с 1% Et₃N в качестве модификатора) в гептане. Неочищенный материал дополнительно очищали с помощью HPLC с обращенной фазой (колонка: X-bridge C18 OBD 5 мкм 30 × 50 мм; условия: вода/ацетонитрил с 0,1% муравьиной кислоты при 75 мл/мин; вводимый объем 1,5 мл; градиент: от 5 до 20% MeCN, 3,5 мин. градиента) с получением формиатной соли смеси соединения I-16 и соединения I-17 (10,5 мг, 0,023 ммоль, выход 15%) в виде белого твердого вещества. MS [M+H]⁺ = 383,1. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,93 (s, 1H), 8,25 (s, 1H), 7,49 (d, J=8,5 Гц, 1H), 7,06-6,88 (m, 2H), 5,76-5,53 (m, 2H), 5,03 (dd, J=13,3, 5,1 Гц, 1H), 4,30 (d, J=17,8 Гц, 1H), 4,18 (d, J=16,3 Гц, 1H), 3,99 (td, J=10,3, 5,5 Гц, 1H), 3,05-2,95 (m, 1H), 2,90 (ddd, J=17,1, 13,5, 5,3 Гц, 1H), 2,82 (s, 3H), 2,63-2,55 (m, 1H), 2,40-2,22 (m, 5H), 2,16-2,06 (m, 1H), 2,06-1,90 (m, 2H).

Пример 14. Соль HC(O)OH и 3-(4-фтор-5-(метил-((1S,2S)-2-(метиламино)циклогексил)амино)-1-оксоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-диона (I-163)

Стадия 1. 5-Бром-4-фтор-3-гидрокси-изобензофуран-1(3H)-он (14-2)

В перемешиваемый раствор TMP (57 мл, 57 ммоль) в THF (40 мл) в атмосфере азота добавляли по каплям BuLi (2,7 М в гептане, 20,3 мл, 54,7 ммоль) при 0°C и полученную смесь перемешивали в течение 30 мин. при 0°C. Затем реакционную смесь охлаждали до приблизительно -45°C (с применением бани с сухим льдом/MeCN) и добавляли по каплям 4-бром-3-фторбензойную кислоту (14-1, 4,99 г, 22,8 ммоль), растворенную в THF (15 мл), и продолжали перемешивание при -45°C в течение 5 ч. Затем добавляли по каплям DMF (2,65 мл, 34,2 ммоль) и обеспечивали нагревание реакционной смеси до к. т. и ее перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь гасили 3 М водн. раствором HCl (40 мл) при 0°C и экстрагировали с помощью DCM (×3). Объединенные органические фазы высушивали над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали до сухого состояния. Неочищенный продукт очищали с помощью хроматографии на силикагеле с градиентом элюирования от 0 до 100% EtOAc в гептане с получением соединения 14-2 (2,91 г, 11,4 ммоль, выход 50%) в виде бледно-коричневого твердого вещества. MS [M+H]⁺ = 247,0. ¹H ЯМР (400 МГц, Ацетонитрил-d₃) δ 7,90 (dd, J=8,0, 5,8 Гц, 1H), 7,56 (d, J=8,0 Гц, 1H), 6,72 (s, 1H), 5,92 (br s, 1H).

Стадия 2. 3-(5-Бром-4-фтор-1-оксоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион (14-3)

В перемешиваемый раствор соединения 14-2 (2,90 г, 11,7 ммоль) в DMF (20 мл) добавляли соль HCl и 3-аминопиперидин-2,6-диона (1-3a, 2,90 г, 17,6 ммоль) и NaBH(OAc)₃ (6,22 г, 29,3 ммоль) и полученную смесь перемешивали в течение 2 дней при к. т. Реакционную смесь разбавляли с помощью H₂O (50 мл) и охлаждали до 0°C с помощью бани с водой/льдом, что приводило к образованию осадка. Полученную смесь фильтровали и темно-синее твердое вещество промывали с помощью Et₂O (×3). Полученное твердое вещество высушивали в вакуумной печи с получением соединения 14-3 (1,89 г, 5,31 ммоль, выход 45%) в виде серого твердого вещества. MS [M+H]⁺ = 341,1. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 11,02 (s, 1H), 7,88 (dd, J=8,0, 6,0 Гц, 1H), 7,55 (d, J=8,0 Гц, 1H), 5,12 (dd, J=13,3, 5,1 Гц, 1H), 4,62 (d, J=17,6 Гц, 1H), 4,45 (d, J=17,6 Гц, 1H), 2,99-2,85 (m, 1H), 2,66-2,55 (m, 1H), 2,47-2,36 (m, 1H), 2,05-1,96 (m, 1H).

Стадия 3. Соль HC(O)OH и 3-(4-фтор-5-(метил-((1S,2S)-2-(метиламино)циклогексил)амино)-1-оксоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-диона (I-163)

Во флакон, содержащий соединение 14-3 (200 мг, 0,586 ммоль), CuI (33,5 мг, 0,176 ммоль), Cs₂CO₃ (382 мг, 1,17 ммоль) и (1S,2S)-N1,N2-диметилциклогексан-1,2-диамин ((S, S)-1-5a, 167 мг, 1,17 ммоль), в атмосфере азота добавляли DMF (3 мл) и полученную смесь перемешивали в течение ночи при 90°C. Затем добавляли Celite® и реакционную смесь концентрировали до сухого состояния. Неочищенный продукт очищали с помощью HPLC с обращенной фазой (элюирование с помощью MeCN/H₂O с 0,1% муравьиной кислоты). Фракции, содержащие требуемый продукт, объединяли и лиофилизировали с получением формиатной соли соединения I-163 (8,0 мг, 0,017 ммоль, выход 3%) в виде белого твердого вещества. MS [M+H]⁺ = 403,4. ¹H ЯМР (400 МГц, Ацетонитрил-d₃₊1 капля D₂O) δ 8,32 (s, 1H), 7,47 (d, J=8,2 Гц, 1H), 7,20 (t, J=7,9 Гц, 1H), 4,97 (dd, J=13,4, 5,2 Гц, 1H), 4,38 (d, J=16,9 Гц, 1H), 4,32 (d, J=17,0 Гц, 1H), 3,27 (td, J=11,3, 3,9 Гц, 1H), 2,84-2,72 (m, 1H), 2,68 (s, 3H), 2,67-2,62 (m, 1H), 2,57 (s, 3H), 2,36 (qd, J=13,3, 5,0 Гц, 1H), 2,21-2,14 (m, 1H), 2,11-2,02 (m, 1H), 1,76-1,59 (m, 3H), 1,51 (q, J=12,0 Гц, 1H), 1,37-1,25 (m, 1H), 1,23-1,13 (m, 2H).

Пример 15. Соль HC(O)OH и 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил-(3-(метиламино)бицикло[2.2.1]гепт-5-ен-2-ил)амино)изоиндолин-1,3-диона (I-158)

Стадия 1. Дибензил-(rac-транс-бицикло[2.2.1]гепт-5-ен-2,3-диил)дикарбамат (rac-15-2)

В перемешиваемый раствор rac-транс-бицикло[2.2.1]гепт-5-ен-2,3-дикарбоновой кислоты (15-1, 400 мг, 2,20 ммоль) и PhMe (20 мл) в атмосфере азота добавляли последовательно i-Pr₂NEt (0,96 мл, 5,5 ммоль) и DPPA (0,95 мл, 4,4 ммоль) и полученную смесь перемешивали в течение 4 ч. при к. т. Затем добавляли BnOH (0,57 мл, 5,5 ммоль) и продолжали перемешивание при 90°C в течение 12 ч., затем при 100°C в течение 24 ч. Реакционную смесь охлаждали до 0°C, гасили путем медленного добавления 1 М NaOH (6 мл) и обеспечивали ее нагревание до к. т. при перемешивании. Затем реакционную смесь экстрагировали (×3) с помощью EtOAc и объединенные органические фазы высушивали над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали до сухого состояния. Неочищенный продукт очищали с помощью хроматографии на силикагеле с градиентом элюирования от 0 до 100% EtOAc в гептане с получением рацемического соединения 15-2 (356 мг, 0,889 ммоль, выход 41%) в виде белого твердого вещества. MS [M+H]⁺ = 393,4. ¹H ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 7,40-7,29 (m, 10H), 6,41-6,27 (m, 1H), 6,16 (dd, J=5,8, 2,8 Гц, 1H), 5,12-5,05 (m, 4H), 4,72-4,57 (m, 1H), 3,85 (s, 1H), 3,17 (s, 1H), 2,97 (s, 1H), 2,87 (s, 1H), 1,75-1,66 (m, 1H).

Стадия 2. rac-транс-N2,N3-Диметилбицикло[2.2.1]гепт-5-ен-2,3-диамин (rac-15-3)

В перемешиваемый раствор rac-15-2 (264 мг, 0,673 ммоль) в THF (2 мл) в атмосфере азота добавляли по каплям LiAlH₄ в THF (2,0 мл, 4,0 ммоль) при 0°C и полученную смесь перемешивали в течение ночи при к. т. Затем реакционную смесь охлаждали до 0°C, разбавляли с помощью THF (20 мл) и медленно добавляли порциями Na₂SO₄·10H₂O (200 мг × 4). После перемешивания в течение 10 мин. добавляли другую порцию Na₂SO₄·10H₂O (приблизительно 500 мг). Реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин., фильтровали через слой Celite® и концентрировали до сухого состояния. Неочищенный продукт растворяли в THF (5 мл) и добавляли 4 М HCl в диоксане (2 мл). Мгновенно образовывался белый осадок, и его собирали посредством фильтрации, промывали с помощью Et₂O и высушивали в глубоком вакууме с получением rac-15-3 (144 мг, 0,640 ммоль, выход 95%) в виде белого порошка. ¹H ЯМР (400 МГц, оксид дейтерия) δ 6,56 (dd, J=5,8, 3,5 Гц, 1H), 6,41 (dd, J=5,8, 2,7 Гц, 1H), 3,94 (t, J=3,2 Гц, 1H), 3,49-3,40 (m, 1H), 3,38-3,31 (m, 1H), 3,21 (t, J=2,5 Гц, 1H), 2,90 (s, 3H), 2,82 (s, 3H), 1,98 (dq, J=10,8, 2,0 Гц, 1H), 1,88-1,82 (m, 1H).

Стадия 3. Соль HC(O)OH и 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил-(3-(метиламино)бицикло[2.2.1]гепт-5-ен-2-ил)амино)изоиндолин-1,3-диона (I-158)

Перемешивали суспензию 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-фторизоиндолин-1,3-диона (15-4, 220 мг, 0,796 ммоль), rac-15-3 (179 мг, 0,796 ммоль) и DIPEA (0,28 мл, 1,6 ммоль) в NMP (1,5 мл) в течение 3 ч. при 200°C в микроволновой печи. Неочищенный продукт очищали с помощью HPLC с обращенной фазой (элюирование с помощью MeCN/H₂O с 0,1% NH₃ в качестве модификатора) с собиранием фракций в пробирки, содержащие ~1 каплю муравьиной кислоты. Фракции, содержащие требуемый продукт, концентрировали с помощью лиофилизатора с получением формиатной соли I-158 (2,2 мг, 4,7 мкмоль, выход 0,6%) в виде желтого порошка. Соединение получали в виде смеси диастереоизомеров ~5:1 по мостиковому положению. MS [M+H]⁺ = 409,3. ¹H ЯМР (400 МГц, Ацетонитрил-d₃, oсновной диастереоизомер) δ 8,19 (s, 1H), 7,64 (d, J=8,6 Гц, 1H), 7,30 (t, J=2,4 Гц, 1H), 7,13 (dd, J=8,7, 2,5 Гц, 1H), 6,31 (dd, J=5,7, 3,3 Гц, 1H), 6,15 (dd, J=5,7, 2,8 Гц, 1H), 5,02-4,86 (m, 1H), 4,17 (t, J=3,4 Гц, 1H), 3,09 (s, 1H), 3,04 (s, 1H), 2,92-2,89 (m, 3H), 2,86 (s, 3H), 2,74-2,70 (m, 3H), 2,36 (s, 3H), 2,13-2,05 (m, 1H), 1,56 (dd, J=9,2, 2,0 Гц, 1H).

Пример 16. 2-(2,6-Диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил-((1S,2S)-2-(метиламино)циклогексил)амино)изоиндолин-1,3-дион (I-114)

Перемешивали смесь 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-фторизоиндолин-1,3-диона (15-4, 200 мг, 0,724 ммоль), (1S,2S)-N1,N2-диметилциклогексан-1,2-диамина ((S, S)-1-5a, 0,24 мл, 1,5 ммоль) и DIPEA (0,63 мл, 3,6 ммоль) в NMP (3,0 мл) при 180°C в течение 6 ч. в микроволновой печи. Реакционную смесь концентрировали и полученный осадок очищали с помощью HPLC с обращенной фазой с градиентом элюирования от 5 до 100% вода/MeCN с 0,1% TFA в качестве модификатора. Требуемые фракции собирали, нейтрализовали с помощью насыщ. водн. раствора бикарбоната натрия, экстрагировали с помощью DCM и затем дополнительно очищали с помощью хроматографии на силикагеле с градиентом элюирования от 0 до 40% EtOAc:EtOH (об./об. = 3:7, с 2% Et₃N в качестве модификатора) в DCM с получением требуемого продукта I-114 (230 мг, 0,577 ммоль, выход 80%) в виде светло-желтого твердого вещества. MS [M+H]⁺ = 399,6. ¹H ЯМР (400 МГц, Ацетонитрил-d₃) δ 7,63 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7,25 (d, J=2,5 Гц, 1H), 7,09 (dd, J=8,7, 2,5 Гц, 1H), 4,99-4,91 (m, 1H), 2,93 (s, 3H), 2,82-2,55 (m, 4H), 2,29 (s, 3H), 2,23-2,05 (m, 3H), 1,83-1,56 (m, 4H), 1,53-1,06 (m, 3H).

Пример 17. 5-(((1S,2S)-2-Аминоциклогексил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-диона гидрохлорид (I-99)

Стадия 1. трет-Бутил-((1S,2S)-2-(метиламино)циклогексил)карбамат (17-3)

К трет-бутил-((1S,2S)-2-аминоциклогексил)карбамату (17-1, 1,00 г, 4,67 ммоль), (1H-бензо[d][1,2,3]триазол-1-ил)метанолу (17-2, 0,696 г, 4,67 ммоль) и 4 М HCl в диоксане (1,17 мл, 4,67 ммоль) в EtOH (30 мл) добавляли борогидрид натрия (0,353 г, 9,33 ммоль) и полученную смесь перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали и полученный осадок очищали с помощью RP-C18-колоночной хроматографии с обращенной фазой c градиентом элюирования от 5 до 60% MeCN в воде с получением соединения 17-3 (230 мг, 1,03 ммоль, выход 22%) в виде белого твердого вещества. ¹H ЯМР (400 МГц, метиленхлорид-d₂) δ 4,85-4,39 (m, 1H), 3,26-2,87 (m, 1H), 2,27 (s, 3H), 2,13-1,92 (m, 3H), 1,68-1,54 (m, 2H), 1,34 (s, 9H), 1,25-0,92 (m, 4H).

Стадия 2. трет-Бутил-((1S,2S)-2-((2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-1,3-диоксоиндолин-5-ил)(метил)амино)циклогексил)карбамат (17-4)

Перемешивали смесь 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-фтор-изоиндолин-1,3-диона (15-4, 800 мг, 2,90 ммоль), трет-бутил-((1S,2S)-2-(метиламино)циклогексил)карбамата (17-3, 1323 мг, 5,79 ммоль) и DIPEA (4,05 мл, 23,2 ммоль) в NMP (3,5 мл) при 170°C в течение 4 ч. в микроволновой печи. Реакционную смесь концентрировали и полученный осадок очищали с помощью RP-C18-колоночной хроматографии с обращенной фазой c градиентом элюирования от 5 до 100% MeCN в воде с 0,1% TFA в качестве модификатора. Фракции, содержащие требуемый продукт, собирали и нейтрализовали с помощью насыщ. водн. раствора бикарбоната натрия. Смесь экстрагировали с помощью DCM и затем дополнительно очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с градиентом элюирования от 0 до 100% EtOAc/гептан с получением требуемого продукта 17-4 (160 мг, 0,348 ммоль, выход 12%) в виде желтого твердого вещества. MS [M+H]⁺ = 485,7. ¹H ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 7,90 (d, J=5,7 Гц, 1H), 7,53 (d, J=8,7 Гц, 1H), 7,07 (d, J=2,4 Гц, 1H), 6,77 (dd, J=8,6, 2,5 Гц, 1H), 4,83 (dt, J=12,4, 5,4 Гц, 1H), 4,24 (d, J=8,8 Гц, 1H), 3,69-3,39 (m, 2H), 2,80 (s, 3H), 2,77-2,56 (m, 3H), 2,12-1,97 (m, 2H), 1,84-1,58 (m, 4H), 1,57-1,35 (m, 1H), 1,14 (s, 9H).

Стадия 3. 5-(((1S,2S)-2-Аминоциклогексил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-диона гидрохлорид (I-99)

К трет-бутил-((1S,2S)-2-((2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-1,3-диоксоизоиндолин-5-ил)(метил)амино)циклогексил)карбамату (17-4, 160 мг, 0,330 ммоль) в DCE (4 мл) добавляли 4 М HCl в диоксане (1,65 мл, 6,60 ммоль) и полученную смесь перемешивали при 40°C в течение 30 мин. Реакционную смесь концентрировали до сухого состояния с получением гидрохлоридной соли соединения I-99 (150 мг, 0,31 ммоль, выход 94%) в виде светло-желтого твердого вещества. MS [M+H]⁺ = 385,5. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 11,08 (s, 1H), 8,09-7,82 (m, 3H), 7,71 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7,37 (d, J=2,4 Гц, 1H), 7,20 (dd, J=8,8, 2,4 Гц, 1H), 5,08 (dd, J=13,0, 5,4 Гц, 1H), 3,94 (m, 1H), 3,83-3,63 (m, 1H), 2,90 (m, 4H), 2,65-1,95 (m, 3H), 1,81-1,28 (m, 7H).

Пример 18. 2-(2,6-Диоксопиперидин-3-ил)-5-(((1S,2S)-2-(этиламино)циклогексил)(метил)амино)изоиндолин-1,3-дион (I-104)

Добавляли уксусную кислоту (следовое количество) в смесь 5-(((1S,2S)-2-аминоциклогексил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-диона гидрохлорида (I-99, 30 мг, 0,066 ммоль) и ацетальдегида (18-1, 4,33 мг, 0,098 ммоль) в TFE (1 мл) и DCM (1 мл). Затем добавляли триацетоксиборогидрид натрия (27,8 мг, 0,131 ммоль) и полученную смесь перемешивали в течение ночи при к. т. Добавляли дополнительное количество ацетальдегида (18-1, 20 экв.) и триацетоксиборогидрида натрия (10 экв.) и продолжали перемешивание в течение 1 дня. Реакционную смесь концентрировали и полученный осадок разделяли между DCM и насыщ. водн. раствором хлорида аммония. Водную фазу экстрагировали с помощью DCM (×3) и объединенные органические фазы высушивали над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с градиентом элюирования от 0 до 30% EtOAc:EtOH (об./об. = 3:7, с 2% Et₃N в качестве модификатора) в DCM с получением требуемого продукта I-104 (13 мг, 0,03 ммоль, выход 46%) в виде желтого твердого вещества. MS [M+H]⁺= 413,5. ¹H ЯМР (400 МГц, Ацетонитрил-d₃) δ 7,64 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,26 (d, J=2,6 Гц, 1H), 7,10 (dd, J=8,8, 2,5 Гц, 1H), 5,19-4,72 (m, 1H), 3,86-3,64 (m, 1H), 2,93 (s, 3H), 2,83-2,61 (m, 5H), 2,49 (m, 1H), 1,83-1,55 (m, 5H), 1,46-1,42 (m, 1H), 1,37-1,08 (m, 3H), 0,96 (t, J=7,1 Гц, 3H).

Пример 19. 2-(2,6-Диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил-((1S,2S)-2-((пиридин-3-илметил)амино)циклогексил)амино)изоиндолин-1,3-дион (I-143)

Добавляли триацетоксиборогидрид натрия (27,8 мг, 0,131 ммоль) в смесь 5-(((1S,2S)-2-аминоциклогексил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-диона гидрохлорида (I-99, 30 мг, 0,066 ммоль), уксусной кислоты (следовое количество) и никотинальдегида (19-1, 10,5 мг, 0,098 ммоль) в TFE (1 мл) и DCM (1 мл). Полученную смесь перемешивали в течение ночи при к. т. Добавляли дополнительное количество никотинальдегида (18-1, 3 экв.) и триацетоксиборогидрида натрия (5 экв.) и продолжали перемешивание в течение 1 дня. Реакционную смесь концентрировали и полученный осадок разделяли между DCM и насыщ. водн. раствором хлорида аммония. Водную фазу экстрагировали с помощью DCM (×3) и объединенные органические фазы высушивали над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с градиентом элюирования от 0 до 40% EtOAc: EtOH (об./об. = 3:7, с 2% Et₃N в качестве модификатора) в DCM с получением требуемого продукта I-143 (8 мг, 0,017 ммоль, выход 25%) в виде светло-желтого твердого вещества. MS [M+H]⁺ = 476,4. ¹H ЯМР (400 МГц, Ацетонитрил-d₃) δ 8,89 (s, 1H), 8,47-8,32 (m, 2H), 7,63 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,58 (dt, J=7,8, 2,0 Гц, 1H), 7,27 (d, J=2,5 Гц, 1H), 7,24 (dd, J=7,8, 4,7 Гц, 1H), 7,10 (dd, J=8,8, 2,4 Гц, 1H), 5,03-4,88 (m, 1H), 3,89-3,73 (m, 2H), 3,67 (d, J=13,7 Гц, 1H), 2,83 (s, 3H), 2,80-2,65 (m, 4H), 1,83-1,68 (m, 3H), 1,66-1,38 (m, 3H), 1,29-1,17 (m, 3H).

Пример 20. ((1S,2S)-2-((2-(2,6-Диоксопиперидин-3-ил)-1,3-диоксоиндолин-5-ил)(метил)амино)циклогексил)глицин (I-148)

К 5-(((1S,2S)-2-аминоциклогексил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-диона гидрохлориду (I-99, 30 мг, 0,066 ммоль) и 2-оксоуксусной кислоте (20-1, 120 мг, 1,32 ммоль) в TFE (1 мл) добавляли триацетоксиборогидрид натрия (139 мг, 0,65 ммоль) и полученную смесь перемешивали в течение ночи при к. т. Реакционную смесь концентрировали и неочищенный продукт очищали с помощью RP-C18-колоночной хроматографии с обращенной фазой c градиентом элюирования от 5 до 60% MeCN в воде с получением требуемого продукта I-148 (1,4 мг, 0,003 ммоль, выход 4,6%) в виде светло-желтого твердого вещества. MS [M+H]⁺ = 443,5. ¹H ЯМР (400 МГц, Ацетонитрил-d₃) δ 7,77 (d, J=8,5 Гц, 1H), 7,45 (d, J=2,6 Гц, 1H), 7,20 (dd, J=8,8, 2,5 Гц, 1H), 5,08-4,95 (m, 1H), 4,11-3,89 (m, 1H), 3,47-3,26 (m, 3H), 3,15-2,77 (m, 5H), 2,25-1,83 (m, 4H), 1,67-1,58 (m, 3H), 1,28-1,08 (m, 3H),

Пример 21. 5-(((1S,2S)-2-(Бензиламино)циклогексил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-дион (I-133).

Добавляли триацетоксиборогидрид натрия (42 мг, 0,20 ммоль) в смесь 5-(((1S,2S)-2-аминоциклогексил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-диона гидрохлорида (I-99, 30 мг, 0,066 ммоль), уксусной кислоты (следовое количество) и бензальдегида (4-1, 10 мг, 0,098 ммоль) в TFE (1 мл) и DCM (1 мл). Полученную реакционную смесь перемешивали в течение ночи при к. т. Добавляли дополнительное количество бензальдегида (4-1, 3 экв.) и триацетоксиборогидрида натрия (5 экв.) и продолжали перемешивание в течение 1 дня. Реакционную смесь концентрировали и полученный осадок разделяли между DCM и насыщ. водн. раствором хлорида аммония. Водную фазу экстрагировали с помощью DCM (×3) и объединенные органические фазы высушивали над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с градиентом элюирования от 0 до 30% EtOAc:EtOH (об./об. = 3:7, с 2% Et₃N в качестве модификатора) в DCM с получением требуемого продукта I-133 (3 мг, 0,007 ммоль, выход 10%) в виде светло-желтого твердого вещества. MS [M+H]⁺ = 475,4. ¹H ЯМР (400 МГц, Ацетонитрил-d₃) δ 8,88 (s, 1H), 7,64 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7,37-7,20 (m, 6H), 7,13 (dd, J=8,4, 2,5 Гц, 1H), 5,16-4,84 (m, 1H), 3,88-3,77 (m, 2H), 3,67 (d, J=13,3 Гц, 1H), 2,84 (s, 3H), 2,80-2,68 (m, 4H), 1,88-1,72 (m, 3H), 1,67-1,39 (m, 3H), 1,30-1,17 (m, 3H).

Пример 22. 2-(2,6-Диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил-((1S,2S)-2-(((1-(трифторметил)циклопропил)метил)амино)циклогексил)амино)изоиндолин-1,3-дион (I-138)

Добавляли триацетоксиборогидрид натрия (42 мг, 0,20 ммоль) в смесь 5-(((1S,2S)-2-аминоциклогексил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-диона гидрохлорида (I-99, 30 мг, 0,066 ммоль), уксусной кислоты (следовое количество) и 1-(трифторметил)циклопропан-1-карбальдегида (22-1, 14 мг, 0,098 ммоль) в TFE (1 мл) и DCM (1 мл). Полученную реакционную смесь перемешивали в течение ночи при к. т. Добавляли дополнительное количество 1-(трифторметил)циклопропан-1-карбальдегида (22-1, 3 экв.) и триацетоксиборогидрида натрия (5 экв.) и продолжали перемешивание в течение 1 дня. Реакционную смесь концентрировали и полученный осадок разделяли между DCM и насыщ. водн. раствором хлорида аммония. Водную фазу экстрагировали с помощью DCM (×3) и объединенные органические фазы высушивали над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с градиентом элюирования от 0 до 20% EtOAc:EtOH (об./об. = 3:7, с 2% Et₃N в качестве модификатора) в DCM с получением требуемого продукта I-138 (4 мг, 0,008 ммоль, выход 12%) в виде светло-желтого твердого вещества. MS [M+H]⁺ = 507,2. ¹H ЯМР (400 МГц, Ацетонитрил-d₃) δ 7,63 (d, J=8,7 Гц, 1H), 7,26 (d, J=2,4 Гц, 1H), 7,09 (dd, J=8,5, 2,6 Гц, 1H), 5,10-4,89 (m, 1H), 3,87-3,52 (m, 1H), 2,93 (s, 3H), 2,92-2,77 (m, 3H), 2,77-2,64 (m, 3H), 1,84-1,56 (m, 6H), 1,53-1,26 (m, 4H), 1,21-1,05 (m, 3H)

Пример 23. 2-(2,6-Диоксопиперидин-3-ил)-5-фтор-6-(метил-((1S,2S)-2-(метиламино)циклогексил)амино)изоиндолин-1,3-диона гидрохлорид (I-168)

Стадия 1. 2-(2,6-Диоксопиперидин-3-ил)-5,6-дифтор-изоиндолин-1,3-дион (23-2)

Перемешивали смесь 5,6-дифтор-изобензофуран-1,3-диона (23-1, 1,00 г, 5,43 ммоль), соли HCl и 3-аминопиперидин-2,6-диона (1-3a, 0,939 г, 5,70 ммоль) и ацетата калия (0,586 г, 5,98 ммоль) в уксусной кислоте (20 мл) при 90°C в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до к. т., концентрировали и полученный осадок перемешивали в 20 мл воды в течение 3 ч. Образованный осадок собирали с получением неочищенного продукта 23-2 (1,5 г, 5,1 ммоль, выход 94%) в виде темно-коричневого твердого вещества, которое переносили на следующую стадию без очистки. MS [M-H]⁻ = 293,3.¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 11,15 (s, 1H), 8,16 (t, J=7,7 Гц, 2H), 5,17 (dd, J=12,8, 5,4 Гц, 1H), 2,89 (ddd, J=17,1, 13,9, 5,5 Гц, 1H), 2,70-2,52 (m, 1H), 2,07 (dtd, J=13,1, 5,4, 2,3 Гц, 1H).

Стадия 2. трет-Бутил-метил-((1S,2S)-2-(метиламино)циклогексил)карбамат (23-3)

Добавляли (1S,2S)-N1,N2-диметилциклогексан-1,2-диамин ((S, S)-1-5a, 1 г, 7,03 ммоль) в конц. раствор HCl (0,58 мл, 7,03 ммоль) и MeOH (15 мл) при 0°C. Затем полученный раствор нагревали до комнатной температуры и добавляли по каплям Boc-ангидрид (1,63 мл, 7,03 ммоль) в MeOH (15 мл) в течение 20 мин. Реакционную смесь перемешивали в течение ночи, концентрировали и затем обрабатывали с помощью 1 М водн. NaOH для доведения pH до 8-9. Затем полученную смесь экстрагировали с помощью DCM (3 × 30 мл) и объединенные органические фазы промывали солевым раствором, высушивали над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали с помощью RP-C18-колоночной хроматографии с обращенной фазой с градиентом элюирования от 10 до 80% MeCN в воде с 0,1% NH₄OH в качестве модификатора с получением требуемого продукта 23-3 (665 мг, 2,74 ммоль, выход 39%) в виде белого твердого вещества. MS [M+H]⁺ = 243,2.

Стадия 3. трет-Бутил-((1S,2S)-2-((2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-6-фтор-1,3-диоксоиндолин-5-ил)(метил)амино)циклогексил)(метил)карбамат (23-4)

Перемешивали смесь 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5,6-дифтор-изоиндолин-1,3-диона (23-2, 100 мг, 0,340 ммоль), трет-бутилметил-((1S,2S)-2-(метиламино)циклогексил)карбамата (23-3, 165 мг, 0,680 ммоль) и DIPEA (0,30 мл, 1,7 ммоль) в i-PrOH (3 мл) при 150°C в течение 2 ч. в микроволновой печи. Реакционную смесь концентрировали и неочищенный остаток очищали с помощью RP-C18-колоночной хроматографии с обращенной фазой c градиентом элюирования от 5 до 100% MeCN в воде с 0,1% TFA в качестве модификатора. Фракции, содержащие требуемый продукт, собирали и нейтрализовали с помощью насыщ. водн. раствора бикарбоната натрия. Полученную смесь экстрагировали с помощью DCM и затем дополнительно очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с градиентом элюирования от 0 до 100% EtOAc в гептане с получением требуемого продукта 23-4 (25 мг, 0,048 ммоль, 14%) в виде светло-желтого твердого вещества. MS [M+H]⁺ = 517,5. ¹H ЯМР (400 МГц, Ацетонитрил-d₃) δ 8,85 (s, 1H), 7,44 (d, J=12,1 Гц, 1H), 7,23 (dd, J=7,5, 2,9 Гц, 1H), 4,91 (dd, J=12,4, 5,2 Гц, 1H), 4,41-3,95 (m, 1H), 3,60 (br, 1H), 2,88 (s, 3H), 2,77-2,55 (m, 4H), 2,29-2,19 (m, 2H), 2,15 (s, 3H), 1,66-1,80 (m, 4H), 1,64-1,48 (m, 2H), 1,24 (s, 9H).

Стадия 4. 2-(2,6-Диоксопиперидин-3-ил)-5-фтор-6-(метил-((1S,2S)-2-

(метиламино)циклогексил)амино)изоиндолин-1,3-диона гидрохлорид (I-168)

К трет-бутил-((1S,2S)-2-((2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-6-фтор-1,3-диоксоизоиндолин-5-ил)(метил)амино)циклогексил)(метил) карбамату (23-4, 24 мг, 0,046 ммоль) в DCE (1 мл) добавляли 4 М HCl в диоксане (0,23 мл, 0,93 ммоль) и полученную смесь перемешивали при 40°C в течение 30 мин. Затем реакционную смесь концентрировали до сухого состояния с получением гидрохлоридной соли соединения I-168 (18 мг, 0,037 ммоль, 81%) в виде светло-желтого твердого вещества. MS [M+H]⁺ = 417,4. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 11,11 (s, 1H), 8,47 (s, 1H), 8,26 (s, 1H), 7,82 (d, J=11,9 Гц, 1H), 7,58 (d, J=7,5 Гц, 1H), 5,12 (dd, J=12,8, 5,5 Гц, 1H), 3,76-3,60 (m, 1H), 2,87 (s, 3H), 2,77-2,65 (m, 3H) 2,56 (s, 3H), 2,30-2,10 (m, 2H), 2,10-1,97 (m, 1H), 1,68-1,48 (m, 4H), 1,31 (m, 3H).

Пример 24. 5-(((1S,2S)-2-(диметиламино)циклогексил)(метил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-дион (I-96)

Добавляли формальдегид в H₂O (37 вес. %, 90 мкл, 1,3 ммоль) в смесь 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил-((1S,2S)-2-(метиламино)циклогексил)амино)-изоиндолин-1,3-диона (I-114, 25 мг, 0,063 ммоль) и уксусной кислоты (4 мкл, 0,06 ммоль) в DCE (2 мл) с последующим добавлением триацетоксиборогидрида натрия (200 мг, 0,94 ммоль). Полученную смесь перемешивали в течение ночи при к. т. и затем концентрировали до сухого состояния. Неочищенный остаток разделяли между DCM и насыщ. водн. раствором хлорида аммония. Водную фазу экстрагировали с помощью DCM (×3) и объединенные органические фазы высушивали над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с градиентом элюирования от 0 до 30% EtOAc:EtOH (об./об. = 3:7, с 2% Et₃N в качестве модификатора) в DCM с получением требуемого продукта I-96 (19 мг, 0,043 ммоль, выход 69%) в виде светло-желтого твердого вещества. MS [M+H]⁺ = 413,5. ¹H ЯМР (400 МГц, Ацетонитрил-d₃) δ 8,89 (s, 1H), 7,62 (d, J=8,7 Гц, 1H), 7,19 (d, J=2,4 Гц, 1H), 7,03 (dd, J=8,8, 2,5 Гц, 1H), 5,05-4,86 (m, 1H), 3,87 (td, J=11,0, 3,8 Гц, 1H), 2,90 (s, 3H), 2,82-2,65 (m, 4H), 2,17 (s, 3H), 2,13 (s, 3H), 1,95-1,72 (m, 4H), 1,67-1,55 (m, 1H), 1,52-1,41 (m, 1H), 1,38-1,20 (m, 3H).

Пример 25. 5-(((1S,2S)-2-(Диметиламино)циклогексил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-дион (I-153)

Стадия 1. трет-Бутил-((1S,2S)-2-(диметиламино)циклогексил)карбамат (25-1)

К трет-бутил-((1S,2S)-2-аминоциклогексил)карбамату (17-1, 500 мг, 2,33 ммоль) в EtOH (30 мл) добавляли (1H-бензо[d][1,2,3]триазол-1-ил)метанол (17-2, 750 мг, 4,67 ммоль) и полученную смесь перемешивали в течение 3 ч. Затем добавляли борогидрид натрия (265 мг, 7,00 ммоль) и продолжали перемешивание в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали и затем гасили водой. Водную фазу экстрагировали с помощью DCM (×3) и объединенные органические фазы высушивали над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Неочищенный остаток очищали с помощью RP-C18-колоночной хроматографии с обращенной фазой с градиентом элюирования от 10 до 100% MeCN в воде с 0,1% NH₄OH в качестве модификатора с получением продукта 25-1 (250 мг, 1,03 ммоль, выход 44%) в виде белого твердого вещества. MS [M+H]⁺ = 243,2.

Стадия 2. (1S,2S)-N1,N1-Диметилциклогексан-1,2-диамина гидрохлорид (25-2)

К трет-бутил-((1S,2S)-2-(диметиламино)циклогексил)карбамату (25-1, 170 мг, 0,701 ммоль) в DCE (3 мл) добавляли 4 М HCl в диоксане (1,75 мл, 7,01 ммоль) и полученную смесь перемешивали в течение ночи и затем концентрировали с получением неочищенного продукта, который переносили на следующую стадию без очистки.

Стадия 3. 5-(((1S,2S)-2-(Диметиламино)циклогексил)амино)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолин-1,3-дион (I-153)

Перемешивали смесь 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-фтор-изоиндолин-1,3-диона (15-4, 30 мг, 0,11 ммоль), (1S,2S)-N1,N1-диметилциклогексан-1,2-диамина (25-2, 31 мг, 0,22 ммоль) и DIPEA (0,095 мл, 0,54 ммоль) в i-PrOH (1 мл) при 170°C в течение 4 ч. в микроволновой печи. Реакционную смесь концентрировали и полученный осадок очищали с помощью RP-C18-колоночной хроматографии с обращенной фазой c градиентом элюирования от 5 до 100% MeCN в воде с 0,1% TFA в качестве модификатора. Фракции, содержащие требуемый продукт, собирали и нейтрализовали с помощью насыщ. водн. раствора бикарбоната натрия. Полученную смесь экстрагировали с помощью DCM и затем дополнительно очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с градиентом элюирования от 0 до 40% EtOAc:EtOH (об./об. = 3:7, с 2% Et₃N в качестве модификатора) в DCM с получением требуемого продукта I-153 (4 мг, 0,01 ммоль, выход 9%) в виде светло-желтого твердого вещества. MS [M+H]⁺ = 399,4. ¹H ЯМР (400 МГц, Ацетонитрил-d₃) δ 8,88 (s, 1H), 7,56 (d, J=8,3 Гц, 1H), 6,99 (d, J=2,3 Гц, 1H), 6,88 (dd, J=8,4, 2,1 Гц, 1H), 5,80 (d, J=5,2 Гц, 1H), 5,09-4,82 (m, 1H), 3,35-3,28 (m, 1H), 2,86-2,64 (m, 3H), 2,52-2,45 (m, 1H), 2,36-2,27 (m, 1H), 2,22 (s, 6H), 2,14-2,06 (m, 2H), 1,75-1,68 (m, 1H), 1,50-1,26 (m, 3H), 1,26-1,09 (m, 2H).

Пример 26. Соль CF₃C(O)OH и rac-транс-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(октагидрохиноксалин-1(2H)-ил)изоиндолин-1,3-диона (I-282)

Перемешивали смесь 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-фторизоиндолин-1,3-диона (15-4, 50 мг, 0,18 ммоль), rac-транс-декагидрохиноксалина (51 мг, 0,36 ммоль) и DIPEA (0,25 мл, 1,4 ммоль) в i-PrOH (2 мл) при 200°C в течение 4 ч. в микроволновой печи. Реакционную смесь концентрировали до сухого состояния и остаток очищали с помощью RP-C18-колоночной хроматографии с обращенной фазой c градиентом элюирования от 5 до 100% MeCN в воде с 0,1% TFA в качестве модификатора с получением продукта I-282 в виде соли TFA (5 мг, 0,01 ммоль, выход 5%) в виде желтого твердого вещества. MS [M+H]⁺ = 397,1. ¹H ЯМР (400 МГц, Ацетонитрил-d₃) δ 8,83 (s, 1H), 8,44 (br, 2H), 7,70 (d, J=8,0 Гц, 1H), 7,44 (d, J=2,0 Гц, 1H), 7,35 (dd, J=8,0, 2,1 Гц, 1H), 5,01-4,83 (m, 1H), 3,44-3,17 (m, 4H), 2,77-2,50 (m, 4H), 2,09-1,90 (m, 2H), 1,80-1,70 (m, 2H), 1,65-1,43 (m, 2H), 1,39-1,19 (m, 3H), 1,16-0,99 (m, 1H).

Пример 27. 2-(2,6-Диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил-((1S,2S)-2-(метиламино)циклогептил)амино)изоиндолин-1,3-дион (I-109)

Стадия 1. rac-N, N'-(транс-Циклогептан-1,2-диил)бис(4-нитробензолсульфонамид) (27-3)

В раствор rac-транс-циклогептан-1,2-диамина (27-1, 250 мг, 1,24 ммоль) в DCM (10 мл) при 0°C добавляли Et₃N (1,73 мл, 12,4 ммоль), затем 4-нитробензолсульфонилхлорид (27-2, 661 мг, 2,98 ммоль). Полученную смесь перемешивали при к. т. в течение 3 ч. и затем гасили водой. Полученный осадок собирали посредством фильтрации с получением требуемого продукта 27-3 (450 мг, 0,907 ммоль, выход 73%) в виде бежевого твердого вещества. Продукт переносили на следующую стадию без очистки. MS [M-H]⁻ = 497,1.

Стадия 2. rac-N, N'-(транс-Циклогептан-1,2-диил)бис(N-метил-4-нитробензолсульфонамид) (27-4)

В раствор rac-N, N'-(транс-циклогептан-1,2-диил)бис(4-нитробензолсульфонамида)

(27-3, 450 мг, 0,903 ммоль) в DMF (5 мл) добавляли карбонат цезия (1765 мг, 5,42 ммоль) с последующим добавлением йодметана (0,45 мл, 7,2 ммоль). Полученную смесь перемешивали при к. т. в течение 2 ч. и затем гасили водой. Полученный осадок собирали с помощью фильтрации с получением требуемого продукта 27-4 (450 мг, 0,858 ммоль, выход 95%) в виде бежевого твердого вещества. Продукт переносили на следующую стадию без очистки. MS [M+H]⁺ = 527,3.

Стадия 3. rac-транс-N1,N2-Диметилциклогептан-1,2-диамин (27-5)

В суспензию rac-N, N'-(транс-циклогептан-1,2-диил)бис(N-метил-4-нитробензолсульфонамида) (450 мг, 0,855 ммоль) в MeCN (30 мл) и MeOH (5,0 мл) добавляли карбонат цезия (3340 мг, 10,3 ммоль) с последующим добавлением по каплям меркаптоуксусной кислоты (0,48 мл, 6,8 ммоль). Полученную смесь перемешивали в течение 4 ч. и затем концентрировали до сухого состояния. Остаток разделяли между DCM и насыщ. водн. раствором хлорида аммония и органическую фазу промывали насыщ. водн. раствором карбоната натрия, высушивали над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта 27-5 (80 мг, 0,51 ммоль, выход 60%) в виде грязно-белого твердого вещества, которое применяли на следующей стадии без дополнительной очистки. MS [M+H]⁺ = 157,1.

Стадия 4. 2-(2,6-Диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил-((1S,2S)-2-(метиламино)циклогептил)амино)изоиндолин-1,3-дион (I-109)

Перемешивали смесь 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-фтор-изоиндолин-1,3-диона (15-4, 80 мг, 0,29 ммоль), rac-транс-N1,N2-диметилциклогептан-1,2-диамина (27-5, 54 мг, 0,377 ммоль) и DIPEA (0,40 мл, 2,3 ммоль) в NMP (0,3 мл) при 180°C в течение 6 ч. в микроволновой печи. Полученную смесь концентрировали и неочищенный остаток очищали с помощью RP-C18-колоночной хроматографии с обращенной фазой c градиентом элюирования от 5 до 100% MeCN в воде с 0,1% TFA в качестве модификатора. Фракции, содержащие требуемый продукт, собирали и нейтрализовали с помощью насыщ. водн. раствора бикарбоната натрия. Полученную смесь экстрагировали с помощью DCM и затем дополнительно очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с градиентом элюирования от 0 до 40% EtOAc:EtOH (об./об. = 3:7, с 2% Et₃N в качестве модификатора) в DCM с получением требуемого продукта I-109 (3 мг, 0,06 ммоль, выход 2%) в виде желтого твердого вещества. MS [M+H]⁺ = 413,5. ¹H ЯМР (400 МГц, Ацетонитрил-d₃) δ 7,63 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7,22 (d, J=2,4 Гц, 1H), 7,08 (dd, J=8,7, 2,4 Гц, 1H), 5,05-4,86 (m, 1H), 3,81 (td, J=9,5, 3,2 Гц, 1H), 2,93 (s, 3H), 2,83-2,64 (m, 5H), 2,29 (s, 3H), 2,15-2,07 (m, 2H), 1,91-1,64 (m, 3H), 1,64-1,47 (m, 3H), 1,37-1,05 (m, 3H).

Пример 28. 2-(2,6-Диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил-((1S,2S)-2-(метиламино)циклопентил)амино)изоиндолин-1,3-дион (I-128)

Стадия 1. Ди-трет-бутил-((1S,2S)-циклопентан-1,2-диил)дикарбамат (28-2)

Добавляли Boc-ангидрид (0,64 мл, 2,8 ммоль) в DCM (10 мл) в смесь трет-бутил-((1S,2S)-2-аминоциклопентил)карбамата (28-1, 500 мг, 2,50 ммоль) в DCM (5 мл) при 0°C и полученную смесь нагревали до к. т. Затем реакционную смесь промывали 1 М раствором HCl, водой и солевым раствором. Органическую фазу высушивали над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта 28-2 (750 мг, 2,50 ммоль, выход 100%) в виде грязно-белого твердого вещества. Продукт переносили на следующую стадию без очистки. MS [M+H]⁺ = 301,6.

Стадия 2. Ди-трет-бутил-((1S,2S)-циклопентан-1,2-диил)бис(метилкарбамат) (28-3)

Добавляли трет-бутоксид калия (2,56 мл, 2,56 ммоль) в смесь ди-трет-бутил-((1S,2S)-циклопентан-1,2-диил)дикарбамата (28-2, 350 мг, 1,17 ммоль) и йодметана (0,22 мл, 3,5 ммоль) в DMF (5 мл) при 0°C и полученную смесь перемешивали в течение ночи. Добавляли дополнительное количество трет-бутоксида калия (2,56 мл, 2,56 ммоль) и йодметана (0,22 мл, 3,5 ммоль) и продолжали перемешивание в течение ночи. Реакционную смесь разбавляли с помощью EtOAc и затем промывали с помощью 1 М HCl, водой и солевым раствором. Органическую фазу высушивали над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта 28-3 (380 мг, 1,16 ммоль, выход 100%) в виде грязно-белого твердого вещества. Продукт переносили на следующую стадию без очистки. MS [M+H]⁺ = 329,6.

Стадия 3. (1S,2S)-N1,N2-Диметилциклопентан-1,2-диамин (28-4)

Добавляли 4 М HCl в диоксане (2,91 мл, 11,7 ммоль) в раствор ди-трет-бутил-((1S,2S)-циклопентан-1,2-диил)бис(метилкарбамата (28-3, 0,383 г, 1,17 ммоль) в EtOAc (4 мл) и полученную смесь перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали с получением неочищенного продукта 28-4, который переносили на следующую стадию без очистки.

Стадия 4. 2-(2,6-Диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил-((1S,2S)-2-(метиламино)циклопентил)амино)изоиндолин-1,3-дион (I-128)

Перемешивали смесь 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-фтор-изоиндолин-1,3-диона (15-4, 60 мг, 0,22 ммоль), (1S,2S)-N1,N2-диметилциклопентан-1,2-диамина 28-4 (55,7 мг, 0,434 ммоль) и DIPEA (0,27 мл, 1,5 ммоль) в i-PrOH (2 мл) при 170°C в течение 4 ч. в микроволновой печи. Реакционную смесь концентрировали и остаток очищали с помощью C18-хроматографии с обращенной фазой с градиентом элюирования от 5 до 100% MeCN/вода (с 0,1% TFA в качестве модификатора). Требуемые фракции собирали и нейтрализовали с помощью насыщенного водн. раствора бикарбоната натрия. Смесь экстрагировали с помощью DCM, затем дополнительно очищали с помощью флэш-хроматографии с градиентом элюирования от 0 до 40% EtOAc:EtOH (об./об. = 3:7, с 1% Et₃N в качестве модификатора) в DCM с получением требуемого продукта I-128 (4 мг, 0,009 ммоль, 4%) в виде светло-желтого порошка. MS [M+H]⁺ = 385,3. ¹H ЯМР (400 МГц, Ацетонитрил-d₃) δ 7,63 (d, J=8,7 Гц, 1H), 7,26 (d, J=2,4 Гц, 1H), 7,09 (dd, J=8,7, 2,5 Гц, 1H), 5,09-4,84 (m, 1H), 4,15 (q, J=8,5 Гц, 1H), 3,10 (q, J=8,1 Гц, 1H), 2,96 (s, 3H), 2,84-2,62 (m, 4H), 2,30 (s, 3H), 1,82-1,64 (m, 4H), 1,47-1,39 (m, 2H).

Пример 29. 3-(5-(((1S,2S)-2-(Изопропиламино)циклогексил)амино)-1-оксоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион (I-45)

Добавляли ацетон (0,062 мл, 0,84 ммоль) в смесь соединения I-7 (120 мг, 0,337 ммоль), MgSO₄ (81 мг, 0,67 ммоль) и уксусной кислоты (1 капля) в DMF (2,0 мл) и перемешивали при к. т. в течение 30 мин. Затем реакционную смесь охлаждали до 0°C, затем добавляли триацетоксиборогидрид натрия (143 мг, 0,673 ммоль). Обеспечивали нагревание смеси до комнатной температуры в течении 4 ч. и затем ее концентрировали до сухого состояния. Неочищенный материал очищали с помощью хроматографии на силикагеле с градиентом элюирования от 0 до 100% EtOAc:EtOH (об./об. = 3:1, с 1% Et₃N в качестве модификатора) в DCM с получением соединения I-45 (86,4 мг, 0,195 ммоль, выход 58%) в виде светло-зеленого твердого вещества. MS [M+H]⁺ = 399,4 ¹H ЯМР (400 МГц, метиленхлорид-d₂) δ 7,44 (s, 1H), 6,75 (s, 1H), 6,65 (d, J=8,5 Гц, 1H), 5,14-4,99 (m, 1H), 4,23 (s, 2H), 3,31 (s, 1H), 3,17 (s, 1H), 2,91-2,64 (m, 3H), 2,41-2,24 (m, 1H), 2,24-2,04 (m, 4H), 1,86-1,66 (m, 2H), 1,46-1,28 (m, 3H), 1,26-1,05 (m, 8H).

Пример 30. Соль HC(O)OH и 3-(5-(((1S,2S)-2-(этиламино)циклогексил)амино)-1-оксоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-диона (I-40)

Добавляли ацетальдегид (0,024 мл, 0,42 ммоль) в смесь соединения I-7 (60 мг, 0,17 ммоль), MgSO₄ (40,5 мг, 0,337 ммоль) и уксусной кислоты (1 капля) в DMF (1,0 мл) и перемешивали при к. т. в течение 30 мин. Затем полученную смесь охлаждали до 0°C, затем добавляли триацетоксиборогидрид натрия (71 мг, 0,38 ммоль). Обеспечивали нагревание реакционной смеси до комнатной температуры и ее перемешивали в течение 29 ч. Добавляли дополнительное количество ацетальдегида (0,095 мл, 1,68 ммоль), смесь перемешивали при к. т. в течение 19 ч. и затем концентрировали до сухого состояния. Неочищенный материал очищали с помощью HPLC с обращенной фазой (элюирование с помощью MeCN/H₂O с 0,1% NH₄OH в качестве модификатора). Полученный материал дополнительно очищали с помощью HPLC с обращенной фазой (элюирование с помощью MeCN/H₂O с 0,1% муравьиной кислоты в качестве модификатора) с получением формиатной соли соединения I-40 (1,7 мг, 4,2 мкмоль, выход 2,5%) в виде белого твердого вещества. MS [M+H]⁺ = 385,2. ¹H ЯМР (400 МГц, Ацетонитрил-d₃) δ 9,27 (d, J=45,4 Гц, 1H), 8,80 (s, 1H), 7,46 (d, J=8,3 Гц, 1H), 6,83 (s, 1H), 6,75 (dd, J=8,5, 2,0 Гц, 1H), 5,29 (s, 1H), 5,01 (dd, J=13,4, 5,1 Гц, 1H), 4,36-4,08 (m, 2H), 3,76-3,58 (m, 1H), 3,22-3,10 (m, 1H), 3,10-2,92 (m, 2H), 2,81 (ddd, J=18,3, 13,3, 5,3 Гц, 1H), 2,71 (ddd, J=17,6, 4,8, 2,5 Гц, 1H), 2,37 (qd, J=13,2, 4,8 Гц, 3H), 2,25-2,13 (m, 2H), 1,79-1,69 (m, 1H), 1,60 (q, J=12,4, 11,3 Гц, 1H), 1,37 (qd, J=11,4, 9,8, 2,9 Гц, 2H), 1,31-1,12 (m, 4H).

Пример 31. Соль HC(O)OH и 3-(5-(этил-((1S,2S)-2-(этиламино)циклогексил)амино)-1-оксоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-диона (I-55)

К 3-(5-бром-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-диону (2-3, 40 мг, 0,12 ммоль), CuI (7 мг, 0,04 ммоль), Cs₂CO₃ (161 мг, 0,495 ммоль) и дигидрохлоридной соли (1S,2S)-N1,N2-диэтилциклогексан-1,2-диамина (S, S-31-1, 60 мг, 0,25 ммоль) в атмосфере азота добавляли DMF (0,7 мл) и полученную реакционную смесь перемешивали в течение 72 ч. при 90°C. Реакционную смесь разбавляли с помощью DMSO (0,7 мл), фильтровали и непосредственно очищали с помощью HPLC с обращенной фазой (элюирование с помощью MeCN/H₂O с 0,1% муравьиной кислоты). Фракции, содержащие требуемый продукт, объединяли и лиофилизировали с получением формиатной соли соединения I-55 (5,4 мг, 0,012 ммоль, выход 10%) в виде белого твердого вещества. MS [M+H]⁺ = 413,5. ¹H ЯМР (400 МГц, метиленхлорид-d₂) δ 8,27 (s, 1H), 7,59 (d, J=8,6 Гц, 1H), 7,14-7,01 (m, 1H), 6,97 (dt, J=8,6, 2,1 Гц, 1H), 5,06 (ddd, J=13,3, 5,2, 2,8 Гц, 1H), 4,27 (s, 2H), 3,99-3,74 (m, 1H), 3,47-3,20 (m, 2H), 3,06-2,84 (m, 2H), 2,83-2,61 (m, 3H), 2,37-2,24 (m, 1H), 2,22-2,06 (m, 2H), 1,91-1,73 (m, 3H), 1,66-1,45 (m, 2H), 1,42-1,20 (m, 2H), 1,18-1,10 (m, 6H).

Пример 32. Соль CF₃C(O)OH и 3-(5-(метил-((1S,6S)-6-(метиламино)циклогекс-3-ен-1-ил)амино)-1-оксоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-диона (I-119) и соль CF₃C(O)OH и 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-(метил-((1R,6R)-6-(метиламино)циклогекс-3-ен-1-ил)амино)изоиндолин-1,3-диона (I-121)

Перемешивали смесь 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-5-фтор-изоиндолин-1,3-диона (15-4, 100 мг, 0,362 ммоль), rac-транс-N1,N2-диметилциклогекс-4-ен-1,2-диамина (13-4, 146 мг, 0,685 ммоль) и DIPEA (0,32 мл, 1,8 ммоль) в i-PrOH (1 мл) при 180°C в микроволновой печи в течение 6 ч. В раствор добавляли Celite® и смесь концентрировали до сухого состояния. Неочищенный продукт очищали с помощью хроматографии на силикагеле с градиентом элюирования от 0 до 100% EtOAc:EtOH (об./об. = 3:1, с 0,5% Et₃N) в DCM. Полученный материал дополнительно очищали с помощью HPLC с обращенной фазой (элюирование с помощью H₂O/MeCN с 0,1% TFA в качестве модификатора) с получением CF₃C(O)OH-соли смеси I-119 и I-121 (9,4 мг, 0,017 ммоль, выход 5%) в виде ярко-желтого твердого вещества. MS [M+H]⁺ = 397,4. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 11,08 (s, 1H), 8,59 (s, 2H), 7,73 (d, J=8,5 Гц, 1H), 7,43 (d, J=2,4 Гц, 1H), 7,25 (dd, J=8,7, 2,4 Гц, 1H), 5,80-5,57 (m, 2H), 5,08 (dd, J=12,9, 5,4 Гц, 1H), 4,38 (td, J=10,4, 5,8 Гц, 1H), 3,76 (s, 1H), 2,96-2,82 (m, 4H), 2,74-2,63 (m, 1H), 2,58 (q, J=6,6 Гц, 4H), 2,36 (d, J=13,2 Гц, 2H), 2,19 (d, J=17,1 Гц, 1H), 2,07-1,96 (m, 1H).

Биологические анализы и данные

Активность соединения в соответствии с настоящим изобретением можно оценить посредством следующих способов in vitro.

Пример 33. Количественное определение уровней содержания белков IKZF1, IKZF2 или GSPT1 в клетках 293GT с помощью Prolabel

Систему Prolabel от DiscoverX применяли для разработки высокопроизводительных и количественных анализов для измерения изменений уровней содержания белков IKZF1, IKZF2 и GSPT1 в ответ на воздействие соединений. Метку Prolabel получали из альфа-фрагмента бета-галактозидазы, и она имеет следующую последовательность белка: mssnslavvlqrrdwenpgvtqlnrlaahppfaswrnseeartdrpsqqlrslnge. Комплементарный фрагмент бета-галактозидазы (от DiscoverX) добавляли к метке Prolabel с образованием активного фермента бета-галактозидазы, активность которого можно точно измерить. Благодаря этому можно количественно определить уровни содержания слитого белка с меткой Prolabel в клеточных лизатах.

Конструировали лентивирусные векторы на основе остова pLenti6.2/V5-DEST от Invitrogen, в которых метка Prolabel размещалась выше IKZF1, IKZF2 или GSPT1, а слитый белок экспрессировался под контролем промотора CMV.

Для обеспечения умеренной и устойчивой экспрессии слитых белков с Prolabel во всех клетках в популяции из клеток, экспрессирующих одну копию конструкции, конструировали стабильные линии клеток. Лентивирус с упакованными в нем конструкциями получали с помощью набора ViraPower от Invitrogen. Высокоадгезивные клетки 293GT, клетки GripTite 293 MSR от Thermo Fisher Scientific (номер по каталогу: R79507), инфицировали вирусом при низкой множественности инфицирования и отбирали с помощью 5 мкг/мл бластицидина в течение 2 недель.

Уровни содержания слитых белков с меткой Prolabel в линиях клеток, обработанных соединениями, измеряли следующим образом.

В день 1 клетки разбавляли до 1,0×10⁶ клеток/мл в нормальной среде для роста. В каждую лунку непрозрачного белого 384-луночного планшета высевали 17,5 мкл клеток. Планшеты инкубировали в течение ночи в инкубаторе для культур тканей при 37°C.

В день 2 получали серийные разведения соединений в 384-луночных планшетах из 10 мМ исходных растворов. В каждую лунку 384-луночного планшета добавляли 15 мкл DMSO. В первый столбец добавляли 15 мкл исходного раствора соединения. Раствор перемешивали и 15 мкл переносили в следующий столбец. Это повторяли до получения 20 двукратных разведений. 2,5 мкл разбавленных соединений переносили в 60 мкл среды для культивирования клеток в другом 384-луночном планшете и хорошо перемешивали. 2,5 мкл данной смеси добавляли к клеткам, высеянным в планшет. Конечная концентрация DMSO составляла 0,5%, а наивысшая концентрация соединения составляла 50 мкМ. Планшеты инкубировали в течение ночи (например, в течение приблизительно 14 ч., 18 ч. или 24 ч.) в инкубаторе для культур тканей при 37°C.

В день 3 планшеты извлекали из инкубатора и обеспечивали их уравновешивание при к. т. в течение 30 минут. Субстрат для Prolabel (набор для выявления Prolabel PathHunter от DiscoverX, руководство пользователя: 93-0180) добавляли согласно описанному в протоколах производителя. Планшеты инкубировали при к. т. в течение трех часов и считывали показатели люминесценции с помощью планшет-ридера Envision (Perkin Elmer). Данные анализировали и визуализировали с помощью пакета программного обеспечения Spotfire.

В таблице 14 показана активность в отношении разрушения Helios (IKZF2), Ikaros (IKZF1) и белка 1 перехода между фазами G1 и S (GSPT1) для соединений по настоящему изобретению в анализах Prolabel в клетках 293GT (% разрушения указан при 10 мкМ).

№ соед. Химическая структура IKZF2
EC₅₀ (мкМ) IKZF2
% уменьшения
уровня белка при 10
мкМ, 24 ч. IKZF1
EC₅₀ (мкМ) GSPT1
EC₅₀ (мкМ) I-1 - 20% >30 >30 I-2 >30 0% >30 >30 I-3 0,029 65% >30 >30 I-4 - - - >30 I-9 0,113 65% >50 >50 I-6 0,043 65% >50 Н. д. I-7 0,183 30% >50 Н. д. I-8 0,103 65% >50 >50 I-40 1,67 45% >30 Н. д. I-45 0,10 70% >30 >50 I-55 - 10% >30 Н. д. I-12 0,036 65% >30 Н. д. I-14 0,73 40% >30 Н. д. I-15 0,094 60% >30 Н. д. Смесь I-16 & I-17
0,23 65% 0,12 >50 I-114 0,024 70% 0,29 >50 I-99 0,15 70% 5,20 >50 I-104 0,049 80% 0,051 >50 I-109 0,23 70% >30 >50 Смесь
I-119 &
I-121
0,67 65% 0,63 >50 I-133 0,45 75% >30 Н. д. I-143 23,1 40% >30 Н. д. I-138 - 30% >30 Н. д. I-163 0,066 80% 0,57 Н. д. I-128 >30 30% >30 Н. д. I-10 0,99 50% >30 >50 I-96 1,57 50% 2,37 >50 I-153 0,41 50% >30 >50 I-148 11,3 40% >30 Н. д.

Пример 34. Количественное определение подавляющей активности in vitro первичных регуляторных T-клеток человека, размножаемых в присутствии соединений

Материалы и способы

Сортировка Treg-клеток

Лейкоцитарные пленки человека получали от BioreclamationIVT в США. CD4+ T-клетки выделяли из указанных лейкоцитарных пленок с помощью коктейля для обогащения популяции CD4+ T-клеток человека RosetteSep (StemCell Technologies, США) и градиентного центрифугирования в Ficoll Paque Plus (GE Healthcare LifeSciences, США) согласно рекомендациям производителя. Клетки ресуспендировали в среде RPMI, дополненной 1% раствором пенициллина-стрептомицина, 10% фетальной бычьей сывороткой крови, HEPES (10 мМ), MEM NEAA (100 нМ), пируватом натрия (1 мМ) (все добавки от Thermo Fisher Scientific, США), в дальнейшем называемой полной средой RPMI (cRPMI), и оставляли в покое в течение ночи при 37°C, 5% CO₂ в присутствии 2 ед./мл rhIL-2 (Proleukin, Novartis). Клетки собирали и ресуспендировали в подвижном буфере autoMACS, дополненном BSA (Miltenyi Biotec, США), и метили с помощью антитела к CD4, конъюгированного с FITC (клона RPA-T4), антитела к CD25, конъюгированного с APC (клона M-A251) (Biolegend), и микрогранул с антителом к CD25 (Miltenyi Biotec, США). Клетки, обогащенные CD25, затем выделяли с помощью сепаратора autoMACS Pro. Затем получали высокоочищенную популяцию Treg-клеток путем дополнительной сортировки CD4+ CD25Hi клеток с помощью клеточного сортера Sony SH800. Получаемая в результате популяция Treg-клеток обычно была более чем на 90% чистой согласно экспрессии FOXP3.

Размножение Treg-клеток

Очищенные Treg-клетки высевали в cRPMI в 96-луночных круглодонных планшетах при плотности 25000-50000 клеток на лунку и активировали в присутствии 500 ед./мл rhIL2 и средства для размножения Treg Dynabeads (Thermo Fisher Scientific, США) в соответствии с рекомендациями производителя в присутствии или в отсутствие 100 мкМ рапамицина (Thermo Fisher Scientific, США). Затем добавляли соединения согласно настоящему изобретению в конечной концентрации 10 мкМ и добавляли DMSO в качестве контрольного инертного вещества. Клетки инкубировали при 37°C, 5% CO₂ в общей сложности в течение 12-14 дней. Соединение и rhIL2 пополняли каждые 48 ч. в течение всего периода культивирования.

Фенотипический анализ размножившихся Treg-клеток

Клетки собирали и подсчитывали, и кратность размножения рассчитывали как (число извлеченных клеток)/(число клеток, высеянных в планшет). Некоторую долю клеток фиксировали и пермеабилизировали с помощью набора с буфером для окрашивания на Foxp3 eBioscience (eBioscience, Thermo Fisher Scientific, США) и окрашивали с помощью антитела к Helios, конъюгированного с PE-цианином 7 (клона 22F6). Для определения экспрессии IL2 размножившиеся Treg-клетки дополнительно инкубировали в присутствии коктейля для стимуляции клеток eBioscience с ингибиторами транспорта белков (Thermo Fisher Scientific) в течение 4 часов с последующей фиксацией и окрашиванием с помощью антитела к IL2, конъюгированного с BV711 (клона MQ1-17H12) (BioLegend, США). Данные о клетках собирали на LSRFortessa (Becton Dickinson, США), и анализ проводили с помощью программного обеспечения FlowJo (TreeStar, США).

Функциональный анализ размножившихся Treg-клеток

Первичные PBMC человека получали из свежеприготовленных лейкоцитарных пленок (BioReclamationIVT) с помощью градиентного центрифугирования в Ficoll Paque Plus согласно рекомендациям производителя. Клетки затем метили с помощью CFSE (N-сукцинимидилового сложного эфира диацетата 5(6)-карбоксифлуоресцеина, Sigma-Aldrich, США) и высевали в трех повторностях в cRPMI в круглодонных 96-луночных планшетах в отдельности или с размножившимися Treg-клетками в соотношении PBMC:Treg 1:2. Затем добавляли соединения согласно настоящему изобретению в конечной концентрации 10 мкМ и добавляли DMSO в качестве контрольного инертного вещества. Клетки активировали с помощью растворимого антитела к CD3 (клона OKT3) (eBioscience, ThermoFisher Scientific, США) в конечной концентрации 100 нг/мл. Клетки инкубировали при 37°C, 5% CO₂ в общей сложности в течение 4-5 дней. По завершении культивирования клетки окрашивали с помощью синего красителя для определения жизнеспособности LIVE/DEAD (Thermo Fisher Scientific, США) согласно инструкциям производителя с последующим окрашиванием с помощью антитела к CD4, конъюгированного с BUV737 (клона SK3) (BD Biosciences, США) и антитела к CD8, конъюгированного с BV711 (клона RPA-T8) (Biolegend, США). Данные о клетках собирали на LSRFortessa (Becton Dickinson, США), и анализ проводили с помощью программного обеспечения FlowJo (TreeStar, США). Пролиферацию оценивали в каждой популяции в виде доли клеток, имеющих разбавленный CFSE. Подавление оценивали для каждого условия по сравнению с иммунореактивными клетками, высеянными в планшет в отдельности.

Специалистам в данной области техники будут понятны многие эквиваленты конкретных вариантов осуществления, описанных конкретно в данном документе, или же путем проведения всего лишь обычных экспериментов они смогут установить такие эквиваленты. Предполагается, что такие эквиваленты входят в объем нижеследующей формулы изобретения.

--->

ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ

<110> NOVARTIS AG

<120> ПРОИЗВОДНЫЕ 3-(5-АМИНО-1-ОКСОИЗОИНДОЛИН-2-ИЛ)ПИПЕРИДИН-2,6-ДИОНА

И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ

<130> PAT058179-WO-PCT

<140>

<141>

<150> 62/695,922

<151> 2018-07-10

<160> 314

<170> PatentIn версия 3.5

<210> 1

<211> 121

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 1

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ser Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Ser Leu Ser Ser Tyr

20 25 30

Gly Val Asp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Gly Val Ile Trp Gly Gly Gly Gly Thr Tyr Tyr Ala Ser Ser Leu Met

50 55 60

Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu

65 70 75 80

Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Arg His Ala Tyr Gly His Asp Gly Gly Phe Ala Met Asp Tyr Trp Gly

100 105 110

Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 2

<211> 107

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 2

Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Ser Ser Asn

20 25 30

Val Ala Trp Tyr Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Gly Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gly Gln Ser Tyr Ser Tyr Pro Phe

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105

<210> 3

<211> 451

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 3

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ser Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Ser Leu Ser Ser Tyr

20 25 30

Gly Val Asp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Gly Val Ile Trp Gly Gly Gly Gly Thr Tyr Tyr Ala Ser Ser Leu Met

50 55 60

Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu

65 70 75 80

Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Arg His Ala Tyr Gly His Asp Gly Gly Phe Ala Met Asp Tyr Trp Gly

100 105 110

Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser

115 120 125

Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala

130 135 140

Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val

145 150 155 160

Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala

165 170 175

Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val

180 185 190

Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His

195 200 205

Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys

210 215 220

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly

225 230 235 240

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

245 250 255

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His

260 265 270

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

275 280 285

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr

290 295 300

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly

305 310 315 320

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

325 330 335

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

340 345 350

Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser

355 360 365

Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

370 375 380

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

385 390 395 400

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val

405 410 415

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

420 425 430

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

435 440 445

Pro Gly Lys

450

<210> 4

<211> 214

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 4

Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Ser Ser Asn

20 25 30

Val Ala Trp Tyr Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Gly Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gly Gln Ser Tyr Ser Tyr Pro Phe

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala

100 105 110

Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly

115 120 125

Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala

130 135 140

Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln

145 150 155 160

Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser

165 170 175

Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr

180 185 190

Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser

195 200 205

Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210

<210> 5

<211> 363

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 5

gaggtgcagc tggtggaatc tggcggcgga ctggtgcagt ccggcggctc tctgagactg

tcttgcgctg cctccggctt ctccctgtcc tcttacggcg tggactgggt gcgacaggcc

120

cctggcaagg gcctggaatg ggtgggagtg atctggggcg gaggcggcac ctactacgcc

180

tcttccctga tgggccggtt caccatctcc cgggacaact ccaagaacac cctgtacctg

240

cagatgaact ccctgcgggc cgaggacacc gccgtgtact actgcgccag acacgcctac

300

ggccacgacg gcggcttcgc catggattat tggggccagg gcaccctggt gacagtgtcc

360

tcc

363

<210> 6

<211> 321

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 6

gagatcgtga tgacccagtc ccccgccacc ctgtctgtgt ctcccggcga gagagccacc

ctgagctgca gagcctccga gtccgtgtcc tccaacgtgg cctggtatca gcagagacct

120

ggtcaggccc ctcggctgct gatctacggc gcctctaacc gggccaccgg catccctgcc

180

agattctccg gctccggcag cggcaccgac ttcaccctga ccatctcccg gctggaaccc

240

gaggacttcg ccgtgtacta ctgcggccag tcctactcat accccttcac cttcggccag

300

ggcaccaagc tggaaatcaa g

321

<210> 7

<211> 1353

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 7

gaggtgcagc tggtggaatc tggcggcgga ctggtgcagt ccggcggctc tctgagactg

tcttgcgctg cctccggctt ctccctgtcc tcttacggcg tggactgggt gcgacaggcc

120

cctggcaagg gcctggaatg ggtgggagtg atctggggcg gaggcggcac ctactacgcc

180

tcttccctga tgggccggtt caccatctcc cgggacaact ccaagaacac cctgtacctg

240

cagatgaact ccctgcgggc cgaggacacc gccgtgtact actgcgccag acacgcctac

300

ggccacgacg gcggcttcgc catggattat tggggccagg gcaccctggt gacagtgtcc

360

tccgctagca ccaagggccc aagtgtgttt cccctggccc ccagcagcaa gtctacttcc

420

ggcggaactg ctgccctggg ttgcctggtg aaggactact tccccgagcc cgtgacagtg

480

tcctggaact ctggggctct gacttccggc gtgcacacct tccccgccgt gctgcagagc

540

agcggcctgt acagcctgag cagcgtggtg acagtgccct ccagctctct gggaacccag

600

acctatatct gcaacgtgaa ccacaagccc agcaacacca aggtggacaa gagagtggag

660

cccaagagct gcgacaagac ccacacctgc cccccctgcc cagctccaga actgctggga

720

gggccttccg tgttcctgtt cccccccaag cccaaggaca ccctgatgat cagcaggacc

780

cccgaggtga cctgcgtggt ggtggacgtg tcccacgagg acccagaggt gaagttcaac

840

tggtacgtgg acggcgtgga ggtgcacaac gccaagacca agcccagaga ggagcagtac

900

aacagcacct acagggtggt gtccgtgctg accgtgctgc accaggactg gctgaacggc

960

aaagaataca agtgcaaagt ctccaacaag gccctgccag ccccaatcga aaagacaatc

1020

agcaaggcca agggccagcc acgggagccc caggtgtaca ccctgccccc cagccgggag

1080

gagatgacca agaaccaggt gtccctgacc tgtctggtga agggcttcta ccccagcgat

1140

atcgccgtgg agtgggagag caacggccag cccgagaaca actacaagac caccccccca

1200

gtgctggaca gcgacggcag cttcttcctg tacagcaagc tgaccgtgga caagtccagg

1260

tggcagcagg gcaacgtgtt cagctgcagc gtgatgcacg aggccctgca caaccactac

1320

acccagaagt ccctgagcct gagccccggc aag

1353

<210> 8

<211> 642

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 8

gagatcgtga tgacccagtc ccccgccacc ctgtctgtgt ctcccggcga gagagccacc

ctgagctgca gagcctccga gtccgtgtcc tccaacgtgg cctggtatca gcagagacct

120

ggtcaggccc ctcggctgct gatctacggc gcctctaacc gggccaccgg catccctgcc

180

agattctccg gctccggcag cggcaccgac ttcaccctga ccatctcccg gctggaaccc

240

gaggacttcg ccgtgtacta ctgcggccag tcctactcat accccttcac cttcggccag

300

ggcaccaagc tggaaatcaa gcgtacggtg gccgctccca gcgtgttcat cttccccccc

360

agcgacgagc agctgaagag cggcaccgcc agcgtggtgt gcctgctgaa caacttctac

420

ccccgggagg ccaaggtgca gtggaaggtg gacaacgccc tgcagagcgg caacagccag

480

gagagcgtca ccgagcagga cagcaaggac tccacctaca gcctgagcag caccctgacc

540

ctgagcaagg ccgactacga gaagcataag gtgtacgcct gcgaggtgac ccaccagggc

600

ctgtccagcc ccgtgaccaa gagcttcaac aggggcgagt gc

642

<210> 9

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 9

Ser Tyr Gly Val Asp

1 5

<210> 10

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 10

Gly Phe Ser Leu Ser Ser Tyr

1 5

<210> 11

<211> 16

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 11

Val Ile Trp Gly Gly Gly Gly Thr Tyr Tyr Ala Ser Ser Leu Met Gly

1 5 10 15

<210> 12

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 12

Trp Gly Gly Gly Gly

1 5

<210> 13

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 13

His Ala Tyr Gly His Asp Gly Gly Phe Ala Met Asp Tyr

1 5 10

<210> 14

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 14

Arg Ala Ser Glu Ser Val Ser Ser Asn Val Ala

1 5 10

<210> 15

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 15

Ser Glu Ser Val Ser Ser Asn

1 5

<210> 16

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 16

Gly Ala Ser Asn Arg Ala Thr

1 5

<210> 17

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 17

Gly Ala Ser

<210> 18

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 18

Gly Gln Ser Tyr Ser Tyr Pro Phe Thr

1 5

<210> 19

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 19

Ser Tyr Ser Tyr Pro Phe

1 5

<210> 20

<211> 124

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 20

Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr

20 25 30

Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Val Ile Trp Tyr Glu Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Gly Gly Ser Met Val Arg Gly Asp Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp

100 105 110

Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 21

<211> 107

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 21

Ala Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Ser Ala

20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Asp Ala Ser Ser Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Phe Asn Ser Tyr Pro Tyr

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105

<210> 22

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 22

Thr Tyr Trp Met His

1 5

<210> 23

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 23

Asn Ile Tyr Pro Gly Thr Gly Gly Ser Asn Phe Asp Glu Lys Phe Lys

1 5 10 15

Asn

<210> 24

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 24

Trp Thr Thr Gly Thr Gly Ala Tyr

1 5

<210> 25

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 25

Gly Tyr Thr Phe Thr Thr Tyr

1 5

<210> 26

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 26

Tyr Pro Gly Thr Gly Gly

1 5

<210> 27

<211> 117

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 27

Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu

1 5 10 15

Ser Leu Arg Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Thr Tyr

20 25 30

Trp Met His Trp Val Arg Gln Ala Thr Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Asn Ile Tyr Pro Gly Thr Gly Gly Ser Asn Phe Asp Glu Lys Phe

50 55 60

Lys Asn Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Thr Arg Trp Thr Thr Gly Thr Gly Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr

100 105 110

Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 28

<211> 351

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 28

gaggtgcagc tggtgcagtc aggcgccgaa gtgaagaagc ccggcgagtc actgagaatt

agctgtaaag gttcaggcta caccttcact acctactgga tgcactgggt ccgccaggct

120

accggtcaag gcctcgagtg gatgggtaat atctaccccg gcaccggcgg ctctaacttc

180

gacgagaagt ttaagaatag agtgactatc accgccgata agtctactag caccgcctat

240

atggaactgt ctagcctgag atcagaggac accgccgtct actactgcac taggtggact

300

accggcacag gcgcctactg gggtcaaggc actaccgtga ccgtgtctag c

351

<210> 29

<211> 443

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 29

Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu

1 5 10 15

Ser Leu Arg Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Thr Tyr

20 25 30

Trp Met His Trp Val Arg Gln Ala Thr Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Asn Ile Tyr Pro Gly Thr Gly Gly Ser Asn Phe Asp Glu Lys Phe

50 55 60

Lys Asn Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Thr Arg Trp Thr Thr Gly Thr Gly Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr

100 105 110

Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu

115 120 125

Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys

130 135 140

Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser

145 150 155 160

Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser

165 170 175

Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser

180 185 190

Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn

195 200 205

Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro

210 215 220

Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe

225 230 235 240

Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val

245 250 255

Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe

260 265 270

Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro

275 280 285

Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr

290 295 300

Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val

305 310 315 320

Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala

325 330 335

Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln

340 345 350

Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly

355 360 365

Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro

370 375 380

Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser

385 390 395 400

Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu

405 410 415

Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His

420 425 430

Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly

435 440

<210> 30

<211> 1329

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 30

gaggtgcagc tggtgcagtc aggcgccgaa gtgaagaagc ccggcgagtc actgagaatt

agctgtaaag gttcaggcta caccttcact acctactgga tgcactgggt ccgccaggct

120

accggtcaag gcctcgagtg gatgggtaat atctaccccg gcaccggcgg ctctaacttc

180

gacgagaagt ttaagaatag agtgactatc accgccgata agtctactag caccgcctat

240

atggaactgt ctagcctgag atcagaggac accgccgtct actactgcac taggtggact

300

accggcacag gcgcctactg gggtcaaggc actaccgtga ccgtgtctag cgctagcact

360

aagggcccgt ccgtgttccc cctggcacct tgtagccgga gcactagcga atccaccgct

420

gccctcggct gcctggtcaa ggattacttc ccggagcccg tgaccgtgtc ctggaacagc

480

ggagccctga cctccggagt gcacaccttc cccgctgtgc tgcagagctc cgggctgtac

540

tcgctgtcgt cggtggtcac ggtgccttca tctagcctgg gtaccaagac ctacacttgc

600

aacgtggacc acaagccttc caacactaag gtggacaagc gcgtcgaatc gaagtacggc

660

ccaccgtgcc cgccttgtcc cgcgccggag ttcctcggcg gtccctcggt ctttctgttc

720

ccaccgaagc ccaaggacac tttgatgatt tcccgcaccc ctgaagtgac atgcgtggtc

780

gtggacgtgt cacaggaaga tccggaggtg cagttcaatt ggtacgtgga tggcgtcgag

840

gtgcacaacg ccaaaaccaa gccgagggag gagcagttca actccactta ccgcgtcgtg

900

tccgtgctga cggtgctgca tcaggactgg ctgaacggga aggagtacaa gtgcaaagtg

960

tccaacaagg gacttcctag ctcaatcgaa aagaccatct cgaaagccaa gggacagccc

1020

cgggaacccc aagtgtatac cctgccaccg agccaggaag aaatgactaa gaaccaagtc

1080

tcattgactt gccttgtgaa gggcttctac ccatcggata tcgccgtgga atgggagtcc

1140

aacggccagc cggaaaacaa ctacaagacc acccctccgg tgctggactc agacggatcc

1200

ttcttcctct actcgcggct gaccgtggat aagagcagat ggcaggaggg aaatgtgttc

1260

agctgttctg tgatgcatga agccctgcac aaccactaca ctcagaagtc cctgtccctc

1320

tccctggga

1329

<210> 31

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 31

Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asp Ser Gly Asn Gln Lys Asn Phe Leu

1 5 10 15

Thr

<210> 32

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 32

Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser

1 5

<210> 33

<211> 22

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 33

Tyr Gly Arg Lys Lys Arg Arg Gln Arg Arg Arg Leu Tyr Arg Ser Pro

1 5 10 15

Ala Met Pro Glu Asn Leu

<210> 34

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 34

Ser Gln Ser Leu Leu Asp Ser Gly Asn Gln Lys Asn Phe

1 5 10

<210> 35

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 35

Trp Ala Ser

<210> 36

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 36

Asp Tyr Ser Tyr Pro Tyr

1 5

<210> 37

<211> 113

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 37

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asp Ser

20 25 30

Gly Asn Gln Lys Asn Phe Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys

35 40 45

Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val

50 55 60

Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr

65 70 75 80

Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Asn

85 90 95

Asp Tyr Ser Tyr Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile

100 105 110

Lys

<210> 38

<211> 339

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 38

gagatcgtcc tgactcagtc acccgctacc ctgagcctga gccctggcga gcgggctaca

ctgagctgta aatctagtca gtcactgctg gatagcggta atcagaagaa cttcctgacc

120

tggtatcagc agaagcccgg taaagcccct aagctgctga tctactgggc ctctactaga

180

gaatcaggcg tgccctctag gtttagcggt agcggtagtg gcaccgactt caccttcact

240

atctctagcc tgcagcccga ggatatcgct acctactact gtcagaacga ctatagctac

300

ccctacacct tcggtcaagg cactaaggtc gagattaag

339

<210> 39

<211> 220

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 39

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asp Ser

20 25 30

Gly Asn Gln Lys Asn Phe Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys

35 40 45

Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val

50 55 60

Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr

65 70 75 80

Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Asn

85 90 95

Asp Tyr Ser Tyr Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile

100 105 110

Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp

115 120 125

Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn

130 135 140

Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu

145 150 155 160

Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp

165 170 175

Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr

180 185 190

Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser

195 200 205

Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210 215 220

<210> 40

<211> 660

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 40

gagatcgtcc tgactcagtc acccgctacc ctgagcctga gccctggcga gcgggctaca

ctgagctgta aatctagtca gtcactgctg gatagcggta atcagaagaa cttcctgacc

120

tggtatcagc agaagcccgg taaagcccct aagctgctga tctactgggc ctctactaga

180

gaatcaggcg tgccctctag gtttagcggt agcggtagtg gcaccgactt caccttcact

240

atctctagcc tgcagcccga ggatatcgct acctactact gtcagaacga ctatagctac

300

ccctacacct tcggtcaagg cactaaggtc gagattaagc gtacggtggc cgctcccagc

360

gtgttcatct tcccccccag cgacgagcag ctgaagagcg gcaccgccag cgtggtgtgc

420

ctgctgaaca acttctaccc ccgggaggcc aaggtgcagt ggaaggtgga caacgccctg

480

cagagcggca acagccagga gagcgtcacc gagcaggaca gcaaggactc cacctacagc

540

ctgagcagca ccctgaccct gagcaaggcc gactacgaga agcataaggt gtacgcctgc

600

gaggtgaccc accagggcct gtccagcccc gtgaccaaga gcttcaacag gggcgagtgc

660

<210> 41

<211> 113

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 41

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asp Ser

20 25 30

Gly Asn Gln Lys Asn Phe Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln

35 40 45

Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val

50 55 60

Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr

65 70 75 80

Ile Ser Ser Leu Glu Ala Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Asn

85 90 95

Asp Tyr Ser Tyr Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile

100 105 110

Lys

<210> 42

<211> 339

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 42

gagatcgtcc tgactcagtc acccgctacc ctgagcctga gccctggcga gcgggctaca

ctgagctgta aatctagtca gtcactgctg gatagcggta atcagaagaa cttcctgacc

120

tggtatcagc agaagcccgg tcaagcccct agactgctga tctactgggc ctctactaga

180

gaatcaggcg tgccctctag gtttagcggt agcggtagtg gcaccgactt caccttcact

240

atctctagcc tggaagccga ggacgccgct acctactact gtcagaacga ctatagctac

300

ccctacacct tcggtcaagg cactaaggtc gagattaag

339

<210> 43

<211> 220

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 43

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asp Ser

20 25 30

Gly Asn Gln Lys Asn Phe Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln

35 40 45

Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val

50 55 60

Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr

65 70 75 80

Ile Ser Ser Leu Glu Ala Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Asn

85 90 95

Asp Tyr Ser Tyr Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile

100 105 110

Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp

115 120 125

Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn

130 135 140

Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu

145 150 155 160

Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp

165 170 175

Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr

180 185 190

Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser

195 200 205

Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210 215 220

<210> 44

<211> 660

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 44

gagatcgtcc tgactcagtc acccgctacc ctgagcctga gccctggcga gcgggctaca

ctgagctgta aatctagtca gtcactgctg gatagcggta atcagaagaa cttcctgacc

120

tggtatcagc agaagcccgg tcaagcccct agactgctga tctactgggc ctctactaga

180

gaatcaggcg tgccctctag gtttagcggt agcggtagtg gcaccgactt caccttcact

240

atctctagcc tggaagccga ggacgccgct acctactact gtcagaacga ctatagctac

300

ccctacacct tcggtcaagg cactaaggtc gagattaagc gtacggtggc cgctcccagc

360

gtgttcatct tcccccccag cgacgagcag ctgaagagcg gcaccgccag cgtggtgtgc

420

ctgctgaaca acttctaccc ccgggaggcc aaggtgcagt ggaaggtgga caacgccctg

480

cagagcggca acagccagga gagcgtcacc gagcaggaca gcaaggactc cacctacagc

540

ctgagcagca ccctgaccct gagcaaggcc gactacgaga agcataaggt gtacgcctgc

600

gaggtgaccc accagggcct gtccagcccc gtgaccaaga gcttcaacag gggcgagtgc

660

<210> 45

<211> 15

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический олигонуклеотид"

<400> 45

acctactgga tgcac

<210> 46

<211> 51

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический олигонуклеотид"

<400> 46

aatatctacc ccggcaccgg cggctctaac ttcgacgaga agtttaagaa t

<210> 47

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический олигонуклеотид"

<400> 47

tggactaccg gcacaggcgc ctac

<210> 48

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический олигонуклеотид"

<400> 48

ggctacacct tcactaccta c

<210> 49

<211> 18

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический олигонуклеотид"

<400> 49

taccccggca ccggcggc

<210> 50

<211> 51

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический олигонуклеотид"

<400> 50

aaatctagtc agtcactgct ggatagcggt aatcagaaga acttcctgac c

<210> 51

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический олигонуклеотид"

<400> 51

tgggcctcta ctagagaatc a

<210> 52

<211> 27

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический олигонуклеотид"

<400> 52

cagaacgact atagctaccc ctacacc

<210> 53

<211> 39

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический олигонуклеотид"

<400> 53

agtcagtcac tgctggatag cggtaatcag aagaacttc

<210> 54

<211> 9

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический олигонуклеотид"

<400> 54

tgggcctct

<210> 55

<211> 18

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический олигонуклеотид"

<400> 55

gactatagct acccctac

<210> 56

<211> 440

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 56

Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Asp Cys Lys Ala Ser Gly Ile Thr Phe Ser Asn Ser

20 25 30

Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Val Ile Trp Tyr Asp Gly Ser Lys Arg Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Phe

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Thr Asn Asp Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser

100 105 110

Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser

115 120 125

Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp

130 135 140

Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr

145 150 155 160

Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr

165 170 175

Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys

180 185 190

Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp

195 200 205

Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala

210 215 220

Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro

225 230 235 240

Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val

245 250 255

Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val

260 265 270

Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln

275 280 285

Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln

290 295 300

Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly

305 310 315 320

Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro

325 330 335

Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr

340 345 350

Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser

355 360 365

Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr

370 375 380

Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr

385 390 395 400

Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe

405 410 415

Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys

420 425 430

Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys

435 440

<210> 57

<211> 214

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 57

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Tyr

20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Ser Asn Trp Pro Arg

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala

100 105 110

Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly

115 120 125

Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala

130 135 140

Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln

145 150 155 160

Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser

165 170 175

Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr

180 185 190

Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser

195 200 205

Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210

<210> 58

<211> 447

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 58

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Val Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr

20 25 30

Tyr Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Gly Ile Asn Pro Ser Asn Gly Gly Thr Asn Phe Asn Glu Lys Phe

50 55 60

Lys Asn Arg Val Thr Leu Thr Thr Asp Ser Ser Thr Thr Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Lys Ser Leu Gln Phe Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Arg Asp Tyr Arg Phe Asp Met Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val

115 120 125

Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala

130 135 140

Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser

145 150 155 160

Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val

165 170 175

Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro

180 185 190

Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys

195 200 205

Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro

210 215 220

Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val

225 230 235 240

Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr

245 250 255

Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu

260 265 270

Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys

275 280 285

Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser

290 295 300

Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys

305 310 315 320

Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile

325 330 335

Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro

340 345 350

Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu

355 360 365

Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn

370 375 380

Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser

385 390 395 400

Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg

405 410 415

Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu

420 425 430

His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys

435 440 445

<210> 59

<211> 218

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 59

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Lys Gly Val Ser Thr Ser

20 25 30

Gly Tyr Ser Tyr Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro

35 40 45

Arg Leu Leu Ile Tyr Leu Ala Ser Tyr Leu Glu Ser Gly Val Pro Ala

50 55 60

Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser

65 70 75 80

Ser Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln His Ser Arg

85 90 95

Asp Leu Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg

100 105 110

Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln

115 120 125

Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr

130 135 140

Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser

145 150 155 160

Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr

165 170 175

Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys

180 185 190

His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro

195 200 205

Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210 215

<210> 60

<211> 447

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 60

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr

20 25 30

Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Gln Trp Met

35 40 45

Gly Trp Ile Asn Thr Asp Ser Gly Glu Ser Thr Tyr Ala Glu Glu Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Val Phe Ser Leu Asp Thr Ser Val Asn Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Ile Thr Ser Leu Thr Ala Glu Asp Thr Gly Met Tyr Phe Cys

85 90 95

Val Arg Val Gly Tyr Asp Ala Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu

100 105 110

Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu

115 120 125

Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys

130 135 140

Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser

145 150 155 160

Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser

165 170 175

Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser

180 185 190

Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn

195 200 205

Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His

210 215 220

Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val

225 230 235 240

Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr

245 250 255

Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu

260 265 270

Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys

275 280 285

Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser

290 295 300

Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys

305 310 315 320

Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile

325 330 335

Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro

340 345 350

Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu

355 360 365

Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn

370 375 380

Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser

385 390 395 400

Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg

405 410 415

Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu

420 425 430

His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

435 440 445

<210> 61

<211> 213

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 61

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Arg Ser Ser Val Ser Tyr Met

20 25 30

His Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Trp Ile Tyr

35 40 45

Arg Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Cys Leu Thr Ile Asn Ser Leu Gln Pro Glu

65 70 75 80

Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Ser Phe Pro Leu Thr

85 90 95

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro

100 105 110

Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr

115 120 125

Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys

130 135 140

Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu

145 150 155 160

Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser

165 170 175

Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala

180 185 190

Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe

195 200 205

Asn Arg Gly Glu Cys

210

<210> 62

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 62

Ser Tyr Trp Met Tyr

1 5

<210> 63

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 63

Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe Lys

1 5 10 15

Asn

<210> 64

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 64

Asp Tyr Arg Lys Gly Leu Tyr Ala Met Asp Tyr

1 5 10

<210> 65

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 65

Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

1 5

<210> 66

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 66

Asp Pro Asn Ser Gly Ser

1 5

<210> 67

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 67

Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Val Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

20 25 30

Trp Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Arg Gly Gln Arg Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe

50 55 60

Lys Asn Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Asp Tyr Arg Lys Gly Leu Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 68

<211> 360

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 68

gaagtgcagc tggtgcagtc aggcgccgaa gtgaagaaac ccggcgctac cgtgaagatt

agctgtaaag tctcaggcta caccttcact agctactgga tgtactgggt ccgacaggct

120

agagggcaaa gactggagtg gatcggtaga atcgacccta atagcggctc tactaagtat

180

aacgagaagt ttaagaatag gttcactatt agtagggata actctaagaa caccctgtac

240

ctgcagatga atagcctgag agccgaggac accgccgtct actactgcgc tagagactat

300

agaaagggcc tgtacgctat ggactactgg ggtcaaggca ctaccgtgac cgtgtcttca

360

<210> 69

<211> 446

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 69

Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Val Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

20 25 30

Trp Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Arg Gly Gln Arg Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe

50 55 60

Lys Asn Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Asp Tyr Arg Lys Gly Leu Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val

115 120 125

Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala

130 135 140

Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser

145 150 155 160

Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val

165 170 175

Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro

180 185 190

Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys

195 200 205

Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro

210 215 220

Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val

225 230 235 240

Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr

245 250 255

Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu

260 265 270

Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys

275 280 285

Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser

290 295 300

Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys

305 310 315 320

Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile

325 330 335

Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro

340 345 350

Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu

355 360 365

Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn

370 375 380

Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser

385 390 395 400

Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg

405 410 415

Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu

420 425 430

His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly

435 440 445

<210> 70

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 70

Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala Val Ala

1 5 10

<210> 71

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 71

Trp Ala Ser Thr Arg His Thr

1 5

<210> 72

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 72

Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Pro Leu Thr

1 5

<210> 73

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 73

Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala

1 5

<210> 74

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 74

Trp Ala Ser

<210> 75

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 75

Tyr Asn Ser Tyr Pro Leu

1 5

<210> 76

<211> 1338

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 76

gaagtgcagc tggtgcagtc aggcgccgaa gtgaagaaac ccggcgctac cgtgaagatt

agctgtaaag tctcaggcta caccttcact agctactgga tgtactgggt ccgacaggct

120

agagggcaaa gactggagtg gatcggtaga atcgacccta atagcggctc tactaagtat

180

aacgagaagt ttaagaatag gttcactatt agtagggata actctaagaa caccctgtac

240

ctgcagatga atagcctgag agccgaggac accgccgtct actactgcgc tagagactat

300

agaaagggcc tgtacgctat ggactactgg ggtcaaggca ctaccgtgac cgtgtcttca

360

gctagcacta agggcccgtc cgtgttcccc ctggcacctt gtagccggag cactagcgaa

420

tccaccgctg ccctcggctg cctggtcaag gattacttcc cggagcccgt gaccgtgtcc

480

tggaacagcg gagccctgac ctccggagtg cacaccttcc ccgctgtgct gcagagctcc

540

gggctgtact cgctgtcgtc ggtggtcacg gtgccttcat ctagcctggg taccaagacc

600

tacacttgca acgtggacca caagccttcc aacactaagg tggacaagcg cgtcgaatcg

660

aagtacggcc caccgtgccc gccttgtccc gcgccggagt tcctcggcgg tccctcggtc

720

tttctgttcc caccgaagcc caaggacact ttgatgattt cccgcacccc tgaagtgaca

780

tgcgtggtcg tggacgtgtc acaggaagat ccggaggtgc agttcaattg gtacgtggat

840

ggcgtcgagg tgcacaacgc caaaaccaag ccgagggagg agcagttcaa ctccacttac

900

cgcgtcgtgt ccgtgctgac ggtgctgcat caggactggc tgaacgggaa ggagtacaag

960

tgcaaagtgt ccaacaaggg acttcctagc tcaatcgaaa agaccatctc gaaagccaag

1020

ggacagcccc gggaacccca agtgtatacc ctgccaccga gccaggaaga aatgactaag

1080

aaccaagtct cattgacttg ccttgtgaag ggcttctacc catcggatat cgccgtggaa

1140

tgggagtcca acggccagcc ggaaaacaac tacaagacca cccctccggt gctggactca

1200

gacggatcct tcttcctcta ctcgcggctg accgtggata agagcagatg gcaggaggga

1260

aatgtgttca gctgttctgt gatgcatgaa gccctgcaca accactacac tcagaagtcc

1320

ctgtccctct ccctggga

1338

<210> 77

<211> 107

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 77

Ala Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala

20 25 30

Val Ala Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Trp Ala Ser Thr Arg His Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Glu Ala

65 70 75 80

Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Pro Leu

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210> 78

<211> 321

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 78

gctattcagc tgactcagtc acctagtagc ctgagcgcta gtgtgggcga tagagtgact

atcacctgta aagcctctca ggacgtgggc accgccgtgg cctggtatct gcagaagcct

120

ggtcaatcac ctcagctgct gatctactgg gcctctacta gacacaccgg cgtgccctct

180

aggtttagcg gtagcggtag tggcaccgac ttcaccttca ctatctcttc actggaagcc

240

gaggacgccg ctacctacta ctgtcagcag tataatagct accccctgac cttcggtcaa

300

ggcactaagg tcgagattaa g

321

<210> 79

<211> 214

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 79

Ala Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala

20 25 30

Val Ala Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Trp Ala Ser Thr Arg His Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Glu Ala

65 70 75 80

Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Pro Leu

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala

100 105 110

Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly

115 120 125

Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala

130 135 140

Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln

145 150 155 160

Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser

165 170 175

Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr

180 185 190

Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser

195 200 205

Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210

<210> 80

<211> 642

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 80

gctattcagc tgactcagtc acctagtagc ctgagcgcta gtgtgggcga tagagtgact

atcacctgta aagcctctca ggacgtgggc accgccgtgg cctggtatct gcagaagcct

120

ggtcaatcac ctcagctgct gatctactgg gcctctacta gacacaccgg cgtgccctct

180

aggtttagcg gtagcggtag tggcaccgac ttcaccttca ctatctcttc actggaagcc

240

gaggacgccg ctacctacta ctgtcagcag tataatagct accccctgac cttcggtcaa

300

ggcactaagg tcgagattaa gcgtacggtg gccgctccca gcgtgttcat cttccccccc

360

agcgacgagc agctgaagag cggcaccgcc agcgtggtgt gcctgctgaa caacttctac

420

ccccgggagg ccaaggtgca gtggaaggtg gacaacgccc tgcagagcgg caacagccag

480

gagagcgtca ccgagcagga cagcaaggac tccacctaca gcctgagcag caccctgacc

540

ctgagcaagg ccgactacga gaagcataag gtgtacgcct gcgaggtgac ccaccagggc

600

ctgtccagcc ccgtgaccaa gagcttcaac aggggcgagt gc

642

<210> 81

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 81

Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Val Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

20 25 30

Trp Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Thr Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe

50 55 60

Lys Asn Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Asp Tyr Arg Lys Gly Leu Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 82

<211> 360

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 82

gaagtgcagc tggtgcagtc aggcgccgaa gtgaagaaac ccggcgctac cgtgaagatt

agctgtaaag tctcaggcta caccttcact agctactgga tgtactgggt ccgacaggct

120

accggtcaag gcctggagtg gatgggtaga atcgacccta atagcggctc tactaagtat

180

aacgagaagt ttaagaatag agtgactatc accgccgata agtctactag caccgcctat

240

atggaactgt ctagcctgag atcagaggac accgccgtct actactgcgc tagagactat

300

agaaagggcc tgtacgctat ggactactgg ggtcaaggca ctaccgtgac cgtgtcttca

360

<210> 83

<211> 446

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 83

Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Val Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

20 25 30

Trp Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Thr Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe

50 55 60

Lys Asn Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Asp Tyr Arg Lys Gly Leu Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val

115 120 125

Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala

130 135 140

Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser

145 150 155 160

Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val

165 170 175

Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro

180 185 190

Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys

195 200 205

Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro

210 215 220

Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val

225 230 235 240

Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr

245 250 255

Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu

260 265 270

Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys

275 280 285

Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser

290 295 300

Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys

305 310 315 320

Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile

325 330 335

Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro

340 345 350

Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu

355 360 365

Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn

370 375 380

Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser

385 390 395 400

Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg

405 410 415

Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu

420 425 430

His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly

435 440 445

<210> 84

<211> 1338

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 84

gaagtgcagc tggtgcagtc aggcgccgaa gtgaagaaac ccggcgctac cgtgaagatt

agctgtaaag tctcaggcta caccttcact agctactgga tgtactgggt ccgacaggct

120

accggtcaag gcctggagtg gatgggtaga atcgacccta atagcggctc tactaagtat

180

aacgagaagt ttaagaatag agtgactatc accgccgata agtctactag caccgcctat

240

atggaactgt ctagcctgag atcagaggac accgccgtct actactgcgc tagagactat

300

agaaagggcc tgtacgctat ggactactgg ggtcaaggca ctaccgtgac cgtgtcttca

360

gctagcacta agggcccgtc cgtgttcccc ctggcacctt gtagccggag cactagcgaa

420

tccaccgctg ccctcggctg cctggtcaag gattacttcc cggagcccgt gaccgtgtcc

480

tggaacagcg gagccctgac ctccggagtg cacaccttcc ccgctgtgct gcagagctcc

540

gggctgtact cgctgtcgtc ggtggtcacg gtgccttcat ctagcctggg taccaagacc

600

tacacttgca acgtggacca caagccttcc aacactaagg tggacaagcg cgtcgaatcg

660

aagtacggcc caccgtgccc gccttgtccc gcgccggagt tcctcggcgg tccctcggtc

720

tttctgttcc caccgaagcc caaggacact ttgatgattt cccgcacccc tgaagtgaca

780

tgcgtggtcg tggacgtgtc acaggaagat ccggaggtgc agttcaattg gtacgtggat

840

ggcgtcgagg tgcacaacgc caaaaccaag ccgagggagg agcagttcaa ctccacttac

900

cgcgtcgtgt ccgtgctgac ggtgctgcat caggactggc tgaacgggaa ggagtacaag

960

tgcaaagtgt ccaacaaggg acttcctagc tcaatcgaaa agaccatctc gaaagccaag

1020

ggacagcccc gggaacccca agtgtatacc ctgccaccga gccaggaaga aatgactaag

1080

aaccaagtct cattgacttg ccttgtgaag ggcttctacc catcggatat cgccgtggaa

1140

tgggagtcca acggccagcc ggaaaacaac tacaagacca cccctccggt gctggactca

1200

gacggatcct tcttcctcta ctcgcggctg accgtggata agagcagatg gcaggaggga

1260

aatgtgttca gctgttctgt gatgcatgaa gccctgcaca accactacac tcagaagtcc

1320

ctgtccctct ccctggga

1338

<210> 85

<211> 107

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 85

Asp Val Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Leu Gly

1 5 10 15

Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala

20 25 30

Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Trp Ala Ser Thr Arg His Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Pro Leu

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210> 86

<211> 321

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 86

gacgtcgtga tgactcagtc acccctgagc ctgcccgtga ccctggggca gcccgcctct

attagctgta aagcctctca ggacgtgggc accgccgtgg cctggtatca gcagaagcca

120

gggcaagccc ctagactgct gatctactgg gcctctacta gacacaccgg cgtgccctct

180

aggtttagcg gtagcggtag tggcaccgag ttcaccctga ctatctcttc actgcagccc

240

gacgacttcg ctacctacta ctgtcagcag tataatagct accccctgac cttcggtcaa

300

ggcactaagg tcgagattaa g

321

<210> 87

<211> 214

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 87

Asp Val Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Leu Gly

1 5 10 15

Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala

20 25 30

Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Trp Ala Ser Thr Arg His Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Pro Leu

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala

100 105 110

Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly

115 120 125

Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala

130 135 140

Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln

145 150 155 160

Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser

165 170 175

Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr

180 185 190

Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser

195 200 205

Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210

<210> 88

<211> 642

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 88

gacgtcgtga tgactcagtc acccctgagc ctgcccgtga ccctggggca gcccgcctct

attagctgta aagcctctca ggacgtgggc accgccgtgg cctggtatca gcagaagcca

120

gggcaagccc ctagactgct gatctactgg gcctctacta gacacaccgg cgtgccctct

180

aggtttagcg gtagcggtag tggcaccgag ttcaccctga ctatctcttc actgcagccc

240

gacgacttcg ctacctacta ctgtcagcag tataatagct accccctgac cttcggtcaa

300

ggcactaagg tcgagattaa gcgtacggtg gccgctccca gcgtgttcat cttccccccc

360

agcgacgagc agctgaagag cggcaccgcc agcgtggtgt gcctgctgaa caacttctac

420

ccccgggagg ccaaggtgca gtggaaggtg gacaacgccc tgcagagcgg caacagccag

480

gagagcgtca ccgagcagga cagcaaggac tccacctaca gcctgagcag caccctgacc

540

ctgagcaagg ccgactacga gaagcataag gtgtacgcct gcgaggtgac ccaccagggc

600

ctgtccagcc ccgtgaccaa gagcttcaac aggggcgagt gc

642

<210> 89

<211> 15

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический олигонуклеотид"

<400> 89

agctactgga tgtac

<210> 90

<211> 51

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический олигонуклеотид"

<400> 90

agaatcgacc ctaatagcgg ctctactaag tataacgaga agtttaagaa t

<210> 91

<211> 33

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический олигонуклеотид"

<400> 91

gactatagaa agggcctgta cgctatggac tac

<210> 92

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический олигонуклеотид"

<400> 92

ggctacacct tcactagcta c

<210> 93

<211> 18

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический олигонуклеотид"

<400> 93

gaccctaata gcggctct

<210> 94

<211> 33

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический олигонуклеотид"

<400> 94

aaagcctctc aggacgtggg caccgccgtg gcc

<210> 95

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический олигонуклеотид"

<400> 95

tgggcctcta ctagacacac c

<210> 96

<211> 27

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический олигонуклеотид"

<400> 96

cagcagtata atagctaccc cctgacc

<210> 97

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический олигонуклеотид"

<400> 97

tctcaggacg tgggcaccgc c

<210> 98

<211> 9

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический олигонуклеотид"

<400> 98

tgggcctct

<210> 99

<211> 18

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический олигонуклеотид"

<400> 99

tataatagct accccctg

<210> 100

<211> 448

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 100

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Ser

20 25 30

Trp Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Trp Ile Ser Pro Tyr Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Arg His Trp Pro Gly Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro

115 120 125

Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly

130 135 140

Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn

145 150 155 160

Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln

165 170 175

Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser

180 185 190

Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser

195 200 205

Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr

210 215 220

His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser

225 230 235 240

Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg

245 250 255

Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro

260 265 270

Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala

275 280 285

Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Ala Ser Thr Tyr Arg Val Val

290 295 300

Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr

305 310 315 320

Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr

325 330 335

Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu

340 345 350

Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys

355 360 365

Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser

370 375 380

Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp

385 390 395 400

Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser

405 410 415

Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala

420 425 430

Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

435 440 445

<210> 101

<211> 214

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 101

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Val Ser Thr Ala

20 25 30

Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Ser Ala Ser Phe Leu Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Leu Tyr His Pro Ala

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala

100 105 110

Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly

115 120 125

Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala

130 135 140

Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln

145 150 155 160

Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser

165 170 175

Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr

180 185 190

Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser

195 200 205

Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210

<210> 102

<211> 450

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 102

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr

20 25 30

Ile Met Met Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Ser Ile Tyr Pro Ser Gly Gly Ile Thr Phe Tyr Ala Asp Thr Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ile Lys Leu Gly Thr Val Thr Thr Val Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val

115 120 125

Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala

130 135 140

Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser

145 150 155 160

Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val

165 170 175

Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro

180 185 190

Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys

195 200 205

Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp

210 215 220

Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly

225 230 235 240

Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile

245 250 255

Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu

260 265 270

Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His

275 280 285

Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg

290 295 300

Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys

305 310 315 320

Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu

325 330 335

Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr

340 345 350

Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu

355 360 365

Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp

370 375 380

Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val

385 390 395 400

Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp

405 410 415

Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His

420 425 430

Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro

435 440 445

Gly Lys

450

<210> 103

<211> 216

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 103

Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln

1 5 10 15

Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr

20 25 30

Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu

35 40 45

Met Ile Tyr Asp Val Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe

50 55 60

Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu

65 70 75 80

Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Ser

85 90 95

Ser Thr Arg Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly Gln

100 105 110

Pro Lys Ala Asn Pro Thr Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu

115 120 125

Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr

130 135 140

Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Gly Ser Pro Val Lys

145 150 155 160

Ala Gly Val Glu Thr Thr Lys Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr

165 170 175

Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His

180 185 190

Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys

195 200 205

Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser

210 215

<210> 104

<211> 451

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 104

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Tyr

20 25 30

Trp Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Asn Ile Lys Gln Asp Gly Ser Glu Lys Tyr Tyr Val Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Glu Gly Gly Trp Phe Gly Glu Leu Ala Phe Asp Tyr Trp Gly

100 105 110

Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser

115 120 125

Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala

130 135 140

Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val

145 150 155 160

Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala

165 170 175

Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val

180 185 190

Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His

195 200 205

Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys

210 215 220

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Glu Gly

225 230 235 240

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

245 250 255

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His

260 265 270

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

275 280 285

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr

290 295 300

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly

305 310 315 320

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Ser Ile

325 330 335

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

340 345 350

Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser

355 360 365

Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

370 375 380

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

385 390 395 400

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val

405 410 415

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

420 425 430

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

435 440 445

Pro Gly Lys

450

<210> 105

<211> 215

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 105

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Arg Val Ser Ser Ser

20 25 30

Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu

35 40 45

Ile Tyr Asp Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser

50 55 60

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu

65 70 75 80

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Ser Leu Pro

85 90 95

Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala

100 105 110

Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser

115 120 125

Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu

130 135 140

Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser

145 150 155 160

Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu

165 170 175

Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val

180 185 190

Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys

195 200 205

Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210 215

<210> 106

<211> 123

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 106

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Thr Ser Gly Asp Thr Phe Ser Thr Tyr

20 25 30

Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Gly Ile Ile Pro Ile Phe Gly Lys Ala His Tyr Ala Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys

85 90 95

Ala Arg Lys Phe His Phe Val Ser Gly Ser Pro Phe Gly Met Asp Val

100 105 110

Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 107

<211> 106

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 107

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Tyr

20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Asn Trp Pro Thr

85 90 95

Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210> 108

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 108

Asn Tyr Gly Met Asn

1 5

<210> 109

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 109

Trp Ile Asn Thr Asp Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Asp Asp Phe Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 110

<211> 16

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 110

Asn Pro Pro Tyr Tyr Tyr Gly Thr Asn Asn Ala Glu Ala Met Asp Tyr

1 5 10 15

<210> 111

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 111

Gly Phe Thr Leu Thr Asn Tyr

1 5

<210> 112

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 112

Asn Thr Asp Thr Gly Glu

1 5

<210> 113

<211> 125

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 113

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Phe Thr Leu Thr Asn Tyr

20 25 30

Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Arg Gly Gln Arg Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Trp Ile Asn Thr Asp Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Asp Asp Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Val Phe Ser Leu Asp Thr Ser Val Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Ile Ser Ser Leu Lys Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Asn Pro Pro Tyr Tyr Tyr Gly Thr Asn Asn Ala Glu Ala Met

100 105 110

Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

115 120 125

<210> 114

<211> 375

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 114

caagtgcagc tggtgcagtc gggagccgaa gtgaagaagc ctggagcctc ggtgaaggtg

tcgtgcaagg catccggatt caccctcacc aattacggga tgaactgggt cagacaggcc

120

cggggtcaac ggctggagtg gatcggatgg attaacaccg acaccgggga gcctacctac

180

gcggacgatt tcaagggacg gttcgtgttc tccctcgaca cctccgtgtc caccgcctac

240

ctccaaatct cctcactgaa agcggaggac accgccgtgt actattgcgc gaggaacccg

300

ccctactact acggaaccaa caacgccgaa gccatggact actggggcca gggcaccact

360

gtgactgtgt ccagc

375

<210> 115

<211> 375

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 115

caggtgcagc tggtgcagtc tggcgccgaa gtgaagaaac ctggcgcctc cgtgaaggtg

tcctgcaagg cctctggctt caccctgacc aactacggca tgaactgggt gcgacaggcc

120

aggggccagc ggctggaatg gatcggctgg atcaacaccg acaccggcga gcctacctac

180

gccgacgact tcaagggcag attcgtgttc tccctggaca cctccgtgtc caccgcctac

240

ctgcagatct ccagcctgaa ggccgaggat accgccgtgt actactgcgc ccggaacccc

300

ccttactact acggcaccaa caacgccgag gccatggact attggggcca gggcaccacc

360

gtgaccgtgt cctct

375

<210> 116

<211> 451

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 116

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Phe Thr Leu Thr Asn Tyr

20 25 30

Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Arg Gly Gln Arg Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Trp Ile Asn Thr Asp Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Asp Asp Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Val Phe Ser Leu Asp Thr Ser Val Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Ile Ser Ser Leu Lys Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Asn Pro Pro Tyr Tyr Tyr Gly Thr Asn Asn Ala Glu Ala Met

100 105 110

Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr

115 120 125

Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser

130 135 140

Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu

145 150 155 160

Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His

165 170 175

Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser

180 185 190

Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys

195 200 205

Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu

210 215 220

Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu

225 230 235 240

Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu

245 250 255

Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser

260 265 270

Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu

275 280 285

Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr

290 295 300

Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn

305 310 315 320

Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser

325 330 335

Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln

340 345 350

Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val

355 360 365

Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val

370 375 380

Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro

385 390 395 400

Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr

405 410 415

Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val

420 425 430

Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu

435 440 445

Ser Leu Gly

450

<210> 117

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 117

Ser Ser Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr Leu Asn

1 5 10

<210> 118

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 118

Tyr Thr Ser Thr Leu His Leu

1 5

<210> 119

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 119

Gln Gln Tyr Tyr Asn Leu Pro Trp Thr

1 5

<210> 120

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 120

Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr

1 5

<210> 121

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 121

Tyr Thr Ser

<210> 122

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 122

Tyr Tyr Asn Leu Pro Trp

1 5

<210> 123

<211> 1353

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 123

caagtgcagc tggtgcagtc gggagccgaa gtgaagaagc ctggagcctc ggtgaaggtg

tcgtgcaagg catccggatt caccctcacc aattacggga tgaactgggt cagacaggcc

120

cggggtcaac ggctggagtg gatcggatgg attaacaccg acaccgggga gcctacctac

180

gcggacgatt tcaagggacg gttcgtgttc tccctcgaca cctccgtgtc caccgcctac

240

ctccaaatct cctcactgaa agcggaggac accgccgtgt actattgcgc gaggaacccg

300

ccctactact acggaaccaa caacgccgaa gccatggact actggggcca gggcaccact

360

gtgactgtgt ccagcgcgtc cactaagggc ccgtccgtgt tccccctggc accttgtagc

420

cggagcacta gcgaatccac cgctgccctc ggctgcctgg tcaaggatta cttcccggag

480

cccgtgaccg tgtcctggaa cagcggagcc ctgacctccg gagtgcacac cttccccgct

540

gtgctgcaga gctccgggct gtactcgctg tcgtcggtgg tcacggtgcc ttcatctagc

600

ctgggtacca agacctacac ttgcaacgtg gaccacaagc cttccaacac taaggtggac

660

aagcgcgtcg aatcgaagta cggcccaccg tgcccgcctt gtcccgcgcc ggagttcctc

720

ggcggtccct cggtctttct gttcccaccg aagcccaagg acactttgat gatttcccgc

780

acccctgaag tgacatgcgt ggtcgtggac gtgtcacagg aagatccgga ggtgcagttc

840

aattggtacg tggatggcgt cgaggtgcac aacgccaaaa ccaagccgag ggaggagcag

900

ttcaactcca cttaccgcgt cgtgtccgtg ctgacggtgc tgcatcagga ctggctgaac

960

gggaaggagt acaagtgcaa agtgtccaac aagggacttc ctagctcaat cgaaaagacc

1020

atctcgaaag ccaagggaca gccccgggaa ccccaagtgt ataccctgcc accgagccag

1080

gaagaaatga ctaagaacca agtctcattg acttgccttg tgaagggctt ctacccatcg

1140

gatatcgccg tggaatggga gtccaacggc cagccggaaa acaactacaa gaccacccct

1200

ccggtgctgg actcagacgg atccttcttc ctctactcgc ggctgaccgt ggataagagc

1260

agatggcagg agggaaatgt gttcagctgt tctgtgatgc atgaagccct gcacaaccac

1320

tacactcaga agtccctgtc cctctccctg gga

1353

<210> 124

<211> 1353

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 124

caggtgcagc tggtgcagtc tggcgccgaa gtgaagaaac ctggcgcctc cgtgaaggtg

tcctgcaagg cctctggctt caccctgacc aactacggca tgaactgggt gcgacaggcc

120

aggggccagc ggctggaatg gatcggctgg atcaacaccg acaccggcga gcctacctac

180

gccgacgact tcaagggcag attcgtgttc tccctggaca cctccgtgtc caccgcctac

240

ctgcagatct ccagcctgaa ggccgaggat accgccgtgt actactgcgc ccggaacccc

300

ccttactact acggcaccaa caacgccgag gccatggact attggggcca gggcaccacc

360

gtgaccgtgt cctctgcttc taccaagggg cccagcgtgt tccccctggc cccctgctcc

420

agaagcacca gcgagagcac agccgccctg ggctgcctgg tgaaggacta cttccccgag

480

cccgtgaccg tgtcctggaa cagcggagcc ctgaccagcg gcgtgcacac cttccccgcc

540

gtgctgcaga gcagcggcct gtacagcctg agcagcgtgg tgaccgtgcc cagcagcagc

600

ctgggcacca agacctacac ctgtaacgtg gaccacaagc ccagcaacac caaggtggac

660

aagagggtgg agagcaagta cggcccaccc tgccccccct gcccagcccc cgagttcctg

720

ggcggaccca gcgtgttcct gttccccccc aagcccaagg acaccctgat gatcagcaga

780

acccccgagg tgacctgtgt ggtggtggac gtgtcccagg aggaccccga ggtccagttc

840

aactggtacg tggacggcgt ggaggtgcac aacgccaaga ccaagcccag agaggagcag

900

tttaacagca cctaccgggt ggtgtccgtg ctgaccgtgc tgcaccagga ctggctgaac

960

ggcaaagagt acaagtgtaa ggtctccaac aagggcctgc caagcagcat cgaaaagacc

1020

atcagcaagg ccaagggcca gcctagagag ccccaggtct acaccctgcc acccagccaa

1080

gaggagatga ccaagaacca ggtgtccctg acctgtctgg tgaagggctt ctacccaagc

1140

gacatcgccg tggagtggga gagcaacggc cagcccgaga acaactacaa gaccaccccc

1200

ccagtgctgg acagcgacgg cagcttcttc ctgtacagca ggctgaccgt ggacaagtcc

1260

agatggcagg agggcaacgt ctttagctgc tccgtgatgc acgaggccct gcacaaccac

1320

tacacccaga agagcctgag cctgtccctg ggc

1353

<210> 125

<211> 107

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 125

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ser Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Tyr Thr Ser Thr Leu His Leu Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Tyr Asn Leu Pro Trp

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210> 126

<211> 321

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 126

gatattcaga tgactcagtc acctagtagc ctgagcgcta gtgtgggcga tagagtgact

atcacctgta gctctagtca ggatatctct aactacctga actggtatct gcagaagccc

120

ggtcaatcac ctcagctgct gatctactac actagcaccc tgcacctggg cgtgccctct

180

aggtttagcg gtagcggtag tggcaccgag ttcaccctga ctatctctag cctgcagccc

240

gacgacttcg ctacctacta ctgtcagcag tactataacc tgccctggac cttcggtcaa

300

ggcactaagg tcgagattaa g

321

<210> 127

<211> 321

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 127

gacatccaga tgacccagtc cccctccagc ctgtctgctt ccgtgggcga cagagtgacc

atcacctgtt cctccagcca ggacatctcc aactacctga actggtatct gcagaagccc

120

ggccagtccc ctcagctgct gatctactac acctccaccc tgcacctggg cgtgccctcc

180

agattttccg gctctggctc tggcaccgag tttaccctga ccatcagctc cctgcagccc

240

gacgacttcg ccacctacta ctgccagcag tactacaacc tgccctggac cttcggccag

300

ggcaccaagg tggaaatcaa g

321

<210> 128

<211> 214

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 128

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ser Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Tyr Thr Ser Thr Leu His Leu Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Tyr Asn Leu Pro Trp

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala

100 105 110

Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly

115 120 125

Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala

130 135 140

Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln

145 150 155 160

Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser

165 170 175

Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr

180 185 190

Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser

195 200 205

Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210

<210> 129

<211> 642

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 129

gatattcaga tgactcagtc acctagtagc ctgagcgcta gtgtgggcga tagagtgact

atcacctgta gctctagtca ggatatctct aactacctga actggtatct gcagaagccc

120

ggtcaatcac ctcagctgct gatctactac actagcaccc tgcacctggg cgtgccctct

180

aggtttagcg gtagcggtag tggcaccgag ttcaccctga ctatctctag cctgcagccc

240

gacgacttcg ctacctacta ctgtcagcag tactataacc tgccctggac cttcggtcaa

300

ggcactaagg tcgagattaa gcgtacggtg gccgctccca gcgtgttcat cttccccccc

360

agcgacgagc agctgaagag cggcaccgcc agcgtggtgt gcctgctgaa caacttctac

420

ccccgggagg ccaaggtgca gtggaaggtg gacaacgccc tgcagagcgg caacagccag

480

gagagcgtca ccgagcagga cagcaaggac tccacctaca gcctgagcag caccctgacc

540

ctgagcaagg ccgactacga gaagcataag gtgtacgcct gcgaggtgac ccaccagggc

600

ctgtccagcc ccgtgaccaa gagcttcaac aggggcgagt gc

642

<210> 130

<211> 642

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 130

gacatccaga tgacccagtc cccctccagc ctgtctgctt ccgtgggcga cagagtgacc

atcacctgtt cctccagcca ggacatctcc aactacctga actggtatct gcagaagccc

120

ggccagtccc ctcagctgct gatctactac acctccaccc tgcacctggg cgtgccctcc

180

agattttccg gctctggctc tggcaccgag tttaccctga ccatcagctc cctgcagccc

240

gacgacttcg ccacctacta ctgccagcag tactacaacc tgccctggac cttcggccag

300

ggcaccaagg tggaaatcaa gcgtacggtg gccgctccca gcgtgttcat cttcccccca

360

agcgacgagc agctgaagag cggcaccgcc agcgtggtgt gtctgctgaa caacttctac

420

cccagggagg ccaaggtgca gtggaaggtg gacaacgccc tgcagagcgg caacagccag

480

gagagcgtca ccgagcagga cagcaaggac tccacctaca gcctgagcag caccctgacc

540

ctgagcaagg ccgactacga gaagcacaag gtgtacgcct gtgaggtgac ccaccagggc

600

ctgtccagcc ccgtgaccaa gagcttcaac aggggcgagt gc

642

<210> 131

<211> 125

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 131

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Phe Thr Leu Thr Asn Tyr

20 25 30

Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Trp Ile Asn Thr Asp Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Asp Asp Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Val Phe Ser Leu Asp Thr Ser Val Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Ile Ser Ser Leu Lys Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Asn Pro Pro Tyr Tyr Tyr Gly Thr Asn Asn Ala Glu Ala Met

100 105 110

Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

115 120 125

<210> 132

<211> 375

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 132

caggtgcagc tggtgcagtc aggcgccgaa gtgaagaaac ccggcgctag tgtgaaagtc

agctgtaaag ctagtggctt caccctgact aactacggga tgaactgggt ccgccaggcc

120

ccaggtcaag gcctcgagtg gatgggctgg attaacaccg acaccggcga gcctacctac

180

gccgacgact ttaagggcag attcgtgttt agcctggaca ctagtgtgtc taccgcctac

240

ctgcagatct ctagcctgaa ggccgaggac accgccgtct actactgcgc tagaaacccc

300

ccctactact acggcactaa caacgccgag gctatggact actggggtca aggcactacc

360

gtgaccgtgt ctagc

375

<210> 133

<211> 375

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 133

caggtgcagc tggtgcagtc tggcgccgaa gtgaagaaac ctggcgcctc cgtgaaggtg

tcctgcaagg cctctggctt caccctgacc aactacggca tgaactgggt gcgacaggcc

120

cctggacagg gcctggaatg gatgggctgg atcaacaccg acaccggcga gcctacctac

180

gccgacgact tcaagggcag attcgtgttc tccctggaca cctccgtgtc caccgcctac

240

ctgcagatct ccagcctgaa ggccgaggat accgccgtgt actactgcgc ccggaacccc

300

ccttactact acggcaccaa caacgccgag gccatggact attggggcca gggcaccacc

360

gtgaccgtgt cctct

375

<210> 134

<211> 451

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 134

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Phe Thr Leu Thr Asn Tyr

20 25 30

Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Trp Ile Asn Thr Asp Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Asp Asp Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Val Phe Ser Leu Asp Thr Ser Val Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Ile Ser Ser Leu Lys Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Asn Pro Pro Tyr Tyr Tyr Gly Thr Asn Asn Ala Glu Ala Met

100 105 110

Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr

115 120 125

Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser

130 135 140

Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu

145 150 155 160

Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His

165 170 175

Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser

180 185 190

Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys

195 200 205

Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu

210 215 220

Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu

225 230 235 240

Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu

245 250 255

Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser

260 265 270

Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu

275 280 285

Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr

290 295 300

Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn

305 310 315 320

Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser

325 330 335

Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln

340 345 350

Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val

355 360 365

Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val

370 375 380

Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro

385 390 395 400

Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr

405 410 415

Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val

420 425 430

Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu

435 440 445

Ser Leu Gly

450

<210> 135

<211> 1353

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 135

caggtgcagc tggtgcagtc aggcgccgaa gtgaagaaac ccggcgctag tgtgaaagtc

agctgtaaag ctagtggctt caccctgact aactacggga tgaactgggt ccgccaggcc

120

ccaggtcaag gcctcgagtg gatgggctgg attaacaccg acaccggcga gcctacctac

180

gccgacgact ttaagggcag attcgtgttt agcctggaca ctagtgtgtc taccgcctac

240

ctgcagatct ctagcctgaa ggccgaggac accgccgtct actactgcgc tagaaacccc

300

ccctactact acggcactaa caacgccgag gctatggact actggggtca aggcactacc

360

gtgaccgtgt ctagcgctag cactaagggc ccgtccgtgt tccccctggc accttgtagc

420

cggagcacta gcgaatccac cgctgccctc ggctgcctgg tcaaggatta cttcccggag

480

cccgtgaccg tgtcctggaa cagcggagcc ctgacctccg gagtgcacac cttccccgct

540

gtgctgcaga gctccgggct gtactcgctg tcgtcggtgg tcacggtgcc ttcatctagc

600

ctgggtacca agacctacac ttgcaacgtg gaccacaagc cttccaacac taaggtggac

660

aagcgcgtcg aatcgaagta cggcccaccg tgcccgcctt gtcccgcgcc ggagttcctc

720

ggcggtccct cggtctttct gttcccaccg aagcccaagg acactttgat gatttcccgc

780

acccctgaag tgacatgcgt ggtcgtggac gtgtcacagg aagatccgga ggtgcagttc

840

aattggtacg tggatggcgt cgaggtgcac aacgccaaaa ccaagccgag ggaggagcag

900

ttcaactcca cttaccgcgt cgtgtccgtg ctgacggtgc tgcatcagga ctggctgaac

960

gggaaggagt acaagtgcaa agtgtccaac aagggacttc ctagctcaat cgaaaagacc

1020

atctcgaaag ccaagggaca gccccgggaa ccccaagtgt ataccctgcc accgagccag

1080

gaagaaatga ctaagaacca agtctcattg acttgccttg tgaagggctt ctacccatcg

1140

gatatcgccg tggaatggga gtccaacggc cagccggaaa acaactacaa gaccacccct

1200

ccggtgctgg actcagacgg atccttcttc ctctactcgc ggctgaccgt ggataagagc

1260

agatggcagg agggaaatgt gttcagctgt tctgtgatgc atgaagccct gcacaaccac

1320

tacactcaga agtccctgtc cctctccctg gga

1353

<210> 136

<211> 1353

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 136

caggtgcagc tggtgcagtc tggcgccgaa gtgaagaaac ctggcgcctc cgtgaaggtg

tcctgcaagg cctctggctt caccctgacc aactacggca tgaactgggt gcgacaggcc

120

cctggacagg gcctggaatg gatgggctgg atcaacaccg acaccggcga gcctacctac

180

gccgacgact tcaagggcag attcgtgttc tccctggaca cctccgtgtc caccgcctac

240

ctgcagatct ccagcctgaa ggccgaggat accgccgtgt actactgcgc ccggaacccc

300

ccttactact acggcaccaa caacgccgag gccatggact attggggcca gggcaccacc

360

gtgaccgtgt cctctgcttc taccaagggg cccagcgtgt tccccctggc cccctgctcc

420

agaagcacca gcgagagcac agccgccctg ggctgcctgg tgaaggacta cttccccgag

480

cccgtgaccg tgtcctggaa cagcggagcc ctgaccagcg gcgtgcacac cttccccgcc

540

gtgctgcaga gcagcggcct gtacagcctg agcagcgtgg tgaccgtgcc cagcagcagc

600

ctgggcacca agacctacac ctgtaacgtg gaccacaagc ccagcaacac caaggtggac

660

aagagggtgg agagcaagta cggcccaccc tgccccccct gcccagcccc cgagttcctg

720

ggcggaccca gcgtgttcct gttccccccc aagcccaagg acaccctgat gatcagcaga

780

acccccgagg tgacctgtgt ggtggtggac gtgtcccagg aggaccccga ggtccagttc

840

aactggtacg tggacggcgt ggaggtgcac aacgccaaga ccaagcccag agaggagcag

900

tttaacagca cctaccgggt ggtgtccgtg ctgaccgtgc tgcaccagga ctggctgaac

960

ggcaaagagt acaagtgtaa ggtctccaac aagggcctgc caagcagcat cgaaaagacc

1020

atcagcaagg ccaagggcca gcctagagag ccccaggtct acaccctgcc acccagccaa

1080

gaggagatga ccaagaacca ggtgtccctg acctgtctgg tgaagggctt ctacccaagc

1140

gacatcgccg tggagtggga gagcaacggc cagcccgaga acaactacaa gaccaccccc

1200

ccagtgctgg acagcgacgg cagcttcttc ctgtacagca ggctgaccgt ggacaagtcc

1260

agatggcagg agggcaacgt ctttagctgc tccgtgatgc acgaggccct gcacaaccac

1320

tacacccaga agagcctgag cctgtccctg ggc

1353

<210> 137

<211> 107

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 137

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ser Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Tyr Thr Ser Thr Leu His Leu Gly Ile Pro Pro Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Asn Asn Ile Glu Ser

65 70 75 80

Glu Asp Ala Ala Tyr Tyr Phe Cys Gln Gln Tyr Tyr Asn Leu Pro Trp

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210> 138

<211> 321

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 138

gatattcaga tgactcagtc acctagtagc ctgagcgcta gtgtgggcga tagagtgact

atcacctgta gctctagtca ggatatctct aactacctga actggtatca gcagaagccc

120

ggtaaagccc ctaagctgct gatctactac actagcaccc tgcacctggg aatcccccct

180

aggtttagcg gtagcggcta cggcaccgac ttcaccctga ctattaacaa tatcgagtca

240

gaggacgccg cctactactt ctgtcagcag tactataacc tgccctggac cttcggtcaa

300

ggcactaagg tcgagattaa g

321

<210> 139

<211> 321

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 139

gacatccaga tgacccagtc cccctccagc ctgtctgctt ccgtgggcga cagagtgacc

atcacctgtt cctccagcca ggacatctcc aactacctga actggtatca gcagaagccc

120

ggcaaggccc ccaagctgct gatctactac acctccaccc tgcacctggg catcccccct

180

agattctccg gctctggcta cggcaccgac ttcaccctga ccatcaacaa catcgagtcc

240

gaggacgccg cctactactt ctgccagcag tactacaacc tgccctggac cttcggccag

300

ggcaccaagg tggaaatcaa g

321

<210> 140

<211> 214

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 140

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ser Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Tyr Thr Ser Thr Leu His Leu Gly Ile Pro Pro Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Asn Asn Ile Glu Ser

65 70 75 80

Glu Asp Ala Ala Tyr Tyr Phe Cys Gln Gln Tyr Tyr Asn Leu Pro Trp

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala

100 105 110

Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly

115 120 125

Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala

130 135 140

Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln

145 150 155 160

Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser

165 170 175

Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr

180 185 190

Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser

195 200 205

Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210

<210> 141

<211> 642

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 141

gatattcaga tgactcagtc acctagtagc ctgagcgcta gtgtgggcga tagagtgact

atcacctgta gctctagtca ggatatctct aactacctga actggtatca gcagaagccc

120

ggtaaagccc ctaagctgct gatctactac actagcaccc tgcacctggg aatcccccct

180

aggtttagcg gtagcggcta cggcaccgac ttcaccctga ctattaacaa tatcgagtca

240

gaggacgccg cctactactt ctgtcagcag tactataacc tgccctggac cttcggtcaa

300

ggcactaagg tcgagattaa gcgtacggtg gccgctccca gcgtgttcat cttccccccc

360

agcgacgagc agctgaagag cggcaccgcc agcgtggtgt gcctgctgaa caacttctac

420

ccccgggagg ccaaggtgca gtggaaggtg gacaacgccc tgcagagcgg caacagccag

480

gagagcgtca ccgagcagga cagcaaggac tccacctaca gcctgagcag caccctgacc

540

ctgagcaagg ccgactacga gaagcataag gtgtacgcct gcgaggtgac ccaccagggc

600

ctgtccagcc ccgtgaccaa gagcttcaac aggggcgagt gc

642

<210> 142

<211> 642

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 142

gacatccaga tgacccagtc cccctccagc ctgtctgctt ccgtgggcga cagagtgacc

atcacctgtt cctccagcca ggacatctcc aactacctga actggtatca gcagaagccc

120

ggcaaggccc ccaagctgct gatctactac acctccaccc tgcacctggg catcccccct

180

agattctccg gctctggcta cggcaccgac ttcaccctga ccatcaacaa catcgagtcc

240

gaggacgccg cctactactt ctgccagcag tactacaacc tgccctggac cttcggccag

300

ggcaccaagg tggaaatcaa gcgtacggtg gccgctccca gcgtgttcat cttcccccca

360

agcgacgagc agctgaagag cggcaccgcc agcgtggtgt gtctgctgaa caacttctac

420

cccagggagg ccaaggtgca gtggaaggtg gacaacgccc tgcagagcgg caacagccag

480

gagagcgtca ccgagcagga cagcaaggac tccacctaca gcctgagcag caccctgacc

540

ctgagcaagg ccgactacga gaagcacaag gtgtacgcct gtgaggtgac ccaccagggc

600

ctgtccagcc ccgtgaccaa gagcttcaac aggggcgagt gc

642

<210> 143

<211> 15

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический олигонуклеотид"

<400> 143

aattacggga tgaac

<210> 144

<211> 15

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический олигонуклеотид"

<400> 144

aactacggca tgaac

<210> 145

<211> 51

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический олигонуклеотид"

<400> 145

tggattaaca ccgacaccgg ggagcctacc tacgcggacg atttcaaggg a

<210> 146

<211> 51

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический олигонуклеотид"

<400> 146

tggatcaaca ccgacaccgg cgagcctacc tacgccgacg acttcaaggg c

<210> 147

<211> 48

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический олигонуклеотид"

<400> 147

aacccgccct actactacgg aaccaacaac gccgaagcca tggactac

<210> 148

<211> 48

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический олигонуклеотид"

<400> 148

aacccccctt actactacgg caccaacaac gccgaggcca tggactat

<210> 149

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический олигонуклеотид"

<400> 149

ggattcaccc tcaccaatta c

<210> 150

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический олигонуклеотид"

<400> 150

ggcttcaccc tgaccaacta c

<210> 151

<211> 18

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический олигонуклеотид"

<400> 151

aacaccgaca ccggggag

<210> 152

<211> 18

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический олигонуклеотид"

<400> 152

aacaccgaca ccggcgag

<210> 153

<211> 33

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический олигонуклеотид"

<400> 153

agctctagtc aggatatctc taactacctg aac

<210> 154

<211> 33

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический олигонуклеотид"

<400> 154

tcctccagcc aggacatctc caactacctg aac

<210> 155

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический олигонуклеотид"

<400> 155

tacactagca ccctgcacct g

<210> 156

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический олигонуклеотид"

<400> 156

tacacctcca ccctgcacct g

<210> 157

<211> 27

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический олигонуклеотид"

<400> 157

cagcagtact ataacctgcc ctggacc

<210> 158

<211> 27

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический олигонуклеотид"

<400> 158

cagcagtact acaacctgcc ctggacc

<210> 159

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический олигонуклеотид"

<400> 159

agtcaggata tctctaacta c

<210> 160

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический олигонуклеотид"

<400> 160

agccaggaca tctccaacta c

<210> 161

<211> 9

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический олигонуклеотид"

<400> 161

tacactagc

<210> 162

<211> 9

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический олигонуклеотид"

<400> 162

tacacctcc

<210> 163

<211> 18

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический олигонуклеотид"

<400> 163

tactataacc tgccctgg

<210> 164

<211> 18

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический олигонуклеотид"

<400> 164

tactacaacc tgccctgg

<210> 165

<211> 15

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический олигонуклеотид"

<400> 165

aactacggga tgaac

<210> 166

<211> 51

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический олигонуклеотид"

<400> 166

tggattaaca ccgacaccgg cgagcctacc tacgccgacg actttaaggg c

<210> 167

<211> 48

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический олигонуклеотид"

<400> 167

aaccccccct actactacgg cactaacaac gccgaggcta tggactac

<210> 168

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический олигонуклеотид"

<400> 168

ggcttcaccc tgactaacta c

<210> 169

<211> 447

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 169

Gln Val Gln Leu Gln Gln Trp Gly Ala Gly Leu Leu Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Val Tyr Gly Gly Ser Phe Ser Asp Tyr

20 25 30

Tyr Trp Asn Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Glu Ile Asn His Arg Gly Ser Thr Asn Ser Asn Pro Ser Leu Lys

50 55 60

Ser Arg Val Thr Leu Ser Leu Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu

65 70 75 80

Lys Leu Arg Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Phe Gly Tyr Ser Asp Tyr Glu Tyr Asn Trp Phe Asp Pro Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val

115 120 125

Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala

130 135 140

Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser

145 150 155 160

Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val

165 170 175

Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro

180 185 190

Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys

195 200 205

Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro

210 215 220

Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val

225 230 235 240

Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr

245 250 255

Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu

260 265 270

Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys

275 280 285

Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser

290 295 300

Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys

305 310 315 320

Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile

325 330 335

Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro

340 345 350

Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu

355 360 365

Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn

370 375 380

Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser

385 390 395 400

Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg

405 410 415

Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu

420 425 430

His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys

435 440 445

<210> 170

<211> 214

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 170

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr

20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Asn Trp Pro Leu

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Asn Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala

100 105 110

Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly

115 120 125

Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala

130 135 140

Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln

145 150 155 160

Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser

165 170 175

Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr

180 185 190

Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser

195 200 205

Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210

<210> 171

<211> 446

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 171

Gln Val Gln Leu Lys Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Ala Pro Ser Gln

1 5 10 15

Ser Leu Ser Ile Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ala Tyr

20 25 30

Gly Val Asn Trp Val Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu

35 40 45

Gly Met Ile Trp Asp Asp Gly Ser Thr Asp Tyr Asn Ser Ala Leu Lys

50 55 60

Ser Arg Leu Ser Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Phe Leu

65 70 75 80

Lys Met Asn Ser Leu Gln Thr Asp Asp Thr Ala Arg Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Arg Glu Gly Asp Val Ala Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu

100 105 110

Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala

115 120 125

Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu

130 135 140

Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly

145 150 155 160

Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser

165 170 175

Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu

180 185 190

Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr

195 200 205

Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr

210 215 220

Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe

225 230 235 240

Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro

245 250 255

Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val

260 265 270

Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr

275 280 285

Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val

290 295 300

Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys

305 310 315 320

Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser

325 330 335

Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro

340 345 350

Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val

355 360 365

Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly

370 375 380

Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp

385 390 395 400

Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp

405 410 415

Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His

420 425 430

Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

435 440 445

<210> 172

<211> 220

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 172

Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ala Val Ser Val Gly

1 5 10 15

Gln Lys Val Thr Met Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Gly

20 25 30

Ser Asn Gln Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln

35 40 45

Ser Pro Lys Leu Leu Val Tyr Phe Ala Ser Thr Arg Asp Ser Gly Val

50 55 60

Pro Asp Arg Phe Ile Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr

65 70 75 80

Ile Ser Ser Val Gln Ala Glu Asp Leu Ala Asp Tyr Phe Cys Leu Gln

85 90 95

His Phe Gly Thr Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile

100 105 110

Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp

115 120 125

Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn

130 135 140

Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu

145 150 155 160

Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp

165 170 175

Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr

180 185 190

Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser

195 200 205

Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210 215 220

<210> 173

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 173

Gly Phe Thr Leu Thr Asn Tyr Gly Met Asn

1 5 10

<210> 174

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 174

Ser Tyr Asn Met His

1 5

<210> 175

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 175

Asp Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser Tyr Asn Gln Lys Phe Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 176

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 176

Val Gly Gly Ala Phe Pro Met Asp Tyr

1 5

<210> 177

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 177

Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

1 5

<210> 178

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 178

Tyr Pro Gly Asn Gly Asp

1 5

<210> 179

<211> 118

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 179

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

20 25 30

Asn Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Asp Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser Tyr Asn Gln Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Val Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Val Gly Gly Ala Phe Pro Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Thr Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 180

<211> 354

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 180

caggtgcagc tggtgcagtc aggcgccgaa gtgaagaaac ccggctctag cgtgaaagtt

tcttgtaaag ctagtggcta caccttcact agctataata tgcactgggt tcgccaggcc

120

ccagggcaag gcctcgagtg gatgggcgat atctaccccg ggaacggcga cactagttat

180

aatcagaagt ttaagggtag agtcactatc accgccgata agtctactag caccgtctat

240

atggaactga gttccctgag gtctgaggac accgccgtct actactgcgc tagagtgggc

300

ggagccttcc ctatggacta ctggggtcaa ggcactaccg tgaccgtgtc tagc

354

<210> 181

<211> 444

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 181

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

20 25 30

Asn Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Asp Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser Tyr Asn Gln Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Val Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Val Gly Gly Ala Phe Pro Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro

115 120 125

Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly

130 135 140

Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn

145 150 155 160

Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln

165 170 175

Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser

180 185 190

Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser

195 200 205

Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys

210 215 220

Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu

225 230 235 240

Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu

245 250 255

Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln

260 265 270

Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys

275 280 285

Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu

290 295 300

Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys

305 310 315 320

Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys

325 330 335

Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser

340 345 350

Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys

355 360 365

Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln

370 375 380

Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly

385 390 395 400

Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln

405 410 415

Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn

420 425 430

His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly

435 440

<210> 182

<211> 1332

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 182

caggtgcagc tggtgcagtc aggcgccgaa gtgaagaaac ccggctctag cgtgaaagtt

tcttgtaaag ctagtggcta caccttcact agctataata tgcactgggt tcgccaggcc

120

ccagggcaag gcctcgagtg gatgggcgat atctaccccg ggaacggcga cactagttat

180

aatcagaagt ttaagggtag agtcactatc accgccgata agtctactag caccgtctat

240

atggaactga gttccctgag gtctgaggac accgccgtct actactgcgc tagagtgggc

300

ggagccttcc ctatggacta ctggggtcaa ggcactaccg tgaccgtgtc tagcgctagc

360

actaagggcc cgtccgtgtt ccccctggca ccttgtagcc ggagcactag cgaatccacc

420

gctgccctcg gctgcctggt caaggattac ttcccggagc ccgtgaccgt gtcctggaac

480

agcggagccc tgacctccgg agtgcacacc ttccccgctg tgctgcagag ctccgggctg

540

tactcgctgt cgtcggtggt cacggtgcct tcatctagcc tgggtaccaa gacctacact

600

tgcaacgtgg accacaagcc ttccaacact aaggtggaca agcgcgtcga atcgaagtac

660

ggcccaccgt gcccgccttg tcccgcgccg gagttcctcg gcggtccctc ggtctttctg

720

ttcccaccga agcccaagga cactttgatg atttcccgca cccctgaagt gacatgcgtg

780

gtcgtggacg tgtcacagga agatccggag gtgcagttca attggtacgt ggatggcgtc

840

gaggtgcaca acgccaaaac caagccgagg gaggagcagt tcaactccac ttaccgcgtc

900

gtgtccgtgc tgacggtgct gcatcaggac tggctgaacg ggaaggagta caagtgcaaa

960

gtgtccaaca agggacttcc tagctcaatc gaaaagacca tctcgaaagc caagggacag

1020

ccccgggaac cccaagtgta taccctgcca ccgagccagg aagaaatgac taagaaccaa

1080

gtctcattga cttgccttgt gaagggcttc tacccatcgg atatcgccgt ggaatgggag

1140

tccaacggcc agccggaaaa caactacaag accacccctc cggtgctgga ctcagacgga

1200

tccttcttcc tctactcgcg gctgaccgtg gataagagca gatggcagga gggaaatgtg

1260

ttcagctgtt ctgtgatgca tgaagccctg cacaaccact acactcagaa gtccctgtcc

1320

ctctccctgg ga

1332

<210> 183

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 183

Arg Ala Ser Glu Ser Val Glu Tyr Tyr Gly Thr Ser Leu Met Gln

1 5 10 15

<210> 184

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 184

Ala Ala Ser Asn Val Glu Ser

1 5

<210> 185

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 185

Gln Gln Ser Arg Lys Asp Pro Ser Thr

1 5

<210> 186

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 186

Ser Glu Ser Val Glu Tyr Tyr Gly Thr Ser Leu

1 5 10

<210> 187

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 187

Ala Ala Ser

<210> 188

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 188

Ser Arg Lys Asp Pro Ser

1 5

<210> 189

<211> 111

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 189

Ala Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Glu Tyr Tyr

20 25 30

Gly Thr Ser Leu Met Gln Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro

35 40 45

Lys Leu Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Asn Val Glu Ser Gly Val Pro Ser

50 55 60

Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser

65 70 75 80

Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Ser Arg

85 90 95

Lys Asp Pro Ser Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105 110

<210> 190

<211> 333

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 190

gctattcagc tgactcagtc acctagtagc ctgagcgcta gtgtgggcga tagagtgact

atcacctgta gagctagtga atcagtcgag tactacggca ctagcctgat gcagtggtat

120

cagcagaagc ccgggaaagc ccctaagctg ctgatctacg ccgcctctaa cgtggaatca

180

ggcgtgccct ctaggtttag cggtagcggt agtggcaccg acttcaccct gactatctct

240

agcctgcagc ccgaggactt cgctacctac ttctgtcagc agtctaggaa ggaccctagc

300

accttcggcg gaggcactaa ggtcgagatt aag

333

<210> 191

<211> 218

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 191

Ala Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Glu Tyr Tyr

20 25 30

Gly Thr Ser Leu Met Gln Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro

35 40 45

Lys Leu Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Asn Val Glu Ser Gly Val Pro Ser

50 55 60

Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser

65 70 75 80

Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Ser Arg

85 90 95

Lys Asp Pro Ser Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg

100 105 110

Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln

115 120 125

Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr

130 135 140

Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser

145 150 155 160

Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr

165 170 175

Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys

180 185 190

His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro

195 200 205

Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210 215

<210> 192

<211> 654

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 192

gctattcagc tgactcagtc acctagtagc ctgagcgcta gtgtgggcga tagagtgact

atcacctgta gagctagtga atcagtcgag tactacggca ctagcctgat gcagtggtat

120

cagcagaagc ccgggaaagc ccctaagctg ctgatctacg ccgcctctaa cgtggaatca

180

ggcgtgccct ctaggtttag cggtagcggt agtggcaccg acttcaccct gactatctct

240

agcctgcagc ccgaggactt cgctacctac ttctgtcagc agtctaggaa ggaccctagc

300

accttcggcg gaggcactaa ggtcgagatt aagcgtacgg tggccgctcc cagcgtgttc

360

atcttccccc ccagcgacga gcagctgaag agcggcaccg ccagcgtggt gtgcctgctg

420

aacaacttct acccccggga ggccaaggtg cagtggaagg tggacaacgc cctgcagagc

480

ggcaacagcc aggagagcgt caccgagcag gacagcaagg actccaccta cagcctgagc

540

agcaccctga ccctgagcaa ggccgactac gagaagcata aggtgtacgc ctgcgaggtg

600

acccaccagg gcctgtccag ccccgtgacc aagagcttca acaggggcga gtgc

654

<210> 193

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 193

Asp Ile Tyr Pro Gly Gln Gly Asp Thr Ser Tyr Asn Gln Lys Phe Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 194

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 194

Tyr Pro Gly Gln Gly Asp

1 5

<210> 195

<211> 118

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 195

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

20 25 30

Asn Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Asp Ile Tyr Pro Gly Gln Gly Asp Thr Ser Tyr Asn Gln Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Ala Thr Met Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Val Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Val Gly Gly Ala Phe Pro Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 196

<211> 354

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 196

caggtgcagc tggtgcagtc aggcgccgaa gtgaagaaac ccggcgctag tgtgaaagtt

agctgtaaag ctagtggcta tactttcact tcttataata tgcactgggt ccgccaggcc

120

ccaggtcaag gcctcgagtg gatcggcgat atctaccccg gtcaaggcga cacttcctat

180

aatcagaagt ttaagggtag agctactatg accgccgata agtctacttc taccgtctat

240

atggaactga gttccctgag gtctgaggac accgccgtct actactgcgc tagagtgggc

300

ggagccttcc caatggacta ctggggtcaa ggcaccctgg tcaccgtgtc tagc

354

<210> 197

<211> 444

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 197

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

20 25 30

Asn Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Asp Ile Tyr Pro Gly Gln Gly Asp Thr Ser Tyr Asn Gln Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Ala Thr Met Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Val Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Val Gly Gly Ala Phe Pro Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro

115 120 125

Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly

130 135 140

Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn

145 150 155 160

Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln

165 170 175

Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser

180 185 190

Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser

195 200 205

Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys

210 215 220

Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu

225 230 235 240

Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu

245 250 255

Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln

260 265 270

Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys

275 280 285

Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu

290 295 300

Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys

305 310 315 320

Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys

325 330 335

Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser

340 345 350

Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys

355 360 365

Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln

370 375 380

Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly

385 390 395 400

Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln

405 410 415

Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn

420 425 430

His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly

435 440

<210> 198

<211> 1332

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 198

caggtgcagc tggtgcagtc aggcgccgaa gtgaagaaac ccggcgctag tgtgaaagtt

agctgtaaag ctagtggcta tactttcact tcttataata tgcactgggt ccgccaggcc

120

ccaggtcaag gcctcgagtg gatcggcgat atctaccccg gtcaaggcga cacttcctat

180

aatcagaagt ttaagggtag agctactatg accgccgata agtctacttc taccgtctat

240

atggaactga gttccctgag gtctgaggac accgccgtct actactgcgc tagagtgggc

300

ggagccttcc caatggacta ctggggtcaa ggcaccctgg tcaccgtgtc tagcgctagc

360

actaagggcc cgtccgtgtt ccccctggca ccttgtagcc ggagcactag cgaatccacc

420

gctgccctcg gctgcctggt caaggattac ttcccggagc ccgtgaccgt gtcctggaac

480

agcggagccc tgacctccgg agtgcacacc ttccccgctg tgctgcagag ctccgggctg

540

tactcgctgt cgtcggtggt cacggtgcct tcatctagcc tgggtaccaa gacctacact

600

tgcaacgtgg accacaagcc ttccaacact aaggtggaca agcgcgtcga atcgaagtac

660

ggcccaccgt gcccgccttg tcccgcgccg gagttcctcg gcggtccctc ggtctttctg

720

ttcccaccga agcccaagga cactttgatg atttcccgca cccctgaagt gacatgcgtg

780

gtcgtggacg tgtcacagga agatccggag gtgcagttca attggtacgt ggatggcgtc

840

gaggtgcaca acgccaaaac caagccgagg gaggagcagt tcaactccac ttaccgcgtc

900

gtgtccgtgc tgacggtgct gcatcaggac tggctgaacg ggaaggagta caagtgcaaa

960

gtgtccaaca agggacttcc tagctcaatc gaaaagacca tctcgaaagc caagggacag

1020

ccccgggaac cccaagtgta taccctgcca ccgagccagg aagaaatgac taagaaccaa

1080

gtctcattga cttgccttgt gaagggcttc tacccatcgg atatcgccgt ggaatgggag

1140

tccaacggcc agccggaaaa caactacaag accacccctc cggtgctgga ctcagacgga

1200

tccttcttcc tctactcgcg gctgaccgtg gataagagca gatggcagga gggaaatgtg

1260

ttcagctgtt ctgtgatgca tgaagccctg cacaaccact acactcagaa gtccctgtcc

1320

ctctccctgg ga

1332

<210> 199

<211> 111

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 199

Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Glu Tyr Tyr

20 25 30

Gly Thr Ser Leu Met Gln Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro

35 40 45

Lys Leu Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Asn Val Glu Ser Gly Val Pro Asp

50 55 60

Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser

65 70 75 80

Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Arg

85 90 95

Lys Asp Pro Ser Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105 110

<210> 200

<211> 333

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 200

gatatcgtcc tgactcagtc acccgatagc ctggccgtca gcctgggcga gcgggctact

attaactgta gagctagtga atcagtcgag tactacggca ctagcctgat gcagtggtat

120

cagcagaagc ccggtcaacc ccctaagctg ctgatctacg ccgcctctaa cgtggaatca

180

ggcgtgcccg ataggtttag cggtagcggt agtggcaccg acttcaccct gactattagt

240

agcctgcagg ccgaggacgt ggccgtctac tactgtcagc agtctaggaa ggaccctagc

300

accttcggcg gaggcactaa ggtcgagatt aag

333

<210> 201

<211> 218

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 201

Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Glu Tyr Tyr

20 25 30

Gly Thr Ser Leu Met Gln Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro

35 40 45

Lys Leu Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Asn Val Glu Ser Gly Val Pro Asp

50 55 60

Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser

65 70 75 80

Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Arg

85 90 95

Lys Asp Pro Ser Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg

100 105 110

Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln

115 120 125

Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr

130 135 140

Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser

145 150 155 160

Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr

165 170 175

Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys

180 185 190

His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro

195 200 205

Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210 215

<210> 202

<211> 654

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 202

gatatcgtcc tgactcagtc acccgatagc ctggccgtca gcctgggcga gcgggctact

attaactgta gagctagtga atcagtcgag tactacggca ctagcctgat gcagtggtat

120

cagcagaagc ccggtcaacc ccctaagctg ctgatctacg ccgcctctaa cgtggaatca

180

ggcgtgcccg ataggtttag cggtagcggt agtggcaccg acttcaccct gactattagt

240

agcctgcagg ccgaggacgt ggccgtctac tactgtcagc agtctaggaa ggaccctagc

300

accttcggcg gaggcactaa ggtcgagatt aagcgtacgg tggccgctcc cagcgtgttc

360

atcttccccc ccagcgacga gcagctgaag agcggcaccg ccagcgtggt gtgcctgctg

420

aacaacttct acccccggga ggccaaggtg cagtggaagg tggacaacgc cctgcagagc

480

ggcaacagcc aggagagcgt caccgagcag gacagcaagg actccaccta cagcctgagc

540

agcaccctga ccctgagcaa ggccgactac gagaagcata aggtgtacgc ctgcgaggtg

600

acccaccagg gcctgtccag ccccgtgacc aagagcttca acaggggcga gtgc

654

<210> 203

<211> 114

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 203

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser

20 25 30

Tyr Asp Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Asp Trp

35 40 45

Val Ser Thr Ile Ser Gly Gly Gly Thr Tyr Thr Tyr Tyr Gln Asp Ser

50 55 60

Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu

65 70 75 80

Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr

85 90 95

Cys Ala Ser Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser

100 105 110

Ser Ala

<210> 204

<211> 108

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 204

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Arg Arg Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr His Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Gly Ala Ser Thr Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser His Ser Ala Pro Leu

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg

100 105

<210> 205

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 205

Glu Val Gln Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Tyr Cys Val Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Gly Ser

20 25 30

Tyr Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp

35 40 45

Val Ser Ala Ile Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser

50 55 60

Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu

65 70 75 80

Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr

85 90 95

Cys Ala Lys Lys Tyr Tyr Val Gly Pro Ala Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

100 105 110

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly

115 120

<210> 206

<211> 113

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 206

Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Gln Ser Val Leu Tyr Ser

20 25 30

Ser Asn Asn Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln His Lys Pro Gly Gln

35 40 45

Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val

50 55 60

Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr

65 70 75 80

Ile Ser Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln

85 90 95

Tyr Tyr Ser Ser Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Ile Glu Val

100 105 110

Lys

<210> 207

<211> 114

<212> БЕЛОК

<213> Homo sapiens

<400> 207

Asn Trp Val Asn Val Ile Ser Asp Leu Lys Lys Ile Glu Asp Leu Ile

1 5 10 15

Gln Ser Met His Ile Asp Ala Thr Leu Tyr Thr Glu Ser Asp Val His

20 25 30

Pro Ser Cys Lys Val Thr Ala Met Lys Cys Phe Leu Leu Glu Leu Gln

35 40 45

Val Ile Ser Leu Glu Ser Gly Asp Ala Ser Ile His Asp Thr Val Glu

50 55 60

Asn Leu Ile Ile Leu Ala Asn Asn Ser Leu Ser Ser Asn Gly Asn Val

65 70 75 80

Thr Glu Ser Gly Cys Lys Glu Cys Glu Glu Leu Glu Glu Lys Asn Ile

85 90 95

Lys Glu Phe Leu Gln Ser Phe Val His Ile Val Gln Met Phe Ile Asn

100 105 110

Thr Ser

<210> 208

<211> 170

<212> БЕЛОК

<213> Homo sapiens

<400> 208

Ile Thr Cys Pro Pro Pro Met Ser Val Glu His Ala Asp Ile Trp Val

1 5 10 15

Lys Ser Tyr Ser Leu Tyr Ser Arg Glu Arg Tyr Ile Cys Asn Ser Gly

20 25 30

Phe Lys Arg Lys Ala Gly Thr Ser Ser Leu Thr Glu Cys Val Leu Asn

35 40 45

Lys Ala Thr Asn Val Ala His Trp Thr Thr Pro Ser Leu Lys Cys Ile

50 55 60

Arg Asp Pro Ala Leu Val His Gln Arg Pro Ala Pro Pro Ser Thr Val

65 70 75 80

Thr Thr Ala Gly Val Thr Pro Gln Pro Glu Ser Leu Ser Pro Ser Gly

85 90 95

Lys Glu Pro Ala Ala Ser Ser Pro Ser Ser Asn Asn Thr Ala Ala Thr

100 105 110

Thr Ala Ala Ile Val Pro Gly Ser Gln Leu Met Pro Ser Lys Ser Pro

115 120 125

Ser Thr Gly Thr Thr Glu Ile Ser Ser His Glu Ser Ser His Gly Thr

130 135 140

Pro Ser Gln Thr Thr Ala Lys Asn Trp Glu Leu Thr Ala Ser Ala Ser

145 150 155 160

His Gln Pro Pro Gly Val Tyr Pro Gln Gly

165 170

<210> 209

<211> 114

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 209

Asn Trp Val Asn Val Ile Ser Asp Leu Lys Lys Ile Glu Asp Leu Ile

1 5 10 15

Gln Ser Met His Ile Asp Ala Thr Leu Tyr Thr Glu Ser Asp Val His

20 25 30

Pro Ser Cys Lys Val Thr Ala Met Lys Cys Phe Leu Leu Glu Leu Gln

35 40 45

Val Ile Ser Leu Glu Ser Gly Asp Ala Ser Ile His Asp Thr Val Glu

50 55 60

Asn Leu Ile Ile Leu Ala Asn Asp Ser Leu Ser Ser Asn Gly Asn Val

65 70 75 80

Thr Glu Ser Gly Cys Lys Glu Cys Glu Glu Leu Glu Glu Lys Asn Ile

85 90 95

Lys Glu Phe Leu Gln Ser Phe Val His Ile Val Gln Met Phe Ile Asn

100 105 110

Thr Ser

<210> 210

<211> 297

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 210

Ile Thr Cys Pro Pro Pro Met Ser Val Glu His Ala Asp Ile Trp Val

1 5 10 15

Lys Ser Tyr Ser Leu Tyr Ser Arg Glu Arg Tyr Ile Cys Asn Ser Gly

20 25 30

Phe Lys Arg Lys Ala Gly Thr Ser Ser Leu Thr Glu Cys Val Leu Asn

35 40 45

Lys Ala Thr Asn Val Ala His Trp Thr Thr Pro Ser Leu Lys Cys Ile

50 55 60

Arg Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro

65 70 75 80

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys

85 90 95

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val

100 105 110

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr

115 120 125

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu

130 135 140

Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His

145 150 155 160

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys

165 170 175

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

180 185 190

Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu

195 200 205

Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro

210 215 220

Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn

225 230 235 240

Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu

245 250 255

Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val

260 265 270

Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln

275 280 285

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

290 295

<210> 211

<211> 114

<212> БЕЛОК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (93)..(93)

<223> /замена="Lys"

<220>

<221> Сайт

<222> (1)..(114)

<223> /примечание="Вариантные остатки, указанные в последовательности,

не имеют предпочтения относительно остатков в аннотациях

вариантных положений"

<400> 211

Asn Trp Val Asn Val Ile Ser Asp Leu Lys Lys Ile Glu Asp Leu Ile

1 5 10 15

Gln Ser Met His Ile Asp Ala Thr Leu Tyr Thr Glu Ser Asp Val His

20 25 30

Pro Ser Cys Lys Val Thr Ala Met Lys Cys Phe Leu Leu Glu Leu Gln

35 40 45

Val Ile Ser Leu Glu Ser Gly Asp Ala Ser Ile His Asp Thr Val Glu

50 55 60

Asn Leu Ile Ile Leu Ala Asn Asn Ser Leu Ser Ser Asn Gly Asn Val

65 70 75 80

Thr Glu Ser Gly Cys Lys Glu Cys Glu Glu Leu Glu Glu Lys Asn Ile

85 90 95

Lys Glu Phe Leu Gln Ser Phe Val His Ile Val Gln Met Phe Ile Asn

100 105 110

Thr Ser

<210> 212

<211> 77

<212> БЕЛОК

<213> Homo sapiens

<400> 212

Ile Thr Cys Pro Pro Pro Met Ser Val Glu His Ala Asp Ile Trp Val

1 5 10 15

Lys Ser Tyr Ser Leu Tyr Ser Arg Glu Arg Tyr Ile Cys Asn Ser Gly

20 25 30

Phe Lys Arg Lys Ala Gly Thr Ser Ser Leu Thr Glu Cys Val Leu Asn

35 40 45

Lys Ala Thr Asn Val Ala His Trp Thr Thr Pro Ser Leu Lys Cys Ile

50 55 60

Arg Asp Pro Ala Leu Val His Gln Arg Pro Ala Pro Pro

65 70 75

<210> 213

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 213

Gly Tyr Thr Phe Thr Thr Tyr Trp Met His

1 5 10

<210> 214

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 214

Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Trp Met Tyr

1 5 10

<210> 215

<211> 20

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 215

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

1 5 10 15

Gly Gly Gly Ser

<210> 216

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 216

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser

1 5 10 15

<210> 217

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 217

Gly Gly Gly Gly Ser

1 5

<210> 218

<211> 242

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 218

Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Thr Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr Val Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Asn Leu Glu Gln

65 70 75 80

Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Thr Gly Gly Gly Gly Ser

100 105 110

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Lys Leu Gln Glu

115 120 125

Ser Gly Pro Gly Leu Val Ala Pro Ser Gln Ser Leu Ser Val Thr Cys

130 135 140

Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg

145 150 155 160

Gln Pro Pro Arg Lys Gly Leu Glu Trp Leu Gly Val Ile Trp Gly Ser

165 170 175

Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ile

180 185 190

Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Phe Leu Lys Met Asn Ser Leu Gln

195 200 205

Thr Asp Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly

210 215 220

Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val

225 230 235 240

Ser Ser

<210> 219

<211> 242

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 219

Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Gly Gly Gly Gly Ser

100 105 110

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Val Gln Leu Gln Glu

115 120 125

Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys

130 135 140

Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg

145 150 155 160

Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly Val Ile Trp Gly Ser

165 170 175

Glu Thr Thr Tyr Tyr Ser Ser Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser

180 185 190

Lys Asp Asn Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr

195 200 205

Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly

210 215 220

Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val

225 230 235 240

Ser Ser

<210> 220

<211> 242

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 220

Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Gly Gly Gly Gly Ser

100 105 110

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Val Gln Leu Gln Glu

115 120 125

Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys

130 135 140

Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg

145 150 155 160

Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly Val Ile Trp Gly Ser

165 170 175

Glu Thr Thr Tyr Tyr Gln Ser Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser

180 185 190

Lys Asp Asn Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr

195 200 205

Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly

210 215 220

Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val

225 230 235 240

Ser Ser

<210> 221

<211> 242

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 221

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr

20 25 30

Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Ser Ser Ser Leu Lys

50 55 60

Ser Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu

65 70 75 80

Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly

115 120 125

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala

130 135 140

Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala

145 150 155 160

Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly

165 170 175

Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly

180 185 190

Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu

195 200 205

Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln

210 215 220

Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu

225 230 235 240

Ile Lys

<210> 222

<211> 242

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 222

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr

20 25 30

Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Gln Ser Ser Leu Lys

50 55 60

Ser Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu

65 70 75 80

Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly

115 120 125

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala

130 135 140

Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala

145 150 155 160

Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly

165 170 175

Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly

180 185 190

Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu

195 200 205

Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln

210 215 220

Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu

225 230 235 240

Ile Lys

<210> 223

<211> 247

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 223

Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Gly Gly Gly Gly Ser

100 105 110

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln

115 120 125

Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu Thr

130 135 140

Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly

145 150 155 160

Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly

165 170 175

Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Ser Ser Ser Leu Lys Ser

180 185 190

Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu Lys

195 200 205

Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Lys

210 215 220

His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

225 230 235 240

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

245

<210> 224

<211> 247

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 224

Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Gly Gly Gly Gly Ser

100 105 110

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln

115 120 125

Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu Thr

130 135 140

Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly

145 150 155 160

Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly

165 170 175

Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Gln Ser Ser Leu Lys Ser

180 185 190

Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu Lys

195 200 205

Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Lys

210 215 220

His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

225 230 235 240

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

245

<210> 225

<211> 247

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 225

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr

20 25 30

Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Ser Ser Ser Leu Lys

50 55 60

Ser Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu

65 70 75 80

Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly

115 120 125

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Ile Val Met

130 135 140

Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr

145 150 155 160

Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr

165 170 175

Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser

180 185 190

Arg Leu His Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly

195 200 205

Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala

210 215 220

Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gln

225 230 235 240

Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

245

<210> 226

<211> 247

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 226

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr

20 25 30

Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Gln Ser Ser Leu Lys

50 55 60

Ser Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu

65 70 75 80

Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly

115 120 125

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Ile Val Met

130 135 140

Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr

145 150 155 160

Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr

165 170 175

Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser

180 185 190

Arg Leu His Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly

195 200 205

Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala

210 215 220

Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gln

225 230 235 240

Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

245

<210> 227

<211> 247

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 227

Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Gly Gly Gly Gly Ser

100 105 110

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln

115 120 125

Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu Thr

130 135 140

Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly

145 150 155 160

Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly

165 170 175

Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ser Leu Lys Ser

180 185 190

Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu Lys

195 200 205

Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Lys

210 215 220

His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

225 230 235 240

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

245

<210> 228

<211> 247

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 228

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr

20 25 30

Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ser Leu Lys

50 55 60

Ser Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu

65 70 75 80

Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly

115 120 125

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Ile Val Met

130 135 140

Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr

145 150 155 160

Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr

165 170 175

Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser

180 185 190

Arg Leu His Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly

195 200 205

Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala

210 215 220

Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gln

225 230 235 240

Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

245

<210> 229

<211> 242

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 229

Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Gly Gly Gly Gly Ser

100 105 110

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Val Gln Leu Gln Glu

115 120 125

Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys

130 135 140

Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg

145 150 155 160

Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly Val Ile Trp Gly Ser

165 170 175

Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser

180 185 190

Lys Asp Asn Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr

195 200 205

Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly

210 215 220

Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val

225 230 235 240

Ser Ser

<210> 230

<211> 242

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 230

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr

20 25 30

Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ser Leu Lys

50 55 60

Ser Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu

65 70 75 80

Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly

115 120 125

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala

130 135 140

Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala

145 150 155 160

Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly

165 170 175

Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly

180 185 190

Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu

195 200 205

Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln

210 215 220

Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu

225 230 235 240

Ile Lys

<210> 231

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 231

His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr

1 5 10

<210> 232

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 232

Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr

1 5

<210> 233

<211> 18

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 233

Gly Ser Thr Ser Gly Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly Glu Gly Ser Thr

1 5 10 15

Lys Gly

<210> 234

<211> 119

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 234

Gln Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ala Phe Ser Ser Tyr

20 25 30

Trp Met Asn Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Gln Ile Tyr Pro Gly Asp Gly Asp Thr Asn Tyr Asn Gly Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Gln Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Gln Leu Ser Gly Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Ser Cys

85 90 95

Ala Arg Lys Thr Ile Ser Ser Val Val Asp Phe Tyr Phe Asp Tyr Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr

115

<210> 235

<211> 111

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 235

Glu Leu Val Leu Thr Gln Ser Pro Lys Phe Met Ser Thr Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Ser Val Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asn Val Gly Thr Asn

20 25 30

Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys Pro Leu Ile

35 40 45

Tyr Ser Ala Thr Tyr Arg Asn Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Thr Asn Val Gln Ser

65 70 75 80

Lys Asp Leu Ala Asp Tyr Phe Tyr Phe Cys Gln Tyr Asn Arg Tyr Pro

85 90 95

Tyr Thr Ser Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Arg Ser

100 105 110

<210> 236

<211> 248

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 236

Gln Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ala Phe Ser Ser Tyr

20 25 30

Trp Met Asn Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Gln Ile Tyr Pro Gly Asp Gly Asp Thr Asn Tyr Asn Gly Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Gln Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Gln Leu Ser Gly Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Ser Cys

85 90 95

Ala Arg Lys Thr Ile Ser Ser Val Val Asp Phe Tyr Phe Asp Tyr Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Gly Ser Thr Ser Gly Ser Gly Lys Pro

115 120 125

Gly Ser Gly Glu Gly Ser Thr Lys Gly Glu Leu Val Leu Thr Gln Ser

130 135 140

Pro Lys Phe Met Ser Thr Ser Val Gly Asp Arg Val Ser Val Thr Cys

145 150 155 160

Lys Ala Ser Gln Asn Val Gly Thr Asn Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys

165 170 175

Pro Gly Gln Ser Pro Lys Pro Leu Ile Tyr Ser Ala Thr Tyr Arg Asn

180 185 190

Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe

195 200 205

Thr Leu Thr Ile Thr Asn Val Gln Ser Lys Asp Leu Ala Asp Tyr Phe

210 215 220

Tyr Phe Cys Gln Tyr Asn Arg Tyr Pro Tyr Thr Ser Gly Gly Gly Thr

225 230 235 240

Lys Leu Glu Ile Lys Arg Arg Ser

245

<210> 237

<211> 486

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 237

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Thr Ser Ser Leu

20 25 30

Ser Ala Ser Leu Gly Asp Arg Val Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Gln

35 40 45

Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr

50 55 60

Val Lys Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val Pro

65 70 75 80

Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Thr Ile

85 90 95

Ser Asn Leu Glu Gln Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Gly

100 105 110

Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Thr

115 120 125

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu

130 135 140

Val Lys Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Ala Pro Ser Gln Ser

145 150 155 160

Leu Ser Val Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly

165 170 175

Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Arg Lys Gly Leu Glu Trp Leu Gly

180 185 190

Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu Lys Ser

195 200 205

Arg Leu Thr Ile Ile Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Phe Leu Lys

210 215 220

Met Asn Ser Leu Gln Thr Asp Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala Lys

225 230 235 240

His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

245 250 255

Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro

260 265 270

Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu

275 280 285

Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp

290 295 300

Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly

305 310 315 320

Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Lys Arg Gly Arg

325 330 335

Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met Arg Pro Val Gln

340 345 350

Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe Pro Glu Glu Glu

355 360 365

Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala

370 375 380

Pro Ala Tyr Lys Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu

385 390 395 400

Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp

405 410 415

Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu

420 425 430

Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile

435 440 445

Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr

450 455 460

Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met

465 470 475 480

Gln Ala Leu Pro Pro Arg

485

<210> 238

<211> 486

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 238

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu

20 25 30

Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln

35 40 45

Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala

50 55 60

Pro Arg Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Ile Pro

65 70 75 80

Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile

85 90 95

Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gly

100 105 110

Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

115 120 125

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln

130 135 140

Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu Thr

145 150 155 160

Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly

165 170 175

Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly

180 185 190

Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Ser Ser Ser Leu Lys Ser

195 200 205

Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu Lys

210 215 220

Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Lys

225 230 235 240

His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

245 250 255

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro

260 265 270

Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu

275 280 285

Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp

290 295 300

Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly

305 310 315 320

Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Lys Arg Gly Arg

325 330 335

Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met Arg Pro Val Gln

340 345 350

Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe Pro Glu Glu Glu

355 360 365

Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala

370 375 380

Pro Ala Tyr Lys Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu

385 390 395 400

Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp

405 410 415

Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu

420 425 430

Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile

435 440 445

Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr

450 455 460

Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met

465 470 475 480

Gln Ala Leu Pro Pro Arg

485

<210> 239

<211> 486

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 239

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu

20 25 30

Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln

35 40 45

Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala

50 55 60

Pro Arg Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Ile Pro

65 70 75 80

Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile

85 90 95

Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gly

100 105 110

Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

115 120 125

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln

130 135 140

Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu Thr

145 150 155 160

Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly

165 170 175

Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly

180 185 190

Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Gln Ser Ser Leu Lys Ser

195 200 205

Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu Lys

210 215 220

Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Lys

225 230 235 240

His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

245 250 255

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro

260 265 270

Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu

275 280 285

Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp

290 295 300

Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly

305 310 315 320

Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Lys Arg Gly Arg

325 330 335

Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met Arg Pro Val Gln

340 345 350

Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe Pro Glu Glu Glu

355 360 365

Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala

370 375 380

Pro Ala Tyr Lys Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu

385 390 395 400

Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp

405 410 415

Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu

420 425 430

Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile

435 440 445

Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr

450 455 460

Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met

465 470 475 480

Gln Ala Leu Pro Pro Arg

485

<210> 240

<211> 486

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 240

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu

20 25 30

Val Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val

35 40 45

Ser Leu Pro Asp Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys

50 55 60

Gly Leu Glu Trp Ile Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr

65 70 75 80

Ser Ser Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys

85 90 95

Asn Gln Val Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala

100 105 110

Val Tyr Tyr Cys Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met

115 120 125

Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly

130 135 140

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Ile Val Met

145 150 155 160

Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr

165 170 175

Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr

180 185 190

Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser

195 200 205

Arg Leu His Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly

210 215 220

Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala

225 230 235 240

Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gln

245 250 255

Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro

260 265 270

Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu

275 280 285

Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp

290 295 300

Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly

305 310 315 320

Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Lys Arg Gly Arg

325 330 335

Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met Arg Pro Val Gln

340 345 350

Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe Pro Glu Glu Glu

355 360 365

Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala

370 375 380

Pro Ala Tyr Lys Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu

385 390 395 400

Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp

405 410 415

Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu

420 425 430

Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile

435 440 445

Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr

450 455 460

Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met

465 470 475 480

Gln Ala Leu Pro Pro Arg

485

<210> 241

<211> 486

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 241

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu

20 25 30

Val Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val

35 40 45

Ser Leu Pro Asp Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys

50 55 60

Gly Leu Glu Trp Ile Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr

65 70 75 80

Gln Ser Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys

85 90 95

Asn Gln Val Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala

100 105 110

Val Tyr Tyr Cys Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met

115 120 125

Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly

130 135 140

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Ile Val Met

145 150 155 160

Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr

165 170 175

Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr

180 185 190

Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser

195 200 205

Arg Leu His Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly

210 215 220

Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala

225 230 235 240

Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gln

245 250 255

Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro

260 265 270

Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu

275 280 285

Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp

290 295 300

Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly

305 310 315 320

Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Lys Arg Gly Arg

325 330 335

Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met Arg Pro Val Gln

340 345 350

Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe Pro Glu Glu Glu

355 360 365

Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala

370 375 380

Pro Ala Tyr Lys Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu

385 390 395 400

Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp

405 410 415

Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu

420 425 430

Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile

435 440 445

Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr

450 455 460

Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met

465 470 475 480

Gln Ala Leu Pro Pro Arg

485

<210> 242

<211> 491

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 242

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu

20 25 30

Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln

35 40 45

Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala

50 55 60

Pro Arg Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Ile Pro

65 70 75 80

Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile

85 90 95

Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gly

100 105 110

Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

115 120 125

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

130 135 140

Gly Gly Gly Ser Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val

145 150 155 160

Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser

165 170 175

Leu Pro Asp Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly

180 185 190

Leu Glu Trp Ile Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Ser

195 200 205

Ser Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn

210 215 220

Gln Val Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val

225 230 235 240

Tyr Tyr Cys Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp

245 250 255

Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro

260 265 270

Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu

275 280 285

Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His

290 295 300

Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu

305 310 315 320

Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr

325 330 335

Cys Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe

340 345 350

Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg

355 360 365

Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser

370 375 380

Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Lys Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr

385 390 395 400

Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys

405 410 415

Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn

420 425 430

Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu

435 440 445

Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly

450 455 460

His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr

465 470 475 480

Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

485 490

<210> 243

<211> 491

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 243

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu

20 25 30

Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln

35 40 45

Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala

50 55 60

Pro Arg Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Ile Pro

65 70 75 80

Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile

85 90 95

Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gly

100 105 110

Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

115 120 125

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

130 135 140

Gly Gly Gly Ser Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val

145 150 155 160

Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser

165 170 175

Leu Pro Asp Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly

180 185 190

Leu Glu Trp Ile Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Gln

195 200 205

Ser Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn

210 215 220

Gln Val Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val

225 230 235 240

Tyr Tyr Cys Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp

245 250 255

Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro

260 265 270

Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu

275 280 285

Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His

290 295 300

Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu

305 310 315 320

Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr

325 330 335

Cys Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe

340 345 350

Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg

355 360 365

Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser

370 375 380

Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Lys Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr

385 390 395 400

Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys

405 410 415

Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn

420 425 430

Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu

435 440 445

Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly

450 455 460

His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr

465 470 475 480

Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

485 490

<210> 244

<211> 491

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 244

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu

20 25 30

Val Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val

35 40 45

Ser Leu Pro Asp Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys

50 55 60

Gly Leu Glu Trp Ile Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr

65 70 75 80

Ser Ser Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys

85 90 95

Asn Gln Val Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala

100 105 110

Val Tyr Tyr Cys Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met

115 120 125

Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly

130 135 140

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly

145 150 155 160

Ser Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro

165 170 175

Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys

180 185 190

Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu

195 200 205

Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser

210 215 220

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln

225 230 235 240

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro

245 250 255

Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Thr Thr Thr Pro

260 265 270

Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu

275 280 285

Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His

290 295 300

Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu

305 310 315 320

Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr

325 330 335

Cys Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe

340 345 350

Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg

355 360 365

Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser

370 375 380

Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Lys Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr

385 390 395 400

Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys

405 410 415

Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn

420 425 430

Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu

435 440 445

Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly

450 455 460

His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr

465 470 475 480

Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

485 490

<210> 245

<211> 491

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 245

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu

20 25 30

Val Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val

35 40 45

Ser Leu Pro Asp Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys

50 55 60

Gly Leu Glu Trp Ile Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr

65 70 75 80

Gln Ser Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys

85 90 95

Asn Gln Val Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala

100 105 110

Val Tyr Tyr Cys Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met

115 120 125

Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly

130 135 140

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly

145 150 155 160

Ser Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro

165 170 175

Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys

180 185 190

Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu

195 200 205

Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser

210 215 220

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln

225 230 235 240

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro

245 250 255

Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Thr Thr Thr Pro

260 265 270

Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu

275 280 285

Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His

290 295 300

Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu

305 310 315 320

Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr

325 330 335

Cys Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe

340 345 350

Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg

355 360 365

Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser

370 375 380

Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Lys Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr

385 390 395 400

Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys

405 410 415

Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn

420 425 430

Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu

435 440 445

Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly

450 455 460

His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr

465 470 475 480

Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

485 490

<210> 246

<211> 491

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 246

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu

20 25 30

Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln

35 40 45

Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala

50 55 60

Pro Arg Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Ile Pro

65 70 75 80

Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile

85 90 95

Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gly

100 105 110

Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

115 120 125

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

130 135 140

Gly Gly Gly Ser Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val

145 150 155 160

Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser

165 170 175

Leu Pro Asp Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly

180 185 190

Leu Glu Trp Ile Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn

195 200 205

Ser Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn

210 215 220

Gln Val Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val

225 230 235 240

Tyr Tyr Cys Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp

245 250 255

Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro

260 265 270

Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu

275 280 285

Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His

290 295 300

Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu

305 310 315 320

Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr

325 330 335

Cys Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe

340 345 350

Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg

355 360 365

Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser

370 375 380

Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Lys Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr

385 390 395 400

Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys

405 410 415

Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn

420 425 430

Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu

435 440 445

Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly

450 455 460

His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr

465 470 475 480

Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

485 490

<210> 247

<211> 491

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 247

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu

20 25 30

Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln

35 40 45

Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala

50 55 60

Pro Arg Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Ile Pro

65 70 75 80

Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile

85 90 95

Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gly

100 105 110

Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

115 120 125

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

130 135 140

Gly Gly Gly Ser Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val

145 150 155 160

Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser

165 170 175

Leu Pro Asp Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly

180 185 190

Leu Glu Trp Ile Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn

195 200 205

Ser Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn

210 215 220

Gln Val Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val

225 230 235 240

Tyr Tyr Cys Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp

245 250 255

Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro

260 265 270

Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu

275 280 285

Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His

290 295 300

Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu

305 310 315 320

Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr

325 330 335

Cys Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe

340 345 350

Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg

355 360 365

Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser

370 375 380

Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Lys Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr

385 390 395 400

Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys

405 410 415

Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn

420 425 430

Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu

435 440 445

Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly

450 455 460

His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr

465 470 475 480

Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

485 490

<210> 248

<211> 491

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 248

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu

20 25 30

Val Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val

35 40 45

Ser Leu Pro Asp Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys

50 55 60

Gly Leu Glu Trp Ile Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr

65 70 75 80

Asn Ser Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys

85 90 95

Asn Gln Val Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala

100 105 110

Val Tyr Tyr Cys Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met

115 120 125

Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly

130 135 140

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly

145 150 155 160

Ser Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro

165 170 175

Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys

180 185 190

Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu

195 200 205

Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser

210 215 220

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln

225 230 235 240

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro

245 250 255

Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Thr Thr Thr Pro

260 265 270

Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu

275 280 285

Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His

290 295 300

Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu

305 310 315 320

Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr

325 330 335

Cys Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe

340 345 350

Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg

355 360 365

Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser

370 375 380

Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Lys Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr

385 390 395 400

Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys

405 410 415

Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn

420 425 430

Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu

435 440 445

Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly

450 455 460

His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr

465 470 475 480

Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

485 490

<210> 249

<211> 486

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 249

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu

20 25 30

Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln

35 40 45

Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala

50 55 60

Pro Arg Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Ile Pro

65 70 75 80

Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile

85 90 95

Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gly

100 105 110

Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

115 120 125

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln

130 135 140

Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu Thr

145 150 155 160

Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly

165 170 175

Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly

180 185 190

Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ser Leu Lys Ser

195 200 205

Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu Lys

210 215 220

Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Lys

225 230 235 240

His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

245 250 255

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro

260 265 270

Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu

275 280 285

Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp

290 295 300

Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly

305 310 315 320

Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Lys Arg Gly Arg

325 330 335

Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met Arg Pro Val Gln

340 345 350

Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe Pro Glu Glu Glu

355 360 365

Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala

370 375 380

Pro Ala Tyr Lys Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu

385 390 395 400

Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp

405 410 415

Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu

420 425 430

Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile

435 440 445

Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr

450 455 460

Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met

465 470 475 480

Gln Ala Leu Pro Pro Arg

485

<210> 250

<211> 45

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 250

Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala

1 5 10 15

Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly

20 25 30

Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp

35 40 45

<210> 251

<211> 24

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 251

Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu

1 5 10 15

Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys

<210> 252

<211> 72

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический олигонуклеотид"

<400> 252

atctacatct gggcgccctt ggccgggact tgtggggtcc ttctcctgtc actggttatc

accctttact gc

<210> 253

<211> 230

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 253

Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe

1 5 10 15

Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr

20 25 30

Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val

35 40 45

Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val

50 55 60

Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser

65 70 75 80

Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu

85 90 95

Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser

100 105 110

Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro

115 120 125

Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln

130 135 140

Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala

145 150 155 160

Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr

165 170 175

Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu

180 185 190

Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser

195 200 205

Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser

210 215 220

Leu Ser Leu Gly Lys Met

225 230

<210> 254

<211> 135

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 254

accacgacgc cagcgccgcg accaccaaca ccggcgccca ccatcgcgtc gcagcccctg

tccctgcgcc cagaggcgtg ccggccagcg gcggggggcg cagtgcacac gagggggctg

120

gacttcgcct gtgat

135

<210> 255

<211> 690

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 255

gagagcaagt acggccctcc ctgcccccct tgccctgccc ccgagttcct gggcggaccc

agcgtgttcc tgttcccccc caagcccaag gacaccctga tgatcagccg gacccccgag

120

gtgacctgtg tggtggtgga cgtgtcccag gaggaccccg aggtccagtt caactggtac

180

gtggacggcg tggaggtgca caacgccaag accaagcccc gggaggagca gttcaatagc

240

acctaccggg tggtgtccgt gctgaccgtg ctgcaccagg actggctgaa cggcaaggaa

300

tacaagtgta aggtgtccaa caagggcctg cccagcagca tcgagaaaac catcagcaag

360

gccaagggcc agcctcggga gccccaggtg tacaccctgc cccctagcca agaggagatg

420

accaagaacc aggtgtccct gacctgcctg gtgaagggct tctaccccag cgacatcgcc

480

gtggagtggg agagcaacgg ccagcccgag aacaactaca agaccacccc ccctgtgctg

540

gacagcgacg gcagcttctt cctgtacagc cggctgaccg tggacaagag ccggtggcag

600

gagggcaacg tctttagctg ctccgtgatg cacgaggccc tgcacaacca ctacacccag

660

aagagcctga gcctgtccct gggcaagatg

690

<210> 256

<211> 282

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 256

Arg Trp Pro Glu Ser Pro Lys Ala Gln Ala Ser Ser Val Pro Thr Ala

1 5 10 15

Gln Pro Gln Ala Glu Gly Ser Leu Ala Lys Ala Thr Thr Ala Pro Ala

20 25 30

Thr Thr Arg Asn Thr Gly Arg Gly Gly Glu Glu Lys Lys Lys Glu Lys

35 40 45

Glu Lys Glu Glu Gln Glu Glu Arg Glu Thr Lys Thr Pro Glu Cys Pro

50 55 60

Ser His Thr Gln Pro Leu Gly Val Tyr Leu Leu Thr Pro Ala Val Gln

65 70 75 80

Asp Leu Trp Leu Arg Asp Lys Ala Thr Phe Thr Cys Phe Val Val Gly

85 90 95

Ser Asp Leu Lys Asp Ala His Leu Thr Trp Glu Val Ala Gly Lys Val

100 105 110

Pro Thr Gly Gly Val Glu Glu Gly Leu Leu Glu Arg His Ser Asn Gly

115 120 125

Ser Gln Ser Gln His Ser Arg Leu Thr Leu Pro Arg Ser Leu Trp Asn

130 135 140

Ala Gly Thr Ser Val Thr Cys Thr Leu Asn His Pro Ser Leu Pro Pro

145 150 155 160

Gln Arg Leu Met Ala Leu Arg Glu Pro Ala Ala Gln Ala Pro Val Lys

165 170 175

Leu Ser Leu Asn Leu Leu Ala Ser Ser Asp Pro Pro Glu Ala Ala Ser

180 185 190

Trp Leu Leu Cys Glu Val Ser Gly Phe Ser Pro Pro Asn Ile Leu Leu

195 200 205

Met Trp Leu Glu Asp Gln Arg Glu Val Asn Thr Ser Gly Phe Ala Pro

210 215 220

Ala Arg Pro Pro Pro Gln Pro Gly Ser Thr Thr Phe Trp Ala Trp Ser

225 230 235 240

Val Leu Arg Val Pro Ala Pro Pro Ser Pro Gln Pro Ala Thr Tyr Thr

245 250 255

Cys Val Val Ser His Glu Asp Ser Arg Thr Leu Leu Asn Ala Ser Arg

260 265 270

Ser Leu Glu Val Ser Tyr Val Thr Asp His

275 280

<210> 257

<211> 847

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 257

aggtggcccg aaagtcccaa ggcccaggca tctagtgttc ctactgcaca gccccaggca

gaaggcagcc tagccaaagc tactactgca cctgccacta cgcgcaatac tggccgtggc

120

ggggaggaga agaaaaagga gaaagagaaa gaagaacagg aagagaggga gaccaagacc

180

cctgaatgtc catcccatac ccagccgctg ggcgtctatc tcttgactcc cgcagtacag

240

gacttgtggc ttagagataa ggccaccttt acatgtttcg tcgtgggctc tgacctgaag

300

gatgcccatt tgacttggga ggttgccgga aaggtaccca cagggggggt tgaggaaggg

360

ttgctggagc gccattccaa tggctctcag agccagcact caagactcac ccttccgaga

420

tccctgtgga acgccgggac ctctgtcaca tgtactctaa atcatcctag cctgccccca

480

cagcgtctga tggcccttag agagccagcc gcccaggcac cagttaagct tagcctgaat

540

ctgctcgcca gtagtgatcc cccagaggcc gccagctggc tcttatgcga agtgtccggc

600

tttagcccgc ccaacatctt gctcatgtgg ctggaggacc agcgagaagt gaacaccagc

660

ggcttcgctc cagcccggcc cccaccccag ccgggttcta ccacattctg ggcctggagt

720

gtcttaaggg tcccagcacc acctagcccc cagccagcca catacacctg tgttgtgtcc

780

catgaagata gcaggaccct gctaaatgct tctaggagtc tggaggtttc ctacgtgact

840

gaccatt

847

<210> 258

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 258

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser

1 5 10

<210> 259

<211> 30

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический олигонуклеотид"

<400> 259

ggtggcggag gttctggagg tggaggttcc

<210> 260

<211> 112

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 260

Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Lys Gln Gly

1 5 10 15

Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr

20 25 30

Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys

35 40 45

Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys

50 55 60

Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg

65 70 75 80

Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala

85 90 95

Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

100 105 110

<210> 261

<211> 112

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 261

Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly

1 5 10 15

Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr

20 25 30

Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys

35 40 45

Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys

50 55 60

Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg

65 70 75 80

Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala

85 90 95

Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

100 105 110

<210> 262

<211> 336

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 262

agagtgaagt tcagcaggag cgcagacgcc cccgcgtaca agcagggcca gaaccagctc

tataacgagc tcaatctagg acgaagagag gagtacgatg ttttggacaa gagacgtggc

120

cgggaccctg agatgggggg aaagccgaga aggaagaacc ctcaggaagg cctgtacaat

180

gaactgcaga aagataagat ggcggaggcc tacagtgaga ttgggatgaa aggcgagcgc

240

cggaggggca aggggcacga tggcctttac cagggtctca gtacagccac caaggacacc

300

tacgacgccc ttcacatgca ggccctgccc cctcgc

336

<210> 263

<211> 336

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 263

agagtgaagt tcagcaggag cgcagacgcc cccgcgtacc agcagggcca gaaccagctc

tataacgagc tcaatctagg acgaagagag gagtacgatg ttttggacaa gagacgtggc

120

cgggaccctg agatgggggg aaagccgaga aggaagaacc ctcaggaagg cctgtacaat

180

gaactgcaga aagataagat ggcggaggcc tacagtgaga ttgggatgaa aggcgagcgc

240

cggaggggca aggggcacga tggcctttac cagggtctca gtacagccac caaggacacc

300

tacgacgccc ttcacatgca ggccctgccc cctcgc

336

<210> 264

<211> 42

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 264

Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met

1 5 10 15

Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe

20 25 30

Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu

35 40

<210> 265

<211> 48

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 265

Gln Arg Arg Lys Tyr Arg Ser Asn Lys Gly Glu Ser Pro Val Glu Pro

1 5 10 15

Ala Glu Pro Cys Arg Tyr Ser Cys Pro Arg Glu Glu Glu Gly Ser Thr

20 25 30

Ile Pro Ile Gln Glu Asp Tyr Arg Lys Pro Glu Pro Ala Cys Ser Pro

35 40 45

<210> 266

<211> 126

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 266

aaacggggca gaaagaaact cctgtatata ttcaaacaac catttatgag accagtacaa

actactcaag aggaagatgg ctgtagctgc cgatttccag aagaagaaga aggaggatgt

120

gaactg

126

<210> 267

<211> 144

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 267

caacgaagga aatatagatc aaacaaagga gaaagtcctg tggagcctgc agagccttgt

cgttacagct gccccaggga ggaggagggc agcaccatcc ccatccagga ggattaccga

120

aaaccggagc ctgcctgctc cccc

144

<210> 268

<211> 21

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 268

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro

<210> 269

<211> 2000

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<220>

<221> другой_признак

<222> (1)..(2000)

<223> /примечание="Эта последовательность может охватывать 50-2000

нуклеотидов"

<400> 269

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

120

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

180

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

240

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

300

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

360

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

420

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

480

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

540

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

600

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

660

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

720

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

780

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

840

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

900

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

960

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1020

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1080

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1140

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1200

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1260

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1320

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1380

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1440

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1500

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1560

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1620

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1680

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1740

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1800

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1860

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1920

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1980

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

2000

<210> 270

<211> 1184

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 270

cgtgaggctc cggtgcccgt cagtgggcag agcgcacatc gcccacagtc cccgagaagt

tggggggagg ggtcggcaat tgaaccggtg cctagagaag gtggcgcggg gtaaactggg

120

aaagtgatgt cgtgtactgg ctccgccttt ttcccgaggg tgggggagaa ccgtatataa

180

gtgcagtagt cgccgtgaac gttctttttc gcaacgggtt tgccgccaga acacaggtaa

240

gtgccgtgtg tggttcccgc gggcctggcc tctttacggg ttatggccct tgcgtgcctt

300

gaattacttc cacctggctg cagtacgtga ttcttgatcc cgagcttcgg gttggaagtg

360

ggtgggagag ttcgaggcct tgcgcttaag gagccccttc gcctcgtgct tgagttgagg

420

cctggcctgg gcgctggggc cgccgcgtgc gaatctggtg gcaccttcgc gcctgtctcg

480

ctgctttcga taagtctcta gccatttaaa atttttgatg acctgctgcg acgctttttt

540

tctggcaaga tagtcttgta aatgcgggcc aagatctgca cactggtatt tcggtttttg

600

gggccgcggg cggcgacggg gcccgtgcgt cccagcgcac atgttcggcg aggcggggcc

660

tgcgagcgcg gccaccgaga atcggacggg ggtagtctca agctggccgg cctgctctgg

720

tgcctggcct cgcgccgccg tgtatcgccc cgccctgggc ggcaaggctg gcccggtcgg

780

caccagttgc gtgagcggaa agatggccgc ttcccggccc tgctgcaggg agctcaaaat

840

ggaggacgcg gcgctcggga gagcgggcgg gtgagtcacc cacacaaagg aaaagggcct

900

ttccgtcctc agccgtcgct tcatgtgact ccacggagta ccgggcgccg tccaggcacc

960

tcgattagtt ctcgagcttt tggagtacgt cgtctttagg ttggggggag gggttttatg

1020

cgatggagtt tccccacact gagtgggtgg agactgaagt taggccagct tggcacttga

1080

tgtaattctc cttggaattt gccctttttg agtttggatc ttggttcatt ctcaagcctc

1140

agacagtggt tcaaagtttt tttcttccat ttcaggtgtc gtga

1184

<210> 271

<211> 448

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 271

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Asp Tyr Ser Ile Thr Ser Asp

20 25 30

Tyr Ala Trp Asn Trp Ile Arg Gln Phe Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp

35 40 45

Met Gly Tyr Ile Ser Tyr Ser Gly Ser Thr Ser Tyr Asn Pro Ser Leu

50 55 60

Lys Ser Arg Ile Thr Ile Ser Arg Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser

65 70 75 80

Leu Gln Leu Asn Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Ser Phe Asp Tyr Ala His Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro

115 120 125

Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly

130 135 140

Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn

145 150 155 160

Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln

165 170 175

Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser

180 185 190

Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser

195 200 205

Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr

210 215 220

His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser

225 230 235 240

Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg

245 250 255

Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro

260 265 270

Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala

275 280 285

Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val

290 295 300

Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr

305 310 315 320

Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr

325 330 335

Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu

340 345 350

Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys

355 360 365

Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser

370 375 380

Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp

385 390 395 400

Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser

405 410 415

Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala

420 425 430

Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

435 440 445

<210> 272

<211> 214

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 272

Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Phe Leu Ser Val Thr Pro Gly

1 5 10 15

Glu Lys Val Thr Phe Thr Cys Gln Ala Ser Gln Ser Ile Gly Thr Ser

20 25 30

Ile His Trp Tyr Gln Gln Lys Thr Asp Gln Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Lys Tyr Ala Ser Glu Ser Ile Ser Gly Ile Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Val Glu Ala

65 70 75 80

Glu Asp Ala Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Gln Ile Asn Ser Trp Pro Thr

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala

100 105 110

Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly

115 120 125

Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala

130 135 140

Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln

145 150 155 160

Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser

165 170 175

Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr

180 185 190

Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser

195 200 205

Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210

<210> 273

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 273

Ser Asp Tyr Ala Trp Asn

1 5

<210> 274

<211> 16

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 274

Tyr Ile Ser Tyr Ser Gly Ser Thr Ser Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser

1 5 10 15

<210> 275

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 275

Phe Asp Tyr Ala His Ala Met Asp Tyr

1 5

<210> 276

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 276

Gln Ala Ser Gln Ser Ile Gly Thr Ser Ile His

1 5 10

<210> 277

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 277

Tyr Ala Ser Glu Ser Ile Ser

1 5

<210> 278

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 278

Gln Gln Ile Asn Ser Trp Pro Thr Thr

1 5

<210> 279

<211> 143

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 279

Gly Ala Pro Ala Gly Pro Leu Ile Val Pro Tyr Asn Leu Pro Leu Pro

1 5 10 15

Gly Gly Val Val Pro Arg Met Leu Ile Thr Ile Leu Gly Thr Val Lys

20 25 30

Pro Asn Ala Asn Arg Ile Ala Leu Asp Phe Gln Arg Gly Asn Asp Val

35 40 45

Ala Phe His Phe Asn Pro Arg Phe Asn Glu Asn Asn Arg Arg Val Ile

50 55 60

Val Cys Asn Thr Lys Leu Asp Asn Asn Trp Gly Arg Glu Glu Arg Gln

65 70 75 80

Ser Val Phe Pro Phe Glu Ser Gly Lys Pro Phe Lys Ile Gln Val Leu

85 90 95

Val Glu Pro Asp His Phe Lys Val Ala Val Asn Asp Ala His Leu Leu

100 105 110

Gln Tyr Asn His Arg Val Lys Lys Leu Asn Glu Ile Ser Lys Leu Gly

115 120 125

Ile Ser Gly Asp Ile Asp Ile Thr Ser Ala Ser Tyr Thr Met Ile

130 135 140

<210> 280

<211> 447

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 280

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ser Ser Asn

20 25 30

Val Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Gly Val Ile Pro Ile Val Asp Ile Ala Asn Tyr Ala Gln Arg Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Thr Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Ser Thr Leu Gly Leu Val Leu Asp Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val

115 120 125

Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala

130 135 140

Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser

145 150 155 160

Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val

165 170 175

Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro

180 185 190

Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys

195 200 205

Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro

210 215 220

Pro Cys Pro Ser Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val

225 230 235 240

Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr

245 250 255

Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu

260 265 270

Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys

275 280 285

Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser

290 295 300

Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys

305 310 315 320

Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile

325 330 335

Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro

340 345 350

Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu

355 360 365

Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn

370 375 380

Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser

385 390 395 400

Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg

405 410 415

Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu

420 425 430

His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys

435 440 445

<210> 281

<211> 215

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 281

Glu Thr Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Leu Gly Ser Ser

20 25 30

Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu

35 40 45

Ile Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Pro Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser

50 55 60

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu

65 70 75 80

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Ala Asp Ser Pro

85 90 95

Ile Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala

100 105 110

Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser

115 120 125

Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu

130 135 140

Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser

145 150 155 160

Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu

165 170 175

Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val

180 185 190

Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys

195 200 205

Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210 215

<210> 282

<211> 137

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 282

Met Glu Phe Gly Leu Ser Trp Val Phe Leu Val Ala Leu Leu Arg Gly

1 5 10 15

Val Gln Cys Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln

20 25 30

Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe

35 40 45

Ser Val Tyr Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu

50 55 60

Glu Trp Val Ala Ile Ile Trp Tyr Asp Gly Asp Asn Gln Tyr Tyr Ala

65 70 75 80

Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn

85 90 95

Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Gly Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val

100 105 110

Tyr Tyr Cys Ala Arg Asp Leu Arg Thr Gly Pro Phe Asp Tyr Trp Gly

115 120 125

Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

130 135

<210> 283

<211> 126

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 283

Met Leu Pro Ser Gln Leu Ile Gly Phe Leu Leu Leu Trp Val Pro Ala

1 5 10 15

Ser Arg Gly Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Asp Phe Gln Ser Val

20 25 30

Thr Pro Lys Glu Lys Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile

35 40 45

Gly Ser Ser Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gln Ser Pro Lys

50 55 60

Leu Leu Ile Lys Tyr Ala Ser Gln Ser Phe Ser Gly Val Pro Ser Arg

65 70 75 80

Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Asn Ser

85 90 95

Leu Glu Ala Glu Asp Ala Ala Ala Tyr Tyr Cys His Gln Ser Ser Ser

100 105 110

Leu Pro Phe Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys

115 120 125

<210> 284

<211> 121

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 284

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr

20 25 30

Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Gly Ile Ile Pro Ile Phe Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Gly Leu Trp Glu Val Arg Ala Leu Pro Ser Val Tyr Trp Gly

100 105 110

Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 285

<211> 109

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 285

Ser Tyr Glu Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Val Ala Pro Gly Gln

1 5 10 15

Thr Ala Arg Ile Thr Cys Gly Ala Asn Asp Ile Gly Ser Lys Ser Val

20 25 30

His Trp Tyr Gln Gln Lys Ala Gly Gln Ala Pro Val Leu Val Val Ser

35 40 45

Glu Asp Ile Ile Arg Pro Ser Gly Ile Pro Glu Arg Ile Ser Gly Ser

50 55 60

Asn Ser Gly Asn Thr Ala Thr Leu Thr Ile Ser Arg Val Glu Ala Gly

65 70 75 80

Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Val Trp Asp Arg Asp Ser Asp Gln

85 90 95

Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly

100 105

<210> 286

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 286

Gln Asn Asp Tyr Ser Tyr Pro Tyr Thr

1 5

<210> 287

<211> 63

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический олигонуклеотид"

<400> 287

atggccctgc ctgtgacagc cctgctgctg cctctggctc tgctgctgca tgccgctaga

ccc

<210> 288

<211> 63

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический олигонуклеотид"

<400> 288

atggccctcc ctgtcaccgc cctgctgctt ccgctggctc ttctgctcca cgccgctcgg

ccc

<210> 289

<211> 72

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический олигонуклеотид"

<400> 289

atctacattt gggcccctct ggctggtact tgcggggtcc tgctgctttc actcgtgatc

actctttact gt

<210> 290

<211> 126

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 290

aagcgcggtc ggaagaagct gctgtacatc tttaagcaac ccttcatgag gcctgtgcag

actactcaag aggaggacgg ctgttcatgc cggttcccag aggaggagga aggcggctgc

120

gaactg

126

<210> 291

<211> 336

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 291

cgcgtgaaat tcagccgcag cgcagatgct ccagcctaca agcaggggca gaaccagctc

tacaacgaac tcaatcttgg tcggagagag gagtacgacg tgctggacaa gcggagagga

120

cgggacccag aaatgggcgg gaagccgcgc agaaagaatc cccaagaggg cctgtacaac

180

gagctccaaa aggataagat ggcagaagcc tatagcgaga ttggtatgaa aggggaacgc

240

agaagaggca aaggccacga cggactgtac cagggactca gcaccgccac caaggacacc

300

tatgacgctc ttcacatgca ggccctgccg cctcgg

336

<210> 292

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 292

Gly Gly Gly Gly Ser

1 5

<210> 293

<211> 150

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 293

Pro Gly Trp Phe Leu Asp Ser Pro Asp Arg Pro Trp Asn Pro Pro Thr

1 5 10 15

Phe Ser Pro Ala Leu Leu Val Val Thr Glu Gly Asp Asn Ala Thr Phe

20 25 30

Thr Cys Ser Phe Ser Asn Thr Ser Glu Ser Phe Val Leu Asn Trp Tyr

35 40 45

Arg Met Ser Pro Ser Asn Gln Thr Asp Lys Leu Ala Ala Phe Pro Glu

50 55 60

Asp Arg Ser Gln Pro Gly Gln Asp Cys Arg Phe Arg Val Thr Gln Leu

65 70 75 80

Pro Asn Gly Arg Asp Phe His Met Ser Val Val Arg Ala Arg Arg Asn

85 90 95

Asp Ser Gly Thr Tyr Leu Cys Gly Ala Ile Ser Leu Ala Pro Lys Ala

100 105 110

Gln Ile Lys Glu Ser Leu Arg Ala Glu Leu Arg Val Thr Glu Arg Arg

115 120 125

Ala Glu Val Pro Thr Ala His Pro Ser Pro Ser Pro Arg Pro Ala Gly

130 135 140

Gln Phe Gln Thr Leu Val

145 150

<210> 294

<211> 450

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 294

cccggatggt ttctggactc tccggatcgc ccgtggaatc ccccaacctt ctcaccggca

ctcttggttg tgactgaggg cgataatgcg accttcacgt gctcgttctc caacacctcc

120

gaatcattcg tgctgaactg gtaccgcatg agcccgtcaa accagaccga caagctcgcc

180

gcgtttccgg aagatcggtc gcaaccggga caggattgtc ggttccgcgt gactcaactg

240

ccgaatggca gagacttcca catgagcgtg gtccgcgcta ggcgaaacga ctccgggacc

300

tacctgtgcg gagccatctc gctggcgcct aaggcccaaa tcaaagagag cttgagggcc

360

gaactgagag tgaccgagcg cagagctgag gtgccaactg cacatccatc cccatcgcct

420

cggcctgcgg ggcagtttca gaccctggtc

450

<210> 295

<211> 394

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 295

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Pro Gly Trp Phe Leu Asp Ser Pro Asp Arg Pro

20 25 30

Trp Asn Pro Pro Thr Phe Ser Pro Ala Leu Leu Val Val Thr Glu Gly

35 40 45

Asp Asn Ala Thr Phe Thr Cys Ser Phe Ser Asn Thr Ser Glu Ser Phe

50 55 60

Val Leu Asn Trp Tyr Arg Met Ser Pro Ser Asn Gln Thr Asp Lys Leu

65 70 75 80

Ala Ala Phe Pro Glu Asp Arg Ser Gln Pro Gly Gln Asp Cys Arg Phe

85 90 95

Arg Val Thr Gln Leu Pro Asn Gly Arg Asp Phe His Met Ser Val Val

100 105 110

Arg Ala Arg Arg Asn Asp Ser Gly Thr Tyr Leu Cys Gly Ala Ile Ser

115 120 125

Leu Ala Pro Lys Ala Gln Ile Lys Glu Ser Leu Arg Ala Glu Leu Arg

130 135 140

Val Thr Glu Arg Arg Ala Glu Val Pro Thr Ala His Pro Ser Pro Ser

145 150 155 160

Pro Arg Pro Ala Gly Gln Phe Gln Thr Leu Val Thr Thr Thr Pro Ala

165 170 175

Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser

180 185 190

Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr

195 200 205

Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala

210 215 220

Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys

225 230 235 240

Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met

245 250 255

Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe

260 265 270

Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser Arg

275 280 285

Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Lys Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn

290 295 300

Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg

305 310 315 320

Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro

325 330 335

Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala

340 345 350

Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His

355 360 365

Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp

370 375 380

Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

385 390

<210> 296

<211> 1182

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 296

atggccctcc ctgtcactgc cctgcttctc cccctcgcac tcctgctcca cgccgctaga

ccacccggat ggtttctgga ctctccggat cgcccgtgga atcccccaac cttctcaccg

120

gcactcttgg ttgtgactga gggcgataat gcgaccttca cgtgctcgtt ctccaacacc

180

tccgaatcat tcgtgctgaa ctggtaccgc atgagcccgt caaaccagac cgacaagctc

240

gccgcgtttc cggaagatcg gtcgcaaccg ggacaggatt gtcggttccg cgtgactcaa

300

ctgccgaatg gcagagactt ccacatgagc gtggtccgcg ctaggcgaaa cgactccggg

360

acctacctgt gcggagccat ctcgctggcg cctaaggccc aaatcaaaga gagcttgagg

420

gccgaactga gagtgaccga gcgcagagct gaggtgccaa ctgcacatcc atccccatcg

480

cctcggcctg cggggcagtt tcagaccctg gtcacgacca ctccggcgcc gcgcccaccg

540

actccggccc caactatcgc gagccagccc ctgtcgctga ggccggaagc atgccgccct

600

gccgccggag gtgctgtgca tacccgggga ttggacttcg catgcgacat ctacatttgg

660

gctcctctcg ccggaacttg tggcgtgctc cttctgtccc tggtcatcac cctgtactgc

720

aagcggggtc ggaaaaagct tctgtacatt ttcaagcagc ccttcatgag gcccgtgcaa

780

accacccagg aggaggacgg ttgctcctgc cggttccccg aagaggaaga aggaggttgc

840

gagctgcgcg tgaagttctc ccggagcgcc gacgcccccg cctataagca gggccagaac

900

cagctgtaca acgaactgaa cctgggacgg cgggaagagt acgatgtgct ggacaagcgg

960

cgcggccggg accccgaaat gggcgggaag cctagaagaa agaaccctca ggaaggcctg

1020

tataacgagc tgcagaagga caagatggcc gaggcctact ccgaaattgg gatgaaggga

1080

gagcggcgga ggggaaaggg gcacgacggc ctgtaccaag gactgtccac cgccaccaag

1140

gacacatacg atgccctgca catgcaggcc cttccccctc gc

1182

<210> 297

<211> 4

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 297

Gly Gly Gly Ser

<210> 298

<211> 5000

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<220>

<221> другой_признак

<222> (1)..(5000)

<223> /примечание="Эта последовательность может охватывать 50-5000

нуклеотидов"

<400> 298

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

120

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

180

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

240

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

300

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

360

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

420

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

480

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

540

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

600

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

660

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

720

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

780

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

840

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

900

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

960

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1020

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1080

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1140

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1200

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1260

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1320

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1380

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1440

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1500

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1560

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1620

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1680

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1740

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1800

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1860

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1920

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1980

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

2040

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

2100

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

2160

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

2220

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

2280

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

2340

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

2400

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

2460

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

2520

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

2580

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

2640

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

2700

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

2760

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

2820

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

2880

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

2940

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

3000

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

3060

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

3120

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

3180

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

3240

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

3300

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

3360

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

3420

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

3480

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

3540

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

3600

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

3660

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

3720

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

3780

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

3840

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

3900

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

3960

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

4020

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

4080

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

4140

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

4200

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

4260

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

4320

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

4380

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

4440

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

4500

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

4560

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

4620

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

4680

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

4740

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

4800

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

4860

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

4920

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

4980

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

5000

<210> 299

<211> 373

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 299

Pro Gly Trp Phe Leu Asp Ser Pro Asp Arg Pro Trp Asn Pro Pro Thr

1 5 10 15

Phe Ser Pro Ala Leu Leu Val Val Thr Glu Gly Asp Asn Ala Thr Phe

20 25 30

Thr Cys Ser Phe Ser Asn Thr Ser Glu Ser Phe Val Leu Asn Trp Tyr

35 40 45

Arg Met Ser Pro Ser Asn Gln Thr Asp Lys Leu Ala Ala Phe Pro Glu

50 55 60

Asp Arg Ser Gln Pro Gly Gln Asp Cys Arg Phe Arg Val Thr Gln Leu

65 70 75 80

Pro Asn Gly Arg Asp Phe His Met Ser Val Val Arg Ala Arg Arg Asn

85 90 95

Asp Ser Gly Thr Tyr Leu Cys Gly Ala Ile Ser Leu Ala Pro Lys Ala

100 105 110

Gln Ile Lys Glu Ser Leu Arg Ala Glu Leu Arg Val Thr Glu Arg Arg

115 120 125

Ala Glu Val Pro Thr Ala His Pro Ser Pro Ser Pro Arg Pro Ala Gly

130 135 140

Gln Phe Gln Thr Leu Val Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr

145 150 155 160

Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala

165 170 175

Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe

180 185 190

Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val

195 200 205

Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Lys Arg Gly Arg Lys

210 215 220

Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met Arg Pro Val Gln Thr

225 230 235 240

Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe Pro Glu Glu Glu Glu

245 250 255

Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro

260 265 270

Ala Tyr Lys Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly

275 280 285

Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro

290 295 300

Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr

305 310 315 320

Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly

325 330 335

Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln

340 345 350

Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln

355 360 365

Ala Leu Pro Pro Arg

370

<210> 300

<211> 35

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 300

Thr Lys Lys Lys Tyr Ser Ser Ser Val His Asp Pro Asn Gly Glu Tyr

1 5 10 15

Met Phe Met Arg Ala Val Asn Thr Ala Lys Lys Ser Arg Leu Thr Asp

20 25 30

Val Thr Leu

<210> 301

<211> 105

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 301

acaaaaaaga agtattcatc cagtgtgcac gaccctaacg gtgaatacat gttcatgaga

gcagtgaaca cagccaaaaa atccagactc acagatgtga cccta

105

<210> 302

<211> 69

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 302

Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala

1 5 10 15

Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly

20 25 30

Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Phe Trp Leu

35 40 45

Pro Ile Gly Cys Ala Ala Phe Val Val Val Cys Ile Leu Gly Cys Ile

50 55 60

Leu Ile Cys Trp Leu

<210> 303

<211> 207

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 303

accacgacgc cagcgccgcg accaccaaca ccggcgccca ccatcgcgtc gcagcccctg

tccctgcgcc cagaggcgtg ccggccagcg gcggggggcg cagtgcacac gagggggctg

120

gacttcgcct gtgatttctg gttacccata ggatgtgcag cctttgttgt agtctgcatt

180

ttgggatgca tacttatttg ttggctt

207

<210> 304

<211> 41

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 304

Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr

1 5 10 15

Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro

20 25 30

Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser

35 40

<210> 305

<211> 123

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 305

aggagtaaga ggagcaggct cctgcacagt gactacatga acatgactcc ccgccgcccc

gggcccaccc gcaagcatta ccagccctat gccccaccac gcgacttcgc agcctatcgc

120

tcc

123

<210> 306

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 306

Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly Val Ser

1 5 10

<210> 307

<211> 16

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 307

Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu Lys Ser

1 5 10 15

<210> 308

<211> 16

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 308

Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Ser Ser Ser Leu Lys Ser

1 5 10 15

<210> 309

<211> 16

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 309

Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Gln Ser Ser Leu Lys Ser

1 5 10 15

<210> 310

<211> 16

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 310

Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ser Leu Lys Ser

1 5 10 15

<210> 311

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 311

Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn

1 5 10

<210> 312

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 312

His Thr Ser Arg Leu His Ser

1 5

<210> 313

<211> 40

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<220>

<221> Сайт

<222> (1)..(40)

<223> /примечание="Эта последовательность может охватывать 1-10

повторяющихся звеньев "Gly Gly Gly Ser»

<400> 313

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser

1 5 10 15

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser

20 25 30

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser

35 40

<210> 314

<211> 4

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 314

Arg Gly Asp Ser

<---

Реферат патента 2024 года ПРОИЗВОДНЫЕ 3-(5-АМИНО-1-ОКСОИЗОИНДОЛИН-2-ИЛ)ПИПЕРИДИН-2,6-ДИОНА И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ В ЛЕЧЕНИИ ЗАБОЛЕВАНИЙ, СВЯЗАННЫХ С БЕЛКОМ С "ЦИНКОВЫМИ ПАЛЬЦАМИ" 2 СЕМЕЙСТВА IKAROS (IKZF2)

Настоящее изобретение относится к соединениям на основе 3-(5-амино-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-диона, а именно к соединению формулы (I'), где каждый из X₁ и X₂ независимо представляет собой H или галоген; R_x представляет собой H; каждый из R_a и R_b независимо представляет собой H, или R_a и R_b вместе с атомом, к которому они присоединены, образуют =(O); R₁ представляет собой или ; R₂ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил; или R₅ представляет собой -OR₆ или -NR₇R_7'; R₆ представляет собой H, (C₁-C₆)алкил, при этом алкил необязательно замещен одним заместителем, независимо выбранным из фенила; каждый из R₇ и R_7' независимо представляет собой H, (C₁-C₆)алкил, при этом алкил необязательно замещен одним - тремя R₈; или R₇ и R_7' вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 5-членное гетероциклоалкильное кольцо; каждый R₈ представляет собой -C(O)OH, (C₃-C₇)циклоалкил, фенил или 6-членный гетероарил, содержащий 1 гетероатом, выбранный из N, при этом циклоалкил необязательно замещен одним - четырьмя R₁₀; каждый R₁₀ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₆)алкил; n1 равняется 1, 2 или 3; каждый из n2 и n3 независимо равняется 1; или его фармацевтически приемлемым солям. Также изобретение относится к соединению, выбранному из группы индивидуальных соединений, к фармацевтической композиции, способу разрушения IKZF2, способу лечения заболевания или нарушения, способу модулирования уровней содержания белка IKZF2, способу уменьшения уровней содержания белка IKZF2, применению соединения формулы (I') в изготовлении лекарственного препарата для лечения заболевания или нарушения, применению соединения формулы (I') в лечении заболевания или нарушения. Технический результат изобретения заключается в получении новых соединений, которые могут быть применены в лечении заболеваний или нарушений, связанных с белком с "цинковыми пальцами" 2 семейства IKAROS (IKZF2). 9 н. и 16 з.п. ф-лы, 21 табл., 34 пр.

(I')

Формула изобретения RU 2 815 714 C2

1. Соединение формулы (I'):

где:

каждый из X₁ и X₂ независимо представляет собой H или галоген;

R_x представляет собой H;

каждый из R_a и R_b независимо представляет собой H, или R_a и R_b вместе с атомом, к которому они присоединены, образуют =(O);

R₁ представляет собой или

R₂ представляет собой H или (C₁-C₆)алкил; или

R₅ представляет собой -OR₆ или -NR₇R_7';

R₆ представляет собой H, (C₁-C₆)алкил, при этом алкил необязательно замещен одним заместителем, независимо выбранным из фенила;

каждый из R₇ и R_7' независимо представляет собой H, (C₁-C₆)алкил, при этом алкил необязательно замещен одним - тремя R₈; или

R₇ и R_7' вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 5-членное гетероциклоалкильное кольцо;

каждый R₈ представляет собой -C(O)OH, (C₃-C₇)циклоалкил, фенил или 6-членный гетероарил, содержащий 1 гетероатом, выбранный из N, при этом циклоалкил необязательно замещен одним - четырьмя R₁₀;

каждый R₁₀ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₆)алкил;

n1 равняется 1, 2 или 3;

каждый из n2 и n3 независимо равняется 1;

или его фармацевтически приемлемые соли.

2. Соединение по п.1, характеризующееся формулой (I):

где:

R_x представляет собой H;

R₁ представляет собой

R₂ представляет собой H, (C₁-C₆)алкил; или

R₅ представляет собой -OR₆ или -NR₇R_7';

R₆ представляет собой H, (C₁-C₆)алкил, при этом алкил необязательно замещен одним заместителем, каждый из которых независимо выбран из фенила;

R₇ и R_7' вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 5-членное гетероциклоалкильное кольцо;

каждый R₈ представляет собой (C₃-C₇)циклоалкил или 6-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1 гетероатом, выбранный из N, при этом циклоалкил необязательно замещен одним - четырьмя R₁₀;

каждый R₁₀ независимо в каждом случае представляет собой (C₁-C₆)алкил;

n1 равняется 1, 2 или 3;

или его фармацевтически приемлемые соли.

3. Соединение по п.1 или 2, где R₁ представляет собой

4. Соединение по любому из пп.1-3, где n1 равняется 1 или 2.

5. Соединение по п.1 или 2, характеризующееся формулой (Ia), формулой (Ia-1):

или

или его фармацевтически приемлемые соли.

6. Соединение по п.1 или 2, характеризующееся формулой (Ic), формулой (Id), формулой (Ie), формулой (If), формулой (Ic-1), формулой (Id-1), формулой (Ie-1), формулой (If-1):

или его фармацевтически приемлемые соли.

7. Соединение по п.1 или 2, характеризующееся формулой (Ik), формулой (Il), формулой (Io), формулой (Ip), формулой (Ik-1), формулой (Il-1), формулой (Io-1) или формулой (Ip-1):

или его фармацевтически приемлемые соли.

8. Соединение по любому из пп.1-7, где R₅ представляет собой -OR₆.

9. Соединение по любому из пп.1-7, где R₅ представляет собой -NR₇R_7'.

10. Соединение по п.1 или 2, характеризующееся формулой (Iq), формулой (Ir), формулой (Is), формулой (It), формулой (Iq-1), формулой (Ir-1), формулой (Is-1) или формулой (It-1):

или его фармацевтически приемлемые соли.

11. Соединение по любому из пп.1-10, где R₂ представляет собой H или метил.

12. Соединение, выбранное из

№ Соединения Химическая структура I-1 I-3 I-4 I-9 I-6 I-7 I-8 I-40 I-45 I-55 I-12 I-14 I-15 смесь I-16 и I-17
I-114 I-99 I-104 I-109 смесь
I-119 и
I-121
I-133 I-143 I-138 I-163 I-128 I-10 I-96 I-153 I-148

или его фармацевтически приемлемые соли.

13. Фармацевтическая композиция для лечения заболевания или нарушения, на которые влияет уменьшение уровней содержания белка IKZF2, содержащая терапевтически эффективное количество соединения по любому из пп.1-12 или его фармацевтически приемлемой соли и фармацевтически приемлемые носитель или вспомогательное вещество.

14. Фармацевтическая композиция по п.13, дополнительно содержащая по меньшей мере одно дополнительное фармацевтическое средство.

15. Фармацевтическая композиция по п.13 или 14 для применения в лечении заболевания или нарушения, на которые влияет уменьшение уровней содержания белка IKZF2.

16. Способ разрушения IKZF2, включающий введение пациенту, нуждающемуся в этом, соединения по любому из пп.1-12 или его фармацевтически приемлемой соли.

17. Способ лечения заболевания или нарушения, на которые влияет модулирование уровней содержания белка IKZF2, включающий введение пациенту, нуждающемуся в этом, соединения по любому из пп.1-12 или его фармацевтически приемлемой соли.

18. Способ модулирования уровней содержания белка IKZF2, включающий введение пациенту, нуждающемуся в этом, соединения по любому из пп.1-12 или его фармацевтически приемлемой соли.

19. Способ уменьшения уровней содержания белка IKZF2 у субъекта, включающий стадию введения субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества соединения по любому из пп.1-12 или его фармацевтически приемлемой соли.

20. Способ по любому из пп.16-19, где введение осуществляют перорально, парентерально, подкожно, путем инъекции или инфузии.

21. Соединение по любому из пп.1-12 или его фармацевтически приемлемая соль для применения в лечении заболевания или нарушения, на которые влияет уменьшение уровней содержания белка IKZF2.

22. Применение соединения по любому из пп.1-12 или его фармацевтически приемлемой соли в изготовлении лекарственного препарата для лечения заболевания или нарушения, на которые влияет уменьшение уровней содержания белка IKZF2.

23. Соединение по любому из пп.1-12 или его фармацевтически приемлемая соль для применения в изготовлении лекарственного препарата для лечения заболевания или нарушения, ассоциированных с уменьшением уровней содержания белка IKZF2.

24. Соединение по п.23, где заболевание или нарушение выбраны из немелкоклеточного рака легкого (NSCLC), меланомы, трижды негативного рака молочной железы (TNBC), рака носоглотки (NPC), колоректального рака с микросателлитной стабильностью (mssCRC), тимомы, карциноида, острого миелогенного лейкоза и стромальной опухоли желудочно-кишечного тракта (GIST).

25. Применение соединения по любому из пп.1-12 или его фармацевтически приемлемой соли в лечении заболевания или нарушения, ассоциированных с уменьшением уровней содержания белка IKZF2.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2024 года RU2815714C2

Способ защиты переносных электрических установок от опасностей, связанных с заземлением одной из фаз	1924	Подольский Л.П.	SU2014A1
Способ получения цианистых соединений	1924	Климов Б.К.	SU2018A1
RU 2011121567 A, 10.12.2012
EP 3214081 A1, 06.09.2017.

RU 2 815 714 C2

Авторы

Беквит, Роан Эрик Джон

Бонацци, Симоне

Черниенко, Артем

Ма, Фупэн

Уэр, Натаниэль Ф.

Даты

2024-03-20—Публикация

2019-07-08—Подача

название	год	авторы	номер документа
ПРОИЗВОДНЫЕ 3-(5-ГИДРОКСИ-1-ОКСОИЗОИНДОЛИН-2-ИЛ) ПИПЕРИДИН-2,6-ДИОНА И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ В ЛЕЧЕНИИ ЗАБОЛЕВАНИЙ, СВЯЗАННЫХ С БЕЛКОМ С "ЦИНКОВЫМИ ПАЛЬЦАМИ" 2 (IKZF2) СЕМЕЙСТВА IKAROS	2019	Эдкок, Клэр Бонацци, Симоне Черниенко, Артем Лам, Филип Линкенс, Кэтрин Тэйлор Малик, Хаснейн Ахмед Томсен, Ноэль Мари-Франс Виссер, Майкл Скотт	RU2797559C2
КОМПОЗИЦИИ И СПОСОБЫ СЕЛЕКТИВНОЙ ДЕГРАДАЦИИ БЕЛКА	2018	Голосов, Андрей Гулд, Карлтон, Проктор Гимарайнш, Карле, Патрисия Пинту Хильд, Марк Хорст Питер Мотц, Грегори Росс, Нейтан Томас Соломон, Джонатан, М. Беквит, Роан, Эрик Джон Карбонно, Сет Брэднер, Джеймс, И.	RU2811700C2
ВИДЫ КОМБИНИРОВАННОЙ ТЕРАПИИ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ХИМЕРНЫХ АНТИГЕННЫХ РЕЦЕПТОРОВ И ИНГИБИТОРОВ PD-1	2017	Анак, Озлем Байлик, Сэйнела Брогдон, Дженнифер Кэмерон, Джон, Скотт Чоу, Уилльям Хауард, Дэнни, Роланд, Мл. Исаакс, Ранди Джун, Карл, Х. Лейси, Саймон Мод, Шеннон Миленхорст, Ян, Дж. Шастер, Стивен Кинтас-Кардама, Альфонсо Грапп, Стефан Биттер, Ханс	RU2809160C2
ЛЕЧЕНИЕ ЗЛОКАЧЕСТВЕННОГО НОВООБРАЗОВАНИЯ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ГУМАНИЗИРОВАННОГО ХИМЕРНОГО АНТИГЕННОГО РЕЦЕПТОРА ПРОТИВ ВСМА	2015	Брогдон Дженнифер Чой Юджин Эберсбах Хилмар Гласс Дэвид Хют Хитер Джун Карл Х. Манник Джоан Майлон Майкл С. Мерфи Леон Плиса Габриэла Ричардсон Селеста Руелла Марко Сингх Решма Ван Юнцян У Цилун	RU2751660C2
ХИМЕРНЫЕ АНТИГЕННЫЕ РЕЦЕПТОРЫ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ РАКА	2017	Браннетти, Барбара Брогдон, Дженнифер Энгельс, Борис Гранда, Брайан Хуан, Лу Лэй, Мин Ли, На Чжан, Цзиминь Гимарэс, Карла Джилл, Саар Руэлла, Марко Янг, Регина М.	RU2826270C2
ХИМЕРНЫЕ РЕЦЕПТОРЫ АНТИГЕНА ПРОТИВ МЕЗОТЕЛИНА ЧЕЛОВЕКА И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ	2014	Битти Грегори Энгельс Борис Идамаканти Неераджа Джун Карл Х. Лев Андреас Сун Хуэйцзюань У Цилун	RU2714902C2
CD20 ТЕРАПИЯ, CD22 ТЕРАПИЯ И КОМБИНИРОВАННАЯ ТЕРАПИЯ КЛЕТКАМИ, ЭКСПРЕССИРУЮЩИМИ ХИМЕРНЫЙ АНТИГЕННЫЙ РЕЦЕПТОР (CAR) K CD19	2016	Биттер Ханс Бордо Дженнифер Мэри Браннетти Барбара Брогдон Дженнифер Дакаппагари Навин Кумар Джилл Саар Хайфилл Стивен Хуан Лу Джун Карл Х. Ким Дзу Йоунг Лэй Мин Ли На Лоэв Андреас Орландо Елена Руелла Марко Трэн Таи Чжан Цзиминь Чжоу Ли	RU2752918C2
СПОСОБЫ ПОЛУЧЕНИЯ ЭКСПРЕССИРУЮЩИХ ХИМЕРНЫЙ АНТИГЕННЫЙ РЕЦЕПТОР КЛЕТОК	2015	Бедойа Фелипе Гхассеми Саба Джун Карл Х. Левин Брюс Л. Миленхорст Ян Дж. Майлон Майкл С. Пауэлл Дэниэл Дж. Мл. Чжэн Зоуи	RU2751362C2
ХИМЕРНЫЙ АНТИГЕННЫЙ РЕЦЕПТОР (CAR) ПРОТИВ CD123 ДЛЯ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ В ЛЕЧЕНИИ ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ ОПУХОЛЕЙ	2015	Брогдон Дженнифер Джилл Саар Гласс Дэвид Кендериан Саад Лев Андреас Манник Джоан Майлон Майкл Мерфи Леон Портер Дэвид Л. Руелла Марко Ван Юнцян У Цилун Чжан Цзицюань	RU2724999C2
КОМПОЗИЦИИ И СПОСОБЫ ДЛЯ ИЗБИРАТЕЛЬНОЙ ЭКСПРЕССИИ БЕЛКА	2017	Голосов Андрей Гимарэс Карла Мотц Грегори Майлон Майкл Эллебрехт Кристоф Т. Пэйн Эми С.	RU2795467C2

Описание патента на изобретение RU2815714C2

Похожие патенты RU2815714C2

Формула изобретения RU 2 815 714 C2

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2024 года RU2815714C2

RU 2 815 714 C2