2-((6-(4-БРОМФЕНИЛ)-3-ОКСО-2,3-ДИГИДРОПИРИДАЗИН-4-ИЛ)АМИНО)-4,5,6,7-ТЕТРАГИДРОБЕНЗО[B]ТИОФЕН-3-КАРБОНИТРИЛ, ОБЛАДАЮЩИЙ ПРОТИВОМИКРОБНОЙ АКТИВНОСТЬЮ ПО ОТНОШЕНИЮ К CANDIDA ALBICANS Российский патент 2024 года по МПК C07D409/12 A61K31/501 A61P31/10 

Изобретение относится к области органической химии, к новым биологически активным веществам класса замещенных пиридазин-3(2H/)-онов, а именно к 2-((6-(4-бромфенил)-3-оксо-2,3-дигидропиридазин-4-ил)амино)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-3-карбонитрилу формулы:

который обладает противомикробной активностью, что позволяет предположить его использование в медицине в качестве лекарственного средства с противогрибковыми свойствами и низкой токсичностью.

Аналогом по структуре заявляемому соединению является этиловый эфир 2-[(3-оксо-6-фенил-2-этил-2,3-дигидропиридазин-4-ил)амино]-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-3-карбоновой кислоты [S.A. Shipilovskikh, А.Е. Rubtsov, Russian Journal of Organic Chemistry, 2014, Vol. 50, No. 12, pp. 1853-1855, doi: 10.1134/S1070428014120288] формулы:

Эталоном сравнения биологической активности был выбран тербинафин формулы:

который широко применяется в лечебной практике и является аналогом по действию [Машковский М.Д. Лекарственные средства. - 16-е изд., перераб., испр. и доп. - М.: Новая волна, 2012. - с. 925].

Задачей изобретения является расширение арсенала противогрибковых средств по отношению к кандидозу, в частности разработка средства, обладающего выраженной противогрибковой активностью по отношению к Candida albicans и низкой токсичностью.

Поставленная задача достигается получением 2-((6-(4-бромфенил)-3-оксо-2,3-дигидропиридазин-4-ил)амино)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-3-карбонитрила, который обладает противогрибковой активностью.

Заявляемое соединение 1 синтезируют взаимодействием 2-((5-(4-бромфенил)-2-оксофуран-3(2H)-илиден)амино)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-3-карбонитрила с гидразином. Реакция протекает в диоксане при перемешивании и температуре 60°С в течение 1 часа, с последующим удалением растворителя и выделением целевого продукта известными методами по схеме:

Получение соединения 1: к 412 мг (0,001 моль) 2-((5-(4-бромфенил)-2-оксофуран-3(2H)-илиден)амино)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-3-карбонитрила добавили 5 мл диоксана, 60 мг (0,0012 моль) гидразина гидрата и перемешивали в течение 1 ч при 60°С. Раствор охлаждали до 0°С, образовавшийся осадок отфильтровывали и перекристаллизовывали из этанола.

Выход 320 мг (75%), желтые кристаллы, т. пл. 212-214°С (этанол). Спектр ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆), δ, м.д.: 1.81 м (4Н, 2СН₂), 2.59 м (2Н, СН₂), 2.68 м (2Н, СН₂), 6.99 с (1H, СН), 7.65 м (2Н, Н_аром), 7.74 м (2Н, Н_аром), 9.49 уш. с. (1H, NH), 13.23 уш. с. (1Н, NH). Спектр ¹³С ЯМР (ДМСО-d₆), δ, м.д.: 22.0, 23.1, 24.4, 24.5, 101.6, 114.3, 122.9, 127.8, 128.6, 131.5, 132.2, 133.8, 135.6, 141.1, 145.1, 149.0, 156.4. Найдено, %: С 53.42; Н 3.55; N 13.13; S 7.52. C₁₉Hi₅BrN₄OS. Рассчитано, %: С 53.40; Н 3.54; N 13.11; S 7.50.

Полученное соединение 1 представляет собой оранжевое кристаллическое вещество, растворимое в ДМСО, ацетоне, не растворимое в воде и гексане.

Пример 2. Острую токсичность (ЛД₅₀, мг/мл) соединения 1 определяли по методу Г.Н. Першина [Першин Г.Н. Методы экспериментальной химиотерапии // М., С. 100, 109-117 (1971)]. Соединение 1 вводили внутрибрюшинно белым мышам массой 16-18 г в виде взвеси в 2% крахмальной слизи и наблюдали за поведением и гибелью животных в течение 10 суток. Для исследуемого соединения 1 ЛД₅₀ составляет >1500 мг/кг.

Согласно классификации токсичности препаратов соединение 1 относится к V классу практически нетоксичных препаратов [Измеров Н.Ф., Саноцкий И.В., Сидоров К.К. Параметры токсикометрии промышленных ядов при однократном воздействии: Справочник. М., 1977. - с. 196].

Пример 3. Для характеристики противогрибковой активности соединений использовали стандартные параметры: минимальная подавляющая концентрация (МПК), которую определяли модифицированным методом двукратных серийных разведений [МУК 4.2.1890-04 Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам] и минимальная бактерицидная концентрация (МБК) [Медицинские лабораторные технологии: Руководство по клинической лабораторной диагностике, п/р Каприщенко, 2013, Т 2, стр. 407]. Тесты проводили с использованием культуры модельного микроорганизма Candida albicans АТСС 10231 (Всероссийская коллекция патогенных микроорганизмов) на питательной среде Мюллера-Хинтона с добавлением 0,4% глюкозы в 96-луночных полистироловых планшетах. Концентрация микроорганизмов в лунках перед началом культивирования составляла 5*10⁵ КОЕ/мл. Культивирование проводили при 37°С без перемешивания. Определение МПК и высевы для определения МБК производили через 24 ч. Исследуемое соединение растворяли в диметилсульфоксиде (ДМСО) в концентрации 20 мг/мл до полного растворения. Максимальная действующая концентрация составляла 1000 мкг/мл. Эффект сравнивали с тербинафином.

Результаты испытаний представлены в таблице:

Как видно из таблицы, заявляемое соединение 1 обладает выраженной противогрибковой активностью на уровне препарата сравнения (тербинафин) по отношению к Candida albicans АТСС 10231, а также показывает низкую токсичность. Таким образом, 2-((6-(4-бромфенил)-3-оксо-2,3-дигидропиридазин-4-ил)амино)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-3-карбонитрил 1 проявляет выраженную активность по сравнению с эталоном сравнения, что делает возможным его использование для создания новых лекарственных средств целенаправленного действия.

Изобретение относится к области органической химии, к новым биологически активным веществам класса замещенных пиридазин-3(2H)-онов. Предложен 2-((6-(4-бромфенил)-3-оксо-2,3-дигидропиридазин-4-ил)амино)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-3-карбонитрил, обладающий противомикробной активностью и низкой токсичностью. Технический результат: получено соединение с высоким выходом, обладающее выраженной противомикробной активностью, а также низкой токсичностью. 1 табл., 3 пр.

2-((6-(4-бромфенил)-3-оксо-2,3-дигидропиридазин-4-ил)амино)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-3-карбонитрил формулы

,

обладающий противомикробной активностью.