2-БРОМО-1-(4-БРОМОФЕНИЛ)ЭТИЛИДЕН-2-[6-МЕТИЛ-4-(ТИЕТАН-3-ИЛОКСИ)ПИРИМИДИН-2-ИЛТИО]АЦЕТОГИДРАЗИД, ОБЛАДАЮЩИЙ АНТИКОАГУЛЯЦИОННОЙ И АНТИАГРЕГАЦИОННОЙ АКТИВНОСТЬЮ Российский патент 2024 года по МПК C07D409/12 A61K31/506 A61P7/02 

Предлагаемое изобретение относится к органической химии и медицине, а именно к новому соединению – 2-бромо-1-(4- бромофенил)этилиден-2-[6-метил-4-(тиетан-3-илокси)пиримидин-2- илтио]ацетогидразид, обладающему антикоагуляционной и антиагрегационной активностью.

Наиболее близким аналогом является 2-[5-бром-2,4-дигидро-3-оксо- 2-(тиетанил-3)-1,2,4-триазолил-4]уксусная кислота, проявляющая антиагрегационную и антикоагуляционную активность [Синтез, антиагрегантная и антикоагулянтная активность солей тиетансодержащих 2-[5-бром-2,4-дигидро-3-оксо-1,2,4-триазолил-4]уксусных кислот / К. Г. Гуревич, А. Л. Ураков, Г. А. Розит [и др.] // Химико-фармацевтический журнал. – 2021. – Т. 55, № 5. – С. 3-8. – DOI 10.30906/0023-1134-2021-55-5- 3-8].

Задачей изобретения является расширение арсенала биологически активных веществ, обладающих антикоагуляционной и антиагрегационной активностью.

Технический результат – получение биологически активного вещества с высокой антикоагуляционной и антиагрегационной активностью.

Сущность изобретения: 2-бромо-1-(4-бромофенил)этилиден-2-[6- метил-4-(тиетан-3-илокси)пиримидин-2-илтио]ацетогидразид формулы (I):

обладающий антикоагуляционной и антиагрегационной активностью.

Указанное соединение и его свойства в литературе не описаны. Заявляемое соединение синтезируют взаимодействием гидразида 2-

[6-метил-4-(тиетан-3-илокси)пиримидин-2-илтио]уксусной кислоты с 2- бром-1-(4-бромфенил)этаноном.

Эксперименты в условиях in vitro выполнены на крови здоровых доноров-мужчин в возрасте 18-24 лет. Общее количество доноров составило 16 человек. Забор крови для исследования соединений в отношении системы гемостаза проводился из кубитальной вены с использованием систем вакуумного забора крови BD Vacutainer^® (Becton Dickinson and Company, США). В качестве стабилизатора венозной крови использовался 3,8% раствор цитрата натрия в соотношении 9:1. В работе использовалась центрифуга ОПН-3.02 (ОАО ТНК «ДАСТАН», Киргизия).

Результаты исследования обработаны с применением статистического пакета Statistica 10,0 (StatSoft Inc, США). Проверку на нормальность распределения фактических данных выполняли с помощью критерия Шапиро-Уилка. Выявлено, что вид распределения полученных данных отличается от нормального, поэтому при дальнейшей работе использовались непараметрические методы. Данные представлены в виде медианы, 25 и 75 процентилей. Дисперсионный анализ проводили с помощью критерия Краскела-Уоллиса. Критический уровень значимости р для статистических критериев принимали равным 0,05.

Пример 1.

Синтез заявляемого соединения.

0,25 г (0,0008 моль) гидразида 2-[6-метил-4-(тиетан-3- илокси)пиримидин-2-илтио]уксусной кислоты растворяют в 3 мл этилового спирта, добавляют 0,29 г (0,001 моль) 2-бром-1-(4- бромфенил)этанона, кипятят в течение часа. Охлаждают, осадок

отфильтровывают, промывают спиртом, сушат. Получают 0,21г (48%) продукта, очищают кристаллизацией из этанола. Тпл. = 155-156°C.

Спектр ЯМР 1Н (500 МГц, DMSO-d6), δ, м.д.: 2,07 (с, 3H, 6-CH₃); 3,39-3,41 [м, 2Н, S(CH)₂]; 3,51-3,54 [м, 2Н, S(CH)₂]; 4,00 (с, 2Н, SCH₂СО);

5,14-5,28 (м, 1Н, OCH_тиетан); 6,11 (c, 1H, 5-H); 10,57 (уш. с, 2Н, СОNH); 4,14

(м, CH₂-Br); 7,64 (м, СН^3,5_аром), 7,70 (м, СН^2,6_аром).

Спектр ЯМР 13С (75,5 МГц, DMSO-d6), δ, м.д.: 23,80 (6-СН₃); 41,2 (2-SCH₂CO); 34,60 (С²', С⁴'_тиетан); 81,6 (O-С³'_тиетан); 169,3 (С²); 168,6 (С⁴);

101,40 (С⁵); 166,2(С⁶); 171,00 (С=О); 155,6(N=CH); 59,00 (CH₂Br); 131,7

(СН^3,5_аром), 128,6 (СН^2,6_аром); 133,00 (С=С); 125,4 (СH⁴_аром-Br).

Элементный анализ.

Найдено, %: C 39.58; H 3.32; N 10.26; S 11.74– C₁₈H₁₈Br₂N₄O₂S₂.

Вычислено, %: C 39,54; H 3,30; N 10,27; S 11,78.

Заявляемое соединение представляет собой светло-желтый кристаллический порошок, нерастворимый в воде, спирте, растворимый в диметилформамиде, диметилсульфоксиде.

Пример 2.

Антиагрегационная активность.

Исследование влияния на агрегацию тромбоцитов проводили по методу Born (Born G.G.V.Nature (London).-1962 .-V.194.) на агрегометре

«АТ-02» (НПФ «Медтех», Россия). Определение антиагрегационной активности исследуемых веществ и препаратов сравнения проводили в конечной концентрации 10-3 моль/л. В качестве индукторов агрегации использовали аденозиндифосфат (АДФ) в концентрации 20 мкг/мл и коллаген в концентрации 5 мг/мл производства «Технология-Стандарт» (Россия). В качестве препарата сравнения использовали ацетилсалициловую кислоту («Ацетилсалициловая кислота», Фармацевтическая фабрика Шандонг Ксинхуа Фармасьютикал Ко., ЛТД, Китай).

В результате проведенных исследований на систему гемостаза в условиях in vitro (Таблица) установлено, что соединение I проявляет антиагрегационную активность на уровне ацетилсалициловой кислоты, а также в отличие от препарата сравнения, оказывает влияние на плазменный компонент системы гемостаза, проявляющееся увеличением показателя внутреннего пути свертывания крови – активированное парциальное тромбопластиновое время (АПТВ). Соединение I в указанной концентрации не влияло на показатели концентрации фибриногена и протромбинового времени (ПВ).

Таблица

Результаты исследования на систему гемостаза в условиях in

vitro

Соединение Латентный период, % к контролю Максимальная амплитуда, % к контролю Скорость агрегации, % к контролю Время достижения МА,
% к контролю АПТВ, % к контролю I +11,9
(8,9-14,7) -14,5
(12,6-16,3) -10,5
(8,1-13,7) +19,4
(17,2-20,1) +5,9
(4,3-7,4) Ацетилсалициловая
кислота -2,1
(1,1–2,6) -13,7
(10,8-16,4) -10,5
(7,6-12,3) +10,5
(8,7-13,4) - Гепарин натрия - - - - +20,3
(19,7-21,4)

Пример 3.

Антикоагуляционная активность.

Определение антикоагуляционной активности проводили клоттинговыми тестами на турбидиметрическом гемокоагулометре Solar CGL 2110 (ЗАО «СОЛАР», Россия). В качестве препарата сравнения использовали «Гепарин натрия» (ОАО «Синтез», Россия). Определение

антикоагуляционной активности исследуемых веществ и препарата сравнения проводили в концентрации 5×10^-4 г/мл. В работе использовались реактивы производства «Технология-Стандарт» (г. Барнаул, Россия).

Согласно результатам исследования, приведенным в таблице, соединение I демонстрирует гипокоагуляцию, повышая активированное парциальное тромбопластиновое время (АПТВ) на 5,9%.

Изобретение относится к органической химии и медицине, а именно к 2-бромо-1-(4-бромофенил)этилиден-2-[6-метил-4-(тиетан-3-илокси)пиримидин-2-илтио]ацетогидразиду формулы. Технический результат заключается в получении биологически активного вещества с высокой антиагрегационной и антикоагуляционной активностью. 2 з.п. ф-лы, 1 табл., 3 пр.

1. 2-Бромо-1-(4-бромофенил)этилиден-2-[6-метил-4-(тиетан-3-илокси)пиримидин-2-илтио]ацетогидразид формулы

.

2. Соединение по п. 1, проявляющее антиагрегационную активность.

3. Соединение по п. 1, проявляющее антикоагуляционную активность.