Способ получения N,N-диэтил-3-бензоил-4-гидрокси-1-(2-гидроксифенил)-2-(1H-индол-3-ил)-5-оксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-2-карбоксамида, обладающего противомикробной активностью Российский патент 2024 года по МПК C07D207/38 C07D209/04 C07D227/08 A61K31/404 A61P31/04 

Изобретение относится к области органической химии, а именно к способам получения новых индивидуальных соединений класса 3-гидрокси-Ш-пиррол-2(5Я)-она, которые могут быть использованы в качестве исходных продуктов для синтеза новых гетероциклических систем и в фармакологии.

Известны структурные аналоги заявленных соединений, метил 3-бензоил-4-гидрокси-1-(2-гидроксифенил)-2-(1H-индол-3-ил)-5-оксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-2-карбоксилат (Пат. 2806041 РФ, МПК C 07 D 209/04, C 07 D 227/10, А 61 Р 31/04, А 61 К 31/404. Способ получения метил 3-бензоил-4-гидрокси-1-(2-гидроксифенил)-2-(1H-индол-3-ил)-5-оксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-2-карбоксилата, обладающего противомикробной активностью: №2023106454: заявл. 20.03.2023: опубл. 25.10.2023 / А.Н. Масливец, СЮ. Баландина, А.И. Кобелев, Д.А. Караваев; заявители и патентообладатели ФГБОУ ВО «Пермский государственный национальный исследовательский университет» (RU). - 6 с). Синтез структурных аналогов осуществляется по следующей схеме:

К недостаткам данного способа относится сложность получения N,N-диэтил-3-бензоил-4-гидрокси-1-(2-гидроксифенил)-2-(1H-индол-3-ил)-5-оксо-2,5-дигидро-1H -пиррол-2-карбоксамида.

Задачей изобретения является разработка простого способа синтеза неописанного в литературе N,N-диэтил-3-бензоил-4-гидрокси-1-(2- гидроксифенил)-2-(1H -индол-3-ил)-5-оксо-2,5-дигидро-1H -пиррол-2-карбоксамида, обладающего противомикробной активностью.

Технический результат - разработан способ синтеза N,N-диэтил-3-бензоил-4-гидрокси-1-(2-гидроксифенил)-2-(1H -индол-3-ил)-5-оксо-2,5-дигидро-1H -пиррол-2-карбоксамида, выявлена ранее не известная противомикробная активность.

Технический результат достигается получением соединения путем взаимодействия 3-бензоил-2-гидрокси-3а-(1H -индол-3-ил)- 1H -пирроло[2,1-с][1,4]бензоксазин-1,4(3аH)-диона I с диэтиламином, с последующим выделением целевого продукта по следующей схеме:

Процесс ведут при комнатной температуре, при перемешивании, а в качестве растворителя используют безводный диоксан.

Из патентной и технической литературы не были выявлены способы получения N,N-диэтил-3-бензоил-4-гидрокси-1-(2-гидроксифенил)-2-(1H-индол-3-ил)-5-оксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-2-карбоксамида, имеющие сходные признаки с заявленным способом, а именно, не использовались исходные продукты, растворители, в которых проходит реакция, на основании чего можно сделать вывод о соответствии заявленного технического решения критерию «новизна» и «изобретательский уровень».

Изобретение иллюстрируется следующим примером.

Пример 1. N,N-диэтил-3-бензоил-4-гидрокси-1-(2-гидроксифенил)-2-(1H -индол-3-ил)-5-оксо-2,5-дигидро-1H -пиррол-2-карбоксамид.

К раствору 0,34 ммоль 3-бензоил-2-гидрокси-За-(1H -индол-3-ил)- 1H -пирроло[2,1-с][1,4]бензоксазин-1,2,4-триона в 1,3 мл безводного диоксана, добавили 35 мкл этилендиамина, выдерживали при комнатной температуре и постоянном перемешивании, спустя 4 часов выпавший белый осадок отфильтровывали. Выход 74%, т.пл. 196-197°С (1,4-диоксан). Соединение (II) C₃₀H₂₇N₃O₅.

Найдено, %: С, 70.71; Н, 5.34; N, 8.25; О, 15.70 Вычислено, %: С, 70.70; Н, 5.37; N, 8.24; О, 15.69

Соединение (II) - белое кристаллическое вещество, плавящееся с разложением, легкорастворимое в ДМСО и ДМФА, растворимое в горячих водных смесях, 1,2 дихлорэтане, 1,4-диоксане, труднорастворимое в ароматических углеводородах, четыреххлористом углероде, этилацетате, нерастворимое в ацетоне, хлороформе, спиртах и алканах.

В ИК спектре соединения (II), снятого в виде пасты в вазелиновом масле, присутствуют полосы валентных колебаний групп ОН и NH при 3242 и 3437 см^-1 соответственно, карбонильных групп С=O, при 1694, 1636 см^-1.

В спектре ЯМР ¹Н соединения (II), снятом в растворе ДМСО-d₆, кроме сигналов протонов алифатических заместителей, ароматических колец и связанных с ними групп, присутствуют уширенный синглет фенольной и енольной ОН-группы при 8.37 м.д., дублет аминогруппы индольного фрагмента 10.94 (J2,4 Гц) м.д.

Пример 2. Фармакологическое исследование метил 3-бензоил-4-гидрокси-1-(2-гидроксифенил)-2-(1H -индол-3-ил)-5-оксо-2,5-дигидро-1H -пиррол-2-карбоксилата (II) на наличие противомикробной активности.

Для исследований использовали общепринятый метод двукратных серийных разведений в жидкой питательной среде микрометодом [Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ - М.: И-во Медицина, 2005]. Готовили исходные разведения микроорганизмов в физиологическом растворе из суточной агаровой культуры по оптическому стандарту мутности (ОСО) на 5 ME с использованием денситометра. После ряда разведений конечная концентрация клеток в опыте составляла 2,5×10⁵ клеток/мл.

Противомикробные свойства химических веществ изучали на 3-х коллекционных условно-патогенных штаммах микроорганизмов: Staphylococcus aureus (АТСС 25923), Escherichia coli (АТСС 25922), Candida albicans (РКПГY 1353/1277).

В лунках стерильного 96 луночного плоскодонного микропланшета готовили два параллельных ряда двукратных серийных разведений химических соединений в бульоне РПБ, Сабуро. В каждой лунке содержалось 150 мкл определенной концентрации испытуемого вещества и 150 мкл инокулята культуры. В последних рядах содержалась питательная среда и культура в равных объемах (контроль). Максимально испытанная концентрация соответствовала 1000,0 мкг/мл, минимальная - 1,0 мкг/мл. Микропланшет помещали в термостат спектрофотометра Epoch и замеряли оптическую плотности (ОП) при длине волны 540 нм. Через 24 часа и 7 суток вновь регистрировали ОП культуральной жидкости.

Результаты оценивали с помощью программного обеспечения Gen 5 спектрофотометра для микропланшет Epoch. Последняя лунка ряда с задержкой роста и показателями ОП равной оптической плотности контрольной лунки соответствует минимальной подавляющей концентрацией соединения.

Анализ полученных данных показал:

- соединение II подавляя рост культур S. aureus в концентрации 250 мкг/мл,

гибель наступает от воздействия концентрации в 500 мкг/мл.

Таблица. Результаты исследования противомикробных свойств соединения (II).

Изобретение относится к способу получения нового соединения N,N-диэтил-3-бензоил-4-гидрокси-1-(2-гидроксифенил)-2-(1H-индол-3-ил)-5-оксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-2-карбоксамида формулы II путем выдерживания 3-бензоил-2-гидрокси-3a-(1H-индол-3-ил)-1H-пирроло[2,1-c][1,4]бензоксазин-1,4(3aH)-диона I с диэтиламином при комнатной температуре по следующей схеме:

Технический результат: разработан новый способ получения соединения N,N-диэтил-3-бензоил-4-гидрокси-1-(2-гидроксифенил)-2-(1H-индол-3-ил)-5-оксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-2-карбоксамид, обладающего противомикробной активностью. 1 табл., 2 пр.

Способ получения N,N-диэтил-3-бензоил-4-гидрокси-1-(2-гидроксифенил)-2-(1H-индол-3-ил)-5-оксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-2-карбоксамида формулы II путем выдерживания 3-бензоил-2-гидрокси-3a-(1H-индол-3-ил)-1H-пирроло[2,1-c][1,4]бензоксазин-1,4(3aH)-диона I с диэтиламином при комнатной температуре по следующей схеме: