СПОСОБЫ ЛЕЧЕНИЯ СИМПТОМОВ И НАРУШЕНИЙ, АССОЦИИРОВАННЫХ С ЛИЗОСОМНЫМИ БОЛЕЗНЯМИ НАКОПЛЕНИЯ Российский патент 2024 года по МПК A61K31/439 A61P25/00 A61P25/28 

ПЕРЕКРЕСТНАЯ ССЫЛКА НА РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ

Настоящая заявка является международной заявкой, по которой испрашивается приоритет предварительных заявок США № 62/800,996, поданной 4 февраля 2019, № 62/851,433, поданной 22 мая 2019, № 62/894,167, поданной 30 августа 2019, № 62/937,618, поданной 19 ноября 2019 и № 62/962,647, поданной 17 января 2020, содержание каждой из которых включено в настоящий документ в качестве ссылки полностью.

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ

Данное изобретение относится к способам лечения или профилактики конкретных симптомов и нарушений, которые ассоциированы с лизосомными болезнями накопления, с использованием соединений хинуклидина формулы (I), необязательно в комбинации с ферментной заместительной терапией. Они включают надъядерные параличи взора, включая горизонтальные и вертикальные парезы саккадических движений глаз, а также когнитивные нарушения или нарушения походки, например, у пациентов с болезнью Гоше или болезнью Ниманна-Пика типа C.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Лизосомные болезни накопления

Лизосомные болезни накопления (LSD) представляют собой группу из около 50 редких наследственных заболеваний обмена веществ, вызванных дефектами лизосомальной функции. Как правило, пациенты с LSD накапливают вредные уровни субстрата (т.е. хранимого материала) в лизосомах из-за дефицита или дефекта фермента, ответственного за метаболизм субстрата, или из-за дефицита ферментного активатора, необходимого для правильной ферментативной функции. Большинство LSD вызваны единичным ферментативным дефектом или дефицитом, обычно фермента, вовлеченного в метаболизм жиров или гликопротеинов. Некоторые из наиболее распространенных LSD включают болезнь Гоше, болезнь Фабри и болезнь Ниманна-Пика (тип C). Гоше, Фабри и Ниманн-Пик являются примерами сфинголипидозов. Каждое из этих заболеваний связано с набором симптомов, которые прямо или косвенно вызваны лежащими в основе генетическими дефектами. В результате часто бывает трудно предсказать, какие симптомы или нарушения, связанные с ними, можно эффективно лечить с помощью различных способов лечения. Симптомы, общие для нескольких ЛСД, включают изменения саккадических движений глаз, когнитивную дисфункцию и нарушения походки, такие как атаксия. Эти симптомы особенно распространены при болезни Гоше (например, типа 3) и болезни Неймана-Пика (типа C).

Дефекты саккадических движений глаз при LSD

Существует несколько функциональных классов движений глаз, в том числе быстрое скачкообразное движение, плавное преследование, оптокинетический нистагм (OKN), вестибулярные рефлексы и вергенция, каждый из которых контролируется отдельными кортикальными, стволовыми и надъядерными сетями мозжечка. Отказ надъядерных саккадных центров ствола головного мозга приводит к надъядерному параличу взора, также называемому парез саккадических движений глаз. «Надъядерный» относится к расположению дефекта выше соответствующих ядер черепных нервов в среднем мозге ствола головного мозга (глазодвигательный нерв, блоковидный нерв) или мостах ствола мозга (отводящий нерв). Глазодвигательный, блоковидный и отводящий нервы являются единственными нервами черепа, контролирующими мелкие мышцы, которые двигают глаз, и повреждения самих нервов не приводят к парезам взгляда.

Быстрые скачкообразные движения представляют собой быстрые одновременные движения обоих глаз между двумя или несколькими фазами фиксации в одном и том же направлении. Быстрые скачкообразные движения контрастируют с плавным преследованием, при котором глаза двигаются плавно без скачков, обычно отслеживая объекты в поле видимости. Быстрые скачкообразные движения служат в качестве визуальной фиксации, быстрого движения глаз и быстрой фазы оптокинетического нистагма. Быстрые скачкообразные движения контролируются кортикально через область фронтальных глазодвигательных полей лобной доли, или субкортикально, через верхнее двухолмие (область среднего мозга). Быстрые скачкообразные движения являются особенно важными во время чтения и при осмотре ближайших окрестностей. Поскольку область сетчатки с высоким разрешением, ямка, очень мала (примерно 1-2 градуса обзора), саккадическое движение глаз имеет решающее значение для разрешения мелких объектов в поле зрения. Опытные читатели перемещают глаза во время чтения в среднем каждые 250 миллисекунд, и во время каждого скачкообразного движения, длящегося 20-40 миллисекунд, цель взгляда перемещается в среднем по 7-9 символам (диапазон 1-20 символов).

Пиковая угловая скорость глаза во время скачкообразного движения может достигать у человека до 900 градусов в секунду. Быстрые скачкообразные движения в ответ на неожиданный стимул обычно начинаются всего за 200 миллисекунд, и длятся они от 20 миллисекунд до 200 миллисекунд в зависимости от амплитуды. Амплитуда быстрого скачкообразного движения представляет собой угловое расстояние, которое глаз проходит во время движения глаза. Быстрые скачкообразные движения при зафиксированной голове могут иметь амплитуду до 90 градусов, но в большинстве случаев любое смещение взгляда более чем на 20 градусов сопровождается движением головы. Во время этих быстрых скачкообразных движений, глаз сначала совершает быстрое скачкообразное движение, чтобы сместить взгляд на цель, а голова следует за ним медленнее, в то время как глаза сохраняют фокусировку на цели. Последнее называется вестибулоокулярным рефлексом (VOR), и его функция заключается в медленном смещении глаз в направлении, противоположном движению головы, чтобы поддерживать фокусировку зрения в сетчатке. Поскольку голова почти всегда находится в легком движении, VOR необходим для стабилизации зрения почти при любых обстоятельствах, но особенно во время чтения.

Парез саккадических движений глаз может приводить к замедлению быстрых скачкообразных движений по горизонтали, вертикали или по обоим направлениям, и может быть с ограничениями по дальности или без них. Существование горизонтального или вертикального пареза саккадических движений глаз зависит от конкретной области мозга, вовлеченной в патологию.

Болезнь Гоше (GD) представляет собой редкую аутосомно-рецессивную лизосомную болезнь накопления. У пациентов с GD имеется мутация в гене GBA1, который кодирует глюкозилцерамидазу (GC), также известную как бета-глюкоцереброзидаза. Этот фермент отвечает за расщепление гликосфинголипидов на их компоненты, такое как расщепление глюкозилцерамида (GLC; также известного как глюкоцереброзид) на глюкозу и церамид. Моноциты и макрофаги имеют особенно высокое содержание лизосом, содержащих GLC, и у пациентов с GD эти клетки становятся увеличенными и накапливают токсические концентрации GLC. Эти так называемые «клетки Гоше» накапливаются в нескольких органах, включая кости, костный мозг, селезенку, печень, легкие и мозг. Системно это приводит к спленомегалии, гепатомегалии, анемии, тромбоцитопении, лейкопении, остеопении, остеонекрозу и другим патологическим нарушениям.

Существует три подтипа болезни Гоше, которые различаются возрастом начала, тяжестью и наличием неврологических проявлений. Болезнь Гоше 1 типа (GD-1), не нейронопатическая GD, является наиболее распространенной формой со средним возрастом на момент постановки диагноза 28 лет и умеренно сокращенной продолжительностью жизни. При GD-1 фермент GC сохраняет некоторую функциональность, и отсутствует неврологическое вовлечение. GD 2 типа представляет собой острую нейронопатическую GD, которая диагностируется в младенческом возрасте, является тяжелым неврологическим поражением и вызывает смерть обычно в течение первых двух лет жизни. Фермент GC у пациента 2 типа имеет более серьезные нарушения функции по сравнению с GD-1. GD 3 типа представляет собой хроническую нейронопатическую GD, которая диагностируется в детстве, характеризуется постепенно ухудшающимся неврологическим поражением и ожидаемой продолжительностью жизни, как правило, не более 30 лет. Симптомы GD-3 включают аномалии селезенки и печени, утомляемость, кровотечение, судороги и надъядерный паралич взора. Неврологические проявления у пациентов с GD-3 постепенно развиваются по мере развития болезни. Одной из наиболее изнурительных черт является парез взора, который является дефектом нейронных путей, контролирующих быстрые скачкообразные движения глаз. На ранних стадиях заболевания наблюдается замедление горизонтальных быстрых скачкообразных движений. Заболевание прогрессирует до полного горизонтального пареза саккадических движений глаз с различной степенью вертикального пареза саккадических движений глаз. VOR также может быть нарушен у пациентов с GD-3. Эти особенности заболевания оказывают сильное влияние на качество жизни пациентов с GD-3 и могут препятствовать получению образования и перспективам трудоустройства.

Существующее лечение GD-1 и GD-3 ограничено рекомбинантной ферментозаместительной терапией (ERT) с применение имиглюцеразы, велаглюцеразы или талиглюцеразы, и субстрат-редуцирующей терапией (SRT) с применением миглустата или элиглустата. См., например, Lunawati L. Bennett & Chris Fellner, Pharmacotherapy of Gaucher Disease: Current and Future Options, P&T 43(5): 274-280, 309 (2018). Имиглюцераза, ведущая схема лечения, является рекомбинантной версией GC человека, сделанной в клетках яичников китайского хомяка и вводимой медленной внутривенной инъекцией (обычно в течение 1-2 часов) каждые 1-2 недели. Она доступна с 1998 в США. Велаглюцераза является другим рекомбинантным аналогом GC человека, который создан на клеточной линии фибросаркомы, и одобрен FDA в 2010. Талиглюцераза является подобной, полученной с применением генетически модифицированных клеток корнеплода моркови и одобренной с 2012. Все эти схемы лечения требуют ВВ введения в больнице или другом медицинском учреждении, и рекомбинантные ферменты не преодолевают гематоэнцефалический барьер и поэтому не способны лечить неврологические симптомы GD. Таким образом, эти схемы ERT с доказанной эффективностью при лечении пациентов с GD-1, у пациентов с GD-3 они являются эффективными только для лечения не неврологических симптомов заболевания.

Субстрат-редуцирующая терапия является альтернативным подходом к лечению GD. Целью этой терапии является снижение аккумуляции GLC чрез ингибирование фермента, который отвечает за синтез GLC. Глюкозилцерамидсинтаза (GCS), также известная как UDP-глюкозацерамидсинтаза, является ферментом, который катализирует стадию исходного гликозилирования церамида с получением глюкозилцерамида.

Ингибиторы GCS были предложены для лечения различных заболеваний, включая гликолипидные болезни накопления и лизосомные болезни накопления, включая болезнь Гоше. См., например, WO 2005/068426 (Actelion Pharm. Ltd.). Миглустат (Zavesca) является иминоглюкозным ингибитором GCS. Он представляет собой N-алкилированный иминосахар и действует как обратимый конкурентный ингибитор GCS, связывая активный сайт фермента. Хотя он разработан для лечения нейронопатических форм GD, GD-2 и GD-3, FDA одобрил его только для лечения пациентов с легкой-умеренной GD-1, и только в качестве терапии второй линии (пациенты должны быть неспособны получать ERT лечение). Хотя миглустат пересекает гематоэнцефалический барьер, при клинических испытаниях было обнаружено, что он неэффективен для лечения неврологических проявлений GD-3. Элиглустат также является ингибитором GCS, и он является аналогом церемида. Он был одобрен FDA только для лечения системных симптомов у пациентов с GD-1.

Болезнь Ниманна-Пика типа C (NPC) также является лизосомной болезнью накопления, и хотя ее причина совершенно отличается от болезни Гоше, в некотором смысле конечный результат аналогичен. NPC вызывается мутациями в генах NPC1 или NPC2. NPC1 является мембранным белком, который опосредует внутриклеточный перенос холестерина в постлизосомные места назначения. В частности, NPC1 действует совместно с NPC2, способствуя выходу холестерина из эндосомального/лизосомального компартмента. Неэстерифицированный холестерин, который был высвобожден из липопротеинов низкой плотности в просвете поздних эндосом/лизосом, переносится NPC2 в холестерин-связывающий карман NPC1. Приблизительно 95% пациентов с NPC имеют мутации в NPC1, в то время как у большинства остальных есть мутации в NPC2. Одним из последствий этой нарушенной миграции холестерина является аккумуляция холестерина и гликосфинголипидов (включая GLC) в клетках печени, селезенки и мозга. Одним из отличительных признаков NPC, как и GD3, является прогрессирующее развитие надъядерного паралича взора, включая горизонтальные и вертикальные парезы саккадических движений глаз.

Другая группа заболеваний и нарушений, обычно связанных с парезом саккадических движений глаз, включает GM2-ганглиозидозы (такие, как болезнь Тея Сакса, болезнь Сандхоффа и AB вариант GM2 ганглиозидоза).

GM2 ганглиозидозы, как и болезнь Гоше, представляют собой лизосомную болезнь накопления, отмеченную генетическими дефектами метаболизма гликосфинголипидов. GM2 ганглиозидозы отмечены дефектами фермента гексозаминидазы A и/или его кофактора GM2 белка-активатора, которые ответственны за распад GM2 до GM3. GM2 и GM3 являются родственными ганглиозидами, которые являются частью одного и того же метаболического пути, при котором глюкозилцерамид разлагается до церамида. Таким образом, GM3 производится поэтапным способом, который начинается с превращения церамида в глюкозилцерамид (с помощью GLC), за которым следует превращение в галактозил-глюкозилцерамид с последующим превращением в GM3 (N-ацетил-a-нейраминидил-галактозил-глюкозилцерамид) с последующим превращением в GM2 (N-ацетилгалактозил N-ацетил-a-нейраминидил-галактозил-глюкозилцерамид). Таким образом, патологическое накопление GM2, которое является признаком GM2 ганглиозидозов, может быть уменьшено с помощью ингибитора GCS, который ингибирует более раннюю стадию синтеза глюкозилцерамида.

Описанные здесь хинуклидиновые соединения обладают активностью в качестве ингибиторов фермента глюкозилцерамидсинтазы (GCS). Эти соединения были описаны как обычно используемые при лечении лизосомных болезней накопления, таких как болезнь Фабри, болезнь Гоше и болезнь Ниманна-Пика. См., например, WO 2012/129084 и U.S. 2016/0361301.

В данной области существует реальная потребность в разработке терапевтических средств, эффективных для облегчения или управления неврологическими симптомами, связанными с болезнью Гоше 3 типа, особенно дефицита саккадических движений глаз.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение относится к соединению хинуклидина (соединение 1) согласно формуле (I),

(I)

или его фармацевтически приемлемой соли или пролекарству, где:

R¹ выбирают из водорода, галогена (например, фтор), циано, нитро, гидрокси, тио, амино, C_1-6-алкила (например, метила или этила), C_2-6-алкенила, C_2-6-алкинил, C_1-6-алкилокси, C_2-6-алкенилокси и C_2-6-алкинилокси, где указанный алкил, алкенил, алкинил, алкилокси, алкенилокси или алкинилокси необязательно замещен одной или несколькими (например, 1, 2 или 3) группами, выбранными из галогена, циано, нитро, гидрокси, тио или амино;

R² и R³ независимо выбирают из C_1-3-алкила, необязательно замещенного одним или несколькими (например, 1, 2 или 3) галогенами, или R² и R³ вместе образуют циклопропильную или циклобутильную группу, необязательно замещенную одним или несколькими (например, 1 или 2) галогенами;

R⁴, R⁵ и R⁶ каждый независимо выбирают из водорода, галогена, нитро, гидрокси, тио, амино, C_1-6-алкила и C_1-6-алкилокси, где указанный алкил или алкилокси необязательно замещен одним или несколькими (например, 1, 2 или 3) группами, выбранными из галогена, гидрокси, циано и C_1-6-алкилокси; и

A является 5- или 6-членной арильной или гетеоарильной группой, необязательно замещенной 1, 2 или 3 группами, независимо выбранными из галогена, гидрокси, тио, амино, нитро, C_1-6алкокси или C_1-6алкила.

В первом аспекте, в настоящей заявке представлен способ лечения или профилактики надъядерных параличей взора, включая горизонтальные и вертикальные парезы саккадических движений глаз, у субъекта, нуждающегося в этом, где способ включает введение субъекту эффективного количества соединения хинуклидина, как описано в настоящем документе, например, соединения формулы I. В других аспектах, настоящая заявка дополнительно представляет использование соединений хинуклидина, описанных в настоящем документе, для лечения или профилактики надъядерных параличей взора, включая горизонтальные и вертикальные парезы саккадических движений глаз, и/или для производства лекарственного средства для лечения или профилактики надъядерных параличей взора, включая горизонтальные и вертикальные парезы саккадических движений глаз.

Дополнительные признаки и преимущества соединений, композиций и способов, описанных в настоящем документе, будут очевидны из следующего подробного описания.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ

На фигурах 1 и 2 показанное горизонтальное саккадическое движение глаз, измеренное у пяти пациентов, как описано в примере 5 (фигура 1 показывает пациентов 1-3 и фигура 2 показывает пациентов 4-5). Амплитуду быстрых скачкообразных движений и пиковую скорость измеряют, когда мишень движется горизонтально либо на 15° (серые точки), либо на 30° (черные точки) от центрального положения либо налево, либо направо. Движения глаза направо представлено положительными пиковыми скоростями, и движение налево представлено отрицательными пиковыми скоростями. Закрашенная серым площадь на каждом графике представляет нормальный интервал пиковых скоростей при любой данной амплитуде.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ

Хотя конкретные варианты осуществления настоящего описания теперь будут описаны со ссылкой на примеры получения и схемы, следует понимать, что такие варианты осуществления приведены только в качестве примера и просто иллюстрируют лишь небольшое количество из многих возможных конкретных вариантов осуществления, которые могут представлять заявки принципов настоящего описания. Различные изменения и модификации будут очевидны специалистам в данной области техники, учитывая преимущество настоящего раскрытия, и считаются находящимися в пределах сущности и объема настоящего описания, как дополнительно определено в прилагаемой формуле изобретения.

Определения

Если не указано иное, все технические и научные термины, используемые в настоящем документе, имеют те же значения, которые обычно понимаются средним специалистом в области, к которой относится это описание. Хотя любые способы и материалы, аналогичные или эквивалентные тем, которые описаны в настоящем документе, могут быть использованы на практике или при тестировании настоящего изобретения, далее описаны типовые способы, устройства и материалы. Все технические и патентные публикации, цитируемые в настоящем документе, полностью включены в настоящий документ в качестве ссылки. Ничто в настоящем документе не может быть истолковано как признание того, что изобретение не имеет права датировать такое описание задним числом на основании предшествующего изобретения.

Практика настоящего описания будет использовать, если не указано иное, обычные способы культивирования тканей, иммунологии, молекулярной биологии, микробиологии, клеточной биологии и рекомбинантной ДНК, которые находятся в компетенции специалистов в данной области техники.

Все числовые обозначения, например, pH, температура, время, концентрация, молекулярная масса, включая диапазоны, являются приблизительными, которые варьируются (+) или (-) с шагом 0,1 или 1,0, где это необходимо. Следует понимать, хотя это не всегда явно указано, что всем числовым обозначениям предшествует термин «примерно». Также следует понимать, хотя не всегда явно указано, что реагенты, описанные в настоящем документе, являются просто типовыми, и что их эквиваленты известны в данной области техники.

Используемый в настоящем документе термин «необязательно замещенный» является эквивалентом фразы «незамещенный или замещенный».

Используемая в настоящем документе фраза «в способе лечения или профилактики» (например, во фразе «в способе лечения или профилактики надъядерных параличей взора») является эквивалентом фразы «при лечении или профилактике» (например, во фразе« при лечении или профилактике надъядерных параличей взора»).

Как используется в описании и формуле изобретения, формы единственного числа включают множественное число, если контекст явно не диктует иное. Например, термин «клетка» включает множество клеток, включая их смеси. Если специально не указано или не очевидно из контекста, как используется в настоящем документе, термин «или» следует понимать как включающий. Термин «включая» используется в настоящем документе для обозначения и используется взаимозаменяемо с фразой «включая, но не ограничиваясь этим».

Используемый в настоящем документе термин «содержащий» или «содержит» предназначен для обозначения того, что композиции и способы включают перечисленные элементы, но не исключают другие. «Состоящий по существу из», когда используется для определения композиций и способов, означает исключение других элементов, имеющих какое-либо существенное значение для комбинации для заявленной цели. Таким образом, композиция, состоящая по существу из элементов, как определено в настоящем документе, не исключает следовых примесей из способа выделения и очистки и фармацевтически приемлемых носителей, таких как солевой раствор с фосфатным буфером, консерванты и тому подобное. «Состоит из» означает исключение более чем следовых элементов других ингредиентов и существенных стадий способа введения композиций по настоящему изобретению или стадий способа получения композиции или достижения желаемого результата. Варианты осуществления, определенные каждым из этих переходных терминов, входят в объем настоящего изобретения. Использование термина «содержащий» в настоящем документе предназначено для охвата «состоящий по существу из» и «состоящий из».

Термины «субъект», «индивидуум» или «пациент» используются в настоящем документе взаимозаменяемо и относятся к позвоночному, такому как млекопитающее. Млекопитающие включают, но не ограничиваются ими, мышей, крыс, кроликов, обезьян, крупный рогатый скот, овец, свиней, собак, кошек, сельскохозяйственных животных, спортивных животных, домашних животных, лошадей, приматов и людей. В одном варианте осуществления, млекопитающие включают лошадей, собак и кошек. В некоторых вариантах осуществления, млекопитающим является человек, например, человек, страдающий определенным заболеванием или нарушением, таким как болезнь Гоше (например, GD-3) или болезнь Ниманна-Пика типа C.

«Введение» определено в настоящем документе как средство предоставления агента или композиции, содержащей агент, субъекту таким образом, чтобы агент находился внутри тела субъекта. Такое введение может осуществляться любым путем, включая, без ограничений, пероральный, трансдермальный (например, вагинальный, ректальный, перорально-слизистый), путем инъекции (например, подкожный, внутривенный, парентеральный, внутрибрюшинный, в ЦНС) или путем ингаляции (например, пероральный или назальный). Разумеется, фармацевтические препараты выпускаются в формах, подходящих для каждого пути введения.

«Лечить» или «лечение» заболевания обычно включает: (1) ингибирование заболевания, т.е. остановку или уменьшение развития заболевания или его клинических симптомов; и/или (2) облегчение заболевания, т.е. вызывание регресса заболевания или его клинических симптомов.

Используемые в настоящем документе термины «лечить» и «лечение» также относятся либо к обращению надъядерного паралича взора, либо к стабилизации надъядерного паралича взора. Это связано с тем, что заболевания и нарушения, описанные в настоящем документе, являются прогрессирующими нарушениями - в отсутствие лечения надъядерный паралич взора будет продолжать ухудшаться до полного пареза (т.е. паралича). Например, в начале болезни у пациента могут наблюдаться замедленные или заторможенные быстрые скачкообразные движения глаз, но по мере прогрессирования заболевания у пациентов может развиться полное отсутствие быстрых скачкообразных движений. Таким образом, лечение включает в себя как замедление этого прогрессирующего ухудшения (например, стабилизацию), так и обращение этого прогрессирующего ухудшения (например, улучшение).

«Профилактика» или «предотвращение» заболевания обычно включает предотвращение развития клинических симптомов заболевания у пациента, который может быть предрасположен к заболеванию, но еще не испытывает или не проявляет симптомов заболевания.

Используемые в настоящем документе термины «предотвращение» или «профилактика» также включают профилактику развития надъядерного паралича взора у пациента, у которого есть подозрение или диагностировано заболевание или нарушение, описанное в настоящем документе. Поскольку заболевания и нарушения, описанные в настоящем документе, являются прогрессирующими нарушениями, различные признаки и симптомы могут проявляться прогрессивно, по мере развития болезни. Так, например, пациенту может быть поставлен диагноз GD-3 или NPC до того, как начнется развитие надъядерного паралича взора. У такого пациента способы лечения, описанные в настоящем документе, могут быть эффективными для предотвращения развития надъядерного паралича взора.

Термин «парез» является синонимом «паралича» и включает любую степень потери двигательной функции одной или нескольких скелетных мышц. Таким образом, в настоящем документе термин «парез» охватывает как полный парез, то есть полный паралич, так и частичный парез. Полный парез означает, что мышца или группа мышц, например, экстраокулярные мышцы, утратили способность сокращаться. Таким образом, пораженный глаз или глаза могут быть не в состоянии двигаться. Частичный парез может проявляться как заторможенность движений, замедление движений или другие дефекты движений. Они могут включать потерю диапазона движений. Применительно к быстрым скачкообразным движениям это может включать ингибирование инициирования быстрых скачкообразных движений (например, в ответ на стимулы), изменения частоты быстрых скачкообразных движений, изменения пиковой скорости быстрых скачкообразных движений, изменения амплитуды быстрых скачкообразных движений, изменения задержки между быстрыми скачкообразными движениями и/или потери способности удерживать взгляд или переводить взгляд. В настоящем документе, в некоторых вариантах осуществления, парез включает офтальмопарез и/или офтальмоплегию. Таким образом, этот термин охватывает как слабость, так и паралич экстраокулярных мышц. Экстраокулярные мышцы включают любую одну или несколько из верхних прямых, нижних, средних, боковых, нижних косых и верхних косых мышц глаза. Слабость и/или паралич могут включать в себя одно или несколько из горизонтальных движений, вертикальных движений или вращательных движений.

Термин «страдающий», если он относится к термину «лечение», относится к пациенту или человеку, у которого было диагностировано заболевание. Термин «страдающий», если он относится к термину «профилактика», относится к пациенту или человеку, который предрасположен к заболеванию. Пациента также можно отнести к категории «подверженных риску страдания» заболеванием из-за наличия в анамнезе болезни в его семейном анамнезе, или из-за наличия генетических мутаций, связанных с заболеванием. У пациента, подверженного риску заболевания, еще не развиваются все или некоторые из характерных патологий заболевания.

«Эффективное количество» или «терапевтически эффективное количество» является количеством, достаточным для достижения благоприятных или желаемых результатов. Эффективное количество можно вводить за одно или несколько введений, применений или дозировок. Такая доставка зависит от ряда переменных, включая период времени, в течение которого должна использоваться индивидуальная дозированная форма, биодоступность терапевтического агента и путь введения. Однако понятно, что конкретные уровни доз терапевтических агентов по настоящему изобретению для любого конкретного субъекта зависят от множества факторов, включая, например, активность конкретного применяемого соединения, возраст, массу тела, общее состояние здоровья, пол и диету субъекта, время введения, скорость выведения, комбинацию лекарственных средств и тяжесть конкретного нарушения, подвергаемого лечению, и форму введения. Лечебные дозировки обычно можно титровать для оптимизации безопасности и эффективности. Как правило, взаимосвязь между дозой и эффектом, полученная при испытаниях in vitro и/или in vivo, первоначально может предоставить полезные рекомендации по правильным дозам для введения пациенту. Обычно желательно вводить такое количество соединения, которое эффективно для достижения уровня в сыворотке, соизмеримого с концентрациями, которые оказались эффективными in vitro. Определение этих параметров находится в компетенции специалиста в данной области техники. Эти соображения, а также эффективные составы и процедуры введения хорошо известны в данной области техники и описаны в стандартных учебниках. В соответствии с этим определением, используемым в настоящем документе, термин «терапевтически эффективным количеством» является количество, достаточное для лечения (например, улучшения) одного или нескольких симптомов, ассоциированных с заболеванием или нарушением, описанным в настоящем документе (например, в любом из Способа 1 и след. или Способа 4 и след.) ex vivo, in vitro или in vivo.

В настоящем документе термин «фармацевтически приемлемый эксципиент» охватывает любые стандартные фармацевтические эксципиенты, включая носители, такие как солевой раствор с фосфатным буфером, воду и эмульсии, такие как эмульсии масло/вода или вода/масло и различные типы смачивающих агентов. Фармацевтические композиции также могут включать стабилизаторы и консерванты. Примеры носителей, стабилизаторов и адъювантов см. Remington’s Pharmaceutical Sciences (20^th ed., Mack Publishing Co., 2000).

Используемый в настоящем документе термин «пролекарство» означает фармакологическое производное исходной молекулы лекарственного средства, которое требует биотрансформации, спонтанной или ферментативной, в организме, для высвобождения активного лекарственного средства. Например, пролекарствами являются вариации или производные соединения хинуклидина, описанного в настоящем документе, которые имеют группы, расщепляемые при определенных метаболических условиях, которые, при расщеплении, превращаются в соединение хинуклидина, описанное в настоящем документе, например, соединение формулы I. Такие пролекарства затем фармацевтически активны in vivo, когда они подвергаются сольволизу в физиологических условиях или подвергаются ферментативной деградации. Соединения-пролекарства в настоящем документе могут называться одинарными, двойными, тройными и т.д., в зависимости от количества стадий биопревращения, необходимых для высвобождения активного лекарственного средства в организме, и количества функциональных групп, присутствующих в форме предшественника. Формы пролекарств часто обладают преимуществами растворимости, тканевой совместимости или замедленного высвобождения в организме млекопитающих.

Пролекарства, широко известные в данной области техники, включают хорошо известные производные кислот, такие как, например, сложные эфиры, полученные реакцией кислых соединений с подходящим спиртом, амиды, полученные реакцией кислых соединений с амином и основными группами, которые вступают в реакцию с образованием производного ацилированного основания. Другие производные пролекарства могут быть объединены с другими признаками, описанными в настоящем документе, для повышения биодоступности. Таким образом, специалисты в данной области техники поймут, что некоторые из описанных здесь соединений, имеющие, например, свободные амино- или гидроксигруппы, могут быть превращены в пролекарства. Пролекарства включают соединения, имеющие аминокислотный остаток, или полипептидную цепь из двух или нескольких (например, двух, трех или четырех) аминокислотных остатков, которые ковалентно связаны через пептидные связи со свободными группами амино, гидрокси или карбоновой кислоты описанных здесь соединений. Аминокислотные остатки включают 20 встречающихся в природе аминокислот, обычно обозначаемых трехбуквенными символами, а также включают 4-гидроксипролин, гидроксилизин, демозин, изодемозин, 3-метилгистидин, норвалин, бета-аланин, гамма-аминомасляную кислоту, цитруллин, гомоцистеин, гомосерин, орнитин и метионинсульфон. Пролекарства также включают соединения, имеющие группу карбоната, карбамата, амида или алкилового эфира, ковалентно связанную с любым из вышеуказанных заместителей, описанных в настоящем документе.

Используемый в настоящем документе термин «фармацевтически приемлемая соль» означает фармацевтически приемлемую кислотно-аддитивную соль или фармацевтически приемлемую основно-аддитивную соль описанного соединения, которую можно вводить без каких-либо конечного существенных нежелательных биологических эффектов или любого конечного вредного взаимодействия с любым другим компонентом фармацевтической композиции, в которой она может содержаться.

В настоящем документе, термин «C_1-6-алкил» означает насыщенный или разветвленный свободный радикал, состоящий по существу из 1-6 атомов углерода и соответствующего количества атомов водорода. Типовые C_1-6-алкильные группы включают метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил и изобутил. Другие C_1-6-алкильные группы будут очевидны специалисту в данной области техники, учитывая преимущество настоящего описания. Термины «C_1-3-алкил», «C_1-4-алкил» и т.д. имеют эквивалентные значения, т.е., насыщенный линейный или разветвленный свободный радикал, состоящий по существу из 1-3 (или 4) атомов углерода и соответствующего числа атомов водород.

В настоящем документе, термин «C_2-6-алкенил» означает ненасыщенный линейный или разветвленный свободный радикал, состоящий, по существу, из 2-6 атомов углерода и соответствующего количества атомов водорода, причем свободный радикал содержит, по меньшей мере, одну двойную связь углерод-углерод. Типовые C_2-6-алкенильные группы включают этенил, проп-1-енил, проп-2-енил, изопропенил, бут-1-енил, 2-метилпроп-1-енил и 2-метил-проп-2-енил. Другие C_2-6-алкенильные группы будут очевидны специалистам в данной области техники, учитывая преимущество настоящего описания.

В настоящем документе, термин «C_2-6-алкинил» означает ненасыщенный линейный или разветвленный свободный радикал, состоящий, по существу, из 2-6 атомов углерода и соответствующего количества атомов водорода, причем свободный радикал содержит, по меньшей мере, одну тройную связь углерод-углерод. Типовые C_2-6-алкинильные группы включают этинил, проп-1-инил, проп-2-инил, бут-1-инил и 3-метилбут-1-инил. Другие C_2-6-алкинильные группы будут очевидны специалистам в данной области техники, учитывая преимущество настоящего описания.

В настоящем документе, термин «C_1-6-алкилокси» означает насыщенный линейный или разветвленный свободный радикал, состоящий по существу из 1-6 атомов углерода (и соответствующего количества атомов водорода) и атома кислорода. C_1-6-алкилоксигруппа присоединена через атом кислорода. Типовые C_1-6-алкилоксигруппы включают метилокси, этилокси, н-пропилокси, изопропилокси, н-бутилокси и изобутилокси. Другие C_1-6-алкилоксигруппы будут очевидны специалистам в данной области техники, учитывая преимущество настоящего описания. Термины «C_1-3-алкилокси», «C_1-4-алкилокси» и подобные имеют эквивалентные значения, т.е. насыщенный линейный или разветвленный свободный радикал, состоящий по существу из 1-3 (или 4) атомов углерода (и соответствующего количества атомов водорода) и атома кислорода, где группа присоединена через атом кислорода.

В настоящем документе, термин «C_2-6-алкенилокси» означает ненасыщенный линейный или разветвленный свободный радикал, состоящий, по существу, из 2-6 атомов углерода (и соответствующего количества атомов водорода) и атома кислорода, причем свободный радикал содержит, по меньшей мере, одну двойную связь углерод-углерод. C_2-6-алкенилоксигруппа присоединена через атом кислорода. Типовой C_2-6-алкенилоксигруппой является этенилокси; другие будут очевидны специалистам в данной области техники, учитывая преимущество настоящего описания.

В настоящем документе термин «C_2-6-алкинилокси» означает ненасыщенный линейный или разветвленный свободный радикал, состоящий, по существу, из 2-6 атомов углерода (и соответствующего количества атомов водорода) и атома кислорода, причем свободный радикал содержит, по меньшей мере, одну тройную связь углерод-углерод. C_2-6-алкенилоксигруппа присоединена через атом кислорода. Типовой C_2-6-алкенилоксигруппой является этинилокси; другие будут очевидны специалистам в данной области техники, учитывая преимущество настоящего описания.

В настоящем документе термин «гетероарил» означает ароматический свободный радикал, содержащий 5 или 6 атомов (т.е. атомы кольца), которые образуют кольцо, где от 1 до 5 атомов кольца являются углеродом, а оставшиеся от 1 до 5 атомов кольца (т.е. гетероатомы кольца) выбраны независимо из группы, состоящей из азота, серы и кислорода. Типовые 5-членные гетероарильные группы включают фурил, тиенил, тиазолил (например, тиазол-2-ил), пиразолил, изотиазолил, оксазолил, изоксазолил, пирролил, триазолил, имидазолил, оксадиазолил и тиадиазолил. Типовые 6-членные гетероарильные группы включают пиридил, пиримидил, пиразинил, пиридазинил, 1,2,4-триазинил, бензоксазолил, бензотиазолил, бензизотиазолил, бензизоксазолил и бензимидазолил. Другие гетероарильные группы будут очевидны специалистам в данной области техники, учитывая преимущество настоящего описания. Обычно гетероарильная группа присоединена к основной структуре через атом углерода. Однако специалисты в данной области поймут, что некоторые другие атомы, например, гетероатомы кольца, могут быть присоединены к основной структуре.

В настоящем документе термин «арил» означает ароматический свободный радикал, содержащий 5 или 6 атомов (т.е. атомов кольца), которые образуют кольцо, где все атомы кольца являются углеродом. Типовой арильной группой является фенильная группа.

В настоящем документе термин «алифатический» означает не ароматическое соединение, содержащее атомы углерода и водорода, например, содержащее от 1 до 9 атомов углерода. Алифатические соединения могут быть линейными или разветвленными, могут содержать одну или несколько кольцевых структур и могут содержать одну или несколько двойных связей углерод-углерод (при условии, что соединение не содержит не насыщенную кольцевую структуру, имеющую ароматический характер). Примеры алифатических соединений включают этан, пропилен, циклобутан и циклогексадиен.

В настоящем документе термины «гало» и «галоген» означают фтор, хлор, бром или йод. Эти термины используются взаимозаменяемо и могут относиться к свободнорадикальной группе галогена или к атому галогена как таковому. Специалисты в данной области техники легко смогут установить идентификацию, с учетом контекста, в котором этот термин используется в настоящем описании.

В настоящем документе термин «циано» означает свободный радикал, имеющий атом углерода, связанный с атомом азота тройной связью. Радикал циано присоединен через атом углерода.

В настоящем документе термин «нитро» означает -NO₂ радикал, который присоединен через атом азота.

В настоящем документе термины «гидрокси» и «гидроксил» означают -ОН радикал, который присоединен через атом кислорода. Термин «тио» означает -SH радикал, который присоединен через атом серы.

В настоящем документе термин «амино» означает свободный радикал, содержащий атом азота и 1 или 2 атома водорода. Таким образом, термин «амино» обычно относится к первичным и вторичным аминам. В этом отношении, как используется в настоящем документе, третичный амин представлен общей формулой RR’N-, где R и R’ являются углеродными радикалами, которые могут быть или не быть идентичными. Тем не менее, термин «амино», как правило, может использоваться в настоящем документе для описания первичного, вторичного или третичного амина, и специалисты в данной области техники легко смогут установить идентификацию, с учетом контекста, в которой этот термин используется в настоящем описании.

В настоящем документе термин «оксо» означает кислородный радикал, который присоединен через двойную связь. Если атом, связанный с этим кислородом, представляет собой атом углерода, связью является двойная связь углерод-кислород, которая может обозначаться как -(C=O)- и может называться кетоном.

Перечисление списка химических групп в любом определении переменной в настоящем документе включает определения этой переменной как любой отдельной группы или комбинации перечисленных групп. Перечисление варианта осуществления для переменной или аспекта в настоящем документе включает этот вариант осуществления в качестве любого отдельного варианта осуществления или в комбинации с любыми другими вариантами осуществления или их частями.

Любые композиции или способы, представленные в настоящем документе, могут быть объединены с одной или несколькими другими композициями и способами, представленными в настоящем документе.

В настоящем документе используются следующие сокращения:

ш широкий сигнал КДИ карбонилдиимидазол ЦНС центральная нервная система д дублет ДАФИ 4',6-диамидино-2-фениоиндол дд дублет дублетов ДМЭ диметоксиэтан DMEM модифицированная по Дульбекко среда Игла ДМСО-d6 диметилсульфоксид-d6 ДМФ диметилформамид ДНК деоксирибонуклеиновая кислота DTBZ дигидротетрабеназин Carbon-11 ЭДТК этилендиаминтетрауксусная кислота ELISA ферментный иммуносорбентный анализ Et₂O диэтиловый эфир EtMgBr бромид этилмагния EtOAc этилацетат GL1 глюкозилцерамид (GlcCer) GM1 моносиалотетрагексозилганглиозид GM3 моносиалодигексозилганглиозид GSL гликосфинголипид H&E окрашивание гематоксилином и эозином ВЭЖХ высокого давления/высокоэффективная жидкостная хроматография HSA сывороточный альбумин человека ИПС изопропиловый спирт J константа сочетания ЖХМС жидкостная хромато-масс-спектрометрия м мультиплет ч./млн. части на миллион rHA рекомбинантный альбумин человека с синглет ТБМЭ трет-бутилметиловый эфир ТГФ тетрагидрофуран Tris трис(гидроксиметил)аминометан TWEEN20 Polysorbate 20 TWEEN80 Polysorbate 80 WT дикий тип УЖХМС ультраэффективная жидкостная хромато-масс-спектрометрия

Соединения

Настоящее описание относится к соединениям хинуклидина для использования в терапевтических способах, относящихся к лечению или профилактике заболеваний и нарушений, обсуждаемых в настоящем документе. Во всех своих различных аспектах изобретение относится к соединению хинуклидина (Соединение 1) согласно формуле (I),

(I)

или его фармацевтически приемлемой соли или пролекарству, где:

R¹ выбирают из водорода, галогена (например, фтора), циано, нитро, гидрокси, тио, амино, C_1-6-алкила (например, метила или этила), C_2-6-алкенила, C_2-6-алкинила, C_1-6-алкилокси, C_2-6-алкенилокси и C_2-6-алкинилокси, где указанный алкил, алкенил, алкинил, алкилокси, алкенилокси или алкинилокси необязательно замещен одной или несколькими (например, 1, 2 или 3) группами, выбранными из галогена, циано, нитро, гидрокси, тио или амино;

R² и R³ независимо выбирают из C_1-3-алкила, необязательно замещенного одним или несколькими (например, 1, 2 или 3) галогенами, или R² и R³ вместе образуют циклопропильную или циклобутильную группу, необязательно замещенную одним или несколькими (например, 1 или 2) галогенами;

R⁴, R⁵ и R⁶ каждый независимо выбирают из водорода, галогена, нитро, гидрокси, тио, амино, C_1-6-алкила и C_1-6-алкилокси, где указанный алкил или алкилокси необязательно замещен одним или несколькими (например, 1, 2 или 3) группами, выбранными из галогена, гидрокси, циано и C_1-6-алкилокси; и

A является 5- или 6-членной арильной или гетеоарильной группой (например, фенилом или тиазолилом), необязательно замещенной 1, 2 или 3 группами, независимо выбранными из галогена, гидрокси, тио, амино, нитро, C_1-6алкокси или C_1-6алкила.

В других вариантах осуществления любых аспектов настоящего описания, настоящее описание дополнительно относится к соединениям следующим образом:

1.1 Соединение 1, где R¹ выбирают из водорода, галогена, циано, нитро, гидрокси, тио, амино, C_1-6-алкила, C_1-6-алкилокси, где указанный алкил или алкилокси необязательно замещен одной или несколькими (например, 1, 2 или 3) группами, выбранными из галогена, циано, нитро, гидрокси, тио или амино;

1.2 Соединение 1, где R¹ выбирают из водорода, галогена, C_1-6-алкила, C_1-6-алкилокси, где указанный алкил или алкилокси необязательно замещен одной или несколькими (например, 1, 2 или 3) группами, выбранными из галогена, циано, нитро, гидрокси, тио или амино;

1.3 Соединение 1, где R¹ выбирают из водорода, галогена, C_1-4-алкила, C_1-4-алкилокси, где указанный алкил или алкилокси необязательно замещен одной или несколькими (например, 1, 2 или 3) группами, выбранными из галогена, циано, нитро, гидрокси, тио или амино;

1.4 Соединение 1, где R¹ выбирают из водорода, галогена, C_1-4-алкила, C_1-4-алкилокси, где указанный алкил или алкилокси необязательно замещен одной или несколькими (например, 1, 2 или 3, или 1 или 2) группами, выбранными из циано, нитро, гидрокси, тио или амино;

1.5 Соединение 1, где R¹ выбирают из водорода, галогена и C_1-4-алкила, где указанный алкил необязательно замещен одной или несколькими (например, 1 или 2) группами, выбранными из галогена, гидрокси, тио или амино;

1.6 Соединение 1, где R¹ выбирают из водорода, фтора, метила и этила, где указанный метил или этил необязательно замещен 1 или 2 группами, выбранными из галогена, гидрокси, тио или амино;

1.7 Соединение 1, где R¹ выбирают из водорода и метила, где указанный метил необязательно замещен 1 или 2 галогенами;

1.8 Соединение 1, где R¹ является водородом;

1.9 Соединение 1, или любое из 1.1-1.8, где R¹ не присоединен к атому азота хинуклидиновой группы;

1.10 Соединение 1, или любое из 1.1-1.9, где R² и R³ каждый независимо является C_1-3-алкилом, необязательно замещенным одним или несколькими (например, 1, 2 или 3) галогенами;

1.11 Соединение 1.11, где R² и R³ каждый независимо является метилом или этилом, необязательно замещенным 1 или 2 галогенами;

1.12 Соединение 1.11, где R² и R³ каждый независимо выбирают из метила и этила, необязательно замещенного одним или несколькими фторами, например, 1, 2 или 4 фторами;

1.13 Соединение 1.11, где R² и R³ каждый независимо является метилом, замещенным 0, 1, 2 или 3 фторами;

1.14 Соединение 1.11, где R² и R³ каждый является метилом или трифторметилом;

1.15 Соединение 1.11, R² и R³ каждый является метилом;

1.16 Соединение 1, или любое из 1.1-1.9, где R² и R³ вместе образуют циклопропильную или циклобутильную группу, необязательно замещенную одним или несколькими (например, 1 или 2) галогенами;

1.17 Соединение 1.16, где R² и R³ вместе образуют циклопропильную группу;

1.18 Соединение 1 или любое из 1.1-1.9, где R² и R³ каждый является метилом, или R² и R³ вместе образуют циклопропильную группу;

1.19 Соединение 1, или любое из 1.1-1.9, где R⁴, R⁵ и R⁶ каждый независимо выбирают из водорода, галогена, C_1-6-алкила и C_1-6-алкилокси, где указанный алкил или алкилокси необязательно замещен одной или несколькими (например, 1, 2 или 3) группами, выбранными из галогена, гидрокси, циано и C_1-6-алкилокси;

1.20 Соединение 1, или любое из 1.1-1.9, где R⁴, R⁵ и R⁶ каждый независимо выбирают из водорода, галогена, C_1-3-алкила и C_1-3-алкилокси, где указанный алкил или алкилокси необязательно замещен одной или несколькими (например, 1, 2 или 3) группами, выбранными из галогена, гидрокси, циано и C_1-3-алкилокси;

1.21 Соединение 1.19, где R⁴, R⁵ и R⁶ каждый независимо выбирают из водорода, галогена, C_1-3-алкила и C_1-3-алкилокси, где указанный алкил или алкилокси необязательно замещен одной или несколькими (например, 1, 2 или 3) группами, выбранными из галогена, циано и C_1-3-алкилокси;

1.22 Соединение 1.19, где R⁴, R⁵ и R⁶ каждый независимо выбирают из водорода, галогена, C_1-3-алкила и C_1-3-алкилокси, где указанный алкил или алкилокси необязательно замещен одной или несколькими (например, 1, 2 или 3) группами, выбранными из галогена и C_1-3-алкилокси;

1.23 Соединение 1.19, где R⁴, R⁵ и R⁶ каждый независимо выбирают из галогена, C_1-3-алкила и C_1-3-алкилокси, где указанный алкил или алкилокси необязательно замещен одной или несколькими (например, 1, 2 или 3) группами, выбранными из галогена и C_1-3-алкилокси;

1.24 Соединение 1, или любое из 1.19-1.23, R⁴ выбирают из водорода, галогена, C_1-3-алкила и C_1-3-алкилокси, где указанный алкил или алкилокси необязательно замещен одной или несколькими (например, 1, 2 или 3) группами, выбранными из галогена и C_1-3-алкилокси;

1.25 Соединение 1.24, R⁴ выбирают из галогена (например, фтора), C_1-3-алкила (например, метила) и C_1-3-алкилокси (например, метокси или этокси), где указанный алкил или алкилокси необязательно замещен одной или несколькими (например, 1, 2 или 3) группами, выбранными из галогена и C_1-3-алкилокси (например, метокси или этокси);

1.26 Соединение 1.26, R⁴ выбирают из галогена (например, фтора) и C_1-3-алкилокси (например, метокси или этокси), где указанный алкилокси необязательно замещен одной или несколькими (например, 1, 2 или 3) группами, выбранными из галогена и C_1-3-алкилокси (например, метокси или этокси);

1.27 Соединение 1.26, R⁴ является фтором или C_1-3-алкилокси (например, этокси), необязательно замещенным одной или несколькими (например, 1, 2 или 3) группами, выбранными из галогена и C_1-3-алкилокси (например, метокси);

1.28 Соединение 1.26, где R⁴ является фтором или этокси, необязательно замещенным одним или несколькими (например, 1, 2 или 3) C_1-3-алкилокси (например, метокси);

1.29 Соединение 1, или любое из 1.19-1.28, где R⁶ является водородом;

1.30 Соединение 1, или любое из 1.19-1.28, где R⁵ и R⁶ каждый является водородом;

1.31 Соединение 1, или любое из 1.19-1.28, R⁵ и R⁶ каждый является водородом и R⁴ является фтором или C_1-3-алкилокси (например, этокси), необязательно замещенным одной или несколькими (например, 1, 2 или 3) группами, выбранными из галогена и C_1-3-алкилокси (например, метокси);

1.32 Соединение 1.31, где R⁵ и R⁶ каждый является водородом, и R⁴ является фтором или этокси, необязательно замещенным одним или несколькими (например, 1, 2 или 3) C_1-3-алкилокси (например, метокси);

1.33 Соединение 1.32, где R⁵ и R⁶ каждый является водородом, и R⁴ является фтором или этокси, замещенным метокси (например, 2-метоксиэтокси);

1.34 Соединение 1.32, где R⁴ является фтором или 2-метоксиэтокси;

1.35 Соединение 1, или любое из 1.1-1.34, где, по меньшей мере, один из R⁴, R⁵ и R⁶ не является водородом;

1.36 Соединение 1, или любое из 1.1-1.35, где R⁶ является водородом, и R⁴ и R⁵ расположены в 2, 4 или 6 положениях фенильного кольца, к которому они присоединены (т.е., орто или пара к заместителю А);

1.37 Соединение 1, или любое из 1.1-1.35, где R⁶ является водородом и R⁴ и R⁵ независимо расположены в 2 и 3 (т.е., соседних орто и мета), 3 и 4 (т.е. соседних мета и пара), или 3 и 5 положениях (т.е., мета) фенильного кольца к которому они присоединены (по отношению к заместителю А);

1.38 Соединение 1, или любое из 1.1-1.35, где R⁶ является водородом и R⁴ и R⁵ расположены в 3 и 5 положениях (т.е., мета) фенильного кольца к которому они присоединены (по отношению к заместителю А);

1.39 Соединение 1, или любое из 1.1-1.35, где R⁵ и R⁶ являются водородом и R⁴ расположен в 2, 3 или 4 положении фенильного кольца, к которому он присоединен (например, орто, мета или пара к заместителю А);

1.40 Соединение 1, или любое из 1.1-1.35, где R⁵ и R⁶ являются водородом и R⁴ расположен в 2 или 4 положении фенильного кольца к которому он присоединен (например, орто или пара к заместителю А);

1.41 Соединение 1, или любое из 1.1-1.35, где R⁵ и R⁶ являются водородом и R⁴ расположен в 4 положении фенильного кольца к которому он присоединен (например, пара к заместителю А);

1.42 Соединение 1, или любое из 1.1-1.35, где ни один из R⁴, R⁵ и R⁶ не является водородом, и каждый из R⁴, R⁵ и R⁶ независимо находятся в 2, 4 или 6 положениях фенильного кольца, к которому они присоединены (т.е., орто или пара к заместителю А);

1.43 Соединение 1, или любое из 1.1-1.42, где R⁴ расположен в 4-положении фенильного кольца, к которому он присоединен (т.е., пара к заместителю А);

1.44 Соединение 1, или любое из 1.1-1.43, где A является 6-членной арильной группой, 5-членной гетероарильной группой (например, содержащей 1, 2 или 3 гетероатома в гетероарильном кольце, выбранном из N, O и S), или 6-членной гетероарильной группой (например, содержащей 1, 2 или 3 атома азота в гетероарильном кольце);

1.45 Соединение 1.44, где A является 6-членной арильной группой или 5-членной гетероарильной группой (например, содержащей 1, 2 или 3 гетероатома в гетероарильном кольце, выбранном из N, O и S), необязательно, где 5-членная гетероарильная группа содержит 1 или 2 гетероатома, выбранных из N и S (например, один N и/или один S);

1.46 Соединение 1.44 или 1.45, где A выбирают из группы, состоящей из фенила, фурила, тиенила, тиазолила, пиразолила, изотиазолила, оксазолила, изоксазолила, пирролила, триазолила, имидазолила, оксадиазолила и тиадиазолила;

1.47 Соединение 1.46, где A выбирают из группы, состоящей из фенила, тиенила, тиазолила, пирролила и имидазолила;

1.48 Соединение 1.46, где A выбирают из группы, состоящей из фенила и тиазолила, например, 2-тиазол-4-ила или 4-тиазол-2-ила;

1.49 Соединение 1, или любое из 1.1-1.48, где A не замещен;

1.50 Соединение 1, или любое из 1.1-1.48, где A замещен одной или несколькими (например, 1, 2 или 3) группами, независимо выбранными из галогена, гидрокси, тио, амино, нитро, C_1-6алкокси и C_1-6алкила (например, метила);

1.51 Соединение 1.50, где A является тиазолилом, замещенным одним галогеном (например, фтором), или C_1-6алкилом (например, метилом);

1.52 Соединение 1.50, где A является фенилом, замещенным 1, 2 или 3 группами, независимо выбранными из галогена (например, фтора) и C_1-6алкила (например, метила);

1.53 Соединение 1.52, где A является фенилом, замещенным 1 или 2 фторами или метильными группами;

1.54 Соединение 1, или любое из 1.1-1.53 где две группы, присоединенные к заместителю А (т.е., фенильное кольцо (-(C₆H₂R⁴R⁵R⁶)) и -C(R²R³)- группа), находятся в 1,2-, 1,3- или 1,4-отношении друг к другу (т.е., орто, мета или пара);

1.55 Соединение 1.54, где две группы, присоединенные к заместителю А, находятся в 1,3-отношении друг к другу (т.е., мета);

1.56 Соединение 1.54, где две группы, присоединенные к заместителю А находятся в 1,4-отношении друг к другу (т.е., пара);

1.57 Любые из соединений 1.54-1.56, где A заместителем является 5-членная гетероарильная группа и, по меньшей мере, одна из двух групп, присоединенных к заместителю А (т.е., фенильное кольцо (-(C₆H₂R⁴R⁵R⁶)) и -C(R²R³)-группа), присоединена к атому углерода гетероарильного кольца, необязательно, где оде такие группы присоединены к атомам углерода гетероарильного кольца;

1.58 Соединение 1, или любое из 1.1-1.57, где соединение формулы I может быть представлено одной или несколькими следующими субструктурами:

1.59 Соединение 1, или любое из 1.1-1.58, где соединение формулы I или любое из формул II - XII, имеет (S) конфигурацию;

1.60 Соединение 1, или любое из 1.1-1.58, где соединение формулы I или любое из формул II - XII, имеет (R) конфигурацию;

1.61 Соединение 1, или любое из 1.1-1.60, где соединение формулы I или любое из формул II - XII, имеет энантиомерный избыток (например, (S) конфигурации), по меньшей мере, 90%, например, по меньшей мере, 92%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 99,5% или 99.9%;

1.62 Соединение 1, или любое из 1.1-1.58, где соединение формулы I или любое из формул II - XII, является рацемическим (т.е., приблизительно в 50:50 отношении энантиомеров), или является смесью энантиомеров с некоторым другим отношением (например, менее 50:50 или более 50:50);

1.63 Соединение 1, или любое из 1.1-1.62, где соединение формулы I выбирают из группы, состоящей из:

Соединение № Соединение 1 Хинуклидин-3-ил (2-(4'-фтор[1,1'-бифенил]-3-ил)пропан-2-ил)карбамат 2 (S)-хинуклидин-3-ил (2-(2-(4-фторфенил)тиазол-4-ил)пропан-2-ил)карбамат 3 (S)-хинуклидин-3-ил (2-(4’-(2-метоксиэтокси)-[1,1’-бифенил]-4-ил)пропан-2-ил)карбамат 4 1-азабицикло[2.2.2]окт-3-ил [2-(бифенил-3-ил)пропан-2-ил]карбамат 5 (S)-хинуклидин-3-ил 2-(бифенил-4-ил)пропан-2-илкарбамат 6 Хинуклидин-3-ил 1-(бифенил-4-ил)циклопропилкарбамат 7 (S)-хинуклидин-3-ил 1-(4'-фторбифенил-4-ил)циклопропилкарбамат 8 (S)-1-азабицикло[2.2.2]окт-3-ил [1-(2',4'-дифторбифенил-4-ил)циклопропил]карбамат 9 1-азабицикло[2.2.2]окт-3-ил [1-(4'-метоксибифенил-4-ил)циклопропил]карбамат 10 Хинуклидин-3-ил 2-(5-(4-фторфенил)тиофен-3-ил)пропан-2-илкарбамат 11 (S)-хинуклидин-3-ил 2-(3-(4-фторфенил)изотиазол-5-ил)пропан-2-илкарбамат 12 (S)-хинуклидин-3-ил 2-(4-(4-фторфенил)тиазол-2-ил)пропан-2-илкарбамат 13 Хинуклидин-3-ил (2-(4'-(2-метоксиэтокси)-[1,1'-бифенил]-4-ил)пропан-2-ил)карбамат 14 (S)-хинуклидин-3-ил (2-(3'-(2-метоксиэтокси)-[1,1'-бифенил]-4-ил)пропан-2-ил)карбамат 15 Хинуклидин-3-ил (2-(4'-(2-метоксиэтокси)-[1,1'-бифенил]-3-ил)пропан-2-ил)карбамат 16 Хинуклидин-3-ил (2-(4'-(3-метоксипропокси)-[1,1'-бифенил]-4-ил)пропан-2-ил)карбамат 17 Хинуклидин-3-ил (2-(4'-(гидроксиметил)-[1,1'-бифенил]-4-ил)пропан-2-ил)карбамат 18 Хинуклидин-3-ил (2-(4'-(2-гидроксиэтил)-[1,1'-бифенил]-4-ил)пропан-2-ил)карбамат 19 Хинуклидин-3-ил (2-(2-(4-(3-метоксипропокси)фенил)тиазол-4-ил)пропан-2-ил)карбамат 20 Хинуклидин-3-ил (2-(2-(4-(2-метоксиэтокси)фенил)тиазол-4-ил)пропан-2-ил)карбамат 21 Хинуклидин-3-ил 2-(5-(4-(2-метоксиэтокси)фенил)пиридин-2-ил)пропан-2-илкарбамат 22 Хинуклидин-3-ил (2-(4'-(3-цианопропокси)-[1,1'-бифенил]-4-ил)пропан-2-ил)карбамат 23 Хинуклидин-3-ил (2-(4'-(цианометокси)-[1,1'-бифенил]-4-ил)пропан-2-ил)карбамат

1.64 Соединение 1, или любое из 1.1-1.63, где соединение выбирают из хинуклидин-3-ила (2-(4'-фтор-[1,1'-бифенил]-3-ил)пропан-2-ил)карбамата, (S)-хинуклидин-3-ила (2-(2-(4-фторфенил)тиазол-4-ил)пропан-2-ил)карбамата и (S)-хинуклидин-3-ила (2-(4’-(2-метоксиэтокси)-[1,1’-бифенил]-4-ил)пропан-2-ил)карбамата;

1.65 Соединение 1, или любое из 1.1-1.63, где соединением является хинуклидин-3-ил (2-(4'-фтор-[1,1'-бифенил]-3-ил)пропан-2-ил)карбамат;

1.66 Соединение 1 или любое из 1.1-1.63, где соединением является хинуклидин-3-ил (2-(2-(4-фторфенил)тиазол-4-ил)пропан-2-ил)карбамат, например, (S)-хинуклидин-3-ил (2-(2-(4-фторфенил)тиазол-4-ил)пропан-2-ил)карбамат;

1.67 Соединение 1, или любое из 1.1-1.66, где соединение формулы I, или любое из II - XII, имеет форму свободного основания;

1.68 Соединение 1, или любое из 1.1-1.66, где соединение формулы I, или любое из II - XII, имеет форму фармацевтически приемлемой соли;

1.69 Соединение 1.68, где указанная солевая форма является формой кислотно-аддитивной соли;

1.70 Соединение 1.69, где указанная форма кислотно-аддитивной соли является солью, выбранной из гидрохлорида, гидробромида, гидроиодида, нитрата, сульфата, бисульфата, фосфата, кислого фосфата, ацетата, лактата, цитрата, кислого цитрата, тартрата, битартрата, сукцината, гидроксисукцинката, малата, малеата, фумарата, глюконата, сахарата, бензоата, метансульфоната и памоата;

1.71 Соединение 1.70, где форму кислотно-аддитивной соли выбирают из гидрохлорида, гидроксисукцината (например, 2-гидроксисукцината) и малата;

1.72 Соединение 1.68, где указанной формой соли является основно-аддитивная форма соли;

1.73 Соединение 1, или любое из 1.1-1.72, где соединением является (S)-хинуклидин-3-ил (2-(2-(4-фторфенил)тиазол-4-ил)пропан-2-ил)карбамат в форме малата;

1.74 Соединение 1, или любое из 1.1-1.73, где соединение формулы I, или любое из II - XII, в форме пролекарства, как описано в настоящем документе;

1.75 Соединение 1, или любое из 1.1-1.74, где соединение формулы I, или любое из II - XII, имеет форму гидрата, сольвата и/или полиморфа.

Соли

Описанные соединения, например, любое из Соединений 1 или 1.1-1.75, которые являются основными по природе, обычно способны образовывать большое количество различных солей с различными неорганическими и/или органическими кислотами. Хотя такие соли обычно фармацевтически приемлемы для введения животным и людям, на практике часто желательно сначала выделить соединение из реакционной смеси в виде фармацевтически неприемлемой соли, а затем просто превратить последнюю обратно в соединение в виде свободного основания путем обработки щелочным реагентом с последующим превращением свободного основания в фармацевтически приемлемую кислотно-аддитивную соль. Кислотно-аддитивные соли основных соединений могут быть легко получены с использованием обычных методик, например, путем обработки основного соединения по существу эквивалентным количеством выбранной минеральной или органической кислоты в среде водного растворителя или в подходящем органическом растворителе, таком как, например, метанол или этанол. После осторожного выпаривания растворителя получают желаемую твердую соль. Описанные соединения, которые положительно заряжены, например, содержащие четвертичный аммоний, также могут образовывать соли с анионным компонентом различных неорганических и/или органических кислот.

Кислоты, которые можно использовать для получения фармацевтически приемлемых солей соединения хинуклидина, включают такие, которые могут образовывать нетоксичные кислотно-аддитивные соли, например, соли, содержащие фармакологически приемлемые анионы, такие как хлорид, бромид, йодид, нитрат, сульфат или бисульфат, фосфат или кислый фосфат, ацетат, лактат, цитрат или кислый цитрат, тартрат или битартрат, сукцинат, малат, малеат, фумарат, глюконат, сахарат, бензоат, метансульфонат и памоат [т.е. 1,1'-метиленбис(2-гидрокси-3-нафтоат)].

Описанные соединения, которые являются кислыми по природе, например, соединения, содержащие тиольную группу, обычно способны образовывать большое количество различных солей с различными неорганическими и/или органическими основаниями. Хотя такие соли обычно фармацевтически приемлемы для введения животным и людям, на практике часто бывает желательно сначала выделить соединение из реакционной смеси в виде фармацевтически неприемлемой соли, а затем просто превратить последнюю обратно в соединение свободной кислоты путем обработки кислотным реагентом и затем превратить свободную кислоту в фармацевтически приемлемую основно-аддитивную соль. Эти основно-аддитивные соли могут быть легко получены с использованием обычных методик, например, путем обработки соответствующих кислых соединений водным раствором, содержащим желаемые фармакологически приемлемые катионы, и последующим выпариванием полученного раствора досуха, например, при пониженном давлении. Альтернативно, они также могут быть получены путем смешивания низших алканольных растворов кислых соединений и желаемого алкоксида щелочного металла вместе с последующим выпариванием полученного раствора досуха таким же образом, как и раньше. В любом случае можно использовать стехиометрические количества реагентов, чтобы гарантировать полноту реакции и максимальный выход продукта желаемой твердой соли.

Основания, которые могут быть использованы для получения фармацевтически приемлемых основно-аддитивных солей соединения хинуклидина, включают такие, которые могут образовывать нетоксичные основно-аддитивные соли, например, соли, содержащие фармакологически приемлемые катионы, такие как катионы щелочных металлов (например, калия и натрия), катионы щелочноземельных металлов (например, кальция и магния), аммоний или другие водорастворимые амино-аддитивные соли, такие как N-метилглюкамин (меглумин), низший алканоламмоний и другие подобные основания органических аминов.

В одном варианте осуществления, фармацевтически приемлемой солью является сукцинат. В другом варианте осуществления, фармацевтически приемлемой солью является 2-гидроксисукцинат, например, (S)-2-гидроксисукцинат. В другом варианте осуществления, фармацевтически приемлемой солью является гидрохлорид (т.е. соль с HCl). В другом варианте осуществления, фармацевтически приемлемой солью является малат.

Пролекарства

Настоящее описание дополнительно охватывает пролекарства соединений 1 и 1.1-1.75. Фармацевтически приемлемые пролекарства, описанные в настоящем документе, являются производными соединений хинуклидина, которые могут быть превращены in vivo в соединения хинуклидина, описанные в настоящем документе. Пролекарства, которые сами могут обладать некоторой активностью, становятся фармацевтически активными in vivo, когда они подвергаются, например, сольволизу в физиологических условиях или ферментативной деградации. Способы получения пролекарств соединений, как описано в настоящем документе, будут очевидны специалисту в данной области техники на основе настоящего описания.

В одном варианте осуществления, карбаматная группа соединения хинуклидина модифицирована. Например, карбаматная группа соединения хинуклидина может быть модифицирована добавлением воды и/или одного или двух алифатических спиртов. В этом случае двойная связь углерод-кислород карбаматной группы принимает то, что можно было бы рассматривать как полуацетальную или ацетальную функциональную группу. В одном варианте осуществления, карбаматная группа соединения хинуклидина может быть модифицирована добавлением алифатического диола, такого как 1,2-этандиол.

В одном варианте осуществления одна или несколько гидрокси, тио или аминогрупп в соединении хинуклидина модифицированы. Например, одна или несколько гидрокси, тио и/или аминогрупп в соединении хинуклидина могут быть модифицированы с образованием кислых производных, например, сложных эфиров, сложных тиоэфиров (или тиольных эфиров) и/или амидов. Производные кислоты могут быть образованы, например, взаимодействием соединения хинуклидина, которое содержит одну или несколько гидрокси, тио или аминогрупп, с ацетилирующим агентом. Примеры ацетилирующих агентов включают ангидриды, такие как уксусный ангидрид, хлорангидриды, такие как бензилхлорид, и дикарбонаты, такие как ди-трет-бутилдикарбонат.

Стереохимия

Настоящее описание дополнительно охватывает стереоизомеры и смесь стереоизомеров соединений 1 и 1.1-1.75. Стереоизомеры (например, цис- и транс-изомеры) и все оптические изомеры описанного соединения (например, R- и S-энантиомеры), а также рацемические, диастереомерные и другие смеси таких изомеров входят в объем настоящего описания.

В одном варианте осуществления, хинуклидин-3-ильная группа соединения хинуклидина, как определено в настоящем документе, имеет R-конфигурацию. Соответственно, соединение хинуклидина может быть выбрано из группы, состоящей из соединений формул (Ia) - (XIIa):

и их фармацевтически приемлемых солей и пролекарств.

В другом варианте осуществления, хинуклидин-3-ильная группа соединения хинуклидина, как определено в настоящем документе, имеет S-конфигурацию. Соответственно, соединение хинуклидина может быть выбрано из группы, состоящей из соединений формул (Ib) - (XIIb):

и их фармацевтически приемлемых солей и пролекарств.

В одном варианте осуществления, соединением хинуклидина является соединение формулы (Xb) или его фармацевтически приемлемая соль или пролекарство. В другом варианте осуществления, соединением хинуклидина является соединение формулы (XIIb) или его фармацевтически приемлемая соль или пролекарство.

В одном варианте осуществления, хинуклидин-3-ильная группа соединения хинуклидина, как определено в настоящем документе, существует в смеси изомеров, имеющих R- и S- конфигурации. Например, соединение хинуклидина может быть смесью соединений, выбранных из группы, состоящей из соединений формул (Ia) и (Ib), (IIa) и (IIb), (IIIa) и (IIIb), (IVa) и (IVb), (Va) и (Vb), (VIa) и (VIb), (VIIa) и (VIIb), (VIIIa) и (VIIIb), (IXa) и (IXb), (Xa) и (Xb), (XIa) и (XIb) и (XIIa) и (XIIb) и их фармацевтически приемлемых солей и пролекарства. В одном варианте осуществления, соединение хинуклидина присутствует в виде рацемической смеси, например, R- и S-изомеры хинуклидин-3-ильной группы присутствуют в примерно равных количествах. В другом варианте осуществления, соединение хинуклидина присутствует в виде изомеров, имеющих R- и S-конфигурации, где R- и S-изомеры присутствуют в разных количествах. В одном варианте осуществления, S- изомер присутствует в энантиомерном избытке, по меньшей мере, примерно 5%, 10%, 25%, 40%, 70%, 80%, 90%, 95%, 97%, 98% или 99%, например, примерно 100%. В другом варианте осуществления, R- изомер присутствует в энантиомерном избытке, по меньшей мере, примерно 5%, 10%, 25%, 40%, 70%, 80%, 90%, 95%, 97%, 98% или 99%, например, примерно 100%.

Способы получения энантиообогащенных и/или энантиочувствительных соединений хинуклидина будут очевидны специалисту в данной области техники на основании настоящего описания.

Описанные соединения могут существовать в нескольких таутомерных формах, включая форму енола и имина, форму кето и енамина, геометрические изомеры и их смеси. Таутомеры существуют в виде смесей таутомеров в растворе. В твердой форме обычно преобладает один таутомер. Несмотря на то, что может быть описан один таутомер, все таутомеры входят в объем настоящего описания.

Атропизомеры также входят в объем настоящего описания, Атропизомеры относятся к соединениям, которые могут быть разделены на изомеры с ограниченным вращением.

Другие формы

Настоящее описание также включает гидраты, сольваты и полиморфы соединения 1 и 1.1-1.75. Фармацевтически приемлемые гидраты, сольваты и полиморфы соединений хинуклидина, описанных в настоящем документе, входят в объем настоящего описания. Соединения хинуклидина, описанные в настоящем документе, могут быть в аморфной форме и/или в одной или нескольких кристаллических формах.

Меченые изотопами соединения также входят в объем настоящего описания. В настоящем документе термин «изотопно-меченое соединение» относится к описанному соединению, включая его фармацевтические соли и пролекарства, каждое из которых описано в настоящем документе, в котором один или несколько атомов заменены атомом, имеющим атомную массу или массовое число, отличное от атомной массы или массового числа, обычно встречающегося в природе. Примеры изотопов, которые могут быть включены в описанные соединения, включают изотопы водорода, углерода, азота, кислорода, фосфора, фтора и хлора, такие как ²H, ³H, ¹³C, ¹⁴C, ¹⁵N, ¹⁸O, ¹⁷O, ³¹P, ³²P, ³⁵S, ¹⁸F и ³⁶Cl, соответственно.

Медицинские показания

Соединения хинуклидина и фармацевтические композиции, содержащие их, описанные в настоящем документе, применяют в терапии, в частности, при терапевтическом лечении надъядерных параличей взора, включая горизонтальные и вертикальные парезы саккадических движений глаз, неврологические нарушения, включая слабоумие и нарушения походки у пациента, имеющего болезнь, такую как болезнь Гоше. Субъекты, подлежащие лечению в соответствии со способами, описанными в настоящем документе, включают позвоночных, таких как млекопитающие. В конкретных вариантах осуществления, млекопитающим является пациент-человек.

В первом аспекте, настоящее изобретение представляет способ (Способ 1) лечения или профилактики надъядерных параличей взора, включая горизонтальные и вертикальные парезы саккадических движений глаз, у субъекта, нуждающегося в этом, где способ включает введение субъекту эффективного количества соединения хинуклидина, как описано в настоящем документе, например, соединение формулы I или любой из II-XII, Ia-XIIa или Ib-XIIb, или любое из соединений 1 или 1.1-1.75. Также представлено соединение хинуклидина, как описано в настоящем документе, например, соединение формулы I или любой из II-XII, Ia-XIIa или Ib-XIIb, или любое из соединений 1 или 1.1-1.75, для использования в способе лечения или профилактики надъядерных параличей взора, включая горизонтальные и вертикальные парезы саккадических движений глаз, у нуждающегося в этом субъекта, например, для использования в способе 1, или любом другом из 1.1-1.62. Кроме того, представлено использование соединения хинуклидина, как описано в настоящем документе, например, соединения формулы I или любой из II-XII, Ia-XIIa или Ib-XIIb, или любого из соединений 1 или 1.1-1.75 при производстве лекарственного средства для использования в способе лечения или профилактики надъядерных параличей взора, включая горизонтальные и вертикальные парезы саккадических движений глаз, у субъекта, нуждающегося в этом, например, при производстве лекарственного средства для использования в способе 1, или любом из 1.1-1.62.

В других конкретных вариантах способа 1, в настоящем описании представлен:

1.1 Способ 1, где способ включает введение субъекту эффективного количества соединения формулы I или любой из II-XII, Ia-XIIa или Ib-XIIb, или любого из соединений 1 или любого из 1.1-1.75;

1.2 Способ 1, где способ включает введение субъекту эффективного количества соединения 1 или любого одного или нескольких из соединений 1.1-1.75;

1.3 Способ 1 или любой из 1.1-1.2, где способ включает введение субъекту эффективного количества фармацевтической композиции, содержащей соединение согласно формуле I или любой из II-XII, Ia-XIIa или Ib-XIIb, или любого из Соединений 1 или любого из 1.1-1.75;

1.4 Способ 1 или любой из 1.1-1.2, где способ включает введение субъекту эффективного количества фармацевтической композиции, содержащей соединение 1 или любое одно или несколько из соединений 1.1-1.75;

1.5 Способ 1.3 или 1.4, где фармацевтическая композиция дополнительно содержит, по меньшей мере, один фармацевтически приемлемый эксципиент, как описано в настоящем документе;

1.6 Способ 1 или любой из 1.1-1.5, где способ включает введение фармацевтической дозированной формы, содержащей эффективное количество соединения или эффективное количество фармацевтической композиции;

1.7 Способ 1.6, где дозированной формой является пероральная дозированная форма (например, пилюля, капсула, каплет, таблетка, драже, порошок, гранула, пленка, пастилка или жидкость);

1.8 Способ 1.7, где дозированной формой является жевательная таблетка;

1.9 Способ 1.6, где дозированной формой является парентеральная дозированная форма (например, где фармацевтическая композиция составлена для инъекции);

1.10 Способ 1.9, где инъекция является внутривенной, внутримышечной, интратекальной или подкожной, необязательно, стерильной инъекцией;

1.11 Способ 1.6, где дозированной формой является местная или ректальная дозированная форма;

1.12 Способ 1.6, где дозированной формой является интраназальная дозированная форма (например, аэрозоль);

1.13 Способ 1 или любой из 1.1-1.12, где способ дополнительно включает одновременное введение второго активного агента, например, второго соединения, способного лечить или предотвращать супрануклеарные параличи взора у пациента, нуждающегося в этом, как описано в настоящем документе;

1.14 Способ 1.13, где второй активный агент вводят в той же фармацевтической композиции или дозированной форме, что и соединение хинуклидина;

1.15 Способ 1.13 или 1.14, где вторым активным агентом является ингибитор GCS (например, миглустат или элиглустат);

1.16 Способ 1, или любой из 1.1-1.15, где субъектом является млекопитающее животное;

1.17 Способ 1.16, где субъектом является примат;

1.18 Способ 1.17, где субъектом является человек;

1.19 Способ 1 или любой из 1.1-1.18, где супрануклеарным параличом взора является парез взгляда;

1.20 Способ 1 или любой из 1.1-1.19, где надъядерный паралич взора включает горизонтальный парез саккадических движений глаз, вертикальный парез саккадических движений глаз, ухудшение вестибулоокулярного рефлекса, ухудшение фиксации взгляда, ухудшение горизонтального плавного преследования и/или ухудшение вертикального плавного преследования;

1.21 Способ 1, или любой из 1.1-1.20, где надъядерный паралич взора включает горизонтальный парез саккадических движений глаз;

1.22 Способ 1, или любой из 1.1-1.21, где надъядерный паралич взора включает вертикальный парез саккадических движений глаз;

1.23 Способ 1, или любой из 1.1-1.22, где надъядерный паралич взора является полным парезом (например, параличом);

1.24 Способ 1, или любой из 1.1-1.23, где субъект имеет болезнь Гоше 3 типа;

1.25 Способ 1, или любой из 1.1-1.24, где субъект имеет болезнь Ниманна-Пика типа С;

1.26 Способ 1, или любой из 1.1-1.24, где субъект имеет GM2-ганглиозидоз (например, болезнь Тея-Сакса, болезнь Сандхоффа или вариант AB GM2 ганглиозидоза);

1.27 Способ 1, или любой из 1.1-1.24, где у субъекта диагностирована мутация в гене GBA1;

1.28 Способ 1, или любой из 1.1-1.24, где у субъекта диагностирована мутация в генах NPC1 и/или NPC2;

1.29 Способ 1, или любой из 1.1-1.24, где у субъекта диагностирована мутация в гене HEXA (кодирующем гексозаминидазу A) и/или мутацию в гене HEXB (кодирующем гексозаминидазу B) и/или мутацию в гене GM2A (кодирующем белок-активатор GM2 ганглиозида);

1.30 Способ 1, или любое из 1.1-1.29, где у субъекта диагностирована болезнь Паркинсона;

1.31 Способ 1, или любое из 1.1-1.30, где субъект проходит одновременное лечение ферментозамещающей терапией (ERT), например, с применением глюкоцереброзидазы (например, имиглюцеразы, велаглюцеразы или талиглюцеразы), необязательно, где каждый из таких ферментов является рекомбинантным ферментом;

1.32 Способ 1.31, где субъект проходит одновременное лечение одним или несколькими из имиглюцеразы, велаглюцеразы (например, велаглюцеразы альфа) и талиглюцеразы (например, талиглюцеразы альфа);

1.33 Способ 1.32, где субъект проходит одновременное лечение имиглюцеразой;

1.34 Способ 1.33, где субъект проходит одновременное лечение имиглюцеразой в дозе от 2,5 единиц/кг массы тела до 80 единиц/кг массы тела каждые 1-3 недель, например, от 40 до 60 единиц/кг массы тела каждые 2 недели (1 единица имиглюцеразы равна количеству фермента, который катализирует гидролиз 1 микромоля синтетического субстрата п-нитрофенил-β-D-глюкопиранозида в минуту при 37°C);

1.35 Способ 1.34, где дозировку имиглюцеразы для субъекта при каждом введении (например, каждые 1-3 недель, например, каждые 2 недели) вводят в виде внутривенной (ВВ) инфузии в течение периода 1-3 часа (например, 1-2 часа);

1.36 Способ 1 или любой из 1.1-1.35, где субъекту вводят ферментозамещающую терапию (например, имиглюцеразу, велаглюцеразу и/или талиглюцеразу) до начала лечения соединением формулы I (или любой из II-XII, Ia-XIIa или Ib-XIIb, или любым из соединений 1 или 1.1-1.75);

1.37 Способ 1.36, где субъекту вводят терапию имиглюцеразой в течение, по меньшей мере, 6 месяцев с начала терапии соединением формулы I (или любой из II-XII, Ia-XIIa или Ib-XIIb, или любого из соединений 1 или 1.1-1.75), например, по меньшей мере, 12 месяцев (1 года), или, по меньшей мере, 18 месяцев, или, по меньшей мере, 2 года, или, по меньшей мере, 3 года.

1.38 Способ 1.36 или 1.37, где субъекту вводят терапию имиглюцеразой в течение, по меньшей мере, 6 месяцев в стабильной дозе до начала терапии соединением формулы I (или любой из II-XII, Ia-XIIa или Ib-XIIb, или любого из соединений 1 или 1.1-1.75);

1.39 Способ 1 или любой из 1.1-1.38, где способ дополнительно включает стадию перевода субъекта от ERT терапии (например, имиглюцеразой, велаглюцеразой или талиглюцеразой) к лечению соединением формулы I (или любой из II-XII, Ia-XIIa или Ib-XIIb, или любым из соединений 1 или 1.1-1.75);

1.40 Способ 1 или любой из 1.1-1.39, где субъект имеет уровень гемоглобина, по меньшей мере, 11 г/дл для женщин и, по меньшей мере, 12 г/дл для мужчин;

1.41 Способ 1, или любой из 1.1-1.40, где субъект имеет количество тромбоцитов, по меньшей мере, 100000/кубический миллиметр;

1.42 Способ 1, или любой из 1.1-1.41, где субъект имеет объем селезенки менее чем 10 кратный нормальному (MN) и/или объем печени менее чес 1,5 MN;

1.43 Способ 1, или любой из 1.1-1.42, где у субъекта диагностированы глазодвигательные нарушения, например, глазодвигательные нарушения, характеризующиеся горизонтальной аномалией саккадических движений глаз;

1.44 Способ 1, или любой из 1.1-1.43, где субъекту исполнилось, по меньшей мере, 18 лет (например, 18-30 лет) на начало лечения соединением согласно формуле I (или любой из II-XII, Ia-XIIa или Ib-XIIb, или любым из соединений 1 или 1.1-1.75);

1.45 Способ 1, или любой из 1.1-1.44, где субъект имеет концентрацию глюкозилцерамида (GL1) 4.4-11.1 нг/мл в спинномозговой жидкости (CSF) и 4.9-8.3 мкг/мл в плазме;

1.46 Способ 1, или любой из 1.1-1.45, где субъект имеет концентрацию глюкозилсфингозина (лизо-GL1) 20.1-67.6 пг/мл в CSF и 8.8-159.0 нг/мл в плазме;

1.47 Способ 1, или любое из 1.1-1.46, где субъекту вводят суточную дозу от примерно 1 мг до примерно 150 мг соединения формулы I (или любой из II-XII, Ia-XIIa или Ib-XIIb, или любого из соединений 1 или 1.1-1.75), например, от 5 до 50 мг, или от 10 до 40 мг, или от 10 до 30 мг, или от 10 до 20 мг, или от 20 до 30 мг, или от 30 до 40 мг, или от 40 до 50 мг, или от 5 до 25 мг, или от 20 до 50 мг, или от 5 до 15 мг, или от 15 до 30 мг, или примерно 15 мг, или выбранную из 2, 5, 15, 25, 50, 100, или 150 мг;

1.48 Способ 1, или любой из 1.1-1.47, где субъект является взрослым пациентом-человеком, например, в возрасте от 18 до 80 лет, например, от 18 до 60 лет, или от 18 до 40 лет, или от 18 до 30 лет, или от 18 до 25 лет;

1.49 Способ 1, или любой из 1.1-1.47, где субъектом является пациент-человек детского возраста, например, в возрасте от 0 до 18 лет, например, от 1 до 15 лет, или от 1 до 5 лет, или от 5 до 10 лет, или от 10 до 15 лет, или от 10 до 18 лет;

1.50 Способ 1, или любой из 1.1-1.49, где способ является эффективным для стабилизации прогрессирования надъядерного паралича взора, например, в течение, по меньшей мере, 6 месяцев, или, по меньшей мере, 9 месяцев, или, по меньшей мере, 12 месяцев;

1.51 Способ 1, или любой из 1.1-1.49, где способ является эффективным для обращения прогрессирования надъядерного паралича взора, например, в течение, по меньшей мере, 6 месяцев, или, по меньшей мере, 9 месяцев, или, по меньшей мере, 12 месяцев;

1.52 Способ 1, или любой из 1.1-1.51, где способ дает снижение концентрации глюкозилцерамида в CSF и/или в плазме на, по меньшей мере, 30% через 6 месяцев лечения, например, по меньшей мере, 40%, по меньшей мере, 50%, по меньшей мере, 60% или, по меньшей мере, 70%;

1.53 Способ 1, или любой из 1.1-1.52, где способ дает повышение концентрации глюкозилсфингозина в CSF и/или в плазме на, по меньшей мере, 30% через 6 месяцев лечения, например, по меньшей мере, 40%, по меньшей мере, 50%, по меньшей мере, 60% или, по меньшей мере, 70%;

1.54 Способ 1, или любой из 1.1-1.53, где способ дает статистически или клинически неизмененное значение модифицированного инструмента по оценки тяжести (mSST) для неврологических заболеваний через 6 месяцев лечения;

1.55 Способ 1, или любой из 1.1-1.54, где соединение формулы I (или любой из II-XII, Ia-XIIa или Ib-XIIb, или любое из соединений 1 или 1.1-1.75) или его фармацевтически приемлемую соль или пролекарство вводят системным введением, например, патентеральным путем или не парентеральным путем;

1.56 Способ 1.55, где путь введения является пероральным (энтеральным);

1.57 Способ 1.55, где путь введения является парентеральным, например, инъекцией, например, внутривенной инъекцией.

1.58 Способ 1, или любой из 1.1-1.57, где соединение формулы I (или любой из II-XII, Ia-XIIa или Ib-XIIb, или любое из соединений 1 или 1.1-1.75), или его фармацевтически приемлемая соль ли пролекарство вводят местным введением, например, местным введением;

1.59 Способ 1, или любой из 1.1-1.58, где соединением является (S)-хинуклидин-3-ил (2-(2-(4-фторфенил)тиазол-4-ил)пропан-2-ил)карбамат или хинуклидин-3-ил (2-(4'-фтор-[1,1'-бифенил]-3-ил)пропан-2-ил)карбамат;

1.60 Способ 1.59, где доза соединения составляет 15 мг/сутки при пероральном введении;

1.61 Способ 1.60, где доза соединения составляет 15 мг/сутки однократной пероральной дозой;

1.62 Способ 1, или любой из 1.1-1.61, где субъекту вводят однократную суточную дозу 5 мг, 10 мг, 15 мг или 20 мг соединения, например, (S)-хинуклидин-3-ил (2-(2-(4-фторфенил)тиазол-4-ил)пропан-2-ил)карбамата, необязательно в форме кислотно-аддитивного малата.

Заболевания и нарушения, например, вызывающие надъядерный паралич взора, часто связаны с одной или несколькими генетическими мутациями. В некоторых вариантах осуществления настоящего описания, субъекту или субъекту диагностировано конкретное заболевание или нарушение, и также диагностирована конкретная генетическая мутация, например та, которая, как известно, является причиной рассматриваемого заболевания или нарушения, хотя часто невозможно доказать, что конкретное заболевание или нарушение пациента вызвано конкретной мутацией, которая была диагностирована у человека. В данном случае термин «диагностирована конкретная генетическая мутация» означает, что субъект или пациент были протестированы, например, с помощью ДНК- или РНК-секвенирования, профилирования белков или других подходящих средств, и было обнаружено, что у него имеется рассматриваемая мутация. Однако, как обсуждается ниже, многие генетические заболевания и нарушения могут иметь несколько генетических причин (например, мутаций), и пациенты могут иметь несколько мутаций, каждая из которых может, при некоторых обстоятельствах, быть достаточной, чтобы вызвать заболевание или нарушение, не будучи доказательством того, что конкретная мутация вызывает конкретное заболевание или нарушение у конкретного пациента.

Способы согласно способу 1 и след. могут быть благоприятны для субъектов, у которых диагностирована лизосомная болезнь накопления, такая как Гоше 3 типа или Ниманн-Пик типа С, но которые еще не имеют глазные симптомы, ассоциированные с болезненным состоянием. Способы согласно способу 1 и след. также могут быть благоприятны для субъектов, подверженных риску развития лизосомной болезни накопления, такой как Гоше 3 типа или Ниманн-Пик типа С, из-за, например, мутации у субъекта или семейного анамнеза, которая, как известно, вызывает такое заболевание. Поэтому, в некоторых вариантах осуществления способов, описанных в настоящем документе, субъект диагностирован как имеющий риск развития такого заболевания или нарушения, и способ предотвращает или откладывает наступление и/или развитие глазных симптомов заболевания или нарушения (например, надъядерного паралича взора) у субъекта. В некоторых вариантах осуществления, субъект диагностирован как имеющий риск развития указанного заболевания или нарушения через наличие мутации в гене, как описано в настоящем документе.

Во втором аспекте, в настоящем изобретении представлен способ (Способ 4) лечения или профилактики когнитивной дисфункции и/или нарушений походки, включая атаксию, ассоциированной с лизосомной болезнью накопления, у субъекта, нуждающегося в этом, где способ включает введение субъекту эффективного количества соединения хинуклидина, как описано в настоящем документе, например, соединения формулы I или любой из II-XII, Ia-XIIa или Ib-XIIb, или любого из соединений 1 или 1.1-1.75. Также представлено соединение хинуклидина, как описано в настоящем документе, например, соединение формулы I или любой из II-XII, Ia-XIIa или Ib-XIIb, или любое из соединений 1 или 1.1-1.75, для применения в способе лечения или профилактики когнитивной дисфункции и/или нарушений походки, включая атаксию, ассоциированных с лизосомной болезнью накопления, у субъекта, нуждающегося в этом, например, для применения в способе 4 или любом из 4.1-4.62. Кроме того, представлено применение соединения хинуклидина, как описано в настоящем документе, например, соединения формулы I или любой из II-XII, Ia-XIIa или Ib-XIIb, или любого из соединений 1 или 1.1-1.75, в производстве лекарственного средства для применения в способе лечения или профилактики когнитивной дисфункции и/или нарушений походки, включая атаксию, ассоциированных с лизосомной болезнью накопления, у субъекта, нуждающегося в этом, например, производстве лекарственного средства для применения в Способе 4 или любом из 4.1-4.62.

В конкретных дополнительных вариантах осуществления способа 4, в настоящем описании представлен:

4.1 Способ 4, где способ включает введение субъекту эффективного количества соединения формулы I или любой из II-XII, Ia-XIIa или Ib-XIIb, или любого из соединений 1 или любого из 1.1-1.75;

4.2 Способ 4, где способ включает введение субъекту эффективного количества соединения 1 или любого одного или нескольких из соединений 1.1-1.75;

4.3 Способ 4 или любой из 4.1-4.2, где способ включает введение субъекту эффективного количества фармацевтической композиции, содержащей соединение формулы I или любой из II-XII, Ia-XIIa или Ib-XIIb, или любое из соединений 1 или любое из 1.1-1.75;

4.4. Способ 4 или любой из 4.1-4.2, где способ включает введение субъекту эффективного количества фармацевтической композиции, содержащей соединение 1 или любое одно или несколько из соединений 1.1-1.75;

4.5 Способ 4.3 или 4.4, где фармацевтическая композиция дополнительно содержит, по меньшей мере, один фармацевтически приемлемый эксципиент, как описано в настоящем документе;

4.6 Способ 4 или любой из 4.1-4.5, где способ включает введение фармацевтической дозированной формы, содержащей эффективное количество соединения или эффективное количество фармацевтической композиции;

4.7 Способ 4.6, где дозированной формой является пероральная дозированная форма (например, пилюля, капсула, каплет, таблетка, драже, порошок, гранула, пленка, пастилка или жидкость);

4.8 Способ 4.7, где дозированной формой является жевательная таблетка;

4.9 Способ 4.6, где дозированной формой является парентеральная дозированная форма (например, где фармацевтическая композиция составлена для инъекции);

4.10 Способ 4.9, где инъекция является внутривенной, внутримышечной, интратекальной или подкожной, необязательно, стерильной инъекцией;

4.11 Способ 4.6, где дозированной формой является местная или ректальная дозированная форма;

4.12 Способ 4.6, где дозированной формой является интраназальная дозированная форма (например, аэрозоль);

4.13 Способ 4 или любой из 4.1-4.12, где способ дополнительно включает одновременное введение второго активного агента, например, второго соединения, способного лечить или предотвращать супрануклеарные параличи взора у пациента, нуждающегося в этом, как описано в настоящем документе;

4.14 Способ 4.13, где второй активный агент вводят в той же фармацевтической композиции или дозированной форме, что и соединение хинуклидина;

4.15 Способ 4.13 или 4.14, где вторым активным агентом является ингибитор GCS (например, миглустат или элиглустат);

4.16 Способ 1, или любой из 4.1-4.15, где субъектом является млекопитающее животное;

4.17 Способ 4.16, где субъектом является примат;

4.18 Способ 4.17, где субъектом является человек;

4.19 Способ 4 или любой из 4.1-4.18, где атаксией является мозжечковая атаксия;

4.20 Способ 4 или любой из 4.1-4.19, где атаксия демонстрирует симптомы, выбранные из нестабильной походки, астении, асинергии, замедленной реакции, дисхронометрии, дизартрии, дисфагии, гипотонии, дисметрии, гипометрии, гиперметрии, дисдиадохокинезии, невнятной речи, тремора голоса, атаксического дыхания, постуральной нестабильности и их комбинаций, например, при которых первичным атаксическим дефицитом является нестабильность походки;

4.21 Способ 4, или любой из 4.1-4.20, где субъект имеет исходную атаксию, по меньшей мере, 0,5 по шкале оценки и ранжирования атаксии (SARA) в начале терапии в соответствии со способом, например, исходный балл по SARA составляет, по меньшей мере, 1 или, по меньшей мере, 2, или, по меньшей мере, 3, или, по меньшей мере, 4, или, по меньшей мере, 5, или, по меньшей мере, 10, или, по меньшей мере, 20;

4.22 Способ 4, или любой из 4.1-4.21, где когнитивной дисфункцией является деменция;

4.23 Способ 4, или любой из 4.1-4.22, где при деменции проявляются признаки нарушения скорости зрительного поиска, скорости считывания при обработке, умственной гибкости и/или исполнительного функционирования, например, как свидетельство TMT-A более 30 секунд, или более 45 секунд, или более 60 секунд и/или TMT-B более 70 секунд или более 90 секунд, или более 120 секунд, или более 150 секунд, или более 180 секунд, и/или где TMT-B минус TMT-A составляет более 40 секунд, или более 60 секунд, или более 90 секунд, или более 120 секунд;

4.24 Способ 4, или любой из 4.1-4.23, где субъект имеет болезнь Гоше 3 типа;

4.25 Способ 4, или любой из 4.1-4.24, где субъект имеет болезнь Ниманна-Пика типа С;

4.26 Способ 4, или любой из 4.1-4.24, где субъект имеет GM2-ганглиозидоз (например, болезнь Тея-Сакса, болезнь Сандхоффа или вариант AB GM2 ганглиозидоза);

4.27 Способ 4, или любой из 4.1-4.24, где у субъекта диагностирована мутация в гене GBA1;

4.28 Способ 4, или любой из 4.1-4.24, где у субъекта диагностирована мутация в генах NPC1 и/или NPC2;

4.29 Способ 4, или любой из 4.1-4.24, где у субъекта диагностирована мутация в гене HEXA (кодирующем гексозаминидазу A) и/или мутацию в гене HEXB (кодирующем гексозаминидазу B) и/или мутацию в гене GM2A (кодирующем белок-активатор GM2 ганглиозида);

4.30 Способ 4, или любое из 4.1-4.29, где у субъекта диагностирована болезнь Паркинсона;

4.31 Способ 4, или любое из 4.1-4.30, где субъект проходит одновременное лечение ферментозамещающей терапией (ERT), например, с применением глюкоцереброзидазы (например, имиглюцеразы, велаглюцеразы или талиглюцеразы), необязательно, где каждый из таких ферментов является рекомбинантным ферментом;

4.32 Способ 4.31, где субъект проходит одновременное лечение одним или несколькими из имиглюцеразы, велаглюцеразы (например, велаглюцеразы альфа) и талиглюцеразы (например, талиглюцеразы альфа);

4.33 Способ 4.32, где субъект проходит одновременное лечение имиглюцеразой;

4.34 Способ 4.33, где субъект проходит одновременное лечение имиглюцеразой в дозе от 2,5 единиц/кг массы тела до 80 единиц/кг массы тела каждые 1-3 недель, например, от 40 до 60 единиц/кг массы тела каждые 2 недели (1 единица имиглюцеразы равна количеству фермента, который катализирует гидролиз 1 микромоля синтетического субстрата п-нитрофенил-β-D-глюкопиранозида в минуту при 37°C);

4.35 Способ 4.34, где дозировку имиглюцеразы для субъекта при каждом введении (например, каждые 1-3 недель, например, каждые 2 недели) вводят в виде внутривенной (ВВ) инфузии в течение периода 1-3 часа (например, 1-2 часа);

4.36 Способ 4 или любой из 4.1-4.35, где субъекту вводят ферментозамещающую терапию (например, имиглюцеразу, велаглюцеразу и/или талиглюцеразу) до начала лечения соединением формулы I (или любой из II-XII, Ia-XIIa или Ib-XIIb, или любым из соединений 1 или 1.1-1.75);

4.37 Способ 4.36, где субъекту вводят терапию имиглюцеразой в течение, по меньшей мере, 6 месяцев с начала терапии соединением формулы I (или любой из II-XII, Ia-XIIa или Ib-XIIb, или любого из соединений 1 или 1.1-1.75), например, по меньшей мере, 12 месяцев (1 года), или, по меньшей мере, 18 месяцев, или, по меньшей мере, 2 года, или, по меньшей мере, 3 года.

4.38 Способ 4.36 или 4.37, где субъекту вводят терапию имиглюцеразой в течение, по меньшей мере, 6 месяцев в стабильной дозе до начала терапии соединением формулы I (или любой из II-XII, Ia-XIIa или Ib-XIIb, или любого из соединений 1 или 1.1-1.75);

4.39 Способ 4 или любой из 4.1-4.38, где способ дополнительно включает стадию перевода субъекта от ERT терапии (например, имиглюцеразой, велаглюцеразой или талиглюцеразой) к лечению соединением формулы I (или любой из II-XII, Ia-XIIa или Ib-XIIb, или любым из соединений 1 или 1.1-1.75);

4.40 Способ 4 или любой из 4.1-4.39, где субъект имеет уровень гемоглобина, по меньшей мере, 11 г/дл для женщин и, по меньшей мере, 12 г/дл для мужчин;

4.41 Способ 4, или любой из 4.1-4.40, где субъект имеет количество тромбоцитов, по меньшей мере, 100000/кубический миллиметр;

4.42 Способ 4, или любой из 4.1-4.41, где субъект имеет объем селезенки менее чем 10 кратный нормальному (MN) и/или объем печени менее чес 1,5 MN;

4.43 Способ 4, или любой из 4.1-4.42, где у субъекта диагностированы сопутствующая деменция, например, болезнь Альцгеймера или болезнь Паркинсона;

4.44 Способ 4, или любой из 4.1-4.43, где субъекту исполнилось, по меньшей мере, 18 лет (например, 18-30 лет) на начало лечения соединением согласно формуле I (или любой из II-XII, Ia-XIIa или Ib-XIIb, или любым из соединений 1 или 1.1-1.75);

4.45 Способ 4, или любой из 4.1-4.44, где субъект имеет концентрацию глюкозилцерамида (GL1) 4.4-14.1 нг/мл в спинномозговой жидкости (CSF) и 4.9-8.3 мкг/мл в плазме;

4.46 Способ 4, или любой из 4.1-4.45, где субъект имеет концентрацию глюкозилсфингозина (лизо-GL1) 20.1-67.6 пг/мл в CSF и 8.8-159.0 нг/мл в плазме;

4.47 Способ 4, или любое из 4.1-4.46, где субъекту вводят суточную дозу от примерно 1 мг до примерно 150 мг соединения формулы I (или любой из II-XII, Ia-XIIa или Ib-XIIb, или любого из соединений 1 или 1.1-1.75), например, от 5 до 50 мг, или от 10 до 40 мг, или от 10 до 30 мг, или от 10 до 20 мг, или от 20 до 30 мг, или от 30 до 40 мг, или от 40 до 50 мг, или от 5 до 25 мг, или от 20 до 50 мг, или от 5 до 15 мг, или от 15 до 30 мг, или примерно 15 мг, или выбранную из 2, 5, 15, 25, 50, 100, или 150 мг;

4.48 Способ 4, или любой из 4.1-4.47, где субъект является взрослым пациентом-человеком, например, в возрасте от 18 до 80 лет, например, от 18 до 60 лет, или от 18 до 40 лет, или от 18 до 30 лет, или от 18 до 25 лет;

4.49 Способ 4, или любой из 4.1-4.47, где субъектом является пациент-человек детского возраста, например, в возрасте от 0 до 18 лет, например, от 1 до 15 лет, или от 1 до 5 лет, или от 5 до 10 лет, или от 10 до 15 лет, или от 10 до 18 лет;

4.50 Способ 4, или любой из 4.1-4.49, где способ эффективен для снижения по шкале атаксии SARA по меньшей мере на 0,5, например, снижения оценки по шкале SARA по меньшей мере на 1, или по меньшей мере 2, или по меньшей мере, 3, или по меньшей мере 5, или по меньшей мере, 10; или где способ эффективен для снижения показателя SARA до значений от 0,00 до 3,00, или от 0,00 до 2,00, или от 0,00 до 1,50, или от 0,00 до 1,00, или от 0,00 до 0,50;

4.51 Способ 4, или любой из 4.1-4.49, где способ эффективен для улучшения когнитивных способностей или уменьшения когнитивного дефицита, например, по данным сокращения времени, необходимого для завершения теста отслеживания (TMT), TMT-A и/или TMT-B, снижения разницы между временем TMT-A и временем TMT-B (TMT-A - TMT-B), например, уменьшения не менее 10%, или не менее 20%, или не менее 30%, или не менее 40%, или, по меньшей мере, 50% (например, где TMT-A уменьшается на 5-20%, и/или TMT-B уменьшается на 25-30%, и/или [TMT-A - TMT-B] уменьшается на 25-30%);

4.52 Способ 4, или любой из 4.1-4.51, где способ дает снижение концентрации глюкозилцерамида в CSF и/или в плазме на, по меньшей мере, 30% через 6 месяцев лечения, например, по меньшей мере, 40%, по меньшей мере, 50%, по меньшей мере, 60% или по меньшей мере, 70%;

4.53 Способ 4, или любой из 4.1-4.52, где способ дает повышение концентрации глюкозилсфингозина в CSF и/или в плазме на, по меньшей мере, 30% через 6 месяцев лечения, например, по меньшей мере, 40%, по меньшей мере, 50%, по меньшей мере, 60% или по меньшей мере, 70%;

4.54 Способ 4, или любой из 4.1-4.53, где способ дает статистически или клинически неизмененное значение модифицированного инструмента по оценки тяжести (mSST) для неврологических заболеваний через 6 месяцев лечения;

4.55 Способ 4, или любой из 4.1-4.54, где соединение формулы I (или любой из II-XII, Ia-XIIa или Ib-XIIb, или любое из соединений 1 или 1.1-1.75) или его фармацевтически приемлемую соль или пролекарство вводят системным введением, например, патентеральным путем или не парентеральным путем;

4.56 Способ 4.55, где путь введения является пероральным (энтеральным);

4.57 Способ 4.55, где путь введения является парентеральным, например, инъекцией, например, внутривенной инъекцией.

4.58 Способ 4, или любой из 4.1-4.57, где соединение формулы I (или любой из II-XII, Ia-XIIa или Ib-XIIb, или любое из соединений 1 или 1.1-1.75), или его фармацевтически приемлемая соль ли пролекарство вводят местным введением, например, местным введением;

4.59 Способ 4, или любой из 4.1-4.58, где соединением является (S)-хинуклидин-3-ил (2-(2-(4-фторфенил)тиазол-4-ил)пропан-2-ил)карбамат или хинуклидин-3-ил (2-(4'-фтор-[1,1'-бифенил]-3-ил)пропан-2-ил)карбамат;

4.60 Способ 4.59, где доза соединения составляет 15 мг/сутки при пероральном введении;

4.61 Способ 4.60, где доза соединения составляет 15 мг/сутки однократной пероральной дозой;

4.62 Способ 4, или любой из 4.1-4.61, где субъекту вводят однократную суточную дозу 5 мг, 10 мг, 15 мг или 20 мг соединения, например, (S)-хинуклидин-3-ил (2-(2-(4-фторфенил)тиазол-4-ил)пропан-2-ил)карбамата, необязательно в форме кислотно-аддитивного малата.

В некоторых вариантах осуществления настоящего описания у субъекта или субъекта диагностировано конкретное заболевание или нарушение, и также диагностирована конкретная генетическая мутация, например, та, которая, как известно, является причиной рассматриваемого заболевания или нарушения, хотя часто невозможно доказать, что конкретное заболевание или нарушение пациента вызвано конкретной мутацией, которая была диагностирована у человека. В данном случае термин «диагностирована конкретная генетическая мутация» означает, что субъект или пациент были протестированы, например, с помощью ДНК- или РНК-секвенирования, профилирования белков или других подходящих средств, и было обнаружено, что у него имеется рассматриваемая мутация. Однако, как обсуждается ниже, многие генетические заболевания и нарушения могут иметь несколько генетических причин (например, мутаций), и пациенты могут иметь несколько мутаций, каждая из которых может, при некоторых обстоятельствах, быть достаточной, чтобы вызвать заболевание или нарушение, не будучи доказательством того, что конкретная мутация вызывает конкретное заболевание или нарушение у конкретного пациента.

Способы согласно способу 4 и след. могут быть благоприятны для субъектов, у которых диагностирована лизосомная болезнь накопления, такая как Гоше 3 типа или Ниманн-Пик типа С, но которые еще не имеют когнитивные и/или атаксические симптомы, ассоциированные с болезненным состоянием. Способы согласно способу 4 и след. также могут быть благоприятны для субъектов, подверженных риску развития лизосомной болезни накопления, такой как Гоше 3 типа или Ниманн-Пик типа С, из-за, например, мутации у субъекта или семейного анамнеза, которая, как известно, вызывает такое заболевание. Поэтому, в некоторых вариантах осуществления способов, описанных в настоящем документе, субъект диагностирован как имеющий риск развития такого заболевания или нарушения, и способ предотвращает или откладывает наступление и/или развитие когнитивных и/или атаксических симптомов заболевания или нарушения (например, надъядерного паралича взора) у субъекта. В некоторых вариантах осуществления, субъект диагностирован как имеющий риск развития указанного заболевания или нарушения через наличие мутации в гене, как описано в настоящем документе.

Фармацевтические композиции

В настоящем описании также представлены фармацевтические композиции, содержащие, по меньшей мере, одно соединение хинуклидина, как описано в настоящем документе, и по меньшей мере, один фармацевтически приемлемый эксципиент, например, для использования в соответствии со способами, описанными в настоящем документе. Фармацевтически приемлемым эксципиентом может быть любой такой эксципиент, известный в данной области техники, включая описанные в, например, Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co. (A. R. Gennaro edit. 1985). Фармацевтические композиции соединений, описанных в настоящем документе, могут быть получены обычными способами, известными в данной области техники, например, смешиванием, по меньшей мере, одного описанного в настоящем документе соединения с фармацевтически приемлемым эксципиентом.

Таким образом, в одном аспекте настоящее описание представляет фармацевтическую дозированную форму, содержащую соединение хинуклидина, как описано в настоящем документе, и фармацевтически приемлемый эксципиент, где дозированная форма составлена для обеспечения при введении (например, при пероральном введении) количества указанного соединения, достаточного для лечения заболевания или нарушения, описанного в настоящем документе (например, в любом из Способа 1 и след. или Способа 4 и след.).

Фармацевтическая композиция или дозированная форма по изобретению может включать агент и другой носитель, например, соединение или композицию, инертный или активный, такой как поддающийся обнаружению агент, метка, адъювант, разбавитель, связующий агент, стабилизатор, буферы, соли, липофильные растворители, консервант, адъювант или подобные. Носители также включают фармацевтические эксципиенты и добавки, например, белки, пептиды, аминокислоты, жиры и углеводы (например, сахара, включая моносахариды, ди-, три-, тетра- и олигосахариды; дериватизированные сахара, такие как альдиты, альдоновые кислоты, эстерифицированные сахара и подобные; и полисахариды или полимеры сахара), которые могут присутствовать по отдельности или в комбинации, включая отдельно или в комбинации от 1 до 99,99% по массе или по объему. Примеры белковых эксципиентов включают сывороточный альбумин, такой как сывороточный альбумин человека (HSA), рекомбинантный альбумин человека (rHA), желатин, казеин и подобные. Типовые компоненты аминокислоты/антитела, которые также могут функционировать в качестве буферного средства, включают аланин, глицин, аргинин, бетаин, гистидин, глутаминовую кислоту, аспарагиновую кислоту, цистеин, лизин, лейцин, изолейцин, валин, метионин, фенилаланин, аспартам и подобные. Углеводные эксципиенты также входят в объем данного изобретения, их примеры включают, но не ограничиваются ими, моносахариды, такие как фруктоза, мальтоза, галактоза, глюкоза, D-манноза, сорбоза и подобные; дисахариды, такие как лактоза, сахароза, трегалоза, целлобиоза и подобные; полисахариды, такие как раффиноза, мелецитоза, мальтодекстрины, декстраны, крахмалы и подобные; и альдиты, такие как маннит, ксилит, мальтит, лактит, ксилит, сорбит (глюцит) и миоинозит.

Носители, которые можно использовать, включают буфер или агент, регулирующий pH; обычно буфером является соль, полученная из органической кислоты или основания. Типовые буферы включают соли органических кислот, такие как соли лимонной кислоты, аскорбиновой кислоты, глюконовой кислоты, карбоновой кислоты, винной кислоты, янтарной кислоты, уксусной кислоты или фталевой кислоты; Tris, гидрохлорид трометамина или фосфатные буферы. Дополнительные носители включают полимерные эксципиенты/добавки, такие как поливинилпирролидоны, фиколлы (полимерный сахар), декстраты (например, циклодекстрины, такие как 2-гидрокси-пропил-β-циклодекстрин), полиэтиленгликоли, ароматизаторы, антимикробные агенты, подсластители, антиоксиданты, антистатики. поверхностно-активные вещества (например, полисорбаты, такие как «TWEEN 20» и «TWEEN 80»), жиры (например, фосфолипиды, жирные кислоты), стероиды (например, холестерин) и хелатирующие агенты (например, ЭДТК).

В настоящем описании также представлены фармацевтические композиции и наборы, содержащие указанные композиции, которые содержат, по меньшей мере, одно соединение хинуклидина, описанное в настоящем документе, и, по меньшей мере, еще один фармацевтически активный агент. Эти фармацевтические композиции и наборы могут быть адаптированы для одновременного, последовательного и/или раздельного введения соединения хинуклидина и дополнительного активного агента. Например, соединение хинуклидина и дополнительный активный агент могут быть составлены в виде отдельных дозированных форм, например, в отдельных таблетках, капсулах, лиофилизатах или жидкостях, или они могут быть составлены в одной и той же дозированной форме, например, в той же таблетке, капсуле, лиофилизате или жидкости. Если соединение хинуклидина и дополнительный активный агент составлены в одной и той же дозированной форме, соединение хинуклидина и дополнительный активный агент могут присутствовать по существу в смеси, например, в сердцевине таблетки, или они могут присутствовать по существу в отдельных областях дозированной формы, например, в разных слоях одной и той же таблетки. В одном варианте осуществления, фармацевтическая дозированная форма содержит дополнительный агент, который способен лечить или предотвращать надъядерный паралич взора, например, у пациента, имеющего, диагностированного или предрасположенного к лизосомной болезни накопления, такой как Гоше 3 типа или Ниманн-Пик типа С, или боль, например, у пациента, у которого диагностирована лизосомная болезнь накопления, или предрасположенного к ней, например, болезнь Фабри, как описано в настоящем документе.

В дополнительном аспекте, в настоящем описании представлена фармацевтическая композиция, содержащая: (i) соединение хинуклидина, как описано в настоящем документе; (ii) дополнительный активный агент; и (iii) фармацевтически приемлемый эксципиент. В одном варианте осуществления, дополнительным активным агентом является агент, который способен лечить или предотвращать надъядерный паралич взора, нарушение походки или когнитивную дисфункцию (например, деменцию), например, у пациента, имеющего, диагностированного или предрасположенного к лизосомной болезни накопления, такой как Гоше 3 типа или Ниманн-Пик типа С, как описано в настоящем документе.

Описанные соединения хинуклидина и фармацевтические композиции можно использовать на животных или людях. Таким образом, описанное соединение может быть составлено в виде фармацевтической композиции для перорального, буккального, парентерального (например, внутривенного, внутримышечного или подкожного), местного, ректального или интраназального введения, или в форме, подходящей для введения путем ингаляции или инсуффляции. В конкретных вариантах осуществления, соединение хинуклидина или фармацевтическая композиция составлены для системного введения, например, не парентеральным путем. В одном варианте осуществления, соединение хинуклидина или фармацевтическая композиция составлена для перорального введения, например, в твердой форме. Такие способы введения и способы приготовления соответствующих фармацевтических композиций описаны, например, в Gibaldi’s Drug Delivery Systems in Pharmaceutical Care (1^st ed., American Society of Health-System Pharmacists 2007).

Фармацевтические композиции могут быть составлены таким образом, чтобы обеспечивать медленное, пролонгированное или контролируемое высвобождение активного ингредиента с использованием, например, гидроксипропилметилцеллюлозы в различных пропорциях для обеспечения желаемого профиля высвобождения, других полимерных матриц, липосом и/или микросфер. Фармацевтические композиции также могут необязательно содержать замутнители, и могут быть композицией, которая высвобождает активные ингредиенты только или предпочтительно в определенной части желудочно-кишечного тракта, необязательно, замедленно, например, с помощью энтеросолюбильного покрытия. Примеры герметизирующих композиций включают полимерные вещества и воски. Активный ингредиент также может быть в микрокапсулированной форме, при необходимости, с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми носителями, эксципиентами или разбавителями, хорошо известными в данной области техники (см., например, Remington’s). Описанные соединения могут быть составлены для непрерывной доставки способами, хорошо известными специалистам в данной области техники. Примеры таких составов можно найти в патентах США 3,119,742; 3,492,397; 3,538,214; 4,060,598; и 4,173,626.

В твердых дозированных формах для перорального введения (например, капсулах, таблетках, пилюлях, драже, порошках, гранулах и подобных) активный ингредиент смешан с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми носителями, эксципиентами или разбавителями, такими как цитрат натрия или дикальцийфосфат, и/или любой из следующих: (1) наполнители или разбавители, такие как крахмалы, лактоза, сахароза, глюкоза, маннит, микрокристаллическая целлюлоза, фосфат кальция и/или кремниевая кислота; (2) связующие агенты, такие как, например, карбоксиметилцеллюлоза, альгинаты, желатин, прежелатинизированный кукурузный крахмал, поливинилпирролидон, гидроксипропилметилцеллюлоза, сахароза и/или аравийская камедь; (3) увлажнители, такие как глицерин; (4) разрыхлители, такие как агар-агар, карбонат кальция, натрия крахмалгликолят, картофельный или тапиоковый крахмал, альгиновая кислота, некоторые силикаты и карбонат натрия; (5) агенты, замедляющие растворение, такие как парафин; (6) ускорители абсорбции, такие как соединения четвертичного аммония; (7) смачивающие агенты, такие как, например, лаурилсульфат натрия, ацетиловый спирт и моностеарат глицерина; (8) абсорбенты, такие как каолин и бентонитовая глина; (9) смазывающие вещества, такие как тальк, диоксид кремния, стеарат кальция, стеарат магния, твердые полиэтиленгликоли, лаурилсульфат натрия и их смеси; и (10) красители. В случае капсул, таблеток и пилюль, фармацевтические композиции также могут содержать буферные агенты. Твердые композиции подобного типа также могут быть получены с использованием наполнителей в мягких и твердых желатиновых капсулах и эксципиентов, таких как лактоза или молочные сахара, а также высокомолекулярных полиэтиленгликолей и подобных.

Таблетка может быть изготовлена прессованием или формованием, необязательно с одним или несколькими дополнительными ингредиентами. Прессованные таблетки могут быть приготовлены с использованием связующих агентов (например, желатина или гидроксипропилметилцеллюлозы), смазывающих агентов, инертных разбавителей, консервантов, разрыхлителей (например, натрия крахмалгликолята или поперечно-сшитой карбоксиметилцеллюлозы натрия), поверхностно-активных веществ и/или диспергирующих агентов. Формованные таблетки могут быть получены путем формования в подходящей машине смеси порошкообразного активного ингредиента, смоченного инертным жидким разбавителем. Таблетки и другие твердые дозированные формы, такие как драже, капсулы, пилюли и гранулы, необязательно могут иметь насечки или приготовлены с покрытиями и оболочками, такими как энтеросолюбильные покрытия и другие покрытия, хорошо известные в данной области техники.

В вариантах осуществления, фармацевтические композиции вводят перорально в жидкой форме. Жидкие дозированные формы для перорального введения активного ингредиента включают фармацевтически приемлемые эмульсии, микроэмульсии, растворы, суспензии, сиропы и эликсиры. Жидкие препараты для перорального введения могут быть представлены в виде сухого продукта для разведения водой или другим подходящим носителем перед использованием. В дополнение к активному ингредиенту, жидкие лекарственные формы могут содержать инертные разбавители, обычно используемые в данной области, такие как, например, вода или другие растворители, солюбилизирующие агенты и эмульгаторы, такие как этиловый спирт, изопропиловый спирт, этилкарбонат, этилацетат, бензиловый спирт, бензилбензоат, пропиленгликоль, 1,3-бутиленгликоль, масла (например, хлопковое, арахисовое, кукурузное, зародышевое, оливковое, касторовое и кунжутное масла), глицерин, тетрагидрофуриловый спирт, полиэтиленгликоли и сложные эфиры жирных кислот сорбитана и их смеси. В дополнение к инертным разбавителям, жидкие фармацевтические композиции могут включать адъюванты, такие как смачивающие агенты, эмульгирующие и суспендирующие агенты, подсластители, ароматизаторы, красители, отдушки и консерванты и подобные. Суспензии, в дополнение к активному ингредиенту, могут содержать суспендирующие агенты, такие как, но не ограничиваясь ими, этоксилированные изостеариловые спирты, полиоксиэтиленсорбит и сложные эфиры сорбитана, микрокристаллическую целлюлозу, метагидроксид алюминия, бентонит, агар-агар и трагакант и их смеси. Подходящие жидкие препараты могут быть приготовлены обычными способами с фармацевтически приемлемыми добавками, такими как суспендирующий агент (например, сироп сорбита, метилцеллюлоза или гидрированные пищевые жиры); эмульгатор (например, лецитин или аравийская камедь); не водный носитель (например, миндальное масло, масляные эфиры или этиловый спирт); и/или консервант (например, метил- или пропилпара-гидроксибензоаты или сорбиновая кислота). Активные ингредиенты также можно вводить в виде болюса, электуария или пасты.

Для буккального введения, композиция может принимать форму таблеток или пастилок, приготовленных обычным способом.

В вариантах осуществления, фармацевтические композиции вводят не пероральными средствами, такими как местное нанесение, трансдермальное нанесение, инъекция и подобные. В родственных вариантах осуществления, фармацевтические композиции вводят парентерально путем инъекции, инфузии или имплантации (например, внутривенно, внутримышечно, внутриартериально, подкожно и т.п.).

Описанные соединения могут быть составлены для парентерального введения путем инъекции, в том числе с использованием обычных методов катетеризации или инфузии. Составы для инъекций могут быть представлены в виде стандартной дозированной формы, например, в ампулах или в многодозовых контейнерах, с добавленным консервантом. Композиции могут принимать такие формы, как суспензии, растворы или эмульсии в масляных или водных носителях, и могут содержать препаратообразующий агент, такой как суспендирующий, стабилизирующий и/или диспергирующий агент, признанный специалистами в данной области техники. Альтернативно, активный ингредиент может быть в форме порошка для восстановления подходящим носителем, например, стерильной апирогенной водой, перед использованием.

Фармацевтические композиции могут быть введены непосредственно в центральную нервную систему. Соответственно, в некоторых вариантах осуществления, композиции вводят непосредственно в центральную нервную систему, чтобы избежать гематоэнцефалического барьера. В некоторых вариантах осуществления, композиция может быть введена через прямую инъекцию в спинной мозг. В вариантах реализации изобретения композиция вводится путем интратекальной инъекции. В некоторых вариантах осуществления, композицию вводят интрацеребровентрикулярной инъекцией. В вариантах осуществления, композицию вводят в церебральный боковой желудочек. В вариантах осуществления, композицию вводят в оба церебральных боковых желудочка. В дополнительных вариантах осуществления, композицию вводят внутригиппокампальной инъекцией. Композиции можно вводить одой инъекцией или несколькими инъекциями. В других вариантах осуществления, композицию вводят более чем в одно место (например, в два участка центральной нервной системы).

Фармацевтические композиции могут быть в форме стерильных инъекций. Фармацевтические композиции могут быть стерилизованы, например, фильтрацией через фильтр, задерживающий бактерии, или введением стерилизующих агентов в виде стерильных твердых композиций, которые могут быть растворены в стерильной воде или какой-либо другой стерильной среде для инъекций непосредственно перед использованием. Для приготовления такой композиции, активный ингредиент растворяют или суспендируют в парентерально приемлемом жидком носителе. Типовые носители и растворители включают, но не ограничиваются ими, воду, воду, доведенную до подходящего pH добавлением соответствующего количества хлористоводородной кислоты, гидроксида натрия или подходящего буфера, 1,3-бутандиол, раствор Рингера и изотонический раствор хлорида натрия. Фармацевтическая композиция также может содержать один или несколько консервантов, например, метил-, этил- или н-пропил-пара-гидроксибензоат. Для улучшения растворимости может быть добавлен улучшающий растворение, или солюбилизирующий агент, или растворитель может содержать 10-60% масс. пропиленгликоля или подобного.

Фармацевтические композиции могут содержать один или несколько фармацевтически приемлемых стерильных изотонических водных или не водных растворов, дисперсий, суспензий или эмульсий или стерильных порошков, которые могут быть восстановлены в стерильные растворы или дисперсии для инъекций непосредственно перед применением. Такие фармацевтические композиции могут содержать антиоксиданты; буферы; бактериостатики; растворенные вещества, которые придают составу изотоничность к крови предполагаемого реципиента; суспендирующие агенты; загустители; консерванты; и подобные.

Примеры подходящих водных и не водных носителей, которые могут использоваться в фармацевтических композициях по изобретению, включают воду, этанол, полиолы (такие как глицерин, пропиленгликоль, полиэтиленгликоль и подобные) и их подходящие смеси, растительные масла, такие как оливковое масло, и сложные органические эфиры для инъекций, такие как этил олеат. Надлежащую текучесть можно поддерживать, например, путем использования покрывающих материалов, таких как лецитин, путем поддержания необходимого размера частиц в случае дисперсий и путем использования поверхностно-активных веществ. В некоторых вариантах осуществления, чтобы продлить действие активного ингредиента, желательно замедлить абсорбцию соединения при подкожной или внутримышечной инъекции. Это может быть достигнуто за счет использования жидкой суспензии кристаллического или аморфного материала, имеющего плохую растворимость в воде. Скорость абсорбции активного ингредиента затем зависит от скорости его растворения, которая, в свою очередь, может зависеть от размера кристаллов и кристаллической формы. Альтернативно, отсроченная абсорбция парентерально введенного активного ингредиента достигается растворением или суспендированием соединения в масляном носителе. Кроме того, пролонгированная абсорбция фармацевтической формы для инъекций может быть обеспечена за счет включения агентов, замедляющих абсорбцию, таких как моностеарат алюминия и желатин.

Парентеральные композиции с контролируемым высвобождением могут быть в форме водных суспензий, микросфер, микрокапсул, магнитных микросфер, масляных растворов, масляных суспензий, эмульсий, или активный ингредиент может быть включен в биосовместимые носители, липосомы, наночастицы, имплантаты или устройства для инфузии. Материалы для использования в производстве микросфер и/или микрокапсул включают, но не ограничиваются ими, биоразлагаемые/биоразрушаемые полимеры, такие как полиглактин, поли (изобутилцианоакрилат), поли (2-гидроксиэтил-L-глутамин) и поли(молочная кислота). Биосовместимые носители, которые можно использовать при приготовлении парентерального состава с контролируемым высвобождением, включают углеводы, такие как декстраны, белки, такие как альбумин, липопротеины или антитела. Материалы для использования в имплантатах могут быть не биоразлагаемыми, например, полидиметилсилоксан, или биоразлагаемыми, такими как, например, поли(капролактон), поли(молочная кислота), поли(гликолевая кислота) или поли(ортоэфиры).

Для местного применения описанное соединение может быть составлено в виде мази или крема. Описанные соединения также могут быть составлены в ректальных композициях, таких как суппозитории или удерживающие клизмы, например, содержащие обычные основы для суппозиториев, такие как масло какао или другие глицериды.

Для интраназального введения или введения ингаляцией, описанные соединения могут быть удобно доставлены в форме раствора или суспензии из помпового распылителя, который сжимается или накачивается пациентом, или в виде аэрозольного спрея из находящегося под давлением контейнера или небулайзера с использованием подходящего пропеллента, например, дихлордифторметана, трихлорфторметана, дихлортетрафторэтана, диоксида углерода или другого подходящего газа. В случае аэрозоля под давлением, единичная доза может быть определена путем обеспечения клапана для доставки отмеренного количества. Контейнер под давлением или небулайзер может содержать раствор или суспензию описанного соединения. Капсулы и картриджи (сделанные, например, из желатина) для использования в ингаляторе или инсуффляторе могут быть составлены так, чтобы содержать порошковую смесь описанного соединения и подходящей порошковой основы, такой как лактоза или крахмал.

Обычно агенты и композиции, описанные в настоящем документе, вводят в эффективном количестве или количестве, достаточном для лечения или профилактики надъядерного паралич взора у субъекта, нуждающегося в этом. Обычно доза может быть скорректирована в этом диапазоне на основании, например, возраста, физического состояния, массы тела, пола, диеты, времени введения и других клинических факторов. Определение эффективного количества находится в компетенции специалиста в данной области техники.

Будучи в целом описанными в настоящем документе, следующие не ограничивающие примеры представлены для дополнительной иллюстрации этого изобретения.

ПРИМЕРЫ

Общие методики химического синтеза

Общая методика A: Образование карбамата с трифосгеном

К суспензии гидрохлорида амина (1 эквивалент) и триэтиламина (3-4 эквивалентов) в ТГФ (концентрация ~0,2 M) при комнатной температуре добавляют трифосген (0,35 эквивалента). Реакционную смесь перемешивают в течение 10 мин и добавляют небольшое количество простого эфира (1-2 мл). Соль триэтиламмония отфильтровывают с получением прозрачного раствора изоцианата в ТГФ/простом эфире.

К раствору спирта (1,5 эквивалента) в ТГФ (концентрация ~0,2 M) при комнатной температуре добавляют NaH [60%, масло] (1,5 эквивалента). Реакционную смесь перемешивают в течение 15 мин и вышеуказанный раствор (изоцианат в ТГФ/простом эфире) добавляют по каплям. Во время стандартной обработки, реакцию гасят насыщенным раствором соли. Раствор экстрагируют EtOAc, и органический слой сушат над Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт очищают на combiflash (SiO₂ картридж, CHCl₃ и 2N NH₃ в MeOH) с получением соответствующего карбамата.

Общая методика B: Алкилирование церийорганическим соединением

Суспензию CeCl₃ (4 эквивалента) в ТГФ (концентрация ~0,2 M) перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч. Суспензию охлаждают до -78°C и MeLi/Простой эфир [1,6M] (4 эквивалента) добавляют по каплям. Церийорганический комплекс образуется в течение 1 ч, и раствор нитрила (1 эквивалент) в ТГФ (концентрация 2.0 M) добавляют по каплям. Реакционную смесь нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение 18 ч. Раствор охлаждают до 0°C и гасят водой (~1 мл), затем добавляют 50% водный раствор гидроксида аммония (~3 мл) до образования осадка и осаждают на дно колбы. Смесь фильтруют через слой целита и концентрируют. Неочищенный продукт обрабатывают раствором HCl/диоксана [4,0 M]. Промежуточный гидрохлорид арилпропан-2-амина растирают в простом эфире и применяют как есть на следующей стадии. Альтернативно, неочищенное свободное основание амина очищают на combiflash (SiO₂ картридж, CHCl₃ и 2N NH₃ в MeOH) с получением соответствующего арилпропиламина.

Общая методика C: Сочетание Сузуки

К раствору арилгалогенида (1 эквивалент) в смеси ДМЭ/вода [4:1] (концентрация ~0,2 M) добавляют бороновую кислоту (2 эквивалента), палладиевый катализатор (0,1-0,25 эквивалента) и карбонат натрия (2 эквивалента). Реакционную смесь облучают микроволнами 25 мин при 150°C. После фильтрации через слой целита и концентрации, неочищенный продукт очищают на combiflash (SiO₂ картридж, CHCl₃ и 2N NH₃ в MeOH) с получением соответствующего продукта сочетания.

Альтернативно: К раствору арилгалогенида (1 эквивалент) в смеси толуола/воды [20:1] (концентрация ~ 0,2 M) добавляют бороновую кислоту (1,3-2,5 эквивалента), палладиевый катализатор (0,05-0,15 эквивалента), трициклогексилфосфин (0,15-0.45 эквивалент) и фосфат калия (5 эквивалентов). Реакционную смесь облучают микроволнами 25 мин при 150°C. После фильтрации через слой целита и концентрации, неочищенный продукт очищают на combiflash (SiO₂ картридж, CHCl₃ и 2N NH₃ в MeOH) с получением соответствующего продукта сочетания.

Общая методика D: Циклопропанирование

К смеси арилнитрила (1 эквивалент) и Ti(Oi-Pr)₄ (1,7 эквивалента), перемешиваемой при -70°C, добавляют по каплям EtMgBr [3,0 M в простом эфире] (1,1 эквивалента). Реакционную смесь нагревают до 25°C и перемешивают в течение 1 ч. К вышеуказанной смеси добавляют BF₃·Et₂O (3 эквивалента) по каплям при 25°C. После добавления, смесь перемешивают в течение еще 2 ч и затем гасят водной HCI [2M]. Полученный раствор затем подщелачивают добавлением водного NaOH [2M]. Органический продукт экстрагируют простым эфиром этила. Органические слои объединяют, сушат над Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт очищают колоночной хроматографией на силикагеле (элюируя петролейным эфиром/EtOAc: 10/1 до 1/1) с получением соответствующего 1-арилциклопропанамина.

Общая методика E: Биарильное сочетание с применением условий Сузуки

К перемешиваемому раствору арилгалогенидного компонента (1 эквивалент) в 5:1 (об./об.) диоксане/воде (~0,15 M) или 5:1 (об./об.) добавляют N, N-диметилформамид (~0,15 M), арилборонат или компонент арилбороновой кислоты (1-1,5 эквивалента), карбонат натрия (2-3 эквивалента) и [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий (II) (0,05 эквивалента). Смесь нагревают (90°C) в течение ночи и затем фильтруют через слой целита. Целит промывают этилацетатом и объединенный фильтрат промывают насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄) и концентрируют. Остаток очищают флэш-хроматографией над диоксидом кремния.

Общая методика F: Получение карбамата с применением изоцианата, созданного через путь смешанного ангидрида/перестановки Куртиуса

К перемешиваемому раствору компонента карбоновой кислоты (1 эквивалент) в тетрагидрофуране (~0,1 M) добавляют триэтиламин (2 эквивалента). Реакционную смесь охлаждают (0°C) и обрабатывают изобутилхлорформиатом (1,5 эквивалента). Через 1 час при 0°C, добавляют раствор азида натрия (2 эквивалента) в воде (~1 M), и реакционную смесь нагревают до комнатной температуры. После перемешивания в течение ночи, реакционную смесь разбавляют водой и экстрагируют этилацетатом. Объединенные экстракты промывают водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄) и концентрируют. Неочищенный ацилазид дополнительно сушат совместным выпариванием с толуолом и затем помещают в толуол (~0,1 M). Перемешанный раствор кипятят с обратным холодильником в течение 2-2,5 часов, охлаждают и обрабатывают спиртовым компонентом (1,25-2 эквивалента). Реакционную смесь нагревают при кипении с обратным холодильником в течение ночи и затем концентрируют. Остаток помещают либо в этилацетат, либо в хлороформ и промывают водным карбонатом натрия, (Na₂SO₄) и концентрируют. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией над диоксидом кремния с применением градиентов растворителей хлороформа/метанола (менее полярных карбаматов) или хлороформа/метанола/аммиака (более полярных карбаматов).

Пример 1: Синтез соединений хинуклидина

1-азабицикло[2,2,2]окт-3-ил [2-(4'-фторбифенил-3-ил)пропан-2-ил]карбамат (Соединение 1)

С применением общей методики C, 1-азабицикло[2,2,2]окт-3-ил [2-(3-бромфенил)пропан-2-ил]карбамат (600 мг, 1,63 ммоль), 4-фторфенилбороновую кислоту (457 мг, 3,27 ммоль) и ацетат палладия (II) дают указанное в заголовке соединение в виде белого твердого вещества (373 мг; 60%). ¹H ЯМР (400 MГц, CDCl₃) δ 7,56 (с, 1H), 7,52 (дд, J=5,4, 8,4 Гц, 2H), 7,42-7,38 (м,3H), 7,12 (м,2H), 5,18 (5, 1H), 4,62 (с, 1H), 2,66 (м,6H), 1,72 (с, 6H), 2,01-0,83 (м,5H) ч./млн. ¹³C ЯМР (100 MГц, CDCl₃) δ 125,0, 124,0, 123,8, 116,0, 116,0, 71,3, 55,9, 55,5, 47,6, 46,7, 29,6, 25,6, 24,8, 19,8 ч./млн. Чистота: 98,0% УЖХМС (210 нм); время удержания 0,95 мин; (M+1) 382,9. Анал. Рассч. для C₂₃H₂₇FN₂O₂·0,37 (CHCl₃): C, 65,86; H, 6,47; N, 6,57. Найдено: C, 65,85; H, 6,69; N, 6,49.

(S)-хинуклидин-3-ил 2-(2-(4-фторфенил)тиазол-4-ил)пропан-2-илкарбамат (Соединение 2)

К перемешиваемому раствору 4-фтортиобензамида (8,94 г, 57,6 ммоль) в этаноле (70 мл) добавляют этил 4-хлорацетоацетат (7,8 мл, 58 ммоль). Реакционную смесь нагревают при кипении с обратным холодильником в течение 4 часов, обрабатывают добавлением аликвоты этил 4-хлорацетоацетата (1,0 мл, 7,4 ммоль) и кипятят с обратным холодильником в течение еще 3,5 часов. Реакционную смесь затем концентрируют, и остаток разделяют между этилацетатом (200 мл) и водным NaHCO₃ (200 мл). Органический слой объединяют с обратным экстрактом водного слоя (этилацетат, 1×75 мл), сушат (Na₂SO₄) и концентрируют. Полученное янтарное масло очищают флэш-хроматографией с применением градиента гексан/этилацетат с получением этил 2-(2-(4-фторфенил)тиазол-4-ил)ацетата в виде низкоплавкого практически бесцветного твердого вещества (13,58 г, 89%).

К перемешиваемому раствору этил 2-(2-(4-фторфенил)тиазол-4-ил)ацетата (6,28 г, 23,7 ммоль) в ДМФ (50 мл) добавляют гидрид натрия [60% дисперсию в минеральном масле] (2,84 г, 71,0 ммоль). Пенистую смесь перемешивают в течение 15 минут, затем охлаждают на ледяной бане и добавляют йодметан (4,4 мл, 71 ммоль). Реакционную смесь перемешивают в течение ночи, позволяя охлаждающей бане медленно нагреваться до комнатной температуры. Смесь затем концентрируют и остаток разделяют между этилацетатом (80 мл) и водой (200 мл). Органический слой промывают второй порцией воды (1×200 мл), сушат (Na₂SO₄) и концентрируют. Полученное янтарное масло очищают флэш-хроматографией с применением градиента гексан/этилацетат с получением этил 2-(2-(4-фторфенил)тиазол-4-ил)-2-метилпропаноата в виде бесцветного масла (4,57 г, 66%).

К перемешиваемому раствору этил 2-(2-(4-фторфенил)тиазол-4-ил)-2-метилпропаноата (4,56 г, 15,5 ммоль) в 1:1:1 ТГФ/этаноле/воде (45 мл) добавляют моногидрат гидроксида лития (2,93 г, 69,8 ммоль). Реакционную смесь перемешивают в течение ночи, концентрируют и повторно растворяют в воде (175 мл). Раствор промывают простым эфиром (1×100 мл), подкисляют добавлением 1,0 N HCl (80 мл) и экстрагируют этилацетатом (2×70 мл). Объединенные экстракты сушат (Na₂SO₄) и концентрируют с получением 2-(2-(4-фторфенил)тиазол-4-ил)-2-метилпропановой кислоты в виде белого твердого вещества (4,04 г, 98%). Этот продукт применяют на следующей стадии без очистки.

К перемешиваемому и охлажденному (0°С) раствору 2-(2-(4-фторфенил)тиазол-4-ил)-2-метилпропановой кислоты (4,02 г, 15,2 ммоль) в ТГФ (100 мл) добавляют триметиламин (4,2 мл, 30 ммоль), затем изобутилхлорформиат (3,0 мл, 23 ммоль). Реакционную смесь перемешивают холодной в течение еще 1 часа, затем добавляют раствор азида натрия (1,98 г, 30,5 ммоль) в воде (20 мл). Реакционную смесь перемешивают в течение ночи, позволяя охлаждающей бане медленно нагреваться до комнатной температуры. Смесь затем разбавляют водой (100 мл) и экстрагируют этилацетатом (2×60 мл). Объединенные экстракты промывают водным NaHCO₃ (1×150 мл) и насыщенным раствором соли (1×100 мл), сушат (Na₂SO₄) и концентрируют. После совместного выпаривания с толуолом (2×50 мл), полученное белое твердое вещество помещают в толуол (100 мл) и кипятят с обратным холодильником в течение 4 часов. (S)-3-хинуклидинол (3,87 г, 30,4 ммоль) затем добавляют и кипячение с обратным холодильником продолжают в течение ночи. Реакционную смесь концентрируют, и остаток разделяют между этилацетатом (100 мл) и водным NaHCO₃ (150 мл). Органический слой промывают водой (1×150 мл), сушат (Na₂SO₄) и концентрируют. Полученное беловатое твердое вещество очищают флэш-хроматографией с применением градиента хлороформа/метанола/аммиака с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (4,34 г, 73%). ¹H ЯМР (400 MГц, CDCl₃) δ 7,96-7,88 (м, 2H), 7,16-7,04 (м, 3H), 5,55 (шс, 1H), 4,69-4,62 (м,1H), 3,24-3,11 (м,1H), 3,00-2,50 (м, 5H), 2,01-1,26 (м, 11H) ч./млн. ¹³C ЯМР (400 MГц, CDCl₃) δ 166,4, 165,1, 163,8 (д, J=250,3 Гц), 162,9, 155,0, 130,1 (д, J=3,3 Гц), 128,4 (д, J= 8,5 Гц), 115,9 (д, J= 22,3 Гц), 112,5, 71,2, 55,7, 54,2, 47,5, 46,5, 28,0, 25,5, 24,7, 19,6 ч./млн. Чистота: 100% УЖХМС (210 нм и 254 нм); время удержания 0,83 мин; (M+1) 390.

(S)-хинуклидин-3-ил (2-(4'-(2-метоксиэтокси)-[1,1'-бифенил]-4-ил)пропан-2-ил)карбамат (Соединение 3)

С применением общей методики E и введения в реакционную смесь этил 2-(4-бромфенил)-2-метилпропаноата и 4-(2-метоксиэтокси)фенилбороновой кислоты, этил 2-(4'-(2-метоксиэтокси)-[1,1'-бифенил]-4-ил)-2-метилпропаноат получают в виде беловатого твердого вещества. К перемешиваемому раствору этого соединения (3,01 г, 8,78 ммоль) в 1:1:1 (об./об./об.) тетрагидрофуране/этаноле/воде (45 мл) добавляют моногидрат гидроксида лития (1,47 г, 61,4 ммоль). Смесь нагревают при кипении с обратным холодильником в течение ночи и затем концентрируют. Остаток растворяют в воде, обрабатывают 1N хлористоводородной кислотой (65 мл) и экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические слои промывают насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄) и концентрируют с получением 2-(4'-(2-метоксиэтокси)-[1,1'-бифенил]-4-ил)-2-метилпропановой кислоты в виде белого твердого вещества (2,75 г, 100%). Это промежуточное соединение и (S)-хинуклидин-3-ол подвергают взаимодействию согласно общей методике F с получением указанного в заголовке соединения в виде бесцветного, стеклообразного твердого вещества. ¹H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d₆) δ 7,62-7,29 (м, 7H), 7,01 (д, J=8,9 Гц, 2H), 4,47-4,37 (м, 1H), 4,17-4,08 (м, 2H), 3,72-3,62 (м, 2H), 3,32 (с, 3H), 3,09-2,25 (м, 6H), 2,05-1,18 (м, 11H) ч./млн. ¹³C ЯМР (100 MГц, ДМСО-d₆) δ 157,9, 154,5, 146,7, 137,4, 132,5, 127,5, 125,7, 125,2, 114,8, 70,4, 70,0, 66,9, 58,2, 55,4, 54,2, 46,9, 45,9, 29,4, 25,3, 24,2, 19,2 ч./млн. Чистота: 100%, 100% (210 и 254 нм) УЖХМС; время удержания: 0,87 мин; (M+H⁺) 439,5.

1-азабицикло[2,2,2]окт-3-ил [2-(бифенил-3-ил)пропан-2-ил]карбамат (Соединение 4)

С применением общей методики C, 1-азабицикло[2,2,2]окт-3-ил [2-(3-бромфенил)пропан-2-ил]карбамат (600 мг, 1,63 ммоль), фенилбороновая кислота (398 мг, 3,27 ммоль) и ацетат палладия (II) дают указанное в заголовке соединение в виде белого твердого вещества (379 мг, 64%). ¹H ЯМР (400 MГц, CDCl₃) δ 7,61 (с, 1H), 7,56 (д, J= 7,4 Гц, 2H), 7,50-7,38 (м, 4H), 7,34 (м, 2H), 5,16 (с, 1H), 4,63 (с, 1H), 3,39-2,09 (м, 6H), 1,72 (с, 6H), 2,02-0,73 (м, 5H) ч./млн. ¹³C ЯМР (100 MГц, CDCl₃) δ 154,8, 147,8, 141,6, 129,0, 129,0, 128,6, 127,5, 125,8, 125,0, 124,0, 71,6, 71,3, 55,9, 55,5, 47,6, 46,8, 31,5, 30,2, 30,0, 29,5, 25,6, 24,8, 19,8 ч./млн. Чистота: 99% УЖХМС (210 нм); время удержания 0,84 мин; (M+1) 365,0. Анал. рассч. для C₂₃H₂₈N₂O₂·0,29 (CHCl₃): C, 70,02; H, 7,14; N, 7,01. Найдено: C, 70,02; H, 7,37; N, 6,84.

(S)-хинуклидин-3-ил 2-(бифенил-4-ил)пропан-2-илкарбамат (Соединение 5)

С применением общей методики B, бромбензонитрил (2,00 г, 11,0 ммоль) превращают в соответствующий 2-(4-бромфенил)пропан-2-амин (1,20 г, 51%) в виде коричневого масла.

С применением общей методики A, 2-(4-бромфенил)пропан-2-амин (1,0 г, 4,7 ммоль) и (S)-хинуклидин-3-ол дает (S)-хинуклидин-3-ил 2-(4-бромфенил)пропан-2-илкарбамат (1,0 г, 58%) в виде коричневого масла.

С применением общей методики C, вышеуказанный бромид (200 мг, 0,540 ммоль), фенилбороновая кислота (133 мг, 1,10 ммоль) и [PdCl₂(pddf)]CH₂Cl₂ дают указанное в заголовке соединение в виде белого твердого вещества (70 мг, 35%). ¹H ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ 7,60-7,53 (м, 4H), 7,47 (д, J=8,5 Гц, 2H), 7,42 (т, J=7,5 Гц, 2H), 7,33 (т, J=7,5 Гц, 1H), 5,26 (шс, 1H), 4,64 (м, 1H), 3,33-3,15 (м, 1H), 3,10-2,45 (м, 5H), 2,40-1,80 (м, 2H), 1,78-1,58 (м, 7H), 1,55-1,33 (м, 2H) ч./млн. ¹³C ЯМР (125 MГц, CDCl₃) δ 154,5, 146,1, 140,8, 139,5, 128,7, 127,2, 127,1, 127,1, 125,2, 70,9, 55,5, 55,1, 47,4, 46,4, 31,1, 29,5, 25,3, 24,5, 19,5 ч./млн. Чистота: 100% ЖХМС (214 нм и 254 нм); время удержания 1,56 мин; (M+1) 365.

Хинуклидин-3-ил 1-(бифенил-4-ил)циклопропилкарбамат (Соединение 6)

С применением общей методики D, бромбензонитрил (3,00 г, 16,5 ммоль) превращают в соответствующий 1-(4-бромфенил)циклопропанамин (1,80 г, 51%) в виде желтого твердого вещества.

С применением общей методики A, 1-(4-бромфенил)циклопропанамин (1,0 г, 4,7 ммоль) и хинуклидин-3-ол дает хинуклидин-3-ил 1-(4-бромфенил)циклопропилкарбамат (1,3 г, 75%) в виде белого полутвердого вещества.

С применением общей методики C, вышеуказанный карбамат (400 мг, 1,12 ммоль), фенилбороновая кислота (267 мг, 2,22 ммоль) и [PdCl₂(pddf)]CH₂Cl₂ дают указанное в заголовке соединение в виде вязкого масла (100 мг, 25%). ¹H ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ 7,47 (д, J= 7,5 Гц, 2H), 7,43 (д, J= 8,0 Гц, 2H), 7,33 (т, J= 7,5 Гц, 2H), 7,26-7,15 (м, 3H), 5,93 (шс, 0,6H), 5,89 (шс, 0,4H), 4,67 (м, 1H), 3,20-3,06 (м, 1H), 2,88-2,42 (м, 5H), 1,98-1,08 (м, 9H) ч./млн. ¹³C ЯМР (125 MГц, CDCl₃) δ 155,0, 141,0, 139,7, 138,2, 127,7, 126,1, 126,0, 124,8, 124,1, 70,0, 54,5, 46,3, 45,4, 34,1, 24,3, 23,2, 18,3, 17,0 ч./млн. Чистота: 100% ЖХМС (214 нм и 254 нм); время удержания 1,52 мин; (M+1) 363.

(S)-хинуклидин-3-ил 1-(4'-фторбифенил-4-ил)циклопропилкарбамат (Соединение 7)

С применением общей методики C, (S)-хинуклидин-3-ил 1-(4-бромфенил)циклопропил карбамат, 4-F-фенилбороновая кислота и [PdCl₂(pddf)]CH₂Cl₂ дают указанное в заголовке соединение в виде белого твердого вещества (45%). ¹H ЯМР (500 MГц, ДМСО-d₆) δ 8,06-7,83 (д, 1H), 7,69-7,66 (м, 2H), 7,59-7,55 (м, 2H), 7,29-7,22 (м, 4H), 4,56-4,54 (м, 1H), 3,13-2,32 (м, 6H), 1,91-1,19 (м, 9H) ч./млн. ¹³C ЯМР (125 MГц, ДМСО-d₆) δ 163,2, 161,2, 156,4, 143,7, 136,9, 128,9, 128,8, 126,8, 125,6, 116,2, 116,0, 70,7, 55,8, 47,4, 46,4, 34,8, 25,7, 24,6, 19,6, 18,7, 18,6 ч./млн. Чистота: > 97% ЖХМС (214 нм и 254 нм); время удержания 1,96 мин; (M+1) 381,2.

(S)-1-азабицикло[2,2,2]окт-3-ил [1-(2',4'-дифторбифенил-4-ил)циклопропил]карбамат (Соединение 8)

С применением общей методики C, (S)-хинуклидин-3-ил 1-(4-бромфенил)циклопропилкарбамат (0,446 г, 1,22 ммоль), 2,4-дифторфенилбороновая кислота (0,386 г, 2,44 ммоль) и Pd(OAc)₂ (0,015 г, 0,067 ммоль) дают указанное в заголовке соединение в виде рыжевато-коричневого твердого вещества (0,111 г, 23%). ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 7,43 (дд, J=8,4, 1,6 Гц, 2H), 7,40-7,33 (м, 1H), 7,31 (д, J=7,7 Гц, 2H), 6,99-6,81 (м, 2H), 5,54 (д, J=48,0 Гц, 1H), 4,82-4,65 (м, 1H), 3,30-3,07 (м, 1H), 2,98-2,44 (м, 5H), 1,97 (д, J=32,7 Гц, 1H), 1,83 (д, J=10,3 Гц, 1H), 1,64 (с, 1H), 1,52 (с, 1H), 1,39 (с, 1H), 1,31 (д, J=6,8 Гц, 4H) ч./млн. ¹³C ЯМР основной ротомер (CDCl₃) δ 162,2 (дд, J=12,8, 249,1 Гц), 159,8 (дд, J=11,8, 251,0 Гц), 156,9, 156,0, 142,6, 133,1, 131,3 (м), 128,9, 125,6, 124,9, 111,5 (дд, J=3,9, 21,2 Гц) 104,4 (дд, J=25,2, 29,4 Гц), 72,1, 71,6, 55,7, 47,4, 46,5, 35,7, 35,3, 25,5, 24,6, 24,4, 19,5, 18,1 ч./млн. Чистота: ЖХМС >99,3% (214 нм и 254 нм); время удержания 0,90 мин; (M+1) 399,0.

1-азабицикло[2,2,2]окт-3-ил [1-(4'-метоксибифенил-4-ил)циклопропил]карбамат (Соединение 9)

С применением общей методики C, хинуклидин-3-ил 1-(4-бромфенил)циклопропилкарбамат (0,485 г, 1,33 ммоль), 4-метоксифенилбороновая кислота (0,404 г, 2,66 ммоль) и Pd(OAc)₂ (0,016 г, 0,071 ммоль) дают указанное в заголовке соединение в виде серого твердого вещества (0,337 мг, 65%). ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 7,48 (дд, J=8,6, 5,5 Гц, 4H), 7,29 (д, J=7,6 Гц, 2H), 6,96 (д, J=8,8 Гц, 2H), 5,58 (д, J=48,7 Гц, 1H), 4,83-4,63 (м, 1H), 3,84 (с, 3H), 3,20 (дд, J=24,0, 15,5 Гц, 1H), 2,97-2,42 (м, 5H), 1,97 (д, J=30,9 Гц, 1H), 1,81 (с, 1H), 1,75-1,33 (м, 3H), 1,28 (д, J=6,8 Гц, 4H) ч./млн. ¹³C ЯМР основной ротомер (CDCl₃) δ 159,1, 156,0, 141,4, 139,0, 133,4, 128,0, 126,7, 125,9, 114,2, 71,5, 55,7, 55,3, 47,4, 46,5, 35,3, 25,5, 24,6, 19,6, 17,8 ч./млн. Чистота: ЖХМС >97,1% (214 нм и 254 нм); время удержания 0,88 мин; (M+1) 393,4.

Хинуклидин-3-ил 2-(5-(4-фторфенил)тиофен-3-ил)пропан-2-илкарбамат (Соединение 10)

К перемешиваемому и охлажденному (0°C) раствору этил 5-бромтиофен-3-карбоксилата (13,30 г, 56,57 ммоль) в ТГФ (100 мл) добавляют раствор бромид метилмагния в диэтиловом эфире [3,0 M] (55,0 мл, 165 ммоль), по каплям в течение 20 минут. Через 2 часа, реакционный раствор концентрируют. Остаток помещают в водный NH₄Cl (200 мл) и экстрагируют этилацетатом (2×100 мл). Объединенные экстракты сушат (Na₂SO₄) и концентрируют. Полученное янтарное масло очищают флэш-хроматографией с применением градиента гексан/этилацетат с получением 2-(5-бромтиофен-3-ил)пропан-2-ола в виде бледно-янтарного масла (8,05 г, 64%).

К перемешиваемому раствору 2-(5-бромтиофен-3-ил)пропан-2-ол (8,03 г, 36,3 ммоль) в метиленхлориде (80 мл) добавляют азид натрия (7,08 г, 109 ммоль) затем трифторуксусную кислоту (8,0 мл; по каплям в течение 5-6 минут). Загущающую суспензию перемешивают в течение 1,5 часа, затем разбавляют водой (350 мл) и экстрагируют этилацетатом (1×200 мл). Органический слой промывают водным NaHCO₃ (1×250 мл), сушат (Na₂SO₄) и концентрируют с получением неочищенного продукта азида. К перемешиваемому раствору этого продукта в ТГФ (160 мл) добавляют воду (11 мл) затем трифенилфосфин (23,8 г, 90,7 ммоль). Реакционную смесь перемешивают в течение 2 дней, затем концентрируют. Полученный остаток растворяют в этилацетате (250 мл) и экстрагируют 1 N водной HCl (4×75 мл). Объединенные экстракты подщелачивают концентрированным NH₄OH и экстрагируют этилацетатом (2×100 мл). Эти экстракты, в свою очередь, сушат (Na₂SO₄) и концентрируют. Полученное янтарное масло очищают флэш-хроматографией с применением градиента метиленхлорид/метанол/аммиак с получением смеси 2-(5-бромтиофен-3-ил)пропан-2-амина и оксида трифенилфосфина (соотношение ~70/30) в виде вязкого янтарного масла (1,32 г, 17%).

К перемешиваемому раствору 3-хинуклидинола (3,00 г, 23,6 ммоль) в ТГФ (100 мл) добавляют 4-нитрофенилхлороформиат (5,94 г, 29,5). После перемешивания в течение 4 часов, осадок отфильтровывают, промывают ТГФ и сушат на воздухе на фритте под лабораторным вакуумом. Фильтровальную лепешку растворяют в этилацетате (150 мл) и промывают водным NaHCO₃ (1×150 мл) и водой (2×150 мл). Органический слой сушат (Na₂SO₄) и концентрируют с получением неочищенного карбоната 4-нитрофенилхинуклидин-3-ила, который применяют на следующей стадии без очистки.

К перемешиваемому раствору 2-(5-бромтиофен-3-ил)пропан-2-амина (0,366 г, 1,66 ммоль) в ТГФ (10 мл) добавляют карбонат 4-нитрофенилхинуклидин-3-ил (0,571 г, 1,95 ммоль) и несколько гранул 4-(диметиламино)пиридина. Смесь кипятят с обратным холодильником в течение ночи, концентрируют и разделяют между этилацетатом (50 мл) и водным NaHCO₃ (50 мл). Органический слой снова промывают водным NaHCO₃ (1×50 мл), сушат (Na₂SO₄) и концентрируют. Полученную грязно-желтую камедь очищают флэш-хроматографией с применением градиента хлороформ/метанол/аммиак с получением хинуклидин-3-ил (1-(5-бромтиофен-3-ил)циклопропил)карбамата в виде беловатого твердого вещества (0,305 г, 49%).

С применением общей методики C, хинуклидин-3-ил (1-(5-бромтиофен-3-ил)циклопропил)карбамат (0,227 г, 0,742 ммоль), 4-фторфенилбороновая кислота (0,208 г, 1,49 ммоль), трициклогексилфосфин (0,021 г, 0,075 ммоль), фосфат калия (0,866, 4,08 ммоль) и ацетат палладия (8,0 мг, 36 мкмоль) дают указанное в заголовке соединение в виде серого твердого вещества (0,142 г, 49%). ¹H ЯМР (400 MГц, CDCl₃) δ 7,60-7,45 (м, 2H), 7,24-7,19 (м, 1H), 7,10-6,97 (м, 3H), 5,23 (шс, 1H), 4,72-4,61 (м, 1H), 3,30-3,04 (м, 1H), 3,03-2,25 (м, 5H), 2,09-1,02 (м, 11H) ч./млн. ¹³C ЯМР (400 MГц, CDCl₃) δ 162,3 (д, J=247,1 Гц), 154,5, 149,8, 143,6, 130,7, 127,4 (д, J=8,1 Гц), 121,8, 118,9, 115,8 (д, J=21,6 Гц), 70,8, 55,5, 53,4, 47,3, 46,4, 29,0, 25,4, 24,4, 19,4 ч./млн. Чистота: 95,8% УЖХМС (210 нм и 254 нм); время удержания 0,90 мин; (M+1) 389.

(S)-хинуклидин-3-ил 2-(3-(4-фторфенил)изотиазол-5-ил)пропан-2-илкарбамат (Соединение 11)

К перемешиваемому раствору 2-(3-(4-фторфенил)изотиазол-5-ил)пропан-2-амина (1,21 г, 5,12 ммоль) в толуоле добавляют раствор фосгена в толуоле [~1,9 M] (10,8 мл, 20,5 ммоль). Реакционную смесь нагревают при кипении с обратным холодильником в течение двух часов и затем концентрируют. Остаток совместно выпаривают с толуолом (2×15 мл) с получением неочищенного промежуточного изоцианата в виде золотистого масла. Этот продукт помещают в толуол (10 мл) и обрабатывают (S)-3-хинуклидинолом (0,749 г, 5,89 ммоль). Реакционную смесь нагревают при кипении с обратным холодильником в течение ночи и концентрируют. Остаток очищают флэш-хроматографией с применением градиента хлороформ/метанол/аммиак с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (0,971 г, 49%). ¹H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d₆) δ 8,09-8,00 (м, 2H), 7,87 (шс, 1H), 7,75 (с, 1H), 7,35-7,25 (м, 2H), 4,54-4,45 (м, 1H), 3,14-2,92 (м, 1H), 2,87-2,17 (м, 5H), 1,98-0,98 (м, 11H) ч./млн. ¹³C ЯМР (400 MГц, ДМСО-d₆) δ 180,1, 165,6, 162,6 (д, J=246,4 Гц), 154,7, 131,2 (д, J=3,0 Гц), 128,7 (д, J=8,4 Гц), 118,2, 115,7 (д, J=21,8 Гц), 70,6, 55,3, 52,8, 46,9, 45,9, 29,9, 25,2, 24,2, 19,2 ч./млн. Чистота: 100% УЖХМС (210 нм и 254 нм); время удержания 0,82 мин; (M+1) 390.

(S)-хинуклидин-3-ил 2-(4-(4-фторфенил)тиазол-2-ил)пропан-2-илкарбамат (Соединение 12)

К перемешиваемому раствору этил 3-амино-3-тиоxoпропаноата (20,00 г, 135,9 ммоль) в этаноле (120 мл) добавляют 2-бром-4’-фторацетофенон (29,49 г, 135,9 ммоль). Смесь кипятят с обратным холодильником в течение 1 часа, концентрируют и разделяют между этилацетатом (300 мл) и водным NaHCO₃ (400 мл). Органический слой объединяют с обратным экстрактом водного слоя (этилацетат, 1×100 мл), сушат (Na₂SO₄) и концентрируют. Полученное светло-коричневое твердое вещество очищают флэш-хроматографией с применением градиента гексан/этилацетат с получением этил 2-(4-(4-фторфенил)тиазол-2-ил)ацетата в виде беловатого твердого вещества (29,92 г, 83%).

К перемешиваемому и охлажденному (-78°C) раствору этил 2-(4-(4-фторфенил)тиазол-2-ил)ацетата (10,00 г, 37,69 ммоль) в ТГФ (250 мл) добавляют раствор трет-бутоксида калия в ТГФ [1,0 M] (136 мл, 136 ммоль), по каплям в течение 15 минут, затем 18-краун-6 (1,6 мл, 7,5 ммоль). Через еще 30 минут при -78°C добавляют йодметан (8,5 мл), по каплям в течение 5 минут. Реакционную смесь перемешивают холодной в течение еще 2 часов, затем выливают в воду (450 мл) и экстрагируют этилацетатом (2×150 мл). Объединенные экстракты промывают насыщенным раствором соли (1×200 мл), сушат (Na₂SO₄) и концентрируют. Полученное коричневое масло очищают флэш-хроматографией с применением градиента гексан/этилацетат с получением этил 2-(4-(4-фторфенил)тиазол-2-ил)-2-метилпропаноата в виде бледно-янтарного масла (8,64 г, 78%).

К перемешиваемому раствору этил 2-(4-(4-фторфенил)тиазол-2-ил)-2-метилпропаноата (0,900 г, 3,07 ммоль) в 1:1:1 ТГФ/этаноле/воде (15 мл) добавляют моногидрат гидроксида лития (0,451 г, 10,7 ммоль). После перемешивания в течение ночи, реакционную смесь концентрируют и повторно растворяют в воде (80 мл). Раствор промывают простым эфиром (1×50 мл), подкисляют добавлением 1N HCl (15 мл) и экстрагируют этилацетатом (2×50 мл). Объединенные экстракты сушат (Na₂SO₄) и концентрируют с получением 2-(4-(4-фторфенил)тиазол-2-ил)-2-метилпропановой кислоты в виде бледно-золотистого твердого вещества (0,808 г, 99%).

К перемешиваемому и охлажденному (0°C) раствору 2-(4-(4-фторфенил)тиазол-2-ил)-2-метилпропановой кислоты (0,784 г, 2,96 ммоль) в ТГФ (25 мл) добавляют триэтиламин (0,82 мл, 5,9 ммоль) затем изобутилхлорформиат (0,58 мл, 4,4 ммоль). Реакционную смесь перемешивают холодной в течение еще 1 часа, затем добавляют раствор азида натрия (0,385 г, 5,92 ммоль) в воде (7 мл). Реакционную смесь перемешивают в течение ночи, позволяя охлаждающей бане медленно нагреваться до комнатной температуры. Смесь затем разбавляют водой (100 мл) и экстрагируют этилацетатом (2×60 мл). Объединенные экстракты промывают водным NaHCO₃ (1×150 мл) и насыщенным раствором соли (1×100 мл), сушат (Na₂SO₄) и концентрируют. После совместного выпаривания с толуолом (2×30 мл), полученное беловатое твердое вещество помещают в толуол (25 мл) и кипятят с обратным холодильником в течение 4 часов. (S)-3-хинуклидинол (0,753 г, 5,92 ммоль) затем добавляют, и кипение с обратным холодильником продолжают в течение 3 часов. Реакционную смесь концентрируют, и остаток очищают флэш-хроматографией с применением градиента хлороформ/метанол/аммиак с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (0,793 г, 69%). ¹H ЯМР (400 MГц, CDCl₃) δ 7,90-7,81 (м, 2H), 7,32 (с, 1H), 7,14-7,05 (м, 2H), 5,76 (шс, 1H), 4,72-4,65 (м, 1H), 3,26-3,10 (м, 1H), 3,03-2,37 (м, 5H), 2,05-1,23 (м, 11H) ч./млн. ¹³C ЯМР (400 MГц, CDCl₃) δ 177,6, 162,6 (д, J=248,4 Гц), 154,8, 153,6, 130,8 (д, J=3,2 Гц), 128,1 (д, J=8,1 Гц), 115,9 (д, J=21,7 Гц), 112,2, 71,6, 55,7, 47,4, 46,5, 29,1, 25,4, 24,7, 19,6 ч./млн. Чистота: 100% УЖХМС (210 нм и 254 нм); время удержания 0,82 мин; (M+1) 390.

Хинуклидин-3-ил (2-(4'-(2-метоксиэтокси)-[1,1'-бифенил]-4-ил)пропан-2-ил)карбамат (Соединение 13)

С применением общей методики F и введением в реакционную смесь 2-(4'-(2-метоксиэтокси)-[1,1'-бифенил]-4-ил)-2-метилпропановой кислоты (полученной, как описано в примере 3) и хинуклидин-3-ола, указанное в заголовке соединение получают в виде бесцветного, стеклообразного твердого вещества (23%). Данные ЯМР совпадают с таковым из примера 3. Чистота: 100%, 99,1% (210 & 254 нм) УЖХМС; время удержания: 0,87 мин; (M+H⁺) 439,0.

(S)-хинуклидин-3-ил (2-(3’-(2-метоксиэтокси)-[1,1’-бифенил]-4-ил)пропан-2-ил)карбамат (Соединение 14)

Заменяя 4-(2-метоксиэтокси)фенилбороновую кислоту 3-(2-метоксиэтокси)фенилбороновой кислотой, последовательность реакционной смеси, указанную в примере 3, применяют для получения 2-(3'-(2-метоксиэтокси)-[1,1'-бифенил]-4-ил)-2-метилпропановой кислоты. Это промежуточное соединение и хинуклидин-3-ол подвергают взаимодействию согласно общей методике F с получением указанного в заголовке соединения в виде стеклообразного, бесцветного твердого вещества. ¹H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d₆) δ 7,63-7,31 (м, 6H), 7,24-7,10 (м, 2H), 6,92 (дд, J=8,2, 1,9 Гц, 1H), 4,51-4,34 (м, 1H), 4,21-4,08 (м, 2H), 3,72-3,64 (м, 2H), 3,32 (с, 3H), 3,09-2,26 (м, 5H), 2,04-1,22 (м, 9H) ч./млн. ¹³C ЯМР (100 MГц, ДМСО-d₆) δ 158,9, 154,6, 147,6, 141,5, 137,6, 129,9, 126,3, 125,2, 118,9, 113,2, 112,5, 70,4, 70,0, 66,9, 58,2, 55,4, 54,2, 46,9, 45,9, 29,4, 25,3, 24,2, 19,2 ч./млн. Чистота: 100%, 100% (210 и 254 нм) УЖХМС; время удержания: 0,91 мин; 15 (M+H⁺) 439,4.

Хинуклидин-3-ил (2-(4’-(2-метоксиэтокси)-[1,1’-бифенил]-3-ил)пропан-2-ил)карбамат (Соединение 15)

Заменяя этил 2-(4-бромфенил)-2-метилпропаноат этил 2-(3-бромфенил)-2-метилпропаноатом, последовательность реакционной смеси, указанную в примере 3, применяют для получения 2-(4'-(2-метоксиэтокси)-[1,1'-бифенил]-3-ил)-2-метилпропановой кислоты. Это промежуточное соединение и хинуклидин-3-ол подвергают взаимодействию согласно общей методике F с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества. ¹H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d₆) δ 7,62-7,20 (м, 7H), 7,03 (д, J=8,7 Гц, 2H), 4,48-4,35 (м, 2H), 4,18-4,08 (м, 2H), 3,72-3,62 (м, 2H), 3,32 (с, 3H), 3,10-2,19 (м, 6H), 2,10-1,10 (м, 11H) ч./млн. ¹³C ЯМР (100 MГц, ДМСО-d₆) δ 158,0, 154,6, 148,8, 139,5, 133,1, 128,5, 127,7, 123,8, 123,2, 122,7, 114,8, 70,4, 69,9, 67,0, 58,2, 55,3, 54,5, 47,0, 45,9, 29,4, 25,3, 24,2, 19,2 ч./млн. Чистота: 97,4%, 94,6% (210 и 254 нм) УЖХМС; время удержания: 0,88 мин; (M+H⁺) 439,3.

Хинуклидин-3-ил (2-(4'-(3-метоксипропокси)-[1,1'-бифенил]-4-ил)пропан-2-ил)карбамат (Соединение 16)

К перемешиваемому раствору 4-йодфенола (10,05 г, 45,68 ммоль) в ацетонтриле (100 мл) добавляют карбонат калия (6,95 г, 50,2 ммоль) и 1-хлор-3-метоксипропан (6,4 мл, 57,1 ммоль). Смесь нагревают при кипении с обратным холодильником в течение ночи и затем концентрируют. Остаток помещают в воду и экстрагируют этилацетатом. Объединенные экстракты промывают водным раствором бикарбоната натрия, сушат (Na₂SO₄) и концентрируют. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией над диоксидом кремния с применением элюента гексан/этилацетат с получением 1-йод-4-(3-метоксипропокси)бензола в виде бесцветного масла (4,39 г, 33%). Это промежуточное соединение и этил 2-метил-2-(4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)пропаноат подвергают взаимодействию согласно общей методике E с получением этил 2-(4'-(3-метоксипропокси)-[1,1'-бифенил]-4-ил)-2-метилпропаноата. К перемешиваемому раствору этого соединения (0,693 г, 1,94 ммоль) в 1:1:1 (об./об./об.) тетрагидрофуране/этаноле/воде (10 мл) добавляют моногидрат гидроксида лития (0,326 г, 7,77 ммоль). Смесь нагревают при кипении с обратным холодильником в течение ночи и затем концентрируют. Остаток растворяют в воде, обрабатывают 1N хлористоводородной кислотой (10 мл) и экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические слои промывают насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄) и концентрируют с получением 2-(4'-(3-метоксипропокси)-[1,1'-бифенил]-4-ил)-2-метилпропановой кислоты в виде воскообразного беловатого твердого вещества (0,630 г, 99%). Это промежуточное соединение и хинуклидин-3-ол подвергают взаимодействию согласно общей методике F с получением указанного в заголовке соединения в виде стеклообразного, бесцветного твердого вещества (62%). ¹H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d₆) δ 7,61-7,29 (м, 7H), 7,00 (д, J= 8,8 Гц, 2H), 4,47-4,36 (м, 1H), 4,05 (т, J= 6,4 Гц, 2H), 3,48 (т, J=6,3 Гц, 2H), 3,26 (с, 3H), 3,10-2,25 (м, 6H), 2,04-1,74 (м, 4H), 1,65-1,23 (м, 9H) ч./млн.,1³C ЯМР (100 MГц, ДМСО-d6) δ 158,0, 154,5, 146,7, 137,4, 132,4, 127,5, 125,7, 125,2, 114,8, 69,9, 68,5, 64,6, 57,9, 55,4, 54,2, 46,9, 46,0, 29,4, 29,0, 25,2, 24,1, 19,2 ч./млн. Чистота: 97,7%, 98,2% (210 и 254 нм) УЖХМС; время удержания: 0,96 мин; (M+H⁺) 453,5.

Хинуклидин-3-ил (2-(4'-(гидроксиметил)-[1,1'-бифенил]-4-ил)пропан-2-ил)карбамат (Соединение 17)

С применением общей методики E и вводя в реакционную смесь этил 2-(4-бромфенил)-2-метилпропаноат и 4-формилфенилбороновую кислоту, этил 2-(4'-формил-[1,1'-бифенил]-4-ил)-2-метилпропаноат получают в виде бледно-янтарного твердого вещества. Это промежуточное соединение и хинуклидин-3-ол подвергают взаимодействию согласно общей методике F с получением хинуклидин-3-ил (2-(4'-формил-[1,1'-бифенил]-4-ил)пропан-2-ил)карбамата в виде пенистого желтого твердого вещества. К перемешиваемому раствору этого продукта (0,755 г, 1,92 ммоль) в 2:1 (об./об.) тетрагидрофуране/этаноле (15 мл) добавляют боргидрид натрия (0,073 г, 1,93 ммоль). Через 45 минут, реакционную смесь разбавляют водой и экстрагируют хлороформом. Объединенные экстракты сушат (Na₂SO₄) и концентрируют на диоксиде кремния. Флэш-хроматография на диоксиде кремния с применением элюента хлороформ/метанол/аммиак дает указанное в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (0,323 г, 43%). ¹H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d₆) δ 7,66-7,29 (м,9H), 5,18 (т, J= 5,7 Гц, 1H), 4,53 (д, J= 5,7 Гц, 2H), 4,46-4,37 (м,1H), 3,11-2,19 (м,6H), 2,11-1,10 (м,11H) ч./млн. ¹³C ЯМР (100 MГц, ДМСО-d₆) δ 154,7, 147,3, 141,5, 138,4, 137,7, 127,0, 126,2, 126,1, 125,3, 70,0, 62,6, 55,4, 54,2, 46,9, 45,9, 29,4, 25,3, 24,2, 19,2 ч./млн. Чистота: 97,5%, 99,1% (210 и 254 нм) УЖХМС; время удержания: 0,73 мин; (M+H⁺) 395.

Хинуклидин-3-ил (2-(4'-(2-гидроксиэтил)-[1,1'-бифенил]-4-ил)пропан-2-ил)карбамат (Соединение 18)

С применением общей методики E и вводя в реакционную смесь 1-(2-(бензилокси)этил)-4-бромбензол и этил 2-метил-2-(4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)пропаноат, этил 2-(4'-(2-(бензилокси)этил)-[1,1'-бифенил]-4-ил)-2-метилпропаноат получают в виде бесцветной камеди. К перемешиваемому раствору этого соединения (1,34 г, 3,33 ммоль) в 1:1:1 (об./об./об.) тетрагидрофурана/этанола/воды (18 мл) добавляют моногидрат гидроксида лития (0,698 г, 16,6 ммоль). После нагревания при температуре кипения с обратным холодильником в течение ночи, реакционную смесь концентрируют и разделяют между водой и диэтиловым эфиром. Полученную эмульсию повторно экстрагируют 0,2 N водным раствором гидроксида натрия (5×50 мл). Прозрачную часть водного слоя удаляют каждый раз. Объединенные водные слои затем обрабатывают 1,0 N хлористоводородной кислотой (80 мл) и полученную суспензию белого твердого вещества экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические слои сушат (Na₂SO₄) и концентрируют с получением 2-(4'-(2-(бензилокси)этил)-[1,1'-бифенил]-4-ил)-2-метилпропановой кислоты в виде белого твердого вещества (1,20 г, 96%). Это соединение и хинуклидин-3-ол подвергают взаимодействию согласно общей методике F с получением хинуклидин-3-ил (2-(4'-(2-бензилоксиэтил)-[1,1'-бифенил]-4-ил)пропан-2-ил)карбамата. К перемешиваемому раствору этого продукта (0,435 г, 0,806 ммоль) в метаноле добавляют 1,0 N хлористоводородной кислоты (1 мл) и 10% палладия на угле (50% воды; 0,087 г). Смесь циклируют между вакуумом и продувкой азотом несколько раз, повторно заполняют водородом после последнего вакуумирования. Через 1,25 часа реакционную смесь фильтруют через Целит и концентрируют. Остаток помещают в водный раствор карбоната натрия и экстрагируют 4:1 (об./об.) хлороформом/изопропанолом. Объединенные экстракты сушат (Na₂SO₄) и концентрируют в диоксид кремния. Флэш-хроматография над диоксидом кремния с применением градиента хлороформ/метанол/аммиак дает очищенное указанное в заголовке соединение в виде бесцветного твердого вещества. ¹H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d₆) δ 7,85-7,63 (м,1H), 7,63-7,19 (м,8H), 4,78-4,62 (м,2H), 3,71-2,78 (м,8H), 2,76 (т, J= 6,8 Гц, 2H), 2,26-1,96 (м,2H), 1,96-1,40 (м,9H) ч./млн. ¹³C ЯМР (100 MГц, ДМСО-d₆) δ 153,8, 146,8, 138,7, 137,9, 137,6, 129,4, 126,3, 126,1, 125,3, 66,2, 62,1, 54,4, 52,8, 45,4, 44,5, 38,6, 29,5, 29,2, 24,0, 19,9, 16,6 ч./млн. Чистота: 100%, 100% (210 и 254 нм) УЖХМС; время удержания: 0,75 мин; (M+H⁺) 409.

Хинуклидин-3-ил (2-(2-(4-(3-метоксипропокси)фенил)тиазол-4-ил)пропан-2-ил)карбамат (Соединение 19)

К перемешиваемой суспензии 4-метокситиобензамида (9,99 г, 59,7 ммоль) в этаноле (75 мл) добавляют этил 4-хлорацетоацетат (8,1 мл, 60 ммоль). Смесь нагревают при кипении с обратным холодильником в течение 4 часов, затем охлаждают, добавляют еще этил 4-хлорацетоацетат (0,81 мл, 6,0 ммоль) и возвращают к кипению с обратным холодильником. Через еще 4 часа нагревания, реакционную смесь концентрируют и разделяют между этилацетатом и водным раствором бикарбоната натрия. Органический слой объединяют с дополнительными экстрактами этилацетата, сушат (Na₂SO₄) и концентрируют. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией над диоксидом кремния с применением градиента гексан/этилацетат с получением этил 2-(2-(4-метоксифенил)тиазол-4-ил)ацетат в виде бледно-янтарного масла (14,51 г, 87%). К перемешиваемому раствору этого соединения (14,48 г, 52,2 ммоль) в N, N-диметилформамиде (125 мл) добавляют гидрид натрия (60% дисперсию в минеральном масле; 6,27 г, 157 ммоль), порциями, в течение более 15 минут. Полученную красную суспензию охлаждают (0°C) и обрабатывают, по каплям, в течение 10 минут, йодметаном (9,80 мл, 157 ммоль). Охлаждающую баню удаляют, и реакционную смесь перемешивают 4 часа, затем концентрируют и разделяют остаток между этилацетатом и водой. Органический слой дважды промывают водой, сушат (Na₂SO₄) и концентрируют. Остаток очищают флэш-хроматографией над диоксидом кремния с применением градиента гексан/этилацетат с получением этил 2-(2-(4-метоксифенил)тиазол-4-ил)-2-метилпропаноата в виде бледно-янтарного масла (14,12 г, 89%). К перемешиваемому раствору этого промежуточного соединения (14,12 г, 46,24 ммоль) в метиленхлориде (250 мл) добавляют трибромид бора (11,0 мл, 116 ммоль), по каплям в течение 5 минут. После перемешивания в течение ночи, реакцию гасят медленным добавлением метанола (~20 мл) и затем концентрируют. Остаток помещают в метанол (250 мл) и концентрированную серную кислоту (7,0 мл). Перемешанный раствор нагревают при кипении с обратным холодильником в течение 2 часов, концентрируют и разделяют между этилацетатом и водным раствором бикарбоната натрия. Органический слой объединяют со вторым экстрактом этилацетата водного слоя, сушат (Na₂SO₄) и концентрируют с получением метил 2-(2-(4-гидроксифенил)тиазол-4-ил)-2-метилпропаноата в виде белого твердого вещества (12,56 г, 98%). К перемешиваемому раствору 1-бром-3-метоксипропана (1,66 г, 10,8 ммоль) в ацетоне (30 мл) добавляют промежуточный фенол (2,00 г, 7,21 ммоль) и карбонат калия (1,25 г, 9,04 ммоль). Смесь нагревают в течение ночи при кипении с обратным холодильником, фильтруют и концентрируют. Остаток очищают флэш-хроматографией над диоксидом кремния с применением градиента гексан/этилацетат с получением метил 2-(2-(4-(3-метоксипропокси)фенил)тиазол-4-ил)-2-метилпропаноата в виде блеклой янтарной камеди (2,47 г, 98%). К перемешиваемому раствору этого соединения (2,45 г, 7,01 ммоль) в 1:1:1 (об./об./об.) тетрагидрофурана/этанола/воды (45 мл) добавляют моногидрат гидроксида лития (1,47 г, 35,0 ммоль). После перемешивания в течение ночи, реакционную смесь концентрируют и разделяют между водой и диэтиловым эфиром. Водный слой обрабатывают 1,0 N хлористоводородной кислотой (40 мл) и экстрагируют этилацетатом. Объединенные экстракты сушат (Na₂SO₄) и концентрируют с получением 2-(2-(4-(3-метоксипропокси)фенил)тиазол-4-ил)-2-метилпропановой кислоты в виде белого твердого вещества (2,19 г, 40 93%). Это соединение и хинуклидин-3-ол подвергают взаимодействию согласно общей методике F с получением указанного в заголовке соединения в виде мягкого блеклого янтарного твердого вещества. ¹H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d₆) δ 7,82 (д, J=8,9 Гц, 2H), 7,36 (шс, 1H), 7,24 (шс, 1H), 7,03 (д, J=8,9 Гц, 2H), 4,49-4,41 (м,1H), 4,07 (т, J=6,4 Гц, 2H), 3,48 (т, J=6,4 Гц, 2H), 3,26 (с, 3H), 3,09-2,26 (м,6H), 2,02-1,91 (м,2H), 1,91-1,03 (м,11H) ч./млн. ¹³C ЯМР (100 MГц, ДМСО-d6) δ 165,8, 162,4, 160,0, 154,6, 127,5, 126,1, 114,9, 112,1, 70,1, 68,4, 64,8, 57,9, 55,4, 53,5, 46,9, 45,9, 28,9, 28,3, 25,2, 24,2, 19,2 ч./млн. Чистота: 100%, 100% (210 и 254 нм) УЖХМС; время удержания: 0,87 мин; (M+H⁺) 460.

Хинуклидин-3-ил (2-(2-(4-(2-метоксиэтокси)фенил)тиазол-4-ил)пропан-2-ил)карбамат (Соединение 20)

К перемешиваемому раствору 2-бромэтилметилового эфира (1,88 г, 13,5 ммоль) в ацетоне добавляют метил 2-(2-(4-гидроксифенил)тиазол-4-ил)-2-метилпропаноат (полученный, как описано в примере 19, 2,00 г, 7,21 ммоль) и карбонат калия (1,56 г, 11,3 ммоль). После нагревания при температуре кипения с обратным холодильником в течение ночи, смесь обрабатывают дополнительным 2-бромэтилметиловым эфиром (1,88 г, 13,5 ммоль) и карбоната калия (1,56 г, 11,3 ммоль). Реакционную смесь нагревают при кипении с обратным холодильником в течение второй ночи, фильтруют и концентрируют. Остаток очищают флэш-хроматографией над диоксидом кремния с применением градиента гексан/этилацетат с получением метил 2-(2-(4-(2-метоксиэтокси)фенил)тиазол-4-ил)-2-метилпропаноата в виде белого твердого вещества (2,71 г, 90%). К перемешиваемому раствору этого соединения (2,71 г, 8,08 ммоль) в 1:1:1 (об./об./об.) тетрагидрофуране/этаноле/воде (50 мл) добавляют моногидрат гидроксида лития (1,70 г, 40,5 ммоль). После перемешивания в течение ночи, реакционную смесь концентрируют и разделяют между водой и диэтиловым эфиром. Водный слой обрабатывают 1,0 N хлористоводородной кислотой (41 мл) и экстрагируют этилацетатом. Объединенные экстракты сушат (Na₂SO₄) и концентрируют с получением 2-(2-(4-(2-метоксиэтокси)фенил)тиазол-4-ил)-2-метилпропановой кислоты в виде белого твердого вещества (2,57 г, 99%). Это соединение и хинуклидин-3-ол подвергают взаимодействию согласно общей методике F с получением указанного в заголовке соединения в виде бледно-янтарного твердого вещества. ¹H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d₆) δ 7,82 (д, J=8,8 Гц, 2H), 7,36 (шс, 1H), 7,24 (шс, 1H), 7,04 (д, J=8,8 Гц, 2H), 4,49-4,41 (м,1H), 4,19-4,12 (м,2H), 3,71-3,65 (м,2H), 3,32 (с, 3H), 3,11-2,87 (м,1H), 2,86-2,19 (м,5H), 1,92-1,16 (м,11H) ч./млн. ¹³C ЯМР (100 MГц, ДМСО-d₆) δ 165,7, 162,9, 159,9, 154,6, 127,5, 126,2, 114,9, 112,2, 70,3, 70,1, 67,1, 58,2, 55,4, 53,5, 46,9, 45,9, 28,3, 25,2, 24,3, 19,2 ч./млн. Чистота: 100%, 100% (210 и 254 нм) УЖХМС; время удержания: 0,85 мин; (M+H⁺) 446.

Хинуклидин-3-ил 2-(5-(4-(2-метоксиэтокси)фенил)пиридин-2-ил)пропан-2-илкарбамат (Соединение 21)

С применением общей методики E и вводя в реакционную смесь 5-бромпиколинонитрил и 2-(4-(2-метоксиэтокси)фенил)-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан, получают 5-(4-(2-метоксиэтокси)фенил)пиколинонитрил. Трихлорид церия (8,05 г, 21,6 ммоль) загружают в колбу и сушат нагреванием (170°C) под вакуумом в течение 3 часов. Твердое вещество помещают в тетрагидрофуран (20 мл) и энергично перемешивают в течение 30 минут. Суспензию охлаждают до -78°C и обрабатывают, по каплям, 3,0 M раствором метиллития в диэтиловом эфире (7,2 мл, 21,6 ммоль). После добавления, реакционную смесь перемешивают при -78°C в течение 1 часа, затем добавляют раствор вышеуказанного арилбората (1,83 г, 7,20 ммоль) в тетрагидрофуране (20 мл). Смесь выдерживают при -78°C в течение 2 часов и затем нагревают до комнатной температуры. В это время, реакцию гасят добавлением водного гидроксида аммония (10 мл) и фильтруют через слой целита. Фильтрат экстрагируют этилацетатом, и объединенные экстракты промывают насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄) и концентрируют. Остаток очищают флэш-хроматографией над диоксидом кремния с применением элюента этилацетата с получением 2-(5-(4-(2-метоксиэтокси)фенил)пиридин-2-ил)пропан-2-амина в виде желтого твердого вещества (0,800 г, 39%). К перемешиваемой суспензии этого промежуточного соединения (0,500 г, 1,75 ммоль) в воде (10 мл) и концентрированной хлористоводородной кислоты (0,44 мл) добавляют толуол (10 мл). Смесь охлаждают (0°C) и обрабатывают, одновременно, в течение 1 часа, растворами трифосгена (0,776 г, 2,62 ммоль) в толуоле (10 мл) и бикарбоната натрия (2,2 г, 26 ммоль) в воде (20 мл). После добавлений, реакционную смесь перемешивают в течение еще 30 минут, затем верхний слой толуола удаляют и сушат (Na₂SO₄). В это время перемешиваемый раствор хинуклидин-3-ола (0,445 г, 3,64 ммоль) в тетрагидрофуране (10 мл) обрабатывают гидридом натрия (60% дисперсию в минеральном масле; 0,154 г, 3,85 ммоль). Эту смесь перемешивают в течение 5 минут и затем добавляют к раствору неочищенного изоцианата в толуоле. Реакционную смесь перемешивают в течение 10 минут, гасят добавлением насыщенного раствора соли (5 мл) и экстрагируют этилацетатом. Объединенные экстракты сушат (Na₂SO₄) и концентрируют. Остаток очищают флэш-хроматографией над диосидом кремния с обращенной фазой с получением указанного в заголовке соединения в виде светло-желтого твердого вещества (0,100 г, 13%). ¹H ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ 8,70-8,70 (д, J=2,0 Гц, 1H), 7,83-7,81 (м,1H), 7,49-7,47 (д, J=9,0 Гц, 2H), 7,45-7,43 (д, J=8,0 Гц, 1H), 7,03-7,01 (д, J=8,5 Гц, 2H), 6,63 (шс, 1H), 4,68-4,66 (м,1H), 4,16 (т, J=5,0 Гц, 2H), 3,77 (т, J=5,0 Гц, 2H), 3,45 (с, 3H), 3,19-2,70 (м,6H), 2,15-1,89 (м,2H), 1,76 (с, 6H), 1,73-1,36 (м,3H) ч./млн. ¹³C ЯМР (125 MГц, CDCl₃) δ 162,7, 158,9, 154,9, 145,9, 134,8, 134,3, 130,1, 128,1, 119,2, 115,2, 71,0, 70,8, 67,4, 59,2, 55,9, 55,7, 47,4, 46,5, 46,4, 27,9, 25,4, 24,6, 19,5 ч./млн. Чистота: >99% (214 и 254 нм) ЖХМС; время удержания: 1,32 мин; (M+H⁺) 440,2.

Хинуклидин-3-ил (2-(4'-(3-цианопропокси)-[1,1'-бифенил]-4-ил)пропан-2-ил)карбамат (Соединение 22)

К перемешиваемому раствору 4-бромфенола (17,1 г, 98,8 ммоль) в ацетонитриле (150 мл) добавляют 1-бромбутилнитрил (12,3 мл, 124 ммоль) и карбонат калия (15,0 г, 109 ммоль). Смесь нагревают до кипения с обратным холодильником в течение ночи, охлаждают и концентрируют. Остаток помещают в воду и экстрагируют этилацетатом. Объединенные экстракты сушат (Na₂SO₄) и концентрируют, и неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией над диоксидом кремния с применением элюента гексан/этилацетат с получением 4-(4-бромфенокси)бутаннитрила в виде белого твердого вещества (20,8 г, 88%). К перемешиваемому раствору этого продукта в N, N-диметилформамиде (100 мл), добавляют бис(пинаколато)диборон (4,60 г, 18,1 ммоль), ацетат калия (7,41 г, 75,5 ммоль) и комплекс [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]-дихлорпалладия(II) с дихлометаном (0,616 г, 1,04 ммоль). Смесь нагревают до кипения с обратным холодильником в течение ночи и затем концентрируют. Остаток помещают в этилацетат и промывают водой и насыщенным раствором соли. Органический слой сушат (Na₂SO₄) и концентрируют, и неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией над диоксидом кремния с применением элюента гексан/этилацетат с получением 4-(4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенокси)бутаннитрила в виде белого твердого вещества (3,43 г, 79%). Этот продукт и хинуклидин-3-ил (2-(4-бромфенил)пропан-2-ил)карбамат (полученный взаимодействием хинуклидин-3-ола и 2-(4-бромфенил)пропан-2-амина с применением общей методики F) подвергают взаимодействию согласно общей методике E с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества. ¹H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d₆) δ 7,67-7,26 (м,7H), 7,02 (д, J=8,8 Гц, 2H), 4,50-4,33 (м,1H), 4,08 (т, J=6,0 Гц, 2H), 3,14-2,18 (м,8H), 2,04 (квин, J=6,7 Гц, 2H), 1,94-1,70 (м,11H) ч./млн. ¹³C ЯМР (100 MГц, ДМСО-d₆) δ 157,7, 154,5, 146,8, 137,4, 132,7, 127,6, 125,7, 125,2, 120,2, 114,9, 70,0, 65,8, 55,4, 54,2, 46,9, 45,9, 29,4, 25,3, 24,7, 24,2, 19,2, 13,4 ч./млн. Чистота: 100%, 98,9% (210 и 254 нм) УЖХМС; время удержания: 0,88 мин; (M+H⁺) 448,6.

Хинуклидин-3-ил (2-(4'-(цианометокси)-[1,1'-бифенил]-4-ил)пропан-2-ил)карбамат (Соединение 23)

С применением общей методики E и вводя в реакционную смесь хинуклидин-3-ил (2-(4-бромфенил)пропан-2-ил)карбамат (полученный взаимодействием хинуклидин-3-ола и 2-(4-бромфенил)пропан-2-амина с применением общей методики F) и 4-(цианометокси)фенилбороновую кислоту, указанное в заголовке соединение получают в виде бледно-янтарного твердого вещества. ¹H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d₆) δ 7,65 (д, J= 8,2 Гц, 2H), 7,60-7,31 (м,5H), 7,15 (д, J=8,9 Гц, 2H), 5,21 (с, 2H), 4,53-4,30 (м,1H), 3,18-2,19 (м,6H), 2,05-1,18 (м,11H) ч./млн. ¹³C ЯМР (100 MГц, ДМСО-d₆) δ 155,8, 154,6, 147,2, 137,2, 134,4, 127,8, 126,0, 125,3, 116,7, 115,3, 70,0, 55,4, 54,2, 53,5, 46,9, 45,9, 29,4, 25,2, 24,2, 19,2 ч./млн. Чистота: 100%, 100% (210 и 254 нм) УЖХМС; время удержания: 0,85 мин; (M+H⁺) 420,3.

Пример 2: Получение свободного основания (S)-хинуклидин-3-ил (2-(2-(4-фторфенил)тиазол-4-ил)пропан-2-ил)карбамата

Стадия 1: Диметилирование метилйодидом

Химическая формула: С₁₃Н₁₂FNO₂S Химическая формула: С₁₅Н₁₆FNO₂S Точная масса: 265,06 Точная масса: 293,09 Молекулярная масса: 265,30 Молекулярная масса: 293,36

3N КД колбу оборудуют термометром, капельной воронкой и входом для азота. Колбу промывают азотом, и трет-бутоксид калия (ММ 112,21, 75,4 ммоль, 8,46 г, 4,0 экв., белый порошок) взвешивают и добавляют в колбу через порошковую воронку, затем добавляют ТГФ (60 мл). Большая часть трет-бутоксида калия растворяется с получением мутного раствора. Эту смесь охлаждают на бане лед-вода до 0-2°C (внутренняя температура). В отдельной колбе, исходный сложный эфир (ММ 265,3, 18,85 ммоль, 5,0 г, 1,0 экв.) растворяют в ТГФ (18 мл+2 мл в качестве промывки) и переносят в капельную воронку. Этот раствор добавляют по каплям в охлажденную смесь в течение 25-30 мин, сохраняя внутреннюю температуру ниже 5°C во время добавления. Реакционную смесь охлаждают обратно до 0-2°C. В отдельной колбе, получают раствор метилйодида (ММ 141,94, 47,13 ммоль, 6,7 г, 2,5 экв.) в ТГФ (6 мл) и переносят в капельную воронку. Колбу, содержащую раствор метилйодида, затем промывают ТГФ (1,5 мл), затем переносят в капельную воронку, уже содержащую прозрачный бесцветный раствор метилйодид в ТГФ. Этот раствор осторожно добавляют по каплям в темно-коричневую реакционную смесь в течение 30-40 мин, сохраняя внутреннюю температуру ниже 10°C все время в течение добавления. После завершения добавления, слегка мутную смесь перемешивают в течение еще 1 ч, в течение которого внутренняя температура падает до 0-5°C. После перемешивания в течение часа при 0-5°C, реакционную смесь гасят медленным по каплям добавлением 5,0M водной HCl (8 мл) в течение 5-7 мин. Внутреннюю температуру сохраняют ниже 20°C во время этого добавления. После добавления, добавляют воду (14 мл) и смесь перемешивают в течение 2-3 мин. Перемешивание останавливают, и два слоя разделяют. Затем два слоя переносят в 250 мл 1N КД колбу, и ТГФ выпаривают в вакууме насколько возможно с получением двухфазного слоя ТГФ/продукта и воды. Два слоя разделяют. ТГФ раствор продукта со стадии 1 применяют в следующей реакции.

Стадия 2: Гидролиз этилового эфира с моногидратом LiOH

Химическая формула: С₁₅Н₁₆FNO₂S Химическая формула: С₁₃Н₁₂FNO₂S Точная масса: 293,09 Точная масса: 265,06 Молекулярная масса: 293,36 Молекулярная масса: 265,30

Неочищенный сложный эфир в ТГФ добавляют в реакционную колбу. Отдельно, LiOH.H₂O (ММ 41,96, 75,0 ммоль, 3,15 граммов, 2,2 экв.) взвешивают в 100 мл стакане, куда добавляют мешалку. Добавляют воду (40 мл), и смесь перемешивают до тех пор, пока все твердые вещества не растворятся с получением прозрачного бесцветного раствора. Этот водный раствор затем добавляют в 250 мл КД колбу, содержащую раствор сложного эфира в тетрагидрофуране (ТГФ). Конденсатор присоединяют к горлу колбы, и вход для азота присоединяют к верхней части конденсатора. Смесь нагревают при кипении с обратным холодильником в течение 16 часов. Через 16 часов, нагревание останавливают, и смесь охлаждают до комнатной температуры. ТГФ выпаривают в вакууме с получением коричневого раствора. Аликвоту коричневого водного раствора анализируют ВЭЖХ и ЖХ/МС для полного гидролиза этилового эфира. Добавляют воду (15 мл), и этот водный щелочной раствор экстрагируют ТБМЭ (2×40 мл) для удаления трет-бутиловогт эфира. Водный щелочной слой охлаждают на бане лед-вода до 0-10°C и подкисляют добавлением по каплям концентрированной HCl до pH ~ 1 при перемешивании. К этому липкому твердому веществу в водном кислот растворе добавляют ТБМЭ (60 мл), и смесь встряхивают и затем энергично перемешивают для растворения всей кислоты в слое ТБМЭ. Два слоя переносят в делительную воронку, и слой ТБМЭ отделяют. Бледно-желтый водный кислый раствор повторно экстрагируют ТБМЭ (40 мл), и слой ТБМЭ отделяют и объединяют с предыдущим слоем ТБМЭ. Водный кислый слой отбрасывают. Объединенные слои ТБМЭ сушат над безводным Na₂SO₄, фильтруют и выпаривают в вакууме для удаления ТБМЭ и получения неочищенной кислоты в виде оранжевого/темно-желтого масла, которое затвердевает в высоком вакууме до грязно-желтого твердого вещества. Неочищенную кислоту взвешивают и кристаллизуют нагреванием в гептане/ТБМЭ (3:1, 5 мл/г неочищенного продукта) с получением кислоты в виде желтого твердого вещества.

Стадия 3: Образование гидроксаминовой кислоты с NH₂OH.HCl

Химическая формула: С₁₃Н₁₂FNO₂S Химическая формула: С₁₃Н₁₃FN₂O₂S Точная масса: 265,06 Точная масса: 280,07 Молекулярная масса: 265,30 Молекулярная масса: 280,32

Карбоновую кислоту (ММ 265,3, 18,85 ммоль, 5,0 г, 1,0 экв.) взвешивают и переносят в 25 мл 1N КД колбу под азотом. ТГФ (5,0 мл) добавляют, и кислоту легко растворяют с получением прозрачного темно-желтого/коричневого раствора. Раствор охлаждают до 0-2°C (температура бани) в ледяной бане и медленно добавляют N, N’-карбонилдиимидазол (КДИ; ММ 162,15, 20,74 ммоль, 3,36 г, 1,1 экв.) небольшими порциями в течение 10-15 минут. Ледяную баню удаляют, и раствор перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч. Через 1 ч перемешивания, раствор снова охлаждают в бане лед-вода до 0-2°C (температура бани). Медленно добавляют гидрохлорид гидроксиламина (NH₂OH.HCl; ММ 69,49, 37,7 ммоль, 2,62 г, 2,0 экв.) небольшими порциями в виде твердого вещества в течение 3-5 минут, так как это добавление является экзотермическим. После завершения добавления, воду (1,0 мл) добавляют в гетерогенную смесь по каплям в течение 2 минут, и реакционную смесь перемешивают при 0-10°C в бане лед-вода в течение 5 минут. Охлаждающую баню удаляют, и реакционную смесь перемешивают под азотом при комнатной температуре в течение ночи в течение 20-22 ч. Раствор становится прозрачным по мере растворения всего NH₂OH.HCl. Через 20-22 ч, аликвоту реакционной смеси анализируют жидкостной хроматографией высокого давления (ЖХВД). ТГФ затем выпаривают в вакууме, и остаток помещают в дихлорметан (120 мл) и воду (60 мл). Смесь переносят в делительную воронку, где ее встряхивают, и два слоя разделяют. Водный слой отбрасывают, и слой дихлорметана промывают 1N гидрохлоридом (HCl; 60 мл). Кислый слой отбрасывают. Слой дихлорметана сушат над безводным Na₂SO₄, фильтруют, и растворитель выпаривают в вакууме с получением неочищенной гидроксаминовой кислоты в виде бледно-желтого твердого вещества, которое сушат в высоком вакууме в течение ночи.

Стадия 3 (продолжение): Превращение гидроксаминовой кислоты в циклическое промежуточное соединение (не выделяют)

Химическая формула: С₁₃Н₁₃FN₂O₂S Химическая формула: С₁₄Н₁₁FN₂O₃S Точная масса: 280,07 Точная масса: 306,05 Молекулярная масса: 280,32 Молекулярная масса: 306,31

Неочищенную гидроксаминовую кислоту (ММ 280,32, 5,1 г) переносят в 250 мл 1N КД колбу с азотным входом. Добавляют мешалку, затем добавляют ацетонитрил (50 мл). Твердое вещество нерастворимо в ацетонитриле. Желтую гетерогенную смесь перемешивают в течение 2-3 минут под азотом, и КДИ (ММ 162,15, 20,74 ммоль, 3,36 г, 1,1 экв.) добавляют одной порцией при комнатной температуре. Экзотерм не наблюдается. Твердое вещества сразу же растворяют, и прозрачный желтый раствор перемешивают при комнатной температуре в течение 2-2,5 ч. Через 2-2,5 ч, аликвоту анализируют ВЭЖХ и ЖХ/МС, которые показали превращение гидроксаминовой кислоты в желаемое циклическое промежуточное соединение.

Затем ацетонитрил выпаривают в вакууме с получением неочищенного циклического промежуточного соединения в виде красноватого густого масла. Масло помещают в толуол (60 мл), и красноватую смесь нагревают до кипения с обратным холодильником в течение 2 часов, в течение которых циклическое промежуточное соединение выделяет CO₂ и перестраивается в изоцианат (см. ниже.

Химическая формула: С₁₄Н₁₁FN₂O₃S Химическая формула: С₁₃Н₁₁FN₂OS Точная масса: 306,05 Точная масса: 262,06 Молекулярная масса: 306,31 Молекулярная масса: 262,30

Стадия 3 (продолжение): Превращение изоцианата в свободное основание

Химическая формула: С₁₃Н₁₁FN₂OS Химическая формула: С₂₀Н₂₄FN₂O₂S Точная масса: 262,06 Точная масса: 389,16 Молекулярная масса: 262,30 Молекулярная масса: 389,49

Реакционную смесь охлаждают до 50-60°C и (S)-(+)-хинуклидинол (ММ 127,18, 28,28 ммоль, 3,6 г, 1,5 экв.) добавляют к смеси в виде твердого вещества одной порцией. Смесь повторно нагревают до кипения с обратным холодильником в течение 18 ч. Через 18 ч, аликвоту анализируют ВЭЖХ и ЖХ/МС, которые показывают полное превращение изоцианата в желаемый продукт. Реакционную смесь переносят в делительную воронку, и добавляют толуол (25 мл). Смесь промывают водой (2×40 мл), и водные слои отделяют. Объединенные водные слои повторно экстрагируют толуолом (30 мл), и водный слой отбрасывают. Объединенные толуольные слои экстрагируют 1N HCl (2×60 мл), и толуольный слой (содержащий O-ацильную примесь) отбрасывают. Объединенные HCl слои переносят в 500 мл колбу Эрленмейера, оборудованную мешалкой. Перемешиваемый желтый/красновато-оранжевый раствор подщелачивают до pH 10-12 добавлением по каплям 50% масс./масс. водного NaOH. Желаемое свободное основание выпадает в осадок в виде грязно-желтого липкого твердого вещества, которое удерживает лопатку мешалки. К этой смеси добавляют изопропилацетат (100 мл), и смесь энергично перемешивают в течение 5 минут, когда липкое твердое вещество превращается в изопропилацетат. Перемешивание останавливают, и два слоя разделяют. Желтый слой изопропилацетата отделяют, и щелочной слой повторно экстрагируют изопропилацетатом (30 мл). Щелочной водный слой отбрасывают, и объединенные слои изопропилацетата сушат над безводным Na₂SO₄, фильтруют в предварительно взвешенную КД колбу, и растворитель выпаривают в вакууме с получением неочищенного свободного основания в виде бежевого/рыжевато-коричневого твердого вещества, которое сушат в высоком вакууме в течение ночи.

Стадия 3 (продолжение): Перекристаллизация неочищенного свободного основания

Бежевое/рыжевато-коричневое твердое вещество взвешивают и перекристаллизуют из гептана/изопропилацетата (3:1, 9,0 мл растворителя/г неочищенного свободного основания). Подходящее количество гептана/изопропилацетата добавляют к неочищенному свободному основанию вместе с мешалкой, и смесь нагревают до кипения с обратным холодильником в течение 10 мин (свободное основание изначально было частично растворимым, но растворилось с получением прозрачного красновато-оранжевого раствора при нагревании при кипении с обратным холодильником). Источник тепла удаляют, и смесь охлаждают до комнатной температуры при перемешивании, когда образуется белый осадок. После перемешивания при комнатной температуре в течение 3-4 ч, осадок отфильтровывают через вакуумный шланг с применением воронки Бюхнера, промывают гептаном (20 мл) и сушат под шлангом с вакуумом на воронке Бюхнера в течение ночи. Осадок переносят в кристаллизатор и сушат при 55°C в течение ночи в вакуумной печи. ¹H ЯМР (400 MГц, CDCl₃) δ 8,04-7,83 (м,2H), 7,20-6,99 (м,3H), 5,53 (с, 1H), 4,73-4,55 (м,1H), 3,18 (дд, J=14,5, 8,4 Гц, 1H), 3,05-2,19 (м,5H), 2,0-1,76 (м,11H) ч./млн. ¹³C ЯМР (100 MГц, CDCl₃) δ 166,38, 165,02, 162,54, 162,8-155,0 (д, C-F), 130,06, 128,43, 128,34, 116,01, 115,79, 112,46, 71,18, 55,70, 54,13, 47,42, 46,52, 27,94, 25,41, 24,67, 19,58 ч./млн.

Пример 3: Получение кристаллических форм солей (S)-хинуклидин-3-ил (2-(2-(4-фторфенил)тиазол-4-ил)пропан-2-ил)карбамата

Кристаллические соли (S)-хинуклидин-3-ил (2-(2-(4-фторфенил)тиазол-4-ил)пропан-2-ил)карбамата могут быть образованы из свободного основания, полученного как описано в Примере 23.

Например, свободное основание (S)-хинуклидин-3-ил (2-(2-(4-фторфенил)тиазол-4-ил)пропан-2-ил)карбамата (примерно 50 ммоль) растворяют в ИПС (140 мл) при комнатной температуре и фильтруют. Фильтрат добавляют в 1 л к.д. колбы, которую оборудуют верхней мешалкой и входом/выходом азота. L-яблочную кислоту (примерно 50 ммоль) растворяют в ИПС (100+30 мл) при комнатной температуре и фильтруют. Фильтрат добавляют в вышеуказанную 1-литровую колбу. Полученный раствор перемешивают при комнатной температуре (с или без высевания) под азотом в течение 4-24 часов. Во время этого периода времени образуются кристаллы. Продукт собирают фильтрацией и промывают небольшим количеством ИПС (30 мл). Кристаллическое твердое вещество сушат в вакуумной печи при 55°C в течение 72 часов с получением желаемого малата.

Кристаллические формы других солей, например, кислотно-аддитивных солей с янтарной кислотой или HCl, могут быть получены по аналогичной методике.

Пример 4: In vitro GCS ингибирование (Соединение 2 и аналоги)

Ингибирование активности глюкозилцерамидсинтазы может быть измерено с применением одного или нескольких анализов. Первым анализом является микросомальный анализ, в котором прямо измеряется превращение церамида в глюкозилцерамид с применением ВЭЖХ. Микросомы являются источником активности глюкозилцерамидсинтазы в микросомальном анализе. Вторым анализом является клеточный, фенотипический анализ, который отслеживает экспрессию на поверхности клеток нисходящего жира GM3 с применением опосредованной антителом иммунофлуоресценции. Конкретные протоколы представлены ниже.

Микросомальный анализ активности глюкозилцерамидсинтазы:

Ферментный анализ с применением микросом в качестве источника активности глюкозилцерамидсинтазы. Флуоресцентный церамидный субстрат доставляют к мембраносвязанному ферменту в виде комплекса с альбумином. После реакции, церамид и глюкозилцерамид разделяют и количественно оценивают с помощью ВЭЖХ с обращенной фазой с флуоресцентным определением. Ферментативную активность оценивают с использованием флуоресцентно меченого субстрата и микросом в качестве источника глюкозилцерамидсинтазы. C₆-NBD-церамид образует комплекс с альбумином для доставки в микросомы, которые выделяют в соответствии с процедурой, описанной ниже. Конечная концентрация C₆-NBD-церамида в исходном растворе составляет 0,5 мМ; Конечная плотность АБС составляет 0,5 мм. Разделение и количественное определение субстрата и продукта (глюкозилцерамида) проводят с применением ВЭЖХ с обращенной фазой с флуоресцентным определением.

Получение микросом из A375 клеток меланомы человека;

Микросомы выделяют из A375 клеток меланомы человека. От восьми до десяти миллионов клеток собирают трипсинизацией и промывают ледяным ФРФБ. Клетки ресуспендируют в ледяном лизисном буфере, содержащем ингибиторы протеазы. Лизат клеток обрабатывают ультразвуком на льду с помощью зондового соникатора. После обработки ультразвуком, клеточный лизат отделяют от дебриса центрифугированием при 10000 g в течение 10 минут при 4°C. Супернатант удаляют и очищают дополнительным центрифугированием при 100000 g в течение 1 часа при 4°C. Затем осадок в пробирке ресуспендируют в лизисном буфере, аликвотируют и хранят при -80°C до использования.

Анализ глюкозилцерамидсинтазы

Для определения ингибирования глюкозилцерамидсинтазы, субстраты при 2x от их Km (флуоресцентный церамид и UDP-глюкоза, 3 мкМ и 4 мкМ, соответственно) и микросомы (1:50 разведение) объединяют 1:1 и инкубируют при комнатной температуре в течение 1 часа в темноте на планшетном шейкере. Реакционную смесь останавливают добавлением 150 мкл 100 мкМ C₈-церамида в 50% водн. изопропаноле; 10 мкл конечной смеси анализируют на ВЭЖХ (с датчиком флуоресценции). Подвижной фазой является 1% муравьиная кислота, добавленная в 81% метанол/19% воду со скоростью потока 0,5 мл/мин. Флуоресценцию определяют с λ_ex= 470 нм и λ_em= 530 нм. В этих условиях, NBD-C₆-GluCer имеет время удержания примерно 1,7 мин, и NBD-C₆-Cer элюируется из колонки через примерно 2,1 мин. Оба пика отделяют друг от друга и базовой линией, и интегрируют автоматически с применением программы ВЭЖХ. Долю превращения субстрата в продукт применяют в качестве данных для тестирования ингибитора.

GM3 флуоресцентно-связанный ферментный анализ (FLISA):

Это фенотипический анализ, который измеряет экспрессию GM3 в клетках B16 меланомы мыши или C32 меланомы человека после обработки тестируемыми соединениями. Экспрессия GM3 на клеточной поверхности определяется по флуоресценции, опосредованной антителом.

Соединения разводят в середе и высевают в 384-луночные планшеты в ДМСО. Клетки B16 и C32 анализируют при плотности 20000 клеток/мл и 62500 клеток/мл, соответственно, на лунку. Каждая кривая фильтрации содержит 10 точек, которые анализируют дважды при каждом прогоне теста. Планшеты инкубируют в течение 48 часов при 37°C, 5% CO2 и затем промывают один раз TBS. Анти-GM3 антитело добавляют в каждую лунку, и затем планшеты инкубируют в течение еще одного часа при комнатной температуре. Планшеты затем дважды промывают и инкубируют в течение еще часа с меченым вторичным антителом. После конечной инкубации, планшеты промывают дважды, и флуоресценцию при λ_ex =D640/20 нм и λ_em =657 нм определяют на флуоресцентном ридере.

Результаты анализа

Результаты индивидуальных анализов некоторых типовых соединений в этих анализах представлены в таблице ниже. Результаты микросомальных анализов показывают как «GCS IC₅₀», которая является концентрацией соединения, вызывающей 50% ингибирование активности глюкозилцерамидсинтазы. Результаты клеточных анализов показывают как «GM3 B16 IC₅₀» или «GM3 C32 IC₅₀» для анализа B16 и анализа C32, соответственно. Эти значения представляют собой концентрацию соединения, вызывающую 50% ингибирование экспрессии GM3 на поверхности клетки.

Соединение № GCS IC₅₀ (нМ) GM3 B16 IC₅₀ (нМ) GM3 C32 IC₅₀ (нМ) 1 0,0019 0,0156 0,0021 2 0,0601 0,1068 0,0096 3 0,00414 0,0437 0,00131 4 0,0015 0,0116 0,0008 5 0,0012 0,0193 0,0003 6 0,0028 0,0181 0,0006 7 0,0014 0,0081 0,0004 8 0,0010 0,0075 0,0004 9 0,0014 0,0168 0,0004 10 0,0064 0,0213 0,0022 11 0,0149 0,0819 0,0018 12 0,0203 0,0878 0,0037 13 0,0035 0,0386 0,0007 14 0,0104 0,1096 0,0053 15 0,0267 0,0295 0,0049 16 0,0024 0,0666 0,0016 17 0,4544 0,8786 0,0216 18 0,1480 0,6555 0,0223 19 0,1701 0,1972 0,0426 20 0,3601 0,1065 0,0198 21 0,0506 0,2658 0,0111 22 0,0096 0,0865 0,0032 23 0,0026 0,0477 0,0008

Эти сравнительные результаты демонстрируют, что соединения согласно настоящему описанию обладают сопоставимой активностью in vitro в качестве ингибиторов GCS и, как результат, ожидается, что они продемонстрируют аналогичные преимущества in vivo.

Пример 5: Клиническое исследование Соединения 2 у пациентов с GD-3

Начинают 156-недельное, открытое, мультинациональное, в несколько частей исследование безопасности, переносимости, фармакокинетики, фармакодинамики и поисковых показателе эффективности Соединения 2 в комбинации с имиглюцеразой у взрослых пациентов с болезнью Гоше 3 типа, стабилизированной имиглюцеразой.

Пациенты в возрасте 18 лет и старше с клиническим диагнозом GD3 и документально подтвержденным дефицитом активности кислой бета-глюкозидазы, получавшие лечение ERT в течение, по меньшей мере, 3 лет и имиглюцеразу (Церезим) в стабильной ежемесячной дозе в течение, по меньшей мере, 6 месяцев до включения, были включены в исследование. Пациенты должны достичь следующих терапевтических целей GD: уровень гемоглобина ≥11,0 г/дл для женщин и ≥12,0 г/дл для мужчин; количество тромбоцитов ≥100000/мм³; объем селезенки <10 кратно нормальному (MN) или тотальная спленэктомия (при условии, что спленэктомия произошла >3 лет до рандомизации); объем печени <1,5 MN; и отсутствие криза костей, и отсутствие симптоматических заболеваний костей, таких как боль в костях, связанная с остеонекрозом и/или патологическими переломами в течение последнего года. Пациенты должны иметь GD3 с глазодвигательными нарушениями (надъядерный паралич взора), характеризующимися аномалией горизонтального скачкообразного движения.

(A) промежуточный анализ на 26 неделе

Промежуточный анализ был проведен, когда 5 пациентов завершили 26 недель одновременного лечения (1) имиглюцеразой (Cerezyme от Sanofi Genzyme) в соответствии с установленной схемой для каждого пациента и (2) соединением 2, вводимым перорально в дозе 15 мг/сутки в разовой дозе. В ходе исследования пациентов оценивают на безопасность и переносимость, CSF и биомаркеры плазмы (глюкозилцерамид, GL-1; глюкозилсфингозин, лизо-GL1), фармакокинетику, маркеры системного заболевания (объем селезенки и печени, измеренный с помощью магнитно-резонансной томографии (МРТ), количество тромбоцитов, уровень гемоглобина), признаки интерстициального заболевания легких (компьютерная томография легких высокого разрешения (КТ)) и горизонтальное скачкообразное движение глаз.

Исходно у четырех пациентов было неврологическое поражение легкой степени, и один имел умеренное неврологическое поражение, как было измерено с помощью модифицированного инструмента оценки тяжести (mSST; Davies, et al., 2011). У всех пациентов были обнаружены признаки интерстициального заболевания легких на основании КТ грудной клетки. У одного пациента была анемия, о чем свидетельствует уровень гемоглобина в плазме 10,6 г/дл.

Все пациенты не сообщили о серьезных или длительных нежелательных явлениях, вызванных лечением. Наиболее частыми событиями были головная боль и боль в спине, они считались легкими или умеренными и временными по продолжительности (вероятно, связанными с люмбальной пункцией, выполненной для тестирования CSF).

Было обнаружено, что соединение 2 эффективно преодолевает гематоэнцефалический барьер у всех пациентов, как показано в таблице ниже:

Соединение 2 в плазме День 1 (N=5) ППК_0-24, нг⋅ч/мл (среднее ± СО) 715 ± 225 C_max, нг/мл (среднее ± СО) 48,2 ± 19,2 t_max, ч (медианное) 2,00 Соединение 2 в CSF Неделя 4 (N=5) Неделя 26 (N=4) Концентрация через 4 часа после дозы, нг/мл (среднее ± СО) 4,17 ± 0,83 4,71 ± 2,50

Более высокая вариабельность CSF концентрации соединения 2, наблюдаемая на 26 неделе, объясняется уменьшением воздействия на одного из пациентов (Пациент 5) на 12-26 неделе по неизвестным причинам. Пациент 1 был исключен из определения CSF на 26 неделе из-за ошибки при сборе образца.

Было обнаружено значительное улучшение биомаркеров в плазме и CSF для GD-3 через 26 недель. Исходно, средняя (± СО) концентрация GL-1 в CSF составляло 7,1 ± 2,8 нг/мл (диапазон 4,4-11,1 нг/мл), в то время как средняя (± СО) концентрация лизо-GL-1 в CSF составила 39,3 ± 22,9 пг/мл (диапазон 20,1-67,6 пг/мл). Для сравнения: концентрация GL-1 в CSF здорового человека составляет 4,5-5,9 нг/мл, а концентрация лизо-GL-1 в CSF составляет менее 5,0 пг/мл. Через 4 недели и через 26 недель было найдено следующее индивидуальное снижение биомаркеров CSF (показано как доля снижения от исходной концентрации CSF):

Пациент 1 Пациент 2 Пациент 3 Пациент 4 Пациент 5 Среднее (n=4)* GL-1 через 4 недели -86% -55% -53% -62% -36% -64% GL-1 через 26 недель -86% -78% -58% -78% +4% -75% Lyso-GL1 через 4 недели -38% -16% -34% -39% -11% -32% Lyso-GL1 через 26 недель -52% -42% -41% -57% +94% -48% *За исключением Пациента 5, который показал пониженное воздействие в анализе ФК по результатам недель 12-26.

Тяжесть интерстициального заболевания легких характеризуют долей объема легкого, пораженного ILD, по данным КТ высокого разрешения в четырех областях легких (дуга аорты, киль, нижняя зона L3, нижняя зона L4). Пациентов ранжируют как имеющих тяжелое ILD (поражение 51-100% объема легких), умеренное ILD (поражение 26-50% объема легких), легкое ILD (поражение 1-25% объема легких) или нормальное состояние (0% объема легких, показывающего ILD). Все пациенты имели исходное ILD, и у 4 из 5 пациентов наблюдался регресс ILD через 26 недель лечения (пациент 5 показал незначительное прогрессирование ILD):

Дуга аорты Киль Зона L3 Зона L4 Левое Правое Левое Правое Левое Правое Левое Правое Пациент 1 Исходное Легк. Легк. Легк. Легк. Норм. Норм. Легк. Легк. Неделя 26 Норм. Норм. Норм. Норм. Норм. Норм. Норм. Норм. Пациент 2 Исходное Легк. Легк. Легк. Легк. Легк. Норм. Умерен. Умерен. Неделя 26 Норм. Норм. Норм. Легк. Норм. Норм. Норм. Норм. Пациент 3 Исходное Легк. Легк. Умерен Легк. Тяж. Умерен Тяж. Тяж. Неделя 26 Норм. Норм. Норм. Норм. Легк. Легк. Умерен. Умерен. Пациент 4 Исходное Норм. Легк. Норм. Норм. Норм. Норм. Норм. Норм. Неделя 26 Норм. Норм. Норм. Норм. Норм. Норм. Норм. Норм. Пациент 5 Исходное Легк. Легк. Легк. Легк. Легк. Легк. Легк. Легк. Неделя 26 Легк. Легк. Легк. Умерен Легк. Легк. Умерен. Умерен.

У всех пациентов системного ухудшения не выявлено. Два пациента показали уменьшение объема селезенки на 10% и более. Клинически значимых изменений уровня гемоглобина не было. В среднем количество тромбоцитов выросло на 17% от исходного уровня до 26 недель, и три пациента с самым низким исходным уровнем тромбоцитов показали индивидуальное увеличение через 26 недель 23-42%. Индивидуальные данные пациентов по количеству тромбоцитов показаны в таблице ниже (показано как 10⁹ тромбоцитов/л):

Пациент 1 Пациент 2 Пациент 3 Пациент 4 Пациент 5 Скрининг 192 207 259* 313 149 День 1 186* 192* н/д 307* 127* Неделя 4 203 243 247 239 154 Неделя 12 214 294 264 314 180 Неделя 26 264 236 248 267 173 % изменения от исходного уровня до 26 недель + 42% + 23% -4,3% -13% +36% *указывает цифру, применяемую в качестве исходной.

Количественную оценку горизонтальных и вертикальных скачкообразных движений глаз (HSEM и VSEM, соответственно) проводят для всех 5 пациентов. У пяти пациентов, средняя пиковая скорость (PV) горизонтальных 15° быстрых скачкообразных движений вправо составляет 50,8 °/с (±8,1 °/с) на исходном уровне, и 47,5 °/мин (±12,6 °/с) на 26 неделе; и средняя PV горизонтальных 15° быстрых скачкообразных движений влево составляет 44,7 °/с (±17,9 °/с) на исходном уровне и 32,3 °/с (±15,9 °/с) на 26 неделе. Более медленная скорость подразумевает более значительную степень неврологического ухудшения. Средняя PV горизонтальных 30° быстрых скачкообразных движений вправо составляет 77,7 °/с (±16,4 °/с) на исходном уровне и 68,1 °/мин (±24,7 °/с) на 26 неделе; и средняя PV горизонтальных 30° быстрых скачкообразных движений влево составляет 58,7 °/с (±21,5 °/с) на исходном уровне и 49,9 °/с (±8,5 °/с) на 26 неделе. Нормальный диапазон для 15° и 30° для горизонтальных быстрых скачкообразных движений ранее был описан как >200 °/с и >400 °/с (Bremova-Ertl et al, 2018). Измерения HSEM для каждого из пяти пациентов показаны на фигурах 1 и 2. Кратко, никаких клинически значимых изменений HSEM не наблюдалось в течение периода лечения 26 недель. Как и для HSEM, измерения VSEM были стабильными между исходным уровнем и 26 неделей.

Четыре поисковых биомаркера были количественно определены в плазме, сыворотке и/или CSF пациентов с GD3 на 4 неделе и 26 неделе: хитотриозидазу (CHITO; фермент, который, как известно, повышен у пациентов с GD) измеряют в CSF и сыворотке; GM3 (уровень гликосфинголипидного маркера, о котором известно, что он повышен у пациентов с GD) измеряют в CSF и плазме; гликопротеиновый не метастатический белок меланомы B (GPNMB; по сообщениям, биомаркер невропатической GD3) измеряют CSF. Результаты показаны в таблице ниже как доля изменения от базового уровня на 4 неделе и 26 неделе для каждого параметра:

Пациент 1 Пациент 2 Пациент 3 Пациент 4 Пациент 5 CHITO CSF- Неделя 4 -5% +11% +9% -6% -6% CSF- Неделя 26 -10% -11% +20% -1% +68% Сыворотка - Неделя 4 -11% +8% -7% -12% -1% Сыворотка - Неделя 26 -43% -55% -1% +98% -11% GM3 CSF - Неделя 4 -51% 0% -59% -59% 0% CSF - Неделя 26 -51% 0% -59% -59% 0% Плазма - Неделя 4 -70% -63% -65% -62% -47% Плазма - Неделя 26 -86% -69% -74% -72% +10% GPNMB CSF - Неделя 4 -63% +30% +9% -6% -2% CSF - Неделя 26 -14% 0% +45% +10% -8%

(B) Промежуточный анализ на 52 неделе

Второй промежуточный анализ проводят, когда первые 6 пациентов достигают 52 недели лечения, как описано выше в разделе (A). Этот анализ включает пациентов 1-5, как описано в разделе (A), а также нового пациента 6. Все шесть пациентов имели гомозиготный фенотип Гоше L444P (1448T/C).

На 52 неделе все пациенты остаются включенными в исследование. Всего было зарегистрировано 30 нежелательных явлений, возникших в результате лечения у шести пациентов, все из которых имели легкую или среднюю степень тяжести, и ни одно из них не считается связанным с лечением соединением 2 или имиглюцеразой. В основном это были головная боль и боль в спине, вероятно, связанная с люмбальной пункцией.

Анализ концентраций соединения 2 в плазме и CSF показывает в значительной степени сопоставимые значения со значениями, полученными на 26 неделе. Однако пациент 5 имеет примерно на 50% более низкую концентрацию соединения 2 в плазме и CSF на 26 неделе и не определяемую концентрацию на 52 неделе. Считается, что это связано либо с не соблюдением требований, либо с ошибками дозирования, поэтому анализ повторяют без данных пациента 5 для недель 26 и 52. Эти данные подтверждают вывод о том, что устойчивая концентрация соединения 2 достигается в плазме и CSF на или до 4 недели:

Соединение 2 в плазме День 1 (N=6) ППК_0-24, нг⋅ч/мл (среднее ± СО) 729 ± 205 C_max, нг/мл (среднее ± СО) 49,1 ± 17,3 t_max, ч (медианное) 2,00 Соединение 2 в плазме День 1 (N=6) Неделя 4 (N=6) Неделя 26 (N=6) Неделя 52 (N=6) Концентрация через 2-4 часа после дозы, нг/мл (среднее ± СО) 39,7 ± 12,6 92,3 ± 36,4 102,0 ± 49,5 69,8 ± 58,3 Исключая пациента 5 112 84 Соединение 2 в CSF День 1 (N=6) Неделя 4 (N=6) Неделя 26 (N=6) Неделя 52 (N=6) Концентрация через 2-4 часа после дозы, нг/мл (среднее ± СО) < LLOQ 4,56 ± 1,20 5,26 ± 2,49 4,43 ± 3,23 Исключая пациента 5 6,13 5,32

На 52 неделе, данные также показали устойчивые значительные улучшения биомаркеров в плазме и CSF для GD-3. Результаты аналогичны тем, которые получены через 26 недель. Для всех шести GD3 пациентов, концентрации GL-1 и lyso-GL-1 в плазме и CSF были следующие:

Лизо-GL-1 GL-1 Исходный уровень 52 недели Исходный уровень 52 недели Плазма 29,3 нг/мл (6,3-159,0) 15,2 нг/мл (2,5-46,8) 6,21 мкг/мл (4,2-8,3) 1,59 мкг/мл (0,9-2,7) CSF 34,0 пг/мл (20,1-67,6) 17,3 пг/мл (5,8-37,4) 6,36 нг/мл (4,4-11,1) 2,48 нг/мл (1,0-6,1)

Таким образом, на 52 неделе, по сравнению с исходным уровнем, концентрации в плазме и CSF изменились следующим образом:

Лизо-GL-1 (% изменения) GL-1 (% изменения) Концентрация в плазме -56,7% -71,6% Концентрация в CSF -55,9% -55,4%

Кроме того, поисковые биомаркеры количественно определяют в CSF пациентов с GD3: церамид (предшественник GL-1), хитотриозидаза (CHITO), GM3 и GPNMB. Через 52 недели лечения, существенных изменений CSF концентраций церамида, CHITO или GPNMB не наблюдалось. Четыре из шести пациентов имели измеримые концентрации GM3 в CSF на исходном уровне, и у каждого из этих пациентов был неопределяемый GM3 в CSF через 4 недели, 26 недель и 52 недели.

Через 52 недели проводят количественную оценку горизонтальных и вертикальных саккадических движений глаз у всех шести пациенток аналогичным образом, как описано в разделе (A). Однако было установлено, что методология, используемая для учета шума (например, вызванного морганием или движениями головы), могла внести систематическую ошибку в результаты. Поэтому способ учета шума был изменен, и был разработан набор критериев контроля для оценки достоверности наборов данных, полученных устройством для считывания движений глаз. При переоценке данных саккадических движений глаз за 26 недель и при оценке данных за 52 недели было обнаружено, что уровень шума был слишком высоким, чтобы можно было сделать какие-либо выводы из данных.

Кроме того, через 52 недели 5 из 6 пациентов показали улучшение атаксии. Степень атаксии на исходном уровне и на протяжении всего исследования оценивают по шкале оценки и ранжированию атаксии (SARA; Schmitz-Hübsch et al. [2006]), которая оценивает восемь отдельных признаков мозжечковой атаксии по шкале от 0 до 40. Восемь признаков: походка, фаза опоры, сидение, нарушение речи, слежение за пальцем, тест «нос-палец», быстрое попеременное движение рук и пяточно-коленная проба. Результаты оценки атаксии по SARA для всех шести пациентов представлены в таблице ниже:

Суммарная оценка SARA При скрининге Неделя 26 Неделя 52 Пациент 1 3,0 1,0 0,0 Пациент 2 3,0 2,0 1,5 Пациент 3 3,5 0,0 0,0 Пациент 4 3,0 5,0 7,5 Пациент 5 0,5 0,0 0,0 Пациент 6 4,0 2,0 3,0 Средняя оценка 2,83 1,67 2,00 Средняя оценка за исключением 4 пациента 2,80 1,00 0,90

Как показано в таблице, пять из шести пациентов имеют легкую атаксию на исходном уровне, при этом средний суммарный балл по SARA составляет 2,8 (СО=1,2). Наиболее частым дефицитом на исходном уровне являются нарушения походки. Исключая пациента 5 из-за низкого уровня воздействия соединения 2 на этого пациента и по существу нормальной исходной оценки атаксии у пациента (только 0,5), 4 из 5 пациентов демонстрируют улучшение атаксии на 52 неделе (среднее улучшение = -0,9; СО=3,2). Пациент 4 демонстрирует увеличение оценки атаксии, при этом оценка на исходном уровне была 3, а на 52 неделе, 7,5. Следует отметить, что это очевидное ухудшение почти полностью вызвано изменением параметра оценки «фазы опоры» (оценка фазы опоры на исходном уровне и 26 неделе=1; оценка на 52 неделе=5) и что пациент жалуется на боль в левом колене во время исследования. Кроме того, перед исследованием субъект повредил большой палец левой ноги; через 11 дней после исследования эта травма была разрешена. За исключением этого резко выделяющегося эффекта пациента 4, лечение Соединением 2 привело к значительному снижению средней оценки по SARA на 26 неделе, которая была далее немного улучшена на 52 неделе.

Тест построения маршрута (TMT) используют для оценки когнитивных функций у пациентов. TMT является одним из наиболее широко используемых нейропсихологических тестов и входит в состав большинства панелей тестов. TMT является диагностическим инструментом для оценки общего интеллекта и когнитивных дисфункций (Tombaugh et al. [2004]; Cavaco et al. [2013]). В части A TMT, субъектов просят соединить группу чисел в порядке возрастания. Эта задача представляет собой комбинацию визуального поиска и общей визуальной и моторной скорости обработки. Часть B представляет собой последовательность, в которой чередуются цифры и буквы. Субъекты должны активно переключаться между обеими категориями, соединяя их в возрастающем, но чередующемся порядке. Следовательно, считается, что эта задача включает компонент исполнительной функции, поскольку субъект должен активно переключаться между категориями при соединении символов (MacPherson et al. [2017]).

TMT-A оценивает в основном скорость восприятия и психомоторную скорость. TMT-B более конкретно оценивает умственную гибкость и способность к переключению. Оценку TMT B минус TMT А используют для устранения вариабельности, относящейся к компонентам графомоторного и визуального сканирования TMT A. Полученная оценка отражает уникальные требования к задаче TMT B.

В исследовании нормативных данных для TMT A и TMT B у проживающих вне дома престарелых индивидуумов в возрасте 18-89 лет (n=911), средние (SD) значения в группе 18-24 лет (n=155) составляли 22,9 с (6,9) для TMT A и 49 с (12,7) для TMT B (Tombauch et al. [2004]). Наоборот, среднее время, затраченное для завершения испытания A и испытания B для пациентов этого исследования составляло 67,8 с (SD=60,3 с) и 193,8 с (SD=197,0), соответственно. На исходном уровне, средняя разница по времени, затраченном для завершения испытания B минус испытание A составляла 126,0 с (SD=142,9 с). Это показывает, что пациенты с GD-3 в этом исследовании демонстрируют некоторую степень когнитивной дисфункции на исходном уровне.

На 52 неделе среднее время, затраченное для завершения испытания A, составило 56,5 с (SD=55,2 с), а для испытания B - 122,7 с (SD=91,8 с). Четыре из шести пациентов продемонстрировали сокращение времени, затраченного для завершения испытания А, и шесть из шести продемонстрировали сокращение времени, затраченного для завершения испытания B. За исключением Пациента 5 из-за низкого уровня воздействия Соединения 2 у этого пациента, четыре из пяти пациентов продемонстрировали снижение TMT А, и пять из пяти пациентов продемонстрировали уменьшение TMT-B.

На 52 неделе у 5 из 6 пациентов наблюдают сокращение времени (TMT B - TMT A). Индивидуальные результаты показаны в таблице ниже.

TMT-A (с) - TMT-B (с) При скрининге Неделя 26 Неделя 52 Изменение (%) от исходного уровня до 52 недели Пациент 1 13 21 16 + 23% Пациент 2 71 37 57 - 20% Пациент 3 72 56 20 - 72% Пациент 4 116 (нет данных) 66 - 43% Пациент 5 74 60 72 - 3% Пациент 6 410 440 166 - 60% Среднее 126 (n=6) 123 (n=5) 66 (n=6) - 29%

На 52 неделе, средняя разница во времени, затраченном для завершения испытания B минус испытание A, составила 66,2 с (SD=54,3). За исключением пациента 5, четыре из пяти пациентов продемонстрировали улучшение в испытании B минус испытание A на 52 неделе, со средним улучшением -71,4 с (-31,6%) (SD 99,3 с (37,6%)).

Неврологическую функцию дополнительно оценивают с помощью функциональной магнитно-резонансной томографии (фМРТ). Пациент 2 был исключен, поскольку на сеансе на 52 неделе данные фМРТ не собирали. Сеансы фМРТ в состоянии покоя проводят в посещения на исходном уровне, при скрининге, 26 неделе и 52 неделе. Оценки связности от четырех субъектов (пациенты 1, 3, 4 и 5) вводят в анализ второго уровня как «соответствующая» группа. Пациент 5 был изолирован из-за вероятного несоблюдения режима приема исследуемого препарата, описанного выше. Анализы проводят, как описано в другом месте (Smith et al. [2009]).

Было обнаружено, что соответствующие субъекты демонстрируют повышенную связь между более широко распределенным набором областей мозга, чем субъекты, не соответствующие требованиям, с увеличением силы между задними и передними аспектами как наиболее заметной особенности. На анатомическом уровне соответствующие пациенты демонстрируют широко распространенное и устойчивое усиление связей между затылочно-теменными структурами и лобными, височными и лимбическими мишенями. Изменения связности у пациента 5 были скромнее и ограничены пространственно проксимальными структурами. На функциональном уровне, улучшенная связность между режимом по умолчанию и медиальными фронтальными сетями наблюдается у всех субъектов, кроме пациента 5. Это говорит о том, что сигнал в этих разрозненных сетях становится более связным, так что активность мозга может более эффективно передаваться между когнитивным резервом (задним) и исполнительными функциями высшего порядка (передними). Также очевидно согласованное реципрокное картирование сетей в состоянии покоя (RSN) 2 и 3 («когнитивные функции-язык-ортография» и «когнитивные функции-пространство») в RSN 8 и 9 (исполнительное и левое лобно-теменное). Пространственное распределение изменений связности гораздо более важно для пациента 5, в первую очередь отражая перекрытие медиально-лобной и лобно-теменной сетей. Обе точки зрения предполагают, что пациент, полностью соблюдающий протокол лечения, развил большую согласованность между задними и передними частями мозга, так что весь мозг стал поддающимся эффективной передаче информации. Там, где это очевидно, измененная связность для пациента 5 проявляется в более узком наборе передних отделов мозга и представляет собой менее целостное свидетельство терапевтического эффекта.

Результаты представлены в таблице ниже. Пространственный анализ связи между различными анатомическими областями мозга выполняется для определения коэффициента корреляции для регрессивной средней интенсивности вокселя за один проход. Результаты показывают, что связь между сетью в режиме по умолчанию (в состоянии покоя) и сетью исполнительных функций увеличилась у пациентов 1, 3, 4 и 6, но уменьшилась у пациента 5.

Пациент 1 Пациент 3 Пациент 4 Пациент 5 Пациент 6 Изменение коэффициента корреляции + 0,20 +0,20 +0,20 -0,13 +0,70

Дополнительно обнаружено, что два пациента показывают снижение объема селезенки на 52 неделе, и средняя концентрация тромбоцитов повышается на 9,3% в среднем (диапазон от -8,2% до +45,3%), все пациенты сохраняют терапевтическую цель более чем 120×10⁹/л количество тромбоцитов. Повышение средней концентрации тромбоцитов в первую очередь управляется повышениями в 3 из 6 пациентов. Клинически значимые изменения уровня гемоглобина отсутствуют.

Пример 6: Фармакокинетика Соединения 2 у здоровых добровольцев-людей

Два клинических исследования в фазе 1 были проведены для оценки фармакокинетики, фармакодинамики, безопасности и переносимости Соединения 2 на здоровых добровольцах-людях в присутствии и отсутствии пищи. Соединение 2 также известно как венглюстат.

Исследование 1

Исследование 1 представляет собой одноцентровое исследование из 2 частей на здоровых взрослых мужчинах-добровольцах. Часть 1 представляет собой двойное слепое рандомизированное плацебо-контролируемое последовательное восходящее исследование однократной дозы Соединения 2 на безопасность, переносимость и ФК. Часть 2 представляет собой открытое, однокогортное, рандомизированное, перекрестное исследование с 2 последовательностями, 2 периодами и 2 видами лечения Соединением 2 для определения ФК с пищей с высоким содержанием жиров и без нее.

В 1 часть исследования включают и рандомизируют 55 здоровых мужчин (плацебо, n=14; дозы 2, 5, 15, 25, 50 и 100 мг, n=6 каждый; доза 150 мг, n=5). Во 2 части приняли участие восемь здоровых мужчин.

В 1 части субъектов произвольно распределяют для получения 2, 5, 15, 25, 50, 100 или 150 мг Соединения 2 (форма L-яблочной соли) или соответствующего плацебо утром первого дня после, по меньшей мере, 10-часового голодания. Во 2 части субъектов произвольно распределяют для получения однократной пероральной дозы 5 мг Соединения 2 либо во время голодания (по меньшей мере, 10 часов до и 4 часов после приема), либо через 30 минут после стандартизированного завтрака с высоким содержанием жиров (~815 ккал). После 7-дневного периода отмывки участников переводят в другое состояние.

В исследовании 1, часть 1, кровь собирают для определения концентраций в плазме Соединения 2 во время введения исследуемого лекарственного средства (0 час) и через 0,5, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 8, 10, 12, 16, 24, 48, 72 и 96 часов после введения дозы. Образцы мочи собирают для анализа концентраций Соединения 2, начиная с 2 часов до введения исследуемого лекарственного средства и через 48 часов после этого.

В исследовании 1, часть 2, кровь берут для определения концентраций Соединения 2 в плазме через 0, 0,5, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 8, 10, 12, 16, 24 и 48 часов после введения дозы.

В 1 части было обнаружено, что после однократного перорального дозирования 2-150 мг доз Соединения 2, максимальная концентрация в плазме (C_max) возникает в медианное время 3-5,5 часов, затем концентрации в плазме начинают экспоненциально снижаться, при средней геометрической t_1/2 28,9 часов. Воздействие увеличивается пропорционально дозе во всем диапазоне доз: 75-кратное повышение дозы дает 97,3-, 89,2- и 85,9-кратное повышение значений средней геометрической C_max, ППК_last и ППК_inf, соответственно. Результаты ФК показаны в следующей таблице (ППК= площадь под кривой время-концентрация, либо для последней измеримой концентрации, либо экстраполированная на бесконечность; t_1/2=конечный период полувыведения; CL/F=очевидный общий клиренс из плазмы; CV=коэффициент вариаций; СО=стандартное отклонение; t_max=время до C_max; Vss/F=очевидный объем распределения в состоянии покоя):

Параметр 2 мг (N=6) 5 мг (N=6) 15 мг (N=6) 25 мг (N=6) 50 мг (N=6) 100 мг (N=6) 150 мг (N=5) C_max, нг/мл Среднее (СО) 5,7 (1,2) 14,7 (1,61) 53,0 (16,7) 84,4 (31,8) 181 (56) 374 (38) 529 (109) Среднее геометрическое (CV) 5,6 (21,4) 14,6 (10,9) 50,7 (31,5) 79,9 (37,7) 173 (31) 372 (10,3) 520 (21) t_max, медианное, ч (диапазон) 3,50 (3,00-8,00) 5,50 (4,00-8,00) 3,50 (2,00-5,00) 5,00 (4,00-8,00) 4,00 (3,00-6,00) 3,00 (2,00-4,00) 4,00 (1,00-8,00) ППК_last, нг⋅ч/мл Среднее (СО) 214 (52) 560 (71) 1,830 (520) 3,380 (1100) 6,310 (1880) 13,000 (2330) 18,600 (5480) Среднее геометрическое (CV) 209 (24,3) 556 (12,7) 1,760 (29) 3,240 (33) 6,070 (30) 12,800 (18) 18,000 (30) ППК_inf, нг⋅ч/мл Среднее (СО) 243 (61) 652 (122) 2,070 (600) 3,810 (1,080) 7,130 (2,320) 14,400 (3,010) 20,600 (6,640) Среднее геометрическое (CV) 237 (25) 643 (19) 1,990 (29) 3,690 (28) 6,800 (33) 14,100 (21) 19,900 (32) t_1/2, ч Среднее (СО) 29,2 (43) 33,3 (8,1) 29,7 (7,1) 30,2 (5,5) 28,9 (5,3) 27,8 (3,6) 26,9 (5,7) Среднее геометрическое (CV) 28,9 (14,8) 32,5 (24,4) 29,0 (24,0) 29,8 (18,1) 28,5 (18,4) 27,6 (12,8) 26,4 (21,3) CL/F, л/ч Среднее (СО) 6,43 (1,41) 5,86 (1,01) 5,85 (1,89) 5,18 (1,31) 5,75 (2,01) 5,38 (1,25) 5,80 (1,55) Среднее геометрическое (CV) 6,3 (22,0) 5,8 (17,3) 5,6 (32,2) 5,0 (25,3) 5,5 (34,9) 5,3 (23,4) 5,6 (26,7) V_ss/F, л Среднее (СО) 275 (54) 274 (30) 245 (81) 240 (78) 239 (62) 213 (22) 228 (50) Среднее геометрическое (CV) 270 (20) 273 (11) 233 (33) 228 (33) 232 (26) 212 (10) 223 (22)

Из 2 части было обнаружено, что введение 5 мг дозы при питании с высоким содержанием жиров не оказывает влияния на действие Соединения 2 по сравнению с состоянием голодания. Медианное t_max составляет 6,00 часов независимо от питания или голодания. Средние геометрические отношения при питании/голодании составляют 0,92 и 0,91 для C_max и ППК_last, соответственно. Внутрисубъектная вариабельность (т.е. питание/голодание) отмечена при менее половины общей субъектной вариабельности.

Исследование 2

Исследование 2 представляет собой одноцентровое, двойное слепое, рандомизированное, плацебо-контролируемое, последовательное восходящее с повторными дозами исследование безопасности, переносимости, ФК и фармакодинамики Соединения 2 у здоровых взрослых добровольцев мужского и женского пола.

В исследование включены и произвольно распределены 36 здоровых взрослых людей (19 мужчин и 17 женщин) (n=9 в каждой группе). Субъекты произвольно распределены для получения один раз в сутки Соединения 2 в дозе 5, 10 или 20 мг (в виде капсул по 5 мг в форме L-яблочной соли) или плацебо в течение 14 дней после, по меньшей мере, 10 часов голодания.

Кровь собирают для определения концентраций в плазме Соединения 2 следующим образом: День 1 в 0, 0,5, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 8, 10, 12 и 16 часов после дозирования; в дни 2-5, 8, 11 и 13, в 0 ч; в день 14, в 0,5, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 8, 10, 12 часов после дозирования; в дни 15-17, в 24, 48 и 72 часов, соответственно, после дозирования на 14 день. Образцы мочи собирают для анализа концентраций Соединения 2 в день 1 (0 часов после дозирования) и далее в день 14 через 0-24 часов после дозирования. Фармакодинамические конечные точки (концентрации GL-1, GL-3 и GM3 в плазме) оценивают в дни 1-5, 8, 11, 13 и 14, в 0 часов после дозирования; и в день 15 через 24 часа после дозирования на 14 день.

Было обнаружено, что у субъектов, получающих 5, 10, или 20 мг Соединения 2 один раз в сутки в течение 14 дней, C_max в плазме возникает в медианное время 2-5 часов после дозирования в дни 1 и 14. Значения C_trough достигают плато на 5 день 5. Воздействие Соединения 2 повышается близко пропорционально дозе в интервале дозирования 5-20 мг: это 4-кратное повышение дозы дает 3,76- и 3,69-кратное повышение значений средней геометрической C_max и ППК_0-24 на 14 день, соответственно. ФК результаты из исследования 2 суммированы в следующей таблице:

День 1 Параметр 5 мг (N=9) 10 мг (N=9) 20 мг (N=9) C_max, нг/мл Среднее (СО) 18,5 (3,2) 38,5 (7,4) 68,0 (15,7) Среднее геометрическое (CV) 18,2 (17,3) 37,8 (19,3) 66,5 (23,1) t_max, медианное, ч (диапазон) 5,00 (2,00-8,17) 3,00 (2,00-5,00) 3,07 (2,00-6,00) ППК_0-24, нг⋅ч/мл Среднее (СО) 296 (54) 635 (132) 1,100 (211) Среднее геометрическое (CV) 292 (18) 623 (21) 1,080 (19) День 14 C_max, нг/мл Среднее (СО) 37,0 (6,4) 89,7 (29,1) 142 (40) Среднее геометрическое (CV) 36,5 (17,2) 86,0 (32,5) 137 (28,3) t_max, медианное, ч (диапазон) 3,00 (2,00-6,00) 2,00 (2,00-6,00) 3,00 (2,00-8,00) ППК_0-24, нг⋅ч/мл Среднее (СО) 642 (121) 1,550 (464) 2,420 (705) Среднее геометрическое (CV) 632 (19) 1,490 (30) 2,340 (29) C_trough, нг/мл Среднее (СО) 19,4 (4,0) 49,9 (19,3) 73,3 (24,4) Среднее геометрическое (CV) 19,0 (20,5) 47,5 (38,7) 69,9 (33,2) t_1/2, ч Среднее (СО) 29,3 (4,6) 31,3 (3,3) 35,0 (6,3) Среднее геометрическое (CV) 29,0 (15,8) 31,2 (10,5) 34,5 (18,0) CL_ss/F, л/ч Среднее (СО) 5,98 (1,17) 5,13 (1,25) 6,58 (1,70) Среднее геометрическое (CV) 5,9 (19,5) 5,0 (24,4) 6,4 (25,8) CL_R(0-24), л/ч Среднее (СО) 1,55 (0,68) 1,49 (0,41) 2,07 (0,58) Среднее геометрическое (CV) НД^a (44,0) 1,4 (27,7) 2,0 (28,0)

Через 14 доз один раз в сутки Соединения 2, 24-часовая неизмененная фракция выделения с мочой (средняя fe_0-24) варьировалась между 26,3% и 33,1% без очевидного соотнесения с дозой. Средняя CL_R(0-24) варьируется от 1,49 л/ч до 2,07 л/ч, приблизительно 3,18-3,86-кратно ниже, чем наблюдаемые CL/F в плазме.

GL-1, GL-3 и GM3 в плазме у получателей плацебо остается аналогичной исходному уровню, в то время уровни GL-1 и GM3 в плазме снижаются от исходного уровня в зависимости от времени и дозы в группе 3 дозы Соединения 2, как показано в следующей таблице (точечная оценка соотношений при лечении глюкозилцерамида (GL-1), глоботриаозилцерамида (GL-3) и ганглиозида GM3 (GM3) на 15 день в исследовании с повторным возрастанием дозы):

Параметр Сравнение Оценка 90% доверительный интервал GL-1 5 мг к плацебо 0,39 0,29-0,50 10 мг к плацебо 0,32 0,25-0,42 20 мг к плацебо 0,23 0,17-0,30 GL-3 5 мг к плацебо 0,61 0,47-0,79 10 мг к плацебо 0,69 0,53-0,89 20 мг к плацебо 0,67 0,51-0,89 GM3 5 мг к плацебо 0,56 0,45-0,70 10 мг к плацебо 0,49 0,39-0,60 20 мг к плацебо 0,40 0,32-0,50

Максимальное устойчивое действие на GL-1 наблюдают на 11 день в группах 5 и 10 мг и на 8 день в группе 20 мг. Среднее рассчитанное снижение GL-1 по сравнению с исходным уровнем на 15-й день составляет 41,9%, 69,6% и 74,6% в соответствующих группах 5, 10 и 20 мг. Значения GL-1 были ниже нижнего предела количественной оценки (LLOQ) на исходном уровне у 1 реципиента 5 мг соединения 2 и на день 15 у 3, 5 и 9 субъектов в группах 5, 10 и 20 мг доз, соответственно.

Максимальное устойчивое снижение GM3 наблюдают во всех группах дозировки Соединения 2, начиная со дня 13. Средние уровни GM3 в плазме на день 15 составляют 42,7%, 49,4% и 57,8% от исходного уровня для групп 5, 10 и 20 мг доз, соответственно. GM3 был ниже LLOQ на 15 день у 1 и 2 субъектов в группах 10 и 20 мг дозами, соответственно.

GL-3 в плазме также уменьшается со временем во всех группах дозирования Соединения 2, но вариабельные и низкие исходные значения GL-3 по сравнению с LLOQ ограниченными средними расчетными снижениями GL-3. В группах плацебо, 5, 10 и 20 мг доз значения GL-3 были ниже LLOQ у 1, 3, 1 и 6 субъектов, соответственно, на исходном уровне, и у 4, 9, 7 и 9 субъектов, соответственно, на день 15.

Среднее оценочное снижение GL-1 в плазме от исходного уровня (90% CI), связанные с Соединением 2 C_trough в группах 5, 10 и 20 мг дозы (19,0, 47,5 и 69,9 нг/мл, соответственно) составляет 67,0% (54,4-79,7%), 74,4% (63,7-85,2%) и 76,3% (64,8-87,8%), соответственно.

Заключения

В этих исследованиях, действие Соединения 2 на здоровых субъектов (C_max и ППК) было близко к дозозависимому при введении однократных доз в диапазоне от 2 до 150 мг или в виде повторных, однократных доз в диапазоне от 5 до 20 мг в течение 14 дней. По сравнению с голоданием, пища с высоким содержанием жиров не влияла на действие у субъектов, получивших однократную дозу 5 мг. При повторных дозах от 5 до 20 мг один раз в сутки устойчивое состояние достигалось в течение 5 дней; на накопление не повлияли ни возраст, ни пол. Фармакодинамически, повторные ежедневные дозы Соединения 2 снижали GL-1 и GM3 в плазме в зависимости от времени и дозы, что согласуется с опосредованным Соединением 2 ингибированием GCS, хотя исходные уровни GL-3 были слишком низкими, чтобы быть полезными в качестве фармакодинамического биомаркера. Дозозависимое снижение GL-1 подтвердило предполагаемый механизм действия Соединения 2: ингибирование образования GL-1 из церамида через GCS.

Во всех исследованиях, профиль безопасности оценивают путем мониторинга нежелательных явлений, возникающих в результате лечения (TEAE), в течение 10 дней после последней дозы исследуемого препарата, включая серьезные нежелательные явления [SAE]), мониторинг ЭКГ, лабораторные показатели и физические обследования.

Ни в одном из исследований не было летальных исходов, SAE, тяжелых TEAE или TEAE, приведших к прекращению исследования.

Ни в одном из исследований не сообщалось о клинически значимых гематологических или биохимических аномалиях. Жизненно важные показатели не показали существенных изменений по сравнению с исходным уровнем ни в одном из исследований. Параметры ЭКГ не показали значимых изменений в исследованиях однократной возрастающей дозы и влияния пищи; в исследовании с множественными возрастающими дозами параметры ЭКГ не изменились статистически значимо по сравнению со средним исходным уровнем по сравнению с плацебо у реципиентов Соединения 2 при любой дозе. Следует понимать, что хотя изобретение было описано в связи с приведенными выше вариантами осуществления, приведенное выше описание и примеры предназначены для иллюстрации, а не для ограничения объема изобретения. Другие аспекты, преимущества и модификации в пределах объема изобретения будут очевидны специалистам в области, к которой относится изобретение.

Пример 7: Клиническое исследование Соединения 2 у пациентов с болезнью Фабри

Способ

Трехлетнее открытое исследование Соединения 2 у молодых пациентов с классической болезнью Фабри было проведено с целью оценки долгосрочной безопасности, фармакодинамики и поисковых показателей эффективности Соединения 2 у взрослых мужчин-пациентов с болезнью Фабри. Одиннадцать субъектов были включены в исследование, и семь субъектов завершили все аспекты исследования. Все субъекты были мужчинами с диагностированной классической болезнью Фабри, подтвержденной генотипом и остаточной активностью альфа-галактозидазы ниже уровней обнаружения (9 из 11 имели нонсенс-мутацию в гене GLA). Все субъекты имели уровни лизо-GL3 в плазме, по меньшей мере, 65 нг/мл и не получали ранее специфического лечения болезни Фабри. Средний возраст субъектов составлял 24 года (диапазон 19-37 лет).

Пациентам вводят суточную пероральную дозу 15 мг Соединения 2. Клиренс отложений GL-3 в коже контролируют путем взятия биопсий через 12, 26, 52 и 156 недель, которые оценивают полуколичественно с помощью световой микроскопии (фокусирующейся на эндотелиальных клетках капилляров кожи). Каждый образец был независимо оценен 3 патологами на наличие включений GL-3 по четырехбалльной шкале и ранжированы как 0 (нет/след), 1 (легкие), 2 (умеренные) или 3 (тяжелые) в соответствии с Eng et al., N. Engl. J. Med. 345:9-16 (2001). Единая оценка для каждого пациента на момент времени получена путем взятия оценок, выставленных большинством из трех патологов. Если не удалось получить оценку большинства, используют среднюю оценку (что приводит к некоторым дробным оценкам). Образцы плазмы также были проанализированы на GL-3, лизо-GL-3, GL-1 и GM3 на исходном уровне и неделях 12, 26, 52 и 156. Оценки боли и абдоминальных симптомов анализируют на исходном уровне и неделях 12, 26, 52, 104 и 156 с использованием протокола подсчета оценок SF-36.

Пациентов оценивают с помощью анкеты Short Form-36 (SF-36) во время многочисленных посещений от исходного уровня до недели 156. Это анкета из 36 пунктов, используемая для измерения 8 различных аспектов здоровья (жизнеспособность, физическое функционирование, телесная боль, общее восприятие здоровья, физическое ролевое функционирование, эмоциональное ролевое функционирование, социальное ролевое функционирование и психическое здоровье). Оценка по каждому из восьми аспектов варьируется от 0 (максимальная инвалидность) до 100 (нет инвалидности), и, таким образом, более высокие оценки указывают на хорошее состояние здоровья. Кроме того, желудочно-кишечные симптомы, включая боль в животе, вздутие живота и движения кишечника, оценивают с использованием модифицированной версии системы оценки тяжести воспаления кишечника. Конкретные вопросы, задаваемые в рамках этих оценок, включают: (1) страдает ли пациент от боли в животе в течение последних десяти дней, (2) какова была тяжесть боли в животе за последние десять дней, используя оценку по шкале от 0 (отсутствие боли) до 100 (очень сильная боль) и (3) сколько дней в течение последних десяти дней пациент испытывал боль в животе.

Результаты

На 156 неделе у пяти пациентов наблюдают снижение показателя GL-3 кожи на 1 балл, у двух пациентов было полное удаление включений GL-3, у одного пациента не было изменений и у одного пациента не было образцов. В течение 156-недельного исследования, средний уровень GL-1 в плазме снизился на 69%, средний уровень GM3 в плазме снизился на 60%, средний уровень GL-3 в плазме снизился на 77%, а средний уровень lyso-GL3 в плазме снизился на 52%. GL-1 и GM3 в плазме показали очень быстрое снижение в течение первых 2-4 недель лечения. Все четыре показателя показали устойчивое сохранение сниженной плазменной нагрузки, которая в значительной степени стабилизировалась к 52 неделе.

Данные по плазме и моче сведены в таблице ниже:

Измеренный параметр: Изменение от исходного измерения на: 26 неделе (n=9) 52 неделе (n=7) 104 неделе (n=7) 156 неделе (n=7) GL-3 в плазме (мкг/мл) -3,62 мкг/мл -5,06 мкг/мл -6,32 мкг/мл -6,97 мкг/мл лизо-GL-3 в плазме (нг/мл) -30,99 нг/мл -37,10 нг/мл -39,84 нг/мл -48,13 нг/мл GL-1 в плазме (мкг/мл) -3,26 мкг/мл -3,58 мкг/мл -3,70 мкг/мл -3,23 мкг/мл M3 в плазме G (мкг/мл) -10,77 мкг/мл -8,84 мкг/мл -9,92 мкг/мл -8,12 мкг/мл GL-3 в моче (мг на ммоль креатинина мочи) -0,25 мг/ммоль
(n=8) -0,20 мг/ммоль
(n=7) -0,18 мг/ммоль
(n=7) -0,18 мг/ммоль
(n=7)

Эти результаты демонстрируют, что Соединение 2, вводимое в дозе 15 мкг/сутки, последовательно снижает уровни GL-1, лизо-GL-1 и GM3 в организме в целом прогрессивным образом.

Кроме того, для сравнения были проанализированы данные 3 фазы ранее завершенного плацебо-контролируемого исследования агалсидазы бета (Fabrazyme) для сравнения (см. Eng et al., N. Eng. J. Med., 345:9 (2001). Для сравнения с агалсидазой бета, историческая контрольная группа включает пациентов, леченных агалсидазой бета на 3 фазе испытания, и изменение GL-3 в плазме сравнивают в нескольких временных точках до трех лет. Критерии включения и исходные характеристики были схожими между двумя исследованиями. При усиления сравнения, пациентов, получавших Соединение 2, сопоставляют с пациентами 3 фазы исследования на основе оценок предрасположенности с использованием исходных переменных возраста, GL-3 в плазме, пола, UPCR (<500 мг/г к с 500-1000 мг/г к с >1000 мг/г). г) и eGFR (<80 к ≥ 80 мл/мин/1,73 м²). 11 пациентов, получавших Соединение 2, сопоставляют с 19 пациентами для сравнения с плацебо и с 28 пациентами для сравнения с агалсидазой бета. Все пациенты во всех трех группах были мужчинами и имели повышенный уровень GL-3 в плазме, UPCR <500 мг/г и eGFR ≥80 мл/ мин/1,73 м². Средний возраст во всех трех группах был аналогичным. Сравнение показывает, что лечение Соединением 2 в течение 26 недель привело к значительному снижению GL-3 в плазме по сравнению с плацебо, -3,62 мкг/мл по сравнению с -1,06 мкг/мл (P <0,0001). Хотя лечение Соединением 2 дает аналогичное снижение GL-3 в плазме на 52 неделе по сравнению с агалсидазой бета, на 104 неделе и на 156 неделе, снижение GL-3 в плазме при лечении Соединением было значительно больше (p=0,0351 на 104 неделе; p=0,0081 на 156 неделе). Уровни GL-3 в плазме через 156 недели составляют 1,90 мкг/мл для пациентов, леченных Соединением 2, по сравнению с 4,44 мкг/мл для пациентов, леченных агалсидазой бета.

Подробные результаты оценки включения GL-3 в кожу показаны в таблицах ниже (оценка 0 означает отсутствие включений GL-3):

Эндотелиальные клетки, поверхностные сосуды Оценка изменения GL-3 в коже Количество пациентов в каждой категории изменения (изменения по сравнению с исходной оценкой кожи) на: 12 недель 26 недель 52 недели 156 недель Оценка 1 снижается до 0 2/6 (33%) Оценка 1 не меняется 4/9 (44%) 4/9 (44%) 3/6 (50%) 1/6 (17%) Оценка 1 повышается до 2 1/9 (11%) 1/9 (11%) Оценка 2 снижается до 1 3/9 (33%) 3/9 (33%) 2/6 (33%) 3/6 (50%) Оценка 2 не меняется 1/9 (11%) 1/9 (11%) 1/6 (17%) Эндотелиальные клетки, глубокие сосуды Оценка изменения GL-3 в коже Количество пациентов в каждой категории изменения (изменения по сравнению с исходной оценкой кожи) на: 12 недель 26 недель 52 недели 156 недель Оценка 1 не меняется 1/9 (11%) 1/9 (11%) 1/6 (17%) Оценка 2 снижается до 0,5 1/6 (17%) Оценка 2 снижается до 1 2/9 (22%) 2/9 (22%) 3/6 (50%) 3/6 (50%) Оценка 2 снижается до 1,5 1/6 (17%) Оценка 2 не меняется 6/9 (67%) 6/9 (67%) 2/6 (33%) 1/6 (17%) Клетки гладкой мускулатуры, глубокие сосуды Оценка изменения GL-3 в коже Количество пациентов в каждой категории изменения (изменения по сравнению с исходной оценкой кожи) на: 12 недель 26 недель 52 недели 156 недель Оценка 1, 5 не меняется 2/9 (22%) Оценка 1, 5 повышается до 2 2/9 (22%) 1/5 (20%) 1/6 (17%) Оценка 2 снижается до 0,5 Оценка 2 снижается до 1 1/6 (17%) Оценка 2 снижается до 1,5 1/6 (17%) Оценка 2 не меняется 7/9 (78%) 7/9 (78%) 4/5 (80%) 3/6 (50%) Клетки периневрия Оценка изменения GL-3 в коже Количество пациентов в каждой категории изменения (изменения по сравнению с исходной оценкой кожи) на: 12 недель 26 недель 52 недели 156 недель Оценка 1 не меняется 1/6 (17%) Оценка 1 повышается до 2 1/9 (11%) 1/9 (11%) 1/6 (17%) Оценка 2 снижается до 1 1/6 (17%) Оценка 2 снижается до 1,5 1/6 (17%) 1/6 (17%) Оценка 2 не меняется 8/9 (89%) 8/9 (89%) 3/6 (50%) 4/6 (67%)

В дополнение к подсчету включений GL-3 в коже с помощью световой микроскопии, долю объема цитоплазмы эндотелиальных клеток, занятая включениями GL-3, оценивают с использованием точечного подсчета электронных микроскопических изображений маскированным ридером. Изображения, по меньшей мере, 50 капилляров поверхностных эндотелиальных клеток получают с помощью электронной микроскопии при 7500х увеличении. Двухфакторные t-тесты используют для оценки различий между исходными значениями и значениями после лечения в каждый момент времени. Результаты представлены в таблице ниже:

Исходный уровень (N=9) 3 месяца (N=9) 6 месяцев (N=8) 3 года (N=6) Объемная доля (объем включений/общий объем цитоплазмы) 0,29 ± 0,03 0,29 ± 0,06 0,23 ± 0,04 0,18 ± 0,03 Изменения от исходного уровня -1,9% -21,1% -38,7% P значение к исходному уровню 0,74 0,001 0,001

Эти результаты демонстрируют, что Соединение 2, вводимое в дозе 15 мг/сутки, последовательно снижает уровни включений GL-3 в коже в целом прогрессивным образом. Результаты в целом были более выраженными для эндотелия поверхностных сосудов по сравнению с эндотелиальными клетками глубоких сосудов и другими тканями кожи.

Семь из девяти пациентов улучшили общие показатели боли в теле на 26 неделе (SF-36), в то время как три из шести пациентов улучшили общие показатели боли в теле на 156 неделе (SF-36). Среди пациентов с желудочно-кишечными болями на исходном уровне, тяжесть боли (боли в животе) снизилась у четырех из пяти на 26 неделе и у четырех из четырех на 156 неделе. Количество дней с желудочно-кишечными болями уменьшилось у пяти из пяти пациентов на 26 неделе и у трех из четырех пациентов на 156 неделе.

Подробные результаты измерения боли в животе показаны в таблицах ниже.

Боль в животе Количество пациентов, ответивших «Да» относительно боли в животе за 10 дней до визита Исходный уровень 4 недели 12 недель 26 недель 52 недели 104 недели 156 недель 6/11 (55%) 4/11 (36%) 2/10 (20%) 3/9 (33%) 2/7 (28%) 2/7 (28%) 2/7 (28%) Оценка тяжести боли в животе за 10 дней до визита (среднее значение, шкала 0-100) Исходный уровень (n=6) 4 недели (n=4) 12 недель (n=2) 26 недель (n=3) 52 недели (n=1) 104 недели (n=1) 156 недель (n=2) 52,50 29,75 40,00 31,33 21,00 21,00 15,00 Количество дней в течение предшествующих 10 дней с болью в животе (среднее значение) Исходный уровень (n=6) 4 недели (n=4) 12 недель (n=2) 26 недель (n=3) 52 недели (n=3) 104 недели (n=2) 156 недель (n=2) 3,83 2,50 3,50 3,00 0,70 0,50 0,20

Эти результаты демонстрируют, что Соединение 2, вводимое в дозе 15 мг/сутки, последовательно уменьшает боль в животе и дискомфорт в теле в целом прогрессивным образом.

Кроме того, если признаки или аспекты изобретения описаны в терминах групп Маркуша, специалисты в данной области техники поймут, что изобретение таким же образом описано в терминах любого отдельного члена или подгруппы членов группы Маркуша.

Все публикации, заявки на патенты, патенты и другие ссылки, упомянутые в настоящем документе, прямо включены в качестве ссылки во всей своей полноте в той же степени, как если бы каждая была включена в качестве ссылки по отдельности. В случае противоречия преимущественную силу имеет настоящее описание, включая определения.

Изобретение относится к химии и фармацевтической промышленности, а именно к способу лечения или профилактики когнитивной дисфункции, ассоциированной с лизосомной болезнью накопления, у субъекта человека, нуждающегося в этом. Предложенный способ включает введение указанному субъекту эффективного количества соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, где соединение формулы (I) имеет структуру , при этом: R¹ – водород; R² и R³ – независимо выбирают из C_1-3-алкила; R⁴, R⁵ и R⁶ – независимо выбирают из водорода и галогена; A – тиазолил. Изобретение обеспечивает создание способа, который эффективен для улучшения когнитивных способностей или уменьшения когнитивного дефицита, измеренного по данным сокращения времени, необходимого для завершения теста построения маршрута (TMT), TMT-A и/или TMT-B, снижения разницы между временем TMT-A и временем TMT-B (TMT-A - TMT-B). 15 з.п. ф-лы, 2 ил., 20 табл., 7 пр.

1. Способ лечения или профилактики когнитивной дисфункции, ассоциированной с лизосомной болезнью накопления у субъекта человека, нуждающегося в этом, где способ эффективен для улучшения когнитивных способностей или уменьшения когнитивного дефицита, измеренного по данным сокращения времени, необходимого для завершения теста построения маршрута (TMT), TMT-A и/или TMT-B или снижения разницы между временем TMT-A и временем TMT-B (TMT-A - TMT-B); включающий введение субъекту эффективного количества соединения формулы (I),

или его фармацевтически приемлемой соли, где:

R¹ является водородом;

R² и R³ независимо выбирают из C_1-3-алкила;

R⁴, R⁵ и R⁶ каждый независимо выбирают из водорода и галогена; и

A является тиазолилом.

2. Способ по п.1, где R² и R³ каждый независимо выбирают из метильной и этильной групп.

3. Способ по п.1 или 2, где R⁴ является фтором и R⁵ и R⁶ являются водородом; и/или где R⁴ расположен в 4 положении фенильного кольца, к которому он присоединен.

4. Способ по любому из пп.1-3, где указанное соединение представлено следующими структурными формулами (III), (IV), (V), (VIII), или (XI):

или его фармацевтически приемлемая соль.

5. Способ по п.4, где указанное соединение представлено структурной формулой (XI) и где R⁴ является фтором.

6. Способ по п.1, где указанное соединение представляет собой (S)-хинуклидин-3-ил (2-(2-(4-фторфенил)тиазол-4-ил)пропан-2-ил)карбамата или его фармацевтически приемлемая соль.

7.Способ по п.1, где указанное соединение является (S)-хинуклидин-3-ил(2-(2-(4-фторфенил)тиазол-4-ил)пропан-2-ил)карбаматом в форме малатной соли.

8. Способ по любому из пп.1-7, где когнитивная дисфункция представляет собой деменцию, например болезнь Альцгеймера или болезнь Паркинсона, необязательно, где при деменции проявляются признаки нарушения скорости зрительного поиска, скорости считывания при обработке, умственной гибкости и/или исполнительного функционирования.

9. Способ по любому из пп.1-8, где сокращение времени, необходимого для завершения теста построения маршрута (TMT), TMT-A и/или TMT-B или снижения разницы между временем TMT-A и временем TMT-B (TMT-A - TMT-B), составляет не менее 10%, или не менее 20%, или не менее 30%, или не менее 40%, или не менее 50%.

10. Способ по любому из пп.1-9, где способ представляет собой способ лечения или профилактики когнитивной дисфункции и нарушений походки, включая атаксию, связанную с лизосомальной болезнью накопления.

11. Способ по п.10, где атаксия представляет собой мозжечковую атаксию, при этом атаксия необязательно проявляется симптомами, выбранными из нестабильности походки, астении, асинергии, задержки реакции, дисхронометрии, дизартрии, дисфагии, гипотонии, дисметрии, гипометрии, гиперметрии, дисдиадохокинезии, невнятной речи, голосового тремора, атаксического дыхания, постуральной неустойчивости и их комбинации, например, где первичным атаксическим дефицитом является неустойчивость походки.

12. Способ по п.10 или 11, где субъект имеет исходную атаксию, по меньшей мере, 0,5 по шкале оценки и ранжирования атаксии (SARA) в начале терапии в соответствии со способом, например, исходный балл по SARA составляет, по меньшей мере, 1 или, по меньшей мере, 2, или, по меньшей мере, 3, или, по меньшей мере, 4, или, по меньшей мере, 5, или, по меньшей мере, 10, или, по меньшей мере, 20.

13. Способ по любому из пп.10-12, где способ эффективен для снижения по шкале атаксии SARA по меньшей мере на 0,5, например, снижения оценки по шкале SARA по меньшей мере на 1, или по меньшей мере 2, или по меньшей мере, 3, или по меньшей мере 5, или по меньшей мере, 10; или где способ эффективен для снижения показателя SARA до значений от 0,00 до 3,00, или от 0,00 до 2,00 или от 0,00 до 1,50, или от 0,00 до 1,00, или от 0,00 до 0,50.

14. Способ по любому из пп.1-13, где субъект имеет болезнь Гоше 3 типа или болезнь Ниманна-Пика типа C или GM2-ганглиозидоз.

15. Способ по любому из пп.1-14, где субъект проходит одновременное лечение ферментозамещающей терапией (ERT), например, с применением глюкоцереброзидазы, необязательно, где субъекту проводят лечение ферментозамещающей терапией до начала лечения указанным соединением, и/или где способ дополнительно включает стадию перевода субъекта с терапии ERT на лечение указанным соединением.

16. Способ по любому из пп.1-15, где указанное соединение или его фармацевтически приемлемую соль вводят системно, например, не парентеральным путем или перорально, и/или где субъекту вводят суточную дозу от примерно 1 мг до примерно 150 мг указанного соединения, например, от 5 до 50 мг, или от 10 до 40 мг, или от 10 до 30 мг, или от 10 до 20 мг, или от 20 до 30 мг, или от 30 до 40 мг, или от 40 до 50 мг, или от 5 до 25 мг, или от 20 до 50 мг, или от 5 до 15 мг, или от 15 до 30 мг, или примерно 15 мг.