ПЕРЕКРЕСТНАЯ ССЫЛКА НА РОДСТВЕННУЮ ЗАЯВКУ

[0001] Данная заявка заявляет приоритет по предварительной заявке США № 62/701065, поданной 20 июля 2018 г., и предварительной заявке США № 62/844958, поданной 8 мая 2019 г., содержание которых включено в данный документ в полном объеме посредством ссылки.

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[0002] Предложены анти-CD112R антитела, а также их применение для усиления, повышения и поддержания противоопухолевого иммунного ответа, лечения рака и усиления взаимодействий CD226 с CD112.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[0003] Звенья и врожденной, и адаптивного иммунной системы используют узкоспециализированные иммунные клетки для инспекции организма в поисках признаков злокачественного новообразования. Врожденный иммунитет обеспечивает первую линию защиты и быстрый ответ с использованием таких механизмов, как барьеры и деструктивные пептиды, которые являются неспецифическими и существуют в природе. Природные клетки-киллеры (NK) представляют собой тип лимфоцитов, которые являются частью врожденной иммунной системы и могут распознавать и уничтожать инфицированные вирусом и опухолевые клетки, используя гранзимы, хранящиеся в их цитоплазме.

[0004] Адаптивный иммунитет развивается со временем в ответ на антиген и обеспечивает длительный иммунитет. Цитотоксические лимфоциты (ЦТЛ), также известные как CD8⁺ T-клетки, являются частью адаптивного иммунного ответа, поскольку они распознают антигены вируса и опухоли, представленные антигенпрезентирующими клетками (АПК). ЦТЛ активируются при взаимодействии с АПК, такой как дендритная клетка или макрофаг. АПК представляет опухолевые антигены в контексте молекул ГКГС к T-клеточному рецептору (ТКР) на поверхности T-клеток. Во время этого когнатного взаимодействия АПК обеспечивает костимулирующий сигнал, который приводит к активации Т-клеток, пролиферации Т-клеток и уменьшению или устранению клеток, экспрессирующих антиген, посредством цитотоксических механизмов.

[0005] Применение анти-CD112R иммунотерапии дает возможность повышать, усиливать и поддерживать иммунные ответы. CD112R представляет собой ингибирующий рецептор, в первую очередь экспрессируемый Т-клетками и NK-клетками, и который конкурирует за связывание CD112 с активирующим рецептором CD226. Взаимодействие CD112 с CD112R имеет более высокую аффинность, чем с CD226, и тем самым эффективно регулирует активацию клеток, опосредованную CD226. Анти-CD112R антитела, которые блокируют взаимодействие с CD112, ограничивают подавляющую передачу сигналов непосредственно нижестоящему CD112R, одновременно способствуя большей активации иммунных клеток за счет увеличения взаимодействий CD226 с CD112. В исследованиях in vitro было показано, что анти-CD112R антитела увеличивают пролиферацию, активацию и цитотоксичность иммунных эффекторных клеток.

[0006] Экспрессия мРНК CD112R обнаруживается в ряде раковых тканей и основана на прогнозном анализе с использованием набора данных TCGA (Атлас ракового генома). Его экспрессия наиболее сильна в опухолях, обогащенных Т- и NK-клетками. Помимо экспрессии на миелоидных клетках, экспрессия лиганда CD112R, CD112, обычно повышается на опухолевых клетках различного происхождения. Учитывая эти обстоятельства, взаимодействие CD112R с инфильтрирующими опухоль иммунными клетками имеет сильный потенциал для негативной регуляции местных иммунных ответов в микроокружении опухоли.

[0007] Таким образом, терапевтическое лечение анти-CD112R антителами дает возможность снизить подавляющую передачу сигналов, которая предположительно возникает, когда иммунные клетки, экспрессирующие CD112R, взаимодействуют с CD112 на опухолевых клетках и/или миелоидных клетках в микроокружении опухоли и могут усиливать, повышать и поддерживать противоопухолевые иммунные ответы.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[0008] В некоторых вариантах осуществления предложено выделенное анти-CD112R антитело. Такое выделенное анти-CD112R антитело связывается с CD112R человека, при этом указанное антитело блокирует связывающее взаимодействие между CD112 человека и CD112R человека и не блокирует связывающее взаимодействие между мышиным CD112 и мышиным CD112R, причем указанное антитело необязательно полностью человеческое или гуманизированное.

[0009] В некоторых вариантах осуществления в настоящем изобретении предложено выделенное антитело, содержащее:

(a) HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1; (b) HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2; (c) HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3; (d) LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4; (e) LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5; и (f) LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6; или

(a) HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 101; (b) HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 102; (c) HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 103; (d) LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 104; (e) LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 105; и (f) LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 106; или

(a) HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 201; (b) HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 202; (c) HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 203; (d) LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 204; (e) LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 205; и (f) LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 206; или

(a) HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 301; (b) HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 302; (c) HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 303; (d) LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 304; (e) LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 305; и (f) LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 306; или

(a) HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 401; (b) HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 402; (c) HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 403; (d) LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 404; (e) LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 405; и (f) LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 406; или

(a) HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 501; (b) HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 502; (c) HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 503; (d) LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 504; (e) LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 505; и (f) LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 506; или

(a) HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 601; (b) HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 602; (c) HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 603; (d) LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 604; (e) LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 605; и (f) LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 606; или

(a) HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 701; (b) HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 702; (c) HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 703; (d) LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 704; (e) LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 705; и (f) LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 706; или

(a) HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 801; (b) HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 802; (c) HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 803; (d) LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 804; (e) LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 805; и (f) LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 806; или

(a) HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 901; (b) HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 902; (c) HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 903; (d) LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 904; (e) LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 905; и (f) LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 906; или

(a) HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1001; (b) HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1002; (c) HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1003; (d) LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1004; (e) LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1005; и (f) LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1006; или

(a) HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2001; (b) HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2002; (c) HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2003; (d) LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2004; (e) LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2005; и (f) LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2006; или

(a) HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3001; (b) HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3002; (c) HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3003; (d) LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3004; (e) LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3005; и (f) LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3006; или

(a) HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4001; (b) HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4002; (c) HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4003; (d) LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4004; (e) LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4005; и (f) LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4006.

[0010] В некоторых вариантах осуществления антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH) и вариабельную область легкой цепи (VL), при этом:

VH по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 12 и VL по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 18; или

VH по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 112 и VL по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 118; или

VH по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 212 и VL по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 218; или

VH по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 312 и VL по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 318; или

VH по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 412 и VL по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 418; или

VH по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 512 и VL по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 518; или

VH по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 612 и VL по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 618; или

VH по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 712 и VL по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 718; или

VH по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 812 и VL по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 818; или

VH по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 912 и VL по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 918; или

VH по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 1012 и VL по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 1018; или

VH по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 2012 и VL по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 2018; или

VH по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 3012 и VL по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 3018; или

VH по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 4012 и VL по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 4018.

[0011] В некоторых вариантах осуществления антитело содержит шесть CDR (HCDR1, HCDR2, HCDR3, LCDR1, LCDR2 и LCDR3), как описано в данном документе, и последовательности VH и/или VL, которые по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичны аминокислотной последовательности VH и/или VL, описанной в данном документе. В некоторых вариантах осуществления последовательности VH и/или VL не на 100% идентичны аминокислотной последовательности, описанной в данном документе. В некоторых вариантах осуществления антитело содержит аминокислотные последовательности HCDR1, HCDR2, HCDR3, LCDR1, LCDR2 и LCDR3, описанные в настоящем документе, и вариацию последовательности в последовательностях VH и/или VL, которая находится за пределами последовательностей CDR. В таких вариантах осуществления вариация последовательностей VH и/или VL находится в пределах одной или более каркасных областей VH и/или VL.

[0012] В некоторых вариантах осуществления антитело содержит последовательности VH и/или VL, которые по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100%. идентичны аминокислотной последовательности, описанной в данном документе. В некоторых вариантах осуществления последовательности VH и/или VL не на 100% идентичны аминокислоте, описанной в данном документе. В таких вариантах осуществления вариация последовательностей VH и/или VL находится в и/или за пределами последовательностей CDR, если не указано иное.

[0013] В некоторых вариантах осуществления антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH) и вариабельную область легкой цепи (VL), при этом:

VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 12, а VL содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 18; или

VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 112, а VL содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 118; или

VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 212, а VL содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 218; или

VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 312, а VL содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 318; или

VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 412, а VL содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 418; или

VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 512, а VL содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 518; или

VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 612, а VL содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 618; или

VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 712, а VL содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 718; или

VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 812, а VL содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 818; или

VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 912, а VL содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 918; или

VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1012, а VL содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1018; или

VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2012, а VL содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2018; или

VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3012, а VL содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3018; или

VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4012, а VL содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4018.

[0014] В некоторых вариантах осуществления предложены анти-CD112R антитела, которые активируют NK-клетки. В некоторых вариантах осуществления предложены анти-CD112R антитела, которые повышают регуляцию CD137 на NK-клетках. В некоторых вариантах осуществления анти-CD112R антитела, которые активируют NK-клетки и/или повышают регуляцию CD137 на NK-клетках, представляют собой любые антитела, описанные в Таблице последовательностей, такие как, например, антитела 32, 33, 34, 35 и 36. В некоторых вариантах осуществления анти-CD112R антитела, которые активируют NK-клетки и/или повышают регуляцию CD137 на NK-клетках, содержат шесть CDR антител 32, 33, 34, 35 и 36, соответственно (см. Таблицу последовательностей).

[0015] В некоторых вариантах осуществления антитело представляет собой моноклональное антитело. В некоторых вариантах осуществления антитело представляет собой гуманизированное антитело. В некоторых вариантах осуществления антитело представляет собой полностью человеческое антитело. В некоторых вариантах осуществления антитело представляет собой фрагмент антитела, выбранный из Fab, Fab', Fv, scFv или (Fab')₂. В некоторых вариантах осуществления антитело представляет собой полноразмерное антитело. В некоторых вариантах осуществления выделенное антитело содержит Fc-область IgG1, IgG2, IgG3 или IgG4. В некоторых вариантах осуществления в описании предложена композиция, содержащая раскрытое в данном документе антитело и фармацевтически приемлемый носитель.

[0016] В некоторых вариантах осуществления антитело усиливает дегрануляцию NK-клеток, увеличивает активацию NK-клеток, увеличивает активацию внутриопухолевых NK-клеток при их представлении в комбинации с анти-TIGIT антителом, ингибирует рост опухоли in vivo и/или предотвращает приживление опухоли при повторном заражении опухолью. В некоторых таких вариантах осуществления антитело содержит константную область тяжелой цепи IgG1 человека, и антитело увеличивает дегрануляцию NK-клеток, увеличивает активацию NK-клеток, увеличивает активацию внутриопухолевых NK-клеток при их представлении в комбинации с анти-TIGIT антителом, ингибирует рост опухоли in vivo и/или предотвращает приживление опухоли при повторном заражении опухолью по сравнению с идентичным в остальном антителом, содержащим константную область тяжелой цепи IgG человека другого изотипа.

[0017] В некоторых вариантах осуществления в описании предложен способ усиления, повышения и/или поддержания противоопухолевого иммунного ответа у субъекта, включающий введение антитела или композиции, описанной в данном документе, субъекту, имеющему опухоль.

[0018] В некоторых вариантах осуществления в описании предложен способ лечения рака у субъекта, включающий введение антитела или композиции, описанной в данном документе, субъекту, имеющему рак. В некоторых вариантах осуществления рак представляет собой карциному, лимфому, бластому, саркому или лейкоз. В некоторых вариантах осуществления рак представляет собой плоскоклеточный рак, мелкоклеточный рак легкого, рак гипофиза, рак пищевода, астроцитому, саркому мягких тканей, немелкоклеточный рак легкого (в том числе плоскоклеточный немелкоклеточный рак легкого), аденокарциному легкого, плоскоклеточную карциному легкого, рак брюшины, гепатоцеллюлярный рак, рак желудочно-кишечного тракта, рак поджелудочной железы, глиобластому, рак шейки матки, рак яичников, рак печени, рак мочевого пузыря, гепатому, рак молочной железы, рак толстой кишки, рак толстой и прямой кишок, карциному эндометрия или матки, карциному слюнной железы, рак почки, почечно-клеточную карциному, рак печени, рак предстательной железы, рак влагалища, рак щитовидной железы, карциному печени, рак головного мозга, рак эндометрия, рак яичка, холангиокарциному, рак желчного пузыря, рак желудка, меланому или различные типы рака головы и шеи (в том числе плоскоклеточную карциному головы и шеи).

[0019] В некоторых вариантах осуществления в описании предложен способ усиления взаимодействий CD226 с CD112 у субъекта, включающий введение субъекту антитела или композиции, описанной в данном документе.

[0020] В некоторых вариантах осуществления в описании предложен способ усиления активации CD8 Т-клеток у субъекта, включающий введение антитела или композиции, описанной в данном документе, субъекту, нуждающемуся в активации CD8 Т-клеток.

[0021] В некоторых вариантах осуществления в описании предложен способ усиления продукции гамма-интерферона CD8 Т-клетками у субъекта, включающий введение антитела или композиции, описанной в настоящем документе, субъекту, нуждающемуся в продукции гамма-интерферона CD8 Т-клетками.

[0022] В некоторых вариантах осуществления в описании предложен способ усиления активации NK-клеток у субъекта, включающий введение антитела или композиции, описанной в данном документе, субъекту, нуждающемуся в активации NK-клеток.

[0023] В некоторых вариантах осуществления в описании предложен способ усиления цитотоксичности, опосредованной NK-клетками, у субъекта, включающий введение антитела или композиции, описанной в данном документе, субъекту, нуждающемуся в повышении цитотоксичности, опосредованной NK-клетками.

[0024] В некоторых вариантах осуществления способы, описанные в настоящем документе, дополнительно включают введение второй терапии. В некоторых вариантах осуществления вторая терапия представляет собой лучевую терапию, хирургическое вмешательство или введение второго агента. В некоторых вариантах осуществления вторая терапия представляет собой второй агент. В некоторых таких вариантах осуществления второй агент представляет собой антагонист PD-1, PD-L1, CTLA-4, Lag-3 или TIM-3. В некоторых вариантах осуществления второй агент представляет собой антагонист TIGIT или CD96. В некоторых вариантах осуществления второй агент представляет собой антагонист PVRL1, PVRL2, PVRL3, PVRL4 или CD155. В некоторых вариантах осуществления второй агент представляет собой антагонист CD47, CD39 или IL-27. В некоторых вариантах осуществления второй агент представляет собой агонист STING.

[0025] В некоторых вариантах осуществления в описании предложено применение антитела или композиции, описанной в настоящем документе, для усиления и/или увеличения и/или поддержания противоопухолевого иммунитета и/или лечения рака и/или усиления взаимодействий CD226 с CD112.

[0026] В некоторых вариантах осуществления в описании предложено применение антитела или композиции, описанной в настоящем документе, для приготовления лекарственного средства для усиления и/или увеличения и/или поддержания противоопухолевого иммунного ответа и/или лечения рака и/или усиления взаимодействий CD226 с CD112.

[0027] В некоторых вариантах осуществления в описании предложена нуклеиновая кислота, кодирующая антитело, описанное в данном документе.

[0028] В некоторых вариантах осуществления в описании предложена клетка-хозяин, содержащая нуклеиновую кислоту, кодирующую антитело, описанное в данном документе.

[0029] В некоторых вариантах осуществления в описании предложен способ получения описанного в данном документе антитела, включающий культивирование клетки-хозяина, содержащей нуклеиновую кислоту, кодирующую антитело, описанное в данном документе, при этом клетка-хозяин культивируется в условиях, при которых экспрессируется антитело. В некоторых вариантах осуществления способ дополнительно включает очищение антитела.

[0030] Иллюстративные варианты осуществления изобретения включают следующее:

Варианты осуществления 1. Выделенное анти-CD112R антитело, которое связывается с CD112R человека, при этом указанное антитело блокирует связывающее взаимодействие между CD112 человека и CD112R человека и не блокирует связывающее взаимодействие между мышиным CD112 и мышиным CD112R, причем указанное антитело необязательно полностью человеческое или гуманизированное.

Варианты осуществления 2. Выделенное антитело по варианту осуществления 1, в котором выделенное антитело содержит:

(a) HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 701; (b) HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 702; (c) HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 703; (d) LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 704; (e) LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 705; и (f) LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 706; или

(a) HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1001; (b) HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1002; (c) HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1003; (d) LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1004; (e) LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1005; и (f) LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1006; или

(a) HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2001; (b) HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2002; (c) HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2003; (d) LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2004; (e) LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2005; и (f) LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2006; или

(a) HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3001; (b) HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3002; (c) HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3003; (d) LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3004; (e) LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3005; и (f) LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3006; или

(a) HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4001; (b) HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4002; (c) HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4003; (d) LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4004; (e) LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4005; и (f) LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4006; или

(a) HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1001 с 1, 2 или 3 аминокислотными заменами в положениях 4, 5 и/или 6 SEQ ID NO: 1001; (b) HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1002 с 1, 2, 3, 4 или 5 аминокислотными заменами в положениях 1, 3, 5, 6 и/или 8 SEQ ID NO: 1002; (c) HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1003; (d) LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1004; (e) LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1005; и (f) LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1006.

Варианты осуществления 3. Выделенное антитело по варианту осуществления 1 или 2, в котором указанное антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH) и вариабельную область легкой цепи (VL), при этом:

V_H по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 712, и VL по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 718; или

V_H по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 1012, и VL по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 1018; или

VH по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 2012, и VL по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 2018; или

VH по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 3012, и VL по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 3018; или

VH по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 4012 и VL по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 4018, необязательно при условии, что если какая-либо вариация последовательности присутствует в CDR, такая вариация последовательности находится в пределах HCDR1 или HCDR2 с не более чем 3-мя аминокислотными заменами, например, не более чем 2-мя аминокислотными заменами в положениях 4, 5 и/или 6 HCDR1 и с не более чем 5-ю аминокислотными заменами, например, не более чем 2-мя аминокислотными заменами в положениях 1, 3, 5, 6 и/или 8 HCDR2, необязательно, при этом вариация не находится в пределах HCDR3, LCDR1, LCDR2 и LCDR3.

Варианты осуществления 4. Выделенное антитело по любому из вариантов осуществления 1-3, в котором антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH) и вариабельную область легкой цепи (VL), при этом:

VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 712 и VL содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 718; или

VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1012 и VL содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1018; или

VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2012 и VL содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2018; или

VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3012 и VL содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3018; или

VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4012 и VL содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4018.

Варианты осуществления 5. Выделенное антитело по любому из предыдущих вариантов осуществления, в котором указанное антитело представляет собой моноклональное антитело.

Варианты осуществления 6. Выделенное антитело по любому из предыдущих вариантов осуществления, в котором антитело представляет собой полноразмерное антитело или фрагмент антитела, необязательно Fab, Fab', Fv, scFv или (Fab')₂.

Варианты осуществления 7. Выделенное антитело по любому из вариантов осуществления 1-5, в котором антитело содержит Fc-область IgG1, IgG2, IgG3 или IgG4, при этом антитело необязательно содержит константную область тяжелой цепи IgG1 человека, константную область тяжелой цепи IgG4 человека или мутантную константную область тяжелой цепи IgG4 человека, при этом мутантная константная область тяжелой цепи IgG4 человека необязательно содержит мутацию, выбранную из замены в Ser228, замены в Leu235, замены в Asn297 или их комбинации, нумерация в соответствии с нумерацией EU, или замена S228P и замена L235E, нумерация в соответствии с нумерацией EU.

Варианты осуществления 8. Выделенное антитело по любому из вариантов осуществления 1-7, в котором антитело

увеличивает дегрануляцию NK-клеток; и/или

увеличивает активацию NK-клеток; и/или

увеличивает активацию внутриопухолевых NK-клеток при представлении в комбинации с анти-TIGIT антителом; и/или

подавляет рост опухоли in vivo; и/или

предотвращает приживление опухоли при повторном заражении опухолью, необязательно, при этом антитело представляет собой IgG1 или IgG4.

Варианты осуществления 9. Фармацевтическая композиция, содержащая антитело по любому из вариантов осуществления 1-8 и фармацевтически приемлемый носитель, при этом композиция необязательно содержит опсонизирующий агент, агент, истощающий популяцию регуляторных Т-клеток, химиотерапию и/или антагонист PD-1, PD- L1, CTLA-4, Lag-3 или TIM-3.

Варианты осуществления 10. Выделенное антитело по любому из вариантов осуществления 1-8 или фармацевтическая композиция по варианту осуществления 9 для применения в усилении, повышении и/или поддержании противоопухолевого иммунного ответа у субъекта, необязательно, при этом у субъекта усиливается активация CD8 Т-клеток или увеличивается продукция гамма-интерферона CD8 Т-клетками, или, необязательно, при этом у субъекта усиливается активация NK-клеток, или у субъекта усиливается цитотоксичность, опосредованная NK-клетками, или, необязательно, при этом у субъекта усиливается взаимодействия CD226 с CD112.

Варианты осуществления 11. Выделенное антитело по любому из вариантов осуществления 1-8 или фармацевтическая композиция по варианту осуществления 9 для применения при лечении рака у субъекта, при этом рак, необязательно, представляет собой карциному, лимфому, бластому, саркому или лейкемию, или при этом рак, необязательно, представляет собой плоскоклеточный рак, мелкоклеточный рак легкого, рак гипофиза, рак пищевода, астроцитому, саркому мягких тканей, немелкоклеточный рак легкого (в том числе плоскоклеточный немелкоклеточный рак легкого), аденокарциному легкого, плоскоклеточную карциному легкого, рак брюшины, гепатоцеллюлярный рак, рак желудочно-кишечного тракта, рак поджелудочной железы, глиобластому, рак шейки матки, рак яичников, рак печени, рак мочевого пузыря, гепатому, рак молочной железы, рак толстой кишки, рак толстой и прямой кишок, карциному эндометрия или матки, карциному слюнной железы, рак почки, почечно-клеточную карциному, рак печени, рак предстательной железы, рак влагалища, рак щитовидной железы, карциному печени, рак головного мозга, рак эндометрия, рак яичка, холангиокарциному, рак желчного пузыря, рак желудка, меланому или различные типы рака головы и шеи (в том числе плоскоклеточную карциному головы и шеи).

Варианты осуществления 12. Выделенное антитело или фармацевтическая композиция для применения в соответствии с вариантом осуществления 10 или 11, при этом применение дополнительно включает введение второй терапии, причем вторая терапия необязательно представляет собой лучевую терапию, хирургическое вмешательство или введение второго агента, где второй агент необязательно является антагонистом PD-1, PD-L1, CTLA-4, Lag-3 или TIM-3, или антагонистом TIGIT или CD96, или антагонистом PVRL1, PVRL2, PVRL3, PVRL4 и CD155, или антагонистом CD47, или является антагонистом CD39, или является антагонистом IL-27, или является агонистом STING, при этом второй агент необязательно представляет собой антагонистическое антитело.

Варианты осуществления 13. Нуклеиновая кислота, кодирующая антитело по любому из вариантов осуществления 1-8.

Варианты осуществления 14. Клетка-хозяин, содержащая нуклеиновую кислоту по варианту осуществления 13.

Варианты осуществления 15. Способ получения антитела по любому из вариантов осуществления 1-8, включающий культивирование клетки-хозяина согласно варианту осуществления 14 в условиях, при которых экспрессируется антитело, необязательно дополнительно включающий очищение антитела.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ

[0031] На Фиг. 1 показана способность анти-CD112R антител по сравнению с контрольным антителом изотипа IgG1 связываться с клетками Jurkat, сконструированными для сверхэкспрессии CD112R человека. Интенсивность связывания оценивали по среднему геометрическому значению интенсивности флуоресценции (gMFI) метки антитела Alexa Fluor® 647.

[0032] На Фиг. 2A-2B показана способность анти-CD112R антител по сравнению с контрольным антителом изотипа IgG1 блокировать взаимодействие CD112R с CD112 на клетках Jurkat, сконструированных для сверхэкспрессии CD112R человека. На Фиг. 2А, клетки предварительно инкубировали либо с изотипическим контролем IgG1, либо с анти-CD112R антителом. После промывки клетки одновременно окрашивали биотинилированным his-меченным CD112 человека и стрептавидином-PE. Способность анти-CD112R антител блокировать связывание CD112 с CD112R оценивали по среднему геометрическому значению интенсивности флуоресценции (gMFI) PE-метки и отображали как процент ингибирования. Процент ингибирования рассчитывали как [100 - ((MFI тестового образца/Макс. MFI) * 100%)]. На Фиг. 2B показан процент ингибирования, измеренный с помощью ИФА, взаимодействия между CD112R человека и CD112 с помощью описанных в данном документе анти-CD112R антител.

[0033] На Фиг. 3 показана усиленная цитотоксичность, опосредованная Nk-клетками человека, против клеток REH (линия клеток лейкемии человека) в присутствии анти-CD112R антител по сравнению с контрольным антителом изотипа IgG1. Активированные NK-клетки и клетки REH, меченные CellTrace violet, культивировали совместно в течение четырех часов. После совместного культивирования жизнеспособность клеток REH оценивали путем окрашивания 7-AAD. Цитотоксичность (процент относительно изотипического контроля) рассчитывали как ((процент мертвых клеток с тестовым антителом минус процент мертвых клеток с антителом изотипического контроля), деленный на процент мертвых клеток с антителом изотипического контроля) x 100.

[0034] На Фиг. 4 показана усиленная антиген-управляемая активация CD8+ Т-клеток, измеренная посредством секреции ИФН-γ, в присутствии анти-CD112R антител по сравнению с контрольным антителом изотипа IgG1. Клетки Colo205 обрабатывали пептидом pp65 и совместно культивировали с CMV-специфическими Т-клетками человека в присутствии анти-CD112R антитела или контрольного антитела изотипа IgG1. Уровни ИФН-γ в супернатантах культивируемых клеток измеряли с помощью Luminex. CD8+ Т-клетки, обработанные анти-CD112R антителами 2 и 5, приводили к большей секреции ИФН-γ, чем наблюдаемая с изотипическим контролем.

[0035] На Фиг. 5 показан график, показывающий, что комбинация мышиных анти-CD112R антител и мышиных анти-TIGIT антител оказывает терапевтический эффект на мышиной сингенной модели опухоли CT-26. Мышей с опухолью рандомизировали на четыре группы и дважды в неделю в течение двух недель им вводили внутрибрюшинно инъекцию 1) антитела изотипического контроля; 2) анти-TIGIT антитела; 3) анти-CD112R антитела; или 4) анти-TIGIT антитела в сочетании с анти-CD112R антителом. Средние объемы опухолей для каждой группы лечения показаны в зависимости от времени. Результаты демонстрируют, что комбинация анти-CD112R антитела с анти-TIGIT антителом была эффективной для снижения роста опухоли по сравнению с животными, получавшими изотипический контроль, в то время как монотерапия анти-CD112R антителом или анти-TIGIT антителом показала либо отсутствие активности, либо лишь умеренный эффект на снижение роста опухоли.

[0036] На Фиг. 6 показан график, изображающий повышенную экспрессию CD112R в PBMC после активации анти-CD3 антителом. РВМС человека стимулировали in vitro анти-CD3 антителом, а экспрессию CD112R оценивали с помощью проточной цитометрии. Количественное определение связывания антитела к CD112R оценивали по среднему геометрическому значению интенсивности флуоресценции (gMFI) метки антитела Alexa Fluor® 647 для указанного типа клеток. CD112R показан как кратное изменение по сравнению с отрицательным контролем (FON, (gMFI CD112R, деленный на gMFI изотипического контроля)).

[0037] На Фиг. 7 показана усиленная дегрануляция, опосредованная NK-клетками, в ответ на опухолевые клетки в присутствии анти-CD112R антител с изотипом IgG1. NK-клетки человека и клетки Raji.CD112 совместно культивировали в течение четырех часов с антителом к CD107a PE в присутствии антител к CD112R. После совместного культивирования дегрануляцию NK-клеток определяли по частоте встречаемости NK-клеток, которые были CD107a-положительными.

[0038] На Фиг. 8A-8D показана усиленная активация NK-клеток в присутствии антитела к CD112R с изотипом IgG1. PBMC человека от 2 разных доноров и клетки K562 совместно культивировали в течение 16 часов в присутствии антитела к CD112R. После совместного культивирования активацию NK-клеток определяли по частоте встречаемости NK-клеток, которые были CD137-положительными. Результаты для донора 1 и донора 2 в двух независимых анализах показаны на Фиг. 8A-8D, соответственно.

[0039] На Фиг. 9 показано ингибирование роста опухоли у мышей, которых лечили анти-CD112R антителом. На Фигуре показаны сводные данные 3-х экспериментов, N=44-45 на группу. Статистический анализ был выполнен с помощью теста Манна-Уитни на 24 день после имплантации.

[0040] На Фиг. 10A-10B показано, что введение анти-CD112R антитела увеличивает общую выживаемость мышей, инокулированных опухолями CT-26, и защищает мышей от повторного заражения опухолью. На Фиг.10А показана частота выживания мышей после заражения первичной опухолью с введением анти-CD112R антитела. У выживших мышей не было пальпируемых опухолей после 50-го дня инокуляции, и считалось, что они являются мышами с полным клиническим ответом. На Фиг. 10B показано ингибирование роста опухоли у выживших мышей после повторного заражения опухолью по сравнению с наивными контрольными мышами. Статистический анализ выполняли с помощью теста Мантела-Кокса на 50-й день после имплантации (Фиг. 10A) и теста Манна-Уитни на 15-й день после имплантации (Фиг. 10B).

[0041] На Фиг. 11 показано, что эффективность блокады CD112R in vivo на мышиной модели опухоли CT26 зависит от NK-клеток и CD8 T-клеток. На Фигуре показано ингибирование роста опухоли у мышей, которых лечили анти-CD112R антителом, с одновременным истощением популяции либо NK-клеток, либо CD8 T-клеток.

[0042] На Фиг. 12A-12B показана экспрессия CD69 (Фиг. 12A) и гранзима B (Фиг. 12B) на внутриопухолевых NK-клетках в модели опухоли CT-26 после введения анти-CD112R антитела.

[0043] На Фиг. 13A-13F показаны средние (Фиг. 13A) и индивидуальные (Фиг. 13 B-E) значения измерений объема опухоли в зависимости от времени на модели опухоли CT-26 после введения только анти-CD112R антител и в комбинации с анти-PD1 антителами. На Фиг. 13F показана общая выживаемость без опухолей на 50-й день после имплантации как доля выживших без опухолей на группу.

[0044] На Фиг. 14A-14F показано выравнивание последовательностей CDR описанных в данном документе антител. На Фиг. 14A-14C показаны последовательности CDR вариабельной области тяжелой цепи, а на Фиг. 14D-14F показаны последовательности CDR вариабельной области легкой цепи. На каждой из Фиг. 14A - 14F в первом столбце показаны HCDR1 (Фиг. 14A), HCDR2 (Фиг. 14B) и HCDR3 (Фиг. 14C), LCDR1 (Фиг. 14D), LCDR2 (Фиг. 14E) и LCDR3 (Фиг. 14F), при этом номер клона антитела указан перед H1 (для HCDR1), H2 (для HCDR2), H3 (для HCDR3), L1 (для LCDR1), L2 (для LCDR2) и L3 (для LCDR3). Во втором столбце показана последовательность, в третьем столбце показано количество аминокислот в последовательности, а в последнем столбце показан процент идентичности каждой последовательности относительно последовательности клона 32 исходного антитела. Клоны 32, 33, 34, 35 и 36 членов семейства выделены жирным шрифтом.

[0045] На Фиг. 15A-15H показано выравнивание последовательностей каркасной области описанных в данном документе антител. На Фиг. 15A-15D показаны последовательности каркасной области вариабельной области тяжелой цепи, а на Фиг. 15E-15H показаны последовательности каркасной области вариабельной области легкой цепи. На каждой из Фиг. 15A - 15F в первом столбце показаны FR1 тяжелой цепи (Фиг. 15A), FR2 (Фиг. 15B), FR3 (Фиг. 15C), FR4 (Фиг. 15D) и FR1 легкой цепи (Фиг. 15E), FR2 (Фиг. 15F), а также FR3 (Фиг. 15G) и FR4 (Фиг. 15H), при этом номер клона антитела указан перед VH (для HFR1, HFR3, HFR3 и HFR4) и VL (для LFR1, LFR2, LFR3 и LFR4). Во втором столбце показана последовательность, а в последнем столбце показан процент идентичности каждой последовательности относительно последовательности из клона 32 исходного антитела. Клоны 32, 33, 34, 35 и 36 членов семейства выделены жирным шрифтом.

[0046] На Фиг. 16A-16B показано выравнивание последовательностей вариабельной области описанных в данном документе антител. На Фиг. 16A показаны последовательности вариабельной области тяжелой цепи, а на Фиг. 16B показаны последовательности вариабельной области легкой цепи. Каждая последовательность помечена соответствующим номером клона. Показан процент идентичности каждой последовательности относительно последовательности из клона 32 антитела. Клоны 32, 33, 34, 35 и 36 членов семейства выделены жирным шрифтом.

[0047] На Фиг. 17 показана степень связывания описанных в данном документе анти-CD112R антител и дополнительных анти-CD112R антител (антител A, B и C, которые связывают CD112R человека) с клетками, экспрессирующими CD112R мыши.

[0048] На Фиг. 18 показана степень связывания описанных в данном документе анти-CD112R антител и дополнительных анти-CD112R антител (антител A, B и C, которые связывают CD112R человека) с растворимым CD112R мыши.

[0049] На Фиг. 19 показано процентное значение ингибирования взаимодействия между CD11R мыши и CD112 мыши с помощью описанных в данном документе анти-CD112R антител и дополнительных анти-CD112R антител (антител A, B и C, которые связывают CD112R человека).

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ВАРИАНТОВ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ

ОПРЕДЕЛЕНИЯ

[0050] В данной заявке использование «или» означает «и/или», если не указано иное. В контексте пункта формулы со множественной зависимостью использование «или» относится к более чем одному предшествующему независимому или зависимому пункту формулы только в альтернативе. Термины «содержащий», «включающий» и «имеющий» могут использоваться взаимозаменяемо в данном документе.

[0051] Термины «CD112R», «PVR-связанный домен иммуноглобулина, содержащий», «рецептор CD112», «белок, содержащий домен иммуноглобулина, связанный с рецептором полиовируса», «домен иммуноглобулина, связанный с рецептором полиовируса, содержащий^», «рецептор нектина-2», «C7orf15» и «трансмембранный белок PVRIG» используются взаимозаменяемо и относятся к нативному CD112R человека, если специально не указано иное (например, CD112R мыши, CD112R яванского макака и т.д.). Этот термин включает полноразмерный непроцессированный CD112R, а также любую форму CD112R, которая возникает в результате процесинга в клетке. Термин охватывает встречающиеся в природе варианты CD112R человека, например, варианты сплайсинга или аллельные варианты. Внешние идентификаторы гена CD112R включают Entrez Gene: 79037, Ensembl: ENSG00000213413, OMIM: 617012 и UniProtKB: Q6DKI7.

[0052] «Аффинность» относится к силе суммарного количества нековалентных взаимодействий между одним сайтом связывания молекулы (например, антитела) и ее партнером по связыванию (например, антигеном). Если не указано иное, в контексте данного документа «аффинность связывания» относится к действительной аффинности связывания, которая отражает взаимодействие в соотношении 1:1 между членами связывающей пары (например, антителом и антигеном). Аффинность молекулы X к ее партнеру Y обычно может быть представлена константой диссоциации (K_D). Аффинность можно измерить обычными методами, известными в данной области, включая описанные в данном документе. Конкретные иллюстративные и примерные варианты осуществления для измерения аффинности связывания описаны ниже.

[0053] Антитело с «созревшей аффинностью» относится к антителу с одним или более изменениями в одной или более гипервариабельных областях (HVR) по сравнению с исходным антителом, которое не имеет таких изменений, при этом такие изменения необязательно приводят к повышению аффинности антитела к антигену.

[0054] Термин «антитело» в данном документе используется в самом широком смысле и охватывает различные структуры антител, включая, помимо прочего, моноклональные антитела, поликлональные антитела, мультиспецифические антитела (например, биспецифические антитела) и фрагменты антител, если они проявляют желаемую антигенсвязывающую активность.

[0055] «Фрагмент антитела» относится к молекуле, отличной от интактного антитела, которая включает часть интактного антитела, которая связывает антиген, с которым связывается интактное антитело. Примеры фрагментов антител включают Fv, Fab, Fab', Fab'-SH, F(ab')₂; диатела; линейные антитела; молекулы одноцепочечных антител (например, scFv); и мультиспецифические антитела, образованные из фрагментов антител.

[0056] Термин «блокировать» в контексте взаимодействия между двумя или более молекулами используется в данном документе для обозначения ингибирования или предотвращения указанного взаимодействия между двумя или более молекулами, при этом ингибирование или предотвращение указанного взаимодействия между двумя или более молекулами является полным или почти полным по меньшей мере при одном условии. «Почти полное» ингибирование - это процентное ингибирование примерно на 70-99,9%, а «полное» ингибирование составляет 100%. Например, говорят, что молекула «блокирует» взаимодействие между двумя или более другими молекулами, если она полностью или почти полностью ингибирует такое взаимодействие при определенных концентрациях дозозависимым образом.

[0057] Термин «рак» применяют в данном документе для обозначения группы клеток, которые демонстрируют аномально высокие уровни пролиферации и роста. Рак может быть доброкачественным (также называемым доброкачественной опухолью), предзлокачественным или злокачественным. Раковые клетки могут представлять собой раковые клетки солидных опухолей или лейкемические раковые клетки. Термин «опухоль» используется в данном документе для обозначения клетки или клеток, которые содержат рак. Термин «рост опухоли» используется в данном документе для обозначения пролиферации или роста клетки или клеток, которые содержат рак, что приводит к соответствующему увеличению размера или степени рака.

[0058] Термин «химерное» антитело относится к антителу, в котором фрагмент тяжелой и/или легкой цепи получен из конкретного источника или вида, в то время как часть тяжелой и/или легкой цепи получены из другого источника или вида.

[0059] «Класс» антитела относится к типу константного домена или константной области, которой обладает его тяжелая цепь. Есть пять основных классов антител: IgA, IgD, IgE, IgG и IgM, и некоторые из них могут быть дополнительно разделены на подклассы (изотипы), например,IgG₁, IgG₂, IgG₃, IgG₄, IgA₁ и IgA₂. Константные домены тяжелой цепи, которые соответствуют различным классам иммуноглобулинов, называются α, δ, ε, γ и μ, соответственно.

[0060] Введение «в комбинации с» одним или более дополнительными терапевтическими средствами включает одновременное (параллельное) и последовательное (непрерывное) введение в любом порядке.

[0061] Используемый в данном документе термин «цитотоксический агент» относится к веществу, которое ингибирует или предотвращает клеточную функцию и/или вызывает гибель или разрушение клеток. Цитотоксические агенты включают радиоактивные изотопы (например, At²¹¹, I¹³¹, I¹²⁵, Y⁹⁰, Re¹⁸⁶, Re¹⁸⁸, Sm¹⁵³, Bi²¹², P³², Pb²¹²и радиоактивные изотопы Lu); химиотерапевтические агенты или лекарственные препараты (например, метотрексат, адриамицин, алкалоиды барвинка (винкристин, винбластин, этопозид), доксорубицин, мелфалан, митомицин С, хлорамбуцил, даунорубицин или другие интеркалирующие агенты); агенты, ингибирующие рост; ферменты и их фрагменты, такие как нуклеолитические ферменты; антибиотики; токсины, такие как низкомолекулярные токсины или ферментативно активные токсины бактериального, грибкового, растительного или животного происхождения, включая их фрагменты и/или варианты; и различные противоопухолевые или противораковые средства, описанные ниже, но не ограничиваются ими.

[0062] «Эффекторные функции» относятся к биологической активности, присущей Fc-области антитела, которая варьируется в зависимости от изотипа антитела. Примеры эффекторных функций антитела включают: связывание C1q и комплемент-зависимую цитотоксичность (КЗЦ); связывание с Fc-рецептором; антителозависимую клеточно-опосредованную цитотоксичность (АЗКЦ); фагоцитоз; подавление рецепторов клеточной поверхности (например рецептора В-клеток); и активацию В-клеток.

[0063] «Эффективное количество» агента, например фармацевтического состава, относится к количеству, эффективному в дозах и в течение периодов времени, необходимых для достижения желаемого терапевтического или профилактического результата.

[0064] Термин «Fc-область» в данном документе используется для определения С-концевой области тяжелой цепи иммуноглобулина, которая содержит по меньшей мере часть константной области. Этот термин включает нативную последовательность Fc-областей и варианты Fc-областей.В некоторых вариантах осуществления Fc-область тяжелой цепи IgG человека простирается от Cys226 или от Pro230 до карбоксильного конца тяжелой цепи. Однако C-концевой лизин (Lys447) Fc-области может присутствовать, а может и не присутствовать (нумерация в этом абзаце соответствует системе нумерации EU, также называемой индексом EU, как описано в Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD, 1991).

[0065] «Каркас», «каркасная область» или «FR» относится к остаткам вариабельного домена, отличным от остатков гипервариабельной области (HVR). FR вариабельного домена обычно состоит из четырех доменов FR: FR1, FR2, FR3 и FR4. Соответственно, последовательности HVR и FR обычно появляются в следующей последовательности в VH (или VL): FR1-H1(L1)-FR2-H2(L2)-FR3-H3(L3)-FR4.

[0066] Термины «полноразмерное антитело», «интактное антитело» и «целое антитело» используются в данном документе взаимозаменяемо для обозначения антитела, имеющего структуру, по существу аналогичную структуре нативного антитела, или имеющего тяжелые цепи, которые содержат Fc-область, как определено в данном документе.

[0067] Термины «клетка-хозяин», «линия клеток-хозяев» и «культура клеток-хозяев» используются взаимозаменяемо и относятся к клеткам, в которые была введена экзогенная нуклеиновая кислота, включая потомство таких клеток. Клетки-хозяева включают «трансформанты» и «трансформированные клетки», которые включают первичную трансформированную клетку и потомство, полученное от нее, независимо от количества пассажей. Потомство может не быть полностью идентичным по содержанию нуклеиновой кислоты родительской клетке и может содержать мутации. В данный документ включены мутантные потомки, которые обладают той же функцией или биологической активностью, что и проверенная или отобранная первоначально трансформированная клетка.

[0068] «Антитело человека» представляет собой антитело, которое имеет аминокислотную последовательность, которая соответствует таковой антитела, продуцируемого у человека или клеткой человека, или полученного из источника, отличного от человека, который использует репертуары человеческих антител или другие последовательности, кодирующие антитела человека. Это определение человеческого антитела специально исключает гуманизированное антитело, содержащее нечеловеческие антигенсвязывающие остатки.

[0069] Термин «вариабельная область» или «вариабельный домен» относится к домену тяжелой или легкой цепи антитела, который участвует в связывании антитела с антигеном. Вариабельные домены тяжелой цепи и легкой цепи (VH и VL, соответственно) нативного антитела обычно имеют сходные структуры, причем каждый домен включает четыре консервативные каркасные области (FR) и три гипервариабельные области (HVR). (См., например, Kindt et al. Kuby Immunology, 6^th ed., W.H. Freeman and Co., page 91 (2007).) Одного домена VH или VL может быть достаточно для придания антигенсвязывающей специфичности. Кроме того, антитела, которые связывают конкретный антиген, могут быть выделены с использованием домена VH или VL из антитела, связывающего антиген, для скрининга библиотеки комплементарных доменов VL или VH, соответственно. См., например,, Portolano et al., J. Immunol. 150:880-887 (1993); Clarkson et al., Nature 352:624-628 (1991).

[0070] «Человеческий консенсусный каркас» представляет собой каркас, который представляет собой наиболее часто встречающиеся аминокислотные остатки при выборе последовательностей каркасных участков VL или VH иммуноглобулина человека. Как правило, выбор последовательностей VL или VH иммуноглобулина человека осуществляется из подгруппы последовательностей вариабельных доменов. Как правило, подгруппа последовательностей является подгруппой, как описано в Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, NIH Publication 91-3242, Bethesda MD (1991), vols. 1-3. В некоторых вариантах осуществления для VL подгруппа представляет собой подгруппу каппа I, как описано в Kabat et al., выше. В некоторых вариантах осуществления для VH подгруппа представляет собой подгруппу III, как описано в Kabat et al., выше.

[0071] Термин «гипервариабельная область» или «HVR» в контексте настоящего описания относится к каждой из областей вариабельного домена антитела, которые являются гипервариабельными по последовательности («определяющие комплементарность области» или «CDR») и/или образуют структурно определенные петли («гипервариабельные области») и/или содержат остатки, контактирующие с антигеном («контакты антигена»). Обычно антитела содержат шесть HVR: три в VH (H1, H2, H3) и три в VL (L1, L2, L3).

[0072] «Иммуноконъюгат» представляет собой антитело, конъюгированное с одной или более гетерологичными молекулами, включая цитотоксический агент, но не ограничиваясь им.

[0073] «Человек» или «субъект» - это млекопитающее. Млекопитающие включают домашних животных (например, коров, овец, кошек, собак и лошадей), приматов (например, людей и приматов, не являющихся людьми, таких как обезьяны), кроликов и грызунов (например, мышей и крыс), но не ограничиваются ими. В некоторых вариантах осуществления индивидуум или субъект является человеком.

[0074] «Выделенное» антитело - это антитело, которое было отделено от компонента его естественного окружения. В некоторых вариантах осуществления антитело очищают до чистоты более 95% или 99%, что определяется, например, электрофоретически (например, ДСН-ПААГ, изоэлектрическим фокусированием (IEF), капиллярным электрофорезом) или хроматографией (например, ионным обменом или ВЭЖХ с обратной фазой). Для обзора методов оценки чистоты антител см., например, Flatman et al., J. Chromatogr. B 848:79-87 (2007).

[0075] Термин «моноклональное антитело» в контексте настоящего описания относится к антителу, полученному из популяции по существу гомогенных антител, т.е. отдельные антитела, составляющие популяцию, идентичны и/или связываются с одним и тем же эпитопом, за исключением возможных вариантных антител, например, содержащих встречающиеся в природе мутации или возникающих во время получения препарата моноклонального антитела, такие варианты обычно присутствуют в незначительных количествах. В отличие от препаратов поликлональных антител, которые обычно включают разные антитела, направленные против разных детерминант (эпитопов), каждое моноклональное антитело в препарате моноклонального антитела направлено против одной детерминанты на антигене. Таким образом, определитель «моноклональное» указывает на характер антитела как полученного из по существу гомогенной популяции антител и не должен толковаться как требующий получения антитела каким-либо конкретным методом.Например, моноклональные антитела, которые будут использоваться в соответствии с настоящим изобретением, могут быть получены различными методами, включая, помимо прочего, гибридомный метод, методы рекомбинантной ДНК, методы фагового дисплея и методы с использованием трансгенных животных, содержащих все или часть локусов иммуноглобулина человека, такие способы и другие иллюстративные способы получения моноклональных антител, описанные в данном документе.

[0076] «Чистое антитело» относится к антителу, которое не конъюгировано с гетерологичным фрагментом (например, цитотоксическим фрагментом) или радиоактивной меткой. Чистое антитело может присутствовать в фармацевтическом составе.

[0077] «Нативные антитела» относятся к природным молекулам иммуноглобулинов с различными структурами. Например, нативные IgG-антитела представляют собой гетеротетрамерные гликопротеины примерно 150000 дальтон, состоящие из двух идентичных легких цепей и двух идентичных тяжелых цепей, связанных дисульфидной связью. От N- до C-конца каждая тяжелая цепь имеет вариабельную область (VH), также называемую вариабельным доменом тяжелой цепи, за которой следуют три константных домена (CH1, CH2 и CH3). Аналогично, от N- до С-конца каждая легкая цепь имеет вариабельную область (VL), также называемую вариабельным доменом легкой цепи, за которой следует константный домен легкой цепи (CL). Легкая цепь антитела может быть отнесена к одному из двух типов, называемых каппа (κ) и лямбда (λ), на основе аминокислотной последовательности ее константного домена.

[0078] «Процент (%) идентичности аминокислотной последовательности» по отношению к эталонной полипептидной последовательности определяется как процент аминокислотных остатков в последовательности-кандидате, которые идентичны аминокислотным остаткам в эталонной полипептидной последовательности, после выравнивания последовательностей и введения пробелов при необходимости для достижения максимального процента идентичности последовательностей, но без учета каких-либо консервативных замен как части идентичности последовательностей. Выравнивание для определения процента идентичности аминокислотной последовательности может быть достигнуто различными способами, которые известны специалистам в данной области, например, с использованием общедоступного компьютерного программного обеспечения, такого как программное обеспечение BLAST, BLAST-2, ALIGN или Megalign (DNASTAR). Специалисты в данной области техники могут определить соответствующие параметры для выравнивания последовательностей, включая любые алгоритмы, необходимые для достижения максимального выравнивания по всей длине сравниваемых последовательностей. Однако для целей настоящего описания % значения идентичности аминокислотных последовательностей получают с использованием компьютерной программы сравнения последовательностей ALIGN-2. Компьютерная программа для сравнения последовательностей ALIGN-2 была разработана Genentech, Inc., а исходный код был подан вместе с пользовательской документацией в Бюро регистрации авторских прав США, Вашингтон, округ Колумбия, 20559, где он зарегистрирован под номером регистрации авторских прав США TXU510087. Программа ALIGN-2 находится в открытом доступе от Genentech, Inc., Южный Сан-Франциско, Калифорния, или может быть скомпилирована из исходного кода. Программа ALIGN-2 должна быть скомпилирована для использования в операционной системе UNIX, включая цифровой UNIX V4.0D. Все параметры сравнения последовательностей задаются программой ALIGN-2 и не меняются.

[0079] В ситуациях, когда ALIGN-2 используется для сравнения аминокислотных последовательностей,% идентичности аминокислотной последовательности данной аминокислотной последовательности A относительно, с или по сравнению с данной аминокислотной последовательности B (которая альтернативно может быть сформулирована как данная аминокислота последовательность A, которая имеет или содержит определенный % идентичности аминокислотной последовательности относительно, с или по сравнению с данной аминокислотной последовательности B) рассчитывается следующим образом:

100 умножить на дробь X/Y

где X - количество аминокислотных остатков, оцененных как идентичные совпадения программой выравнивания последовательностей ALIGN-2 при выравнивании этой программой A и B, и где Y - общее количество аминокислотных остатков в B. Понятно, что если длина аминокислотной последовательности A не равна длине аминокислотной последовательности B,% идентичности аминокислотной последовательности A к B не будет равняться % идентичности аминокислотной последовательности B к A. Если специально не указано иное, все значения % идентичности аминокислотной последовательности, используемые в данном документе, получены как описано в непосредственно предшествующем абзаце с использованием компьютерной программы ALIGN-2.

[0080] Термин «фармацевтический состав» или «фармацевтическая композиция» относится к препарату, который находится в такой форме, чтобы обеспечить эффективность биологической активности содержащегося в нем активного ингредиента, и который не содержит дополнительных компонентов, которые являются неприемлемо токсичными для субъекта, которому будет вводиться состав.

[0081] «Фармацевтически приемлемый носитель» относится к ингредиенту в фармацевтическом составе или композиции, отличному от активного ингредиента, который нетоксичен для субъекта. Фармацевтически приемлемый носитель включает, без ограничения, буфер, эксципиент, стабилизатор или консервант.

[0082] Используемый в данном документе термин «лечение» (и его грамматические вариации, такие как «лечить» или «лечение») относится к клиническому вмешательству в попытке изменить естественное течение болезни у индивидуума, проходящего лечение, и может проводиться либо для профилактики, либо во время курса клинической патологии. Желаемые эффекты лечения включают предотвращение возникновения или рецидива заболевания, облегчение симптомов, уменьшение любых прямых или косвенных патологических последствий заболевания, предотвращение метастазирования, снижение скорости прогрессирования заболевания, улучшение или временное облегчение состояния болезни, и ремиссию или улучшенный прогноз, но не ограничиваются ими. В некоторых вариантах осуществления антитела по изобретению используются для задержки развития заболевания или замедления прогрессирования заболевания.

[0083] Используемый в данном документе термин «вектор» относится к молекуле нуклеиновой кислоты, способной размножать другую нуклеиновую кислоту, с которой она связана. Термин включает вектор как самореплицирующуюся структуру нуклеиновой кислоты, а также вектор, включенный в геном клетки-хозяина, в которую он был введен. Некоторые векторы способны управлять экспрессией нуклеиновых кислот, с которыми они функционально связаны. Такие векторы называются в данном документе «векторами экспрессии».

КОМПОЗИЦИИ И СПОСОБЫ

[0084] Предложены анти-CD112R антитела, композиции, содержащие описанные антитела, и способы их применения.

Типичные анти-CD112R антитела

[0085] В таблице последовательностей ниже представлены последовательности определенных вариантов осуществления антител, описанных и заявленных в данном документе.

[0086] В некоторых вариантах осуществления предложены антитела, которые связываются с CD112R и/или блокируют связывание CD112R с CD112 и/или усиливают активацию Т-клеток и NK-клеток. В некоторых вариантах осуществления предложены антитела, которые связываются с CD112R. В некоторых вариантах осуществления предложены антитела, которые блокируют связывание CD112R с CD112. В некоторых вариантах осуществления предложены антитела, которые усиливают активацию CD226, Т-клеток и/или NK-клеток.

[0087] Ингибирование связывания между CD112R и CD112, например, с Т- и NK-клетками, можно определить путем измерения ингибирования связывания клеток, с которыми связывается CD112R, в присутствии и в отсутствие антитела.

[0088] В данном документе предложены антитела, которые специфически связываются с CD112R.

[0089] В некоторых вариантах осуществления антитела связываются с CD112R человека.

[0090] В некоторых вариантах осуществления антитела связываются с CD112R человека и блокируют взаимодействие CD112R человека с CD112 человека. В некоторых вариантах осуществления антитела связываются с CD112R человека, блокируют взаимодействие CD112R человека с CD112 человека, но не блокируют взаимодействие CD112R мыши с CD112 мыши. В некоторых вариантах осуществления антитела, которые связываются с CD112R человека, блокируют взаимодействие CD112R человека с CD112 человека, но не блокируют взаимодействие CD112R мыши с CD112 мыши, включают антитела 32, 33, 34, 35 и 36.

[0091] В некоторых вариантах осуществления антитело к CD112R содержит вариабельную область тяжелой цепи («VH»), содержащую CDR1, CDR2 и/или CDR3 VH любого из антител к CD112R, представленных в настоящем документе (т.е. клоны антител с номерами 2, 5, 44, 58, 10 , 38, 15, 35, 46, 47, 32, 33, 34 или 36).

[0092] В некоторых вариантах осуществления антитело к CD112R содержит VH, содержащую CDR1, CDR2 и/или CDR3 VH любого из антител к CD112R, представленных в настоящем документе, и VL, содержащую CDR1, CDR2 и/или CDR3 любого из антител к CD112R, представленных в настоящем документе. В некоторых вариантах осуществления антитело к CD112R содержит VH, содержащую CDR1, CDR2 и/или CDR3 VH любого из клонов антител с номерами 2, 5, 44, 58, 10, 38, 15, 35, 46, 47, 32, 33, 34 или 36, и VL, содержащую CDR1, CDR2 и/или CDR3 VL любого из клонов антител с номерами 2, 5, 44, 58, 10, 38, 15, 35, 46, 47, 32, 33, 34 или 36, при этом CDR VH и VL необязательно происходят из одного и того же клона антитела.

[0093] В некоторых вариантах осуществления предложены антитела, содержащие следующее:

HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1; (b) HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2; (c) HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3; с или без (d) LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4; (e) LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5; и (f) LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6; или

HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 101; (b) HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 102; (c) HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 103; с или без (d) LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 104; (e) LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 105; и (f) LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 106; или

HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 201; (b) HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 202; (c) HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 203; с или без (d) LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 204; (e) LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 205; и (f) LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 206; или

HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 301; (b) HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 302; (c) HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 303; с или без (d) LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 304; (e) LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 305; и (f) LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 306; или

HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 401; (b) HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 402; (c) HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 403; с или без (d) LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 404; (e) LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 405; и (f) LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 406; или

HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 501; (b) HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 502; (c) HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 503; с или без (d) LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 504; (e) LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 505; и (f) LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 506; или

HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 601; (b) HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 602; (c) HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 603; с или без (d) LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 604; (e) LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 605; и (f) LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 606; или

HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 701; (b) HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 702; (c) HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 703; с или без (d) LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 704; (e) LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 705; и (f) LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 706; или

HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 801; (b) HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 802; (c) HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 803; с или без (d) LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 804; (e) LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 805; и (f) LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 806; или

(a) HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 901; (b) HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 902; (c) HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 903; (d) LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 904; (e) LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 905; и (f) LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 906; или

(a) HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1001; (b) HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1002; (c) HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1003; (d) LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1004; (e) LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1005; и (f) LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1006; или

(a) HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2001; (b) HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2002; (c) HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2003; (d) LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2004; (e) LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2005; и (f) LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2006; или

(a) HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3001; (b) HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3002; (c) HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3003; (d) LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3004; (e) LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3005; и (f) LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3006; или

(a) HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4001; (b) HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4002; (c) HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4003; (d) LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4004; (e) LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4005; и (f) LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4006.

[0094] В некоторых вариантах осуществления антитело к CD112R содержит VL, содержащую CDR1, CDR2 и CDR3 VL любого из антител к CD112R, представленных в настоящем документе. В некоторых вариантах осуществления антитело к CD112R содержит VL, содержащую CDR1, CDR2 и CDR3 VL любого из клонов антител с номерами 2, 5, 44, 58, 10, 38, 15, 35, 46, 47, 32, 33, 34 или 36.

[0095] В некоторых вариантах осуществления антитело к CD112R может содержать:

VH, содержащую аминокислотную последовательность CDR1, CDR2 и CDR3 VH клона антитела номер 2, и VL, содержащую CDR1, CDR2 и CDR3 VL клона антитела номер 2; или

VH, содержащую аминокислотную последовательность CDR1, CDR2 и CDR3 VH клона антитела номер 5, и VL, содержащую CDR1, CDR2 и CDR3 VL клона антитела номер 5; или

VH, содержащую аминокислотную последовательность CDR1, CDR2 и CDR3 VH клона антитела номер 44, и VL, содержащую CDR1, CDR2 и CDR3 VL клона антитела номер 44; или

VH, содержащую аминокислотную последовательность CDR1, CDR2 и CDR3 VH клона антитела номер 58, и VL, содержащую CDR1, CDR2 и CDR3 VL клона антитела номер 58; или

VH, содержащую аминокислотную последовательность CDR1, CDR2 и CDR3 VH клона антитела номер 10, и VL, содержащую CDR1, CDR2 и CDR3 VL клона антитела номер 10; или

VH, содержащую аминокислотную последовательность CDR1, CDR2 и CDR3 VH клона антитела номер 38, и VL, содержащую CDR1, CDR2 и CDR3 VL клона антитела номер 38; или

VH, содержащую аминокислотную последовательность CDR1, CDR2 и CDR3 VH клона антитела номер 15, и VL, содержащую CDR1, CDR2 и CDR3 VL клона антитела номер 15; или

VH, содержащую аминокислотную последовательность CDR1, CDR2 и CDR3 VH клона антитела номер 35, и VL, содержащую CDR1, CDR2 и CDR3 VL клона антитела номер 35; или

VH, содержащую аминокислотную последовательность CDR1, CDR2 и CDR3 VH клона антитела номер 47, и VL, содержащую CDR1, CDR2 и CDR3 VL клона антитела номер 47; или

VH, содержащую аминокислотную последовательность CDR1, CDR2 и CDR3 VH клона антитела номер 46, и VL, содержащую CDR1, CDR2 и CDR3 VL клона антитела номер 46; или

VH, содержащую аминокислотную последовательность CDR1, CDR2 и CDR3 VH клона антитела номер 32, и VL, содержащую CDR1, CDR2 и CDR3 VL клона антитела номер 32; или

VH, содержащую аминокислотную последовательность CDR1, CDR2 и CDR3 VH клона антитела номер 33, и VL, содержащую CDR1, CDR2 и CDR3 VL клона антитела номер 33; или

VH, содержащую аминокислотную последовательность CDR1, CDR2 и CDR3 VH клона антитела номер 34, и VL, содержащую CDR1, CDR2 и CDR3 VL клона антитела номер 34; или

VH, содержащую аминокислотную последовательность CDR1, CDR2 и CDR3 VH клона антитела номер 36, и VL, содержащую CDR1, CDR2 и CDR3 VL клона антитела номер 36.

[0096] В приведенной ниже таблице последовательностей представлены последовательности вариабельной области тяжелой и легкой цепей определенных описанных антител.

[0097] В некоторых вариантах осуществления антитело к CD112R содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность VH любого из антител к CD112R, представленных в настоящем документе. В некоторых вариантах осуществления антитело к CD112R содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность VH любого из клонов антител с номерами 2, 5, 44, 58, 10, 38, 15, 35, 46, 47, 32, 33, 34 или 36.

[0098] В некоторых вариантах осуществления антитело к CD112R содержит VH любого из клонов антител с номерами 2, 5, 44, 58, 10, 38, 15, 35, 46, 47, 32, 33, 34 или 36, но с 1, 2, 3, 4 или 5 аминокислотными заменами вне определяющих комплементарность областей (CDR), например 1, 2, 3, 4 или 5 консервативными заменами вне CDR. В некоторых вариантах осуществления антитело к CD112R содержит VH любого из клонов антител с номерами 2, 5, 44, 58, 10, 38, 15, 35, 46, 47, 32, 33, 34 или 36, но с 1, 2, 3, 4 или 5 реверсивными заменами вне определяющих комплементарность областей (CDR).

[0099] В некоторых вариантах осуществления антитело к CD112R содержит VH любого из клонов антител с номерами 2, 5, 44, 58, 10, 38, 15, 35, 46, 47, 32, 33, 34 или 36, но с 1, 2, 3, 4 или 5 аминокислотными заменами в каркасных областях последовательности VH, например, 1, 2, 3, 4 или 5 консервативными заменами. В некоторых вариантах осуществления антитело к CD112R содержит VH любого из клонов антител с номерами 2, 5, 44, 58, 10, 38, 15, 35, 46, 47, 32, 33, 34 или 36, но с 1, 2, 3, 4 или 5 реверсивными заменами в каркасных областях последовательности VH.

[00100] В некоторых вариантах осуществления антитело к CD112R содержит CDR VH и VL любого из антител к CD112R, описанных в данном документе, при этом каждая CDR содержит 0, 1, 2 или 3 аминокислотных добавления, замены (например, консервативные замены) или делеции.

[00101] В некоторых вариантах осуществления антитело к CD112R содержит CDR1, CDR2 и CDR3 VH, содержащие аминокислотные последовательности CDR VH любого из антител к CD112R, представленных в настоящем документе, и содержит VH, которая по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по крайней мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99% идентична VH любого из представленных в данном документе антител к CD112R. В некоторых вариантах осуществления антитело к CD112R содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99% идентична аминокислотной последовательности VH любого из клонов антител с номерами 2, 5, 44, 58, 10, 38, 15, 35, 46 , 47, 32, 33, 34 или 36. В некоторых вариантах осуществления VH антитела отличается от VH последовательностей, показанных в Таблице последовательностей, из-за 1, 2, 3, 4 или 5 аминокислотных замен в каркасных областях последовательности VH, например, 1, 2, 3, 4 или 5 консервативных замен. В некоторых вариантах осуществления VH антитела отличается от VH последовательностей, показанных в Таблице последовательностей, из-за 1, 2, 3, 4 или 5 реверсивных замен в каркасных областях последовательности VH.

[00102] В некоторых вариантах осуществления антитело к CD112R содержит VH, состоящую из аминокислотной последовательности VH любого из антител к CD112R, представленных в настоящем документе. В некоторых вариантах осуществления антитело к CD112R содержит VH, которая состоит из аминокислотной последовательности VH любого из клонов антитела с номерами 2, 5, 44, 58, 10, 38, 15, 35, 46, 47, 32, 33, 34 или 36.

[00103] В некоторых вариантах осуществления антитело к CD112R содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность VL любого из антител к CD112R, представленных в настоящем документе. В некоторых вариантах осуществления антитело к CD112R содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность VL любого из клонов антител с номерами 2, 5, 44, 58, 10, 38, 15, 35, 46, 47, 32, 33, 34 или 36. В некоторых вариантах осуществления антитело к CD112R содержит CDR1, CDR2 и CDR3 VL, содержащие аминокислотные последовательности CDR VL любого из антител к CD112R, представленных в настоящем документе, и содержит VL, которая по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по крайней мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99% идентична VL любого из представленных в данном документе антител к CD112R. В некоторых вариантах осуществления антитело к CD112R содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99% идентична аминокислотной последовательности VL любого из клонов антител с номерами 2, 5, 44, 58, 10, 38, 15, 35, 46 , 47, 32, 33, 34 или 36. В некоторых вариантах осуществления VL антитела отличается от VL последовательностей, показанных в Таблице последовательностей, из-за 1, 2, 3, 4 или 5 аминокислотных замен в каркасных областях последовательности VL, например, 1, 2, 3, 4 или 5 консервативных замен. В некоторых вариантах осуществления VL антитела отличается от VL последовательностей, показанных в Таблице последовательностей, из-за 1, 2, 3, 4 или 5 реверсивных замен.

[00104] В некоторых вариантах осуществления антитело к CD112R содержит VL, состоящую из аминокислотной последовательности VL любого из антител к CD112R, представленных в настоящем документе. В некоторых вариантах осуществления антитело к CD112R содержит VL, которая состоит из аминокислотной последовательности VL любого из клонов антитела с номерами 2, 5, 44, 58, 10, 38, 15, 35, 46, 47, 32, 33, 34 или 36.

[00105] В некоторых вариантах осуществления антитело к CD112R содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность VH любого из представленных в данном документе антител к CD112R, и содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность VL любого из тех же антител к CD112R, представленных в настоящем документе. В некоторых из этих вариантов осуществления антитело к CD112R содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность VH любого из клонов антител с номерами 2, 5, 44, 58, 10, 38, 15, 35, 46, 47, 32, 33, 34 или 36, и VL, содержащую аминокислотную последовательность VL любого из клонов антител с номерами 2, 5, 44, 58, 10, 38, 15, 35, 46, 47, 32, 33, 34 или 36, необязательно где VH и VL относятся к одному и тому же номеру клона антитела.

[00106] В некоторых вариантах осуществления VH антитела представляет собой VH любого из клонов антител с номерами 2, 5, 44, 58, 10, 38, 15, 35, 46, 47, 32, 33, 34 или 36, но с 1, 2, 3, 4 или 5 аминокислотными заменами в каркасных областях последовательности VH, таких как 1, 2, 3, 4 или 5 консервативных замены, а VL представляет собой VL любого из тех же антител из списка выше. Однако в некоторых вариантах осуществления VH антитела представляет собой VH любого из клонов антител с номерами 2, 5, 44, 58, 10, 38, 15, 35, 46, 47, 32, 33, 34 или 36, но с 1, 2, 3, 4 или 5 заменами в каркасных областях последовательности VH.

[00107] В некоторых вариантах осуществления антитело к CD112R содержит VH и VL, содержащие аминокислотные последовательности VH и VL любого из клонов антител с номерами 2, 5, 44, 58, 10, 38, 15, 35, 46, 47, 32, 33, 34 или 36.

[00108] В некоторых вариантах осуществления антитело к CD112R содержит CDR1, CDR2 и CDR3 VH, содержащие аминокислотные последовательности CDR VH любого из антител к CD112R, представленных в настоящем документе, а также CDR1, CDR2 и CDR3 VL, содержащие аминокислотные последовательности CDR VL любого из представленных в данном документе антител к CD112R, а также содержит VH и VL, каждая из которых по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99% идентичны соответствующим VH и VL любого из представленных в данном документе антител к CD112R. В некоторых вариантах осуществления VH и VL антитела отличаются от последовательностей VH и VL, показанных в Таблице последовательностей, из-за 1, 2, 3, 4 или 5 аминокислотных замен в каркасных областях последовательностей, таких как 1, 2, 3, 4 или 5 консервативных замен или таких как 1, 2, 3, 4 или 5 реверсивных замен.

[00109] В некоторых вариантах осуществления антитело к CD112R содержит VH и VL, состоящие из аминокислотной последовательности VH и VL любого из антител к CD112R, представленных в настоящем документе. В некоторых вариантах осуществления антитело к CD112R содержит VH и VL, каждая из которых состоит из аминокислотных последовательностей VH и VL любого из клонов антител с номерами 2, 5, 44, 58, 10, 38, 15, 35, 46, 47, 32, 33, 34 и 36.

[00110] Антитело к CD112R может содержать:

VH, содержащую аминокислотную последовательность VH клона антитела номер 2, и VL, содержащую аминокислотную последовательность VL клона антитела номер 2; или

VH, содержащую аминокислотную последовательность VH клона антитела номер 5, и VL, содержащую аминокислотную последовательность VL клона антитела номер 5; или

VH, содержащую аминокислотную последовательность VH клона антитела номер 44, и VL, содержащую аминокислотную последовательность VL клона антитела номер 44; или

VH, содержащую аминокислотную последовательность VH клона антитела номер 58, и VL, содержащую аминокислотную последовательность VL клона антитела номер 58; или

VH, содержащую аминокислотную последовательность VH клона антитела номер 10, и VL, содержащую аминокислотную последовательность VL клона антитела номер 10; или

VH, содержащую аминокислотную последовательность VH клона антитела номер 38, и VL, содержащую аминокислотную последовательность VL клона антитела номер 38; или

VH, содержащую аминокислотную последовательность VH клона антитела номер 15, и VL, содержащую аминокислотную последовательность VL клона антитела номер 15; или

VH, содержащую аминокислотную последовательность VH клона антитела номер 35, и VL, содержащую аминокислотную последовательность VL клона антитела номер 35; или

VH, содержащую аминокислотную последовательность VH клона антитела номер 47, и VL, содержащую аминокислотную последовательность VL клона антитела номер 47;

VH, содержащую аминокислотную последовательность VH клона антитела номер 46, и VL, содержащую аминокислотную последовательность VL клона антитела номер 46;

VH, содержащую аминокислотную последовательность VH клона антитела номер 32, и VL, содержащую аминокислотную последовательность VL клона антитела номер 32; или

VH, содержащую аминокислотную последовательность VH клона антитела номер 33, и VL, содержащую аминокислотную последовательность VL клона антитела номер 33; или

VH, содержащую аминокислотную последовательность VH клона антитела номер 34, и VL, содержащую аминокислотную последовательность VL клона антитела номер 34; или

VH, содержащую аминокислотную последовательность VH клона антитела номер 36, и VL, содержащую аминокислотную последовательность VL клона антитела номер 36; или.

[00111] Антитело к CD112R может содержать:

VH, содержащую CDR VH клона антитела номер 2, и VL, содержащую CDR VL клона антитела номер 2, и аминокислотные последовательности VH и VL, которые по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99% идентичны VH и VL клона антитела номер 2; или

VH, содержащую CDR VH клона антитела номер 5, и VL, содержащую CDR VL клона антитела номер 5, и аминокислотные последовательности VH и VL, которые по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99% идентичны VH и VL клона антитела номер 5; или

VH, содержащую CDR VH клона антитела номер 44, и VL, содержащую CDR VL клона антитела номер 44, и аминокислотные последовательности VH и VL, которые по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99% идентичны VH и VL клона антитела номер 44; или

VH, содержащую CDR VH клона антитела номер 58, и VL, содержащую CDR VL клона антитела номер 58, и аминокислотные последовательности VH и VL, которые по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99% идентичны VH и VL клона антитела номер 58; или

VH, содержащую CDR VH клона антитела номер 10, и VL, содержащую CDR VL клона антитела номер 10, и аминокислотные последовательности VH и VL, которые по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99% идентичны VH и VL клона антитела номер 10; или

VH, содержащую CDR VH клона антитела номер 38, и VL, содержащую CDR VL клона антитела номер 38, и аминокислотные последовательности VH и VL, которые по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99% идентичны VH и VL клона антитела номер 38; или

VH, содержащую CDR VH клона антитела номер 15, и VL, содержащую CDR VL клона антитела номер 15, и аминокислотные последовательности VH и VL, которые по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99% идентичны VH и VL клона антитела номер 15; или

VH, содержащую CDR VH клона антитела номер 35, и VL, содержащую CDR VL клона антитела номер 35, и аминокислотные последовательности VH и VL, которые по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99% идентичны VH и VL клона антитела номер 35; или

VH, содержащую CDR VH клона антитела номер 47, и VL, содержащую CDR VL клона антитела номер 47, и аминокислотные последовательности VH и VL, которые по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99% идентичны VH и VL клона антитела номер 47; или

VH, содержащую CDR VH клона антитела номер 46, и VL, содержащую CDR VL клона антитела номер 46, и аминокислотные последовательности VH и VL, которые по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99% идентичны VH и VL клона антитела номер 46; или

VH, содержащую CDR VH клона антитела номер 32, и VL, содержащую CDR VL клона антитела номер 32, и аминокислотные последовательности VH и VL, которые по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99% идентичны VH и VL клона антитела номер 32; или

VH, содержащую CDR VH клона антитела номер 33, и VL, содержащую CDR VL клона антитела номер 33, и аминокислотные последовательности VH и VL, которые по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99% идентичны VH и VL клона антитела номер 33; или

VH, содержащую CDR VH клона антитела номер 34, и VL, содержащую CDR VL клона антитела номер 34, и аминокислотные последовательности VH и VL, которые по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99% идентичны VH и VL клона антитела номер 34; или

VH, содержащую CDR VH клона антитела номер 36, и VL, содержащую CDR VL клона антитела номер 36, и аминокислотные последовательности VH и VL, которые по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99% идентичны VH и VL клона антитела номер 36.

[00112] В некоторых из вышеупомянутых вариантов осуществления VH и/или VL могут отличаться от последовательности каждого из видов наличием 1, 2, 3, 4 или 5 аминокислотных замен, таких как 1, 2, 3, 4 или 5 консервативных замен. В некоторых вариантах осуществления VH может содержать 1, 2, 3, 4 или 5 реверсивных замен.

[00113] Антитело к CD112R может содержать:

VH, состоящую из аминокислотной последовательности VH клона антитела номер 2, и VL, состоящую из VL клона антитела номер 2; или

VH, состоящую из аминокислотной последовательности VH клона антитела номер 5, и VL, состоящую из VL клона антитела номер 5; или

VH, состоящую из аминокислотной последовательности VH клона антитела номер 44, и VL, состоящую из VL клона антитела номер 44; или

VH, состоящую из аминокислотной последовательности VH клона антитела номер 58, и VL, состоящую из VL клона антитела номер 58; или

VH, состоящую из аминокислотной последовательности VH клона антитела номер 10, и VL, состоящую из VL клона антитела номер 10; или

VH, состоящую из аминокислотной последовательности VH клона антитела номер 38, и VL, состоящую из VL клона антитела номер 38; или

VH, состоящую из аминокислотной последовательности VH клона антитела номер 15, и VL, состоящую из VL клона антитела номер 15; или

VH, состоящую из аминокислотной последовательности VH клона антитела номер 35, и VL, состоящую из VL клона антитела номер 35; или

VH, состоящую из аминокислотной последовательности VH клона антитела номер 47, и VL, состоящую из VL клона антитела номер 47; или

VH, состоящую из аминокислотной последовательности VH клона антитела номер 46, и VL, состоящую из VL клона антитела номер 46; или

VH, состоящую из аминокислотной последовательности VH клона антитела номер 32, и VL, состоящую из VL клона антитела номер 32; или

VH, состоящую из аминокислотной последовательности VH клона антитела номер 33, и VL, состоящую из VL клона антитела номер 33; или

VH, состоящую из аминокислотной последовательности VH клона антитела номер 34, и VL, состоящую из VL клона антитела номер 34; или

VH, состоящую из аминокислотной последовательности VH клона антитела номер 36, и VL, состоящую из VL клона антитела номер 36.

[00114] В некоторых вариантах осуществления антитело к CD112R содержит любую из вариабельных областей и/или CDR 1-3 вариабельной области антител, описанных выше и в других местах в настоящем документе, например, в Таблице последовательностей.

[00115] В некоторых вариантах осуществления антитело к CD112R представляет собой антитело IgG, такое как антитело IgG1, IgG2, IgG3 или IgG4, или его модифицированную форму, как описано в разделе ниже. В некоторых вариантах осуществления константная область выполняет эффекторную функцию, а в некоторых вариантах осуществления константная область не является эффекторной.

[00116] В некоторых вариантах осуществления антитело к CD112R содержит тяжелую цепь (НС), содержащую аминокислотную последовательность тяжелой цепи любого из антител к CD112R, представленных в настоящем документе. В некоторых вариантах осуществления антитело к CD112R содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность тяжелой цепи любого из клонов антител с номерами 2, 5, 44, 58, 10, 38, 15, 35, 46, 47, 32, 33, 34 или 36.

[00117] В некоторых вариантах осуществления антитело к CD112R может содержать:

тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность тяжелой цепи клона антитела номер 2, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность легкой цепи клона антитела номер 2; или

тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность тяжелой цепи клона антитела номер 5, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность легкой цепи клона антитела номер 5; или

тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность тяжелой цепи клона антитела номер 44, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность легкой цепи клона антитела номер 44; или

тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность тяжелой цепи клона антитела номер 58, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность легкой цепи клона антитела номер 58; или

тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность тяжелой цепи клона антитела номер 10, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность легкой цепи клона антитела номер 10; или

тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность тяжелой цепи клона антитела номер 38, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность легкой цепи клона антитела номер 38; или

тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность тяжелой цепи клона антитела номер 15, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность легкой цепи клона антитела номер 15; или

тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность тяжелой цепи клона антитела номер 35, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность легкой цепи клона антитела номер 35; или

тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность тяжелой цепи клона антитела номер 47, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность легкой цепи клона антитела номер 47; или

тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность тяжелой цепи клона антитела номер 46, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность легкой цепи клона антитела номер 46; или

тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность тяжелой цепи клона антитела номер 32, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность легкой цепи клона антитела номер 32; или

тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность тяжелой цепи клона антитела номер 33, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность легкой цепи клона антитела номер 33; или

тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность тяжелой цепи клона антитела номер 34, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность легкой цепи клона антитела номер 34; или

тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность тяжелой цепи клона антитела номер 36, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность легкой цепи клона антитела номер 36.

[00118] Антитело к CD112R может содержать:

тяжелую цепь (HC), содержащую CDR HC клона антитела номер 2, и легкую цепь (LC), содержащую CDR LC клона антитела номер 2, и аминокислотные последовательности HC и LC, которые по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99% идентичны HC и LC клона антитела номер 2, соответственно; или

HC, содержащую CDR HC клона антитела номер 5, и легкую цепь (LC), содержащую CDR LC клона антитела номер 5, и аминокислотные последовательности HC и LC, которые по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99% идентичны HC и LC клона антитела номер 5, соответственно; или

HC, содержащую CDR HC клона антитела номер 44, и легкую цепь (LC), содержащую CDR LC клона антитела номер 44, и аминокислотные последовательности HC и LC, которые по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99% идентичны HC и LC клона антитела номер 44, соответственно; или

HC, содержащую CDR HC клона антитела номер 58, и легкую цепь (LC), содержащую CDR LC клона антитела номер 58, и аминокислотные последовательности HC и LC, которые по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99% идентичны HC и LC клона антитела номер 58, соответственно; или

HC, содержащую CDR HC клона антитела номер 10, и легкую цепь (LC), содержащую CDR LC клона антитела номер 10, и аминокислотные последовательности HC и LC, которые по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99% идентичны HC и LC клона антитела номер 10, соответственно; или

HC, содержащую CDR HC клона антитела номер 38, и легкую цепь (LC), содержащую CDR LC клона антитела номер 38, и аминокислотные последовательности HC и LC, которые по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99% идентичны HC и LC клона антитела номер 38, соответственно; или

HC, содержащую CDR HC клона антитела номер 15, и легкую цепь (LC), содержащую CDR LC клона антитела номер 15, и аминокислотные последовательности HC и LC, которые по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99% идентичны HC и LC клона антитела номер 15, соответственно; или

HC, содержащую CDR HC клона антитела номер 35, и легкую цепь (LC), содержащую CDR LC клона антитела номер 35, и аминокислотные последовательности HC и LC, которые по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99% идентичны HC и LC клона антитела номер 35, соответственно; или

HC, содержащую CDR HC клона антитела номер 47, и легкую цепь (LC), содержащую CDR LC клона антитела номер 47, и аминокислотные последовательности HC и LC, которые по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99% идентичны HC и LC клона антитела номер 47, соответственно; или

HC, содержащую CDR HC клона антитела номер 46, и легкую цепь (LC), содержащую CDR LC клона антитела номер 46, и аминокислотные последовательности HC и LC, которые по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99% идентичны HC и LC клона антитела номер 46, соответственно; или

HC, содержащую CDR HC клона антитела номер 32, и LC, содержащую CDR LC клона антитела номер 32, и аминокислотные последовательности HC и LC, которые по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99% идентичны HC и LC клона антитела номер 32, соответственно; или

HC, содержащую CDR HC клона антитела номер 33, и легкую цепь (LC), содержащую CDR LC клона антитела номер 33, и аминокислотные последовательности HC и LC, которые по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99% идентичны HC и LC клона антитела номер 33, соответственно; или

HC, содержащую CDR HC клона антитела номер 34, и легкую цепь (LC), содержащую CDR LC клона антитела номер 34, и аминокислотные последовательности HC и LC, которые по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99% идентичны HC и LC клона антитела номер 34, соответственно; или

HC, содержащую CDR HC клона антитела номер 36, и легкую цепь (LC), содержащую CDR LC клона антитела номер 36, и аминокислотные последовательности HC и LC, которые по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99% идентичны HC и LC клона антитела номер 36, соответственно.

[00119] В некоторых из вышеупомянутых вариантов осуществления HC и/или LC могут отличаться от последовательности каждого из видов наличием 1, 2, 3, 4 или 5 аминокислотных замен, таких как 1, 2, 3, 4 или 5 консервативных замен. В некоторых из вышеупомянутых вариантов осуществления HC и/или LC могут отличаться от последовательности каждого из видов наличием 1, 2, 3, 4 или 5 аминокислотных замен, таких как 1, 2, 3, 4 или 5 реверсивных замен.

1. Примерный класс антител с общими структурными и функциональными признаки

[00120] В некоторых вариантах осуществления предложены анти-CD112R антитела. В некоторых вариантах осуществления антитела к CD112 имеют общие структурные и/или функциональные признаки. В некоторых вариантах осуществления класс антител включает исходное антитело и его варианты с созревшей аффинностью. Один типичный класс антител включает исходный клон 32 и его варианты с созревшей аффинностью, но не ограничивается ими. В некоторых вариантах осуществления варианты с созревшей аффинностью включают антитела 33, 34, 35 и 36. В некоторых вариантах осуществления варианты с созревшей аффинностью включают антитела с консервативными заменами по сравнению с антителами 32, 33, 34, 35 и 36.

a. Структурные признаки типичного класса антител

[00121] В некоторых вариантах осуществления анти-CD112R антитела имеют общие структурные признаки, такие как, например, показанные на Фигурах 14 и 15. Когда в данном документе описывается «класс» или «члены класса» антител, следует понимать, что охватываются/предполагаются варианты осуществления, описывающие одно анти-CD112R антитело или множество анти-CD112R антител. В некоторых вариантах осуществления анти-CD112R антитела содержат идентичные HCDR3. В некоторых вариантах осуществления анти-CD112R антитела содержат идентичные LCDR1. В некоторых вариантах осуществления анти-CD112R антитела содержат идентичные LCDR2. В некоторых вариантах осуществления анти-CD112R антитела содержат идентичные LCDR3. В некоторых вариантах осуществления анти-CD112R антитела содержат идентичные HCDR3 и идентичные LCDR1, LCDR2 и/или LCDR3. В некоторых вариантах осуществления анти-CD112R антитела содержат HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1003, и/или LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1004, и/или LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1005, и/или LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1006.

[00122] В некоторых вариантах осуществления каждый член класса антител содержит каркасные области тяжелой цепи, содержащие аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 1007, 1008, 1009 и 1010. В некоторых вариантах осуществления каждый член класса антител содержит аминокислотную последовательность вариабельной области тяжелой цепи, которая по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92% или по меньшей мере на 93% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 1012, при этом любая и каждая вариация последовательности относительно SEQ ID NO: 1012 находится в HCDR1 и/или HCDR2. В некоторых вариантах осуществления каждый член класса антител содержит каркасные области легкой цепи, содержащие аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 1013, 1014, 1015 и 1016. В некоторых вариантах осуществления каждый член класса антител содержит аминокислотную последовательность вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO: 1018.

[00123] Члены этого типичного класса антител могут включать некоторые варианты аминокислотных последовательностей HCDR1 и HCDR2. В некоторых вариантах осуществления каждый член класса антител содержит HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1001 или аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1001 с 1, 2 или 3 аминокислотными заменами в положениях 4, 5 и/или 6 SEQ ID NO: 1001. В некоторых вариантах осуществления класс антител содержит HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1001 с 1, 2 или 3 аминокислотными заменами в положениях, которые варьируются между аминокислотами SEQ ID NO: 1001, 2001, 3001, 4001 и 701, как показано на Фигуре 14. В некоторых вариантах осуществления одна или более из 1, 2 или 3 аминокислотных замен не являются консервативными заменами. В некоторых вариантах осуществления одна или более из 1, 2 или 3 аминокислотных замен являются консервативными заменами. В некоторых вариантах осуществления член класса антител содержит HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2001, 3001, 701 или 4001.

[00124] В некоторых вариантах осуществления каждый член класса антител содержит HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1002 или аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1002 с 1, 2, 3, 4 или 5 аминокислотными заменами в положениях 1, 3, 5, 6 и/или 8 SEQ ID NO: 1002. В некоторых вариантах осуществления класс антител содержит HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1002 с 1, 2, 3, 4 или 5 аминокислотными заменами в положениях, которые варьируются между аминокислотами SEQ ID NO: 1002, 2002, 3002, 4002 и 702, как показано на Фигуре 14. В некоторых вариантах осуществления одна или более из 1, 2, 3, 4 или 5 аминокислотных замен не являются консервативными заменами. В некоторых вариантах осуществления одна или более из 1, 2, 3, 4 или 5 аминокислотных замен являются консервативными заменами. В некоторых вариантах осуществления член класса антител содержит HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2002, 3002, 702 или 4002.

[00125] В некоторых вариантах осуществления каждый член класса антител содержит идентичные каркасные области тяжелой цепи и легкой цепи.

б. Функциональные признаки типичного класса антител

[00126] В некоторых вариантах осуществления предложены антитела к CD112R, при этом антитела обладают особым техническим эффектом связывания с CD112R человека, блокируя взаимодействие CD112R человека с CD112 и не блокируя взаимодействие CD112R мыши с CD112. В некоторых вариантах осуществления каждый член класса антител связывается с CD112R человека и блокирует связывающее взаимодействие между CD112 человека и CD112R человека. В некоторых вариантах осуществления каждый член класса антител не блокирует связывающее взаимодействие между CD112 мыши и CD112R мыши. Хотя члены класса антител не блокируют взаимодействие между CD112 мыши и CD112R мыши, члены класса антител либо частично ингибируют связывающее взаимодействие между CD112 мыши и CD112R мыши, либо не ингибируют связывающее взаимодействие между CD112 мыши и CD112R мыши. В некоторых таких вариантах осуществления ни один член класса антител не ингибирует взаимодействие между CD112R мыши и CD112 мыши более чем на 50%. В некоторых вариантах осуществления каждый член класса антител проявляет по меньшей мере некоторое связывание с растворимым CD112R мыши. В некоторых вариантах осуществления антитело является полностью человеческим или гуманизированным. В некоторых вариантах осуществления каждый член класса антител связывает один и тот же эпитоп на CD112R человека.

2. Фрагменты антител

[00127] В некоторых вариантах осуществления антитело, представленное в настоящем документе, представляет собой фрагмент антитела. Фрагменты антител включают фрагменты Fab, Fab', Fab'-SH, F(ab')₂, Fv и scFv, и другие фрагменты, описанные ниже. Для обзора некоторых фрагментов антител см. Hudson et al. Nat. Med. 9:129-134 (2003). Для обзора фрагментов scFv см. например, Pluckthün, in The Pharmacology of Monoclonal Antibodies, vol. 113, Rosenburg and Moore eds., (Springer-Verlag, New York), pp. 269-315 (1994); см. также WO 93/16185; и патенты США № 5571894 и 5587458. Обсуждения фрагментов Fab и F(ab')₂, содержащих остатки эпитопа, связывающего рецептор реутилизации, и имеющих увеличенный период полужизни in vivo, приведены в Патенте США № 5869046.

[00128] Диатела представляют собой фрагменты антител с двумя антигенсвязывающими сайтами, которые могут быть бивалентными или биспецифическими. См., например, EP 404097; WO 1993/01161; Hudson et al., Nat. Med. 9:129-134 (2003); и Hollinger et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90: 6444-6448 (1993). Триатела и тетратела также описаны в Hudson et al., Nat. Med. 9:129-134 (2003).

[00129] Однодоменные антитела представляют собой фрагменты антител, содержащие весь или часть вариабельного домена тяжелой цепи или весь или часть вариабельного домена легкой цепи антитела. В некоторых вариантах осуществления однодоменное антитело представляет собой однодоменное антитело человека (Domantis, Inc., Waltham, MA; см., например, Патент США № 6248516 B1).

[00130] Фрагменты антител могут быть получены различными методами, включая, помимо прочего, протеолитическое расщепление интактного антитела, а также продукцию рекомбинантными клетками-хозяевами (например, E. сoli или фагом), как описано в данном документе.

3. Мультиспецифические антитела

[00131] В некоторых вариантах осуществления антитело, представленное в настоящем документе, представляет собой мультиспецифическое антитело, например биспецифическое антитело. Мультиспецифические антитела - это моноклональные антитела, обладающие специфичностью связывания по крайней мере с двумя разными сайтами. В некоторых вариантах осуществления одна из специфичностей связывания относится к CD112R, а другая - к любому другому антигену. В некоторых вариантах осуществления одна из специфичностей связывания относится к CD112R, а другая независимо выбрана из одного (в случае биспецифического) или более (в случае мультиспецифического) из PD-1, PD-L1, CTLA-4, Lag-3, TIM-3, TIGIT, CD96, PVRL1, PVRL2, PVRL3, PVRL4, CD155, STING, CD47, CD39 и IL-27. В некоторых вариантах осуществления биспецифические антитела могут связываться с двумя разными эпитопами CD112R. Биспецифические антитела также можно использовать для локализации цитотоксических агентов в клетках, экспрессирующих CD112R. Биспецифические антитела можно получить в виде полноразмерных антител или фрагментов антител.

[00132] Методы получения мультиспецифических антител включают рекомбинантную коэкспрессию двух пар тяжелая цепь-легкая цепь иммуноглобулина, имеющих разные специфичности (см. Milstein and Cuello, Nature 305: 537 (1983)), WO 93/08829, и Traunecker et al., EMBO J. 10: 3655 (1991)), и конструирование «выступ-во-впадину» (см., например, Патент США № 5731168), но не ограничиваются ими. Мультиспецифические антитела также могут быть получены путем создания электростатических управляющих эффектов для создания Fc-гетеродимерных молекул антитела (WO 2009/089004 A1); перекрестного сшивания двух или более антител или фрагментов (см., например, Патент США № 4676980 и Brennan et al., Science, 229: 81 (1985)); использование лейциновых застежек для выработки биспецифических антител (см., например, Kostelny et al., J. Immunol., 148(5):1547-1553 (1992)); использования технологии «диател» для получения фрагментов биспецифических антител (см., например, Hollinger et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 90:6444-6448 (1993)); и использования одноцепочечных димеров Fv (sFv) (см., например Gruber et al., J. Immunol., 152:5368 (1994)); и получение триспецифических антител, как описано, например, в Tutt et al. J. Immunol. 147: 60 (1991).

[00133] Сконструированные антитела с тремя или более функциональными антигенсвязывающими сайтами, включая «антитела-осьминоги», также включены в данный документ (см., например US 2006/0025576 A1).

[00134] Антитело или фрагмент в данном документе также включает «Fab двойного действия» или «DAF», содержащий антигенсвязывающий сайт, который связывается с CD112R, а также с другим, отличным антигеном (см., например, US 2008/0069820).

4. Варианты антител

[00135] В некоторых вариантах осуществления предложены варианты аминокислотной последовательности антител, представленных в настоящем документе. Например, может быть желательно улучшить аффинность связывания и/или другие биологические свойства антитела. Варианты аминокислотной последовательности антитела могут быть получены путем внесения соответствующих модификаций в нуклеотидную последовательность, кодирующую антитело, или путем пептидного синтеза. Такие модификации включают, например, делеции и/или вставки, и/или замены остатков в аминокислотных последовательностях антитела. Любая комбинация делеции, вставки и замены может быть использована для получения конечной конструкции при условии, что конечная конструкция обладает желаемыми характеристиками, например, антигенсвязывающими характеристиками.

5. Варианты замены, вставки и делеции

[00136] В некоторых вариантах осуществления предложены варианты антител, содержащие одну или более аминокислотных замен. Сайты, представляющие интерес для замещающего мутагенеза, включают HVR и FR. Консервативные замены показаны в Таблице 1 как «примерные замены». Аминокислотные замены могут быть введены в представляющее интерес антитело, и продукты могут быть проверены на желаемую активность, например, сохранение/улучшение связывания антигена, снижение иммуногенности или улучшение АЗКЦ или КЗЦ.

[00137] ТАБЛИЦА 1

Исходный
остаток Примерные
замены Консервативные
замены Ala (A) Val; Leu; Ile Val Arg (R) Lys; Gln; Asn Lys Asn (N) Gln; His; Asp, Lys; Arg Gln Asp (D) Glu; Asn Glu Cys (C) Ser; Ala Ser Gln (Q) Asn; Glu Asn Glu (E) Asp; Gln Asp Gly (G) Ala Ala His (H) Asn; Gln; Lys; Arg Arg Ile (I) Leu; Val; Met; Ala; Phe; Норлейцин Leu Leu (L) Норлейцин; Ile; Val; Met; Ala; Phe Ile Lys (K) Arg; Gln; Asn Arg Met (M) Leu; Phe; Ile Leu Phe (F) Trp; Leu; Val; Ile; Ala; Tyr Tyr Pro (P) Ala Ala Ser (S) Thr Thr Thr (T) Val; Ser Ser Trp (W) Tyr; Phe Tyr Tyr (Y) Trp; Phe; Thr; Ser Phe Val (V) Ile; Leu; Met; Phe; Ala; Норлейцин Leu

Аминокислоты могут быть сгруппированы в соответствии с общими свойствами боковой цепи:

(1) гидрофобные: норлейцин, Met, Ala, Val, Leu, Ile;

(2) нейтральные гидрофильные: Cys, Ser, Thr, Asn, Gln;

(3) кислые: Asp, Glu;

(4) основные: His, Lys, Arg;

(5) остатки, влияющие на ориентацию цепи: Gly, Pro;

(6) ароматные: Trp, Tyr, Phe.

[00138] Неконсервативные замены повлекут за собой замену члена одного из этих классов на другой класс.

[00139] В HVR могут быть внесены изменения (например, замены), например, для повышения аффинности антитела. Такие изменения могут быть сделаны в «горячих точках» HVR, то есть в остатках, кодируемых кодонами, которые подвергаются мутации с высокой частотой в процессе соматического созревания (см., например, Chowdhury, Methods Mol. Biol. 207:179-196 (2008)), и/или остатках, которые контактируют с антигеном, при этом полученный вариант VH или VL тестируется на аффинность связывания. Созревание аффинности путем конструирования и повторного выбора из вторичных библиотек описано, например, в Hoogenboom et al. in Methods in Molecular Biology 178:1-37 (O'Brien et al., ed., Human Press, Totowa, NJ, (2001).) В некоторых вариантах осуществления созревание аффинности, разнообразие вводится в вариабельные гены, выбранные для созревания, любым из множества способов (например, подверженной ошибкам ПЦР, перетасовкой цепей или олигонуклеотид-направленным мутагенезом). Затем создается вторичная библиотека. Затем библиотека проверяется для выявления любых вариантов антител с желаемой аффинностью. Другой метод введения разнообразия включает подходы, направленные на HVR, в которых несколько остатков HVR (например, 4-6 остатков за раз) рандомизируются. Остатки HVR, участвующие в связывании антигена, могут быть специфически идентифицированы, например, с использованием аланин-сканирующего мутагенеза или моделирования. CDR-H3 и CDR-L3, в частности, часто становятся мишенью.

[00140] В некоторых вариантах осуществления замены, вставки или делеции могут происходить в одной или более HVR, если такие изменения существенно не снижают способность антитела связывать антиген. Например, консервативные изменения (например, консервативные замены, как предусмотрено в данном документе), которые существенно не снижают аффинность связывания, могут быть внесены в HVR. Такие изменения могут, например, находиться за пределами контактирующих с антигеном остатков HVR. В некоторых вариантах осуществления вариантов последовательностей VH и VL, представленных выше, каждая HVR либо не изменена, либо содержит не более одной, двух или трех аминокислотных замен.

[00141] Применимый способ идентификации остатков или областей антитела, которые могут быть мишенями для мутагенеза, называется «аланин-сканирующий мутагенез», как описано в Cunningham and Wells (1989) Science, 244:1081-1085. В этом способе остаток или группа целевых остатков (например, заряженные остатки, такие как arg, asp, his, lys и glu) идентифицируются и заменяются нейтральной или отрицательно заряженной аминокислотой (например, аланином или полиаланином) для определения влияет ли это на взаимодействие антитела с антигеном. Дальнейшие замены могут быть введены в аминокислотные положения, демонстрирующие функциональную чувствительность к начальным заменам. Альтернативно или дополнительно, кристаллическая структура комплекса антиген-антитело может быть использована для определения точек контакта между антителом и антигеном. Такие контактные остатки и соседние остатки могут быть нацелены или исключены как кандидаты для замены. Варианты могут быть проверены, чтобы определить, содержат ли они желаемые свойства.

[00142] Вставки аминокислотной последовательности включают амино- и/или карбокси-концевые слияния, имеющие длину в диапазоне от одного остатка до полипептидов, содержащих сто или более остатков, а также вставки внутри последовательности одного или нескольких аминокислотных остатков. Примеры концевых вставок включают антитело с N-концевым остатком метионила. Другие инсерционные варианты молекулы антитела включают слияние N- или C-конца антитела с ферментом (например, ADEPT) или полипептидом, который увеличивает время полужизни антитела в сыворотке.

6. Варианты гликозилирования

[00143] В определенных вариантах осуществления антитело, представленное в настоящем документе, изменено для увеличения или уменьшения степени, в которой антитело является гликозилированным. Добавление или удаление сайтов гликозилирования к антителу может быть удобно выполнено путем изменения аминокислотной последовательности таким образом, что создается или удаляется один или более сайтов гликозилирования.

[00144] Когда антитело содержит Fc-область, углевод, присоединенный к нему, может быть изменен. Нативные антитела, продуцируемые клетками млекопитающих, обычно содержат разветвленный двухантенный олигосахарид, который обычно присоединяется посредством N-связи к Asn297 домена CH2 Fc-области. См., например, Wright et al. TIBTECH 15:26-32 (1997). Олигосахарид может включать в себя различные углеводы, например, маннозу, N-ацетилглюкозамин (GlcNAc), галактозу и сиаловую кислоту, а также фукозу, присоединенную к GlcNAc в «стволе» двухантенной структуры олигосахаридов. В некоторых вариантах осуществления могут быть сделаны модификации олигосахарида в антителе по изобретению для создания вариантов антител с определенными улучшенными свойствами.

[00145] В некоторых вариантах осуществления представлены варианты антител, имеющие углеводную структуру, в которой отсутствует фукоза, присоединенная (прямо или косвенно) к Fc-области. Например, количество фукозы в таком антителе может составлять от 1% до 80%, от 1% до 65%, от 5% до 65% или от 20% до 40%. Количество фукозы определяется путем расчета среднего количества фукозы в сахарной цепи в Asn297 относительно суммы всех гликоструктур, присоединенных к Asn 297 (например, сложных, гибридных и структур с высоким содержанием маннозы), как измерено с помощью масс-спектрометрии MALDI-TOF, как описано, например, в WO 2008/077546. Asn297 относится к остатку аспарагина, расположенному приблизительно в положении 297 в Fc-области (нумерация Eu остатков Fc-области); однако Asn297 также может быть расположен приблизительно на ± 3 аминокислоты выше или ниже положения 297, то есть между положениями 294 и 300, из-за незначительных вариаций последовательности в антителах. Такие варианты фукозилирования могут иметь улучшенную функцию АЗКЦ. См., например, патентные публикации США № US 2003/0157108 (Presta, L.); US 2004/0093621 (Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd). Примеры публикаций, относящихся к «дефукозилированным» или «дефицитным по фукозе» вариантам антител, включают: US 2003/0157108; WO 2000/61739; WO 2001/29246; US 2003/0115614; US 2002/0164328; US 2004/0093621; US 2004/0132140; US 2004/0110704; US 2004/0110282; US 2004/0109865; WO 2003/085119; WO 2003/084570; WO 2005/035586; WO 2005/035778; WO 2005/053742; WO 2002/031140; Okazaki et al. J. Mol. Biol. 336:1239-1249 (2004); Yamane-Ohnuki et al. Biotech. Bioeng. 87: 614 (2004). Примеры клеточных линий, способных продуцировать дефукозилированные антитела, включают клетки Lec13 CHO, дефицитные по фукозилированию белка (Ripka et al. Arch. Biochem. Biophys. 249:533-545 (1986); заявка на патент США № US 2003/0157108 A1, Presta, L; и WO 2004/056312 A1, Adams et al., особенно в примере 11), и линии клеток с нокаутом, таких как ген альфа-1,6-фукозилтрансферазы, FUT8, клетки с нокаутом СНО (см., например, Yamane-Ohnuki et al. Biotech. Bioeng. 87: 614 (2004); Kanda, Y. et al., Biotechnol. Bioeng., 94(4):680-688 (2006); и WO 2003/085107).

[00146] Варианты антител дополнительно содержат олигосахариды, разделенные пополам, например, в которых двухантенный олигосахарид, присоединенный к Fc-области антитела, разделен пополам GlcNAc. Такие варианты антител могут иметь пониженное фукозилирование и/или улучшенную функцию АЗКЦ. Примеры таких вариантов антител описаны, например, в WO 2003/011878 (Jean-Mairet et al.); патенте США № 6 602 684 (Umana et al.); и US 2005/0123546 (Umana et al.). Также предложены варианты антител с по меньшей мере одним остатком галактозы в олигосахариде, присоединенном к Fc-области. Такие варианты антител могут иметь улучшенную функцию КЗЦ. Такие варианты антител описаны, например, в WO 1997/30087 (Patel et al.); WO 1998/58964 (Raju, S.); и WO 1999/22764 (Raju, S.).

7. Варианты Fc-области

[00147] В некоторых вариантах осуществления одна или более аминокислотных модификаций могут быть введены в Fc-область антитела, представленного в настоящем документе, тем самым генерируя вариант Fc-области. Вариант Fc-области может содержать последовательность Fc-области человека (например, Fc-область человеческого IgG1, IgG2, IgG3 или IgG4), содержащую аминокислотную модификацию (например, замену) в одном или более аминокислотных положениях.

[00148] В некоторых вариантах осуществления в изобретении рассмотрен вариант антитела, который обладает некоторыми, но не всеми эффекторными функциями, что делает его подходящим кандидатом для применений, в которых время полужизни антитела in vivo является важным, но некоторые эффекторные функции (такие как комплемент и АЗКЦ) ненужны или вредны. Анализы цитотоксичности in vitro и/или in vivo могут быть проведены для подтверждения снижения/истощения активности КЗЦ и/или АЗКЦ. Например, могут быть проведены анализы связывания Fc-рецептора (FcR), чтобы убедиться, что у антитела отсутствует связывание с FcγR (следовательно, вероятно, не обладает активностью АЗКЦ), но сохраняется способность связывания с FcRn. Первичные клетки для опосредования АЗКЦ, NK-клетки, экспрессируют только FcγRIII, тогда как моноциты экспрессируют FcγRI, FcγRII и FcγRIII. Данные по экспрессии FcR на гемопоэтических клетках обобщены в таблице 3 на странице 464 публикации Ravetch and Kinet, Annu. Rev. Immunol. 9:457-492 (1991). Неограничивающие примеры анализов in vitro для оценки активности АЗКЦ интересующей молекулы описаны в патенте США № 5500362 (см., например, Hellstrom, I. et al. Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 83:7059-7063 (1986)) и Hellstrom, I et al., Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 82:1499-1502 (1985); 5821337 (см. Bruggemann, M. et al., J. Exp. Med. 166:1351-1361 (1987)). В качестве альтернативы можно использовать методы нерадиоактивных анализов (см., например, анализ нерадиоактивной цитотоксичности ACTI™ для проточной цитометрии (CellTechnology, Inc. Mountain View, CA; и анализ нерадиоактивной цитотоксичности CytoTox 96^® (Promega, Madison, WI). Эффекторные клетки, пригодные для такого анализа, включают мононуклеарные клетки периферической крови МКПК (PBMC) и естественные клетки-киллеры (NK). В качестве альтернативы или дополнения, АЗКЦ-активность молекулы, представляющей интерес, можно оценить in vivo, например, на животной модели, такой как описанная в публикации Clynes et al. Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 95:652-656 (1998). Анализы связывания C1q также могут быть выполнены для подтверждения того, что антитело неспособно связывать C1q и, следовательно, не имеет активности КЗЦ. См., например, ИФА связывания C1q и C3c в WO 2006/029879 и WO 2005/100402. Для оценки активации комплемента может быть проведен анализ КЗЦ (см., например, Gazzano-Santoro et al., J. Immunol. Methods 202:163 (1996); Cragg, M.S. et al., Blood 101:1045-1052 (2003); and Cragg, M.S. И M.J. Glennie, Blood 103:2738-2743 (2004)). Связывание FcRn и определение клиренса/периода полужизни in vivo также можно проводить с использованием методов, известных в данной области (см., например, Petkova, S.B. et al., Int'l. Immunol. 18(12):1759-1769 (2006)).

[00149] Антитела с пониженной эффекторной функцией включают антитела с заменой одного или более остатков 238, 265, 269, 270, 297, 327 и 329 Fc-области (патент США № 6737056). Такие Fc-мутанты включают Fc-мутантов с заменами в двух или более аминокислотных положениях 265, 269, 270, 297 и 327, включая так называемого Fc-мутанта «DANA» с заменой остатков 265 и 297 на аланин (патент США № 7332581).

[00150] Описаны некоторые варианты антител с улучшенным или ослабленным связыванием с FcR. (См., например, Патент США № 6737056; WO 2004/056312, и Shields et al., J. Biol. Chem. 9(2): 6591-6604 (2001).)

[00151] В некоторых вариантах осуществления вариант антитела содержит Fc-область с одной или более аминокислотными заменами, которые улучшают АЗКЦ, например, заменами в положениях 298, 333 и/или 334 Fc-области (нумерация остатков по EU).

[00152] В некоторых вариантах осуществления в Fc-область вносятся изменения, которые приводят к измененному (т.е. улучшенному или ослабленному) связыванию C1q и/или комплемент-зависимой цитотоксичности (КЗЦ), например, как описано в патенте США № 6194551, WO 99/51642 и Idusogie et al. J. Immunol. 164: 4178-4184 (2000).

[00153] Антитела с увеличенным периодом полужизни и улучшенным связыванием с неонатальным Fc-рецептором (FcRn), который отвечает за перенос материнских IgG к плоду (Guyer et al., J. Immunol. 117:587 (1976) и Kim et al., J. Immunol. 24:249 (1994)), описаны в US 2005/0014934 A1 (Hinton et al.).Эти антитела содержат Fc-область с одной или более заменами в ней, которые улучшают связывание Fc-области с FcRn. Такие Fc-варианты включают варианты с заменами в одном или более остатках Fc-области: 238, 252, 254, 256, 265, 272, 286, 303, 305, 307, 311, 312, 317, 340, 356, 360, 362, 376, 378, 380, 382, 413, 424 или 434, например, заменой остатка 434 Fc-области (например, Патент США № 7371826).

[00154] См. также Duncan & Winter, Nature 322:738-40 (1988); патент США № 5648260; патент США № 5624821; и WO 94/29351, касающиеся других примеров вариантов Fc-области.

[00155] В некоторых вариантах осуществления предложено антитело в соответствии с Таблицей последовательностей, при этом его изотип представляет собой IgG1 человека. В некоторых вариантах осуществления предложено антитело в соответствии с Таблицей последовательностей, при этом его изотип представляет собой IgG4 человека. В некоторых вариантах осуществления предложено антитело в соответствии с Таблицей последовательностей, при этом его изотип представляет собой IgG4 человека, и при этом имеется единственная мутация серина 228 на пролин (S228P).

8. Варианты сконструированных антител с цистеином

[00156] В некоторых вариантах осуществления может быть желательно создать сконструированные антитела с цистеином, например, «THIOM-антитела», в которых один или более остатков антитела замещены остатками цистеина. В конкретных вариантах осуществления замещенные остатки находятся в доступных сайтах антитела. За счет замещения этих остатков цистеином реактивные тиоловые группы тем самым размещаются в доступных сайтах антитела и могут использоваться для конъюгирования антитела с другими фрагментами, такими как фрагменты лекарственного средства или линкер-лекарственные фрагменты, для создания иммуноконъюгата, как описано далее в настоящем документе. В некоторых вариантах осуществления любой один или более из следующих остатков могут быть замещены цистеином: V205 (нумерация по Кабат) легкой цепи; A118 (нумерация EU) тяжелой цепи; и S400 (нумерация EU) Fc-области тяжелой цепи. Сконструированные антитела с цистеином могут быть получены, как описано, например, в патенте США № 7521541.

9. Производные антител

[00157] В некоторых вариантах осуществления антитело, представленное в настоящем документе, может быть дополнительно модифицировано, чтобы содержать дополнительные небелковые фрагменты, которые известны в данной области и легко доступны. Фрагменты, подходящие для дериватизации антитела, включают водорастворимые полимеры, но не ограничиваются ими. Неограничивающие примеры водорастворимых полимеров включают полиэтиленгликоль (ПЭГ), сополимеры этиленгликоля/пропиленгликоля, карбоксиметилцеллюлозу, декстран, поливиниловый спирт, поливинилпирролидон, поли-1,3-диоксолан, поли-1,3,6-триоксан, сополимер этилена и малеинового ангидрида, полиаминокислоты (либо гомополимеры, либо статистические сополимеры) и декстран или поли(н-винилпирролидон)полиэтиленгликоль, гомополимеры пропиленгликоля, сополимеры пролипропиленоксида/этиленоксида, полиоксиэтилированные полиолы (например, глицерин), поливиниловый спирт и их смеси, но не ограничиваются ими. Пропиональдегид полиэтиленгликоля может иметь преимущества при производстве из-за его стабильности в воде. Полимер может меть любую молекулярную массу и может быть разветвленным или неразветвленным. Количество полимеров, присоединенных к антителу, может варьироваться, и если присоединено более одного полимера, они могут быть одинаковыми или разными молекулами. В общем, количество и/или тип полимеров, используемых для дериватизации, может быть определено на основании соображений, включая конкретные свойства или функции антитела, подлежащего улучшению, будет ли производное антитело использоваться в терапии при определенных условиях и т. д., но не ограничиваясь ими.

[00158] В другом варианте осуществления предложены конъюгаты антитела и небелкового фрагмента, которые можно избирательно нагревать под воздействием излучения. В некоторых вариантах осуществления небелковый фрагмент представляет собой углеродную нанотрубку (Kam et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 102: 11600-11605 (2005)). Излучение может иметь любую длину волны и включает, помимо прочего, длины волн, которые не повреждают обычные клетки, но нагревают небелковый фрагмент до температуры, при которой гибнут клетки, проксимальные к антитело-небелковому фрагменту.

Рекомбинантные методы

[00159] Антитела могут быть получены с использованием рекомбинантных методов и композиций, например, как описано в патенте США № 4816567. В некоторых вариантах осуществления предусмотрена выделенная нуклеиновая кислота, кодирующая описанное в данном документе анти-CD112R антитело. Такая нуклеиновая кислота может кодировать аминокислотную последовательность, содержащую VL, и/или аминокислотную последовательность, содержащую VH антитела (например, легкую и/или тяжелую цепи антитела). В дополнительном варианте осуществления предложен один или более векторов (например, векторов экспрессии), содержащих такую нуклеиновую кислоту. В дополнительном варианте осуществления предложена клетка-хозяин, содержащая такую нуклеиновую кислоту. В одном таком варианте осуществления клетка-хозяин содержит (например, была трансформирована им): (1) вектор, содержащий нуклеиновую кислоту, кодирующую аминокислотную последовательность, содержащую VL антитела, и аминокислотную последовательность, содержащую VH антитела, или (2) первый вектор, содержащий нуклеиновую кислоту, которая кодирует аминокислотную последовательность, содержащую VL антитела, и второй вектор, содержащий нуклеиновую кислоту, которая кодирует аминокислотную последовательность, содержащую VH антитела. В некоторых вариантах осуществления клетка-хозяин является эукариотической, например клеткой яичника китайского хомячка (СНО) или лимфоидной клеткой (например, клеткой Y0, NS0, Sp20). В некоторых вариантах осуществления предложен способ получения анти-CD112R антитела, где способ включает культивирование клетки-хозяина, содержащей нуклеиновую кислоту, кодирующую антитело, как указано выше, в условиях, подходящих для экспрессии антитела, и необязательно выделение антитела из клетки-хозяина (или среды для культивирования клеток-хозяев).

[00160] Для получения рекомбинантного анти-CD112R антитела нуклеиновую кислоту, кодирующую антитело, например, как описано выше, выделяют и вставляют в один или более векторов для дальнейшего клонирования и/или экспрессии в клетке-хозяине. Такую нуклеиновую кислоту можно легко выделять и секвенировать с использованием общепринятых процедур (например, с использованием олигонуклеотидных зондов, способных специфически связываться с генами, кодирующими тяжелые и легкие цепи антитела).

[00161] Клетки-хозяева, подходящие для клонирования или экспрессии векторов, кодирующих антитело, включают прокариотические или эукариотические клетки, описанные в данном документе. Например, антитела могут продуцироваться в бактериях, в частности, когда гликозилирование и эффекторная функция Fc не нужны. Для экспрессии фрагментов антител и полипептидов в бактериях см., например, патенты США № 5648237, 5789199 и 5840523. (См. также Charlton, Methods in Molecular Biology, Vol. 248 (BKC Lo, ed., Humana Press, Totowa, NJ, 2003), pp. 245-254, описывающую экспрессию фрагментов антител в E. coli). После экспрессии антитело может быть выделено из биомассы бактериальных клеток в растворимой фракции и может быть дополнительно очищено.

[00162] Помимо прокариот, подходящими хозяевами для клонирования или экспрессии векторов, кодирующих антитела, являются эукариотические микроорганизмы, такие как мицелиальные грибы или дрожжи, включая штаммы грибов и дрожжей, чьи метаболические пути гликозилирования были «гуманизированы», что приводит к продукции антител с частично или полностью человеческим профилем гликозилирования. См. Gerngross, Nat. Biotech. 22:1409-1414 (2004) и Li et al., Nat. Biotech. 24:210-215 (2006).

[00163] Клетки-хозяева, подходящие для экспрессии гликозилированного антитела, также можно получать из многоклеточных организмов (беспозвоночных и позвоночных). Примеры клеток беспозвоночных включают клетки растений и насекомых. Идентифицированы многочисленные бакуловирусные штаммы, которые можно использовать в сочетании с клетками насекомых, в частности для трансфекции клеток Spodoptera frugiperda.

[00164] В качестве хозяев также можно использовать культуры растительных клеток. См., например, патенты США № 5959177, 6040498, 6420548, 7125978 и 6417429 (описывающие технологию PLANTIBODIES™ для получения антител в трансгенных растениях).

[00165] В качестве хозяев также можно использовать клетки позвоночных. Например, можно использовать линии клеток млекопитающих, адаптированные для роста в суспензии. Другими примерами применимых линий клеток-хозяев млекопитающих являются линия CV1 почек обезьяны, трансформированная SV40 (COS-7); линия почек эмбриона человека (293 или клетки 293, как описано, например, у Graham et al., J. Gen Virol. 36:59 (1977); клетки почек детенышей хомячка (BHK); клетки Сертоли мыши (клетки TM4, как описано, например, у Mather, Biol. Reprod. 23:243-251 (1980)); клетки почки обезьяны (CV1); клетки почки африканской зеленой мартышки (VERO-76); клетки карциномы шейки матки человека (HELA); клетки почки собаки (MDCK; клетки печени крысы линии buffalo (BRL 3A); клетки легкого человека (W138); клетки печени человека (Hep G2); клетки опухоли молочной железы мыши (MMT 060562); клетки TRI, как описано, например, у Mather et al., Annals N.Y. Acad. Sci. 383:44-68 (1982); клетки MRC 5 и клетки FS4. Другие применимые линии клеток-хозяев млекопитающих включают клетки яичника китайского хомячка (СНО), включая клетки DHFR^-CHO (Urlaub et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77:4216 (1980)); и линии миеломных клеток, такие как Y0, NS0 и Sp2/0. Для обзора некоторых линий клеток-хозяев млекопитающих, подходящих для продукции антител, см., например, Yazaki and Wu, Methods in Molecular Biology, Vol. 248 (B.K.C. Lo, ed., Humana Press, Totowa, NJ), pp. 255-268 (2003).

Иммуноконъюгаты

[00166] В изобретении также предложены иммуноконъюгаты, содержащие анти-CD112R антитело, конъюгированное в данном документе с одним или более другими терапевтическими агентами или радиоактивными изотопами.

[00167] В другом варианте осуществления иммуноконъюгат содержит антитело, как описано в данном документе, конъюгированное с радиоактивным атомом с образованием радиоконъюгата. Для производства радиоконъюгатов доступны различные радиоактивные изотопы. Примеры включают At²¹¹, I¹³¹, I¹²⁵, Y⁹⁰, Re¹⁸⁶, Re¹⁸⁸, Sm¹⁵³, Bi²¹², P³², Pb²¹² и радиоактивные изотопы Lu. Когда радиоконъюгат используется для обнаружения, он может содержать радиоактивный атом для сцинтиграфических исследований, например tc99m или I123, или спиновую метку для изображений ядерного магнитного резонанса (ЯМР) (также известную как магнитно-резонансная томография, МРТ), например снова йод-123, йод-131, индий-111, фтор-19, углерод-13, азот-15, кислород-17, гадолиний, марганец или железо.

[00168] Конъюгаты антитела могут быть получены с использованием различных бифункциональных агентов, связывающих болок, таких как N-сукцинимидил-3-(2-пиридилдитио) пропионат (SPDP), сукцинимидил-4-(N-малеимидометил) циклогексан-1-карбоксилат (SMCC), иминотиолан (IT), бифункциональные производные имидоэфиров (такие как диметиладипимидат HCl), активные сложные эфиры (такие как дисукцинимидил суберат), альдегиды (такие как глутаральдегид), бис-азидосоединения (такие как бис (п-азидобензоил) гександиамин), производные бис-диазония (такие как бис-(п-диазонийбензоил)-этилендиамин), диизоцианаты (такие как 2,6-диизоцианат толуола) и бис-активные соединения фтора (такие как 1,5-дифтор-2,4-динитробензол). Например, иммунотоксин рицин может быть получен, как описано в Vitetta et al., Science 238:1098 (1987). Меченная углеродом-14 1-изотиоцианатобензил-3-метилдиэтилентриаминпентауксусная кислота (MX-DTPA) является типичным хелатирующим агентом для конъюгации радионуклеотида с антителом. См. WO 94/11026. Линкер может быть «расщепляемым линкером», способствующим высвобождению цитотоксического лекарственного средства в клетке. Могут быть использованы, например, кислотолабильный линкер, чувствительный к пептидазе линкер, фотолабильный линкер, диметиловый линкер или дисульфидсодержащий линкер (Chari et al., Cancer Res. 52:127-131 (1992); патент США № 5208020).

[00169] Иммуноконъюгаты или ADC в настоящем документе явно предполагают конъюгаты, полученные с помощью перекрестно-линкерных реагентов, включая, помимо прочего, BMPS, EMCS, GMBS, HBVS, LC-SMCC, MBS, MPBH, SBAP, SIA, SIAB, SMCC, SMPB, SMPH, сульфо-EMCS, сульфо-GMBS, сульфо-KMUS, сульфо-MBS, сульфо-SIAB, сульфо-SMCC и сульфо-SMPB, а также SVSB (сукцинимидил-(4-винилсульфон) бензоат), которые являются коммерчески доступными (например, от Pierce Biotechnology, Inc., Rockford, IL., U.S.A), но не ограничиваются ими.

Фармацевтические составы и композиции

[00170] Фармацевтические препараты или композиции анти-CD112R-антитела, как описано в данном документе, получают путем смешивания такого антитела, имеющего желаемую степень чистоты, с одним или более необязательными фармацевтически приемлемыми носителями, разбавителями и/или наполнителями (Remington's Pharmaceutical Sciences 16th edition, Osol, A. Ed. (1980)), в виде лиофилизированных составов или водных растворов. Фармацевтически приемлемые носители, разбавители и эксципиенты обычно нетоксичны для реципиентов в используемых дозировках и концентрациях и включают: стерильную воду, буферы, такие как фосфат, цитрат и другие органические кислоты; антиоксиданты, включая аскорбиновую кислоту и метионин; консерванты (такие как хлорид октадецилдиметилбензиламмония; хлорид гексаметония; хлорид бензалкония, хлорид бензетония; фенол, бутиловый или бензиловый спирт; алкилпарабены, такие как метил или пропилпарабен; катехол; резорцинол; циклогексанол; 3-пентанол; и м-крезол); низкомолекулярные (менее чем около 10 остатков) полипептиды; белки, такие как сывороточный альбумин, желатин или иммуноглобулины; гидрофильные полимеры, такие как поливинилпирролидон; аминокислоты, такие как глицин, глутамин, аспарагин, гистидин, аргинин или лизин; моносахариды, дисахариды и другие углеводы, включая глюкозу, маннозу или декстрины; хелатообразующие агенты, такие как ЭДТК; сахара, такие как сахароза, маннит, трегалоза или сорбит; солеобразующие противоионы, такие как натрий; комплексы металлов (например, комплексы Zn-белок); и/или неионные поверхностно-активные вещества, такие как полиэтиленгликоль (ПЭГ), но не ограничиваются ими. Примеры фармацевтически приемлемых носителей в данном документе дополнительно включают агенты, диспергирующие лекарственные средства, такие как растворимые нейтрально-активные гликопротеины гиалуронидазы (sHASEGP), например растворимые гликопротеины гиалуронидазы PH-20 человека, такие как rHuPH20 (HYLENEX^®, Baxter International, Inc.).Некоторые иллюстративные sHASEGP и способы их использования, включая rHuPH20, описаны в публикациях патентов США № 2005/0260186 и 2006/0104968.В одном аспекте sHASEGP комбинируется с одной или более дополнительными гликозаминогликаназами, такими как хондроитиназы.

[00171] Типичные составы лиофилизированных антител описаны в патенте США № 6267958. Водные составы антител включают те, которые описаны в патенте США № 6171586 и WO2006/044908, причем последние составы включают гистидин-ацетатный буфер.

[00172] Состав или композиция, описанная в данном документе, также может содержать более одного активного ингредиента, если это необходимо для конкретного показания, подлежащего лечению, предпочтительно ингредиенты с дополнительной активностью, которые не оказывают неблагоприятного воздействия друг на друга. Такие активные ингредиенты присутствуют в надлежащей комбинации в количествах, которые эффективны для предполагаемого применения.

[00173] Активные ингредиенты могут быть заключены в микрокапсулы, полученные, например, методами коацервации или межфазной полимеризации, например, микрокапсулы из гидроксиметилцеллюлозы или желатиновые микрокапсулы и полиметилметацилатные микрокапсулы, соответственно, в коллоидных системах доставки лекарств (например, липосомы, альбумин микросферы, микроэмульсии, наночастицы и нанокапсулы) или в макроэмульсиях. Такие методы раскрыты в Remington's Pharmaceutical Sciences 16th edition, Osol, A. Ed. (1980).

[00174] Можно изготовить препараты с замедленным высвобождением. Подходящие примеры препаратов с замедленным высвобождением включают полупроницаемые матрицы из твердых гидрофобных полимеров, содержащие антитело, причем матрицы представлены в форме, например пленок или микрокапсул.

[00175] Составы или композиции, используемые для введения in vivo, обычно стерильны. Стерильность может быть легко достигнута, например, путем фильтрации через стерильные фильтрующие мембраны.

Терапевтические способы

[00176] Любые из представленных в данном документе анти-CD112R антител могут использоваться в терапевтических методах. Везде, где обсуждается «антитело», также следует понимать, что композиция, содержащая антитело, также включена.

[00177] В одном аспекте предусмотрено анти-CD112R антитело для использования в качестве лекарственного средства. В некоторых вариантах осуществления предложено анти-CD112R антитело для применения для усиления, повышения и/или поддержания противоопухолевого иммунного ответа у субъекта, имеющего опухоль. В некоторых вариантах осуществления опухоль является раковой. В некоторых вариантах осуществления предложено анти-CD112R антитело для использования при лечении рака. В некоторых вариантах осуществления предложено анти-CD112R антитело для использования для усиления взаимодействий CD226 с CD112.

[00178] В дополнительном аспекте в изобретении предложено применение анти-CD112R антитела при производстве или приготовлении лекарственного средства. В некоторых вариантах осуществления лекарственное средство предназначено для использования для усиления, повышения и/или поддержания противоопухолевого иммунного ответа у субъекта, имеющего опухоль. В некоторых вариантах осуществления опухоль является раковой. В некоторых вариантах осуществления лекарственное средство предназначено для лечения рака. В некоторых вариантах осуществления лекарственное средство предназначено для усиления взаимодействий CD226 с CD112.

[00179] В дополнительных аспектах в изобретении предложены способы лечения заболеваний и/или расстройств, при которых желательно блокирование CD112R. В некоторых вариантах осуществления предусмотрены способы усиления, повышения и/или поддержания противоопухолевого иммунного ответа у субъекта, имеющего опухоль, включающие введение анти-CD112R антитела, как описано в данном документе. В некоторых вариантах осуществления опухоль является раковой. В некоторых вариантах осуществления предложены способы лечения рака у субъекта, имеющего рак, включающие введение анти-CD112R антитела, как описано в данном документе. В некоторых вариантах осуществления предусмотрены способы усиления взаимодействий CD226 с CD112 у субъекта, необязательно имеющего рак, включающие введение анти-CD112R антитела, как описано в данном документе.

[00180] В некоторых аспектах в изобретении предложен способ облегчения одного или более симптомов заболевания или расстройства, связанного с белком CD112R; или анти-CD112R антитело, или лекарственное средство, содержащее анти-CD112R антитело, для облегчения одного или более симптомов заболевания или расстройства, связанного с белком CD112R (такого как любое из заболеваний или расстройств, описанных в данном документе, например, рака). В некоторых аспектах в изобретении предложен способ уменьшения количества симптомов или тяжести одного или более симптомов заболевания или расстройства, связанных с белком CD112R; или анти-CD112R антитело, или лекарственное средство, содержащее анти-CD112R антитело, для уменьшения количества симптомов или тяжести одного или более симптомов заболевания или нарушения, связанного с белком CD112R (например, любого из заболеваний или расстройств, описанных в данном документе, например, рака). В конкретном варианте осуществления симптомом заболевания или расстройства, связанного с белком CD112R, является опухоль, а уменьшение представляет собой уменьшение размера опухоли, неспособность опухоли к росту или устранение опухоли.

[00181] Описанные в данном документе антитела можно использовать, например, для лечения рака. В некоторых вариантах осуществления предложены способы лечения рака, включающие введение субъекту эффективного количества описанного в данном документе антитела. В некоторых вариантах осуществления антитела могут запускать или усиливать иммунный ответ у субъекта, такой как антигенспецифический иммунный ответ. В некоторых вариантах осуществления антитела могут стимулировать активность Т-клеток. В некоторых вариантах осуществления антитела могут ингибировать рост по меньшей мере одной опухоли у субъекта.

[00182] В настоящем документе предложены способы лечения субъекта, имеющего рак, включающие введение субъекту терапевтически эффективного количества анти-CD112R антитела, описанного в данном документе, таким образом, чтобы субъект проходил лечение. Анти-CD112R антитело можно использовать отдельно. Альтернативно, анти-CD112R антитело можно использовать в сочетании с другим агентом, как описано ниже.

[00183] Виды рака могут представлять собой рак с солидными опухолями или злокачественные новообразования крови (например, опухоли жидких тканей).

[00184] Неограничивающие примеры рака для лечения включают плоскоклеточный рак, мелкоклеточный рак легкого, немелкоклеточный рак легкого, плоскоклеточный немелкоклеточный рак легкого (NSCLC), неплоскоклеточный NSCLC, глиому, рак желудочно-кишечного тракта, рак почек (например, светлоклеточная карцинома), рак яичников, рак печени, колоректальный рак, рак эндометрия, рак почки (например, почечно-клеточная карцинома (RCC)), рак предстательной железы (например, гормонорезистентная аденокарцинома предстательной железы), рак щитовидной железы, нейробластома, рак поджелудочной железы, глиобластому (мультиформнуюглиобластому), рак шейки матки, рак желудка, рак мочевого пузыря, гепатому, рак молочной железы, рак толстой кишки и рак головы и шеи (или карциному), рак желудка, герминогенную опухоль, саркому у детей, синоназальная опухоль из клеток-натуральных киллеров, меланому (например, метастатическая злокачественная меланома, такая как кожная или внутриглазная злокачественная меланома), рак костей, рак кожи, рак матки, рак анальной области, рак яичек, карциному фаллопиевых труб, карциному эндометрия, карциному шейки матки, карциному влагалища, карциному вульвы, рак пищевода, рак тонкой кишки, рак эндокринной системы, рак паращитовидной железы, рак надпочечника, саркома мягких тканей, рак уретры, рак полового члена, солидные опухоли у детей, рак мочеточника, карциному почечной лоханки, новообразование центральной нервной системы (ЦНС), первичную лимфому ЦНС, опухолевый ангиогенез, опухоль оси позвоночника, рак головного мозга, глиому ствола головного мозга, аденому гипофиза, саркому Капоши, эпидермоидный рак, плоскоклеточный рак, Т-клеточную лимфому, раковые образования, связанные с воздействием окружающей среды, в том числе индуцированные асбестом, связанные с вирусом раковые опухоли или раковые опухоли вирусного происхождения (например, вирус папилломы человека (опухоли, связанные с HPV-, или опухоли с HPV-происхождением)), а также гематологические злокачественные новообразования, происходящие от одного из двух основных линий клеток крови то есть линии миелоидных клеток (которая продуцирует гранулоциты, эритроциты, тромбоциты, макрофаги и тучные клетки) или линии лимфоидных клеток (которая продуцирует B, T, NK и плазматические клетки), например, все типы лейкозов, лимфом и миелом, например, острые, хронические, лимфоцитарные и/или миелогенные лейкозы, такие как острый лейкоз (ALL), острый миелогенный лейкоз (AML), хронический лимфоцитарный лейкоз (CLL) и хронический миелолейкоз (CML), недифференцированный AML (MO), миелобластный лейкоз (M1), миелобластный лейкоз (M2; с созреванием клеток), промиелоцитарный лейкоз (вариант M3 или M3 [M3V]), миеломоноцитарный лейкоз (M4 или вариант M4 с эозинофилией [M4E]), моноцитарный лейкоз (M5), эритролейкоз (M6), мегакариобластный лейкоз (M7), изолированная гранулоцитарная саркома и хлорома; лимфомы, такие как лимфома Ходжкина (HL), неходжкинская лимфома (NHL), В-клеточные гематологические злокачественные новообразования, например, B-клеточные лимфомы, T-клеточные лимфомы, лимфоплазмацитоидные лимфомы, моноцитоидные B-клеточные лимфомы, лимфома лимфоидной ткани, ассоциированная со слизистой оболочкой (MALT), анапластическая (например, Ki 1+) крупноклеточная лимфома, Т-клеточная лимфома/лейкоз взрослых, лимфома из мантийных клеток, ангио-иммунобластная Т-клеточная лимфома, ангиоцентрическая лимфома, интестинальная Т-клеточная лимфома, первичная медиастинальная B-клеточная лимфома, предшественница Т-лимфобластной лимфомы, Т-лимфобластная лимфома; и лимфома/лейкоз (T-Lbly/T-ALL), периферическая Т-клеточная лимфома, лимфобластная лимфома, посттрансплантационное лимфопролиферативное заболевание, истинная гистиоцитарная лимфома, первичная лимфома центральной нервной системы, первичная эффузионная лимфома, B-клеточная лимфома, лимфобластная лимфома (LBL), гемопоэтические опухоли лимфоидной линии, острый лимфобластный лейкоз, диффузная В-крупноклеточная лимфома, лимфома Беркитта, фолликулярная лимфома, диффузная гистиоцитарная лимфома (DHL), иммунобластная крупноклеточная лимфома, предшественница B-лимфобластной лимфомы (CTLC-лимфома), также называемая грибовидным микозом или синдромом Сезари) и лимфоплазмацитоидная лимфома (LPL) с макроглобулинемией Вальденстрема; миеломы, такие как миелома IgG, миелома легких цепей, несекреторная миелома, вялотекущая миелома (также называемая индолентной миеломой), одиночная плазмоцитома и множественные миеломы, хронический лимфолейкоз (CLL), волосисто-клеточная лимфома; гемопоэтические опухоли миелоидного происхождения, опухоли мезенхимального происхождения, включая фибросаркому и рабдомиоскаркому; семинома, тератокарцинома, опухоли центральной и периферической нервной системы, включая астроцитому, шванномы; опухоли мезенхимального происхождения, включая фибросаркому, рабдомиоскарому и остеосаркому; и другие опухоли, в том числе меланома, пигментная ксеродермия, кератоакантома, семинома, фолликулярный рак щитовидной железы и тератокарцинома, гемопоэтические опухоли лимфоидной линии, например Т-клеточные и В-клеточные опухоли, включая, помимо прочего, Т-клеточные нарушения, такие как Т- пролимфоцитарный лейкоз (T-PLL), включая типы с мелкоклеточными и церебриформными клетками; лейкоз из крупных гранулярных лимфоцитов (LGL) Т-клеточного типа; и T-NHL гепатолиенальная лимфома; периферическая/посттимическая Т-клеточная лимфома (плеоморфные и иммунобластные подтипы); ангиоцентрическая (назальная) Т-клеточная лимфома; рак головы или шеи, рак почек, рак прямой кишки, рак щитовидной железы; острая миелоидная лимфома, а также любые комбинации указанных видов рака. Описанные в данном документе способы также могут быть использованы для лечения метастатических злокачественных опухолей, неоперабельных, рефрактерных злокачественных опухолей (например, злокачественных опухолей, рефрактерных к предыдущей иммунотерапии, например, блокирующему антителу к CTLA-4 или PD-1) и/или рецидивирующих злокачественных опухолей.

[00185] В некоторых вариантах осуществления описанное в данном документе антитело вводят субъектам, имеющим рак, который проявил неадекватный ответ на предшествующее лечение или прогрессировал, например, на предшествующее лечение иммуноонкологическим или иммунотерапевтическим препаратом. В некоторых вариантах осуществления рак является рефрактерным или резистентным к предшествующему лечению, либо по своей природе рефрактерным, либо резистентным (например, рефрактерным к антагонисту пути PD-1), или при котором приобретается резистентное или рефрактерное состояние. Например, описанное в данном документе антитело можно вводить субъектам, которые не реагируют или недостаточно реагируют на первую терапию, или у которых наблюдается прогрессирование заболевания после лечения, например, лечения антагонистом пути анти-PD-1, либо отдельно, либо в комбинации с другой терапией (например, с терапией антагонистами пути анти-PD-1). В других вариантах осуществления описанное в данном документе антитело вводят субъектам, которые ранее не получали (т.е. не лечились) иммуноонкологический агент, например антагонист пути PD-1.

Комбинации

[00186] Антитела по изобретению можно использовать в терапии либо отдельно, либо в комбинации с другими агентами. Например, антитело по изобретению можно совместно вводить по меньшей мере с одним дополнительным терапевтическим агентом (например, дополнительно включающим введение второй терапии).

[00187] В некоторых вариантах осуществления нацеливание на дополнительный независимый путь ингибирования или их комбинации могут привести к дальнейшему усилению активации иммунных клеток по сравнению с монотерапией.

[00188] В некоторых вариантах осуществления дополнительный терапевтический агент или второй агент представляет собой химиотерапевтический агент, опсонизирующий агент, агент, истощающий популяцию регуляторных Т-клеток («Treg»), антагонист мишени, отличной от CD112R, или агонист мишени, отличной от CD112R. В некоторых вариантах осуществления второй агент представляет собой химиотерапевтический агент, описанный в данном документе, или любой известный химиотерапевтический агент. В некоторых вариантах осуществления второй агент представляет собой опсонизирующий агент, где опсонизирующий агент представляет собой антитело, отличное от анти-CD112R антитела, которое нацелено на раковые или опухолевые клетки. В некоторых вариантах осуществления второй агент представляет собой описанный в данном документе агент, истощающий Treg, или любой известный агент, истощающий Treg. В некоторых вариантах осуществления второй агент является антагонистом мишени, отличной от CD112R. В некоторых вариантах осуществления второй агент является агонистом мишени, отличной от CD112R.

[00189] В некоторых случаях второй агент нацелен на независимый путь ингибирования, такой как, например, путь с участием PD-1, PD-L1, CTLA-4, Lag-3 или TIM-3. В некоторых вариантах осуществления второй агент противодействует одному или более из PD-1, PD-L1, CTLA-4, Lag-3 и TIM-3. Подходящие антагонисты для использования в описанной в данном документе комбинированной терапии включают, без ограничения, лиганды, антитела (например, моноклональные антитела и биспецифические антитела) и поливалентные агенты. В одном варианте осуществления антагонист представляет собой слитый белок, например слитый белок Fc, такой как AMP-244. В некоторых вариантах осуществления антагонист PD-1 представляет собой анти-PD-1 или анти-PD-L1 антитело.

[00190] Типичным анти-PD-1 антителом является ниволумаб (BMS-936558) или антитело, которое содержит CDR или вариабельные области одного из антител 17D8, 2D3, 4H1, 5C4, 7D3, 5F4 и 4A11, описанные в WO 2006/121168. В некоторых вариантах осуществления анти-PD-1 антитело представляет собой MK-3475 (ламбролизумаб), описанное в WO 2012/145493; AMP-514, описанное в WO 2012/145493; или PDR001. Другие известные антитела к PD-1 и другие ингибиторы PD-1 включают антитела, описанные в WO 2009/014708, WO 03/099196, WO 2009/114335, WO 2011/066389, WO 2011/161699, WO 2012/145493, патентах США №№ 7635757 и 8217149, и публикации патента США № 2009/0317368. Также можно использовать любое из анти-PD-1 антител, описанных в WO2013/173223. Анти-PD-1 антитело, которое конкурирует за связывание и/или связывается с тем же эпитопом на PD-1, что и одно из этих антител, также можно использовать в комбинированном лечении.

[00191] В некоторых вариантах осуществления анти-PD-L1 антитело, используемое в комбинированной терапии, представляет собой BMS-936559 (обозначается как 12A4 в WO 2007/005874 и патенте США № 7943743) или антитело, которое содержит CDR или вариабельные области 3G10, 12A4, 10A5, 5F8, 10H10, 1B12, 7H1, 11E6, 12B7 и 13G4, которое описано в публикации PCT WO 07/005874 и патенте США № 7943743. В определенном варианте осуществления анти-PD-L1 антителом является MEDI4736 (также известный как дурвалумаб и анти-B7-H1), MPDL3280A (также известный как атезолизумаб и RG7446), MSB0010718C (также известный как авелумаб; WO2013/79174) или rHigM12B7. Также можно использовать любое из анти-PD-L1 антител, раскрытых в WO 2013/173223, WO 2011/066389, WO 2012/145493, патентах США № 7635757 и 8217149 и публикации США № 2009/145493. Анти-PD-L1 антитела, которые конкурируют и/или связываются с тем же эпитопом, что и эпитоп любого из этих антител, также можно использовать в комбинированном лечении.

[00192] В некоторых вариантах осуществления антитело к CD112R по данному описанию можно использовать с антагонистом CTLA-4, например, анти-CTLA-4 антителом. В одном из вариантов осуществления анти-CTLA-4 антитело представляет собой антитело, выбранное из группы: Yervoy® (ипилимумаб или антитело к 10D1, описанное в публикации РСТ WO 01/14424), тремелимумаб (ранее тицилимумаб, CP-675,206), моноклональное антитело или анти-CTLA-4 антитело, описанное в любой из следующих публикаций: WO 98/42752; WO 00/37504; патенте США № 6207156; Hurwitz et al. (1998) Pro. Natl. Acad. Sci. USA 95(17): 10067-10071; Camacho et al. (2004) J. Clin. Oncology 22(145): antibodiestract No. 2505 (антитело к CP-675206); и Mokyr et al. (1998) Cancer Res. 58:5301-5304. Также можно использовать любое из анти-CTLA-4 антител, описанных в WO2013/173223.

[00193] В некоторых вариантах осуществления анти-CD112R антитело по настоящему описанию используется в комбинации с антагонистом LAG-3 (также называемым в данном и других документах как LAG3). Примеры анти-LAG3 антител включают антитела, содержащие CDR или вариабельные области антител 25F7, 26H10, 25E3, 8B7, 11F2 или 17E5, которые описаны в публикации патента США № US 2011/0150892, WO 10/19570 и WO 2014/008218. В одном варианте осуществления анти-LAG-3 антитело представляет собой BMS-986016. Другие признанные в данной области анти-LAG-3 антитела, которые можно использовать, включают IMP731 и IMP-321, описанные в US 2011/007023, WO 08/132601 и WO 09/44273. Анти-LAG-3 антитела, которые конкурируют и/или связываются с тем же эпитопом, что и эпитоп любого из этих антител, также можно использовать в комбинированном лечении.

[00194] В некоторых вариантах осуществления нацеливание на два или более рецепторов TIGIT, CD96 и CD112R одновременно увеличивает опосредованную CD226 передачу сигналов по сравнению с монотерапией анти-CD112R. Следовательно, в некоторых вариантах осуществления второй агент является антагонистом TIGIT и/или CD96. Подходящие антагонисты для использования в описанной в данном документе комбинированной терапии включают, без ограничения, лиганды, антитела (например, моноклональные антитела и биспецифические антитела) и поливалентные агенты.

[00195] В некоторых вариантах осуществления члены семейства генов PVR активируются в опухолевых клетках и могут проявлять присущие опухолевые свойства. Нацеливание на дополнительных членов семейства генов PVR в сочетании с анти-CD112R антителами приводит к повышенной чувствительности опухолей по сравнению с монотерапией. Следовательно, в некоторых вариантах осуществления второй агент выбирается из одного или более антагонистов PVRL1, PVRL2, PVRL3, PVRL4 и CD155. Подходящие антагонисты для применения в описанной в данном документе комбинированной терапии включают, без ограничения, лиганды, антитела (например, моноклональные антитела и биспецифические антитела) и поливалентные агенты.

[00196] Агонисты STING индуцируют активацию клеток врожденного иммунитета, что приводит к усилению примирования Т-клеток и привлечению иммунных клеток в микроокружение опухоли. Нацеливание на агонисты STING в комбинации с CD112R может привести к еще большему увеличению набора и активации Т-клеток и NK-клеток.

[00197] Повышенный фагоцитоз, опосредованный анти-CD47 антителами, может привести к увеличению презентирования антигенов рака макрофагами Т-клеткам. Комбинированное лечение анти-CD47 антителом и анти-CD112R антителом, таким как анти-CD112R антитело, предложенное в настоящем документе, дает возможность усилить ответ Т-клеток, специфичных к раку, и полностью охвачено данным документом.

[00198] Аденозин через аденозиновые рецепторы, экспрессируемые на иммунных клетках, ингибирует активацию Т-клеток и NK-клеток. Анти-CD39 антитела подавляют образование аденозина, предотвращая гидролиз аденозинтрифосфата (АТФ). Комбинированное лечение анти-CD39 антителом и анти-CD112R антителом, таким как анти-CD112R антитело, представленное в настоящем документе, дает возможность дополнительно усилить терапию CD112R путем ингибирования опосредованной аденозином передачи клеточного сигнала в иммунных клетках.

[00199] Цитокины могут эффективно модулировать активацию Т-клеток и NK-клеток. IL-27 представляет собой иммуносупрессивный цитокин, который ингибирует ответы, опосредованные Т-клетками и NK-клетками. Анти-IL-27 антитела дают возможность усилить терапию CD112R за счет ограничения передачи сигналов иммуносупрессивных цитокинов в иммунных клетках. Таким образом, обеспечивается комбинированное лечение анти-IL-27 антителом и анти-CD112R антителом, таким как анти-CD112R антитело, предложенное в настоящем документе.

[00200] Антитела в данном документе также могут быть предоставлены до, по существу одновременно с или после других способов лечения, например хирургического вмешательства, химиотерапии, лучевой терапии или введения биологического препарата, такого как другое терапевтическое антитело. В некоторых вариантах осуществления рак рецидивировал или прогрессировал после терапии, выбранной из хирургического вмешательства, химиотерапии и лучевой терапии, или их комбинации. Например, анти-CD112R антитело, описанное в данном документе, можно вводить в качестве дополнительной терапии, когда существует риск наличия микрометастазов и/или для снижения риска рецидива.

[00201] Для лечения рака комбинации можно вводить в сочетании с одним или более дополнительными противораковыми агентами, такими как химиотерапевтический агент, агент, ингибирующий рост, противораковая вакцина, такая как вакцина для генной терапии, агент против ангиогенеза и/или противоопухолевый состав.

[00202] В некоторых вариантах осуществления с комбинацией можно вводить противовоспалительное лекарственное средство, такое как стероид или нестероидное противовоспалительное лекарственное средство (NSAID). В случаях, когда желательно привести в состояние покоя аберрантно пролиферативные клетки, субъекту также можно вводить гормоны и стероиды (включая синтетические аналоги), такие как 17a-этинилэстрадиол, диэтилстильбестрол, тестостерон, преднизон, флуоксиместерон, дроматостанолон, тестолактон, мегестролацетат, метилпреднизолон, метил-тестостерон, преднизолон, триамцинолон, хлортрианизен, гидроксипрогестерон, аминоглутетимид, эстрамустин, медроксипрогестеронацетат, леупролид, флутамид, ZOLADEX®, Торемид, в сочетании с или до лечения антителами к CD112R, описанными в данном документе. При использовании способов или композиций, описанных в данном документе, при желании также можно вводить другие агенты, используемые для модуляции роста или метастазирования опухоли в клинических условиях, такие как антимиметики.

[00203] Такие комбинированные терапии, указанные выше, включают комбинированное введение (когда два или более терапевтических агентов включены в одни и те же или отдельные составы или композиции) и раздельное введение, и в этом случае введение антитела по изобретению может происходить до, одновременно и/или после введения дополнительного терапевтического агента или агентов. В некоторых вариантах осуществления введение анти-CD112R антитела и введение дополнительного терапевтического агента происходит в течение примерно одного месяца, или в течение примерно одной, двух или трех недель, или в течение примерно одного, двух, трех, четырех, пяти или шести дней друг от друга.

[00204] Антитело по изобретению (и любое дополнительное терапевтическое средство) можно вводить любыми подходящими способами, включая парентеральное, внутрилегочное и интраназальное, и при желании местного лечения, интралезиальное введение. Парентеральные инфузии включают внутримышечное, внутривенное, внутриартериальное, внутрибрюшинное или подкожное введение. Введение дозы может осуществляться любым подходящим путем, например инъекциями, такими как внутривенные или подкожные инъекции, частично в зависимости от того, является ли введение краткосрочным или хроническим. В данном документе предусмотрены различные схемы введения дозы, включая, помимо прочего, однократное или многократное введение в различные моменты времени, болюсное введение и пульсовую инфузию.

[00205] Антитела по изобретению могут быть приготовлены, дозированы и введены способом, совместимым с надлежащей медицинской практикой. Факторы, которые следует учитывать в этом контексте, включают конкретное заболевание, которое лечат, конкретное млекопитающее, которое лечат, клиническое состояние отдельного субъекта, причину расстройства, место доставки агента, способ введения, схема введения и другие факторы, известные практикующим врачам. Используемый в данном документе термин «разделенная доза» означает разделение единичной стандартной дозы или общей суточной дозы на две или более доз, например, два или более введений единичной стандартной дозы. Антитело можно вводить в виде «разделенной дозы».

[00206] Антитело не обязательно, но опционально приготовлено с одним или более агентами, используемыми в настоящее время для предотвращения или лечения рассматриваемого нарушения. Эффективное количество таких других агентов зависит от количества антитела, присутствующего в составе или композиции, типа расстройства или лечения и других факторов, обсуждаемых выше. Их обычно используют в тех же дозах и с путями введения, как описано в данном документе, или примерно от 1 до 99% доз, описанных в данном документе, или в любой дозе и любым путем, которые эмпирически/клинически определены как подходящие. В некоторых вариантах осуществления антитело представлено в составе для немедленного высвобождения, а другой агент приготовлен для пролонгированного высвобождения или наоборот.

Промышленные изделия

[00207] В другом аспекте изобретения предложено промышленное изделие, содержащее материалы, пригодные для лечения, профилактики и/или диагностики расстройств, описанных выше. Изделие содержит контейнер и размещенную с контейнером или находящуюся на нем этикетку или вкладыш в упаковку. Подходящие контейнеры включают, например, бутыли, флаконы, шприцы, пакеты с растворами для в/в введения и т. д. Контейнеры можно формировать из различных материалов, например из стекла или пластика. Контейнер содержит композицию, которая сама по себе или в комбинации с другой композицией, эффективна для лечения, профилактики и/или диагностики состояния, и может иметь стерильный отверстие доступа (например, контейнер может представлять собой пакет или флакон с раствором для внутривенного введения, имеющий пробку, к имеющий пробку, выполненную с возможностью прокалывания иглой для подкожных инъекций). По крайней мере один активный агент в композиции представляет собой антитело по изобретению. На этикетке или на листке-вкладыше в упаковку указано, что композицию применяют для лечения предпочтительного патологического состояния. Кроме того, изделие может содержать (а) первый контейнер с содержащейся в нем композицией, причем композиция содержит антитело по изобретению; и (b) второй контейнер с содержащейся в нем композицией, причем композиция содержит дополнительный цитотоксический или иной терапевтический агент. Промышленное изделие в этом варианте осуществления изобретения может дополнительно содержать вкладыш в упаковку, указывающий, что композиции могут использоваться для лечения конкретного состояния. Альтернативно или дополнительно изделие может дополнительно содержать второй (или третий) контейнер, содержащий фармацевтически приемлемый буфер, такой как бактериостатическая воду для инъекций (BWFI), фосфатно-солевой буферный раствор, раствор Рингера и раствор декстрозы. Оно может дополнительно включать другие материалы, желательные с коммерческой точки зрения и с точки зрения пользователя, включая другие буферы, разбавители, фильтры, иглы и шприцы.

[00208] Понятно, что любое из вышеуказанных промышленных изделий может включать иммуноконъюгат по изобретению вместо или в дополнение к анти-CD112R антителу.

ПРИМЕРЫ

Пример 1. Получение анти-CD112R антител.

[00209] Антигены биотинилировали с использованием набора для сульфо-NHS-биотинилирования EZ-Link от Pierce. Козий F(ab')2, конъюгированный FITC, к каппа-цепи человека (LC-FITC), ExtrAvidin-PE (EA-PE) и стрептавидин-AF633 (SA-633) были получены от Southern Biotech, Sigma и Molecular Probes, соответственно. Разделительные колонки со стрептавидиновыми микрогранулами и MACS LC были приобретены у Miltenyi Biotec. Козье антитело, конъюгированное с РЕ, к IgG человека (Human-PE) было получено от Southern Biotech.

[00210] Первичное обнаружение.

[00211] Восемь наивных синтетических дрожжевых библиотек человека, каждая из ~ 109 вариантов, размножали, как описано ранее (см., например, Y. Xu et al, Addressing polyspecificity of antibodies selected from an in vitro yeast presentation system: a FACS-based, high-throughput selection and analytical tool. PEDS 26.10, 663-70 (2013); WO 2009036379; WO 2010105256; и WO 2012009568). Для первых двух раундов отбора была выполнена методика магнитной сортировки гранул с использованием системы Miltenyi MACS, как описано ранее (см., например, Siegel et al, High efficiency recovery and epitope-specific sorting of an scFv yeast display library". J Immunol Methods 286(1-2), 141-153 (2004). Вкратце, дрожжевые клетки (~ 1010 клеток/библиотеку) инкубировали с 1,5 мл 10 нМ биотинилированного Fc-слитого антигена в течение 15 минут при 30°C в промывочном буфере (фосфатно-солевой буфер (ФСБ)/0,1% бычий сывороточный альбумин (БСА)). После однократного промывания 40 мл ледяного промывочного буфера осадок клеток ресуспендировали в 20 мл промывочного буфера, к дрожжам добавляли стрептавидиновые микрогранулы (500 мкл) и инкубировали в течение 15 мин при 4°C. Затем дрожжи осаждали, ресуспендировали в 20 мл промывочного буфера и наносили на колонку Miltenyi LS. После загрузки 20 мл на колонку, ее промывали 3 раза 3 мл промывочного буфера. Колонку затем удаляли из магнитного поля и дрожжи элюировали 5 мл питательной среды и затем выращивали в течение ночи. Следующие раунды селекции были выполнены с использованием проточной цитометрии. Приблизительно 2×10⁷ дрожжей осаждали, трижды промывали промывочным буфером и инкубировали при 30°C либо с уменьшающимися концентрациями биотинилированного антигена (от 100 до 1 нМ) в условиях равновесия, либо с реагентом истощения полиспецифичности (PSR), чтобы удалить неспецифические антитела из выборки. Для истощения PSR библиотеки инкубировали разведением 1:10 биотинилированного реагента PSR, как описано ранее (см., например, Y. Xu et al, Addressing polyspecificity of antibodies selected from an in vitro yeast presentation system: a FACS-based, high-throughput selection and analytical tool. PEDS 26.10, 663-70 (2013). Затем дрожжи дважды промывали промывочным буфером и окрашивали вторичными реагентами LC-FITC (разбавленным 1:100) и либо SA-633 (разбавленным 1:500), либо EAPE (разбавленным 1:50) в течение 15 минут при 4°C. После двукратной промывки промывочным буфером осадки клеток ресуспендировали в 0,3 мл промывочного буфера и переносили в сортирующие пробирки с сетчатыми крышками. Отбор с использованием давления аффинности для отбора и выделения антител с более высокой аффинностью осуществляли путем конкуренции с холодным (т.е. немеченым) антигеном.

[00212] Сортировку проводили с использованием сортировщика FACS ARIA (BD Biosciences) и определяли сортировочные интервалы для отбора антител с желаемыми характеристиками. Отборочные раунды повторяли до тех пор, пока не была получена популяция со всеми желаемыми характеристиками. После последнего раунда сортировки дрожжи высевали и отбирали отдельные колонии для характеристики.

[00213] Перетасовывание партии легкой цепи.

[00214] Протокол диверсификации легкой цепи использовался на этапе первичного обнаружения для дальнейшего обнаружения и улучшения антител.

[00215] Протокол диверсификации партии легких цепей: тяжелые цепи из наивной селекции экстрагировали из дрожжей с помощью ПЦР и трансформировали в библиотеку легких цепей с количеством вариантов 5×10⁶. Селекции были выполнены с одним раундом MACS и тремя раундами FACS, как описано в наивном обнаружении. В различных раундах FACS библиотеки проверяли на связывание PSR и давление аффинности путем титрования антигена до 0,5 нМ. Сортировка проводилась для получения популяции с желаемыми характеристиками.

[00216] Оптимизация антител

[00217] Оптимизацию антител проводили путем получения вариантов вариабельных областей тяжелой цепи, как описано ниже.

[00218] Селекция CDRH1 и CDRH2: CDRH3 одного антитела рекомбинировали в предварительно созданную библиотеку с вариантами CDRH1 и CDRH2 с количеством вариантов 1 × 10⁸, и отбор выполнялся с помощью одного раунда MACS и трех раундов FACS, как описано в наивном обнаружении. В различных раундах FACS библиотеки исследовали на предмет связывания PSR, перекрестной реактивности у мыши, и давления аффинности путем титрования или давления аффинности путем предварительного образования комплекса антигена с исходным Fab или исходным IgG для обогащения связывающими веществами с более высокой аффинностью, чем исходный IgG. Сортировка проводилась для получения популяции с желаемыми характеристиками.

[00219] Производство и очистка антител

[00220] Клоны дрожжей выращивали до насыщения и затем индуцировали в течение 48 часов при 30°С при встряхивании. После индукции дрожжевые клетки осаждали и супернатанты собирали для очистки. IgG очищали с использованием колонки с белком А и элюировали уксусной кислотой, рН 2,0. Фрагменты Fab были получены путем расщепления папаином и очищены с помощью KappaSelect (GE Healthcare LifeSciences).

[00221] Измерения KD с использованием ForteBio

[00222] Измерения аффинности с использованием ForteBio выполняли на Octet RED384 в целом, как описано ранее (см., например, Estep et al., High throughput solution-based measurement of antibody-antigen affinity and epitope binning. Mabs 5(2), 270-278 (2013)). Вкратце, измерения аффинности с использованием ForteBio выполняли путем загрузки IgG в оперативном режиме на сенсоры AHQ. Сенсоры уравновешивали в автономном режиме в буфере для анализа в течение 30 минут, а затем контролировали в оперативном режиме в течение 60 секунд для установления исходного уровня. Сенсоры с нагруженными IgG подвергались воздействию 100 нМ антигена в течение 3 минут, а затем переносились в буфер для анализа на 3 минуты для измерения скорости диссоциации. Все кинетики анализировали с использованием модели связывания 1:1.

[00223] Биннинг эпитопа/блокирование лиганда с использованием ForteBio

[00224] Биннинг эпитопа/блокирование лигандов проводили с использованием стандартного сэндвич-анализа перекрестного блокирования. Контрольный IgG к мишени или рецептор нагружали на сенсоры AHQ, а незанятые Fc-связывающие сайты на сенсоре блокировали нерелевантным (нецелевым) антителом IgG1 человека. Затем сенсоры подвергали воздействию 100 нМ целевого антигена, а затем второго антитела к мишени. Дополнительное связывание вторым антителом после ассоциации антигена указывает на незанятый эпитоп (не конкурентный), в то время как отсутствие связывания указывает на блокирование эпитопа (блокирование конкурента или лиганда).

[00225] Кинтетический анализ Biacore

[00226] Для измерений на основе Biacore антиген был ковалентно связан с чипом C1 захвата Fc к антителу мыши с использованием набора иммобилизации по аминогруппе (GE Healthcare Bio-Sciences). Связь между антигеном и пятиточечным титрованием антитела трехкратным разведением, начиная с 27 нМ, измеряли в течение 300 секунд. Затем в течение 3600 секунд измеряли диссоциацию между антигеном и антителом. Кинетические данные были проанализированы и адаптированы в целом с использованием модели связывания 1:1.

Пример 2. Анти-CD112R антитела связываются с CD112R.

[00227] Анализ связывания на клетках

[00228] Оценивали способность анти-CD112R антител связываться с CD112R, экспрессируемым на клетках. 1×10⁵ клеток Jurkat (линия клеток острой Т-клеточной лейкемии, ATCC № TIB-152), которые были либо дикого типа, либо сконструированы для сверхэкспрессии CD112R человека (Jurkat-CD112R OE), добавляли в каждую лунку 96-луночного планшета с V-образным дном и окрашивали либо анти-CD112R антителами, либо изотипическим контролем IgG1 (0,63 мкг/мл) в течение 1 часа при 4°C. Клетки дважды промывали ФСБ+ 2% ФБС и ресуспендировали с антителом к Fc IgG человека, конъюгированным с Alexa Fluor® 647 (Biolegend, № по каталогу 409320), разведенным 1:100 в ФБС+2% ФБС, и инкубировали при 4°C в течение 30 минут. Затем клетки дважды промывали и ресуспендировали в ФСБ+2% ФБС. Клеточные данные были получены с использованием LSRFortessa X-20 (BD Biosciences) и проанализированы с помощью программного обеспечения FlowJo (Tree Star).

[00229] Результаты представлены на Фиг. 1. Количественное связывание антител с клетками Jurkat-CD112R OE оценивали по среднему геометрическому значению интенсивности флуоресценции (gMFI) сигнала Alexa Fluor® 647. Эти результаты демонстрируют, что анти-CD112R антитела связываются с клетками, экспрессирующими CD112R. Сводная информация о связывании антител представлена в Таблице 2.

Пример 3. Анти-CD112R антитела блокируют связывание CD112 с клетками, экспрессирующими CD112R.

[00230] Анализ блокировки на клетках

[00231] Оценивали способность анти-CD112R антител блокировать связывание CD112 с клетками, экспрессирующими CD112R. 1×10⁵ клеток Jurkat (линия клеток острой Т-клеточной лейкемии, ATCC № TIB-152), которые были сконструированы для сверхэкспрессии CD112R человека (Jurkat-CD112R OE), добавляли в каждую лунку 96-луночного планшета с V-образным дном и окрашивали серийными разведениями либо анти-CD112R антител, либо изотипического контроля IgG1 (максимальная концентрация, 10 мкг/мл) в течение 1 часа при 4°C. Клетки дважды промывали ФСБ+2% ФБС и ресуспендировали с биотинилированным his-меченным CD112 человека (3 мкг/мл) (BPS Bioscience, № 71234) и PE-стрептавидином (5 мкг/мл) (Biolegend, № 405204) в ФСБ+2% ФБС, и инкубировали 2 часа при 4°C. Затем клетки дважды промывали и ресуспендировали в ФСБ+2% ФБС. Клеточные данные были получены с использованием LSRFortessa X-20 (BD Biosciences) и проанализированы с помощью программного обеспечения FlowJo (Tree Star).

[00232] Результаты представлены на Фиг. 2А и в Таблице 2. Количественное определение связывания CD112 с клетками оценивали по среднему геометрическому значению интенсивности флуоресценции (gMFI) сигнала PE и отображали как процент ингибирования. Процент ингибирования рассчитывали как [100 - ((MFI тестируемого образца/Макс. MFI)*100%)]. Эти результаты демонстрируют, что анти-CD112R антитела ингибируют способность CD112 связываться с экспрессирующими CD112R клетками дозозависимым образом. Сводная информация о связывании и блокировании антител представлена в Таблице 2.

[00233] Способность анти-CD112R антител блокировать CD112R человека также оценивали с помощью ИФА. Вкратце, 96-луночные планшеты Nunc Maxisorp покрывали 1 мкг/мл слитого белка CD112R-hIgG4 в ФСБ в течение ночи при 4°C. Затем планшеты промывали 6 раз ФСБ+0,01% Tween-20 (ФБСТ) и затем блокировали 200 мкл ФСБ+1% БСА в течение 1,5 часов при комнатной температуре. После блокирования планшеты промывали 6 раз ФСБТ. Затем добавляли 100 мкл анти-CD112R антител в ФСБ+1% БСА до конечной исходной концентрации 10 мкг/мл с 4-кратными серийными разведениями. Планшеты инкубировали при комнатной температуре 1,5 часа. Следующие планшеты промывали 6 раз ФСБТ и затем инкубировали с 1 мкг/мл белка Fc CD112 (R&D Systems, кат № 9317-N2-050), который был биотинилирован с помощью набора для сульфо-NHS-биотинилирования (Thermo Fisher, кат. № 21925) в 100 мкл ФСБ+1% БСА в течение 1 часа при комнатной температуре. Затем планшеты промывали 6 раз ФСБТ и затем инкубировали со стрептавидин-HRP (Biolegend, № по каталогу 405210), разведенным в ФСБ+1% БСА, в соответствии с рекомендациями производителя в течение 1 часа при комнатной температуре. После этой инкубации планшеты промывали 6 раз ФСБТ и проявляли субстратом TMB (Life Technologies, № по каталогу 002023). Реакцию останавливали равным объемом стоп-реагента (Life Technologies, № по каталогу SS04). Поглощение при 450 нм (ОП 450) измеряли на планшет-ридере SpectraMax.

[00234] Результаты представлены на Фиг. 2В и в Таблице 2. Эти результаты демонстрируют, что анти-CD112R антитела блокируют связывание CD112R человека с CD112 человека. Процент ингибирования рассчитывали как [100 - ((ОП 450 тестового образца/Макс. ОП 450)*100%)] Макс. ОП 450 определяли как поглощение при 450 нм в отсутствие антитела.

[00235] Таблица 2: Сводная информация о связывании и блокировании антител

Антитело gMFI Jurkat (кратное увеличение относительно изотипического контроля) gMFI сверхэкспрессирующих Jurkat-CD112R (OE) (кратное увеличение относительно изотипического контроля) IC50 блокирования CD112 на Jurkat-CD112R OE (нг/мл) Макс. ингибирование блокирования CD112 на Jurkat-CD112R OE (%) Макс. ингибирование блокирования CD112 ИФА (%) Антитело 2 4,7 63,9 0,83 94,1 97,0 Антитело 5 3,8 63,3 0,17 97,0 97,4 Антитело 10 4,6 55,7 0,69 96,8 96,3 Антитело 15 4 53,2 0,51 97,9 97,0 Антитело 32 2,5 27,9 23,57 96,0 75,1 Антитело 33 3,4 34,2 21,89 97,4 78,8 Антитело 34 3,8 33,8 13,22 96,9 80,0 Антитело 35 3,3 32,1 16,19 97,4 81,7 Антитело 36 3,5 31 24,37 97,5 86,2 Антитело 38 3,8 51,7 0,19 95,5 97,2 Антитело 44 4,8 46,9 0,81 97,7 96,8 Антитело 46 4,2 23,8 16,22 95,5 97,6 Антитело 58 4,5 37,3 2,8 96,3 97,3

Пример 4. Анти-CD112R антитела усиливают опосредованное NК-клетками уничтожение.

[00236] Анализ цитотоксичности NK

[00237] Чтобы определить влияние анти-CD112R антител человека на цитотоксичность, опосредованную NK-клетками, NK-клетки человека совместно культивировали с клетками-мишенями REH (линия клеток острого лимфоцитарного лейкоза, отличная от T/B, ATCC № CRL-8286) в присутствии анти-CD112R антитела или изотипического контроля.

[00238] Вкратце, NK-клетки были выделены из PBMC трех здоровых доноров посредством отрицательной селекции (набор для выделения NK-клеток Easysep™, Stemcell № 17955) и активированы в течение 16 часов с помощью IL-2 (10 единиц/мл) (Peprotech № 200-02) и IL-12 (20 нг/мл (Peprotech № 200-12) в RPMI+10% ФБС+1% пенициллин-стрептомицин (R10) (ThermoFisher). Клетки REH промывали, ресуспендировали в ФСБ (ThermoFisher) и метили с помощью CellTrace ™violet (CTV) (ThermoFisher № C34557) в течение 12 минут при 37°C. Затем клетки REH промывали ФСБ+10% ФБС и затем ресуспендировали в R10. После активации NK-клетки промывали и ресуспендировали в R10. 2,5 × 10⁵ NK-клеток и 5 × 10⁴ клеток REH добавляли в каждую лунку 96-луночного планшета с плоским дном для соотношения эффекторных клеток-мишеней 5:1. Анти-CD112R антитело и антитело изотипа IgG1 разводили в R10 и также добавляли в каждую лунку до конечной концентрации 10 мкг/мл. Каждое условие выполнялось в двух экземплярах. Затем планшеты инкубировали в течение 4 часов при 37°C. Затем клетки промывали и инкубировали при комнатной температуре в течение 30 минут в темноте с красителем для определения жизнеспособности 7-AAD (1 мкг/мл) (Biolegend № 420404) для специфической маркировки мертвых клеток. Данные жизнеспособности клеток были получены с использованием LSRFortessa X-20 (BD Biosciences) и проанализированы с помощью программного обеспечения FlowJo (Tree Star). Мертвые клетки REH были определены как двойные положительные по CTV и 7-AAD клетки.

[00239] Результаты представлены на Фиг. 3. Цитотоксичность (процент относительно изотипического контроля) рассчитывали как ((процент мертвых клеток с тестовым антителом минус процент мертвых клеток с антителом изотипического контроля), деленный на процент мертвых клеток с антителом изотипического контроля) x 100. Обработка NK-клеток каждым из описанных в данном документе анти-CD112R антител приводила к усилению опосредованной клетками цитотоксичности против клеток REH по сравнению с изотипическим контролем. Эти результаты демонстрируют, что анти-CD112R антитела усиливают опосредованное уничтожение NK-клеток.

Пример 5. Анти-CD112R антитела усиливают активацию CD8+ Т-клеток, управляемую антигеном.

[00240] Антигенспецифический анализ CD8+ Т-клеток.

[00241] Оценивали влияние анти-CD112R антител на активацию CD8+ Т-клеток, управляемую антигеном. Первичная ограниченная по HLA-A*0201 цитомегаловирусная (CMV) линия CD8+ Т-клеток (Astarte Biologics № 1049, партия № 3782DE17) инкубировали с активированными пептидами клеток Colo205 (клеточная линия аденокарциномы толстой кишки, ATCC № CCL-222) в присутствии анти-CD112R антитела или изотипического контроля.

[00242] Вкратце, CMV-специфические Т-клетки размораживали, промывали и ресуспендировали в X-VIVO 10 (ThermoFisher № BW04380Q). 2 × 10⁴ CMV Т-клеток добавляли в каждую лунку 96-луночного круглодонного планшета и оставляли в покое в течение 4 часов при 37°C. После начального периода покоя в каждую лунку добавляли 5 × 10⁴ клеток Colo205 и пептид CMV pp65 (1 нг/мл) (Anaspec № AS-63937). Затем анти-CD112R антитело и изотипическое антитело разводили в X-VIVO 10 и добавляли в каждую лунку до конечной концентрации 10 мкг/мл. Каждое условие выполнялось в двух экземплярах. Затем планшеты инкубировали в течение 16 часов при 37°C. Супернатанты собирали из каждой лунки и подвергали одному циклу замораживания/оттаивания перед оценкой цитокинов. После оттаивания аналитические супернатанты разбавляли 1:5 в X-VIVO 10, а затем измеряли гамма-интерферон (ИФН-g) в аналитическом супернатанте с помощью мультиплексного анализа с использованием магнитных гранул Luminex для CD8+ T-клеток человека (Millipore Sigma № HCD8MAG-15K) и проводили на Millipore FlexMap 3D.

[00243] Результаты представлены на Фиг. 4. Условия испытаний. Уровни ИФН-g определяли количественно на основе стандартной кривой, построенной для определенных концентраций IFNg. CD8+ Т-клетки, обработанные анти-CD112R антителами 2 и 5, приводили к большей секреции ИФН-g, чем наблюдаемая с изотипическим контролем. Эти результаты демонстрируют, что анти-CD112R антитела усиливают активацию CD8+ Т-клеток, управляемую антигеном.

Пример 6. Комбинация антитела к CD112R мыши и антитела к TIGIT мыши оказывает терапевтический эффект на модели опухоли CT-26 мыши.

[00244] Эффективность комбинированной блокады CD112R и Tigit in vivo

[00245] Эффективность блокады CD112R и TIGIT в качестве отдельных и комбинированных агентов была протестирована на мышиной сингенной модели опухоли аденокарциномы толстой кишки CT26. Самкам мышей Balb/c в возрасте 7 недель (Charles River Laboratories, № 028) имплантировали подкожно 0,1 × 10⁶ клеток CT26.WT (ATCC № CRL-2638) в 0,1 мл инокуляционной матрицы 50% матригеля. Мышей рандомизировали на группы по 10 мышей в каждой (всего 40 мышей) стратифицированным способом с объемом опухоли в диапазоне 80-120 мм³ и обрабатывали дважды в неделю в течение двух недель путем внутрибрюшинной инъекции, как показано в Таблице 3.

[00246] Таблица 3: Детали группы лечения

Группа Лечение 1 Лечение 2 Антитело Доза (мкг/мышь) Антитело Доза (мкг/мышь) Изотип Изотип 1 500 Изотип 2 500 CD112R Изотип 1 500 к CD112R 500 TIGIT Анти-TIGIT 500 Изотип 2 500 CD112R+TIGIT Анти-CD112R 500 Анти-TIGIT 500

[00247] Объемы опухолей измеряли каждые 2-3 дня, пока опухоли не достигли предельного размера IACUC (<2000 мм³).

[00248] Таблица 4: Сведения об антителах

Группа Клон Изотип 1 Клон C1.18.4, изотипический контроль мышиного IgG2a Изотип 2 Поликлональный изотипический контроль IgG человека Анти-Tigit 10A7, мышиный IgG2a Анти-CD112R Анти-CD112R IgG4 человека

[00249] Результаты представлены на Фиг 5. На графике показаны средние объемы опухолей для каждой группы лечения в зависимости от времени. Результаты демонстрируют, что комбинация анти-CD112R антитела с анти-TIGIT антителом была эффективной для снижения роста опухоли по сравнению с животными, получавшими изотипический контроль, в то время как монотерапия анти-CD112R антителом или анти-TIGIT антителом показала либо отсутствие активности, либо лишь умеренный эффект на снижение роста опухоли. Хотя одно анти-CD112R антитело не показало активности в этом анализе, другие эксперименты, представленные в настоящем документе, демонстрируют пользу монотерапии анти-CD112R антителом. См., например, Фиг. 9.

Пример 7. Повышенная экспрессия CD112R в PBMC после активации анти-CD3 антителом.

[00250] CD112R активируется в активированных РВМС in vitro

[00251] Чтобы определить влияние клеточной активации на экспрессию CD112R, PBMC человека стимулировали in vitro анти-CD3 антителом. Мононуклеарные клетки периферической крови (PBMC) от здоровых доноров выделяли из лейкоцитов (Research Blood Components). Отдельные лейкоцитарные пленки обрабатывали отдельно. В каждую коническую пробирку объемом 50 мл (Corning № 430290) добавляли 15 мл лейкоцитарной пленки и разбавляли 15 мл ФСБ (Thermofisher № 14190144) + 2 мМ ЭДТА (Fisher Scientific № BP2482-500) до общего объема 30 мл в каждой пробирке. Разбавленные лейкоцитарные пленки покрывали 14 мл Ficolpaque (GE Healthcare Life Science № 17-544203) и центрифугировали при 2000 об/мин в течение 20 минут при комнатной температуре с выключенным тормозом. Градиентную интерфазу собирали и дважды промывали ФСБ+2 мМ ЭДТА. Выделенные клетки подсчитывали и ресуспендировали в концентрации 2,5-5 × 10⁷ клеток/мл в 10% ДМСО (Sigma-Aldrich № 472301) + 90% инактивированной нагреванием ФБС (ThermoFisher № 16140-071).

[00252] Замороженные РВМС быстро оттаивали и ресуспендировали в среде с добавлением RPMI, которая содержала RPMI+GlutaMax (1x) (ThermoFisher № 61870-036), 10% инактивированный нагреванием ФБС, 1x раствор незаменимых аминокислот MEM (ThermoFisher № 15140-122), 1 мМ пирувата натрия (ThermoFisher № 11360070), 100 Ед/мл Пеницилина/Стрептомицина (ThermoFisher № 15140-122), 1x 2-меркаптоэтанола (ThermoFisher № 21985023), 10 мМ Hepes (ThermoFisher № 15630-080). Выделенные PBMC промывали, подсчитывали и ресуспендировали в концентрации 0,5 × 10⁶ клеток/мл. 1 × 10⁶ клеток на лунку помещали в 24-луночный планшет с плоским дном (Corning № 3526) и стимулировали 0,25 мкг/мл анти-CD3 антитела (клон UCHT1, Biolegend № 300414). Клетки собирали в указанные моменты времени, промывали буфером для FACS, содержащим 1x ФСБ, 2% ФБС и 2 мМ ЭДТА, и переносили в 96-луночный планшет с V-образным дном (Costar № 3894) для окрашивания антител.

[00253] Клетки центрифугировали при 1500 об/мин в течение 3 минут, и супернатант сливали. Клетки ресуспендировали в буфере FACS и инкубировали в течение 1 часа при 4°C с первичными антителами, указанными в Таблице 5, следующим образом:

[00254] Таблица 5

Антитело Клон Компания CD3-A700 SK7 Biolegend № 344822 CD8-FITC RPA-T8 Biolegend № 301006 CD4-PEcy7 RPA-T4 Biolegend № 300511 CD19-PEdazzle HIB19 Biolegend № 302251 NKp46-PE 9E2 Biolegend № 331907 CD11b-BV785 ICRF44 Biolegend № 301345 PD1 -BV421 EH12.1 Biolegend № 565935 CD226-BV711 DX11 BD Biosciences № 564796 CD112R Внутренний Внутренний Fc IgG человека HP6017 Biolegend № 409320

[00255] Клетки дважды промывали и инкубировали в течение 30 минут при 4°C с разведенным 1:100 Alexa 647-конъюгированным антителом к IgG человека (клон HP6017, Biolegend № 409320). Клетки промывали один раз буфером FACS и окрашивали красителем Live/Dead Aqua для определения жизнеспособности, разведенным 1:500 в 1x ФСБ (Thermofisher № L34966) в течение 10 минут при 4°C. Клетки промывали один раз и собирали непосредственно на проточном цитометре X-20 Fortessa (BD Biosciences). Данные анализировали с помощью Flowjo (TreeStar) и Graphpad prism (программное обеспечение Graphpad).

[00256] Результаты представлены на Фиг. 6. Количественное определение связывания антитела к CD112R оценивали по среднему геометрическому значению интенсивности флуоресценции (gMFI) сигнала Alexa Fluor® 647 для указанного типа клеток. Связывание анти-CD112R антитела показано как кратное по сравнению с отрицательным контролем (FON, (gMFI CD112R, деленное на gMFI изотипического контроля)). Эти результаты демонстрируют, что экспрессия CD112R увеличивается в NK-клетках и Т-клетках после активации анти-CD3 антителом.

Пример 8. Анти-CD112R антитела усиливают дегрануляцию NK-клеток в совместных культурах опухолевых клеток.

[00257] Чтобы определить влияние анти-CD112R антитела на дегрануляцию, опосредованную NK-клетками, NK-клетки человека культивировали совместно с клетками-мишенями Raji (линия клеток лимфомы Беркитта, ATCC № CCL-86), которые ранее были трансдуцированы лентивирусом для экспрессии CD112 (Origene, № RC213693L2), в присутствии антител 35, 38, 44 и изотипического контроля.

[00258] Вкратце, NK-клетки выделяли и объединяли из PBMC трех здоровых доноров посредством отрицательной селекции (набор для выделения NK-клеток Easysep™, Stemcell № 17955) и культивировали в течение 16 часов в среде DMEM+10% ФБС+1% пенициллин-стрептомицин (D10) (ThermoFisher). После инкубации в течение ночи при 37°C NK-клетки промывали и ресуспендировали в D10. Клетки Raji.CD112 собирали, промывали и затем ресуспендировали в D10. 1 × 10⁵ NK-клеток и 5 × 10⁴ клеток Raji.CD112 добавляли в каждую лунку 96-луночного планшета с плоским дном для соотношения эффекторных клеток-мишеней 2:1. Анти-CD112R антитела и контрольное антитело изотипа IgG1 разводили в D10 и добавляли в каждую лунку при начальной концентрации 10 мкг/мл при 10-кратных серийных разведениях. Каждое условие выполнялось в двух экземплярах. Анти-CD107a антитело, конъюгированное с PE (Biolegend, № 328608), и монензин (Biolegend, № 420701) также добавляли в каждую лунку в концентрациях, указанных производителем. Конечный объем каждой лунки составлял 200 мкл. Затем планшеты инкубировали в течение 4 часов при 37°C. Через 4 часа анти-CD3 антитело, конъюгированное с FITC (Biolegend, № 300306), и анти-NKp46 антитело, конъюгированное с APC (Biolegend № 331914), разводили в D10 и добавляли по 50 мкл в каждую лунку. Затем планшеты инкубировали еще 30 минут при 4°C для окрашивания. Затем клетки переносили в планшеты с V-образным дном, дважды промывали и ресуспендировали в ФСБ+2% ФБС. Данные были получены с использованием проточного цитометра LSRFortessa X-20 (BD Biosciences) и проанализированы с помощью программного обеспечения FlowJo (Tree Star). Дегрануляцию NK определяли как частоту встречаемости клеток Cd107a⁺в лимфоцитарных воротах CD3^- NKp46^+.

[00259] Результаты представлены на Фиг. 7. Обработка NK-клеток анти-CD112R антителами, описанная в данном документе, привела к усилению дегрануляции NK, как измерено с помощью окрашивания CD107a, по сравнению с изотипическим контролем.

Пример 9. Анти-CD112R антитела повышают активацию NK-клеток в совместных культурах опухолевых клеток PBMC.

[00260] Чтобы оценить влияние антител к CD112R на активацию NK-клеток, несколько антител оценивали в совместных культурах опухолевых клеток РВМС. Повышенная регуляция CD137 (4-1BB), который ранее был установлен как маркер активации NK-клеток (Baessler et al. (2010) Blood 115 (15); André et al. (2018) Cell 175, 1731-1743), измеряли на NK-клетках из PBMC, совместно культивируемых с клетками-мишенями K562 (линия клеток хронического миелогенного лейкоза, ATCC № CCL-243) с анти-CD112R антителами или изотипическими контрольными антителами.

[00261] Вкратце, замороженные PBMC, выделенные из лейкоцитов здоровых доноров, размораживали, промывали, ресуспендировали в DMEM+10% ФБС+1% пенициллин-стрептомицин (D10) и высевали в 96-луночные планшеты с плоским дном в концентрации 5×10⁵ клеток на лунку и выдерживали 4 часа при 37°C перед добавлением клеток-мишеней и антител. Затем в первом эксперименте (Фиг. 8A-8B) антитела к CD112R и контрольное антитело изотипа IgG1 разводили в D10 и добавляли в каждую лунку в начальной концентрации 10 мкг/мл при 10-кратных серийных разведениях. В следующем эксперименте (Фиг. 8C-8D) в каждую лунку добавляли одну концентрацию (1 мкг/мл) анти-CD112R антитела или контрольного антитела изотипа IgG1. Для обоих экспериментов каждое условие выполнялось в двух повторностях. Затем клетки K562 собирали, промывали и ресуспендировали в D10 и добавляли в каждую лунку в концентрации 5 × 10⁴ клеток на лунку. Конечный объем каждой лунки составлял 200 мкл. Затем планшеты инкубировали в течение 16 часов при 37°C. Через 16 часов клетки переносили на планшеты с V-образным дном и дважды промывали ФСБ+2% ФБС. Клетки окрашивали анти-CD3 антителом, конъюгированным с FITC (Biolegend, № 300306), анти-NKp46 антителом, конъюгированным с BV421 (Biolegend № 331914) и анти-CD137 антителом, конъюгированным с APC (Biolegend, № 309810) в ФСБ+2% ФБС в течение 30 минут при 4°C. Затем клетки дважды промывали и ресуспендировали в ФСБ+2% FBS. Данные были получены с использованием проточного цитометра LSRFortessa X-20 (BD Biosciences) и проанализированы с помощью программного обеспечения FlowJo (Tree Star). Активация NK-клеток определялась как частота встречаемости CD137+ клеток в лимфоцитарных воротах CD3-NKp46+.

[00262] Результаты от двух отдельных доноров из двух независимых экспериментов представлены на Фиг. 8A-8D. Добавление анти-CD112R антитела к совместным культурам клеток PBMC-K562 привело к значительной активации NK-клеток по сравнению с изотипическим контролем, как измерено с помощью активации CD137 на NK-клетках.

Пример 10. Анти-CD112R антитело снижает рост опухоли в модели CT-26.

[00263] Эффективность блокады CD112R in vivo оценивали на мышиной сингенной модели опухоли аденокарциномы толстой кишки CT26.WT. Самкам мышей BALB/cAnNTac в возрасте 7 недель (Taconic Biosciences, кат. № BALB-F) подкожно имплантировали в правый бок 0,2×10⁶ CT26.WT (ATCC, кат. № CRL-2638) в 0,1 мл бессывороточной среды с 50% Geltrex (GIBCO, кат. № A1432-02) и 50% RPMI-1640 (GIBCO, кат. № A10491-01). Мышей с пальпируемыми опухолями рандомизировали на 4-й день после имплантации и лечили внутрибрюшинно два раза в неделю в течение трех недель, начиная со дня рандомизации, как показано в Таблице 6.

[00264] Таблица 6:

Группа Лечение Доза (мкг/мышь) Изотипический контроль Изотипический контроль IgG2a мыши 500 Антитело 46 IgG2a мыши к CD112R 500

[00265] Объемы опухолей измеряли штангенциркулем каждые 2-3 дня, пока опухоли не достигли предельного размера в соответствии с IACUC (<2000 мм ³). Объем опухоли (мм³) рассчитывали следующим образом: ширина (мм) x [длина (мм)] 2×0,5.

[00266] Результаты представлены на Фиг. 9. На графике представлены объединенные данные трех независимых экспериментов, показывающие средние объемы опухолей для каждой группы лечения в зависимости от времени. Эти результаты демонстрируют, что лечение мышей с опухолью антителом к CD112R приводило к значительному ингибированию роста опухоли, измеренному на 24 день после инокуляции.

Пример 11. Блокада CD112R приводит к противоопухолевому иммунитету у мышей с полным отторжением опухоли в модели CT26.

[00267] Противоопухолевый иммунитет оценивали у мышей, которых лечили анти-CD112R антителом, и которые демонстрировали полные ответы на первичные заражения опухолью CT26.WT. Для первичного заражения самкам мышей BALB/cAnNTac в возрасте 7 недель (Taconic Biosciences, кат. № BALB-F) подкожно имплантировали в правый бок 0,2×10⁶ CT26.WT (ATCC, кат. № CRL-2638) в 0,1 мл бессывороточной среды с 50% Geltrex (GIBCO, кат. № A1432-02) и 50% RPMI-1640 (GIBCO, кат. № A10491-01). Мышей с пальпируемыми опухолями рандомизировали на 4-й день после имплантации и лечили внутрибрюшинно два раза в неделю в течение трех недель, начиная со дня рандомизации, как показано в Таблице 7.

[00268] Таблица 7:

Группа Лечение Доза (мкг/мышь) Изотипический контроль Изотипический контроль IgG2a мыши 500 Антитело 46 IgG2a мыши к CD112R 500

[00269] Объемы опухолей измеряли штангенциркулем каждые 2-3 дня, пока опухоли не достигли предельного размера в соответствии с IACUC (<2000 мм ³). Объем опухоли (мм³) рассчитывали следующим образом: ширина (мм) x [длина (мм)] 2×0,5.

[00270] Все выжившие мыши на 50-й день после имплантации, у которых отсутствовали какие-либо заметные опухоли, считались выжившими/с полным клиническим ответом. Мышей с полным ответом (n=8) из группы, получавшей анти-CD112R антитело, повторно заражали путем инокуляции в левый бок 1 × 10⁶ клеток CT26.WT (ATCC, кат. № CRL-2638) в 0,1 мл бессывороточной среды с 50% Geltrex (GIBCO, кат. № A1432-02) и 50% RPMI-1640 (GIBCO, кат. № A10491-01), что в пять раз превышает дозу первичной инокуляции. В качестве контроля равным по возрасту наивным самкам мышей Balb/c (n=5) также аналогичным образом инокулировали в левый бок 1×10⁶ клеток CT26.WT в 0,1 мл бессывороточной среды с 50% Geltrex и 50% RPMI-1640. Мыши не получали дальнейшего лечения. Объемы опухолей измеряли каждые 2-3 дня, пока опухоли не достигли предельного размера в соответствии с IACUC (<2000 мм ³). Объем опухоли (мм3) рассчитывали следующим образом: ширина (мм) x [длина (мм)] 2×0,5.

[00271] Результаты представлены на Фиг. 10A-10B. На Фиг. 10А представлены объединенные данные 3 независимых экспериментов, показывающие частоту выживания мышей, которым имплантированы первичные опухоли CT26, которых лечили анти-CD112R антителом. На Фиг. 11В показаны средние объемы опухолей у группы лечения анти-CD112R антителом с полным клиническим ответом после повторного заражения опухолью и у наивных мышей, подвергнутых стимуляции контролем, в зависимости от времени. Статистический анализ выполняли с помощью теста Мантела-Кокса на 50-й день после имплантации (Фиг. 10A) и теста Манна-Уитни на 15-й день после имплантации (Фиг. 10B). Эти результаты демонстрируют, что мыши, которых лечили анти-CD112R антителом, проявляли полные клинические ответы после заражения первичной опухолью и последующее быстрое отторжение при повторном заражении опухолью у этих мышей также демонстрирует, что лечение анти-CD112R антителом приводит к развитию иммунологической памяти и защитного иммунитета.

Пример 12. И NK-клетки, и CD8-Т-клетки вносят вклад в терапевтическую активность анти-CD112R антитела при заражении опухолью CT26.

[00272] Эффективность блокады CD112R in vivo оценивали на мышиной сингенной модели опухоли CT26 после истощения популяции NK-клеток или CD8 T-клеток. Для истощения популяции NК и CD8 Т-клетки мышей обрабатывали дважды в неделю в течение трех недель, начиная с рандомизации, антителом Asialo-GM1 («asGM1» на Фиг. 11; Biolegend; кат. № 146002; доза 100 мкл/мышь; внутрибрюшинно) и анти-CD8a антителом (Bioxcell; кат. № BE0085; 200 мкг/мышь; внутрибрюшинно), соответственно.

[00273] Самкам мышей BALB/cAnNTac в возрасте 7 недель (Taconic Biosciences, кат. № BALB-F) подкожно имплантировали в правый бок 0,2 x10⁶ CT26.WT (ATCC, кат. № CRL-2638) в 0,1 мл бессывороточной среды с 50% Geltrex (GIBCO, кат. № A1432-02) и 50% RPMI-1640 (GIBCO, кат. № A10491-01). Мышей с пальпируемыми опухолями рандомизировали на 4-й день после имплантации и лечили внутрибрюшинно два раза в неделю в течение трех недель, начиная со дня рандомизации, с помощью антитела 46 (IgG2a мыши к CD112R; 12,5 мг/кг; внутрибрюшинно).

[00274] Объемы опухолей измеряли штангенциркулем каждые 2-3 дня, пока опухоли не достигли предельного размера в соответствии с IACUC (<2000 мм³). Объем опухоли (мм³) рассчитывали следующим образом: ширина (мм) x [длина (мм)] ²×0,5.

[00275] Результаты представлены на Фиг. 11. На графике показаны средние объемы опухолей для каждой группы лечения в зависимости от времени. Эти результаты показывают, что терапевтический эффект анти-CD112R антитела значительно снижается после истощения популяции NK-клеток или CD8 T-клеток. Эти результаты показывают, что как CD8 Т-клетки, так и NK-клетки необходимы для эффективного ингибирования роста опухоли, опосредованного анти-CD112R антителом.

Пример 13. Блокада CD112R активирует опухолевые NK-клетки in vivo.

[00276] Оценка ex vivo маркеров активации NK после введения дозы монотерапии анти-CD112R антитела.

[00277] Чтобы определить влияние анти-CD112R антитела на активацию NK-клеток in vivo, самкам мышей BALB/cAnNTac в возрасте 7 недель (Taconic Biosciences, кат. № BALB-F) имплантировали подкожно в правый бок 0,2×10⁶ CT26.WT (ATCC, кат. № CRL-2638) в 0,1 мл 50% Geltrex (GIBCO, кат. № A1432-02). Мышей с пальпируемыми опухолями рандомизировали на 4-й день после имплантации и им вводили 500 мкг либо антитела изотипического контроля (клон C1.18.4, BioXcell,кат. № 0085), либо антитела 46 (IgG2a мыши к CD112R). Обоим группам также совместно вводили 500 мкг изотипического контроля (клон MOPC-21, Bioxcell, кат № 0083). Терапии готовили в стерильном 1x ФСБ (GIBCO, кат. № 14190-136), и общий объем 100 мкл вводили внутрибрюшинно.

[00278] Обработка опухолей: мышей умерщвляли и опухоли резецировали через 24 часа после обработки. Опухоль была переработана в суспензии единичных клеток путем разрушения ткани через фильтр с размером ячеек 440 микрон (Costar № 3480), помещенный в центрифужную пробирку объемом 50 мл (Falcon № 352350), с использованием грубого конца поршня шприца объемом 3 мл (BD 301077) в буфере FACS (1x ФСБ, 2% термоинактивированный ФБС, GIBCO, кат. № 16140-071; 2 мМ ЭДТА, Fisher Bioreagents, кат. № BP2482-500). Вытесненные опухоли еще раз фильтровали через сетчатый фильтр размером 70 микрон (Falcon, кат. № 352350), а оставшуюся ткань дополнительно разрушали с помощью поршня шприца объемом 3 мл. Клетки центрифугировали при 800 g в течение 10 минут. Осадки клеток ресуспендировали в буфере FACS.

[00279] Повторная стимуляция ex vivo: Примерно половину суспензии единичных клеток переносили в 96-луночные планшеты из полипропилена с U-образным дном глубиной 2 мл (Thermofisher № AB-0932) и центрифугировали при 1000 g в течение 5 минут при 4°C. Клетки ресуспендировали в предварительно нагретой среде 1x RPMI+Glutamax (GIBCO № 61870-035) с 10% инактивированной нагреванием ФБС, содержащей 20 нг/мл PMA (Abcam № ab120297), 500 нг/мл соли иономицина Ca²⁺ (Abcam № ab120116 ), 5 мкг/мл брефельдина А (Biolegend № 420601) и 2 мкМ монензина (Biolegend № 420701). Клетки инкубировали течение 3,5 часов при 37°C, 5% CO₂. Клетки снова центрифугировали, как описано выше.

[00280] Окрашивание поверхностного антигена антителом для FACS: Осадки клеток один раз промывали 500 мкл холодного буфера FACS. Клетки ресуспендировали в 100 мкл буфера FACS с TruStain fcX™ (антитело к CD16/32 мыши, при разведении, указанном в Таблице 8. Клетки инкубировали на льду в течение 15 минут. Готовили коктейль из антител к поверхностным антигенам (подробности см. в Таблице 8) и добавляли непосредственно к предварительно заблокированным клеткам. Клетки инкубировали 1 час на льду. Затем клетки дважды промывали 500 мкл буфера FACS.

[00281] Окрашивание красителями в отношении жизнеспособности: клетки окрашивали красителем для оценки жизнеспособности Live/Dead Aqua, разведенным 1:500 в 1x ФСБ (Thermofisher № L34966) в течение 10 минут при 4°C.

[00282] Фиксация: клетки промывали один раз и фиксировали 200 мкл буфера для фиксации/пермеабилизации eBioscience Foxp3 (Thermofisher № 00-5523-00, используя протокол производителя для рекомендаций по разведению) в течение ночи при 4°C.

[00283] Окрашивание внутриклеточного антигена антителом для FACS: Клетки были пермеабилизированы путем добавления непосредственно 200 мкл 1х буфера для пермеабилизации eBioscience (см. протокол производителя для рекомендаций по разведению). Клетки центрифугировали при 1000 g в течение 5 минут и окрашивали внутриклеточной панелью антител при конечном разведении в 1x буфере для пермеабилизации eBioscience. Клетки инкубировали в течение 1 часа при комнатной температуре. Клетки дважды промывали 500 мкл буфера для пермеабилизации, ресуспендировали в 150 мкл буфера FACS.

[00284] Клетки собирали на проточном цитометре X-20 Fortessa (BD Biosciences). Данные анализировали с помощью Flowjo (FlowJo, LLC) и Graphpad prism (программное обеспечение Graphpad).

[00285] Таблица 8: Антитела, используемые на Фиг. 12 A-B.

Флуорофор Антитело Клон Компания № в каталоге Разведение Тип окрашивания Нет данных FcBlock 93 Biolegend 101320 1:100 Блок Fc Alexa700 CD45 I3/2,3 Biolegend 147716 1:100 Поверхностное PEDazzle NKp46 29A1.4 Biolegend 137630 1:100 Поверхностное APC/
Fire™ TCRbeta H57-597 Biolegend 109246 1:100 Поверхностное BV785 CD69 H1.2F3 Biolegend 101243 1:100 Поверхностное BV510 Live/
Dead Thermofisher L34966 1:500 На жизнеспособность APC Gzmb NGZB Thermofisher 17-8898-82 1:100 Внутриклеточное

[00286] Результаты представлены на Фиг. 12A-B. На Фиг. 12А показана частота инфильтрирующих опухоль NK-клеток, экспрессирующих CD69. На Фиг. 12В показана частота инфильтрующих опухоль NK-клеток, экспрессирующих гранзим В, после рестимуляции ex vivo. NK-клетки гейтировали следующим образом: популяции CD45⁺, CD45⁺ SSC-A^Low, живых, синглетных, NKp46⁺ TCRb^-. Положительный гейт был установлен на основе отрицательного контроля флуоресценции минус один (FMO). P-значение было получено с использованием непарного t-критерия (*, p <0,05; **, p <0,01, ***, p <0,001). Эти результаты демонстрируют, что блокада CD112R значительно увеличивает экспрессию маркера ранней активации CD69 и белка протеазосодержащей вакуоли, гранзима В, во внутриопухолевых NK-клетках в модели опухоли CT-26.

Пример 14. Комбинация анти-CD112R и анти-PD1 антител оказывает терапевтический эффект и увеличивает выживаемость без опухолей на модели опухоли CT-26 мыши.

[00287] Эффективность комбинированной блокады CD112R и PD-1 in vivo

[00288] Эффективность блокады CD112R и PD-1 в качестве монотерапии и в качестве комбинированной терапии была протестирована на сингенной модели опухоли аденокарциномы толстой кишки CT-26. Самкам мышей BALB/cAnNTac в возрасте 6 недель (Taconic Biosciences, Balb-F) подкожно имплантировали в правый бок 0,2×10⁶ CT26.WT (ATCC, кат. № CRL-2638) в 0,1 мл бессывороточной среды с 50% Geltrex (GIBCO, кат. № A1432-02) и 50% RPMI-1640 (GIBCO, кат. № A10491-01). Мышей рандомизировали на группы по 10 мышей в каждой со средним объемом опухоли 90 мм³ с использованием метода рандомизации парного распределения. Мышей обрабатывали дважды в неделю в течение двух недель путем внутрибрюшинной инъекции, как показано в Таблице 9. Подробные сведения о средствах лечения включены в Таблицу 10.

[00289] Таблица 9: Подробности для группы лечения

Группа Лечение 1 Лечение 2 Антитело Доза (мг/кг) Антитело Доза (мг/кг) Изотип Изотип 1 12,5 Изотип 2 10 CD112R Анти-CD112R 12,5 Изотип 2 10 PD-1 Изотип 1 12,5 Анти-PD-1 10 CD112R+PD-1 Анти-CD112R 12,5 Анти-PD-1 10

[00290] Таблица 10: Сведения об антителах

Группа Клон Изотип 1 Клон C1.18.4 изотипического контроля, IgG2a мыши Изотип 2 Клон 2A3 изотипического контроля, IgG2a крысы Анти-CD112R Антитело 46, IgG2a мыши Анти-PD-1 RMP1-14, IgG2a крысы

[00291] Объемы опухолей измеряли дважды в неделю до тех пор, пока опухоли не достигли предельного размера в соответствии с IACUC (<2000 мм3). Объем опухоли (мм3) рассчитывали следующим образом: ширина (мм) x [длина (мм)] 2×0,52.

[00292] Результаты представлены на Фиг. 13A-F. На Фиг. 13A-E показаны измерения среднего и индивидуального объема опухоли, соответственно, для каждой группы лечения в зависимости от времени. Результаты, показанные на Фиг. 13A, демонстрируют, что комбинация анти-CD112R с анти-PD-1 антител была эффективной и статистически значимой (при измерении на 21 день с помощью непарного t-критерия) в отношении снижения роста опухоли по сравнению с животными, которым вводили изотипический контроль. Монотерапия анти-CD112R или анти-PD-1 антителами также продемонстрировала активность в снижении роста опухоли. На Фиг. 13F показана общая выживаемость без опухолей на 50-й день после имплантации, показанная как доля выживших без опухолей на группу после лечения, как описано выше. Эти результаты демонстрируют, что комбинация анти-CD112R антитела с анти-PD-1 антителом обеспечивает более высокую выживаемость без опухолей, чем изотипический контроль или монотерапевтический агент.

Пример 15. Связывание анти-CD112R антител с клетками, экспрессирующими мышиный CD112R

[00293] Способность анти-CD112R антител связываться с CD112R мыши оценивали на клетках, сверхэкспрессирующих CD112R мыши. 0,8 × 10⁵ клеток 293T (ATCC CRL-3216), которые были сконструированы для сверхэкспрессии мышиного CD112R (293T.mCD112R), добавляли в каждую лунку 96-луночного планшета с V-образным дном и окрашивали либо анти-CD112R антителами, либо изотипическим контролем IgG1 при начальной концентрации 10 мкг/мл, в 3-кратных серийных разведениях в течение 30 минут при 4°C. Клетки дважды промывали ФСБ+ 2% ФБС и ресуспендировали с антителом к Fc IgG человека, конъюгированным с Alexa Fluor® 647 (Biolegend, № по каталогу 409320) , разведенным 1:100 в ФБС+2% ФБС, и инкубировали при 4°C в течение 20 минут. Затем клетки дважды промывали и ресуспендировали в ФСБ+2% ФБС. Клеточные данные были получены с использованием LSRFortessa X-20 (BD Biosciences) и проанализированы с помощью программного обеспечения FlowJo (Tree Star).

[00294] Результаты представлены на Фиг. 17 и в Таблице 11. Количественное связывание антител с клетками 293T.mCD112R оценивали по среднему геометрическому значению интенсивности флуоресценции (gMFI) сигнала Alexa Fluor® 647. Эти результаты демонстрируют, что несколько анти-CD112R антител связываются с клетками, экспрессирующими CD112R мыши.

Пример 16. Связывание анти-CD112R антител с растворимым мышиным CD112R

[00295] Способность анти-CD112R антител связываться с растворимым CD112R мыши оценивали с помощью ИФА. Вкратце, 96-луночные планшеты Nunc Maxisorp покрывали 1 мкг/мл анти-CD112R антител или изотипического контроля (Biolegend, кат. № 403502) в ФСБ в течение ночи при 4°C. Затем планшеты промывали 6 раз ФСБ+0,01% Tween-20 (ФБСТ) и затем блокировали 200 мкл ФСБ+1% БСА в течение 1,5 часов при комнатной температуре. После блокирования планшеты промывали 6 раз ФСБТ. Затем добавляли 100 мкл слитого белка CD112R-hIgG4 мыши в ФСБ+1% БСА до конечной исходной концентрации 10 мкг/мл с 4-кратными серийными разведениями. Планшеты инкубировали при комнатной температуре 1,5 часа. Следующие планшеты промывали 6 раз ФСБТ, а затем инкубировали с анти-IgG4 HRP антителом (Thermo Fisher, кат. № MA1-33437) в 100 мкл в течение 1 часа при комнатной температуре. Планшеты промывали 6 раз ФСБТ и проявляли субстратом TMB (Life Technologies, № по каталогу 002023). Реакцию останавливали равным объемом стоп-реагента (Life Technologies, № по каталогу SS04). Поглощение при 450 нм(ОП 450) измеряли на планшет-ридере SpectraMax.

[00296] Результаты представлены на Фиг. 18 и в Таблице 11. Эти результаты демонстрируют, что анти-CD112R антитела связываются с растворимым CD112R мыши.

Пример 17. Ингибирование или блокирование связывания мышиного CD112R с CD112

[00297] Способность видов анти-CD112R антител с перекрестной реактивностью блокировать связывание CD112R мыши с CD112 мыши оценивали с помощью ИФА. Вкратце, 96-луночные планшеты Nunc Maxisorp покрывали 1 мкг/мл CD112 мыши (Sino Biological, № по каталогу 50318-M08H) в ФСБ в течение ночи при 4°C. Затем планшеты промывали 6 раз ФСБ+0,01% Tween-20 (ФБСТ) и затем блокировали 200 мкл ФСБ+1% БСА в течение 1,5 часов при комнатной температуре. После блокирования планшеты промывали 6 раз ФСБТ. Затем добавляли 50 мкл анти-CD112R антител или изотипического контроля (Biolegend, № по каталогу 403502) в ФСБ+1% БСА до конечной начальной концентрации 40 мкг/мл с 2-кратными серийными разведениями. 50 мкл слитого белка CD112R-hIgG4 мыши также добавляли в каждую лунку до конечной концентрации 2 мкг/мл. Планшеты инкубировали при комнатной температуре 1,5 часа. Следующие планшеты промывали 6 раз ФСБТ, а затем инкубировали с анти-IgG4 HRP антителом (Thermo Fisher, кат. № MA1-33437) в 100 мкл в течение 1 часа при комнатной температуре. Планшеты промывали 6 раз ФСБТ и проявляли субстратом TMB (Life Technologies, № по каталогу 002023). Реакцию останавливали равным объемом стоп-реагента (Life Technologies, № по каталогу SS04). Поглощение при 450 нм(ОП 450) измеряли на планшет-ридере SpectraMax.

[00298] Результаты представлены на Фиг. 19 и в Таблице 11. Эти результаты демонстрируют, что анти-CD112R антитела ингибируют связывание CD112R мыши с CD112 мыши в различной степени. Процент ингибирования рассчитывали как [100 - ((ОП тестового образца 450/Макс. ОП 450)*100%)] Макс. ОП 450 определяли как поглощение при 450 нм в отсутствие антитела.

[00299] Как показано в Таблице 11 и на Фиг.17-19, антитела 32, 33, 34, 35 и 36 способны блокировать взаимодействие CD112 человека с CD112R человека, но согласно определению блокирования, описанному в данном документе, не способны блокировать связывающее взаимодействие между CD112R мыши и CD112 мыши. См., например, последние два столбца Таблицы 11 для антител 32, 33, 34, 35 и 36, показывающие % ингибирования взаимодействия у мыши на уровне 0, 28,3, 20,3, 24,2 и 41,6, соответственно, по сравнению с % ингибирования взаимодействия у человека на уровне 75,1, 78,8, 80, 81,7 и 86,2, соответственно. Антитела, не принадлежащие к типичному классу антител, родственных антителу 32, не проявляют такого дифференциального блокирования.

[00300] Таблица 11: Сводная информация о связывании и блокировании антител (мыши)

Антитело gMFI CD112R 293T-мыши (кратное увеличение относительно изотипического контроля) EC50 ИФА связывания CD112R мыши (нг/мл) Максимальное ингибирование ИФА блокирования мышиного CD112/CD112R (%) Максимальное ингибирование ИФА блокирования CD112/CD112R человека (%) Антитело А 104,6 34,5 90,3 90,6 Антитело B 133,3 27,4 92,5 88,9 Антитело C 88,1 41,0 90,1 97,8 Антитело 32 14,9 269,5 0,0 75,1 Антитело 33 73,3 38,3 28,3 78,8 Антитело 34 72,2 24,2 20,3 80,0 Антитело 35 55,6 21,5 24,2 81,7 Антитело 36 76,3 25,1 41,6 86,2 Антитело 46 74,8 180,6 88,0 97,6 Антитело 58 79,4 411,7 85,7 97,3

[00301] Хотя вышеизложенное изобретению было описано довольно подробно посредством иллюстрации и примера в целях ясности понимания, описания и примеры не следует истолковывать как ограничивающие объем изобретению. Содержание всей патентной и научной литературы, цитируемой в данном документе, явным образом и в полном объеме включено посредством ссылки.

Таблица последовательностей SEQ ID NO Номер клона Описание Последовательность 1 2 VH CDR1 FTFSEYTMN 2 2 VH CDR2 AIVGSGDSTYYADSVKG 3 2 VH CDR3 AKDYSSGDWIDYGMDV 4 2 VL CDR1 QASQDISNYLN 5 2 VL CDR2 DASNLAT 6 2 VL CDR3 QQFDLLPPT 7 2 VH FR1 EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASG 8 2 VH FR2 WVRQAPGKGLEWVS 9 2 VH FR3 RFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC 10 2 VH FR4 WGQGTTVTVSS 11 2 VH ДНК GAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCCTGGTCAAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCAGTGAATATACCATGAACTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGCTATTGTAGGTAGTGGTGACAGCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCGGTGTACTACTGCGCCAAGGACTACAGCTCCGGAGACTGGATCGATTATGGAATGGACGTATGGGGCCAGGGAACAACTGTCACCGTCTCCTCA 12 2 VH Белка EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSEYTMNWVRQAPGKGLEWVSAIVGSGDSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKDYSSGDWIDYGMDVWGQGTTVTVSS 13 2 VL FR1 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITC 14 2 VL FR2 WYQQKPGKAPKLLIY 15 2 VL FR3 GVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYC 16 2 VL FR4 FGGGTKVEIK 17 2 VL ДНК GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCAGGCGAGTCAGGACATTAGCAACTATTTAAATTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAGCTCCTGATCTACGATGCATCCAATTTGGCAACAGGGGTCCCATCAAGGTTCAGTGGAAGTGGATCTGGGACAGATTTTACTTTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGAAGATATTGCAACATATTACTGTCAGCAGTTCGATCTCCTCCCTCCTACTTTTGGCGGAGGGACCAAGGTTGAGATCAAA 18 2 VL Белка DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQASQDISNYLNWYQQKPGKAPKLLIYDASNLATGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQQFDLLPPTFGGGTKVEIK 19-100: не используются 101 5 VH CDR1 FTFSDYAMI 102 5 VH CDR2 AISGGGESTYYADSVKG 103 5 VH CDR3 AKDYSSGDWIDYGMDV 104 5 VL CDR1 QASQDISNYLN 105 5 VL CDR2 DASNLAT 106 5 VL CDR3 QQFDLLPPT 107 5 VH FR1 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASG 108 5 VH FR2 WVRQAPGKGLEWVS 109 5 VH FR3 RFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC 110 5 VH FR4 WGQGTTVTVSS 111 5 VH ДНК GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAGCGACTATGCCATGATATGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGCTATTAGTGGTGGAGGTGAAAGCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCGGTGTACTACTGCGCCAAGGACTACAGCTCCGGAGACTGGATCGATTATGGAATGGACGTATGGGGCCAGGGAACAACTGTCACCGTCTCCTCA 112 5 VH Белка EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSDYAMIWVRQAPGKGLEWVSAISGGGESTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKDYSSGDWIDYGMDVWGQGTTVTVSS 113 5 VL FR1 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITC 114 5 VL FR2 WYQQKPGKAPKLLIY 115 5 VL FR3 GVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYC 116 5 VL FR4 FGGGTKVEIK 117 5 VL ДНК GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCAGGCGAGTCAGGACATTAGCAACTATTTAAATTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAGCTCCTGATCTACGATGCATCCAATTTGGCAACAGGGGTCCCATCAAGGTTCAGTGGAAGTGGATCTGGGACAGATTTTACTTTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGAAGATATTGCAACATATTACTGTCAGCAGTTCGATCTCCTCCCTCCTACTTTTGGCGGAGGGACCAAGGTTGAGATCAAA 118 5 VL Белка DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQASQDISNYLNWYQQKPGKAPKLLIYDASNLATGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQQFDLLPPTFGGGTKVEIK 119-200: не используются 201 44 VH CDR1 GTFDNYYIS 202 44 VH CDR2 GIFPIFGTANYAQKFQG 203 44 VH CDR3 AREVGHYSGSPYYMDV 204 44 VL CDR1 RASQSINSWLA 205 44 VL CDR2 DASSLES 206 44 VL CDR3 QQVGPYLT 207 44 VH FR1 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASG 208 44 VH FR2 WVRQAPGQGLEWMG 209 44 VH FR3 RVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYC 210 44 VH FR4 WGKGTTVTVSS 211 44 VH ДНК CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGTCCTCGGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGAGGCACCTTCGACAACTATTACATCAGCTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGAGGGATCTTCCCTATCTTCGGTACCGCAAACTACGCACAGAAGTTCCAGGGCAGAGTCACGATTACCGCGGACGAATCCACGAGCACAGCCTACATGGAGCTGAGCAGCCTGAGATCTGAGGACACGGCGGTGTACTACTGCGCCAGAGAAGTCGGACACTACTCCGGCAGCCCATACTACATGGACGTATGGGGCAAGGGTACAACTGTCACCGTCTCCTCA 212 44 VH Белка QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFDNYYISWVRQAPGQGLEWMGGIFPIFGTANYAQKFQGRVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCAREVGHYSGSPYYMDVWGKGTTVTVSS 213 44 VL FR1 DIQMTQSPSTLSASVGDRVTITC 214 44 VL FR2 WYQQKPGKAPKLLIS 215 44 VL FR3 GVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYC 216 44 VL FR4 FGGGTKVEIK 217 44 VL ДНК GACATCCAGATGACCCAGTCTCCTTCCACCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCGGGCCAGTCAGAGTATTAATAGCTGGTTGGCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAGCTCCTGATCTCCGATGCCTCCAGTTTGGAAAGTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGAATTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGATGATTTTGCAACTTATTACTGCCAGCAGGTCGGCCCCTACCTCACTTTTGGCGGAGGGACCAAGGTTGAGATCAAA 218 44 VL Белка DIQMTQSPSTLSASVGDRVTITCRASQSINSWLAWYQQKPGKAPKLLISDASSLESGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCQQVGPYLTFGGGTKVEIK 219-300: не используются 301 58 VH CDR1 FTFGDYAMS 302 58 VH CDR2 FIGSKFYGGETEYTASVKG 303 58 VH CDR3 ARGPRRYTYGMDV 304 58 VL CDR1 RASQSISSYLN 305 58 VL CDR2 AASSLQS 306 58 VL CDR3 QQSSTPLT 307 58 VH FR1 EVQLVESGGGLVQPGRSLRLSCTASG 308 58 VH FR2 WFRQAPGKGLEWVG 309 58 VH FR3 RFTISRDGSKSIAYLQMNSLKTEDTAVYYC 310 58 VH FR4 WGQGTTVTVSS 311 58 VH ДНК GAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCAGGGCGGTCCCTGAGACTCTCCTGTACAGCTTCTGGATTCACCTTTGGTGATTATGCTATGAGCTGGTTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTAGGTTTCATTGGAAGCAAATTCTATGGTGGGGAAACAGAATACACCGCGTCTGTGAAAGGCAGATTCACCATCTCAAGAGATGGTTCCAAAAGCATCGCCTATCTGCAAATGAACAGCCTGAAAACCGAGGACACGGCGGTGTACTACTGCGCCAGAGGACCAAGACGCTACACATACGGAATGGACGTATGGGGCCAGGGAACAACTGTCACCGTCTCCTCA 312 58 VH Белка EVQLVESGGGLVQPGRSLRLSCTASGFTFGDYAMSWFRQAPGKGLEWVGFIGSKFYGGETEYTASVKGRFTISRDGSKSIAYLQMNSLKTEDTAVYYCARGPRRYTYGMDVWGQGTTVTVSS 313 58 VL FR1 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITC 314 58 VL FR2 WYQQKPGKAPKLLIY 315 58 VL FR3 GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYC 316 58 VL FR4 FGGGTKVEIK 317 58 VL ДНК GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCGGGCAAGTCAGAGCATTAGCAGCTATTTAAATTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAGCTCCTGATCTATGCTGCATCCAGTTTGCAAAGTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGTGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAGTCTGCAACCTGAAGATTTTGCAACTTACTACTGTCAGCAAAGCTCCACCCCCCTCACTTTTGGCGGAGGGACCAAGGTTGAGATCAAA 318 58 VL Белка DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQSSTPLTFGGGTKVEIK 319-400: не используются 401 10 VH CDR1 FTFDDYAVH 402 10 VH CDR2 GISWSSGLIGYADSVKG 403 10 VH CDR3 AKGPPTYQDYFDL 404 10 VL CDR1 RASQSVSRYLA 405 10 VL CDR2 DASNRAT 406 10 VL CDR3 QQVSFFPPIT 407 10 VH FR1 EVQLVESGGGLVQPGRSLRLSCAASG 408 10 VH FR2 WVRQAPGKGLEWVS 409 10 VH FR3 RFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYC 410 10 VH FR4 WGRGTLVTVSS 411 10 VH ДНК GAAGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGCAGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTGATGATTATGCCGTGCACTGGGTCCGGCAAGCTCCAGGGAAGGGCCTGGAGTGGGTCTCAGGTATTAGTTGGAGTAGTGGACTAATAGGCTATGCGGACTCTGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAACGCCAAGAACTCCCTGTATCTGCAAATGAACAGTCTGAGAGCTGAGGACACGGCGGTGTACTACTGCGCCAAGGGCCCTCCTACCTACCAAGACTACTTCGACCTATGGGGGAGAGGTACCTTGGTCACCGTCTCCTCA 412 10 VH Белка EVQLVESGGGLVQPGRSLRLSCAASGFTFDDYAVHWVRQAPGKGLEWVSGISWSSGLIGYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKGPPTYQDYFDLWGRGTLVTVSS 413 10 VL FR1 EIVLTQSPATLSLSPGERATLSC 414 10 VL FR2 WYQQKPGQAPRLLIY 415 10 VL FR3 GIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYC 416 10 VL FR4 FGGGTKVEIK 417 10 VL ДНК GAAATTGTGTTGACACAGTCTCCAGCCACCCTGTCTTTGTCTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCCTGCAGGGCCAGTCAGAGTGTTAGCAGGTACTTAGCCTGGTACCAACAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATGATGCATCCAACAGGGCCACTGGCATCCCAGCCAGGTTCAGTGGCAGTGGGTCTGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTAGAGCCTGAAGATTTTGCAGTTTATTACTGTCAGCAGGTCAGTTTCTTCCCTCCTATCACTTTTGGCGGAGGGACCAAGGTTGAGATCAAA 418 10 VL Белка EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVSRYLAWYQQKPGQAPRLLIYDASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQVSFFPPITFGGGTKVEIK 419-500: не используются 501 38 VH CDR1 FTFSGHLMS 502 38 VH CDR2 AISGSAGETYYADSVKG 503 38 VH CDR3 ARDAYYDDWSGWADWYFDL 504 38 VL CDR1 RASQSVSRYLA 505 38 VL CDR2 DASNRAT 506 38 VL CDR3 QQVSLLPPT 507 38 VH FR1 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASG 508 38 VH FR2 WVRQAPGKGLEWVS 509 38 VH FR3 RFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC 510 38 VH FR4 WGRGTLVTVSS 511 38 VH ДНК GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAGCGGACACCTAATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGCTATTAGTGGATCCGCAGGTGAAACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCGGTGTACTACTGCGCCAGAGATGCGTACTACGACGACTGGAGCGGATGGGCCGATTGGTACTTCGATTTATGGGGGAGAGGTACCTTGGTCACCGTCTCCTCA 512 38 VH Белка EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSGHLMSWVRQAPGKGLEWVSAISGSAGETYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARDAYYDDWSGWADWYFDLWGRGTLVTVSS 513 38 VL FR1 EIVLTQSPATLSLSPGERATLSC 514 38 VL FR2 WYQQKPGQAPRLLIY 515 38 VL FR3 GIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYC 516 38 VL FR4 FGGGTKVEIK 517 38 VL ДНК GAAATTGTGTTGACACAGTCTCCAGCCACCCTGTCTTTGTCTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCCTGCAGGGCCAGTCAGAGTGTTAGCAGGTACTTAGCCTGGTACCAACAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATGATGCATCCAACAGGGCCACTGGCATCCCAGCCAGGTTCAGTGGCAGTGGGTCTGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTAGAGCCTGAAGATTTTGCAGTTTATTACTGTCAGCAGGTCAGTCTCCTCCCTCCTACTTTTGGCGGAGGGACCAAGGTTGAGATCAAA 518 38 VL Белка EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVSRYLAWYQQKPGQAPRLLIYDASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQVSLLPPTFGGGTKVEIK 519-600: не используются 601 15 VH CDR1 FTFGDVAMS 602 15 VH CDR2 YIGSKAYGGETEYTASVKG 603 15 VH CDR3 ARAGHSYGSIASNWFDP 604 15 VL CDR1 RASQSISSYLN 605 15 VL CDR2 GASSLQS 606 15 VL CDR3 QQGFYTPWT 607 15 VH FR1 EVQLVESGGGLVQPGRSLRLSCTASG 608 15 VH FR2 WFRQAPGKGLEWVG 609 15 VH FR3 RFTISRDGSKSIAYLQMNSLKTEDTAVYYC 610 15 VH FR4 WGQGTLVTVSS 611 15 VH ДНК GAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCAGGGCGGTCCCTGAGACTCTCCTGTACAGCTTCTGGATTCACCTTTGGTGATGTCGCTATGTCCTGGTTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTAGGTTACATTGGAAGCAAAGCTTATGGTGGGGAAACAGAATACACCGCGTCTGTGAAAGGCAGATTCACCATCTCAAGAGATGGTTCCAAAAGCATCGCCTATCTGCAAATGAACAGCCTGAAAACCGAGGACACGGCGGTGTACTACTGCGCCAGAGCTGGACACAGCTACGGATCCATCGCCAGCAACTGGTTCGACCCATGGGGACAGGGTACATTGGTCACCGTCTCCTCA 612 15 VH Белка EVQLVESGGGLVQPGRSLRLSCTASGFTFGDVAMSWFRQAPGKGLEWVGYIGSKAYGGETEYTASVKGRFTISRDGSKSIAYLQMNSLKTEDTAVYYCARAGHSYGSIASNWFDPWGQGTLVTVSS 613 15 VL FR1 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITC 614 15 VL FR2 WYQQKPGKAPKLLIY 615 15 VL FR3 GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYC 616 15 VL FR4 FGGGTKVEIK 617 15 VL ДНК GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCGGGCAAGTCAGAGCATTAGCAGCTATTTAAATTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAGCTCCTGATCTATGGTGCATCCAGTTTGCAAAGTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGTGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAGTCTGCAACCTGAAGATTTTGCAACTTACTACTGTCAGCAAGGATTCTACACTCCTTGGACTTTTGGCGGAGGGACCAAGGTTGAGATCAAA 618 15 VL Белка DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYGASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQGFYTPWTFGGGTKVEIK 619-700: не используются 701 35 VH CDR1 GTFSSAAIS 702 35 VH CDR2 NIIPIVGIANYAQKFQG 703 35 VH CDR3 ARDTGRGYTRHFWFDP 704 35 VL CDR1 RASQSISSYLN 705 35 VL CDR2 AASSLQS 706 35 VL CDR3 QQSDILYT 707 35 VH FR1 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASG 708 35 VH FR2 WVRQAPGQGLEWMG 709 35 VH FR3 RVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYC 710 35 VH FR4 WGQGTLVTVSS 711 35 VH ДНК CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGTCCTCGGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGAGGCACCTTCAGCTCCGCCGCTATCAGCTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGAAACATCATCCCTATCGTAGGTATAGCAAACTACGCACAGAAGTTCCAGGGCAGAGTCACGATTACCGCGGACGAATCCACGAGCACAGCCTACATGGAGCTGAGCAGCCTGAGATCTGAGGACACGGCGGTGTACTACTGCGCCAGAGACACGGGACGGGGATACACCAGACACTTCTGGTTTGACCCCTGGGGACAGGGTACATTGGTCACCGTCTCCTCA 712 35 VH Белка QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSAAISWVRQAPGQGLEWMGNIIPIVGIANYAQKFQGRVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARDTGRGYTRHFWFDPWGQGTLVTVSS 713 35 VL FR1 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITC 714 35 VL FR2 WYQQKPGKAPKLLIY 715 35 VL FR3 GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYC 716 35 VL FR4 FGGGTKVEIK 717 35 VL ДНК GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCGGGCAAGTCAGAGCATTAGCAGCTATTTAAATTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAGCTCCTGATCTATGCTGCATCCAGTTTGCAAAGTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGTGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAGTCTGCAACCTGAAGATTTTGCAACTTACTACTGTCAGCAAAGCGACATCCTCTACACTTTTGGCGGAGGGACCAAGGTTGAGATCAAA 718 35 VL Белка DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQSDILYTFGGGTKVEIK 719-800: не используются 801 47 VH CDR1 GTFSNYAIS 802 47 VH CDR2 GIIPIFGTANYAQKFQG 803 47 VH CDR3 ARGRGALALVGPYYGMDV 804 47 VL CDR1 RSSQSLLHSNGYNYLD 805 47 VL CDR2 LGSHRAS 806 47 VL CDR3 MQALRAPT 807 47 VH FR1 EVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASG 808 47 VH FR2 WVRQAPGQGLEWMG 809 47 VH FR3 RVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYC 810 47 VH FR4 WGQGTTVTVSS 811 47 VH ДНК GAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGTCCTCGGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGAGGCACCTTCAGCAACTATGCTATCAGCTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGAGGGATCATCCCTATCTTTGGTACAGCAAACTACGCACAGAAGTTCCAGGGCAGAGTCACGATTACCGCGGACGAATCCACGAGCACAGCCTACATGGAGCTGAGCAGCCTGAGATCTGAGGACACGGCGGTGTACTACTGCGCCAGAGGCAGAGGCGCTCTGGCACTCGTCGGACCATACTACGGAATGGACGTATGGGGCCAGGGAACAACTGTCACCGTCTCCTCA 812 47 VH Белка EVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYAISWVRQAPGQGLEWMGGIIPIFGTANYAQKFQGRVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGRGALALVGPYYGMDVWGQGTTVTVSS 813 47 VL FR1 DIVMTQSPLSLPVTPGEPASISC 814 47 VL FR2 WYLQKPGQSPQLLIY 815 47 VL FR3 GVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYC 816 47 VL FR4 FGGGTKVEIK 817 47 VL ДНК GATATTGTGATGACTCAGTCTCCACTCTCCCTGCCCGTCACCCCTGGAGAGCCGGCCTCCATCTCCTGCAGGTCTAGTCAGAGCCTCCTGCATAGTAATGGATACAACTATTTGGATTGGTACCTGCAGAAGCCAGGGCAGTCTCCACAGCTCCTGATCTATTTGGGTTCTCATCGGGCCTCCGGGGTCCCTGACAGGTTCAGTGGCAGTGGATCAGGCACAGATTTTACACTGAAAATCAGCAGAGTGGAGGCTGAGGATGTTGGGGTTTATTACTGCATGCAGGCACTCCGAGCCCCTACTTTTGGCGGAGGGACCAAGGTTGAGATCAAA 818 47 VL Белка DIVMTQSPLSLPVTPGEPASISCRSSQSLLHSNGYNYLDWYLQKPGQSPQLLIYLGSHRASGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCMQALRAPTFGGGTKVEIK 819-900 не используются 901 46 VH CDR1 FTFGDYAMS 902 46 VH CDR2 FIGSKAYGGTTEYTASVKG 903 46 VH CDR3 ARGPRRYTYGMDV 904 46 VL CDR1 RASQSISSYLN 905 46 VL CDR2 AASSLQS 906 46 VL CDR3 QQSSTPLT 907 46 VH FR1 EVQLVESGGGLVQPGRSLRLSCTASG 908 46 VH FR2 WFRQAPGKGLEWVG 909 46 VH FR3 RFTISRDGSKSIAYLQMNSLKTEDTAVYYC 910 46 VH FR4 WGQGTTVTVSS 911 46 VH ДНК GAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCAGGGCGGTCCCTGAGACTCTCCTGTACAGCTTCTGGATTCACCTTTGGTGATTATGCTATGAGCTGGTTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTAGGTTTCATTGGAAGCAAAGCTTATGGTGGGACAACAGAATACACCGCGTCTGTGAAAGGCAGATTCACCATCTCAAGAGATGGTTCCAAAAGCATCGCCTATCTGCAAATGAACAGCCTGAAAACCGAGGACACGGCGGTGTACTACTGCGCCAGAGGACCAAGACGCTACACATACGGAATGGACGTATGGGGCCAGGGAACAACTGTCACCGTCTCCTCA 912 46 VH Белка EVQLVESGGGLVQPGRSLRLSCTASGFTFGDYAMSWFRQAPGKGLEWVGFIGSKAYGGTTEYTASVKGRFTISRDGSKSIAYLQMNSLKTEDTAVYYCARGPRRYTYGMDVWGQGTTVTVSS 913 46 VL FR1 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITC 914 46 VL FR2 WYQQKPGKAPKLLIY 915 46 VL FR3 GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYC 916 46 VL FR4 FGGGTKVEIK 917 46 VL ДНК GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCGGGCAAGTCAGAGCATTAGCAGCTATTTAAATTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAGCTCCTGATCTATGCTGCATCCAGTTTGCAAAGTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGTGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAGTCTGCAACCTGAAGATTTTGCAACTTACTACTGTCAGCAAAGCTCCACCCCCCTCACTTTTGGCGGAGGGACCAAGGTTGAGATCAAA 918 46 VL Белка DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQSSTPLTFGGGTKVEIK 919-1000 не используются 1001 32 VH CDR1 GTFSSYAIS 1002 32 VH CDR2 GIIPISGTANYAQKFQG 1003 32 VH CDR3 ARDTGRGYTRHFWFDP 1004 32 VL CDR1 RASQSISSYLN 1005 32 VL CDR2 AASSLQS 1006 32 VL CDR3 QQSDILYT 1007 32 VH FR1 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASG 1008 32 VH FR2 WVRQAPGQGLEWMG 1009 32 VH FR3 RVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYC 1010 32 VH FR4 WGQGTLVTVSS 1011 32 VH ДНК CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGTCCTCGGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGAGGCACCTTCAGCAGCTATGCTATCAGCTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGAGGGATCATCCCTATCTCTGGTACAGCAAACTACGCACAGAAGTTCCAGGGCAGAGTCACGATTACCGCGGACGAATCCACGAGCACAGCCTACATGGAGCTGAGCAGCCTGAGATCTGAGGACACGGCGGTGTACTACTGCGCCAGAGACACGGGACGGGGATACACCAGACACTTCTGGTTTGACCCCTGGGGACAGGGTACATTGGTCACCGTCTCCTCA 1012 32 VH Белка QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGGIIPISGTANYAQKFQGRVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARDTGRGYTRHFWFDPWGQGTLVTVSS 1013 32 VL FR1 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITC 1014 32 VL FR2 WYQQKPGKAPKLLIY 1015 32 VL FR3 GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYC 1016 32 VL FR4 FGGGTKVEIK 1017 32 VL ДНК GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCGGGCAAGTCAGAGCATTAGCAGCTATTTAAATTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAGCTCCTGATCTATGCTGCATCCAGTTTGCAAAGTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGTGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAGTCTGCAACCTGAAGATTTTGCAACTTACTACTGTCAGCAAAGCGACATCCTCTACACTTTTGGCGGAGGGACCAAGGTTGAGATCAAA 1018 32 VL Белка DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQSDILYTFGGGTKVEIK 1019-2000 не используются 2001 33 VH CDR1 GTFGNYAIS 2002 33 VH CDR2 GIIPIPGIANYAQKFQG 2003 33 VH CDR3 ARDTGRGYTRHFWFDP 2004 33 VL CDR1 RASQSISSYLN 2005 33 VL CDR2 AASSLQS 2006 33 VL CDR3 QQSDILYT 2007 33 VH FR1 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASG 2008 33 VH FR2 WVRQAPGQGLEWMG 2009 33 VH FR3 RVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYC 2010 33 VH FR4 WGQGTLVTVSS 2011 33 VH ДНК CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGTCCTCGGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGAGGCACCTTCGGAAACTATGCTATCAGCTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGAGGGATCATCCCTATCCCAGGTATCGCAAACTACGCACAGAAGTTCCAGGGCAGAGTCACGATTACCGCGGACGAATCCACGAGCACAGCCTACATGGAGCTGAGCAGCCTGAGATCTGAGGACACGGCGGTGTACTACTGCGCCAGAGACACGGGACGGGGATACACCAGACACTTCTGGTTTGACCCCTGGGGACAGGGTACATTGGTCACCGTCTCCTCA 2012 33 VH Белка QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFGNYAISWVRQAPGQGLEWMGGIIPIPGIANYAQKFQGRVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARDTGRGYTRHFWFDPWGQGTLVTVSS 2013 33 VL FR1 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITC 2014 33 VL FR2 WYQQKPGKAPKLLIY 2015 33 VL FR3 GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYC 2016 33 VL FR4 FGGGTKVEIK 2017 33 VL ДНК GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCGGGCAAGTCAGAGCATTAGCAGCTATTTAAATTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAGCTCCTGATCTATGCTGCATCCAGTTTGCAAAGTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGTGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAGTCTGCAACCTGAAGATTTTGCAACTTACTACTGTCAGCAAAGCGACATCCTCTACACTTTTGGCGGAGGGACCAAGGTTGAGATCAAA 2018 33 VL Белка DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQSDILYTFGGGTKVEIK 2019-3000 не используются 3001 34 VH CDR1 GTFSSAAIS 3002 34 VH CDR2 GIFPISGHANYAQKFQG 3003 34 VH CDR3 ARDTGRGYTRHFWFDP 3004 34 VL CDR1 RASQSISSYLN 3005 34 VL CDR2 AASSLQS 3006 34 VL CDR3 QQSDILYT 3007 34 VH FR1 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASG 3008 34 VH FR2 WVRQAPGQGLEWMG 3009 34 VH FR3 RVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYC 3010 34 VH FR4 WGQGTLVTVSS 3011 34 VH ДНК CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGTCCTCGGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGAGGCACCTTCAGCAGCGCCGCTATCAGCTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTCGAGTGGATGGGAGGGATCTTCCCTATCTCCGGTCACGCAAACTACGCACAGAAGTTCCAGGGCAGAGTCACGATTACCGCGGACGAATCCACGAGCACAGCCTACATGGAGCTGAGCAGCCTGAGATCTGAGGACACGGCGGTGTACTACTGCGCCAGAGACACGGGACGGGGATACACCAGACACTTCTGGTTTGACCCCTGGGGACAGGGTACATTGGTCACCGTCTCCTCA 3012 34 VH Белка QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSAAISWVRQAPGQGLEWMGGIFPISGHANYAQKFQGRVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARDTGRGYTRHFWFDPWGQGTLVTVSS 3013 34 VL FR1 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITC 3014 34 VL FR2 WYQQKPGKAPKLLIY 3015 34 VL FR3 GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYC 3016 34 VL FR4 FGGGTKVEIK 3017 34 VL ДНК GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCGGGCAAGTCAGAGCATTAGCAGCTATTTAAATTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAGCTCCTGATCTATGCTGCATCCAGTTTGCAAAGTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGTGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAGTCTGCAACCTGAAGATTTTGCAACTTACTACTGTCAGCAAAGCGACATCCTCTACACTTTTGGCGGAGGGACCAAGGTTGAGATCAAA 3018 34 VL Белка DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQSDILYTFGGGTKVEIK 3019-4000 не используются 4001 36 VH CDR1 GTFATYAIS 4002 36 VH CDR2 GIFPLSGTANYAQKFQG 4003 36 VH CDR3 ARDTGRGYTRHFWFDP 4004 36 VL CDR1 RASQSISSYLN 4005 36 VL CDR2 AASSLQS 4006 36 VL CDR3 QQSDILYT 4007 36 VH FR1 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASG 4008 36 VH FR2 WVRQAPGQGLEWMG 4009 36 VH FR3 RVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYC 4010 36 VH FR4 WGQGTLVTVSS 4011 36 VH ДНК CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGTCCTCGGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGAGGCACCTTCGCAACCTATGCTATCAGCTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGAGGGATCTTCCCTCTCTCCGGTACAGCAAACTACGCACAGAAGTTCCAGGGCAGAGTCACGATTACCGCGGACGAATCCACGAGCACAGCCTACATGGAGCTGAGCAGCCTGAGATCTGAGGACACGGCGGTGTACTACTGCGCCAGAGACACGGGACGGGGATACACCAGACACTTCTGGTTTGACCCCTGGGGACAGGGTACATTGGTCACCGTCTCCTCA 4012 36 VH Белка QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFATYAISWVRQAPGQGLEWMGGIFPLSGTANYAQKFQGRVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARDTGRGYTRHFWFDPWGQGTLVTVSS 4013 36 VL FR1 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITC 4014 36 VL FR2 WYQQKPGKAPKLLIY 4015 36 VL FR3 GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYC 4016 36 VL FR4 FGGGTKVEIK 4017 36 VL ДНК GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCGGGCAAGTCAGAGCATTAGCAGCTATTTAAATTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAGCTCCTGATCTATGCTGCATCCAGTTTGCAAAGTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGTGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAGTCTGCAACCTGAAGATTTTGCAACTTACTACTGTCAGCAAAGCGACATCCTCTACACTTTTGGCGGAGGGACCAAGGTTGAGATCAAA 4018 36 VL Белка DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQSDILYTFGGGTKVEIK

--->

ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ

<110> SURFACE ONCOLOGY, INC.

ADIMAB LLC

<120> КОМПОЗИЦИИ АНТИ-CD112R АНТИТЕЛ И СОПУТСТВУЮЩИЕ СПОСОБЫ

<130> 01219-0001-00PCT

<150> US 62/701 065

<151> 20.07.2018

<150> US 62/844 958

<151> 08.05.2019

<160> 4018

<170> PatentIn версия 3.5

<210> 1

<211> 9

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 2 - VH CDR1

<400> 1

Phe Thr Phe Ser Glu Tyr Thr Met Asn

1 5

<210> 2

<211> 17

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 2 - VH CDR2

<400> 2

Ala Ile Val Gly Ser Gly Asp Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 3

<211> 16

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 2 - VH CDR3

<400> 3

Ala Lys Asp Tyr Ser Ser Gly Asp Trp Ile Asp Tyr Gly Met Asp Val

1 5 10 15

<210> 4

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 2 - VL CDR1

<400> 4

Gln Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr Leu Asn

1 5 10

<210> 5

<211> 7

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 2 - VL CDR2

<400> 5

Asp Ala Ser Asn Leu Ala Thr

1 5

<210> 6

<211> 9

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 2 - VL CDR3

<400> 6

Gln Gln Phe Asp Leu Leu Pro Pro Thr

1 5

<210> 7

<211> 26

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 2 - VH FR1

<400> 7

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly

20 25

<210> 8

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 2 - VH FR2

<400> 8

Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ser

1 5 10

<210> 9

<211> 30

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 2 - VH FR3

<400> 9

Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln

1 5 10 15

Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

20 25 30

<210> 10

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 2 - VH FR4

<400> 10

Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

1 5 10

<210> 11

<211> 369

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 2 - VH ДНК

<400> 11

Gly Ala Gly Gly Thr Gly Cys Ala Gly Cys Thr Gly Gly Thr Gly Gly

1 5 10 15

Ala Gly Thr Cys Thr Gly Gly Gly Gly Gly Ala Gly Gly Cys Cys Thr

20 25 30

Gly Gly Thr Cys Ala Ala Gly Cys Cys Thr Gly Gly Gly Gly Gly Gly

35 40 45

Thr Cys Cys Cys Thr Gly Ala Gly Ala Cys Thr Cys Thr Cys Cys Thr

50 55 60

Gly Thr Gly Cys Ala Gly Cys Cys Thr Cys Thr Gly Gly Ala Thr Thr

65 70 75 80

Cys Ala Cys Cys Thr Thr Cys Ala Gly Thr Gly Ala Ala Thr Ala Thr

85 90 95

Ala Cys Cys Ala Thr Gly Ala Ala Cys Thr Gly Gly Gly Thr Cys Cys

100 105 110

Gly Cys Cys Ala Gly Gly Cys Thr Cys Cys Ala Gly Gly Gly Ala Ala

115 120 125

Gly Gly Gly Gly Cys Thr Gly Gly Ala Gly Thr Gly Gly Gly Thr Cys

130 135 140

Thr Cys Ala Gly Cys Thr Ala Thr Thr Gly Thr Ala Gly Gly Thr Ala

145 150 155 160

Gly Thr Gly Gly Thr Gly Ala Cys Ala Gly Cys Ala Cys Ala Thr Ala

165 170 175

Cys Thr Ala Cys Gly Cys Ala Gly Ala Cys Thr Cys Cys Gly Thr Gly

180 185 190

Ala Ala Gly Gly Gly Cys Cys Gly Gly Thr Thr Cys Ala Cys Cys Ala

195 200 205

Thr Cys Thr Cys Cys Ala Gly Ala Gly Ala Cys Ala Ala Thr Thr Cys

210 215 220

Cys Ala Ala Gly Ala Ala Cys Ala Cys Gly Cys Thr Gly Thr Ala Thr

225 230 235 240

Cys Thr Gly Cys Ala Ala Ala Thr Gly Ala Ala Cys Ala Gly Cys Cys

245 250 255

Thr Gly Ala Gly Ala Gly Cys Cys Gly Ala Gly Gly Ala Cys Ala Cys

260 265 270

Gly Gly Cys Gly Gly Thr Gly Thr Ala Cys Thr Ala Cys Thr Gly Cys

275 280 285

Gly Cys Cys Ala Ala Gly Gly Ala Cys Thr Ala Cys Ala Gly Cys Thr

290 295 300

Cys Cys Gly Gly Ala Gly Ala Cys Thr Gly Gly Ala Thr Cys Gly Ala

305 310 315 320

Thr Thr Ala Thr Gly Gly Ala Ala Thr Gly Gly Ala Cys Gly Thr Ala

325 330 335

Thr Gly Gly Gly Gly Cys Cys Ala Gly Gly Gly Ala Ala Cys Ala Ala

340 345 350

Cys Thr Gly Thr Cys Ala Cys Cys Gly Thr Cys Thr Cys Cys Thr Cys

355 360 365

Ala

<210> 12

<211> 123

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 2 - VH Белка

<400> 12

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Glu Tyr

20 25 30

Thr Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Ala Ile Val Gly Ser Gly Asp Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Lys Asp Tyr Ser Ser Gly Asp Trp Ile Asp Tyr Gly Met Asp Val

100 105 110

Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 13

<211> 23

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 2 - VL FR1

<400> 13

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys

20

<210> 14

<211> 15

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 2 - VL FR2

<400> 14

Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr

1 5 10 15

<210> 15

<211> 32

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 2 - VL FR3

<400> 15

Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr

1 5 10 15

Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys

20 25 30

<210> 16

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 2 - VL FR4

<400> 16

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

1 5 10

<210> 17

<211> 321

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 2 - VL DNA

<400> 17

Gly Ala Cys Ala Thr Cys Cys Ala Gly Ala Thr Gly Ala Cys Cys Cys

1 5 10 15

Ala Gly Thr Cys Thr Cys Cys Ala Thr Cys Cys Thr Cys Cys Cys Thr

20 25 30

Gly Thr Cys Thr Gly Cys Ala Thr Cys Thr Gly Thr Ala Gly Gly Ala

35 40 45

Gly Ala Cys Ala Gly Ala Gly Thr Cys Ala Cys Cys Ala Thr Cys Ala

50 55 60

Cys Thr Thr Gly Cys Cys Ala Gly Gly Cys Gly Ala Gly Thr Cys Ala

65 70 75 80

Gly Gly Ala Cys Ala Thr Thr Ala Gly Cys Ala Ala Cys Thr Ala Thr

85 90 95

Thr Thr Ala Ala Ala Thr Thr Gly Gly Thr Ala Thr Cys Ala Gly Cys

100 105 110

Ala Gly Ala Ala Ala Cys Cys Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Cys

115 120 125

Cys Cys Cys Thr Ala Ala Gly Cys Thr Cys Cys Thr Gly Ala Thr Cys

130 135 140

Thr Ala Cys Gly Ala Thr Gly Cys Ala Thr Cys Cys Ala Ala Thr Thr

145 150 155 160

Thr Gly Gly Cys Ala Ala Cys Ala Gly Gly Gly Gly Thr Cys Cys Cys

165 170 175

Ala Thr Cys Ala Ala Gly Gly Thr Thr Cys Ala Gly Thr Gly Gly Ala

180 185 190

Ala Gly Thr Gly Gly Ala Thr Cys Thr Gly Gly Gly Ala Cys Ala Gly

195 200 205

Ala Thr Thr Thr Thr Ala Cys Thr Thr Thr Cys Ala Cys Cys Ala Thr

210 215 220

Cys Ala Gly Cys Ala Gly Cys Cys Thr Gly Cys Ala Gly Cys Cys Thr

225 230 235 240

Gly Ala Ala Gly Ala Thr Ala Thr Thr Gly Cys Ala Ala Cys Ala Thr

245 250 255

Ala Thr Thr Ala Cys Thr Gly Thr Cys Ala Gly Cys Ala Gly Thr Thr

260 265 270

Cys Gly Ala Thr Cys Thr Cys Cys Thr Cys Cys Cys Thr Cys Cys Thr

275 280 285

Ala Cys Thr Thr Thr Thr Gly Gly Cys Gly Gly Ala Gly Gly Gly Ala

290 295 300

Cys Cys Ala Ala Gly Gly Thr Thr Gly Ala Gly Ala Thr Cys Ala Ala

305 310 315 320

Ala

<210> 18

<211> 107

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 2 - VL Белка

<400> 18

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Ala Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Phe Asp Leu Leu Pro Pro

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210> 19

<400> 19

000

<210> 20

<400> 20

000

<210> 21

<400> 21

000

<210> 22

<400> 22

000

<210> 23

<400> 23

000

<210> 24

<400> 24

000

<210> 25

<400> 25

000

<210> 26

<400> 26

000

<210> 27

<400> 27

000

<210> 28

<400> 28

000

<210> 29

<400> 29

000

<210> 30

<400> 30

000

<210> 31

<400> 31

000

<210> 32

<400> 32

000

<210> 33

<400> 33

000

<210> 34

<400> 34

000

<210> 35

<400> 35

000

<210> 36

<400> 36

000

<210> 37

<400> 37

000

<210> 38

<400> 38

000

<210> 39

<400> 39

000

<210> 40

<400> 40

000

<210> 41

<400> 41

000

<210> 42

<400> 42

000

<210> 43

<400> 43

000

<210> 44

<400> 44

000

<210> 45

<400> 45

000

<210> 46

<400> 46

000

<210> 47

<400> 47

000

<210> 48

<400> 48

000

<210> 49

<400> 49

000

<210> 50

<400> 50

000

<210> 51

<400> 51

000

<210> 52

<400> 52

000

<210> 53

<400> 53

000

<210> 54

<400> 54

000

<210> 55

<400> 55

000

<210> 56

<400> 56

000

<210> 57

<400> 57

000

<210> 58

<400> 58

000

<210> 59

<400> 59

000

<210> 60

<400> 60

000

<210> 61

<400> 61

000

<210> 62

<400> 62

000

<210> 63

<400> 63

000

<210> 64

<400> 64

000

<210> 65

<400> 65

000

<210> 66

<400> 66

000

<210> 67

<400> 67

000

<210> 68

<400> 68

000

<210> 69

<400> 69

000

<210> 70

<400> 70

000

<210> 71

<400> 71

000

<210> 72

<400> 72

000

<210> 73

<400> 73

000

<210> 74

<400> 74

000

<210> 75

<400> 75

000

<210> 76

<400> 76

000

<210> 77

<400> 77

000

<210> 78

<400> 78

000

<210> 79

<400> 79

000

<210> 80

<400> 80

000

<210> 81

<400> 81

000

<210> 82

<400> 82

000

<210> 83

<400> 83

000

<210> 84

<400> 84

000

<210> 85

<400> 85

000

<210> 86

<400> 86

000

<210> 87

<400> 87

000

<210> 88

<400> 88

000

<210> 89

<400> 89

000

<210> 90

<400> 90

000

<210> 91

<400> 91

000

<210> 92

<400> 92

000

<210> 93

<400> 93

000

<210> 94

<400> 94

000

<210> 95

<400> 95

000

<210> 96

<400> 96

000

<210> 97

<400> 97

000

<210> 98

<400> 98

000

<210> 99

<400> 99

000

<210> 100

<400> 100

000

<210> 101

<211> 9

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 5 - VH CDR1

<400> 101

Phe Thr Phe Ser Asp Tyr Ala Met Ile

1 5

<210> 102

<211> 17

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 5 - VH CDR2

<400> 102

Ala Ile Ser Gly Gly Gly Glu Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 103

<211> 16

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 5 - VH CDR3

<400> 103

Ala Lys Asp Tyr Ser Ser Gly Asp Trp Ile Asp Tyr Gly Met Asp Val

1 5 10 15

<210> 104

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 5 - VL CDR1

<400> 104

Gln Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr Leu Asn

1 5 10

<210> 105

<211> 7

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 5 - VL CDR2

<400> 105

Asp Ala Ser Asn Leu Ala Thr

1 5

<210> 106

<211> 9

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 5 - VL CDR3

<400> 106

Gln Gln Phe Asp Leu Leu Pro Pro Thr

1 5

<210> 107

<211> 26

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 5 - VH FR1

<400> 107

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly

20 25

<210> 108

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 5 - VH FR2

<400> 108

Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ser

1 5 10

<210> 109

<211> 30

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 5 - VH FR3

<400> 109

Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln

1 5 10 15

Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

20 25 30

<210> 110

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 5 - VH FR4

<400> 110

Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

1 5 10

<210> 111

<211> 369

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 5 - VH ДНК

<400> 111

gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc 60

tcctgtgcag cctctggatt cacctttagc gactatgcca tgatatgggt ccgccaggct 120

ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct attagtggtg gaggtgaaag cacatactac 180

gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240

ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggcggtgt actactgcgc caaggactac 300

agctccggag actggatcga ttatggaatg gacgtatggg gccagggaac aactgtcacc 360

gtctcctca 369

<210> 112

<211> 123

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 5 - VH Белка

<400> 112

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr

20 25 30

Ala Met Ile Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Ala Ile Ser Gly Gly Gly Glu Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Lys Asp Tyr Ser Ser Gly Asp Trp Ile Asp Tyr Gly Met Asp Val

100 105 110

Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 113

<211> 23

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 5 - VL FR1

<400> 113

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys

20

<210> 114

<211> 15

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 5 - VL FR2

<400> 114

Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr

1 5 10 15

<210> 115

<211> 32

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 5 - VL FR3

<400> 115

Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr

1 5 10 15

Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys

20 25 30

<210> 116

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 5 - VL FR4

<400> 116

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

1 5 10

<210> 117

<211> 321

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 5 - VL ДНК

<400> 117

gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60

atcacttgcc aggcgagtca ggacattagc aactatttaa attggtatca gcagaaacca 120

gggaaagccc ctaagctcct gatctacgat gcatccaatt tggcaacagg ggtcccatca 180

aggttcagtg gaagtggatc tgggacagat tttactttca ccatcagcag cctgcagcct 240

gaagatattg caacatatta ctgtcagcag ttcgatctcc tccctcctac ttttggcgga 300

gggaccaagg ttgagatcaa a 321

<210> 118

<211> 107

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 5 - VL Белка

<400> 118

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Ala Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Phe Asp Leu Leu Pro Pro

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210> 119

<400> 119

000

<210> 120

<400> 120

000

<210> 121

<400> 121

000

<210> 122

<400> 122

000

<210> 123

<400> 123

000

<210> 124

<400> 124

000

<210> 125

<400> 125

000

<210> 126

<400> 126

000

<210> 127

<400> 127

000

<210> 128

<400> 128

000

<210> 129

<400> 129

000

<210> 130

<400> 130

000

<210> 131

<400> 131

000

<210> 132

<400> 132

000

<210> 133

<400> 133

000

<210> 134

<400> 134

000

<210> 135

<400> 135

000

<210> 136

<400> 136

000

<210> 137

<400> 137

000

<210> 138

<400> 138

000

<210> 139

<400> 139

000

<210> 140

<400> 140

000

<210> 141

<400> 141

000

<210> 142

<400> 142

000

<210> 143

<400> 143

000

<210> 144

<400> 144

000

<210> 145

<400> 145

000

<210> 146

<400> 146

000

<210> 147

<400> 147

000

<210> 148

<400> 148

000

<210> 149

<400> 149

000

<210> 150

<400> 150

000

<210> 151

<400> 151

000

<210> 152

<400> 152

000

<210> 153

<400> 153

000

<210> 154

<400> 154

000

<210> 155

<400> 155

000

<210> 156

<400> 156

000

<210> 157

<400> 157

000

<210> 158

<400> 158

000

<210> 159

<400> 159

000

<210> 160

<400> 160

000

<210> 161

<400> 161

000

<210> 162

<400> 162

000

<210> 163

<400> 163

000

<210> 164

<400> 164

000

<210> 165

<400> 165

000

<210> 166

<400> 166

000

<210> 167

<400> 167

000

<210> 168

<400> 168

000

<210> 169

<400> 169

000

<210> 170

<400> 170

000

<210> 171

<400> 171

000

<210> 172

<400> 172

000

<210> 173

<400> 173

000

<210> 174

<400> 174

000

<210> 175

<400> 175

000

<210> 176

<400> 176

000

<210> 177

<400> 177

000

<210> 178

<400> 178

000

<210> 179

<400> 179

000

<210> 180

<400> 180

000

<210> 181

<400> 181

000

<210> 182

<400> 182

000

<210> 183

<400> 183

000

<210> 184

<400> 184

000

<210> 185

<400> 185

000

<210> 186

<400> 186

000

<210> 187

<400> 187

000

<210> 188

<400> 188

000

<210> 189

<400> 189

000

<210> 190

<400> 190

000

<210> 191

<400> 191

000

<210> 192

<400> 192

000

<210> 193

<400> 193

000

<210> 194

<400> 194

000

<210> 195

<400> 195

000

<210> 196

<400> 196

000

<210> 197

<400> 197

000

<210> 198

<400> 198

000

<210> 199

<400> 199

000

<210> 200

<400> 200

000

<210> 201

<211> 9

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 44 - VH CDR1

<400> 201

Gly Thr Phe Asp Asn Tyr Tyr Ile Ser

1 5

<210> 202

<211> 17

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 44 - VH CDR2

<400> 202

Gly Ile Phe Pro Ile Phe Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe Gln

1 5 10 15

Gly

<210> 203

<211> 16

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 44 - VH CDR3

<400> 203

Ala Arg Glu Val Gly His Tyr Ser Gly Ser Pro Tyr Tyr Met Asp Val

1 5 10 15

<210> 204

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 44 - VL CDR1

<400> 204

Arg Ala Ser Gln Ser Ile Asn Ser Trp Leu Ala

1 5 10

<210> 205

<211> 7

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 44 - VL CDR2

<400> 205

Asp Ala Ser Ser Leu Glu Ser

1 5

<210> 206

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 44 - VL CDR3

<400> 206

Gln Gln Val Gly Pro Tyr Leu Thr

1 5

<210> 207

<211> 26

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 44 - VH FR1

<400> 207

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly

20 25

<210> 208

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 44 - VH FR2

<400> 208

Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met Gly

1 5 10

<210> 209

<211> 30

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 44 - VH FR3

<400> 209

Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr Met Glu

1 5 10 15

Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

20 25 30

<210> 210

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 44 - VH FR4

<400> 210

Trp Gly Lys Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

1 5 10

<210> 211

<211> 369

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 44 - VH ДНК

<400> 211

caggtgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60

tcctgcaagg cttctggagg caccttcgac aactattaca tcagctgggt gcgacaggcc 120

cctggacaag ggcttgagtg gatgggaggg atcttcccta tcttcggtac cgcaaactac 180

gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg aatccacgag cacagcctac 240

atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggcggtgt actactgcgc cagagaagtc 300

ggacactact ccggcagccc atactacatg gacgtatggg gcaagggtac aactgtcacc 360

gtctcctca 369

<210> 212

<211> 123

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 44 - VH Белка

<400> 212

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Asp Asn Tyr

20 25 30

Tyr Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Gly Ile Phe Pro Ile Phe Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Glu Val Gly His Tyr Ser Gly Ser Pro Tyr Tyr Met Asp Val

100 105 110

Trp Gly Lys Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 213

<211> 23

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 44 - VL FR1

<400> 213

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys

20

<210> 214

<211> 15

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 44 - VL FR2

<400> 214

Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Ser

1 5 10 15

<210> 215

<211> 32

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 44 - VL FR3

<400> 215

Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr

1 5 10 15

Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys

20 25 30

<210> 216

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 44 - VL FR4

<400> 216

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

1 5 10

<210> 217

<211> 318

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 44 - VL ДНК

<400> 217

gacatccaga tgacccagtc tccttccacc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60

atcacttgcc gggccagtca gagtattaat agctggttgg cctggtatca gcagaaacca 120

gggaaagccc ctaagctcct gatctccgat gcctccagtt tggaaagtgg ggtcccatca 180

aggttcagcg gcagtggatc tgggacagaa ttcactctca ccatcagcag cctgcagcct 240

gatgattttg caacttatta ctgccagcag gtcggcccct acctcacttt tggcggaggg 300

accaaggttg agatcaaa 318

<210> 218

<211> 106

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 44 - VL Белка

<400> 218

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Asn Ser Trp

20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Ser Asp Ala Ser Ser Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Val Gly Pro Tyr Leu Thr

85 90 95

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210> 219

<400> 219

000

<210> 220

<400> 220

000

<210> 221

<400> 221

000

<210> 222

<400> 222

000

<210> 223

<400> 223

000

<210> 224

<400> 224

000

<210> 225

<400> 225

000

<210> 226

<400> 226

000

<210> 227

<400> 227

000

<210> 228

<400> 228

000

<210> 229

<400> 229

000

<210> 230

<400> 230

000

<210> 231

<400> 231

000

<210> 232

<400> 232

000

<210> 233

<400> 233

000

<210> 234

<400> 234

000

<210> 235

<400> 235

000

<210> 236

<400> 236

000

<210> 237

<400> 237

000

<210> 238

<400> 238

000

<210> 239

<400> 239

000

<210> 240

<400> 240

000

<210> 241

<400> 241

000

<210> 242

<400> 242

000

<210> 243

<400> 243

000

<210> 244

<400> 244

000

<210> 245

<400> 245

000

<210> 246

<400> 246

000

<210> 247

<400> 247

000

<210> 248

<400> 248

000

<210> 249

<400> 249

000

<210> 250

<400> 250

000

<210> 251

<400> 251

000

<210> 252

<400> 252

000

<210> 253

<400> 253

000

<210> 254

<400> 254

000

<210> 255

<400> 255

000

<210> 256

<400> 256

000

<210> 257

<400> 257

000

<210> 258

<400> 258

000

<210> 259

<400> 259

000

<210> 260

<400> 260

000

<210> 261

<400> 261

000

<210> 262

<400> 262

000

<210> 263

<400> 263

000

<210> 264

<400> 264

000

<210> 265

<400> 265

000

<210> 266

<400> 266

000

<210> 267

<400> 267

000

<210> 268

<400> 268

000

<210> 269

<400> 269

000

<210> 270

<400> 270

000

<210> 271

<400> 271

000

<210> 272

<400> 272

000

<210> 273

<400> 273

000

<210> 274

<400> 274

000

<210> 275

<400> 275

000

<210> 276

<400> 276

000

<210> 277

<400> 277

000

<210> 278

<400> 278

000

<210> 279

<400> 279

000

<210> 280

<400> 280

000

<210> 281

<400> 281

000

<210> 282

<400> 282

000

<210> 283

<400> 283

000

<210> 284

<400> 284

000

<210> 285

<400> 285

000

<210> 286

<400> 286

000

<210> 287

<400> 287

000

<210> 288

<400> 288

000

<210> 289

<400> 289

000

<210> 290

<400> 290

000

<210> 291

<400> 291

000

<210> 292

<400> 292

000

<210> 293

<400> 293

000

<210> 294

<400> 294

000

<210> 295

<400> 295

000

<210> 296

<400> 296

000

<210> 297

<400> 297

000

<210> 298

<400> 298

000

<210> 299

<400> 299

000

<210> 300

<400> 300

000

<210> 301

<211> 9

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 58 - VH CDR1

<400> 301

Phe Thr Phe Gly Asp Tyr Ala Met Ser

1 5

<210> 302

<211> 19

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 58 - VH CDR2

<400> 302

Phe Ile Gly Ser Lys Phe Tyr Gly Gly Glu Thr Glu Tyr Thr Ala Ser

1 5 10 15

Val Lys Gly

<210> 303

<211> 13

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 58 - VH CDR3

<400> 303

Ala Arg Gly Pro Arg Arg Tyr Thr Tyr Gly Met Asp Val

1 5 10

<210> 304

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 58 - VL CDR1

<400> 304

Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr Leu Asn

1 5 10

<210> 305

<211> 7

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 58 - VL CDR2

<400> 305

Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser

1 5

<210> 306

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 58 - VL CDR3

<400> 306

Gln Gln Ser Ser Thr Pro Leu Thr

1 5

<210> 307

<211> 26

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 58 - VH FR1

<400> 307

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly

20 25

<210> 308

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 58 - VH FR2

<400> 308

Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Gly

1 5 10

<210> 309

<211> 30

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 58 - VH FR3

<400> 309

Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Gly Ser Lys Ser Ile Ala Tyr Leu Gln

1 5 10 15

Met Asn Ser Leu Lys Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

20 25 30

<210> 310

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 58 - VH FR4

<400> 310

Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

1 5 10

<210> 311

<211> 366

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 58 - VH ДНК

<400> 311

gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtacagc cagggcggtc cctgagactc 60

tcctgtacag cttctggatt cacctttggt gattatgcta tgagctggtt ccgccaggct 120

ccagggaagg ggctggagtg ggtaggtttc attggaagca aattctatgg tggggaaaca 180

gaatacaccg cgtctgtgaa aggcagattc accatctcaa gagatggttc caaaagcatc 240

gcctatctgc aaatgaacag cctgaaaacc gaggacacgg cggtgtacta ctgcgccaga 300

ggaccaagac gctacacata cggaatggac gtatggggcc agggaacaac tgtcaccgtc 360

tcctca 366

<210> 312

<211> 122

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 58 - VH Белка

<400> 312

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Gly Asp Tyr

20 25 30

Ala Met Ser Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Gly Phe Ile Gly Ser Lys Phe Tyr Gly Gly Glu Thr Glu Tyr Thr Ala

50 55 60

Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Gly Ser Lys Ser Ile

65 70 75 80

Ala Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr

85 90 95

Tyr Cys Ala Arg Gly Pro Arg Arg Tyr Thr Tyr Gly Met Asp Val Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 313

<211> 23

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 58 - VL FR1

<400> 313

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys

20

<210> 314

<211> 15

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 58 - VL FR2

<400> 314

Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr

1 5 10 15

<210> 315

<211> 32

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 58 - VL FR3

<400> 315

Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr

1 5 10 15

Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys

20 25 30

<210> 316

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 58 - VL FR4

<400> 316

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

1 5 10

<210> 317

<211> 318

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 58 - VL ДНК

<400> 317

gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60

atcacttgcc gggcaagtca gagcattagc agctatttaa attggtatca gcagaaacca 120

gggaaagccc ctaagctcct gatctatgct gcatccagtt tgcaaagtgg ggtcccatca 180

aggttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240

gaagattttg caacttacta ctgtcagcaa agctccaccc ccctcacttt tggcggaggg 300

accaaggttg agatcaaa 318

<210> 318

<211> 106

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 58 - VL Белка

<400> 318

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Ser Thr Pro Leu Thr

85 90 95

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210> 319

<400> 319

000

<210> 320

<400> 320

000

<210> 321

<400> 321

000

<210> 322

<400> 322

000

<210> 323

<400> 323

000

<210> 324

<400> 324

000

<210> 325

<400> 325

000

<210> 326

<400> 326

000

<210> 327

<400> 327

000

<210> 328

<400> 328

000

<210> 329

<400> 329

000

<210> 330

<400> 330

000

<210> 331

<400> 331

000

<210> 332

<400> 332

000

<210> 333

<400> 333

000

<210> 334

<400> 334

000

<210> 335

<400> 335

000

<210> 336

<400> 336

000

<210> 337

<400> 337

000

<210> 338

<400> 338

000

<210> 339

<400> 339

000

<210> 340

<400> 340

000

<210> 341

<400> 341

000

<210> 342

<400> 342

000

<210> 343

<400> 343

000

<210> 344

<400> 344

000

<210> 345

<400> 345

000

<210> 346

<400> 346

000

<210> 347

<400> 347

000

<210> 348

<400> 348

000

<210> 349

<400> 349

000

<210> 350

<400> 350

000

<210> 351

<400> 351

000

<210> 352

<400> 352

000

<210> 353

<400> 353

000

<210> 354

<400> 354

000

<210> 355

<400> 355

000

<210> 356

<400> 356

000

<210> 357

<400> 357

000

<210> 358

<400> 358

000

<210> 359

<400> 359

000

<210> 360

<400> 360

000

<210> 361

<400> 361

000

<210> 362

<400> 362

000

<210> 363

<400> 363

000

<210> 364

<400> 364

000

<210> 365

<400> 365

000

<210> 366

<400> 366

000

<210> 367

<400> 367

000

<210> 368

<400> 368

000

<210> 369

<400> 369

000

<210> 370

<400> 370

000

<210> 371

<400> 371

000

<210> 372

<400> 372

000

<210> 373

<400> 373

000

<210> 374

<400> 374

000

<210> 375

<400> 375

000

<210> 376

<400> 376

000

<210> 377

<400> 377

000

<210> 378

<400> 378

000

<210> 379

<400> 379

000

<210> 380

<400> 380

000

<210> 381

<400> 381

000

<210> 382

<400> 382

000

<210> 383

<400> 383

000

<210> 384

<400> 384

000

<210> 385

<400> 385

000

<210> 386

<400> 386

000

<210> 387

<400> 387

000

<210> 388

<400> 388

000

<210> 389

<400> 389

000

<210> 390

<400> 390

000

<210> 391

<400> 391

000

<210> 392

<400> 392

000

<210> 393

<400> 393

000

<210> 394

<400> 394

000

<210> 395

<400> 395

000

<210> 396

<400> 396

000

<210> 397

<400> 397

000

<210> 398

<400> 398

000

<210> 399

<400> 399

000

<210> 400

<400> 400

000

<210> 401

<211> 9

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 10 - VH CDR1

<400> 401

Phe Thr Phe Asp Asp Tyr Ala Val His

1 5

<210> 402

<211> 17

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 10 - VH CDR2

<400> 402

Gly Ile Ser Trp Ser Ser Gly Leu Ile Gly Tyr Ala Asp Ser Val Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 403

<211> 13

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 10 - VH CDR3

<400> 403

Ala Lys Gly Pro Pro Thr Tyr Gln Asp Tyr Phe Asp Leu

1 5 10

<210> 404

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 10 - VL CDR1

<400> 404

Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Arg Tyr Leu Ala

1 5 10

<210> 405

<211> 7

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 10 - VL CDR2

<400> 405

Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr

1 5

<210> 406

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 10 - VL CDR3

<400> 406

Gln Gln Val Ser Phe Phe Pro Pro Ile Thr

1 5 10

<210> 407

<211> 26

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 10 - VH FR1

<400> 407

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly

20 25

<210> 408

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 10 - VH FR2

<400> 408

Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ser

1 5 10

<210> 409

<211> 30

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 10 - VH FR3

<400> 409

Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu Gln

1 5 10 15

Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

20 25 30

<210> 410

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 10 - VH FR4

<400> 410

Trp Gly Arg Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

1 5 10

<210> 411

<211> 360

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 10 - VH ДНК

<400> 411

gaagtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggcaggtc cctgagactc 60

tcctgtgcag cctctggatt cacctttgat gattatgccg tgcactgggt ccggcaagct 120

ccagggaagg gcctggagtg ggtctcaggt attagttgga gtagtggact aataggctat 180

gcggactctg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca acgccaagaa ctccctgtat 240

ctgcaaatga acagtctgag agctgaggac acggcggtgt actactgcgc caagggccct 300

cctacctacc aagactactt cgacctatgg gggagaggta ccttggtcac cgtctcctca 360

<210> 412

<211> 120

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 10 - VH Белка

<400> 412

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asp Asp Tyr

20 25 30

Ala Val His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Gly Ile Ser Trp Ser Ser Gly Leu Ile Gly Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Lys Gly Pro Pro Thr Tyr Gln Asp Tyr Phe Asp Leu Trp Gly Arg

100 105 110

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 413

<211> 23

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 10 - VL FR1

<400> 413

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys

20

<210> 414

<211> 15

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 10 - VL FR2

<400> 414

Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr

1 5 10 15

<210> 415

<211> 32

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 10 - VL FR3

<400> 415

Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr

1 5 10 15

Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys

20 25 30

<210> 416

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 10 - VL FR4

<400> 416

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

1 5 10

<210> 417

<211> 324

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 10 - VL ДНК

<400> 417

gaaattgtgt tgacacagtc tccagccacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60

ctctcctgca gggccagtca gagtgttagc aggtacttag cctggtacca acagaaacct 120

ggccaggctc ccaggctcct catctatgat gcatccaaca gggccactgg catcccagcc 180

aggttcagtg gcagtgggtc tgggacagac ttcactctca ccatcagcag cctagagcct 240

gaagattttg cagtttatta ctgtcagcag gtcagtttct tccctcctat cacttttggc 300

ggagggacca aggttgagat caaa 324

<210> 418

<211> 108

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 10 - VL Белка

<400> 418

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Arg Tyr

20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Val Ser Phe Phe Pro Pro

85 90 95

Ile Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210> 419

<400> 419

000

<210> 420

<400> 420

000

<210> 421

<400> 421

000

<210> 422

<400> 422

000

<210> 423

<400> 423

000

<210> 424

<400> 424

000

<210> 425

<400> 425

000

<210> 426

<400> 426

000

<210> 427

<400> 427

000

<210> 428

<400> 428

000

<210> 429

<400> 429

000

<210> 430

<400> 430

000

<210> 431

<400> 431

000

<210> 432

<400> 432

000

<210> 433

<400> 433

000

<210> 434

<400> 434

000

<210> 435

<400> 435

000

<210> 436

<400> 436

000

<210> 437

<400> 437

000

<210> 438

<400> 438

000

<210> 439

<400> 439

000

<210> 440

<400> 440

000

<210> 441

<400> 441

000

<210> 442

<400> 442

000

<210> 443

<400> 443

000

<210> 444

<400> 444

000

<210> 445

<400> 445

000

<210> 446

<400> 446

000

<210> 447

<400> 447

000

<210> 448

<400> 448

000

<210> 449

<400> 449

000

<210> 450

<400> 450

000

<210> 451

<400> 451

000

<210> 452

<400> 452

000

<210> 453

<400> 453

000

<210> 454

<400> 454

000

<210> 455

<400> 455

000

<210> 456

<400> 456

000

<210> 457

<400> 457

000

<210> 458

<400> 458

000

<210> 459

<400> 459

000

<210> 460

<400> 460

000

<210> 461

<400> 461

000

<210> 462

<400> 462

000

<210> 463

<400> 463

000

<210> 464

<400> 464

000

<210> 465

<400> 465

000

<210> 466

<400> 466

000

<210> 467

<400> 467

000

<210> 468

<400> 468

000

<210> 469

<400> 469

000

<210> 470

<400> 470

000

<210> 471

<400> 471

000

<210> 472

<400> 472

000

<210> 473

<400> 473

000

<210> 474

<400> 474

000

<210> 475

<400> 475

000

<210> 476

<400> 476

000

<210> 477

<400> 477

000

<210> 478

<400> 478

000

<210> 479

<400> 479

000

<210> 480

<400> 480

000

<210> 481

<400> 481

000

<210> 482

<400> 482

000

<210> 483

<400> 483

000

<210> 484

<400> 484

000

<210> 485

<400> 485

000

<210> 486

<400> 486

000

<210> 487

<400> 487

000

<210> 488

<400> 488

000

<210> 489

<400> 489

000

<210> 490

<400> 490

000

<210> 491

<400> 491

000

<210> 492

<400> 492

000

<210> 493

<400> 493

000

<210> 494

<400> 494

000

<210> 495

<400> 495

000

<210> 496

<400> 496

000

<210> 497

<400> 497

000

<210> 498

<400> 498

000

<210> 499

<400> 499

000

<210> 500

<400> 500

000

<210> 501

<211> 9

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 38 - VH CDR1

<400> 501

Phe Thr Phe Ser Gly His Leu Met Ser

1 5

<210> 502

<211> 17

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 38 - VH CDR2

<400> 502

Ala Ile Ser Gly Ser Ala Gly Glu Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 503

<211> 19

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 38 - VH CDR3

<400> 503

Ala Arg Asp Ala Tyr Tyr Asp Asp Trp Ser Gly Trp Ala Asp Trp Tyr

1 5 10 15

Phe Asp Leu

<210> 504

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 38 - VL CDR1

<400> 504

Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Arg Tyr Leu Ala

1 5 10

<210> 505

<211> 7

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 38 - VL CDR2

<400> 505

Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr

1 5

<210> 506

<211> 9

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 38 - VL CDR3

<400> 506

Gln Gln Val Ser Leu Leu Pro Pro Thr

1 5

<210> 507

<211> 26

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 38 - VH FR1

<400> 507

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly

20 25

<210> 508

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 38 - VH FR2

<400> 508

Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ser

1 5 10

<210> 509

<211> 30

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 38 - VH FR3

<400> 509

Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln

1 5 10 15

Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

20 25 30

<210> 510

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 38 - VH FR4

<400> 510

Trp Gly Arg Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

1 5 10

<210> 511

<211> 378

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 38 - VH ДНК

<400> 511

gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc 60

tcctgtgcag cctctggatt cacctttagc ggacacctaa tgagctgggt ccgccaggct 120

ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct attagtggat ccgcaggtga aacatactac 180

gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240

ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggcggtgt actactgcgc cagagatgcg 300

tactacgacg actggagcgg atgggccgat tggtacttcg atttatgggg gagaggtacc 360

ttggtcaccg tctcctca 378

<210> 512

<211> 126

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 38 - VH Белка

<400> 512

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Gly His

20 25 30

Leu Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Ala Ile Ser Gly Ser Ala Gly Glu Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Asp Ala Tyr Tyr Asp Asp Trp Ser Gly Trp Ala Asp Trp Tyr

100 105 110

Phe Asp Leu Trp Gly Arg Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120 125

<210> 513

<211> 23

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 38 - VL FR1

<400> 513

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys

20

<210> 514

<211> 15

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 38 - VL FR2

<400> 514

Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr

1 5 10 15

<210> 515

<211> 32

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 38 - VL FR3

<400> 515

Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr

1 5 10 15

Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys

20 25 30

<210> 516

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 38 - VL FR4

<400> 516

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

1 5 10

<210> 517

<211> 321

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 38 - VL ДНК

<400> 517

gaaattgtgt tgacacagtc tccagccacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60

ctctcctgca gggccagtca gagtgttagc aggtacttag cctggtacca acagaaacct 120

ggccaggctc ccaggctcct catctatgat gcatccaaca gggccactgg catcccagcc 180

aggttcagtg gcagtgggtc tgggacagac ttcactctca ccatcagcag cctagagcct 240

gaagattttg cagtttatta ctgtcagcag gtcagtctcc tccctcctac ttttggcgga 300

gggaccaagg ttgagatcaa a 321

<210> 518

<211> 107

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 38 - VL Белка

<400> 518

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Arg Tyr

20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Val Ser Leu Leu Pro Pro

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210> 519

<400> 519

000

<210> 520

<400> 520

000

<210> 521

<400> 521

000

<210> 522

<400> 522

000

<210> 523

<400> 523

000

<210> 524

<400> 524

000

<210> 525

<400> 525

000

<210> 526

<400> 526

000

<210> 527

<400> 527

000

<210> 528

<400> 528

000

<210> 529

<400> 529

000

<210> 530

<400> 530

000

<210> 531

<400> 531

000

<210> 532

<400> 532

000

<210> 533

<400> 533

000

<210> 534

<400> 534

000

<210> 535

<400> 535

000

<210> 536

<400> 536

000

<210> 537

<400> 537

000

<210> 538

<400> 538

000

<210> 539

<400> 539

000

<210> 540

<400> 540

000

<210> 541

<400> 541

000

<210> 542

<400> 542

000

<210> 543

<400> 543

000

<210> 544

<400> 544

000

<210> 545

<400> 545

000

<210> 546

<400> 546

000

<210> 547

<400> 547

000

<210> 548

<400> 548

000

<210> 549

<400> 549

000

<210> 550

<400> 550

000

<210> 551

<400> 551

000

<210> 552

<400> 552

000

<210> 553

<400> 553

000

<210> 554

<400> 554

000

<210> 555

<400> 555

000

<210> 556

<400> 556

000

<210> 557

<400> 557

000

<210> 558

<400> 558

000

<210> 559

<400> 559

000

<210> 560

<400> 560

000

<210> 561

<400> 561

000

<210> 562

<400> 562

000

<210> 563

<400> 563

000

<210> 564

<400> 564

000

<210> 565

<400> 565

000

<210> 566

<400> 566

000

<210> 567

<400> 567

000

<210> 568

<400> 568

000

<210> 569

<400> 569

000

<210> 570

<400> 570

000

<210> 571

<400> 571

000

<210> 572

<400> 572

000

<210> 573

<400> 573

000

<210> 574

<400> 574

000

<210> 575

<400> 575

000

<210> 576

<400> 576

000

<210> 577

<400> 577

000

<210> 578

<400> 578

000

<210> 579

<400> 579

000

<210> 580

<400> 580

000

<210> 581

<400> 581

000

<210> 582

<400> 582

000

<210> 583

<400> 583

000

<210> 584

<400> 584

000

<210> 585

<400> 585

000

<210> 586

<400> 586

000

<210> 587

<400> 587

000

<210> 588

<400> 588

000

<210> 589

<400> 589

000

<210> 590

<400> 590

000

<210> 591

<400> 591

000

<210> 592

<400> 592

000

<210> 593

<400> 593

000

<210> 594

<400> 594

000

<210> 595

<400> 595

000

<210> 596

<400> 596

000

<210> 597

<400> 597

000

<210> 598

<400> 598

000

<210> 599

<400> 599

000

<210> 600

<400> 600

000

<210> 601

<211> 9

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 15 - VH CDR1

<400> 601

Phe Thr Phe Gly Asp Val Ala Met Ser

1 5

<210> 602

<211> 19

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 15 - VH CDR2

<400> 602

Tyr Ile Gly Ser Lys Ala Tyr Gly Gly Glu Thr Glu Tyr Thr Ala Ser

1 5 10 15

Val Lys Gly

<210> 603

<211> 17

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 15 - VH CDR3

<400> 603

Ala Arg Ala Gly His Ser Tyr Gly Ser Ile Ala Ser Asn Trp Phe Asp

1 5 10 15

Pro

<210> 604

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 15 - VL CDR1

<400> 604

Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr Leu Asn

1 5 10

<210> 605

<211> 7

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 15 - VL CDR2

<400> 605

Gly Ala Ser Ser Leu Gln Ser

1 5

<210> 606

<211> 9

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 15 - VL CDR3

<400> 606

Gln Gln Gly Phe Tyr Thr Pro Trp Thr

1 5

<210> 607

<211> 26

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 15 - VH FR1

<400> 607

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly

20 25

<210> 608

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 15 - VH FR2

<400> 608

Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Gly

1 5 10

<210> 609

<211> 30

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 15 - VH FR3

<400> 609

Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Gly Ser Lys Ser Ile Ala Tyr Leu Gln

1 5 10 15

Met Asn Ser Leu Lys Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

20 25 30

<210> 610

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 15 - VH FR4

<400> 610

Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

1 5 10

<210> 611

<211> 378

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 15 - VH ДНК

<400> 611

gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtacagc cagggcggtc cctgagactc 60

tcctgtacag cttctggatt cacctttggt gatgtcgcta tgtcctggtt ccgccaggct 120

ccagggaagg ggctggagtg ggtaggttac attggaagca aagcttatgg tggggaaaca 180

gaatacaccg cgtctgtgaa aggcagattc accatctcaa gagatggttc caaaagcatc 240

gcctatctgc aaatgaacag cctgaaaacc gaggacacgg cggtgtacta ctgcgccaga 300

gctggacaca gctacggatc catcgccagc aactggttcg acccatgggg acagggtaca 360

ttggtcaccg tctcctca 378

<210> 612

<211> 126

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 15 - VH Белка

<400> 612

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Gly Asp Val

20 25 30

Ala Met Ser Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Gly Tyr Ile Gly Ser Lys Ala Tyr Gly Gly Glu Thr Glu Tyr Thr Ala

50 55 60

Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Gly Ser Lys Ser Ile

65 70 75 80

Ala Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr

85 90 95

Tyr Cys Ala Arg Ala Gly His Ser Tyr Gly Ser Ile Ala Ser Asn Trp

100 105 110

Phe Asp Pro Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120 125

<210> 613

<211> 23

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 15 - VL FR1

<400> 613

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys

20

<210> 614

<211> 15

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 15 - VL FR2

<400> 614

Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr

1 5 10 15

<210> 615

<211> 32

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 15 - VL FR3

<400> 615

Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr

1 5 10 15

Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys

20 25 30

<210> 616

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 15 - VL FR4

<400> 616

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

1 5 10

<210> 617

<211> 321

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 15 - VL ДНК

<400> 617

gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60

atcacttgcc gggcaagtca gagcattagc agctatttaa attggtatca gcagaaacca 120

gggaaagccc ctaagctcct gatctatggt gcatccagtt tgcaaagtgg ggtcccatca 180

aggttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240

gaagattttg caacttacta ctgtcagcaa ggattctaca ctccttggac ttttggcgga 300

gggaccaagg ttgagatcaa a 321

<210> 618

<211> 107

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 15 - VL Белка

<400> 618

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Gly Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Phe Tyr Thr Pro Trp

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210> 619

<400> 619

000

<210> 620

<400> 620

000

<210> 621

<400> 621

000

<210> 622

<400> 622

000

<210> 623

<400> 623

000

<210> 624

<400> 624

000

<210> 625

<400> 625

000

<210> 626

<400> 626

000

<210> 627

<400> 627

000

<210> 628

<400> 628

000

<210> 629

<400> 629

000

<210> 630

<400> 630

000

<210> 631

<400> 631

000

<210> 632

<400> 632

000

<210> 633

<400> 633

000

<210> 634

<400> 634

000

<210> 635

<400> 635

000

<210> 636

<400> 636

000

<210> 637

<400> 637

000

<210> 638

<400> 638

000

<210> 639

<400> 639

000

<210> 640

<400> 640

000

<210> 641

<400> 641

000

<210> 642

<400> 642

000

<210> 643

<400> 643

000

<210> 644

<400> 644

000

<210> 645

<400> 645

000

<210> 646

<400> 646

000

<210> 647

<400> 647

000

<210> 648

<400> 648

000

<210> 649

<400> 649

000

<210> 650

<400> 650

000

<210> 651

<400> 651

000

<210> 652

<400> 652

000

<210> 653

<400> 653

000

<210> 654

<400> 654

000

<210> 655

<400> 655

000

<210> 656

<400> 656

000

<210> 657

<400> 657

000

<210> 658

<400> 658

000

<210> 659

<400> 659

000

<210> 660

<400> 660

000

<210> 661

<400> 661

000

<210> 662

<400> 662

000

<210> 663

<400> 663

000

<210> 664

<400> 664

000

<210> 665

<400> 665

000

<210> 666

<400> 666

000

<210> 667

<400> 667

000

<210> 668

<400> 668

000

<210> 669

<400> 669

000

<210> 670

<400> 670

000

<210> 671

<400> 671

000

<210> 672

<400> 672

000

<210> 673

<400> 673

000

<210> 674

<400> 674

000

<210> 675

<400> 675

000

<210> 676

<400> 676

000

<210> 677

<400> 677

000

<210> 678

<400> 678

000

<210> 679

<400> 679

000

<210> 680

<400> 680

000

<210> 681

<400> 681

000

<210> 682

<400> 682

000

<210> 683

<400> 683

000

<210> 684

<400> 684

000

<210> 685

<400> 685

000

<210> 686

<400> 686

000

<210> 687

<400> 687

000

<210> 688

<400> 688

000

<210> 689

<400> 689

000

<210> 690

<400> 690

000

<210> 691

<400> 691

000

<210> 692

<400> 692

000

<210> 693

<400> 693

000

<210> 694

<400> 694

000

<210> 695

<400> 695

000

<210> 696

<400> 696

000

<210> 697

<400> 697

000

<210> 698

<400> 698

000

<210> 699

<400> 699

000

<210> 700

<400> 700

000

<210> 701

<211> 9

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 35 - VH CDR1

<400> 701

Gly Thr Phe Ser Ser Ala Ala Ile Ser

1 5

<210> 702

<211> 17

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 35 - VH CDR2

<400> 702

Asn Ile Ile Pro Ile Val Gly Ile Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe Gln

1 5 10 15

Gly

<210> 703

<211> 16

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 35 - VH CDR3

<400> 703

Ala Arg Asp Thr Gly Arg Gly Tyr Thr Arg His Phe Trp Phe Asp Pro

1 5 10 15

<210> 704

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 35 - VL CDR1

<400> 704

Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr Leu Asn

1 5 10

<210> 705

<211> 7

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 35 - VL CDR2

<400> 705

Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser

1 5

<210> 706

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 35 - VL CDR3

<400> 706

Gln Gln Ser Asp Ile Leu Tyr Thr

1 5

<210> 707

<211> 26

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 35 - VH FR1

<400> 707

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly

20 25

<210> 708

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 35 - VH FR2

<400> 708

Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met Gly

1 5 10

<210> 709

<211> 30

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 35 - VH FR3

<400> 709

Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr Met Glu

1 5 10 15

Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

20 25 30

<210> 710

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 35 - VH FR4

<400> 710

Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

1 5 10

<210> 711

<211> 369

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 35 - VH ДНК

<400> 711

caggtgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60

tcctgcaagg cttctggagg caccttcagc tccgccgcta tcagctgggt gcgacaggcc 120

cctggacaag ggcttgagtg gatgggaaac atcatcccta tcgtaggtat agcaaactac 180

gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg aatccacgag cacagcctac 240

atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggcggtgt actactgcgc cagagacacg 300

ggacggggat acaccagaca cttctggttt gacccctggg gacagggtac attggtcacc 360

gtctcctca 369

<210> 712

<211> 123

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 35 - VH Белка

<400> 712

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Ala

20 25 30

Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Asn Ile Ile Pro Ile Val Gly Ile Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Asp Thr Gly Arg Gly Tyr Thr Arg His Phe Trp Phe Asp Pro

100 105 110

Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 713

<211> 23

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 35 - VL FR1

<400> 713

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys

20

<210> 714

<211> 15

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 35 - VL FR2

<400> 714

Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr

1 5 10 15

<210> 715

<211> 32

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 35 - VL FR3

<400> 715

Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr

1 5 10 15

Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys

20 25 30

<210> 716

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 35 - VL FR4

<400> 716

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

1 5 10

<210> 717

<211> 318

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 35 - VL ДНК

<400> 717

gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60

atcacttgcc gggcaagtca gagcattagc agctatttaa attggtatca gcagaaacca 120

gggaaagccc ctaagctcct gatctatgct gcatccagtt tgcaaagtgg ggtcccatca 180

aggttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240

gaagattttg caacttacta ctgtcagcaa agcgacatcc tctacacttt tggcggaggg 300

accaaggttg agatcaaa 318

<210> 718

<211> 106

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 35 - VL Белка

<400> 718

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Asp Ile Leu Tyr Thr

85 90 95

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210> 719

<400> 719

000

<210> 720

<400> 720

000

<210> 721

<400> 721

000

<210> 722

<400> 722

000

<210> 723

<400> 723

000

<210> 724

<400> 724

000

<210> 725

<400> 725

000

<210> 726

<400> 726

000

<210> 727

<400> 727

000

<210> 728

<400> 728

000

<210> 729

<400> 729

000

<210> 730

<400> 730

000

<210> 731

<400> 731

000

<210> 732

<400> 732

000

<210> 733

<400> 733

000

<210> 734

<400> 734

000

<210> 735

<400> 735

000

<210> 736

<400> 736

000

<210> 737

<400> 737

000

<210> 738

<400> 738

000

<210> 739

<400> 739

000

<210> 740

<400> 740

000

<210> 741

<400> 741

000

<210> 742

<400> 742

000

<210> 743

<400> 743

000

<210> 744

<400> 744

000

<210> 745

<400> 745

000

<210> 746

<400> 746

000

<210> 747

<400> 747

000

<210> 748

<400> 748

000

<210> 749

<400> 749

000

<210> 750

<400> 750

000

<210> 751

<400> 751

000

<210> 752

<400> 752

000

<210> 753

<400> 753

000

<210> 754

<400> 754

000

<210> 755

<400> 755

000

<210> 756

<400> 756

000

<210> 757

<400> 757

000

<210> 758

<400> 758

000

<210> 759

<400> 759

000

<210> 760

<400> 760

000

<210> 761

<400> 761

000

<210> 762

<400> 762

000

<210> 763

<400> 763

000

<210> 764

<400> 764

000

<210> 765

<400> 765

000

<210> 766

<400> 766

000

<210> 767

<400> 767

000

<210> 768

<400> 768

000

<210> 769

<400> 769

000

<210> 770

<400> 770

000

<210> 771

<400> 771

000

<210> 772

<400> 772

000

<210> 773

<400> 773

000

<210> 774

<400> 774

000

<210> 775

<400> 775

000

<210> 776

<400> 776

000

<210> 777

<400> 777

000

<210> 778

<400> 778

000

<210> 779

<400> 779

000

<210> 780

<400> 780

000

<210> 781

<400> 781

000

<210> 782

<400> 782

000

<210> 783

<400> 783

000

<210> 784

<400> 784

000

<210> 785

<400> 785

000

<210> 786

<400> 786

000

<210> 787

<400> 787

000

<210> 788

<400> 788

000

<210> 789

<400> 789

000

<210> 790

<400> 790

000

<210> 791

<400> 791

000

<210> 792

<400> 792

000

<210> 793

<400> 793

000

<210> 794

<400> 794

000

<210> 795

<400> 795

000

<210> 796

<400> 796

000

<210> 797

<400> 797

000

<210> 798

<400> 798

000

<210> 799

<400> 799

000

<210> 800

<400> 800

000

<210> 801

<211> 9

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 47 - VH CDR1

<400> 801

Gly Thr Phe Ser Asn Tyr Ala Ile Ser

1 5

<210> 802

<211> 17

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 47 - VH CDR2

<400> 802

Gly Ile Ile Pro Ile Phe Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe Gln

1 5 10 15

Gly

<210> 803

<211> 18

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 47 - VH CDR3

<400> 803

Ala Arg Gly Arg Gly Ala Leu Ala Leu Val Gly Pro Tyr Tyr Gly Met

1 5 10 15

Asp Val

<210> 804

<211> 16

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 47 - VL CDR1

<400> 804

Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu His Ser Asn Gly Tyr Asn Tyr Leu Asp

1 5 10 15

<210> 805

<211> 7

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 47 - VL CDR2

<400> 805

Leu Gly Ser His Arg Ala Ser

1 5

<210> 806

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 47 - VL CDR3

<400> 806

Met Gln Ala Leu Arg Ala Pro Thr

1 5

<210> 807

<211> 26

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 47 - VH FR1

<400> 807

Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly

20 25

<210> 808

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 47 - VH FR2

<400> 808

Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met Gly

1 5 10

<210> 809

<211> 30

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 47 - VH FR3

<400> 809

Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr Met Glu

1 5 10 15

Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

20 25 30

<210> 810

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 47 - VH FR4

<400> 810

Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

1 5 10

<210> 811

<211> 375

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 47 - VH ДНК

<400> 811

gaggtgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60

tcctgcaagg cttctggagg caccttcagc aactatgcta tcagctgggt gcgacaggcc 120

cctggacaag ggcttgagtg gatgggaggg atcatcccta tctttggtac agcaaactac 180

gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg aatccacgag cacagcctac 240

atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggcggtgt actactgcgc cagaggcaga 300

ggcgctctgg cactcgtcgg accatactac ggaatggacg tatggggcca gggaacaact 360

gtcaccgtct cctca 375

<210> 812

<211> 125

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 47 - VH Белка

<400> 812

Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Asn Tyr

20 25 30

Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Gly Ile Ile Pro Ile Phe Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Gly Arg Gly Ala Leu Ala Leu Val Gly Pro Tyr Tyr Gly Met

100 105 110

Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

115 120 125

<210> 813

<211> 23

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 47 - VL FR1

<400> 813

Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly

1 5 10 15

Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys

20

<210> 814

<211> 15

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 47 - VL FR2

<400> 814

Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu Ile Tyr

1 5 10 15

<210> 815

<211> 32

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 47 - VL FR3

<400> 815

Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr

1 5 10 15

Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys

20 25 30

<210> 816

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 47 - VL FR4

<400> 816

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

1 5 10

<210> 817

<211> 333

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 47 - VL ДНК

<400> 817

gatattgtga tgactcagtc tccactctcc ctgcccgtca cccctggaga gccggcctcc 60

atctcctgca ggtctagtca gagcctcctg catagtaatg gatacaacta tttggattgg 120

tacctgcaga agccagggca gtctccacag ctcctgatct atttgggttc tcatcgggcc 180

tccggggtcc ctgacaggtt cagtggcagt ggatcaggca cagattttac actgaaaatc 240

agcagagtgg aggctgagga tgttggggtt tattactgca tgcaggcact ccgagcccct 300

acttttggcg gagggaccaa ggttgagatc aaa 333

<210> 818

<211> 111

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 47 - VL Белка

<400> 818

Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly

1 5 10 15

Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu His Ser

20 25 30

Asn Gly Tyr Asn Tyr Leu Asp Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser

35 40 45

Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Leu Gly Ser His Arg Ala Ser Gly Val Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile

65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Met Gln Ala

85 90 95

Leu Arg Ala Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105 110

<210> 819

<400> 819

000

<210> 820

<400> 820

000

<210> 821

<400> 821

000

<210> 822

<400> 822

000

<210> 823

<400> 823

000

<210> 824

<400> 824

000

<210> 825

<400> 825

000

<210> 826

<400> 826

000

<210> 827

<400> 827

000

<210> 828

<400> 828

000

<210> 829

<400> 829

000

<210> 830

<400> 830

000

<210> 831

<400> 831

000

<210> 832

<400> 832

000

<210> 833

<400> 833

000

<210> 834

<400> 834

000

<210> 835

<400> 835

000

<210> 836

<400> 836

000

<210> 837

<400> 837

000

<210> 838

<400> 838

000

<210> 839

<400> 839

000

<210> 840

<400> 840

000

<210> 841

<400> 841

000

<210> 842

<400> 842

000

<210> 843

<400> 843

000

<210> 844

<400> 844

000

<210> 845

<400> 845

000

<210> 846

<400> 846

000

<210> 847

<400> 847

000

<210> 848

<400> 848

000

<210> 849

<400> 849

000

<210> 850

<400> 850

000

<210> 851

<400> 851

000

<210> 852

<400> 852

000

<210> 853

<400> 853

000

<210> 854

<400> 854

000

<210> 855

<400> 855

000

<210> 856

<400> 856

000

<210> 857

<400> 857

000

<210> 858

<400> 858

000

<210> 859

<400> 859

000

<210> 860

<400> 860

000

<210> 861

<400> 861

000

<210> 862

<400> 862

000

<210> 863

<400> 863

000

<210> 864

<400> 864

000

<210> 865

<400> 865

000

<210> 866

<400> 866

000

<210> 867

<400> 867

000

<210> 868

<400> 868

000

<210> 869

<400> 869

000

<210> 870

<400> 870

000

<210> 871

<400> 871

000

<210> 872

<400> 872

000

<210> 873

<400> 873

000

<210> 874

<400> 874

000

<210> 875

<400> 875

000

<210> 876

<400> 876

000

<210> 877

<400> 877

000

<210> 878

<400> 878

000

<210> 879

<400> 879

000

<210> 880

<400> 880

000

<210> 881

<400> 881

000

<210> 882

<400> 882

000

<210> 883

<400> 883

000

<210> 884

<400> 884

000

<210> 885

<400> 885

000

<210> 886

<400> 886

000

<210> 887

<400> 887

000

<210> 888

<400> 888

000

<210> 889

<400> 889

000

<210> 890

<400> 890

000

<210> 891

<400> 891

000

<210> 892

<400> 892

000

<210> 893

<400> 893

000

<210> 894

<400> 894

000

<210> 895

<400> 895

000

<210> 896

<400> 896

000

<210> 897

<400> 897

000

<210> 898

<400> 898

000

<210> 899

<400> 899

000

<210> 900

<400> 900

000

<210> 901

<211> 9

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 46 - VH CDR1

<400> 901

Phe Thr Phe Gly Asp Tyr Ala Met Ser

1 5

<210> 902

<211> 19

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 46 - VH CDR2

<400> 902

Phe Ile Gly Ser Lys Ala Tyr Gly Gly Thr Thr Glu Tyr Thr Ala Ser

1 5 10 15

Val Lys Gly

<210> 903

<211> 13

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 46 - VH CDR3

<400> 903

Ala Arg Gly Pro Arg Arg Tyr Thr Tyr Gly Met Asp Val

1 5 10

<210> 904

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 46 - VL CDR1

<400> 904

Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr Leu Asn

1 5 10

<210> 905

<211> 7

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 46 - VL CDR2

<400> 905

Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser

1 5

<210> 906

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 46 - VL CDR3

<400> 906

Gln Gln Ser Ser Thr Pro Leu Thr

1 5

<210> 907

<211> 26

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 46 - VH FR1

<400> 907

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly

20 25

<210> 908

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 46 - VH FR2

<400> 908

Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Gly

1 5 10

<210> 909

<211> 30

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 46 - VH FR3

<400> 909

Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Gly Ser Lys Ser Ile Ala Tyr Leu Gln

1 5 10 15

Met Asn Ser Leu Lys Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

20 25 30

<210> 910

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 46 - VH FR4

<400> 910

Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

1 5 10

<210> 911

<211> 366

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 46 - VH ДНК

<400> 911

gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtacagc cagggcggtc cctgagactc 60

tcctgtacag cttctggatt cacctttggt gattatgcta tgagctggtt ccgccaggct 120

ccagggaagg ggctggagtg ggtaggtttc attggaagca aagcttatgg tgggacaaca 180

gaatacaccg cgtctgtgaa aggcagattc accatctcaa gagatggttc caaaagcatc 240

gcctatctgc aaatgaacag cctgaaaacc gaggacacgg cggtgtacta ctgcgccaga 300

ggaccaagac gctacacata cggaatggac gtatggggcc agggaacaac tgtcaccgtc 360

tcctca 366

<210> 912

<211> 122

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 46 - VH Белка

<400> 912

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Gly Asp Tyr

20 25 30

Ala Met Ser Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Gly Phe Ile Gly Ser Lys Ala Tyr Gly Gly Thr Thr Glu Tyr Thr Ala

50 55 60

Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Gly Ser Lys Ser Ile

65 70 75 80

Ala Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr

85 90 95

Tyr Cys Ala Arg Gly Pro Arg Arg Tyr Thr Tyr Gly Met Asp Val Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 913

<211> 23

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 46 - VL FR1

<400> 913

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys

20

<210> 914

<211> 15

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 46 - VL FR2

<400> 914

Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr

1 5 10 15

<210> 915

<211> 32

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 46 - VL FR3

<400> 915

Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr

1 5 10 15

Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys

20 25 30

<210> 916

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 46 - VL FR4

<400> 916

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

1 5 10

<210> 917

<211> 318

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 46 - VL ДНК

<400> 917

gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60

atcacttgcc gggcaagtca gagcattagc agctatttaa attggtatca gcagaaacca 120

gggaaagccc ctaagctcct gatctatgct gcatccagtt tgcaaagtgg ggtcccatca 180

aggttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240

gaagattttg caacttacta ctgtcagcaa agctccaccc ccctcacttt tggcggaggg 300

accaaggttg agatcaaa 318

<210> 918

<211> 106

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 46 - VL Белка

<400> 918

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Ser Thr Pro Leu Thr

85 90 95

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210> 919

<400> 919

000

<210> 920

<400> 920

000

<210> 921

<400> 921

000

<210> 922

<400> 922

000

<210> 923

<400> 923

000

<210> 924

<400> 924

000

<210> 925

<400> 925

000

<210> 926

<400> 926

000

<210> 927

<400> 927

000

<210> 928

<400> 928

000

<210> 929

<400> 929

000

<210> 930

<400> 930

000

<210> 931

<400> 931

000

<210> 932

<400> 932

000

<210> 933

<400> 933

000

<210> 934

<400> 934

000

<210> 935

<400> 935

000

<210> 936

<400> 936

000

<210> 937

<400> 937

000

<210> 938

<400> 938

000

<210> 939

<400> 939

000

<210> 940

<400> 940

000

<210> 941

<400> 941

000

<210> 942

<400> 942

000

<210> 943

<400> 943

000

<210> 944

<400> 944

000

<210> 945

<400> 945

000

<210> 946

<400> 946

000

<210> 947

<400> 947

000

<210> 948

<400> 948

000

<210> 949

<400> 949

000

<210> 950

<400> 950

000

<210> 951

<400> 951

000

<210> 952

<400> 952

000

<210> 953

<400> 953

000

<210> 954

<400> 954

000

<210> 955

<400> 955

000

<210> 956

<400> 956

000

<210> 957

<400> 957

000

<210> 958

<400> 958

000

<210> 959

<400> 959

000

<210> 960

<400> 960

000

<210> 961

<400> 961

000

<210> 962

<400> 962

000

<210> 963

<400> 963

000

<210> 964

<400> 964

000

<210> 965

<400> 965

000

<210> 966

<400> 966

000

<210> 967

<400> 967

000

<210> 968

<400> 968

000

<210> 969

<400> 969

000

<210> 970

<400> 970

000

<210> 971

<400> 971

000

<210> 972

<400> 972

000

<210> 973

<400> 973

000

<210> 974

<400> 974

000

<210> 975

<400> 975

000

<210> 976

<400> 976

000

<210> 977

<400> 977

000

<210> 978

<400> 978

000

<210> 979

<400> 979

000

<210> 980

<400> 980

000

<210> 981

<400> 981

000

<210> 982

<400> 982

000

<210> 983

<400> 983

000

<210> 984

<400> 984

000

<210> 985

<400> 985

000

<210> 986

<400> 986

000

<210> 987

<400> 987

000

<210> 988

<400> 988

000

<210> 989

<400> 989

000

<210> 990

<400> 990

000

<210> 991

<400> 991

000

<210> 992

<400> 992

000

<210> 993

<400> 993

000

<210> 994

<400> 994

000

<210> 995

<400> 995

000

<210> 996

<400> 996

000

<210> 997

<400> 997

000

<210> 998

<400> 998

000

<210> 999

<400> 999

000

<210> 1000

<400> 1000

000

<210> 1001

<211> 9

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 32 - VH CDR1

<400> 1001

Gly Thr Phe Ser Ser Tyr Ala Ile Ser

1 5

<210> 1002

<211> 17

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 32 - VH CDR2

<400> 1002

Gly Ile Ile Pro Ile Ser Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe Gln

1 5 10 15

Gly

<210> 1003

<211> 16

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 32 - VH CDR3

<400> 1003

Ala Arg Asp Thr Gly Arg Gly Tyr Thr Arg His Phe Trp Phe Asp Pro

1 5 10 15

<210> 1004

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 32 - VL CDR1

<400> 1004

Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr Leu Asn

1 5 10

<210> 1005

<211> 7

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 32 - VL CDR2

<400> 1005

Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser

1 5

<210> 1006

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 32 - VL CDR3

<400> 1006

Gln Gln Ser Asp Ile Leu Tyr Thr

1 5

<210> 1007

<211> 26

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 32 - VH FR1

<400> 1007

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly

20 25

<210> 1008

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 32 - VH FR2

<400> 1008

Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met Gly

1 5 10

<210> 1009

<211> 30

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 32 - VH FR3

<400> 1009

Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr Met Glu

1 5 10 15

Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

20 25 30

<210> 1010

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 32 - VH FR4

<400> 1010

Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

1 5 10

<210> 1011

<211> 369

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 32 - VH ДНК

<400> 1011

caggtgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60

tcctgcaagg cttctggagg caccttcagc agctatgcta tcagctgggt gcgacaggcc 120

cctggacaag ggcttgagtg gatgggaggg atcatcccta tctctggtac agcaaactac 180

gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg aatccacgag cacagcctac 240

atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggcggtgt actactgcgc cagagacacg 300

ggacggggat acaccagaca cttctggttt gacccctggg gacagggtac attggtcacc 360

gtctcctca 369

<210> 1012

<211> 123

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 32 - VH Белка

<400> 1012

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr

20 25 30

Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Gly Ile Ile Pro Ile Ser Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Asp Thr Gly Arg Gly Tyr Thr Arg His Phe Trp Phe Asp Pro

100 105 110

Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 1013

<211> 23

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 32 - VL FR1

<400> 1013

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys

20

<210> 1014

<211> 15

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 32 - VL FR2

<400> 1014

Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr

1 5 10 15

<210> 1015

<211> 32

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 32 - VL FR3

<400> 1015

Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr

1 5 10 15

Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys

20 25 30

<210> 1016

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 32 - VL FR4

<400> 1016

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

1 5 10

<210> 1017

<211> 318

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 32 - VL ДНК

<400> 1017

gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60

atcacttgcc gggcaagtca gagcattagc agctatttaa attggtatca gcagaaacca 120

gggaaagccc ctaagctcct gatctatgct gcatccagtt tgcaaagtgg ggtcccatca 180

aggttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240

gaagattttg caacttacta ctgtcagcaa agcgacatcc tctacacttt tggcggaggg 300

accaaggttg agatcaaa 318

<210> 1018

<211> 106

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 32 - VL Белка

<400> 1018

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Asp Ile Leu Tyr Thr

85 90 95

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210> 1019

<400> 1019

000

<210> 1020

<400> 1020

000

<210> 1021

<400> 1021

000

<210> 1022

<400> 1022

000

<210> 1023

<400> 1023

000

<210> 1024

<400> 1024

000

<210> 1025

<400> 1025

000

<210> 1026

<400> 1026

000

<210> 1027

<400> 1027

000

<210> 1028

<400> 1028

000

<210> 1029

<400> 1029

000

<210> 1030

<400> 1030

000

<210> 1031

<400> 1031

000

<210> 1032

<400> 1032

000

<210> 1033

<400> 1033

000

<210> 1034

<400> 1034

000

<210> 1035

<400> 1035

000

<210> 1036

<400> 1036

000

<210> 1037

<400> 1037

000

<210> 1038

<400> 1038

000

<210> 1039

<400> 1039

000

<210> 1040

<400> 1040

000

<210> 1041

<400> 1041

000

<210> 1042

<400> 1042

000

<210> 1043

<400> 1043

000

<210> 1044

<400> 1044

000

<210> 1045

<400> 1045

000

<210> 1046

<400> 1046

000

<210> 1047

<400> 1047

000

<210> 1048

<400> 1048

000

<210> 1049

<400> 1049

000

<210> 1050

<400> 1050

000

<210> 1051

<400> 1051

000

<210> 1052

<400> 1052

000

<210> 1053

<400> 1053

000

<210> 1054

<400> 1054

000

<210> 1055

<400> 1055

000

<210> 1056

<400> 1056

000

<210> 1057

<400> 1057

000

<210> 1058

<400> 1058

000

<210> 1059

<400> 1059

000

<210> 1060

<400> 1060

000

<210> 1061

<400> 1061

000

<210> 1062

<400> 1062

000

<210> 1063

<400> 1063

000

<210> 1064

<400> 1064

000

<210> 1065

<400> 1065

000

<210> 1066

<400> 1066

000

<210> 1067

<400> 1067

000

<210> 1068

<400> 1068

000

<210> 1069

<400> 1069

000

<210> 1070

<400> 1070

000

<210> 1071

<400> 1071

000

<210> 1072

<400> 1072

000

<210> 1073

<400> 1073

000

<210> 1074

<400> 1074

000

<210> 1075

<400> 1075

000

<210> 1076

<400> 1076

000

<210> 1077

<400> 1077

000

<210> 1078

<400> 1078

000

<210> 1079

<400> 1079

000

<210> 1080

<400> 1080

000

<210> 1081

<400> 1081

000

<210> 1082

<400> 1082

000

<210> 1083

<400> 1083

000

<210> 1084

<400> 1084

000

<210> 1085

<400> 1085

000

<210> 1086

<400> 1086

000

<210> 1087

<400> 1087

000

<210> 1088

<400> 1088

000

<210> 1089

<400> 1089

000

<210> 1090

<400> 1090

000

<210> 1091

<400> 1091

000

<210> 1092

<400> 1092

000

<210> 1093

<400> 1093

000

<210> 1094

<400> 1094

000

<210> 1095

<400> 1095

000

<210> 1096

<400> 1096

000

<210> 1097

<400> 1097

000

<210> 1098

<400> 1098

000

<210> 1099

<400> 1099

000

<210> 1100

<400> 1100

000

<210> 1101

<400> 1101

000

<210> 1102

<400> 1102

000

<210> 1103

<400> 1103

000

<210> 1104

<400> 1104

000

<210> 1105

<400> 1105

000

<210> 1106

<400> 1106

000

<210> 1107

<400> 1107

000

<210> 1108

<400> 1108

000

<210> 1109

<400> 1109

000

<210> 1110

<400> 1110

000

<210> 1111

<400> 1111

000

<210> 1112

<400> 1112

000

<210> 1113

<400> 1113

000

<210> 1114

<400> 1114

000

<210> 1115

<400> 1115

000

<210> 1116

<400> 1116

000

<210> 1117

<400> 1117

000

<210> 1118

<400> 1118

000

<210> 1119

<400> 1119

000

<210> 1120

<400> 1120

000

<210> 1121

<400> 1121

000

<210> 1122

<400> 1122

000

<210> 1123

<400> 1123

000

<210> 1124

<400> 1124

000

<210> 1125

<400> 1125

000

<210> 1126

<400> 1126

000

<210> 1127

<400> 1127

000

<210> 1128

<400> 1128

000

<210> 1129

<400> 1129

000

<210> 1130

<400> 1130

000

<210> 1131

<400> 1131

000

<210> 1132

<400> 1132

000

<210> 1133

<400> 1133

000

<210> 1134

<400> 1134

000

<210> 1135

<400> 1135

000

<210> 1136

<400> 1136

000

<210> 1137

<400> 1137

000

<210> 1138

<400> 1138

000

<210> 1139

<400> 1139

000

<210> 1140

<400> 1140

000

<210> 1141

<400> 1141

000

<210> 1142

<400> 1142

000

<210> 1143

<400> 1143

000

<210> 1144

<400> 1144

000

<210> 1145

<400> 1145

000

<210> 1146

<400> 1146

000

<210> 1147

<400> 1147

000

<210> 1148

<400> 1148

000

<210> 1149

<400> 1149

000

<210> 1150

<400> 1150

000

<210> 1151

<400> 1151

000

<210> 1152

<400> 1152

000

<210> 1153

<400> 1153

000

<210> 1154

<400> 1154

000

<210> 1155

<400> 1155

000

<210> 1156

<400> 1156

000

<210> 1157

<400> 1157

000

<210> 1158

<400> 1158

000

<210> 1159

<400> 1159

000

<210> 1160

<400> 1160

000

<210> 1161

<400> 1161

000

<210> 1162

<400> 1162

000

<210> 1163

<400> 1163

000

<210> 1164

<400> 1164

000

<210> 1165

<400> 1165

000

<210> 1166

<400> 1166

000

<210> 1167

<400> 1167

000

<210> 1168

<400> 1168

000

<210> 1169

<400> 1169

000

<210> 1170

<400> 1170

000

<210> 1171

<400> 1171

000

<210> 1172

<400> 1172

000

<210> 1173

<400> 1173

000

<210> 1174

<400> 1174

000

<210> 1175

<400> 1175

000

<210> 1176

<400> 1176

000

<210> 1177

<400> 1177

000

<210> 1178

<400> 1178

000

<210> 1179

<400> 1179

000

<210> 1180

<400> 1180

000

<210> 1181

<400> 1181

000

<210> 1182

<400> 1182

000

<210> 1183

<400> 1183

000

<210> 1184

<400> 1184

000

<210> 1185

<400> 1185

000

<210> 1186

<400> 1186

000

<210> 1187

<400> 1187

000

<210> 1188

<400> 1188

000

<210> 1189

<400> 1189

000

<210> 1190

<400> 1190

000

<210> 1191

<400> 1191

000

<210> 1192

<400> 1192

000

<210> 1193

<400> 1193

000

<210> 1194

<400> 1194

000

<210> 1195

<400> 1195

000

<210> 1196

<400> 1196

000

<210> 1197

<400> 1197

000

<210> 1198

<400> 1198

000

<210> 1199

<400> 1199

000

<210> 1200

<400> 1200

000

<210> 1201

<400> 1201

000

<210> 1202

<400> 1202

000

<210> 1203

<400> 1203

000

<210> 1204

<400> 1204

000

<210> 1205

<400> 1205

000

<210> 1206

<400> 1206

000

<210> 1207

<400> 1207

000

<210> 1208

<400> 1208

000

<210> 1209

<400> 1209

000

<210> 1210

<400> 1210

000

<210> 1211

<400> 1211

000

<210> 1212

<400> 1212

000

<210> 1213

<400> 1213

000

<210> 1214

<400> 1214

000

<210> 1215

<400> 1215

000

<210> 1216

<400> 1216

000

<210> 1217

<400> 1217

000

<210> 1218

<400> 1218

000

<210> 1219

<400> 1219

000

<210> 1220

<400> 1220

000

<210> 1221

<400> 1221

000

<210> 1222

<400> 1222

000

<210> 1223

<400> 1223

000

<210> 1224

<400> 1224

000

<210> 1225

<400> 1225

000

<210> 1226

<400> 1226

000

<210> 1227

<400> 1227

000

<210> 1228

<400> 1228

000

<210> 1229

<400> 1229

000

<210> 1230

<400> 1230

000

<210> 1231

<400> 1231

000

<210> 1232

<400> 1232

000

<210> 1233

<400> 1233

000

<210> 1234

<400> 1234

000

<210> 1235

<400> 1235

000

<210> 1236

<400> 1236

000

<210> 1237

<400> 1237

000

<210> 1238

<400> 1238

000

<210> 1239

<400> 1239

000

<210> 1240

<400> 1240

000

<210> 1241

<400> 1241

000

<210> 1242

<400> 1242

000

<210> 1243

<400> 1243

000

<210> 1244

<400> 1244

000

<210> 1245

<400> 1245

000

<210> 1246

<400> 1246

000

<210> 1247

<400> 1247

000

<210> 1248

<400> 1248

000

<210> 1249

<400> 1249

000

<210> 1250

<400> 1250

000

<210> 1251

<400> 1251

000

<210> 1252

<400> 1252

000

<210> 1253

<400> 1253

000

<210> 1254

<400> 1254

000

<210> 1255

<400> 1255

000

<210> 1256

<400> 1256

000

<210> 1257

<400> 1257

000

<210> 1258

<400> 1258

000

<210> 1259

<400> 1259

000

<210> 1260

<400> 1260

000

<210> 1261

<400> 1261

000

<210> 1262

<400> 1262

000

<210> 1263

<400> 1263

000

<210> 1264

<400> 1264

000

<210> 1265

<400> 1265

000

<210> 1266

<400> 1266

000

<210> 1267

<400> 1267

000

<210> 1268

<400> 1268

000

<210> 1269

<400> 1269

000

<210> 1270

<400> 1270

000

<210> 1271

<400> 1271

000

<210> 1272

<400> 1272

000

<210> 1273

<400> 1273

000

<210> 1274

<400> 1274

000

<210> 1275

<400> 1275

000

<210> 1276

<400> 1276

000

<210> 1277

<400> 1277

000

<210> 1278

<400> 1278

000

<210> 1279

<400> 1279

000

<210> 1280

<400> 1280

000

<210> 1281

<400> 1281

000

<210> 1282

<400> 1282

000

<210> 1283

<400> 1283

000

<210> 1284

<400> 1284

000

<210> 1285

<400> 1285

000

<210> 1286

<400> 1286

000

<210> 1287

<400> 1287

000

<210> 1288

<400> 1288

000

<210> 1289

<400> 1289

000

<210> 1290

<400> 1290

000

<210> 1291

<400> 1291

000

<210> 1292

<400> 1292

000

<210> 1293

<400> 1293

000

<210> 1294

<400> 1294

000

<210> 1295

<400> 1295

000

<210> 1296

<400> 1296

000

<210> 1297

<400> 1297

000

<210> 1298

<400> 1298

000

<210> 1299

<400> 1299

000

<210> 1300

<400> 1300

000

<210> 1301

<400> 1301

000

<210> 1302

<400> 1302

000

<210> 1303

<400> 1303

000

<210> 1304

<400> 1304

000

<210> 1305

<400> 1305

000

<210> 1306

<400> 1306

000

<210> 1307

<400> 1307

000

<210> 1308

<400> 1308

000

<210> 1309

<400> 1309

000

<210> 1310

<400> 1310

000

<210> 1311

<400> 1311

000

<210> 1312

<400> 1312

000

<210> 1313

<400> 1313

000

<210> 1314

<400> 1314

000

<210> 1315

<400> 1315

000

<210> 1316

<400> 1316

000

<210> 1317

<400> 1317

000

<210> 1318

<400> 1318

000

<210> 1319

<400> 1319

000

<210> 1320

<400> 1320

000

<210> 1321

<400> 1321

000

<210> 1322

<400> 1322

000

<210> 1323

<400> 1323

000

<210> 1324

<400> 1324

000

<210> 1325

<400> 1325

000

<210> 1326

<400> 1326

000

<210> 1327

<400> 1327

000

<210> 1328

<400> 1328

000

<210> 1329

<400> 1329

000

<210> 1330

<400> 1330

000

<210> 1331

<400> 1331

000

<210> 1332

<400> 1332

000

<210> 1333

<400> 1333

000

<210> 1334

<400> 1334

000

<210> 1335

<400> 1335

000

<210> 1336

<400> 1336

000

<210> 1337

<400> 1337

000

<210> 1338

<400> 1338

000

<210> 1339

<400> 1339

000

<210> 1340

<400> 1340

000

<210> 1341

<400> 1341

000

<210> 1342

<400> 1342

000

<210> 1343

<400> 1343

000

<210> 1344

<400> 1344

000

<210> 1345

<400> 1345

000

<210> 1346

<400> 1346

000

<210> 1347

<400> 1347

000

<210> 1348

<400> 1348

000

<210> 1349

<400> 1349

000

<210> 1350

<400> 1350

000

<210> 1351

<400> 1351

000

<210> 1352

<400> 1352

000

<210> 1353

<400> 1353

000

<210> 1354

<400> 1354

000

<210> 1355

<400> 1355

000

<210> 1356

<400> 1356

000

<210> 1357

<400> 1357

000

<210> 1358

<400> 1358

000

<210> 1359

<400> 1359

000

<210> 1360

<400> 1360

000

<210> 1361

<400> 1361

000

<210> 1362

<400> 1362

000

<210> 1363

<400> 1363

000

<210> 1364

<400> 1364

000

<210> 1365

<400> 1365

000

<210> 1366

<400> 1366

000

<210> 1367

<400> 1367

000

<210> 1368

<400> 1368

000

<210> 1369

<400> 1369

000

<210> 1370

<400> 1370

000

<210> 1371

<400> 1371

000

<210> 1372

<400> 1372

000

<210> 1373

<400> 1373

000

<210> 1374

<400> 1374

000

<210> 1375

<400> 1375

000

<210> 1376

<400> 1376

000

<210> 1377

<400> 1377

000

<210> 1378

<400> 1378

000

<210> 1379

<400> 1379

000

<210> 1380

<400> 1380

000

<210> 1381

<400> 1381

000

<210> 1382

<400> 1382

000

<210> 1383

<400> 1383

000

<210> 1384

<400> 1384

000

<210> 1385

<400> 1385

000

<210> 1386

<400> 1386

000

<210> 1387

<400> 1387

000

<210> 1388

<400> 1388

000

<210> 1389

<400> 1389

000

<210> 1390

<400> 1390

000

<210> 1391

<400> 1391

000

<210> 1392

<400> 1392

000

<210> 1393

<400> 1393

000

<210> 1394

<400> 1394

000

<210> 1395

<400> 1395

000

<210> 1396

<400> 1396

000

<210> 1397

<400> 1397

000

<210> 1398

<400> 1398

000

<210> 1399

<400> 1399

000

<210> 1400

<400> 1400

000

<210> 1401

<400> 1401

000

<210> 1402

<400> 1402

000

<210> 1403

<400> 1403

000

<210> 1404

<400> 1404

000

<210> 1405

<400> 1405

000

<210> 1406

<400> 1406

000

<210> 1407

<400> 1407

000

<210> 1408

<400> 1408

000

<210> 1409

<400> 1409

000

<210> 1410

<400> 1410

000

<210> 1411

<400> 1411

000

<210> 1412

<400> 1412

000

<210> 1413

<400> 1413

000

<210> 1414

<400> 1414

000

<210> 1415

<400> 1415

000

<210> 1416

<400> 1416

000

<210> 1417

<400> 1417

000

<210> 1418

<400> 1418

000

<210> 1419

<400> 1419

000

<210> 1420

<400> 1420

000

<210> 1421

<400> 1421

000

<210> 1422

<400> 1422

000

<210> 1423

<400> 1423

000

<210> 1424

<400> 1424

000

<210> 1425

<400> 1425

000

<210> 1426

<400> 1426

000

<210> 1427

<400> 1427

000

<210> 1428

<400> 1428

000

<210> 1429

<400> 1429

000

<210> 1430

<400> 1430

000

<210> 1431

<400> 1431

000

<210> 1432

<400> 1432

000

<210> 1433

<400> 1433

000

<210> 1434

<400> 1434

000

<210> 1435

<400> 1435

000

<210> 1436

<400> 1436

000

<210> 1437

<400> 1437

000

<210> 1438

<400> 1438

000

<210> 1439

<400> 1439

000

<210> 1440

<400> 1440

000

<210> 1441

<400> 1441

000

<210> 1442

<400> 1442

000

<210> 1443

<400> 1443

000

<210> 1444

<400> 1444

000

<210> 1445

<400> 1445

000

<210> 1446

<400> 1446

000

<210> 1447

<400> 1447

000

<210> 1448

<400> 1448

000

<210> 1449

<400> 1449

000

<210> 1450

<400> 1450

000

<210> 1451

<400> 1451

000

<210> 1452

<400> 1452

000

<210> 1453

<400> 1453

000

<210> 1454

<400> 1454

000

<210> 1455

<400> 1455

000

<210> 1456

<400> 1456

000

<210> 1457

<400> 1457

000

<210> 1458

<400> 1458

000

<210> 1459

<400> 1459

000

<210> 1460

<400> 1460

000

<210> 1461

<400> 1461

000

<210> 1462

<400> 1462

000

<210> 1463

<400> 1463

000

<210> 1464

<400> 1464

000

<210> 1465

<400> 1465

000

<210> 1466

<400> 1466

000

<210> 1467

<400> 1467

000

<210> 1468

<400> 1468

000

<210> 1469

<400> 1469

000

<210> 1470

<400> 1470

000

<210> 1471

<400> 1471

000

<210> 1472

<400> 1472

000

<210> 1473

<400> 1473

000

<210> 1474

<400> 1474

000

<210> 1475

<400> 1475

000

<210> 1476

<400> 1476

000

<210> 1477

<400> 1477

000

<210> 1478

<400> 1478

000

<210> 1479

<400> 1479

000

<210> 1480

<400> 1480

000

<210> 1481

<400> 1481

000

<210> 1482

<400> 1482

000

<210> 1483

<400> 1483

000

<210> 1484

<400> 1484

000

<210> 1485

<400> 1485

000

<210> 1486

<400> 1486

000

<210> 1487

<400> 1487

000

<210> 1488

<400> 1488

000

<210> 1489

<400> 1489

000

<210> 1490

<400> 1490

000

<210> 1491

<400> 1491

000

<210> 1492

<400> 1492

000

<210> 1493

<400> 1493

000

<210> 1494

<400> 1494

000

<210> 1495

<400> 1495

000

<210> 1496

<400> 1496

000

<210> 1497

<400> 1497

000

<210> 1498

<400> 1498

000

<210> 1499

<400> 1499

000

<210> 1500

<400> 1500

000

<210> 1501

<400> 1501

000

<210> 1502

<400> 1502

000

<210> 1503

<400> 1503

000

<210> 1504

<400> 1504

000

<210> 1505

<400> 1505

000

<210> 1506

<400> 1506

000

<210> 1507

<400> 1507

000

<210> 1508

<400> 1508

000

<210> 1509

<400> 1509

000

<210> 1510

<400> 1510

000

<210> 1511

<400> 1511

000

<210> 1512

<400> 1512

000

<210> 1513

<400> 1513

000

<210> 1514

<400> 1514

000

<210> 1515

<400> 1515

000

<210> 1516

<400> 1516

000

<210> 1517

<400> 1517

000

<210> 1518

<400> 1518

000

<210> 1519

<400> 1519

000

<210> 1520

<400> 1520

000

<210> 1521

<400> 1521

000

<210> 1522

<400> 1522

000

<210> 1523

<400> 1523

000

<210> 1524

<400> 1524

000

<210> 1525

<400> 1525

000

<210> 1526

<400> 1526

000

<210> 1527

<400> 1527

000

<210> 1528

<400> 1528

000

<210> 1529

<400> 1529

000

<210> 1530

<400> 1530

000

<210> 1531

<400> 1531

000

<210> 1532

<400> 1532

000

<210> 1533

<400> 1533

000

<210> 1534

<400> 1534

000

<210> 1535

<400> 1535

000

<210> 1536

<400> 1536

000

<210> 1537

<400> 1537

000

<210> 1538

<400> 1538

000

<210> 1539

<400> 1539

000

<210> 1540

<400> 1540

000

<210> 1541

<400> 1541

000

<210> 1542

<400> 1542

000

<210> 1543

<400> 1543

000

<210> 1544

<400> 1544

000

<210> 1545

<400> 1545

000

<210> 1546

<400> 1546

000

<210> 1547

<400> 1547

000

<210> 1548

<400> 1548

000

<210> 1549

<400> 1549

000

<210> 1550

<400> 1550

000

<210> 1551

<400> 1551

000

<210> 1552

<400> 1552

000

<210> 1553

<400> 1553

000

<210> 1554

<400> 1554

000

<210> 1555

<400> 1555

000

<210> 1556

<400> 1556

000

<210> 1557

<400> 1557

000

<210> 1558

<400> 1558

000

<210> 1559

<400> 1559

000

<210> 1560

<400> 1560

000

<210> 1561

<400> 1561

000

<210> 1562

<400> 1562

000

<210> 1563

<400> 1563

000

<210> 1564

<400> 1564

000

<210> 1565

<400> 1565

000

<210> 1566

<400> 1566

000

<210> 1567

<400> 1567

000

<210> 1568

<400> 1568

000

<210> 1569

<400> 1569

000

<210> 1570

<400> 1570

000

<210> 1571

<400> 1571

000

<210> 1572

<400> 1572

000

<210> 1573

<400> 1573

000

<210> 1574

<400> 1574

000

<210> 1575

<400> 1575

000

<210> 1576

<400> 1576

000

<210> 1577

<400> 1577

000

<210> 1578

<400> 1578

000

<210> 1579

<400> 1579

000

<210> 1580

<400> 1580

000

<210> 1581

<400> 1581

000

<210> 1582

<400> 1582

000

<210> 1583

<400> 1583

000

<210> 1584

<400> 1584

000

<210> 1585

<400> 1585

000

<210> 1586

<400> 1586

000

<210> 1587

<400> 1587

000

<210> 1588

<400> 1588

000

<210> 1589

<400> 1589

000

<210> 1590

<400> 1590

000

<210> 1591

<400> 1591

000

<210> 1592

<400> 1592

000

<210> 1593

<400> 1593

000

<210> 1594

<400> 1594

000

<210> 1595

<400> 1595

000

<210> 1596

<400> 1596

000

<210> 1597

<400> 1597

000

<210> 1598

<400> 1598

000

<210> 1599

<400> 1599

000

<210> 1600

<400> 1600

000

<210> 1601

<400> 1601

000

<210> 1602

<400> 1602

000

<210> 1603

<400> 1603

000

<210> 1604

<400> 1604

000

<210> 1605

<400> 1605

000

<210> 1606

<400> 1606

000

<210> 1607

<400> 1607

000

<210> 1608

<400> 1608

000

<210> 1609

<400> 1609

000

<210> 1610

<400> 1610

000

<210> 1611

<400> 1611

000

<210> 1612

<400> 1612

000

<210> 1613

<400> 1613

000

<210> 1614

<400> 1614

000

<210> 1615

<400> 1615

000

<210> 1616

<400> 1616

000

<210> 1617

<400> 1617

000

<210> 1618

<400> 1618

000

<210> 1619

<400> 1619

000

<210> 1620

<400> 1620

000

<210> 1621

<400> 1621

000

<210> 1622

<400> 1622

000

<210> 1623

<400> 1623

000

<210> 1624

<400> 1624

000

<210> 1625

<400> 1625

000

<210> 1626

<400> 1626

000

<210> 1627

<400> 1627

000

<210> 1628

<400> 1628

000

<210> 1629

<400> 1629

000

<210> 1630

<400> 1630

000

<210> 1631

<400> 1631

000

<210> 1632

<400> 1632

000

<210> 1633

<400> 1633

000

<210> 1634

<400> 1634

000

<210> 1635

<400> 1635

000

<210> 1636

<400> 1636

000

<210> 1637

<400> 1637

000

<210> 1638

<400> 1638

000

<210> 1639

<400> 1639

000

<210> 1640

<400> 1640

000

<210> 1641

<400> 1641

000

<210> 1642

<400> 1642

000

<210> 1643

<400> 1643

000

<210> 1644

<400> 1644

000

<210> 1645

<400> 1645

000

<210> 1646

<400> 1646

000

<210> 1647

<400> 1647

000

<210> 1648

<400> 1648

000

<210> 1649

<400> 1649

000

<210> 1650

<400> 1650

000

<210> 1651

<400> 1651

000

<210> 1652

<400> 1652

000

<210> 1653

<400> 1653

000

<210> 1654

<400> 1654

000

<210> 1655

<400> 1655

000

<210> 1656

<400> 1656

000

<210> 1657

<400> 1657

000

<210> 1658

<400> 1658

000

<210> 1659

<400> 1659

000

<210> 1660

<400> 1660

000

<210> 1661

<400> 1661

000

<210> 1662

<400> 1662

000

<210> 1663

<400> 1663

000

<210> 1664

<400> 1664

000

<210> 1665

<400> 1665

000

<210> 1666

<400> 1666

000

<210> 1667

<400> 1667

000

<210> 1668

<400> 1668

000

<210> 1669

<400> 1669

000

<210> 1670

<400> 1670

000

<210> 1671

<400> 1671

000

<210> 1672

<400> 1672

000

<210> 1673

<400> 1673

000

<210> 1674

<400> 1674

000

<210> 1675

<400> 1675

000

<210> 1676

<400> 1676

000

<210> 1677

<400> 1677

000

<210> 1678

<400> 1678

000

<210> 1679

<400> 1679

000

<210> 1680

<400> 1680

000

<210> 1681

<400> 1681

000

<210> 1682

<400> 1682

000

<210> 1683

<400> 1683

000

<210> 1684

<400> 1684

000

<210> 1685

<400> 1685

000

<210> 1686

<400> 1686

000

<210> 1687

<400> 1687

000

<210> 1688

<400> 1688

000

<210> 1689

<400> 1689

000

<210> 1690

<400> 1690

000

<210> 1691

<400> 1691

000

<210> 1692

<400> 1692

000

<210> 1693

<400> 1693

000

<210> 1694

<400> 1694

000

<210> 1695

<400> 1695

000

<210> 1696

<400> 1696

000

<210> 1697

<400> 1697

000

<210> 1698

<400> 1698

000

<210> 1699

<400> 1699

000

<210> 1700

<400> 1700

000

<210> 1701

<400> 1701

000

<210> 1702

<400> 1702

000

<210> 1703

<400> 1703

000

<210> 1704

<400> 1704

000

<210> 1705

<400> 1705

000

<210> 1706

<400> 1706

000

<210> 1707

<400> 1707

000

<210> 1708

<400> 1708

000

<210> 1709

<400> 1709

000

<210> 1710

<400> 1710

000

<210> 1711

<400> 1711

000

<210> 1712

<400> 1712

000

<210> 1713

<400> 1713

000

<210> 1714

<400> 1714

000

<210> 1715

<400> 1715

000

<210> 1716

<400> 1716

000

<210> 1717

<400> 1717

000

<210> 1718

<400> 1718

000

<210> 1719

<400> 1719

000

<210> 1720

<400> 1720

000

<210> 1721

<400> 1721

000

<210> 1722

<400> 1722

000

<210> 1723

<400> 1723

000

<210> 1724

<400> 1724

000

<210> 1725

<400> 1725

000

<210> 1726

<400> 1726

000

<210> 1727

<400> 1727

000

<210> 1728

<400> 1728

000

<210> 1729

<400> 1729

000

<210> 1730

<400> 1730

000

<210> 1731

<400> 1731

000

<210> 1732

<400> 1732

000

<210> 1733

<400> 1733

000

<210> 1734

<400> 1734

000

<210> 1735

<400> 1735

000

<210> 1736

<400> 1736

000

<210> 1737

<400> 1737

000

<210> 1738

<400> 1738

000

<210> 1739

<400> 1739

000

<210> 1740

<400> 1740

000

<210> 1741

<400> 1741

000

<210> 1742

<400> 1742

000

<210> 1743

<400> 1743

000

<210> 1744

<400> 1744

000

<210> 1745

<400> 1745

000

<210> 1746

<400> 1746

000

<210> 1747

<400> 1747

000

<210> 1748

<400> 1748

000

<210> 1749

<400> 1749

000

<210> 1750

<400> 1750

000

<210> 1751

<400> 1751

000

<210> 1752

<400> 1752

000

<210> 1753

<400> 1753

000

<210> 1754

<400> 1754

000

<210> 1755

<400> 1755

000

<210> 1756

<400> 1756

000

<210> 1757

<400> 1757

000

<210> 1758

<400> 1758

000

<210> 1759

<400> 1759

000

<210> 1760

<400> 1760

000

<210> 1761

<400> 1761

000

<210> 1762

<400> 1762

000

<210> 1763

<400> 1763

000

<210> 1764

<400> 1764

000

<210> 1765

<400> 1765

000

<210> 1766

<400> 1766

000

<210> 1767

<400> 1767

000

<210> 1768

<400> 1768

000

<210> 1769

<400> 1769

000

<210> 1770

<400> 1770

000

<210> 1771

<400> 1771

000

<210> 1772

<400> 1772

000

<210> 1773

<400> 1773

000

<210> 1774

<400> 1774

000

<210> 1775

<400> 1775

000

<210> 1776

<400> 1776

000

<210> 1777

<400> 1777

000

<210> 1778

<400> 1778

000

<210> 1779

<400> 1779

000

<210> 1780

<400> 1780

000

<210> 1781

<400> 1781

000

<210> 1782

<400> 1782

000

<210> 1783

<400> 1783

000

<210> 1784

<400> 1784

000

<210> 1785

<400> 1785

000

<210> 1786

<400> 1786

000

<210> 1787

<400> 1787

000

<210> 1788

<400> 1788

000

<210> 1789

<400> 1789

000

<210> 1790

<400> 1790

000

<210> 1791

<400> 1791

000

<210> 1792

<400> 1792

000

<210> 1793

<400> 1793

000

<210> 1794

<400> 1794

000

<210> 1795

<400> 1795

000

<210> 1796

<400> 1796

000

<210> 1797

<400> 1797

000

<210> 1798

<400> 1798

000

<210> 1799

<400> 1799

000

<210> 1800

<400> 1800

000

<210> 1801

<400> 1801

000

<210> 1802

<400> 1802

000

<210> 1803

<400> 1803

000

<210> 1804

<400> 1804

000

<210> 1805

<400> 1805

000

<210> 1806

<400> 1806

000

<210> 1807

<400> 1807

000

<210> 1808

<400> 1808

000

<210> 1809

<400> 1809

000

<210> 1810

<400> 1810

000

<210> 1811

<400> 1811

000

<210> 1812

<400> 1812

000

<210> 1813

<400> 1813

000

<210> 1814

<400> 1814

000

<210> 1815

<400> 1815

000

<210> 1816

<400> 1816

000

<210> 1817

<400> 1817

000

<210> 1818

<400> 1818

000

<210> 1819

<400> 1819

000

<210> 1820

<400> 1820

000

<210> 1821

<400> 1821

000

<210> 1822

<400> 1822

000

<210> 1823

<400> 1823

000

<210> 1824

<400> 1824

000

<210> 1825

<400> 1825

000

<210> 1826

<400> 1826

000

<210> 1827

<400> 1827

000

<210> 1828

<400> 1828

000

<210> 1829

<400> 1829

000

<210> 1830

<400> 1830

000

<210> 1831

<400> 1831

000

<210> 1832

<400> 1832

000

<210> 1833

<400> 1833

000

<210> 1834

<400> 1834

000

<210> 1835

<400> 1835

000

<210> 1836

<400> 1836

000

<210> 1837

<400> 1837

000

<210> 1838

<400> 1838

000

<210> 1839

<400> 1839

000

<210> 1840

<400> 1840

000

<210> 1841

<400> 1841

000

<210> 1842

<400> 1842

000

<210> 1843

<400> 1843

000

<210> 1844

<400> 1844

000

<210> 1845

<400> 1845

000

<210> 1846

<400> 1846

000

<210> 1847

<400> 1847

000

<210> 1848

<400> 1848

000

<210> 1849

<400> 1849

000

<210> 1850

<400> 1850

000

<210> 1851

<400> 1851

000

<210> 1852

<400> 1852

000

<210> 1853

<400> 1853

000

<210> 1854

<400> 1854

000

<210> 1855

<400> 1855

000

<210> 1856

<400> 1856

000

<210> 1857

<400> 1857

000

<210> 1858

<400> 1858

000

<210> 1859

<400> 1859

000

<210> 1860

<400> 1860

000

<210> 1861

<400> 1861

000

<210> 1862

<400> 1862

000

<210> 1863

<400> 1863

000

<210> 1864

<400> 1864

000

<210> 1865

<400> 1865

000

<210> 1866

<400> 1866

000

<210> 1867

<400> 1867

000

<210> 1868

<400> 1868

000

<210> 1869

<400> 1869

000

<210> 1870

<400> 1870

000

<210> 1871

<400> 1871

000

<210> 1872

<400> 1872

000

<210> 1873

<400> 1873

000

<210> 1874

<400> 1874

000

<210> 1875

<400> 1875

000

<210> 1876

<400> 1876

000

<210> 1877

<400> 1877

000

<210> 1878

<400> 1878

000

<210> 1879

<400> 1879

000

<210> 1880

<400> 1880

000

<210> 1881

<400> 1881

000

<210> 1882

<400> 1882

000

<210> 1883

<400> 1883

000

<210> 1884

<400> 1884

000

<210> 1885

<400> 1885

000

<210> 1886

<400> 1886

000

<210> 1887

<400> 1887

000

<210> 1888

<400> 1888

000

<210> 1889

<400> 1889

000

<210> 1890

<400> 1890

000

<210> 1891

<400> 1891

000

<210> 1892

<400> 1892

000

<210> 1893

<400> 1893

000

<210> 1894

<400> 1894

000

<210> 1895

<400> 1895

000

<210> 1896

<400> 1896

000

<210> 1897

<400> 1897

000

<210> 1898

<400> 1898

000

<210> 1899

<400> 1899

000

<210> 1900

<400> 1900

000

<210> 1901

<400> 1901

000

<210> 1902

<400> 1902

000

<210> 1903

<400> 1903

000

<210> 1904

<400> 1904

000

<210> 1905

<400> 1905

000

<210> 1906

<400> 1906

000

<210> 1907

<400> 1907

000

<210> 1908

<400> 1908

000

<210> 1909

<400> 1909

000

<210> 1910

<400> 1910

000

<210> 1911

<400> 1911

000

<210> 1912

<400> 1912

000

<210> 1913

<400> 1913

000

<210> 1914

<400> 1914

000

<210> 1915

<400> 1915

000

<210> 1916

<400> 1916

000

<210> 1917

<400> 1917

000

<210> 1918

<400> 1918

000

<210> 1919

<400> 1919

000

<210> 1920

<400> 1920

000

<210> 1921

<400> 1921

000

<210> 1922

<400> 1922

000

<210> 1923

<400> 1923

000

<210> 1924

<400> 1924

000

<210> 1925

<400> 1925

000

<210> 1926

<400> 1926

000

<210> 1927

<400> 1927

000

<210> 1928

<400> 1928

000

<210> 1929

<400> 1929

000

<210> 1930

<400> 1930

000

<210> 1931

<400> 1931

000

<210> 1932

<400> 1932

000

<210> 1933

<400> 1933

000

<210> 1934

<400> 1934

000

<210> 1935

<400> 1935

000

<210> 1936

<400> 1936

000

<210> 1937

<400> 1937

000

<210> 1938

<400> 1938

000

<210> 1939

<400> 1939

000

<210> 1940

<400> 1940

000

<210> 1941

<400> 1941

000

<210> 1942

<400> 1942

000

<210> 1943

<400> 1943

000

<210> 1944

<400> 1944

000

<210> 1945

<400> 1945

000

<210> 1946

<400> 1946

000

<210> 1947

<400> 1947

000

<210> 1948

<400> 1948

000

<210> 1949

<400> 1949

000

<210> 1950

<400> 1950

000

<210> 1951

<400> 1951

000

<210> 1952

<400> 1952

000

<210> 1953

<400> 1953

000

<210> 1954

<400> 1954

000

<210> 1955

<400> 1955

000

<210> 1956

<400> 1956

000

<210> 1957

<400> 1957

000

<210> 1958

<400> 1958

000

<210> 1959

<400> 1959

000

<210> 1960

<400> 1960

000

<210> 1961

<400> 1961

000

<210> 1962

<400> 1962

000

<210> 1963

<400> 1963

000

<210> 1964

<400> 1964

000

<210> 1965

<400> 1965

000

<210> 1966

<400> 1966

000

<210> 1967

<400> 1967

000

<210> 1968

<400> 1968

000

<210> 1969

<400> 1969

000

<210> 1970

<400> 1970

000

<210> 1971

<400> 1971

000

<210> 1972

<400> 1972

000

<210> 1973

<400> 1973

000

<210> 1974

<400> 1974

000

<210> 1975

<400> 1975

000

<210> 1976

<400> 1976

000

<210> 1977

<400> 1977

000

<210> 1978

<400> 1978

000

<210> 1979

<400> 1979

000

<210> 1980

<400> 1980

000

<210> 1981

<400> 1981

000

<210> 1982

<400> 1982

000

<210> 1983

<400> 1983

000

<210> 1984

<400> 1984

000

<210> 1985

<400> 1985

000

<210> 1986

<400> 1986

000

<210> 1987

<400> 1987

000

<210> 1988

<400> 1988

000

<210> 1989

<400> 1989

000

<210> 1990

<400> 1990

000

<210> 1991

<400> 1991

000

<210> 1992

<400> 1992

000

<210> 1993

<400> 1993

000

<210> 1994

<400> 1994

000

<210> 1995

<400> 1995

000

<210> 1996

<400> 1996

000

<210> 1997

<400> 1997

000

<210> 1998

<400> 1998

000

<210> 1999

<400> 1999

000

<210> 2000

<400> 2000

000

<210> 2001

<211> 9

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 33 - VH CDR1

<400> 2001

Gly Thr Phe Gly Asn Tyr Ala Ile Ser

1 5

<210> 2002

<211> 17

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 33 - VH CDR2

<400> 2002

Gly Ile Ile Pro Ile Pro Gly Ile Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe Gln

1 5 10 15

Gly

<210> 2003

<211> 16

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 33 - VH CDR3

<400> 2003

Ala Arg Asp Thr Gly Arg Gly Tyr Thr Arg His Phe Trp Phe Asp Pro

1 5 10 15

<210> 2004

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 33 - VL CDR1

<400> 2004

Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr Leu Asn

1 5 10

<210> 2005

<211> 7

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 33 - VL CDR2

<400> 2005

Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser

1 5

<210> 2006

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 33 - VL CDR3

<400> 2006

Gln Gln Ser Asp Ile Leu Tyr Thr

1 5

<210> 2007

<211> 26

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 33 - VH FR1

<400> 2007

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly

20 25

<210> 2008

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 33 - VH FR2

<400> 2008

Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met Gly

1 5 10

<210> 2009

<211> 30

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 33 - VH FR3

<400> 2009

Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr Met Glu

1 5 10 15

Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

20 25 30

<210> 2010

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 33 - VH FR4

<400> 2010

Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

1 5 10

<210> 2011

<211> 369

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 33 - VH ДНК

<400> 2011

caggtgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60

tcctgcaagg cttctggagg caccttcgga aactatgcta tcagctgggt gcgacaggcc 120

cctggacaag ggcttgagtg gatgggaggg atcatcccta tcccaggtat cgcaaactac 180

gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg aatccacgag cacagcctac 240

atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggcggtgt actactgcgc cagagacacg 300

ggacggggat acaccagaca cttctggttt gacccctggg gacagggtac attggtcacc 360

gtctcctca 369

<210> 2012

<211> 123

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 33 - VH Белка

<400> 2012

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Gly Asn Tyr

20 25 30

Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Gly Ile Ile Pro Ile Pro Gly Ile Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Asp Thr Gly Arg Gly Tyr Thr Arg His Phe Trp Phe Asp Pro

100 105 110

Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 2013

<211> 23

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 33 - VL FR1

<400> 2013

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys

20

<210> 2014

<211> 15

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 33 - VL FR2

<400> 2014

Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr

1 5 10 15

<210> 2015

<211> 32

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 33 - VL FR3

<400> 2015

Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr

1 5 10 15

Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys

20 25 30

<210> 2016

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 33 - VL FR4

<400> 2016

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

1 5 10

<210> 2017

<211> 318

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 33 - VL ДНК

<400> 2017

gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60

atcacttgcc gggcaagtca gagcattagc agctatttaa attggtatca gcagaaacca 120

gggaaagccc ctaagctcct gatctatgct gcatccagtt tgcaaagtgg ggtcccatca 180

aggttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240

gaagattttg caacttacta ctgtcagcaa agcgacatcc tctacacttt tggcggaggg 300

accaaggttg agatcaaa 318

<210> 2018

<211> 106

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 33 - VL Белка

<400> 2018

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Asp Ile Leu Tyr Thr

85 90 95

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210> 2019

<400> 2019

000

<210> 2020

<400> 2020

000

<210> 2021

<400> 2021

000

<210> 2022

<400> 2022

000

<210> 2023

<400> 2023

000

<210> 2024

<400> 2024

000

<210> 2025

<400> 2025

000

<210> 2026

<400> 2026

000

<210> 2027

<400> 2027

000

<210> 2028

<400> 2028

000

<210> 2029

<400> 2029

000

<210> 2030

<400> 2030

000

<210> 2031

<400> 2031

000

<210> 2032

<400> 2032

000

<210> 2033

<400> 2033

000

<210> 2034

<400> 2034

000

<210> 2035

<400> 2035

000

<210> 2036

<400> 2036

000

<210> 2037

<400> 2037

000

<210> 2038

<400> 2038

000

<210> 2039

<400> 2039

000

<210> 2040

<400> 2040

000

<210> 2041

<400> 2041

000

<210> 2042

<400> 2042

000

<210> 2043

<400> 2043

000

<210> 2044

<400> 2044

000

<210> 2045

<400> 2045

000

<210> 2046

<400> 2046

000

<210> 2047

<400> 2047

000

<210> 2048

<400> 2048

000

<210> 2049

<400> 2049

000

<210> 2050

<400> 2050

000

<210> 2051

<400> 2051

000

<210> 2052

<400> 2052

000

<210> 2053

<400> 2053

000

<210> 2054

<400> 2054

000

<210> 2055

<400> 2055

000

<210> 2056

<400> 2056

000

<210> 2057

<400> 2057

000

<210> 2058

<400> 2058

000

<210> 2059

<400> 2059

000

<210> 2060

<400> 2060

000

<210> 2061

<400> 2061

000

<210> 2062

<400> 2062

000

<210> 2063

<400> 2063

000

<210> 2064

<400> 2064

000

<210> 2065

<400> 2065

000

<210> 2066

<400> 2066

000

<210> 2067

<400> 2067

000

<210> 2068

<400> 2068

000

<210> 2069

<400> 2069

000

<210> 2070

<400> 2070

000

<210> 2071

<400> 2071

000

<210> 2072

<400> 2072

000

<210> 2073

<400> 2073

000

<210> 2074

<400> 2074

000

<210> 2075

<400> 2075

000

<210> 2076

<400> 2076

000

<210> 2077

<400> 2077

000

<210> 2078

<400> 2078

000

<210> 2079

<400> 2079

000

<210> 2080

<400> 2080

000

<210> 2081

<400> 2081

000

<210> 2082

<400> 2082

000

<210> 2083

<400> 2083

000

<210> 2084

<400> 2084

000

<210> 2085

<400> 2085

000

<210> 2086

<400> 2086

000

<210> 2087

<400> 2087

000

<210> 2088

<400> 2088

000

<210> 2089

<400> 2089

000

<210> 2090

<400> 2090

000

<210> 2091

<400> 2091

000

<210> 2092

<400> 2092

000

<210> 2093

<400> 2093

000

<210> 2094

<400> 2094

000

<210> 2095

<400> 2095

000

<210> 2096

<400> 2096

000

<210> 2097

<400> 2097

000

<210> 2098

<400> 2098

000

<210> 2099

<400> 2099

000

<210> 2100

<400> 2100

000

<210> 2101

<400> 2101

000

<210> 2102

<400> 2102

000

<210> 2103

<400> 2103

000

<210> 2104

<400> 2104

000

<210> 2105

<400> 2105

000

<210> 2106

<400> 2106

000

<210> 2107

<400> 2107

000

<210> 2108

<400> 2108

000

<210> 2109

<400> 2109

000

<210> 2110

<400> 2110

000

<210> 2111

<400> 2111

000

<210> 2112

<400> 2112

000

<210> 2113

<400> 2113

000

<210> 2114

<400> 2114

000

<210> 2115

<400> 2115

000

<210> 2116

<400> 2116

000

<210> 2117

<400> 2117

000

<210> 2118

<400> 2118

000

<210> 2119

<400> 2119

000

<210> 2120

<400> 2120

000

<210> 2121

<400> 2121

000

<210> 2122

<400> 2122

000

<210> 2123

<400> 2123

000

<210> 2124

<400> 2124

000

<210> 2125

<400> 2125

000

<210> 2126

<400> 2126

000

<210> 2127

<400> 2127

000

<210> 2128

<400> 2128

000

<210> 2129

<400> 2129

000

<210> 2130

<400> 2130

000

<210> 2131

<400> 2131

000

<210> 2132

<400> 2132

000

<210> 2133

<400> 2133

000

<210> 2134

<400> 2134

000

<210> 2135

<400> 2135

000

<210> 2136

<400> 2136

000

<210> 2137

<400> 2137

000

<210> 2138

<400> 2138

000

<210> 2139

<400> 2139

000

<210> 2140

<400> 2140

000

<210> 2141

<400> 2141

000

<210> 2142

<400> 2142

000

<210> 2143

<400> 2143

000

<210> 2144

<400> 2144

000

<210> 2145

<400> 2145

000

<210> 2146

<400> 2146

000

<210> 2147

<400> 2147

000

<210> 2148

<400> 2148

000

<210> 2149

<400> 2149

000

<210> 2150

<400> 2150

000

<210> 2151

<400> 2151

000

<210> 2152

<400> 2152

000

<210> 2153

<400> 2153

000

<210> 2154

<400> 2154

000

<210> 2155

<400> 2155

000

<210> 2156

<400> 2156

000

<210> 2157

<400> 2157

000

<210> 2158

<400> 2158

000

<210> 2159

<400> 2159

000

<210> 2160

<400> 2160

000

<210> 2161

<400> 2161

000

<210> 2162

<400> 2162

000

<210> 2163

<400> 2163

000

<210> 2164

<400> 2164

000

<210> 2165

<400> 2165

000

<210> 2166

<400> 2166

000

<210> 2167

<400> 2167

000

<210> 2168

<400> 2168

000

<210> 2169

<400> 2169

000

<210> 2170

<400> 2170

000

<210> 2171

<400> 2171

000

<210> 2172

<400> 2172

000

<210> 2173

<400> 2173

000

<210> 2174

<400> 2174

000

<210> 2175

<400> 2175

000

<210> 2176

<400> 2176

000

<210> 2177

<400> 2177

000

<210> 2178

<400> 2178

000

<210> 2179

<400> 2179

000

<210> 2180

<400> 2180

000

<210> 2181

<400> 2181

000

<210> 2182

<400> 2182

000

<210> 2183

<400> 2183

000

<210> 2184

<400> 2184

000

<210> 2185

<400> 2185

000

<210> 2186

<400> 2186

000

<210> 2187

<400> 2187

000

<210> 2188

<400> 2188

000

<210> 2189

<400> 2189

000

<210> 2190

<400> 2190

000

<210> 2191

<400> 2191

000

<210> 2192

<400> 2192

000

<210> 2193

<400> 2193

000

<210> 2194

<400> 2194

000

<210> 2195

<400> 2195

000

<210> 2196

<400> 2196

000

<210> 2197

<400> 2197

000

<210> 2198

<400> 2198

000

<210> 2199

<400> 2199

000

<210> 2200

<400> 2200

000

<210> 2201

<400> 2201

000

<210> 2202

<400> 2202

000

<210> 2203

<400> 2203

000

<210> 2204

<400> 2204

000

<210> 2205

<400> 2205

000

<210> 2206

<400> 2206

000

<210> 2207

<400> 2207

000

<210> 2208

<400> 2208

000

<210> 2209

<400> 2209

000

<210> 2210

<400> 2210

000

<210> 2211

<400> 2211

000

<210> 2212

<400> 2212

000

<210> 2213

<400> 2213

000

<210> 2214

<400> 2214

000

<210> 2215

<400> 2215

000

<210> 2216

<400> 2216

000

<210> 2217

<400> 2217

000

<210> 2218

<400> 2218

000

<210> 2219

<400> 2219

000

<210> 2220

<400> 2220

000

<210> 2221

<400> 2221

000

<210> 2222

<400> 2222

000

<210> 2223

<400> 2223

000

<210> 2224

<400> 2224

000

<210> 2225

<400> 2225

000

<210> 2226

<400> 2226

000

<210> 2227

<400> 2227

000

<210> 2228

<400> 2228

000

<210> 2229

<400> 2229

000

<210> 2230

<400> 2230

000

<210> 2231

<400> 2231

000

<210> 2232

<400> 2232

000

<210> 2233

<400> 2233

000

<210> 2234

<400> 2234

000

<210> 2235

<400> 2235

000

<210> 2236

<400> 2236

000

<210> 2237

<400> 2237

000

<210> 2238

<400> 2238

000

<210> 2239

<400> 2239

000

<210> 2240

<400> 2240

000

<210> 2241

<400> 2241

000

<210> 2242

<400> 2242

000

<210> 2243

<400> 2243

000

<210> 2244

<400> 2244

000

<210> 2245

<400> 2245

000

<210> 2246

<400> 2246

000

<210> 2247

<400> 2247

000

<210> 2248

<400> 2248

000

<210> 2249

<400> 2249

000

<210> 2250

<400> 2250

000

<210> 2251

<400> 2251

000

<210> 2252

<400> 2252

000

<210> 2253

<400> 2253

000

<210> 2254

<400> 2254

000

<210> 2255

<400> 2255

000

<210> 2256

<400> 2256

000

<210> 2257

<400> 2257

000

<210> 2258

<400> 2258

000

<210> 2259

<400> 2259

000

<210> 2260

<400> 2260

000

<210> 2261

<400> 2261

000

<210> 2262

<400> 2262

000

<210> 2263

<400> 2263

000

<210> 2264

<400> 2264

000

<210> 2265

<400> 2265

000

<210> 2266

<400> 2266

000

<210> 2267

<400> 2267

000

<210> 2268

<400> 2268

000

<210> 2269

<400> 2269

000

<210> 2270

<400> 2270

000

<210> 2271

<400> 2271

000

<210> 2272

<400> 2272

000

<210> 2273

<400> 2273

000

<210> 2274

<400> 2274

000

<210> 2275

<400> 2275

000

<210> 2276

<400> 2276

000

<210> 2277

<400> 2277

000

<210> 2278

<400> 2278

000

<210> 2279

<400> 2279

000

<210> 2280

<400> 2280

000

<210> 2281

<400> 2281

000

<210> 2282

<400> 2282

000

<210> 2283

<400> 2283

000

<210> 2284

<400> 2284

000

<210> 2285

<400> 2285

000

<210> 2286

<400> 2286

000

<210> 2287

<400> 2287

000

<210> 2288

<400> 2288

000

<210> 2289

<400> 2289

000

<210> 2290

<400> 2290

000

<210> 2291

<400> 2291

000

<210> 2292

<400> 2292

000

<210> 2293

<400> 2293

000

<210> 2294

<400> 2294

000

<210> 2295

<400> 2295

000

<210> 2296

<400> 2296

000

<210> 2297

<400> 2297

000

<210> 2298

<400> 2298

000

<210> 2299

<400> 2299

000

<210> 2300

<400> 2300

000

<210> 2301

<400> 2301

000

<210> 2302

<400> 2302

000

<210> 2303

<400> 2303

000

<210> 2304

<400> 2304

000

<210> 2305

<400> 2305

000

<210> 2306

<400> 2306

000

<210> 2307

<400> 2307

000

<210> 2308

<400> 2308

000

<210> 2309

<400> 2309

000

<210> 2310

<400> 2310

000

<210> 2311

<400> 2311

000

<210> 2312

<400> 2312

000

<210> 2313

<400> 2313

000

<210> 2314

<400> 2314

000

<210> 2315

<400> 2315

000

<210> 2316

<400> 2316

000

<210> 2317

<400> 2317

000

<210> 2318

<400> 2318

000

<210> 2319

<400> 2319

000

<210> 2320

<400> 2320

000

<210> 2321

<400> 2321

000

<210> 2322

<400> 2322

000

<210> 2323

<400> 2323

000

<210> 2324

<400> 2324

000

<210> 2325

<400> 2325

000

<210> 2326

<400> 2326

000

<210> 2327

<400> 2327

000

<210> 2328

<400> 2328

000

<210> 2329

<400> 2329

000

<210> 2330

<400> 2330

000

<210> 2331

<400> 2331

000

<210> 2332

<400> 2332

000

<210> 2333

<400> 2333

000

<210> 2334

<400> 2334

000

<210> 2335

<400> 2335

000

<210> 2336

<400> 2336

000

<210> 2337

<400> 2337

000

<210> 2338

<400> 2338

000

<210> 2339

<400> 2339

000

<210> 2340

<400> 2340

000

<210> 2341

<400> 2341

000

<210> 2342

<400> 2342

000

<210> 2343

<400> 2343

000

<210> 2344

<400> 2344

000

<210> 2345

<400> 2345

000

<210> 2346

<400> 2346

000

<210> 2347

<400> 2347

000

<210> 2348

<400> 2348

000

<210> 2349

<400> 2349

000

<210> 2350

<400> 2350

000

<210> 2351

<400> 2351

000

<210> 2352

<400> 2352

000

<210> 2353

<400> 2353

000

<210> 2354

<400> 2354

000

<210> 2355

<400> 2355

000

<210> 2356

<400> 2356

000

<210> 2357

<400> 2357

000

<210> 2358

<400> 2358

000

<210> 2359

<400> 2359

000

<210> 2360

<400> 2360

000

<210> 2361

<400> 2361

000

<210> 2362

<400> 2362

000

<210> 2363

<400> 2363

000

<210> 2364

<400> 2364

000

<210> 2365

<400> 2365

000

<210> 2366

<400> 2366

000

<210> 2367

<400> 2367

000

<210> 2368

<400> 2368

000

<210> 2369

<400> 2369

000

<210> 2370

<400> 2370

000

<210> 2371

<400> 2371

000

<210> 2372

<400> 2372

000

<210> 2373

<400> 2373

000

<210> 2374

<400> 2374

000

<210> 2375

<400> 2375

000

<210> 2376

<400> 2376

000

<210> 2377

<400> 2377

000

<210> 2378

<400> 2378

000

<210> 2379

<400> 2379

000

<210> 2380

<400> 2380

000

<210> 2381

<400> 2381

000

<210> 2382

<400> 2382

000

<210> 2383

<400> 2383

000

<210> 2384

<400> 2384

000

<210> 2385

<400> 2385

000

<210> 2386

<400> 2386

000

<210> 2387

<400> 2387

000

<210> 2388

<400> 2388

000

<210> 2389

<400> 2389

000

<210> 2390

<400> 2390

000

<210> 2391

<400> 2391

000

<210> 2392

<400> 2392

000

<210> 2393

<400> 2393

000

<210> 2394

<400> 2394

000

<210> 2395

<400> 2395

000

<210> 2396

<400> 2396

000

<210> 2397

<400> 2397

000

<210> 2398

<400> 2398

000

<210> 2399

<400> 2399

000

<210> 2400

<400> 2400

000

<210> 2401

<400> 2401

000

<210> 2402

<400> 2402

000

<210> 2403

<400> 2403

000

<210> 2404

<400> 2404

000

<210> 2405

<400> 2405

000

<210> 2406

<400> 2406

000

<210> 2407

<400> 2407

000

<210> 2408

<400> 2408

000

<210> 2409

<400> 2409

000

<210> 2410

<400> 2410

000

<210> 2411

<400> 2411

000

<210> 2412

<400> 2412

000

<210> 2413

<400> 2413

000

<210> 2414

<400> 2414

000

<210> 2415

<400> 2415

000

<210> 2416

<400> 2416

000

<210> 2417

<400> 2417

000

<210> 2418

<400> 2418

000

<210> 2419

<400> 2419

000

<210> 2420

<400> 2420

000

<210> 2421

<400> 2421

000

<210> 2422

<400> 2422

000

<210> 2423

<400> 2423

000

<210> 2424

<400> 2424

000

<210> 2425

<400> 2425

000

<210> 2426

<400> 2426

000

<210> 2427

<400> 2427

000

<210> 2428

<400> 2428

000

<210> 2429

<400> 2429

000

<210> 2430

<400> 2430

000

<210> 2431

<400> 2431

000

<210> 2432

<400> 2432

000

<210> 2433

<400> 2433

000

<210> 2434

<400> 2434

000

<210> 2435

<400> 2435

000

<210> 2436

<400> 2436

000

<210> 2437

<400> 2437

000

<210> 2438

<400> 2438

000

<210> 2439

<400> 2439

000

<210> 2440

<400> 2440

000

<210> 2441

<400> 2441

000

<210> 2442

<400> 2442

000

<210> 2443

<400> 2443

000

<210> 2444

<400> 2444

000

<210> 2445

<400> 2445

000

<210> 2446

<400> 2446

000

<210> 2447

<400> 2447

000

<210> 2448

<400> 2448

000

<210> 2449

<400> 2449

000

<210> 2450

<400> 2450

000

<210> 2451

<400> 2451

000

<210> 2452

<400> 2452

000

<210> 2453

<400> 2453

000

<210> 2454

<400> 2454

000

<210> 2455

<400> 2455

000

<210> 2456

<400> 2456

000

<210> 2457

<400> 2457

000

<210> 2458

<400> 2458

000

<210> 2459

<400> 2459

000

<210> 2460

<400> 2460

000

<210> 2461

<400> 2461

000

<210> 2462

<400> 2462

000

<210> 2463

<400> 2463

000

<210> 2464

<400> 2464

000

<210> 2465

<400> 2465

000

<210> 2466

<400> 2466

000

<210> 2467

<400> 2467

000

<210> 2468

<400> 2468

000

<210> 2469

<400> 2469

000

<210> 2470

<400> 2470

000

<210> 2471

<400> 2471

000

<210> 2472

<400> 2472

000

<210> 2473

<400> 2473

000

<210> 2474

<400> 2474

000

<210> 2475

<400> 2475

000

<210> 2476

<400> 2476

000

<210> 2477

<400> 2477

000

<210> 2478

<400> 2478

000

<210> 2479

<400> 2479

000

<210> 2480

<400> 2480

000

<210> 2481

<400> 2481

000

<210> 2482

<400> 2482

000

<210> 2483

<400> 2483

000

<210> 2484

<400> 2484

000

<210> 2485

<400> 2485

000

<210> 2486

<400> 2486

000

<210> 2487

<400> 2487

000

<210> 2488

<400> 2488

000

<210> 2489

<400> 2489

000

<210> 2490

<400> 2490

000

<210> 2491

<400> 2491

000

<210> 2492

<400> 2492

000

<210> 2493

<400> 2493

000

<210> 2494

<400> 2494

000

<210> 2495

<400> 2495

000

<210> 2496

<400> 2496

000

<210> 2497

<400> 2497

000

<210> 2498

<400> 2498

000

<210> 2499

<400> 2499

000

<210> 2500

<400> 2500

000

<210> 2501

<400> 2501

000

<210> 2502

<400> 2502

000

<210> 2503

<400> 2503

000

<210> 2504

<400> 2504

000

<210> 2505

<400> 2505

000

<210> 2506

<400> 2506

000

<210> 2507

<400> 2507

000

<210> 2508

<400> 2508

000

<210> 2509

<400> 2509

000

<210> 2510

<400> 2510

000

<210> 2511

<400> 2511

000

<210> 2512

<400> 2512

000

<210> 2513

<400> 2513

000

<210> 2514

<400> 2514

000

<210> 2515

<400> 2515

000

<210> 2516

<400> 2516

000

<210> 2517

<400> 2517

000

<210> 2518

<400> 2518

000

<210> 2519

<400> 2519

000

<210> 2520

<400> 2520

000

<210> 2521

<400> 2521

000

<210> 2522

<400> 2522

000

<210> 2523

<400> 2523

000

<210> 2524

<400> 2524

000

<210> 2525

<400> 2525

000

<210> 2526

<400> 2526

000

<210> 2527

<400> 2527

000

<210> 2528

<400> 2528

000

<210> 2529

<400> 2529

000

<210> 2530

<400> 2530

000

<210> 2531

<400> 2531

000

<210> 2532

<400> 2532

000

<210> 2533

<400> 2533

000

<210> 2534

<400> 2534

000

<210> 2535

<400> 2535

000

<210> 2536

<400> 2536

000

<210> 2537

<400> 2537

000

<210> 2538

<400> 2538

000

<210> 2539

<400> 2539

000

<210> 2540

<400> 2540

000

<210> 2541

<400> 2541

000

<210> 2542

<400> 2542

000

<210> 2543

<400> 2543

000

<210> 2544

<400> 2544

000

<210> 2545

<400> 2545

000

<210> 2546

<400> 2546

000

<210> 2547

<400> 2547

000

<210> 2548

<400> 2548

000

<210> 2549

<400> 2549

000

<210> 2550

<400> 2550

000

<210> 2551

<400> 2551

000

<210> 2552

<400> 2552

000

<210> 2553

<400> 2553

000

<210> 2554

<400> 2554

000

<210> 2555

<400> 2555

000

<210> 2556

<400> 2556

000

<210> 2557

<400> 2557

000

<210> 2558

<400> 2558

000

<210> 2559

<400> 2559

000

<210> 2560

<400> 2560

000

<210> 2561

<400> 2561

000

<210> 2562

<400> 2562

000

<210> 2563

<400> 2563

000

<210> 2564

<400> 2564

000

<210> 2565

<400> 2565

000

<210> 2566

<400> 2566

000

<210> 2567

<400> 2567

000

<210> 2568

<400> 2568

000

<210> 2569

<400> 2569

000

<210> 2570

<400> 2570

000

<210> 2571

<400> 2571

000

<210> 2572

<400> 2572

000

<210> 2573

<400> 2573

000

<210> 2574

<400> 2574

000

<210> 2575

<400> 2575

000

<210> 2576

<400> 2576

000

<210> 2577

<400> 2577

000

<210> 2578

<400> 2578

000

<210> 2579

<400> 2579

000

<210> 2580

<400> 2580

000

<210> 2581

<400> 2581

000

<210> 2582

<400> 2582

000

<210> 2583

<400> 2583

000

<210> 2584

<400> 2584

000

<210> 2585

<400> 2585

000

<210> 2586

<400> 2586

000

<210> 2587

<400> 2587

000

<210> 2588

<400> 2588

000

<210> 2589

<400> 2589

000

<210> 2590

<400> 2590

000

<210> 2591

<400> 2591

000

<210> 2592

<400> 2592

000

<210> 2593

<400> 2593

000

<210> 2594

<400> 2594

000

<210> 2595

<400> 2595

000

<210> 2596

<400> 2596

000

<210> 2597

<400> 2597

000

<210> 2598

<400> 2598

000

<210> 2599

<400> 2599

000

<210> 2600

<400> 2600

000

<210> 2601

<400> 2601

000

<210> 2602

<400> 2602

000

<210> 2603

<400> 2603

000

<210> 2604

<400> 2604

000

<210> 2605

<400> 2605

000

<210> 2606

<400> 2606

000

<210> 2607

<400> 2607

000

<210> 2608

<400> 2608

000

<210> 2609

<400> 2609

000

<210> 2610

<400> 2610

000

<210> 2611

<400> 2611

000

<210> 2612

<400> 2612

000

<210> 2613

<400> 2613

000

<210> 2614

<400> 2614

000

<210> 2615

<400> 2615

000

<210> 2616

<400> 2616

000

<210> 2617

<400> 2617

000

<210> 2618

<400> 2618

000

<210> 2619

<400> 2619

000

<210> 2620

<400> 2620

000

<210> 2621

<400> 2621

000

<210> 2622

<400> 2622

000

<210> 2623

<400> 2623

000

<210> 2624

<400> 2624

000

<210> 2625

<400> 2625

000

<210> 2626

<400> 2626

000

<210> 2627

<400> 2627

000

<210> 2628

<400> 2628

000

<210> 2629

<400> 2629

000

<210> 2630

<400> 2630

000

<210> 2631

<400> 2631

000

<210> 2632

<400> 2632

000

<210> 2633

<400> 2633

000

<210> 2634

<400> 2634

000

<210> 2635

<400> 2635

000

<210> 2636

<400> 2636

000

<210> 2637

<400> 2637

000

<210> 2638

<400> 2638

000

<210> 2639

<400> 2639

000

<210> 2640

<400> 2640

000

<210> 2641

<400> 2641

000

<210> 2642

<400> 2642

000

<210> 2643

<400> 2643

000

<210> 2644

<400> 2644

000

<210> 2645

<400> 2645

000

<210> 2646

<400> 2646

000

<210> 2647

<400> 2647

000

<210> 2648

<400> 2648

000

<210> 2649

<400> 2649

000

<210> 2650

<400> 2650

000

<210> 2651

<400> 2651

000

<210> 2652

<400> 2652

000

<210> 2653

<400> 2653

000

<210> 2654

<400> 2654

000

<210> 2655

<400> 2655

000

<210> 2656

<400> 2656

000

<210> 2657

<400> 2657

000

<210> 2658

<400> 2658

000

<210> 2659

<400> 2659

000

<210> 2660

<400> 2660

000

<210> 2661

<400> 2661

000

<210> 2662

<400> 2662

000

<210> 2663

<400> 2663

000

<210> 2664

<400> 2664

000

<210> 2665

<400> 2665

000

<210> 2666

<400> 2666

000

<210> 2667

<400> 2667

000

<210> 2668

<400> 2668

000

<210> 2669

<400> 2669

000

<210> 2670

<400> 2670

000

<210> 2671

<400> 2671

000

<210> 2672

<400> 2672

000

<210> 2673

<400> 2673

000

<210> 2674

<400> 2674

000

<210> 2675

<400> 2675

000

<210> 2676

<400> 2676

000

<210> 2677

<400> 2677

000

<210> 2678

<400> 2678

000

<210> 2679

<400> 2679

000

<210> 2680

<400> 2680

000

<210> 2681

<400> 2681

000

<210> 2682

<400> 2682

000

<210> 2683

<400> 2683

000

<210> 2684

<400> 2684

000

<210> 2685

<400> 2685

000

<210> 2686

<400> 2686

000

<210> 2687

<400> 2687

000

<210> 2688

<400> 2688

000

<210> 2689

<400> 2689

000

<210> 2690

<400> 2690

000

<210> 2691

<400> 2691

000

<210> 2692

<400> 2692

000

<210> 2693

<400> 2693

000

<210> 2694

<400> 2694

000

<210> 2695

<400> 2695

000

<210> 2696

<400> 2696

000

<210> 2697

<400> 2697

000

<210> 2698

<400> 2698

000

<210> 2699

<400> 2699

000

<210> 2700

<400> 2700

000

<210> 2701

<400> 2701

000

<210> 2702

<400> 2702

000

<210> 2703

<400> 2703

000

<210> 2704

<400> 2704

000

<210> 2705

<400> 2705

000

<210> 2706

<400> 2706

000

<210> 2707

<400> 2707

000

<210> 2708

<400> 2708

000

<210> 2709

<400> 2709

000

<210> 2710

<400> 2710

000

<210> 2711

<400> 2711

000

<210> 2712

<400> 2712

000

<210> 2713

<400> 2713

000

<210> 2714

<400> 2714

000

<210> 2715

<400> 2715

000

<210> 2716

<400> 2716

000

<210> 2717

<400> 2717

000

<210> 2718

<400> 2718

000

<210> 2719

<400> 2719

000

<210> 2720

<400> 2720

000

<210> 2721

<400> 2721

000

<210> 2722

<400> 2722

000

<210> 2723

<400> 2723

000

<210> 2724

<400> 2724

000

<210> 2725

<400> 2725

000

<210> 2726

<400> 2726

000

<210> 2727

<400> 2727

000

<210> 2728

<400> 2728

000

<210> 2729

<400> 2729

000

<210> 2730

<400> 2730

000

<210> 2731

<400> 2731

000

<210> 2732

<400> 2732

000

<210> 2733

<400> 2733

000

<210> 2734

<400> 2734

000

<210> 2735

<400> 2735

000

<210> 2736

<400> 2736

000

<210> 2737

<400> 2737

000

<210> 2738

<400> 2738

000

<210> 2739

<400> 2739

000

<210> 2740

<400> 2740

000

<210> 2741

<400> 2741

000

<210> 2742

<400> 2742

000

<210> 2743

<400> 2743

000

<210> 2744

<400> 2744

000

<210> 2745

<400> 2745

000

<210> 2746

<400> 2746

000

<210> 2747

<400> 2747

000

<210> 2748

<400> 2748

000

<210> 2749

<400> 2749

000

<210> 2750

<400> 2750

000

<210> 2751

<400> 2751

000

<210> 2752

<400> 2752

000

<210> 2753

<400> 2753

000

<210> 2754

<400> 2754

000

<210> 2755

<400> 2755

000

<210> 2756

<400> 2756

000

<210> 2757

<400> 2757

000

<210> 2758

<400> 2758

000

<210> 2759

<400> 2759

000

<210> 2760

<400> 2760

000

<210> 2761

<400> 2761

000

<210> 2762

<400> 2762

000

<210> 2763

<400> 2763

000

<210> 2764

<400> 2764

000

<210> 2765

<400> 2765

000

<210> 2766

<400> 2766

000

<210> 2767

<400> 2767

000

<210> 2768

<400> 2768

000

<210> 2769

<400> 2769

000

<210> 2770

<400> 2770

000

<210> 2771

<400> 2771

000

<210> 2772

<400> 2772

000

<210> 2773

<400> 2773

000

<210> 2774

<400> 2774

000

<210> 2775

<400> 2775

000

<210> 2776

<400> 2776

000

<210> 2777

<400> 2777

000

<210> 2778

<400> 2778

000

<210> 2779

<400> 2779

000

<210> 2780

<400> 2780

000

<210> 2781

<400> 2781

000

<210> 2782

<400> 2782

000

<210> 2783

<400> 2783

000

<210> 2784

<400> 2784

000

<210> 2785

<400> 2785

000

<210> 2786

<400> 2786

000

<210> 2787

<400> 2787

000

<210> 2788

<400> 2788

000

<210> 2789

<400> 2789

000

<210> 2790

<400> 2790

000

<210> 2791

<400> 2791

000

<210> 2792

<400> 2792

000

<210> 2793

<400> 2793

000

<210> 2794

<400> 2794

000

<210> 2795

<400> 2795

000

<210> 2796

<400> 2796

000

<210> 2797

<400> 2797

000

<210> 2798

<400> 2798

000

<210> 2799

<400> 2799

000

<210> 2800

<400> 2800

000

<210> 2801

<400> 2801

000

<210> 2802

<400> 2802

000

<210> 2803

<400> 2803

000

<210> 2804

<400> 2804

000

<210> 2805

<400> 2805

000

<210> 2806

<400> 2806

000

<210> 2807

<400> 2807

000

<210> 2808

<400> 2808

000

<210> 2809

<400> 2809

000

<210> 2810

<400> 2810

000

<210> 2811

<400> 2811

000

<210> 2812

<400> 2812

000

<210> 2813

<400> 2813

000

<210> 2814

<400> 2814

000

<210> 2815

<400> 2815

000

<210> 2816

<400> 2816

000

<210> 2817

<400> 2817

000

<210> 2818

<400> 2818

000

<210> 2819

<400> 2819

000

<210> 2820

<400> 2820

000

<210> 2821

<400> 2821

000

<210> 2822

<400> 2822

000

<210> 2823

<400> 2823

000

<210> 2824

<400> 2824

000

<210> 2825

<400> 2825

000

<210> 2826

<400> 2826

000

<210> 2827

<400> 2827

000

<210> 2828

<400> 2828

000

<210> 2829

<400> 2829

000

<210> 2830

<400> 2830

000

<210> 2831

<400> 2831

000

<210> 2832

<400> 2832

000

<210> 2833

<400> 2833

000

<210> 2834

<400> 2834

000

<210> 2835

<400> 2835

000

<210> 2836

<400> 2836

000

<210> 2837

<400> 2837

000

<210> 2838

<400> 2838

000

<210> 2839

<400> 2839

000

<210> 2840

<400> 2840

000

<210> 2841

<400> 2841

000

<210> 2842

<400> 2842

000

<210> 2843

<400> 2843

000

<210> 2844

<400> 2844

000

<210> 2845

<400> 2845

000

<210> 2846

<400> 2846

000

<210> 2847

<400> 2847

000

<210> 2848

<400> 2848

000

<210> 2849

<400> 2849

000

<210> 2850

<400> 2850

000

<210> 2851

<400> 2851

000

<210> 2852

<400> 2852

000

<210> 2853

<400> 2853

000

<210> 2854

<400> 2854

000

<210> 2855

<400> 2855

000

<210> 2856

<400> 2856

000

<210> 2857

<400> 2857

000

<210> 2858

<400> 2858

000

<210> 2859

<400> 2859

000

<210> 2860

<400> 2860

000

<210> 2861

<400> 2861

000

<210> 2862

<400> 2862

000

<210> 2863

<400> 2863

000

<210> 2864

<400> 2864

000

<210> 2865

<400> 2865

000

<210> 2866

<400> 2866

000

<210> 2867

<400> 2867

000

<210> 2868

<400> 2868

000

<210> 2869

<400> 2869

000

<210> 2870

<400> 2870

000

<210> 2871

<400> 2871

000

<210> 2872

<400> 2872

000

<210> 2873

<400> 2873

000

<210> 2874

<400> 2874

000

<210> 2875

<400> 2875

000

<210> 2876

<400> 2876

000

<210> 2877

<400> 2877

000

<210> 2878

<400> 2878

000

<210> 2879

<400> 2879

000

<210> 2880

<400> 2880

000

<210> 2881

<400> 2881

000

<210> 2882

<400> 2882

000

<210> 2883

<400> 2883

000

<210> 2884

<400> 2884

000

<210> 2885

<400> 2885

000

<210> 2886

<400> 2886

000

<210> 2887

<400> 2887

000

<210> 2888

<400> 2888

000

<210> 2889

<400> 2889

000

<210> 2890

<400> 2890

000

<210> 2891

<400> 2891

000

<210> 2892

<400> 2892

000

<210> 2893

<400> 2893

000

<210> 2894

<400> 2894

000

<210> 2895

<400> 2895

000

<210> 2896

<400> 2896

000

<210> 2897

<400> 2897

000

<210> 2898

<400> 2898

000

<210> 2899

<400> 2899

000

<210> 2900

<400> 2900

000

<210> 2901

<400> 2901

000

<210> 2902

<400> 2902

000

<210> 2903

<400> 2903

000

<210> 2904

<400> 2904

000

<210> 2905

<400> 2905

000

<210> 2906

<400> 2906

000

<210> 2907

<400> 2907

000

<210> 2908

<400> 2908

000

<210> 2909

<400> 2909

000

<210> 2910

<400> 2910

000

<210> 2911

<400> 2911

000

<210> 2912

<400> 2912

000

<210> 2913

<400> 2913

000

<210> 2914

<400> 2914

000

<210> 2915

<400> 2915

000

<210> 2916

<400> 2916

000

<210> 2917

<400> 2917

000

<210> 2918

<400> 2918

000

<210> 2919

<400> 2919

000

<210> 2920

<400> 2920

000

<210> 2921

<400> 2921

000

<210> 2922

<400> 2922

000

<210> 2923

<400> 2923

000

<210> 2924

<400> 2924

000

<210> 2925

<400> 2925

000

<210> 2926

<400> 2926

000

<210> 2927

<400> 2927

000

<210> 2928

<400> 2928

000

<210> 2929

<400> 2929

000

<210> 2930

<400> 2930

000

<210> 2931

<400> 2931

000

<210> 2932

<400> 2932

000

<210> 2933

<400> 2933

000

<210> 2934

<400> 2934

000

<210> 2935

<400> 2935

000

<210> 2936

<400> 2936

000

<210> 2937

<400> 2937

000

<210> 2938

<400> 2938

000

<210> 2939

<400> 2939

000

<210> 2940

<400> 2940

000

<210> 2941

<400> 2941

000

<210> 2942

<400> 2942

000

<210> 2943

<400> 2943

000

<210> 2944

<400> 2944

000

<210> 2945

<400> 2945

000

<210> 2946

<400> 2946

000

<210> 2947

<400> 2947

000

<210> 2948

<400> 2948

000

<210> 2949

<400> 2949

000

<210> 2950

<400> 2950

000

<210> 2951

<400> 2951

000

<210> 2952

<400> 2952

000

<210> 2953

<400> 2953

000

<210> 2954

<400> 2954

000

<210> 2955

<400> 2955

000

<210> 2956

<400> 2956

000

<210> 2957

<400> 2957

000

<210> 2958

<400> 2958

000

<210> 2959

<400> 2959

000

<210> 2960

<400> 2960

000

<210> 2961

<400> 2961

000

<210> 2962

<400> 2962

000

<210> 2963

<400> 2963

000

<210> 2964

<400> 2964

000

<210> 2965

<400> 2965

000

<210> 2966

<400> 2966

000

<210> 2967

<400> 2967

000

<210> 2968

<400> 2968

000

<210> 2969

<400> 2969

000

<210> 2970

<400> 2970

000

<210> 2971

<400> 2971

000

<210> 2972

<400> 2972

000

<210> 2973

<400> 2973

000

<210> 2974

<400> 2974

000

<210> 2975

<400> 2975

000

<210> 2976

<400> 2976

000

<210> 2977

<400> 2977

000

<210> 2978

<400> 2978

000

<210> 2979

<400> 2979

000

<210> 2980

<400> 2980

000

<210> 2981

<400> 2981

000

<210> 2982

<400> 2982

000

<210> 2983

<400> 2983

000

<210> 2984

<400> 2984

000

<210> 2985

<400> 2985

000

<210> 2986

<400> 2986

000

<210> 2987

<400> 2987

000

<210> 2988

<400> 2988

000

<210> 2989

<400> 2989

000

<210> 2990

<400> 2990

000

<210> 2991

<400> 2991

000

<210> 2992

<400> 2992

000

<210> 2993

<400> 2993

000

<210> 2994

<400> 2994

000

<210> 2995

<400> 2995

000

<210> 2996

<400> 2996

000

<210> 2997

<400> 2997

000

<210> 2998

<400> 2998

000

<210> 2999

<400> 2999

000

<210> 3000

<400> 3000

000

<210> 3001

<211> 9

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 34 - VH CDR1

<400> 3001

Gly Thr Phe Ser Ser Ala Ala Ile Ser

1 5

<210> 3002

<211> 17

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 34 - VH CDR2

<400> 3002

Gly Ile Phe Pro Ile Ser Gly His Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe Gln

1 5 10 15

Gly

<210> 3003

<211> 16

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 34 - VH CDR3

<400> 3003

Ala Arg Asp Thr Gly Arg Gly Tyr Thr Arg His Phe Trp Phe Asp Pro

1 5 10 15

<210> 3004

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 34 - VL CDR1

<400> 3004

Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr Leu Asn

1 5 10

<210> 3005

<211> 7

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 34 - VL CDR2

<400> 3005

Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser

1 5

<210> 3006

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 34 - VL CDR3

<400> 3006

Gln Gln Ser Asp Ile Leu Tyr Thr

1 5

<210> 3007

<211> 26

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 34 - VH FR1

<400> 3007

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly

20 25

<210> 3008

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 34 - VH FR2

<400> 3008

Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met Gly

1 5 10

<210> 3009

<211> 30

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 34 - VH FR3

<400> 3009

Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr Met Glu

1 5 10 15

Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

20 25 30

<210> 3010

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 34 - VH FR4

<400> 3010

Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

1 5 10

<210> 3011

<211> 369

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 34 - VH ДНК

<400> 3011

caggtgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60

tcctgcaagg cttctggagg caccttcagc agcgccgcta tcagctgggt gcgacaggcc 120

cctggacaag ggctcgagtg gatgggaggg atcttcccta tctccggtca cgcaaactac 180

gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg aatccacgag cacagcctac 240

atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggcggtgt actactgcgc cagagacacg 300

ggacggggat acaccagaca cttctggttt gacccctggg gacagggtac attggtcacc 360

gtctcctca 369

<210> 3012

<211> 123

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 34 - VH Белка

<400> 3012

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Ala

20 25 30

Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Gly Ile Phe Pro Ile Ser Gly His Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Asp Thr Gly Arg Gly Tyr Thr Arg His Phe Trp Phe Asp Pro

100 105 110

Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 3013

<211> 23

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 34 - VL FR1

<400> 3013

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys

20

<210> 3014

<211> 15

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 34 - VL FR2

<400> 3014

Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr

1 5 10 15

<210> 3015

<211> 32

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 34 - VL FR3

<400> 3015

Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr

1 5 10 15

Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys

20 25 30

<210> 3016

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 34 - VL FR4

<400> 3016

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

1 5 10

<210> 3017

<211> 318

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 34 - VL ДНК

<400> 3017

gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60

atcacttgcc gggcaagtca gagcattagc agctatttaa attggtatca gcagaaacca 120

gggaaagccc ctaagctcct gatctatgct gcatccagtt tgcaaagtgg ggtcccatca 180

aggttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240

gaagattttg caacttacta ctgtcagcaa agcgacatcc tctacacttt tggcggaggg 300

accaaggttg agatcaaa 318

<210> 3018

<211> 106

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 34 - VL Белка

<400> 3018

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Asp Ile Leu Tyr Thr

85 90 95

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210> 3019

<400> 3019

000

<210> 3020

<400> 3020

000

<210> 3021

<400> 3021

000

<210> 3022

<400> 3022

000

<210> 3023

<400> 3023

000

<210> 3024

<400> 3024

000

<210> 3025

<400> 3025

000

<210> 3026

<400> 3026

000

<210> 3027

<400> 3027

000

<210> 3028

<400> 3028

000

<210> 3029

<400> 3029

000

<210> 3030

<400> 3030

000

<210> 3031

<400> 3031

000

<210> 3032

<400> 3032

000

<210> 3033

<400> 3033

000

<210> 3034

<400> 3034

000

<210> 3035

<400> 3035

000

<210> 3036

<400> 3036

000

<210> 3037

<400> 3037

000

<210> 3038

<400> 3038

000

<210> 3039

<400> 3039

000

<210> 3040

<400> 3040

000

<210> 3041

<400> 3041

000

<210> 3042

<400> 3042

000

<210> 3043

<400> 3043

000

<210> 3044

<400> 3044

000

<210> 3045

<400> 3045

000

<210> 3046

<400> 3046

000

<210> 3047

<400> 3047

000

<210> 3048

<400> 3048

000

<210> 3049

<400> 3049

000

<210> 3050

<400> 3050

000

<210> 3051

<400> 3051

000

<210> 3052

<400> 3052

000

<210> 3053

<400> 3053

000

<210> 3054

<400> 3054

000

<210> 3055

<400> 3055

000

<210> 3056

<400> 3056

000

<210> 3057

<400> 3057

000

<210> 3058

<400> 3058

000

<210> 3059

<400> 3059

000

<210> 3060

<400> 3060

000

<210> 3061

<400> 3061

000

<210> 3062

<400> 3062

000

<210> 3063

<400> 3063

000

<210> 3064

<400> 3064

000

<210> 3065

<400> 3065

000

<210> 3066

<400> 3066

000

<210> 3067

<400> 3067

000

<210> 3068

<400> 3068

000

<210> 3069

<400> 3069

000

<210> 3070

<400> 3070

000

<210> 3071

<400> 3071

000

<210> 3072

<400> 3072

000

<210> 3073

<400> 3073

000

<210> 3074

<400> 3074

000

<210> 3075

<400> 3075

000

<210> 3076

<400> 3076

000

<210> 3077

<400> 3077

000

<210> 3078

<400> 3078

000

<210> 3079

<400> 3079

000

<210> 3080

<400> 3080

000

<210> 3081

<400> 3081

000

<210> 3082

<400> 3082

000

<210> 3083

<400> 3083

000

<210> 3084

<400> 3084

000

<210> 3085

<400> 3085

000

<210> 3086

<400> 3086

000

<210> 3087

<400> 3087

000

<210> 3088

<400> 3088

000

<210> 3089

<400> 3089

000

<210> 3090

<400> 3090

000

<210> 3091

<400> 3091

000

<210> 3092

<400> 3092

000

<210> 3093

<400> 3093

000

<210> 3094

<400> 3094

000

<210> 3095

<400> 3095

000

<210> 3096

<400> 3096

000

<210> 3097

<400> 3097

000

<210> 3098

<400> 3098

000

<210> 3099

<400> 3099

000

<210> 3100

<400> 3100

000

<210> 3101

<400> 3101

000

<210> 3102

<400> 3102

000

<210> 3103

<400> 3103

000

<210> 3104

<400> 3104

000

<210> 3105

<400> 3105

000

<210> 3106

<400> 3106

000

<210> 3107

<400> 3107

000

<210> 3108

<400> 3108

000

<210> 3109

<400> 3109

000

<210> 3110

<400> 3110

000

<210> 3111

<400> 3111

000

<210> 3112

<400> 3112

000

<210> 3113

<400> 3113

000

<210> 3114

<400> 3114

000

<210> 3115

<400> 3115

000

<210> 3116

<400> 3116

000

<210> 3117

<400> 3117

000

<210> 3118

<400> 3118

000

<210> 3119

<400> 3119

000

<210> 3120

<400> 3120

000

<210> 3121

<400> 3121

000

<210> 3122

<400> 3122

000

<210> 3123

<400> 3123

000

<210> 3124

<400> 3124

000

<210> 3125

<400> 3125

000

<210> 3126

<400> 3126

000

<210> 3127

<400> 3127

000

<210> 3128

<400> 3128

000

<210> 3129

<400> 3129

000

<210> 3130

<400> 3130

000

<210> 3131

<400> 3131

000

<210> 3132

<400> 3132

000

<210> 3133

<400> 3133

000

<210> 3134

<400> 3134

000

<210> 3135

<400> 3135

000

<210> 3136

<400> 3136

000

<210> 3137

<400> 3137

000

<210> 3138

<400> 3138

000

<210> 3139

<400> 3139

000

<210> 3140

<400> 3140

000

<210> 3141

<400> 3141

000

<210> 3142

<400> 3142

000

<210> 3143

<400> 3143

000

<210> 3144

<400> 3144

000

<210> 3145

<400> 3145

000

<210> 3146

<400> 3146

000

<210> 3147

<400> 3147

000

<210> 3148

<400> 3148

000

<210> 3149

<400> 3149

000

<210> 3150

<400> 3150

000

<210> 3151

<400> 3151

000

<210> 3152

<400> 3152

000

<210> 3153

<400> 3153

000

<210> 3154

<400> 3154

000

<210> 3155

<400> 3155

000

<210> 3156

<400> 3156

000

<210> 3157

<400> 3157

000

<210> 3158

<400> 3158

000

<210> 3159

<400> 3159

000

<210> 3160

<400> 3160

000

<210> 3161

<400> 3161

000

<210> 3162

<400> 3162

000

<210> 3163

<400> 3163

000

<210> 3164

<400> 3164

000

<210> 3165

<400> 3165

000

<210> 3166

<400> 3166

000

<210> 3167

<400> 3167

000

<210> 3168

<400> 3168

000

<210> 3169

<400> 3169

000

<210> 3170

<400> 3170

000

<210> 3171

<400> 3171

000

<210> 3172

<400> 3172

000

<210> 3173

<400> 3173

000

<210> 3174

<400> 3174

000

<210> 3175

<400> 3175

000

<210> 3176

<400> 3176

000

<210> 3177

<400> 3177

000

<210> 3178

<400> 3178

000

<210> 3179

<400> 3179

000

<210> 3180

<400> 3180

000

<210> 3181

<400> 3181

000

<210> 3182

<400> 3182

000

<210> 3183

<400> 3183

000

<210> 3184

<400> 3184

000

<210> 3185

<400> 3185

000

<210> 3186

<400> 3186

000

<210> 3187

<400> 3187

000

<210> 3188

<400> 3188

000

<210> 3189

<400> 3189

000

<210> 3190

<400> 3190

000

<210> 3191

<400> 3191

000

<210> 3192

<400> 3192

000

<210> 3193

<400> 3193

000

<210> 3194

<400> 3194

000

<210> 3195

<400> 3195

000

<210> 3196

<400> 3196

000

<210> 3197

<400> 3197

000

<210> 3198

<400> 3198

000

<210> 3199

<400> 3199

000

<210> 3200

<400> 3200

000

<210> 3201

<400> 3201

000

<210> 3202

<400> 3202

000

<210> 3203

<400> 3203

000

<210> 3204

<400> 3204

000

<210> 3205

<400> 3205

000

<210> 3206

<400> 3206

000

<210> 3207

<400> 3207

000

<210> 3208

<400> 3208

000

<210> 3209

<400> 3209

000

<210> 3210

<400> 3210

000

<210> 3211

<400> 3211

000

<210> 3212

<400> 3212

000

<210> 3213

<400> 3213

000

<210> 3214

<400> 3214

000

<210> 3215

<400> 3215

000

<210> 3216

<400> 3216

000

<210> 3217

<400> 3217

000

<210> 3218

<400> 3218

000

<210> 3219

<400> 3219

000

<210> 3220

<400> 3220

000

<210> 3221

<400> 3221

000

<210> 3222

<400> 3222

000

<210> 3223

<400> 3223

000

<210> 3224

<400> 3224

000

<210> 3225

<400> 3225

000

<210> 3226

<400> 3226

000

<210> 3227

<400> 3227

000

<210> 3228

<400> 3228

000

<210> 3229

<400> 3229

000

<210> 3230

<400> 3230

000

<210> 3231

<400> 3231

000

<210> 3232

<400> 3232

000

<210> 3233

<400> 3233

000

<210> 3234

<400> 3234

000

<210> 3235

<400> 3235

000

<210> 3236

<400> 3236

000

<210> 3237

<400> 3237

000

<210> 3238

<400> 3238

000

<210> 3239

<400> 3239

000

<210> 3240

<400> 3240

000

<210> 3241

<400> 3241

000

<210> 3242

<400> 3242

000

<210> 3243

<400> 3243

000

<210> 3244

<400> 3244

000

<210> 3245

<400> 3245

000

<210> 3246

<400> 3246

000

<210> 3247

<400> 3247

000

<210> 3248

<400> 3248

000

<210> 3249

<400> 3249

000

<210> 3250

<400> 3250

000

<210> 3251

<400> 3251

000

<210> 3252

<400> 3252

000

<210> 3253

<400> 3253

000

<210> 3254

<400> 3254

000

<210> 3255

<400> 3255

000

<210> 3256

<400> 3256

000

<210> 3257

<400> 3257

000

<210> 3258

<400> 3258

000

<210> 3259

<400> 3259

000

<210> 3260

<400> 3260

000

<210> 3261

<400> 3261

000

<210> 3262

<400> 3262

000

<210> 3263

<400> 3263

000

<210> 3264

<400> 3264

000

<210> 3265

<400> 3265

000

<210> 3266

<400> 3266

000

<210> 3267

<400> 3267

000

<210> 3268

<400> 3268

000

<210> 3269

<400> 3269

000

<210> 3270

<400> 3270

000

<210> 3271

<400> 3271

000

<210> 3272

<400> 3272

000

<210> 3273

<400> 3273

000

<210> 3274

<400> 3274

000

<210> 3275

<400> 3275

000

<210> 3276

<400> 3276

000

<210> 3277

<400> 3277

000

<210> 3278

<400> 3278

000

<210> 3279

<400> 3279

000

<210> 3280

<400> 3280

000

<210> 3281

<400> 3281

000

<210> 3282

<400> 3282

000

<210> 3283

<400> 3283

000

<210> 3284

<400> 3284

000

<210> 3285

<400> 3285

000

<210> 3286

<400> 3286

000

<210> 3287

<400> 3287

000

<210> 3288

<400> 3288

000

<210> 3289

<400> 3289

000

<210> 3290

<400> 3290

000

<210> 3291

<400> 3291

000

<210> 3292

<400> 3292

000

<210> 3293

<400> 3293

000

<210> 3294

<400> 3294

000

<210> 3295

<400> 3295

000

<210> 3296

<400> 3296

000

<210> 3297

<400> 3297

000

<210> 3298

<400> 3298

000

<210> 3299

<400> 3299

000

<210> 3300

<400> 3300

000

<210> 3301

<400> 3301

000

<210> 3302

<400> 3302

000

<210> 3303

<400> 3303

000

<210> 3304

<400> 3304

000

<210> 3305

<400> 3305

000

<210> 3306

<400> 3306

000

<210> 3307

<400> 3307

000

<210> 3308

<400> 3308

000

<210> 3309

<400> 3309

000

<210> 3310

<400> 3310

000

<210> 3311

<400> 3311

000

<210> 3312

<400> 3312

000

<210> 3313

<400> 3313

000

<210> 3314

<400> 3314

000

<210> 3315

<400> 3315

000

<210> 3316

<400> 3316

000

<210> 3317

<400> 3317

000

<210> 3318

<400> 3318

000

<210> 3319

<400> 3319

000

<210> 3320

<400> 3320

000

<210> 3321

<400> 3321

000

<210> 3322

<400> 3322

000

<210> 3323

<400> 3323

000

<210> 3324

<400> 3324

000

<210> 3325

<400> 3325

000

<210> 3326

<400> 3326

000

<210> 3327

<400> 3327

000

<210> 3328

<400> 3328

000

<210> 3329

<400> 3329

000

<210> 3330

<400> 3330

000

<210> 3331

<400> 3331

000

<210> 3332

<400> 3332

000

<210> 3333

<400> 3333

000

<210> 3334

<400> 3334

000

<210> 3335

<400> 3335

000

<210> 3336

<400> 3336

000

<210> 3337

<400> 3337

000

<210> 3338

<400> 3338

000

<210> 3339

<400> 3339

000

<210> 3340

<400> 3340

000

<210> 3341

<400> 3341

000

<210> 3342

<400> 3342

000

<210> 3343

<400> 3343

000

<210> 3344

<400> 3344

000

<210> 3345

<400> 3345

000

<210> 3346

<400> 3346

000

<210> 3347

<400> 3347

000

<210> 3348

<400> 3348

000

<210> 3349

<400> 3349

000

<210> 3350

<400> 3350

000

<210> 3351

<400> 3351

000

<210> 3352

<400> 3352

000

<210> 3353

<400> 3353

000

<210> 3354

<400> 3354

000

<210> 3355

<400> 3355

000

<210> 3356

<400> 3356

000

<210> 3357

<400> 3357

000

<210> 3358

<400> 3358

000

<210> 3359

<400> 3359

000

<210> 3360

<400> 3360

000

<210> 3361

<400> 3361

000

<210> 3362

<400> 3362

000

<210> 3363

<400> 3363

000

<210> 3364

<400> 3364

000

<210> 3365

<400> 3365

000

<210> 3366

<400> 3366

000

<210> 3367

<400> 3367

000

<210> 3368

<400> 3368

000

<210> 3369

<400> 3369

000

<210> 3370

<400> 3370

000

<210> 3371

<400> 3371

000

<210> 3372

<400> 3372

000

<210> 3373

<400> 3373

000

<210> 3374

<400> 3374

000

<210> 3375

<400> 3375

000

<210> 3376

<400> 3376

000

<210> 3377

<400> 3377

000

<210> 3378

<400> 3378

000

<210> 3379

<400> 3379

000

<210> 3380

<400> 3380

000

<210> 3381

<400> 3381

000

<210> 3382

<400> 3382

000

<210> 3383

<400> 3383

000

<210> 3384

<400> 3384

000

<210> 3385

<400> 3385

000

<210> 3386

<400> 3386

000

<210> 3387

<400> 3387

000

<210> 3388

<400> 3388

000

<210> 3389

<400> 3389

000

<210> 3390

<400> 3390

000

<210> 3391

<400> 3391

000

<210> 3392

<400> 3392

000

<210> 3393

<400> 3393

000

<210> 3394

<400> 3394

000

<210> 3395

<400> 3395

000

<210> 3396

<400> 3396

000

<210> 3397

<400> 3397

000

<210> 3398

<400> 3398

000

<210> 3399

<400> 3399

000

<210> 3400

<400> 3400

000

<210> 3401

<400> 3401

000

<210> 3402

<400> 3402

000

<210> 3403

<400> 3403

000

<210> 3404

<400> 3404

000

<210> 3405

<400> 3405

000

<210> 3406

<400> 3406

000

<210> 3407

<400> 3407

000

<210> 3408

<400> 3408

000

<210> 3409

<400> 3409

000

<210> 3410

<400> 3410

000

<210> 3411

<400> 3411

000

<210> 3412

<400> 3412

000

<210> 3413

<400> 3413

000

<210> 3414

<400> 3414

000

<210> 3415

<400> 3415

000

<210> 3416

<400> 3416

000

<210> 3417

<400> 3417

000

<210> 3418

<400> 3418

000

<210> 3419

<400> 3419

000

<210> 3420

<400> 3420

000

<210> 3421

<400> 3421

000

<210> 3422

<400> 3422

000

<210> 3423

<400> 3423

000

<210> 3424

<400> 3424

000

<210> 3425

<400> 3425

000

<210> 3426

<400> 3426

000

<210> 3427

<400> 3427

000

<210> 3428

<400> 3428

000

<210> 3429

<400> 3429

000

<210> 3430

<400> 3430

000

<210> 3431

<400> 3431

000

<210> 3432

<400> 3432

000

<210> 3433

<400> 3433

000

<210> 3434

<400> 3434

000

<210> 3435

<400> 3435

000

<210> 3436

<400> 3436

000

<210> 3437

<400> 3437

000

<210> 3438

<400> 3438

000

<210> 3439

<400> 3439

000

<210> 3440

<400> 3440

000

<210> 3441

<400> 3441

000

<210> 3442

<400> 3442

000

<210> 3443

<400> 3443

000

<210> 3444

<400> 3444

000

<210> 3445

<400> 3445

000

<210> 3446

<400> 3446

000

<210> 3447

<400> 3447

000

<210> 3448

<400> 3448

000

<210> 3449

<400> 3449

000

<210> 3450

<400> 3450

000

<210> 3451

<400> 3451

000

<210> 3452

<400> 3452

000

<210> 3453

<400> 3453

000

<210> 3454

<400> 3454

000

<210> 3455

<400> 3455

000

<210> 3456

<400> 3456

000

<210> 3457

<400> 3457

000

<210> 3458

<400> 3458

000

<210> 3459

<400> 3459

000

<210> 3460

<400> 3460

000

<210> 3461

<400> 3461

000

<210> 3462

<400> 3462

000

<210> 3463

<400> 3463

000

<210> 3464

<400> 3464

000

<210> 3465

<400> 3465

000

<210> 3466

<400> 3466

000

<210> 3467

<400> 3467

000

<210> 3468

<400> 3468

000

<210> 3469

<400> 3469

000

<210> 3470

<400> 3470

000

<210> 3471

<400> 3471

000

<210> 3472

<400> 3472

000

<210> 3473

<400> 3473

000

<210> 3474

<400> 3474

000

<210> 3475

<400> 3475

000

<210> 3476

<400> 3476

000

<210> 3477

<400> 3477

000

<210> 3478

<400> 3478

000

<210> 3479

<400> 3479

000

<210> 3480

<400> 3480

000

<210> 3481

<400> 3481

000

<210> 3482

<400> 3482

000

<210> 3483

<400> 3483

000

<210> 3484

<400> 3484

000

<210> 3485

<400> 3485

000

<210> 3486

<400> 3486

000

<210> 3487

<400> 3487

000

<210> 3488

<400> 3488

000

<210> 3489

<400> 3489

000

<210> 3490

<400> 3490

000

<210> 3491

<400> 3491

000

<210> 3492

<400> 3492

000

<210> 3493

<400> 3493

000

<210> 3494

<400> 3494

000

<210> 3495

<400> 3495

000

<210> 3496

<400> 3496

000

<210> 3497

<400> 3497

000

<210> 3498

<400> 3498

000

<210> 3499

<400> 3499

000

<210> 3500

<400> 3500

000

<210> 3501

<400> 3501

000

<210> 3502

<400> 3502

000

<210> 3503

<400> 3503

000

<210> 3504

<400> 3504

000

<210> 3505

<400> 3505

000

<210> 3506

<400> 3506

000

<210> 3507

<400> 3507

000

<210> 3508

<400> 3508

000

<210> 3509

<400> 3509

000

<210> 3510

<400> 3510

000

<210> 3511

<400> 3511

000

<210> 3512

<400> 3512

000

<210> 3513

<400> 3513

000

<210> 3514

<400> 3514

000

<210> 3515

<400> 3515

000

<210> 3516

<400> 3516

000

<210> 3517

<400> 3517

000

<210> 3518

<400> 3518

000

<210> 3519

<400> 3519

000

<210> 3520

<400> 3520

000

<210> 3521

<400> 3521

000

<210> 3522

<400> 3522

000

<210> 3523

<400> 3523

000

<210> 3524

<400> 3524

000

<210> 3525

<400> 3525

000

<210> 3526

<400> 3526

000

<210> 3527

<400> 3527

000

<210> 3528

<400> 3528

000

<210> 3529

<400> 3529

000

<210> 3530

<400> 3530

000

<210> 3531

<400> 3531

000

<210> 3532

<400> 3532

000

<210> 3533

<400> 3533

000

<210> 3534

<400> 3534

000

<210> 3535

<400> 3535

000

<210> 3536

<400> 3536

000

<210> 3537

<400> 3537

000

<210> 3538

<400> 3538

000

<210> 3539

<400> 3539

000

<210> 3540

<400> 3540

000

<210> 3541

<400> 3541

000

<210> 3542

<400> 3542

000

<210> 3543

<400> 3543

000

<210> 3544

<400> 3544

000

<210> 3545

<400> 3545

000

<210> 3546

<400> 3546

000

<210> 3547

<400> 3547

000

<210> 3548

<400> 3548

000

<210> 3549

<400> 3549

000

<210> 3550

<400> 3550

000

<210> 3551

<400> 3551

000

<210> 3552

<400> 3552

000

<210> 3553

<400> 3553

000

<210> 3554

<400> 3554

000

<210> 3555

<400> 3555

000

<210> 3556

<400> 3556

000

<210> 3557

<400> 3557

000

<210> 3558

<400> 3558

000

<210> 3559

<400> 3559

000

<210> 3560

<400> 3560

000

<210> 3561

<400> 3561

000

<210> 3562

<400> 3562

000

<210> 3563

<400> 3563

000

<210> 3564

<400> 3564

000

<210> 3565

<400> 3565

000

<210> 3566

<400> 3566

000

<210> 3567

<400> 3567

000

<210> 3568

<400> 3568

000

<210> 3569

<400> 3569

000

<210> 3570

<400> 3570

000

<210> 3571

<400> 3571

000

<210> 3572

<400> 3572

000

<210> 3573

<400> 3573

000

<210> 3574

<400> 3574

000

<210> 3575

<400> 3575

000

<210> 3576

<400> 3576

000

<210> 3577

<400> 3577

000

<210> 3578

<400> 3578

000

<210> 3579

<400> 3579

000

<210> 3580

<400> 3580

000

<210> 3581

<400> 3581

000

<210> 3582

<400> 3582

000

<210> 3583

<400> 3583

000

<210> 3584

<400> 3584

000

<210> 3585

<400> 3585

000

<210> 3586

<400> 3586

000

<210> 3587

<400> 3587

000

<210> 3588

<400> 3588

000

<210> 3589

<400> 3589

000

<210> 3590

<400> 3590

000

<210> 3591

<400> 3591

000

<210> 3592

<400> 3592

000

<210> 3593

<400> 3593

000

<210> 3594

<400> 3594

000

<210> 3595

<400> 3595

000

<210> 3596

<400> 3596

000

<210> 3597

<400> 3597

000

<210> 3598

<400> 3598

000

<210> 3599

<400> 3599

000

<210> 3600

<400> 3600

000

<210> 3601

<400> 3601

000

<210> 3602

<400> 3602

000

<210> 3603

<400> 3603

000

<210> 3604

<400> 3604

000

<210> 3605

<400> 3605

000

<210> 3606

<400> 3606

000

<210> 3607

<400> 3607

000

<210> 3608

<400> 3608

000

<210> 3609

<400> 3609

000

<210> 3610

<400> 3610

000

<210> 3611

<400> 3611

000

<210> 3612

<400> 3612

000

<210> 3613

<400> 3613

000

<210> 3614

<400> 3614

000

<210> 3615

<400> 3615

000

<210> 3616

<400> 3616

000

<210> 3617

<400> 3617

000

<210> 3618

<400> 3618

000

<210> 3619

<400> 3619

000

<210> 3620

<400> 3620

000

<210> 3621

<400> 3621

000

<210> 3622

<400> 3622

000

<210> 3623

<400> 3623

000

<210> 3624

<400> 3624

000

<210> 3625

<400> 3625

000

<210> 3626

<400> 3626

000

<210> 3627

<400> 3627

000

<210> 3628

<400> 3628

000

<210> 3629

<400> 3629

000

<210> 3630

<400> 3630

000

<210> 3631

<400> 3631

000

<210> 3632

<400> 3632

000

<210> 3633

<400> 3633

000

<210> 3634

<400> 3634

000

<210> 3635

<400> 3635

000

<210> 3636

<400> 3636

000

<210> 3637

<400> 3637

000

<210> 3638

<400> 3638

000

<210> 3639

<400> 3639

000

<210> 3640

<400> 3640

000

<210> 3641

<400> 3641

000

<210> 3642

<400> 3642

000

<210> 3643

<400> 3643

000

<210> 3644

<400> 3644

000

<210> 3645

<400> 3645

000

<210> 3646

<400> 3646

000

<210> 3647

<400> 3647

000

<210> 3648

<400> 3648

000

<210> 3649

<400> 3649

000

<210> 3650

<400> 3650

000

<210> 3651

<400> 3651

000

<210> 3652

<400> 3652

000

<210> 3653

<400> 3653

000

<210> 3654

<400> 3654

000

<210> 3655

<400> 3655

000

<210> 3656

<400> 3656

000

<210> 3657

<400> 3657

000

<210> 3658

<400> 3658

000

<210> 3659

<400> 3659

000

<210> 3660

<400> 3660

000

<210> 3661

<400> 3661

000

<210> 3662

<400> 3662

000

<210> 3663

<400> 3663

000

<210> 3664

<400> 3664

000

<210> 3665

<400> 3665

000

<210> 3666

<400> 3666

000

<210> 3667

<400> 3667

000

<210> 3668

<400> 3668

000

<210> 3669

<400> 3669

000

<210> 3670

<400> 3670

000

<210> 3671

<400> 3671

000

<210> 3672

<400> 3672

000

<210> 3673

<400> 3673

000

<210> 3674

<400> 3674

000

<210> 3675

<400> 3675

000

<210> 3676

<400> 3676

000

<210> 3677

<400> 3677

000

<210> 3678

<400> 3678

000

<210> 3679

<400> 3679

000

<210> 3680

<400> 3680

000

<210> 3681

<400> 3681

000

<210> 3682

<400> 3682

000

<210> 3683

<400> 3683

000

<210> 3684

<400> 3684

000

<210> 3685

<400> 3685

000

<210> 3686

<400> 3686

000

<210> 3687

<400> 3687

000

<210> 3688

<400> 3688

000

<210> 3689

<400> 3689

000

<210> 3690

<400> 3690

000

<210> 3691

<400> 3691

000

<210> 3692

<400> 3692

000

<210> 3693

<400> 3693

000

<210> 3694

<400> 3694

000

<210> 3695

<400> 3695

000

<210> 3696

<400> 3696

000

<210> 3697

<400> 3697

000

<210> 3698

<400> 3698

000

<210> 3699

<400> 3699

000

<210> 3700

<400> 3700

000

<210> 3701

<400> 3701

000

<210> 3702

<400> 3702

000

<210> 3703

<400> 3703

000

<210> 3704

<400> 3704

000

<210> 3705

<400> 3705

000

<210> 3706

<400> 3706

000

<210> 3707

<400> 3707

000

<210> 3708

<400> 3708

000

<210> 3709

<400> 3709

000

<210> 3710

<400> 3710

000

<210> 3711

<400> 3711

000

<210> 3712

<400> 3712

000

<210> 3713

<400> 3713

000

<210> 3714

<400> 3714

000

<210> 3715

<400> 3715

000

<210> 3716

<400> 3716

000

<210> 3717

<400> 3717

000

<210> 3718

<400> 3718

000

<210> 3719

<400> 3719

000

<210> 3720

<400> 3720

000

<210> 3721

<400> 3721

000

<210> 3722

<400> 3722

000

<210> 3723

<400> 3723

000

<210> 3724

<400> 3724

000

<210> 3725

<400> 3725

000

<210> 3726

<400> 3726

000

<210> 3727

<400> 3727

000

<210> 3728

<400> 3728

000

<210> 3729

<400> 3729

000

<210> 3730

<400> 3730

000

<210> 3731

<400> 3731

000

<210> 3732

<400> 3732

000

<210> 3733

<400> 3733

000

<210> 3734

<400> 3734

000

<210> 3735

<400> 3735

000

<210> 3736

<400> 3736

000

<210> 3737

<400> 3737

000

<210> 3738

<400> 3738

000

<210> 3739

<400> 3739

000

<210> 3740

<400> 3740

000

<210> 3741

<400> 3741

000

<210> 3742

<400> 3742

000

<210> 3743

<400> 3743

000

<210> 3744

<400> 3744

000

<210> 3745

<400> 3745

000

<210> 3746

<400> 3746

000

<210> 3747

<400> 3747

000

<210> 3748

<400> 3748

000

<210> 3749

<400> 3749

000

<210> 3750

<400> 3750

000

<210> 3751

<400> 3751

000

<210> 3752

<400> 3752

000

<210> 3753

<400> 3753

000

<210> 3754

<400> 3754

000

<210> 3755

<400> 3755

000

<210> 3756

<400> 3756

000

<210> 3757

<400> 3757

000

<210> 3758

<400> 3758

000

<210> 3759

<400> 3759

000

<210> 3760

<400> 3760

000

<210> 3761

<400> 3761

000

<210> 3762

<400> 3762

000

<210> 3763

<400> 3763

000

<210> 3764

<400> 3764

000

<210> 3765

<400> 3765

000

<210> 3766

<400> 3766

000

<210> 3767

<400> 3767

000

<210> 3768

<400> 3768

000

<210> 3769

<400> 3769

000

<210> 3770

<400> 3770

000

<210> 3771

<400> 3771

000

<210> 3772

<400> 3772

000

<210> 3773

<400> 3773

000

<210> 3774

<400> 3774

000

<210> 3775

<400> 3775

000

<210> 3776

<400> 3776

000

<210> 3777

<400> 3777

000

<210> 3778

<400> 3778

000

<210> 3779

<400> 3779

000

<210> 3780

<400> 3780

000

<210> 3781

<400> 3781

000

<210> 3782

<400> 3782

000

<210> 3783

<400> 3783

000

<210> 3784

<400> 3784

000

<210> 3785

<400> 3785

000

<210> 3786

<400> 3786

000

<210> 3787

<400> 3787

000

<210> 3788

<400> 3788

000

<210> 3789

<400> 3789

000

<210> 3790

<400> 3790

000

<210> 3791

<400> 3791

000

<210> 3792

<400> 3792

000

<210> 3793

<400> 3793

000

<210> 3794

<400> 3794

000

<210> 3795

<400> 3795

000

<210> 3796

<400> 3796

000

<210> 3797

<400> 3797

000

<210> 3798

<400> 3798

000

<210> 3799

<400> 3799

000

<210> 3800

<400> 3800

000

<210> 3801

<400> 3801

000

<210> 3802

<400> 3802

000

<210> 3803

<400> 3803

000

<210> 3804

<400> 3804

000

<210> 3805

<400> 3805

000

<210> 3806

<400> 3806

000

<210> 3807

<400> 3807

000

<210> 3808

<400> 3808

000

<210> 3809

<400> 3809

000

<210> 3810

<400> 3810

000

<210> 3811

<400> 3811

000

<210> 3812

<400> 3812

000

<210> 3813

<400> 3813

000

<210> 3814

<400> 3814

000

<210> 3815

<400> 3815

000

<210> 3816

<400> 3816

000

<210> 3817

<400> 3817

000

<210> 3818

<400> 3818

000

<210> 3819

<400> 3819

000

<210> 3820

<400> 3820

000

<210> 3821

<400> 3821

000

<210> 3822

<400> 3822

000

<210> 3823

<400> 3823

000

<210> 3824

<400> 3824

000

<210> 3825

<400> 3825

000

<210> 3826

<400> 3826

000

<210> 3827

<400> 3827

000

<210> 3828

<400> 3828

000

<210> 3829

<400> 3829

000

<210> 3830

<400> 3830

000

<210> 3831

<400> 3831

000

<210> 3832

<400> 3832

000

<210> 3833

<400> 3833

000

<210> 3834

<400> 3834

000

<210> 3835

<400> 3835

000

<210> 3836

<400> 3836

000

<210> 3837

<400> 3837

000

<210> 3838

<400> 3838

000

<210> 3839

<400> 3839

000

<210> 3840

<400> 3840

000

<210> 3841

<400> 3841

000

<210> 3842

<400> 3842

000

<210> 3843

<400> 3843

000

<210> 3844

<400> 3844

000

<210> 3845

<400> 3845

000

<210> 3846

<400> 3846

000

<210> 3847

<400> 3847

000

<210> 3848

<400> 3848

000

<210> 3849

<400> 3849

000

<210> 3850

<400> 3850

000

<210> 3851

<400> 3851

000

<210> 3852

<400> 3852

000

<210> 3853

<400> 3853

000

<210> 3854

<400> 3854

000

<210> 3855

<400> 3855

000

<210> 3856

<400> 3856

000

<210> 3857

<400> 3857

000

<210> 3858

<400> 3858

000

<210> 3859

<400> 3859

000

<210> 3860

<400> 3860

000

<210> 3861

<400> 3861

000

<210> 3862

<400> 3862

000

<210> 3863

<400> 3863

000

<210> 3864

<400> 3864

000

<210> 3865

<400> 3865

000

<210> 3866

<400> 3866

000

<210> 3867

<400> 3867

000

<210> 3868

<400> 3868

000

<210> 3869

<400> 3869

000

<210> 3870

<400> 3870

000

<210> 3871

<400> 3871

000

<210> 3872

<400> 3872

000

<210> 3873

<400> 3873

000

<210> 3874

<400> 3874

000

<210> 3875

<400> 3875

000

<210> 3876

<400> 3876

000

<210> 3877

<400> 3877

000

<210> 3878

<400> 3878

000

<210> 3879

<400> 3879

000

<210> 3880

<400> 3880

000

<210> 3881

<400> 3881

000

<210> 3882

<400> 3882

000

<210> 3883

<400> 3883

000

<210> 3884

<400> 3884

000

<210> 3885

<400> 3885

000

<210> 3886

<400> 3886

000

<210> 3887

<400> 3887

000

<210> 3888

<400> 3888

000

<210> 3889

<400> 3889

000

<210> 3890

<400> 3890

000

<210> 3891

<400> 3891

000

<210> 3892

<400> 3892

000

<210> 3893

<400> 3893

000

<210> 3894

<400> 3894

000

<210> 3895

<400> 3895

000

<210> 3896

<400> 3896

000

<210> 3897

<400> 3897

000

<210> 3898

<400> 3898

000

<210> 3899

<400> 3899

000

<210> 3900

<400> 3900

000

<210> 3901

<400> 3901

000

<210> 3902

<400> 3902

000

<210> 3903

<400> 3903

000

<210> 3904

<400> 3904

000

<210> 3905

<400> 3905

000

<210> 3906

<400> 3906

000

<210> 3907

<400> 3907

000

<210> 3908

<400> 3908

000

<210> 3909

<400> 3909

000

<210> 3910

<400> 3910

000

<210> 3911

<400> 3911

000

<210> 3912

<400> 3912

000

<210> 3913

<400> 3913

000

<210> 3914

<400> 3914

000

<210> 3915

<400> 3915

000

<210> 3916

<400> 3916

000

<210> 3917

<400> 3917

000

<210> 3918

<400> 3918

000

<210> 3919

<400> 3919

000

<210> 3920

<400> 3920

000

<210> 3921

<400> 3921

000

<210> 3922

<400> 3922

000

<210> 3923

<400> 3923

000

<210> 3924

<400> 3924

000

<210> 3925

<400> 3925

000

<210> 3926

<400> 3926

000

<210> 3927

<400> 3927

000

<210> 3928

<400> 3928

000

<210> 3929

<400> 3929

000

<210> 3930

<400> 3930

000

<210> 3931

<400> 3931

000

<210> 3932

<400> 3932

000

<210> 3933

<400> 3933

000

<210> 3934

<400> 3934

000

<210> 3935

<400> 3935

000

<210> 3936

<400> 3936

000

<210> 3937

<400> 3937

000

<210> 3938

<400> 3938

000

<210> 3939

<400> 3939

000

<210> 3940

<400> 3940

000

<210> 3941

<400> 3941

000

<210> 3942

<400> 3942

000

<210> 3943

<400> 3943

000

<210> 3944

<400> 3944

000

<210> 3945

<400> 3945

000

<210> 3946

<400> 3946

000

<210> 3947

<400> 3947

000

<210> 3948

<400> 3948

000

<210> 3949

<400> 3949

000

<210> 3950

<400> 3950

000

<210> 3951

<400> 3951

000

<210> 3952

<400> 3952

000

<210> 3953

<400> 3953

000

<210> 3954

<400> 3954

000

<210> 3955

<400> 3955

000

<210> 3956

<400> 3956

000

<210> 3957

<400> 3957

000

<210> 3958

<400> 3958

000

<210> 3959

<400> 3959

000

<210> 3960

<400> 3960

000

<210> 3961

<400> 3961

000

<210> 3962

<400> 3962

000

<210> 3963

<400> 3963

000

<210> 3964

<400> 3964

000

<210> 3965

<400> 3965

000

<210> 3966

<400> 3966

000

<210> 3967

<400> 3967

000

<210> 3968

<400> 3968

000

<210> 3969

<400> 3969

000

<210> 3970

<400> 3970

000

<210> 3971

<400> 3971

000

<210> 3972

<400> 3972

000

<210> 3973

<400> 3973

000

<210> 3974

<400> 3974

000

<210> 3975

<400> 3975

000

<210> 3976

<400> 3976

000

<210> 3977

<400> 3977

000

<210> 3978

<400> 3978

000

<210> 3979

<400> 3979

000

<210> 3980

<400> 3980

000

<210> 3981

<400> 3981

000

<210> 3982

<400> 3982

000

<210> 3983

<400> 3983

000

<210> 3984

<400> 3984

000

<210> 3985

<400> 3985

000

<210> 3986

<400> 3986

000

<210> 3987

<400> 3987

000

<210> 3988

<400> 3988

000

<210> 3989

<400> 3989

000

<210> 3990

<400> 3990

000

<210> 3991

<400> 3991

000

<210> 3992

<400> 3992

000

<210> 3993

<400> 3993

000

<210> 3994

<400> 3994

000

<210> 3995

<400> 3995

000

<210> 3996

<400> 3996

000

<210> 3997

<400> 3997

000

<210> 3998

<400> 3998

000

<210> 3999

<400> 3999

000

<210> 4000

<400> 4000

000

<210> 4001

<211> 9

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 36 - VH CDR1

<400> 4001

Gly Thr Phe Ala Thr Tyr Ala Ile Ser

1 5

<210> 4002

<211> 17

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 36 - VH CDR2

<400> 4002

Gly Ile Phe Pro Leu Ser Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe Gln

1 5 10 15

Gly

<210> 4003

<211> 16

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 36 - VH CDR3

<400> 4003

Ala Arg Asp Thr Gly Arg Gly Tyr Thr Arg His Phe Trp Phe Asp Pro

1 5 10 15

<210> 4004

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 36 - VL CDR1

<400> 4004

Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr Leu Asn

1 5 10

<210> 4005

<211> 7

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 36 - VL CDR2

<400> 4005

Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser

1 5

<210> 4006

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 36 - VL CDR3

<400> 4006

Gln Gln Ser Asp Ile Leu Tyr Thr

1 5

<210> 4007

<211> 26

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 36 - VH FR1

<400> 4007

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly

20 25

<210> 4008

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 36 - VH FR2

<400> 4008

Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met Gly

1 5 10

<210> 4009

<211> 30

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 36 - VH FR3

<400> 4009

Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr Met Glu

1 5 10 15

Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

20 25 30

<210> 4010

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 36 - VH FR4

<400> 4010

Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

1 5 10

<210> 4011

<211> 369

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 36 - VH ДНК

<400> 4011

caggtgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60

tcctgcaagg cttctggagg caccttcgca acctatgcta tcagctgggt gcgacaggcc 120

cctggacaag ggcttgagtg gatgggaggg atcttccctc tctccggtac agcaaactac 180

gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg aatccacgag cacagcctac 240

atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggcggtgt actactgcgc cagagacacg 300

ggacggggat acaccagaca cttctggttt gacccctggg gacagggtac attggtcacc 360

gtctcctca 369

<210> 4012

<211> 123

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 36 - VH Белка

<400> 4012

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ala Thr Tyr

20 25 30

Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Gly Ile Phe Pro Leu Ser Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Asp Thr Gly Arg Gly Tyr Thr Arg His Phe Trp Phe Asp Pro

100 105 110

Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 4013

<211> 23

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 36 - VL FR1

<400> 4013

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys

20

<210> 4014

<211> 15

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 36 - VL FR2

<400> 4014

Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr

1 5 10 15

<210> 4015

<211> 32

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 36 - VL FR3

<400> 4015

Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr

1 5 10 15

Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys

20 25 30

<210> 4016

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 36 - VL FR4

<400> 4016

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

1 5 10

<210> 4017

<211> 318

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 36 - VL ДНК

<400> 4017

gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60

atcacttgcc gggcaagtca gagcattagc agctatttaa attggtatca gcagaaacca 120

gggaaagccc ctaagctcct gatctatgct gcatccagtt tgcaaagtgg ggtcccatca 180

aggttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240

gaagattttg caacttacta ctgtcagcaa agcgacatcc tctacacttt tggcggaggg 300

accaaggttg agatcaaa 318

<210> 4018

<211> 106

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический: 36 - VL Белка

<400> 4018

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Asp Ile Leu Tyr Thr

85 90 95

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<---

Изобретение относится к области биохимии, в частности к выделенному антителу анти-CD112R или его фрагменту. Также раскрыта композиция, содержащая указанное антитело; нуклеиновая кислота, кодирующая указанное антитело; клетка-хозяин, содержащая указанное антитело. Раскрыты способ усиления, повышения и/или поддержания противоопухолевого иммунного ответа у субъекта, с помощью указанного антитела, способ усиления активации CD8 Т-клеток или NK-клеток у субъекта, с помощью указанного антитела, способ усиления продукции гамма-интерферона CD8 Т-клетками, с помощью указанного антитела, способ усиления цитотоксичности, с помощью указанного антитела, способ усиления взаимодействий CD226 с CD112 у субъекта, с помощью указанного антитела, способ получения указанного антитела. Изобретение обладает способностью эффективно лечить заболевания, экспрессией CD112. 13 н. и 27 з.п. ф-лы, 19 ил., 12 табл., 17 пр.

1. Выделенное анти-CD112R антитело или его фрагмент, содержащие вариабельную область тяжелой цепи (VH) и вариабельную область легкой цепи (VL), где VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 712 и VL содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 718.

2. Выделенное антитело или его фрагмент по п. 1, где указанное выделенное антитело представляет собой моноклональное антитело.

3. Выделенное антитело или его фрагмент по п. 1 или 2, где указанное выделенное антитело представляет собой фрагмент антитела.

4. Выделенное антитело или его фрагмент по п. 3, где указанный фрагмент представляет собой Fab, Fab’, Fv, scFv или (Fab’)₂.

5. Выделенное антитело или его фрагмент по п. 1 или 2, где указанное выделенное антитело представляет собой полноразмерное антитело.

6. Выделенное антитело или его фрагмент по п. 5, где Fc-область указанного выделенного антитела содержит IgG1, IgG2, IgG3 или IgG4.

7. Выделенное антитело или его фрагмент по любому из пп. 1-6, где указанное выделенное антитело содержит константную область тяжелой цепи IgG1 человека.

8. Выделенное антитело или его фрагмент по любому из пп. 1-6, где указанное выделенное антитело содержит константную область тяжелой цепи IgG4 человека.

9. Выделенное антитело или его фрагмент по п. 8, где указанное выделенное антитело содержит мутантную константную область тяжелой цепи IgG4 человека.

10. Выделенное антитело или его фрагмент по п. 9, где указанная мутантная константная область тяжелой цепи IgG4 содержит мутацию, выбранную из замены в Ser228, замены в Leu235, замены в Asn297 или их комбинации, нумерация в соответствии с нумерацией EU.

11. Выделенное антитело или его фрагмент по п. 9, где указанная мутантная константная область тяжелой цепи IgG4 содержит замену S228P и замену L235E, нумерация в соответствии с нумерацией EU.

12. Выделенное антитело или его фрагмент по любому из пп. 1-7, где указанное выделенное антитело содержит константную область тяжелой цепи IgG1 человека, и при этом указанное выделенное антитело

i) увеличивает дегрануляцию NK-клеток; и/или

ii) увеличивает активацию NK-клеток; и/или

iii) увеличивает активацию внутриопухолевых NK-клеток при представлении в комбинации с анти-TIGIT антителом; и/или

iv) подавляет рост опухоли in vivo; и/или

v) предотвращает приживление опухоли при повторном заражении опухолью.

13. Выделенное антитело или его фрагмент по любому из предшествующих пунктов, где указанное антитело связывается с CD112R человека.

14. Полностью человеческое выделенное анти-CD112R антитело или его фрагмент по любому из предшествующих пунктов.

15. Композиция для лечения рака, при котором опухолевые клетки и/или миелоидные клетки в микроокружении опухоли экспрессируют CD112, содержащая выделенное антитело или его фрагмент по любому из пп. 1-14 и фармацевтически приемлемый носитель.

16. Композиция по п. 15, дополнительно содержащая антагонист PD-1, PD-L1, CTLA-4, Lag-3, TIGIT, CD96 или TIM-3.

17. Способ усиления, повышения и/или поддержания противоопухолевого иммунного ответа у субъекта, включающий введение субъекту, имеющему опухоль, антитела или его фрагмента по любому из пп. 1-14 или композиции по п. 15 или 16.

18. Способ усиления активации CD8 Т-клеток у субъекта, включающий введение антитела или его фрагмента по любому из пп. 1-14 или композиции по п. 15 или 16 субъекту, нуждающемуся в активации CD8 Т-клеток.

19. Способ усиления продукции гамма-интерферона CD8 Т-клетками у субъекта, включающий введение антитела или его фрагмента по любому из пп. 1-14 или композиции по п. 15 или 16 субъекту, нуждающемуся в продукции гамма-интерферона CD8 Т-клетками.

20. Способ усиления активации NK-клеток у субъекта, включающий введение антитела или его фрагмента по любому из пп. 1-14 или композиции по п. 15 или 16 субъекту, нуждающемуся в активации NK-клеток.

21. Способ усиления цитотоксичности, опосредованной NK-клетками, у субъекта, включающий введение антитела или его фрагмента по любому из пп. 1-14 или композиции по п. 15 или 16 субъекту, нуждающемуся в повышении цитотоксичности, опосредованной NK-клетками.

22. Способ лечения рака у субъекта, при котором опухолевые клетки и/или миелоидные клетки в микроокружении опухоли экспрессируют CD112, включающий введение антитела или его фрагмента по любому из пп. 1-14 или композиции по п. 15 или 16 субъекту, имеющему рак.

23. Способ по п. 22, где указанный рак представляет собой карциному, лимфому, бластому, саркому или лейкоз.

24. Способ по п. 22, где указанный рак представляет собой плоскоклеточный рак, мелкоклеточный рак легкого, рак гипофиза, рак пищевода, астроцитому, саркому мягких тканей, немелкоклеточный рак легкого (в том числе плоскоклеточный немелкоклеточный рак легкого), аденокарциному легкого, плоскоклеточную карциному легкого, рак брюшины, гепатоцеллюлярный рак, рак желудочно-кишечного тракта, рак поджелудочной железы, глиобластому, рак шейки матки, рак яичников, рак печени, рак мочевого пузыря, гепатому, рак молочной железы, рак толстой кишки, рак толстой и прямой кишок, карциному эндометрия или матки, карциному слюнной железы, рак почки, почечно-клеточную карциному, рак печени, рак предстательной железы, рак влагалища, рак щитовидной железы, карциному печени, рак головного мозга, рак эндометрия, рак яичка, холангиокарциному, рак желчного пузыря, рак желудка, меланому или различные типы рака головы и шеи (в том числе плоскоклеточную карциному головы и шеи).

25. Способ усиления взаимодействий CD226 с CD112 у субъекта, включающий введение субъекту антитела или его фрагмента по любому из пп. 1-14 или композиции по п. 15 или 16.

26. Способ по любому из пп. 17-25, где указанный способ дополнительно включает применение второй терапии.

27. Способ по п. 26, где указанная вторая терапия представляет собой лучевую терапию или хирургическое вмешательство.

28. Способ по п. 26, где указанная вторая терапия представляет собой применение химиотерапии, опсонизирующего агента или агента, истощающего популяцию регуляторных Т-клеток.

29. Способ по п. 26, где указанная вторая терапия представляет собой введение антагониста PD-1, PD-L1, CTLA-4, Lag-3 или TIM-3.

30. Способ по п. 26, где указанная вторая терапия представляет собой введение антагониста TIGIT или CD96.

31. Способ по п. 26, где указанная вторая терапия представляет собой введение антагониста PVRL1, PVRL2, PVRL3, PVRL4 и CD155.

32. Способ по п. 26, где указанная вторая терапия представляет собой введение антагониста CD47.

33. Способ по п. 26, где указанная вторая терапия представляет собой введение антагониста CD39.

34. Способ по п. 26, где указанная вторая терапия представляет собой введение антагониста IL-27.

35. Способ по п. 26, где указанная вторая терапия представляет собой введение агониста STING.

36. Способ по любому из пп. 29-34, где указанный антагонист представляет собой антитело.

37. Нуклеиновая кислота, кодирующая выделенное антитело или его фрагмент по любому из пп. 1-14.

38. Клетка-хозяин для получения анти-CD112R антитела или его фрагмента, содержащая нуклеиновую кислоту по п. 37.

39. Способ получения выделенного антитела или его фрагмента по любому из пп. 1-14, включающий культивирование клетки-хозяина по п. 38 в условиях, при которых экспрессируется указанное выделенное антитело или его фрагмент.

40. Способ по п. 39, дополнительно включающий очистку указанного выделенного антитела или его фрагмента.

название	год	авторы	номер документа
АНТИТЕЛА К C10ORF54 И ИХ ПРИМЕНЕНИЯ	2015	Липпинкотт, Джон Ван Дер Хорст, Эдвард Тейн, Хтун Ким, Сунь, Юн Преста, Леонард, Г. Тёниссен, Ян-Виллем	RU2714232C2
УСОВЕРШЕНСТВОВАННЫЕ ПРОКОАГУЛЯНТНЫЕ АНТИТЕЛА	2019	Торн, Карина Хансен, Бьярне, Грам Йонсен, Лауст, Бруун Харндал, Миккель, Норс Ян, Чжижу Эстергаард, Хенрик Грейзен, Пер, Дж Йоханссон, Ева Раш, Мортен, Грёнбех Чэнь, Цзианьхэ Свенссон, Андерс Чжу, Хайсунь Чжоу, Жун	RU2810748C2
АНТИТЕЛА К C10ORF54 И ИХ ПРИМЕНЕНИЯ	2015	Липпинкотт, Джон Ван Дер Хорст, Эдвард Тейн, Хтун Ким, Сунь, Юн Преста, Леонард, Г. Тёниссен, Ян-Виллем	RU2819627C1
АНТИТЕЛА ПРОТИВ СИГНАЛ-РЕГУЛЯТОРНОГО БЕЛКА АЛЬФА И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ	2017	Понз, Хауме Сим, Банг Джанет Вань, Хун Ко, Трэйси Чиа-Чиэнь Каудер, Стивен Эллиот Харримен, Уилльям Дон Искиердо, Шелли	RU2771964C2
CD131-СВЯЗЫВАЮЩИЕ БЕЛКИ И ИХ ПРИМЕНЕНИЯ	2016	Овчарек Кэтрин Пануосис Коста Уилсон Николас Харди Мэттью Эвардс Кирстен Райзман Вероника	RU2773927C2
ТЕРАПЕВТИЧЕСКИЕ АНТИТЕЛА ПРОТИВ ЛИГАНДА CD40	2018	Луговской, Алексей	RU2770209C2
АНТИТЕЛА К PD-1 И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ	2017	Мэбри, Джордж Роберт, Сазински, Стивен	RU2761640C2
АНТИТЕЛА ПРОТИВ TNFRSF9 И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ	2019	Ян, И Се, Цзиншу Дун, Чуньянь Ян, Фан Лу, Чэнюань Шэнь, Юэлэй Ни, Цзянь Го, Янань Чэнь, Юньюнь	RU2812200C2
КОМБИНАЦИИ АНТИТЕЛ К STAPHYLOCOCCUS AUREUS	2019	Ткачик, Кристин Селлман, Брет Ду, Цюнь Дамшродер, Мелисса Коэн, Тэйлор	RU2804815C2
Анти-PD-L1 и IL-2 цитокины	2017	Кэмпбелл Джейми Сэнди Николь Ван Кринкс Кассандра Аркинстолл Стивен Джон Гермашевски Волкер Керби Иэн Космак Миха Гэллагер Томас Динтонио Сесилия Джиллис Стивен Дуглас	RU2769282C2

ОДНОЦЕПОЧЕЧНЫЕ МУЛЬТИВАЛЕНТНЫЕ СВЯЗЫВАЮЩИЕ БЕЛКИ С ЭФФЕКТОРНОЙ ФУНКЦИЕЙ	2007	Томпсон Питер Армстронг Ледбэттэр Джеффри А. Хайдэн-Ледбэттэр Марта Сьюзан Гросмэйр Лаура Сью Бадер Роберт Брэди Уилльям Чистякова Людмила Фоллетти Максимиллиан Т. Калабро Валери Шулер Алуин	RU2487888C2
WO 2017221255 A1, 28.12.2017
US 20170240613 A1, 24.08.2017.

КОМПОЗИЦИИ АНТИ-CD112R АНТИТЕЛ И СОПУТСТВУЮЩИЕ СПОСОБЫ Российский патент 2024 года по МПК C07K16/28 A61K45/06 A61K47/68 A61P35/00

Описание патента на изобретение RU2819624C2

Похожие патенты RU2819624C2

Иллюстрации к изобретению RU 2 819 624 C2

Реферат патента 2024 года КОМПОЗИЦИИ АНТИ-CD112R АНТИТЕЛ И СОПУТСТВУЮЩИЕ СПОСОБЫ

Формула изобретения RU 2 819 624 C2

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2024 года RU2819624C2

RU 2 819 624 C2