Способ моделирования химического гастрита у лабораторных крыс Российский патент 2024 года по МПК G09B23/28 

Изобретение относится к ветеринарной медицине, а конкретно к ветеринарной гастроэнтерологии, экспериментальной медицине, патологической физиологии, и может быть использовано для изучения патогенеза и терапии гастрита, вызванных химическим повреждением слизистой оболочки желудка.

Уровень техники

Известен способ моделирования химического гастрита в эксперименте путем перорального введения неинбредным белым крысам смеси нестероидного противовоспалительного препарата Кеторол из расчета 5 мг/кг и 200 мкл 5% раствора аскорбиновой кислоты за 1 час до кормления 1 раз в сутки в течение 21 дня [Патент РФ №2395125 G09B 23/28, 20.07.2010].

Главным недостатком данного метода является длительное время ожидания действия препарата и его стоимость.

Наиболее близким по технической сущности и достигаемому положительному эффекту и принятое авторами за прототип является моделирование гастрита, предложенное Vaananen et al., 1992. Крысам однократно перорально вводили индометацин в дозе 20 мг/кг перорально и внутривенно. Отмечалось формирование макроскопически видимых изменений слизистой оболочки желудка (Vaananen, P.M. Pharmacological investigation of the role of leukotrienes in the pathogenesis of experimental NSAID gastropathy /P.M.Vaananen, C.M.Keenan, M.B.Grisham, J.L.Wallace //Inflammation. - 1992, Jun. - Vol.16. - №3. - P.227-240). Наибольшие повреждения слизистой оболочки были выявлены при пероральном введении.

Недостатком данного способа является официнальная труднодоступность индометацина и его стоимость.

Раскрытие изобретения

Задачей предлагаемого изобретения является создание модели, которая наиболее полно отражает морфологическую картину поражения не только слизистого слоя, но и мышечного слоя желудка.

Технический результат, который может быть достигнут с помощью предлагаемого изобретения, сводится к изучению патогенеза гастрита у различных животных и исследования новых методов при лечении данной патологии.

Технический результат достигается с помощью способа провокации химического гастрита у лабораторных крыс, включающего однократное пероральное введение неинбредным крысам 0,1 мг кристаллов перманганата калия, помещенного в болюс, который состоит из пшеничной муки высшего сорта, в смеси с водой в соотношении 1 грамм муки к 1 мл воды, за 4 часа до кормления.

Осуществление изобретения

Способ был осуществлен следующим образом. Неинбредным белым крысам (самкам и самцам) однократно вводят 0,1 мг кристаллов перманганата калия, помещенного в болюс из пшеничной муки высшего сорта воде, в пропорции 1 грамм муки к 1 мл воды, за 4 часа до кормления. После окончанию эксперимента животным проводили эвтаназию с соблюдением правил, с помощью эфирного наркоза. Патологический материал (стенку желудка) фиксировали в 10% формалине в соотношении 1:10 (на одну часть материала 10 частей 10% формалина). Гистологические препараты готовили, используя общепринятые методики, в результате которых были выявлены типичные признаки химического гастрита: гиперплазию ямочного эпителия с локальным истощением муцина, увеличение количества обкладочных (париетальных) клеток в дне желез слизистой оболочки пилорического отдела желудка, гипертрофию мышечной пластинки слизистой оболочки желудка, увеличение в собственной пластинке слизистой оболочки желудка количества гладкомышечных клеток, отек собственной пластинки слизистой оболочки.

Эксперимент был выполнен на тридцати животных: самках и самцов неинбредных белых крыс пятимесячного возраста, содержащихся в условиях вивария. Все эксперименты проведены в соответствии с «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных» (Приложение к приказу Министерства здравоохранения СССР от 12.08.1977 г. N755) и «Европейской конвенцией о защите позвоночных животных, используемых для экспериментов или в иных научных целях» от 18 марта 1986 г.

Была одна экспериментальная группа. I группа – животные, получавшие однократно перорально 0,1 мг кристаллов перманганата калия, помещенного в болюс из пшеничной муки высшего сорта на воде в пропорции 1 грамм муки к 1 мл воды, за 4 часа до кормления. Через час после начала исследований животным проводили эвтаназию путем перерезки спинного мозга под эфирным наркозом. Гистологический материал получали из разных отделов желудка (кардиальный, дно желудка, тело желудка и пилорический отдел), фиксировали в 10% формалине в соотношении 1:10, заливали в парафин, срезы (3-4 мкм) делались на ротационном микротоме, наносились на стекла с адгезивным покрытием (яичный альбумин), окрашивали эозином и гематоксилином.

При проведении патоморфологического исследования у всех животных, которые получали однократное пероральное введение 0,1 мг кристаллов перманганата калия, помещенного в болюс из пшеничной муки высшего сорта на воде в пропорции 1 грамм муки к 1 мл воды, за 4 часа до кормления, отмечалось уменьшение количества главных клеток в дне желез слизистой оболочки пилорического отдела желудка на фоне увеличения количества эозинофильно-окрашенных париетальных клеток, продуцирующих соляную кислоту, гиперплазию ямочного эпителия с локальным истощением муцина, гипертрофию мышечной пластинки слизистой оболочки желудка, увеличение в собственной пластинке слизистой оболочки желудка количества гладкомышечных клеток и ее отек.

Таким образом, у данных животных получавших однократно перорально 0,1 мг кристаллов перманганата калия, помещенного в болюс из пшеничной муки высшего сорта на воде в пропорции 1 грамм муки к 1 мл воды, за 4 часа до кормления, привело к развитию химического гастрита, что подтверждается результатами гистологического исследования.

Положительный эффект от использования предлагаемого способа состоит в создании экспериментальной модели химического гастрита, обладающей 100%-ной воспроизводимостью и соответствующей по гистологической картине химическому гастриту.

Пример 1. Применение болюса 0,03 мг кристаллов перманганата калия из пшеничной муки высшего сорта на воде в пропорции 1 грамм муки к 1 мл воды за 4 часа до кормления не имело необходимого эффекта, макроскопически заметных эрозивно-язвенных поражений при указанной пропорции не наблюдалось.

Пример 2. Применение болюса 0,2 мг кристаллов перманганата калия из пшеничной муки высшего сорта в пропорции 1 грамм муки к 1 мл воды за 4 часа до кормления привело к летальному исходу лабораторных крыс.

Пример 3. Применение болюса 0,1 мг кристаллов перманганата калия из пшеничной муки высшего сорта на воде в пропорции 1 грамм муки к 1 мл воды за 4 часа до кормления приводило к макроскопическим заметным эрозивно-язвенным поражениям и полностью отразило картину поражения желудка при гастрите, вызванном воздействием химических веществ на слизистую оболочку желудка

По сравнению с прототипом заявленное решение обладает следующими положительными качествами:

1) Легкодоступность перманганата калия.

2) Более низкая стоимость компонентов для производства болюса.

3) Быстрое воздействие перманганата калия на слизистую оболочку желудка.

Изобретение относится к экспериментальной, ветеринарной медицине и заключается в моделировании химического гастрита у лабораторных животных. Неинбредным крысам однократно перорально вводят 0,1 мг кристаллов перманганата калия в болюсе, который состоит из пшеничной муки высшего сорта в смеси с водой в соотношении 1 грамм муки к 1 мл воды, за 4 часа до кормления. Изобретение обеспечивает 100% моделирование гастрита и полностью отражает картину поражения желудка при гастрите, вызванном воздействием химических веществ на слизистую оболочку желудка. 3 пр.

Способ моделирования химического гастрита у лабораторных крыс, включающий однократное пероральное введение неинбредным крысам 0,1 мг кристаллов перманганата калия, помещенного в болюс, который состоит из пшеничной муки высшего сорта в смеси с водой в соотношении 1 грамм муки к 1 мл воды, за 4 часа до кормления.