Фунгицид с ростостимулирующими свойствами для томатов Российский патент 2024 года по МПК A01N63/27 C12N1/20 A01P3/00 

Область техники

Изобретение относится к биотехнологии, микробиологии, а также к сельскому хозяйству и может быть использовано для повышения урожайности томатов. Известно микробиологическое средство защиты растений для повышения урожая и защиты их от болезней, коммерческое название препарата «Альбит». Препарат содержит гидролизат бактерий Pseudomonas aureofaciens ВКМ В-1973Д, гидролизат бактерий Bacillus megaterium, хвойный экстракт, хлорофилло-каротиновую пасту и раствор макро- и микроэлементов. Препарат является средством бактериальной природы для повышения урожая, защиты растений от болезней, повышения устойчивости растений к засухе и другим неблагоприятным факторам среды. Недостатками «Альбита» являются достаточно сложная и многостадийная технология получения препарата, а также многокомпонентный состав препарата[1].

Известно средство для повышения урожайности и защиты картофеля от фитопатогенных грибов, включающее суспензию штамма Bacillus atrophaeus ВКПМ В-11474 с титром вегетативных клеток и спор 1×10⁸ КОЕ/мл, полученную на бобовом отваре. Недостатком является, что препарат используют только для картофеля, авторы не раскрывают рецепт и технологию приготовления бобового отвара [2].

За прототип взят известный препарат - средство защиты растений Ризоплан - бактериальный фунгицид и одновременно биологический пестицид - биологический препарат, который эффективен против гельминтоспориозной гнили, мучнистой росы, бурой ржавчины, пятнистостей, фитофтороза картофеля, серой и плодовой гнилей на плодовых и ягодниках, черной ножки, слизистого и сосудистого бактериозов капусты, обладает биостимулирующим и фунгицидным действиями. Ризоплан готовится на основе не образующей спор грамотрицательной бактерии рода Pseudomonas. Представляет собой жидкую культуру Pseodomonas fluorescens, с титром не ниже 5×10⁹ спор/мл. Препарат не токсичен по отношению к теплокровным животным и человеку. Различные производители указывают разные сроки хранения: срок хранения торфяной формы - 6 месяцев, жидкой суспензии - 12 недель при температуре от 4 до 30°С, ил - 30 дней. Рецептура препарата производителями не раскрывается. Недостатком данного препарата являются не большие сроки хранения и не высокая ростостимулирующая активность. В результате проведенных нами исследования выявлено, что во всех препаратах, где заявлен срок годности больше 30 дней, присутствуют посторонние микроорганизмы, которые, по-видимому, и обеспечивают эффективность препарата, после гибели Pseodomonas fluorescens. Однако производители в составе препарата их не указывают.

Техническая задача - разработать фунгицид с ростостимулирующими свойствами на основе Pseodomonas fluorescens для томатов.

Технический результат - защита сельскохозяйственных растений от фитопатогенных грибов и повышение урожайности.

Он достигается тем, что предлагаемое жидкое средство, включающее Pseodomonas fluorescens (титр 1×10⁹ КОЕ/мл), полученный на питательной среде следующего состава: меласса 10 г, фосфат калия 2,5 г, сульфат магния 1 г, сульфат железа (III) 1 г, нитрат аммония 1 г, горох шлифованный, предварительно обработанный 80 г, мука мясокостная - 5 г, глицин - 1 г, хвощ полевой (корень) 10 г, лопух большой (корень) 10 г, вода дистиллированная до 1 л. Предлагается в качестве средства для защиты растений от фитопатогенных грибов и повышения урожайности томатов.

Жидкая форма средства имеет ряд преимуществ по сравнению с сухой формой: отсутствие значительных энергетических затрат, упрощение технологии получения, сохранение биологической активности действующего начала в процессе приготовления средства, простота применения.

Основу препарата составляет универсальная питательная среда следующего состава: меласса 10 г, фосфат калия 2,5 г, сульфат магния 1 г, сульфат железа (II) 1 г, нитрат аммония 1 г, горох шлифованный, предварительно обработанный (80 г гороха сухого лущеного отваривается в 1 л воды на медленном огне в течение 1 часа, затем фильтруется через три слоя марли, осадок удаляют), дистиллированная вода до 1 л.

Исследование фунгицидной активности проводилось натурным методом с использование фитопатогена p.Fusarium. Почва, зараженная фитопатогеном, обрабатывалась суспензией микроорганизмов. На 3 и 10 сутки проводилась оценка состояния почвы (Фиг. 1).

Для глубинного культивирования микроорганизмов применяли универсальную питательную среду следующего состава: меласса 10 г, фосфат калия 2,5 г, сульфат магния 1 г, сульфат железа (II) 1 г, нитрат аммония 1 г, горох шлифованный, предварительно обработанный 80 г, дистиллированная вода до 1 л. Значение рН выдерживали в пределах 7,5 - 7,6. Время стерилизации составляло 30 мин при 1 Bar. После автоклавирования питательную смесь остужали до комнатной температуры и добавляли растительный экстракт (сухой) или измельченные части растений (перечень растительного сырья представлен в таблице 1). Количество растительного сухого сырья - 10 г на 1 л среды. Посев микроорганизмов осуществляли, внося 1 мл суспензии микроорганизмов в колбу на 250 мл с готовой средой. Культивирование микроорганизмов производилось 24 часа при температуре 28°С с принудительной аэрацией со скоростью вращения 125 об/мин. Далее проводили серию стандартных десятикратных разведений, осуществляли посев на питательный агар и термостатировали 24 часа при температуре 28°С. Опыты воспроизводили семь раз, по три параллельных пробы в каждой серии. Были выявлены и выбраны для приготовления питательной среды растительные экстракты, оказывающие стимулирующее действие на численность микроорганизмов.

Затем эксперимент воспроизводили с изменением последовательности внесения растительного сырья, то есть не после, а до автоклавирования. Был выбран оптимальный способ внесения растительного сырья.

Для изучения влияния химических, растительных веществ и веществ животного происхождения на рост Pseudomonas fluorescens применяли универсальную питательную среду (состав показан выше) с добавлением экстрактов лопуха и хвоща, по 10 г. Вещества (глицин, глюкоза и пр.) добавляли в количестве 5 г на 1 л каждого экстракта до стерилизации в автоклаве. Значение рН выдерживали в пределах 7,5 - 7,6. Время стерилизации составляло 30 мин. при давлении 1,0 Bar. После автоклавирования питательную среду остужали до комнатной температуры и фильтровали. Культивирование микроорганизмов производилось при температуре - 28±2°С с принудительной аэрацией со скоростью вращения 125 об/мин в шейкере-инкубаторе "Innova 44" в течении 20-24 часов. Опыты воспроизводили трижды. Численность микроорганизмов оценивали методом стандартных десятикратных разведений с высевом в стерильных условиях в чашки Петри на агаризованную среду вышеуказанного состава с соответствующими добавками.

Таким образом, в ходе экспериментов был получен следующий компонентный состав препарата: Pseodomonas fluorescens (титр 1×10⁹ КОЕ/мл), полученный на питательной среде следующего состава: меласса 10 г, фосфат калия 2,5 г, сульфат магния 1 г, сульфат железа (II) 1 г, нитрат аммония 1, горох шлифованный, предварительно обработанный 80 г, мука мясокостная - 5 г, глицин - 1 г, хвощ полевой (корень) 10 г, лопух большой (корень) 10 г, вода дистиллированная до 1 л.

Затем были проведены испытания на растениях томатов.

Испытания проводились на растениях семейства пасленовых: томатах сортов «Санька» и «Красная россыпь», по 50 растений каждого сорта. Растения высаживались в лотки для рассады. Перед посадкой семян почва обрабатывалась препаратом в количестве 200 мл на 1 м². В контрольной группе аналогичных растений почва не подвергалась обработке. Затем растения были высажены в грунт. Производилась оценка растений на заражение фитопатогенами, высоту куста, срок созревания плодов, урожайность, количество плодов в кисти и масса плода.

Полученные результаты подтверждены примерами.

Таким образом, препарат, состоит из следующих компонентов: включающее штамм Pseodomonas fluorescens (титр 1×10⁹ КОЕ/мл), полученный на питательной среде следующего состава: меласса 10 г, фосфат калия 2,5 г, сульфат магния 1 г, сульфат железа (II) 1 г, нитрат аммония 1, горох шлифованный, предварительно обработанный 80 г, мука мясокостная 5 г, глицин 5 г, хвощ полевой (корень) 10 г, лопух большой (корень) 10 г, вода дистиллированная до 1 л. Количество микроорганизмов Pseudomonas fluorescens 5×10⁹ КОЕ/мл, которое сохраняется на протяжении двух месяцев, и еще в течение двух месяцев снижается на порядок. Хранить при температуре +4-8°С. Используется для обработки почвы перед посадкой семян, обработки корней рассады и почвы перед высадкой в грунт.

Список литературы

1. Злотников А.К., Злотникова И.К., Санцевич Н.И., Мельников В.А. Препарат для защиты урожая растений и защиты их от болезней. Патент РФ № 2147181, 2000.

2. Сопрунова О.Б., Баубекова Д.Г., Байрамбеков Ш.Б., Полякова Е.В., Сопрунова В.Е. Средство для повышения урожайности и защиты растений пасленовых от фитопатогенных грибов. Патент RU 2655848 C1.

3. Электронный ресурс: Ризоплан - биопрепарат и фунгицид (tomsk.ru). Дата обращения 10.12.22.

Изобретение относится к сельскому хозяйству. Фунгицид с ростостимулирующими свойствами для томатов включает суспензию Pseodomonas fluorescens с титром вегетативных клеток 1×10⁹ КОЕ/мл, полученную на питательной среде следующего состава: меласса 10 г, фосфат калия 2,5 г, сульфат магния 1 г, сульфат железа (II) 1 г, нитрат аммония 1 г, горох шлифованный, предварительно обработанный, 80 г, мука мясокостная 5 г, глицин 1 г, хвощ полевой корень 10 г, лопух большой корень 10 г, вода дистиллированная до 1 л. Изобретение позволяет защитить сельскохозяйственные растения от фитопатогенных грибов и повысить урожайность. 1 ил., 1 табл.

Фунгицид с ростостимулирующими свойствами для томатов, включающий суспензию Pseodomonas fluorescens с титром вегетативных клеток 1×10⁹ КОЕ/мл, полученную на питательной среде следующего состава: меласса 10 г, фосфат калия 2,5 г, сульфат магния 1 г, сульфат железа (II) 1 г, нитрат аммония 1 г, горох шлифованный, предварительно обработанный, 80 г, мука мясокостная 5 г, глицин 1 г, хвощ полевой корень 10 г, лопух большой корень 10 г, вода дистиллированная до 1 л.