МАКРОЦИКЛИЧЕСКОЕ СОЕДИНЕНИЕ Российский патент 2024 года по МПК C07D498/22 A61K31/506 A61P3/00 A61P29/00 A61P35/00 A61P37/00 

Область техники, к которой относится изобретение

[0001]

Настоящее изобретение относится к новому макроциклическому соединению и лекарственному средству, содержащему указанное соединение в качестве активного ингредиента.

Уровень техники

[0002]

Киназа 4, ассоциированная с рецептором интерлейкина 1 (interleikin 1 receptor-associated kinase 4 - IRAK-4), представляет собой фермент фосфорилирования белка, который играет важную роль в нисходящей передаче сигнала Toll-подобных рецепторов (Toll-like receptors - TLR), рецептора интерлейкина 1 (interleukin 1 receptor - IL-1R), IL-18R и IL-33R (Непатентный документ 1). Поскольку семейство рецепторов TLR/IL-1 выполняет важную функцию в развитии воспаления и биологического иммутитета, считается, что нисходящая передача сигнала играет важную роль во многих заболеваниях, включая воспалительные и аутоиммунные заболевания.

[0003]

TLR используют в качестве лигандов патоген-ассоциированные молекулярные паттерны (pathogen-associated molecular patterns - РАМР), производимые инфекционными микроорганизмами, такими как бактерии, грибы, паразиты и вирусы. Они также распознают ассоциированные с повреждениями молекулярные паттерны (damage-associated molecular patterns - DAMPs), высвобождаемые из поврежденных клеток или апоптозирующих клеток, и активируются. Если лиганд связывается с TLR или представителями семейства рецептора IL-1, адапторная молекула, MyD88, рекрутируется в общую внутриклеточную область, называемую областью TIR (Toll/IL-1 рецептора). Считается, что IRAK-4 рекрутируется к рецепторам через взаимодействие с MyD88, и начинается нисходящая передача сигнала (Непатентный документ 2). IRAK-4 активирует IRAK-1 и IRAK-2, а также контролирует выработку медиаторов воспаления, таких как цитокины и хемокины, посредством активации сигнальных молекул, таких как NF-kB и MAPK, в нисходящем потоке.

[0004]

Сообщалось, что клетки человека с дефицитом гена IRAK-4 не реагирует на агонисты для TLR, отличные от TLR3, IL-1β и IL-18 (Непатентный документ 3). Мышь с дефицитом гена IRAK-4 также не реагирует на агонисты для TLR, отличные от TLR3, IL-1β и IL-18 (Непатентный документ 4). С другой стороны, у мышей с дефицитом гена IRAK-1 и гена IRAK-2 наблюдается лишь частичное подавление этих сигналов (Непатентный документ 5). По этой причине считается, что IRAK-4 среди представителей семейства IRAK играет наиболее важную роль в этих сигнальных трансдукциях. Сообщалось также, что у мышей с нокаутом по IRAK-4 и дефицитом киназной активности тяжесть артрита, экспериментального аутоаллергического энцефаломиелита и модели атеросклероза ниже по сравнению с мышами дикого типа (Непатентный документ 6). Таким образом, киназная активность IRAK-4 является необходимой для передачи сигналов, ответственных за патологию, и ингибиторы IRAK-4 могут продемонстрировать превосходную эффективность терапевтического лечения аутоиммунных заболеваний, таких как острые и хронические воспаления, ревматоидный артрит и системный эритриматоз, метаболических нарушений, таких как подагра и диабет, и таких заболеваний, как опухоли.

[0005]

В качестве соединений, обладающих ингибиторной активностью в отношении IRAK-4, известны, например, соединения, описанные в Патентных документах 1-6.

Ссылки предшествующего уровня

Патентные документы

[0006]

Патентный документ 1: Международная патентная публикация WO 2016/144846

Патентный документ 2: Международная патентная публикация WO 2016/053771

Патентный документ 3: Международная патентная публикация WO 2015/048281

Патентный документ 4: Международная патентная публикация WO 2013/042137

Патентный документ 5: Международная патентная публикация WO 2012/068546

Патентный документ б: Международная патентная публикация WO 2015/150995

Непатентные документы

[0007]

Непатентный документ 1: Flannery S. & Bowie A.G., Biochemical Pharmacology, 80 (2010) 1981-1991

Непатентный документ 2: Jain A. et al., Froniters in Immunology, 5 (2014) Article 553

Непатентный документ 3: Picad С.et al., Science, 299 (2003) 2076-2079

Непатентный документ 4: Suzuki N. et al., Nature, 416 (2002) 750-754

Непатентный документ 5: Wan Y. et al., J. Biol. Chem., 284 (2009) 10367-10375

Непатентный документ 6: Koziczak-Holbro M. et al., Arthritis & Rheumatism, 60 (2009) 1661-1671

Сущность изобретения

Цели настоящего изобретения

[0008]

Целью настоящего изобретения является предоставление нового соединения, которое обладает ингибиторной активностью в отношении IRAK-4. Другой целью настоящего изобретения является предоставление нового соединения, которое может применяться в качестве активного ингредиента лекарственного средства для профилактического и/или терапевтического лечения заболевания, связанного с ингибированием IRAK-4. Еще одной целью настоящего изобретению является предоставление лекарственного средства, содержащего указанное соединение.

Средства достижения указанных целей

[0009]

Для достижения описанных выше целей авторами настоящего изобретения были проведены серьезные исследования. В результате они обнаружили, что соединения по настоящему изобретению, представленные формулой (1), приведенной ниже, обладают превосходной ингибирующей активностью IRAK-4 и могут применяться для профилактического и/или терапевтического лечения заболеваний, связанных с ингибированием IRAK-4, и оформили настоящее изобретение.

[0010]

Таким образом, настоящее изобретение осуществлено, например, следующим образом.

[1] Соединение, представленное приведенной ниже общей формулой (1):

[Формула 1]

[в формуле (1)

R¹ представляет собой -Н, С_1-6 алкил, галоген-С_1-6 алкил, гидрокси-С_1-6 алкил, C_1-6 алкокси-С_1-6 алкил, -C(O)R¹², -S(O₂)R¹², -C(O)NR¹¹R¹², -С(О)OR¹² или 3-7-членную насыщенную кольцевую группу, R¹ может быть замещенным 1-3 одинаковыми или разными заместителями, выбранными из группы G¹;

группа G¹ представляет собой группу заместителей, состоящую из -F, гидроксильной группы, цианогруппы, галоген-С_1-6 алкила, C_1-4 алкокси, фенила, 5- или 6-членного гетероарила и 3-7-членной насыщенной кольцевой группы, где фенил и 5- или 6-членный гетероарил, включенный в группу G¹, может быть замещенным 1-3 одинаковыми или разными заместителями, выбранными из группы G^Ar;

группа G^Ar представляет собой группу заместителей, состоящую из -F, -Cl, гидроксильной группы, цианогруппы, C_1-6 алкила, галоген-С_1-6 алкила и -NH₂;

R¹¹ представляет собой -Н, C_1-6 алкил, галоген-С_1-6 алкил, C_1-6 алкокси-С_1-6 алкил, галоген-С_1-6 алкокси-С_1-6 алкил или 3-7-членную насыщенную кольцевую группу;

R¹² представляет собой С_1-6 алкил, галоген-С_1-6 алкил, алкокси-С_1-6 алкил, галоген-С_1-6 алкокси-С_1-6 алкил, 3-7-членную насьщенную кольцевую группу, фенил или 5- или 6-членный гетероарил, где фенил и 5- или 6-членный гетероарил в качестве R¹² может быть замещенным 1-3 одинаковыми или разными заместителями, выбранными из группы G^Ar;

R² представляет собой -Н, С_1-6 алкил, галоген-С_1-6 алкил, гидрокси-С_1-6 алкил, С_1-6 алкокси-С_1-6 алкил или 3-7-членную насьщенную кольцевую группу;

R³ представляет собой -Н, C_1-6 алкил, галоген-С_1-6 алкил, гидрокси-С_1-6 алкил, C_1-6 алкокси-С_1-6 алкил или 3-7-членную насьщенную кольцевую группу;

Ar представляет собой 6-10-членный арил или 5-10-членный гетероарил, где Ar может быть замещенным 1-3 одинаковыми или разными заместителями, выбранными из группы G²;

группа G² представляет собой группу заместителей, состоящую из -F, -Cl, гидроксильной группы, цианогруппы, С_1-6 алкила, галоген-С_1-6 алкила, гидрокси-С_1-6 алкила, R^Ar1-O-C_1-3 алкила, R^Ar1-NR¹³-C_1-3 алкила, -NR¹³C(О)R¹⁴, -С(О)NR¹³R¹⁴, -C(O)NH₂, -NR¹³S(O₂)R¹⁴, -S(O₂)NR¹³R¹⁴, -NH₂, -S(O₂)NH₂, -NR¹³R¹⁴ и -NHC(О) NHR¹⁵;

R^Ar1 представляет собой -H, С_1-6 алкил, галоген-С_1-6 алкил или 3-7-членную насыщенную кольцевую группу, где R^Ar1 может быть замещенным 1-3 одинаковыми или разными заместителями, выбранными из группы G³;

группа G³ представляет собой группу заместителей, состоящую из -F, гидроксильной группы, C_1-3 алкила, галоген-С_1-3 алкила, оксогруппы, C_1-3 алкокси, галоген-С_1-3 алкокси и 3-7-членной насыщенной кольцевой группы;

R¹³ представляет собой -Н, С_1-3 алкил, галоген-С_1-3 алкил, C_1-3 алкокси-С_1-3 алкил, галоген-С_1-3 алкокси-С_1-3 алкил или 3-7-членную насыщенную кольцевую группу;

R¹⁴ представляет собой C_1-3 алкил, галоген-С_1-3 алкил, С_1-3 алкокси-С_1-3 алкил, галоген-С_1-3 алкокси-С_1-3 алкил или 3-7-членную насыщенную кольцевую группу;

R¹⁵ представляет собой -Н, фенил или 5- или 6-членный гетероарил, R¹⁵ может быть замещенным 1-3 одинаковыми или разными заместителями, выбранными из группы заместителей G⁴;

группа G⁴ представляет собой группу заместителей, состоящую из галогена, цианогруппы, C_1-3 алкила и галоген-С_1-3 алкила;

X¹ представляет собой N или СН;

X² представляет собой NH или О;

X³ представляет собой группу, представленную приведенной далее общей формулой (1-1):

[Формула 2]

приведенной далее общей формулой (1-2):

[Формула 3]

или

приведенной далее общей формулой (1-3):

[Формула 4]

(а и b представляют направление присоединения),

R²¹ и R²² независимо представляют собой -Н, С_1-3 алкил или галоген-С_1-3 алкил;

X⁴ представляет собой группу, представленную приведенной далее общей формулой (2-1):

[Формула 5]

(b и с представляют направление присоединения); в формуле (2-1),

n представляет собой целое число от 1 до 3;

Y представляет собой NR⁵¹ или О;

R³¹ и R³² независимо представляют собой -Н, С_1-3 алкил или галоген-С_1-3 алкил; или

R³¹ и R³² могут объединяться с образованием 3-6-членного насыщенного кольца;

R⁴¹ и R⁴² независимо представляют собой -Н, -F, гидроксильную группу, С_1-3 алкил, галоген-С_1-3 алкил, С_1-3 алкокси или галоген-С_1-3 алкокси; или

R⁴¹ и R⁴² могут объединяться с образованием 3-6-членного насыщенного кольца;

R⁵¹ представляет собой -Н, С_1-3 алкил или галоген-С_1-3 алкил;

или

R⁵¹ и R³¹ могут объединяться с образованием 4-6-членного насыщенного кольца;

X⁴ может быть замещенным 1-3 одинаковыми или разными заместителями, выбранными из группы G⁵; и

группа G⁵ представляет собой группу заместителей, состоящую из -F, гидроксильной группы, С_1-3 алкила, галоген-С_1-3 алкила, С_1-3 алкокси и галоген-С_1-3 алкокси],

или его соль.

[0011]

[2] Соединение или его соль по пункту [1], где Ar представляет собой 5- или 6-членный гетероарил.

[2-2] Соединение или его соль по пункту [1], представленному выше, где Ar представляет собой тиенил, тиазолил, изотиазолил, пирролил, пиразолил, имидазолил, пиридил, пиримидинил или пиразинил.

[2-3] Соединение или его соль по пункту [1], представленному выше, где Ar представляет собой тиазолил, изотиазолил, пиразолил, имидазолил, пиридил, пиримидинил или пиразинил.

[2-4] Соединение или его соль по пункту [1], представленному выше, где Ar представляет собой тиазолил, изотиазолил, пиридил или пиримидинил.

[2-5] Соединение или его соль по пункту [1], представленному выше, где Ar представляет собой тиазолил или пиримидинил.

[0012]

[3] Соединение или его соль по пункту [1] или [2], представленным выше, где R¹ представляет собой -Н, C_1-6 алкил, галоген-С_1-6 алкил, гидрокси-С_1-6 алкил, C_1-6 алкокси-С_1-6 алкил или 3-7-членную насыщенную кольцевую группу, и R¹ может быть замещенным 1-3 одинаковыми или разными заместителями, выбранными из группы G¹ (группа G¹ принимает значения, описанные выше).

[3-2] Соединение или его соль по пункту [1] или [2], представленным выше, где R¹ представляет собой -Н, C_1-6 алкил, галоген-С_1-6 алкил, С_1-6 алкокси-С_1-6 алкил или 3-7-членную насыщенную кольцевую группу, и R¹ может быть замещенным 1-3 одинаковыми или разными заместителями, выбранными из группы заместителей G¹ (группа заместителей G¹ принимает значения, описанные выше).

[3-3] Соединение или его соль по пункту [1] или [2], представленным выше, где R¹ представляет собой -Н, C_1-6 алкил или 3-7-членную насыщенную кольцевую группу, и R¹ может быть замещенным 1-3 одинаковыми или разными заместителями, выбранными из группы G¹ (группа заместителей G¹ принимает значения, описанные выше).

[0013]

[4] Соединение или его соль по любому из пунктов с [1] по [3-3], приведенных выше, где X² представляет собой NH.

Когда номера пунктов, на которые делается ссылка, указаны с использованием интервала значений, например «пункты с [1] по [3-3], приведенные выше», и пункт с дополнительным номером, например [3-2], включен в указанный интервал, это означает, что ссылка сделана и на пункт с дополнительным номером, такой как [3-2]. То же самое относится к представленным далее описаниям.

[0014]

[5] Соединение или его соль по любому из пунктов с [1] по [4], приведенных выше, где X³ представляет собой группу, представленную приведенной далее общей формулой (1-1):

[Формула 6]

(R²¹ и R²² принимают значения, описанные выше).

[0015]

[6] Соединение или его соль по любому из пунктов с [1] по [5], приведенных выше, где X³ представляет собой группу, представленную приведенной далее общей формулой (1-1-1):

[Формула 7]

[7] Соединение или его соль по любому из пунктов с [1] по [6], приведенных выше, где в общей формуле (2-1) для X⁴ n равно 1.

[0016]

[8] Соединение или его соль по любому из пунктов с [1] по [8], приведенных выше, где Ar представляет собой группу, представленную приведенной далее общей формулой (3-1):

[Формула 8]

в формуле (3-1)

R^Ar2 представляет собой -Н, -F, -Cl, гидроксильную группу, цианогруппу, С_1-6 алкил, галоген-C_1-6 алкил, гидрокси-С_1-6 алкил, R^Ar1-O-C_1-3 алкил или -NR¹³R¹⁴ (R^Ar1, R¹³ и R¹⁴ принимают значения, описанные выше).

[8-2] Соединение или его соль по любому из пунктов с [1] по [7], приведенных выше, где Ar представляет собой группу, представленную общей формулой (3-1), и в формуле (3-1) R^Ar2 представляет собой -Н, С_1-6 алкил, гидрокси-С_1-6 алкил или R^Ar1-O-C_1-3 алкил (R^Ar1 принимает значения, описанные выше).

[8-3] Соединение или его соль по любому из пунктов с [1] по [8], приведенных выше, где Ar представляет собой группу, представленную общей формулой (3-1), и в формуле (3-1) R^Ar2 представляет собой R^Ar1-O-C_1-3 алкил (R^Ar1 принимает значения, описанные выше).

[0017]

[8-4] Соединение или его соль по любому из пунктов с [1] по [8], приведенных выше, где Ar представляет собой группу, представленную общей формулой (3-1), в формуле (3-1) R^Ar2 представляет собой R^Ar1-O-C_1-3 алкил (R^Ar1 принимает значения, описанные выше), R^Ar1 представляет собой C_1-6 алкил или 3-7-членную насыщенную кольцевую группу, и R^Ar1 может быть замещенным 1-3 одинаковыми или разными заместителями, выбранными из группы G³ (группа G³ принимает значения, описанные выше).

[8-5] Соединение или его соль по любому из пунктов с [1] по [8], приведенных выше, где Ar представляет собой группу, представленную общей формулой (3-1), в формуле (3-1) R^Ar2 представляет собой R^Ar1-O-C_1-3 алкил (R^Ar1 принимает значения, описанные выше), R^Ar1 представляет собой С_1-6 алкил, и R^Ar1 может быть замещенным 1-3 одинаковыми или разными заместителями, выбранными из группы G³ (группа G³ принимает значения, описанные выше).

[8-6] Соединение или его соль по любому из пунктов с [1] по [8], приведенных выше, где Ar представляет собой группу, представленную общей формулой (3-1), в формуле (3-1) R^Ar2 представляет собой R^Ar1-O-C_1-3 алкил (R^Ar1 принимает значения, описанные выше), R^Ar1 представляет собой 3-7-членную насыщенную кольцевую группу, и R^Ar1 может быть замещенным 1-3 одинаковыми или разными заместителями, выбранными из группы G³ (группа G³ принимает значения, описанные выше).

[8-7] Соединение или его соль по любому из пунктов с [1] по [7], приведенных выше, где Ar представляет собой группу, представленную общей формулой (3-1), в формуле (3-1) R^Ar2 представляет собой R^Ar1-O-C_1-3 алкил (R^Ar1 принимает значения, описанные выше), R^Ar1 представляет собой С_3-7 циклоалкил, и R^Ar1 может быть замещенным 1-3 одинаковыми или разными заместителями, выбранными из группы G³ (группа G³ принимает значения, описанные выше).

[0018]

[9] Соединение или его соль по любому из пунктов с [1] по [8-7], приведенных выше, где Ar представляет собой группу, представленную общей формулой (3-1); и

в формуле (3-1)

R^Ar2 представляет собой -Н, метил, гидроксиметил, -CH₂-O-R^Ar1 (R^Ar1 принимает значения, описанные выше).

[9-2] Соединение или его соль по любому из пунктов с [1] по [8-7], приведенных выше, где Ar представляет собой группу, представленную общей формулой (3-1), в формуле (3-1), R^Ar2 представляет собой R^Ar1-O-CH₂- (R^Ar1 принимает значения, описанные выше), R^Ar1 представляет собой C_1-6 алкил или 3-7-членную насыщенную кольцевую группу, и R^Ar1 может быть замещенным 1-3 одинаковыми или разными заместителями, выбранными из группы G³ (группа G³ принимает значения, описанные выше).

[9-3] Соединение или его соль по любому из пунктов с [1] по [8-7], приведенных выше, где Ar представляет собой группу, представленную общей формулой (3-1), в формуле (3-1) R^Ar2 представляет собой R^Ar1-O-CH₂- (R^Ar1 принимает значения, описанные выше), R^Ar1 представляет собой C_1-6 алкил, и R^Ar1 может быть замещенным 1-3 одинаковыми или разными заместителями, выбранными из группы G³ (группа G³ принимает значения, описанные выше).

[0019]

[9-4] Соединение или его соль по любому из пунктов с [1] по [8-7], приведенных выше, где Ar представляет собой группу, представленную общей формулой (3-1), в формуле (3-1) R^Ar2 представляет собой R^Ar1-O-CH₂- (R^Ar1 принимает значения, описанные выше), R^Ar1 представляет собой 3-7-членную насыщенную кольцевую группу, и R^Ar1 может быть замещенным 1-3 одинаковыми или разными заместителями, выбранными из группы G³ (группа G³ принимает значения, описанные выше).

[9-5] Соединение или его соль по любому из пунктов с [1] по [8-7], приведенных выше, где Ar представляет собой группу, представленную общей формулой (3-1), в формуле (3-1), R^Ar2 представляет собой R^Ar1-O-CH₂- (R^Ar1 принимает значения, описанные выше), R^Ar1 представляет собой С_3-7 циклоалкил, и R^Ar1 может быть замещенным 1-3 одинаковыми или разными заместителями, выбранными из группы G³ (группа G³ принимает значения, описанные выше).

[9-6] Соединение или его соль по любому из пунктов с [1] по [8-7], приведенных выше, где Ar представляет собой группу, представленную общей формулой (3-1), и в формуле (3-1) R^Ar2 представляет собой метил или гидроксиметил.

[9-7] Соединение или его соль по любому из пунктов с [1] по [8-7], приведенных выше, где Ar представляет собой группу, представленную общей формулой (3-1), и в формуле (3-1) R^Ar2 представляет собой метил.

[9-8] Соединение или его соль по любому из пунктов с [1] по [8-7], приведенных выше, где Ar представляет собой группу, представленную общей формулой (3-1), и в формуле (3-1) R^Ar2 представляет собой гидроксиметил.

[0020]

[10] Соединение или его соль по любому из пунктов с [1] по [9-8], приведенных выше, где R³ представляет собой -Н.

[11] Соединение или его соль по любому из пунктов с [1] по [10], приведенных выше, где R² представляет собой -Н или метил.

[12] Соединение или его соль по любому из пунктов с [1] по [11], приведенных выше, где R¹ представляет собой -Н или С_1-3 алкил.

[12-2] Соединение или его соль по любому из пунктов с [1] по [11], приведенных выше, где R¹ представляет собой -Н.

[12-3] Соединение или его соль по любому из пунктов с [1] по [11], приведенных выше, где R¹ представляет собой С_1-3 алкил.

[12-4] Соединение или его соль по любому из пунктов с [1] по [11], приведенных выше, где R¹ представляет собой метил или этил.

[12-5] Соединение или его соль по любому из пунктов с [1] по [11], приведенных выше, где R¹ представляет собой метил.

[12-6] Соединение или его соль по любому из пунктов с [1] по [11], приведенных выше, где R¹ представляет собой этил.

[0021]

[13] Соединение, представленное приведенной далее формулой:

[Формула 9]

или его соль.

[0022]

[14] Соединение, представленное приведенной далее формулой:

[Формула 10]

или его соль.

[0023]

[15] Соединение, представленное приведенной далее формулой:

[Формула 11]

или его соль.

[0024]

[16] Соединение, представленное приведенной далее формулой:

[Формула 12]

или его соль.

[0025]

[17] Соединение, представленное приведенной далее формулой:

[Формула 13]

или его соль.

[0026]

[18] Соединение, представленное приведенной далее формулой:

[Формула 14]

или его соль.

[0027]

[19] Соединение, представленное приведенной далее формулой:

[Формула 15]

или его соль.

[0028]

[20] Лекарственное средство, содержащее соединение по любому из пунктов с [1] по [19], приведенных выше, или его фармацевтически приемлемую соль в качестве активного ингредиента.

[21] Лекарственное средство по пункту [20], представленному выше, которое представляет собой лекарственное средство для профилактического и/или терапевтического лечения заболевания, связанного с ингибированием IRAK4.

[22] Лекарственное средство по пункту [20], представленному выше, которое представляет собой лекарственное средство для профилактического и/или терапевтического лечения ревматизма.

[23] Ингибитор IRAK4, содержащий соединение по любому из пунктов с [1] по [19], приведенных выше, или его фармацевтически приемлемую соль в качестве активного ингредиента.

[0029]

[24] Фармацевтическая композиция для профилактического и/или терапевтического лечения ревматизма, которая содержит соединение по любому из пунктов с [1] по [19], приведенных выше, или его фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемый носитель.

[25] Соединение по любому из пунктов с [1] по [19], приведенных выше, или его фармацевтически приемлемая соль, которые применяются для профилактического и/или терапевтического лечения ревматизма.

[26] Способ профилактического и/или терапевтического лечения ревматизма у млекопитающего, который включает стадию введения млекопитающему эффективного количества соединения по любому из пунктов с [1] по [19], приведенных выше, или его фармацевтически приемлемой соли.

Эффект изобретения

[0030]

«Соединения, представленные формулой (1), или их соль» (называемые далее просто как «соединения по настоящему изобретению» обладают превосходной ингибиторной активностью в отношении IRAK-4. Соединения по настоящему изобретения, в соответствии с определенным вариантом осуществления, проявляют значительную селективность в отношении других киназ, в частности FLT3. Кроме того, соединения по настоящему изобретению, в соответствии с определенным вариантом осуществления, показывают низкую генетическую токсичность. Соединения по настоящему изобретению, в соответствии с определенным вариантом осуществления, также могут применяться в качестве активного ингредиента лекарственного средства для профилактического и/или терапевтического лечения заболевания, связанного с ингибированием IRAK-4, например для профилактического и/или терапевтического лечения аутоиммунного заболевания. Соединения по настоящему изобретению, в соответствии с определенным вариантом осуществления, могут также применяться в качестве реагента, обладающего ингибиторной активностью в отношении IRAK-4.

Способы осуществления настоящего изобретения

[0031]

Далее настоящее изобретения будет объяснено подробно.

В настоящем описании, если конкретно не указано иное, атом углерода может быть представлен просто как "С", атом водорода -как "Н", атом кислорода - как "О", атом серы - как "S", атом азота - как "N". Далее, карбонильная группа может быть преставлена просто как "-С(O)-", карбоксильная группа - как "-СОО-", сульфинильная группа - как "-S(O)-", сульфонильная группа как "-S(O)₂-", простая эфирная связь - как "-O-", простая тиоэфирная связь - как "-S-" (каждый знак в этих групп показывает связь).

[0032]

В настоящем описании алкил может представлять собой линейную, разветвленную или циклическую насыщенную углеводородную группу либо комбинацию таких групп, если конкретно не указано иное. Примеры алкила включают, в частности, метил, этил, пропил, бутил, его изомеры [нормальный (н), изо, вторичный (втор), третичный (трет) и т.п.] и циклоалкил, такой как циклопропил и циклобутил. Примеры алкила включают алкил, содержащий от 1 до 6 атомов углерода. В соответствии с другим вариантом осуществления примеры включают алкил, содержащий от 1 до 3 атомов углерода. Алкил, содержащий от 1 до 6 атомов углерода, может обозначаться как C_1-6 алкил.

[0033]

«Алкокси» может представлять собой линейную, разветвленную или циклическую насыщенную алкилоксигруппу или комбинацию таких групп, если конкретно не указано иное. Примеры таких групп включают, в частности, метокси, этокси, пропокси, бутокси, его изомеры [нормальный (н-), изо-, вторичный (втор-), третичный (трет-) и т.п.] и циклоалкилокси, такую как циклопропокси и циклобутокси. Примеры алкокси включают алкоксигруппу, содержащую от 1 до 6 атомов углерода. В другом варианте осуществления примеры включают алкоксигруппу, содержащую от 1 до 3 атомов углерода. Алкоксигруппа, содержащая от 1 до 6 атомов углерода, может обозначаться как С_1-6 алкокси.

[0034]

«Алкилен» может представлять собой линейный или разветвленный алкилен. Его примеры включают, в частности, метилен, этилен, пропилен, бутилен, метилметилен, этилметилен, метилэтилен, 1,2-диметилэтилен, 1,1,2,2-тетраметилэтилен и 1-метилбутилен. Примеры алкилена включают, алкилен, содержащий от 1 до 6 атомов углерода. В соответствии с другим вариантом осуществления примеры алкилена включают алкилен, содержащий от 1 до 3 атомов углерода. Алкилен, содержащий от 1 до 6 атомов углерода, может обозначаться как С_1-6 алкилен.

«Галоген» представляет собой фтор (-F), хлор (-Cl), бром (-Br) или йод (-I). В соответствии с другим вариантом осуществления примеры галогена включают -F и -Cl. В соответствии с еще одним вариантом осуществления примеры галогена включают -F. Термин «галоген-» означает замещение 1-7 одинаковыми или разными галогенами. В соответствии с другим вариантом осуществления он означает замещение 1-5 одинаковыми или разными галогенами. В соответствии с еще одним вариантом осуществления он означает замещение 1-3 галогенами. В соответствии с еще одним вариантом осуществления он означает замещение 1 атомом галогена. Примеры включают замещение -F.

[0035]

Термин «ароматическое кольцо (ароматический цикл)» конкретно не ограничен при условии, что кольцо (цикл) обладает ароматичностью, и его примеры включают моноциклическое трициклическое ароматическое кольцо. Примеры ароматического кольца включают ароматическое углеводородное кольцо и ароматическое гетероциклическое кольцо. Конкретные примеры таких групп включают бензол, нафталин, фенантрен, тиофен, фуран, тиазол, изотиазол, оксазол, изоксазол, оксадиазол, пиррол, пиразол, имидазол, пиридин, пиримидин, пиразин, пиридазин, пиридон, пиримидинон, индол, изоиндол, индазол, хинолин, изохинолин, бензимидазол, бензотриазол, бензотиофен, бензофуран, бензотиазол, фталазин, хиноксалин, пирролопиридин и карбазол.

Примеры «ароматической кольцевой группы» включают моновалентную группу, образованную удалением одного произвольно выбранного атома водорода из ароматического кольца. Группа ароматического кольца может представлять собой ароматическую группу от моноциклической до трициклической. Примеры такой группы примеры включают, в частности, арил и гетероарил.

[0036]

«Арил» может представлять собой моноциклическую трициклическую ароматическую углеводородную кольцевую группу. Арил также может представлять собой ароматическую углеводородную кольцевую группу, конденсированную с насыщенным углеводородным кольцом, описанным ниже. Примеры арила включают 6-14-членный арил. В соответствии с другим вариантом осуществления примеры арила включают 6-10-членный арил. В соответствии с еще одним вариантом осуществления примеры арила включают 6-членный арил. Конкретные примеры аоида включают фенил, нафтил, антранил, фенантренил, флоренил, инданил и 1, 2, 3, 4-тетрагидронафталенил. В соответствии с другим вариантом осуществления примеры арила включают фенил, и в соответствии с еще одним вариантом осуществления примеры арила включают нафтил. Инданил и 1,2,3,4-тетрагидронафталенил относятся к 6-10-членному арилу.

[0037]

«Гетероарил» может представлять собой моноциклическую трициклическую кольцевую группу, содержащую от 1 до 4 гетероатомов в качестве атомов, образующих кольцо. Примеры гетероатомов включают атомы О, S и N. Примеры гетероарила включают 5-14-членный гетероарил. В соответствии с другим вариантом осуществления примеры гетероарила включают 5-10-членный гетероарил. В соответствии с еще одним вариантом осуществления примеры гетероарила включают 5- или 6-членный гетероарил. Конкретные примеры гетероарила включают тиенил, фуранил, тиазолил, изотиазолил, оксазолил, изоксазолил, оксадиазолил, пирролил, пиразолил, имидазолил, пиридил, пиримидинил, пиразинил, пиридазинил, пиридонил, пиримидинонил, индолил, изоиндолил, индазолил, хинолил, изохинолил, бензимидазолил, бензотриазолил, бензотиенил, бензофуранил, бензотиазолил, фталазинил, хиноксалинил, пирролопиридил и карбазолил.

[0038]

Примеры «насыщенного кольца» включают насыщенное углеводородное кольцо и насыщенное гетероциклическое кольцо. Насыщенное кольцо может содержать поперечную связь или может быть конденсированным с описанным выше ароматическим кольцом.

«Насыщенное углеводородное кольцо» может содержать от одного до трех углеводородных циклов. Его примеры включают 3-10-членное насыщенное углеводородное кольцо. В соответствии с другим вариантом осуществления его примеры включают 3-7-членное насыщенное углеводородное кольцо. В соответствии с еще одним вариантом осуществления его примеры включают 5- или 6-членное насыщенное углеводородное кольцо. Насыщенное углеводородное кольцо может содержать поперечную связь и может быть конденсированным с описанным выше ароматическим кольцом. Конкретные примеры насыщенного углеводородного кольца включают циклопропан, циклобутан, циклопентан, циклогексан и адамантан.

[0039]

«Насыщенное гетероциклическое кольцо» может представлять собой моноциклическое - трициклическое насыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее от 1 до 4 гетероатомов в качестве атомов, образующих кольцо. Примеры гетероатома включают атомы О, S и N. Примеры насыщенного гетероциклического кольца включают 3-10-членное насыщенное гетероциклическое кольцо. В соответствии с другим вариантом осуществления примеры насыщенного гетероциклического кольца включают 3-7-членное насыщенное гетероциклическое кольцо. В соответствии с еще одним вариантом осуществления примеры насыщенного гетероциклического кольца включают 5- или 6-членное насыщенного гетероциклическое кольцо. Такое насыщенное гетероциклическое кольцо может содержать поперечную связь и может быть конденсированным с описанным выше ароматическим кольцом. Конкретные примеры такого насыщенного гетероциклического кольца включают тетрагидропиран, тетрагидрофуран, пиперидин, пирролидин, азетидин, оксетан, азиридин, оксиран, тетрагидротиопиран, тетрагидротиофен, морфолин, оксазепан и пиперазин.

[0040]

Примеры «конденсированного кольца» включают циклическое соединение, состоящее из двух или большего количества колец, связанных вместе таким образом, что кольца обладают двумя или большим количеством общих атомов, где два или большее количество колец независимо представляют собой 3-7-членное насыщенное кольцо. Конденсированное кольцо может содержать от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из атомов О, S и N. Примеры конденсированного кольца включают циклическое соединение, в котором два соседних атома принадлежат обоим кольцам.

[0041]

Примеры «спирокольца» включают циклическое соединение, состоящее из двух колец с одним общим атомом углерода, где два кольца независимо представляют собой 3-7-членное насыщенное кольцо. Спирокольцо может содержать от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из атомов О, S и N. Когда спирокольцо образовано 7-11 атомами, такое кольцо может называться 7-11-членным спирокольцом. Примеры спирокольца включают 7-13-членное спирокольцо. В соответствии с другим вариантом осуществления примеры спирокольца включают 7-11-членное спирокольцо. В соответствии с еще одним вариантом осуществления примеры спирокольца включают 7-9-членное спирокольцо.

[0042]

Примеры термина «насыщенная кольцевая группа» включают моновалентную группу, полученную удалением одного произвольно выбранного атома водорода из насыщенного кольца, и двухвалентную группу, полученную удалением по одному атому водорода от двух образующих кольцо атомов насыщенного кольца. Примеры насыщенной кольцевой группы включают насыщеную углеводородную кольцевую группу и насыщенную гетероциклическую кольцевую группу. Примерами такой группы являются 3-10-членные насыщенные кольцевые группы. В соответствии с другим вариантом осуществления примеры такой группы включают 3-7-членную насыщенную кольцевую группу. В соответствии с еще одним вариантом осуществления примеры такой группы включают 5- или 6-членную насыщенную кольцевую группу.

[0043]

Примеры «насыщенной углеводородной кольцевой группы» включают моновалентную группу, образованную удалением одного произвольно выбранного атома водорода из насыщенного углеводородного кольца, и двухвалентную группу, полученную удалением по одному атому водорода от двух разных образующих кольцо атомов насыщенного углеводородного кольца. Насыщенная углеводородная кольцевая группа может представлять собой моноциклическую - трициклическую насыщенную углеводородную группу. Насыщенная углеводородная кольцевая группа может соедержать поперечную связь и может быть конденсированной с описанным выше ароматическим кольцом. Примеры такой группы включают 3-10-членную насыщенную углеводородную кольцевую группу. В соответствии с другим вариантом осуществления примеры такой группы включают 3-7-членную насыщенную углеводородную кольцевую группу. В соответствии с еще одним вариантом осуществления примеры такой группы включают 5- или 6-членную насыщенную углеводородную кольцевую группу. Конкретные примеры моновалентной группы включают циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил и адамантил. Конкретные примеры двухвалентной группы включают двухвалентную группу, полученную из любого описанного выше конкретного примера моновалентной группы дополнительным удалением атома водорода от образующего кольцо атома, отличного от образующего кольцо атома, от которого атом водорода был удален при образовании моновалентной группы.

[0044]

Примеры «насыщенной гетероциклической кольцевой группы» включают моновалентную группу, полученную удалением произвольно выбранного атома водорода из насыщенного гетероциклического кольца, и двухвалентную группу, полученную удалением по одному атому водорода от двух разных образующих кольцо атомов насыщенного гетероциклического кольца. Насыщенная гетероциклическая кольцевая группа может представлять собой моноциклическую - трициклическую насыщенную гетероциклическую кольцевую группу, содержащую от 1 до 4 гетероатомов в качестве атомов, образующих кольцо. Такая насыщенная гетероциклическая кольцевая группа может содержать поперечную связь и может быть конденсированной с описанным выше ароматическим кольцом. Примеры гетероатома включают атомы О, S и N. Примеры указанной группы включают 3-10-членную гетероциклическую кольцевую группу. В соответствии с другим вариантом осуществления примеры такой группы включают 3-7-членную насыщенную гетероциклическую кольцевую группу. В соответствии с еще одним вариантом осуществления примеры такой группы включают 5- или 6-членную насыщенную гетероциклическую кольцевую группу. Конкретные примеры моновалентной насыщенной гетероциклической кольцевой группы включают тетрагидропиранил, тетрагидрофуранил, пиперидинил, пирролидинил, азетидинил, оксетанил, тетрагидротиопиранил, тетрагидротиенил, морфолинил и пиперазинил.

[0045]

«Частично ненасыщенная кольцевая группа» может представлять собой насыщенную кольцевую группу, часть которой является ненасыщенной, и примеры такой группы включают частично ненасыщенную углеводородную кольцевую группу и частично ненасыщенную гетероциклическую кольцевую группу. Примеры такой группы включают 3-10-членную частично ненасыщенную кольцевую группу. В соответствии с другим вариантом осуществления примеры такой группы включают 3-7-членную частично ненасыщенную кольцевую группу. В соответствии с еще одним вариантом осуществления примеры такой группы включают 5- или 6-членную частично ненасыщенную кольцевую группу.

[0046]

«Частично ненасыщенная углеводородная кольцевая группа» может представлять собой насыщенную углеводородную кольцевую группу, часть которой является ненасыщенной. Конкретные примеры такой группы включают циклопентенил, циклопентадиенил, циклогексенил, циклогексадиенил и бициклооктатриенил.

«Частично ненасыщенная гетероциклическая кольцевая группа» может представлять собой насыщенную гетероциклическую кольцевую группу, часть которой является ненасыщенной. Конкретные примеры такой группы включают дигидропиранил, дигидрофуранил, дигидротиопиранил, дигидротиенил, 1,2-дигидрохинолил и 1,2,3,4-тетрагидрохинолил.

[0047]

Настоящее изобретение включает все изомеры, если конкретно не указано иное. Например, алкил, алкенил, алкинил, алкокси, алкилтио, алкилен, алкенилен и алкинилен включают линейные и разветвленные группы. Кроме того, объем настоящего изобретения включает любой из изомеров расположения относительно двойной связи, кольца или конценсированного кольца (Е- или Z-изомер либо цис- или транс-изомер), изомеров относительно асимметричного атома углерода или т.п.(R- или S-изомер, изомеры по α- или β-конфигурации, энантиомеры, диастереомеры и т.п.), оптически активные вещества, обладающие оптическим вращением (D- или L-изомер либо d- или l-isomer), изомеры по полярности, наблюдаемой при хроматографическом разделении (изомер высокой полярности или изомер низкой полярности), уравновешенные (equilibrated) соединения, конформационные изомеры, смеси этих изомеров в произвольных соотношениях и рацематы.

[0048]

В настоящем описании, как очевидно для специалистов в данной области, символ:

[Формула 16]

показывает, что связь находится под плоскостью (т.е., α-конфигурация), символ:

[Формула 17]

показывает, что связь находится перед плоскостью (т.т., β-конфигурация), и символ:

[Формула 18]

означает «-конфигурацию или β-конфигурацию или их смесь, если конкретно не указано.

[0049]

Далее соединения, представленные формулой (1), и их соли будут описаны подробно.

[Формула 19]

[0050]

В настоящем описании выражение «может быть замещенной» означает, что если конкретно не указано, у соответствующей группы нет заместителя или есть от 1 до 5 одинаковых или разных заместителей. В соответствии с другим вариантом осуществления данное выражение означает, что у соответствующей группы нет заместителя или есть от 1 до 3 заместителей. В соответствии с еще одним вариантом осуществления данное выражение означает, что у соответствующей группы нет заместителя или есть 1 заместитель. В соответствии с еще одним вариантом осуществления данное выражение означает, что у соответствующей группы нет заместителя.

[0051]

Примеры R¹ включают -Н, С_1-6 алкил, галоген-С_1-6 алкил, гидрокси-С_1-6 алкил, С_1-6 алкокси-С_1-6 алкил, -C(O)R¹², -S(O)₂)R¹², -C(O)NR¹¹R¹², -С(О)OR¹² и 3-7-членную насыщенную кольцевую группу. В соответствии с другим вариантом осуществления его примеры включают -Н, C_1-6 алкил, галоген-С_1-6 алкил, гидрокси-С_1-6 алкил, C_1-6 алкокси-С_1-6 алкил и 3-7-членную насыщенную кольцевую группу. В соответствии с еще одним вариантом осуществления его примеры включают -Н, C_1-6 алкил и 3-7-членную насыщенную кольцевую группу. В соответствии с еще одним вариантом осуществления его примеры включают -Н, метил и этил. В соответствии с еще одним вариантом осуществления его примеры включают метил.

R¹ может быть замещенным 1-3 одинаковыми или разными заместителями, выбранными из группы G¹.

Примеры группы G¹ включают группу заместителей, состоящую из -F, гидроксильной группы, цианогруппы, галоген-С_1-6 алкила, С_1-4 алкокси, фенила, 5- или 6-членного гетероарила и 3-7-членной насыщенной кольцевой группы. В соответствии с другим вариантом осуществления ее примеры включают группу G¹¹, состоящую из -F, гидроксильной группы, галоген-С_1-6 алкила, С_1-4 алкокси и 3-7-членной насыщенной кольцевой группы. В соответствии с еще одним вариантом осуществления примеры включают группу G¹², состоящую из -F, гидроксильной группы, C_1-4 алкокси и 3-7-членной насыщенной кольцевой группы.

Фенил и 5- или 6-членный гетероарил, включенные в группу G¹, могут быть замещенными 1-3 одинаковыми или разными заместителями, выбранными из группы G^Ar.

[0052]

Примеры группы G^Ar включают группу, состоящую из -F, -Cl, гидроксильной группы, цианогруппы, C_1-6 алкила, галоген-С_1-6 алкила и -NH₂. В соответствии с другим вариантом осуществления ее примеры включают группу G^Ar1, состоящую из -F, -Cl, цианогруппы, C_1-6 алкила и галоген-С_1-6 алкила.

Примеры R¹¹ включают -Н, С_1-6 алкил, галоген-С_1-6 алкил, С_1-6 алкокси-С_1-6 алкил, галоген-С_1-6 алкокси-С_1-6 алкил и 3-7-членную насыщенную кольцевую группу. В соответствии с другим вариантом осуществления его примеры включают С_1-6 алкил, C_1-6 алкокси-С_1-6 алкил и 3-7-членную насыщенную кольцевую группу.

Примеры R¹² включают С_1-6 алкил, галоген-С_1-6 алкил, С_1-6 алкокси-С_1-6 алкил, галоген-С_1-6 алкокси-С_1-6 алкил, 3-7-членную насыщенную кольцевую группу, фенил и 5- или 6-членный гетероарил. В соответствии с другим вариантом осуществления его примеры включают С_1-6 алкил, 3-7-членную насыщенную кольцевую группу, фенил и 5- или 6-членный гетероарил. В соответствии с еще одним вариантом осуществления его примеры включают С_1-6 алкил и 3-7-членную насыщенную кольцевую группу.

Фенил и 5- или 6-членный гетероарил в качестве R¹² могут быть замещенными 1-3 одинаковыми или разными заместителями, выбранными из группы G^Ar.

Помимо варианта осуществления, в котором используется группа G^Ar, описанная выше, существует также другой вариант осуществления, в котором группа G^Ar представляет собой группу G^Ar1.

[0053]

Примеры R² включают -Н, С_1-6 алкил, галоген-С_1-6 алкил, гидрокси-С_1-6 алкил, С_1-6 алкокси-С_1-6 алкил и 3-7-членную насыщенную кольцевую группу. В соответствии с другим вариантом осуществления его примеры включают -Н, С_1-6 алкил и 3-7-членную насыщенную кольцевую группу. В соответствии с еще одним вариантом осуществления его примеры включают -Н, C_1-3 алкил и циклопропил. В соответствии с еще одним вариантом осуществления его примеры включают -Н и метил. В соответствии с еще одним вариантом осуществления его примеры включают -Н.

[0054]

Примеры R³ включают -Н, C_1-6 алкил, галоген-С_1-6 алкил, гидрокси-С_1-6 алкил, C_1-6 алкокси-С_1-6 алкил и 3-7-членную насыщенную кольцевую группу. В соответствии с другим вариантом осуществления его примеры включают -Н, C_1-6 алкил и 3-7-членную насыщенную кольцевую группу. В соответствии с еще одним вариантом осуществления его примеры включают -Н, C_1-3 алкил и циклопропил. В соответствии с еще одним вариантом осуществления его примеры включают -Н и метил. В соответствии с еще одним вариантом осуществления его примеры включают -Н.

[0055]

Примеры Ar включают 6-10-членный арил и 5-10-членный гетероарил. В соответствии с другим вариантом осуществления его примеры включают фенил 5- или 6-членный гетероарил. В соответствии с еще одним вариантом осуществления его примеры включают 5- или 6-членный гетероарил.

Примеры 6-10-членного арила в качестве Ar включают фенил, нафтил и инданил. В соответствии с еще одним вариантом осуществления его примеры включают фенил.

[0056]

Примеры 5-10-членного гетероарила Ar включают тиенил, фуранил, тиазолил, изотиазолил, оксазолил, изоксазолил, оксадиазолил, пирролил, пиразолил, имидазолил, пиридил, пиримидинил, пиразинил, пиридазинил, пиридонил, пиримидинонил, индолил, изоиндолил, индазолил, хинолил, изохинолил, бензимидазолил, бензотриазолил, бензотиенил, бензофуранил, бензотиазолил, фталазинил, хиноксалинил и пирролопиридил. В соответствии с другим вариантом осуществления его примеры включают тиенил, фуранил, тиазолил, изотиазолил, оксазолил, изоксазолил, оксадиазолил, пирролил, пиразолил, имидазолил, пиридил, пиримидинил, пиразинил, пиридазинил, пиридон-ил и пиримидинон-ил. В соответствии с еще одним вариантом осуществления его примеры включают тиенил, тиазолил, изотиазолил, пирролил, пиразолил, имидазолил, пиридил, пиримидинил и пиразинил. В соответствии с еще одним вариантом осуществления его примеры включают тиенил, тиазолил, изотиазолил, пирролил, имидазолил, пиридил и пиримидинил. В соответствии с еще одним вариантом осуществления его примеры включают тиазолил, изотиазолил, пиридил и пиримидинил. В соответствии с еще одним вариантом осуществления его примеры включают тиазолил и пиримидинил. В соответствии с еще одним вариантом осуществления его примеры включают пиримидинил.

[0057]

Ar может быть замещенным 1-3 одинаковыми или разными заместителями, выбранными из группы G².

Примеры группы G² включают группу заместителей, состоящую из -F, -Cl, гидроксильной группы, цианогруппы, C_1-6 алкила, галоген-C_1-6 алкила, гидрокси-С_1-6 алкила, R^Ar1-O-C_1-3 алкила, R^Ar1-NR¹³-C_1-3 алкила, -NR¹³C(О)R¹⁴, -С(О)NR¹³R¹⁴, -C(O)NH₂, -NR¹³S(O₂)R¹⁴, S(O₂)NR¹³R¹⁴, -NH₂, -SO₂)NH₂, -NR¹³R¹⁴ и -NHC(О)NHR¹⁵. В соответствии с другим вариантом осуществления ее примеры включают группу G²¹ состоящую из C_1-6 алкила, галоген-С_1-6 алкила, гидрокси-С_1-6 алкила и R^Ar1-O-C_1-3 алкила. В соответствии с еще одним вариантом осуществления ее примеры включают группу G²², состоящую из C_1-6 алкила, гидрокси-С_1-6 алкила и R^Ar1-O-C_1-3 алкила. В соответствии с еще одним вариантом осуществления ее примеры включают группу G²², состоящую из С_1-6 алкила, гидрокси-С_1-6 алкила и R^Ar1-O-C_1-3 алкила. В соответствии с еще одним вариантом осуществления ее примеры включают R^Ar1-O-C_1-3 алкил. В соответствии с еще одним вариантом осуществления ее примеры включают R^Ar1-O-метил. В соответствии с еще одним вариантом осуществления ее примеры включают метил.

[0058]

Примеры R^Ar1 включают -Н, С_1-6 алкил, галоген-С_1-6 алкил и 3-7-членную насыщенную кольцевую группу. В соответствии с другим вариантом осуществления его примеры включают С_1-6 алкил и 3-7 членную насыщенную кольцевую группу. В соответствии с еще одним вариантом осуществления его примеры включают С_1-6 алкил. В соответствии с еще одним вариантом осуществления его примеры включают нормальный пропил. В соответствии с еще одним вариантом осуществления его примеры включают циклобутил и циклопентил. В соответствии с еще одним вариантом осуществления его примеры включают циклопентил. В соответствии с еще одним вариантом осуществления его примеры включают 3-7-членную насыщенную кольцевую группу. Примеры 3-7-членной насыщенной кольцевой группы включают С_3-7 циклоалкил и 3-7-членную насыщенную гетероциклическую кольцевую группу. Примеры 3-7-членной насыщенной гетероциклической кольцевой группы включают оксетанил, азетидинил, тетрагидрофуранил, пирролидинил, тетрагидротиенил, тетрагидропиранил, пиперидинил, тетрагидротиопиранил, морфолинил и пиперазинил. В соответствии с другим вариантом осуществления его примеры включают тетрагидрофуранил.

[0059]

R^Ar1 может быть замещенным 1-3 одинаковыми или разными заместителями, выбранными из группы G³.

Примеры группы G³ включают группу заместителей, состоящую из -F, гидроксильной группы, C_1-3 алкил, галоген-С_1-3 алкил, оксо, C_1-3 алкокси, галоген-С_1-3 алкокси и 3-7-членной насыщенной кольцевой группы. В соответствии с другим вариантом осуществления ее примеры включают группу G³¹, состоящую из -F, гидроксильной группы и 3-7-членной насыщенной кольцевой группы. В соответствии с еще одним вариантом осуществления ее примеры включают группу G³², состоящую из -F, гидроксильной группы, C_1-3 алкила, галоген-С_1-3 алкила, оксо, С_1-3 алкокси и 3-7-членной насыщенной кольцевой группы. В соответствии с еще одним вариантом осуществления ее примеры включают группу G³3, состоящую из -F, гидроксильной группы и С_3-7 циклоалкила. В соответствии с еще одним вариантом осуществления ее примеры включают группу G³4, состоящую из -F, гидроксильной группы и циклопропила.

[0060]

Примеры R¹³ включают -Н, С_1-3 алкил, галоген-С_1-3 алкил, С_1-3 алкокси-С_1-3 алкил, галоген-С_1-3 алкокси-С_1-3 алкил и 3-7-членную насыщенную кольцевую группу. В соответствии с другим вариантом осуществления его примеры включают -Н, С_1-3 алкил, галоген-С_1-3 алкил, С_1-3 алкокси-С_1-3 алкил и галоген-С_1-3 алкил. В соответствии с еще одним вариантом осуществления его примеры включают 3-7-членную насыщенную кольцевую группу.

[0061]

Примеры R¹⁴ включают С_1-3 алкил, галоген-С_1-3 алкил, C_1-3 алкокси-С_1-3 алкил, галоген-С_1-3 алкокси-С_1-3 алкил и 3-7-членную насьщенную кольцевую группу. В соответствии с другим вариантом осуществления его примеры включают C_1-3 алкил, галоген-С_1-3 алкил, С_1-3 алкокси-С_1-3 алкил и галоген-С_1-3 алкил. В соответствии с еще одним вариантом осуществления его примеры включают 3-7-членную насьщенную кольцевую группу.

Примеры 3-7-членной насыщенной кольцевой группы в качестве R¹³ и R¹⁴ включают С_3-7 циклоалкил и 3-7-членную насыщенную гетероциклическую кольцевую группу. В соответствии с другим вариантом осуществления ее примеры включают циклопропил, циклобутил и оксетанил.

[0062]

Примеры R¹⁵ включают -Н, фенил и 5- или 6-членный гетероарил. Примеры 5- или 6-членного гетероарила включают тиенил, фуранил, тиазолил, изотиазолил, оксазолил, изоксазолил, оксадиазолил, пирролил, пиразолил, имидазолил, пиридил, пиримидинил, пиразинил и пиридазинил. В соответствии с другим вариантом осуществления примеры R¹³ включают фенил и трифторметилфенил.

[0063]

R¹⁵ может быть замещенным 1-3 одинаковыми или разными заместителями, выбранными из группы G⁴.

Примеры группы G⁴ включают группу заместителей, состоящую из галогена, цианогруппы, С_1-3 алкила и галоген-С_1-3 алкила. В соответствии с другим вариантом осуществления ее примеры включают группу G⁴¹, состоящую из -F, цианогруппы, метила и трифторметила.

[0064]

Другим вариантом осуществления Ar является, например, группа, представленная формулой (3-1).

[Формула 20]

[0065]

Примеры R^Ar2 включают -Н, -F, -Cl, гидроксильную группу, цианогруппу, С_1-6 алкил, галоген-С_1-6 алкил, гидрокси-С_1-6 алкил, R^Ar1-O-C_1-3 алкил и -NR¹³R¹⁴ (R^Ar1, R¹³ и R¹⁴ принимают значения, описанные выше). В соответствии с другим вариантом осуществления его примеры включают R^Ar1-O-C_1-3 алкил. В соответствии с еще одним вариантом осуществления его примеры включают -CH₂-O-R^Ar1 (R^Ar1 принимает значения, описанные выше). В соответствии с еще одним вариантом осуществления его примеры включают метил и гидроксиметил. В соответствии с еще одним вариантом осуществления его примеры включают метил. В соответствии с еще одним вариантом осуществления его примеры включают гидроксиметил.

Конкретные примеры R^Ar1-O-C_1-3 алкила включают группы, представленные следующими формулами:

[Формула 21]

[0066]

В соответствии с другим вариантом осуществления конкретные примеры R^Ar1-O-C_1-3 алкила включают группы, представленные следующими формулами.

[Формула 22]

[0067]

Примеры X¹ включают N и СН. В соответствии с другим вариантом осуществления его примеры включают N. В соответствии с еще одним вариантом осуществления его примеры включают СН.

Примеры X² включают NH и О. В соответствии с другим вариантом осуществления его примеры включают NH.

Примеры X³ включают группы, представленные формулами с (1-1) по (1-3) (а и b показывают направление присоединения).

[Формула 23]

[0068]

В соответствии с другим вариантом осуществления его примеры включают группу, представленную общей формулой (1-1). В соответствии с еще одним вариантом осуществления его примеры включают группу, представленную следующей общей формулой (1-1-1).

[Формула 24]

[0069]

Примеры R²¹ и R²² независимо включают -Н, C_1-3 алкил и галоген-С_1-3 алкил. В соответствии с другим вариантом осуществления их примеры включают -Н и метил. В соответствии с еще одним вариантом осуществления их примеры включают -Н.

[0070]

Примеры X⁴ включают группу, представленную приведенной далее формулой (2-1) (b и с представляют направление присоединения).

[Формула 25]

[0071]

Примеры n включают целые числа от 1 до 3. В соответствии с другим вариантом осуществления его примеры включают целое число 1.

Примеры Y включают NR⁵¹ и О. В соответствии с другим вариантом осуществления его примеры включают NR⁵¹. В соответствии с еще одним вариантом осуществления его примеры включают О.

[0072]

Примеры R³¹ и R³² независимо включают -Н, С_1-3 алкил и галоген-С_1-3 алкил. В соответствии с другим вариантом осуществления их примеры включают -Н и метил. В соответствии с еще одним вариантом осуществления примеры включают -Н.

[0073]

R³¹ и R³² также могут объединяться с образованием 3-6-членного насыщенного кольца. Примеры 3-6-членного насыщенного кольца включают циклопропил, циклобутил, оксетанил, циклопентил, циклогексил, тетрагидрофуранил и тетрагидропиранил. В соответствии с другим вариантом осуществления их примеры включают циклопропил, циклобутил и оксетанил. В соответствии с еще одним вариантом осуществления их примеры включают циклопропил и циклобутил.

[0074]

Примеры R⁴¹ и R⁴² независимо включают -Н, -F, гидроксильную группу, C_1-3 алкил, галоген-С_1-3 алкил, C_1-3 алкокси и галоген-С_1-3 алкокси. В соответствии с другим вариантом осуществления их примеры включают -Н, -F, C_1-3 алкил, галоген-С_1-3 алкил, C_1-3 алкокси и галоген-С_1-3 алкокси. В соответствии с еще одним вариантом осуществления их примеры включают -Н, -F и C_1-3 алкил. В соответствии с еще одним вариантом осуществления их примеры включают -Н, -F и метил. В соответствии с еще одним вариантом осуществления их примеры включают -Н и -F.

[0075]

R⁴¹ и R⁴² также могут объединяться с образованием 3-6-членного насыщенного кольца. Примеры 3-6-членного насыщенного кольца включают циклопропил, циклобутил, оксетанил, циклопентил, циклогексил, тетрагидрофуранил и тетрагидропиранил. В соответствии с другим вариантом осуществления его примеры включают циклопропил, циклобутил и оксетанил. В соответствии с еще одним вариантом осуществления его примеры включают циклопропил и циклобутил. В соответствии с еще одним вариантом осуществления его примеры включают циклопропил.

[0076]

Примеры R⁵¹ включают -Н, С_1-3 алкил и галоген-С_1-3 алкил. В соответствии с другим вариантом осуществления его примеры включают -Н и метил. В соответствии с еще одним вариантом осуществления его примеры включают -Н.

[0077]

R⁵¹ и R³¹ также могут объединяться с образованием 4-6-членного насыщенного кольца. Примеры 4-6-членного насыщенного кольца включают азетидинил, пирролидинил и пиперазинил. В соответствии с еще одним вариантом осуществления его примеры включают пирролидинил.

[0078]

X⁴ может быть замещенным 1-3 одинаковыми или разными заместителями, выбранными из группы G⁵.

Примеры группы G⁵ включают группу заместителей, состоящую из -F, гидроксильной группы, C_1-3 алкила, галоген-С_1-3 алкила, C_1-3 алкокси и галоген-С_1-3 алкокси. В соответствии с другим вариантом осуществления примеры группы G⁵¹ включают группу заместителей, состоящую из -F, гидроксильной группы и C_1-3 алкила. В соответствии с еще одним вариантом осуществления примеры группы G⁵² включают группу заместителей, состоящую из -F и гидроксильной группы.

[0079]

Конкретные примеры X⁴ включают, например, группы, представленные следующими формулами:

[Формула 26]

[0080]

В соответствии с другим вариантом осуществления конкретные примеры X⁴ включают группы, представленные следующими формулами:

[Формула 27]

[0081]

Конкретные примеры соединений, входящих в область настоящего изобретения, включают предствленные далее соединения. Однако область настоящего изобретения не ограничивается ими.

[0082]

В настоящем описании под «соединениями, представленными формулой (1)» обычно понимаются соединения, представленные формулой (1), в свободной форме. Примеры их солей включают следующие соли.

Тип соли соединений, представленных формулой (1), конкретно не ограничен, и она может представлять собой кислотно-аддитивную соль или основно-аддитивную соль, и может быть в форме внутримолекулярного противоиона. В частности, когда соль используется в качестве активного ингредиента лекарственного средства, она предпочтительно представляет собой фармацевтически приемлемую соль. Когда в настоящем описании соль представлена для применения в качестве лекарственного средства, под солью соединений, представленных формулой (1), обычно понимается фармацевтически приемлемая соль. Кислотно-аддитивные соли включают, например, кислотно-аддитивные соли с неорганическими кислотами, такими как соляная кислота, бромистоводородная кислота, иодистоводородная кислота, серная кислота, азотная кислота и фосфорная кислота, и кислотно-аддитивные соли с органическими кислотами, такими как муравьиная кислота, уксусная кислота, пропионовая кислота, щавелевая кислота, малоновая кислота, янтарная кислота, метансульфоновая кислота, этансульфоновая кислота, бензолсульфоновая кислота, лимонная кислота, яблочная кислота, винная кислота, дибензоилвинная кислота, миндальная кислота, малеиновая кислота, фумаровая кислота, аспаргиновая кислота и глутаминовая кислота. В качестве примеров основно-аддитивных солей могут быть указаны основно-аддитивные соли неорганических оснований, таких как гидроксид натрия, калия, магния, кальция и алюминия, основно-аддитивные соли с органическим основанием, таким как метиламин, 2-аминоэтанол, аргинин, лизин, орнитин и т.п. Однако тип соли не ограничивается указанными типами, и, разумеется, он может подходящим образом подбираться специалистом в данной области техники.

[0083]

Соединения по настоящему изобретению могут быть представлены в форме гидрата. Соединения по настоящему изобретению также могут быть представлены в безводной форме.

Соединения по настоящему изобретению могут быть представлены в форме сольвата. Соединения по настоящему изобретению также могут быть представлены в несольватированной форме.

Соединения по настоящему изобретению могут быть представлены в кристаллической форме. Соединения по настоящему изобретению также могут быть представлены в аморфной форме.

Соединения по настоящему изобретению могут быть помечены любым из различных радиоактивных или нерадиоактивных изотопов.

Точнее, соединения по настоящему изобретению включают ангидриды и несольваты «соединений, представленных формулой (1)», их гидраты и/или сольваты и кристаллы.

Соединения по настоящему изобретению также включают ангидриды и несольваты «солей соединений, представленных формулой (1)», гидраты и/или сольваты солей и их кристаллы.

[0084]

Соединения по настоящему изобретению также могут представлять собой фармацевтически приемлемые пролекарства «соединений, представленных формулой (1)». Фармацестически приемлемое пролекарство представляет собой соединение, содержащее группу, которая может подвергаться превращению в аминогруппу, гидроксильную группу, карбоксильную группу или т.п. в результате сольволиза или в физиологических условиях. Например, в качестве группы, которая образует пролекарство для гидроксильной группы или аминогруппы, может быть указана, например, ацильная группа и алкоксикарбонильная группа. В качестве группы, которая образует пролекарство для карбоксильной группы, может быть указана, например, метильная группа, этильная группа, н-пропильная группа, изопропильная группа, н-бутильная группа, изобутильная группа, s-бутильная группа, трет-бутильная группа, аминогруппа, метиламиногруппа, этиламиногруппа, диметиламиногруппа и диэтиламиногруппа.

[0085]

Такое пролекарство обычно может быть получено, например, соответствующим введением группы, которая образует пролекарство, в любое соединение по настоящему изобретению на одну или несколько групп, произвольно выбранных из гидроксильной группы и аминогруппы, с использованием реагента, образующего пролекарство, такого как соответствующий галогенид, с последующим, при необходимости, подходящим выделением и очисткой соединения удобным способом. Группа, которая образует пролекарство, также может надлежащим образом вводиться в соединения по настоящему изобретению по карбоксильной группе с применением образующего пролекарство реагента, такого как соответствующий спирт или амин.

[0086]

<Общие способы получения>

Соединения, представленные формулой (1), могут быть получены в соответствии с известными способами, такими как описанные ниже способы, аналогичными способами или способами, описанными в примерах. Соединения, используемые в приведенных далее способах получения в качестве исходных материалов, доступны из коммерческих источниках или могут быть получены известными способами, описанными, например, в "Compendium of Organic Synthesis Methods, Vols. I to XII, Wiley InterScience".

[0087]

Некоторые промежуточные соединения могут использоваться после введения защитных групп или после удаления защиты в соответствии с известными методами, описанными, например, в Peter G.M., Wuts, "Greene's Protective Groups in Organic Chemistry, John Wiley & Sons, 2014".

[0088]

Смесь стереоизомеров может разделяться известным методом, например методами, описанными в "E.L. Eloel, S.H. Wilen, Stereochemistry of Organic Compounds, John Wiley & Sons, 1994", аналогичными методами и методами, описанными в примерах. Многокомпонентные смеси могут разделяться методами, которые описаны выше.

Реакции синтеза соединений по настоящему изобретению проводятся в подходящих растворителях, выбранных в соответствии с известными методами. Подходящими являются растворители, по существу не взаимодействующие с исходными материалами, промежуточными соединениями или продуктами при температурах проведения реакций (например, при температурах в интервале от температуры плавления до температуры кипения растворителя). Реакции могут проводиться в растворителе одного вида или в смеси растворителей. Используется растворитель, подходящий для каждой реакции.

[0090]

Ход реакций можно отслеживать с помощью подходящего известного метода. Например, образование продукта можно контролировать методом спектроскопии с использованием, например, аппарата ядерного магнитного резонанса (ЯМР), использующего ядра ¹Н, ¹³С или т.п., инфракрасного спектрофотометра (ИК), масс-спектрометра (МС), высокоскоростной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ), тонкослойной хроматографии (ТСХ) или т.п.

[0091]

Соединения по настоящему изобретению могут быть получены любыми способами, отличными от способов, описанных в настоящем документе, при надлежащем использовании методов, описанных в настоящем документе, и общих технических знаний в данной области техники. Уравнения реакций и примеры приведены только в качестве типичных примеров и не ограничивают область настоящего изобретения.

[0092]

Аббревиатуры, используемые в схемах, описанных ниже, представляют собой аббревиатуры, обычно используемые в данной области техники. Значения аббревиатур для химических терминов, используемых в настоящем описании, включая примеры, определены следующим образом: ДМФА - N,N-диметилформамид; ДМСО - диметилсульфоксид; ТГФ - тетрагидрофуран; DME - 1,2-диметоксиэтан; ТФУК - трифторуксусная кислота; час.- часы; КТ - комнатная температура; RT - время удерживания; LG - удаляемая группа.

[0093]

Соединения по настоящему изобретению, представленные формулой (1), могут быть получены в соответствии, например, с приведенными далее схемами реакций. В приведенных далее схемах «СТАДИЯ» означает стадию способа, например «СТАДИЯ 1» означает стадию 1.

[0094]

Макроциклические соединения, представленные формулой (1), состоят из четырех частей, т.е. азотсодержащего бициклического гетероциклического кольцевого материнского ядра, замещенного пиперидина, линкера, связывающего фрагменты а и с, и ароматического кольца, непосредственно присоединенного к азотсодержащему бициклическому гетероциклическому кольцевому материнскому ядру.

[0095]

На схеме 1 представлен первый способ синтеза макроциклических соединений. Данный способ включает первое связывание замещенного пиперидина и линкера, связывающего фрагменты а и с, взаимодействие полученного продукта с азотсодержащим бициклическим гетероциклическим материнским ядром с образованием связи X², последующее образование вязи X³ с получением макроцикла и, наконец, введение ароматического кольца, непосредственно связывающегося с азот-содержащим бициклическим гетероциклически кольцевым материнским ядром.

[Формула 28]

СХЕМА. 1

[0096]

Соединения, представленные формулой (1), могут быть получены, например, способом, показанным на реакционной схеме 1 (в формулах соединений М представляет собой, например, заместитель, который может взаимодействовать через различные типы связывания с использованием ZnI, MgBr, бороновой кислоты, сложного эфира бороновой кислоты или т.п., LG¹ и LG² представляют собой удаляемую группу, такую как -Cl, -В -Br, -I, -OTf, -OMs, -OMs и -Ots, Q¹ и Q² представляют собой, например, гидроксильную группу, удаляемую группу, такую как -Cl, -Br, -I, -OTf, -OMs и -OTs, или заместитель, способный образовывать связь С-O или С-С, такой как алкенильная группа и боран-производное, и Q³ представляет собой заместитель, способный образовывать связь С-O или C-N взаимодействием с группой LG², такой как гидроксильная группа и аминогруппа). Соединения, представленные формулами (2) (6), являются доступными из коммерческих источников или могут быть получены в соответствии с известными способами, например способами, показанными ниже, или аналогичными способами.

[0097]

СТАДИЯ 1

Соединения, представленные формулой (1), могут быть получены реакцией сочетания соединения, представленного формулой (2), в присутствии металлического катализатора. Точнее, соединения могут быть получены, например, реакцией сочетания Судзуки-Мияуры (Suzuki-Miyaura) соединения, представленного формулой (2), и реагента, представленного формулой (6). В качестве катализатора реакции может использоваться, например, Pd(dppf)Cl₂, PdAmphos, Pd(PPh₃)₄ или т.п. В качестве основания может использоваться карбонат цезия, фторид цезия, карбонат натрия или т.п. В качестве реакционного растворителя может использоваться ТГФ, 1,4-диоксан, ДМФА, ацетонитрил или т.п. Температура реакции обычно находится в интервале от комнатной температуры до 180°С.

[0098]

В качестве реагента, представленного формулой (6), может использоваться коммерчески доступная бороновая кислота, сложные пинаколовые эфиры и сложные эфиры катехина. Он также может быть получен из доступных коммерческих источников арилбромида, арилхлорида и арилйодида реакцией сочетания, катализируемой металлом, или реакцией обмена галоген - металл. Точнее, он может быть получен, например, реакцией сочетания Сузуки-Мияуры с бис(пинаколат)дибором или т.п. В качестве катализатора реакции может использоваться, например, Pd(dppf)Cl₂ или т.п. В качестве основания может использоваться ацетат калия или т.п. В качестве реакционного растворителя может использоваться 1,4-диоксан или т.п. Температура реакции обычно может находиться в интервале от 40 до 150°С. Помимо двух описанных выше способов, реагент, представленный формулой (6), может быть получен реакцией борирования с активацией С-Н связи в присутствии иридиевого катализатора с использованием электронодонорного бидентантного лиганда и источника бора, такого как бис(пинаколато)дибор, без добавления арилгалогенидов.

[0099]

СТАДИЯ 2

Соединение, представленное формулой (2), может быть получено из соединения, представленного формулой (3), реакцией образования С-O связи, такой как алкилирование и реакция Митсунобу, или реакцией образования С-С связи, такой как реакция сочетания, катализируемая металлом. В реакции Митсунобу группы ОН образуются на фрагментах Q¹ и Q² в формуле (3), и взаимодействие осуществляют добавлением диэтилазодикарбоксилата, диизопропилазодикарбоксилата или ди-трет-бутилазодикарбоксилата в присутствии трифенилфосфина. В качестве реакционного растворителя может использоваться ТГФ, толуол или т.п. Чтобы циклизации протекала предпочтительнее как внутримолекулярная реакция, а не как межмолекулярная реакция, она проводится в условиях высокого разбавления от 0,1 до 0,001 моль/л. Температура реакции обычно может находиться в интервале от комнатной температуры до 80°С. Реакция алкилирования может осуществляться через образование гидроксильной группы на фрагменте Q¹ и удаление группы, такой как -Cl, -Br, -I, -OTf, -OMs или -OTs, на фрагменте Q² при проведении реакции в условиях высокого разбавления в присутствии основания, такого как гидрид натрия, карбонат калия, карбонат цезия или диизопропилэтиламин. В качестве реакционного растворителя может использоваться ТГФ, ДМФА, ацетонитрил или т.п. Температура реакции обычно может находиться в интервале от комнатной температуры до 100°С.

[0100]

СТАДИЯ 3

Соединение, представленное формулой (3), синтезируют реакцией алкилирования или реакцией сочетания, катализируемой металлом, замещенного пиперидина, представленного формулой (4), и соединения, представленного формулой (5). В частности, реакция алкилирования может проводиться в присутствии основания, такого как гидрид натрия, карбонат калия, карбонат цезия или диизопропилэтиламин, с использование ТГФ, ДМФА, ацетонитрила, ДМФА, ацетонитрила или т.п. в качестве реакционного растворителя при температуре в интервале от комнатной температуры до 100°С для образования С-О или C-N связи.

В частности, в реакции сочетания, катализируемой металлом, добавляют смесь метансульфоната [(2-ди-трет-бутилфосфино-3,6-диметокси-2',4',6'-триизопропил-1,1'-бифенил)-2-(2'-амино-1,1'-бифенил)] палладия (II) или трис (дибензилиденацетон) дипалладия (0) в качестве катализатора и дициклогексилфосфино-2',4', 6'-триизопропил-1,1'-бифенил в качестве лиганда, и в качестве основания может использоваться фосфазеновое основание Р₂-Et или феноксид натрия. В качестве реакционного растворителя может использоваться ТГФ, 1,4-диоксан, ДМФА, ацетонитрил или т.п. Температура реакции обычно может находиться в интервале от комнатной температуры до 180°С. Кроме того, соединение, представленное формулой (3), также может быть синтезировано с комбинацией реагентов, обычно используемых в реакции кросс-сочетания Бухвальда-Хартвига (Buchwald-Hartwig), с образованием таким образом С-O или C-N связи.

[0101]

[Формула 29]

СХЕМА 2

[0102]

Соединение, представленное формулой (4), может быть получено, например, способом, показанным на реакционной схеме 2 (в формулах соединений Q² представляет собой, например, гидроксильную группу, удаляемую группу, такую как -Cl, -Br, -I, - OTf, -OMs и - OTs, или заместитель, способный образовывать С-O связь или С-С связь, такой как алкенильная группа и производное боргидрида, и Q³ представляет собой заместитель, способный образовывать С-O связь или C-N связь взаимодействием с группой LG², такой как гидроксильная группа и аминогруппа). Соединения, представленные формулами (6) и (7), доступны из комерческих источников или могут быть получены известными способами, например представленными ниже, или аналогичными.

[0103]

СТАДИЯ 4

Соединение, представленное формулой (4), синтезируют восстановлением кетонового фрагмента соединения, представленного формулой (6). В качестве восстановителя может использоваться борогидрид натрия, L-Selectolide или т.п., которые могут восстанавливать только кетоновый фрагмент в присутствии сложного эфира и амида. Реакция проводится с использованием метанола, ТГФ или т.п.в качестве растворителя и обычно протекает при температуре в интервале от -78°С до комнатной температуры. Когда группа Q³ представляет собой аминогруппу, гидроксильная группа, образованная в результате восстановления, подвергается превращению в удаляемую группу, такую как -Cl, -Br, -I, -OTf, -OMs и -OTs, затем подвергается превращению в азидогруппу и, наконец, в NH₂. Например, вторичная гидроксильная группа может подвергаться превращению в удаляемую группу с помощью метансульфонилхлорида, п-толуолсульфонилхлорида или т.п. в присутствии основания, такого как триэтиламин, в дихлорметане в качестве растворителя. Реакция обычно протекает при температуре в интервале от 0 до 40°С. Взаимодействием полученного продукта с азидом натрия в ДМФА может быть получено Q³-фрагмент-азидированное соединение. Азидогруппа может подвергаться восстановлению до первичной аминогруппы гидрированием с использованием палладия на угле или гидроксида палладия или реакции Штаудингера (Staudinger) с использованием трифенилфосфина.

[0104]

СТАДИЯ 5

Соединение, представленное формулой (6), синтезируют амидированием, этерификацией или ацилированием соединения, представленного формулой (7). В частности, С_2-5 аминоспирт с защищенной гидроксильной группой или С_2-5 диол с одной защищенной гидроксильной группой подвергается связыванию по амидной или сложноэфирный связи с производным 4-оксопиперидин-2-карбоновой кислоты, представленным формулой (7). В качестве конденсирующего агента для амидирования или этерификации может использоваться 1-пропанофосфорный ангидрид, 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимид, HATU или т.п. В качестве нуклеофила для амидирования может использоваться HOBt, HOAt или т.п. В качестве основания может использоваться диизопропилэтиламин или т.п. В качестве реакционного растворителя может использоваться, например, ДМФА, дихлорметан, ТГФ или т.п. Температура реакции обычно может находиться в интервале от 0 до 150°С. В реакции ацилирования фрагмент карбоновой кислоты производного 4-оксопиперидин-2-карбоновой кислоты может активироваться с помощью оксалилдихлорида, изобутилхлорформиата или т.п. и затем подвергаться взаимодействию с С_2-5 аминоспиртом с защищенной гидроксильной группой или с С_2-5 диолом с одной защищенной гидроксильной группой с образованием амидной или сложноэфирной связи.

[0105]

На схеме 3 представлен второй способ синтеза макроциклических соединений, который описан ниже. Сначала азотсодержащее бициклическое гетероциклическое кольцевое материнское ядро подвергается взаимодействию с замещенным пиперидином с образованием X² связи, полученное соединение подвергается связыванию с линкером, соединяющим фрагменты а и с. Далее, как и на схеме 1, конечный продукт получают через образование макроциклического кольца и введение ароматического кольца в азот-содержащее бициклическое гетероциклическое кольцевое материнское ядро.

[0106]

Катализируемая металлом реакция сочетания соединения, представленного формулой (2), и реагента, представленного формулой (6) (СТАДИЯ 1) и реакция образования макроцикла (СТАДИЯ 2) с использованием соединения, представленного формулой (3), в качестве исходного материала являются общими для способов схем 1 и 3.

[Формула 30]

схема 3

[0107]

Соединения, представленные формулой (1), могут быть получены, например, способом, показанным на реакционной схеме 3 (в формулах соединений М представляет собой, например, заместитель, который может взаимодействовать реакции сочетания различных типов с использованием ZnI, MgBr, бороновой кислоты, сложного эфира бороновой кислоты или т.п., LG¹ и LG² представляют собой удаляемые группы, такие как -Cl, -Br, -I, -OTf, -OMs и -Ots, Q¹ и Q² представляют собой, например, гидроксильную группу, удаляемую группу, такую как -Cl, -Br, -I, -OTf, -OMs и -OTs, или заместитель, способный образовывать С-O или С-С связь, такой как алкенильная группа и производное боргидрида, и Q³ представляет собой заместитель, способный образовывать С-O или C-N связь взаимодействием LG² группы, такой как гидроксильная группа и аминогруппа). Соединения, представленные формулами (2), (3), (5), (6), (8) и (9), доступны из коммерческих источников или могут быть получены в соответствии с известными способами, например показанными ниже, или аналогично.

[0108]

СТАДИЯ 6

Соединение, представленное формулой (3), может синтезироваться связыванием амидным или сложно-эфирным связыванием С_2-5 аминоспирта с защищенной гидроксильной группой или С_2-5 диола с одной защищенной гидроксильной группой с карбоновой кислотой, представленной формулой (8). Используемая реакция представляет собой реакцию амидирования, реакцию этерификации, реакцию ацилирования или т.п. В качестве конденсирующего агента для амидирования или этерификации может использоваться 1-пропанфосфоновый ангидрид, 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимид, HATU или т.п. В качестве нуклеофила для амидирования может использоваться HOBt, HOAt или т.п. В качестве основания может использоваться диизопропилэтиламин или т.п. В качестве реакционного растворителя может использоваться, например, ДМФА, дихлорметан, ТГФ или т.п. Температура реакции обычно может находиться в интервале от 0 до 150°С. В реакции ацилирования фрагмент карбоновой кислоты может активироваться с использованием оксалилдихлорида, изобутилхлорформиата или т.п. и подвергаться взаимодействию с С_2-5 аминоспиртом с защищенной гидроксильной группой или с С_2-5 диолом с одной защищенной гидроксильной группой с образованием амидной или сложноэфирной связи.

[0109]

СТАДИЯ 7

Соединение, представленное формулой (8), синтезируют алкилированием или реакцией сочетания, катализируемой металлом, замещенного пиперидина, представленного формулой (9), с соединением, представленным формулой (5), и последующим сольволизом полученного сложного эфира. Условия реакции, используемые для реакций алкилирования и сочетания, катализируемого металлом, аналогичны условиям, используемым на стадии 3 схемы 1. Для гидролиза сложного эфира используется основание, такое как гидроксид натрия, гидроксид калия и гидроксид лития, и реакция протекает при температуре от 40 до 80°С в растворителе, таком как метанол или этанол. Рекомендовано проводить реакции при 40°С для предотвращения изомеризации по хиральной точке в положении 2 пиперидина. Соединение, представленное формулой (9), может синтезироваться способом, описанным на стадии 5 схем 1 и 2. То есть его синтезируют из производного 4-оксопиперидин-2-карбоновой кислоты, представленного формулой (7), используемого в качестве исходного материала, метил-этерификацией с триметилсилилдиазометаном или этерификацией с использованием в качестве конденсирующего агента 1-пропанфосфонового ангидрида, 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимидина, HATU или т.п.

[0110]

На схеме 4 представлен третий способ синтеза макроциклических соединений. В этом способе сначала присоединяется линкер, связывающий замещенный пиперидин и фрагменты а и с, и затем полученный продукт подвергается взаимодействию с азот-содержащим бициклическим гетероциклическим материнским ядром с образованием X³ связи. После этого образуется X² связь с получением макроцикла, и, наконец, вводится ароматическое кольцо, которое должно непосредственно присоединяться к азотсодержащему бициклическому гетероциклическому материнскому ядру.

[Формула 31]

СХЕМА4

[0111]

Соединения, представленные формулой (1), могут быть получены, например, способом, показанным на реакционной схеме 4 (в формулах соединений М представляет собой заместитель, который может взаимодействовать через реакции сочетания различных типов с использованием ZnI, MgBr, бороновой кислоты, сложного эфира бороновой кислоты или т.п., LG¹ и LG² представляют собой удаляемую группу, такую как -Cl, -Br, -I, -OTf, -OMs и -Ots, Q¹ и Q² представляют собой, например, гидроксильную группу, удаляемую группу, такую как -Cl, -Br, -I, -OTf, -OMs и -OTs, или или заместитель, способный образовывать С-O или С-С связь, такой как алкенильная группа или производное боргидрида, и Q³ представляет собой заместитель, способный образовывать С-O или C-N связь взаимодействием с LG² группой, такой как гидроксильная группа и аминогруппа). Соединения, представленные формулами (2), (4) (б) и (10), доступны из коммерческих источников или могут быть получены в соответствии с известными способами, например описанными ниже, или аналогично.

[0112]

СТАДИЯ 8

Соединение, представленное формулой (11), синтезируют, например, способом, аналогичным способу стадии 10 схемы 3, через внутримолекулярное алкилирование или реакцию сочетания, катализируемую металлом, соединения, представленного формулой (10). В этом случае при проведении реакции в условиях высокого разбавления, когда концентрация субстрата составляет, например, от 0,1 до 0,001 моль/л для обеспечения более предпочтительной внутримолекулярной реакции, а не межмолекулярной реакции, может синтезироваться соединение, представленное формулой (11).

[0113]

СТАДИЯ 9

Соединение, представленное формулой (14), синтезируют межмолекулярной реакцией Митсунобу или межмолекулярной реакцией алкилирования соединения, представленного формулой (4), и соединения, представленного формулой (5). Условия реакции аналогичны условиям стадии 2 схемы 1, но реакция может проводиться в условиях, при которых концентрация субстрата составляет, например, от 1,0 до 0,1 моль/л.

[0114]

Способы получения соединений по настоящему изобретению не ограничиваются способами, описанными в настоящем документе. Например, соединения по настоящему изобретению могут быть получены модификацией или преобразованием заместителей в соединениях, являющихся предшественниками соединений по настоящему изобретению, с использованием одной реакции или комбинации двух или более реакций, описанных в статьях, относящихся к области химии, и т.п.

[0115]

Примеры способа получения соединений по настоящему изобретению, которые содержат асимметричный атом углерода, включают способ получения, основанный на асимметричном восстановлении, способ применения коммерчески доступного исходного материала (или исходного материала, который может быть получен известным способом или аналогично), в котором фрагмент, соответствующий асимметричному атому углерода, уже является оптически активным, способ с оптическим разделением или способ получения оптически активного соединения с использованием фермента и т.п. Может также применяться способ, в котором соединение по настоящему изобретению или его предшественник выделяется в качестве оптически активного изомера обычным методом. Примеры такого метода включают, например, метод применения высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с использованием хиральной колонки или сверхкритической жидкостной хроматографии (supercritical fluid chromatography - SFC), классическую фракционную кристаллизацию для разделения оптически активных веществ, включающую образование соли с оптически активным реагентом, разделение фракционной кристаллизацией или т.п.и превращение соли в соединение в форме свободного основания, метод, включающий конденсацию с оптически активным реагентом с образованием диастереомера с последующим разделением, очисткой и разложением полученного диастереомера и т.п. Когда предшественник разделяют для получения оптически активного соединения, оптически активное соединение по настоящему изобретению после этого может быть получено описанными выше способами получения с оптически активным веществом.

[0116]

Когда соединение по настоящему изобретению содержит кислотную функциональную группу, такую как карбоксильная группа, фенольная гидроксильная группа или тетразольный цикл, соединение может подвергаться превращению в фармацевтически приемлемую соль (например, неорганические соли натрия и т.п., или органические соли триэтиламина и т.п.) известными методами. Например, когда должна быть получена неорганическая соль, предпочтительно растворить соединение по настоящему изобретению в воде, содержащей гидроксид, карбонат, бикарбонат или т.п., соответствующий желательной неорганической соли. Для взаимодействия может добавляться смешивающийся с водой неактивный органический растворитель, такой как метанол, этанол, ацетон и диоксан. Например, при применении гидроксида натрия, карбоната натрия или гидрокарбоната натрия может быть получен раствор натриевой соли.

[0117]

Когда соединение по настоящему изобретению содержит аминогруппу, другую основную функциональную группу или ароматическое кольцо, которая(ое) уже обладает основностью (например, пиридиновое кольцо и т.п.), соединение также может подвергаться превращению в фармацевтически приемлемую соль (например, соль с неорганической кислотой, такой как соляная кислота, или соль с органической кислотой, такой как уксусная кислота) известными методами. Например, когда должна быть получена соль с неорганической кислотой, предпочтительно растворять соединение по настоящему изобретению в водном растворе, содержащем желательную неорганическую кислоту. Для взаимодействия может добавляться смешивающийся с водой неактивный органический растворитель, такой как метанол, этанол, ацетон и диоксан. Например, при применении соляной кислоты может быть получен раствор гидрохлорида.

[0118]

Если необходима твердая соль, раствор может быть выпарен или к раствору может добавляться смешивающийся с водой органический растворитель, обладающий некоторой полярностью, такой как н-бутанол иди этилметилкетон, с получением твердой соли.

Различные соединения, раскрытые в настоящем изобретении, могут быть очищены известными методами, такими как различные методы хроматографии (колоночная хроматография, флэш-колоночная хроматография, тонкослойная хроматография, высокоэффективная жидкостная хроматография, сверхкритическая флюидная хроматография и тому подобное).

[0119]

Соединения по настоящему изобретению в соответствии с определенным вариантом осуществления обладают ингибиторной активностью в отношении IRAK-4 и могут использоваться в качестве ингибитора IRAK-4. То есть соединения по настоящему изобретению в соответствии с определенным вариантом осуществления могут использоваться в качестве лекарственного средства для профилактического и/или терапевтического лечения заболеваний, связанных с ингибированием IRAK-4. Точнее, заболевание, связанное с ингибированием IRAK-4, представляет собой заболевание, при котором ингибирование IRAK-4 является эффективным, и, точнее, заболевание, связанное с ингибированием IRAK-4, конкретно не ограничено при условии, что его можно предотвращать и/или лечить подавлением продуцирования медиаторов воспаления, таких как TNFα и IL-6, через ингибирование TLR или системы сигнальной трансдукции семейства интерлейкина IL-1.

[0120]

Ингибиторная активность в отношении IRAK-4 может количественно определяться, например, методом, описанным в примерах биологических испытаний 1 и 2.

Заболевание, связанное с ингибированием IRAK-4, конкретно не ограничено при условии, что оно представляет собой заболевание, при котором ингибирование IRAK-4 является эффективным, и конкретные примеры включают, например, острое или хроническое воспаление, аутоиммунные заболевания (ревматоидный артрит, системные эритематозы, волчаночный нефрит и т.п.), аутовоспалительные заболевания (периодический синдром, ассоциированный с рецептором TNF (TNF receptor-associated periodic syndrome - TRAPS), семейная средиземноморская лихорадка, криопирин-ассоциированный периодический синдром, синдром высокого уровня IgD и т.п.), нарушения обмена веществ (подагра и т.п.) и т.п.

[0121]

В соответствии с определенным вариантом осуществления, соединения по настоящему изобретению обладают подавляющим действием передачи сигнала TLR/IL-1β и могут применяться в качестве активного ингредиента лекарственного средства, как показано в примерах биологических испытаний, представленных ниже. В частности, соединения по настоящему изобретению в соответствии с определенным вариантом осуществления предпочтительно применяются для профилактического и/или терапевтического лечения заболевания, в которые вовлечена передача сигнала IRAK-4.

[0122]

Соединения по настоящему изобретению в соответствии с определенным вариантом осуществления показывают значительную селективность воздействия по другим киназам. Примеры других киназ включают FLT3, ITK, CK2, IKKb, JAK1, Syk, PKC9 и р38. В соответствии с другим вариантом осуществления примеры включают, в частности, FLT3.

Применимость лекарственного средства по настоящему изобретению в соответствии с определенным вариантом осуществления для профилактического и/или терапевтического лечения заболевания, при котором в патологический процесс вовлечена передача сигнала IRAK-4, может подтверждаться, например, тестом ингибирования продуцирования цитокинов с использованием иммуноцитов или применением модели коллаген-индуцированного артрита. В частности, в качестве типичного примера теста можно указать метод, описанный в примере биологического описания 3.

[0123]

Лекарственное средство по настоящему изобретению в соответствии с определенным вариантом осуществления может быть получено в качестве лекарственного средства, содержащего соединение, представленное формулой (1), или его фармацевтически приемлемую соль в качестве активного ингредиента, и к лекарственному средству по настоящему изобретению также относится, например, лекарственное средство, содержащее соединение или его фармацевтически приемлемую соль, которое при введении в живой организм в качестве пролекарства подвергается метаболизму с получением соединения, представленного формулой (1), или его фармацевтически приемлемой соли.

[0124]

Хотя способ введения лекарственного средства по настоящему изобретению в соответствии с определенным вариантом осуществления конкретно не ограничен, схема введения может подходящим образом выбираться, например, из перорального введения, подкожного введения, внутрикожного введения, внутримышечной инъекции, внутривенного введения, перназального введения, интравагинального введения, интраректального введения, местного введения в пораженную часть и т.п.

[0125]

В качестве лекарственного средства по настоящему изобретению соединение, представленое формулой (1) или его фармацевтически приемлемая соль могут применяться per se. Однако предпочтительно добавлять к соединению, представленному формулой (1), или его фармацевтически приемлемой соли фармацевтически приемлемые носители одного или нескольких видов для получения фармацевтической композиции и введения композиции. Кроме того, в качестве активного ингредиента лекарственного средства по настоящему изобретению может использоваться гидрат или сольват соединения, представленного общей формулой (1), или его фармацевтически приемлемая соль.

[0126]

Примеры лекарственной формы, используемой для получения вышеупомянутой фармацевтической композиции, включают таблетку, порошок, гранулу, сироп, суспензию, капсулу, препарат для ингаляции, препарат для инъекции и т.п. Для их производства используются различные носители, подходящие для получения препаратов. Примеры носителя препаратов для перорального введения включают эксципиенты, связующие вещества, смазывающие вещества, ускорители флюидизирования и красители. Примеры способа для применения композиции в качестве препарата для ингаляции включают способ вдыхания фармацевтической композиции в виде порошка или жидкой лекарственной формы, полученной растворением или суспендированием фармацевтической композиции в растворителе, метод вдыхания тумана фармацевтической композиции с использованием распылителя, называемого атомайзером или небулайзером и т.п. Когда композицию получают в форме препарата для инъекции, в качестве разбавителя обычно может использоваться дистиллированная вода для инъекций, физиологический солевой раствор, водный раствор глюкозы, растительно масло для инъекций, пропиленгликоль, полиэтиленгликоль и т.п. При необходимости можно добавлять дезинфицирующие средства, антисептики, стабилизаторы, изотонические агенты, смягчающие средства. Также может быть получена и использоваться в качестве лекарственного средства по настоящему изобретения клатратная композиция, в которой соединение по настоящему изобретению, клатрировано в циклодекстрин.

[0127]

При введении лекарственного средства по настоящему изобретению в соответствии с определенным вариантом осуществления подходящия лекарственная форма может подходящим образом выбираться и вводиться соответствующим способом. Например, лекарственное средство может вводиться перорально в форме таблетки, порошка, гранулы, сиропа, суспензии, капсулы или т.п. Лекарственное средство также может вводиться через дыхательные пути в форме препарата для ингаляции. Кроме того, лекарственное средство может вводиться подкожно, внутрикожно, интраваскулярно (внутрисосудистым способом), внутримышечно или интраперитонеально в форме препарата для инъекции, включая капельную инфузию. Кроме того, лекарственное средство может вводиться трансмукозально в форме сублингвальной таблетки, свечи или т.п.и может вводиться чрескожно в форме геля, лосьона, мази, крема, спрея или т.п. Лекарственное средство также может вводиться в форме лекарственного средства прологнированного действия, например в форме инъекции замедленного высвобождения действующего вещества и встраивающегося препарата (например, препарата в форме пленки и т.п.).

[0128]

Период введения лекарственного средства по настоящему изобретению в соответствии с определенным вариантом осуществления конкретно не ограничен. В целом, лекарственное средство вводится в течение периода, когда считается, что клинические симптомы заболевания являются выраженными, и обычно введение продолжается в течение от нескольких недель до одного года. Однако также можно продлить период введения в зависимости от патологических состояний. Лекарственное средство также может вводиться профилактически по назначению врача, даже если клинические симптомы не выражены. Доза лекарственного средства по настоящему изобретению в соответствии с определенным вариантом осуществления конкретно не ограничена. Например, когда лекарственное средство по настоящему изобретению вводится перорально, взрослому человеку может быть назначено от 0,01 до 1000 мг активного ингредиента на каждый прием. Что касается частоты введения в вышеуказанном случае, введение может осуществляться с частотой от одного раза каждые 6 месяцев до ежедневного введения, предпочтительно один раз в день.

[0129]

Суточная доза и/или доза, принимаемая один раз в день, период введения и частота введения могут быть подходящим образом увеличены или уменьшены в зависимости от различных условий, таких как возраст, масса тела, состояние физического здоровья пациента, тип и тяжесть заболевания, подлежащего лечению, способ введения и лекарственная форма (возможность замедленного высвобождения активного ингредиента из носителя и т.п.).

[0130]

Когда лекарственное средство по настоящему изобретению согласно определенному варианту осуществления используется для профилактического и/или терапевтического лечения вышеупомянутых заболеваний, лекарственное средство по настоящему изобретению согласно определенному варианту осуществления может использоваться вместе с одним или несколькими видами лекарственных средств, выбранных из лекарственных средств, описанных ниже, в одно и то же или в разное время. Кроме того, лекарственное средство по настоящему изобретению в соответствии с определенным вариантом осуществления может быть получено в форме так называемого комбинированного лекарственного средства вместе с лекарственными средствами, примеры которых описаны выше, и затем введено. Такой комбинированный препарат может быть представлен как лекарственная форма полной смеси активных ингредиентов, подобной типичным композициям такого типа, а также в лекарственной форме, наборе или упаковке, включающей несмешанную комбинацию ингредиентов, вводимых отдельно из двух или большего количества контейнеров, каждый из которых содержит каждый активный ингредиент.

[0131]

Примеры препаратов, которые могут использоваться вместе с лекарственным средством по настоящему изобретения согласно определенному варианту осуществления, включают, например, иммунодепрессанты (такролимус, циклоспорин, рапамицин, микофенолат мофетила, препараты интерферона, циклофосфамид, азатиоприн, метотрексат и т.п.), антифлогистики (стероиды (преднизолон, дексаметазон, бетаметазон, кортизон и т.п.) и нестероидные противовоспалительные препараты (НПВП, ибупрофен, целекоксиб и т.п.)), генно-инженерные противоревматические препараты (препараты золота, метотрексат, лефлуномид, сульфасалазин, пеницилламин, игуратимод, хлорохин, тофацитиниб и др.), противомалярийные препараты (гидроксихлорохин и др.), терапевтические средства для лечения рассеянного склероза (интерферон, препараты против α4-интегринов, финголимод, митоксантрон и т.п.) и противоцитокиновые препараты (препараты направленного действия против TNFα, против IL-6, против IL-12/23 и т.п.). Примеры также включают биологические препараты, используемые в качестве терапевтических средств для лечения аутоиммунных заболеваний (анти-CD20 препараты, CTLA-4-Ig и т.п.), препараты для лечения нарушений метаболизма мочевой кислоты (колхицин, пробенецид, буколом, бензбромарон, аллопуринол и т.п.), гипогликемические средства (алоглиптин, натеглинид, акарбоза, метформин, пиоглитазон, препараты инсулина и т.п.), гипотензивные средства (имидаприл, валсартан, кандезартан и т.п.), желчегонные средства (урсодезоксихолевая кислота и т.п.), бронхолитические средства (сальметерол и сальбутамол, которые являются β2-агонистами адреналина, ипратропиум и тиотропиум, которые являются антихолинергическими препаратами, и т.п.), терапевтические лекарственные средства для лечения аллергических заболеваний (теофиллин и т.п.), противоаллергические лекарственные средства (фексохинадин, эпинастин, олопатадин, лоратадин, цетиризин, бепотастин, кетотифен, кромогликат натрия, пемироласт, хлорфенирамин и т.п.), антагонисты лейкотриенов (зафирлукаст, монтелукаст, пранлукаст и т.п.), гиполипидемические препараты (аторвастатин, симвастатин, клинофибрат, безафибрат, пробукол, эластаза, этил икосапентат, и тому подобное), средства контроля нейротрансмиттеров (донепезил, галантамин, мемантин и т.п.), антиоксиданты (витамин Е, ацетилцистеин, карнитин, бетаин, пентоксифиллин и т.п.) и антибиотики (различные антибиотики β-лактамного типа, макролидного типа, тетрациклинового типа, аминогликозидного типа, хинолонового типа и т.п., хлорамфеникол и т.п.). Лекарственное средство по настоящему изобретению также может применяться вместе с различными видами лекарственных средств, которые будут созданы в будущем. Эти комбинированные лекарственные средства ничем не ограничены при условии, что они являются клинически значимыми.

[0132]

Соединения по настоящему изобретению согласно определенному варианту осуществления включают соединения, демонстрирующие превосходную безопасность (связанную с отсутствием различных токсичностей и фармакологической безопасностью) и отличные фармакокинетические характеристики и т.п., и возможность их применения в качестве активного ингредиента лекарственного средства может быть подтверждена, например, методами, описанными ниже.

[0133]

Примеры тестов, касающихся безопасности, включают, в частности, описанные ниже. Однако они не ограничиваются этими примерами. Примеры включают цитотоксические тесты (тесты с использованием клеток HL60, гепатоцитов и т.п.), тесты генотоксичности (тест Эймса, тест ТК лимфомы мыши, тест хромосомных аберраций, тест микроядер и т.п.), тесты чувствительности кожи (метод Бюлера, метод GPMT, метод APT, тест LLNA и т.п.), тесты чувствительности кожи к свету (метод адъювантных полос и т.п.), тесты раздражения глаз (однократная инстилляция, краткосрочная непрерывная инстилляция, повторная инстилляция и т.п.), тесты фармакологической безопасности для сердечно-сосудистой системы (метод телеметрии, метод APD, анализ ингибирования hERG и т.п.), тесты фармакологической безопасности для центральной нервной системы (метод FOB, модифицированный метод Ирвина и т.п.), тесты фармакологической безопасности для дыхательной системы (метод с использованием аппарата для измерения дыхательной функции, метод измерения с помощью анализатора газов крови и т.п.), тесты общей токсичности, тесты репродуктивной токсичности и токсичности внутриутробного развития и т.п.

[0134]

Примеры тестов, касающихся фармакокинетических характеристик, включают, например, тесты, перечисленные ниже. Однако они не ограничиваются этими примерами. Примеры включают тесты ингибирования или индукции фермента цитохрома Р450, тесты проницаемости клеток (тесты с использованием клеток СаСО-2, клеток MDCK и т.п.), анализ АТФазы транспортера лекарственного средства, тесты пероральной абсорбции, тесты измерения перехода концентрации в крови, тесты метаболизма (тест на стабильность, тест на молекулярные виды метаболитов, тест реактивности и т.п.), тесты растворимости (тест растворимости на основе турбидиметрического метода и т.п.) и т.п.

[0135]

Возможность применения соединений по настоящему изобретению в качестве активного ингредиента лекарственного средства согласно определенному варианту осуществления может быть подтверждена, например, с помощью теста цитоксичесности. Примеры теста цитотоксичести включают методы с использованием различных культивируемых клеток, например клеток HL-60, которые являются клетками прелейкемии человека, первичных изолированных культивируемых клеток гепатоцитов, фракции нейтрофилов, приготовленной из периферической крови человека, и т.п. Хотя тест может проводиться по методике, описанной ниже, он не ограничивается только представленным описанием. Клетки готовят в виде суспензии с концентрацией от 105 до 107 клеток/мл, и суспензию добавляют в микропробирки или микропланшеты в объеме от 0,01 до 1 мл. К суспензии добавляют раствор соединения в объеме, составляющем от 1/100 до 1 объема клеточной суспензии, и культивируют клетки в культруральной клеточной среде с конечной концентрацией соединения от 0,001 до 1000 мкМ в течение от 30 минут до нескольких дней при 37°С при 5% CO₂. После завершения выдерживания выживаемость клеток оценивают с помощью метода МТТ, метода WST-1 (Ishiyama, М., et al., In Vitro Toxicology, 8, p. 187, 1995) или аналогично. С помощью количественного определения цитотоксичности соединения для клеток может быть подтверждена возможности применения соединения в качестве активного ингредиента лекарственного средства.

[0136]

Возможность применения соединений по настоящему изобретению в качестве активного ингредиента лекарственного средства согласно определенному варианту осуществления может быть подтверждена с помощью, например, теста на генотоксичность. Примеры теста на генотоксичность включают тест Эймса, тест лимфомы мыши ТК, тест хромосомных аберраций, микроядерный тест и т.п. Тест Эймса представляет собой метод определения обратной мутации путем культивирования определенных видов бактерий Salmonella или Escherichia на чашках для культивирования микроорганизмов или т.п. и добавления к ним соединения (см. IYAKUSHIN (Notification by the chief of Evaluation and Licensing Division, Pharmaceutical and Medical Safety Bureau, Ministry of Health, Labor and Welfare, Japan), No. 1604, 1999, "Guideline for Genotoxicity Test", II-1. Genotoxicity Test, and the like). Тест TK лимфомы мыши представляет собой тест выявления способности к генетической мутации, направленной на ген тимидин-киназы клетки лимфомы мыши L5178Y (см. IYAKUSHIN No. 1604, 1999, "Guideline for Genotoxicity Test", II-3. Mouse Lymphoma TK Test; Clive, D. et al., Mutat. Res., 31, pp. 17-29, 1975; Cole, J., et al., Mutat. Res., 111, pp. 371-386, 1983, и т.п.). Тест на хромосомную аберрацию представляет собой метод определения активности инициирования хромосомной аберрации путем

культивирования клеток млекопитающих в присутствии соединения с последующей фиксацией клеток, окрашиванием и наблюдением за хромосомами клеток (см. IYAKUSHIN No. 1604, 1999, "Guideline for Genotoxicity Test", II-2. Chromosomal Aberration Test Utilizing Mammalian Cultured Cells, and the like). Могут использоваться также микроядерный тест, который представляет собой метод оценки способности к образованию микроядер, вызванных хромосомной аберрацией, метод с использованием грызунов (тест in vivo) (IYAKUSHIN No. 1604, 1999, "Guideline for Genotoxicity Test", II-4. Micronucleus Test Using Rodent; Hayashi M. et al., Mutat. Res., 312, pp. 293-304, 1994; Hayashi, M. et al., Environ. Mol. Mutagen., 35, pp.234-252, 2000), метод использования культивированных клеток (тест in vitro) (Fenech M., et al., Mutat. Res., 147, pp. 29-36, 1985; Miller, В., et al., Mutat. Res., 392, pp. 45-59, 1997) и т.п. Определение генотоксичности соединения с помощью одного или нескольких из этих методов может подтвердить применимость соединения в качестве активного ингредиента лекарственного средства.

[0137]

Возможность применения соединений по настоящему изобретению в качестве активного ингредиента лекарственного средства согласно определенному варианту осуществления может подтверждаться, например, тестом чувствительности кожи. Тесты чувствительности кожи включают тесты кожной сенсибилизации с использованием морских свинок, метод Бюхлера (Buehler, E.V., Arch. Dermatol., 91, pp. 171-177, 1965), метод GPMT (метод максимизации, Magnusson В., et al., J. Invest. Dermatol., 52, pp. 268-276, 1969), метод APT (метод тестирования адъюванта и пластыря (Sato, Y. et al., Contact Dermatitis, 7, pp. 225-237, 1981)), и т.п. Кроме того, в качестве теста чувствительности кожи с использованием мыши может использоваться метод LLNA (анализ реакции регионарных лимфоузлов) (OECD Guideline for the testing of chemicals 429, Skin sensitization 2002; Takeyoshi, M.et al., Toxicol. Lett., 119 (3), pp. 203-8, 2001; Takeyoshi, M. et al., J. Appl. Toxicol., 25 (2), pp. 129-34, 2005) и т.п. Определения способности соединения вызывать сенсибилизацию кожи одним или несколькими из этих методов может подтвердить применимость соединения в качестве активного ингредиента лекарственного средства.

[0138]

Возможность применения соединений по настоящему изобретению в качестве активного ингредиента лекарственного средства согласно определенному варианту осуществления может быть подтверждена, например, с помощью теста фотосенсибилизации кожи. Примеры теста фотосенсибилизации кожи включают тест фотосенсибилизации кожи с использованием морской свинки (см. "Drug Nonclinical Test Guideline Commentary 2002", Yakuji Nippo, published on 2002, 1-9: Skin Photosensitization Test, и т.п.) и т.п., другие примеры методов включают метод адъювантной полоски ("adjuvant and strip") (Ichikawa, H. et al., J. Invest. Dermatol., 76, pp. 498-501, 1981), метод Харбера (Harber) (Harder, L.C., Arch. Dermatol., 96, pp. 646-653, 1967), метод Хорио (Horio) (Horio, Т., J. Invest. Dermatol., 67, pp.591-593, 1976), метод Джордана (Jordan) (Jordan, W.P., Contact Dermatitis, 8, pp.109-116, 1982), метод Кочевера (Kochever) (Kochever, I.E. et al., J. Invest. Dermatol., 73, pp. 14 4-14 6, 1979), метод Maypepa (Maurer) method (Maurer, T. et al., Br. J. Dermatol., 63, pp.593-605, 1980), метод Морикавы (Morikawa) (Morikawa, F. et al., "Sunlight and Man", Tokyo Univ. Press, Tokyo, pp.529-557, 1974), метод Винсона (Vinson) (Vinson, L.J., J. Soc. Cosm. Chem., 17, pp.123-130, 1966) и т.п. Определение способности фотосенсибилизации кожи соединения с помощью одного или нескольких из этих методов может подтвердить применимость соединения в качестве активного ингредиента лекарственного средства.

[0139]

В соответствии с определенным вариантом осуществления возможность применения соединений по настоящему изобретению в качестве активного ингредиента лекарственного средства может быть подтверждена, например, тестом раздражающего действия на слизистую оболочку глаз. Примеры теста раздражающего действия на слизистую оболочку глаз включают метод теста однократной инстилляции (разовая инстилляция), метод теста кратковременной непрерывной инстилляции (многократная инстилляция в течение коротного промежутка времени с равными интервалами), метод теста повторной (многократной) инстилляции в течение от нескольких дней до нескольких десятков дней) с использованием глаз кролика, глаз обезьяны и т.п., и может использоваться метод оценки симптомов раздражения слизистой оболочки глаз в определенные временные точки после инстилляции в соответствии с уточненной шкалой Дрейза (Fukui, N. et al., Gendai no Rinsho, 4 (7), pp. 277-289, 1970) и т.п. Изучение раздражающего действия на глаза соединения с использованием одного или нескольких из этих методов может подтвердить применимость соединения в качестве активного ингредиента лекарственного средства.

[0140]

Возможность применения соединений по настоящему изобретению в качестве активного ингредиента лекарственного средства согласно определенному варианту осуществления может подтверждаться проведением, например, теста фармакологической безопасности для сердечно-сосудистой системы. Примеры теста фармакологической безопасности для сердечно-осудистой системы включают метод телеметрии (метод количественного определения влияния введения соединения без анастезии на электрокардиограмму, частоту сердечных сокращений, кровяное давление, кровоток и т.п. (Electrocardiogram, Echocardiography, Blood Pressure and Pathological Tests of Animals for Fundamental and Clinical Medicine, edited by Sugano S., Tsubone H., Nakada Y., published on 2003, Maruzen), метод APD (метод измерения времени удерживания потенциала действия клеток сердечной мышцы (Muraki, K. et al., AM. J. Physiol., 269, H524-532, 1995; Ducic, I. et al., J. Cardiovasc. Pharmacol., 30 (1), pp. 42-54, 1997)), метод оценки ингибирования hERG (метод фиксации потенциала (пэтч-клемп) (Chachin, М. et al., Nippon Yakurigaku Zasshi, 119, pp. 345-351, 2002), метод анализа связывания (Gilbert, J.D. et al., J. Pharm. Tox. Methods, 50, pp. 187-199, 2004), метод анализа эффлекса Rb⁺ (Cheng, C.S. et al., Drug Develop.Indust. Pharm., 28, pp. 177-191, 2002), метод оценки потенциала мембраны (Dorn, A. et al., J. Biomol. Screen., 10, pp. 339-347, 2005)) и т.п. Определение влияния на сердечно-сосудистую систему соединения с помощью одного или нескольких из этих методов может подтвердить применимость соединения в качестве активного ингредиента лекарственного средства.

[0141]

Возможность применения соединений по настоящему изобретению в качестве активного ингредиента лекарственного средства согласно определенному варианту осуществления может подтверждаться проведением, например, теста фармакологической безопасности для центральной нервной системы. Примеры теста фармакологической безопасности для центральной нервной системы включают метод набора функциональных тестов (Functional Observational Battery - FOB) (Functional Observational Battery, Mattson, J.L. et al., J. American College of Technology, 15 (3), pp. 239-254, 1996), модифицированный метод Ирвина (метод оценки с помощью наблюдения общих симптомов и поведения (Irwin, S., Comprehensive Observational Assessment (Berl.) 13, pp.222-257, 1968)) и т.п. Оценка воздействия соединения на центральную нервную систему с использованием одного или нескольких из этих методов может подтвердить применимость соединения в качестве активного ингредиента лекарственного средства.

[0142]

Возможность применения соединений по настоящему изобретению в качестве активного ингредиента лекарственного средства в соответствии с определенным вариантом осуществления может подтверждаться проведением, например, теста фармакологической безопасности для дыхательной системы. Примеры теста фармакологической безопасности для дыхательной системы включают метод количественного определения с использованием аппарата измерения дыхательной функции (метод измерения частоты дыхания, разового объема вентиляции легких, минутного объема вентиляции легких и т.п., Drorbaugh, J.E. et al., Pediatrics, 16, pp. 81-87, 1955; Epstein, M.A. et al., Respir. Physiol., 32, pp. 105-120, 1978), метод с использованием анализатора газов крови (метод измерения количества газов в крови, кислородной сатурации гемоглобина и т.п., Matsuo, S., Medicina, 40, pp. 188-, 2003), и т.п. Оценка влияния соединения на дыхательную систему с использованием одного или нескольких из этих методов может подтвердить применимость соединения в качестве активного ингредиента лекарственного средства.

[0143]

Возможность применения соединений по настоящему изобретению в качестве активного ингредиента лекарственного средства согласно определенному варианту осуществления может подтверждаться, например, тестом общей токсичности. Тест общей токсичности представляет собой метод разового или неоднократного (в течение нескольких дней) перорального или внутривенного введения соединения, растворенного или суспендированного в подходящем растворителе, грызуну, такому как крыса и мышь, или животному, не относящемуся к грызунам, такому как обезьяна и собака, с оценкой с помощью наблюдения общих состояний, клинико-химических изменений, патогистологических изменений и т.п. у животных, принимающих соединение. Оценка общей токсичности соединения с использованием этих методов может подтвердить применимость соединения в качестве активного ингредиента лекарственного средства.

[0144]

Возможность применения соединений по настоящему изобретению в качестве активного ингредиента лекарственного средства согласно определенному варианту осуществления может подтверждаться, например, тестом токсического действия на репродуктивную систему и внутриутробное развитие. Тест токсического действия на репродуктивную систему и внутриутробное развитие представляет собой тест изучения индукции вредного воздействия соединения на репродуктивные процессы и процессы развития с использованием грызунов, таких как крысы и мыши, или животных, которые не являются грызунами, таких как обезьяны и собаки (см. "Drug Nonclinical Test Guideline Commentary 2002", Yakuj i Nippo, published on 2002, 1-6: Reproductive and Developmental Toxicity Test, и т.п.). Примеры теста токсического действия на репродуктивную систему и внутриутробное развитие включают тесты, касающиеся фертильности и раннего эмбриогенеза вплоть до нидации, тесты, касающиеся развития материнских функций до и после рождения, тесты, касающиеся эмбриогенеза и развития плода (см. IYAKUSHIN No. 1834, 2000, Appendix, "Guideline for Drug Toxicity Test", [3] Reproductive and Developmental Toxicity Test, и т.п.) и т.п. Оценка токсического действия соединения на репродуктивную систему и внутриутробное развитие с использованием одного или нескольких из этих методов может подтвердить применимость соединения в качестве активного ингредиента лекарственного средства.

[0145]

Возможность применения соединений по настоящему изобретению в качестве активного ингредиента лекарственного средства согласно определенному варианту осуществления может подтверждаться, например, тестом ингибирования или индуцирования фермента цитохрома P450t (Gomez-Lechon, M.J. et al., Curr. Drug Metab., 5 (5), pp. 443-462, 2004). Примеры теста ингибирования или индуцирования фермента цитохрома Р450 включают, например, метод определения in vitro, ингибирует ли соединение активность фермента цитохрома Р450, с помощью фермента цитохрома Р450 каждого молекулярного вида, очищенного из клеток или полученного с использованием генетического рекомбинанта или микросомы системы экспрессии Р450 человека (Miller, V.P. et al., Ann. N.Y. Acad. Sci., 919, pp.26-32, 2000), метод измерения изменений экспрессии фермента цитохрома Р450 каждого молекулярного вида или его ферментной активности с использованием микросом печени человека или суспензии разрушенных клеток (Hengstler, J.G. et al., Drug Metab. Rev., 32, pp. 81-118, 2000), метод экстракции РНК из гепатоцитов человека, подвершихся воздействию соединения, и сравнения количества экспрессии мРНК с контролем для исследования способности соединения индуцировать ферменты (Kato, М. et al., Drug Metab. Pharmacokinet., 20 (4), pp. 236-243, 2005) и т.п.Оценка влияния соединения на ингибирование или индукцию фермента цитохрома Р450 с использованием этих методов может подтвердить применимость соединения в качестве активного ингредиента лекарственного средства.

[0146]

Возможность применения соединений по настоящему изобретению в качестве активного ингредиента лекарственного средства согласно определенному варианту осуществления может подтверждаться, например, тестом выработки реактивного метаболита. Примеры теста, подтверждающего выработку реактивных метаболитов, включают, например, метод инкубации микросом печени человека в присутствии NADPH и глутатиона, меченного флуоресценцией с использованием дансильной группы (dGSH), захвата реакционных метаболитов в виде dGSH-аддуктов и полное обнаружение пиков реактивных метаболитов из полученных количеств dGSH-аддуктов на основе интенсивности флуоресценции, используемой в качестве показателя (Junping Gan, et al., Chem. Res. Toxicol., 2005, 18, 896-903), метод инкубирования Немеченого соединения с микросомами печени человека в присутствии NADPH и измерения радиоактивности атома углерода, ковалентно связанного с белками (Baillie Т.A., Drug Metabolizing Enzymes. Cytochrome P450 and Other Enzymes in Drug Discovery and Development, pp. 147-154, 2003), и т.п. Оценка риска возникновения у соединения идиосинкразической лекарственной токсичности, которая генерируется в результате продуцирования реакционноспособного метаболита соединения, с использованием одного или нескольких из этих методов может подтвердить применимость соединения в качестве активного ингредиента лекарственного средства.

[0147]

Возможность применения соединений по настоящему изобретению в качестве активного ингредиента лекарственного средства согласно определенному варианту осуществления может подтверждаться, например, тестом на клеточную проницаемость. Примеры теста клеточной проницаемости включают, например, метод измерения проницаемости соединения через клеточную мембрану в системе культуры клеток in vitro с использованием СаСО-2 клеток (Delie, F. et al., Crit. Rev. Ther. Drug Carrier Syst., 14, pp. 221-286, 1997; Yamashita, S. et al., Eur. J. Pham. Sci., 10, pp. 195-204, 2000; Ingels, F.M. et al., J. Pham. Sci., 92, pp.1545-1558, 2003), метод измерения проницаемости через клеточную мембрану соединения в системе клеточной культуры in vitro с использованием MDCK клеток (Irvine, J.D. et al., J. Pham. Sci., 88, pp. 28-33, 1999) и т.п. Оценка клеточной проницаемости соединения с использованием одного или нескольких из этих методов может подтвердить применимость соединения в качестве активного ингредиента лекарственного средства.

[0148]

Возможность применения соединений по настоящему изобретению в качестве активного ингредиента лекарственного средства согласно определенному варианту осуществления может быть подтверждена анализом АТФазы транспортера лекарственного средства для транспортера АТФ-связывающей (ATP-binding cassette ABC) кассеты. Примеры анализа АТФазы транспортера лекарственного средства включают метод определения, является ли соединение субстратом Р-гликопротеина (Р-gp), с использованием системы экспрессии Р-gp бакуловируса (Germann, U.A., Methods Enzymol., 292, pp. 427-41, 1998) и т.п. Кроме того, возможность применения также может подтверждаться тестом транспорта с использованием ооцитов, собранных от афрканской когтистой лягушки (Xenopus laevis), для переносчика растворенного носителя (solute carrier - SLC). Тесты переноса включают метод проверки, является ли исследуемое соединение субстратом OATP2, с использованием ооцитов, экспрессирующих OATP2 (Tamai I. et al., Pharm. Res., 2001 September; 18 (9), 1262-1269), и т.п. Оценка влияния соединения на переносчик ABC или переносчик SLC с использованием этих методов может подтвердить применимость соединения в качестве активного ингредиента лекарственного средства.

[0149]

Возможность применения соединений по настоящему изобретению в качестве активного ингредиента лекарственного средства согласно определенному варианту осуществления может подтверждаться, например, тестом пероральной абсорбции. Примеры теста пероральной абсорбции включают метод перорального введения грызуну, обезьяне, собаке или т.п. определенного количества соединения, растворенного или суспендированного в подходящем растворителе, с количественным определением уровня содержания соединения в крови после перорального введения по времени с использованием метода ЖХ-МС/МС ("Newest Mass Spectrometry for Life Science", Kodansha Scientific, 2002, edited by Harada K. et al, и т.п.) для оценки перехода в кровь соединения, введенного перорально, и т.п. Оценки абсорбции соединения при пероральном введении с использованием этих методов может подтвердить применимость соединения в качестве активного ингредиента лекарственного средства.

[0150]

Возможность применения соединений по настоящему изобретению в качестве активного ингредиента лекарственного средства согласно определенному варианту осуществления может подтверждаться, например, тестом измерения перехода концентрации в крови. Примеры теста измерения перехода концентрации крови включают метод введения соединения перорально или парентерально (например, внутривенно, внутримышечно, интраперитонеально, подкожно, чрескожно, инстилляцией, назально и т.п.) грызуну, обезьяне, собаке или т.п., и измерения изменения уровня содержания соединения в крови во времени после введения с использованием метода ЖХ-МС/МС ("Newest Mass Spectrometry for Life Science", Kodansha Scientific, 2002, edited by Harada K. et al, и т.п.) и т.п. Оценка перехода концентрации соединения в крови с использованием этих методов может подтвердить применимость соединения в качестве активного ингредиента лекарственного средства.

[0151]

Возможность применения соединений по настоящему изобретению в качестве активного ингредиента лекарственного средства согласно определенному варианту осуществления может подтверждаться, например, метаболическим тестом. Примеры метаболического теста включают метод оценки стабильности в крови (метод прогнозирования метаболического клиренса in vivo на основе скорости метаболизма соединения в меченочных микросомах человека или животных других видов (см. Shou, W.Z. et al., J. Mass Spectrom., 40 (10) pp. 1347-1356, 2005; Li, C. et al., Drug Metab. Dispos., 34 (6), 901-905, 2006, и т.п.), метод определения молекулярных видов метаболитов, метод определения реакционноспособных метаболитов и т.п. Оценка метаболического профиля соединения с использованием этих методов может подтвердить применимость соединения в качестве активного ингредиента лекарственного средства.

[0152]

Возможность применения соединений по настоящему изобретению в качестве активного ингредиента лекарственного средства согласно определенному варианту осуществления может подтверждаться, например, тестом растворимости. В качестве метода оценки растворимости в воде приведены примеры методов подтверждения растворимости в кислых условиях, нейтральных условиях или основных условиях, а также методы подтверждения изменения растворимости в зависимости от присутствия или отсутствия желчной кислоты. Примеры теста растворимости включают тест определения растворимости на основе турбидиметрического метода (Lipinski, С.A. et al., Adv. Drug Deliv. Rev., 23, pp. 3-26, 1997; Bevan, CD. et al., Anal. Chem., 72, pp. 17 81-17 87, 2000) и т.п. Оценка растворимости соединения с использованием этих методов может подтвердить применимость соединения в качестве активного ингредиента лекарственного средства.

[0153]

Возможность применения соединений по настоящему изобретению в качестве активного ингредиента лекарственного средства согласно определенному варианту осуществления может быть подтверждена, например, исследованием повреждений верхних отделов желудочно-кишечного тракта, почечной дисфункции и т.п. В качестве фармакологического теста для верхних отделов желудочно-кишечного тракта можно провести исследование действия на слизистую оболочку желудка с использованием модели повреждения слизистой оболочки желудка голодающей крысы. Примеры фармакологического теста функции почек включают метод измерения почечного кровотока [Physiology, 18th edition, Bunkodo, 1986, Chapter 17] и т.п. Оценка воздействия соединения на верхние отделы желудочно-кишечного тракта и функцию почек с использованием этих методов может подтвердить применимость соединения в качестве активного ингредиента лекарственного средства.

Примеры

[0154]

Далее настоящее изобретение будет более подробно объяснено со ссылкой на примеры и тесты биологических испытаний (далее они могут совместно именоваться как «примеры и т.п.»). Однако область настоящего изобретения не ограничивается приведенными примерами.

Все приобретенные реагенты используют без дополнительной очистки. Приобретенные безводные растворители использую без дополнительной сушки. Для колоночной хроматографии используют систему препаративной очистки среднего давления производства YAMAZEN, SmartFlash, или систему препаративной очистки среднего давления производства BIOTAGE, Isolera ONE, к которой в качестве МС-детектора подключен BIOTAGE Dalton. В качестве колонки используют SNAP Ultra производства BIOTAGE или DispoPack AT производства YMC. В некоторых случаях очистку проводят с использованием BondElute SCX производства Agilent в качестве ионообменной смолы. BondElute SCX в дальнейшем может называться просто SCX. Пример метода использования SCX представляет собой метод промывки картриджа метанолом и дихлорметаном, затем адсорбцию неочищенного продукта, растворенного в минимальном объеме растворителя (например, смешанном растворителе из дихлорметана и метанола или т.п.), затем промывку примесей метанолом при повышении давления и элюирование продукта 2,0 М раствором аммиака в метаноле. Для тонкослойной хроматографии (ТСХ) используют силикагель с предварительно нанесенным покрытием 60 F254 (производство Merck, номер продукта 5715-1 М)). После проявления хроматограмм смесью хлороформ:метанол (от 1:0 до 1:1) или этилацетат:гексан (от 1:0 до 0:1) наличие соединения подтверждают УФ облучением (254 нм или 365 нм) или окрашиванием раствором йода, водным раствором перманганата калия, фосфорно-молибденовой кислоты (раствор в этаноле) и т.п. Препаративную тонкослойную хроматографию (далее также называемую «ПТСХ») проводят с использованием одной или нескольких пластин PLC Plate Silica Gel 60 F254 (20 × 20 см, толщина слоя 2 мм, включая зону концентрирования (4 см), производство Merck, номер продукта 13793-1 М) в зависимости от количества образца. Для сушки органических растворителей используют безводный сульфат магния или безводный сульфат натрия.

[0155]

ЯМР

Для анализа методом 1Н (4 00 МГц) ядерного магнитного резонанса (далее сокращенно - ЯМР) используют AVANCE III HD-400MHz производства Bruker или AVANCE III HD-600MHz производства Bruker.

В качестве внутреннего стандарта используют известные растворители или добавки. В качестве данных 1Н ЯМР приводятся химические сдвиги в частях на миллион (далее сокращенно - м.д.), интегральные значения (описанные, например, как 1Н) и мультиплеты («с» означает синглет, «д» означает дублет, «т» означает триплет, «кв» означает квартет, «кви» означает квинтет, «м» означает мультиплет, «уш.» означает уширенный, «дд» означает дублет дублетов и т.п.).

[0156]

Для ЖХМС масс-спектр получают с использованием жидкостной хроматографии-масс-спектрометрии (ЖХ-МС). Если не указано конкретно, в качестве масс-спектрометра используют одноквадрупольный масс-спектрометр SQD System (производства Waters), и измерения проводят методом электрораспылительной ионизацией (electrospray ionization - ESI). В качестве аппарата жидкостной хроматографии используют Acquity Ultra Performance LC System производства Waters. В качестве разделительной колонки используют ACQUITY UPLC ВЕН C18 (2,1×50 мм, 1,7 мкм) производства Waters.

[0157]

Когда условия ЖХ конкретно указаны в примерах и ссылочных примерах, это означает, что измерение проводят с указанным растворителем в указанных условиях, "m/z" означает данные масс-спектра (также указываются МН⁺ или МН-).

[0158]

(ЖХ-1) Измерение проводят в следующих условиях: элюирование при объемной скорости потока 0,6 мл/минута с использованием линейного градиента от 5 до 90% (об/об) раствора В (ацетонитрил) в растворе А (10 мМ водный раствор ацетата аммония) от 0 до 2,0 минут и затем линейный градиент от 90 до 98% (об/об) раствора В в растворе А от 2,0 до 2,5 минут.

[0159]

(ЖХ-6) Измерение проводят в следующих условиях: элюирование проводят с объемной скоростью потока 0,6 мл/минута с использованием линейного градиента от 70 до 90% (об/об) раствора В (ацетонитрил) в растворе А (10 мМ водный ацетат аммония) от 0 минуты до 2,0 минут и затем линейный градиент от 90 до 98% (об/об) раствора В в растворе А от 2,0 до 2,5 минут.

[0160]

Для очистки методом ВЭЖХ используют систему препаративной очистка производства Waters Japan и колонку Triart С18 ExRS (производства YMC) или т.п., в качестве элюиента используют 10 мМ водный ацетат аммония/ацетонитрил.

[0161]

Аббревиатура «колич.», указанная в описании представленных далее примеровз и способах синтера промежуточных соединений означает, что целевое соединение получено с количественным выходом.

[Формула 32]

Способ А-1

[0162]

Промежуточное соединение А-1-2: 6-Бром-3-фтор-2-нитрофенол

[Формула 33]

[0163]

3-фтор-2-нитрофенол (промежуточное соединение А-1-1, 30,9 г, 196 ммоль) растворяют в ацетонитриле (20 мл) и к полученному раствору добавляют концентрированную серную кислоту (44 мл), поддерживая температуру на уровне 30°С или ниже. Далее, раствор N-бромсукцинимида (35,4 г, 198 ммоль) в ацетонитриле (281 мл) по каплям добавляют к реакционной смеси в течение 1 часа 30 минут при охлаждении льдом. Затем реакционную смесь перемешивают в течение 12 часов, при этом температура смеси самопроизвольно повышается от 0°С до комнатной температуры. После завершения реакции к реакционной смеси добавляют ледяную воду (300 мл), полученную смесь экстрагируют этилацетатом и затем органический слой промывают водой и насыщенным раствором соли. Органический слой сушат над безводным сульфатом магния, фильтруют и затем концентрируют при пониженном давлении. Полученный сырой продукт (62,1 г) представляет собой смесь целевого соединения и изомера положения атома брома, но полученный сырой продукт используют в следующей стадии без разделения и очистки.

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,03, m/z 234 [М-Н]⁺.

[0164]

Промежуточное соединение А-1-3: 2-(Бензилокси)-1-бром-4-фтор-3-нитробензол

[Формула 3 4]

[0165]

б-Бром-3-фтор-2-нитрофенол (промежуточное соединение А-1-2, 62,1 г, смесь изомеров положения атома брома, упомянутая выше) растворяют в ацетонитриле (1000 мл), к полученному раствору добавляют бензилбромид (2 4,6 мл, 206 ммоль) и карбонат калия (95,0 г, 689 ммоль) и перемешивают полученную смесь при 90°С в течение 1 часа. К реакционной смеси при комнатной температуре добавляют воду (300 мл), полученную смесь экстрагируют этилацетатом и затем органический слой промывают водой и насыщенным раствором соли. Органический слой сушат над безводным сульфатом магния, фильтруют и затем концентрируют при пониженном давлении. Полученный сырой продукт очищают колоночной хроматографией (силикагель, элюирование с градиентом: гексан:этилацетат = от 100:0 до 40:60) с получением 2-(бензилокси)-1-бром-4-фтор-3-нитробензола (17,5 г, выход для 2 стадий 2 7%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,95 (определено только в УФ).

1Н-ЯМР (CDCl₃): δ (м.д.) 7,71 (1Н, дд, J=9,2, 5,6 Гц), 7,51-7,44 (2Н, м), 7,43-7,34 (3Н, м), 6,99 (1Н, т, 8,7 Гц), 5,19 (2Н, с).

[0166]

Промежуточное соединение А-1-4: Метил-(3-(бензилокси)-4-бром-2-нитрофенил)глицинат

[Формула 35]

[0167]

2-(Бензилокси)-1-бром-4-фтор-3-нитробензол (промежуточное соединение А-1-3, 30,5 г, 93,5 ммоль) и пидрохлорид метилглицина гидрохлорид (41,1 г, 327 ммоль) растворяют в ацетонитриле (467 мл), к полученному раствору добавляют N,N-диизопропилэтиламин (95,0 мл, 542 ммоль) и молекулярные сита 4А (30,5 г) и перемешивают полученную смесь при 50°С в течение 72 часов. Затем реакционную смесь фильтруют через слой целита, фильтрат экстрагируют этилацетатом и органический слой промывают водой и насыщенным раствором соли. Органический слой сушат над безводным сульфатом магния, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Полученный сырой продукт очищают колоночной хроматографией (силикагель, элюирование с градиентом, гексан:этилацетат = от 100:0 до 50:50) с получением грубо очищенного продукта (43,1 г). Полученный продукт используют в следующей реакции без дополнительной очистки.

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1, 88, m/z 395 [М+Н]⁺.

1Н-ЯМР (CDCl₃): δ (м.д.) 7,56-7,49 (3Н, м), 7,43-7,32 (3Н, м), 6,39-6,30 (2Н, м), 5,18 (2Н, с), 3,98 (2Н, д, J=5, 3 Гц), 3, 81 (3Н, с).

[0168]

Промежуточное соединение А-1-5: 8-(Бензилокси)-7-бром-3,4-дигидрохиноксалин-2(1Н)-он

[Формула 3 6]

[0169]

Этанол (550 мл) и воду (550 мл) добавляют к метил-(3-(бензилокси)-4-бром-2-нитрофенил) глицинату (промежуточное соединение А-1-4, 43,1 г, упомянуто выше как грубо очищенный продукт), железу (97,5 г, 174 4 ммоль) и хлориду аммония (58,3 г, 10 90 ммоль) с получением суспензии, которую перемешивают при 80°С в течение 4 часов. После завершения реакции к реакционной смеси при комнатной температуре добавляют этанол (100 мл) и хлороформ (100 мл) и фильтруют полученную смесь через слой целита. Фильтрат концентрируют при пониженном давлении с получением сырого продукта (29,6 г). Полученный продукт используют в следующей реакции без дополнительной очистки.

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,51, m/z 331 [М-Н]⁺.

1Н-ЯМР (ДМСО-d₆): δ (м.д.) 9,84 (1Н, с), 7,58 (2Н, д, J=6,9 Гц), 7,43-7,30 (3Н, м), 6,99 (1Н, д, J=8,6 Гц), 6,45 (1Н, д, J=8,6 Гц), 6,22 (1Н, с), 4,93 (2Н, с), 3,68 (2Н, с).

[0170]

Промежуточное соединение А-1-6: 8-(Бензилокси)-7-бромхиноксалин-2(1Н)-он

Формула 37]

[0171]

8-(Бензилокси)-7-бром-3,4-дигидрохиноксалин-2(1Н)-он (промежуточное соединение А-1-5, 2 9,6 г, упомянуто выше как сырой продукт) растворяют в тетрапидрофуране (592 мл), к полученному раствору добавляют диоксид марганца (27,0 г, 311 ммоль) и перемешивают полученную смесь при 70°С в течение 12 часов. После завершения реакции к реакционной смеси при комнатной температуре добавляют тетрапидрофуран (300 мл) и фильтруют полученную смесь через слой целита. Фильтрат концентрируют при пониженном давлении, затем к полученному твердому остатку добавляют тетрапидрофуран (40 мл), этилацетат (250 мл) и гексан (250 мл) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 30 минут. Суспензию фильтруют и выделенный фильтрацией твердый продукт сушат при пониженной давлении с получением 8-(бензилокси)-7-бромхиноксалин-2(1Н)-она (19,9 г, выход для 3 стадий 64%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,49, m/z 331 [М+Н]⁺.

1Н-ЯМР (CDCl₃): δ (м.д.) 9,05 (1Н, уш. с), 8,18 (1Н, с), 7,55-7,48 (2Н, м), 7,47-7,36 (5Н, м), 5,18 (2Н, с).

[0172]

Промежуточное соединение А-1-7: 8-(Бензилокси)-7-бром-2-хлорхиноксалин

[Формула 38]

[0173]

8-(Бензилокси)-7-бромхиноксалин-2(1Н)-он (промежуточное соединение A-1-6, 1,0 г, 3,02 ммоль) растворяют в тионилхлориде (10 мл), к раствору добавляют N,N-диметилформамид (0,234 мл, 3,02 ммоль) и перемешивают полученную смесь при 80°С в течение 1 часа. После завершения реакции к реакционной смеси при комнатной температуре добавляют воду (30 мл), полученную смесь экстрапируют этилацетатом и затем органический слой промывают водой и насыщенным раствором соли. Органический слой сушат над безводным сульфатом магния, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Полученный сырой продукт очищают колоночной хроматографией (силикагель, элюирование с градиентом, гексан:этилацетат = от 100:0 до 60:40) с получением 8-(бензилокси)-7-бром-2-хлорхиноксалина (644 мг, выход 61%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=2,Q6, m/z 349 [М+Н]⁺.

1Н-ЯМР (CDCl₃): δ (м.д.) 8,77 (1Н, с), 7,91 (1Н, д, J=9,1 Гц), 7,75 (1Н, д, J=9,1 Гц), 7,63 (2Н, д, J=7,4 Гц), 7,42-7,31 (3Н, м), 5,48 (2Н, с).

[0174]

[Формула 39]

Способ А-2

[0175]

Промежуточное соединение А-2-3: трет-Бутил-(S)-2-((3-((трет-бутилдифенилсилил)окси)пропил)карбамоил)-4-оксопиперидин-1-карбоксилат

[Формула 40]

[0176]

(S)-1-(трет-Бутоксикарбонил)-4-оксопиперидин-2-карбоновую кислоту (промежуточное соединение А-2-1, 1, 57 г, 6, 46 ммоль) растворяют в тетрагидрофуране (33 мл), к полученному раствору при охлаждении льдом добавляют триэтиламин (1,32 мл, 9,69 ммоль) и изобутилкарбонохлоридат (1,02 мл, 7,7 5 ммоль) и перемешивают полученную смесь в течение 30 минут. Затем к реакционной смеси добавляют 3-((трет-бутилдифенилсилил)окси)пропан-1-амин (промежуточное соединение А-2-2, 2,43 г, 7,76 ммоль) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 1 часа. После завершения реакции к реакционной смеси добавляют воду (50 мл), полученную смесь экстрагируют этилацетатом и затем органический слой промывают водой и насыщенным раствором соли. Органический слой сушат над безводным сульфатом магния, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Полученный сырой продукт очищают колоночной хроматографией (силикагель, элюирование с градиентом: гексан:этилацетат = от 100:0 до 70:30) с получением трет-бутил-(S)-2-((3-((трет-бутилдифенилсилил)окси)пропил)карбамоил)-4-оксопиперидин-1-карбоксилата (2,15 г, выход 62%).

ЖКМС (ЖК-1): RT=2,26, т/z 539 [М+Н]⁺.

1Н-ЯМР (CDCl₃): δ (м.д.) 7,64 (4Н, дд, J=7,8, 1,6 Гц), 7,46-7,35 (6Н, м), 6,58 (1Н, уш. с), 4,82 (1Н, м), 3,96-3,80 (1Н, м), 3,69 (2Н, т, J=5,4 Гц), 3,55 (1Н, ддд, J=13,3, 8,3, 5,0 Гц), 3,39 (2Н, м), 2,82 (1Н, дд, J=16,5, 2,8 Гц), 2,64-2,46 (2Н, м), 2,45-2,35 (1Н, м), 1,72 (1Н, кв, J=6, 3 Гц), 1,59-1,52 (1Н, м), 1,47 (9Н, с), 1,05 (9Н, с).

[0177]

Промежуточное соединение А-2-4: трет-Бутил-(23,4R)-2-((3-((трет-бутилдифенилсилил)окси)пропил)карбамоил)-4-гидроксипиперидин-1-карбоксилат

[Формула 41]

[0178]

трет-Бутил-(S)-2-((3-((трет-бутилдифенилсилил)окси)пропил)карбамоил)-4-оксопиперидин-1-карбоксилат (промежуточное соединение А-2-3, 2,15 г, 4,00 ммоль) растворяют в тетрагидрофуране (8 мл), к полученному раствору при -78°С добавляют 1 М раствор L-Select, ride в тетрагидрофуране (6,0 мл, 6,00 ммоль) и перемешивают полученную смесь в течение 1 часа. После завершения реакции к реакционной смеси добавляют насыщенный водный раствор хлорида аммония (20 мл), полученную смесь экстрагируют этилацетатом и затем органический слой промывают водой и насыщенным раствором соли. Органический слой сушат над безводным сульфатом магния, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Полученный сырой продукт очищают колоночной хроматографией (силикагель, элюирование с градиентом, гексан:этилацетат = от 100:0 до 0:100) с получением трет-бутил-(2S,4R)-2-((3-((трет-бутилдифенилсилил)окси)пропил)карбамоил)-4-гидроксипиперидин-1-карбоксилата (1,72 г, выход 80%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=2,25, m/z 541 [М+Н]⁺.

1Н-ЯМР (CDCl₃): δ (м.д.) 7,65 (4Н, дд, J=7,8, 1,4 Гц), 7,46-7,35 (6Н, м), 6,82 (1Н, уш. с), 5,75 (1Н, уш. с), 4,81-4,70 (1Н, м), 4,08-4,00 (1Н, уш.), 3,87-3,74 (1Н, м), 3,73-3,53 (2Н, м), 3,50-3,39 (1Н, м), 3,38-3,28 (1Н, м), 3,14 (1Н, тд, J=13,3, 2,6 Гц), 2,30-2,16 (1Н, м), 1,89-1,80 (1Н, м), 1,79-1,67 (3Н, м), 1,64-1,53 (1Н, м), 1,46 (9Н, м), 1,05 (9Н, с).

[0179]

Промежуточное соединение А-2-5: трет-Бутил-(2S,4R)-2-((3-((трет-бутилдифенилсилил)окси)пропил)карбамоил)-4-((метилсульфонил)окси)пиперидин-1-карбоксилат

[Формула 42]

[0180]

трет-Бутил-(2S,4R)-2-((3-((трет-бутилдифенилсилил)окси)пропил)карбамоил)-4-гидроксипиперидин-1-карбоксилат (промежуточное соединение А-2-4, 1,72 г, 3,19 ммоль) растворяют в дихлорметане (6,4 мл), к полученному раствору при охлаждении льдом добавляют триэтиламин (0,80 мл, 5,74 ммоль) и метансульфонилхлорид (0,345 мл, 4,47 ммоль) и перемешивают полученную смесь при 0°С в течение 2 часов. Затем к реакционной смеси при комнатной температуре добавляют воду (20 мл), полученную смесь экстрагируют этилацетатом и затем органический слой промывают водой и насыщенным раствором соли. Органический слой сушат над безводным сульфатом магния, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Полученный сырой продукт (2,46 г) используют в следующей реакции без дополнительной очистки.

ЖХМС (ЖХ-1): RT=2,25, т/z 619 [М+Н]⁺.

[0181]

Промежуточное соединение А-2-6: трет-Бутил-(2S,4S)-4-азидо-2-((3-((трет-бутилдифенилсилил)океи)пропил)карбамоил)пиперидин-1-карбоксилат

[Формула 43]

[0182]

трет-Бутил-(2S,4R)-2-((3-((трет-бутилдифенилсилил)окси)пропил)карбамоил)-4-((метилсульфонил)окси)пиперидин-1-карбоксилат (промежуточное соединение А-2-5, 2,46 г, упомянуто выше как сырой продукт) растворяют в N, N-диметилформамиде (40 мл), к полученному раствору добавляют азид натрия (388 мг, 5,79 ммоль) и перемешивают полученную смесь при 90°С в течение 6 часов. После завершения реакции к реакционной смеси при комнатной температуре добавляют воду (20 мл), полученную смесь экстрагируют этилацетатом и затем органический слой промывают водой и насыщенным раствором соли. Органический слой сушат над безводным сульфатом магния, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Полученный сырой продукт очищают колоночной хроматографией (силикагель, элюирование с градиентом, гексан:этилацетат = от 100:0 до 80:20) с получением трет-бутил-(2S,4S)-4-азидо-2-((3-((трет-бутилдифенилсилил)окси)пропил)карбамоил)пиперидин-1-карбоксилата (362 мг, выход для 2 стадий 20%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=2,47, т/z 566 [М+Н]⁺.

1Н-ЯМР (CDCl₃): δ (м.д.) 7,64 (4Н, дд, J=6,5, 4,0 Гц), 7,46-7,35 (6Н, м), 6,46-5,85 (1Н, м), 4,92-4,62 (1Н, м), 4,07-3,93 (0,5Н, м), 3,91-3,75 (0,5Н, м), 2,89-2,68 (1Н, м), 2,58-2,35 (1Н, м), 3,69 (2Н, т, J=6,0 Гц), 3,49-3,29 (2Н, м), 1,91-1,83 (1Н, м), 1,73 (1Н, квинт, J=6,4 Гц), 1,49-1,23 (12Н, м), 1,05 (9Н, с), 0,91-0,84 (1Н, м).

[0183]

Промежуточное соединение А-2-7: трет-Бутил-(2S,4S)-4-амино-2-((3-((трет-бутилдифенилсилил)окси)пропил)карбамоил)пиперидин-1-карбоксилат

[Формула 44]

[0184]

трет-Бутил-(2S,4S)-4-азидо-2-((3-((трет-бутилдифенилсилил)окси)пропил)карбамоил)пиперидин-1-карбоксилат (промежуточное соединение А-2-6, 362 мг, 0,64 ммоль) растворяют в метаноле (6,4 мл), к раствору добавляют пидроксид палладия (181 мг, 50% масс.) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 2 часов в атмосфере водорода. Атмосферу в реакционной системе замещают азотом и затем реакционную смесь фильтруют через слой целита. Фильтрат концентрируют при пониженном давлении с получением трет-бутил-(2S,4S)-4-амино-2-((3-((трет-бутилдифенилсилил) окси)пропил)карбамоил)пиперидин-1-карбоксилата (345 мг, выход 97%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,93, m/z 5 40 [М+Н]⁺.

1Н-ЯМР (CDCl₃): δ (м.д.) 7,64 (4Н, дд, J=6,4, 4,0 Гц), 7,46-7,34 (6Н, м), 6,34-5,96 (1Н, м), 4,90-4,63 (1Н, м), 4,24-3,89 (1Н, м), 3,75-3,64 (2Н, м), 3,45-3,28 (3Н, м), 3,15-2,98 (0,5Н, м), 2,92-2,64 (1,5Н, м), 2,55-2,30 (1Н, м), 1,79-1,68 (3,5Н, м), 1,46 (9Н, м), 1,32-1,13 (2,5Н, м), 1,05 (9Н, м).

[0185]

[Формула 45]

Способ А-3

СпособА-3

[0186]

Промежуточное соединение А-3-1: трет-Бутил-(2S,4S)-4-((8-(бензилокси)-7-бромхиноксалин-2-ил)амино)-2-((3-((трет-бутилдифенилсилил)окси)пропил)карбамоил)пиперидин-1-карбоксилат

[Формула 46]

[0187]

трет-Бутил-(2S,4S)-4-амино-2-((3-((трет-бутилдифенилсилил)окси)пропил)карбамоил)пиперидин-1-карбоксилат (промежуточное соединение А-2-7, 345 мг, 0,64 ммоль) растворяют в диметилсульфоксиде (5,8 мл), к полученному раствору добавляют 8-(бензилокси)-7-бром-2-хлорхиноксалин (промежуточное соединение А-1-7, 202 мг, 0,5 82 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламин (0,15 2 мл, 0,87 ммоль) и перемешивают полученную смесь при 120°С в течение 12 часов. После завершения реакции к реакционной смеси добавляют воду (30 мл), полученную смесь экстрагируют этилацетатом и затем органический слой промывают водой и насыщенным раствором соли. Органический слой сушат над безводным сульфатом магния, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Полученный сырой продукт очищают колоночной хроматографией (силикагель, элюирование с градиентом, хлороформ:метанол = от 100:0 до 90:10) с получением трет-бутил-(2S,4S)-4-((8-(бензилокси)-7-бромхиноксалин-2-ил)амино)-2-((3-((трет-бутилдифенилсилил)окси)пропил)карбамоил)пиперидин-1-карбоксилата (147 мг, выход 27%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=2,31, т/z 852 [М+Н]⁺.

1Н-ЯМР (CDCl₃): δ (м.д.) 8,24-8,18 (1Н, м), 7,68-7,57 (6Н, м), 7,55-7,48 (2Н, м), 7,45-7,29 (9Н, м), 6,34 (1Н, уш. с), 5,44 (1Н, д, J=10,8 Гц), 5,29 (1Н, д, J=10,8 Гц), 4,79 (1Н, д, J=8,0 Гц), 4,48-3, 86 (1Н, м), 3,67 (2Н, т, J=8,0 Гц), 3,48-3,26 (2Н, м), 2,89-2,74 (1Н, м), 2,72-2,57 (1Н, м), 2,29 (1Н, д, J=12,0 Гц), 1,75-1,65 (2Н, м), 1,54-1,42 (10Н, м), 1,34-1,18 (2Н, м), 1,09-1,01 (10Н, м).

[0188]

Промежуточное соединение А-3-2: трет-Бутил-(2S,4S)-4-((8-(бензилокси)-7-бромхиноксалин-2-ил)амино)-2-((3-гидроксипропил)карбамоил)пиперидин-1-карбоксилат

[Формула 47]

[0189]

трет-Бутил-(2S,4S)-4-((8-(бензилокси)-7-бромхиноксалин-2-ил)амино)-2-((3-((трет-бутилдифенилсилил)окси)пропил)карбамоил)пиперидин-1-карбоксилат (промежуточное соединение А-3-1, 147 мг, 0,172 ммоль) растворяют в тетрагидрофуране (0,86 мл), к полученному раствору добавляют 1 М раствор фторида тетрабутиламмония в тетрагидрофуране (0,863 мл, 0,863 ммоль) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 2 часов. После завершения реакции реакционную смесь очищают с использованием автоматической колоночной хроматографии (силикагель, элюирование с градиентом, хлороформ:метанол = от 100:0 до 80:20) с получением трет-бутил-(2S,4S)-4-((8-(бензилокси)-7-бромхиноксалии-2-ил)амино)-2-((3-пидроксипропил)карбамоил)пиперидин-1-карбоксилата (104 мг, выход 98%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,77, m/z 614 [М+Н]⁺.

1Н-ЯМР (CDCl₃): δ (м.д.) 8,24-8,18 (1Н, м), 7,61 (2Н, д, J=7,3 Гц), 7,55-7,48 (2Н, м), 7,42-7,30 (3Н, м), 6,51 (1Н, уш. с), 5,43 (1Н, д, J=10,8 Гц), 5,30 (1Н, д, J=10,8 Гц), 5,02-4,82 (2Н, м), 4,45-3, 95 (1Н, м), 3,60-3,51 (2Н, м), 3,06-2,94 (2Н, м), 2,93-2,64 (2Н, м), 2,39-2,28 (1Н, м), 1,86-1,73 (2Н, м), 1,50 (9Н, с), 1,44-1,21 (4Н, м).

[0190]

Промежуточное соединение А-3-3: трет-Бутил-(2S,4S)-2-((3-(бензоилокси)пропил)карбамоил)-4-((8-(бензилокси)-7-бромхиноксалин-2-ил)амино)пиперидин-1-карбоксилат

[Формула 48]

[0191]

трет-Бутил-(2S,4S)-4-((8-(бензилокси)-7-бромхиноксалии-2-ил)амино)-2-((3-гидрокеипропил)карбамоил)пиперидин-1-карбоксилат (промежуточное соединение A-3-2, 104 мг, 0,170 ммоль) растворяют в смешенном растворителе дихлорметана (0,85 мл) и пиридина (0,85 мл), к полученному раствору при охлаждении льдом при 0°С добавляют бензоилхлорид (0,024 мл, 0,20 ммоль) и N,N-диметиламинпиридин (2 мп, 0,017 ммоль) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 1 часа. После завершения реакции реакционную смесь очищают с использованием автоматической колоночной хроматографии (силикагель, элюирование с градиентом, хлороформ:метанол = от 100:0 до 90:10) с получением трет-бутил-(2S,4S)-2-((3-(бензоилокеи)пропил)карбамоил)-4-((8-(бензилокси)-7-бромхиноксалин-2-ил)амино)пиперидии-1-карбоксилата (109 мг, выход 89%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=2,18, m/z 718 [М+Н]⁺.

1Н-ЯМР (CDCl₃): δ (м.д.) 8,22 (1Н, с), 8,02 (2Н, д, J=7,4 Гц), 7,61 (2Н, д, J=8,0 Гц), 7,59-7,53 (1Н, м), 7,51 (2Н, д, J=3,2 Гц), 7,44 (2H, т, J=8, 0 Гц), 7,33 (2Н, т, J=7,1 Гц), 6,66-6,32 (1Н, м), 5,45 (1Н, д, J=10,8 Гц), 5,29 (1Н, д, J=10,8 Гц), 5,12-4,88 (1Н, м), 4,84 (1Н, д, J=6,8 Гц), 4,39-4,25 (3Н, м), 3,46-3,35 (1Н, м), 3,34-3,22 (1Н, м), 2,95-2,66 (2Н, м), 2,37-2,26 (1Н, м), 1,97-1,88 (2Н, м), 1,56-1,44 (11Н, м), 1,37-1,27 (2Н, м).

[0192]

Промежуточное соединение А-3-4: 3-((2S,4S)-4-((7-Бром-8-гидроксихиноксалин-2-ил)амино)пиперидин-2-карбоксамидо)пропилбензоат

[Формула 49]

[0193]

трет-Бутил-(2S,4S)-2-((3-(бензоилокси)пропил)карбамоил)-4-((8-(бензилокеи)-7-бромхиноксалин-2-ил)амино)пиперидин-1-карбоксилат (промежуточное соединение А-3-3, 108 мг, 0,12 ммоль) растворяют в дихлорметане (2,5 мл), к раствору при охлаждении добавляют 1 М раствор трибромида бора в дихлорметане (0,742 мл, 0,74 ммоль) и затем перемешивают полученную смесь в течение 30 минут. После исчезновения исходных веществ к реакционной смеси при 0°С по каплям добавляют метанол (2,5 мл) для завершения реакции реакции. Полученную реакционную смесь очищают с помощью SCX с получением 3-((2S,45)-4-((7-бром-8-гидроксихиноксалин-2-ил)амино)пиперидин-2-карбоксамидо)пропилбензоата (77 мг, выход 97%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,52, m/z 528 [М+Н]⁺.

1Н-ЯМР (CDCl₃): δ (м.д.) 8,87 (1Н, уш. с), 8,18 (1Н, с), 8,09-8,03 (2Н, м), 7,66-7,59 (1Н, м), 7,57-7,51 (1Н, м), 7,48-7,40 (3Н, м), 7,29 (1Н, д, J=8, 4 Гц), 4,91 (1Н, д, J=5, 6 Гц), 5,81 (2Н, т, J=5,6 Гц), 5,06-4,95 (1Н, м), 3,69 (1Н, т, J=3, 9 Гц), 3,62-3,51 (2Н, м), 3,21 (1Н, д, J=12,8 Гц), 3,08 (1Н, дт, J=4,4, 3,7 Гц), 2,92-2,80 (1Н, м), 2,06 (2Н, квинт, J=6,5 Гц), 1,94-1,88 (1Н, м), 1,54-1,45 (2Н, м), 1,27 (1Н, ддд, J=12, 6, 10,0, 4,7 Гц).

[0194]

Промежуточное соединение А-3-5: трет-Бутил-(2S,4S)-2-((3-(бензоилокси)пропил)карбамоил)-4-((7-бром-8-гидроксихиноксалин-2-ил)амино)пиперидин-1-карбоксилат

[Формула 50]

[0195]

3-((2S,4S)-4-((7-Бром-8-гидроксихиноксалин-2-ил)амино)пиперидин-2-карбоксамидо)пропилбензоат (промежуточное соединение А-3-4, 77 мг, 0,146 ммоль) растворяют в дихлорметане (7,4 мл), к раствору добавляют триэтиламин (0,204 мл, 1,46 ммоль) и ди-трет-бутилдикарбонат (240 мг, 1,10 ммоль) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 1 часа. Затем реакционную смесь очищают непосредственно с использованием автоматической колоночной хроматографии (силикагель, элюирование с градиентом, хлороформ:метанол = от 100:0 до 80:20) с получением трет-бутил-(2S,4S)-2-((3-(бензоилокси) пропил)карбамоил)-4-((7-бром-8-гидроксихиноксалин-2-ил)амино)пиперидин-1-карбоксилата (77 мг, выход 84%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,98, m/z 628 [М+Н]⁺.

1Н-ЯМР (CDCl₃): δ (м.д.) 9,28-8,76 (1Н, м), 8,48-7,90 (3Н, м), 7,78-7,16 (4Н, м), 6,92-5,92 (1Н, м), 4,96-4,85 (1Н, м), 4,49-4,01 (4Н, м), 3,52-3,33 (2Н, м), 2,98 (1Н, д, J=6,7 Гц), 2,10-1,88 (2Н, м), 1,56-1,45 (11Н, м), 1,37-1,18 (4Н, м).

[0196]

Промежуточное соединение А-3-6: трет-Бутил-(2S,4S)-4-((7-бром-8-гидроксихиноксалин-2-ил)амино) -2-((3-гидроксипропил)карбамоил)пиперидин-1-карбоксилат

[Формула 51]

[0197]

трет-Бутил-(2S,4S)-2-((3-(бензоилокси)пропил)карбамоил)-4-((7-бром-8-гидроксихиноксалин-2-ил)амино)пиперидин-1-карбоксилат (промежуточное соединение А-3-5, 77 мг, 0,12 ммоль) растворяют в метаноле (2,5 мл), к раствору добавляют карбонат калия (170 мг, 1,2 3 ммоль) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 15 минут. Затем реакционную смесь очищают с использованием автоматической колоночной хроматографии (силикагель, элюирование с градиентом, хлороформ:метанол = от 100:0 до 60:40) с получением трет-бутил-(2S,4S)-4-((7-бром-8-гидроксихинокс алии-2-ил)амино)-2-((3-гидроксипропил)карбамоил)пиперидин-1-карбоксилата (45 мг, выход 70%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,47, т/z 524 [М+Н]⁺.

1Н-ЯМР (CDCl₃): δ (м.д.) 8,88 (1Н, уш. с), 8,26-8,17 (1Н, м), 7,70-7,44 (1Н, м), 7,33-7,28 (1Н, м), 6,68 (1Н, уш. с), 5,04-4,83 (2Н, м), 4,45-4,00 (2Н, м), 3,71-3,43 (5Н, м), 3,40-2,86 (2Н, м), 1,96 (1Н, д, J=12,0 Гц), 1,82-1,67 (2Н, м), 1,66-1,45 (9Н, м), 1,42-1,17 (2Н, м).

[0198]

Промежуточное соединение А.-3-7: трет-Бутил-(3²S,3⁴S)-1⁷-бром-4-оксо-9-окса-2,5-диаза-1(2,8)-хиноксалин-3(4,2)-пиперидии ациклононафан-3¹-карбоксилат

[Формула 52]

[0199]

трет-Бутил-(2S,4S)-4-((7-бром-8-гидрокеихиноксалии-2-ил)амино)-2-((3-гидроксипропил)карбамоил)пиперидин-1-карбоксилат (промежуточное соединение А.-3-6, 45 мг, 0,086 ммоль) растворяют в тетрагидрофуране (17,2 мл), к раствору добавляют трифенилфосфин (56 мг, 0,22 ммоль) и 20% раствор ди-трет-бутилазодикарбоксилата в толуоле (0,30 мл) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 12 часов. Затем реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении. Полученный сырой продукт очищают с использованием автоматической колоночной хроматографии (силикагель, элюирование с градиентом, хлороформ:метанол = от 100:0 до 90:10) с получением трет-бутил-(3²S,3⁴S) -17-бром-4-оксо-9-окса-2,5-диаза-1(2,8)-хиноксалин-3(4,2)-пиперидинациклонафан-3¹-карбоксилата (26,3 мг, выход 61%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,56, m/z 506 [М+Н]⁺.

1Н-ЯМР (CDCl₃): δ (м.д.) 8,22 (1Н, д, J=5,4 Гц), 7,60-7,52 (2Н, м), 5,16-5,04 (1,5Н, м), 4,91-4,85 (0,5Н, м), 4,47-4,38 (1Н, м), 4,35-4,26 (1, 5Н, м), 4,19-4,01 (1,5Н, м), 3,86-3,71 (1,5Н, м), 3,70-3,59 (0, 5Н, м), 3,13 (0,5Н, дт, J=16,0, 4,0 Гц), 2,95 (1,5Н, дт, J=16,0, 4,0 Гц), 2,24-2,03 (2Н, м), 1,99-1,86 (1Н, м), 1,75-1,62 (1Н, м), 1,53-1,45 (9, 5Н, м), 1,39-1,18 (1,5Н, м).

[0200]

[Формула 53]

Способ В-1

[0201]

Промежуточное соединение В-1-2: 1-(трет-Бутил)-2-метил-(S)-4-оксопиперидин-1,2-дикарбоксилат

[Формула 54]

[0202]

(S)-1-[трет-Бутоксикарбонил)-4-оксопиперидин-2-карбоновую кислоту [промежуточное соединение Е-1-1, 33,9 г,160 ммоль) растворяют 6 смеси толуола (800 мл) и метанола (266 мл), к раствору при охлаждении льдом по каплям добавляют 2 М раствор триметилсилилдиазометана 6 диэтилобом эфире [100 мл, 200 ммоль) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 3 часов. После завершения реакции к реакционной смеси при охлаждении льдом добавляют уксусную кислоту (100 мл) и концентрируют полученную смесь при пониженном давлении. Затем к концентрированной смеси добавляют воду [200 мл), экстрагируют смесь этилацетатом и органический слой промывают водой и насыщенным раствором соли. Органический слой сушат над безводным сульфатом магния, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении с получением сырого продукта (41,1 г). Полученный продукт используют в следующей реакции без дополнительной очистки.

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,12, т/ z 253 [М+Н]⁺.

1Н-ЯМР [CDCl₃): 5 (м.д.) 5,18-5,08 (0,5Н, м), 4,91-4,82 (0,5Н, м), 4,16-4,02 (1Н, м), 3,75 (3Н, с), 3,72-3,56 (1Н, м), 2,78 (2Н, д, J=6,2 Гц), 2,55-2,46 (2Н, м), 1,48 [9Н, с).

[0203]

Промежуточное соединение B-1-3: 1-(трет-Бутил)-2-метил-(2S,4R)-4-гидроксипиперидин-1,2-дикарбоксилат

[Формула 55]

[0204]

1-(трет-Бутил)-2-метил-(S)-4-оксопиперидин-1,2-дикарбоксилат (промежуточное соединение B-1-2, 11,1 г, 43,1 ммоль) растворяют в тетрагидрофуране [8 6 мл), к раствору при температуре -78°С добавляют 1 М раствор L-Selectride в тетрагидрофуране (65 мл, 64,7 ммоль) и перемешивают полученную смесь в течение 2 часов. После завершения реакции к реакционной смеси добавляют насыщенный водный раствор хлорида аммония (200 мл), полученную смесь экстрагируют этилацетатом и затем промывают органический слой водой и насыщенным раствором соли. Органический слой сушат над безводным сульфатом натрия, фильтруют и затем концентрируют при пониженном давлении. Полученный сырой продукт очищают колоночной хроматографией (силикагель, элюирование с градиентом, гексан:этилацетат = от 100:0 до 0:100) с получением 1-(трет-бутил)-2-метил-(2S,4R)-4-пидроксипиперидин-1,2-дикарбоксилата (8,69 г, выход 78%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=0,77, m/z 260 [М+Н]⁺.

1Н-ЯМР (CDCl₃): δ (м.д.) 5,07-4,57 (1Н, м), 4,19-4,08 (1Н, м), 3,96-3,60 (4Н, м), 3,47-3,21 (1Н, м), 2,42 (1Н, д, J=14,2 Гц), 1,92 (1Н, ддд, J=14,2, 6,8, 2,4 Гц), 1,79-1,62 (3Н, м), 1,47 (9Н, с).

[0205]

Промежуточное соединение В-1-4: 1-(трет-Бутил)-2-метил-(2S,4R)-4-((метилсульфонил)окси)пиперидин-1,2-дикарбокеилат

[Формула 56]

[0206]

1-(трет-Бутил)-2-метил-(2S,4R)-4-гидроксипиперидин-1,2-дикарбоксилат (промежуточное соединение В-1-3, 16,5 г, 63,6 ммоль) растворяют в дихлорметане (127 мл), к раствору при охлаждении льдом добавляют триэтиламин (36 мл, 255 ммоль) и метансульфонилхлорид (9,85 мл, 127 ммоль) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 1 часа. Затем реакционную смесь экстрагируют этилацетатом и органический слой промывают водой и насыщенным раствором соли. Органический слой сушат над безводным сульфатом магния, фильтруют и затем концентрируют при пониженном давлении. Полученный сырой продукт (21,5 г) используют в следующей реакции без дополнительной очистки.

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,32, m/z 338 [М+Н]⁺.

[0207]

Промежуточное соединение В-1-5: 1-(трет-Бутил)-2-метил-(2S,4S)-4-азидопиперидин-1,2-дикарбоксилат

[Формула 57]

[0208]

1-(трет-Бутил)-2-метил-(2S,4R)-4-((метилсульфонил)окси)пиперидин-1,2-дикарбоксилат (промежуточное соединение В-1-4, 21,5 г, упомянуто выше как сырой продукт) растворяют в N,N-диметилформамиде (319 мл), к полученному раствору добавляют азид натрия (8,29 г, 127 ммоль) и перемешивают полученную смесь при 80°С в течение 11 часов. После завершения реакции реакционную смесь экстрагируют этилацетатом и затем органический слой промывают водой и насыщенным раствором соли. Органический слой сушат над безводным сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Полученный сырой продукт (18,1 г) используют в следующей реакции без дополнительной очистки.

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,53, m/z 285 [М+Н]⁺.

1Н-ЯМР (CDCl₃): δ (м.д.) 5,12-4,60 (1Н, м), 4,24-4,13 (0,5Н, м), 4,10-4,02 (0,5Н, м), 3,81-3,72 (3Н, м), 3,43-3,32 (1Н, м), 3,11-2,89 (1Н, м), 2,56-2,38 (1Н, м), 2,04-1,85 (1Н, м), 1,75-1,60 (2Н, м), 1,52-1,39 (9Н, м).

[0209]

Промежуточное соединение В-1-6: 1-(трет-Бутил)-2-метил-(2S,4S)-4-аминопиперидин-1,2-дикарбоксилат

[Формула 58]

[0210]

1-(трет-Бутил)-2-метил-(2S,4S)-4-азидопиперидин-1,2-дикарбоксилат (промежуточное соединение В-1-5, 18,1 г, 63,7 ммоль) растворяют в метаноле (318 мл), к раствору добавляют гидроксид палладия (3,8 г, 20% масс.) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 21 часов в атмосфере водорода. Атмосферу в реакционной системе замещают азотом и затем реакционную смесь фильтруют через слой целита. Фильтрат концентрируют при пониженном давлении с получением 1-(трет-бутил)-2-метил-(2S,4S)-4-аминопиперидин-1,2-дикарбоксилата (15,0 г, выход для 3 стадий 91%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=0,81, m/z 259 [М+Н]⁺.

1Н-ЯМР (CDCl₃): δ (м.д.) 4,99 (0,5Н, д, J=4,8 Гц), 4,80 (0,5Н, д, J=4,8 Гц), 4,18-4,14 (0,5Н, м), 4,12-3,94 (1Н, м), 3,76-3,69 (4Н, м), 3,37-3,30 (0,5Н, т, J=4,0 Гц), 2,71 (1Н, т, J=11,3 Гц), 2,47-2,28 (1Н, м), 2,26-2,14 (0,5Н, м), 1,91 (0,5Н, ддд, J=14,4, 6,8, 2,6 Гц), 1,85-1,64 (2Н, м), 1,56-1,40 (9Н, м), 1,33-1,16 (1Н, м).

[0211]

Промежуточное соединение В-1-7: 1-(трет-Бутил)-2-метил-(2S,4S)-4-((8-(бензилокси)-7-бромхиноксалин-2-ил)амино)пиперидин-1,2-дикарбоксилат

[Формула 59]

[0212]

1-(трет-Бутил)-2-метил-(2S,4S)-4-аминопиперидин-1,2-дикарбоксилат (промежуточное соединение В-1-6, 11,2 г, 43,2 ммоль) растворяют в диметилсульфоксиде (79 мл), к раствору добавляют 8-(бензилокси)-7-бром-2-хлорхиноксалин (промежуточное соединение А-1-7, 13,7 г, 39,3 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламин (27,4 мл, 157 ммоль) и перемешивают полученную смесь при 100°С в течение 18 часов. Затем к реакционной смеси добавляют воду (300 мл), полученную смесь экстрагируют этилацетатом и затем органический слой промывают водой и насыщенным раствором соли. Органический слой сушат над безводным сульфатом магния, фильтруют и затем концентрируют при пониженном давлении. Полученный сырой продукт очищают колоночной хроматографией (силикагель, элюирование с градиентом, хлороформ:метанол = от 100:0 до 90:10) с получением 1-(трет-бутил) 2-метил-(2S,4S)-4-((8-(бензилокси)-7-бромхиноксалин-2-ил)амино)пиперидин-1,2-дикарбоксилата (11,7 г, выход 39%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=2,12, m/z 571 [М+Н]⁺.

1Н-ЯМР (CDCl₃): δ (м.д.) 8,19-8,13 (1Н, м), 7,63-7,50 (4Н, м), 7,44-7,28 (3Н, м), 5,34 (2Н, кВ, J=10,6 Гц), 5,16-4,87 (1Н, м), 4,79 (1Н, д, J=7,2 Гц), 4,23-4,12 (2Н, м), 3,65 (3Н, с), 3,09 (1Н, уш. с), 2,64 (1Н, д, J=12,6 Гц), 2,38-2,30 (1Н, м), 1,72 (1Н, дт, J=12,6, 6,2 Гц), 1, 54-1, 27 (10Н, м).

[0213]

Промежуточное соединение В-1-8: (2S,4S)-4-((8-(Бензилокси)-7-бромхиноксалин-2-ил)амино)-1-(трет-бутоксикарбонил)пиперидин-2-карбоновая кислота

[Формула 60]

[0214]

1-(трет-Бутил)-2-метил-(2S,4S)-4-((8-(бензилокси)-7-бромхиноксалин-2-ил)амино)пиперидин-1,2-дикарбоксилат (промежуточное соединение Б-1-7, 11,7 г, 20,6 ммоль) растворяют в метаноле (680 мл), к раствору добавляют 1 М водный раствор гидроксида натрия (206 мл) и перемешивают полученную смесь при 40°С в течение 1 часа. После завершения реакции к реакционной смеси добавляют 2 М водную соляную кислоту (103 мл), полученную смесь экстрагируют хлороформом, затем органический слой промывают водой и насыщенным раствором соли. Органический слой сушат над безводным сульфатом магния, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Полученный сырой продукт очищают колоночной хроматографией (силикагель, элюированием с градиентом, хлороформ:метанол = от 100:0 до 80:20) с получением (2S,4S)-4-((8-(бензилокси)-7-бромхиноксалин-2-ил)амино)-1-(трет-бутоксикарбонил)пиперидин-2-карбоновой кислоты (8,97 г, выход 78%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,41, m/z 555 [М-Н]⁺.

1Н-ЯМР (CDCl₃): δ (м.д.) 8,17 (1Н, уш. с), 7,62-7,41 (5Н, м), 7,40-7,27 (4Н, м), 5,35-5,15 (3Н, м), 5,12-4,84 (2Н, м), 4,12-4,00 (1Н, м), 3,20-3,12 (1Н, м), 2,69 (2Н, с), 1,47 (9Н, с), 1,02-0,95 (1Н, м).

[0215]

Промежуточное соединение В-1-9: (2S,4S)-4-((7-Бром-8-гидроксихиноксалин-2-ил)амино)пиперидин-2-карбоновая кислота

[Формула 61]

[0216]

(2S,4S)-4-((8-(Бензилокси)-7-бромхиноксалин-2-ил)амино)-1-(трет-бутоксикарбонил)пиперидин-2-карбоновую кислоту (промежуточное соединение В-1-8, 8,97 г, 16,1 ммоль) растворяют в дихлорметане (161 мл), к раствору при охлаждении льдом до 0°С добавляют 1 М раствор трибромида бора в дихлорметане (96,7 мл, 96,7 ммоль) и перемешивают полученную смесь в течение 2 часов. После исчезновения исходных веществ к реакционной смеси по каплям при 0°С добавляют трет-бутанол (160 мл) для завершения реакции. Полученную реакционную смесь очищают непосредственно с помощью SCX с получением (2S,4S)-4-((7-бром-8-гидроксихиноксалин-2-ил)амино)пиперидин-2-карбоновой кислоты (6,13 г, выход 100%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=0,89, m/z 367 [М+Н]⁺.

1Н-ЯМР (CD₃OD): δ (м.д.) 8,00 (1Н, д, J=6,6 Гц), 7,46-7,34 (2Н, м), 7,26-7,09 (2Н, м), 4, 32-4,24 (1Н, м), 3,65-3,46 (2Н, м), 3,24-3,07 (2Н, м), 2,48-2,29 (1Н, м), 2,15-1,94 (2Н, м), 1,94-1,82 (1Н, м), 1,81-1,68 (1Н, м).

[0217]

Промежуточное соединение В-1-10: (2S,4S)-4-((7-Бром-8-гидроксихиноксалин-2-ил)амино)-1-(трет-бутоксикарбонил)пиперидин-2-карбоновая кислота

[Формула 62]

[0218]

(2S,4S)-4-((7-Бром-8-гидроксихиноксалин-2-ил)амино)пиперидин-2-карбоновую кислоту (промежуточное соединение В-1-9, 5,31 г, 14,5 ммоль) растворяют в N,N-диметилформамиде (725 мл), к раствору добавляют тризтиламин (6,05 мл, 43,5 ммоль) и ди-трет-бутилдикарбонат (4,75 г, 21,8 ммоль) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 1 часа. Затем к реакционной смеси добавляют 1 М водную соляную кислоту, полученную смесь экстрагируют этилацетатом и промывают органический слой водой и насыщенным раствором соли. Органический слой сушат над безводным сульфатом магния, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Полученный сырой продукт используют в следующей реакции без дополнительной очистки.

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,08, m/z 467 [М+Н]⁺.

[0219]

[Формула 63]

Способ В-2

[0220]

Промежуточное соединение В-2-1: трет-Бутил-(2S,4S)-4-((7-бром-8-гидроксихиноксалин-2-ил)амино)-2-((3-((трет-бутилдифенилсилил)окси)пропил)карбамоил)пиперидин-1-карбоксилат

[Формула 64]

[0221]

(2S,4S)-4-((7-Бром-8-гидроксихиноксалин-2-ил)амино)-1-(трет-бутоксикарбонил)пиперидин-2-карбоновую кислоту (промежуточное соединение В-1-10, 4,23 г, 9,07 ммоль) и 3-((трет-бутилдифенилсилил)окси)пропан-1-амин (4,26 г, 13,6 ммоль) растворяют в дихлорметане (45 мл), к раствору добавляют N-метилморфолин (2,49 мл, 22,7 ммоль), гидрохлорид 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимида (5,64 г, 36,3 ммоль) и 1-гидроксибензотриазол (2,69 г, 19,9 ммоль) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 2 часов. После завершения реакции реакционную смесь экстрагируют дихлорметаном и затем органический слой промывают водой и насыщенным раствором соли. Органический слой сушат над безводным сульфатом магния, фильтруют и затем концентрируют при пониженном давлении. Полученный сырой продукт используют в следующей реакции без дополнительной очистки.

ЖХМС (ЖХ-1): RT=2,56, m/z 764 [М+Н]⁺.

[0222]

Промежуточное соединение А-3-6: трет-Бутил-(23,4S)-4-((7-бром-8-гидроксихиноксалин-2-ил)амино)-2-((3-гидроксипропил)карбамоил)пиперидин-1-карбоксилат

[Формула 65]

[0223]

трет-Бутил-(2S,4S)-4-((7-бром-8-гидроксихиноксалин-2-ил)амино)-2-((3-((трет-бутилдифенилсилил)окси)пропил)карбамоил)пиперидин-1-карбоксилат (промежуточное соединение В-2-1, 4,64 г, 6,10 ммоль) растворяют в тетрагидроф уране (30 мл), к раствору добавляют 1 М раствор фторида тетрабутиламмония в тетрагидрофуране (30 мл, 30 ммоль) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 1 часа. После завершения реакции реакционную смесь очищают с использованием автоматической колоночной хроматографии (силикагель, элюирование с градиентом, хлороформ:метанол = от 100:0 до 60:40) с получением трет-бутил-(2S,4S)-4-((7-бром-8-гидроксихиноксалин-2-ил) амино)-2-((3-гидроксипропил)карбамоил)пиперидин-1-карбоксилата (2,90 г, выход 91%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,47, m/z 524 [М+Н]⁺.

1Н-ЯМР (CDCl₃): δ (м.д.) 8,88 (1Н, уш. с), 8,26-8,17 (1Н, м), 7,70-7,44 (1Н, м), 7,33-7,28 (1Н, м), 6,68 (1Н, уш. с), 5,04-4,83 (2Н, м), 4,45-4,00 (2Н, м), 3,71-3,43 (5Н, м), 3,40-2,86 (2Н, м), 1,96 (1Н, д, J=12,0 Гц), 1, 82-1, 67 (2Н, м), 1,66-1,53 (8Н, м), 1,50-1,45 (1Н, м), 1,42-1,17 (2Н, м).

[0224]

Промежуточное соединение А-3-7: трет-Бутил-(3²S,3⁴S)-1⁷-бром-4-оксо-9-окса-2,5-диаза-1(2,8)-хиноксалин-3(4,2)-пиперидинациклонафан-3¹-карбоксилат

[Формула 66]

[0225]

трет-Бутил-(2S,4S)-4-((7-бром-8-гидроксихиноксалин-2-ил)амино)-2-((3-гидроксипропил)карбамоил)пиперидин-1-карбоксилат (промежуточное соединение В-3-6, 2,90 г, 5,55 ммоль) растворяют в ТГФ (1109 мл), к раствору добавляют трифенилфосфин (3,64 мг, 13,8 ммоль) и 20% раствор ди-трет-бутилазодикарбоксилата в толуоле (19,2 мл) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 2 часов. Затем реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении. Полученный сырой продукт очищают с использованием автоматической колоночной хроматографии (силикагель, элюирование с градиентом, хлороформ:метанол = от 100:0 до 90:10) с получением трет-бутил-(3²S,3⁴S)-1⁷-бром-4-оксо-9-окса-2,5-диаза-1(2,8)-хиноксалин-3(4,2)-пиперидинациклононафан-3¹-карбоксилата (1,96 г, выход 70%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,56, т/z 506 [М+Н]⁺.

1Н-ЯМР (CDCl₃): δ (м.д.) 8,22 (1Н, д, J=5,4 Гц), 7,60-7,52 (2Н, м), 5,16-5,04 (1,5Н, м), 4,91-4,85 (0,5Н, м), 4,47-4,38 (1Н, м), 4,35-4,26 (1, 5Н, м), 4,19-4,01 (1,5Н, м), 3,86-3,71 (1,5Н, м), 3,70-3,59 (0, 5Н, м), 3,13 (0,5Н, дт, J=16,0, 4,0 Гц), 2,95 (1,5Н, дт, J=16,0, 4,0 Гц), 2,24-2,03 (2Н, м), 1,99-1,86 (1Н, м), 1,75-1,62 (1Н, м), 1, 53-1,45 (9,5Н, м), 1,39-1,18 (1, 5Н, м).

[0226]

[Формула 67]

Способ С-1

[0227]

Промежуточное соединение С-1-1: трет-Бутил-(3²S,3⁴S)-4-оксо-1⁷-(2-(пропоксиметил) пиримидин-5-ил)-9-окса-2,5-диаза-1(2,8)-хиноксалин-3(4,2)-пиперидинациклононафан-3¹-карбоксилат

[Формула 68]

[0228]

трет-Бутил-(3²S,3⁴S)-1⁷-бром-4-оксо-9-окса-2,5-диаза-1(2,8)-хиноксалин-3(4,2)-пиперидинациклононафан-3¹-карбоксилат (промежуточное соединение А-3-7, 51 мг, 0,099 ммоль) и (2-(пропоксиметил)пиримидин-5-ил)бороновую кислоту (165 мг, 45% масс., 0,25 ммоль) растворяют в смеси 1,4-диоксана (2,0 мл) и воды (0,50 мл), к раствору добавляют карбонат калия (40 мг, 0,30 ммоль) и комплекс диклорида [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]палладия(II) и дихлорметана (20,2 мг, 0,020 ммоль) и перемешивают полученную смесь при 100°С в течение 4 часов при микроволновом облучении. Затем реакционную смесь фильтруют через слой целита и концентрируют фильтрат при пониженном давлении. Сырой продукт очищают с использованием автоматической колоночной хроматографии (аминосиликатель, элюирование, хлороформ:этилацетат = 50:50) с получением грубо очищенного продукта (313 мг). Полученный продукт используют в следующей реакции без дополнительной очистки.

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,44, m/z 578 [М+Н]⁺.

[0229]

Промежуточное соединение С-1-2: (3²S, 3⁴S)-1⁷-(2-(Пропоксиметил)пиримидин-5-ил)-9-окса-2,5-диаза-1(2,8)-хиноксалин-3(4,2)-пиперидинациклононафан-4-он

[Формула 69]

[0230]

трет-Бутил-(3²S,3⁴S)-4-оксо-1⁷-(2-(пропоксиметил)пиримидин-5-ил)-9-океа-2,5-диаза-1(2,8)-хиноксалин-3(4,2)-пиперидинациклононафан-3¹-карбоксилат (промежуточное соединение С-1-1, 313 мг, 0,54 ммоль, грубо очищенный продукт) растворяют в дихлорметане (1 мл), к раствору добавляют трифторуксусную кислоту (0,25 мл) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 14 часов. Полученную реакционную смесь грубо очищают SCX. Затем полученный продукт очищают с использованием автоматической колоночной хроматографии (аминосиликагель, элюирование с градиентом, хлороформ:метанол = от 100:0 до 90:10) с получением (3²S,3⁴S)-1⁷-(2-(пропоксиметил)пиримидин-5-ил)-9-окса-2,5-диаза-1(2,8)-хиноксалин-3(4,2)-пиперидинациклононафан-4-она (29,9 мг, выход для 2 стадий 63%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,02, m/z 478 [М+Н]⁺.

[0231]

Пример а-01-07 (конечный продукт С-1-3): (3²S,3⁴S)-3¹-Метил-1⁷-(2-(пропоксиметил)пиримидин-5-ил)-9-окса-2,5-диаза-1(2,8)-хиноксалин-3(4,2)-пиперидинациклононафан-4-он

[Формула 70]

[0232]

(3²S,3⁴S)-1⁷-(2-(Пропоксиметил)пиримидин-5-ил)-9-окса-2,5-диаза-1(2,8)-хиноксалин-3(4,2)-пиперидинациклононафан-4-он (промежуточное соединение С-1-2, 29,9 мг, 0,063 ммоль) растворяют в смеси дихлорметана (0,32 мл) и метанола (0,32 мл), к раствору добавляют 37% водный формальдегид (0,014 мл, 0,19 ммоль) и триацетоксиборогидрид натрия (20 мг, 0,094 ммоль) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 1 часа. Полученную реакционную смесь сначала грубо очищают с помощью SCX и затем очищают с использованием жидкостной колоночной хроматографии с обращенной фазой с получением (3²S,3⁴S)-3¹-метил-1⁷-(2-(пропоксиметил)пиримидин-5-ил)-9-окса-2,5-диаза-1(2,8)-хиноксалин-3(4,2)-пиперидинациклононафан-4-она (4,8 мг, выход 15%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,07, m/z 492 [М+Н]⁺.

1Н-ЯМР (CD₃OD): δ (м.д.) 9,05 (2Н, с), 8,20 (1Н, с), 7,66 (1Н, д, J=8,4 Гц), 7,41 (1Н, д, J=8,4 Гц), 4,78-4,65 (3Н, м), 4,20-4,10 (1Н, м), 3,88-3,74 (3Н, м), 3,62 (2Н, т, J=6,8 Гц), 3,57-3,48 (1Н, м), 3,36-3,33 (2Н, м), 2,93-2,73 (2Н, м), 2,57 (4Н, с), 2,26 (1Н, д, J=7,8 Гц), 2,01-1,93 (1Н, м), 1,90-1,61 (5Н, м), 0,98 (3Н, т, J=7,8 Гц).

[0233]

Соединения, представленные в таблицах ниже, синтезируют аналогичными способами. В таблицах ниже способы получения, на которые делается ссылка, указаны в колонке «Справочные способы».

[0234]

[0235]

[Формула 71]

Способ D-1

[0236]

Промежуточное соединение D-1-2: Хинолин-6-илацетат

[Формула 72]

[0237]

Хинолин-6-ол (промежуточное соединение D-1-1, 20,0 г, 138 ммоль) растворяют в дихлорметане (222 мл), к раствору при охлаждении льдом добавляют пиридин (13,3 мл, 165 ммоль) и ацетилхлорид (11,7 мл, 164 ммоль) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 1 часа. После завершения реакции к реакционной смеси добавляют насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия (300 мл) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 45 минут до прекращения вспенивания. Реакционную смесь экстрагируют хлороформом, затем органический слой промывают водой и насыщенным раствором соли. Органический слой сушат над безводным сульфатом магния, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Полученный сырой продукт (26,1 г) используют в следующей реакции без дополнительной очистки.

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1.05, m/z 188 [М+Н]⁺.

1Н-ЯМР (CDCl₃): δ (м.д.) 8,91 (1Н, дд, J=4,2, 1,7 Гц), 8,13 (2Н, д, J=1,7 Гц), 7,57 (1Н, д, J=2,6 Гц), 7,47 (1Н, дд, J=8,3, 2,6 Гц), 7,42 (1Н, дд, J=8,3, 4,2 Гц), 2,37 (3Н, с).

[0238]

Промежуточное соединение D-1-3: 3-Бромхинолин-6-илацетат

[Формула 73]

[0239]

Хинолин-6-илацетат (промежуточное соединение D-1-2, 26,1 г, упомянуто выше как сырой продукт) растворяют в тетрахлориде углерода (500 мл), к раствору независимо при охлаждении льдом и с исользованием капельной воронки добавляют пиридин (28 мл, 343 ммоль) и бром (50 г, 313 ммоль). Затем полученную смесь перемешивают при 90°С в течение 3 часов. После завершения реакции к реакционной смеси добавляют дихлорметан (300 мл) и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия (250 мл) добавляют и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 15 минут. Органический слой сушат над безводным сульфатом магния, фильтруют и затем концентрируют при пониженном давлении. Сырой продукт очищают с использованием автоматической колоночной хроматографии (силикагель, элюирование с градиентом, хлороформ:метанол = от 100:0 до 90:10) с получением 3-бромхинолин-6-илацетата (25,9 г, выход 71%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,46, m/z 266 [М+Н]⁺.

1Н-ЯМР (CDCl₃): δ (м.д.) 8,89 (1Н, д, J=2,1 Гц), 8,28 (1Н, д, J=2,1 Гц), 8,10 (1Н, д, J=8,9 Гц), 7,52-7,45 (2Н, м), 2,37 (3Н, с).

[0240]

Промежуточное соединение D-1-4: 3-Бромхинолин-6-ол

[Формула 74]

[0241]

3-Бромхинолин-6-илацетат (промежуточное соединение D-1-3, 25,9 г, 97,6 ммоль) растворяют в метаноле (130 мл), к раствору добавляют воду (78 мл) и карбонат калия (27,0 г, 195 ммоль) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 1 часа 30 минут. После завершения реакции метанол выпаривают при пониженном давлении. Сырой продукт промывают 3 раза водой (20 мл), затем сушат при 40°С в течение 4 часов при пониженном давлении с получением 3-бромхинолин-6-ола (21,0 г, выход 96%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,19, m/z 224 [М+Н]⁺.

1Н-ЯМР (CDCl₃): δ (м.д.) 8,75 (1Н, д, J=2,2 Гц), 8,16 (1Н, д, J=2,2 Гц), 7,99 (1Н, д, J=9,3 Гц), 7,32 (1Н, дд, J=9,3, 2,6 Гц), 7,03 (1Н, д, J=2,6 Гц), 5,24 (1Н, уш. с).

[0242]

Промежуточное соединение D-1-5: 3-Бром-5-йодхинолин-6-ол

[Формула 75]

[0243]

3-Бромхинолин-6-ол (промежуточное соединение D-1-4, 21,0 г, 93,8 ммоль) суспендируют в 2 М водном растворе гидроксида натрия (204 мл), к полученному раствору по каплям в течение 45 минут добавляют раствор, содержащий йод (28,6 г, 112 ммоль), растворенный в 20% водном растворе йодида калия (йодид калия 54 г/вода 270 мл), и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 1 часа. После завершения реакции к реакционной смеси добавляют уксусную кислоту (27 мл), перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 1 часа и затем фильтруют. Сырой продукт промывают 3 раза водой (100 мл) и сушат при 40°С в течение 12 часов при пониженном давлении с получением 3-бром-5-йодхинолин-6-ола (33,6 г).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,54, m/z 349 [М+Н]⁺.

1Н-ЯМР (CDCl₃): δ (м.д.) 8,73 (1Н, д, J=2,1 Гц), 8,42 (1Н, дд, J=2,1, 0,6 Гц), 7,98 (1Н, д, J=9,2 Гц), 7,49 (1Н, д, J=9,2 Гц), 5,98 (1Н, уш. с).

[0244]

Промежуточное соединение D-1-6: 6-(Бензилокси)-3-бром-5-йодхинолин

[Формула 76]

[0245]

3-Бром-5-йодхинолин-6-ол (промежуточное соединение D-1-5, 33,6 г, 93,8 ммоль) растворяют в N,N-диметилформамиде (313 мл), к раствору добавляют карбонат цезия (36,6 г, 112 ммоль) и бензилбромид (12,3 мл, 103 ммоль) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 2 часов. После завершения реакции к реакционной смеси добавляют воду (300 мл), полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 45 минут и затем фильтруют. Сырой продукт сушат при пониженном давлении с получением 6-(бензилокси)-3-бром-5-йодхинолина (39,9 г, выход 96%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=2,32, m/z 440 [М+Н]⁺.

1Н-ЯМР (CDCl₃): δ (м.д.) 8,73 (1Н, д, J=2,1 Гц), 8,64 (1Н, д, J=2,1 Гц), 8,02 (1Н, д, J=9,2 Гц), 7,53 (2Н, д, J=7,6 Гц), 7,47-7,39 (3Н, м), 7,38-7,31 (1Н, м), 5,35 (2Н, с).

[0246]

Промежуточное соединение D-1-7: (6-(Бензилокси)-3-бромхинолин-5-ил)бороновая кислота

[Формула 77]

[0247]

6-(Бензилокси)-3-бром-5-йодхинолин (промежуточное соединение D-1-6, 17,6 г, 40,0 ммоль) растворяют в тетрагидрофуране (400 мл) и к полученному раствору при комнатной температуре добавляют триметилборат (9,8 мл, 87,9 ммоль). Реакционную смесь охлаждают до -78°С и по каплям в течение 15 минут добавляют 2 М раствор хлорида изопропилмапния в тетрагидрофуране (50 мл, 100 ммоль). Полученную смесь перемешивают в течение 2 часов, нагревая до комнатной температуры. После завершения реакции к реакционной смеси добавляют уксусную кислоту (200 мл) и воду (200 мл) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 30 минут. Реакционную смесь экстрагируют этилацетатом, органический слой промывают водой и насыщенным раствором соли. Органический слой сушат над безводным сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Полученный сырой продукт (11,7 г) используют в следующей реакции без дополнительной очистки.

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,45, m/z 358 [М+Н]⁺.

[0248]

Промежуточное соединение D-1-8: 6-(Бензилокси)-3-бромхинолин-5-ол

[Формула 78]

[0249]

(6-(Бензилокси)-3-бромхинолин-5-ил)бороновую кислоту (промежуточное соединение D-1-7, 11,5 г, упомянуто выше как сырой продукт) растворяют в ацетоне (400 мл), к раствору добавляют воду (200 мл) и оксон (40,2 г, 65,6 ммоль) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 1 часа. После завершения реакции к реакционной смеси добавляют насыщенный водный раствор тиосульфата натрия (200 мл), полученную смесь экстрагируют хлороформом и промывают органический слой водой и насыщенным раствором соли. Органический слой сушат над безводным сульфатом магния, фильтруют и затем концентрируют при пониженном давлении. Полученный сырой продукт (10,6 г) используют в следующей реакции без дополнительной очистки.

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,69, m/z 330 [М+Н]⁺.

1Н-ЯМР (CDCl₃): δ (м.д.) 8,76 (1Н, д, J=2,2 Гц), 8,65-8,60 (1Н, м), 7,63 (1Н, д, J=9,3 Гц), 7,50 (1Н, д, J=9,3 Гц), 7,48-7,35 (5Н, м), 6,09 (1Н, с), 5,25 (2Н, с).

[0250]

[Формула 79]

Способ D-2

[0251]

Промежуточное соединение D-2-2: 1-(трет-Бутил)-2-метил-(2S,4S)-4-((6-(бензилокси)-5-((триизопропилсилил)окси)хинолин-3-ил)амино)пиперидин-1,2-дикарбоксилат

[Формула 80]

[0252]

6-(Бензилокси)-3-бром-5-((триизопропилсилил)окси)хинолин (промежуточное соединение D-2-1, 3,60 г, 7,41 ммоль) и 1-(трет-бутил)-2-метил-(2S,4S)-4-аминопиперидин-1,2-дикарбоксилат (промежуточное соединение B-1-6, 3,20 г, 12,4 ммоль) растворяют в толуоле (22 мл), к раствору добавляют метансульфонат [(2-ди-трет-бутилфосфино-3,6-диметокси-2',4',6'-триизопропил-1,1'-бифенил)-2-(2'-амино-1,1'-бифенил)]палладия(II) (320 мг, 0,37 ммоль) и фосфазеновое основание P₂-Et (5 мл, 15 ммоль) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 30 минут. После завершения реакции реакционную смесь очищают с использованием автоматической колоночной хроматографии (силикатель, элюирование с градиентом, хлороформ:метанол = от 100:0 до 80:20) с получением 1-(трет-бутил)-2-метил-(2S,4S)-4-((6-(бензилокси)-5-((триизопропилсилил)окси)хинолин-3-ил)амино)пиперидин-1,2-дикарбоксилата (2,10 г, выход 43%).

ЖХМС (ЖХ-6): RT=2,10, m/z 664 [М+Н]⁺.

1Н-ЯМР (CDCl₃): δ (м.д.) 8,24 (1Н, д, J=2,8 Гц), 7,52-7,28 (9Н, м), 7,15 (1Н, д, J=9,2 Гц), 5,25-5,08 (0,5Н, м), 4,93 (0,5Н, уш. с), 4,18 (0,5Н, д, J=14,2 Гц), 4,05 (0,5Н, д, J=14,2 Гц), 3,80-3,71 (3Н, м), 3,47-3,30 (1Н, м), 3,22-2,95 (1Н, м), 2,58 (1Н, уш. с), 2,41-2,16 (1Н, м), 2,15-1,89 (1Н, м), 1,80-1,61 (1Н, м), 1,53-1,42 (9Н, м), 1,36-1,17 (4Н, м), 1,03 (18Н, д, J=7, 3 Гц).

[0253]

Промежуточное соединение D-2-3: (2S,4S)-4-((6-(Бензилокси)-5-((триизопропилсилил)окси)хинолин-3-ил)амино)-1-(трет-бутоксикарбонил)пиперидин-2-карбоновая кислота

[Формула 81]

[0254]

1-(трет-Бутил)-2-метил-(2S,4S)-4-((6-(бензилокси)-5-((триизопропилсилил)окси)хинолин-3-ил)амино)пиперидин-1,2-дикарбоксилат (промежуточное соединение D-2-2, 2,10 г, 3,16 ммоль) растворяют в метаноле (210 мл), к раствору добавляют 1 М водный раствор гидроксида натрия (32 мл) и перемешивают полученную смесь при 40°С в течение 15 часов. После завершения реакции к реакционной смеси добавляют 1 М водную соляную кислоту (33 мл), экстрагируют полученную смесь хлороформом, затем органический слой промывают водой и насыщенным раствором соли. Органический слой сушат над безводным сульфатом магния, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Полученный сырой продукт (2,15 г) используют в следующей реакции без дополнительной очистки.

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,95, m/z 650 [М+Н]⁺.

[0255]

Промежуточное соединение D-2-4: трет-Бутил-(2S,4S)-4-((6-(бензилокси)-5-((триизопропилсилил)окси)хинолин-3-ил)амино)-2-((2-фтор-3-гидроксипропил)карбамоил)пиперидин-1-карбоксилат

[Формула 82]

[0256]

(2S,4S)-4-((6-(Бензилокси)-5-((триизопропилсилил)окси)хинолин-3-ил)амино)-1-(трет-бутоксикарбонил)пиперидин-2-карбоновую кислоту (промежуточное соединение D-2-3, 2,15 г, 3,16 ммоль) и 3-амино-2-фторпропан-1-ол (348 мг, 3,79 ммоль) растворяют в N,N-диметилформамиде (16 мл), к раствору добавляют N-метилморфолин (0,87 мл, 7,90 ммоль), гидрохлорид 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимида (2,45 г, 12,6 ммоль) и 1-гидроксибензотриазол (1,01 г, 6,96 ммоль) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 30 минут. После завершения реакции реакционную смесь экстрагируют этилацетатом, органический слой промывают водой и насыщенным раствором соли. Органический слой сушат над безводным сульфатом магния, фильтруют и затем концентрируют при пониженном давлении. Сырой продукт очищают с использованием автоматической колоночной хроматографии (силикагель, элюирование с градиентом, этилацетат:метанол = от 100:0 до 98:2) с получением трет-бутил-(2S,4S)-4-((6-(бензилокси)-5-((триизопропилсилил)окси)хинолин-3-ил)амино)-2-((2-фтор-3-гидроксипропил)карбамоил)пиперидин-1-карбоксилата (886 мг, выход 39%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=2,35, m/z 725 [М+Н]⁺.

1Н-ЯМР (CDCl₃): δ (м.д.) 8,27-8,23 (1H, м), 7,54-7,46 (1H, м), 7,44-7,28 (6H, м), 7,14 (1Н, д, J=9,2 Гц), 5,16 (2Н, с), 4,98 (1Н, уш. с), 4,77-4,44 (1Н, м), 4,12 (1Н, кв, J=7,2 Гц), 3,71 (5Н, м), 3,28-3,10 (1Н, м), 2,96 (1Н, уш. с), 2,75-2,49 (1Н, м), 2,29 (1Н, д, J=10,8 Гц), 2,05 (1Н, с), 1,54-1,47 (1Н, м), 1,35-1,17 (9Н, м), 1,35-1,17 (5Н, м), 1,03 (18Н, д, J=7,3 Гц).

[0257]

Промежуточное соединение D-2-5: трет-Бутил-(2S,4S)-4-((6-(бензилокси)-5-гидроксихинолин-3-ил)амино)-2-((2-фтор-3-гидроксипропил)карбамоил)пиперидин-1-карбоксилат

[Формула 83]

[0258]

трет-Бутил-(2S,4S)-4-((6-(бензилокси)-5-((триизопропилсилил)окси)хинолин-3-ил)амино)-2-((2-фтор-3-гидроксипропил)карбамоил)пиперидин-1-карбоксилат (промежуточное соединение D-2-4, 886 мг, 1,22 ммоль) растворяют в тетрапидрофуране (6,1 мл), к раствору добавляют 1 М раствор фторида тетрабутиламмония в тетрапидрофуране (2,44 мл, 2,44 ммоль) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 30 минут. После завершения реакции реакционную смесь очищают с использованием автоматической колоночной хроматографии (силикагель, элюирование с градиентом, хлороформ:метанол = от 100:0 до 80:20) с получением трет-бутил-(2S,4S)-4-((6-(бензилокси)-5-гидроксихинолин-3-ил)амино)-2-((2-фтор-3-гидроксипропил)карбамоил)пиперидин-1-карбоксилата (660 мг, выход 95%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,46, m/z 569 [М+Н]⁺.

1Н-ЯМР (CDCl₃): δ (м.д.) 8,29 (1Н, д, J=2,8 Гц), 7,55-7,28 (6Н, м), 7,22-7,12 (2Н, м), 6,92-6,37 (1Н, м), 6,03 (1Н, уш. с), 4.99 (1Н, уш. с), 4,73 (0,5Н, уш. с), 4,61 (0,5Н, уш. с), 4,46-4,06 (2Н, м), 3,93-3,70 (3Н, м), 3,66 (2Н, уш. с), 3,10-2,95 (2Н, м), 2,93-2,57 (2Н, м), 2,10 (2Н, д, J=11,8 Гц), 1,53-1,48 (9Н, м), 1,47-1,22 (2Н, м).

[0259]

Промежуточное соединение D-2-6: трет-Бутил-(3²S,3⁴S)-1⁶-(бензилокси)-7-фтор-4-оксо-9-окса-2,5-диаза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-3¹-карбоксилат

[Формула 84]

[0260]

трет-Бутил-(2S,4S)-4-((6-(бензилокси)-5-гидроксихинолин-3-ил)амино)-2-((2-фтор-3-гидроксипропил)карбамоил)пиперидин-1-карбоксилат (промежуточное соединение D-2-5, 660 мг, 1,161 ммоль) растворяют в толуоле (240 мл), к раствору добавляют трифенилфосфин (773 мг, 2,90 ммоль) и 20% раствор ди-трет-бутил-азодикарбоксилата в толуоле (4,16 мл, 3,48 ммоль) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении. Полученный сырой продукт очищают с использованием автоматической колоночной хроматографии (силикагель, элюирование с градиентом, хлороформ:метанол = от 100:0 до 90:10) с получением трет-бутил-(3²S, 3⁴S)-1⁶-(бензилокси)-7-фтор-4-оксо-9-окса-2,5-диаза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-3¹-карбоксилата (431 мг, выход 67%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,62, m/z 551 [М+Н]⁺.

1Н-ЯМР (CDCl₃): δ (м.д.) 8,29 (1Н, д, J=2,8 Гц), 7,72-7,62 (1Н, м), 7,53-7,28 (5Н, м), 7,21 (1Н, д, J=9,4 Гц), 5,91 (1Н, д, J=7,2 Гц), 5,31 (1Н, д, J=12,0 Гц), 5,22 (1Н, д, J=12,0 Гц), 4,96 (0,5Н, уш. с), 4,91 (0,5Н, уш. с), 4,81 (0,5Н, уш. с), 4,61 (1Н, дд, J=8,9, 3,5), 4,48-4,32 (1, 5Н, м), 4,07-3,99 (1Н, м), 3,78-3,71 (2Н, м), 3,68-3,57 (1Н, м), 3,56-3,37 (2Н, м), 2,72 (1Н, д, J=11,6 Гц), 1,99-1,92 (1Н, м), 1,85 (2Н, тд, J=6,8, 3,2 Гц), 1,73-1,59 (1Н, м), 1,53-1,39 (9Н, м).

[0261]

[Формула 85]

Способ D-3

[0262]

Промежуточное соединение D-3-1: трет-Бутил-(3²S,3⁴S)-7-фтор-1⁶-гидрокси-4-оксо-9-окса-2,5-диаза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафен-3¹-карбоксилат

[Формула 86]

[0263]

трет-Бутил-(3²S,3⁴S)-1⁶-(бензилокси)-7-фтор-4-окео-9-окса-2,5-диаза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-3¹-карбоксилат (промежуточное соединение D-2-6, 325 мг, 0,5 9 ммоль) растворяют в смеси метанола (3 мл) и тетрагидрофурана (3 мл), к раствору добавляют гидроксид палладия (65 мг, 20% масс.) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 18 часов в атмосфере водорода. Атмосферу в реакционной замещают азотом и затем реакционную смесь фильтруют через слой целита. Фильтрат концентрируют при пониженном давлении с получением трет-бутил- (3²S,3⁴S)-7-фтор-1⁶-гидрокси-4-оксо-9-окса-2,5-дмаза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафен-3¹-карбоксилата (330 мг, выход 92%) в виде сырого продукта. Сырой продукт используют в следующей реакции без дополнительной очистки.

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,13, m/z 461 [М+Н]⁺.

[0264]

Промежуточное соединение D-3-2: трет-Бутил-(3²S,3⁴S)-7-фтор-4-оксо-1⁶-(((трифторметил)сульфонил)окси)-9-окса-2,5-диаза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафен-3¹-карбоксилат

[Формула 87]

[0265]

трет-Бутил-(3²S,3⁴S)-7-фтор-1⁶-гидрокси-4-оксо-9-окса-2,5-диаза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафен-3¹-карбоксилат (промежуточное соединение D-3-1, 330 мг, 0,72 ммоль) растворяют в 1,4-диоксане (7,2 мл), к раствору добавляют N,N-диметилформамид (6 капель), N,N-диизопропилэтиламин (0,748 мл, 4,30 ммоль) и N-фенил-бис(трифторметансульфонимид) (824 мг, 2,30 ммоль) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 7 часов. После завершения реакции реакционную смесь очищают с использованием автоматической колоночной хроматографии (силикагель, элюирование с градиентом, хлороформ:метанол = от 100:0 до 90:10) с получением трет-бутил- (3²S,3⁴S)-7-фтор-4-оксо-1⁶-(((трифторметил)сульфонил)окси)-9-окса-2,5-диаза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафен-3¹-карбоксилата (420 мг, 99%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,65, m/z 593 [М+Н]⁺.

1Н-ЯМР (ДМСО-d₆): δ (м.д.) 8,55 (1Н, д, J=2,6 Гц), 8,18 (1Н, д, J=7,0 Гц), 7,75 (1Н, д, J=9,2 Гц), 7,23 (1Н, д, J=7,9 Гц), 7,05 (1Н, с), 6,93-6,87 (1Н, м), 5,14 (0,5Н, уш. с), 5,08-4,93 (0,5Н, м), 4,71 (0,5Н, д, J=2,4 Гц), 4,65-4,52 (0,5Н, м), 4,46-4,22 (2Н, м), 4,11 (1Н, уш. с), 3,98 (1Н, д, J=9,0 Гц), 3,65-3,48 (3Н, м), 3,29-3,11 (2Н, м), 1,99-1,87 (1Н, м), 1,59 (1Н, д, J=13,4 Гц), 1,42-1,23 (9Н, м).

[0266]

Промежуточное соединение D-3-3: трет-Бутил-(3²S,3⁴S)-7-фтор-4-оксо-1⁶-(2-(пропоксиметил)пиримидин-5-ил)-9-окса-2,5-диаза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-3¹-карбоксилат

[Формула 88]

[0267]

трет-Бутил-(3²S,3⁴S)-7-фтор-4-оксо-1⁶-(((трифторметил)сульфонил)окси)-9-окса-2,5-диаза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафен-3¹-карбоксилат (промежуточное соединение D-3-2, 420 мг, 0,71 ммоль) и 2-(пропоксиме тил)-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиримидин (1,30 г, 31% масс., 1,77 ммоль) растворяют в смеси 1,4-диоксана (2,8 мл) и воды (0,28 мл), к раствору добавляют карбонат цезия (705 мг, 2,12 ммоль) и комплекс дихлорида [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]палладия(II) и дихлорметана (117 мг, 0,14 ммоль) и перемешивают полученную смесь при 100°С в течение 2 часов при микроволновом облучении. Реакционную смесь фильтруют через слой целита, фильтрат концентрируют при пониженном давлении и сырой продукт очищают с использованием автоматической колоночной хроматографии (силикагель, элюирование с градиентом, хлороформ:метанол = от 100:0 до 90:10) с получением трет-бутил-(3²S,3⁴S)-7-фтор-4-оксо-1⁶-(2-(пропоксиметил)пиримидин-5-ил)-9-окса-2,5-диаза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-3¹-карбоксилата (180 мг, выход 43%) в виде грубо очищенного продукта. Грубо очищенный продукт используют в следующей реакции без дополнительной очистки.

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,44, m/z 595 [М+Н]⁺.

[0268]

Промежуточное соединение D-3-4: (3²S,3⁴S)-7-Фтор-1⁶-(2-(пропоксиметил)пиримидин-5-ил)-9-окса-2,5-диаза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-4-он

[Формула 89]

[0269]

трет-Бутил-(3²S,3⁴S)-7-фтор- 4-оксо-1⁶-(2-(пропоксиметил)пиримидин-5-ил)-9-окса-2,5-диаза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-3¹-карбоксилат (промежуточное соединение D-3-3, 180 мг, 0,30 ммоль) растворяют в дихлорметане (3,0 мл), к раствору добавляют трифторуксусную кислоту (0,75 мл) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 30 минут. Полученную реакционную смесь грубо очищают с помощью SCX с получением (3²S, 3⁴S)-7-фтор-1⁶-(2-(пропоксиметил)пиримидин-5-ил)-9-окса-2,5-диаза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-4-она (148 мг, выход 98%). Грубо очищенный продукт используют в следующей реакции без дополнительной очистки.

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,01, m/z 495 [М+Н]⁺.

[0270]

Пример а-02-02 (конечный продукт D-3-5): (3²S,3⁴S)-7-Фтор-3¹-метил-1⁶-(2-(пропоксиметил)пиримидин-5-ил)-9-окса-2,5-диаза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-4-он

[Формула 90]

[0271]

(3²S,3⁴S)-7-Фтор-1⁶-(2-(пропоксиметил)пиримидин-5-ил)-9-окса-2,5-диаза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-4-он (промежуточное соединение D-3-4, 148 мг, 0,30 ммоль) растворяют в смеси дихлорметана (1,5 мл) и метанола (1,5 мл), к раствору добавляют 37% водный формальдегид (0,068 мл, 0,91 ммоль) и триацетоксиборогидрид натрия (96 мг, 0,45 ммоль) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 1 часа. Полученную реакционную смесь грубо очищают с помощью SCX и затем очищают жидкостной колоночной хроматографией с обращенной фазой с получением (3²S,3⁴S)-7-фтор-3¹-метил-1⁶-(2-(пропоксиметил)пиримидин-5-ил)-9-окса-2,5-диаза-1(3,5)-хинолиыа-3(4,2)-пиперидинациклононафан-4-она (106 мг, выход для 2 стадий 69%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,11, m/z 50 9 [М+Н]⁺.

1Н-ЯМР (CDCl₃): δ (м.д.) 9,07 (2Н, с), 8,43 (1Н, д, J=2,7 Гц), 7,87 (1Н, д, J=8,7 Гц), 7,46-7,39 (2Н, м), 6,64 (1Н, уш. с), 5,20-4,87 (1Н, м), 4,83 (2Н, с), 4,23-4,10 (1Н, м), 3,97-3,78 (3Н, м), 3,74-3,62 (3Н, м), 3,30-3,20 (2Н, м), 2,84-2,76 (1Н, м), 2,41 (3Н, с), 2,34 (1Н, уш. с), 2,21 (1Н, д, J=13,1 Гц), 2,03 (1Н, д, J=9,2 Гц), 1,80-1,63 (4Н, м), 0,99 (3Н, т, J=7,4 Гц).

[0272]

[Формула 91]

Способ Е-1

[0273]

Промежуточное соединение Е-1-1: 6-(Бензилокси)-3-бром-5-(3-((трет-бутилдифенилсилил)окси)пропокси)хинолин

[Формула 92]

[0274]

6-(Бензилокси)-3-бромхинолин-5-ол (промежуточное соединение D-1-8, 3,00 г, 9,1 ммоль) растворяют в толуоле (91 мл), к раствору добавляют 3-((трет-бутилдифенилсилил)окси)пропан-1-ол (4,2 г, 18,2 ммоль), трифенилфосфин (4,80 г, 18,2 ммоль) и ди-трет-бутилазодикарбоксилат (18,2 ммоль) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 1 часа. После завершения реакции растворитель удаляют при пониженном давлении, сырой продукт грубо очищают с использованием автоматической колоночной хроматографии (силикагель, элюирование с градиентом, гексан:этилацетат = от 100:0 до 70:30) с получением 6-(бензилокси)-3-бром-5-(3-((трет-бутилдифенилсилил)окси)пропокси)хинолина (6,49 г) в виде грубо очищенного продукта. Грубо очищенный продукт используют в следующей реакции без дополнительной очистки.

ЖХМС (ЖХ-6): RT=2,71, m/z 626 [М+Н]⁺.

[0275]

Промежуточное соединение Е-1-2: 3-((6-(Бензилокси)-3-бромхинолин-5-ил)окси)пропан-1-ол

[Формула 93]

[0276]

6-(Бензилокси)-3-бром-5-(3-((трет-бутилдифенилсилил)окси)пропокси)хинолин (промежуточное соединение Е-1-1, 6,49 г, 10,36 ммоль) растворяют в тетрагидрофуране (80 мл), к раствору добавляют фторид тетрабутиламмония (30 мл, 1 М раствор в ТГФ) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 16 часов. После завершения реакции реакционную смесь экстрагируют этилацетатом и промывают органический слой водой и насыщенным раствором соли. Органический слой сушат над безводным сульфатом магния, фильтруют и затем концентрируют при пониженном давлении. Сырой продукт очищают с использованием автоматической колоночной хроматографии (силикагель, элюирование с градиентом, хлороформ:метанол = от 100:0 до 50:50) с получением 3-((6-(бензилокси)-3-бромхинолин-5-ил)окси)пропан-1-ола (4,72 г) в виде грубо очищенного продукта.

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1, 66, m/z 388 [М+Н]⁺.

1Н-ЯМР (CDCl₃): δ (м.д.) 8,77 (1Н, д, J=2,2 Гц), 8,58 (1Н, дд, J=2,2, 0,7 Гц), 7,93-7,75 (1Н, м), 7,55-7,29 (6Н, м), 5,27 (2Н, с), 4,28 (2Н, т, J=5,8 Гц), 3,90 (2Н, кв, J=5,8 Гц), 3,70 (1Н, уш. с), 2,11-2,02 (2Н, м).

[0277]

Промежуточное соединение Е-1-3: 2-(3-((6-(Бензилокси)-3-бромхинолин-5-ил)окси)пропил)-1-(трет-бутил)-(2S,4S)-4-азидопиперидии-1,2-дикарбоксилат

[Формула 94]

[0278]

3-((6-(Бензилокси)-3-бромхинолин-5-ил)окси)пропан-1-ол (промежуточное соединение Е-1-2, 4,02 г, 10,3 ммоль) и (2S,4S)-4-азидо-1-(трет-бутоксикарбонил)пиперидин-2-карбоновую кислоту (4,81 г, 17,8 ммоль) растворяют в дихлорметане (100 мл), к раствору добавляют гидрохлорид 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида (4,06 г, 21,1 ммоль) и N,N-диметиламинопиридин (2,70 г, 22,1 ммоль) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 3 часов. После завершения реакции реакционную смесь экстрагируют дихлорметаном и промывают органический слой водой и насыщенным раствором соли. Органический слой сушат над безводным сульфатом магния, фильтруют и затем концентрируют при пониженном давлении. Сырой продукт очищают с использованием автоматической колоночной хроматографии (силикагель, элюирование с градиентом, гексан:этилацетат = от 90:10 до 0:100) с получением 2-(3-((6-(бензилокси)-3-бромхинолин-5-ил)окси)пропил)-1-(трет-бутил)-(2S,4S)-4-азидопиперидин-1,2-дикарбоксилата (5,69 г) в виде грубо очищенного продукта. Грубо очищенный продукт используют в следующем реакции без дополнительной очистки.

ЖХМС (ЖХ-1): RT=2,36, m/z 640 [М+Н]⁺.

[0279]

Промежуточное соединение Е-1-4: 2-(3-((6-(Бензилокси)-3-бромхинолин-5-ил)окси)пропил)-1-(трет-бутил)-(2S,4S)-4-аминопиперидин-1,2-дикарбоксилат

[Формула 95]

[0280]

2-(3-((6-(Бензилокси)-3-бромхинолин-5-ил)окси)пропил)-1-(трет-бутил)-(2S,4S)-4-азидопиперидин-1,2-дикарбоксилат (промежуточное соединение Е-1-3, 5,69 г, 8,88 ммоль) растворяют в тетрагидрофуране (100 мл), к раствору добавляют трифенилфосфин (5,0 г, 19,0 ммоль) и воду (5,0 мл) и перемешивают полученную смесь при 70°С в течение 15 часов. После завершения реакции растворитель удаляют при пониженном давлении, сырой продукт очищают с использованием автоматической колоночной хроматографии (силикагель, элюирование с градиентом, гексан:этилацетат = от 90:10 до 0:100) с получением 2-(3-((6-(бензилокси)-3-бромхинолин-5-ил)окси)пропил)-1-(трет-бутил)-(2S,4S)-4-аминопиперидин-1,2-дикарбоксилата (5,78 г) в виде грубо очищенного продукта. Грубо очищенный продукт используют в следующей реакции без дополнительной очистки.

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,70, m/z 614 [М+Н]⁺.

[0281]

Промежуточное соединение Е-1-5: трет-Бутил-(3²S,3⁴S)-1⁶-(бензилокси)-4-оксо-5,9-диокса-2-аза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-3¹-карбоксилат

[Формула 96]

[0282]

2-(3-((6-(Бензилокси)-3-бромхинолин-5-ил)окси)пропил)-1-(трет-бутил)(2S,4S)-4-аминопиперидин-1,2-дикарбоксилат (промежуточное соединение Е-1-4, 5,46 г, 8,89 ммоль) растворяют в 1,4-диоксане (90 мл), к раствору добавляют карбонат цезия (9,00 г, 27,6 ммоль) и метансульфонат [(2-ди-трет-бутилфосфино-2',4',6'-триизопропил-1,1'-бифенил)-2-(2'-амино-1,1'-бифенил)]палладия(II) (1,10 г, 1,38 ммоль) и перемешивают полученную смесь при 120°С в течение 3 дней. После завершения реакции реакционную смесь фильтруют через слой целита и концентрируют фильтрат при пониженном давлении. Полученный сырой продукт очищают с использованием автоматической колоночной хроматографии (силикагель, элюирование с градиентом, гексан:этилацетат = от 90:10 до 0:100) с получением трет-бутил-(3²S,3⁴S)-1⁶-(бензилокси)-4-оксо-5,9-диокса-2-аза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-3¹-карбоксилата (360 мг, выход 7%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,98, m/z 534 [М+Н]⁺.

1Н-ЯМР (CDCl₃): δ (м.д.) 8,76 (1Н, д, J=2,3 Гц), 8,58-8,53 (1Н, м), 7,79 (1Н, д, J=9,3 Гц), 7,53-7,30 (6Н, м), 5,28-5,21 (0,5Н, м), 4,97 (0,5Н, д, J=5,3 Гц), 4,46-4,34 (2Н, м), 4,25 (2Н, т, J=6,2 Гц), 4,15-4,01 (0,5Н, м), 3,95 (0,5Н, д, J=12,5 Гц), 3,06-2,84 (1Н, м), 2,66 (1Н, дт, J=11,4, 3,7 Гц), 2,31 (1Н, т, J=10,0 Гц), 2,23-2,12 (2Н, м), 1,80-1,63 (1Н, м), 1,50-1,37 (13Н, м), 1,33-1,15 (1Н, м).

[0283]

[Формула 97]

Способ F-1

[0284]

Промежуточное соединение F-1-1: трет-Бутил-(3-((6-(бензилокси)-3-бромхинолин-5-ил)окси)пропил)карбамат

[Формула 98]

[0285]

6-(Бензилокси)-3-бромхинолин-5-ол (промежуточное соединение D-1-8, 1,0 г, 3,03 ммоль) растворяют в толуоле (15 мл), к раствору добавляют трет-бутил-(3-пидроксипропил)карбамат (1,59 г, 9,09 ммоль), трифенилфосфин (1,99 г, 7,57 ммоль) и, наконец, 20% раствор ди-трет-бутилазодикарбоксилата в толуоле (10 мл, 9,09 ммоль) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 1 часа. Растворитель выпаривают, остаток очищают с использованием автоматической колоночной хроматографии (силикагель, элюент, гексан:этилацетат = 1:1) с получением трет-бутил-(3-((6-(бензилокси)-3-бромхинолин-5-ил)окси)пропил)карбамата (3,11 г, выход 99%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=2,11, m/z 487 [М+Н]⁺.

1Н-ЯМР (CDCl₃): δ (м.д.) 8,76 (1Н, д, J=2,0 Гц), 8,56 (1Н, д, J=2,0 Гц), 7,80 (1Н, д, J=9,0 Гц), 7,53 (1Н, с), 7,40 (5Н, с), 5,29 (2Н, с), 5,11-4,84 (2Н, м), 4,26-4,17 (2Н, м), 3,44-3,32 (2Н, м), 2,04-1,97 (2Н, м), 1,44 (9Н, с).

[0286]

Промежуточное соединение F-1-2: трет-Бутил-(3-((6-(бензилокси)-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксабороран-2-ил)хинолин-5-ил)окси)пропил)карбамат

[Формула 99]

[0287]

трет-Бутил-(3-((6-(бензилокси)-3-бромхинолин-5-ил)окси)пропил)карбамат (промежуточное соединение F-1-1, 1,0 г, 3,03 ммоль) растворяют в 1,4-диоксане (15 мл), к раствору добавляют бис(пинаколато)дибор (451 мг, 1,79 ммоль), [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]палладий(II) (175 мг, 0,24 ммоль) и ацетат калия (237 мг, 2,38 ммоль) и перемешивают полученную смесь при 100°С в течение 14 часов. Реакционный раствор охлаждают до комнатной температуры, твердый осадок удаляют фильтрацией и растворитель выпаривают с получением трет-бутил-(3-((6-(бензилокси)-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксабороран-2-ил)хинолин-5-ил)окси)пропил)карбамата в виде сырого продукта.

ЖХМС (ЖХ-1): RT=2,14, m/z 534 [М+Н]⁺.

[0288]

Промежуточное соединение F-1-3: трет-Бутил-(3-((6-(бензилокси)-3-гидроксихинолин-5-ил)окси)пропил)карбамат

[Формула 100]

[0289]

трет-Бутил-(3-((6-(бензилокси)-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксабороран-2-ил)хинолин-5-ил)окси)пропил)карбамат (промежуточное соединение F-1-2, 636 мг, 1,19 ммоль) растворяют в тетрагидрофуране (13 мл), к раствору при охлаждении льдом добавляют 1 М водный раствор гидроксида натрия (520 мкл) и 20% водный раствор пероксида водорода (520 мкл) и перемешивают полученную смесь при этой же температуре в течение 2 часов. К реакционной смеси добавляют насыщенный водный раствор тиосульфата натрия и 1 М соляную кислоту, полученную смесь экстрагируют хлороформом, органический слой сушат над сульфатом магния, затем растворитель выпаривают и остаток очищают с использованием автоматической колоночной хроматографии (силикагель, элюент, гексан:этилацетат = 50:50) с получением трет-бутил-(3-((6-(бензилокси)-3-гидроксихинолин-5-ил)окси)пропил)карбамата (678 мг, выход 99%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,68, m/z 425 [М+Н]⁺.

1Н-ЯМР (CDCl₃): δ (м.д.) 8,65-8,48 (1Н, м), 8,37-8,10 (1Н, м), 8,04-7,86 (1Н, м), 7,85-7,69 (1Н, м), 7,52-7,43 (2Н, м), 7,43-7,27 (4Н, м), 5,25 (2Н, с), 4,18-4,13 (2Н, м), 3,61-3,50 (2Н, м), 1,96-1,86 (2Н, м), 1,26 (2Н, с), 1,24 (9Н, с).

[0290]

Промежуточное соединение F-1-4: 5-(3-Аминопропокси)-6-(бензилокси)хинолин-3-ол

[Формула 101]

[0291]

трет-Бутил-(3-((6-(бензилокси)-3-гидроксихинолин-5-ил)окси)пропил)карбамат (промежуточное соединение F-1-3, 678 мг, 1,60 ммоль) растворяют в дихлорметане (17 мл), к раствору при комнатной температуре добавляют трифторуксусную кислоту (4,0 мл) и перемешивают полученную смесь в течение 20 минут. Реакционную смесь концентрируют и концентрированную реакционную смесь обрабатывают с использованием SCX картриджа с получением 5-(3-аминопропокси)-6-(бензилокси)хинолин-3-ола (312 мг, выход 60%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=0,96, m/z 325 [М+Н]⁺.

1Н-ЯМР (CDCl₃): δ (м.д.) 8,64 (1Н, д, J=2,5 Гц), 7,83-7,76 (1Н, м), 7,76-7,72 (1Н, м), 7,49-7,44 (2Н, м), 7,43-7,28 (4Н, м), 5,25-5,20 (2H, м), 4,25-4,17 (2Н, м), 3,09-2,99 (2Н, м), 2,03-1,90 (2Н, м).

[0292]

Промежуточное соединение F-1-5: трет-Бутил-(2S,4R)-2-((3-((6-(бензилокси)-3-гидроксихинолин-5-ил)окси)пропил)карбамоил)-4-гидроксипиперидин-1-карбоксилат

[Формула 102]

[0293]

5-(3-Аминопропокси)-6-(бензилокси)хинолин-3-ол (промежуточное соединение F-1-4, 312 мг, 0,81 ммоль) растворяют в дихлорметане (4,0 мл), к раствору добавляют N-метилморфолин (222 мкл, 2,01 ммоль), гидрохлорид 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимида (627 мг, 3,22 ммоль), 1-гидроксибензотриазол (239 мг, 1,77 ммоль) и (2S,4R)-1-(трет-бутоксикарбонил)-4-гидроксипиперидин-2-карбоновую кислоту (376 мг, 1,45 ммоль) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 3 часов. К реакционной смеси добавляют воду и экстрагируют полученную смесь хлороформом, растворитель выпаривают и остаток очищают с использованием автоматической колоночной хроматографии (силикагель, элюент, хлороформ:метанол = 9:1) с получением трет-бутил-(2S,4R)-2-((3-((6-(бензилокси)-3-гидроксихинолин-5-ил)окси)пропил)карбамоил)-4-гидроксипиперидин-1-карбоксилата (122 мг, выход 27%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,43, m/z 552 [М+Н]⁺.

[0294]

Промежуточное соединение F-1-6: трет-Бутил-(3²S,3⁴S)-1⁶-(бензилокси)-4-окси-2,9-диокса-5-аза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-3¹-карбоксилат

[Формула 103]

[0295]

трет-Бутил-(2S,4R)-2-((3-((6-(бензилокси)-3-гидроксихинолин-5-ил)окси)пропил)карбамоил)-4-гидроксипиперидин-1-карбоксилат (промежуточное соединение F-1-5, 122 мг, 0,22 ммоль) растворяют в толуоле (20 мл), к раствору добавляют трифенилфосфин (149 мг, 0,54 ммоль) и 20% раствор ди-трет-бутилазодикарбоксилата в толуоле (780 мкл, 0,65 ммоль) и перемешивают полученную смесь в течение 1 часа 30 минут. Реакционную смесь концентрируют и остаток очищают с использованием автоматической колоночной хроматографии (силикагель, элюент, хлороформ:метанол = 90:10) с получением трет-бутил-(3²S,3⁴S)-1⁶-(бензилокси)-4-окси-2,9-диокса-5-аза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-3¹-карбоксилата (84 мг, 72%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,60, m/z 534 [М+Н]⁺.

[0296]

[Формула 104]

Способ F-2

[0297]

Промежуточное соединение F-2-1: трет-Бутил-(3²S,3⁴S)-1⁶-гидрокси-4-окси-2,9-диокса-5-аза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-3¹-карбоксилат

[Формула 105]

[0298]

трет-Бутил-(3²S,3⁴S)-1⁶-(бензилокси)-4-окси-2,9-диокса-5-аза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-3¹-карбоксилат (промежуточное соединение F-1-6, 84 мг, 0,15 ммоль) растворяют в метаноле (0,8 мл), к раствору в атмосфере азота добавляют тетрагидрофуран (0,8 мл) и гидроксид палладия (16,6 мг), атмосферу в реакционной системе в ручном режиме меняют на газообразный водород и энергично перемешивают смесь при комнатной температуре в течение 14 часов. Нерастворимые вещества удаляют из реакционной смеси фильтрацией, затем растворитель выпаривают и остаток очищают с использованием автоматической колоночной хроматографии (силикагель, элюент, хлороформ:метанол = 90:10) с получением трет-бутил-(3²S,3⁴S)-1⁶-гидрокси-4-окси-2,9-диокса-5-аза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-3¹-карбоксилата (31,2 мг, выход 46%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,12, m/z 444 [М+Н]⁺.

[0299]

Промежуточное соединение F-2-2: трет-Бутил-(3²S,3⁴S)-1⁶-(((трифторметил)сульфонил)окси)-4-окси-2,9-диокса-5-аза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-3¹-карбоксилат

[Формула 106]

[0300]

трет-Бутил-(3²S,3⁴S)-1⁶-гидрокси-4-окси-2,9-диокса-5-аза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-3¹-карбоксилат (промежуточное соединение F-2-1, 31,2 мг, 70 мкмоль) растворяют в 1,4-диоксане (700 мкл), к раствору добавляют N,N-бис(трифторметилсульфонил)анилин (85 мг, 0,22 ммоль), диизопропилэтиламин (73 мкл, 0,42 ммоль) и диметилформамид (2 капли) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 3 часов. Реакционную смесь концентрируют и остаток очищают с использованием автоматической колоночной хроматографии (силикагель, элюент, хлороформ:метанол = 90:10) с получением трет-бутил-(3²S,3⁴S)-1⁶-(((трифторметил)сульфонил)окси)-4-окси-2,9-диокса-5-аза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-3¹-карбоксилата (44,3 мг, выход 99%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,68, m/z 576 [М+Н]⁺.

1Н-ЯМР (CDCl₃): δ (м.д.) 8,80 (1Н, д, J=2,5 Гц), 8,01 (1Н, с), 7,93 (1Н, д, J=9,5 Гц), 7,84-7,79 (1Н, м), 7,53-7,47 (1Н, м), 7,43-7,34 (2Н, м), 7,30 (3Н, с), 5,76-5,59 (1Н, м), 4,74-4,64 (1Н, м), 4, 42-4, 22 (3Н, м), 4,16-3,86 (4Н, м), 3,43-3,26 (1Н, м), 2,50-2,40 (1Н, м), 2,34-2,27 (1Н, м), 2,21-2,13 (1Н, м), 1,90-1,75 (4Н, м), 1,46 (9Н, с).

[0301]

Промежуточное соединение F-2-3: трет-Бутил-(3²S,3⁴S)-1⁶-(2-(пропоксиметил)пиримидин-5-ил)-4-окси-2,9-диокса-5-аза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-3¹-карбоксилат

[Формула 107]

[0302]

трет-Бутил-(3²S,3⁴S)-1⁶-(((трифторметил)сульфонил)окси)-4-окси-2,9-диокса-5-аза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-3¹-карбоксилат (промежуточное соединение F-2-2, 44 мг, 76 мкмоль) растворяют в 1,4-диоксане (600 мкл) и воде (60 мкл), к раствору добавляют (2-(пропоксиметил)пиримидин-5-ил)бороновую кислоту (175 мг, 0,19 ммоль), [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]палладий(II) (13 мг, 15 мкмоль) и карбонат цезия (78 мг, 0,23 ммоль) и обрабатывают микроволновым излучением при 100°С в течение 3 часов. Нерастворимые вещества удаляют фильтрацией через слой целлита, затем растворитель выпаривают и остаток очищают с использованием автоматической колоночной хроматографии (силикагель, элюент, хлороформ:метанол = 90:10) с получением трет-бутил-(3²S,3⁴S)-1⁶-(2-(пропоксиметил)пиримидин-5-ил)-4-окси-2,9-диокса-5-аза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-3¹-карбоксилата (22,8 мг, выход 52%).

ЖХМС (ЖХ-1) : RT=1,42, m/z 578 [М+Н]⁺.

[0303]

Промежуточное соединение F-2-4: (3²S,3⁴S)-1⁶-(2-(Пропоксиметил)пиримидин-5-ил)-2,9-диокса-5-аза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-4-он

[0304]

трет-Бутил-(3²S,3⁴S)-1⁶-(2-(пропоксиметил)пиримидин-5-ил)-4-окси-2,9-диокса-5-аза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-31-карбоксилат (промежуточное соединение F-2-3, 22,8 мг, 39 мкмоль) растворяют 6 дихлорметане (400 мкл), к раствору добавляют трифторуксусную кислоту (100 мкл) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 20 минут. Реакционную смесь обрабатывают с помощью SCX с получением (3²S,3⁴S)-1⁶-(2-(пропоксиметил)пиримидин-5-ил)-2,9-диокса-5-аза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-4-она (13,4 мг, выход 99%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=0,98, m/z 478 [М+Н]⁺.

[0305]

Пример а-02-25 (конечный продукт F-2-5): (3²S,3⁴S)-3¹-Метил-1⁶-(2-(пропоксиметил)пиримидин-5-ил)-2,9-диокса-5-аза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-4-он

[0306]

(3²S,3⁴S)-1⁶-(2-(Пропоксиметил)пиримидин-5-ил)-2,9-диокса-5-аза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-4-он (промежуточное соединение F-2-4, 13,4 мг, 39 мкмоль) растворяют в дихлорметане (200 мкл) и метаноле (200 мкл), к раствору добавляют 37% водный формальдегид (8,7 мкл, 0,12 ммоль) и триацетоксиборогидрид натрия (12,5 мг, 59 мкмоль) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 10 минут. Реакционную смесь обрабатывают с помощью SCX и затем очищают с использованием препаративной тонкослойной хроматографии (элюент, хлороформ:2М раствор аммиака в метаноле = 97:3) с получением (3²S,3⁴S)-3¹-метил-1⁶- (2- (пропоксиметил) пиримидин-5-ил) -2, 9-диокса-5-аза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-4-она (6,2 мг, выход 32%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,00, m/z 492 [М+Н]⁺.

¹Н-ЯМР (CD₃OD): δ (м.д.) 9,19 (2Н, с), 8,82 (1Н, д, J=2,5 Гц), 7,97 (1Н, д, J=9,0 Гц), 7, 90-7, 84 (2Н, м), 4,78 (2Н, с), 4,41 (1Н, дд, J=2,5, 2,5 Гц), 4, 30-4, 22 (1Н, м), 4,17-4,04 (1Н, м), 3, 86-3, 69 (1Н, м), 3, 69-3, 55 (4Н, м), 3,40 (1Н, д, J=6,8 Гц), 3,29-3,11 (1Н, м), 2,59 (3Н, с), 2, 35-2, 25 (1Н, м), 2,19-2,04 (3Н, м), 1, 98-1, 84 (1Н, м), 1,81-1,75 (1Н, м), 1,75-1,67 (2Н, м), 1,17 (1Н, т, J=7,5 Гц), 0,98 (3Н, т, J=7,5 Гц).

[0307]

[0308]

129

Промежуточное соединение G-1-3': (2S,4S)-4-Азидо-1-(трет-бутоксикарбонил)пиперидин-2-карбоновая кислота

[030 9]

1-(трет-Бутил)-2-метил-(2S,4S)-4-азидопиперидин-1,2-дикарбоксилат (5,3 г, 19 ммоль), полученный в соответствии со способом, описанным в литературе (Eur. J. Org. Chem., 2004, 2928-2935), растворяют в метаноле (220 мл), к раствору добавляют 1 М водный раствор гидроксида натрия (190 мл) и перемешивают полученную смесь при 40°С в течение 1 часа. Реакционную смесь нейтрализуют добавлением 1 М соляной кислоты и экстрагируют этилацетатом, органический слой промывают насыщенным раствором соли, сушат над сульфатом натрия и растворитель выпаривают с получением сырой реакционной смеси, содержащей (2S,4S)-4-азидо-1-(трет-бутоксикарбонил)пиперидин-2-карбоновую кислоту.

ЖХМС (ЖХ-1): RT=0,89, m/z 269 [М-Н]⁺.

1Н-ЯМР (CDCl₃): δ (м.д.) 5,07 (1Н, уш. с), 4,92 (1Н, уш. с), 4, 24-3, 97 (1Н, м), 3, 49-3, 36 (1Н, м), 3,18-2,92 (1Н, м), 2,58-2,41 (1Н, м), 2,01-1,88 (1Н, м), 1,54-1,41 (9Н, с).

[0310]

Промежуточное соединение G-1-1: 2-(4-((1s,5s)-9-Борабицикло[3.3.1]нонан-9-ил)бутил)изоиндолин-1,3-дион

[0311]

2-(Бут-3-ен-1-ил)изоиндолин-1,3-дион (2 г, 10 ммоль) при охлаждении льдом растворяют в 0,5 М растворе 9-борабицикло[3.3.1]нонана в тетрагидрофуране (20 мл) и перемешивают полученную смесь при этой же температуре в течение 1,5 часа. Растворитель реакционной смеси выпаривают с получением сырой реакционной смеси, содержащей 2-(4-((1s,5s)-9-борабицикло[3.3.1]нонан-9-ил)бутил)изоиндолин-1,3-дион.

[0312]

Промежуточное соединение G-1-2: 2-(4-(6-(Бензилокси)-3-бромхинолин-5-ил)бутил)изоиндолин-1,3-дион

[0313]

6-(Бензилокси)-3-бром-5-йодхинолин (промежуточное соединение D-1-8, 1,8 г, 4,1 ммоль) растворяют в 1,4-диоксане 8,2 мл) и воде (82 0 мкл), к раствору добавляют 2-(4-((1s, 5s)-9-борабицикло[3,3,1]нонан-9-ил)бутил)изоиндолин-1,3-дион (промежуточное соединение G-1-1, 1,3 г, 4,1 ммоль), 1,1'-бис (дифенилфосфино)ферроцен]палладий(II) (60 0 мг, 820 мкмоль) и карбонат калия (1,7 г, 12 ммоль) и перемешивают полученную смесь при 100°С в течение 14 часов. Нерастворимые вещества удаляют из реакционной смеси фильтрацией через слой целита, затем растворитель выпаривают и остаток очищают с использованием автоматической колоночной хроматографии (силикагель, элюент, гексан:этилацетат=50:50) с получением 2-(4-(6-(бензилокси)-3-бромхинолин-5-ил)бутил)изоиндолин-1,3-диона (340 мг, выход 16%). ЖХМС (ЖХ-1): RT=2,29, т/z 440 [М+Н]⁺

0314]

Промежуточное соединение G-1-3: 4-(6-(Бензилокси)-3-бромхинолин-5-ил)бутан-1-амин

[0315]

2-(4-(6-(Бензилокси)-3-бромхинолин-5-ил)бутил)изоиндолин-1,3-дион (промежуточное соединение G-1-2, 553 мг, 1,07 ммоль) растворяют в этаноле (11 мл), к раствору добавляют гидразингидрат (105 мкл, 2,15 ммоль) и перемешивают полученную смесь при 85°С в течение 9 часов. Полученную сырую реакционную смесь концентрируют, нерастворимые вещества удаляют фильтрацией, растворитель дополнительно выпаривают и остаток очищают с использованием автоматической колоночной хроматографии (силикагель, элюент, гексан : этилацетат = 50:50 → хлороформ : метанол = 90:10) с получением 4-(6-(бензилокси)-3-бромхинолин-5-ил)бутан-1-амина (264 мг, выход 64%). ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,30, m/z 385 [М+Н]⁺.

[0316]

Промежуточное соединение G-1-4: трет-Бутил-(2S,4S)-4-азидо-2-((4-(6-(бензилокси)-3-бромхинолин-5-ил)бутил)карбамоил)пиперидин-1-карбоксилат

[0317]

4-(6-(Бензилокси)-3-бромхинолин-5-ил)бутан-1-амин (промежуточное соединение G-1-3, 214 мг, 0,55 ммоль) растворяют в диметилформамиде (2,8 мл), к раствору добавляют N-метилморфолин (150 мкл, 1,39 ммоль), гидрохлорид 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимида (638 мг, 3,33 ммоль), 1-гидроксибензотриазол (223 мг, 1,66 ммоль) и (2S,4S)-4-азидо-1-(трет-бутоксикарбонил)пиперидин-2-карбоновую кислоту (промежуточное соединение G-1-3', 150 мг, 0,55 ммоль) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 14 часов. К реакционной смеси добавляют воду, полученную смесь экстрагируют хлороформом, растворитель выпаривают и остаток очищают с использованием автоматической колоночной хроматографии (силикагель, элюент, хлороформ : метанол = 90:10) с получением трет-бутил-(2S,4R)-2-((3-((6-(бензилокси)-3-гидроксихинолин-5-ил)окси)пропил)карбамоил)-4-гидроксипиперидин-1-карбоксилата (220 мг, выход 62%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=2,23, m/z 637 [М+Н]⁺.

1Н-ЯМР (CDCl₃): δ (м.д.) 8, 85-8, 72 (1Н, м), 8, 48-8, 36 (1Н, м), 7, 98-7, 89 (1Н, м), 7, 60-7,30 (6Н, м), 6,37-6,11 (1Н, м), 5,34-5, 20 (2Н, м), 4, 88-4, 72 (1Н, м), 4,05-3, 90 (1Н, м), 3,90-3,70 (1Н, м), 3,38-3,00 (3Н, м), 2, 87-2, 39 (3Н, м), 1,91-1,76 (1Н, м), 1,60 (1Н, м), 1,51-1,40 (9Н, м).

[0318]

Промежуточное соединение G-1-5: трет-Бутил-(2S,4S)-4-амино-2 -((4 -(6-(бензилокси)-3-бромхинолин-5-ил)бутил)карбамоил)пиперидин-1-карбоксилат

[0319]

трет-Бутил-(2S,4R)-2-((3-((6-(бензилокси)-3-гидроксихинолин-5-ил)окси)пропил)карбамоил)-4-гидроксипиперидин-1-карбоксилат (промежуточное соединение G-1-4, 190 мг, 2 98 мкмоль) растворяют в тетрагидрофуране (1,2 мл), к раствору добавляют трифенилфосфин (86 мг, 0,33 ммоль) и перемешивают полученную смесь при 50°С в течение 5,5 часов. К полученной сырой реакционной смеси добавляют воду, смесь экстрагируют этилацетатом, органический слой промывают насыщенным раствором соли, сушат над сульфатом натрия, растворитель выпаривают и остаток очищают с использованием автоматической колоночной хроматографии (силикагель, элюент, хлороформ : метанол = 95:5) с получением трет-бутил-[25,4S)-4-амино-2-((4-(6-(бензилокси)-3-бромхинолин-5-ил)бутил)карбамоил)пиперидин-1-карбоксилата (134 мг, выход 7 4%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1.62, m/z 611 [М+Н]⁺.

[0320]

Промежуточное соединение G-1-6: трет-Бутил-(3²S,3⁴S)-1⁶-(бензилокси)-4-оксо-2,5-диаза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-3¹-карбоксилат

[0321]

трет-Бутил-(2S,4S)-4-амино-2-((4-(6-(бензилокси)-3-бромхинолин-5-ил)бутил)карбамоил)пиперидин-1-карбоксилат (промежуточное соединение G-1-5, 27 мг, 44 мкмоль) растворяют в толуоле (1,5 мл), к раствору добавляют метансульфонат [(2-ди-трет-бутилфосфиыо-3,6-диметокси-2',4',6'-триизопропил-1,1'-бифенил)-2-(2'-амино-1,1'-бифенил)]палладия(II) (1,9 мг, 2,2 мкмоль) и фосфазеновое основание P₂-Et (29 мкл, 88 мкмоль) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре. Реакционную смесь очищают с использованием автоматической колоночной хроматографии (силикагель, элюент, хлороформ:метанол=90:10) с получением трет-бутил-(3²S,3⁴S)-1⁶-(бензилокси)-4-оксо-2,5-диаза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-3¹-карбоксилата (9 мг, выход 3 9%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,72, т/z 531 [М+Н]⁺

[0322]

[0323]

Промежуточное соединение G-2-1: трет-Бутил-(3²S,3⁴S)-1⁶-гидрокси-4-оксо-2,5-диаза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-3¹-карбоксилат

[0324]

трет-Бутил-(3²S,3⁴S)-1⁶-(бензилокси)-4-оксо-2,5-диаза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-3¹-карбоксилат (промежуточное соединение G-1-6, 100 мг, 0,19 ммоль) растворяют в метаноле (2,7 мл), этилацетате (4 мл) и толуоле (2,6 мл), к раствору в атмосфре азота добавляют гидроксид палладия (25 мг), атмосферу вручную замещают газообразным водородом и энергично перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 14 часов. Нерастворимые вещества удаляют из реакционной смеси фильтрацией и затем растворитель выпаривают с получением трет-бутил-(3²S,3⁴S)-1⁶-гидрокси-4-оксо-2,5-диаза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-3¹-карбоксилата (70 мг, выход 8 4%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,21, m/z 441 [М+Н]⁺.

[0325]

Промежуточное соединение G-2-2: трет-Бутил-(3²S,3⁴S)-1⁶-(((трифторметил)сульфонил)окси)-4-оксо-2,5-диаза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-3¹-карбоксилат

[0326]

трет-Бутил-(3²S,3⁴S)-1⁶-гидрокси-4-оксо-2,5-диаза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-3¹-карбоксилат (промежуточное соединение G-2-1, 70 мг, 159 мкмоль) растворяют в 1,4-диоксане (1,6 мл), к раствору добавляют N,N-бис(трифторметилсульфонил)анилин (181 мг, 0,51 ммоль), диизопропилэтиламин (170 мкл, 0,95 ммоль) и диметилформамид (6 капель) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 3 часов. Реакционную смесь концентрируют и остаток очищают с использованием автоматической колоночной хроматографии (силикагель, элюент, хлороформ:метанол=90:10) с получением трет-бутил-(3²S,3⁴S)-1⁶-(((трифторметил)сульфонил)окси)-4-оксо-2,5-диаза-1(3,5)-хинолина-3 (4,2)-пиперидинациклононафан-3¹-карбоксилат (88 мг, выход 97%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,76, m/z 573 [М+Н]⁺

[0327]

Промежуточное соединение G-2-3: трет-Бутил-(3²S,3⁴S)-1⁶-(2-(пропоксиметил)пиримидин-5-ил)-2,5-диаза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-3¹-карбоксилат

[0328]

трет-Бутил-(3²S,3⁴S)-1⁶-(((трифторметил)сульфонил)окси)-4-оксо-2,5-диаза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-3¹-карбоксилат (промежуточное соединение G-2-2, 44 мг, 76 мкмоль) растворяют в 1,4-диоксане (300 мкл) и воде (30 мкл), к раствору добавляют (2-(пропоксиметил)пиримидин-5-ил)бороновую кислоту (175 мг, 0,19 ммоль), [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]палладий(II) (32 мг, 3 8 мкмоль) и карбонат цезия (15 0 мг, 0,4 6 ммоль) и обрабатывают полученную смесь микроволновым облучением при 100°С в течение 3 часов. Нерастворимые вещества удаляют из реакционной смеси фильтрацией через слой целита, затем растворитель выпаривают и остаток очищают с использованием автоматической колоночной хроматографии (силикатель, элюент, хлороформ:метанол=9 0:10) с получением трет-бутил-(3²S,3⁴S)-1⁶-(2-(пропоксиметил)пиримидин-5-ил)-2,5-диаза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-3¹-карбоксилата (44 мг, выход 99%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,46, m/z 575 [М+Н]⁺.

[0329]

Промежуточное соединение G-2-4: (3²S,3⁴S)-1⁶-(2-(пропоксиметил)пиримидин-5-ил)-2,5-диаза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-4-он

[0330]

трет-Бутил-(3²S,3⁴S)-1⁶-(2-(пропоксиметил)пиримидин-5-ил)-2,5-диаза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-3¹-карбоксилат (промежуточное соединение G-2-3, 22,8 мг, 39 мкмоль) растворяют в дихлорметане (400 мкл), к раствору добавляют трифторуксусную кислоту (100 мкл) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 20 минут. Реакционную смесь обрабатывают с помощью SCX с получением (3²S,3⁴S)-1⁶-(2-(пропоксиметил)пиримидин-5-ил)-2,5-диаза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-4-она (19 мг, выход 4 6%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,01, m/z 475 [М+Н]⁺.

[0331]

Пример а-02-24 (конечный продукт G-2-5): (3²S,3⁴S)-3¹-Метил-1⁶-(2-(пропоксиметил)пиримидин-5-ил)-2,5-диаза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-4-он

[0332]

(3²S,3⁴S)-1⁶-(2-(Пропоксиметил)пиримидин-5-ил)-2,5-диаза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-4-он (промежуточное соединение G-2-4, 19 мг, 39 мкмоль) растворяют в дихлорметане (290 мкл) и метаноле (290 мкл), к раствору добавляют 37% водный формальдегид (10 мкл, 0,26 ммоль) и триацетоксиборогидрид натрия (27,7 мг, 130 мкмоль) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 35 минут.Реакционную смесь обрабатывают с помощью SCX и затем очищают с помощью ВЭЖХ с получением (3²S,3⁴S)-3¹-метил-1⁶-(2-(пропоксиметил)пиримидин-5-ил)-2,5-диаза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-4-она (17,2 мг, выход 9 0%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,09, m/z 489 [М+Н]⁺.

1Н-ЯМР (CD₃OD): δ (м.д.) 8,82 (2Н, с), 8,43 (1Н, д, J=2,5 Гц), 7,82-7,74 (1Н, м, J=8,5 Гц), 7,28-7,24 (1Н, м), 7,05 (1Н, д, J=2,5 Гц), 4,79 (2Н, с), 3,88-3,77 (2Н, м), 3,68-3,55 (4Н, м), 3,12-3,02 (1Н, м), 2, 93-2, 79 (2Н, м), 2,57 (3Н, с), 2,53-2,43 (1Н, м), 2,07-2,01 (2Н, м), 1,91-1,81 (1Н, м), 1,78-1,66 (4Н, м), 1,63-1,42 (2Н, м), 0,99 (3Н, т, J=7,5 Гц). [0333]

[0334]

Промежуточное соединение Н-1-2: Метил-(S, Е)-4-оксо-2-(тритиламино)гепт-5-еноат

[0335]

Метил-(S)-5-(диметоксифосфорил)-4-оксо-2-(тритиламино)пентаноат (17 г, 35,3 ммоль), полученный в соответствии со способом, описанным в научной литературе (J. Org. Chem., 2012, 77, 10001-10009), растворяют в ацетонитриле

(200 мл), к раствору добавляют карбонат калия (5,1 г, 37 ммоль) и ацетальдегид (5,92 мл, 106 ммоль) и перемешивают полученную смесь при 40°С в течение 4 8 часов. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры, растворитель выпаривают, затем добавляют этилацетат, органический слой промывают водой и насыщенным раствором соли, сушат над сульфатом магния, растворитель выпаривают и остаток очищают с использованием автоматической колоночной хроматографии (силикагель, элюент, гексан:этилацетат=75:25) с получением метил-(S, Е)-4-оксо-2-(тритиламино)гепт-5-еноат (11,5 г, выход 48%).

1Н-ЯМР (CDCl₃): δ (м.д.) 7,55-7,41 (6Н, м), 7,30-7,15 (9Н, м), 6,80-6,72 (1Н, м), 6,11-6,03 (1Н, м), 3,79-3,63 (1Н, м), 3,27 (3Н, с), 2,90-2,72 (2Н, м), 2,72-2,59 (1Н, м), 1,89 (3Н, дд, J=7, 0, 2, 0 Гц).

[0336]

Промежуточное соединение Н-1-3: Соль трифторуксусной кислоты метил-(S, Е)-2-амино-4-оксогепт-5-еноата

[0337]

Метил-(S, Е)-4-оксо-2-(тритиламино)гепт-5-еноат (промежуточное соединение Н-1-2, 11,5 г, 27,8 ммоль) растворяют в дихлорметане (92 мл), к раствору добавляют трифторуксусную кислоту (92 мл) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрируют, остаток растворяют в воде, затем раствор промывают диэтиловым эфиром и растворитель выпаривают с получением соли трифторуксусной кислоты метил-(S, Е)-2-амино-4-оксогепт-5-еноата (8,49 г, выход 99%).

1Н-ЯМР (ДМСО d₆): δ (м.д.) 8,34 (3Н, уш. с), 6,96 (1Н, кв, J=7,0 Гц), 7,00 (1Н, кв, J=7,0 Гц), 6,19 (1Н, м), 4,37 (2Н, м), 3,71 (3Н, с), 3,31-3,17 (2Н, м), 1,95-1,87 (3Н, м).

[0338]

Промежуточное соединение Н-1-4: Метил-(2S)-1-бензил-6-метил-4-оксопиперидин-2-карбоксилат

[0339]

Соль трифторуксусной кислоты метил-(S, Е)-2-амино-4-оксогепт-5-еноата (промежуточное соединение Н-1-3, 7,92 г, 27,8 ммоль) растворяют в тетрагидрофуране (100 мл), к раствору добавляют молекулярные сита 4А (8 г), триэтиламин (3,87 мл, 27,8 ммоль) и бензальдегид (2,83 мл, 27,8 ммоль) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 30 минут. Нерастворимые вещества удаляют из реакционной смеси фильтрацией, затем растворитель выпаривают, остаток растворяют в метаноле (100 мл), к раствору добавляют цианоборогидрид натрия (27,8 мл, 27,8 ммоль) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 14 часов. К реакционной смеси добавляют насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия, полученную смесь экстрагируют дихлорметаном, органический слой промывают насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным раствором соли, затем сушат над сульфатом магния, растворитель выпаривают и остаток очищают с использованием автоматической колоночной хроматографии (силикагель, элюент, гексан:этилацетат=75:15) с получением метил-(2S)-1-бензил-6-метил-4-оксопиперидин-2-карбоксилата (2,28 г, выход 31%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,54, m/z 262 [М+Н]⁺.

[0340]

Промежуточное соединение Н-1-5: Метил-(2S)-6-метил-4-оксопиперидин-2-карбоксилат

[0341]

Метил-(2S)-1-бензил-6-метил-4-оксопиперидин-2-карбоксилат (промежуточное соединение Н-1-4, 100 мг, 0,38 ммоль) растворяют в метаноле (2,5 мл), к раствору в атмосфере азота добавляют гидроксид палладия (18 мг), атмосферу в ручном режиме замещают газообразным водородом и энергично перемешивают смесь при комнатной температуре в течение 14 часов. Нерастворимые вещества удаляют из реакционной смеси фильтрацией и затем растворитель выпаривают с получением сырого продукта, содержащего метил-(2S)-6-метил-4-оксопиперидин-2-карбоксилат (64 мг, выход 97%).

1Н-ЯМР (ДМСОd₆): δ (м.д.) 4,07-4,04 (1Н, м), 3,78 (1,5Н, с), 3,74 (1,5Н, с), 3,27-3,23 (1Н, м), 3,03-2,97 (1Н, м), 2,73-2,59 (3Н, м), 2,44-2, 37 (3Н, м), 2,17-2,07 (3Н, м), 1,27 (1,5Н, д, J=6,0 Гц), 1,18 (1,5Н, д, J=6,0 Гц).

[0342]

Промежуточное соединение Н-1-6: Метил-(2S)-1,6-диметил-4-оксопиперидин-2-карбоксилат

[0343]

Метил-(2S)-6-метил-4-оксопиперидин-2-карбоксилат (промежуточное соединение Н-1-5, 1,54 г, 9,0 моль) растворяют в дихлорметане (70 мл), к раствору добавляют 31% водный формальдегид (7 мл, 86 ммоль) и триацетоксиборогидрид натрия (2,28 г, 10,8 ммоль) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь обрабатывают с помощью SCX с получением сырого продукта, содержащего метил-(2S)-1,6-диметил-4-оксопиперидин-2-карбоксилат (1, 48 г, выход 89%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=0,72, т/z 186 [М+Н]⁺.

[0344]

Промежуточное соединение Н-1-7: Метил-(2S)-4-(бензиламино)-1,6-диметилпиперидин-2-карбоксилат

[0345]

Метил-(2S)-1,6-диметил-4-оксопиперидин-2-карбоксилат (промежуточное соединение Н-1-6, 1,48 г, 7,99 моль) растворяют в метаноле (19 мл), к раствору добавляют бензиламин (4,4 мл, 40 ммоль) и тетраизопропоксид титана (9,5 мл, 40 ммоль) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 14 часов. К реакционной смеси при охлаждении льдом добавляют борогидрид натрия (1,04 г, 27,6 ммоль) и перемешивают полученную смесь при этой же температуре в течение 1,5 часа. К реакционной смеси добавляют 25% водный раствор аммиака, полученную смесь перемешивают в течение 14 часов и затем нерастворимый осадок удаляют фильтрацией через слой целита. Растворитель полученного органического слоя выпаривают, остаток разбавляют насыщенным раствором соли, экстрагируют смесью хлороформ/метанол (90:10), органический слой сушат над сульфатом магния и растворитель выпаривают досуха с получением сырого продукта, содержащего метил-(2S)-4-(бензиламино)-1,6-диметилпиперидин-2-карбоксилат (9,91 г, выход 99%).

[0346]

Промежуточное соединение Н-1-8: Метил-(2S)-4-амино-1,6-диметилпиперидин-2-карбоксилат

[0347]

Метил-(2S)-4-(бензиламино)-1,6-диметилпиперидин-2-карбоксилат (промежуточное соединение Н-1-7, 2,21 г, 8,0 ммоль) растворяют в метаноле (50 мл), к раствору в атмосфре азота добавляют гидроксид палладия (2,21 г, 15,7 ммоль), атмосферу в ручном режиме замещают газообразным водородом и энергично перемешивают смесь при комнатной температуре в течение 14 часов. Нерастворимые вещества удаляют из реакционной смеси фильтрацией и растворитель выпаривают с получением сырого продукта, содержащего метил-(2S)-4-амино-1,6-диметилпиперидин-2-карбоксилат (2,52 г, выход 99%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=0,76, m/z 186 [М+Н]⁺.

[0348]

Промежуточное соединение Н-1-9: Метил-(2S)-4-((трет-бутоксикарбонил)амино)-1,6-диметилпиперидин-2-карбоксилат

[0349]

Метил-(2S)-4-амино-1,6-диметилпиперидин-2-карбоксилат (промежуточное соединение Н-1-8, 1,4 г, 7,52 ммоль) растворяют в дихлорметане (38 мл), к раствору в атмосфре азота добавляют ди-трет-бутилдикарбонат (2,59 мл, 11,3 ммоль) и триэтиламин (2,1 мл, 15 ммоль) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 3 часов. Реакционную смесь концентрируют и остаток очищают с использованием автоматической колоночной хроматографии (силикагель, элюент, хлороформ:метанол:2 5% водный аммиак=200:9:1) с получением метил-(2S)-4-((трет-бутоксикарбонил)амино)-1,6-диметилпиперидин-2-карбоксилата (1, 61 г, выход 7 5%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,23, m/z 287 [М+Н]⁺.

[0350]

Промежуточное соединение Н-1-10: Натриевая соль (2S)-4-((трет-бутоксикарбонил)амино)-1,6-диметилпиперидин-2-карбоновой кислоты

[0351]

Метил-(2S)-4-((трет-бутоксикарбонил)амино)-1,6-диметилпиперидин-2-карбоксилат (промежуточное соединение Н-1-9, 1,61 г, 11,2 ммоль) растворяют в метаноле (28 мл), к раствору добавляют 2 М водный раствор гидроксида натрия (5,6 мл, 11,3 ммоль) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь концентрируют с получением натриевой соли (2S)-4-((трет-бутоксикарбонил)амино)-1,6-диметилпиперидин-2-карбоновой кислоты (1,51 г, выход 99%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=0,70, m/z 273 [М+Н]⁺.

[0352]

[0353]

Промежуточное соединение Н-2-2: (Е)-2-(4-(6-(Бензилокси)-3-бромхинолин-5-ил)бут-3-ен-1-ил)изоиндолин-1,3-дион

[0354]

6-(Бензилокси)-3-бром-5-йодхинолин (промежуточное соединение D-1-6, 2,0 г, 4,5 ммоль) растворяют в толуоле (50 мл), к раствору добавляют 10% раствор три-трет-бутилфосфина в пентане (910 мкл, 0,4 5 ммоль), дициклогексилметиламин (2,6 г, 13,5 ммоль), 2-(бут-3-ен-1-ил)изоиндолин-1,3-дион (1,1 г, 5,5 ммоль), полученный в соответствии со способом, описанным в научной литературе (J. Org. Chem., 1974, 39, 1979-1980), и трис(дибензилиденацетон)дипалладий (0) (206 мг, 0,23 ммоль) и перемешивают полученную смесь с нагревом при 120°С в течение 20 часов. Реакционный раствор охлаждают до комнатной температуры, затем растворитель выпаривают и остаток очищают колоночной хроматографией (силикагель, элюент, гексан:этилацетат=86:14) с получением (Е)-2-(4-(6-(бензилокси)-3-бромхинолин-5-ил)бут-3-ен-1-ил)изоиндолин-1,3-диона (1,4 г, выход 61%).

[0355]

Промежуточное соединение Н-2-3: (Е)-4-(6-(Бензилокси)-3-бромхинолин-5-ил)бут-3-ен-1-амин

[0356]

(Е)-2-(4-(6-(Бензилокси)-3-бромхинолин-5-ил)бут-3-ен-1-ил)изоиндолин-1,3-дион (промежуточное соединение Н-2-2, 1,29 г, 2,51 ммоль) растворяют в этаноле (25 мл), к раствору добавляют гидразингидрат (1,82 мл, 5,02 ммоль) и кипятят с обратным холодильником полученную смесь в течение 4 часов. Реакционный раствор охлаждают до комнатной температуры, растворитель выпаривают, остаток растворяют в воде (25 мл), раствор экстрагируют этилацетатом, органический слой концентрируют и остаток очищают колоночной хроматографией (силикагель, элюент, гексан:этилацетат=86:14) с получением (Е)-4-(6-(бензилокси)-3-бромхинолин-5-ил)бут-3-ен-1-амина (680 мг, 39%).

[0357]

Промежуточное соединение Н-2-4: трет-Бутил-((2S)-2-(((Е)-4-(6-(бензилокси)-3-бромхинолин-5-ил)бут-3-ен-1-ил)карбамоил)-1,6-диметилпиперидин-4-ил)карбамат

[0358]

(Е)-4-(6-(Бензилокси)-3-бромхинолин-5-ил)бут-3-ен-1-амин (промежуточное соединение Н-2-3, 193 мг, 0,50 ммоль) растворяют в диметилформамиде (5 мл), к раствору добавляют гидрохлорид 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимида (193 мг, 1,01 ммоль), 1-гидроксибензотриазол (154 мг, 1,01 ммоль) и натриевую соль (2S)-4-((трет-бутоксикарбонил)амино)-1,6-диметилпиперидин-2-карбоновой кислоты (промежуточное соединение Н-1-10, 274 мг, 1,01 ммоль) и перемешивают полученную смесь с нагревом при 50°С в течение 14 часов. Реакционную смесь концентрируют и остаток очищают с использованием автоматической колоночной хроматографии (силикагель, элюент, гексан:этилацетат=50:50) с получением трет-бутил-((2S)-2-(((Е)-4-(6-(бензилокси)-3-бромхинолин-5-ил)бут-3-ен-1-ил)карбамоил)-1,б-диметилпиперидин-4-ил)карбамата (353 мг, выход 99%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,95, m/z 638 [М+Н]⁺.

[0359]

Промежуточное соединение Н-2-5: (2S)-4-Амино-N-((Е)-4-(6-(бензилокси)-3-бромхинолин-5-ил)бут-3-ен-1-ил)-1,6-диме тилпиперидин-2-карбоксамид

[0360]

трет-Бутил-((2S)-2-(((Е)-4-(б-(бензилокси)-3-бромхинолин-5-ил)бут-3-ен-1-ил)карбамоил)-1,6-диметилпиперидин-4-ил)карбамат (промежуточное соединение Н-2-4, 242 мг, 0,38 ммоль) растворяют в дихлорметане (3,8 мл), к раствору добавляют трифторуксусную кислоту (2 90 мкл, 3,8 ммоль) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционный раствор концентрируют, нейтрализуют 25% водным раствором аммиака и экстрагируют хлороформом, органический слой сушат над сульфатом магния и растворитель выпаривают с получением (2S)-4-амино-N-((Е)-4-(6-(бензилокси)-3-бромхинолин-5-ил)бут-3-ен-1-ил)-1,6-диметилпиперидин-2-карбоксамида (203 мг, выход 99%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,42, m/z 538 [М+Н]⁺.

[0361]

Промежуточное соединение Н-2-6: (3²S,Е)-1⁶-(Бензилокси)-3¹,3⁶-диметил-2,5-диаза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пипериданациклононафан-8-ен-4-он

[0362]

(2S)-4-Амино-N-((Е)-4-(6-(бензилокси)-3-бромхинолин-5-ил)бут-3-ен-1-ил)-1,6-диметилгшперидин-2-карбоксамид (промежуточное соединение Н-2-5, 210 мг, 0,38 ммоль) растворяют в 1,4-диоксане (3,9 мл), к раствору добавляют трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (36 мг, 40 мкмоль), 2-дициклогексилфосфино-2',4',6'-триизопропил-1,1'-бифенил (36 мг, 80 мкмоль) и феноксид натрия (90 мг, 0,78 ммоль) и кипятят с обратным холодильником полученную смесь в течение 14 часов. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры, затем растворитель выпаривают и остаток очищают с использованием автоматической колоночной хроматографии (силикагель, элюент, хлороформ:метанол=9:1) с получением (3²S,Е)-1⁶-(бензилокси)-3¹,3⁶-диметил-2,5-диаза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-8-ен-4-она (133 мг, выход 75%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,4 9, m/z 457 [М+Н]⁺.

[0363]

[0364]

Промежуточное соединение Н-3-1: (3²S, Е)-1⁶-Гидрокси-3¹,3⁶-диметил-2,5-диаза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-8-ен-4-он

[03 65]

(3²S,Е)-1⁶-(Бензилокси)-3¹,3⁶-диметил-2,5-диаза-1 (3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-8-ен-4-он (промежуточное соединение Н-2-6, 131 мг, 0,29 ммоль) растворяют в метаноле (2,8 мл), к раствору в атмосфре азота добавляют палладий на угле (24 мг), атмосферу в ручном режиме замещают газообразным водородом и энергично перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 14 часов. Нерастворимые вещества удаляют из реакционной смеси фильтрацией и затем растворитель выпаривают с получением сырого продукта, содержащего (3²S, Е)-1⁶-гидрокси-3¹,3⁶-диметил-2,5-диаза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-8-ен-4-он (105 мг, выход 99%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=0,86, m/z 367 [М+Н]⁺.

[0366]

Промежуточное соединение Н-3-2: (3²S, Е)-3¹,3⁶-Диметил-4-оксо-2,5-диаза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-8-ен-1⁶-илтрифторметансульфонат

[0367]

(3²S, Е)-1⁶-Гидрокси-3¹,3⁶-диметил-2,5-диаза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-8-ен-4-он (промежуточное соединение Н-3-1, 105 мг, 0,29 ммоль) растворяют в 1,4-диоксане (2,9 мл), к раствору добавляют N,N-бис (трифторметилсульфонил)анилин) (136 мг, 0,57 ммоль) и диизопропилэтиламин (80 мкл, 0,57 ммоль) и перемешивают полученную смесь при 70°С в течение 14 часов. Реакционную смесь концентрируют с получением сырого продукта, содержащего (3²S, Е)-3¹,3⁶-диметил-4-оксо-2,5-диаза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-8-ен-1⁶-илтрифторметансульфоната (143 мг, выход 99%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,61, m/z 499 [М+Н]⁺.

[0368]

Пример а-02-17 (конечный продукт Н-3-3): (3²S,E)-3¹,3⁶-Diметил-1⁶-(2-метилпиримидин-5-ил)-2,5-диаза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-8-ен-4-он

[0369]

(3²S, Е)-3¹,3⁶-Диметил-4-оксо-2,5-диаза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-8-ен-1⁶-илтрифторметансульфонат (промежуточное соединение Н-3-2, 120 мг, 0,24 ммоль) растворяют в 1,4-диоксане (2,4 мл) и воде (240 мкл), к раствору добавляют сложный пинаколовый эфир 2-метилпиримидин-5-бороновой кислоты (105 мг, 0,48 ммоль), [1,1'-бис (дифенилфосфино)ферроцен]палладий(II) (17 мг, 20 мкмоль) и карбонат цезия (156 мг, 0,48 ммоль) и обрабатывают полученную смесь микроволновым облучением при 100°С в течение 3 часов. Нерастворимые вещества удаляют из реакционной смеси фильтрацией через слой целита, затем растворитель выпаривают и остаток очищают с помощью ВЭЖХ с получением (3²S,Е)-3¹,3⁶-диметил-1⁶-(2-метилпиримидин-5-ил)-2,5-диаза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-8-ен-4-она (1,1 мг, выход 1%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=0,99, m/z 443 [М+Н]⁺.

1Н-ЯМР (CD₃OD): δ (м.д.) 8, 78-8, 72 (2Н, м), 8, 57-8, 54 (1Н, м), 8, 44-8, 39 (1Н, м), 7, 88-7, 83 (1Н, м), 7,51-7,47 (1Н, м), 7,38-7,33 (1Н, м), 6,45-6,41 (1Н, м), 6, 40-6, 36 (1Н, м), 6,20-6,10 (2Н, м), 3,93-3,85 (2Н, м), 3, 68-3, 62 (2Н, м), 3,52-3,44 (2Н, м), 3,19-3,09 (2Н, м), 2,76 (3Н, с), 2, 72-2, 63 (2Н, м), 2,54 (3Н, с), 2,05-1,95 (2Н, м), 1,62-1,41 (4Н, м), 1,33-1,27 (2Н, м), 1,17 (3Н, д, J=6,5 Гц).

[0370]

[0371]

Промежуточное соединение I-1-2: Метил-1,2-диметил-4-оксопиперидин-2-карбоксилат

[0372]

Метил-1,2-диметил-4-оксо-1,2,3,4-тетрагидропиридин-2-карбоксилат (1,3 г, 7,3 ммоль), полученный в соответствии со способом, описанным в литературе (Org. Lett., 2005, 435-437), растворяют в тетрагидрофуране (8 мл), к раствору в атмосфре азота добавляют L-Selectride(Е) (190 мл) при -78°С и перемешивают полученную смесь при указанной температуре в течение 2 часов. Реакцию гасят добавлением к реакционной смеси метанола, затем реакционную смесь негревают до комнатной температуры, концентрируют и обрабатывают с использованием SCX картриджа с получением сырой реакционной смеси, содержащей метил-1,2-диметил-4-оксопиперидин-2-карбоксилат.

ЖХМС (ЖХ-1): RT=0,94, m/z 186 [М+Н]⁺.

[0373]

Промежуточное соединение I-1-3: Метил-4-(бензиламино)-1,2-диметилпиперидин-2-карбоксилат

[0374]

Метил-1,2-диметил-4-оксопиперидин-2-карбоксилат (промежуточное соединение 1-1-2, 1,0 г, 5,47 моль) растворяют в метаноле (13 мл), к раствору добавляют бензиламин (3,0 мл, 27,4 ммоль) и тетраизопропоксид титана (6,5 мл, 21,9 ммоль) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 14 часов. К реакционной смеси при охлаждении льдом добавляют борогидрид натрия (715 мг, 18,9 ммоль) и перемешивают полученную смесь при этой же температуре в течение 2 часов. К реакционной смеси добавляют 25% водный раствор аммиака, перемешивают полученную смесь в течение 14 часов и затем нерастворимые вещества удаляют фильтрацией через слой целита. Растворитель полученного органического слоя выпаривают, остаток разбавляют насыщенным раствором соли и экстрагируют смесью хлороформ/метанол (90:10), органический слой сушат над сульфатом магния и растворитель выпаривают досуха с получением сырого продукта, содержащего метил-4-(бензиламино)-1,2-диметилпиперидин-2-карбоксилат (1,51 г, выход 99%).

[0375]

Промежуточное соединение I-1-4: Метил-4-амино-1,2-диметилпиперидин-2-карбоксилат

[0376]

Метил-4-(бензиламино)-1,2-диметилпиперидии-2-карбоксилат (промежуточное соединение I-1-5, 1,51 г, 5,47 ммоль) растворяют в метаноле (35 мл), к раствору в атмосфре азота добавляют гидроксид палладия (800 мг, 5,70 ммоль), атмосферу в ручном режиме замещают газообразным водородом и энергично перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 14 часов. Нерастворимые вещества удаляют из реакционной смеси фильтрацией и затем растворитель выпаривают с получением сырого продукта, содержащего метил-4-амино-1,2-диметилпиперидин-2-карбоксилат (1,02 г, выход 99%).

[0377]

Промежуточное соединение I-1-5: Метил-4-((трет-бутоксикарбонил)амино)-1,2-диметилпиперидин-2-карбоксилат

[0378]

Метил-4-амино-1,2-диметилпиперидин-2-карбоксилат (промежуточное соединение I-1-4, 1,02 г, 5,47 ммоль) растворяют в дихлорметане (38 мл), к раствору добавляют ди-трет-бутилдикарбонат (3,58 мл, 16,4 ммоль) и триэтиламин (7,63 мл, 54,7 ммоль) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 3 часов. Реакционную смесь концентрируют, остаток очищают с помощью автоматической колоночной хроматографии (силикагель, элюент, гексан:этилацетат=20:80) с получением метил-4-((трет-бутоксикарбонил)амино)-1,2-диметилпиперидин-2-карбоксилата (205 мг, выход 13%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,26, m/z 287 [М+Н]⁺.

1Н-ЯМР (CDCl₃): δ (м.д.) 4, 53-4, 32 (1Н, м), 3, 78-3, 68 (3Н, м), 2, 90-2,76 (1Н, м), 2, 64-2, 45 (1Н, м), 2,25-2,15 (2Н, м), 1, 98-1, 84 (2Н, м), 1, 80-1, 68 (1Н, м), 1,43 (7Н, с), 1,29 (2Н, с).

[0379]

Промежуточное соединение I-1-6: Натриевая соль 4-((трет-бутоксикарбонил)амино)-1,2-диметилпиперидин-2-карбоновой кислоты

[0380]

Метил-4-((трет-бутоксикарбонил)амино)-1,2-диметилпиперидин-2-карбоксилат (промежуточное соединение I-1-5, 68 7 мг, 2,4 0 ммоль) растворяют в 1 М водном растворе гидроксида натрия (10 мл, 10 ммоль) и перемешивают полученный раствор при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь концентрируют с получением натриевой соли 4-((трет-бутоксикарбонил) амино)-1,2-диметилпиперидин-2-карбоновой кислоты (853 мг, выход 99%).

[0381]

[0382]

Промежуточное соединение I-2-2: 3-((6-(Бензилокси)-3-бромхинолин-5-ил)окси)-2-фторпропан-1-амин

[0383]

трет-Бутил-(S)-(3-((6-(бензилокси)-3-бромхинолин-5-ил)окси)-2-фторпропил)карбамат (промежуточное соединение I-2-1, 6,5 9 г, 13,0 ммоль) растворяют в дихлорметане (40 мл), к раствору добавляют трифторуксусную кислоту (10 мл) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 3 часов. Реакционную смесь обрабатывают с помощью SCX с получением (S)-3-((6-(бензилокси)-3-бромхинолин-5-ил)окси)-2-фторпропан-1-амин (2,78 г, выход 53%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,38, m/z 405 [М+Н]⁺.

1Н-ЯМР (CDCl₃): δ (м. д.) 8, 84-8, 76 (1Н, м), 8, 69-8,63 (1Н, м), 7,83 (1Н, д, J=9,3 Гц), 7,53 (1Н, д, J=9,3 Гц), 7,49-7,32 (5Н, м), 5,32-5,18 (2Н, м), 4, 90-4,68 (1Н, м), 4,40-4,29 (2Н, м), 3, 08-2, 97 (2Н, м).

[0384]

Промежуточное соединение I-2-3: трет-Бутил-(2-((3-((6-(бензилокси)-3-бромхинолин-5-ил)окси-2-фторпропил)карбамоил)-1,2-диметилпиперидин-4-ил)карбамат

[0385]

3-((6-(Бензилокси)-3-бромхинолин-5-ил)окси)-2-фторпропан-1-амин (промежуточное соединение I-2-2, 1,02 г, 2,52 ммоль) растворяют в дихлорметане (20 мл), к раствору добавляют N-метилморфолин (695 мкл, 2,52 ммоль), гидрохлорид 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбоднимида (1,93 г, 10,1 ммоль), 1-гидроксибензотриазол (750 мг, 5,55 ммоль) и натриевую соль 4-((трет-бутоксикарбонил)амино)-1,2-диметилпиперидин-2-карбоновой кислоты (промежуточное соединение 1-1-6, 687 мг, 2,52 ммоль) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 14 часов. К реакционной смеси добавляют воду, полученную смесь экстрагируют хлороформом, растворитель выпаривают и остаток очищают с использованием автоматической колоночной хроматографии (силикагель, элюент, гексан:этилацетат=30:70) с получением трет-бутил-(2-((3-((6-(бензилокси)-3-бромхинолин-5-ил)окси-2-фторпропил)карбамоил)-1,2-диметилпиперидин-4-ил)карбамата (765 мг, выход 42%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=2,05, m/z 65 9 [М+Н]⁺.

1Н-ЯМР (CDCl₃): δ (м.д.) 8,7 7 (1Н, д, J=2,Q Гц), 8,67-8,63 (1Н, м), 7,81 (1Н, д, J=9,0 Гц), 7,55-7, 49 (1Н, м), 7,49-7,35 (5Н, м), 5,27 (2Н, с), 4,98 (1Н, дд, J=10, 0, 7,0 Гц), 4,92-4,64 (1Н, м), 4, 44-4, 25 (3Н, м), 4,12 (1Н, дд, J=7, 0, 7,0 Гц), 3,83-3,67 (1Н, м), 3,63-3,41 (2Н, м), 2, 89-2, 63 (2Н, м), 2,36 (3Н, с), 2,34-2, 22 (1Н, м), 1,45-1, 39 (9Н, м), 1, 29-1, 24 (2Н, м).

[0386]

Промежуточное соединение I-2-4: 4-Амино-N-(3-((6-(бензилокси)-3-бромхинолин-5-ил)окси)-2-фторпропил)-1,2-диметилпиперидин-2-карбоксамид

[0387]

трет-Бутил-(2-((3-((6-(бензилокси)-3-бромхинолин-5-ил)окси-2-фторпропил)карбамоил)-1,2-диметилпиперидин-4-ил)карбамат (промежуточное соединение 1-2-3, 765 мг, 1,16 ммоль) растворяют в дихлорметане (8 мл), к раствору добавляют трифторуксусыую кислоту (2 мл) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 20 минут. Реакционную смесь обрабатывают с помощью SCX с получением 4-амино-N-(3-((6-(бензилокси)-3-бромхинолин-5-ил)окси)-2-фторпропил)-1,2-диметилпиперидин-2-карбоксамида (645 мг, выход 100%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,4 3, m/z 55 9 [М+Н]⁺.

[0388]

Промежуточное соединение I-2-5: 1⁶-(Бензилокси)-7-фтор-3¹,3²-диметил-9-окса-2,5-диаза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-4-он

[0389]

4-Амино-N- (3- ((6- (бензилокси) -3-бромхинолин-5-ил) окси) -2-фторпропил)-1,2-диметилпиперидин-2-карбоксамид (промежуточное соединение 1-2-4, 598 мг, 1,07 ммоль) растворяют в 1,4-диоксане (10 мл), к раствору добавляют трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (98 мг, 107 мкмоль), дициклогексилфосфино-2',4',6'-триизопропил-1,1'-бифенил (102 мг, 214 мкмоль) и феноксид натрия (248 мг, 2,14 ммоль) и кипятят с обратным холодильником полученную смесь в течение 14 часов. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры, затем растворитель выпаривают и остаток очищают с помощью автоматической колоночной хроматографии (силикагель, элюент, этилацетат:метанол=90:10) с получением 1⁶-(бензилокси)-7-фтор-31,32-диметил-9-окса-2,5-диаза-1(3,5)-хинолина-3(4,2) -пиперидинациклононафан-4-она (179 мг, выход 32%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,39, m/z 479 [М+Н]⁺.

1Н-ЯМР (CDCl₃): δ (м, д,) 8,32 (1Н, д, J=2,5 Гц), 8,00 (1Н, д, J=2,5 Гц), 7,67 (1Н, д, J=9,0 Гц), 7, 52-7, 29 (5Н, м), 7,17 (1Н, д, J=9,0 Гц), 5,13-4,89 (1Н, м), 4,27 (1Н, дд, J=11,5, 9,0 Гц), 4,17-4,04 (2Н, м), 3,97 (1Н, д, J=4,4 Гц), 3, 80-3, 67 (1Н, м), 3, 54-3, 26 (1Н, м), 3,18 (1Н, д, J=6, 0 Гц), 2,92 (1Н, тд, J=12,0, 4,0 Гц), 2, 88-2, 79 (1Н, м), 2,69 (2Н, с), 1,96-1, 83 (2Н, м), 1,50 (3Н, с), 1, 47-1, 37 (1Н, м).

[0390]

[0391]

Промежуточное соединение I-3-1: 7-Фтор-1⁶-гидрокси-3¹,3²-диметил-9-окса-2,5-диаза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-4-он

[0392]

1⁶-(Бензилокси)-7-фтор-3¹,3²-диметил-9-окса-2,5-диаза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-4-он (промежуточное соединение 1-2-5, 180 мг, 0,38 ммоль) растворяют в метаноле (8 мл), к раствору в атмосфре азота добавляют 10% палладий на угле (90 мг), атмосферу в ручном режиме замещают газообразным водородом и энергично перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 14 часов. Нерастворимые вещества удаляют из реакционной смеси фильтрацией и затем растворитель выпаривают с получением 7-фтор-1⁶-гидрокси-3¹,3²-диметил-9-окса-2,5-диаза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-4-она (13 8 мг, выход 95%).

ЖХМС (ЖХ-1): RT=0,83, m/z 389 [М+Н]⁺.

1Н-ЯМР (CD₃OD): δ (м.д.) (1Н, д, J=3,0 Гц), 7,53-7,43 (1Н, м), 7,33-7,20 (1Н, м), 7,18-7,07 (1Н, м), 7,01 (1Н, д, J=9, 0 Гц), 6,89-6,85 (1Н, м), 5,29 (1Н, тдд, J=9, 0, 6,5, 3,0 Гц), 5,23-5,14 (1Н, м), 5,12-4,94 (1Н, м), 4,28 (1Н, ддд, J=17,5, 11,0, 7,5 Гц), 4,17-3,86 (3Н, м), 3, 78-3, 65 (1Н, м), 3,51-3,39 (1Н, м), 3,35 (3Н, с), 3,13-3,01 (1Н, м), 2,86 (1Н, ддд, J=11,0, 5,0, 2,0 Гц), 2,62-2,56 (3Н, м), 2,36-2,28 (1Н, м), 1,99 (1Н, д, J=12,0 Гц), 1,75 (1Н, дкв, J=12,0, 5,0 Гц), 1,46-1,41 (3Н, м), 1, 28-1, 16 (2Н, м).

[0393]

Промежуточное соединение I-3-2: 7-Фтор-3¹,3²-диметил-9-окса-2,5-диаза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-1⁶-илтрифторметансульфонат

[0394]

7-Фтор-1⁶-гидрокси-3¹,3²-диметил-9-окса-2,5-диаза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-4-он (промежуточное соединение 1-3-1, 138 мг, 0,36 ммоль) растворяют в дихлорметане (4 мл), к раствору добавляют ангидрид трифторметансульфоновой кислоты (72 мкл, 0,43 ммоль) и пиридин (43 мкл, 0,53 ммоль) и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрируют с получением сырого продукта, содержащего (7-фтор-3¹,3²-диметил-9-окса-2,5-диаза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-1⁶-илтрифторметансульфонат (185 мг, выход 99%). [0395]

Пример а-02-23 (конечный продукт I-3-3): 7-Фтор-3¹,3²-диметил-1⁶-(2-метилпиримидин-5-ил)-9-окса-2,5-диаза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-4-он

[0396]

7-Фтор-3¹,3²-диметил-9-окса-2,5-диаза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-1⁶-илтрифторметансульфонат (промежуточное соединение I-3-2, 185 мг, 0,36 ммоль) растворяют в 1,4-диоксане (4 мл) и воде (800 мкл), к раствору добавляют сложный пинаколовый эфир 2-метилпиримидин-5-бороновой кислоты (147 мг, 1,07 ммоль), [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]палладий(II) (116 мг, 142 мкмоль) и карбонат цезия (696 мг, 2,14 ммоль) и перемешивают полученную смесь при нагревании при 80°С в течение 2 часов. Нерастворимые вещества удаляют из реакционной смеси фильтрацией через слой целита, затем растворитель выпаривают и остаток очищают с помощью ВЭЖХ с получением 7-фтор-31, 32-диметил-1⁶-(2-метилпиримидин-5-ил)-9-окса-2,5-диаза-1(3,5)-хинолина-3(4,2)-пиперидинациклононафан-4-она (43,7 мг, выход 2 6%) в качестве низкополярной фракции.

ЖХМС (ЖХ-1): RT=1,03, m/z 465 [М+Н]⁺.

1Н-ЯМР (CD₃OD): δ (м.д.) 9,05 (2Н, с), 8,42 (1Н, д, J=2,5 Гц), 7,77 (1Н, д, J=8,5 Гц), 7,50 (1Н, д, J=8,5 Гц), 7,03 (1Н, д, J=2,5 Гц), 5,25 (1Н, д, J=6,5 Гц), 5,14 (1Н, уш. с), 4,26-4,12 (1Н, м), 4,08 (1Н, дд, J=12,0, 2,0 Гц), 3,93-3,77 (2Н, м), 3,69 (1Н, дт, J=12,0, 3,5 Гц), 3,67-3,42 (1Н, м), 2,96-2,81 (2Н, м), 2,77 (3Н, с), 2,57 (3Н, с), 2,25 (1Н, д, J=13,2 Гц), 2,02 (1Н, д, J=12,0 Гц, 1Н), 1,77 (1Н, дкв, J=12,0, 5,0 Гц), 1,40 (3Н, с), 1,34-1,20 (м, 1Н).

[0397]

[0398]

<Пример биологического испытания 1: Измерение ингибиторной активности в отношении IRAK-4 человека>

(1) Метод изменения

Для измерения активности IRAK-4 человека (Invitrogen, Cat. PV33 62) измеряют фосфорилирование пептидного субстрата IRAK-4 (биотин-KKKKRFSFKKSFKC) ферментом в присутствии 10 мкМ АТФ (Sigma-Aldrich, Cat. А7699) методом TR-FRET. Ферментативную реакцию проводят в реакционном буфере, содержащем 50 мМ HEPES (рН 7,2), 1 мМ DTT, 0,1 мМ Na₃VO₄, 5 мМ MgCl₂, 1 мМ MnCl₂ и 0,1% альбумина бычьей сыворотки (BSA). Для измерения активности ингибирования IRAK-4 тестируемое соединение добавляют в реакционный буфер, содержащий 1 нМ IRAK-4, 0,5 мкМ пептидного субстрата и 10 мкМ АТФ и инкубируют смесь при 23°С в течение 30 минут. Затем раствор для обнаружения, содержащий антитело, меченный криптатом европия (0,3 мкг/мл, антитело получают с использованием пептидного субстрата IRAK-4 в качестве антигена), стрептавидин-XL665 (2 мкг/мл, CisBio, Cat. 610SAXLB), 50 мМ HEPES (рН 7,2), 0,1% BSA, 120 мМ KF и 66,7 мМ EDTA (все концентрации реагентов представляют собой конечные концентрации) добавляют для завершения реакции и дополнительно инкубируют смесь при 23°С в течение 60 минут. Интенсивность флуоресценции измеряют при длинах волн 665 нм и 62 0 нм с помощью микропланшет-ридера и рассчитывают ферментативную активность как соотношение интенсивностей флуоресценции при 665 нм и 620 нм (665 нм/620 нм). Коэффициент подавления IRAK-4 при добавлении 12,5 мкМ стауроспорина (LC Laboratories, Cat. S-9300) определяют как 100%, коэффициент подавления IRAK-4 без добавления тестируемого соединения определяют как 0%, и IC₅₀ тестируемого соединения вычисляют с использованием 4-параметрической логистической модели программного обеспечения для анализа данных XLfit (ID Business Solutions Ltd.).

Операции и условия, используемые для измерения, могут быть соответствующим образом изменены в пределах такого диапазона, который может быть понятен специалистам в данной области техники и не окажет существенного влияния на результаты измерения.

[0399]

(2) Результаты измерения

Как показано ниже, соединения по настоящему изобретению в соответствии с определенным вариантом осуществления проявляют превосходные ингибиторные активности в отношении IRAK-4.

Когда измерение проводят несколько раз, результаты представляют как средние значения.

[0400]

[0402]

<Пример биологического испытания 2: Тест ингибирования LPS-стимулированного продуцирования TNFα с использованием клеточной линии острого моноцитарного лейкоза человека ТНР-1>

(1) Метод измерения

С помощью ТНР-1 анализа оценивают влияние тестируемого соединения на продуцирование TNFα, индуцированного стимуляцией LPS. Клетки ТНР-1 (АТСС, Cat. TIB-202) инокулируют на 96-луночный планшет с плотностью 1×105 клеток/160 мкл/лунка, тестируемое соединение добавляют в объеме 20 мкл и инкубируют планшет при 37°С в течение 1 часа в инкубаторе с 5% CO₂. Затем добавляют LPS в объеме 20 мкл (конечная концентрация 2,5 нг/мл, Sigma, Cat. L2630) и дополнительно инкубируют планшет в течение 4 часов. После инкубации планшет центрифугируют, из каждой лунки отбирают по 100 мкл супернатанта и используют для оценки количества TNFα с помощью HTRF (Cisbio, Cat. 62TNFPEB). При измерении количества TNFα супернатант разбавляют дважды средой, добавляют в лунки 384-луночного планшета в объеме 10 мкл, затем добавляют анти-TNFα-криптат (5 мкл) и анти-TNFα-XL665 (5 мкл) и планшет оставляют на ночь. Коэффициент интенсивности флуоресцентции при длинах волн 620 и 665 нм (620 нм/665 нм) измеряют с помощью микропланшет-ридера и вычисляют количество TNFα в супернатанте с использованием калибровочной кривой. Коэффициент подавления продуцирования TNFα, наблюдаемого без добавления LPS, определяют как 100%, коэффициент подавления продуцирования TNFα, наблюдаемого без добавления тестируемого соединения, определяют как 0%, и IC₅₀ тестируемого соединения вычисляют с помощью 4-параметрической логистической модели программного обеспечения для анализа данных XLfit (ID Business Solutions Ltd.).

[0403]

Используя 96-луночный планшет, из которого отбирают 100 мкл супернатанта, измеряют коэффициент выживаемости клеток и оценивают влияние нецелевого эффекта тестируемого соединения. ССК-8 (Dojindo, Cat. СК04-10) добавляют в объеме 5 мкл, планшет инкубируют при 37°С в течение 1 часа и с помощью микропланшет-ридера измеряют абсорбцию при 450 нм. Коэффициент выживаемости клеток без добавления LPS определяют как 100%, и IC₅₀ тестируемого соединения вычисляют с использованием XLfit.

Операции и условия, используемые для измерения, могут быть соответствующим образом изменены в пределах такого диапазона, который может быть понятен специалистам в данной области техники и не окажет существенного влияния на результаты измерения.

[0404]

(2) Результаты измерения

Как показано ниже, соединения по настоящему изобретению в соответствии с определенным вариантом осуществления показывают превосходную ингибиторную активность в отношении продуцирования TNFα.

Когда измерение проводят несколько раз, результаты представляют как средние значения.

[0405]

Промышленная применимость

[0407]

Соединения общей формулы (1) и их соли обладают превосходной ингибиторной активностью в отношении IRAK-4 и, следовательно, могут применяться в качестве активных ингредиентов лекарственных средства для профилактического лечения и/или терапевтического лечения заболеваний, связанных с ингибированием IRAK-4.

Изобретение относится к соединению, представленному общей формулой (1), или его фармацевтически приемлемой соли, в формуле (1) R¹ представляет собой -H или C_1-6 алкил; R² представляет собой -H или C_1-6 алкил; R³ представляет собой -H или C_1-6 алкил; Ar представляет собой 6-10-членный арил или 5-10-членный гетероарил, содержащий 2 гетероатома, выбранных из О, S и N, где Ar может быть замещенным 1 заместителем, выбранным из группы G²; группа G² представляет собой группу заместителей, состоящую из C_1-6 алкила, гидрокси-С_1-6 алкила, R^Ar1-O-C_1-3 алкила; R^Ar1 представляет собой -H, C_1-6 алкил, или 3-7-членное насыщенное углеводородное кольцо, R^Ar1 может быть замещенным 1-2 одинаковыми или разными заместителями, выбранными из группы G³; группа G³ представляет собой группу заместителей, состоящую из гидроксильной группы и 3-7-членного насыщенной углеводородной кольцевой группы; X¹ представляет собой N или CH; X² представляет собой NH или O; X³ представляет собой группу, представленную общей формулой (1-1), общей формулой (1-2) или приведенной далее формулой (1-3), a и b представляют направление присоединения; R²¹ and R²² независимо представляют собой -H; X⁴ представляет собой группу, представленную общей формулой (2-1), b и c представляют направление присоединения; в формуле (2-1), n представляет собой целое число от 1 до 3; Y представляет собой NR⁵¹ или O; R³¹ и R³² независимо представляют собой -H, C_1-3 алкил; R⁴¹ и R⁴² независимо представляют собой -Н, -F, C_1-3 алкил; или R⁴¹ и R⁴² могут объединяться с образованием 3-6-членного насыщенного углеводородного кольца; R⁵¹ представляет собой H или C_1-3 алкил; или R⁵¹ и R³¹ могут объединяться с образованием 4-6-членного насыщенного гетероциклического кольца, содержащего один гетероатом, выбранный из N. Технический результат: получено новое соединение, которое может найти применение в медицине для лечения IRAK-4-опосредованных заболеваний. 10 з.п. ф-лы, 7 табл., 70 пр.

1. Соединение, представленное приведенной далее общей формулой (1):

в формуле (1)

R¹ представляет собой -H или C_1-6 алкил;

R² представляет собой -H или C_1-6 алкил;

R³ представляет собой -H или C_1-6 алкил;

Ar представляет собой 6-10-членный арил или 5-10-членный гетероарил, содержащий 2 гетероатома, выбранных из О, S и N, где Ar может быть замещенным 1 заместителем, выбранным из группы G²;

группа G² представляет собой группу заместителей, состоящую из C_1-6 алкила, гидрокси-С_1-6 алкила, R^Ar1-O-C_1-3 алкила;

R^Ar1 представляет собой -H, C_1-6 алкил или 3-7-членное насыщенное углеводородное кольцо, R^Ar1 может быть замещенным 1-2 одинаковыми или разными заместителями, выбранными из группы G³;

группа G³ представляет собой группу заместителей, состоящую из гидроксильной группы и 3-7-членного насыщенной углеводородной кольцевой группы;

X¹ представляет собой N или CH;

X² представляет собой NH или O;

X³ представляет собой группу, представленную приведенной далее общей формулой (1-1):

приведенной далее общей формулой (1-2):

приведенной далее формулой (1-3):

a и b представляют направление присоединения;

R²¹ and R²² независимо представляют собой -H;

X⁴ представляет собой группу, представленную приведенной далее общей формулой (2-1):

b и c представляют направление присоединения;

в формуле (2-1),

n представляет собой целое число от 1 до 3;

Y представляет собой NR⁵¹ или O;

R³¹ и R³² независимо представляют собой -H, C_1-3 алкил;

R⁴¹ и R⁴² независимо представляют собой -Н, -F, C_1-3 алкил; или

R⁴¹ и R⁴² могут объединяться с образованием 3-6-членного насыщенного углеводородного кольца;

R⁵¹ представляет собой H или C_1-3 алкил; или

R⁵¹ и R³¹ могут объединяться с образованием 4-6-членного насыщенного гетероциклического кольца, содержащего один гетероатом, выбранный из N;

или его фармацевтически приемлемая соль.

2. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п. 1, где Ar представляет собой 5- или 6-членный гетероарил, содержащий два гетероатома, выбранных из O, S и N.

3. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п. 1 или 2, где R¹ представляет собой -H, метил или этил.

4. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по любому из пп. 1-3, где X² представляет собой NH.

5. Соединение или его соль по любому из пп. 1-4, где

X³ представляет собой группу, представленную приведенной далее общей формулой (1-1-1):

[Формула 7]

6. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по любому из пп. 1-5, где

в общей формуле (2-1) для X⁴ n равно 1.

7. Соединение или его соль по любому из пп. 1-6, где

Ar представляет собой группу, представленную приведенной далее общей формулой (3-1):

[Формула 8]

в формуле (3-1)

R^Ar2 представляет собой -H, C_1-6 алкил, гидрокси-С_1-6 алкил или R^Ar1-O-C_1-3 алкил, R^Ar1 принимает значения, определенные выше).

8. Соединение или его соль по любому из пп. 1-7, где

Ar представляет собой группу, представленную общей формулой (3-1), и в формуле (3-1)

R^Ar2 представляет собой -H, метил, гидроксиметил или -CH₂-O-R^Ar1, R^Ar1 принимает значения, описанные выше).

9. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по любому из пп. 1-8, где R³ представляет собой -H.

10. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по любому из пп. 1-9, где R² представляет собой -H или метил.

11. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по любому из пп. 1- 10, где R¹ представляет собой -H или C_1-3 алкил.