МУЛЬТИМЕРИЗУЮЩИЕСЯ ПОЛИПЕПТИДЫ, ПРОИСХОДЯЩИЕ ОТ ДОМЕНА С УКЛАДКОЙ ТИПА РУЛЕТ ОСНОВАНИЯ ПЕНТОНА АДЕНОВИРУСА Российский патент 2024 года по МПК C12N7/00 C07K14/05 A61K39/12 A61P31/12 A61P35/00 A61P37/00 

Настоящее изобретение относится к разработке и получению новых полипептидных каркасов для оптимальной презентации олигопептидов, полипептидных последовательностей, белковых доменов, белков и/или белковых комплексов, состоящих из двух, нескольких или многих субъединиц. Такие олигопептиды, полипептидные последовательности, белковые домены и/или белки, представленные полипептидными каркасами по настоящему изобретению, могут включать антигенные частицы, которые стимулируют иммунную систему, чтобы вызвать иммунный ответ, например, для вакцинации или для получения антител или других связывающих молекул в культуре клеток, либо in vivo, либо in vitro в пробирке. В предпочтительном варианте осуществления полипептиды по настоящему изобретению собираются в вирусоподобные частицы (ВПЧ), оптимизированные для представления антигенов, применимых в контексте вакцинации против инфекционных агентов или опухолей.

Предпосылкой для успешной разработки белкового каркаса для презентации олигопептидов, полипептидных последовательностей, белковых доменов, белков и/или белковых комплексов является компактный, стабильный домен мультимеризации, который может включать модальности, представляющие собой открытые и гибкие петлевые структуры, которые могут вмещать такие олигопептиды, полипептидные последовательности, белковые домены, белки и/или белковые комплексы. Предпочтительно, такие отображаемые частицы могут представлять собой иммуногенные антигены, которые представлены иммунной системе. Белки основания пентона (протомеры) из ряда серотипов аденовируса (Ag) собираются в пентамеры, которые затем образуют додекаэдры, напоминающие вирусоподобные частицы. В отличие от живого вируса, они не несут генетического материала, поэтому такие ВПЧ полезны с точки зрения безопасности.

Аденовирус представляет собой один из наиболее часто применяемых векторов генной терапии у людей. Оболочка аденовируса преимущественно состоит из двух различных типов белков, белка гексона и белка основания пентона, причем последний образует пентамерные сборки, к которым прикрепляются фибриллы, характерные для данного вируса. Было показано, что белки основания пентона некоторых серотипов аденовирусов способны к спонтанной самосборке в мультимерную суперструктуру при рекомбинантной экспрессии в отсутствие других аденовирусных компонентов. Такая супер структура представляет собой додекамер, образованный в общей сложности 60 белками основания аденовируса, расположенными в двенадцати идентичных копиях пентамерной "коронообразной" сборки (фиг. 1). Сам белок основания аденовируса имеет двухдоменную архитектуру, в которой один домен представляет собой бета-цилиндр, соединенный со вторым доменом, стабилизированным альфа-спиралями (фиг. 1В). Первый опосредует мультимеризацию в додекаэдр, что подтверждено мутационными исследованиями, в то время как последний представляет собой протяженные петли к растворителю на поверхности додекаэдра. Такие петли чрезвычайно вариабельны по длине и содержанию последовательностей у разных серотипов аденовирусов, в то время как остаток белка основания является высококонсервативным для всех видов. Додекаэдр аденовируса представляет собой очень универсальный каркас для отображения, например, для иммуногенных пептидов, которые можно вставлять в петли, заменяя встречающиеся в природе последовательности. Таким образом, буквально сотни гетер о логичных пептидов могут эффективно отображаться на одном додекаэдре, если все сайты инсерции заняты. Додекаэдр может быть получен рекомбинантным способом в очень больших количествах, он исключительно стабилен и может храниться при температуре окружающей среды в течение неопределенного времени. С применением таких очень выгодных характеристик, были разработаны синтетические частицы на основе додекаэдра, демонстрирующие иммуногенные пептиды в своих открытых петлях, для потенциального применения, включая онкоиммунологию и возникающие инфекционные заболевания.

В WO 2017167988 А1 раскрыты синтетические додекаэдры аденовируса, способствующие встраиванию эпитопа в открытые петли, а также раскрыто получение белка основания аденовируса.

Задача, лежащая в основе настоящего изобретения, заключается в обеспечении новой системы для презентации антигенов или другого груза через белковые каркасы, которые могут собираться в структуры ВПЧ.

Вышеупомянутая техническая задача обеспечена вариантами осуществления настоящего изобретения, как определено в формуле настоящего изобретения, а также дополнительно описана в настоящем документе и проиллюстрирована сопроводительными графическими материалами.

Настоящее изобретение основано, по меньшей мере частично, на обнаружении того факта, что структура белков основания пентона аденовируса представляет собой настоящую двухдоменную структуру, которая могла возникнуть в процессе эволюции в результате слияния генов (фиг. 1В). Указанные два домена, как оказалось, можно легко разделить на две отдельных компактных частицы: бета-цилиндр, содержащий информацию о мультимеризации, и домен альфа-спираль, напоминающая "корону".

Следовательно, в соответствии с настоящим изобретением обеспечен полипептид "минимальной" мультимеризации, который может быть связан с антигеном или другими частицами, несущими груз, что обеспечивает максимальную универсальность и гибкость. Сконструированный таким образом полипептид по настоящему изобретению является производным аминокислотных последовательностей белков основания пентона аденовируса (также называемых в настоящем документе "протомерами основания пентона"), которые образуют домен бета-цилиндр основания пентона аденовирусов. Домен бета-цилиндр белков основания пентона аденовируса образует так называемый домен с укладкой типа рулет (jelly roll fold), содержащий восемь бета-листов с 1 по 8 (см. фиг. 2), Zubieta et al. (2005) Mol. Cell 17, 121-135. Авторами настоящего изобретения было неожиданно обнаружено, что для эффективной мультимеризации и, таким образом, отображения связанного груза, например, олигопептидов или полипептидов, таких как антигены или другие связанные частицы, например, лекарственные средства, метки, нуклеиновые кислоты, две петли (образующие домен «корона»), вставленные в последовательности между аминокислотными участками, образующими домен с укладкой типа рулет, могут быть полностью или в других вариантах осуществления частично заменены желаемыми неаденовирусными последовательностями такими как олигопептидные линкеры (с которыми, в свою очередь, могут быть связаны антигены или другой груз) или любой желаемой аминокислотной последовательностью, такой как полипептиды, белки, белковые домены, белковые комплексы и т.д.

Следовательно, в предпочтительных вариантах осуществления настоящего изобретения нуклеиновая кислота, лекарственное средство, метка и/или партнер по связыванию биологически связывающейся пары присоединен/присоединены к L₁ и/или L₂. "Биологически связывающаяся" пара в соответствии с настоящим изобретением представляет собой пары биологических частиц или соединений, соответственно, которые обычно встречаются в природе или которые по меньшей мере происходят от пар связывания, встречающихся в природе. Примеры включают, но не ограничиваются ими, антигены, антитела, фрагменты антител, диатела, миметики антител, рецепторы и их лиганды, биотин, стрептавидин и т.п.

Такие частицы могут быть связаны с L₁ и/или L₂ с помощью средств, известных в данной области техники. При необходимости линкеры любого типа могут быть связаны с подходящей группой в положении в L₁ и/или L₂, и этот линкер затем присоединяется к желаемой частице. Типичные группы, присутствующие в L₁ и/или L₂, которые могут быть вовлечены в химическое связывание, включают группы NH₂ и SH аминокислотных остатков, присутствующих в L₁ и/или L₂. Однако связывание груза с L₁ и/или L₂ не ограничено химическими связями, но также включает любые другие взаимодействия, такие как ионные взаимодействия, водородные связи и Ван-дер-Ваальсовы взаимодействия.

Домен с укладкой типа рулет в соответствии с настоящим изобретением образован тремя аминокислотными участками (которые также могут называться, например, "сегментами" или "областями"): N-концевым участком, промежуточным участком и С-концевым участком. В нативном протомере основания пентона аденовируса сегменты петли обнаружены между N-концевым аминокислотным участком и промежуточным участком (большая петля) и между промежуточным аминокислотным участком и С-концевым аминокислотным участком (малая петля). Как указано выше, типичные неаденовирусные последовательности полипептида по настоящему изобретению, которые могут быть обозначены в данном документе как "линкеры", заменяют сегменты петли нативного протомера основания пентона аденовируса. В других вариантах осуществления настоящего изобретения одна из больших петель и малая петля нативного основания пентона могут присутствовать в полипептиде по настоящему изобретению и формировать L₁ или L₂.

Таким образом, полипептид по настоящему изобретению обычно имеет структуру, представленную следующей общей формулой (I)

где

А представляет собой N-концевой аминокислотный участок белка основания пентона аденовируса,

В представляет собой аминокислотный участок белка основания пентона аденовируса,

С представляет собой С-концевой аминокислотный участок основания пентона аденовируса,

где В представляет собой аминокислотный участок, расположенный между А и С в последовательности указанного основания пентона аденовируса,

где А, В и С образуют домен с укладкой типа рулет указанного белка основания пентона аденовируса.

L₁ и L₂ представляют собой линкеры, как указано выше. Таким образом, L₁ и L₂ могут быть выбраны практически из любой аминокислотной последовательности (при условии, что она не препятствует мультимеризации полипептида). Таким образом, L₁ и L₂ могут быть одинаковыми или различными и независимо друг от друга выбраны из группы, состоящей из олигопептида, полипептида, белка и белкового комплекса. Последовательности L₁ и L₂, как правило, не являются аденовирусными, т.е. имеют аминокислотную последовательность из по меньшей мере 5, 6, 7, 8, 9 10 или более аминокислот, причем такая последовательность не существует или не встречается в известных последовательностях протомеров основания пентона любого серотипа аденовируса, более предпочтительно любого аденовирусного белка.

В альтернативном варианте осуществления настоящего изобретения линкеры L₁ и L₂ могут быть выбраны из последовательностей петель (т.е. областей, содержащих первую и вторую петли RGD и/или вариабельную петлю, как раскрыто в WO 2017/167988 А1) основания пентона аденовируса. Однако в данном варианте осуществления последовательности сегментов петли происходят от аденовируса, имеющего серотип отличный от серотипа аденовируса, от которого происходят указанные аминокислотные участки А, В и С.Соответственно, в данном варианте осуществления настоящего изобретения обеспечены химеры протомеров основания пентона, где бета-цилиндр, домен с укладкой типа рулет происходит от одного подтипа аденовируса, тогда как L₁ и L₂ представляют собой полипептиды, содержащие сегменты петли RGD и/или вариабельные сегменты петли VL (образующие домен «корона»), происходящие от подтипа аденовируса, отличного от подтипа аденовируса, от которого происходит домен с укладкой типа рулет.

В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения, как показано на фиг. 2, аминокислотный участок А содержит бета-листы 1, 2 и 3 домена с укладкой типа рулет протомера основания пентона аденовируса, аминокислотный участок В содержит бета-листы 4 и 5 домена с укладкой типа рулет указанного протомера основания пентона аденовируса и аминокислотный участок С содержит бета-листы 6, 7 и 8 домена с укладкой типа рулет указанного протомера основания пентона аденовируса. Следует понимать, что каждый сегмент А, В и С может быть независимо получен из одного или различных аденовирусов.

Предпочтительно аминокислотные участки А, В и С имеют аминокислотную последовательность, каждая из которых независимо происходит от последовательностей основания пентона, выбранных из группы, состоящей из оснований пентона аденовируса человека 2 серотипа (hAd2), аденовируса человека 3 серотипа (hAd3), аденовируса человека 4 серотипа (hAd4), аденовируса человека 5 серотипа (hAd5), аденовируса человека 7 серотипа (hAd7), аденовируса человека 11 серотипа (hAd11), аденовируса человека 12 серотипа (hAd12), аденовируса человека 17 серотипа (hAd17), аденовируса человека 25 серотипа (hAd25), аденовируса человека 35 серотипа (hAd35), аденовируса человека 37 серотипа (hAd37), аденовируса человека 41 серотипа (hAd41), аденовируса гориллы (gorAd), аденовируса шимпанзе (ChimpAd), аденовируса обезьяны 18 серотипа (sAd1S), аденовируса обезьяны 20 серотипа (sAd20), аденовируса обезьяны 49 серотипа (sAd49), аденовируса макака-резуса 51 серотипа (rhAd51), аденовируса макака-резуса 52 серотипа (rhAd52) и аденовируса макака-резуса 53 серотипа (rhAd53).

Предпочтительные аминокислотные последовательности вышеупомянутых аденовирусных оснований пентона находятся в общедоступных базах данных, таких как UniProt и UniProtE, и особенно предпочтительные последовательности, описанные в данном документе для вышеупомянутых подтипов аденовирусов, представлены в UniProt Асе. № Q2Y0H9 (аденовируса человека 3 серотипа, SEQ ID NO: 1), UniProt Асе. № Р03276 (аденовируса человека 2 серотипа, SEQ ID NO: 2), UniProt Асе. № Q2KSF3 (аденовируса человека 4 серотипа, SEQ ID NO: 3), UniProt Асе. № Р12538 (аденовируса человека 5 серотипа, SEQ ID NO: 4), UniProt Асе. № Q9JFT6 (аденовируса человека 7 серотипа, SEQ ID NO: 5), UniProt Асе. № D2DM93 (аденовируса человека 11 серотипа, SEQ ID NO: 6), UniProt Асе. № Р36716 (аденовируса человека 12 серотипа, SEQ ID NO: 7), UniProt Асе. № F1DT65 (аденовируса человека 17 серотипа, SEQ ID NO: 8), UniProt Асе. № M0QUK0 (аденовируса человека 25 серотипа, SEQ ID NO: 9), UniProt Асе. № Q7T941 (аденовируса человека 35 серотипа, SEQ ID NO: 10), UniProt Асе. № Q912J1 (аденовируса человека 37 серотипа, SEQ ID NO: 11), UniProt Асе. № F8WQN4 (аденовируса человека 41 серотипа, SEQ ID NO: 12), UniProt Асе. № E5L3Q9 (аденовируса гориллы, SEQ ID NO: 13), UniProt Асе. № G9G849 (аденовируса шимпанзе, SEQ ID NO: 14), UniProt Асе. № H8PFZ9 (аденовируса обезьяны 18 серотипа, SEQ ID NO: 15), UniProt Асе. № F6KSU4 (аденовируса обезьяны 18 серотипа, SEQ ID NO: 16), UniProt Асе. № F2WTK5 (аденовируса обезьяны 49 серотипа, SEQ ID NO: 17), UniProt Асе. № A0A0A1EWW1 (аденовируса макака-резуса 51 серотипа, SEQ ID NO: 18), UniProt Асе. № A0A0A1EWX7 (аденовируса макака-резуса 52 серотипа, SEQ ID NO: 19) и UniProt Асе. № A0A0A1EWZ7 (аденовируса макака-резуса 53 серотипа, SEQ ID NO: 20).

Аминокислотные последовательности вышеуказанных оснований пентона представляют собой (в скобках указан соответствующий номер UniProt Асе):

Основание пентона hAd3 аденовируса человека 3 серотипа (Q2Y0H9), SEQ ID NO: 1:

hAd2 (P03276), SEQ ID NO: 2:

hAd4 (Q2KSF3), SEQ ID NO: 3:

hAd5 (P12538), SEQ ID NO: 4:

hAd7 (Q9JFT6), SEQ ID NO: 5:

hAd11 (D2DM93), SEQ ID NO: 6:

hAd12 (P36716), SEQ ID NO: 7:

hAd17 (F1DT65), SEQ ID NO: 8:

hAd25 (MOQUKO), SEQ ID NO: 9:

hAd35 (Q7T941), SEQ ID NO: 10:

hAd37 (Q912J1), SEQ ID NO: 11

hAd41 (F8WQN4), SEQ ID NO: 12:

Основание пентона аденовируса гориллы gorAd (E5L3Q9), SEQ ID NO: 13:

Основание пентона аденовируса шимпанзе chimpAd (G9G849), SEQ ID NO: 14:

Основание пентона аденовируса обезьяны 18 серотипа, sAd18 (H8PFZ9); SEQ ID NO: 15:

sAd20 (F6KSU4), SEQ ID NO: 16:

sAd49 (F2WTK5), SEQ ID NO: 17:

Основание пентона аденовируса макака-резуса 51 серотипа, rhAd51 (A0A0A1EWW1), SEQ ID NO: 18:

rhAd52 (A0A0A1EWX7), SEQ ID NO: 19:

rhAd53 (A0A0A1EWZ7), SEQ ID NO: NO 20:

Полипептид по настоящему изобретению не ограничивается теми известными специфическими последовательностями для аминокислотных участков А, В и С, образующих мультимеризационный домен с укладкой типа рулет упомянутых выше суб-и серотипов аденовируса, соответственно. Аминокислотные сегменты А, В и С могут также иметь аминокислотные последовательности, сходные с последовательностями известных протомеров оснований пентона аденовируса, при условии, что последовательности А, В и С таковы, что полученный полипептид принимает укладку типа рулет и собирается в пентамерные комплексы (также обозначаемые как "белки пентона"), двенадцать из которых, в свою очередь, самоорганизуются с образованием додекамерного суперкомплекса (ВПЧ по настоящему изобретению) в соответствующих условиях, как дополнительно описано ниже. Обычно такие похожие последовательности сегментов А, В и С имеют идентичность аминокислотной последовательности не менее 85%, более предпочтительно не менее 90%, еще более предпочтительно 95%, особенно предпочтительно не менее 98%, наиболее предпочтительно не менее 99%, с соответствующей аминокислотной последовательностью известного пентона основания аденовируса, предпочтительно с последовательностями SEQ ID NO: с 1 по 20, более предпочтительно, аминокислотные участки А, В и С, как представлено в таблицах 1-3 ниже.

В данном контексте аминокислотные последовательности указаны от N до С-конца с применением однобуквенного кода ИЮПАК, если не указано иное.

Согласно предпочтительному варианту осуществления настоящего изобретения аминокислотный участок А имеет следующую консенсусную последовательность (SEQ ID NO: 21):

где: аминокислотный участок А заканчивается на С-конце перед Z₁ у остатка Т или у аминокислоты с Z₁ по Z15,

U представляет собой любую аминокислоту или отсутствует,

X₁ представляет собой Е или G,

Х₂ представляет собой Е или S,

Х₃ представляет собой L или V,

Х₄ представляет собой А или S,

Х₅ представляет собой L или Q,

Х₆ представляет собой Y или Е,

Х₇ представляет собой R или К,

Х₈ представляет собой V или L,

Х₉ представляет собой V или I,

Х₁₀ представляет собой F или Y,

Х₁₁ представляет собой Т или S,

Х₁₂ представляет собой А, или Т, или I, или G,

Х₁₃ представляет собой S или G,

Х₁₄ представляет собой F или L,

Х₁₅ представляет собой Е или D,

Х₁₆ представляет собой А или G,

Х₁₇ представляет собой D или Q,

X₁₈ представляет собой L или М,

Х₁₉ представляет собой Н или R,

Z₁, если присутствует, представляет собой N,

Z₂, если присутствует, представляет собой М,

Z₃, если присутствует, представляет собой Р,

Z₄, если присутствует, представляет собой N,

Z₅, если присутствует, представляет собой V или I,

Z₆, если присутствует, представляет собой N,

Z₇, если присутствует, представляет собой Е или D,

Z₈, если присутствует, представляет собой Y или F,

Z₉, если присутствует, представляет собой М,

Z₁₀, если присутствует, представляет собой F, или S, или Y,

Z₁₁, если присутствует, является Т или S,

Z₁₂, если присутствует, является S или N,

Z₁₃, если присутствует, представляет собой K,

Z₁₄, если присутствует, представляет собой F,

Z₁₆ если присутствует, представляет собой K.

Более предпочтительные аминокислотные последовательности сегмента А полипептида по настоящему изобретению представлены в следующей таблице 1:

Согласно еще одному предпочтительному варианту осуществления настоящего изобретения аминокислотный участок В вышеуказанной общей формулы (I) имеет следующую последовательность (SEQ ID NO: 22):

где: аминокислотный участок В начинается на N-конце у аминокислоты с Z₁₇ по Z₂₇ или у аминокислоты Q после Z₂₇,

аминокислотный участок В заканчивается на С-конце перед Z₂₈ у аминокислоты L или у аминокислоты с Z₂₈ по Z₃₀,

Z₁₇, если присутствует, представляет собой L или S,

Z₁₈, если присутствует, представляет собой Т или Р или С,

Z₁₉, если присутствует, представляет собой Т или Р,

Z₂₀, если присутствует, представляет собой Р или S или А или R,

Z₂₁, если присутствует, представляет собой N или D,

Z₂₂, если присутствует, представляет собой G или V,

Z₂₃, если присутствует, представляет собой Н или Т,

Z₂₄, если присутствует, представляет собой С,

Z₂₅, если присутствует, представляет собой G,

Z₂₆, если присутствует, представляет собой А, или V, или S,

Z₂₇, если присутствует, представляет собой Е или Q,

Х₂₀ представляет собой L или М,

Х₂₁ представляет собой Q или K,

Х₂₂ представляет собой Q или R, или S,

Х₂₃ представляет собой V или I,

Х₂₄ представляет собой S или N,

Х₂₅ представляет собой Y или F,

Х₂₆ представляет собой А или V,

Z₂₈, если присутствует, представляет собой М или L,

Z₂₉, если присутствует, представляет собой Р,

Z₃₀, если присутствует, представляет собой V или F.

Более предпочтительные аминокислотные последовательности сегмента В полипептида по настоящему изобретению представлены в следующей таблице 2:

Согласно дополнительному предпочтительному варианту осуществления настоящего изобретения сегмент С вышеуказанной общей формулы (I) имеет следующую последовательность (SEQ ID NO: 23):

где: аминокислотный участок С начинается на N-конце у аминокислоты с Z₃₁ по Z₃₃ или у аминокислоты А после Z₃₃,

Z₃₁, если присутствует, представляет собой N,

Z₃₂, если присутствует, представляет собой V,

Z₃₃, если присутствует, представляет собой Р,

Х₂₇ представляет собой R или S или G,

Х₂₈ представляет собой V или I,

Х₂₉ представляет собой Y или Н,

Х₃₀ представляет собой А или S,

Х₃₁ представляет собой R или K.

Более предпочтительные аминокислотные последовательности сегмента С полипептида по настоящему изобретению представлены в следующей таблице 3:

Особенно предпочтительные полипептиды по настоящему изобретению основаны на домене с укладкой типа рулет протомера основания пентона hAd3. В частности, предпочтительны полипептиды, где аминокислотный участок А имеет аминокислотную последовательность, начинающуюся с положения, выбранного из аминокислот с 1 по 48, наиболее предпочтительно положения аминокислоты 1, до положения аминокислоты, выбранного из положений с 129 по 144, наиболее предпочтительно положения аминокислоты 132, где аминокислотный участок В имеет аминокислотную последовательность, начинающуюся с положения, выбранного из положений с 398 по 409, наиболее предпочтительно положения аминокислоты 407, до положения, выбранного из положений с 440 по 443, наиболее предпочтительно положения аминокислоты 442, и где аминокислотный участок С имеет аминокислотную последовательность, начинающуюся с положения, выбранного из положения с 492 по 495, наиболее предпочтительно положения аминокислоты 493, до положения аминокислоты 544, где положения аминокислот относятся к последовательности, представленной в UniProt Асе. № QY0H9 (SEQ ID NO: 1).

Связывающие сегменты L₁ и L₂ полипептида по настоящему изобретению могут быть выбраны из о л иго пептидных линкеров, таких как олигопептиды, содержащие от 4 до 10 аминокислот, предпочтительно содержащие аминокислоты G и S. Предпочтительный пример представляет собой GGGS (SEQ ID 24). Другой пример представляет собой линкер, состоящий из G и S и имеющий несколько повторов GGS, например, 2, 3, 4, 5 или более повторов GGS. Особенно предпочтительный линкер этого типа id GGSGGS (SEQ ID NO: 25).

В других предпочтительных вариантах осуществления L₁ представляет собой полипептидную последовательность, содержащую петлю RGD основания пентона аденовируса, имеющего серотип отличный от серотипа аденовируса(ов), от которого происходят указанные аминокислотные участки А, В и С и/или D представляет собой полипептидную последовательность, содержащую вариабельную петлю основания пентона аденовируса, имеющего серотип отличный от серотипа аденовируса, от которого происходят указанные аминокислотные участки А, В и С.

В дополнительных вариантах осуществления настоящего изобретения L₁ представляет собой петлю RDG, a L₂ представляет собой предпочтительно неаденовирусный олигопептид, предпочтительно из от 4 до 20 аминокислот, более предпочтительно из от 4 до 10 аминокислот, особенно предпочтительно олигопептидный линкер, состоящий из G и S, как определено выше. В аналогичных вариантах осуществления L₂ представляет собой или содержит вариабельную петлю, a L₁ представляет собой олигопептидный линкер, как определено выше. Согласно настоящему изобретению также предполагается, что L₂ представляет собой или содержит петлю RGD, a L₁ представляет собой олигопептидный линкер, и также предполагается, что L₁ представляет собой вариабельную петлю, a L₂ представляет собой олигопептидный линкер.

В других предпочтительных вариантах осуществления, как упоминалось выше, последовательности L₁ и L₂, соответственно, могут быть выбраны из последовательностей домена «корона» белков основания пентона аденовируса, отличного от аденовируса, от которого происходит домен мультимеризации. Обычно комбинация химеры домена «корона» и домена мультимеризации не ограничена. Предпочтительные химеры выбирают из комбинаций доменов «корона» и доменов мультимеризации, как указано выше. Домены «корона», необязательно и предпочтительно, включая неаденовирусные последовательности, встроенные в петлю RGD и/или вариабельную петлю соответствующего домена «корона», более предпочтительно раскрыты в WO 2017/167988 А1.

Таким образом, понятно, что домены «корона» оснований пентона аденовируса обычно состоят из двух аминокислотных участков: так называемого большого фрагмента и малого фрагмента. Большой фрагмент домена «корона» расположен обычно на N-конце в аминокислотной последовательности соответствующего белка основания пентона аденовируса, тогда как малый фрагмент домена «корона» расположен обычно на С-конце. Согласно настоящему изобретению предпочтительно, чтобы большой фрагмент (содержащий петлю RGD, как упомянуто выше) соответствовал L₁ общей формулы (I), и дополнительно предпочтительно, чтобы малый фрагмент (содержащий вариабельную петлю) соответствовал L₂ общей формулы (I). Согласно некоторым вариантам осуществления настоящего изобретения большой и малый фрагменты происходят от одного и того же основания пентона аденовируса. Согласно другим вариантам осуществления настоящего изобретения большой фрагмент и малый фрагмент происходят от различных оснований пентона аденовируса или что только один из больших и малых фрагментов происходит от белка оснований пентона аденовируса, отличного от аденовируса, от которого происходит домен мультимеризации, т.е. от которого происходят аминокислотные участки А, В и С.

Предпочтительные домены «корона» для применения в химерных конструкциях по настоящему изобретению включают домены «корона», выбранные из группы, состоящей из оснований пентона аденовируса человека 2 серотипа (hAd2), аденовируса человека 3 серотипа (hAd3), аденовируса человека 4 серотипа (hAd4), аденовируса человека 5 серотипа (hAd5), аденовируса человека 7 серотипа (hAd7), аденовируса человека 11 серотипа (hAd11), аденовируса человека 12 серотипа (hAd12), аденовируса человека 17 серотипа (hAd17), аденовируса человека 25 серотипа (hAd25), аденовируса человека 35 серотипа (hAd35), аденовируса человека 37 серотипа (hAd37), аденовируса человека 41 серотипа (hAd41), аденовируса гориллы (gorAd), аденовируса шимпанзе (ChimpAd), аденовируса обезьяны 18 серотипа (sAd1S), аденовируса обезьяны 20 серотипа (sAd20), аденовируса обезьяны 49 серотипа (sAd 49), аденовируса макака-резуса 51 серотипа (rhAd51), аденовируса макака-резуса 52 серотипа (rhAd52) и аденовируса макака-резуса 53 серотипа (rhAd53).

Предпочтительные аминокислотные последовательности указанных выше оснований пентона аденовируса, применяемых для домена «корона», представлены в общедоступных базах данных, таких как UniProt и UniProtE, и особенно предпочтительные последовательности, описанные в данном документе для вышеупомянутых подтипов аденовирусов, представлены в UniProt Асе. № Q2Y0H9 (аденовируса человека 3 серотипа, SEQ ID NO: 1), UniProt Асе. № Р03276 (аденовируса человека 2 серотипа, SEQ ID NO: 2), UniProt Асе. № Q2KSF3 (аденовируса человека 4 серотипа, SEQ ID NO: 3), UniProt Асе. № PI2538 (аденовируса человека 5 серотипа, SEQ ID NO: 4), UniProt Асе. № Q9JFT6 (аденовируса человека 7 серотипа, SEQ ID NO: 5), UniProt Асе. № D2DM93 (аденовируса человека 11 серотипа, SEQ ID NO: 6), UniProt Асе. № Р36716 (аденовируса человека 12 серотипа, SEQ ID NO: 7), UniProt Асе. № F1DT65 (аденовируса человека 17 серотипа, SEQ ID NO: 8), UniProt Асе. № M0QUK0 (аденовируса человека 25 серотипа, SEQ ID NO: 9), UniProt Асе. № Q7T941 (аденовируса человека 35 серотипа, SEQ ID NO: 10), UniProt Асе. № Q912J1 (аденовируса человека 37 серотипа, SEQ ID NO: 11), UniProt Асе. № F8WQN4 (аденовируса человека 41 серотипа, SEQ ID NO: 12), UniProt Асе. № E5L3Q9 (аденовируса гориллы, SEQ ID NO: 13), UniProt Асе. № G9G849 (аденовируса шимпанзе, SEQ ID NO: 14), UniProt Асе. № H8PFZ9 (аденовируса обезьяны 18 серотипа, SEQ ID NO: 15), UniProt Асе. № F6KSU4 (аденовируса обезьяны 20 серотипа, SEQ ID NO: 16), UniProt Асе. № F2WTK5 (аденовируса обезьяны 49 серотипа, SEQ ID NO: 17), UniProt Асе. № A0A0A1EWW1 (аденовируса макака-резуса 51 серотипа, SEQ ID NO: 18), UniProt Асе. № A0A0A1EWX7 (аденовируса макака-резуса 52 серотипа, SEQ ID NO: 19) и UniProt Асе. № A0A0A1EWZ7 (аденовируса макака-резуса 53 серотипа, SEQ ID NO: 20).

Наиболее предпочтительные последовательности больших фрагментов доменов «корона» для применения в химерных конструкциях по настоящему изобретению приведены в следующей таблице 4:

Наиболее предпочтительные последовательности больших фрагментов доменов «корона» для применения в химерных конструкциях по настоящему изобретению приведены в следующей таблице 5:

Предпочтительный вариант осуществления настоящего изобретения представляет собой химеру, где домен мультимеризации аденовируса человека 2 серотипа (hAd2) объединен с доменом «корона» основания пентона аденовируса, выбранного из аденовируса человека 3 серотипа (hAd3), аденовируса человека 4 серотипа (hAd4), аденовируса человека 5 серотипа (hAd5), аденовируса человека 7 серотипа (hAd7), аденовируса человека 11 серотипа (hAd11), аденовируса человека 12 серотипа (hAd12), аденовируса человека 17 серотипа (hAd17), аденовируса человека 25 серотипа (hAd25), аденовируса человека 35 серотипа (hAd35), аденовируса человека 37 серотипа (hAd37), аденовируса человека 41 серотипа (hAd41), аденовируса гориллы (gorAd), аденовируса шимпанзе (ChimpAd), аденовируса обезьяны 18 серотипа (sAd18), аденовируса обезьяны 20 серотипа (sAd20), аденовируса обезьяны 49 серотипа (sAd49), аденовируса макака-резуса 51 серотипа (rhAd51), аденовируса макака-резуса 52 серотипа (rhAd52) и аденовируса макака-резуса 53 серотипа (rhAd53). Конкретные последовательности домена мультимеризации и домена «корона», выбранные для данной комбинации относятся к конкретным примерам в соответствии с таблицами с 1 по 5.

Предпочтительный вариант осуществления настоящего изобретения представляет собой химеру, где домен мультимеризации аденовируса человека 3 серотипа (hAd3) объединен с доменом «корона» основания пентона аденовируса, выбранного из аденовируса человека 2 серотипа (hAd2), аденовируса человека 4 серотипа (hAd4), аденовируса человека 5 серотипа (hAd5), аденовируса человека 7 серотипа (hAd7), аденовируса человека 11 серотипа (hAd11), аденовируса человека 12 серотипа (hAd12), аденовируса человека 17 серотипа (hAd17), аденовируса человека 25 серотипа (hAd25), аденовируса человека 35 серотипа (hAd35), аденовируса человека 37 серотипа (hAd37), аденовируса человека 41 серотипа (hAd41), аденовируса гориллы (gorAd), аденовируса шимпанзе (ChimpAd), аденовируса обезьяны 18 серотипа (sAd18), аденовируса обезьяны 20 серотипа (sAd20), аденовируса обезьяны 49 серотипа (sAd49), аденовируса макака-резуса 51 серотипа (rhAd51), аденовируса макака-резуса 52 серотипа (rhAd52) и аденовируса макака-резуса 53 серотипа (rhAd53). Конкретные последовательности домена мультимеризации и домена «корона», выбранные для данной комбинации относятся к конкретным примерам в соответствии с таблицами с 1 по 5.

Предпочтительный вариант осуществления настоящего изобретения представляет собой химеру, где домен мультимеризации аденовируса человека 4 серотипа (hAd4) объединен с доменом «корона» основания пентона аденовируса, выбранного из аденовируса человека 2 серотипа (hAd2), аденовируса человека 3 серотипа (hAd3), аденовируса человека 5 серотипа (hAd5), аденовируса человека 7 серотипа (hAd7), аденовируса человека 11 серотипа (hAd11), аденовируса человека 12 серотипа (hAd12), аденовируса человека 17 серотипа (hAd17), аденовируса человека 25 серотипа (hAd25), аденовируса человека 35 серотипа (hAd35), аденовируса человека 37 серотипа (hAd37), аденовируса человека 41 серотипа (hAd41), аденовируса гориллы (gorAd), аденовируса шимпанзе (ChimpAd), аденовируса обезьяны 18 серотипа (sAd18), аденовируса обезьяны 20 серотипа (sAd20), аденовируса обезьяны 49 серотипа (sAd49), аденовируса макака-резуса 51 серотипа (rhAd51), аденовируса макака-резуса 52 серотипа (rhAd52) и аденовируса макака-резуса 53 серотипа (rhAd53). Конкретные последовательности домена мультимеризации и домена «корона», выбранные для данной комбинации относятся к конкретным примерам в соответствии с таблицами с 1 по 5.

Предпочтительный вариант осуществления настоящего изобретения представляет собой химеру, где домен мультимеризации аденовируса человека 5 серотипа (hAd5) объединен с доменом «корона» основания пентона аденовируса, выбранного из аденовируса человека 2 серотипа (hAd2), аденовируса человека 3 серотипа (hAd3), аденовируса человека 4 серотипа (hAd4), аденовируса человека 7 серотипа (hAd7), аденовируса человека 11 серотипа (hAd11), аденовируса человека 12 серотипа (hAd12), аденовируса человека 17 серотипа (hAd17), аденовируса человека 25 серотипа (hAd25), аденовируса человека 35 серотипа (hAd35), аденовируса человека 37 серотипа (hAd37), аденовируса человека 41 серотипа (hAd41), аденовируса гориллы (gorAd), аденовируса шимпанзе (ChimpAd), аденовируса обезьяны 18 серотипа (sAd18), аденовируса обезьяны 20 серотипа (sAd20), аденовируса обезьяны 49 серотипа (sAd49), аденовируса макака-резуса 51 серотипа (rhAd51), аденовируса макака-резуса 52 серотипа (rhAd52) и аденовируса макака-резуса 53 серотипа (rhAd53). Конкретные последовательности домена мультимеризации и домена «корона», выбранные для данной комбинации относятся к конкретным примерам в соответствии с таблицами с 1 по 5.

Предпочтительный вариант осуществления настоящего изобретения представляет собой химеру, где домен мультимеризации аденовируса человека 7 серотипа (hAd7) объединен с доменом «корона» основания пентона аденовируса, выбранного из аденовируса человека серотипа 2 (hAd2), аденовируса человека 3 серотипа (hAd3), аденовируса человека 4 серотипа (hAd4), аденовируса человека 5 серотипа (hAd5), аденовируса человека 11 серотипа (hAd11), аденовируса человека 12 серотипа (hAd12), аденовируса человека 17 серотипа (hAd17), аденовируса человека 25 серотипа (hAd25), аденовируса человека 35 серотипа (hAd35), аденовируса человека 37 серотипа (hAd37), аденовируса человека 41 серотипа (hAd41), аденовируса гориллы (gorAd), аденовируса шимпанзе (ChimpAd), аденовируса обезьяны 18 серотипа (sAd18), аденовируса обезьяны 20 серотипа (sAd20), аденовируса обезьяны 49 серотипа (sAd49), аденовируса макака-резуса 51 серотипа (rhAd51), аденовируса макака-резуса 52 серотипа (rhAd52) и аденовируса макака-резуса 53 серотипа (rhAd53). Конкретные последовательности домена мультимеризации и домена «корона», выбранные для данной комбинации относятся к конкретным примерам в соответствии с таблицами с 1 по 5.

Предпочтительный вариант осуществления настоящего изобретения представляет собой химеру, где домен мультимеризации аденовируса человека 11 серотипа (hAd11) объединен с доменом «корона» основания пентона аденовируса, выбранного из аденовируса человека 2 серотипа (hAd2), аденовируса человека 3 серотипа (hAd3), аденовируса человека 4 серотипа (hAd4), аденовируса человека 5 серотипа (hAd5), аденовируса человека 7 серотипа (hAd7), аденовируса человека 12 серотипа (hAd12), аденовируса человека 17 серотипа (hAd17), аденовируса человека 25 серотипа (hAd25), аденовируса человека 35 серотипа (hAd35), аденовируса человека 37 серотипа (hAd37), аденовируса человека 41 серотипа (hAd41), аденовируса гориллы (gorAd), аденовируса шимпанзе (ChimpAd), аденовируса обезьяны 18 серотипа (sAd18), аденовируса обезьяны 20 серотипа (sAd20), аденовируса обезьяны 49 серотипа (sAd49), аденовируса макака-резуса 51 серотипа (rhAd51), аденовируса макака-резуса 52 серотипа (rhAd52) и аденовируса макака-резуса 53 серотипа (rhAd53). Конкретные последовательности домена мультимеризации и домена «корона», выбранные для данной комбинации относятся к конкретным примерам в соответствии с таблицами с 1 по 5.

Предпочтительный вариант осуществления настоящего изобретения представляет собой химеру, где домен мультимеризации аденовируса человека 12 серотипа (hAd12) объединен с доменом «корона» основания пентона аденовируса, выбранного из аденовируса человека 2 серотипа (hAd2), аденовируса человека 3 серотипа (hAd3), аденовируса человека 4 серотипа (hAd4), аденовируса человека 5 серотипа (hAd5), аденовируса человека 7 серотипа (hAd7), аденовируса человека 11 серотипа (hAd11), аденовируса человека 17 серотипа (hAd17), аденовируса человека 25 серотипа (hAd25), аденовируса человека 35 серотипа (hAd35), аденовируса человека 37 серотипа (hAd37), аденовируса человека 41 серотипа (hAd41), аденовируса гориллы (gorAd), аденовируса шимпанзе (ChimpAd), аденовируса обезьяны 18 серотипа (sAd18), аденовируса обезьяны 20 серотипа (sAd20), аденовируса обезьяны 49 серотипа (sAd49), аденовируса макака-резуса 51 серотипа (rhAd51), аденовируса макака-резуса 52 серотипа (rhAd52) и аденовируса макака-резуса 53 серотипа (rhAd53). Конкретные последовательности домена мультимеризации и домена «корона», выбранные для данной комбинации относятся к конкретным примерам в соответствии с таблицами с 1 по 5.

Предпочтительный вариант осуществления настоящего изобретения представляет собой химеру, где домен мультимеризации аденовируса человека 17 серотипа (hAd17) объединен с доменом «корона» основания пентона аденовируса, выбранного из аденовируса человека 2 серотипа (hAd2), аденовируса человека 3 серотипа (hAd3), аденовируса человека 4 серотипа (hAd4), аденовируса человека 5 серотипа (hAd5), аденовируса человека 7 серотипа (hAd7), аденовируса человека 11 серотипа (hAd11), аденовируса человека 12 серотипа (hAd12), аденовируса человека 25 серотипа (hAd25), аденовируса человека 35 серотипа (hAd35), аденовируса человека 37 серотипа (hAd37), аденовируса человека 41 серотипа (hAd41), аденовируса гориллы (gorAd), аденовируса шимпанзе (ChimpAd), аденовируса обезьяны 18 серотипа (sAd18), аденовируса обезьяны 20 серотипа (sAd20), аденовируса обезьяны 49 серотипа (sAd49), аденовируса макака-резуса 51 серотипа (rhAd51), аденовируса макака-резуса 52 серотипа (rhAd52) и аденовируса макака-резуса 53 серотипа (rhAd53). Конкретные последовательности домена мультимеризации и домена «корона», выбранные для данной комбинации относятся к конкретным примерам в соответствии с таблицами с 1 по 5.

Предпочтительный вариант осуществления настоящего изобретения представляет собой химеру, где домен мультимеризации аденовируса человека 25 серотипа (hAd25) объединен с доменом «корона» основания пентона аденовируса, выбранного из аденовируса человека 2 серотипа (hAd2), аденовируса человека 3 серотипа (hAd3), аденовируса человека 4 серотипа (hAd4), аденовируса человека 5 серотипа (hAd5), аденовируса человека 7 серотипа (hAd7), аденовируса человека 11 серотипа (hAd11), аденовируса человека 12 серотипа (hAd12), аденовируса человека 17 серотипа (hAd17), аденовируса человека 35 серотипа (hAd35), аденовируса человека 37 серотипа (hAd37), аденовируса человека 41 серотипа (hAd41), аденовируса гориллы (gorAd), аденовируса шимпанзе (ChimpAd), аденовируса обезьяны 18 серотипа (sAd18), аденовируса обезьяны 20 серотипа (sAd20), аденовируса обезьяны 49 серотипа (sAd49), аденовируса макака-резуса 51 серотипа (rhAd51), аденовируса макака-резуса 52 серотипа (rhAd52) и аденовируса макака-резуса 53 серотипа (rhAd53). Конкретные последовательности домена мультимеризации и домена «корона», выбранные для данной комбинации относятся к конкретным примерам в соответствии с таблицами с 1 по 5.

Предпочтительный вариант осуществления настоящего изобретения представляет собой химеру, где домен мультимеризации аденовируса человека 35 серотипа (hAd35) объединен с доменом «корона» основания пентона аденовируса, выбранного из аденовируса человека 2 серотипа (hAd2), аденовируса человека 3 серотипа (hAd3), аденовируса человека 4 серотипа (hAd4), аденовируса человека 5 серотипа (hAd5), аденовируса человека 7 серотипа (hAd7), аденовируса человека 11 серотипа (hAd11), аденовируса человека 12 серотипа (hAd12), аденовируса человека 17 серотипа (hAd17), аденовируса человека 25 серотипа (hAd25), аденовируса человека 37 серотипа (hAd37), аденовируса человека 41 серотипа (hAd41), аденовируса гориллы (gorAd), аденовируса шимпанзе (ChimpAd), аденовируса обезьяны 18 серотипа (sAd18), аденовируса обезьяны 20 серотипа (sAd20), аденовируса обезьяны 49 серотипа (sAd49), аденовируса макака-резуса 51 серотипа (rhAd51), аденовируса макака-резуса 52 серотипа (rhAd52) и аденовируса макака-резуса 53 серотипа (rhAd53). Конкретные последовательности домена мультимеризации и домена «корона», выбранные для данной комбинации относятся к конкретным примерам в соответствии с таблицами с 1 по 5.

Предпочтительный вариант осуществления настоящего изобретения представляет собой химеру, где домен мультимеризации аденовируса человека 37 серотипа (hAd37) объединен с доменом «корона» основания пентона аденовируса, выбранного из аденовируса человека 2 серотипа (hAd2), аденовируса человека 3 серотипа (hAd3), аденовируса человека 4 серотипа (hAd4), аденовируса человека 5 серотипа (hAd5), аденовируса человека 7 серотипа (hAd7), аденовируса человека 11 серотипа (hAd11), аденовируса человека 12 серотипа (hAd12), аденовируса человека 17 серотипа (hAd17), аденовируса человека 25 серотипа (hAd25), аденовируса человека 35 серотипа (hAd35), аденовируса человека 41 серотипа (hAd41), аденовируса гориллы (gorAd), аденовируса шимпанзе (ChimpAd), аденовируса обезьяны 18 серотипа (sAd18), аденовируса обезьяны 20 серотипа (sAd20), аденовируса обезьяны 49 серотипа (sAd49), аденовируса макака-резуса 51 серотипа (rhAd51), аденовируса макака-резуса 52 серотипа (rhAd52) и аденовируса макака-резуса 53 серотипа (rhAd53). Конкретные последовательности домена мультимеризации и домена «корона», выбранные для данной комбинации относятся к конкретным примерам в соответствии с таблицами с 1 по 5.

Предпочтительный вариант осуществления настоящего изобретения представляет собой химеру, где домен мультимеризации аденовируса человека 41 серотипа (hAd41) объединен с доменом «корона» основания пентона аденовируса, выбранного из аденовируса человека 2 серотипа (hAd2), аденовируса человека 3 серотипа (hAd3), аденовируса человека 4 серотипа (hAd4), аденовируса человека 5 серотипа (hAd5), аденовируса человека 7 серотипа (hAd7), аденовируса человека 11 серотипа (hAd11), аденовируса человека 12 серотипа (hAd12), аденовируса человека 17 серотипа (hAd17), аденовируса человека 25 серотипа (hAd25), аденовируса человека 35 серотипа (hAd35), аденовируса человека 37 серотипа (hAd41), аденовируса гориллы (gorAd), аденовируса шимпанзе (ChimpAd), аденовируса обезьяны 18 серотипа (sAd18), аденовируса обезьяны 20 серотипа (sAd20), аденовируса обезьяны 49 серотипа (sAd49), аденовируса макака-резуса 51 серотипа (rhAd51), аденовируса макака-резуса 52 серотипа (rhAd52) и аденовируса макака-резуса 53 серотипа (rhAd53). Конкретные последовательности домена мультимеризации и домена «корона», выбранные для данной комбинации относятся к конкретным примерам в соответствии с таблицами с 1 по 5.

Предпочтительный вариант осуществления настоящего изобретения представляет собой химеру, где домен мультимеризации аденовируса гориллы (gorAd) объединен с доменом «корона» основания пентона аденовируса, выбранного из аденовируса человека 2 серотипа (hAd2), аденовируса человека 3 серотипа (hAd3), аденовируса человека 4 серотипа (hAd4), аденовируса человека 5 серотипа (hAd5), аденовируса человека 7 серотипа (hAd7), аденовируса человека 11 серотипа (hAd11), аденовируса человека 12 серотипа (hAd12), аденовируса человека 17 серотипа (hAd17), аденовируса человека 25 серотипа (hAd25), аденовируса человека 35 серотипа (hAd35), аденовируса человека 37 серотипа (hAd41), аденовируса человека 41 серотипа (hAd41), аденовируса шимпанзе (ChimpAd), аденовируса обезьяны 18 серотипа (sAd18), аденовируса обезьяны 20 серотипа (sAd20), аденовируса обезьяны 49 серотипа (sAd49), аденовируса макака-резуса 51 серотипа (rhAd51), аденовируса макака-резуса 52 серотипа (rhAd52) и аденовируса макака-резуса 53 серотипа (rhAd53). Конкретные последовательности домена мультимеризации и домена «корона», выбранные для данной комбинации относятся к конкретным примерам в соответствии с таблицами с 1 по 5.

Предпочтительный вариант осуществления настоящего изобретения представляет собой химеру, где домен мультимеризации аденовируса шимпанзе (ChimpAd) объединен с доменом «корона» основания пентона аденовируса, выбранного из аденовируса человека 2 серотипа (hAd2), аденовируса человека 3 серотипа (hAd3), аденовируса человека 4 серотипа (hAd4), аденовируса человека 5 серотипа (hAd5), аденовируса человека 7 серотипа (hAd7), аденовируса человека 11 серотипа (hAd11), аденовируса человека 12 серотипа (hAd12), аденовируса человека 17 серотипа (hAd17), аденовируса человека 25 серотипа (hAd25), аденовируса человека 35 серотипа (hAd35), аденовируса человека 37 серотипа (hAd41), аденовируса человека 41 серотипа (hAd41), аденовируса гориллы (gorAd), аденовируса обезьяны 18 серотипа (sAd18), аденовируса обезьяны 20 серотипа (sAd20), аденовируса обезьяны 49 серотипа (sAd49), аденовируса макака-резуса 51 серотипа (rhAd51), аденовируса макака-резуса 52 серотипа (rhAd52) и аденовируса макака-резуса 53 серотипа (rhAd53). Конкретные последовательности домена мультимеризации и домена «корона», выбранные для данной комбинации относятся к конкретным примерам в соответствии с таблицами с 1 по 5.

Предпочтительный вариант осуществления настоящего изобретения представляет собой химеру, где домен мультимеризации аденовируса обезьяны 18 серотипа (sAd1S) объединен с доменом «корона» основания пентона аденовируса, выбранного из аденовируса человека 2 серотипа (hAd2), аденовируса человека 3 серотипа (hAd3), аденовируса человека 4 серотипа (hAd4), аденовируса человека 5 серотипа (hAd5), аденовируса человека 7 серотипа (hAd7), аденовируса человека 11 серотипа (hAd11), аденовируса человека 12 серотипа (hAd12), аденовируса человека 17 серотипа (hAd17), аденовируса человека 25 серотипа (hAd25), аденовируса человека 35 серотипа (hAd35), аденовируса человека 37 серотипа (hAd41), аденовируса человека 41 серотипа (hAd41), аденовируса гориллы (gorAd), аденовируса шимпанзе (ChimpAd), аденовируса обезьяны 20 серотипа (sAd20), аденовируса обезьяны 49 серотипа (sAd49), аденовируса макака-резуса 51 серотипа (rhAd51), аденовируса макака-резуса 52 серотипа (rhAd52) и аденовируса макака-резуса 53 серотипа (rhAd53). Конкретные последовательности домена мультимеризации и домена «корона», выбранные для данной комбинации относятся к конкретным примерам в соответствии с таблицами с 1 по 5.

Предпочтительный вариант осуществления настоящего изобретения представляет собой химеру, где домен мультимеризации аденовируса обезьяны 20 серотипа (sAd20) объединен с доменом «корона» основания пентона аденовируса, выбранного из аденовируса человека 2 серотипа (hAd2), аденовируса человека 3 серотипа (hAd3), аденовируса человека 4 серотипа (hAd4), аденовируса человека 5 серотипа (hAd5), аденовируса человека 7 серотипа (hAd7), аденовируса человека 11 серотипа (hAd11), аденовируса человека 12 серотипа (hAd12), аденовируса человека 17 серотипа (hAd17), аденовируса человека 25 серотипа (hAd25), аденовируса человека 35 серотипа (hAd35), аденовируса человека 37 серотипа (hAd41), аденовируса человека 41 серотипа (hAd41), аденовируса гориллы (gorAd), аденовируса шимпанзе (ChimpAd), аденовируса обезьяны 18 серотипа (sAd1S), аденовируса обезьяны 49 серотипа (sAd49), аденовируса макака-резуса 51 серотипа (rhAd51), аденовируса макака-резуса 52 серотипа (rhAd52) и аденовируса макака-резуса 53 серотипа (rhAd53). Конкретные последовательности домена мультимеризации и домена «корона», выбранные для данной комбинации относятся к конкретным примерам в соответствии с таблицами с 1 по 5.

Предпочтительный вариант осуществления настоящего изобретения представляет собой химеру, где домен мультимеризации аденовируса обезьяны 49 серотипа (sAd49) объединен с доменом «корона» основания пентона аденовируса, выбранного из аденовируса человека 2 серотипа (hAd2), аденовируса человека 3 серотипа (hAd3), аденовируса человека 4 серотипа (hAd4), аденовируса человека 5 серотипа (hAd5), аденовируса человека 7 серотипа (hAd7), аденовируса человека 11 серотипа (hAd11), аденовируса человека 12 серотипа (hAd12), аденовируса человека 17 серотипа (hAd17), аденовируса человека 25 серотипа (hAd25), аденовируса человека 35 серотипа (hAd35), аденовируса человека 37 серотипа (hAd41), аденовируса человека 41 серотипа (hAd41), аденовируса гориллы (gorAd), аденовируса шимпанзе (ChimpAd), аденовируса обезьяны 18 серотипа (sAd18), аденовируса обезьяны 20 серотипа (sAd20), аденовируса макака-резуса 51 серотипа (rhAd51), аденовируса макака-резуса 52 серотипа (rhAd52) и аденовируса макака-резуса 53 серотипа (rhAd53). Конкретные последовательности домена мультимеризации и домена «корона», выбранные для данной комбинации относятся к конкретным примерам в соответствии с таблицами с 1 по 5.

Предпочтительный вариант осуществления настоящего изобретения представляет собой химеру, где домен мультимеризации аденовируса макака-резуса 51 серотипа (rhAd51) объединен с доменом «корона» основания пентона аденовируса, выбранного из аденовируса человека 2 серотипа (hAd2), аденовируса человека 3 серотипа (hAd3), аденовируса человека 4 серотипа (hAd4), аденовируса человека 5 серотипа (hAd5), аденовируса человека 7 серотипа (hAd7), аденовируса человека 11 серотипа (hAd11), аденовируса человека 12 серотипа (hAd12), аденовируса человека 17 серотипа (hAd17), аденовируса человека 25 серотипа (hAd25), аденовируса человека 35 серотипа (hAd35), аденовируса человека 37 серотипа (hAd41), аденовируса человека 41 серотипа (hAd41), аденовируса гориллы (gorAd), аденовируса шимпанзе (ChimpAd), аденовируса обезьяны 18 серотипа (sAd18), аденовируса обезьяны 20 серотипа (sAd20), аденовируса обезьяны 49 серотипа (sAd49), аденовируса макака-резуса 52 серотипа (rhAd52) и аденовируса макака-резуса 53 серотипа (rhAd53). Конкретные последовательности домена мультимеризации и домена «корона», выбранные для данной комбинации относятся к конкретным примерам в соответствии с таблицами с 1 по 5.

Предпочтительный вариант осуществления настоящего изобретения представляет собой химеру, где домен мультимеризации аденовируса макака-резуса 52 серотипа (rhAd52) объединен с доменом «корона» основания пентона аденовируса, выбранного из аденовируса человека 2 серотипа (hAd2), аденовируса человека 3 серотипа (hAd3), аденовируса человека 4 серотипа (hAd4), аденовируса человека 5 серотипа (hAd5), аденовируса человека 7 серотипа (hAd7), аденовируса человека 11 серотипа (hAd11), аденовируса человека 12 серотипа (hAd12), аденовируса человека 17 серотипа (hAd17), аденовируса человека 25 серотипа (hAd25), аденовируса человека 35 серотипа (hAd35), аденовируса человека 37 серотипа (hAd41), аденовируса человека 41 серотипа (hAd41), аденовируса гориллы (gorAd), аденовируса шимпанзе (ChimpAd), аденовируса обезьяны 18 серотипа (sAd18), аденовируса обезьяны 20 серотипа (sAd20), аденовируса обезьяны 49 серотипа (sAd49), аденовируса макака-резуса 51 серотипа (rhAd51) и аденовируса макака-резуса 53 серотипа (rhAd53). Конкретные последовательности домена мультимеризации и домена «корона», выбранные для данной комбинации относятся к конкретным примерам в соответствии с таблицами с 1 по 5.

Предпочтительный вариант осуществления настоящего изобретения представляет собой химеру, где домен мультимеризации аденовируса макака-резуса 53 серотипа (rhAd53) объединен с доменом «корона» основания пентона аденовируса, выбранного из аденовируса человека 2 серотипа (hAd2), аденовируса человека 3 серотипа (hAd3), аденовируса человека 4 серотипа (hAd4), аденовируса человека 5 серотипа (hAd5), аденовируса человека 7 серотипа (hAd7), аденовируса человека 11 серотипа (hAd11), аденовируса человека 12 серотипа (hAd12), аденовируса человека 17 серотипа (hAd17), аденовируса человека 25 серотипа (hAd25), аденовируса человека 35 серотипа (hAd35), аденовируса человека 37 серотипа (hAd41), аденовируса человека 41 серотипа (hAd41), аденовируса гориллы (gorAd), аденовируса шимпанзе (ChimpAd), аденовируса обезьяны 18 серотипа (sAd18), аденовируса обезьяны 20 серотипа (sAd20), аденовируса обезьяны 49 серотипа (sAd49), аденовируса макака-резуса 51 серотипа (rhAd51) и аденовируса макака-резуса 52 серотипа (rhAd52). Конкретные последовательности домена мультимеризации и домена «корона», выбранные для данной комбинации относятся к конкретным примерам в соответствии с таблицами с 1 по 5.

Особенно предпочтительный домен «корона» для получения химер по настоящему изобретению представляет собой домен «корона» белка основания пентона аденовируса человека 3 серотипа (hAd3). Предпочтительные последовательности в отношении положений аминокислот SEQ ID NO: 1 представлены в таблице 4 (большой фрагмент) и таблице 5 (малый фрагмент).

В еще более предпочтительных химерах по настоящему изобретению домен «корона» белка основания пентона аденовируса человека 3 серотипа (hAd3) объединен с доменом мультимеризации белка основания пентона аденовируса, выбранного из аденовируса человека 2 серотипа (hAd2), аденовируса человека 4 серотипа (hAd4), аденовируса человека 5 серотипа (hAd5), аденовируса человека 7 серотипа (hAd7), аденовируса человека 11 серотипа (hAd11), аденовируса человека 12 серотипа (hAd12), аденовируса человека 17 серотипа (hAd17), аденовируса человека 25 серотипа (hAd25), аденовируса человека 35 серотипа (hAd35), аденовируса человека 37 серотипа (hAd37), аденовируса человека 41 серотипа (hAd41), аденовируса гориллы (gorAd), аденовируса шимпанзе (ChimpAd), аденовируса обезьяны 18 серотипа (sAd18), аденовируса обезьяны 20 серотипа (sAd20), аденовируса обезьяны 49 серотипа (sAd49), аденовируса макака-резуса 51 серотипа (rhAd51), аденовируса макака-резуса 52 серотипа (rhAd52) и аденовируса макака-резуса 53 серотипа (rhAd53). Конкретные последовательности домена мультимеризации и домена «корона», выбранные для данной комбинации относятся к конкретным примерам в соответствии с таблицами с 1 по 5.

Особенно предпочтительный домен «корона» для получения химер по настоящему изобретению представляет собой домен «корона» основания пентона аденовируса шимпанзе (ChimpAd). Предпочтительные последовательности в отношении аминокислотных положений SEQ ID NO: 14 представлены в таблице 4 (большой фрагмент) и таблице 5 (малый фрагмент).

В еще более предпочтительных химерах по настоящему изобретению домен «корона» белка основания пентона аденовируса шимпанзе (ChimpAd) объединен с доменом мультимеризации белка основания пентона аденовируса, выбранного из аденовируса человека 3 серотипа (hAd3), аденовируса человека 2 серотипа (hAd2), аденовируса человека 4 серотипа (hAd4), аденовируса человека 5 серотипа (hAd5), аденовируса человека 7 серотипа (hAd7), аденовируса человека 11 серотипа (hAd11), аденовируса человека 12 серотипа (hAd12), аденовируса человека 17 серотипа (hAd17), аденовируса человека 25 серотипа (hAd25), аденовируса человека 35 серотипа (hAd35), аденовируса человека 37 серотипа (hAd37), аденовируса человека 41 серотипа (hAd41), аденовируса гориллы (gorAd), аденовируса обезьяны 18 серотипа (sAd18), аденовируса обезьяны 20 серотипа (sAd20), аденовируса обезьяны 49 серотипа (sAd49), аденовируса макака-резуса 51 серотипа (rhAd51), аденовируса макака-резуса 52 серотипа (rhAd52) и аденовируса макака-резуса 53 серотипа (rhAd53). Конкретные последовательности домена мультимеризации и домена «корона», выбранные для данной комбинации относятся к конкретным примерам в соответствии с таблицами с 1 по 5.

Как уже указано выше, один из основных вариантов осуществления настоящего изобретения представляет собой включение антигена, более конкретно антигена инфекционного агента, такого как вирус, бактерия или другой патоген, или опухолевый или раковый антиген, в один или оба из L₁ и L₂. Предпочтительные сайты включения антигенов в петли RGD и/или вариабельные петли аденовирусных доменов «корона» раскрыты в WO 2017/167988 А1. В контексте данного документа термин "антиген" относится к структуре, распознаваемой молекулами иммунного ответа, например, антителами, рецепторами Т-клеток (TCR) и т.д.

Антигены инфекционных агентов включают, но не ограничиваются ими, например, вирусные инфекционные агенты, такие как ВИЧ, вирусы гепатита, такие как вирус гепатита А, вирус гепатита В или вирус гепатита С, вирус герпеса, вирус ветряной оспы, вирус краснухи, вирус желтой лихорадки, вирус лихорадки Денге, флавивирусы (например, вирус Зика), вирусы гриппа, марбургская вирусная болезнь, вирусы Эбола и арбовирусы, такие как вирус чикунгунья. Антигены бактериальных инфекционных агентов включают, но не ограничиваются ими, антигены, например, Legionella, Helicobacter, Vibrio, инфекционные штаммы Е. coli, Staphylococci, Salmonella и Streptococci. Антигены инфекционных патогенов простейших включают, но не ограничиваются ими, антигены Plasmodium, Trypanosoma, Leishmania и Toxoplasma. Дополнительные примеры антигенов патогенных агентов включают антигены грибковых патогенов, такие как антигены Cryptococcus neoformans, Histoplasma capsulatum, Coccidioides immitis, Blastomyces dermatitidis и Candida albicans.

Конкретные примеры опухолевых антигенов, которые можно применять в соответствии с настоящим изобретением, включают, но не ограничиваются ими, 707-АР, AFP, ART-4, BAGE, бета-катенин/m, Bcr-abl, CAMEL, САР-1, CASP-8, CDC27/m, CDK4/m, CEA, CT, Cyp-B, DAM, ELF2M, ETV6-AML1, G250, GAGE, GnT-V, Gp100, HAGE, HER-2/neu, HLA-A*0201-R170I, HPV-E7, HSP70-2M, HAST-2, hTERT (или hTRT), iCE, KIAA0205, LAGE, LDLR/FUT, MAGE, MART- 1/Melan-A, MC1R, миозин/м, MUC1, MUM-1, -2, -3, NA88-A, NY-ESO-1, pl90 minor bcr-abl, Pml/RAR.alpha., PRAME, PSA, PSM, RAGE, RU1 или RU2, SAGE, SART-1 или SART- 3, TEL/AML1, TPI/m, TRP-1, TRP-2, TRP-2/TNT2h WT1.

Особенно в контексте антигенов, включенных в полипептиды по настоящему изобретению, как L₁ и/или L₂, но также в отношении любого белок-белкового взаимодействия, такого как связывание рецептора с лигандом, можно включить процесс отбора и/или эволюции для обеспечения последовательностей, оптимизированных для связывания мишени, таких как оптимизированные антигены, для проявления улучшенного иммунного ответа. Предпочтительный способ представляет собой рибосомный дисплей, как подробно описано в публикации Schaffitzel et al. (2001) in: Protein-Protein Interactions, A Molecular Cloning Manual: In vitro selection and evolution of protein-ligand interaction by ribosome display (Golemis E., ed.), pages 535-567, Cold Spring Harbor Laboratory Press, New York. Преимуществом способа рибосомного дисплея является его полное выполнение in vitro на всех стадиях отбора. Другие возможные способы отбора также известны в данной области техники и включают фаговый дисплей (Smith (1985) Science 228, 1315-1317; Winter et al. (1994) Annu. Rev. Immunol. 12, 433-455), дрожжевую двухгибридную систему (Fields and Song (19899 Nature 340, 245-246, Chien et al. (1983) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88, 9578-9582) и способы отображения на клеточной поверхности (Georgiu et al. (1993) Trends Biotechnol. 11, 6-10, Boder and Wittrup (1997) Nat. Biotechnol. 15, 553-557).

Способ рибосомного дисплея в основном можно применять двумя путями для оптимизации антигенов или других аминокислотных последовательностей, участвующих в нацеливании на конкретную молекулу, с применением полипептидов по настоящему изобретению. Либо последовательность антигена (или другого связывающего агента) может быть выбрана первой из исходной библиотеки последовательностей полипептидов, которая может достигать 10¹⁴ индивидуальных последовательностей, чаще от 10⁹ до 10¹⁰ последовательностей, необязательно с применением эволюционных процедур, как подробно описано в публикации Schaffitzel et al. (2001), выше. После выбора оптимизированных последовательностей антигена нуклеотидную последовательность, кодирующую ее, клонируют в соответствующий вектор по настоящему изобретению, так что экспрессируется полипептид, в котором оптимизированный антиген включен или представляет собой L₁ и/или L₂ согласно приведенной выше формуле (I).

Согласно альтернативному варианту осуществления данного аспекта настоящего изобретения, библиотека потенциальных последовательностей, кодирующих антиген, непосредственно клонируется в нуклеиновую кислоту по настоящему изобретению, так что каждая последовательность кодирует полипептид, который представляет собой часть или представляет собой, соответственно, один или оба из L₁ и L₂, как определено в формуле (I), выше. Полипептиды по настоящему изобретению, содержащие исходную библиотеку последовательностей антигенов (или, в других вариантах осуществления, другие связывающие последовательности), экспрессируются затем in vitro, и выбор оптимизированных последовательностей антигена (или другого связывающего агента) осуществляют в соответствии со способом рибосомного дисплея, как подробно описано в публикации Schaffitzel et al. (2001), выше.

Дополнительный вариант осуществления полипептидов по настоящему изобретению относится к полипептидам, где L₁ и/или L₂ представляют собой или связаны с, соответственно, последовательностями антител или частями антител, такими как фрагменты антител. В контексте настоящего изобретения термин "антитело" означает иммуноглобулин, специфически связывающийся с антигеном.

Термин "фрагмент антитела" относится к части антитела, которая сохраняет способность полного антитела специфически связываться с антигеном. Примеры фрагментов антител включают, но не ограничиваются ими, фрагменты Fab, фрагменты Fab', фрагменты F(ab')₂, антитела, состоящие только из тяжелых цепей, однодоменные антитела (sdAb), фрагменты scFv, вариабельные фрагменты (Fv), домены VH, домены VL, нанотела, IgNAR (новые антигенные рецепторы иммуноглобулина), ди-scFv, биспецифические Т-клеточные агенты (BITE), молекулы, переориентирующие антитело двойной аффинности (DART), тройные тела, диатела, одноцепочечные диатела и т.п.

"Диатело" представляет собой слитый белок или бивалентное антитело, которое может связывать различные антигены. Диатело состоит из двух одиночных белковых цепей (обычно двух scFv-фрагментов), каждая из которых содержит вариабельные фрагменты антитела. Таким образом, диатела содержат два антигенсвязывающих сайта и, таким образом, могут нацеливаться на один и тот же (моноспецифическое диатело) или различные антигены (биспецифическое диатело).

Термин "однодоменное антитело", в контексте настоящего изобретения, относится к фрагментам антитела, состоящим из одного мономерного вариабельного домена антитела. Просто они включают только вариабельные области мономерной тяжелой цепи антител, состоящих только из тяжелых цепей, продуцируемых хрящевыми рыбами или верблюдовыми. В следствие различного происхождения их также называют фрагментами VHH или VNAR (вариабельный нового антигенный рецептор). Альтернативно, однодоменные антитела можно получить мономеризацией вариабельных доменов обычных мышиных или человеческих антител с помощью генной инженерии. Они обладают молекулярной массой приблизительно от 12 до 15 кДа и, таким образом, представляют собой самые маленькие фрагменты антител, способные распознавать антиген. Дополнительные примеры включают нанотела или наноантитела.

Антигенсвязывающие частицы, применимые в контексте настоящего изобретения, также включают "миметики антител", в контексте настоящего описания относящиеся к соединениям, которые специфически связывают антигены, аналогичные антителам, но которые структурно не связаны с антителами. Обычно миметики антител представляют собой искусственные пептиды или белки с молярной массой от приблизительно 3 до 20 кДа, которые содержат один, два или более доступных доменов, специфически связывающихся с антигеном. Примеры включают, помимо прочего, LACI-D1 (липопротеин-ассоциированный ингибитор свертывания крови), аффилины, например, человеческий-γ В кристаллический или человеческий убиквитин, цистатин, Sac7D из Sulfolobus acidocaldarius, липокалин и антикалины, полученные из липокалинов, DARPins (сконструированные повторяющиеся домены анкирина), CH3-домен Fyn, Kunits-домен ингибиторов протеазы, монотела, например домен 10-го типа фибронектина III типа, аднектины: кноттины (минипротеины цистеиновых узлов), атримеры, эвитела, например связывающие агенты на основе CTLA4, аффитела, например, трехспиральный пучок из Z-домена протеина А из Staphylococcus aureus, транс-тела, например человеческий трансферрин, тетранектины, например мономерный или тримерный домен лектина С-типа человека, микротела, например ингибитор трипсина-П, аффилины, белки броненосцев, несущие повторы. Нуклеиновые кислоты и малые молекулы иногда также считаются миметиками антител (аптамеры), но не искусственными антителами, фрагментами антител и слитыми белками, состоящими из них. Общими преимуществами перед антителами являются лучшая растворимость, проникновение в ткани, устойчивость к нагреванию и воздействию ферментов, а также сравнительно низкие затраты при получении.

Как и нативные белки оснований пентона, полипептиды по настоящему изобретению собираются в пентамерные комплексы, 12 из которых, в свою очередь, собираются в вирусоподобные частицы (ВПЧ) в буферном растворе при значении рН предпочтительно от приблизительно 5,0 до приблизительно 8,0. Предпочтительные примеры представляют собой буферные условия при физиологических условиях или близких к ним, таких как фосфатно-солевой буфер (ФСБ), рН 7,4 или трис-буфер солевой (TBS) или TBS-T рН от 7,2 до 7,6. В таких условиях полипептиды по настоящему изобретнию образуют ВПЧ при температуре приблизительно от 20 до 42°С. Настоящее изобретение также относится к таким пентамерным комплексам и ВПЧ.

Еще один объект настоящего изобретения относится к нуклеиновой кислоте, кодирующей полипептид, как определено в данном документе.

Согласно настоящему изобретению термины "нуклеиновая кислота" и "полинуклеотид" применяются взаимозаменяемо и относятся к ДНК, РНК или видам, содержащим один или более аналогов нуклеотидов. Предпочтительные нуклеиновые кислоты или полинуклеотиды по настоящему изобретению представляют собой ДНК, более предпочтительно двухцепочечную (дц) ДНК. Нуклеотидные последовательности по настоящему изобретению представлены в направлении от 5' до 3', и применяется однобуквенный код ИЮПАК для оснований, если не указано иное.

Другой вариант осуществления относится к нуклеиновой кислоте, полученной для вставки универсальных сегментов L₁ и L₂, как определено в общей формуле (1). То есть этот вариант нуклеиновой кислоты кодирует сегменты А, В и С, но имеет сайты инсерции между сегментами, кодирующими А и В, и между сегментами, кодирующими В и С.

Таким образом, данный вариант осуществления может быть представлен следующей общей формулой (II):

где

а представляет собой нуклеотидную последовательность, кодирующую А общей формулы (I),

b представляет собой нуклеотидную последовательность, кодирующую В общей формулы (I),

с представляет собой нуклеотидную последовательность, кодирующую С общей формулы (I), и

l₁, l₂ каждый представляет собой нуклеотидную последовательность,

с is₁ по is₄ каждый независимо представляет собой нуклеотидную последовательность, содержащую по меньшей мере один сайт инсерции.

Сайт инсерции в контексте указанного варианта осуществления настоящего изобретения предпочтительно представляет собой последовательность узнавания рестрикционного фермента или хоминг-эндонуклеазы. Более предпочтительно, каждый с is₁ по is₄ представляет собой различные сайты инсерции, более конкретно, каждый с is₁ по is₄ представляет собой последовательность распознавания различных рестрикционных ферментов. Предпочтительный вариант осуществления нуклеиновой кислоты, полученной для встраивания нуклеотидных последовательностей, кодирующих L₁ и L₂, имеет нуклеотидную последовательность, где is₁ содержит сайт EcoRI, is₂ содержит сайт RsrII, is3 содержит сайт SacI и 1&4 содержит сайтХЬа!

Сайты рестрикционных ферментов обычно хорошо известны специалисту в данной области техники. Предпочтительные примеры представляют собой такие, как определено выше, но сайты рестрикции могут быть выбраны из большого разнообразия, и рекомендации можно найти у различных производителей рестрикционных ферментов, таких как New England Biolabs, Inc., Ipswich, MA, USA.

Примеры таких сайтов хоминг-эндонуклеазы (НЕ) включают, но не ограничиваются ими, последовательности распознавания PI-SceI, I-CeuI, I-PpoI, I-HmuI, I-CreI, I-DmoI, PI-PfuI и I-MsoI, PI-PspI, I-Scel, другие члены группы LAGLIDAG и их варианты, SegH и Hef или другие хоминг-эндонуклеазы GIY-YIG, I-ApeII, I-Anil, цитохром b мРНК матураза bl3, PI-THI и PI-TfuII, PI-ThyI и другие, см. Stoddard B.L. (2005) Q. Rev. Biophys. 38, 49-95. Соответствующие ферменты представлены в продаже, например, от New England Biolabs Inc., Ipswich, MA, USA.

В предпочтительных вариантах осуществления настоящего изобретения указанная выше нуклеиновая кислота дополнительно содержит по меньшей мере один сайт интеграции нуклеиновой кислоты в вектор или клетку-хозяин. Сайт интеграции может допускать временное или геномное включение.

Что касается интеграции в вектор, в частности в плазмиду или вирус, сайт интеграции предпочтительно является совместимым для интеграции нуклеиновой кислоты в аденовирус, аденоассоциированный вирус (AAV), автономный парвовирус, вирус простого герпеса (HSV), ретровирус, радиновирус, вирус Эпштейн-Барра, лентивирус, вирус леса Семлики или бакуловирус.

Особенно предпочтительные сайты интеграции, которые могут быть включены в нуклеиновую кислоту по настоящему изобретению, могут быть выбраны из транспозонного элемента Tn7, сайтов связывания, специфичных для λ-интегразы, и сайт-специфичных рекомбиназ (SSR), в частности сайта LoxP или сайта рекомбинации, специфичного для рекомбиназы FLP (FRT). Другими предпочтительными механизмами интеграции нуклеиновой кислоты по настоящему изобретению являются специфические гомологичные рекомбинационные последовательности, такие как Ief2-603/Orf1629.

В других предпочтительных вариантах осуществления настоящего изобретения описанная в настоящем документе нуклеиновая кислота дополнительно содержит один или более маркеров устойчивости для отбора против токсичных веществ. Предпочтительные примеры маркеров устойчивости, применимых в контексте настоящего изобретения, включают, но не ограничиваются ими, антибиотики, такие как ампициллин, хлорамфеникол, гентамицин, спектиномицин и маркеры устойчивости к канамицину.

Нуклеиновая кислота по настоящему изобретению может также содержать один или более сайтов связывания рибосомы (RBS).

Еще один объект настоящего изобретения относится к вектору, содержащему нуклеиновую кислоту, как определено выше.

Предпочтительные векторы по настоящему изобретению представляют собой плазмиды, векторы экспрессии, векторы для переноса, более предпочтительно векторы для переноса генов эукариот, векторы для переноса генов, опосредованные временными или вирусными векторами. Другие векторы по настоящему изобретению представляют собой вирусы, такие как векторы аденовируса, векторы аденоассоциированного вируса (AAV), векторы автономных парвовирусов, векторы вируса простого герпеса (HSV), ретровирусные векторы, векторы радиновируса, векторы вируса Эпштейн-Барра, векторы лентивирусов, векторы вируса леса Семлики и бакуловирусные векторы.

Бакуловирусные векторы, подходящие для интеграции нуклеиновой кислоты по настоящему изобретению (например, присутствующие на подходящей плазмиде, такой как вектор для переноса), также представляют собой объект настоящего изобретения и предпочтительно содержат сайт-специфичные сайты интеграции, такие как сайт присоединения Tn7 (который может быть встроенным в ген lacZ для синего/белого скрининга продуктивной интеграции) и/или сайт LoxP. Дополнительные предпочтительные бакуловирусы по настоящему изобретению содержат (альтернативно или в дополнение к вышеописанным сайтам интеграции) ген экспрессии вещества, токсичного для хозяина, фланкированный последовательностями для гомологичной рекомбинации. Примером гена, экспрессирующего токсичное вещество, является ген дифтерийного токсина А. Предпочтительной парой последовательностей для гомологичной рекомбинации является, например, Isf2-603/Orf1629. Бакуловирус может также содержать дополнительный маркерный ген(ы), как описано выше, включая также флуоресцентные маркеры, такие как GFP, YFP и так далее. Конкретные примеры соответствующих бакуловирусов раскрыты, например, в WO 2010/100278 А1.

Другие полезные векторы для применения по настоящему изобретению раскрыты в WO 2005/085456 А1.

Векторы, применимые в прокариотических клетках-хозяевах, содержат предпочтительно, помимо приведенных выше примеров маркерных генов (один или более из них), точку начала репликации (ori). Примеры представляют собой BR322, ColE1 и условные точки начала репликации, такие как OriV и R6Ky, причем последний является предпочтительным условным источником репликации, который делает распространение вектора по настоящему изобретению зависимым от гена pir в прокариотическом хозяине. OriV делает распространение вектора по настоящему изобретению зависимым от гена trfA в прокариотическом хозяине.

Кроме того, настоящее изобретение относится к клетке-хозяину, содержащей нуклеиновую кислоту по настоящему изобретению и/или вектор по настоящему изобретению.

Клетки-хозяева могут быть прокариотическими или эукариотическими. Эукариотические клетки-хозяева могут быть, например, клетками млекопитающих, предпочтительно клетками человека. Примеры клеток-хозяев человека включают, но не ограничиваются ими, HeLa, Huh7, HEK293, HepG2, КАТО-III, IMR32, МТ-2, β-клетки поджелудочной железы, кератиноциты, фибробласты костного мозга, СНР212, первичные нервные клетки, W12, SK-N-MC, Saos-2, WI38, первичные гепатоциты, FLC4, 143ТК, DLD-1, эмбриональные фибробласты легких, первичные фибробласты крайней плоти, клетки MRC5 и MG63. Другие предпочтительные клетки-хозяева по настоящему изобретению представляют собой клетки свиней, предпочтительно клетки СРК, FS-13, РК-15, клетки крупного рогатого скота, предпочтительно клетки MDB, ВТ, клетки крупного рогатого скота, такие как клетки FLL-YFT. Другие эукариотические клетки, применимые в контексте настоящего изобретения, представляют собой клетки С.elegans. Дополнительно эукариотические клетки включают дрожжевые клетки, такие как S. cerevisiae, S. pombe, С.albicans и P. pastoris. Кроме того, настоящее изобретение относится к клеткам насекомых в качестве клеток-хозяев, которые включают клетки S. frugiperda, более предпочтительно клетки Sf9, Sf21, Express Sf+, High Five H5 и клетки D. melanogaster, в частности клетки S2 Schneider. К другим клеткам-хозяевам относятся клетки Dictyostelium discoideum и клетки паразитов, таких как Leishmania spec.

Прокариотические хозяева согласно настоящему изобретению включают бактерии, в частности Е. coli, например, коммерчески доступные штаммы, такие как ТОР10, DH5α, НВ101. BL21 (DE3) и др.

Специалист в данной области техники легко сможет выбрать подходящие пары векторной конструкции/клетки-хозяина для соответствующего размножения и/или переноса элементов нуклеиновой кислоты по настоящему изобретению в подходящего хозяина. Конкретные способы введения соответствующих векторных элементов и векторов в соответствующие клетки-хозяев а известны в данной области техники, и способы можно найти в последнем издании публикации Ausubel et al. (ed.) Current Protocols ш Molecular Biology, John Wiley & Sons, New York, USA.

В предпочтительных вариантах осуществления настоящего изобретения вектор, как определено выше, дополнительно включает сайт для сайт-специфичных рекомбиназ (SSR), предпочтительно один или более сайтов LoxP для Сге-1ох-специфической рекомбинации. В других предпочтительных вариантах осуществления вектор по настоящему изобретению содержит элемент транспозона, предпочтительно сайт прикрепления Тп7.

Кроме того, предпочтительно, чтобы сайт связывания, как определено выше, находился внутри маркерного гена. Такое расположение делает возможным отбор последовательностей, успешно интегрированных в сайт связывания, путем транспозиции. Согласно предпочтительным вариантам осуществления такой маркерный ген выбран из генов люциферазы, β-GAL, CAT, генов, кодирующих флуоресцентные белки, предпочтительно GFP, BFP, YFP, CFP и их варианты, а также гена lacZa.

Кроме того, настоящее изобретение относится к клетке-хозяину, содержащей нуклеиновую кислоту по настоящему изобретению и/или вектор по настоящему изобретению.

Клетки-хозяева могут быть прокариотическими или эукариотическими. Эукариотические клетки-хозяева могут представлять собой, например, клетки млекопитающих, предпочтительно клетки человека. Примеры человеческих клеток-хозяев включают, но не ограничиваются ими, HeLa, Huh7, HEK293, HepG2, КАТО-III, IMR32, МТ-2, β-клетки поджелудочной железы, кератиноциты, фибробласты костного мозга, СНР212, первичные нервные клетки, W12, SK-N-MC, Saos-2, WI38, первичные гепатоциты, FLC4, 143TK, DLD-1, эмбриональные фибробласты легких, первичные фибробласты крайней плоти, клетки MRC5 и MG63. Дополнительные предпочтительные клетки-хозяева по настоящему изобретению представляют собой клетки свиней, предпочтительно клетки СРК, FS-13, РК-15, клетки крупного рогатого скота, предпочтительно клетки MDB, ВТ, клетки крупного рогатого скота, такие как клетки FLL-YFT. Другие эукариотические клетки, применимые в контексте настоящего изобретения, представляют собой клетки С.elegans. Дополнительные эукариотические клетки включают дрожжевые клетки, такие как S. cerevisiae, S. pombe, С.albicans и P. pastoris. Кроме того, настоящее изобретение относится к клеткам насекомых в качестве клеток-хозяев, которые включают клетки S. frugiperda, более предпочтительно клетки Sf9, Sf21, Express Sf+, High Five H5 и клетки D. melanogaster, особенно клетки S2 Schneider. Дополнительные клетки-хозяева включают клетки Dictyostelium discoideum и клетки паразитов, таких как Leishmania spec.

Прокариотические хозяева согласно настоящему изобретению включают бактерии, в частности Е. coli, например, коммерчески доступные штаммы, такие как TOP10, DH5a, НВ101, BL21 (DE3) и т.д.

Специалист в данной области техники легко сможет выбрать подходящие пары конструкции вектор/клетка-хозяин для соответствующего размножения и/или переноса элементов нуклеиновых кислот по настоящему изобретению в подходящего хозяина. Конкретные способы введения соответствующих векторных элементов и векторов в соответствующие клетки-хозяева в равной степени известны в данной области техники, и способы описаны в последнем издании публикации Ausubel et al. (ed.) Current Protocols In Molecular Biology, John Wiley & Sons, New York, USA.

Настоящее изобретение также относится к полипептиду, нуклеиновой кислоте, кодирующей такой полипептид, вектору, содержащему нуклеиновую кислоту, кодирующую полипептид, клетке-хозяину, содержащей такой вектор, а также ВПЧ, как определено выше, для применения в качестве лекарственного средства, в частности, для применения в лечении и/или предотвращении инфекционного заболевания, иммунного заболевания, опухоли или рака.

Следовательно, настоящее изобретение также относится к фармацевтическим композициям, содержащим полипептид, как определено в настоящем документе, нуклеиновую кислоту, кодирующую такой полипептид, вектор, содержащий нуклеиновую кислоту, кодирующую полипептид, клетку-хозяин, содержащую такой вектор, или ВПЧ, как описано выше, вместе с по меньшей мере одним фармацевтически приемлемым носителем, эксципиентом и/или разбавителем.

Как правило, получение фармацевтических композиций в контексте настоящего изобретения, их дозировки и пути введения известны квалифицированному специалисту, и руководство можно найти в последнем издании Remington's Pharmaceutical Sciences (Mack publishing Co., Eastern, PA, USA).

Фармацевтические композиции по настоящему изобретению содержат терапевтически эффективное количество активного ингредиента, как указано выше. Терапевтически эффективное количество зависит от активного ингредиента и, в частности, от пути введения. Фармацевтическую композицию по настоящему изобретению предпочтительно применяют путем парентерального введения, в частности путем инфузии, такой как внутривенная, внутриартериальная или внутрикостная инфузия, или путем инъекции, такой как внутривенная, внутриартериальная, внутрибрюшинная, внутримышечная, внутрикожная, подкожная или интратекальная инъекция. В случае противоопухолевой терапии фармацевтическая композиция, такая как фармацевтическая композиция, содержащая ВПЧ по настоящему изобретению, также может быть введена путем внутриопухолевой инъекции.

Растворы для инъекций или инфузий по настоящему изобретению обычно содержат ВПЧ по настоящему изобретению в воде или водном буферном растворе, предпочтительно в изотоническом буфере при физиологическом значении рН. Жидкие фармацевтические композиции по настоящему изобретению могут содержать дополнительные ингредиенты, такие как фармацевтически приемлемые стабилизаторы, суспендирующие добавки, эмульгаторы и тому подобное. Другими ингредиентами фармацевтической композиции по настоящему изобретению являются вспомогательные вещества, в частности, в контексте применения конструкций по настоящему изобретению для целей вакцинации.

Следующий объект настоящего изобретения относится к способам лечения с применением полезных свойств полипептидов, нуклеиновых кислот, клеток-хозяев, векторов и/или ВПЧ по настоящему изобретению. В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретение обеспечен способ профилактики и/или лечения инфекционного заболевания, включающий стадию введения субъекту, предпочтительно человеку, терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции, как определено выше, где фармацевтическая композиция содержит ВПЧ по настоящему изобретению, содержащие антигены (в частности, содержащиеся в L₁ и/или L₂ полипептида по настоящему изобретению, как определено выше) инфекционного агента, вызывающего инфекционное заболевание. Другой вариант осуществления представляет собой способ предотвращения и/или лечения опухоли или ракового заболевания на стадии введения терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции, как определено выше, субъекту, предпочтительно человеку, где фармацевтическая композиция содержит ВПЧ по настоящему изобретению, содержащие один или более опухолевых антигенов (в частности, содержащихся в L₁ и/или L₂ полипептида по настоящему изобретению, как определено выше).

Настоящее изобретение дополнительно относится к способу получения полипептида, как описано в данном документе, включающему стадию культивирования рекомбинантной клетки-хозяина в подходящей среде, где клетка-хозяин содержит вектор, который содержит нуклеиновую кислоту, кодирующую полипептид, в условиях, обеспечивающих экспрессию указанного полипептида.

Предпочтительно, способ получения полипептида по настоящему изобретению дополнительно включает стадию выделения экспрессированного полипептида из клеток-хозяев и/или среды. Более предпочтительно, способ также включает стадию очистки выделенного полипептида с помощью средств очистки, известных в данной области техники, таких как центрифугирование, гель-проникающая хроматография, аффинная хроматография и т.д.

Настоящее изобретение также относится к способу получения ВПЧ, как определено в данном документе, включающему стадию инкубации раствора полипептида в условиях, обеспечивающих сборку полипептида в ВПЧ, как описано ранее. Правильное образование ВПЧ можно проверить, исследуя раствор образца с помощью электронного микроскопа.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ

Фиг. 1: (А) Додекаэдры, образованные белками основания определенных серотипов аденовируса, представляют собой универсальный каркас.(В) Они содержат 60 копий белка основания аденовируса, которые можно разделить на домен «корона» (оранжевый) и домен мультимеризации (синий). В домене мультимеризации концы, образованные в результате расщепления, могут быть повторно соединены короткими олигопептидными линкерами, с образованием непрерывных полипептидных цепей. N-конец и С-конец белка основания содержатся в домене мультимеризации.

Фиг. 2: схема домена с укладкой типа рулет предпочтительного варианта осуществления полипептида по настоящему изобретению на основе протомера основания пентона hAd3.

Фиг. 3: белок основания аденовируса схематически показан крайним слева. Домен «корона» (см. фиг. 1) окрашен в желтый цвет, домен мультимеризации окрашен в синий цвет. N- и С-концы белка основания содержатся в домене мультимеризации, который опосредует образование пентона и додекаэдра. Удаление домена «корона» приводит к автономному домену мультимеризации, который вместо прежнего домена «корона» теперь содержит олигопептиды, полипептиды, белки или белковые комплексы, как показано схематически в направлении от середины направо. Домены мультимеризации теперь дают начало вирусоподобным частицам, представляющим указанные частицы на своей поверхности. Естественно, домены «корона» и сконструированные домены «корона», происходящие от ряда серотипов аденовирусов, также могут быть приспособлены к каркасу доменов мультимеризации, включая сконструированные домены «корона», содержащие гетерологичные пептидные и полипептидные последовательности.

Фиг. 4: додекаэдрическая платформа (ADDomer), полученная из аденовируса, показана схематично. Исходная частица показана слева. Белок основания образован доменом мультимеризации (синий) и доменом «корона» (желтый). 60 белков основания образуют вирусоподобные частицы (ВПЧ). Справа показаны ADDomers, отображающие (вместо домена «корона») множественные копии олигопептидов, полипептидов и белковых доменов, белков или белковых комплексов. Цветовая кодировка как на фиг. 3.

Фиг. 5: Схематическое изображение вектора рАСЕВас VAJB-CHIK.

Настоящее изобретение дополнительно проиллюстрировано следующим неограничивающим примером:

Пример

Нуклеиновая кислота с последовательностью, обозначенной DNAsegVAJB-CHIK (SEQ ID NO: 26, фланкирована сайтом BamHI на 5' конце и сайтом HindIII на 3' конце, ggatcc в начале последовательности и aagctt в конце последовательности) была получена коммерческим поставщиком:

Конструкцию клонировали в плазмиду для переноса рАСЕВас (Geneva Biotech, Женева, Швейцария) с применением сайтов расщепления BamHI и HindIII, в результате чего была получена конструкция рАСЕВас VAJB-CHIK (SEQ ID NO: 27):

Для проверки правильности вставки применяли секвенирование ДНК. Открытая рамка считывания кодирует белок VAJB-CHIK (SEQ ID NO: 28), который содержит главный нейтрализующий эпитоп вируса чикунгунья STKDNFNVYKATRPYLAH (SEQ ID NO: 29) в петле L1.

VAJB-CHIK (SEQ ID NO: 28):

Затем pACEBac_VAJB-CHIK применяли для трансформации клеток DHlOEMBacY (Geneva Biotech, Женева, Швейцария), несущих бакул о вирусный геном EMBacY в качестве искусственной хромосомы (описан в Fitzgerald DJ et al. Nat Methods. 2006 Dec, 3(12): 1021-32 PMID: 17117155). Композитный бакуловирус с кассетой экспрессии для VAJB1, интегрированной посредством транспозиции Тп7 в клетки DHlOEMBacY, затем идентифицировали с помощью синего/белого скрининга, и рекомбинантный бакуловирус получали, как описано (там же). Культуры клеток насекомых Spodoptera frugiperda линии 21 (Sf21) инфицировали бакуловирус ом, полученным таким образом, как описано в Fitzgerald et al. (2006) Nat Methods, см. выше.

Крупномасштабную (от 100 до 500 мл) экспрессию проводили в клетках Trichoplusia ni Hi5 во встряхиваемых колбах и экспрессию рекомбинантного белка с последующим измерением флуоресценции желтого флуоресцентного белка (YFP), как описано (Fitzgerald DJ et Nat Methods. 2006 Dec;3(12): 1021-32 PMID: 17117155). Когда флуоресценция YFP достигла плато (обычно через 72 часа после остановки пролиферации в культуре клеток, см. Fitzgerald et al, Nat Methods 2006), культуры клеток насекомых собирали и клетки осаждали центрифугированием (4000 g, 10 мин). Клетки замораживали в жидком азоте и хранили при минус 80 градусах Цельсия.

Для получения белка клетки лизировали замораживанием-оттаиванием в фосфатно-солевом буфере (ФСБ), содержащем цельную смесь ингибиторов протеазы (Roche Ltd). Белок очищали путем нанесения градиента сахарозы от 15 до 40% мас./об. сахарозы и ультрацентрифугирования в течение ночи при 100000 g. Собирали градиент и определяли содержание белка с помощью денатурирующего электрофореза в полиакриламидном геле (SDS-PAGE) с последующим окрашиванием кумасси бриллиантовым голубым. Фракции, содержащие VAJB1, объединяли и подвергали диализу против ФСБ (или 10 мМ HEPES, рН 7,4, 50 мМ NaCl). Вторую стадию очистки проводили на колонке HiQ объемом 5 мл (BioRAD) с применением линейного градиента от 50 до 500 мМ NaCl. Образование пентамера и додекамера подтверждали с помощью электронной микроскопии с отрицательным окрашиванием (уранилацетат).

--->

ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ

<110> ИМОФОРОН ЛИМИТЕД

<120> МУЛЬТИМЕРИЗАЦИЯ ПОЛИПЕПТИДОВ, ПОЛУЧЕННЫХ ИЗ ДОМЕНА ТИПА

«JELLY ROLL» ПЕНТОНА АДЕНОВИРУСА

<130> I 2444 WO

<150> EP18186731.8

<151> 2018-07-31

<160> 29

<170> PatentIn версии 3.5

<210> 1

<211> 544

<212> ПРТ

<213> Аденовирус человека C серотипа 3

<400> 1

Met Arg Arg Arg Ala Val Leu Gly Gly Ala Val Val Tyr Pro Glu Gly

1 5 10 15

Pro Pro Pro Ser Tyr Glu Ser Val Met Gln Gln Gln Ala Ala Met Ile

20 25 30

Gln Pro Pro Leu Glu Ala Pro Phe Val Pro Pro Arg Tyr Leu Ala Pro

35 40 45

Thr Glu Gly Arg Asn Ser Ile Arg Tyr Ser Glu Leu Ser Pro Leu Tyr

50 55 60

Asp Thr Thr Lys Leu Tyr Leu Val Asp Asn Lys Ser Ala Asp Ile Ala

65 70 75 80

Ser Leu Asn Tyr Gln Asn Asp His Ser Asn Phe Leu Thr Thr Val Val

85 90 95

Gln Asn Asn Asp Phe Thr Pro Thr Glu Ala Ser Thr Gln Thr Ile Asn

100 105 110

Phe Asp Glu Arg Ser Arg Trp Gly Gly Gln Leu Lys Thr Ile Met His

115 120 125

Thr Asn Met Pro Asn Val Asn Glu Tyr Met Phe Ser Asn Lys Phe Lys

130 135 140

Ala Arg Val Met Val Ser Arg Lys Ala Pro Glu Gly Val Thr Val Asn

145 150 155 160

Asp Thr Tyr Asp His Lys Glu Asp Ile Leu Lys Tyr Glu Trp Phe Glu

165 170 175

Phe Ile Leu Pro Glu Gly Asn Phe Ser Ala Thr Met Thr Ile Asp Leu

180 185 190

Met Asn Asn Ala Ile Ile Asp Asn Tyr Leu Glu Ile Gly Arg Gln Asn

195 200 205

Gly Val Leu Glu Ser Asp Ile Gly Val Lys Phe Asp Thr Arg Asn Phe

210 215 220

Arg Leu Gly Trp Asp Pro Glu Thr Lys Leu Ile Met Pro Gly Val Tyr

225 230 235 240

Thr Tyr Glu Ala Phe His Pro Asp Ile Val Leu Leu Pro Gly Cys Gly

245 250 255

Val Asp Phe Thr Glu Ser Arg Leu Ser Asn Leu Leu Gly Ile Arg Lys

260 265 270

Arg His Pro Phe Gln Glu Gly Phe Lys Ile Met Tyr Glu Asp Leu Glu

275 280 285

Gly Gly Asn Ile Pro Ala Leu Leu Asp Val Thr Ala Tyr Glu Glu Ser

290 295 300

Lys Lys Asp Thr Thr Thr Glu Thr Thr Thr Leu Ala Val Ala Glu Glu

305 310 315 320

Thr Ser Glu Asp Asp Asp Ile Thr Arg Gly Asp Thr Tyr Ile Thr Glu

325 330 335

Lys Gln Lys Arg Glu Ala Ala Ala Ala Glu Val Lys Lys Glu Leu Lys

340 345 350

Ile Gln Pro Leu Glu Lys Asp Ser Lys Ser Arg Ser Tyr Asn Val Leu

355 360 365

Glu Asp Lys Ile Asn Thr Ala Tyr Arg Ser Trp Tyr Leu Ser Tyr Asn

370 375 380

Tyr Gly Asn Pro Glu Lys Gly Ile Arg Ser Trp Thr Leu Leu Thr Thr

385 390 395 400

Ser Asp Val Thr Cys Gly Ala Glu Gln Val Tyr Trp Ser Leu Pro Asp

405 410 415

Met Met Gln Asp Pro Val Thr Phe Arg Ser Thr Arg Gln Val Asn Asn

420 425 430

Tyr Pro Val Val Gly Ala Glu Leu Met Pro Val Phe Ser Lys Ser Phe

435 440 445

Tyr Asn Glu Gln Ala Val Tyr Ser Gln Gln Leu Arg Gln Ala Thr Ser

450 455 460

Leu Thr His Val Phe Asn Arg Phe Pro Glu Asn Gln Ile Leu Ile Arg

465 470 475 480

Pro Pro Ala Pro Thr Ile Thr Thr Val Ser Glu Asn Val Pro Ala Leu

485 490 495

Thr Asp His Gly Thr Leu Pro Leu Arg Ser Ser Ile Arg Gly Val Gln

500 505 510

Arg Val Thr Val Thr Asp Ala Arg Arg Arg Thr Cys Pro Tyr Val Tyr

515 520 525

Lys Ala Leu Gly Ile Val Ala Pro Arg Val Leu Ser Ser Arg Thr Phe

530 535 540

<210> 2

<211> 571

<212> ПРТ

<213> Аденовирус человека C серотипа 2

<400> 2

Met Gln Arg Ala Ala Met Tyr Glu Glu Gly Pro Pro Pro Ser Tyr Glu

1 5 10 15

Ser Val Val Ser Ala Ala Pro Val Ala Ala Ala Leu Gly Ser Pro Phe

20 25 30

Asp Ala Pro Leu Asp Pro Pro Phe Val Pro Pro Arg Tyr Leu Arg Pro

35 40 45

Thr Gly Gly Arg Asn Ser Ile Arg Tyr Ser Glu Leu Ala Pro Leu Phe

50 55 60

Asp Thr Thr Arg Val Tyr Leu Val Asp Asn Lys Ser Thr Asp Val Ala

65 70 75 80

Ser Leu Asn Tyr Gln Asn Asp His Ser Asn Phe Leu Thr Thr Val Ile

85 90 95

Gln Asn Asn Asp Tyr Ser Pro Gly Glu Ala Ser Thr Gln Thr Ile Asn

100 105 110

Leu Asp Asp Arg Ser His Trp Gly Gly Asp Leu Lys Thr Ile Leu His

115 120 125

Thr Asn Met Pro Asn Val Asn Glu Phe Met Phe Thr Asn Lys Phe Lys

130 135 140

Ala Arg Val Met Val Ser Arg Ser Leu Thr Lys Asp Lys Gln Val Glu

145 150 155 160

Leu Lys Tyr Glu Trp Val Glu Phe Thr Leu Pro Glu Gly Asn Tyr Ser

165 170 175

Glu Thr Met Thr Ile Asp Leu Met Asn Asn Ala Ile Val Glu His Tyr

180 185 190

Leu Lys Val Gly Arg Gln Asn Gly Val Leu Glu Ser Asp Ile Gly Val

195 200 205

Lys Phe Asp Thr Arg Asn Phe Arg Leu Gly Phe Asp Pro Val Thr Gly

210 215 220

Leu Val Met Pro Gly Val Tyr Thr Asn Glu Ala Phe His Pro Asp Ile

225 230 235 240

Ile Leu Leu Pro Gly Cys Gly Val Asp Phe Thr His Ser Arg Leu Ser

245 250 255

Asn Leu Leu Gly Ile Arg Lys Arg Gln Pro Phe Gln Glu Gly Phe Arg

260 265 270

Ile Thr Tyr Asp Asp Leu Glu Gly Gly Asn Ile Pro Ala Leu Leu Asp

275 280 285

Val Asp Ala Tyr Gln Ala Ser Leu Lys Asp Asp Thr Glu Gln Gly Gly

290 295 300

Asp Gly Ala Gly Gly Gly Asn Asn Ser Gly Ser Gly Ala Glu Glu Asn

305 310 315 320

Ser Asn Ala Ala Ala Ala Ala Met Gln Pro Val Glu Asp Met Asn Asp

325 330 335

His Ala Ile Arg Gly Asp Thr Phe Ala Thr Arg Ala Glu Glu Lys Arg

340 345 350

Ala Glu Ala Glu Ala Ala Ala Glu Ala Ala Ala Pro Ala Ala Gln Pro

355 360 365

Glu Val Glu Lys Pro Gln Lys Lys Pro Val Ile Lys Pro Leu Thr Glu

370 375 380

Asp Ser Lys Lys Arg Ser Tyr Asn Leu Ile Ser Asn Asp Ser Thr Phe

385 390 395 400

Thr Gln Tyr Arg Ser Trp Tyr Leu Ala Tyr Asn Tyr Gly Asp Pro Gln

405 410 415

Thr Gly Ile Arg Ser Trp Thr Leu Leu Cys Thr Pro Asp Val Thr Cys

420 425 430

Gly Ser Glu Gln Val Tyr Trp Ser Leu Pro Asp Met Met Gln Asp Pro

435 440 445

Val Thr Phe Arg Ser Thr Ser Gln Ile Ser Asn Phe Pro Val Val Gly

450 455 460

Ala Glu Leu Leu Pro Val His Ser Lys Ser Phe Tyr Asn Asp Gln Ala

465 470 475 480

Val Tyr Ser Gln Leu Ile Arg Gln Phe Thr Ser Leu Thr His Val Phe

485 490 495

Asn Arg Phe Pro Glu Asn Gln Ile Leu Ala Arg Pro Pro Ala Pro Thr

500 505 510

Ile Thr Thr Val Ser Glu Asn Val Pro Ala Leu Thr Asp His Gly Thr

515 520 525

Leu Pro Leu Arg Asn Ser Ile Gly Gly Val Gln Arg Val Thr Ile Thr

530 535 540

Asp Ala Arg Arg Arg Thr Cys Pro Tyr Val Tyr Lys Ala Leu Gly Ile

545 550 555 560

Val Ser Pro Arg Val Leu Ser Ser Arg Thr Phe

565 570

<210> 3

<211> 535

<212> ПРТ

<213> Аденовирус человека E серотипа 4

<400> 3

Met Met Arg Arg Ala Tyr Pro Glu Gly Pro Pro Pro Ser Tyr Glu Ser

1 5 10 15

Val Met Gln Gln Ala Met Ala Ala Ala Ala Ala Ile Gln Pro Pro Leu

20 25 30

Glu Ala Pro Tyr Val Pro Pro Arg Tyr Leu Ala Pro Thr Glu Gly Arg

35 40 45

Asn Ser Ile Arg Tyr Ser Glu Leu Thr Pro Leu Tyr Asp Thr Thr Arg

50 55 60

Leu Tyr Leu Val Asp Asn Lys Ser Ala Asp Ile Ala Ser Leu Asn Tyr

65 70 75 80

Gln Asn Asp His Ser Asn Phe Leu Thr Thr Val Val Gln Asn Asn Asp

85 90 95

Phe Thr Pro Thr Glu Ala Ser Thr Gln Thr Ile Asn Phe Asp Glu Arg

100 105 110

Ser Arg Trp Gly Gly Gln Leu Lys Thr Ile Met His Thr Asn Met Pro

115 120 125

Asn Val Asn Gln Phe Met Tyr Ser Asn Lys Phe Lys Ala Arg Val Met

130 135 140

Val Ser Arg Lys Thr Pro Asn Gly Val Thr Val Gly Asp Asn Tyr Asp

145 150 155 160

Gly Ser Gln Asp Glu Leu Lys Tyr Glu Trp Val Glu Phe Glu Leu Pro

165 170 175

Glu Gly Asn Phe Ser Val Thr Met Thr Ile Asp Leu Met Asn Asn Ala

180 185 190

Ile Ile Asp Asn Tyr Leu Ala Val Gly Arg Gln Asn Gly Val Leu Glu

195 200 205

Ser Asp Ile Gly Val Lys Phe Asp Thr Arg Asn Phe Arg Leu Gly Trp

210 215 220

Asp Pro Val Thr Glu Leu Val Met Pro Gly Val Tyr Thr Asn Glu Ala

225 230 235 240

Phe His Pro Asp Ile Val Leu Leu Pro Gly Cys Gly Val Asp Phe Thr

245 250 255

Glu Ser Arg Leu Ser Asn Leu Leu Gly Ile Arg Lys Arg Gln Pro Phe

260 265 270

Gln Glu Gly Phe Gln Ile Met Tyr Glu Asp Leu Asp Gly Gly Asn Ile

275 280 285

Pro Ala Leu Leu Asp Val Glu Ala Tyr Glu Lys Ser Lys Glu Glu Ser

290 295 300

Val Ala Ala Ala Thr Thr Ala Val Ala Thr Ala Ser Thr Glu Val Arg

305 310 315 320

Asp Asp Asn Phe Ala Ser Ala Ala Ala Val Ala Ala Val Lys Ala Asp

325 330 335

Glu Thr Lys Ser Lys Ile Val Ile Gln Pro Val Glu Lys Asp Ser Lys

340 345 350

Glu Arg Ser Tyr Asn Val Leu Ser Asp Lys Lys Asn Thr Ala Tyr Arg

355 360 365

Ser Trp Tyr Leu Ala Tyr Asn Tyr Gly Asp Arg Asp Lys Gly Val Arg

370 375 380

Ser Trp Thr Leu Leu Thr Thr Ser Asp Val Thr Cys Gly Val Glu Gln

385 390 395 400

Val Tyr Trp Ser Leu Pro Asp Met Met Gln Asp Pro Val Thr Phe Arg

405 410 415

Ser Thr His Gln Val Ser Asn Tyr Pro Val Val Gly Ala Glu Leu Leu

420 425 430

Pro Val Tyr Ser Lys Ser Phe Phe Asn Glu Gln Ala Val Tyr Ser Gln

435 440 445

Gln Leu Arg Ala Phe Thr Ser Leu Thr His Val Phe Asn Arg Phe Pro

450 455 460

Glu Asn Gln Ile Leu Val Arg Pro Pro Ala Pro Thr Ile Thr Thr Val

465 470 475 480

Ser Glu Asn Val Pro Ala Leu Thr Asp His Gly Thr Leu Pro Leu Arg

485 490 495

Ser Ser Ile Arg Gly Val Gln Arg Val Thr Val Thr Asp Ala Arg Arg

500 505 510

Arg Thr Cys Pro Tyr Val Tyr Lys Ala Leu Gly Ile Val Ala Pro Arg

515 520 525

Val Leu Ser Ser Arg Thr Phe

530 535

<210> 4

<211> 571

<212> ПРТ

<213> Аденовирус человека C серотипа 5

<400> 4

Met Arg Arg Ala Ala Met Tyr Glu Glu Gly Pro Pro Pro Ser Tyr Glu

1 5 10 15

Ser Val Val Ser Ala Ala Pro Val Ala Ala Ala Leu Gly Ser Pro Phe

20 25 30

Asp Ala Pro Leu Asp Pro Pro Phe Val Pro Pro Arg Tyr Leu Arg Pro

35 40 45

Thr Gly Gly Arg Asn Ser Ile Arg Tyr Ser Glu Leu Ala Pro Leu Phe

50 55 60

Asp Thr Thr Arg Val Tyr Leu Val Asp Asn Lys Ser Thr Asp Val Ala

65 70 75 80

Ser Leu Asn Tyr Gln Asn Asp His Ser Asn Phe Leu Thr Thr Val Ile

85 90 95

Gln Asn Asn Asp Tyr Ser Pro Gly Glu Ala Ser Thr Gln Thr Ile Asn

100 105 110

Leu Asp Asp Arg Ser His Trp Gly Gly Asp Leu Lys Thr Ile Leu His

115 120 125

Thr Asn Met Pro Asn Val Asn Glu Phe Met Phe Thr Asn Lys Phe Lys

130 135 140

Ala Arg Val Met Val Ser Arg Leu Pro Thr Lys Asp Asn Gln Val Glu

145 150 155 160

Leu Lys Tyr Glu Trp Val Glu Phe Thr Leu Pro Glu Gly Asn Tyr Ser

165 170 175

Glu Thr Met Thr Ile Asp Leu Met Asn Asn Ala Ile Val Glu His Tyr

180 185 190

Leu Lys Val Gly Arg Gln Asn Gly Val Leu Glu Ser Asp Ile Gly Val

195 200 205

Lys Phe Asp Thr Arg Asn Phe Arg Leu Gly Phe Asp Pro Val Thr Gly

210 215 220

Leu Val Met Pro Gly Val Tyr Thr Asn Glu Ala Phe His Pro Asp Ile

225 230 235 240

Ile Leu Leu Pro Gly Cys Gly Val Asp Phe Thr His Ser Arg Leu Ser

245 250 255

Asn Leu Leu Gly Ile Arg Lys Arg Gln Pro Phe Gln Glu Gly Phe Arg

260 265 270

Ile Thr Tyr Asp Asp Leu Glu Gly Gly Asn Ile Pro Ala Leu Leu Asp

275 280 285

Val Asp Ala Tyr Gln Ala Ser Leu Lys Asp Asp Thr Glu Gln Gly Gly

290 295 300

Gly Gly Ala Gly Gly Ser Asn Ser Ser Gly Ser Gly Ala Glu Glu Asn

305 310 315 320

Ser Asn Ala Ala Ala Ala Ala Met Gln Pro Val Glu Asp Met Asn Asp

325 330 335

His Ala Ile Arg Gly Asp Thr Phe Ala Thr Arg Ala Glu Glu Lys Arg

340 345 350

Ala Glu Ala Glu Ala Ala Ala Glu Ala Ala Ala Pro Ala Ala Gln Pro

355 360 365

Glu Val Glu Lys Pro Gln Lys Lys Pro Val Ile Lys Pro Leu Thr Glu

370 375 380

Asp Ser Lys Lys Arg Ser Tyr Asn Leu Ile Ser Asn Asp Ser Thr Phe

385 390 395 400

Thr Gln Tyr Arg Ser Trp Tyr Leu Ala Tyr Asn Tyr Gly Asp Pro Gln

405 410 415

Thr Gly Ile Arg Ser Trp Thr Leu Leu Cys Thr Pro Asp Val Thr Cys

420 425 430

Gly Ser Glu Gln Val Tyr Trp Ser Leu Pro Asp Met Met Gln Asp Pro

435 440 445

Val Thr Phe Arg Ser Thr Arg Gln Ile Ser Asn Phe Pro Val Val Gly

450 455 460

Ala Glu Leu Leu Pro Val His Ser Lys Ser Phe Tyr Asn Asp Gln Ala

465 470 475 480

Val Tyr Ser Gln Leu Ile Arg Gln Phe Thr Ser Leu Thr His Val Phe

485 490 495

Asn Arg Phe Pro Glu Asn Gln Ile Leu Ala Arg Pro Pro Ala Pro Thr

500 505 510

Ile Thr Thr Val Ser Glu Asn Val Pro Ala Leu Thr Asp His Gly Thr

515 520 525

Leu Pro Leu Arg Asn Ser Ile Gly Gly Val Gln Arg Val Thr Ile Thr

530 535 540

Asp Ala Arg Arg Arg Thr Cys Pro Tyr Val Tyr Lys Ala Leu Gly Ile

545 550 555 560

Val Ser Pro Arg Val Leu Ser Ser Arg Thr Phe

565 570

<210> 5

<211> 544

<212> ПРТ

<213> Аденовирус человека B серотипа 7

<400> 5

Met Arg Arg Arg Ala Val Leu Gly Gly Ala Met Val Tyr Pro Glu Gly

1 5 10 15

Pro Pro Pro Ser Tyr Glu Ser Val Met Gln Gln Gln Ala Ala Met Ile

20 25 30

Gln Pro Pro Leu Glu Ala Pro Phe Val Pro Pro Arg Tyr Leu Ala Pro

35 40 45

Thr Glu Gly Arg Asn Ser Ile Arg Tyr Ser Glu Leu Ser Pro Leu Tyr

50 55 60

Asp Thr Thr Lys Leu Tyr Leu Val Asp Asn Lys Ser Ala Asp Ile Ala

65 70 75 80

Ser Leu Asn Tyr Gln Asn Asp His Ser Asn Phe Leu Thr Thr Val Val

85 90 95

Gln Asn Asn Asp Phe Thr Pro Thr Glu Ala Ser Thr Gln Thr Ile Asn

100 105 110

Phe Asp Glu Arg Ser Arg Trp Gly Gly Gln Leu Lys Thr Ile Met His

115 120 125

Thr Asn Met Pro Asn Val Asn Glu Tyr Met Phe Ser Asn Lys Phe Lys

130 135 140

Ala Arg Val Met Val Ser Arg Lys Ala Pro Glu Gly Val Ile Val Asn

145 150 155 160

Asp Thr Tyr Asp His Lys Glu Asp Ile Leu Lys Tyr Glu Trp Phe Glu

165 170 175

Phe Thr Leu Pro Glu Gly Asn Phe Ser Ala Thr Met Thr Ile Asp Leu

180 185 190

Met Asn Asn Ala Ile Ile Asp Asn Tyr Leu Glu Ile Gly Arg Gln Asn

195 200 205

Gly Val Leu Glu Ser Asp Ile Gly Val Lys Phe Asp Thr Arg Asn Phe

210 215 220

Arg Leu Gly Trp Asp Pro Glu Thr Lys Leu Ile Met Pro Gly Val Tyr

225 230 235 240

Thr Tyr Glu Ala Phe His Pro Asp Ile Val Leu Leu Pro Gly Cys Gly

245 250 255

Val Asp Phe Thr Glu Ser Arg Leu Ser Asn Leu Leu Gly Ile Arg Lys

260 265 270

Arg His Pro Phe Gln Glu Gly Phe Lys Ile Met Tyr Glu Asp Leu Glu

275 280 285

Gly Gly Asn Ile Pro Ala Leu Leu Asp Val Thr Ala Tyr Glu Glu Ser

290 295 300

Lys Lys Asp Thr Thr Thr Glu Thr Thr Thr Leu Ala Val Ala Glu Glu

305 310 315 320

Thr Ser Glu Asp Asp Asn Ile Thr Arg Gly Asp Thr Tyr Ile Thr Glu

325 330 335

Lys Gln Lys Arg Glu Ala Ala Ala Ala Glu Val Lys Lys Glu Leu Lys

340 345 350

Ile Gln Pro Leu Glu Lys Asp Ser Lys Ser Arg Ser Tyr Asn Val Leu

355 360 365

Glu Asp Lys Ile Asn Thr Ala Tyr Arg Ser Trp Tyr Leu Ser Tyr Asn

370 375 380

Tyr Gly Asn Pro Glu Lys Gly Ile Arg Ser Trp Thr Leu Leu Thr Thr

385 390 395 400

Ser Asp Val Thr Cys Gly Ala Glu Gln Val Tyr Trp Ser Leu Pro Asp

405 410 415

Met Met Gln Asp Pro Val Thr Phe Arg Ser Thr Arg Gln Val Asn Asn

420 425 430

Tyr Pro Val Val Gly Ala Glu Leu Met Pro Val Phe Ser Lys Ser Phe

435 440 445

Tyr Asn Glu Gln Ala Val Tyr Ser Gln Gln Leu Arg Gln Ala Thr Ser

450 455 460

Leu Thr His Val Phe Asn Arg Phe Pro Glu Asn Gln Ile Leu Ile Arg

465 470 475 480

Pro Pro Ala Pro Thr Ile Thr Thr Val Ser Glu Asn Val Pro Ala Leu

485 490 495

Thr Asp His Gly Thr Leu Pro Leu Arg Ser Ser Ile Arg Gly Val Gln

500 505 510

Arg Val Thr Val Thr Asp Ala Arg Arg Arg Thr Cys Pro Tyr Val Tyr

515 520 525

Lys Ala Leu Gly Ile Val Ala Pro Arg Val Leu Ser Ser Arg Thr Phe

530 535 540

<210> 6

<211> 557

<212> ПРТ

<213> Аденовирус человека B серотипа 11

<400> 6

Met Arg Arg Val Val Leu Gly Gly Ala Val Val Tyr Pro Glu Gly Pro

1 5 10 15

Pro Pro Ser Tyr Glu Ser Val Met Gln Gln Gln Ala Thr Ala Val Met

20 25 30

Gln Ser Pro Leu Glu Ala Pro Phe Val Pro Pro Arg Tyr Leu Ala Pro

35 40 45

Thr Glu Gly Arg Asn Ser Ile Arg Tyr Ser Glu Leu Ala Pro Gln Tyr

50 55 60

Asp Thr Thr Arg Leu Tyr Leu Val Asp Asn Lys Ser Ala Asp Ile Ala

65 70 75 80

Ser Leu Asn Tyr Gln Asn Asp His Ser Asn Phe Leu Thr Thr Val Val

85 90 95

Gln Asn Asn Asp Phe Thr Pro Thr Glu Ala Ser Thr Gln Thr Ile Asn

100 105 110

Phe Asp Glu Arg Ser Arg Trp Gly Gly Gln Leu Lys Thr Ile Met His

115 120 125

Thr Asn Met Pro Asn Val Asn Glu Tyr Met Phe Ser Asn Asn Phe Lys

130 135 140

Ala Arg Val Met Val Ser Arg Lys Pro Pro Glu Gly Ala Ala Val Gly

145 150 155 160

Asp Thr Tyr Asp His Lys Gln Asp Ile Leu Glu Tyr Glu Trp Phe Glu

165 170 175

Phe Thr Leu Pro Glu Gly Asn Phe Ser Val Thr Met Thr Ile Asp Leu

180 185 190

Met Asn Asn Ala Ile Ile Asp Asn Tyr Leu Lys Val Gly Arg Gln Asn

195 200 205

Gly Val Leu Glu Ser Asp Ile Gly Val Lys Phe Asp Thr Arg Asn Phe

210 215 220

Lys Leu Gly Trp Asp Pro Glu Thr Lys Leu Ile Met Pro Gly Val Tyr

225 230 235 240

Thr Tyr Glu Ala Phe His Pro Asp Ile Val Leu Leu Pro Gly Cys Gly

245 250 255

Val Asp Phe Thr Glu Ser Arg Leu Ser Asn Leu Leu Gly Ile Arg Lys

260 265 270

Lys Gln Pro Phe Gln Glu Gly Phe Lys Ile Leu Tyr Glu Asp Leu Glu

275 280 285

Gly Gly Asn Ile Pro Ala Leu Leu Asp Val Asp Ala Tyr Glu Asn Ser

290 295 300

Lys Lys Glu Gln Lys Ala Lys Ile Glu Ala Ala Ala Glu Ala Lys Ala

305 310 315 320

Asn Ile Val Ala Ser Asp Ser Thr Arg Val Ala Asn Ala Gly Glu Val

325 330 335

Arg Gly Asp Asn Phe Ala Pro Thr Pro Val Pro Thr Ala Glu Ser Leu

340 345 350

Leu Ala Asp Val Ser Gly Gly Thr Asp Val Lys Leu Thr Ile Gln Pro

355 360 365

Val Glu Lys Asp Ser Lys Asn Arg Ser Tyr Asn Val Leu Glu Asp Lys

370 375 380

Ile Asn Thr Ala Tyr Arg Ser Trp Tyr Leu Ser Tyr Asn Tyr Gly Asp

385 390 395 400

Pro Glu Lys Gly Val Arg Ser Trp Thr Leu Leu Thr Thr Ser Asp Val

405 410 415

Thr Cys Gly Ala Glu Gln Val Tyr Trp Ser Leu Pro Asp Met Met Gln

420 425 430

Asp Pro Val Thr Phe Arg Ser Thr Arg Gln Val Ser Asn Tyr Pro Val

435 440 445

Val Gly Ala Glu Leu Met Pro Val Phe Ser Lys Ser Phe Tyr Asn Glu

450 455 460

Gln Ala Val Tyr Ser Gln Gln Leu Arg Gln Ser Thr Ser Leu Thr His

465 470 475 480

Val Phe Asn Arg Phe Pro Glu Asn Gln Ile Leu Ile Arg Pro Pro Ala

485 490 495

Pro Thr Ile Thr Thr Val Ser Glu Asn Val Pro Ala Leu Thr Asp His

500 505 510

Gly Thr Leu Pro Leu Arg Ser Ser Ile Arg Gly Val Gln Arg Val Thr

515 520 525

Val Thr Asp Ala Arg Arg Arg Thr Cys Pro Tyr Val Tyr Lys Ala Leu

530 535 540

Gly Ile Val Ala Pro Arg Val Leu Ser Ser Arg Thr Phe

545 550 555

<210> 7

<211> 497

<212> ПРТ

<213> Аденовирус человека A серотипа 12

<400> 7

Met Arg Arg Ala Val Glu Leu Gln Thr Val Ala Phe Pro Glu Thr Pro

1 5 10 15

Pro Pro Ser Tyr Glu Thr Val Met Ala Ala Ala Pro Pro Tyr Val Pro

20 25 30

Pro Arg Tyr Leu Gly Pro Thr Glu Gly Arg Asn Ser Ile Arg Tyr Ser

35 40 45

Glu Leu Ser Pro Leu Tyr Asp Thr Thr Arg Val Tyr Leu Val Asp Asn

50 55 60

Lys Ser Ser Asp Ile Ala Ser Leu Asn Tyr Gln Asn Asp His Ser Asn

65 70 75 80

Phe Leu Thr Thr Val Val Gln Asn Asn Asp Tyr Ser Pro Ile Glu Ala

85 90 95

Gly Thr Gln Thr Ile Asn Phe Asp Glu Arg Ser Arg Trp Gly Gly Asp

100 105 110

Leu Lys Thr Ile Leu His Thr Asn Met Pro Asn Val Asn Asp Phe Met

115 120 125

Phe Thr Thr Lys Phe Lys Ala Arg Val Met Val Ala Arg Lys Thr Asn

130 135 140

Asn Glu Gly Gln Thr Ile Leu Glu Tyr Glu Trp Ala Glu Phe Val Leu

145 150 155 160

Pro Glu Gly Asn Tyr Ser Glu Thr Met Thr Ile Asp Leu Met Asn Asn

165 170 175

Ala Ile Ile Glu His Tyr Leu Arg Val Gly Arg Gln His Gly Val Leu

180 185 190

Glu Ser Asp Ile Gly Val Lys Phe Asp Thr Arg Asn Phe Arg Leu Gly

195 200 205

Trp Asp Pro Glu Thr Gln Leu Val Thr Pro Gly Val Tyr Thr Asn Glu

210 215 220

Ala Phe His Pro Asp Ile Val Leu Leu Pro Gly Cys Gly Val Asp Phe

225 230 235 240

Thr Glu Ser Arg Leu Ser Asn Ile Leu Gly Ile Arg Lys Arg Gln Pro

245 250 255

Phe Gln Glu Gly Phe Val Ile Met Tyr Glu His Leu Glu Gly Gly Asn

260 265 270

Ile Pro Ala Leu Leu Asp Val Lys Lys Tyr Glu Asn Ser Leu Gln Asp

275 280 285

Gln Asn Thr Val Arg Gly Asp Asn Phe Ile Ala Leu Asn Lys Ala Ala

290 295 300

Arg Ile Glu Pro Val Glu Thr Asp Pro Lys Gly Arg Ser Tyr Asn Leu

305 310 315 320

Leu Pro Asp Lys Lys Asn Thr Lys Tyr Arg Ser Trp Tyr Leu Ala Tyr

325 330 335

Asn Tyr Gly Asp Pro Glu Lys Gly Val Arg Ser Trp Thr Leu Leu Thr

340 345 350

Thr Pro Asp Val Thr Gly Gly Ser Glu Gln Val Tyr Trp Ser Leu Pro

355 360 365

Asp Met Met Gln Asp Pro Val Thr Phe Arg Ser Ser Arg Gln Val Ser

370 375 380

Asn Tyr Pro Val Val Ala Ala Glu Leu Leu Pro Val His Ala Lys Ser

385 390 395 400

Phe Tyr Asn Glu Gln Ala Val Tyr Ser Gln Leu Ile Arg Gln Ser Thr

405 410 415

Ala Leu Thr Arg Val Phe Asn Arg Phe Pro Glu Asn Gln Ile Leu Val

420 425 430

Arg Pro Pro Ala Ala Thr Ile Thr Thr Val Ser Glu Asn Val Pro Ala

435 440 445

Leu Thr Asp His Gly Thr Leu Pro Leu Arg Ser Ser Ile Ser Gly Val

450 455 460

Gln Arg Val Thr Ile Thr Asp Ala Arg Arg Arg Thr Cys Pro Tyr Val

465 470 475 480

Tyr Lys Ala Leu Gly Ile Val Ser Pro Arg Val Leu Ser Ser Arg Thr

485 490 495

Phe

<210> 8

<211> 517

<212> ПРТ

<213> Аденовирус человека D серотипа 17

<400> 8

Met Arg Arg Ala Val Val Ser Ser Ser Pro Pro Pro Ser Tyr Glu Ser

1 5 10 15

Val Met Ala Gln Ala Thr Leu Glu Val Pro Phe Val Pro Pro Arg Tyr

20 25 30

Met Ala Pro Thr Glu Gly Arg Asn Ser Ile Arg Tyr Ser Glu Leu Ala

35 40 45

Pro Leu Tyr Asp Thr Thr Arg Val Tyr Leu Val Asp Asn Lys Ser Ala

50 55 60

Asp Ile Ala Ser Leu Asn Tyr Gln Asn Asp His Ser Asn Phe Leu Thr

65 70 75 80

Thr Val Val Gln Asn Asn Asp Phe Thr Pro Ala Glu Ala Ser Thr Gln

85 90 95

Thr Ile Asn Phe Asp Glu Arg Ser Arg Trp Gly Gly Asp Leu Lys Thr

100 105 110

Ile Leu His Thr Asn Met Pro Asn Val Asn Glu Tyr Met Phe Thr Ser

115 120 125

Lys Phe Lys Ala Arg Val Met Val Ala Arg Lys His Pro Gln Gly Val

130 135 140

Glu Ala Thr Asp Leu Ser Lys Asp Ile Leu Glu Tyr Glu Trp Phe Glu

145 150 155 160

Phe Thr Leu Pro Glu Gly Asn Phe Ser Glu Thr Met Thr Ile Asp Leu

165 170 175

Met Asn Asn Ala Ile Leu Glu Asn Tyr Leu Gln Val Gly Arg Gln Asn

180 185 190

Gly Val Leu Glu Ser Asp Ile Gly Val Lys Phe Asp Ser Arg Asn Phe

195 200 205

Lys Leu Gly Trp Asp Pro Val Thr Lys Leu Val Met Pro Gly Val Tyr

210 215 220

Thr Tyr Glu Ala Phe His Pro Asp Val Val Leu Leu Pro Gly Cys Gly

225 230 235 240

Val Asp Phe Thr Glu Ser Arg Leu Ser Asn Leu Leu Gly Ile Arg Lys

245 250 255

Lys Gln Pro Phe Gln Glu Gly Phe Arg Ile Met Tyr Glu Asp Leu Glu

260 265 270

Gly Gly Asn Ile Pro Ala Leu Leu Asp Val Pro Lys Tyr Leu Glu Ser

275 280 285

Lys Lys Lys Leu Glu Glu Ala Leu Glu Asn Ala Ala Lys Ala Asn Gly

290 295 300

Pro Ala Arg Gly Asp Ser Ser Val Ser Arg Glu Val Glu Lys Ala Ala

305 310 315 320

Glu Lys Glu Leu Val Ile Glu Pro Ile Lys Gln Asp Asp Ser Lys Arg

325 330 335

Ser Tyr Asn Leu Ile Glu Gly Thr Met Asp Thr Leu Tyr Arg Ser Trp

340 345 350

Tyr Leu Ser Tyr Thr Tyr Gly Asp Pro Glu Lys Gly Val Gln Ser Trp

355 360 365

Thr Leu Leu Thr Thr Pro Asp Val Thr Cys Gly Ala Glu Gln Val Tyr

370 375 380

Trp Ser Leu Pro Asp Leu Met Gln Asp Pro Val Thr Phe Arg Ser Thr

385 390 395 400

Gln Gln Val Ser Asn Tyr Pro Val Val Gly Ala Glu Leu Met Pro Phe

405 410 415

Arg Ala Lys Ser Phe Tyr Asn Asp Leu Ala Val Tyr Ser Gln Leu Ile

420 425 430

Arg Ser Tyr Thr Ser Leu Thr His Val Phe Asn Arg Phe Pro Asp Asn

435 440 445

Gln Ile Leu Cys Arg Pro Pro Ala Pro Thr Ile Thr Thr Val Ser Glu

450 455 460

Asn Val Pro Ala Leu Thr Asp His Gly Thr Leu Pro Leu Arg Ser Ser

465 470 475 480

Ile Arg Gly Val Gln Arg Val Thr Val Thr Asp Ala Arg Arg Arg Thr

485 490 495

Cys Pro Tyr Val Tyr Lys Ala Leu Gly Ile Val Ala Pro Arg Val Leu

500 505 510

Ser Ser Arg Thr Phe

515

<210> 9

<211> 520

<212> ПРТ

<213> Аденовирус человека 25

<400> 9

Met Arg Arg Ala Val Val Ser Ser Ser Pro Pro Pro Ser Tyr Glu Ser

1 5 10 15

Val Met Ala Gln Ala Thr Leu Glu Val Pro Phe Val Pro Pro Arg Tyr

20 25 30

Met Ala Pro Thr Glu Gly Arg Asn Ser Ile Arg Tyr Ser Glu Leu Ala

35 40 45

Pro Gln Tyr Asp Thr Thr Arg Val Tyr Leu Val Asp Asn Lys Ser Ala

50 55 60

Asp Ile Ala Ser Leu Asn Tyr Gln Asn Asp His Ser Asn Phe Leu Thr

65 70 75 80

Thr Val Val Gln Asn Asn Asp Phe Thr Pro Ala Glu Ala Ser Thr Gln

85 90 95

Thr Ile Asn Phe Asp Glu Arg Ser Arg Trp Gly Gly Asp Leu Lys Thr

100 105 110

Ile Leu His Thr Asn Met Pro Asn Val Asn Glu Tyr Met Phe Thr Ser

115 120 125

Lys Phe Lys Ala Arg Val Met Val Ala Arg Lys His Pro Glu Asn Val

130 135 140

Asp Lys Thr Asp Leu Ser Gln Asp Lys Leu Glu Tyr Glu Trp Phe Glu

145 150 155 160

Phe Thr Leu Pro Glu Gly Asn Phe Ser Glu Thr Met Thr Ile Asp Leu

165 170 175

Met Asn Asn Ala Ile Leu Glu Asn Tyr Leu Gln Val Gly Arg Gln Asn

180 185 190

Gly Val Leu Glu Ser Asp Ile Gly Val Lys Phe Asp Ser Arg Asn Phe

195 200 205

Lys Leu Gly Trp Asp Pro Val Thr Lys Leu Val Met Pro Gly Val Tyr

210 215 220

Thr Tyr Glu Ala Phe His Pro Asp Val Val Leu Leu Pro Gly Cys Gly

225 230 235 240

Val Asp Phe Thr Glu Ser Arg Leu Ser Asn Leu Leu Gly Ile Arg Lys

245 250 255

Lys Gln Pro Phe Gln Glu Gly Phe Arg Ile Met Tyr Glu Asp Leu Glu

260 265 270

Gly Gly Asn Ile Pro Ala Leu Leu Asp Thr Lys Lys Tyr Leu Asp Ser

275 280 285

Lys Lys Glu Leu Glu Asp Ala Ala Lys Glu Ala Ala Lys Gln Gln Gly

290 295 300

Asp Gly Ala Val Thr Arg Gly Asp Thr His Leu Thr Val Ala Gln Glu

305 310 315 320

Lys Ala Ala Glu Lys Glu Leu Val Ile Val Pro Ile Glu Lys Asp Glu

325 330 335

Ser Asn Arg Ser Tyr Asn Leu Ile Lys Asp Thr His Asp Thr Met Tyr

340 345 350

Arg Ser Trp Tyr Leu Ser Tyr Thr Tyr Gly Asp Pro Glu Lys Gly Val

355 360 365

Gln Ser Trp Thr Leu Leu Thr Thr Pro Asp Val Thr Cys Gly Ala Glu

370 375 380

Gln Val Tyr Trp Ser Leu Pro Asp Leu Met Gln Asp Pro Val Thr Phe

385 390 395 400

Arg Ser Thr Gln Gln Val Ser Asn Tyr Pro Val Val Gly Ala Glu Leu

405 410 415

Met Pro Phe Arg Ala Lys Ser Phe Tyr Asn Asp Leu Ala Val Tyr Ser

420 425 430

Gln Leu Ile Arg Ser Tyr Thr Ser Leu Thr His Val Phe Asn Arg Phe

435 440 445

Pro Asp Asn Gln Ile Leu Cys Arg Pro Pro Ala Pro Thr Ile Thr Thr

450 455 460

Val Ser Glu Asn Val Pro Ala Leu Thr Asp His Gly Thr Leu Pro Leu

465 470 475 480

Arg Ser Ser Ile Arg Gly Val Gln Arg Val Thr Val Thr Asp Ala Arg

485 490 495

Arg Arg Thr Cys Pro Tyr Val Tyr Lys Ala Leu Gly Ile Val Ala Pro

500 505 510

Arg Val Leu Ser Ser Arg Thr Phe

515 520

<210> 10

<211> 561

<212> ПРТ

<213> Аденовирус человека B серотипа 35

<400> 10

Met Arg Arg Val Val Leu Gly Gly Ala Val Val Tyr Pro Glu Gly Pro

1 5 10 15

Pro Pro Ser Tyr Glu Ser Val Met Gln Gln Gln Gln Ala Thr Ala Val

20 25 30

Met Gln Ser Pro Leu Glu Ala Pro Phe Val Pro Pro Arg Tyr Leu Ala

35 40 45

Pro Thr Glu Gly Arg Asn Ser Ile Arg Tyr Ser Glu Leu Ala Pro Gln

50 55 60

Tyr Asp Thr Thr Arg Leu Tyr Leu Val Asp Asn Lys Ser Ala Asp Ile

65 70 75 80

Ala Ser Leu Asn Tyr Gln Asn Asp His Ser Asn Phe Leu Thr Thr Val

85 90 95

Val Gln Asn Asn Asp Phe Thr Pro Thr Glu Ala Ser Thr Gln Thr Ile

100 105 110

Asn Phe Asp Glu Arg Ser Arg Trp Gly Gly Gln Leu Lys Thr Ile Met

115 120 125

His Thr Asn Met Pro Asn Val Asn Glu Tyr Met Phe Ser Asn Lys Phe

130 135 140

Lys Ala Arg Val Met Val Ser Arg Lys Pro Pro Asp Gly Ala Ala Val

145 150 155 160

Gly Asp Thr Tyr Asp His Lys Gln Asp Ile Leu Glu Tyr Glu Trp Phe

165 170 175

Glu Phe Thr Leu Pro Glu Gly Asn Phe Ser Val Thr Met Thr Ile Asp

180 185 190

Leu Met Asn Asn Ala Ile Ile Asp Asn Tyr Leu Lys Val Gly Arg Gln

195 200 205

Asn Gly Val Leu Glu Ser Asp Ile Gly Val Lys Phe Asp Thr Arg Asn

210 215 220

Phe Lys Leu Gly Trp Asp Pro Glu Thr Lys Leu Ile Met Pro Gly Val

225 230 235 240

Tyr Thr Tyr Glu Ala Phe His Pro Asp Ile Val Leu Leu Pro Gly Cys

245 250 255

Gly Val Asp Phe Thr Glu Ser Arg Leu Ser Asn Leu Leu Gly Ile Arg

260 265 270

Lys Lys Gln Pro Phe Gln Glu Gly Phe Lys Ile Leu Tyr Glu Asp Leu

275 280 285

Glu Gly Gly Asn Ile Pro Ala Leu Leu Asp Val Asp Ala Tyr Glu Asn

290 295 300

Ser Lys Lys Glu Gln Lys Ala Lys Ile Glu Ala Ala Thr Ala Ala Ala

305 310 315 320

Glu Ala Lys Ala Asn Ile Val Ala Ser Asp Ser Thr Arg Val Ala Asn

325 330 335

Ala Gly Glu Val Arg Gly Asp Asn Phe Ala Pro Thr Pro Val Pro Thr

340 345 350

Ala Glu Ser Leu Leu Ala Asp Val Ser Glu Gly Thr Asp Val Lys Leu

355 360 365

Thr Ile Gln Pro Val Glu Lys Asp Ser Lys Asn Arg Ser Tyr Asn Val

370 375 380

Leu Glu Asp Lys Ile Asn Thr Ala Tyr Arg Ser Trp Tyr Leu Ser Tyr

385 390 395 400

Asn Tyr Gly Asp Pro Glu Lys Gly Val Arg Ser Trp Thr Leu Leu Thr

405 410 415

Thr Ser Asp Val Thr Cys Gly Ala Glu Gln Val Tyr Trp Ser Leu Pro

420 425 430

Asp Met Met Lys Asp Pro Val Thr Phe Arg Ser Thr Arg Gln Val Ser

435 440 445

Asn Tyr Pro Val Val Gly Ala Glu Leu Met Pro Val Phe Ser Lys Ser

450 455 460

Phe Tyr Asn Glu Gln Ala Val Tyr Ser Gln Gln Leu Arg Gln Ser Thr

465 470 475 480

Ser Leu Thr His Val Phe Asn Arg Phe Pro Glu Asn Gln Ile Leu Ile

485 490 495

Arg Pro Pro Ala Pro Thr Ile Thr Thr Val Ser Glu Asn Val Pro Ala

500 505 510

Leu Thr Asp His Gly Thr Leu Pro Leu Arg Ser Ser Ile Arg Gly Val

515 520 525

Gln Arg Val Thr Val Thr Asp Ala Arg Arg Arg Thr Cys Pro Tyr Val

530 535 540

Tyr Lys Ala Leu Gly Ile Val Ala Pro Arg Val Leu Ser Ser Arg Thr

545 550 555 560

Phe

<210> 11

<211> 519

<212> ПРТ

<213> Аденовирус человека D37

<400> 11

Met Arg Arg Ala Val Val Ser Ser Ser Pro Pro Pro Ser Tyr Glu Ser

1 5 10 15

Val Met Ala Gln Ala Thr Leu Glu Val Pro Phe Val Pro Pro Arg Tyr

20 25 30

Met Ala Pro Thr Glu Gly Arg Asn Ser Ile Arg Tyr Ser Glu Leu Ala

35 40 45

Pro Leu Tyr Asp Thr Thr Arg Val Tyr Leu Val Asp Asn Lys Ser Ala

50 55 60

Asp Ile Ala Ser Leu Asn Tyr Gln Asn Asp His Ser Asn Phe Leu Thr

65 70 75 80

Thr Val Val Gln Asn Asn Asp Phe Thr Pro Ala Glu Ala Ser Thr Gln

85 90 95

Thr Ile Asn Phe Asp Glu Arg Ser Arg Trp Gly Gly Asp Leu Lys Thr

100 105 110

Ile Leu His Thr Asn Met Pro Asn Val Asn Glu Tyr Met Phe Thr Ser

115 120 125

Lys Phe Lys Ala Arg Val Met Val Ala Arg Lys Lys Ala Glu Gly Ala

130 135 140

Asp Ala Asn Asp Arg Ser Lys Asp Ile Leu Glu Tyr Gln Trp Phe Glu

145 150 155 160

Phe Thr Leu Pro Glu Gly Asn Phe Ser Glu Thr Met Thr Ile Asp Leu

165 170 175

Met Asn Asn Ala Ile Leu Glu Asn Tyr Leu Gln Val Gly Arg Gln Asn

180 185 190

Gly Val Leu Glu Ser Asp Ile Gly Val Lys Phe Asp Ser Arg Asn Phe

195 200 205

Lys Leu Gly Trp Asp Pro Val Thr Lys Leu Val Met Pro Gly Val Tyr

210 215 220

Thr Tyr Glu Ala Phe His Pro Asp Val Val Leu Leu Pro Gly Cys Gly

225 230 235 240

Val Asp Phe Thr Glu Ser Arg Leu Ser Asn Leu Leu Gly Ile Arg Lys

245 250 255

Lys Gln Pro Phe Gln Glu Gly Phe Arg Ile Met Tyr Glu Asp Leu Val

260 265 270

Gly Gly Asn Ile Pro Ala Leu Leu Asn Val Lys Glu Tyr Leu Lys Asp

275 280 285

Lys Glu Glu Ala Gly Lys Ala Asp Ala Asn Thr Ile Lys Ala Gln Asn

290 295 300

Asp Ala Val Pro Arg Gly Asp Asn Tyr Ala Ser Ala Ala Glu Ala Lys

305 310 315 320

Ala Ala Gly Lys Glu Ile Glu Leu Lys Ala Ile Leu Lys Asp Asp Ser

325 330 335

Asp Arg Ser Tyr Asn Val Ile Glu Gly Thr Thr Asp Thr Leu Tyr Arg

340 345 350

Ser Trp Tyr Leu Ser Tyr Thr Tyr Gly Asp Pro Glu Lys Gly Val Gln

355 360 365

Ser Trp Thr Leu Leu Thr Thr Pro Asp Val Thr Cys Gly Ala Glu Gln

370 375 380

Val Tyr Trp Ser Leu Pro Asp Leu Met Gln Asp Pro Val Thr Phe Arg

385 390 395 400

Ser Thr Gln Gln Val Ser Asn Tyr Pro Val Val Gly Ala Glu Leu Met

405 410 415

Pro Phe Arg Ala Lys Ser Phe Tyr Asn Asp Leu Ala Val Tyr Ser Gln

420 425 430

Leu Ile Arg Ser Tyr Thr Ser Leu Thr His Val Phe Asn Arg Phe Pro

435 440 445

Asp Asn Gln Ile Leu Cys Arg Pro Pro Ala Pro Thr Ile Thr Thr Val

450 455 460

Ser Glu Asn Val Pro Ala Leu Thr Asp His Gly Thr Leu Pro Leu Arg

465 470 475 480

Ser Ser Ile Arg Gly Val Gln Arg Val Thr Val Thr Asp Ala Arg Arg

485 490 495

Arg Thr Cys Pro Tyr Val Tyr Lys Ala Leu Gly Ile Val Ala Pro Arg

500 505 510

Val Leu Ser Ser Arg Thr Phe

515

<210> 12

<211> 508

<212> ПРТ

<213> Аденовирус человека F серотипа 41

<400> 12

Met Arg Arg Ala Val Gly Val Pro Pro Val Met Ala Tyr Ala Glu Gly

1 5 10 15

Pro Pro Pro Ser Tyr Glu Ser Val Met Gly Ser Ala Asp Ser Pro Ala

20 25 30

Thr Leu Glu Ala Leu Tyr Val Pro Pro Arg Tyr Leu Gly Pro Thr Glu

35 40 45

Gly Arg Asn Ser Ile Arg Tyr Ser Glu Leu Ala Pro Leu Tyr Asp Thr

50 55 60

Thr Arg Val Tyr Leu Val Asp Asn Lys Ser Ala Asp Ile Ala Ser Leu

65 70 75 80

Asn Tyr Gln Asn Asp His Ser Asn Phe Gln Thr Thr Val Val Gln Asn

85 90 95

Asn Asp Phe Thr Pro Ala Glu Ala Gly Thr Gln Thr Ile Asn Phe Asp

100 105 110

Glu Arg Ser Arg Trp Gly Ala Asp Leu Lys Thr Ile Leu Arg Thr Asn

115 120 125

Met Pro Asn Ile Asn Glu Phe Met Ser Thr Asn Lys Phe Lys Ala Arg

130 135 140

Leu Met Val Glu Lys Lys Asn Lys Glu Thr Gly Leu Pro Arg Tyr Glu

145 150 155 160

Trp Phe Glu Phe Thr Leu Pro Glu Gly Asn Tyr Ser Glu Thr Met Thr

165 170 175

Ile Asp Leu Met Asn Asn Ala Ile Val Asp Asn Tyr Leu Glu Val Gly

180 185 190

Arg Gln Asn Gly Val Leu Glu Ser Asp Ile Gly Val Lys Phe Asp Thr

195 200 205

Arg Asn Phe Arg Leu Gly Trp Asp Pro Val Thr Lys Leu Val Met Pro

210 215 220

Gly Val Tyr Thr Asn Glu Ala Phe His Pro Asp Ile Val Leu Leu Pro

225 230 235 240

Gly Cys Gly Val Asp Phe Thr Gln Ser Arg Leu Ser Asn Leu Leu Gly

245 250 255

Ile Arg Lys Arg Leu Pro Phe Gln Glu Gly Phe Gln Ile Met Tyr Glu

260 265 270

Asp Leu Glu Gly Gly Asn Ile Pro Ala Leu Leu Asp Val Thr Lys Tyr

275 280 285

Glu Ala Ser Ile Gln Lys Ala Lys Glu Glu Gly Lys Glu Ile Gly Asp

290 295 300

Asp Thr Phe Ala Thr Arg Pro Gln Asp Leu Val Ile Glu Pro Val Ala

305 310 315 320

Lys Asp Ser Lys Asn Arg Ser Tyr Asn Leu Leu Pro Asn Asp Gln Asn

325 330 335

Asn Thr Ala Tyr Arg Ser Trp Phe Leu Ala Tyr Asn Tyr Gly Asp Pro

340 345 350

Asn Lys Gly Val Gln Ser Trp Thr Leu Leu Thr Thr Ala Asp Val Thr

355 360 365

Cys Gly Ser Gln Gln Val Tyr Trp Ser Leu Pro Asp Met Met Gln Asp

370 375 380

Pro Val Thr Phe Arg Pro Ser Thr Gln Val Ser Asn Tyr Pro Val Val

385 390 395 400

Gly Val Glu Leu Leu Pro Val His Ala Lys Ser Phe Tyr Asn Glu Gln

405 410 415

Ala Val Tyr Ser Gln Leu Ile Arg Gln Ser Thr Ala Leu Thr His Val

420 425 430

Phe Asn Arg Phe Pro Glu Asn Gln Ile Leu Val Arg Pro Pro Ala Pro

435 440 445

Thr Ile Thr Thr Val Ser Glu Asn Val Pro Ala Leu Thr Asp His Gly

450 455 460

Thr Leu Pro Leu Arg Ser Ser Ile Ser Gly Val Gln Arg Val Thr Ile

465 470 475 480

Thr Asp Ala Arg Arg Arg Thr Cys Pro Tyr Val His Lys Ala Leu Gly

485 490 495

Ile Val Ala Pro Lys Val Leu Ser Ser Arg Thr Phe

500 505

<210> 13

<211> 575

<212> ПРТ

<213> Аденовирус гориллы B7

<400> 13

Met Met Arg Arg Ala Val Leu Gly Gly Ala Val Val Tyr Pro Glu Gly

1 5 10 15

Pro Pro Pro Ser Tyr Glu Ser Val Met Gln Gln Gln Ala Ala Ala Val

20 25 30

Met Gln Pro Ser Leu Glu Ala Pro Phe Val Pro Pro Arg Tyr Leu Ala

35 40 45

Pro Thr Glu Gly Arg Asn Ser Ile Arg Tyr Ser Glu Leu Ala Pro Gln

50 55 60

Tyr Asp Thr Thr Arg Leu Tyr Leu Val Asp Asn Lys Ser Ala Asp Ile

65 70 75 80

Ala Ser Leu Asn Tyr Gln Asn Asp His Ser Asn Phe Leu Thr Thr Val

85 90 95

Val Gln Asn Asn Asp Phe Thr Pro Thr Glu Ala Ser Thr Gln Thr Ile

100 105 110

Asn Phe Asp Glu Arg Ser Arg Trp Gly Gly Gln Leu Lys Thr Ile Met

115 120 125

His Thr Asn Met Pro Asn Val Asn Glu Tyr Met Phe Ser Asn Lys Phe

130 135 140

Lys Ala Arg Val Met Val Ser Arg Glu Ala Ser Lys Ile Asp Ser Glu

145 150 155 160

Lys Asn Asp Arg Ser Lys Asp Thr Leu Lys Tyr Glu Trp Phe Glu Phe

165 170 175

Thr Leu Pro Glu Gly Asn Phe Ser Ala Thr Met Thr Ile Asp Leu Met

180 185 190

Asn Asn Ala Ile Ile Asp Asn Tyr Leu Ala Val Gly Arg Gln Asn Gly

195 200 205

Val Leu Gln Ser Asp Ile Gly Val Lys Phe Asp Thr Arg Asn Phe Arg

210 215 220

Leu Gly Trp Asp Pro Val Thr Lys Leu Val Met Pro Gly Val Tyr Thr

225 230 235 240

Tyr Glu Ala Phe His Pro Asp Ile Val Leu Leu Pro Asp Cys Gly Val

245 250 255

Asp Phe Thr Glu Ser Arg Leu Ser Asn Leu Leu Gly Ile Arg Lys Arg

260 265 270

His Pro Phe Gln Glu Gly Phe Lys Ile Met Tyr Glu Asp Leu Glu Gly

275 280 285

Gly Asn Ile Pro Ala Leu Leu Asp Val Ala Glu Tyr Glu Lys Ser Lys

290 295 300

Lys Glu Ile Ala Ser Ser Thr Thr Thr Thr Ala Val Thr Thr Val Ala

305 310 315 320

Arg Asn Val Ala Asp Thr Ser Val Glu Ala Val Ala Val Ala Val Val

325 330 335

Asp Thr Ile Lys Ala Glu Asn Asp Ser Ala Val Arg Gly Asp Asn Phe

340 345 350

Gln Ser Lys Asn Asp Met Lys Ala Ser Glu Glu Val Thr Val Val Pro

355 360 365

Val Ser Pro Pro Thr Val Thr Glu Thr Glu Thr Lys Glu Pro Thr Ile

370 375 380

Lys Pro Leu Glu Lys Asp Thr Lys Asp Arg Ser Tyr Asn Val Ile Ser

385 390 395 400

Gly Thr Asn Asp Thr Ala Tyr Arg Ser Trp Tyr Leu Ala Tyr Asn Tyr

405 410 415

Gly Asp Pro Glu Lys Gly Val Arg Ser Trp Thr Leu Leu Thr Thr Ser

420 425 430

Asp Val Thr Cys Gly Ala Glu Gln Val Tyr Trp Ser Leu Pro Asp Met

435 440 445

Met Gln Asp Pro Val Thr Phe Arg Ser Thr Arg Gln Val Ser Asn Tyr

450 455 460

Pro Val Val Gly Ala Glu Leu Met Pro Val Phe Ser Lys Ser Phe Tyr

465 470 475 480

Asn Glu Gln Ala Val Tyr Ser Gln Gln Leu Arg Gln Thr Thr Ser Leu

485 490 495

Thr His Ile Phe Asp Arg Phe Pro Glu Asn Gln Ile Leu Ile Arg Pro

500 505 510

Pro Ala Pro Thr Ile Thr Thr Val Ser Glu Asn Val Pro Ala Leu Thr

515 520 525

Asp His Gly Thr Leu Pro Leu Arg Ser Ser Ile Arg Gly Val Gln Arg

530 535 540

Val Thr Val Thr Asp Ala Arg Arg Arg Thr Cys Pro Tyr Val Tyr Lys

545 550 555 560

Ala Leu Gly Ile Val Ala Pro Arg Val Leu Ser Ser Arg Thr Phe

565 570 575

<210> 14

<211> 532

<212> ПРТ

<213> Аденовирус шимпанзе Y25

<400> 14

Met Met Arg Arg Ala Tyr Pro Glu Gly Pro Pro Pro Ser Tyr Glu Ser

1 5 10 15

Val Met Gln Gln Ala Met Ala Ala Ala Ala Ala Met Gln Pro Pro Leu

20 25 30

Glu Ala Pro Tyr Val Pro Pro Arg Tyr Leu Ala Pro Thr Glu Gly Arg

35 40 45

Asn Ser Ile Arg Tyr Ser Glu Leu Ala Pro Leu Tyr Asp Thr Thr Arg

50 55 60

Leu Tyr Leu Val Asp Asn Lys Ser Ala Asp Ile Ala Ser Leu Asn Tyr

65 70 75 80

Gln Asn Asp His Ser Asn Phe Leu Thr Thr Val Val Gln Asn Asn Asp

85 90 95

Phe Thr Pro Thr Glu Ala Ser Thr Gln Thr Ile Asn Phe Asp Glu Arg

100 105 110

Ser Arg Trp Gly Gly Gln Leu Lys Thr Ile Met His Thr Asn Met Pro

115 120 125

Asn Val Asn Glu Phe Met Tyr Ser Asn Lys Phe Lys Ala Arg Val Met

130 135 140

Val Ser Arg Lys Thr Pro Asn Gly Val Thr Val Thr Asp Gly Ser Gln

145 150 155 160

Asp Ile Leu Glu Tyr Glu Trp Val Glu Phe Glu Leu Pro Glu Gly Asn

165 170 175

Phe Ser Val Thr Met Thr Ile Asp Leu Met Asn Asn Ala Ile Ile Asp

180 185 190

Asn Tyr Leu Ala Val Gly Arg Gln Asn Gly Val Leu Glu Ser Asp Ile

195 200 205

Gly Val Lys Phe Asp Thr Arg Asn Phe Arg Leu Gly Trp Asp Pro Val

210 215 220

Thr Glu Leu Val Met Pro Gly Val Tyr Thr Asn Glu Ala Phe His Pro

225 230 235 240

Asp Ile Val Leu Leu Pro Gly Cys Gly Val Asp Phe Thr Glu Ser Arg

245 250 255

Leu Ser Asn Leu Leu Gly Ile Arg Lys Arg Gln Pro Phe Gln Glu Gly

260 265 270

Phe Gln Ile Met Tyr Glu Asp Leu Glu Gly Gly Asn Ile Pro Ala Leu

275 280 285

Leu Asp Val Asp Ala Tyr Glu Lys Ser Lys Glu Glu Ser Ala Ala Ala

290 295 300

Ala Thr Ala Ala Val Ala Thr Ala Ser Thr Glu Val Arg Gly Asp Asn

305 310 315 320

Phe Ala Ser Pro Ala Ala Val Ala Ala Ala Glu Ala Ala Glu Thr Glu

325 330 335

Ser Lys Ile Val Ile Gln Pro Val Glu Lys Asp Ser Lys Asp Arg Ser

340 345 350

Tyr Asn Val Leu Pro Asp Lys Ile Asn Thr Ala Tyr Arg Ser Trp Tyr

355 360 365

Leu Ala Tyr Asn Tyr Gly Asp Pro Glu Lys Gly Val Arg Ser Trp Thr

370 375 380

Leu Leu Thr Thr Ser Asp Val Thr Cys Gly Val Glu Gln Val Tyr Trp

385 390 395 400

Ser Leu Pro Asp Met Met Gln Asp Pro Val Thr Phe Arg Ser Thr Arg

405 410 415

Gln Val Ser Asn Tyr Pro Val Val Gly Ala Glu Leu Leu Pro Val Tyr

420 425 430

Ser Lys Ser Phe Phe Asn Glu Gln Ala Val Tyr Ser Gln Gln Leu Arg

435 440 445

Ala Phe Thr Ser Leu Thr His Val Phe Asn Arg Phe Pro Glu Asn Gln

450 455 460

Ile Leu Val Arg Pro Pro Ala Pro Thr Ile Thr Thr Val Ser Glu Asn

465 470 475 480

Val Pro Ala Leu Thr Asp His Gly Thr Leu Pro Leu Arg Ser Ser Ile

485 490 495

Arg Gly Val Gln Arg Val Thr Val Thr Asp Ala Arg Arg Arg Thr Cys

500 505 510

Pro Tyr Val Tyr Lys Ala Leu Gly Ile Val Ala Pro Arg Val Leu Ser

515 520 525

Ser Arg Thr Phe

530

<210> 15

<211> 508

<212> ПРТ

<213> Аденовирус обезьяны 18

<400> 15

Met Arg Arg Ala Val Gly Val Pro Pro Val Met Ala Tyr Ala Glu Gly

1 5 10 15

Pro Pro Pro Ser Tyr Glu Thr Val Met Gly Ala Ala Asp Ser Pro Ala

20 25 30

Thr Leu Glu Ala Leu Tyr Val Pro Pro Arg Tyr Leu Gly Pro Thr Glu

35 40 45

Gly Arg Asn Ser Ile Arg Tyr Ser Glu Leu Ala Pro Leu Tyr Asp Thr

50 55 60

Thr Arg Val Tyr Leu Val Asp Asn Lys Ser Ala Asp Ile Ala Ser Leu

65 70 75 80

Asn Tyr Gln Asn Asp His Ser Asn Phe Leu Thr Thr Val Val Gln Asn

85 90 95

Asn Asp Phe Thr Pro Val Glu Ala Gly Thr Gln Thr Ile Asn Phe Asp

100 105 110

Glu Arg Ser Arg Trp Gly Gly Asp Leu Lys Thr Ile Leu Arg Thr Asn

115 120 125

Met Pro Asn Ile Asn Glu Phe Met Ser Thr Asn Lys Phe Arg Ala Arg

130 135 140

Leu Met Val Glu Lys Val Asn Lys Glu Thr Asn Ala Pro Arg Tyr Glu

145 150 155 160

Trp Phe Glu Phe Thr Leu Pro Glu Gly Asn Tyr Ser Glu Thr Met Thr

165 170 175

Ile Asp Leu Met Asn Asn Ala Ile Val Asp Asn Tyr Leu Glu Val Gly

180 185 190

Arg Gln Asn Gly Val Leu Glu Ser Asp Ile Gly Val Lys Phe Asp Thr

195 200 205

Arg Asn Phe Arg Leu Gly Trp Asp Pro Val Thr Lys Leu Val Met Pro

210 215 220

Gly Val Tyr Thr Asn Glu Ala Phe His Pro Asp Ile Val Leu Leu Pro

225 230 235 240

Gly Cys Gly Val Asp Phe Thr Gln Ser Arg Leu Ser Asn Leu Leu Gly

245 250 255

Ile Arg Lys Arg Met Pro Phe Gln Ala Gly Phe Gln Ile Met Tyr Glu

260 265 270

Asp Leu Glu Gly Gly Asn Ile Pro Ala Leu Leu Asp Val Ala Lys Tyr

275 280 285

Glu Ala Ser Ile Gln Lys Ala Arg Glu Gln Gly Gln Glu Ile Arg Gly

290 295 300

Asp Asn Phe Thr Val Ile Pro Arg Asp Val Glu Ile Val Pro Val Glu

305 310 315 320

Lys Asp Ser Lys Asp Arg Ser Tyr Asn Leu Leu Pro Gly Asp Gln Thr

325 330 335

Asn Thr Ala Tyr Arg Ser Trp Phe Leu Ala Tyr Asn Tyr Gly Asp Pro

340 345 350

Glu Lys Gly Val Arg Ser Trp Thr Leu Leu Thr Thr Thr Asp Val Thr

355 360 365

Cys Gly Ser Gln Gln Val Tyr Trp Ser Leu Pro Asp Met Met Gln Asp

370 375 380

Pro Val Thr Phe Arg Pro Ser Ser Gln Val Ser Asn Tyr Pro Val Val

385 390 395 400

Gly Val Glu Leu Leu Pro Val His Ala Lys Ser Phe Tyr Asn Glu Gln

405 410 415

Ala Val Tyr Ser Gln Leu Ile Arg Gln Ser Thr Ala Leu Thr His Val

420 425 430

Phe Asn Arg Phe Pro Glu Asn Gln Ile Leu Val Arg Pro Pro Ala Pro

435 440 445

Thr Ile Thr Thr Val Ser Glu Asn Val Pro Ala Leu Thr Asp His Gly

450 455 460

Thr Leu Pro Leu Arg Ser Ser Ile Ser Gly Val Gln Arg Val Thr Ile

465 470 475 480

Thr Asp Ala Arg Arg Arg Thr Cys Pro Tyr Val His Lys Ala Leu Gly

485 490 495

Ile Val Ala Pro Lys Val Leu Ser Ser Arg Thr Phe

500 505

<210> 16

<211> 512

<212> ПРТ

<213> Аденовирус обезьяны 20

<400> 16

Met Arg Arg Ala Val Ala Ile Pro Ser Ala Ala Val Ala Leu Gly Pro

1 5 10 15

Pro Pro Ser Tyr Glu Ser Val Met Ala Ser Ala Asn Leu Gln Ala Pro

20 25 30

Leu Glu Asn Pro Tyr Val Pro Pro Arg Tyr Leu Glu Pro Thr Gly Gly

35 40 45

Arg Asn Ser Ile Arg Tyr Ser Glu Leu Thr Pro Leu Tyr Asp Thr Thr

50 55 60

Arg Leu Tyr Leu Val Asp Asn Lys Ser Ala Asp Ile Ala Thr Leu Asn

65 70 75 80

Tyr Gln Asn Asp His Ser Asn Phe Leu Thr Ser Val Val Gln Asn Ser

85 90 95

Asp Tyr Thr Pro Ala Glu Ala Ser Thr Gln Thr Ile Asn Leu Asp Asp

100 105 110

Arg Ser Arg Trp Gly Gly Asp Leu Lys Thr Ile Leu His Thr Asn Met

115 120 125

Pro Asn Val Asn Glu Phe Met Phe Thr Asn Ser Phe Arg Ala Lys Leu

130 135 140

Met Val Ala His Glu Thr Asn Lys Asp Pro Val Tyr Lys Trp Val Glu

145 150 155 160

Leu Thr Leu Pro Glu Gly Asn Phe Ser Glu Thr Met Thr Ile Asp Leu

165 170 175

Met Asn Asn Ala Ile Val Asp His Tyr Leu Ala Val Gly Arg Gln Asn

180 185 190

Gly Val Lys Glu Ser Glu Ile Gly Val Lys Phe Asp Thr Arg Asn Phe

195 200 205

Arg Leu Gly Trp Asp Pro Gln Thr Glu Leu Val Met Pro Gly Val Tyr

210 215 220

Thr Asn Glu Ala Phe His Pro Asp Val Val Leu Leu Pro Gly Cys Gly

225 230 235 240

Val Asp Phe Thr Tyr Ser Arg Leu Ser Asn Leu Leu Gly Ile Arg Lys

245 250 255

Arg Met Pro Phe Gln Glu Gly Phe Gln Ile Met Tyr Glu Asp Leu Val

260 265 270

Gly Gly Asn Ile Pro Ala Leu Leu Asp Val Pro Ala Tyr Glu Ala Ser

275 280 285

Ile Thr Thr Val Ala Ala Lys Glu Val Arg Gly Asp Asn Phe Glu Ala

290 295 300

Ala Ala Ala Ala Ala Ala Thr Gly Ala Gln Pro Gln Ala Ala Pro Val

305 310 315 320

Val Arg Pro Val Thr Gln Asp Ser Lys Gly Arg Ser Tyr Asn Ile Ile

325 330 335

Thr Gly Thr Asn Asn Thr Ala Tyr Arg Ser Trp Tyr Leu Ala Tyr Asn

340 345 350

Tyr Gly Asp Pro Glu Lys Gly Val Arg Ser Trp Thr Leu Leu Thr Thr

355 360 365

Pro Asp Val Thr Cys Gly Ser Glu Gln Val Tyr Trp Ser Met Pro Asp

370 375 380

Met Tyr Val Asp Pro Val Thr Phe Arg Ser Ser Gln Gln Val Ser Ser

385 390 395 400

Tyr Pro Val Val Gly Ala Glu Leu Leu Pro Ile His Ser Lys Ser Phe

405 410 415

Tyr Asn Glu Gln Ala Val Tyr Ser Gln Leu Ile Arg Gln Gln Thr Ala

420 425 430

Leu Thr His Val Phe Asn Arg Phe Pro Glu Asn Gln Ile Leu Val Arg

435 440 445

Pro Pro Ala Pro Thr Ile Thr Thr Val Ser Glu Asn Val Pro Ala Leu

450 455 460

Thr Asp His Gly Thr Leu Pro Leu Gln Asn Ser Ile Arg Gly Val Gln

465 470 475 480

Arg Val Thr Ile Thr Asp Ala Arg Arg Arg Thr Cys Pro Tyr Val Tyr

485 490 495

Lys Ala Leu Gly Ile Val Ala Pro Arg Val Leu Ser Ser Arg Thr Phe

500 505 510

<210> 17

<211> 511

<212> ПРТ

<213> Аденовирус обезьяны 49

<400> 17

Met Arg Arg Ala Val Pro Ala Ala Ala Ile Pro Ala Thr Val Ala Tyr

1 5 10 15

Ala Asp Pro Pro Pro Ser Tyr Glu Ser Val Met Ala Gly Val Pro Ala

20 25 30

Thr Leu Glu Ala Pro Tyr Val Pro Pro Arg Tyr Leu Gly Pro Thr Glu

35 40 45

Gly Arg Asn Ser Ile Arg Tyr Ser Glu Leu Ala Pro Leu Tyr Asp Thr

50 55 60

Thr Arg Val Tyr Leu Val Asp Asn Lys Ser Ala Asp Ile Ala Ser Leu

65 70 75 80

Asn Tyr Gln Asn Asp His Ser Asn Phe Leu Thr Thr Val Val Gln Asn

85 90 95

Asn Asp Phe Thr Pro Val Glu Ala Gly Thr Gln Thr Ile Asn Phe Asp

100 105 110

Glu Arg Ser Arg Trp Gly Gly Gln Leu Lys Thr Ile Leu His Thr Asn

115 120 125

Met Pro Asn Val Asn Glu Phe Met Phe Thr Asn Ser Phe Arg Ala Lys

130 135 140

Val Met Val Ser Arg Lys Gln Asn Glu Glu Gly Gln Thr Glu Leu Glu

145 150 155 160

Tyr Glu Trp Val Glu Phe Val Leu Pro Glu Gly Asn Tyr Ser Glu Thr

165 170 175

Met Thr Leu Asp Leu Met Asn Asn Ala Ile Val Asp His Tyr Leu Leu

180 185 190

Val Gly Arg Gln Asn Gly Val Leu Glu Ser Asp Ile Gly Val Lys Phe

195 200 205

Asp Thr Arg Asn Phe Arg Leu Gly Trp Asp Pro Val Thr Lys Leu Val

210 215 220

Met Pro Gly Val Tyr Thr Asn Glu Ala Phe His Pro Asp Val Val Leu

225 230 235 240

Leu Pro Gly Cys Gly Val Asp Phe Thr Gln Ser Arg Leu Ser Asn Leu

245 250 255

Leu Gly Ile Arg Lys Arg Gln Pro Phe Gln Glu Gly Phe Arg Ile Met

260 265 270

Tyr Glu Asp Leu Glu Gly Gly Asn Ile Pro Ala Leu Leu Asn Val Lys

275 280 285

Ala Tyr Glu Asp Ser Ile Ala Ala Ala Met Arg Lys His Asn Leu Pro

290 295 300

Leu Arg Gly Asp Val Phe Ala Val Gln Pro Gln Glu Ile Val Ile Gln

305 310 315 320

Pro Val Glu Lys Asp Gly Lys Glu Arg Ser Tyr Asn Leu Leu Pro Asp

325 330 335

Asp Lys Asn Asn Thr Ala Tyr Arg Ser Trp Tyr Leu Ala Tyr Asn Tyr

340 345 350

Gly Asp Pro Leu Lys Gly Val Arg Ser Trp Thr Leu Leu Thr Thr Pro

355 360 365

Asp Val Thr Cys Gly Ser Glu Gln Val Tyr Trp Ser Leu Pro Asp Leu

370 375 380

Met Gln Asp Pro Val Thr Phe Arg Pro Ser Ser Gln Val Ser Asn Tyr

385 390 395 400

Pro Val Val Gly Ala Glu Leu Leu Pro Leu Gln Ala Lys Ser Phe Tyr

405 410 415

Asn Glu Gln Ala Val Tyr Ser Gln Leu Ile Arg Gln Ser Thr Ala Leu

420 425 430

Thr His Val Phe Asn Arg Phe Pro Glu Asn Gln Ile Leu Val Arg Pro

435 440 445

Pro Ala Ala Thr Ile Thr Thr Val Ser Glu Asn Val Pro Ala Leu Thr

450 455 460

Asp His Gly Thr Leu Pro Leu Arg Ser Ser Ile Ser Gly Val Gln Arg

465 470 475 480

Val Thr Ile Thr Asp Ala Arg Arg Arg Thr Cys Pro Tyr Val Tyr Lys

485 490 495

Ala Leu Gly Ile Val Ala Pro Arg Val Leu Ser Ser Arg Thr Phe

500 505 510

<210> 18

<211> 505

<212> ПРТ

<213> Аденовирус макака-резуса 51

<400> 18

Met Arg Arg Ala Val Arg Val Thr Pro Ala Ala Tyr Glu Gly Pro Pro

1 5 10 15

Pro Ser Tyr Glu Ser Val Met Gly Ser Ala Asn Val Pro Ala Thr Leu

20 25 30

Glu Ala Pro Tyr Val Pro Pro Arg Tyr Leu Gly Pro Thr Glu Gly Arg

35 40 45

Asn Ser Ile Arg Tyr Ser Glu Leu Ala Pro Leu Tyr Asp Thr Thr Lys

50 55 60

Val Tyr Leu Val Asp Asn Lys Ser Ala Asp Ile Ala Ser Leu Asn Tyr

65 70 75 80

Gln Asn Asp His Ser Asn Phe Leu Thr Thr Val Val Gln Asn Asn Asp

85 90 95

Phe Thr Pro Thr Glu Ala Gly Thr Gln Thr Ile Asn Phe Asp Glu Arg

100 105 110

Ser Arg Trp Gly Gly Gln Leu Lys Thr Ile Leu His Thr Asn Met Pro

115 120 125

Asn Ile Asn Glu Phe Met Ser Thr Asn Lys Phe Arg Ala Lys Leu Met

130 135 140

Val Glu Lys Ser Asn Ala Glu Thr Arg Gln Pro Arg Tyr Glu Trp Phe

145 150 155 160

Glu Phe Thr Ile Pro Glu Gly Asn Tyr Ser Glu Thr Met Thr Ile Asp

165 170 175

Leu Met Asn Asn Ala Ile Val Asp Asn Tyr Leu Gln Val Gly Arg Gln

180 185 190

Asn Gly Val Leu Glu Ser Asp Ile Gly Val Lys Phe Asp Thr Arg Asn

195 200 205

Phe Arg Leu Gly Trp Asp Pro Val Thr Lys Leu Val Met Pro Gly Val

210 215 220

Tyr Thr Asn Glu Ala Phe His Pro Asp Ile Val Leu Leu Pro Gly Cys

225 230 235 240

Gly Val Asp Phe Thr Gln Ser Arg Leu Ser Asn Leu Leu Gly Ile Arg

245 250 255

Lys Arg Arg Pro Phe Gln Glu Gly Phe Gln Ile Met Tyr Glu Asp Leu

260 265 270

Glu Gly Gly Asn Ile Pro Ala Leu Leu Asp Val Ser Lys Tyr Glu Ala

275 280 285

Ser Ile Gln Arg Ala Lys Ala Glu Gly Arg Glu Ile Arg Gly Asp Thr

290 295 300

Phe Ala Val Ala Pro Gln Asp Leu Glu Ile Val Pro Leu Thr Lys Asp

305 310 315 320

Ser Lys Asp Arg Ser Tyr Asn Ile Ile Asn Asn Thr Thr Asp Thr Leu

325 330 335

Tyr Arg Ser Trp Phe Leu Ala Tyr Asn Tyr Gly Asp Pro Glu Lys Gly

340 345 350

Val Arg Ser Trp Thr Ile Leu Thr Thr Thr Asp Val Thr Cys Gly Ser

355 360 365

Gln Gln Val Tyr Trp Ser Leu Pro Asp Met Met Gln Asp Pro Val Thr

370 375 380

Phe Arg Pro Ser Thr Gln Val Ser Asn Phe Pro Val Val Gly Thr Glu

385 390 395 400

Leu Leu Pro Val His Ala Lys Ser Phe Tyr Asn Glu Gln Ala Val Tyr

405 410 415

Ser Gln Leu Ile Arg Gln Ser Thr Ala Leu Thr His Val Phe Asn Arg

420 425 430

Phe Pro Glu Asn Gln Ile Leu Val Arg Pro Pro Ala Pro Thr Ile Thr

435 440 445

Thr Val Ser Glu Asn Val Pro Ala Leu Thr Asp His Gly Thr Leu Pro

450 455 460

Leu Arg Ser Ser Ile Ser Gly Val Gln Arg Val Thr Ile Thr Asp Ala

465 470 475 480

Arg Arg Arg Thr Cys Pro Tyr Val Tyr Lys Ala Leu Gly Val Val Ala

485 490 495

Pro Lys Val Leu Ser Ser Arg Thr Phe

500 505

<210> 19

<211> 503

<212> ПРТ

<213> Аденовирус макака-резуса 52

<400> 19

Met Arg Arg Ala Val Arg Val Thr Pro Ala Ala Tyr Glu Gly Pro Pro

1 5 10 15

Pro Ser Tyr Glu Ser Val Met Gly Ser Ala Asn Val Pro Ala Thr Leu

20 25 30

Glu Ala Pro Tyr Val Pro Pro Arg Tyr Leu Gly Pro Thr Glu Gly Arg

35 40 45

Asn Ser Ile Arg Tyr Ser Glu Leu Ala Pro Leu Tyr Asp Thr Thr Lys

50 55 60

Val Tyr Leu Val Asp Asn Lys Ser Ala Asp Ile Ala Ser Leu Asn Tyr

65 70 75 80

Gln Asn Asp His Ser Asn Phe Leu Thr Thr Val Val Gln Asn Asn Asp

85 90 95

Phe Thr Pro Thr Glu Ala Gly Thr Gln Thr Ile Asn Phe Asp Glu Arg

100 105 110

Ser Arg Trp Gly Gly Gln Leu Lys Thr Ile Leu His Thr Asn Met Pro

115 120 125

Asn Ile Asn Glu Phe Met Ser Thr Asn Lys Phe Arg Ala Arg Leu Met

130 135 140

Val Lys Lys Val Glu Asn Gln Pro Pro Glu Tyr Glu Trp Phe Glu Phe

145 150 155 160

Thr Ile Pro Glu Gly Asn Tyr Ser Glu Thr Met Thr Ile Asp Leu Met

165 170 175

Asn Asn Ala Ile Val Asp Asn Tyr Leu Gln Val Gly Arg Gln Asn Gly

180 185 190

Val Leu Glu Ser Asp Ile Gly Val Lys Phe Asp Thr Arg Asn Phe Arg

195 200 205

Leu Gly Trp Asp Pro Val Thr Lys Leu Val Met Pro Gly Val Tyr Thr

210 215 220

Asn Glu Ala Phe His Pro Asp Ile Val Leu Leu Pro Gly Cys Gly Val

225 230 235 240

Asp Phe Thr Gln Ser Arg Leu Ser Asn Leu Leu Gly Ile Arg Lys Arg

245 250 255

Arg Pro Phe Gln Glu Gly Phe Gln Ile Met Tyr Glu Asp Leu Glu Gly

260 265 270

Gly Asn Ile Pro Ala Leu Leu Asp Val Thr Lys Tyr Glu Gln Ser Val

275 280 285

Gln Arg Ala Lys Ala Glu Gly Arg Glu Ile Arg Gly Asp Thr Phe Ala

290 295 300

Val Ser Pro Gln Asp Leu Val Ile Glu Pro Leu Glu His Asp Ser Lys

305 310 315 320

Asn Arg Ser Tyr Asn Leu Leu Pro Asn Lys Thr Asp Thr Ala Tyr Arg

325 330 335

Ser Trp Phe Leu Ala Tyr Asn Tyr Gly Asp Pro Glu Lys Gly Val Arg

340 345 350

Ser Trp Thr Ile Leu Thr Thr Thr Asp Val Thr Cys Gly Ser Gln Gln

355 360 365

Val Tyr Trp Ser Leu Pro Asp Met Met Gln Asp Pro Val Thr Phe Arg

370 375 380

Pro Ser Thr Gln Val Ser Asn Phe Pro Val Val Gly Thr Glu Leu Leu

385 390 395 400

Pro Val His Ala Lys Ser Phe Tyr Asn Glu Gln Ala Val Tyr Ser Gln

405 410 415

Leu Ile Arg Gln Ser Thr Ala Leu Thr His Val Phe Asn Arg Phe Pro

420 425 430

Glu Asn Gln Ile Leu Val Arg Pro Pro Ala Pro Thr Ile Thr Thr Val

435 440 445

Ser Glu Asn Val Pro Ala Leu Thr Asp His Gly Thr Leu Pro Leu Arg

450 455 460

Ser Ser Ile Ser Gly Val Gln Arg Val Thr Ile Thr Asp Ala Arg Arg

465 470 475 480

Arg Thr Cys Pro Tyr Val Tyr Lys Ala Leu Gly Val Val Ala Pro Lys

485 490 495

Val Leu Ser Ser Arg Thr Phe

500

<210> 20

<211> 504

<212> ПРТ

<213> Аденовирус макака-резуса 53

<400> 20

Met Arg Arg Ala Val Arg Val Thr Pro Ala Val Tyr Ala Glu Gly Pro

1 5 10 15

Pro Pro Ser Tyr Glu Ser Val Met Gly Ser Ala Asn Val Pro Ala Thr

20 25 30

Leu Glu Ala Pro Tyr Val Pro Pro Arg Tyr Leu Gly Pro Thr Glu Gly

35 40 45

Arg Asn Ser Ile Arg Tyr Ser Glu Leu Ala Pro Leu Tyr Asp Thr Thr

50 55 60

Lys Val Tyr Leu Val Asp Asn Lys Ser Ala Asp Ile Ala Ser Leu Asn

65 70 75 80

Tyr Gln Asn Asp His Ser Asn Phe Leu Thr Thr Val Val Gln Asn Asn

85 90 95

Asp Phe Thr Pro Thr Glu Ala Gly Thr Gln Thr Ile Asn Phe Asp Glu

100 105 110

Arg Ser Arg Trp Gly Gly Gln Leu Lys Thr Ile Leu His Thr Asn Met

115 120 125

Pro Asn Ile Asn Glu Phe Met Ser Thr Asn Lys Phe Arg Ala Arg Leu

130 135 140

Met Val Glu Lys Thr Ser Gly Gln Pro Pro Lys Tyr Glu Trp Phe Glu

145 150 155 160

Phe Thr Ile Pro Glu Gly Asn Tyr Ser Glu Thr Met Thr Ile Asp Leu

165 170 175

Met Asn Asn Ala Ile Val Asp Asn Tyr Leu Gln Val Gly Arg Gln Asn

180 185 190

Gly Val Leu Glu Ser Asp Ile Gly Val Lys Phe Asp Thr Arg Asn Phe

195 200 205

Arg Leu Gly Trp Asp Pro Val Thr Lys Leu Val Met Pro Gly Val Tyr

210 215 220

Thr Asn Glu Ala Phe His Pro Asp Ile Val Leu Leu Pro Gly Cys Gly

225 230 235 240

Val Asp Phe Thr Gln Ser Arg Leu Ser Asn Leu Leu Gly Ile Arg Lys

245 250 255

Arg Arg Pro Phe Gln Glu Gly Phe Gln Ile Met Tyr Glu Asp Leu Glu

260 265 270

Gly Gly Asn Ile Pro Gly Leu Leu Asp Val Pro Ala Tyr Glu Gln Ser

275 280 285

Leu Gln Gln Ala Gln Glu Glu Gly Arg Val Thr Arg Gly Asp Thr Phe

290 295 300

Ala Thr Ala Pro Asn Glu Val Val Ile Lys Pro Leu Leu Lys Asp Ser

305 310 315 320

Lys Asp Arg Ser Tyr Asn Ile Ile Thr Asp Thr Thr Asp Thr Leu Tyr

325 330 335

Arg Ser Trp Phe Leu Ala Tyr Asn Tyr Gly Asp Pro Glu Asn Gly Val

340 345 350

Arg Ser Trp Thr Ile Leu Thr Thr Thr Asp Val Thr Cys Gly Ser Gln

355 360 365

Gln Val Tyr Trp Ser Leu Pro Asp Met Met Gln Asp Pro Val Thr Phe

370 375 380

Arg Pro Ser Thr Gln Val Ser Asn Phe Pro Val Val Gly Thr Glu Leu

385 390 395 400

Leu Pro Val His Ala Lys Ser Phe Tyr Asn Glu Gln Ala Val Tyr Ser

405 410 415

Gln Leu Ile Arg Gln Ser Thr Ala Leu Thr His Val Phe Asn Arg Phe

420 425 430

Pro Glu Asn Gln Ile Leu Val Arg Pro Pro Ala Pro Thr Ile Thr Thr

435 440 445

Val Ser Glu Asn Val Pro Ala Leu Thr Asp His Gly Thr Leu Pro Leu

450 455 460

Arg Ser Ser Ile Ser Gly Val Gln Arg Val Thr Ile Thr Asp Ala Arg

465 470 475 480

Arg Arg Thr Cys Pro Tyr Val Tyr Lys Ala Leu Gly Val Val Ala Pro

485 490 495

Lys Val Leu Ser Ser Arg Thr Phe

500

<210> 21

<211> 144

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Консенсусная последовательность аминокислотного участка A

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (1)..(47)

<223> В этом положении нет аминокислоты или какой-либо аминокислоты

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (50)..(50)

<223> E или G

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (59)..(59)

<223> E или S

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (60)..(60)

<223> L или V

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (61)..(61)

<223> A или S

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (63)..(63)

<223> L или Q

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (64)..(64)

<223> Y или E

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (68)..(68)

<223> R или K

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (69)..(69)

<223> V или L

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (92)..(92)

<223> L или Q

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (96)..(96)

<223> V или I

<220>и

<221> MISC_FEATURE

<222> (101)..(101)

<223> F или Y

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (102)..(102)

<223> T или S

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (104)..(104)

<223> A, или T, или I, или G

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (107)..(107)

<223> S или G

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (113)..(113)

<223> F или L

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (115)..(115)

<223> E или D

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (121)..(121)

<223> A или G

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (122)..(122)

<223> D или Q

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (127)..(127)

<223> L или M

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (128)..(128)

<223> H или R

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (130)..(130)

<223> нет аминокислоты или, если присутствует, N

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (131)..(131)

<223> нет аминокислоты или, если присутствует, M

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (132)..(132)

<223> нет аминокислоты или, если присутствует, P

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (133)..(133)

<223> нет аминокислоты или, если присутствует, N

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (134)..(134)

<223> нет аминокислоты или, если присутствует, V, или I

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (135)..(135)

<223> нет аминокислоты или, если присутствует, N

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (136)..(136)

<223> нет аминокислоты или, если присутствует, E, или D

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (137)..(137)

<223> нет аминокислоты или, если присутствует, Y, или F

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (138)..(138)

<223> нет аминокислоты или, если присутствует, M

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (139)..(139)

<223> нет аминокислоты или, если присутствует, F, или S, или Y

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (140)..(140)

<223> нет аминокислоты или, если присутствует, T, или S

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (141)..(141)

<223> нет аминокислоты или, если присутствует, S, или N

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (142)..(142)

<223> нет аминокислоты или, если присутствует, K

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (143)..(143)

<223> нет аминокислоты или, если присутствует, F

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (144)..(144)

<223> нет аминокислоты или, если присутствует, K

<400> 21

Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa

1 5 10 15

Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa

20 25 30

Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Pro

35 40 45

Thr Xaa Gly Arg Asn Ser Ile Arg Tyr Ser Xaa Xaa Xaa Pro Xaa Xaa

50 55 60

Asp Thr Thr Xaa Xaa Tyr Leu Val Asp Asn Lys Ser Ala Asp Ile Ala

65 70 75 80

Ser Leu Asn Tyr Gln Asn Asp His Ser Asn Phe Xaa Thr Thr Val Xaa

85 90 95

Gln Asn Asn Asp Xaa Xaa Pro Xaa Glu Ala Xaa Thr Gln Thr Ile Asn

100 105 110

Xaa Asp Xaa Arg Ser Arg Trp Gly Xaa Xaa Leu Lys Thr Ile Xaa Xaa

115 120 125

Thr Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa

130 135 140

<210> 22

<211> 46

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Консенсусная последовательность аминокислотного участка B

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (1)..(1)

<223> нет аминокислоты или, если присутствует, L, или S

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (2)..(2)

<223> нет аминокислоты или, если присутствует, T, или P, или C

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (3)..(3)

<223> нет аминокислоты или, если присутствует, T, или P

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (4)..(4)

<223> нет аминокислоты или, если присутствует, P, или S, или A, или R

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (5)..(5)

<223> нет аминокислоты или, если присутствует, N, или D

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (6)..(6)

<223> нет аминокислоты или, если присутствует, G, или V

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (7)..(7)

<223> нет аминокислоты или, если присутствует, H, или T

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (8)..(8)

<223> нет аминокислоты или, если присутствует, C

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (9)..(9)

<223> нет аминокислоты или, если присутствует, G

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (10)..(10)

<223> нет аминокислоты или, если присутствует, A, или V, или S

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (11)..(11)

<223> нет аминокислоты или, если присутствует, E, или Q

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (20)..(20)

<223> L или M

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (22)..(22)

<223> Q или K

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (31)..(31)

<223> Q, или R, или S

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (33)..(33)

<223> V или I

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (34)..(34)

<223> S или N

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (36)..(36)

<223> Y или F

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (41)..(41)

<223> A или V

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (44)..(44)

<223> нет аминокислоты или, если присутствует, M, или L

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (45)..(45)

<223> нет аминокислоты или, если присутствует, P

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (46)..(46)

<223> нет аминокислоты или, если присутствует, V, или F

<400> 22

Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Gln Val Tyr Trp Ser

1 5 10 15

Leu Pro Asp Xaa Met Xaa Asp Pro Val Thr Phe Arg Ser Thr Xaa Gln

20 25 30

Xaa Xaa Asn Xaa Pro Val Val Gly Xaa Glu Leu Xaa Xaa Xaa

35 40 45

<210> 23

<211> 53

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Консенсусная последовательность аминокислотного участка C

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (1)..(1)

<223> нет аминокислоты или, если присутствует, N

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (2)..(2)

<223> нет аминокислоты или, если присутствует, V

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (3)..(3)

<223> нет аминокислоты или, если присутствует, P

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (18)..(18)

<223> R, или S, или G

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (25)..(25)

<223> V или I

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (44)..(44)

<223> A или S

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (46)..(46)

<223> R или K

<400> 23

Xaa Xaa Xaa Ala Leu Thr Asp His Gly Thr Leu Pro Leu Arg Ser Ser

1 5 10 15

Ile Xaa Gly Val Gln Arg Val Thr Xaa Thr Asp Ala Arg Arg Arg Thr

20 25 30

Cys Pro Tyr Val Tyr Lys Ala Leu Gly Ile Val Xaa Pro Xaa Val Leu

35 40 45

Ser Ser Arg Thr Phe

50

<210> 24

<211> 4

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Связывающий сегмент

<400> 24

Gly Gly Gly Ser

1

<210> 25

<211> 6

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Связывающий сегмент

<400> 25

Gly Gly Ser Gly Gly Ser

1 5

<210> 26

<211> 778

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Конструкция DNAsegVAJB-CHIK

<400> 26

ggatccatga ggagacgagc cgtgctaggc ggagcggtgg tgtatccgga gggtcctcct 60

ccttcttacg agagcgtgat gcagcaacag gcggcgatga tacagccccc actggaggct 120

cccttcgtac ccccacggta cctggcgcct acggaaggga gaaacagcat tcgttactcg 180

gagctgtcgc ccctgtacga taccaccaag ttgtatctgg tggacaacaa gtcggcggac 240

atcgcctccc tgaactatca gaacgaccac agcaacttcc tgaccacggt ggtgcagaac 300

aatgacttta cccccacgga ggctagcacc cagaccatca actttgacga gcggtcgcga 360

tggggcggtc agctgaagac catcatgcac accaacatgc ccggaggtga aaacctgtat 420

tttcagagca ccaaagataa ctttaacgtg tataaagcga cccgcccgta tctggcgcat 480

ggaggtgcag agcaggtcta ctggtcgctc cctgacatga tgcaagaccc agtcaccttc 540

cgctccacaa gacaagtcaa caactaccca gtggtgggtg cagagcttat gcccggtgga 600

agcggaggta gcgttcctgc tctcacagat cacgggaccc tgccgttacg cagcagtatc 660

cggggagtcc agcgcgtgac cgttactgac gccagacgcc gcacctgtcc ctacgtttac 720

aaggccctgg gcatagtcgc gccgcgcgtt ctttcaagcc gcactttctg ataagctt 778

<210> 27

<211> 3699

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Конструкция pACEBac_VAJB-CHIK

<400> 27

accggttgac ttgggtcaac tgtcagacca agtttactca tatatacttt agattgattt 60

aaaacttcat ttttaattta aaaggatcta ggtgaagatc ctttttgata atctcatgac 120

caaaatccct taacgtgagt tttcgttcca ctgagcgtca gaccccgtag aaaagatcaa 180

aggatcttct tgagatcctt tttttctgcg cgtaatctgc tgcttgcaaa caaaaaaacc 240

accgctacca gcggtggttt gtttgccgga tcaagagcta ccaactcttt ttccgaaggt 300

aactggcttc agcagagcgc agataccaaa tactgttctt ctagtgtagc cgtagttagg 360

ccaccacttc aagaactctg tagcaccgcc tacatacctc gctctgctaa tcctgttacc 420

agtggctgct gccagtggcg ataagtcgtg tcttaccggg ttggactcaa gacgatagtt 480

accggataag gcgcagcggt cgggctgaac ggggggttcg tgcacacagc ccagcttgga 540

gcgaacgacc tacaccgaac tgagatacct acagcgtgag ctatgagaaa gcgccacgct 600

tcccgaaggg agaaaggcgg acaggtatcc ggtaagcggc agggtcggaa caggagagcg 660

cacgagggag cttccagggg gaaacgcctg gtatctttat agtcctgtcg ggtttcgcca 720

cctctgactt gagcgtcgat ttttgtgatg ctcgtcaggg gggcggagcc tatggaaaaa 780

cgccagcaac gcggcctttt tacggttcct ggccttttgc tggccttttg ctcacatgtt 840

ctttcctgcg ttatcccctg attgacttgg gtcgctcttc ctgtggatgc gcagatgccc 900

tgcgtaagcg ggtgtgggcg gacaataaag tcttaaactg aacaaaatag atctaaacta 960

tgacaataaa gtcttaaact agacagaata gttgtaaact gaaatcagtc cagttatgct 1020

gtgaaaaagc atactggact tttgttatgg ctaaagcaaa ctcttcattt tctgaagtgc 1080

aaattgcccg tcgtattaaa gaggggcgtg gccaagggca tgtaaagact atattcgcgg 1140

cgttgtgaca atttaccgaa caactccgcg gccgggaagc cgatctcggc ttgaacgaat 1200

tgttaggtgg cggtacttgg gtcgatatca aagtgcatca cttcttcccg tatgcccaac 1260

tttgtataga gagccactgc gggatcgtca ccgtaatctg cttgcacgta gatcacataa 1320

gcaccaagcg cgttggcctc atgcttgagg agattgatga gcgcggtggc aatgccctgc 1380

ctccggtgct cgccggagac tgcgagatca tagatataga tctcactacg cggctgctca 1440

aacttgggca gaacgtaagc cgcgagagcg ccaacaaccg cttcttggtc gaaggcagca 1500

agcgcgatga atgtcttact acggagcaag ttcccgaggt aatcggagtc cggctgatgt 1560

tgggagtagg tggctacgtc tccgaactca cgaccgaaaa gatcaagagc agcccgcatg 1620

gatttgactt ggtcagggcc gagcctacat gtgcgaatga tgcccatact tgagccacct 1680

aactttgttt tagggcgact gccctgctgc gtaacatcgt tgctgctgcg taacatcgtt 1740

gctgctccat aacatcaaac atcgacccac ggcgtaacgc gcttgctgct tggatgcccg 1800

aggcatagac tgtacaaaaa aacagtcata acaagccatg aaaaccgcca ctgcgccgtt 1860

accaccgctg cgttcggtca aggttctgga ccagttgcgt gagcgcatac gctacttgca 1920

ttacagttta cgaaccgaac aggcttatgt caactgggtt cgtgccttca tccgtttcca 1980

cggtgtgcgt cacccggcaa ccttgggcag cagcgaagtc gccataactt cgtatagcat 2040

acattatacg aagttatctg taactataac ggtcctaagg tagcgagttt aaacactagt 2100

atcgattcgc gacctactcc ggaatattaa tagatcatgg agataattaa aatgataacc 2160

atctcgcaaa taaataagta ttttactgtt ttcgtaacag ttttgtaata aaaaaaccta 2220

taaatattcc ggattattca taccgtccca ccatcgggcg cggatccatg aggagacgag 2280

ccgtgctagg cggagcggtg gtgtatccgg agggtcctcc tccttcttac gagagcgtga 2340

tgcagcaaca ggcggcgatg atacagcccc cactggaggc tcccttcgta cccccacggt 2400

acctggcgcc tacggaaggg agaaacagca ttcgttactc ggagctgtcg cccctgtacg 2460

ataccaccaa gttgtatctg gtggacaaca agtcggcgga catcgcctcc ctgaactatc 2520

agaacgacca cagcaacttc ctgaccacgg tggtgcagaa caatgacttt acccccacgg 2580

aggctagcac ccagaccatc aactttgacg agcggtcgcg atggggcggt cagctgaaga 2640

ccatcatgca caccaacatg cccggaggtg aaaacctgta ttttcagagc accaaagata 2700

actttaacgt gtataaagcg acccgcccgt atctggcgca tggaggtgca gagcaggtct 2760

actggtcgct ccctgacatg atgcaagacc cagtcacctt ccgctccaca agacaagtca 2820

acaactaccc agtggtgggt gcagagctta tgcccggtgg aagcggaggt agcgttcctg 2880

ctctcacaga tcacgggacc ctgccgttac gcagcagtat ccggggagtc cagcgcgtga 2940

ccgttactga cgccagacgc cgcacctgtc cctacgttta caaggccctg ggcatagtcg 3000

cgccgcgcgt tctttcaagc cgcactttct gataagcttc catcaacttt gacgagcggt 3060

cgcgatgggg cggtcagctg aagaccatca tgcacaccaa catgcccaac gtgaacgagt 3120

acatgttcag caacaagttc aaggcgaggg agcttgtcga gaagtactag aggatcataa 3180

tcagccatac cacatttgta gaggttttac ttgctttaaa aaacctccca cacctccccc 3240

tgaacctgaa acataaaatg aatgcaattg ttgttgttaa cttgtttatt gcagcttata 3300

atggttacaa ataaagcaat agcatcacaa atttcacaaa taaagcattt ttttcactgc 3360

attctagttg tggtttgtcc aaactcatca atgtatctta tcatgtctgg atctgatcac 3420

tgcttgagcc tagaagatcc ggctgctaac aaagcccgaa aggaagctga gttggctgct 3480

gccaccgctg agcaataact atcataaccc ctagggtata cccatctaat tggaaccaga 3540

taagtgaaat ctagttccaa actattttgt catttttaat tttcgtatta gcttacgacg 3600

ctacacccag ttcccatcta ttttgtcact cttccctaaa taatccttaa aaactccatt 3660

tccacccctc ccagttccca actattttgt ccgcccaca 3699

<210> 28

<211> 254

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Белок VAJB-CHIK

<400> 28

Met Arg Arg Arg Ala Val Leu Gly Gly Ala Val Val Tyr Pro Glu Gly

1 5 10 15

Pro Pro Pro Ser Tyr Glu Ser Val Met Gln Gln Gln Ala Ala Met Ile

20 25 30

Gln Pro Pro Leu Glu Ala Pro Phe Val Pro Pro Arg Tyr Leu Ala Pro

35 40 45

Thr Glu Gly Arg Asn Ser Ile Arg Tyr Ser Glu Leu Ser Pro Leu Tyr

50 55 60

Asp Thr Thr Lys Leu Tyr Leu Val Asp Asn Lys Ser Ala Asp Ile Ala

65 70 75 80

Ser Leu Asn Tyr Gln Asn Asp His Ser Asn Phe Leu Thr Thr Val Val

85 90 95

Gln Asn Asn Asp Phe Thr Pro Thr Glu Ala Ser Thr Gln Thr Ile Asn

100 105 110

Phe Asp Glu Arg Ser Arg Trp Gly Gly Gln Leu Lys Thr Ile Met His

115 120 125

Thr Asn Met Pro Gly Gly Glu Asn Leu Tyr Phe Gln Ser Thr Lys Asp

130 135 140

Asn Phe Asn Val Tyr Lys Ala Thr Arg Pro Tyr Leu Ala His Gly Gly

145 150 155 160

Ala Glu Gln Val Tyr Trp Ser Leu Pro Asp Met Met Gln Asp Pro Val

165 170 175

Thr Phe Arg Ser Thr Arg Gln Val Asn Asn Tyr Pro Val Val Gly Ala

180 185 190

Glu Leu Met Pro Gly Gly Ser Gly Gly Ser Val Pro Ala Leu Thr Asp

195 200 205

His Gly Thr Leu Pro Leu Arg Ser Ser Ile Arg Gly Val Gln Arg Val

210 215 220

Thr Val Thr Asp Ala Arg Arg Arg Thr Cys Pro Tyr Val Tyr Lys Ala

225 230 235 240

Leu Gly Ile Val Ala Pro Arg Val Leu Ser Ser Arg Thr Phe

245 250

<210> 29

<211> 18

<212> ПРТ

<213> Вирус чикунгуньи

<400> 29

Ser Thr Lys Asp Asn Phe Asn Val Tyr Lys Ala Thr Arg Pro Tyr Leu

1 5 10 15

Ala His

<---

Изобретение относится к биотехнологии. Описан полипептид для презентации олигопептида, полипептида, белка и/или белкового комплекса, имеющий структуру A-L₁-B-L₂-C (формула (I)), где A представляет собой N-концевой аминокислотный участок белка основания пентона аденовируса, B представляет собой аминокислотный участок белка основания пентона аденовируса, C представляет собой C-концевой аминокислотный участок основания пентона аденовируса, где B представляет собой аминокислотный участок, расположенный между A и C в последовательности указанного основания пентона аденовируса, где A, B и C образуют домен с укладкой типа рулет (jelly roll fold) указанного белка основания пентона аденовируса, L₁ и L₂ независимо друг от друга выбраны из группы, состоящей из олигопептида, полипептида, белка и белкового комплекса, где указанный олигопептид, полипептид, белок и белковый комплекс, соответственно, являются либо по существу неаденовирусными, либо, если являются аденовирусными, A-L₁-B-L₂-C образует химеру основания пентона, где A, B и C образуют домен с укладкой типа рулетоснования пентона аденовируса одного подтипа аденовируса, и L₁ и L₂ образуют домен «корона» основания пентона аденовируса подтипа аденовируса, отличного от подтипа аденовируса домена с укладкой типа рулет. Описана нуклеиновая кислота, кодирующая указанный полипептид. Раскрыта нуклеиновая кислота для получения нуклеиновой кислоты путем вставки нуклеотидных последовательностей, кодирующих L₁ и L₂, содержащая последовательность, имеющую следующую общую 5'-a-is₁-l₁-is₂-b-is₃-l₂-is₄-c-3', где а представляет собой нуклеотидную последовательность, кодирующую А формулы (I), b представляет собой нуклеотидную последовательность, кодирующую B общей формулы (I), c представляет собой нуклеотидную последовательность, кодирующую C общей формулы (I), и l₁, l₂ каждый представляет собой нуклеотидную последовательность, с is₁ по is₄ каждый независимо представляет собой нуклеотидную последовательность, содержащую по меньшей мере один сайт инсерции. Раскрыт вектор для получения указанного полипептида. Описана рекомбинантная клетка-хозяин для получения указанного полипептида. Описан пентамерный комплекс полипептида для презентации олигопептида, полипептида, белка и/или белкового комплекса, где A-L₁-B-L₂-C образует химеру основания пентона и где A, B и C образуют домен с укладкой типа рулетоснования пентона аденовируса одного подтипа аденовируса, и L₁ и L₂ образуют домен «корона» основания пентона аденовируса подтипа аденовируса, отличного от подтипа аденовируса домена с укладкой типа рулет. Раскрыта вирусоподобная частица (ВПЧ) для презентации олигопептида, полипептида, белка и/или белкового комплекса, содержащая 12 пентамерных комплексов. Раскрыта фармацевтическая композиция для презентации олигопептида, полипептида, белка и/или белкового комплекса, содержащая полипептид, нуклеиновую кислоту, вектор, клетку-хозяина или ВПЧ вместе с по меньшей мере одним фармацевтически приемлемым носителем, эксципиентом и/или разбавителем. Раскрыт способ получения полипептида. Полипептидные каркасы по изобретению предназначены для оптимальной презентации пептидов, полипептидных последовательностей, белковых доменов, белков и белковых комплексов, состоящих из двух, нескольких или многих субъединиц. Такие олигопептиды, полипептидные последовательности, белковые домены и белки, представленные полипептидными каркасами по настоящему изобретению, могут включать антигенные частицы, которые стимулируют иммунную систему, чтобы вызвать иммунный ответ, например, для целей вакцинации, или для получения антител или других связывающих молекул в культуре клеток, или в пробирке. 12 н. и 24 з.п. ф-лы, 5 ил., 5 табл., 1 пр.

1. Полипептид для презентации олигопептида, полипептида, белка и/или белкового комплекса, имеющий структуру формулы (I)

где

A представляет собой N-концевой аминокислотный участок белка основания пентона аденовируса,

B представляет собой аминокислотный участок белка основания пентона аденовируса,

C представляет собой C-концевой аминокислотный участок основания пентона аденовируса,

где B представляет собой аминокислотный участок, расположенный между A и C в последовательности указанного основания пентона аденовируса,

где A, B и C образуют домен с укладкой типа рулет (jelly roll fold) указанного белка основания пентона аденовируса,

L₁ и L₂ независимо друг от друга выбраны из группы, состоящей из олигопептида, полипептида, белка и белкового комплекса,

где указанный олигопептид, полипептид, белок и белковый комплекс, соответственно, являются либо по существу неаденовирусными, либо, если являются аденовирусными, A-L₁-B-L₂-C образует химеру основания пентона, где A, B и C образуют домен с укладкой типа рулет основания пентона аденовируса одного подтипа аденовируса, и L₁ и L₂ образуют домен «корона» основания пентона аденовируса подтипа аденовируса, отличного от подтипа аденовируса домена с укладкой типа рулет.

2. Полипептид по п. 1, где аминокислотный участок А содержит бета-листы 1, 2 и 3 домена с укладкой типа рулет указанного аденовируса.

3. Полипептид по п. 1 или 2, где аминокислотный участок В содержит бета-листы 4 и 5 домена с укладкой типа рулет указанного аденовируса.

4. Полипептид по любому из пп. 1-3, где аминокислотный участок С содержит бета-листы 6, 7 и 8 домена с укладкой типа рулет аденовируса.

5. Полипептид по любому из пп. 1-4, где аминокислотные участки A, B и C имеют аминокислотную последовательность, причем каждая независимо выбрана из группы, состоящей из оснований пентона аденовируса человека 2 серотипа, аденовируса человека 3 серотипа, аденовируса человека 4 серотипа, аденовируса человека 5 серотипа, аденовируса человека 7 серотипа, аденовируса человека 11 серотипа, аденовируса человека 12 серотипа, аденовируса человека 17 серотипа, аденовируса человека 25 серотипа, аденовируса человека 35 серотипа, аденовируса человека 37 серотипа, аденовируса человека 41 серотипа, аденовируса гориллы, аденовируса шимпанзе, аденовируса обезьяны 18 серотипа, аденовируса обезьяны 20 серотипа, аденовируса обезьяны 49 серотипа, аденовируса макака-резуса 51 серотипа, аденовируса макака-резуса 52 серотипа и аденовируса макака-резуса 53 серотипа.

6. Полипептид по п. 5, где аминокислотный участок A имеет следующую консенсусную последовательность (SEQ ID NO: 21):

(U)_1-47 PTX₁GRNSIRY SX₂X₃x₄PX₅X₆DTT X₇X₃YLVDNKSA DIASLNYQND

HSNFX₅TTVX₉Q NNDX₁₀X₁₁PX₁₂EAX₁₃ TQTINX₁₄DX₁₅RS RWGX₁₆X₁₇LKTIX₁₈

X₁₉TZ₁Z₂Z₃Z₄Z₅Z₆Z₇Z₈ Z₉Z₁₀Z₁₁Z₁₂Z₁₃Z₁₄Z_15,

где: аминокислотный участок A заканчивается на C-конце перед Z₁ у остатка T или у аминокислоты с Z₁ по Z_15,

U представляет собой любую аминокислоту или отсутствует,

X₁ представляет собой E или G,

X₂ представляет собой E или S,

X₃ представляет собой L или V,

X₄ представляет собой A или S,

X₅ представляет собой L или Q,

X₆ представляет собой Y или E,

X₇ представляет собой R или K,

X₈ представляет собой V или L,

X₉ представляет собой V или I,

X₁₀ представляет собой F или Y,

X₁₁ представляет собой T или S,

X₁₂ представляет собой A, или T, или I, или G,

X₁₃ представляет собой S или G,

X₁₄ представляет собой F или L,

X₁₅ представляет собой E или D,

X₁₆ представляет собой A или G,

X₁₇ представляет собой D или Q,

X₁₈ представляет собой L или M,

X₁₉ представляет собой H или R,

Z₁, если присутствует, представляет собой N,

Z₂, если присутствует, представляет собой M,

Z₃, если присутствует, представляет собой P,

Z₄, если присутствует, представляет собой N,

Z₅, если присутствует, представляет собой V или I,

Z₆, если присутствует, представляет собой N,

Z₇, если присутствует, представляет собой E или D,

Z₈, если присутствует, представляет собой Y или F,

Z₉, если присутствует, представляет собой M,

Z₁₀, если присутствует, представляет собой F, или S, или Y,

Z₁₁, если присутствует, представляет собой T или S,

Z₁₂, если присутствует, представляет собой S или N,

Z₁₃, если присутствует, представляет собой K,

Z₁₄, если присутствует, представляет собой F,

Z₁₆, если присутствует, представляет собой K.

7. Полипептид по п. 6, где аминокислотный участок A выбран из группы, состоящей из следующих последовательностей:

от аминокислоты, выбранной из положений с 1 по 48, до аминокислоты, выбранной из положений с 129 по 144, UniProtAcc. № Q2Y0H9,

от аминокислоты, выбранной из положений с 1 по 48, до аминокислоты, выбранной из положений с 129 по 144, UniProtAcc. № P03276,

от аминокислоты, выбранной из положений с 1 по 44, до аминокислоты, выбранной из положений с 125 по 140, UniProtAcc. № Q2KSF3,

от аминокислоты, выбранной из положений с 1 по 48, до аминокислоты, выбранной из положений с 129 по 144, UniProtAcc. № P12538,

от аминокислоты, выбранной из положений с 1 по 48, до аминокислоты, выбранной из положений с 129 по 144, UniProtAcc. № Q9JFT6,

от аминокислоты, выбранной из положений с 1 по 48, до аминокислоты, выбранной из положений с 129 по 144, UniProtAcc. № D2DM93,

от аминокислоты, выбранной из положений с 1 по 38, до аминокислоты, выбранной из положений с 119 по 134, UniProtAcc. № P36716,

от аминокислоты, выбранной из положений с 1 по 35, до аминокислоты, выбранной из положений с 116 по 131, UniProtAcc. № F1DT65,

от аминокислоты, выбранной из положений с 1 по 43, до аминокислоты, выбранной из положений с 124 по 139, UniProtAcc. № M0QUK0,

от аминокислоты, выбранной из положений с 1 по 49, до аминокислоты, выбранной из положений с 130 по 145, UniProtAcc. № Q7T941,

от аминокислоты, выбранной из положений с 1 по 35, до аминокислоты, выбранной из положений с 116 по 131, UniProtAcc. № Q912J1,

от аминокислоты, выбранной из положений с 1 по 46, до аминокислоты, выбранной из положений с 127 по 142, UniProtAcc. № F8WQN4,

от аминокислоты, выбранной из положений с 1 по 49, до аминокислоты, выбранной из положений с 130 по 145, UniProtAcc. № E5L3Q9,

от аминокислоты, выбранной из положений с 1 по 44, до аминокислоты, выбранной из положений с 125 по 140, UniProtAcc. № G9G849,

от аминокислоты, выбранной из положений с 1 по 46, до аминокислоты, выбранной из положений с 127 по 142, UniProtAcc. № H8PFZ9,

от аминокислоты, выбранной из положений с 1 по 45, до аминокислоты, выбранной из положений с 126 по 141, UniProtAcc. № F6KSU4,

от аминокислоты, выбранной из положений с 1 по 46, до аминокислоты, выбранной из положений с 127 по 142, UniProtAcc. № F2WTK5,

от аминокислоты, выбранной из положений с 1 по 43, до аминокислоты, выбранной из положений с 124 по 139, UniProtAcc. № A0A0A1EWW1,

от аминокислоты, выбранной из положений с 1 по 43, до аминокислоты, выбранной из положений с 124 по 139, UniProtAcc. № A0A0A1EWX7, и

от аминокислоты, выбранной из положений с 1 по 44, до аминокислоты, выбранной из положений с 125 по 140, UniProtAcc. № A0A0A1EWZ7.

8. Полипептид по любому из пп. 5-7, где аминокислотный участок B вышеуказанной общей формулы (I) имеет следующую последовательность (SEQ ID NO: 22):

Z₁₇Z₁₈Z₁₉Z₂₀Z₂₁Z₂₂Z₂₃Z₂₄Z₂₅Z₂₆ Z₂₇QVYWSLPDX₂₀ MX₂₁DPVTFRST X₂₂QX₂₃X₂₄NX₂₅PVVGX₂₆ ELZ₂₈Z₂₉Z₃₀,

где: аминокислотный участок B начинается на N-конце у аминокислоты с Z₁₇ по Z₂₇ или у аминокислоты Q после Z₂₇,

аминокислотный участок B заканчивается на С-конце перед Z₂₈ у аминокислоты L или у аминокислоты с Z₂₈ по Z₃₀,

Z₁₇, если присутствует, представляет собой L или S,

Z₁₈, если присутствует, представляет собой T, или P, или C,

Z₁₉, если присутствует, представляет собой T или P,

Z₂₀, если присутствует, представляет собой P, или S, или A, или R,

Z₂₁, если присутствует, представляет собой N или D,

Z₂₂, если присутствует, представляет собой G или V,

Z₂₃, если присутствует, представляет собой H или T,

Z₂₄, если присутствует, представляет собой C,

Z₂₅, если присутствует, представляет собой G,

Z₂₆, если присутствует, представляет собой A, или V, или S,

Z₂₇, если присутствует, представляет собой E или Q,

X₂₀ представляет собой L или M,

X₂₁ представляет собой Q или K,

X₂₂ представляет собой Q, или R, или S,

X₂₃ представляет собой V или I,

X₂₄ представляет собой S или N,

X₂₅ представляет собой Y или F,

X₂₆ представляет собой A или V,

Z₂₈, если присутствует, представляет собой M или L,

Z₂₉, если присутствует, представляет собой P,

Z₃₀, если присутствует, представляет собой V или F.

9. Полипептид по п. 8, где аминокислотный участок В выбран из группы, состоящей из следующих последовательностей:

от аминокислоты, выбранной из положений с 398 по 409, до аминокислоты, выбранной из положений с 440 по 443, UniProtAcc. № Q2Y0H9,

от аминокислоты, выбранной из положений с 425 по 436, до аминокислоты, выбранной из положений с 467 по 470, UniProtAcc. № P03276,

от аминокислоты, выбранной из положений с 379 по 390, до аминокислоты, выбранной из положений с 421 по 444, UniProtAcc. № Q2KSF3,

от аминокислоты, выбранной из положений с 425 по 436, до аминокислоты, выбранной из положений с 467 по 470, UniProtAcc. № P12538,

от аминокислоты, выбранной из положений с 398 по 409, до аминокислоты, выбранной из положений с 440 по 443, UniProtAcc. № Q9JFT6,

от аминокислоты, выбранной из положений с 415 по 426, до аминокислоты, выбранной из положений с 457 по 460, UniProtAcc. № D2DM93,

от аминокислоты, выбранной из положений с 351 по 362, до аминокислоты, выбранной из положений с 393 по 397, UniProtAcc. № P36716,

от аминокислоты, выбранной из положений с 370 по 381, до аминокислоты, выбранной из положений с 413 по 416, UniProtAcc. № F1DT65,

от аминокислоты, выбранной из положений с 388 по 399, до аминокислоты, выбранной из положений с 440 по 443, UniProtAcc. № M0QUK0,

от аминокислоты, выбранной из положений с 445 по 456, до аминокислоты, выбранной из положений с 497 по 500, UniProtAcc. № Q7T941,

от аминокислоты, выбранной из положений с 372 по 383, до аминокислоты, выбранной из положений с 414 по 417, UniProtAcc. № Q912J1,

от аминокислоты, выбранной из положений с 362 по 373, до аминокислоты, выбранной из положений с 404 по 407, UniProtAcc. № F8WQN4,

от аминокислоты, выбранной из положений с 416 по 427, до аминокислоты, выбранной из положений с 458 по 461, UniProtAcc. № E5L3Q9,

от аминокислоты, выбранной из положений с 372 по 383, до аминокислоты, выбранной из положений с 420 по 423, UniProtAcc. № G9G849,

от аминокислоты, выбранной из положений с 353 по 364, до аминокислоты, выбранной из положений с 395 по 398, UniProtAcc. № H8PFZ9,

от аминокислоты, выбранной из положений с 358 по 369, до аминокислоты, выбранной из положений с 400 по 403, UniProtAcc. № F6KSU4,

от аминокислоты, выбранной из положений с 356 по 367, до аминокислоты, выбранной из положений с 398 по 401, UniProtAcc. № F2WTK5,

от аминокислоты, выбранной из положений с 352 по 363, до аминокислоты, выбранной из положений с 394 по 397, UniProtAcc. № A0A0A1EWW1,

от аминокислоты, выбранной из положений с 350 по 361, до аминокислоты, выбранной из положений с 392 по 395, UniProtAcc. № A0A0A1EWX7, и

от аминокислоты, выбранной из положений с 351 по 362, до аминокислоты, выбранной из положений с 393 по 396, UniProtAcc. № A0A0A1EWZ7.

10. Полипептид по любому из пп. 5-9, где аминокислотный участок C вышеуказанной общей формулы (I) имеет следующую последовательность (SEQ ID NO: 23):

Z₃₁Z₃₂Z₃₃ALTDHGT LPLRSSIX₂₇GV QRVTX₂₈TDARR RTCPYVYKA LGIVX₃₀PX₃₁VLS SRTF,

где: аминокислотный участок C начинается на N-конце у аминокислоты с Z₃₁ по Z₃₃ или у аминокислоты A после Z₃₃,

Z₃₁, если присутствует, представляет собой N,

Z₃₂, если присутствует, представляет собой V,

Z₃₃, если присутствует, представляет собой P,

X₂₇ представляет собой R, или S, или G,

X₂₈ представляет собой V или I,

X₂₉ представляет собой Y или H,

X₃₀ представляет собой A или S,

X₃₁ представляет собой R или K.

11. Полипептид по п. 10, где аминокислотный участок C выбран из группы, состоящей из следующих последовательностей:

от аминокислоты, выбранной из положений с 492 по 495, до С-концевой аминокислоты UniProtAcc. № Q2Y0H9,

от аминокислоты, выбранной из положений с 519 по 522, до С-концевой аминокислоты UniProtAcc. № P03276,

от аминокислоты, выбранной из положений с 466 по 469, до С-концевой аминокислоты UniProtAcc. № Q2KSF3,

от аминокислоты, выбранной из положений с 492 по 495, до С-концевой аминокислоты UniProtAcc. № P12538,

от аминокислоты, выбранной из положений с 465 по 468, до С-концевой аминокислоты UniProtAcc. № Q9JFT6,

от аминокислоты, выбранной из положений с 482 по 485, до С-концевой аминокислоты UniProtAcc. № D2DM93,

от аминокислоты, выбранной из положений с 419 по 422, до С-концевой аминокислоты UniProtAcc. № P36716,

от аминокислоты, выбранной из положений с 438 по 441, до С-концевой аминокислоты UniProtAcc. № F1DT65,

от аминокислоты, выбранной из положений с 455 по 458, до С-концевой аминокислоты UniProtAcc. № M0QUK0,

от аминокислоты, выбранной из положений с 522 по 525, до С-концевой аминокислоты UniProtAcc. № Q7T941,

от аминокислоты, выбранной из положений с 439 по 442, до С-концевой аминокислоты UniProtAcc. № Q912J1,

от аминокислоты, выбранной из положений с 429 по 432, до С-концевой аминокислоты UniProtAcc. № F8WQN4,

от аминокислоты, выбранной из положений с 483 по 486, до С-концевой аминокислоты UniProtAcc. № E5L3Q9,

от аминокислоты, выбранной из положений с 445 по 448, до С-концевой аминокислоты UniProtAcc. № G9G849,

от аминокислоты, выбранной из положений с 420 по 423, до С-концевой аминокислоты UniProtAcc. № H8PFZ9,

от аминокислоты, выбранной из положений с 425 по 428, до С-концевой аминокислоты UniProtAcc. № F6KSU4,

от аминокислоты, выбранной из положений с 423 по 426, до С-концевой аминокислоты UniProtAcc. № F2WTK5,

от аминокислоты, выбранной из положений с 419 по 422, до С-концевой аминокислоты UniProtAcc. № A0A0A1EWW1,

от аминокислоты, выбранной из положений с 417 по 420, до С-концевой аминокислоты UniProtAcc. № A0A0A1EWX7, и

от аминокислоты, выбранной из положений с 418 по 421, до С-концевой аминокислоты UniProtAcc. № A0A0A1EWZ7.

12. Полипептид по любому из пп. 1-11, где аминокислотный участок A имеет последовательность положений с 1 по 132 UniProtAcc. № Q2Y0H9, аминокислотный участок B имеет последовательность положений с 407 по 442 UniProtAcc. № Q2Y0H9, и аминокислотный участок C имеет последовательность положений с 493 по 544 UniProtAcc. № Q2Y0H9.

13. Полипептид по любому из пп. 1-12, где L₁ и/или L₂ представляет собой олигопептид, имеющий последовательность из от 4 до 40 аминокислот, выбранных из аминокислот G и S.

14. Полипептид по п. 13, где L₁ и/или L₂ независимо выбраны из группы, состоящей из GGGS (SEQ ID NO: 24) и GGSGGS (SEQ ID NO: 25).

15. Полипептид по любому из пп. 1-12, где L₁ представляет собой аденовирусную последовательность, содержащую петлю RGD основания пентона аденовируса, имеющего серотип отличный от серотипа аденовируса(ов), от которого происходят указанные аминокислотные участки A, B и C, и/или L₂ представляет собой аденовирусную последовательность, содержащую вариабельную петлю основания пентона аденовируса, имеющего серотип отличный от серотипа аденовируса, от которого происходят указанные аминокислотные участки A, B и C.

16. Полипептид по п. 15, где L₁ представляет собой большой фрагмент домена «корона» основания пентона аденовируса, имеющего серотип отличный от серотипа аденовируса(ов), от которого происходят указанные аминокислотные участки A, B и C, и L₂ представляет собой малый фрагмент домена «корона» основания пентона аденовируса, имеющего серотип отличный от серотипа аденовируса(ов), от которого происходят указанные аминокислотные участки A, B и C.

17. Полипептид по п. 16, где большой и малый фрагменты происходят из белка основания пентона одного и того же аденовируса.

18. Полипептид по п. 16, где большой и малый фрагменты происходят из белка основания пентона различных аденовирусов.

19. Полипептид по любому из пп. 15-18, где одна или более неаденовирусных последовательностей вставлены в петлю RGD и/или вариабельную петлю.

20. Полипептид по любому из пп. 1-19, где L₁ и/или L₂ содержат антиген.

21. Полипептид по п. 20, где антиген выбран из группы, состоящей из антигена инфекционного агента и опухолевого антигена.

22. Полипептид по любому из пп. 1-21, где к L₁ и/или L₂ присоединен/присоединены нуклеиновая кислота, лекарственное средство, метка и/или партнер по связыванию биологически связывающейся пары.

23. Нуклеиновая кислота, кодирующая полипептид по любому из пп. 1-22.

24. Нуклеиновая кислота для получения нуклеиновой кислоты по п. 23 путем вставки нуклеотидных последовательностей, кодирующих L₁ и L₂ общей формулы (I), содержащая последовательность, имеющую следующую общую формулу (II)

где

а представляет собой нуклеотидную последовательность, кодирующую А общей формулы (I),

b представляет собой нуклеотидную последовательность, кодирующую B общей формулы (I),

c представляет собой нуклеотидную последовательность, кодирующую C общей формулы (I), и

l₁, l₂ каждый представляет собой нуклеотидную последовательность,

с is₁ по is₄ каждый независимо представляет собой нуклеотидную последовательность, содержащую по меньшей мере один сайт инсерции.

25. Нуклеиновая кислота по п. 24, где значения с is₁ по is₄ выбраны из группы, состоящей из последовательностей распознавания рестрикционных ферментов и последовательностей распознавания хоминг-эндонуклеаз.

26. Нуклеиновая кислота по п. 25, где is₁ содержит сайт EcoRI, is₂ содержит сайт RsrII, is₃ содержит сайт SacI, и is₄ содержит сайт XbaI.

27. Вектор для получения полипептида по любому из пп. 1-22, содержащий нуклеиновую кислоту по п. 23.

28. Вектор по п. 27, содержащий нуклеиновую кислоту по п. 23 в кассете экспрессии.

29. Рекомбинантная клетка-хозяин для получения полипептида по любому из пп. 1-22, содержащая нуклеиновую кислоту по п. 23 или вектор по п. 27 или 28.

30. Пентамерный комплекс полипептида по любому из пп. 1-12 и 15-22 для презентации олигопептида, полипептида, белка и/или белкового комплекса, где A-L₁-B-L₂-C образует химеру основания пентона, и где A, B и C образуют домен с укладкой типа рулет основания пентона аденовируса одного подтипа аденовируса, и L₁ и L₂ образуют домен «корона» основания пентона аденовируса подтипа аденовируса, отличного от подтипа аденовируса домена с укладкой типа рулет.

31. Вирусоподобная частица (ВПЧ) для презентации олигопептида, полипептида, белка и/или белкового комплекса, содержащая 12 пентамерных комплексов по п. 30.

32. Полипептид по любому из пп. 1-22, нуклеиновая кислота по п. 23, вектор по п. 27 или 28, клетка-хозяин по п. 29 или ВПЧ по п. 31 для применения в качестве лекарственного средства.

33. Фармацевтическая композиция для презентации олигопептида, полипептида, белка и/или белкового комплекса, содержащая полипептид по любому из пп. 1-22, нуклеиновую кислоту по п. 23, вектор по п. 27 или 28, клетку-хозяин по п. 29 или ВПЧ по п. 31 вместе с по меньшей мере одним фармацевтически приемлемым носителем, эксципиентом и/или разбавителем.

34. Способ получения полипептида по любому из пп. 1-22, включающий стадию культивирования рекомбинантной клетки-хозяина по п. 29, где клетка-хозяин содержит вектор по п. 28 в условиях, обеспечивающих экспрессию указанного полипептида.

35. Способ получения ВПЧ по п. 31, включающий стадию инкубации раствора полипептида по любому из пп. 1-22 в условиях, обеспечивающих сборку полипептида в ВПЧ.

36. Полипептид по любому из пп. 1-22, нуклеиновая кислота по п. 23, вектор по п. 27 или 28, клетка-хозяин по п. 29 или ВПЧ по п. 31 для применения в лечении и/или предотвращении инфекционного заболевания, иммунного заболевания, опухоли или рака.