Применение способа получения кондиционной среды, обладающей регенераторным потенциалом для интраназального введения при лечении хронических поствирусных нарушений обоняния Российский патент 2024 года по МПК A61K35/15 A61K38/18 A61P27/00 

Изобретение относится к медицине, а именно к отоларингологии, неврологии и иммунологии, и может быть использовано для лечения/реабилитации больных с хроническими поствирусными нарушениями обоняния на основе применения кондиционной среды, обладающей регенераторным потенциалом, в виде интраназальных ингаляций.

Распространенность обонятельных (ольфакторных) нарушений составляет до 19,1%, в том числе распространенность гипосмии (снижение обоняния) и аносмии (отсутствие обоняния) - 13,3 и 5,8%, соответственно. Причинами возникновения гипосмии/аносмии могут быть: острые или хронические воспаления слизистых оболочек полости носа; заболевания периферического отдела обонятельного нерва; нейродегенеративные заболевания (рассеянный склероз, болезнь Альцгеймера, Паркинсона); травма головы, носа; а также инфекционные заболевания верхних дыхательных путей, вызванные респираторными вирусами (аденовирус, риновирус, коронавирус, грипп). Так, например, расстройства обоняния, как одно из проявлений постковидного синдрома, встречаются у 61,2-85,6% пациентов с COVID-19. Течение и прогноз ольфакторных нарушений при COVID-19 в основном благоприятны, однако сроки разрешения могут значительно варьировать: от 10 дней у пациентов с легкой формой COVID-19 до длительно персистирующих, хронических вариантов продолжительностью от 6 мес и более (McWilliams MP., et al. Recovery from Covid-19 smell loss: Two-years of follow up. Am J Otolaryngol. 2022; 43(5): 103607. doi: 10.1016/j.amjoto.2022.103607).

Наиболее значимым механизмом снижения/отсутствия обоняния при коронавирусной инфекции считается прямое инфицирование и гибель сосудистых перицитов, поддерживающих и микроворсинчатых клеток, которые составляют специализированную «нишу» и обеспечивают структурную и метаболическую поддержку сенсорных обонятельных нейронов (de Melo G.D., Lazarini F., Levallois S., et al. COVID-19-related anosmia is associated with viral persistence and inflammation in human olfactory epithelium and brain infection in hamsters. Sci Transl Med. 2021; 13(596): eabf8396. doi: 10.1126/scitranslmed.abf8396). He исключается прямое повреждение вирусом обонятельных нейронов (Meinhardt J., et al. Olfactory transmucosal SARS-CoV-2 invasion as a port of central nervous system entry in individuals with COVID-19. Nat Neurosci. 2021; 24(2): 168-175. doi: 10.1038/s41593-020-00758-5), а также чрезмерный воспалительный ответ, сопряженный с развитием «цитокинового шторма» (Torabi A., et al. Proinflammatory cytokines in the olfactory mucosa result in COVID-19 induced anosmia. ACS Chem. Neurosci. 2020; 11(13): 1909-1913. doi: 10.1021/acschemneuro.0c00249). Таким образом, для лечения и реабилитации пациентов с поствирусными/постковидными нарушениями обоняния необходимы препараты с противовоспалительной, нейротрофической и нейропротективной активностью.

С учетом вероятного патогенеза ольфакторных нарушений, ассоциированных с инфекцией COVID-19, в качестве терапевтической стратегии для их коррекции одним из первых было предложено использовать кортикостероиды. Однако результаты многоцентрового Европейского исследования 152 больных с постковидной аносмией/гипосмией не выявили явного эффекта от применения как назальных, так и системных кортикостероидов в раннем периоде инфекции (Saussez S., et al. Short-term efficacy and safety of oral and nasal corticosteroids in COVID-19 patients with olfactory dysfunction: A European multicenter study. Pathogens. 2021; 10(6): 698. doi: 10.3390/pathogens10060698). Использование кортикостероидов, даже в виде интраназального спрэя, у больных с хроническими постковидными нарушениями обоняния также не показали значимого восстановления функции (Kasiri Н., et al. Mometasone furoate nasal spray in the treatment of patients with COVID-19 olfactory dysfunction: A randomized, double blind clinical trial. Int. Immunopharmacol. 2021; 98: 107871. doi: 10.1016/j.intimp.2021.107871; Hintschich C.A., et al. Topical administration of mometasone is not helpful in post-COVID-19 olfactory dysfunction. Life (Basel). 2022; 12(10): 1483. doi: 10.3390/life12101483). По этим причинам, а также учитывая возможные побочные эффекты, назначение кортикостероидов при потере обоняния из-за COVID-19 в настоящее время не рекомендуется.

Еще одной хорошо изученной, и при этом абсолютно безопасной терапевтической стратегией реабилитации больных с ольфакторными дисфункциями признается «обонятельная тренировка" (olfactory training), при которой, как правило, используют четыре знакомых аромата (например, лимон, гвоздика, розмарин, эвкалипт или сыр, кофе, клубника и лимон), которые пациент вдыхает 2 раза в день, утром и вечером, курсом до 3 мес. Уже в 2014 г. были опубликованы результаты по использованию обонятельной тренировки у пациентов с персистирующей поствирусной аносмией/гипосмией (Damm М., et al. Olfactory training is helpful in postinfectious olfactory loss: a randomized, controlled, multicenter study. Laryngoscope. 2014; 124(4): 826-831. doi: 10.1002/lary.24340).

Для лечения пациентов с обонятельной дисфункцией при атрофическом рините также предлагается использовать обонятельную тренировку (в течение от 84 до 252 дней) в комбинации с ирригационной терапией и внутримышечным/пероральным приемом препарата «Нейромидин» (патент РФ 2713786 С1.2019).

Предлагается также использовать 3-месячный курс тренировки обоняния в комбинации с различными вариантами адьювантной терапии: либо в сочетании с интраназальными кортикостероидами +/- Vit В, либо интраназальными Vit А+Е (de Sousa F.A., et al. Tailored approach for persistent olfactory dysfunction after SARS-CoV-2 infection: A pilot study. Ann. Otol. Rhinol. Laryngol. 2023; 132(6): 657-666. doi: 10.1177/0003489422111).

Для улучшения/восстановления обоняния амбулаторных пациентов с подтвержденным COVID-19 в анамнезе и обонятельной дисфункцией длительностью свыше 1 мес предлагается проводить 2-недельный курс биорегуляционной терапии (гомеопатии) с использованием препаратов: Эуфорбиум Композитум® Назентропфен С спрей назальный 3 раза/день; Коэнзим Композитум раствор для внутримышечного введения 3 раза/неделю; Траумель® С перорально по 1 табл. 3 раза/день (Владимирова Т.Ю., Барышевская Л.А., Куренков А.В. Возможности коррекции поствирусной обонятельной дисфункции при COVID-19. Медицинский совет.2021; (18): 10-17. https://doi.org/10.21518/2079-701Х-2021 -18-10-17.)-

Продолжают активно тестироваться другие терапевтические подходы с использованием препаратов антиоксидантов, витамина А, омега-3, разагилина и др. (Izquierdo-Dominguez A., et al. Olfactory dysfunction in the COVID-19 outbreak. J Investig Allergol Clin Immunol 2020; 30(5): 317-326. doi: 10.18176/jiaci.0567; Hernandez A.K., et al. Omega-3 supplementation in postviral olfactory dysfunction: A pilot study. Rhinology. 2022; 60(2): 139-144. doi: 10.4193/Rhin21.378; патент РФ 2013108258 А; патент РФ 2587330 C2).

Известен способ лечения обонятельной дисфункции у больных острым риносинуситом (патент РФ 2638688, A61N 1/36, 2017), включающий использование местных деконгестантов, ирригационную, противовоспалительную и муколитическую терапию. После стихания острых проявлений заболевания дополнительно проводят многоканальную электростимуляцию на области жевательных мышц, мышц крыльев носа, круговой мышцы рта и трапеции с двух сторон. Затем осуществляют постановку пиявки (трудотерапия) на латеральную стенку преддверия носа с одной стороны. Курс физиотерапевтического лечения составляет 4-5 сочетанных еженедельных процедур.

Общим недостатком конвенциональных фармпрепаратов и немедикаментозных методов лечения является малая эффективность, особенно, в отношении длительно персистирующих, хронических ольфакторных нарушений, поскольку они не оказывают клинически значимого нейропротективного / нейротрофического эффекта в отношении обонятельного нейроэпителия.

С целью стимуляции регенерации обонятельных нейронов у пациентов с длительной постковидной аносмией предлагается использовать препарат Церебролизин (клинический трайл «Cerebrolysin for Treatment of Covid-related Anosmia and Ageusia» [Электронный ресурс]. URL https://clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT04830943). В соответствии с протоколом клинических испытаний в основной группе (n=150) планируется использовать 40 внутримышечных инъекций Церебролизина в дозе 5 мл (215,2 мг/мл, 1 раз/день, 5 раз/неделю) в течение 8 недель. В группе контроля (n=100) проводить только обонятельную тренировку также в течение 8 недель. Хотя этот трайл и маркируется, как «завершенный» (completed), но полученные результаты, к сожалению, не представлены.

Обогащенная тромбоцитами плазма (platelet-rich plasma, PRP), выделенная из свежей цельной крови, содержит в своем составе не только высокую концентрацию тромбоцитов, но и различные биоактивные факторы с ростовой, противовоспалительной и нейропротективной активностью (Everts P., et al. Platelet-rich plasma: new performance understandings and therapeutic considerations in 2020. Int J Mol Sci. 2020; 21(20): 7794. doi: 10.3390/ijms21207794). Предлагается использовать инъекции аутологичной плазмы обогащенной тромбоцитами в подслизистую носа у больных с хроническими постковидными обонятельными нарушениями (Steffens Y., et al. Effectiveness and safety of PRP on persistent olfactory dysfunction related to COVID-19. Eur. Arch. Otorhinolaryngol. 2022; 279(12): 5951-5953. doi: 10.1007/s00405-022-07560-y; Yan C.H., et al. Use of platelet-rich plasma for COVID-19 related olfactory loss, a randomized controlled trial. Int. Forum Allergy Rhinol. 2023; 13(6): 989-997. doi: 10.1002/alr.23116). Результаты этих испытаний получены на небольших по размеру выборках больных, имеют предварительный характер и не позволяют сделать определенный вывод о пользе или вреде этого вмешательства для лечения стойкой обонятельной дисфункции после COVID-19.

В доступных нам информационных ресурсах не удалось найти каких-либо иных способов и методов лечения/реабилитации больных с хроническими поствирусными нарушениями обоняния, в том числе, с использованием биомедицинских клеточных продуктов или биоактивных факторов.

Однако существуют патенты, предлагающие различные способы получения кондиционной среды, обладающей регенераторным потенциалом, путем лабораторного процессинга и культивирования различных клеток-продуцентов (как правило, мезенхимальных стромальных клеток, выделенных из различных источников). Полученные таким образом кондиционные среды предлагается использовать: локально в области дерматологии и косметологии (AU 2014313874, А61К 35/28, 2016); путем системного или локального введения для стимуляции репарации костной ткани, соединительной ткани (суставного хряща, сухожилий и связок), костного мозга или сосудистой ткани (WO 2015126528, C12N 5/074, 2015); при различных аутоиммунных и нейродегенеративных заболеваниях (WO 2007108003, RU 2008141894, C12N5/07, 2010); для стимуляции образования новых сосудов в ишемизированных тканях (WO 2015145370, А61К 35/28, 2015).

Общим недостатком этих способов является технически сложный лабораторный процессинг клеток-продуцентов, связанный с выделением, сортировкой и культивированием мезенхимальных стволовых клеток, а также узко направленный регенераторный эффект получаемой кондиционной среды в отношении той или иной тканевой мишени. Кроме того, они не применяются для восстановления функции обонятельного нейроэпителия и лечения/реабилитации больных с хроническими поствирусными нарушениями обоняния.

Среди клеток иммунной системы, обладающих выраженным регуляторным влиянием на процессы воспаления и регенерации, наиболее перспективными кандидатами являются макрофаги 2 типа, которые играют центральную роль в заживлении различных тканей, в том числе, в репарации нервной ткани (Yin Y., et al. Macrophage-derived factors stimulate optic nerve regeneration. J Neurosci. 2003; 23(6): 2284-2293. doi: 10.1523/JNEUROSCI.23-06-02284.2003; Sica A., Mantovani A. Macrophage plasticity and polarization: in vivo Veritas. J Clin Invest. 2012; 122(3): 787-795. doi: 10.1172/JCI59643). Первые экспериментальные данные, указывающие на возможную причастность макрофагов к нейрорегенерации, были опубликованы в 1993 г, когда Hikawa N. с соавт.продемонстрировали in vitro, что после поглощения клеточного детрита макрофаги продуцируют факторы, стимулирующие выживаемость нейронов и регенерацию аксонов (Hikawa N., et al. Macrophage-enhanced neurite regeneration of adult dorsal root ganglia neurones in culture. Neuroreport., 1993; 5(1): 41-44. doi: 10.1097/00001756-199310000-00010).

Известен способ получения кондиционной среды, обладающей регенераторным потенциалом, для интраназального введения при лечении заболеваний центральной нервной системы, включающий лабораторный процессинг и культивирование клеток-продуцентов человека, секретирующих в кондиционную среду ангиогенные факторы, в том числе фактор роста эндотелия сосудов [VEGF], в котором в качестве клеток-продуцентов используют макрофаги 2 типа, получаемые из прилипающей фракции мононуклеарных клеток периферической крови пациента или его ближайшего родственника путем культивирования в течение 7-8 суток в питательной среде, дополненной 2-3% аутологичной плазмы в присутствии гранулоцитарно-макрофагального колониестимулирующего фактора, в результате чего в кондиционную среду секретируются биоактивные факторы, выбранные из группы, включающей эритропоэтин [ЕРО], инсулиноподобный ростовой фактор-1 [IGF-1], интерлейкин-6 [IL-6], нейротрофический фактор головного мозга [BDNF], эпидермальный ростовой фактор [EGF], основной фактор роста фибробластов [FGF-basic], обладающие нейротрофическими и нейропротективными свойствами. Полученную кондиционную среду вводят в виде мелкодисперсного аэрозоля интраназально с помощью компрессорного ингалятора (небулайзера) по 2 мл, или 2,5 мл, или 3 мл от 1 до 2 раза в сутки по индивидуальной курсовой программе в течение от 20 до 30 дней. (RU 2637407, А61К 38/18, 2016).

Полученная предложенным способом кондиционная среда использовалась в виде интраназальных ингаляций при лечении функциональных расстройств центральной нервной системы и последствий органических поражений мозга (последствий ишемического инсульта, черепно-мозговой травмы, церебральной ишемии, детского церебрального паралича).

С началом распространения коронавирусной инфекции в 2019-2020 гг, вызванной вирусом SARS-CoV-2, стал отмечаться рост амбулаторных пациентов с поствирусными обонятельными расстройствами, которые относят к хроническому COVID-синдрому (CCS) (Baig A.M. Chronic COVID syndrome: need for an appropriate medical terminology for Long-COVID and COVID Long-Haulers.J Med Virol. 2020; 93(5): 2555-2556. https://doi.org/10.1002/jmv.26624). В связи с этим, поиск новых терапевтических стратегий с целью повышения эффективности лечения/реабилитации больных с хроническими поствирусными нарушениями обоняния является актуальной задачей практической медицины.

С целью расширения арсенала средств для лечения хронических поствирусных нарушений обоняния предлагается использовать вышеописанный способ получения кондиционной среды, обладающей регенераторным потенциалом для интраназального введения.

Поставленная цель достигается применением способа получения кондиционной среды, обладающей регенераторным потенциалом для интраназального введения в качестве способа получения кондиционной среды, обладающей регенераторным потенциалом для интраназального введения для реализации регенераторного потенциала в отношении клеток обонятельного нейроэпителия и восстановления функции обоняния у пациентов с хроническими поствирусными ольфакторными нарушениями.

Предложенное изобретение, на наш взгляд, является новым. В современной литературе отсутствуют указания на применение кондиционной среды из-под культур макрофагов 2 типа, генерированных в условиях дефицита ростовых/сывороточных факторов, в виде интраназальных ингаляций для лечения и реабилитации пациентов с длительно персистирующими, хроническими обонятельными нарушениями, ассоциированными с вирусной инфекцией.

Следует отметить, что поскольку клетки-мишени головного мозга (нейрональные стволовые клетки гиппокампа, зрелые нейроны, клетки микро- и макроглии, олигодендроциты, астроциты) по своему составу, структурной архитектонике и функциональному паттерну кардинально отличаются от клеток обонятельного нейроэпителия (обонятельных сенсорных нейронов, сосудистых перицитов, поддерживающих и микроворсинчатых клеток) не представлялось очевидным, что нейротрофические и нейропротективные эффекты полученной предложенным способом кондиционной среды могут также проявляться и в отношении обонятельного анализатора. Такая возможность не была ранее обнаружена и на эмпирическом уровне, поскольку в ходе клинической апробации данного способа больные, включенные в исследование, не предъявляли жалоб на какие-либо нарушения обонятельной функции.

Лабораторный процессинг и культивирование макрофагов 2 типа, получение кондиционной среды, обладающей регенераторным потенциалом, а также интерназальное введение осуществлялось в соответствии с прототипом -патентом РФ 2637407.

Применение способа получения кондиционной среды, обладающей регенераторным потенциалом, для интраназального введения при лечении пациентов с хроническими поствирусными нарушениями обоняния было апробировано на 7 больных (1 мужчина и 6 женщин в возрасте от 24 до 66; Me 57 лет) с нарушениями обоняния (гипосмия) вследствие перенесенной лабораторно-подтвержденной коронавирусной инфекции COVID-19. Все пациенты, включенные в исследование, характеризовались наличием длительно персистирующей гипосмии (Me 12 мес; от 7 до 24 мес), Отбор пациентов в исследование осуществляли на основании данных обследования врача-невролога и врача-отоларинголога.

Обследование пациентов проводили до начала терапии (визит №1), через 1-2 и 6-12 мес после начала курса терапии (визиты №№2 и 3, соответственно).

Для объективной оценки нарушений обоняния использовали данные ольфактометрии. С этой целью использовали набор пахучих веществ для исследования функции обонятельного анализатора (ООО «Комплимед», РФ). В состав набора входит 6 одорантов, воздействующих, главным образом, на обонятельный рецептор; 6 одорантов ольфактивно-тригеминального и 4 -ольфактивно-глоссофарингеального действия, а также 1 одорант смешанного (ольфактивно-тригеминально-глоссофарингеального) действия. Всего 17 флаконов с пахучими веществами. Ольфактометрию проводили в соответствии с инструкцией фирмы-производителя. При этом оценивали 1) функцию восприятия (ощущает ли пациент запах) и 2) функцию распознавания (правильно ли описывает конкретный запах). Результаты ольфактометрии выражали в виде процента 1) обнаруженных запахов из 17 одорантов и 2) правильно идентифицированных из числа обнаруженных запахов.

Из данных таблицы видно, что исходно, до начала курса интраназальной терапии пациенты отмечали нарушение как восприятия, так и распознавания запахов. Так, по данным ольфактометрии больные ощущали в среднем 13 из 17 тестируемых одорантов (Me 76%; IQR 70-94), а правильно идентифицировали только треть из воспринятых запахов (Me 31%; IQR 28-50%). Через 1-2 мес после начала иммунотерапии (визит №2) способность ощущать запахи у 71% (5 из 7) пролеченных больных полностью восстановилась. При этом функция распознавания в среднем по группе увеличилась двукратно с 31 до 65% (pU<0,001). Позитивный эффект интраназальной иммунотерапии сохранялся в целом также и через 6-12 мес после начала курсового лечения.

Сравнение медианных значений ольфактометрии, полученных при обследовании пациентов при визитах №№1, 2 и 3 с использованием однофакторного дисперсионного анализа Краскела-Уоллиса показало высоко значимые различия среднего уровня как восприятия (Н=14,123, р=0,0009), так и распознавания (Н=11,674, р=0,0029) запахов в динамике проводимой терапии.

Курсовое лечение с использованием способа получения кондиционной среды, обладающей регенераторным потенциалом, было безопасным и хорошо переносимым. Только 1 пациент отметил 2 эпизода заложенности носа в течение 1,5 ч после ингаляции, и еще в одном случае регистрировалось усиление отделяемого из носа. Эти реакции купировались самостоятельно и не требовали медикаментозного лечения.

Для субъективной оценки обоняния пациентами использовали данные анкеты-опросника, по которой пациент оценивал сильное (2 балла) или слабое (1 балл) восприятие 16 запахов (испеченный хлеб, масло, приправы, чеснок, апельсин, клубника, чай, кофе, шоколад и др.). Максимальная оценка - 32 балла.

Исходно, до начала терапии пациенты оценивали нарушения обоняния в среднем на 8 баллов (IQR 3-17), тогда как при последующих визитах результаты анкетирования значимо возрастали до 19 (IQR 15-29, визит №2) и 30 (IQR 22-32, визит №3) баллов. Сравнение результатов опроса с использованием однофакторного дисперсионного анализа Краскела-Уоллиса показало высоко значимые различия субъективной оценки обоняния в динамике проводимой терапии (Н=11,935, р=0,0026).

В ходе исследования оценивали также удовлетворенность пациента проведенной терапией. Для этого пациент должен был ответить на несколько вопросов: Насколько эффективным вы считаете лечение вашего заболевания?; Насколько вас беспокоят побочные эффекты лечения?; Насколько вы удовлетворены безопасностью лечения? Насколько вы готовы продолжить лечение, если вам это потребуется? Насколько вы удовлетворены общей продолжительностью лечения? Будете ли вы рекомендовать такое же лечение кому-то еще с аналогичным заболеванием? В результате пациент давал интегральную оценку свой удовлетворенности лечением по 5-балльной шкале Лайкерта (5-point Likert scale) в виде заключения: очень удовлетворен; удовлетворен; нейтрально; не удовлетворен; очень неудовлетворен.

На относительно ранних срока после начала курса интраназальных ингаляций (визит №2, через 1-2 мес) только 2/7 больных (29%) были очень удовлетворены полученным результатом, тогда как остальные были скорее удовлетворены (4/7, 57%) или высказали нейтральное отношение (1/7, 14%) к проведенной терапии. Тем не менее, на более поздних сроках наблюдения, при третьем визите через 6-12 мес после начала лечения большинство больных (5/7, 71%) отмечали очень высокую удовлетворенность полученным эффектом, а оставшиеся 2 пациента также были в целом удовлетворены результатом проведенной терапии

Примеры практической реализации нового применения известного способа.

Пример 1. Больная Д., 49 лет.Медицинская карта №Д97093. 15.10.2021 г. - первичный осмотр (визит №1) В начале октября 2020 г. перенесла новую коронавирусную инфекцию, подтвержденную данными PCR-анализа мазка из зева на SARS-CoV2. 23.10.2020 жалобы на субфебрильную температуру, слабость (астенический синдром), боли в суставах (артралгии), нарушение обоняния и вкуса. Лечилась амбулаторно. Слабость, субфебрилитет, артралгия купированы. Нарушения обоняния сохраняются до настоящего времени на протяжении 12 мес. Объективно: температура тела 36,5°С, АД 120/80, ЧСС 75 уд/мин. Состояние, удовлетворительное, стабильное, контактна, адекватна. Кожный покров и видимые слизистые чистые, периферических отеков нет. В легких дыхание проводится во все отделы, везикулярное, хрипы не выслушиваются. Антитела к коронавирусу SARS-CoV2 иммуноглобулин класс G (lg G) - положит.(КП 19,5). Диагноз: хронический постковидный синдром. Нарушение обоняния (гипосмия/дисосмия) и вкуса (дисгевзия) [R43.0].

По данным ольфактометрии ощущает 82% запахов (14 из 17 одорантов), при этом правильно идентифицирует только 14% (2 из 14 обнаруженных запахов). По данным анкеты-опросника пациентка оценивала свое обоняние на 3 балла.

Лабораторный процессинг и культивирование макрофагов 2 типа, получение кондиционной среды, обладающей регенераторным потенциалом, осуществляли в соответствии с патентом РФ 2637407. Интраназальное введение кондиционной среды также осуществляли в соответствии с патентом путем ингаляций в виде мелкодисперсного аэрозоля, в течение 30 дней.

25.11.2021, через месяц после начала терапии (визит №2). По данным ольфактометрии функция восприятия запахов сохранялась на исходном уровне: ощущает 82% запахов (14 из 17 одорантов). Однако функция распознавания увеличилась с исходных 14 до 64%: пациентка правильно идентифицировала уже 9 из 14 обнаруженных запахов. По данным анкеты-опросника субъективная оценка пациенткой своего обоняние оставалась на относительно низком уровне (5,5 баллов из максимально возможных 32). Несмотря на объективные позитивные сдвиги в коррекции в способности правильно распознавать обнаруженные запахи, пациентка в целом оценивала свое отношение к проведенной терапии, как нейтральное.

В ноябре 2022 г, через 12 мес после начала терапии (визит №3). По данным ольфактометрии функция восприятия запахов восстановилась полностью: ощущает 100% запахов (17/17 одорантов). Пациентка правильно идентифицировала 10 из 17 обнаруженных запахов, т.е функция распознавания сохранялась на стабильном уровне. По данным анкеты-опросника субъективная оценка пациенткой своего обоняние значительно увеличилась с 3-5,5 до 26 баллов. Интегральная оценка удовлетворенности пациентки проведенным лечением поменялось с нейтральной до максимально высокой («очень удовлетворена»).

Пример 2. Больная К., 59 лет. Медицинская карта №К98431. 01.12.2021 г. - первичный осмотр (визит №1) В начале июня 2021 г. перенесла новую коронавирусную инфекцию, подтвержденную данными PCR-анализа мазка из зева на SARS-CoV2. 12.06.2021 - диарея на протяжении суток; 13.06.2021 - озноб, повышение температуры тела до 39°С, выраженная слабость, головная боль. Лихорадка, выраженная астения сохранялись на протяжении 4-х суток. В это же время - жалобы на потерю обоняния (аносмия) и вкуса (агевзия). Лечилась амбулаторно. Острые проявления инфекции COVID-19 купированы. Нарушения обоняния сохраняются до настоящего времени на протяжении 6 мес. Объективно: температура тела 36,5°С, АД 130/90, ЧСС 80 уд/мин, ЧДД 18. Состояние, удовлетворительное. Кожный покров и видимые слизистые чистые, периферических отеков нет. Носовое дыхание не затруднено. В легких дыхание проводится во все отделы, везикулярное, хрипы не выслушиваются. Антитела к коронавирусу SARS-CoV2 иммуноглобулин класс G (lg G) - положит.(КП 3,6). Диагноз: хронический постковидный синдром. Нарушение обоняния (гипосмия) и вкуса (агевзия) [R43.8].

По данным ольфактометрии ощущает 41% запахов (7 из 17 одорантов), при этом правильно идентифицирует только 28% (2 из 7 обнаруженных запахов). По данным анкеты-опросника пациентка оценивала свое обоняние на 2 балла (слабо воспринимала только 2 запаха из 16).

Лабораторный процессинг и культивирование макрофагов 2 типа, получение кондиционной среды, обладающей регенераторным потенциалом, осуществляли в соответствии с патентом РФ 2637407. Интраназальное введение кондиционной среды также осуществляли в соответствии с патентом путем ингаляций в виде мелкодисперсного аэрозоля, в течение 30 дней.

15.02.2022, через 2 месяца после начала терапии (визит №2). По данным ольфактометрии функция восприятия запахов полностью восстановилась: ощущает 100% запахов (17 из 17 одорантов). Функция распознавания увеличилась 2-кратно с исходных 28 до 65%: пациентка правильно идентифицировала уже 11 из 17 обнаруженных запахов. По данным анкеты-опросника субъективная оценка пациенткой своего обоняния также увеличилась с исходных 2 до 15 баллов. Пациентка в целом оценивала свое отношение к проведенной терапии, как удовлетворительное.

В июне 2022 г, через 6 мес после начала терапии (визит №3). По данным ольфактометрии функция восприятия запахов сохранялась на уровне 100% (17/17 одорантов). Функция распознавания запахов - на уровне 88%: пациентка правильно идентифицировала 15 из 17 обнаруженных запахов. По данным анкеты-опросника субъективная оценка обоняния - 30 баллов (максимальная оценка 32 балла). Интегральная оценка удовлетворенности пациентки проведенным лечением - «очень удовлетворена».

Пример 3. Больная П., 57 лет. Медицинская карта №П98900. 21.12.2021 г. - первичный осмотр (визит №1). В июне 2021 г. перенесла новую коронавирусную инфекцию, подтвержденную данными PCR-анализа мазка из зева на SARS-CoV2. Жалобы на момент заболевания: повышение температуры тела до 38,5°С, боли в горле, осиплость голоса, головная боль, слабость (астенический синдром), одышка. Фебрильная лихорадка сохранялась на протяжении 3-х суток, сопровждалась выраженным астено-вегитативным синдромом. Через 3 дня от начала заболевания - жалобы на потерю обоняния и вкуса. Лечилась амбулаторно. Острые проявления инфекции COVID-19 купированы. Нарушения обоняния сохраняются до настоящего времени на протяжении 6 мес.Объективно: Состояние, удовлетворительное, контактна, адекватна. Кожный покров физиологической окраски, тоны сердца ритмичные. В легких дыхание проводится во все отделы, везикулярное, хрипы не выслушиваются. Антитела к коронавирусу SARS-CoV2 иммуноглобулин класс G (lg G) - положит.(КП 15,1). Диагноз: хронический постковидный синдром. Нарушение обоняния (гипосмия) и вкуса (дисгевзия) [R43.0].

По данным ольфактометрии ощущает 94% запахов (16 из 17 одорантов), при этом правильно идентифицирует только 50% (8 из 16 обнаруженных запахов). По данным анкеты-опросника пациентка оценивала свое обоняние на 12 баллов.

Лабораторный процессинг и культивирование макрофагов 2 типа, получение кондиционной среды, обладающей регенераторным потенциалом, осуществляли в соответствии с патентом РФ 2637407. Интраназальное введение кондиционной среды также осуществляли в соответствии с патентом путем ингаляций в виде мелкодисперсного аэрозоля, в течение 30 дней.

08.02.2022, через 2 месяца после начала терапии (визит №2). По данным ольфактометрии функция восприятия запахов полностью восстановилась: ощущает 100% запахов (17 из 17 одорантов). Функция распознавания увеличилась с исходных 50 до 71%: пациентка правильно идентифицировала 12 из 17 обнаруженных запахов. По данным анкеты-опросника субъективная оценка пациенткой своего обоняние также увеличилась с исходных 12 до 19 баллов. Пациентка в целом оценивала свое отношение к проведенной терапии, как удовлетворительное.

В декабре 2022 г, через 12 мес после начала терапии (визит №3). По данным ольфактометрии функция восприятия запахов сохранялась на уровне 100% (17/17 одорантов). Пациентка правильно идентифицировала 10 из 17 (59%) обнаруженных запахов. По данным анкеты-опросника субъективная оценка обоняния - 22 балла. В целом пациентка была удовлетворена проведенным лечением и выражала свою готовность пройти повторный курс интраназальной терапии.

Пример 4. Больная Г., 59 лет. Медицинская карта №Г3879. 21.10.2021 г. -первичный осмотр (визит №1) В начале ноября 2020 г. перенесла новую коронавирусную инфекцию, подтвержденную данными PCR-анализа мазка из зева на SARS-CoV2. 07.11.2020 жалобы на субфебрильную температуру, кашель, одышку, боли в горле, слабость (астенический синдром), боли в суставах (артралгии), головную боль, тошноту, диарею, нарушение обоняния и вкуса. Лечилась амбулаторно. Острые проявления инфекции COVID-19 купированы.. Нарушения обоняния сохраняются до настоящего времени на протяжении 12 мес.Объективно: температура тела 36,5°С, АД 140/100, ЧСС 85 уд/мин. Состояние, удовлетворительное. Кожный покров и видимые слизистые чистые. В легких дыхание проводится во все отделы, везикулярное, хрипы не выслушиваются. Антитела к коронавирусу SARS-CoV2 иммуноглобулин класс G (lg G) - положит.(КП 20,0). Диагноз: хронический постковидный синдром. Нарушение обоняния (гипосмия/дисосмия) и вкуса (дисгевзия) [R43.0].

По данным ольфактометрии ощущает 76% запахов (13 из 17 одорантов), при этом правильно идентифицирует только 30% (4 из 13 обнаруженных запахов). По данным анкеты-опросника пациентка оценивала свое обоняние на 6,5 баллов.

Лабораторный процессинг и культивирование макрофагов 2 типа, получение кондиционной среды, обладающей регенераторным потенциалом, осуществляли в соответствии с патентом РФ 2637407. Интраназальное введение кондиционной среды также осуществляли в соответствии с патентом путем ингаляций в виде мелкодисперсного аэрозоля, в течение 30 дней.

06.12.2021, через месяц после начала терапии (визит №2). По данным ольфактометрии функция восприятия запахов полностью восстановилась до уровня 100% (17/17 одорантов). Функция распознавания увеличилась с исходных 30 до 88%: пациентка правильно идентифицировала 15 из 17 обнаруженных запахов. По данным анкеты-опросника субъективная оценка пациенткой своего обоняние увеличилась с исходных 6,5 до 29 баллов. Пациентка в целом была очень удовлетворена результатом проведенной терапии.

В декабре 2022 г, через 12 мес после начала терапии (визит №3). По данным ольфактометрии функция восприятия запахов - на уровне 100%. Пациентка правильно идентифицировала 76% (13/17) обнаруженных запахов, т.е функция распознавания сохранялась на стабильном уровне. По данным анкеты-опросника субъективная оценка пациенткой своего обоняние была максимальной (32 балла). Интегральная оценка удовлетворенности пациентки проведенным лечением также максимально высокой («очень удовлетворена»).

Приведенные примеры представлены для иллюстрации, но не для ограничения объема заявленного изобретения. Другие варианты изобретения будут полностью очевидны специалистам в данной области и охватываются прилагаемой формулой изобретения

В ходе клинической апробации выявлена возможность применения способа получения кондиционной среды, обладающей регенераторным потенциалом, для интраназального введения по новому, ранее неизвестному назначению, а именно, для реализации регенераторного потенциала в отношении клеток обонятельного нейроэпителия и, как следствие, получить новый результат в виде восстановления функции обоняния у пациентов с хроническими, поствирусными ольфакторными нарушениями.

Оценивая в целом результаты, можно утверждать, что применение способа получения кондиционной среды, обладающей регенераторным потенциалом, является безопасным, хорошо переносимым и клинически эффективным в лечении и реабилитации пациентов с хроническими, поствирусными нарушениями обоняния.

Изобретение относится к медицине, а именно к отоларингологии, неврологии и иммунологии, и может быть использовано для лечения/реабилитации больных с хроническими поствирусными нарушениями обоняния. Предложено применение кондиционной среды из-под культур макрофагов 2 типа для восстановления функции обоняния у пациентов с хроническими поствирусными ольфакторными нарушениями путем интраназального введения. 1 табл., 4 пр.

Применение кондиционной среды из-под культур макрофагов 2 типа для восстановления функции обоняния у пациентов с хроническими поствирусными ольфакторными нарушениями путем интраназального введения.