ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ
Настоящее изобретение относится к выделенным антителам к рецептору IL4 (IL4R), например, связывающимся с IL4R собаки или кошки и уменьшающим связывание IL4 или IL13, а также к способам их применения, например, для лечения IL4-индуцированных и/или IL13-индуцированных состояний или ослабления сигнальной функции IL4 или IL13 в клетках, например, домашних животных, таких как представители семейств псовых и кошачьих.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
[0001] Интерлейкин 4 (IL4) представляет собой цитокин, который индуцирует дифференцировку наивных Т-хелперных клеток в клетки Th2. IL4 также может стимулировать пролиферацию активированных B-клеток и T-клеток и индуцировать переключение класса B-клеток на IgE. IL13 оказывает такое же действие на иммунные клетки, что и IL4. Оба цитокина связаны с аллергией.
[0002] Рецептор IL4 известен как IL4R-альфа или IL4R. IL4R может спариваться с общим рецептором гамма-цепи и специфически связываться с IL4. IL4R также может спариваться с IL13Ra1, и вместе они могут связываться с IL4 или IL13. Таким образом, блокирование участков связывания на IL4R может потенциально уменьшить связывание IL4 и/или IL13 и снизить влияние этих двух цитокинов на передачу сигналов.
[0003] Животные-компаньоны, такие как кошки, собаки и лошади, страдают многими кожными заболеваниями, аналогичными кожным заболеваниям человека, включая атопический дерматит и аллергические состояния. Следовательно, остается потребность в способах и соединениях, которые можно использовать специально для блокирования IL4 и/или IL13 у животных-компаньонов для лечения состояний, индуцированных IL4 и/или IL13, и для уменьшения передачи сигналов IL4/IL13.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Вариант осуществления 1. Выделенное антитело, которое связывается с собачьим IL4R или кошачьим IL4R, где указанное антитело связывается с эпитопом, содержащим аминокислотную последовательность LX10FMGSENX11T (SEQ ID NO:85), где X10 представляет собой D или N, и X11 представляет собой H или R.
Вариант осуществления 2. Выделенное антитело, которое связывается с собачьим IL4R или кошачьим IL4R, где указанное антитело связывается с эпитопом, содержащим аминокислотную последовательность RLSYQLX10FMGSENX11TCVPEN (SEQ ID NO:86), где X10 представляет собой D или N, и X11 представляет собой H или R.
Вариант осуществления 3. Выделенное антитело по варианту осуществления 2, которое связывается с эпитопом, содержащим аминокислотную последовательность LX10FMGSENX11T (SEQ ID NO:85), где X10 представляет собой D или N, и X11 представляет собой H или R.
Вариант осуществления 4. Выделенное антитело по любому из предшествующих вариантов осуществления, которое связывается с эпитопом, содержащим аминокислотную последовательность SEQ ID NO:88 или SEQ ID NO:91.
Вариант осуществления 5. Выделенное антитело по любому из предшествующих вариантов осуществления, которое связывается с эпитопом, содержащим аминокислотную последовательность SEQ ID NO:89 или SEQ ID NO:92.
Вариант осуществления 6. Выделенное антитело по любому из предшествующих вариантов осуществления, которое связывается с эпитопом, содержащим аминокислотную последовательность SMX12X13DDX14VEADVYQLX15LWAGX16Q (SEQ ID NO:87), где X12 представляет собой P или L, X13 представляет собой I или M, X14 представляет собой это A или F, X15 представляет собой D или H, и X16 представляет собой Q или T.
Вариант осуществления 7. Выделенное антитело, которое связывается с собачьим IL4R или кошачьим IL4R, где указанное антитело связывается с эпитопом, содержащим аминокислотную последовательность SMX12X13DDX14VEADVYQLX15LWAGX16Q (SEQ ID NO:87), где X12 представляет собой P или L, X13 представляет собой I или M, X14 представляет собой A или F, X15 представляет собой D или H, и X16 представляет собой Q или T.
Вариант осуществления 8. Выделенное антитело по любому из предшествующих вариантов осуществления, которое связывается с эпитопом, содержащим аминокислотную последовательность SEQ ID NO:90 или SEQ ID NO:93.
Вариант осуществления 9. Выделенное антитело по любому из предшествующих вариантов осуществления, которое связывается с собачьим IL4R или кошачьим IL4R с константой диссоциации (Kd) менее 5×10-6 М, менее 1×10-6 М, менее 5×10-7 М, менее 1×10-7 М, менее 5×10-8 М, менее 1×10-8 М, менее 5×10-9 М, менее 1×10-9 М, менее 5×10-10 М, менее 1×10-10 М, менее 5×10-11 М, менее 1×10-11 М, менее 5×10-12 М или менее 1×10-12 М, согласно данным биослойной интерферометрии.
Вариант осуществления 10. Антитело по любому из предшествующих вариантов осуществления, которое связывается с собачьим IL4R или кошачьим IL4R, согласно данным иммуноблот-анализа или биослойной интерферометрии.
Вариант осуществления 11. Выделенное антитело по любому из предшествующих вариантов осуществления, которое уменьшает связывание собачьего и/или кошачьего полипептида IL4 и/или собачьего и/или кошачьего полипептида IL-13 с собачьим IL4R и/или кошачьим IL4R, согласно данным биослойной интерферометрии.
Вариант осуществления 12. Выделенное антитело по любому из предшествующих вариантов осуществления, конкурирующее с моноклональным антителом клона B или клона I за связывание с собачьим IL4R или кошачьим IL4R.
Вариант осуществления 13. Выделенное антитело по любому из предшествующих вариантов осуществления, представляющее собой моноклональное антитело.
Вариант осуществления 14. Выделенное антитело по любому из предшествующих вариантов осуществления, представляющее собой собачье, канинизированное, кошачье, фелинизированное или химерное антитело.
Вариант осуществления 15. Выделенное антитело по любому из предшествующих вариантов осуществления, представляющее собой химерное антитело, содержащее одну или более мышиных каркасных областей вариабельной области тяжелой цепи или одну или более мышиных каркасных областей вариабельной области легкой цепи.
Вариант осуществления 16. Выделенное антитело по любому из предшествующих вариантов осуществления, содержащее тяжелую цепь, содержащую:
а) последовательность CDR-H1, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью GYTFTSYVMH (SEQ ID NO:1);
b) последовательность CDR-H2, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью YINPX1NDGTFYNGX2X3X4G (SEQ ID NO:2), где X1 представляет собой K или A, X2 представляет собой K или A, X3 представляет собой F или V, и X4 представляет собой K или Q, или YINPX1NDGT (SEQ ID NO:268), где X1 представляет собой K или A; и
c) последовательность CDR-H3, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью FX5YGX6AY (SEQ ID NO:3), где X5 представляет собой N или Y, и X6 представляет собой I или F.
Вариант осуществления 17. Выделенное антитело по любому из предшествующих вариантов осуществления, содержащее тяжелую цепь, содержащую:
а) последовательность CDR-H1, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:1;
b) последовательность CDR-H2, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:8, SEQ ID NO:269, SEQ ID NO:30, SEQ ID NO:271 или SEQ ID NO:273; и
c) последовательность CDR-H3, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:9 или SEQ ID NO:31.
Вариант осуществления 18. Выделенное антитело по любому из предшествующих вариантов осуществления, содержащее тяжелую цепь, содержащую:
а) CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:1;
b) CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:8, SEQ ID NO:269, SEQ ID NO:30, SEQ ID NO:271 или SEQ ID NO:272; и
c) CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:9 или SEQ ID NO:31.
Вариант осуществления 19. Выделенное антитело по любому из предшествующих вариантов осуществления, содержащее легкую цепь, содержащую:
a) последовательность CDR-L1, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью RASQEISGYLS (SEQ ID NO:4);
b) последовательность CDR-L2, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью AASX7X8DX9 (SEQ ID NO:5), где X7 представляет собой T или N, X8 представляет собой R или L, и X9 представляет собой S или T; и
c) последовательность CDR-L3, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью VQYASYPWT (SEQ ID NO:6).
Вариант осуществления 20. Выделенное антитело по любому из предшествующих вариантов осуществления, содержащее легкую цепь, содержащую:
а) последовательность CDR-L1, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:4;
b) последовательность CDR-L2, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:15 или SEQ ID NO:37; и
c) последовательность CDR-L3, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:6.
Вариант осуществления 21. Выделенное антитело по любому из предшествующих вариантов осуществления, содержащее легкую цепь, содержащую:
а) CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:4;
b) CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:15 или SEQ ID NO:37; и
c) CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:6.
Вариант осуществления 22. Антитело по любому из вариантов осуществления 16-21, дополнительно содержащее одно или более из: (а) последовательности каркасной области 1 вариабельной области тяжелой цепи (HC FR1) SEQ ID NO:10 или SEQ ID NO:32; (b) последовательности HC-FR2 SEQ ID NO:11 или SEQ ID NO:33; (c) последовательности HC-FR3 SEQ ID NO:12, SEQ ID NO:270, SEQ ID NO:34 или SEQ ID NO:273; (d) последовательности HC-FR4 SEQ ID NO:13 или SEQ ID NO:35; (e) последовательности каркасной области 1 вариабельной области легкой цепи (LC-FR1) SEQ ID NO:17 или SEQ ID NO:39; (f) последовательности LC FR2 SEQ ID NO:18 или SEQ ID NO:40; (g) последовательности LC FR3 SEQ ID NO:19 или SEQ ID NO:41; или (h) последовательности LC-FR4 SEQ ID NO:20 или SEQ ID NO:42.
Вариант осуществления 23. Антитело по любому из предшествующих вариантов осуществления, содержащее:
а. (i) последовательность вариабельной области тяжелой цепи, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:21 или SEQ ID NO:43; (ii) последовательность вариабельной области легкой цепи, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:22 или SEQ ID NO:44; или (iii) последовательность вариабельной области тяжелой цепи, аналогичную (i), и последовательность вариабельной области легкой цепи, аналогичную (ii); или
b. (i) последовательность вариабельной области тяжелой цепи, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:59, SEQ ID NO:60, SEQ ID NO:63, SEQ ID NO:64 или SEQ ID NO:274; (ii) последовательность вариабельной области легкой цепи, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:61, SEQ ID NO:62, SEQ ID NO:65, SEQ ID NO:66 или SEQ ID NO:275; или (iii) последовательность вариабельной области тяжелой цепи, аналогичную (i), и последовательность вариабельной области легкой цепи, аналогичную (ii); или
c. (i) последовательность вариабельной области тяжелой цепи, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:67 или SEQ ID NO:69; (ii) последовательность вариабельной области легкой цепи, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:68 или SEQ ID NO:70; или (iii) последовательность вариабельной области тяжелой цепи, аналогичную (i), и последовательность вариабельной области легкой цепи, аналогичную (ii).
Вариант осуществления 24. Антитело по любому из предшествующих вариантов осуществления, содержащее последовательность вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:21, SEQ ID NO:43, SEQ ID NO:59, SEQ ID NO:60, SEQ ID NO:63, SEQ ID NO:64, SEQ ID NO:274, SEQ ID NO:67 или SEQ ID NO:69.
Вариант осуществления 25. Антитело по любому из предшествующих вариантов осуществления, содержащее последовательность вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:22, SEQ ID NO:44, SEQ ID NO:61, SEQ ID NO:62, SEQ ID NO:65, SEQ ID NO:66, SEQ ID NO:275, SEQ ID NO:68 или SEQ ID NO:70.
Вариант осуществления 26. Антитело по любому из предшествующих вариантов осуществления, содержащее:
а) последовательность вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:21 или SEQ ID NO:43, и последовательность вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:22 или SEQ ID NO:44;
b) последовательность вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:59, SEQ ID NO:60, SEQ ID NO:63, SEQ ID NO:64 или SEQ ID NO:274, и последовательность вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотная последовательность SEQ ID NO:61, SEQ ID NO:62, SEQ ID NO:65, SEQ ID NO:66, SEQ ID NO:275; или
c) последовательность вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:67 или SEQ ID NO:69, и последовательность вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:68 или SEQ ID NO:70.
Вариант осуществления 27. Выделенное антитело, которое связывается с собачьим IL4R или кошачьим IL4R, где указанное антитело связывается с эпитопом, содержащим аминокислотную последовательность SEQ ID NO:354.
Вариант осуществления 28. Выделенное антитело по варианту осуществления 27, которое связывается с собачьим IL4R или кошачьим IL4R с константой диссоциации (Kd) менее 5×10-6 М, менее 1×10-6 М, менее 5×10-7 М, менее 1×10-7 М, менее 5×10-8 М, менее 1×10-8 М, менее 5×10-9 М, менее 1×10-9 М, менее 5×10-10 М, менее 1×10-10 М, менее 5×10-11 М, менее 1×10-11 М, менее 5×10-12 М или менее 1×10-12 М, согласно данным биослойной интерферометрии.
Вариант осуществления 29. Антитело по варианту осуществления 27 или варианту осуществления 28, которое связывается с собачьим IL4R или кошачьим IL4R, согласно данным иммуноблот анализа или биослойной интерферометрии.
Вариант осуществления 30. Выделенное антитело по любому из вариантов осуществления 27-29, которое уменьшает связывание собачьего и/или кошачьего полипептида IL4 и/или собачьего и/или кошачьего полипептида IL-13 с собачьим IL4R и/или кошачьим IL4R, согласно данным биослойной интерферометрии.
Вариант осуществления 31. Выделенное антитело по любому из вариантов осуществления 27-30, которое конкурирует с моноклональным антителом M3 за связывание с собачьим IL4R или кошачьим IL4R.
Вариант осуществления 32. Выделенное антитело по любому из вариантов осуществления 27-31, представляющее собой моноклональное антитело.
Вариант осуществления 33. Выделенное антитело по любому из вариантов осуществления 27-32, представляющее собой собачье, канинизированное, кошачье, фелинизированное или химерное антитело.
Вариант осуществления 34. Выделенное антитело по любому из вариантов осуществления 27-33, представляющее собой химерное антитело, содержащее одну или более мышиных каркасных областей вариабельной области тяжелой цепи или одну или более мышиных каркасных областей вариабельной области легкой цепи.
Вариант осуществления 35. Выделенное антитело по любому из вариантов осуществления 27-34, содержащее тяжелую цепь, содержащую:
а) последовательность CDR-H1, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:278;
b) последовательность CDR-H2, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:279; и
c) последовательность CDR-H3, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:280.
Вариант осуществления 36. Выделенное антитело по любому из вариантов осуществления 27-35, содержащее легкую цепь, содержащую:
а) последовательность CDR-L1, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:285;
b) последовательность CDR-L2, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:286; и
c) последовательность CDR-L3, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:287.
Вариант осуществления 37. Выделенное антитело по любому из вариантов осуществления 27-36, дополнительно содержащее одно или более из: (а) последовательности каркасной области 1 вариабельной области тяжелой цепи (HC FR1) SEQ ID NO:281; (b) последовательности HC-FR2 SEQ ID NO:282; (c) последовательности HC-FR3 SEQ ID NO:283; (d) последовательности HC-FR4 SEQ ID NO:284; (e) последовательности каркасной области 1 вариабельной области легкой цепи (LC-FR1) SEQ ID NO:288; (f) последовательности LC FR2 SEQ ID NO:289; (g) последовательности LC FR3 SEQ ID NO:290; или (h) последовательности LC-FR4 SEQ ID NO:291.
Вариант осуществления 38. Выделенное антитело по любому из вариантов осуществления 27-37, содержащее:
а. (i) последовательность вариабельной области тяжелой цепи, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:292; (ii) последовательность вариабельной области легкой цепи, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:293; или (iii) последовательность вариабельной области тяжелой цепи, аналогичную (i), и последовательность вариабельной области легкой цепи, аналогичную (ii); или
b. (i) последовательность вариабельной области тяжелой цепи, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:342 или SEQ ID NO:343; (ii) последовательность вариабельной области легкой цепи, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:344; или (iii) последовательность вариабельной области тяжелой цепи, аналогичную (i), и последовательность вариабельной области легкой цепи, аналогичную (ii).
Вариант осуществления 39. Выделенное антитело по любому из вариантов осуществления 27-38, содержащее последовательность вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:292, SEQ ID NO:342 или SEQ ID NO:343.
Вариант осуществления 40. Выделенное антитело по любому из вариантов осуществления 27-39, содержащее последовательность вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:293 или SEQ ID NO:344.
Вариант осуществления 41. Выделенное антитело по любому из вариантов осуществления 27-40, содержащее:
а) последовательность вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:292, и последовательность вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:293; и/или
b) последовательность вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:342 или SEQ ID NO:343, и последовательность вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:344.
Вариант осуществления 42. Выделенное антитело, содержащее:
а) последовательность вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:292, и последовательность вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:293; или
b) последовательность вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:342 или SEQ ID NO:343, и последовательность вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:344.
Вариант осуществления 43. Выделенное антитело, которое связывается с собачьим IL4R или кошачьим IL4R, где указанное антитело связывается с эпитопом, содержащим аминокислотную последовательность SEQ ID NO:355, и/или эпитопом, содержащим аминокислотную последовательность SEQ ID NO:356.
Вариант осуществления 44. Выделенное антитело по варианту осуществления 43, которое связывается с собачьим IL4R или кошачьим IL4R с константой диссоциации (Kd) менее 5×10-6 М, менее 1×10-6 М, менее 5×10-7 М, менее 1×10-7 М, менее 5×10-8 М, менее 1×10-8 М, менее 5×10-9 М, менее 1×10-9 М, менее 5×10-10 М, менее 1×10-10 М, менее 5×10-11 М, менее 1×10-11 М, менее 5×10-12 М или менее 1×10-12 М, согласно данным биослойной интерферометрии.
Вариант осуществления 45. Антитело по варианту осуществления 43 или варианту осуществления 44, которое связывается с собачьим IL4R или кошачьим IL4R, согласно данным иммуноблот-анализа или биослойной интерферометрии.
Вариант осуществления 46. Выделенное антитело по любому из вариантов осуществления 43-45, которое уменьшает связывание собачьего и/или кошачьего полипептида IL4 и/или собачьего и/или кошачьего полипептида IL-13 с собачьим IL4R и/или кошачьим IL4R, согласно данным биослойной интерферометрии.
Вариант осуществления 47. Выделенное антитело по любому из вариантов осуществления 43-46, которое конкурирует с моноклональным антителом M8 за связывание с собачьим IL4R или кошачьим IL4R.
Вариант осуществления 48. Выделенное антитело по любому из вариантов осуществления 43-47, представляющее собой моноклональное антитело.
Вариант осуществления 49. Выделенное антитело по любому из вариантов осуществления 43-48, представляющее собой собачье, канинизированное антитело, кошачье, фелинизированное или химерное антитело.
Вариант осуществления 50. Выделенное антитело по любому из вариантов осуществления 43-49, представляющее собой химерное антитело, содержащее одну или более мышиных каркасных областей вариабельной области тяжелой цепи или одну или более мышиных каркасных областей вариабельной области легкой цепи.
Вариант осуществления 51. Выделенное антитело по любому из вариантов осуществления 43-50, содержащее тяжелую цепь, содержащую:
а) последовательность CDR-H1, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:310;
b) последовательность CDR-H2, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:311; и
c) последовательность CDR-H3, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:312.
Вариант осуществления 52. Выделенное антитело по любому из вариантов осуществления 43-51, содержащее легкую цепь, содержащую:
а) последовательность CDR-L1, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:317;
b) последовательность CDR-L2, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:318; и
c) последовательность CDR-L3, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:319.
Вариант осуществления 53. Выделенное антитело по любому из вариантов осуществления 43-52, дополнительно содержащее одно или более из: (а) последовательности каркасной области 1 вариабельной области тяжелой цепи (HC FR1) SEQ ID NO:313; (b) последовательности HC-FR2 SEQ ID NO:314; (c) последовательности HC-FR3 SEQ ID NO:315; (d) последовательности HC-FR4 SEQ ID NO:316; (e) последовательности каркасной области 1 вариабельной области легкой цепи (LC-FR1) SEQ ID NO:320; (f) последовательности LC FR2 SEQ ID NO:321; (g) последовательности LC FR3 SEQ ID NO:322; или (h) последовательности LC-FR4 SEQ ID NO:323.
Вариант осуществления 54. Выделенное антитело по любому из вариантов осуществления 43-53, содержащее:
(а) последовательность вариабельной области тяжелой цепи, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:324;
(b) последовательность вариабельной области легкой цепи, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:325; или
(c) последовательность вариабельной области тяжелой цепи, аналогичную (а), и последовательность вариабельной области легкой цепи, аналогичную (b).
Вариант осуществления 55. Выделенное антитело по любому из вариантов осуществления 43-54, содержащее последовательность вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:324.
Вариант осуществления 56. Выделенное антитело по любому из вариантов осуществления 43-55, содержащее последовательность вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:325.
Вариант осуществления 57. Выделенное антитело по любому из вариантов осуществления 43-56, содержащее: последовательность вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:324, и последовательность вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:325.
Вариант осуществления 58. Выделенное антитело, содержащее: последовательность вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:324, и последовательность вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:325.
Вариант осуществления 59. Выделенное антитело, которое связывается с собачьим IL4R, где указанное антитело связывается с эпитопом, содержащим аминокислотную последовательность SEQ ID NO:357.
Вариант осуществления 60. Выделенное антитело по варианту осуществления 59, которое связывается с собачьим IL4R с константой диссоциации (Kd) менее 5×10-6 М, менее 1×10-6 М, менее 5×10-7 М, менее 1×10-7 М, менее 5×10-8 М, менее 1×10-8 М, менее 5×10-9 М, менее 1×10-9 М, менее 5×10-10 М, менее 1×10-10 М, менее 5×10-11 М, менее 1×10-11 М, менее 5×10-12 М или менее 1×10-12 М, согласно данным биослойной интерферометрии.
Вариант осуществления 61. Антитело по варианту осуществления 58 или варианту осуществления 59, которое связывается с собачьим IL4R, согласно данным иммуноблот анализа или биослойной интерферометрии.
Вариант осуществления 62. Выделенное антитело по любому из вариантов осуществления 58-61, которое уменьшает связывание собачьего полипептида IL4 и/или собачьего полипептида IL13 с собачьим IL4R, согласно данным биослойной интерферометрии.
Вариант осуществления 63. Выделенное антитело по любому из вариантов осуществления 58-62, которое конкурирует с моноклональным антителом M9 за связывание с собачьим IL4R.
Вариант осуществления 64. Выделенное антитело по любому из вариантов осуществления 58-63, представляющее собой моноклональное антитело.
Вариант осуществления 65. Выделенное антитело по любому из вариантов осуществления 58-64, представляющее собой собачье, канинизированное, кошачье, фелинизированное или химерное антитело.
Вариант осуществления 66. Выделенное антитело по любому из вариантов осуществления 58-65, представляющее собой химерное антитело, содержащее одну или более мышиных каркасных областей вариабельной области тяжелой цепи или одну или более мышиных каркасных областей вариабельной области легкой цепи.
Вариант осуществления 67. Выделенное антитело по любому из вариантов осуществления 58-66, содержащее тяжелую цепь, содержащую:
а) последовательность CDR-H1, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:326;
b) последовательность CDR-H2, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:327; и
c) последовательность CDR-H3, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:328.
Вариант осуществления 68. Выделенное антитело по любому из вариантов осуществления 58-67, содержащее легкую цепь, содержащую:
a) последовательность CDR-L1, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:333;
b) последовательность CDR-L2, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:334; и
c) последовательность CDR-L3, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:335.
Вариант осуществления 69. Выделенное антитело по любому из вариантов осуществления 58-68, дополнительно содержащее одно или более из: (а) последовательности каркасной области 1 вариабельной области тяжелой цепи (HC FR1) SEQ ID NO:329; (b) последовательности HC-FR2 SEQ ID NO:330; (c) последовательности HC-FR3 SEQ ID NO:331; (d) последовательности HC-FR4 SEQ ID NO:332; (e) последовательности каркасной области 1 вариабельной области легкой цепи (LC-FR1) SEQ ID NO:336; (f) последовательности LC FR2 SEQ ID NO:337; (g) последовательности LC FR3 SEQ ID NO:338; или (h) последовательности LC-FR4 SEQ ID NO:339.
Вариант осуществления 70. Выделенное антитело по любому из вариантов осуществления 58-69, содержащее:
а. (i) последовательность вариабельной области тяжелой цепи, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:340; (ii) последовательность вариабельной области легкой цепи, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:341; или (iii) последовательность вариабельной области тяжелой цепи, аналогичную (i), и последовательность вариабельной области легкой цепи, аналогичную (ii); или же
b. (i) последовательность вариабельной области тяжелой цепи, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:345 или SEQ ID NO:346; (ii) последовательность вариабельной области легкой цепи, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:347; или (iii) последовательность вариабельной области тяжелой цепи, аналогичную (i), и последовательность вариабельной области легкой цепи, аналогичную (ii).
Вариант осуществления 71. Выделенное антитело по любому из вариантов осуществления 58-70, содержащее последовательность вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:340, SEQ ID NO:345 или SEQ ID NO:346.
Вариант осуществления 72. Выделенное антитело по любому из вариантов осуществления 58-71, содержащее последовательность вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:341 или SEQ ID NO:347.
Вариант осуществления 73. Выделенное антитело по любому из вариантов осуществления 58-72, содержащее:
а) последовательность вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:340, и последовательность вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:341; и/или
b) последовательность вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:345 или SEQ ID NO:346, и последовательность вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:347.
Вариант осуществления 74. Выделенное антитело, содержащее:
а) последовательность вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:340, и последовательность вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:341; или
b) последовательность вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:345 или SEQ ID NO:346, и последовательность вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:347.
Вариант осуществления 75. Выделенное антитело, которое связывается с собачьим IL4R, содержащее тяжелую цепь, содержащую:
а) последовательность CDR-H1, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:294;
b) последовательность CDR-H2, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:295; и
c) последовательность CDR-H3, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:296.
Вариант осуществления 76. Выделенное антитело, которое связывается с собачьим IL4R, содержащее легкую цепь, содержащую:
а) последовательность CDR-L1, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:301;
b) последовательность CDR-L2, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:302; и
c) последовательность CDR-L3, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:303.
Вариант осуществления 77. Выделенное антитело по варианту осуществления 75, содержащее легкую цепь, содержащую:
а) последовательность CDR-L1, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:301;
b) последовательность CDR-L2, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:302; и
c) последовательность CDR-L3, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:303.
Вариант осуществления 78. Выделенное антитело по любому из вариантов осуществления 75-77, которое связывается с собачьим IL4R с константой диссоциации (Kd) менее 5×10-6 М, менее 1×10-6 М, менее 5×10-7 М, менее 1×10-7 М, менее 5×10-8 М, менее 1×10-8 М, менее 5×10-9 М, менее 1×10-9 М, менее 5×10-10 М, менее 1×10-10 М, менее 5×10-11 М, менее 1×10-11 М, менее 5×10-12 М или менее 1×10-12 М, согласно данным биослойной интерферометрии.
Вариант осуществления 79. Антитело по любому из вариантов осуществления 75-78, которое связывается с собачьим IL4R, согласно данным иммуноблот-анализа или биослойной интерферометрии.
Вариант осуществления 80. Выделенное антитело по любому из вариантов осуществления 75-79, которое уменьшает связывание собачьего полипептида IL4 и/или собачьего полипептида IL13 с собачьим IL4R, согласно данным биослойной интерферометрии.
Вариант осуществления 81. Выделенное антитело по любому из вариантов осуществления 75-80, которое конкурирует с моноклональным антителом M5 за связывание с собачьим IL4R.
Вариант осуществления 82. Выделенное антитело по любому из вариантов осуществления 75-81, представляющее собой моноклональное антитело.
Вариант осуществления 83. Выделенное антитело по любому из вариантов осуществления 75-82, представляющее собой собачье, канинизированное, кошачье, фелинизированное или химерное антитело.
Вариант осуществления 84. Выделенное антитело по любому из вариантов осуществления 75-83, представляющее собой химерное антитело, содержащее одну или более мышиных каркасных областей вариабельной области тяжелой цепи или одну или более мышиных каркасных областей вариабельной области легкой цепи.
Вариант осуществления 85. Выделенное антитело по любому из вариантов осуществления 75-84, дополнительно содержащее одно или более из: (а) последовательности каркасной области 1 вариабельной области тяжелой цепи (HC FR1) SEQ ID NO:297; (b) последовательности HC-FR2 SEQ ID NO:298; (c) последовательности HC-FR3 SEQ ID NO:299; (d) последовательности HC-FR4 SEQ ID NO:300; (e) последовательности каркасной области 1 вариабельной области легкой цепи (LC-FR1) SEQ ID NO:304; (f) последовательности LC FR2 SEQ ID NO:305; (g) последовательности LC FR3 SEQ ID NO:306; или (h) последовательности LC-FR4 SEQ ID NO:307.
Вариант осуществления 86. Выделенное антитело по любому из вариантов осуществления 75-85, содержащее:
(a) последовательность вариабельной области тяжелой цепи, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:308;
(b) последовательность вариабельной области легкой цепи, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:309; или же
(c) последовательность вариабельной области тяжелой цепи, аналогичную (а), и последовательность вариабельной области легкой цепи, аналогичную (b).
Вариант осуществления 87. Выделенное антитело по любому из вариантов осуществления 75-86, содержащее последовательность вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:308.
Вариант осуществления 88. Выделенное антитело по любому из вариантов осуществления 75-87, содержащее последовательность вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:309.
Вариант осуществления 89. Выделенное антитело по любому из вариантов осуществления 75-88, содержащее: последовательность вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:308, и последовательность вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ. ID NO: 309.
Вариант осуществления 90. Выделенное антитело, содержащее: последовательность вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:308, и последовательность вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:309.
Вариант осуществления 91. Антитело по любому из предшествующих вариантов осуществления, содержащее полипептид Fc дикого типа собачьего или кошачьего IgG или его вариант.
Вариант осуществления 92. Антитело по варианту осуществления 91, в котором полипептид Fc IgG представляет собой полипептид Fc дикого типа собачьего IgG-A или его вариант; полипептид Fc дикого типа собачьего IgG-B или его вариант; полипептид Fc дикого типа собачьего IgG-C или его вариант; полипептид Fc дикого типа собачьего IgG-D или его вариант; полипептид Fc дикого типа кошачьего IgG1a или его вариант; полипептид Fc дикого типа кошачьего IgG1b или его вариант; или полипептид Fc дикого типа кошачьего IgG2 или его вариант.
Вариант осуществления 93. Антитело по варианту осуществления 91 или варианту осуществления 92, в котором вариант полипептида Fc IgG содержит по меньшей мере одну аминокислотную модификацию относительно полипептида Fc дикого типа IgG, где вариант полипептида Fc IgG имеет повышенное сродство связывания с белком A относительно полипептида Fc дикого типа IgG; пониженное сродство связывания с C1q относительно полипептида Fc дикого типа IgG; и/или пониженное сродство связывания с CD16 относительно полипептида Fc дикого типа IgG.
Вариант осуществления 94. Антитело по любому из вариантов осуществления 91-93, в котором вариант полипептида Fc IgG содержит по меньшей мере одну аминокислотную модификацию в шарнирной области относительно полипептида Fc дикого типа IgG, где вариант полипептида Fc IgG имеет повышенное рекомбинантное продуцирование и/или повышенное образование дисульфидных связей в шарнирной области по сравнению с полипептидом Fc дикого типа IgG, согласно данным анализа SDS-PAGE в денатурирующих и/или неденатурирующих условиях.
Вариант осуществления 95. Антитело по любому из вариантов осуществления 91-94, в котором вариант полипептида Fc IgG содержит:
а) по меньшей мере одну аминокислотную замену в положении, соответствующем положению 21, 23, 25, 80, 205 и/или 207 в SEQ ID NO:162;
b) по меньшей мере одну аминокислотную замену в положении, соответствующем положению 5, 38, 39, 94, 97 и/или 98 в SEQ ID NO:163;
c) по меньшей мере одну аминокислотную замену в положении, соответствующем положению 5, 21, 23, 24, 38, 39, 93, 97 и/или 98 в SEQ ID NO:165;
d) по меньшей мере одну аминокислотную замену в положении, соответствующем положению 21, 23, 25, 80 и/или 207 в SEQ ID NO:167;
e) по меньшей мере одну аминокислотную замену в положении, соответствующем положению 16 и/или 198 в SEQ ID NO:203, SEQ ID NO:204, SEQ ID NO:205 или SEQ ID NO:206; и/или
f) по меньшей мере одну аминокислотную замену в положении, соответствующем положению 14 и/или 16 в SEQ ID NO:207.
Вариант осуществления 96. Антитело по любому из вариантов осуществления 91-95, в котором вариант полипептида Fc IgG содержит:
а) по меньшей мере одну аминокислотную замену в положении 21, 23, 25, 80, 205 и/или 207 в SEQ ID NO:162;
b) по меньшей мере одну аминокислотную замену в положении 5, 38, 39, 94, 97 и/или 98 в SEQ ID NO:163;
c) по меньшей мере одну аминокислотную замену в положении 5, 21, 23, 24, 38, 39, 93, 97 и/или 98 в SEQ ID NO:164;
d) по меньшей мере одну аминокислотную замену в положении 21, 23, 25, 80 и/или 207 в SEQ ID NO:165;
e) по меньшей мере одну аминокислотную замену в положении 16 и/или 198 в SEQ ID NO:203, SEQ ID NO:204, SEQ ID NO:205 или SEQ ID NO:206; и/или
f) по меньшей мере одну аминокислотную замену в положении 14 и/или 16 в SEQ ID NO:207.
Вариант осуществления 97. Антитело по любому из вариантов осуществления 91-96, в котором вариант полипептида Fc IgG содержит:
а) треонин в положении, соответствующем положению 21 в SEQ ID NO:162, лейцин в положении, соответствующем положению 23 в SEQ ID NO:162, аланин в положении, соответствующем положению 25 в SEQ ID NO:162, глицин в положении, соответствующем положению 80 в SEQ ID NO:162, аланин в положении, соответствующем положению 205 в SEQ ID NO:162, и/или гистидин в положении, соответствующем положению 207 в SEQ ID NO:162;
b) пролин в положении, соответствующем положению 5 в SEQ ID NO:163, глицин в положении, соответствующем положению 38 в SEQ ID NO:163, аргинин в положении, соответствующем положению 39 в SEQ ID NO:163, аргинин в положении, соответствующем положению 93 в SEQ ID NO:163, изолейцин в положении, соответствующем положению 97 в SEQ ID NO:163, и/или глицин в положении, соответствующем положению 98 в SEQ ID NO:163;
c) пролин в положении, соответствующем положению 5 в SEQ ID NO:164, треонин в положении, соответствующем положению 21 в SEQ ID NO:164, лейцин в положении, соответствующем положению 23 в SEQ ID NO:164, изолейцин в положении, соответствующем положению 24 в SEQ ID NO:164, глицин в положении, соответствующем положению 38 в SEQ ID NO:164, аргинин в положении, соответствующем положению 39 в SEQ ID NO:164, аргинин в положении, соответствующем положению 93 в SEQ ID NO:164, изолейцин в положении, соответствующем положению 97 в SEQ ID NO:164, и/или глицин в положении, соответствующем положению 98 в SEQ ID NO:164;
d) треонин в положении, соответствующем положению 21 в SEQ ID NO:165, лейцин в положении, соответствующем положению 23 в SEQ ID NO:165, аланин в положении, соответствующем положению 25 в SEQ ID NO:165, глицин в положении, соответствующем положению 80 в SEQ ID NO:165, и/или гистидин в положении, соответствующем положению 207 в SEQ ID NO:165;
e) пролин в положении, соответствующем положению 16 в SEQ ID NO:203, SEQ ID NO:204, SEQ ID NO:205 или SEQ ID NO:206, и/или аланин в положении, соответствующем положению 198 в SEQ ID NO:203, SEQ ID NO:204, SEQ ID NO:205 или SEQ ID NO:206; и/или
f) цистеин в положении, соответствующем положению 14 в SEQ ID NO:207, и/или пролин в положении, соответствующем положению 16 в SEQ ID NO:207.
Вариант осуществления 98. Антитело по любому из вариантов осуществления 91-97, в котором вариант полипептида Fc IgG содержит:
а) треонин в положении 21 в SEQ ID NO:162, лейцин в положении 23 в SEQ ID NO:162, аланин в положении 25 в SEQ ID NO:162, глицин в положении 80 в SEQ ID NO:162, аланин в положении 205 в SEQ ID NO:162 и/или гистидин в положении 207 в SEQ ID NO:162;
b) пролин в положении 5 в SEQ ID NO:163, глицин в положении 38 в SEQ ID NO:163, аргинин в положении 39 в SEQ ID NO:163, аргинин в положении 93 в SEQ ID NO:163, изолейцин в положении 97 в SEQ ID NO:163 и/или глицин в положении 98 в SEQ ID NO:163;
c) пролин в положении 5 в SEQ ID NO:164, треонин в положении 21 в SEQ ID NO:164, лейцин в положении 23 в SEQ ID NO:164, изолейцин в положении 24 в SEQ ID NO:164, глицин в положении 38 в SEQ ID NO:164, аргинин в положении 39 в SEQ ID NO:164, аргинин в положении 93 в SEQ ID NO:164, изолейцин в положении 97 в SEQ ID NO:164 и/или глицин в положении 98 в SEQ ID NO:164;
d) треонин в положении 21 в SEQ ID NO:165, лейцин в положении 23 в SEQ ID NO:165, аланин в положении 25 в SEQ ID NO:165, глицин в положении 80 в SEQ ID NO:165 и/или гистидин в положении 207 в SEQ ID NO:165;
e) пролин в положении 16 в SEQ ID NO:203, SEQ ID NO:204, SEQ ID NO:205 или SEQ ID NO:206 и/или аланин в положении 198 в SEQ ID NO:203, SEQ ID NO:204, SEQ ID NO:205 или SEQ ID NO:206; и/или
f) цистеин в положении 14 в SEQ ID NO:207 и/или пролин в положении 16 в SEQ ID NO:207.
Вариант осуществления 99. Антитело по любому из вариантов осуществления 91-98, в котором вариант полипептида Fc IgG содержит область CH1, содержащую по меньшей мере одну аминокислотную модификацию относительно области CH1 дикого типа собачьего или кошачьего IgG, где вариант полипептида Fc IgG содержит:
а) по меньшей мере одну аминокислотную замену в положении, соответствующем положению 24 и/или положению 30 в SEQ ID NO:227, SEQ ID NO:228, SEQ ID NO:229, SEQ ID NO:230 или SEQ ID NO:237; или
b) по меньшей мере одну аминокислотную замену в положении, соответствующем положению 24 и/или положению 29 в SEQ ID NO:238.
Вариант осуществления 100. Антитело, содержащее вариант полипептида Fc IgG, содержащий область CH1, содержащую по меньшей мере одну аминокислотную модификацию относительно области CH1 дикого типа собачьего или кошачьего IgG, где вариант полипептида Fc IgG содержит:
а) по меньшей мере одну аминокислотную замену в положении, соответствующем положению 24 и/или положению 30 в SEQ ID NO:227, SEQ ID NO:228, SEQ ID NO:229, SEQ ID NO:230 или SEQ ID NO:237; или
b) по меньшей мере одну аминокислотную замену в положении, соответствующем положению 24 и/или положению 29 в SEQ ID NO:238.
Вариант осуществления 101. Антитело по любому из вариантов осуществления 27-36, в котором вариант полипептида Fc IgG содержит область CH1, содержащую по меньшей мере одну аминокислотную модификацию относительно области CH1 дикого типа собачьего или кошачьего IgG, где вариант полипептида Fc IgG содержит:
а) по меньшей мере одну аминокислотную замену в положении 24 и/или положении 30 в SEQ ID NO:227, SEQ ID NO:228, SEQ ID NO:229, SEQ ID NO:230 или SEQ ID NO:237; или
b) по меньшей мере одну аминокислотную замену в положении 24 и/или положении 29 в SEQ ID NO:238.
Вариант осуществления 102. Антитело по любому из вариантов осуществления 97-101, где вариант полипептида Fc IgG содержит область CH1, содержащую по меньшей мере одну аминокислотную модификацию относительно области CH1 дикого типа собачьего или кошачьего IgG, где вариант полипептида Fc IgG содержит:
а) лейцин в положении, соответствующем положению 24, и/или аспарагин в положении, соответствующем положению 30 в SEQ ID NO:227, SEQ ID NO:228, SEQ ID NO:229, SEQ ID NO:230 или SEQ ID NO:237; или
b) лейцин в положении, соответствующем положению 24, и/или аспарагин в положении, соответствующем положению 29 в SEQ ID NO:238.
Вариант осуществления 103. Антитело по любому из вариантов осуществления 91-102, где вариант полипептида Fc IgG содержит область CH1, содержащую по меньшей мере одну аминокислотную модификацию относительно области CH1 дикого типа собачьего или кошачьего IgG, где вариант полипептида Fc IgG содержит:
а) лейцин в положении 24 и/или аспарагин в положении 30 в SEQ ID NO:227, SEQ ID NO:228, SEQ ID NO:229, SEQ ID NO:230 или SEQ ID NO:237; или
b) лейцин в положении 24 и/или аспарагин в положении 29 в SEQ ID NO:238.
Вариант осуществления 104. Антитело по любому из предшествующих вариантов осуществления, содержащее константную область дикого типа собачьей или кошачьей легкой цепи или ее вариант.
Вариант осуществления 105. Антитело по любому из предшествующих вариантов осуществления, содержащее константную область κ дикого типа собачьей или кошачьей легкой цепи или ее вариант.
Вариант осуществления 106. Антитело по варианту осуществления 104 или варианту осуществления 105, в котором вариант константной области легкой цепи содержит по меньшей мере одну аминокислотную модификацию относительно константной области κ дикого типа собачьей или кошачьей легкой цепи, содержащую:
а) по меньшей мере одну аминокислотную замену в положении, соответствующем положению 11 и/или положению 22 в SEQ ID NO:235; или
b) по меньшей мере одну аминокислотную замену в положении, соответствующем положению 11 и/или положению 22 в SEQ ID NO:241.
Вариант осуществления 107. Антитело, содержащее вариант константной области легкой цепи, содержащее по меньшей мере одну аминокислотную модификацию относительно константной области κ дикого типа собачьей или кошачьей легкой цепи, содержащую:
а) по меньшей мере одну аминокислотную замену в положении, соответствующем положению 11 и/или положению 22 в SEQ ID NO:235; или
b) по меньшей мере одну аминокислотную замену в положении, соответствующем положению 11 и/или положению 22 в SEQ ID NO:241.
Вариант осуществления 108. Антитело по любому из вариантов осуществления 104-107, в котором вариант константной области легкой цепи содержит по меньшей мере одну аминокислотную модификацию относительно константной области κ дикого типа собачьей или кошачьей легкой цепи, содержащую:
а) аланин в положении, соответствующем положению 11, и/или аргинин в положении, соответствующем положению 22 в SEQ ID NO:235; или
b) аланин в положении, соответствующем положению 11, и/или аргинин в положении, соответствующем положению 22 в SEQ ID NO:241.
Вариант осуществления 109. Антитело по любому из вариантов осуществления 104-108, в котором вариант константной области легкой цепи содержит по меньшей мере одну аминокислотную модификацию относительно константной области κ дикого типа собачьей или кошачьей легкой цепи, содержащую:
а) аланин в положении 11 и/или аргинин в положении 22 в SEQ ID NO:235; или
b) аланин в положении 11 и/или аргинин в положении 22 в SEQ ID NO:241.
Вариант осуществления 110. Антитело по любому из вариантов осуществления 104-109, в котором константная область легкой цепи содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO:235, 236, 241 и/или 242.
Вариант осуществления 111. Антитело по любому из предшествующих вариантов осуществления, представляющее собой биспецифическое антитело.
Вариант осуществления 112. Антитело по любому из предшествующих вариантов осуществления, представляющее собой биспецифическое антитело, содержащее:
i) первый вариант полипептида Fc собачьего IgG, содержащий по меньшей мере одну аминокислотную модификацию относительно первого полипептида Fc дикого типа собачьего IgG, и второй вариант полипептида Fc собачьего IgG, содержащий по меньшей мере одну аминокислотную модификацию относительно второго полипептида Fc дикого типа собачьего IgG, где:
а) первый вариант полипептида Fc собачьего IgG содержит аминокислотную замену в положении, соответствующем положению 138 в SEQ ID NO:162, положению 137 в SEQ ID NO:163, положению 137 в SEQ ID NO:165 или положению 138 в SEQ ID NO:167 и/или
b) второй вариант полипептида Fc собачьего IgG содержит аминокислотную замену в положении, соответствующем положению 138 и/или положению 140 в SEQ ID NO:162, положению 137 и/или положению 139 в SEQ ID NO:163, положению 137 и/или положению 139 в SEQ ID NO:165 или положению 138 и/или положению 140 в SEQ ID NO:167; или
ii) первый вариант полипептида Fc кошачьего IgG, содержащий по меньшей мере одну аминокислотную модификацию относительно первого полипептида Fc дикого типа кошачьего IgG, и второй вариант полипептида Fc кошачьего IgG, содержащий по меньшей мере одну аминокислотную модификацию относительно второго полипептида Fc дикого типа кошачьего IgG, где:
а) первый вариант полипептида Fc кошачьего IgG содержит аминокислотную замену в положении, соответствующем положению 154 в SEQ ID NO:203, SEQ ID NO:204, SEQ ID NO:205, SEQ ID NO:206 или SEQ ID NO:207, и/или
b) второй вариант полипептида Fc кошачьего IgG содержит аминокислотную замену в положении, соответствующем положению 154 и/или положению 156 в SEQ ID NO:203, SEQ ID NO:204, SEQ ID NO:205, SEQ ID NO:206 или SEQ ID NO:207.
Вариант осуществления 113. Антитело или биспецифическое антитело, содержащее:
i) первый вариант полипептида Fc собачьего IgG, содержащий по меньшей мере одну аминокислотную модификацию относительно первого полипептида Fc дикого типа собачьего IgG, и второй вариант полипептида Fc собачьего IgG, содержащий по меньшей мере одну аминокислотную модификацию относительно второго полипептида Fc дикого типа собачьего IgG, где:
а) первый вариант полипептида Fc собачьего IgG содержит аминокислотную замену в положении, соответствующем положению 138 в SEQ ID NO:162, положению 137 в SEQ ID NO:163, положению 137 в SEQ ID NO:165 или положению 138 в SEQ ID NO:167 и/или
b) второй вариант полипептида Fc собачьего IgG содержит аминокислотную замену в положении, соответствующем положению 138 и/или положению 140 в SEQ ID NO:162, положению 137 и/или положению 139 в SEQ ID NO:163, положению 137 и/или положению 139 в SEQ ID NO:165, или положению 138 и/или положению 140 в SEQ ID NO:167;
ii) первый вариант полипептида Fc кошачьего IgG, содержащий по меньшей мере одну аминокислотную модификацию относительно первого полипептида Fc дикого типа кошачьего IgG, и второй вариант полипептида Fc кошачьего IgG, содержащий по меньшей мере одну аминокислотную модификацию относительно второго полипептида Fc дикого типа кошачьего IgG, где:
а) первый вариант полипептида Fc кошачьего IgG содержит аминокислотную замену в положении, соответствующем положению 154 в SEQ ID NO:203, SEQ ID NO:204, SEQ ID NO:205, SEQ ID NO:206 или SEQ ID NO:207, и/или
b) второй вариант полипептида Fc кошачьего IgG содержит аминокислотную замену в положении, соответствующем положению 154 и/или положению 156 в SEQ ID NO:203, SEQ ID NO:204, SEQ ID NO:205, SEQ ID NO:206 или SEQ ID NO:207; или
iii) первый вариант полипептида Fc лошадиного IgG, содержащий по меньшей мере одну аминокислотную модификацию относительно первого полипептида Fc дикого типа лошадиного IgG, и второй вариант полипептида Fc лошадиного IgG, содержащий по меньшей мере одну аминокислотную модификацию относительно второго полипептида Fc дикого типа лошадиного IgG, где:
а) первый вариант полипептида Fc лошадиного IgG содержит аминокислотную замену в положении, соответствующем положению 130 в SEQ ID NO:254, SEQ ID NO:255, SEQ ID NO:256, SEQ ID NO:257, SEQ ID NO:258, SEQ ID NO:259 или SEQ ID NO:260, и/или
b) второй вариант полипептида Fc лошадиного IgG содержит аминокислотную замену в положении, соответствующем положению 130 и/или положению 132 в SEQ ID NO:254, SEQ ID NO:255, SEQ ID NO:256, SEQ ID NO:257, SEQ ID NO:258, SEQ ID NO:259 или SEQ ID NO:260.
Вариант осуществления 114. Антитело по варианту осуществления 112 или варианту осуществления 113, в котором:
a) первый вариант полипептида Fc собачьего IgG содержит триптофан в положении, соответствующем положению 138 в SEQ ID NO:162, положению 137 в SEQ ID NO:163, положению 137 в SEQ ID NO:165 или положению 138 в SEQ ID NO:167;
b) второй вариант полипептида Fc собачьего IgG содержит серин в положении, соответствующем положению 138, и/или аланин в положении, соответствующем положению 140 в SEQ ID NO:162, серин в положении, соответствующем положению 137, и/или аланин в положении, соответствующем положению 139 в SEQ ID NO:163, серин в положении, соответствующем положению 137, и/или аланин в положении, соответствующем положению 139 в SEQ ID NO:165, или серин в положении соответствующем положению 138, и/или аланин в положении, соответствующем положению 140 в SEQ ID NO:167;
c) первый вариант полипептида Fc кошачьего IgG содержит триптофан в положении, соответствующем положению 154 в SEQ ID NO:203, SEQ ID NO:204, SEQ ID NO:205, SEQ ID NO:206 или SEQ ID NO:207;
d) второй вариант полипептида Fc кошачьего IgG содержит серин в положении, соответствующем положению 154, и/или аланин в положении, соответствующем положению 156 в SEQ ID NO:203, SEQ ID NO:204, SEQ ID NO:205, SEQ ID NO:206 или SEQ ID NO:207;
e) первый вариант полипептида Fc лошадиного IgG содержит триптофан в положении, соответствующем положению 130 в SEQ ID NO:254, SEQ ID NO:255, SEQ ID NO:256, SEQ ID NO:257, SEQ ID NO:258, SEQ ID NO:259 или SEQ ID NO:260; и/или
f) второй вариант полипептида Fc лошадиного IgG содержит серин в положении, соответствующем положению 130, и/или аланин в положении, соответствующем положению 132 в SEQ ID NO:254, SEQ ID NO:255, SEQ ID NO:256, SEQ ID NO:257, SEQ ID NO:258, SEQ ID NO:259 или SEQ ID NO:260.
Вариант осуществления 115. Антитело по любому из вариантов осуществления 112-114, в котором:
а) первый вариант полипептида Fc собачьего IgG содержит аминокислотную замену в положении 138 в SEQ ID NO:162, положении 137 в SEQ ID NO:163, положении 137 в SEQ ID NO:165 или положении 138 в SEQ ID NO:167;
b) второй вариант полипептида Fc собачьего IgG содержит аминокислотную замену в положении 138 и/или положении 140 в SEQ ID NO:162, аминокислотную замену в положении 137 и/или положении 139 в SEQ ID NO:163, аминокислотную замену в положении 137 и/или положении 139 в SEQ ID NO:165 или аминокислотную замену в положении 138 и/или положении 140 в SEQ ID NO:167;
c) первый вариант полипептида Fc кошачьего IgG содержит аминокислотную замену в положении 154 в SEQ ID NO:203, SEQ ID NO:204, SEQ ID NO:205, SEQ ID NO:206 или SEQ ID NO:207;
d) второй вариант полипептида Fc кошачьего IgG содержит аминокислотную замену в положении 154 и/или положении 156 в SEQ ID NO:203, SEQ ID NO:204, SEQ ID NO:205, SEQ ID NO:206 или SEQ ID NO:207;
e) первый вариант полипептида Fc лошадиного IgG содержит аминокислотную замену в положении 130 в SEQ ID NO:254, SEQ ID NO:255, SEQ ID NO:256, SEQ ID NO:257, SEQ ID NO:258, SEQ ID NO:259 или SEQ ID NO:260; и/или
f) второй вариант полипептида Fc лошадиного IgG содержит аминокислотную замену в положении 130 и/или положении 132 в SEQ ID NO:254, SEQ ID NO:255, SEQ ID NO:256, SEQ ID NO:257, SEQ ID NO:258, SEQ ID NO:259 или SEQ ID NO:260.
Вариант осуществления 116. Антитело по любому из вариантов осуществления 112-115, в котором:
а) первый вариант полипептида Fc собачьего IgG содержит триптофан в положении 138 в SEQ ID NO:162, положении 137 в SEQ ID NO:163, положении 137 в SEQ ID NO:165 или положении 138 в SEQ ID NO:167;
b) второй вариант полипептида Fc собачьего IgG содержит серин в положении 138 и/или аланин в положении 140 в SEQ ID NO:162, серин в положении 137 и/или аланин в положении 139 в SEQ ID NO:163, серин в положении 137 и/или аланин в положении 139 в SEQ ID NO:165 или серин в положении 138 и/или аланин в положении 140 в SEQ ID NO:167;
c) первый вариант полипептида Fc кошачьего IgG содержит триптофан в положении 154 в SEQ ID NO:203, SEQ ID NO:204, SEQ ID NO:205, SEQ ID NO:206 или SEQ ID NO:207;
d) второй вариант полипептида Fc кошачьего IgG содержит серин в положении 154 и/или аланин в положении 156 в SEQ ID NO:203, SEQ ID NO:204, SEQ ID NO:205, SEQ ID NO:206 или SEQ ID NO:207;
e) первый вариант полипептида Fc лошадиного IgG содержит триптофан в положении 130 в SEQ ID NO:254, SEQ ID NO:255, SEQ ID NO:256, SEQ ID NO:257, SEQ ID NO:258, SEQ ID NO:259 или SEQ ID NO:260; и/или
f) второй вариант полипептида Fc лошадиного IgG содержит серин в положении 130 и/или аланин в положении 132 в SEQ ID NO:254, SEQ ID NO:255, SEQ ID NO:256, SEQ ID NO:257, SEQ ID NO:258, SEQ ID NO:259 или SEQ ID NO:260.
Вариант осуществления 117. Антитело по любому из вариантов осуществления 112-116, в котором первый полипептид Fc дикого типа IgG и второй полипептид Fc дикого типа IgG относятся к одному и тому же подтипу IgG.
Вариант осуществления 118. Антитело по любому из вариантов осуществления 112-117, в котором первый полипептид Fc дикого типа IgG и второй полипептид Fc дикого типа IgG относятся к разным подтипам IgG.
Вариант осуществления 119. Антитело по любому из предшествующих вариантов осуществления, содержащее полипептид Fc IgG, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:162, 163, 164, 165, 166, 167, 168, 169, 170, 171, 172, 173, 174, 175, 176, 177, 178, 179, 180, 181, 182, 183, 184, 185, 186, 187, 188, 189, 190, 191, 192, 193, 194, 195, 196, 197, 198, 199, 200, 201, 202, 203, 204, 205, 206, 207, 208, 209, 210, 211, 212, 213, 214, 215, 216, 217, 218, 219, 220, 221, 222, 223, 224, 225, 226, 227, 228, 229, 230, 231, 232, 233, 234, 237, 238, 239, 240, 254, 255, 256, 257, 258, 259, 260, 261, 262, 263, 264, 265, 266 и/или 267.
Вариант осуществления 120. Антитело по любому из предшествующих вариантов осуществления, содержащее:
а. (i) аминокислотную последовательность тяжелой цепи SEQ ID NO:25 или SEQ ID NO:47; (ii) аминокислотную последовательность легкой цепи SEQ ID NO:26 или SEQ ID NO:48; или (iii) аминокислотную последовательность тяжелой цепи, аналогичную (i), и последовательность легкой цепи, аналогичную (ii);
b. (i) аминокислотную последовательность тяжелой цепи SEQ ID NO:51 или SEQ ID NO:55; (ii) аминокислотную последовательность легкой цепи SEQ ID NO:52 или SEQ ID NO:56; или (iii) аминокислотную последовательность тяжелой цепи, аналогичную (i), и последовательность легкой цепи, аналогичную (ii);
c. (i) аминокислотную последовательность тяжелой цепи SEQ ID NO:71, SEQ ID NO:72, SEQ ID NO:75, SEQ ID NO:76 или SEQ ID NO:276; (ii) аминокислотную последовательность легкой цепи SEQ ID NO:73, SEQ ID NO:74, SEQ ID NO:77, SEQ ID NO:78 или SEQ ID NO:277; или (iii) аминокислотную последовательность тяжелой цепи, аналогичную (i), и последовательность легкой цепи, аналогичную (ii);
d. (i) аминокислотную последовательность тяжелой цепи SEQ ID NO:79, SEQ ID NO:80, SEQ ID NO:82 или SEQ ID NO:83; (ii) аминокислотную последовательность легкой цепи SEQ ID NO:81 или SEQ ID NO:84; или (iii) аминокислотную последовательность тяжелой цепи, аналогичную (i), и последовательность легкой цепи, аналогичную (ii); или
е. (i) аминокислотную последовательность тяжелой цепи SEQ ID NO:243; (ii) аминокислотную последовательность легкой цепи SEQ ID NO:244; или (iii) аминокислотную последовательность тяжелой цепи, аналогичную (i), и последовательность легкой цепи, аналогичную (ii).
Вариант осуществления 121. Антитело по любому из предшествующих вариантов осуществления, представляющее собой биспецифическое антитело, которое связывается с IL4R и одним или более антигенами, выбранными из IL17, IL31, TNFα, CD20, CD19, CD25, IL4, IL13, IL23, IgE, CD11α, IL6R, α4-интергрина, IL12, IL1β или BlyS.
Вариант осуществления 122. Антитело по любому из предшествующих вариантов осуществления, содержащее (i) аминокислотную последовательность тяжелой цепи SEQ ID NO:245; (ii) аминокислотную последовательность легкой цепи SEQ ID NO:246; или (iii) аминокислотную последовательность тяжелой цепи, аналогичную (i), и последовательность легкой цепи, аналогичную (ii).
Вариант осуществления 123. Антитело по любому из предшествующих вариантов осуществления, представляющее собой фрагмент антитела, такой как фрагмент Fv, scFv, Fab, Fab’, F(ab’)2 или Fab’-SH.
Вариант осуществления 124. Выделенная нуклеиновая кислота, кодирующая антитело по любому из предшествующих вариантов осуществления.
Вариант осуществления 125. Клетка-хозяин, содержащая нуклеиновую кислоту по варианту осуществления 124.
Вариант осуществления 126. Клетка-хозяин, которая экспрессирует антитело по любому из вариантов осуществления 1-123.
Вариант осуществления 127. Способ получения антитела, включающий культивирование клетки-хозяина по варианту осуществления 125 или варианту осуществления 126 и выделение антитела.
Вариант осуществления 128. Фармацевтическая композиция, содержащая антитело по любому из вариантов осуществления изобретения 1-123 и фармацевтически приемлемый носитель.
Вариант осуществления 129. Способ лечения представителя вида животного-компаньона, имеющего IL4/IL13-индуцированное состояние, включающий введение представителю вида животного-компаньона терапевтически эффективного количества антитела по любому из вариантов осуществления 1-123 или фармацевтической композиции по варианту осуществления 128.
Вариант осуществления 130. Способ по варианту осуществления 129, в котором представитель вида животного-компаньона представляет собой представителя псовых, кошачьих или лошадиных.
Вариант осуществления 131. Способ по варианту осуществления 129 или варианту осуществления 130, в котором IL4/IL13-индуцированное состояние представляет собой зуд или аллергическое состояние.
Вариант осуществления 132. Способ по любому из вариантов осуществления 129-131, в котором IL4/IL13-индуцированное состояние выбирают из атопического дерматита, аллергического дерматита, зуда, астмы, псориаза, склеродермии и экземы.
Вариант осуществления 133. Способ по любому из вариантов осуществления 129-132, в котором антитело или фармацевтическую композицию вводят парентерально.
Вариант осуществления 134. Способ по любому из вариантов осуществления 129-133, в котором антитело или фармацевтическую композицию вводят внутримышечно, внутрибрюшинно, интрацереброспинально, подкожно, внутриартериально, интрасиновиально, интратекально или путем ингаляции.
Вариант осуществления 135. Способ по любому из вариантов осуществления 129-134, включающий введение антитела или фармацевтической композицией в комбинации с ингибитором Jak, ингибитором PI3K, ингибитором ERK.
Вариант осуществления 136. Способ по любому из вариантов осуществления 129-135, включающий введение антитела или фармацевтической композицией в комбинации с одним или более из антител, выбранных из анти-IL17 антитела, анти-IL31 антитела, анти-TNFα антитела, анти-CD20 антитела, анти-CD19 антитела, анти-CD25 антитела, анти-IL4 антитела, анти-IL13 антитела, анти-IL23 антитела, анти-IgE антитела, анти-CD11α антитела, анти-IL6R антитела, антитела к α4-интергрину, анти-IL12 антитела, анти-IL1β антитела и анти-BlyS антитела.
Вариант осуществления 137. Способ ослабления сигнальной функции IL4 и/или IL13 в клетке, включающий воздействие на клетку антитела по любому из вариантов осуществления 1-123 или фармацевтической композиции по варианту осуществления 64 в условиях, допускающих связывание антитела с внеклеточным IL4 и/или IL13, тем самым уменьшая связывание IL4 и/или IL13 с рецептором IL4R и/или ослабляя сигнальную функцию IL4 и/или IL13 в клетке.
Вариант осуществления 138. Способ по варианту осуществления 137, в котором на клетку воздействуют антителом или фармацевтической композицией ex vivo.
Вариант осуществления 139. Способ по варианту осуществления 138, в котором на клетку воздействуют антителом или фармацевтической композицией in vivo.
Вариант осуществления 140. Способ по любому из вариантов осуществления 137-139, в котором клетка представляет собой собачью клетку, клетку кошки или клетку лошади.
Вариант осуществления 141. Способ по любому из вариантов осуществления 137-140, в котором антитело ослабляет передачу сигнала IL4 и/или IL13 в клетке, что определяют по уменьшению фосфорилирования STAT6.
Вариант осуществления 142. Способ по любому из вариантов осуществления 137-141, в котором клетка представляет собой клетку DH82 собаки.
Вариант осуществления 143. Способ детектирования IL4R в образце, полученном от представителя вида животного-компаньона, включающий приведение образца в контакт с антителом по любому из вариантов осуществления 1-123 или фармацевтической композицией по варианту осуществления 128 в условиях, допускающих связывание антитела с IL4R.
Вариант осуществления 144. Способ по варианту осуществления 141, в котором образец представляет собой биологический образец, полученный от представителя семейства псовых, кошачьих или лошадиных.
Вариант осуществления 145. Способ скрининга молекулы, которая ингибирует сигнальную функцию IL4 и/или IL13, включающий воздействие указанной молекулы на клетку DH82 собаки и определение, происходит ли уменьшение фосфорилирования STAT6.
Вариант осуществления 146. Способ по варианту осуществления 145, в котором молекула содержит анти-IL4R антитело или низкомолекулярный антагонист IL4R.
Вариант осуществления 147. Способ по варианту осуществления 145 или варианту осуществления 146, в котором молекула содержит анти-IL13R антитело или низкомолекулярный антагонист IL13R.
Вариант осуществления 148. Способ по любому из вариантов осуществления 145-147, в котором молекула содержит анти-IL4 антитело или низкомолекулярный антагонист IL4.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ РИСУНКОВ
[0004] На фиг. 1 приведено сравнение аминокислотных последовательностей тяжелой и легкой цепей клона B и клона I мышиных моноклональных антител.
[0005] На фиг. 2A и 2B представлены графики результатов анализа конкурентного связывания эпитопа собачьего IL4R с клоном B, затем с клоном I (фиг. 2A) и с клоном I, затем с клоном B.
[0006] На фиг. 3A, 3B, 3C и 3D представлены графики результатов анализа конкурентного связывания собачьего IL4R с клоном B или клоном I, затем с собачьим IL4 (фиг. 3A); с клоном B или клоном I, затем с собачьим IL13 (фиг. 3B); с собачьим IL4, затем с клоном B или клоном I (фиг. 3C); и с собачьим IL13, затем с клоном B или клоном I (фиг. 3D).
[0007] На фиг. 4A и 4B представлены иммуноблоты полипептидов ECD IL4R кошки, лошади, мыши, человека и собаки, зондированные клоном I (фиг. 4A) и антителом к человеческому Fc-фрагменту в качестве контроля (фиг. 4B) в неденатурирующих условиях (-DTT, левая панель) и денатурирующих условиях (+DTT, правая панель).
[0008] На фиг. 5А показаны гибридные полипептиды ECD IL4R собаки/человека, используемые для анализа картирования эпитопов собачьего IL4R. На фиг. 5B и 5C представлены иммуноблоты ECD собачьего IL4R, ECD человеческого IL4R и различных гибридных полипептидов ECD IL4R собаки/человека, показанных на фиг. 5A, зондированные клоном I (фиг. 5B) и антителом к человеческому Fc-фрагменту в качестве контроля (фиг. 5C).
[0009] На фиг. 6А показаны гибридные полипептиды ECD IL4R собаки/человека, используемые для дополнительных анализов картирования эпитопов собачьего IL4R. На фиг. 6B и 6C представлены иммуноблоты ECD собачьего IL4R, ECD человеческого IL4R и различных гибридных полипептидов ECD IL4R собаки/человека, показанных на 6A, зондированные клоном I (фиг. 6B) и антителом к человеческому Fc-фрагменту в качестве контроля (фиг. 6C).
[0010] На фиг. 7А представлена идентификация аланиновых мутантных полипептидов ECD собачьего IL4R, дополнительно описанных в таблице 1, которые были использованы для дополнительных анализов картирования эпитопа собачьего IL4R. На фиг. 7B и 7C представлены иммуноблоты ECD человеческого IL4R, ECD собачьего IL4R и различных аланиновых мутантных полипептидов ECD собачьего IL4R, зондированные клоном I (фиг. 7B) и антителом к человеческому Fc-фрагменту в качестве контроля (фиг. 7C).
[0011] На фиг. 8 представлена трехмерная модель комплекса собачьего IL4, ECD собачьего IL4R и ECD собачьего IL13R. Первый эпитоп обозначен стрелкой.
[0012] На фиг. 9А показаны гибридные полипептиды ECD IL4R собаки/человека, используемые для анализа картирования эпитопов собачьего IL4R. На фиг. 9B суммированы результаты вестерн-блоттинга ECD собачьего IL4R, ECD человеческого IL4R и различных гибридных полипептидов ECD IL4R собаки/человека, зондированные антителами M3, M8 и M9.
ОПИСАНИЕ НЕКОТОРЫХ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ
[0013] В таблице 1 предоставлен список некоторых последовательностей, упомянутых в настоящем описании.
где X1 представляет собой K или A, X2 представляет собой K или A, X3 представляет собой F или V, и X4 представляет собой K или Q
где X1 представляет собой K или A
где X5 представляет собой N или Y, и X6 представляет собой I или F
где X7 представляет собой T или N, X8 представляет собой R или L, и X9 представляет собой S или T
(химерная B HC)
(Химерная B LC)
(Химерная I HC)
(Химерная I LC)
C1q-, CD16-
C1q-, CD16-
C1q-, CD16-
C1q-, CD16-
C1q-, CD16-
где X10 представляет собой D или N, и X11 представляет собой H или R
(минимальная последовательность)
где X10 представляет собой D или N, и X11 представляет собой H или R
(расширенная последовательность)
где X12 представляет собой P или L, X13 представляет собой I или M, X14 представляет собой A или F, X15 представляет собой D или H, и X16 представляет собой Q или T
NCBI эталонная последовательность: XP_0139700003.1
Изоформа X1 субъединицы альфа рецептора интерлейкина-4 [Canis lupus familiaris]
NCBI эталонная последовательность:
XP_023102076.1
Субъединица альфа рецептора интерлейкина-4 [Felis catus]
NCBI эталонная последовательность:
NP_001075243.1
предшественник альфа рецептора интерлейкина-4 [Equus caballus]
NCBI эталонная последовательность:
NP_001008700.1
Предшественник изоформы 1 субъединицы альфа рецептора интерлейкина-4 [Mus musculus]
NCBI эталонная последовательность:
NP_000409.1
Предшественник изоформы субъединицы альфа рецептора интерлейкина-4 [Homo sapiens]
NCBI Ref:
NP_001003159.1
UniProtKB/Swiss-Prot Ref: P55030.1
NCBI Ref: NP_001075988.1
NCBI Ref:
NP_001003159.1
NCBI Ref:
NP_001036804.1
NCBI Ref:
XP_008536927.1
(гибрид 1)
ECD собачьего IL4R G1-N55 (жирный шрифт)
ECD IL4R человеческого N56-H209 (курсив)
человеческий Fc_His6 (подчеркнутый)
(гибрид 2)
ECD человеческого IL4R G1-N55 и T110-H209 (курсив)
ECD собачьего IL4R R56-H109 (жирный шрифт)
человеческий Fc_His6 (подчеркнутый)
(гибрид 3)
ECD человеческого IL4R G1-H109 (курсив)
ECD собачьего IL4R P110-P204 (жирный шрифт)
человеческий Fc_His6 (подчеркнутый)
(гибрид 4)
ECD собачьего IL4R G1-H109 (жирный шрифт)
ECD человеческого IL4R T110-H209 (курсив)
человеческий Fc_His6 (подчеркнутый)
(гибрид 5)
ECD человеческого IL4R G1-N55 (курсив)
ECD собачьего IL4R R56-P204 (жирный шрифт)
человеческий Fc_His6 (подчеркнутый)
(гибрид 6)
ECD собачьего IL4R G1-N55, P110-P204 (жирный шрифт)
ECD человеческого IL4R N56-H109 (курсив)
человеческий Fc_His6 (подчеркнутый)
(гибрид 7)
ECD человеческого IL4R G1-N30 (курсив)
ECD собачьего IL4R C31-P204 (жирный шрифт)
человеческий Fc_His6 (подчеркнутый)
(гибрид 8)
ECD собачьего IL4R G1-N30 и R56-P204 (жирный шрифт)
ECD человеческого IL4R C31-N55 (курсив)
человеческий Fc_His6 (подчеркнутый)
(гибрид 9)
ECD собачьего IL4R G1-N30 и D42-P204 (жирный шрифт)
ECD человеческого IL4R C31-L41 (курсив)
человеческий Fc_His6 (подчеркнутый)
(гибрид 10)
ECD собачьего IL4R G1-L41 и R56-P204 (жирный шрифт)
ECD человеческого IL4R V42-N55 (курсив)
человеческий Fc_His6 (подчеркнутый)
(гибрид 11)
ECD собачьего IL4R G1-N55 и E72-P204 (жирный шрифт)
ECD человеческого IL4R N56-V71 (курсив)
человеческий Fc_His6 (подчеркнутый)
(гибрид 12)
ECD собачьего IL4R G1-V71 и G90-P204 (жирный шрифт)
ECD человеческого IL4R S72-K89 (курсив)
человеческий Fc_His6 (подчеркнутый)
(гибрид 13)
ECD собачьего IL4R G1-S89 и P110-P204 (жирный шрифт)
ECD человеческого IL4R G90-H109 (курсив)
человеческий Fc_His6 (подчеркнутый)
(гибрид 14)
ECD собачьего IL4R G1-I67 и S95-P204 (жирный шрифт)
ECD человеческого IL4R D68-P94 (курсив)
человеческий Fc_His6 (подчеркнутый)
(Мутант 1)
(Мутант 2)
(Мутант 3)
(Мутант 4)
(Мутант 5)
(Мутант 6)
(Мутант 7)
NCBI Ref: NP_001003384
NCBI Ref:
XP_006927648
NCBI Ref: XP_538150.3
Белок A-
C1q-
CD16-
Белок A+
C1q+
CD16+
Белок A+
C1q+
CD16+
Белок A-
C1q+
CD16+
Белок A-
C1q+
CD16+
Белок A-
C1q-
CD16-
C1q-
Белок A+
I(21)T
R(23)L
T(25)A
E(80)G
T(205)A
Q(207)H
C1q-
Белок A+
I(21)T
Q(207)H
Белок A+
C1q-
K(93)R
Белок A+
C1q+
CD16-
M(5)P
Белок A+
C1q+
CD16-
P(39)R
Белок A+
C1q+
CD16-
D(38)G
Белок A+
C1q+
CD16-
K(97)I
Белок A+
C1q+
CD16-
A(98)G
Белок A+
C1q+
CD16-
D(38)G
K(97)I
A(98)G
Белок A+
C1q-
CD16-
D(38)G
K(93)R
K(97)I
A(98)G
Белок A+
C1q+
CD16-
M(5)P
P(39)R
Белок A+
C1q-
CD16-
M(5)P
P(39)R
K(93)R
C1q+
Белок A+
I(21)T
V(23)L
T(24)I
C1q+
Белок A+
I(21)T
Белок A-
C1q-
K(93)R
C1q-
K(93)R
Белок A+
I(21)T
V(23)L
T(24)I
Белок A+
C1q+
CD16-
L(5)P
Белок A+
C1q+
CD16-
P(39)R
Белок A+
C1q+
CD16-
D(38)G
Белок A+
C1q+
CD16-
K(97)I
Белок A+
C1q+
CD16-
A(98)G
Белок A+
C1q+
CD16-
D(38)G
K(97)I
A(98)G
Белок A+
C1q-
CD16-
D(38)G
K(93)R
K(97)I
A(98)G
Белок A+
C1q+
CD16-
L(5)P
P(39)R
Белок A+
C1q-
CD16-
M(5)P
P(39)R
K(93)R
C1q-
Белок A+
I(21)T
R(23)L
T(25)A
E(80)G
Q(207)H
C1q-
Белок A+
I(21)T
Q(207)H
Биспецифический выступ
T(138)W
Биспецифический выступ
T(137)W
Биспецифический выступ
T(137)W
Биспецифический выступ
T(138)W
Биспецифическая впадина
T(138)S
L(140)A
Биспецифическая впадина
T(137)S
L(139)A
Биспецифическая впадина
T(137)S
L(139)A
Биспецифическая впадина
T(138)S
L(140)A
Белок A+
C1q+
Белок A+
C1q+
Белок A+
C1q+
Белок A+
C1q+
Белок A+
C1q-
K(16)P
Белок A+
C1q-
P(198)A
Белок A+
C1q-
P(198)A
K(16)P
Белок A+
C1q-
P(198)A
Белок A+
C1q-
P(198)A
Cys шарнирной области
G(14)C
K(16)P
Биспецифический выступ
T(154)W
Биспецифический выступ
T(154)W
Биспецифический выступ
T(154)W
Биспецифический выступ
T(154)W
Биспецифический выступ
T(154)W
Биспецифическая впадина
T(154)S L(156)A
Биспецифическая впадина
T(154)S
L(156)A
Биспецифическая впадина
T(154)S
L(156)A
Биспецифическая впадина
T(154)S
L(156)A
Биспецифическая впадина
T(154)S
L(156)A
A(24)L
S(30)D
A(24)L
S(30)D
A(24)L
S(30)D
A(24)L
S(30)D
F(11)A
S(22)R
A(24)L
S(30)D
A(24)L
S(29)D
F(11)A
S(22)R
C1q-
CD16-
Биспецифический выступ
вариант CH1
C1q-
CD16-
Биспецифическая впадина
Биспецифический выступ
T(130)W
Биспецифический выступ
T(130)W
Биспецифический выступ
T(130)W
Биспецифический выступ
T(130)W
Биспецифический выступ
T(130)W
Биспецифический выступ
T(130)W
Биспецифический выступ
T(130)W
Биспецифическая впадина
T(130)S
L(132)A
Биспецифическая впадина
T(130)S
L(132)A
Биспецифическая впадина
T(130)S
L(132)A
Биспецифическая впадина
T(130)S
L(132)A
Биспецифическая впадина
T(130)S
L(132)A
Биспецифическая впадина
T(130)S
L(132)A
Биспецифическая впадина
T(130)S
L(132)A
вариант собачьего IgG-B
C1q-, CD16-
C1q-, CD16-
C1q-, CD16-
C1q-, CD16-
ОПИСАНИЕ НЕКОТОРЫХ ВАРИАНТОВ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ
[0014] Представлены антитела, которые связываются с собачьим IL4R и/или кошачьим IL4R. Также представлены тяжелые цепи и легкие цепи антител, которые способны образовывать антитела, связывающиеся с IL4R. Кроме того, представлены антитела, тяжелые цепи и легкие цепи, содержащие одну или более конкретных определяющих комплементарность областей (CDR). Представлены полинуклеотиды, кодирующие антитела к собачьему или кошачьему IL4R. Также представлены способы получения или очистки антител к собачьему или кошачьему IL4R. Представлены способы лечения с помощью антител к собачьему или кошачьему IL4/IL13. Такие способы включают, без ограничения, способы лечения IL4-индуцированных состояний и/или IL13-индуцированных состояний у видов животных-компаньонов. Предлагаются способы детектирования растворимого IL4R в образце, полученном от представителя вида животного-компаньона. Также представлены способы скрининга молекул, которые ингибируют сигнальную функцию IL4 и/или IL13 (например, анти-IL4R, анти-IL13R, анти-IL4 и анти-IL13 антитела, а также низкомолекулярные антагонисты IL4R, IL13R, IL4 и IL13).
[0015] Также представлены варианты полипептидов Fc IgG животных-компаньонов, таких как представители семейств псовых и кошачьих, имеющие повышенное связывание с белком А, пониженное связывание с C1q, пониженное связывание с CD16, повышенную стабильность, повышенное рекомбинантное продуцирование и/или повышенное образование дисульфидных связей в шарнирной области, которые можно использовать в контексте антител к собачьему или кошачьему IL4R, представленных в настоящем описании. Кроме того, в настоящем описании представлены варианты полипептидов Fc IgG и варианты константных областей легкой цепи животных-компаньонов, таких как представители семейств псовых, кошачьих и лошадиных, для получения биспецифических антител, включая анти-IL4R антитела. В некоторых вариантах осуществления анти-IL4R антитела или фрагменты антител содержат вариант полипептида Fc IgG или вариант константной области легкой цепи. Представлены способы получения анти-IL4R антител и биспецифических антител, включающих варианты полипептидов Fc IgG.
[0016] Представлены новые антитела, направленные против IL4R, например антитела, которые связываются с собачьим или кошачьим IL4R. Представленные в настоящем описании анти-IL4R антитела включают, без ограничения, моноклональные антитела, мышиные антитела, химерные антитела, канинизированные антитела, фелинизированные антитела и биспецифические антитела. В некоторых вариантах осуществления анти-IL4R антитело представляет собой выделенное мышиное моноклональное антитело, такое как клон B, клон I, M3, M5, M8 или M9.
[0017] После иммунизации мышей собачьим IL4R получали клоны гибридомных клеток с помощью стандартной гибридомной технологии. После скрининга с помощью иммуноферментного анализа (ELISA), анализов сродства связывания и анализа нейтрализации in vitro для дальнейшего исследования отбирали моноклональные антитела клона B, клона I, M3, M5, M8 и M9. Тяжелую и легкую цепи клона B и клона I секвенировали и анализировали путем выравнивания последовательностей (фиг. 1; SEQ ID NO:27 (HC клона B), SEQ ID NO:28 (LC клона B), SEQ ID NO:49 (HC клона I) и SEQ ID NO:50 (LC клона I)). Также секвенировали вариабельные области тяжелой (VH) и вариабельные области легкой (VL) цепей M3, M5, M8 и M9 (SEQ ID NO:292 (VH M3), SEQ ID NO:293 (VL M3), SEQ ID NO:308 (VH M5), SEQ ID NO:309 (VL M5), SEQ ID NO:324 (VH M8), SEQ ID NO:325 (VL M8), SEQ ID NO:340 (VH M9) и SEQ ID NO:341 (VL M9).
[0018] В настоящем описании также представлены аминокислотные последовательности клона B и клона I моноклонального антитела. Примеры консенсусных последовательностей CDR идентифицировали как CDR-H1: GYTFTSYVMH (SEQ ID NO:1); CDR-H2: YINPX1NDGTFYNGX2X3X4G (SEQ ID NO:2), где X1 представляет собой K или A, X2 представляет собой K или A, X3 представляет собой F или V, и X4 представляет собой K или Q, или YINPX1NDGT (SEQ ID NO:268), где X1 представляет собой K или A; CDR-H3: FX5YGX6AY (SEQ ID NO:3), где X5 представляет собой N или Y, и X6 представляет собой I или F; CDR-L1: RASQEISGYLS (SEQ ID NO:4); CDR-L2: AASX7X8DX9 (SEQ ID NO:5), где X7 представляет собой T или N, X8 представляет собой R или L, и X9 представляет собой S или T; и CDR-L3: VQYASYPWT (SEQ ID NO:6).
[0019] Кроме того, представлены, например, CDR вариабельной области тяжелой цепи (SEQ ID NO:7, SEQ ID NO:8, SEQ ID NO:269 и SEQ ID NO:9), CDR вариабельной области легкой цепи (SEQ ID NO:14, SEQ ID NO:15 и SEQ ID NO:16), каркасные последовательности вариабельной области тяжелой цепи (SEQ ID NO:10, SEQ ID NO:11, SEQ ID NO:12, SEQ ID NO:270 и SEQ ID NO:13) и каркасные последовательности вариабельной области легкой цепи (SEQ ID NO:17, SEQ ID NO:18, SEQ ID NO:19 и SEQ ID NO:20) для клона B моноклонального антитела. Аминокислотные последовательности вариабельной области тяжелой цепи и вариабельной области легкой цепи клона В моноклонального антитела представлены с лидерной последовательностью или без нее (SEQ ID NO:21, SEQ ID NO:22, SEQ ID NO:23 и SEQ ID NO:24). Аминокислотные последовательности тяжелой цепи и легкой цепи клона B представлены с лидерной последовательностью или без нее (SEQ ID NO:25, SEQ ID NO:26, SEQ ID NO:27 и SEQ ID NO:28).
[0020] В качестве другого примера, представлены CDR вариабельной области тяжелой цепи (SEQ ID NO:29, SEQ ID NO:30, SEQ ID NO:271, SEQ ID NO:272 и SEQ ID NO:31), CDR вариабельной области легкой цепи (SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:37 и SEQ ID NO:38), каркасные последовательности вариабельной области тяжелой цепи (SEQ ID NO:32, SEQ ID NO:33, SEQ ID NO:34, SEQ ID NO:273 и SEQ ID NO:35), а также каркасные последовательности вариабельной области легкой цепи (SEQ ID NO:39, SEQ ID NO:40, SEQ ID NO:41 и SEQ ID NO:42) для клона I моноклонального антитела. Аминокислотные последовательности вариабельной области тяжелой цепи и вариабельной области легкой цепи клона I моноклонального антитела представлены с лидерной последовательностью или без нее (SEQ ID NO:43, SEQ ID NO:44, SEQ ID NO:45 и SEQ ID NO:46). Аминокислотные последовательности тяжелой цепи и легкой цепи клона I представлены с лидерной последовательностью или без нее (SEQ ID NO:47, SEQ ID NO:48, SEQ ID NO:49 и SEQ ID NO:50).
[0021] В качестве дополнительного примера, представлены CDR вариабельной области тяжелой цепи (SEQ ID NO:278, SEQ ID NO:279, SEQ ID NO:280), CDR вариабельной области легкой цепи (SEQ ID NO:285, SEQ ID NO:286 и SEQ ID NO:287), каркасные последовательности вариабельной области тяжелой цепи (SEQ ID NO:281-284) и каркасные последовательности вариабельной области легкой цепи (SEQ ID NO:288-291) для M3.
[0022] В качестве другого примера, представлены CDR вариабельной области тяжелой цепи (SEQ ID NO:294, SEQ ID NO:295, SEQ ID NO:296), CDR вариабельной области легкой цепи (SEQ ID NO:301, SEQ ID NO:302 и SEQ ID NO:303), каркасные последовательности вариабельной области тяжелой цепи (SEQ ID NO:297-300) и каркасные последовательности вариабельной области легкой цепи (SEQ ID NO:304-307) для M5.
[0023] Далее, в качестве примеров в настоящем описании представлены CDR вариабельной области тяжелой цепи (SEQ ID NO:310, SEQ ID NO:311, SEQ ID NO:312), CDR вариабельной области легкой цепи (SEQ ID NO:317, SEQ ID NO:318 и SEQ ID NO:319), каркасные последовательности вариабельной области тяжелой цепи (SEQ ID NO:313-316) и каркасные последовательности вариабельной области легкой цепи (SEQ ID NO:320-323) для M8.
[0024] В настоящем описании также представлены примеры CDR вариабельной области тяжелой цепи (SEQ ID NO:326, SEQ ID NO:327, SEQ ID NO:328), CDR вариабельной области легкой цепи (SEQ ID NO:333, SEQ ID NO:334 и SEQ ID NO:335), каркасные последовательности вариабельной области тяжелой цепи (SEQ ID NO:329-332) и каркасные последовательности вариабельной области легкой цепи (SEQ ID NO:336-339) для M9.
[0025] В настоящем описании также представлены химерные, канинизированные и фелинизированные антитела, полученные из моноклональных антител клона B, клона I, M3, M5, M8 и M9. В некоторых вариантах осуществления представлены аминокислотные последовательности химерных антител, полученных из клона B, такие как SEQ ID NO:51, SEQ ID NO:52, SEQ ID NO:53 и SEQ ID NO:54, в некоторых вариантах осуществления представлены аминокислотные последовательности химерных антител, полученные из клона I, такие как SEQ ID NO:55, SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:57 и SEQ ID NO:58. В некоторых вариантах осуществления представлены аминокислотные последовательности канинизированного клона B, такие как SEQ ID NO:59, SEQ ID NO:60, SEQ ID NO:61, SEQ ID NO:62, SEQ ID NO:71, SEQ ID NO:72, SEQ ID NO:73 и SEQ ID NO:74. В некоторых вариантах осуществления представлены аминокислотные последовательности канинизированного клона I, такие как SEQ ID NO:63, SEQ ID NO:64, SEQ ID NO:274, SEQ ID NO:65, SEQ ID NO:66, SEQ ID NO:275, SEQ ID NO:75, SEQ ID NO:76, SEQ ID NO:276, SEQ ID NO:77, SEQ ID NO:78 и SEQ ID NO:277. В некоторых вариантах осуществления представлены аминокислотные последовательности фелинизированных антител, полученных из клона B, такие как SEQ ID NO:67, SEQ ID NO:68, SEQ ID NO:79, SEQ ID NO:80 и S EQ ID NO: 81. В некоторых вариантах осуществления представлены аминокислотные последовательности фелинизированных антител, полученных из клона I, такие как SEQ ID NO:69, SEQ ID NO:70, SEQ ID NO:82, SEQ ID NO:83 и SEQ ID NO:84. В некоторых вариантах осуществления представлены аминокислотные последовательности канинизированных антител, полученных из M3, такие как SEQ ID NO:342, SEQ ID NO:343, SEQ ID NO:344, SEQ ID NO:348, SEQ ID. NO: 349 и SEQ ID NO:350. В некоторых вариантах осуществления представлены аминокислотные последовательности канинизированных антител, полученных из M9, такие как SEQ ID NO:345, SEQ ID NO:346, SEQ ID NO:347, SEQ ID NO:351, SEQ ID NO:352 и SEQ ID NO:353.
[0026] Используемые в настоящем описании численные величины, такие как Kd, вычислены на основе научных измерений и, таким образом, имеют соответствующую ошибку измерения. В некоторых случаях численная величина может включать числовые значения, округленные до ближайшего значащего числа.
[0027] В контексте настоящего описания единственное число означает «по меньшей мере один» или «один или более», если не указано иное. Используемый в настоящем описании термин «или» означает «и/или», если не указано иное. В контексте зависимого пункта многозвенной формулы изобретения использование «или» при обратной отсылке на другие пункты формулы относится только к этим пунктам формулы в качестве альтернативы.
[0028] Термин «антитело» в настоящем описании используется в самом широком смысле и охватывает различные структуры антител, включая, без ограничения, моноклональные антитела, поликлональные антитела, полиспецифические антитела (например, биспецифические (такие как биспецифические рекрутеры Т-клеток) и триспецифические антитела) и фрагменты антител (такие как Fab, F(ab')2, ScFv, мини-тела, диатела, тритела и тетратела) при условии, что они проявляют требуемую антигенсвязывающую активность. Собаки, кошки и лошади имеют разные разновидности (классы) антител, которые являются общими для многих млекопитающих.
[0029] Термин антитело включает, без ограничения, фрагменты, которые способны связываться с антигеном, такие как Fv, одноцепочечный Fv (scFv), Fab, Fab', di-scFv, sdAb (однодоменное антитело) и (Fab')2 (включая химически связанный F(ab')2). Расщепление антител папаином дает два идентичных антигенсвязывающих фрагмента, называемых «Fab»-фрагментами, каждый из них содержит один антигенсвязывающий участок, и остаточный «Fc»-фрагмент, название которого отражает его способность легко кристаллизоваться. Обработка пепсином дает фрагмент F(ab’)2, который имеет два антигенсвязывающих участка и который все еще способен перекрестно связываться с антигеном. Термин антитело также включает, без ограничения, химерные антитела, гуманизированные антитела и антитела различных видов, таких как мышь, человек, яванский макак, собака, кошка, лошадь и т.д. Кроме того, для всех представленных в настоящем описании конструкций антител также подразумеваются варианты, содержащие последовательности от других организмов. Таким образом, если раскрыта мышиная версия антитела, специалист в данной области поймет, как преобразовать антитело на основе мышиной последовательности в последовательность кошки, собаки, лошади и т.д. Фрагменты антител также включают любую ориентацию одноцепочечных scFv, тандемных ди-scFv, диател, тандемных три-sdcFv, мини-тел и т.д. Фрагменты антител также включают нанотела (sdAb, антитела, имеющие один мономерный домен, такой как пара вариабельных доменов тяжелых цепей, без легкой цепи). В некоторых вариантах осуществления фрагмент антитела может упоминаться как являющийся видоспецифическим (например, scFv мыши или scFv собаки). Это означает не источник конструкции, а последовательности, по меньшей мере части областей, которые не являются CDR. В некоторых вариантах осуществления антитела содержат метку или конъюгированы со вторым фрагментом.
[0030] Термины «метка» и «детектируемая метка» означают фрагмент, присоединенный к антителу или его аналиту, позволяя таким образом детектировать результаты реакции (например, связывания) между членами пары специфического связывания. Меченый член пары специфического связывания называется «детектируемо меченым». Таким образом, термин «меченый связывающий белок» относится к белку с включенной меткой, которая позволяет идентифицировать связывающий белок. В некоторых вариантах осуществления метка представляет собой детектируемый маркер, который может генерировать сигнал, детектируемый визуальными или инструментальными средствами, например, путем включения радиоактивно меченой аминокислоты или присоединения к полипептиду биотинильных фрагментов, которые могут быть обнаружены меченным авидином (например, стрептавидином, содержащим флуоресцентный маркер или ферментативную активность, которая может быть обнаружена оптическими или колориметрическими методами). Примеры меток для полипептидов включают, без ограничения, следующие: радиоизотопы или радионуклиды (например, 3H, 14C, 35S, 90Y, 99Tc, 111In, 125I, 131I, 177Lu, 166Ho или 153Sm); хромогены, флуоресцентные метки (например, FITC, родамин, люминофоры лантаноидов), ферментативные метки (например, пероксидаза хрена, люцифераза, щелочная фосфатаза); хемилюминесцентные маркеры; биотинильные группы; предопределенные полипептидные эпитопы, распознаваемые вторичным репортером (например, последовательности пар лейциновой молнии, сайты связывания для вторичных антител, домены связывания металлов, эпитопные метки); и магнитные агенты, такие как хелаты гадолиния. Репрезентативные примеры меток, обычно используемых для иммуноанализов, включают фрагменты, которые генерируют свет, например соединения акридиния, и фрагменты, которые генерируют флуоресценцию, например флуоресцеин. В этом случае сам фрагмент может не быть меченным детектируемой меткой, но может стать детектируемым после реакции с еще одним фрагментом.
[0031] Термин «моноклональное антитело» относится к антителу из практически однородной популяции антител, т.е. отдельные антитела, составляющие популяцию, идентичны, за исключением возможных встречающихся в природе мутаций, которые могут присутствовать в незначительных количествах. Моноклональные антитела высокоспецифичны и направлены против одного антигенного участка. Кроме того, в отличие от препаратов поликлональных антител, которые обычно включают разные антитела, направленные против разных детерминант (эпитопов), каждое моноклональное антитело направлено против одной детерминанты антигена. Таким образом, образец моноклональных антител может связываться с одним и тем же эпитопом на антигене. Модификатор «моноклональное» указывает на характер антитела как полученного из по существу гомогенной популяции антител, и его не следует толковать как требующий получения антитела каким-либо конкретным способом. Например, моноклональные антитела могут быть получены гибридомным методом, впервые описанным Kohler and Milstein, 1975, Nature 256:495, или могут быть получены методами рекомбинантной ДНК, такими как описанные в патенте США № 4816567. Моноклональные антитела также могут быть выделены из фаговых библиотек, созданных с помощью методов, описанных, например, в McCafferty et al., 1990, Nature 348:552-554.
[0032] В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело представляет собой выделенное мышиное антитело, выбранное из клона B, клона I, M3, M5, M8 и M9.
[0033] «Аминокислотная последовательность» означает последовательность аминокислотных остатков в пептиде или белке. Термины «полипептид» и «белок» используются взаимозаменяемо для обозначения полимера, состоящего из аминокислотных остатков, и не ограничены минимальной длиной. Такие полимеры аминокислотных остатков могут содержать природные или неприродные аминокислотные остатки и включают, без ограничения, пептиды, олигопептиды, димеры, тримеры и мультимеры аминокислотных остатков. Это определение охватывает как полноразмерные белки, так и их фрагменты. Термины также включают постэкспрессионные модификации полипептида, например гликозилирование, сиалирование, ацетилирование, фосфорилирование и т.п. Кроме того, для целей настоящего изобретения «полипептид» относится к белку, который включает модификации, такие как делеции, добавления и замены (обычно консервативные по природе), в нативной последовательности при условии, что белок сохраняет требуемую активность. Эти модификации могут быть преднамеренными, например, введенными посредством сайт-направленного мутагенеза, или могут быть случайными, например, в результате мутаций хозяев, которые продуцируют белки, или ошибок, возникающих в результате ПЦР амплификации.
[0034] В контексте настоящего описания «процент (%) идентичности аминокислотной последовательности» и «гомология» по отношению к последовательности пептида, полипептида или антитела определяют как процент аминокислотных остатков в последовательности-кандидате, которые идентичны аминокислотным остаткам в конкретной пептидной или полипептидной последовательности после выравнивания последовательностей и введения пробелов, если это необходимо для достижения максимального процента идентичности последовательностей, и без учета каких-либо консервативных замен как части идентичности последовательностей. Выравнивание для определения процента идентичности аминокислотной последовательности может быть достигнуто различными способами, которые известны специалистам в данной области, например, с помощью общедоступного компьютерного программного обеспечения, такого как программное обеспечение BLAST, BLAST-2, ALIGN или MEGALINEТМ (DNASTAR). Специалисты в данной области могут определить подходящие параметры для измерения выравнивания, включая любые алгоритмы, необходимые для достижения максимального выравнивания по всей длине сравниваемых последовательностей.
[0035] В некоторых вариантах осуществления вариант имеет по меньшей мере примерно 50% идентичности последовательности с эталонной молекулой нуклеиновой кислоты или полипептидом после выравнивания последовательностей и введения пробелов, если необходимо для достижения максимального процента идентичности последовательностей, и без учета каких-либо консервативных замен как части идентичности последовательности. Такие варианты включают, например, полипептиды, в которых один или более аминокислотных остатков добавлены, удалены на N- или C-конце полипептида. В некоторых вариантах осуществления вариант имеет по меньшей мере примерно 50% идентичности последовательности, по меньшей мере примерно 60% идентичности последовательности, по меньшей мере примерно 65% идентичности последовательности, по меньшей мере примерно 70% идентичности последовательности, по меньшей мере примерно 75% идентичности последовательности, по меньшей мере примерно 80% идентичности последовательности, по меньшей мере примерно 85% идентичности последовательности, по меньшей мере примерно 90% идентичности последовательности, по меньшей мере примерно 95% идентичности последовательности, по меньшей мере примерно 97% идентичности последовательности, по меньшей мере примерно 98% идентичности последовательности или по меньшей мере примерно 99% идентичности последовательности с последовательностью эталонной нуклеиновой кислоты или полипептида.
[0036] «Точечная мутация» представляет собой мутацию, которая включает единственный аминокислотный остаток. Мутация может представлять собой потерю аминокислоты, замену одного аминокислотного остатка на другой или вставку дополнительного аминокислотного остатка.
[0037] «Аминокислотная замена» относится к замене одной аминокислоты в полипептиде другой аминокислотой. В некоторых вариантах осуществления аминокислотная замена представляет собой консервативную замену. Неограничивающие иллюстративные консервативные аминокислотные замены показаны в таблице 2. Аминокислотные замены могут быть введены в представляющую интерес молекулу, и продукты могут быть подвергнуты скринингу на наличие требуемой активности, например сохранение/улучшение связывания антигена, снижение иммуногенности, улучшение ADCC или CDC, повышение уровня рекомбинантного продуцирования и/или улучшение фармакокинетических характеристик.
[0038] Таблица 2
[0039] Аминокислоты можно сгруппировать в соответствии с общими свойствами боковой цепи:
(1) гидрофобные: норлейцин, Met, Ala, Val, Leu, Ile;
(2) нейтральные гидрофильные: Cys, Ser, Thr, Asn, Gln;
(3) кислые: Asp, Glu;
(4) основные: His, Lys, Arg;
(5) остатки, влияющие на ориентацию цепи: Gly, Pro;
(6) ароматические: Trp, Tyr, Phe.
[0040] Неконсервативные замены повлекут за собой замену члена одного из этих классов другим классом.
[0041] «Производное аминокислоты» в контексте настоящего описания относится к любой аминокислоте, модифицированной аминокислоте и/или аналогу аминокислоты, которые не являются одной из 20 обычных природных аминокислот, встречающихся у людей. Примеры производных аминокислот включают природные аминокислоты, не встречающиеся у человека (например, селеноцистеин и пирролизин, которые могут быть обнаружены в некоторых микроорганизмах) и неприродные аминокислоты. Примеры производных аминокислот включают, без ограничения, производные аминокислот, коммерчески доступные у производителей химических продуктов (например, sigmaaldrich.com/chemistry/chemistry-products.html?TablePage=16274965, по состоянию на 6 мая 2017 г., включено в настоящее описание в качестве ссылки). В конкретное место в полипептиде могут быть включены одно или более производных аминокислот с помощью системы трансляции, в которой используются клетки-хозяева, ортогональные аминоацил-тРНК-синтетазы, полученные из эубактериальных синтетаз, ортогональные тРНК и производные аминокислоты. Дополнительное описание см., например, в патенте США № 9624485.
[0042] В некоторых вариантах осуществления полипептид содержит аминокислотную замену на производное аминокислоты. В некоторых вариантах осуществления производное аминокислоты представляет собой производное аланина, производное цистеина, производное аспарагиновой кислоты, производное глутаминовой кислоты, производное фенилаланина, производное глицина, производное гистидина, производное изолейцина, производное лизина, производное лейцина, производное метионина, производное аспарагина, производное пролина, производное глутамина, производное аргинина, производное серина, производное треонина, производное валина, производное триптофана или производное тирозина.
[0043] «IL4R» в контексте настоящего описания представляет собой полипептид, содержащий полноразмерную альфа-субъединицу рецептора IL4 или ее фрагмент, который связывается с IL4.
[0044] Например, «IL4R» относится к полипептиду IL4R, полученному из любого источника, относящегося к позвоночному животному, включая млекопитающих, таких как приматы (например, люди и яванские макаки), грызуны (например, мыши и крысы) и животные-компаньоны (например, собаки, кошки и лошади), если не указано иное. Этот термин также включает встречающиеся в природе варианты IL4R, например варианты сплайсинга или аллельные варианты, или искусственно созданные варианты IL4R, например, меченые полипептиды IL4R. В некоторых вариантах осуществления IL4R представляет собой фрагмент внеклеточного домена, который связывается с IL4. В некоторых таких вариантах осуществления IL4R может упоминаться как внеклеточный домен IL4R (ECD). В некоторых вариантах осуществления IL4R содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO:94, 95, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116 или 117.
[0045] В контексте настоящего описания «IL4» представляет собой полипептид, содержащий полноразмерный IL4 или его фрагмент, который связывается с IL4R.
[0046] Например, IL4 относится к полипептиду IL4, полученному из любого источника, относящегося к позвоночному животному, включая млекопитающих, таких как приматы (например, люди и яванские макаки), грызуны (например, мыши и крысы) и животные-компаньоны (например, собаки, кошки, и лошади), если не указано иное. Термин также включает встречающиеся в природе варианты IL4, например варианты сплайсинга или аллельные варианты, или искусственно созданные варианты IL4, например меченые полипептиды IL4. В некоторых вариантах осуществления IL4 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO:118, 119, 120, 121, 122 или 123 или ее процессированную версию. В некоторых вариантах осуществления IL4 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO:124, 125, 126, 127, 128, 129, 130 или 131.
[0047] В контексте настоящего описания «IL13» представляет собой полипептид, содержащий полноразмерный IL13 или его фрагмент, который связывается с IL4R.
[0048] Например, IL13 относится к полипептиду IL13, полученному из любого источника, относящегося к позвоночному животному, включая млекопитающих, таких как приматы (например, люди и яванские макаки), грызуны (например, мыши и крысы) и животные-компаньоны (например, собаки, кошки, и лошади), если не указано иное. Термин также включает встречающиеся в природе варианты IL13, например варианты сплайсинга или аллельные варианты, или искусственно созданные варианты IL13, например, меченые полипептиды IL13. В некоторых вариантах осуществления IL13 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO:154 или 155 или ее процессированную версию. В некоторых вариантах осуществления IL31 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO:156, 157, 158 или 159.
[0049] В контексте настоящего описания «IL13R» или «IL13Ra1» представляет собой полипептид, содержащий полноразмерный IL13R или его фрагмент, который спаривается с IL4R для связывания IL4 или IL13.
[0050] В контексте настоящего описания «рецептор гамма-С» представляет собой полипептид, содержащий полноразмерный рецептор общей гамма-цепи или его фрагмент, который спаривается с IL4R для связывания IL4.
[0051] Термин «IL4R-связывающий домен» антитела означает связывающий домен, образованный легкой цепью и тяжелой цепью анти-IL4R антитела, который связывается с IL4R.
[0052] В некоторых вариантах осуществления IL4R-связывающий домен связывается с собачьим IL4R с более высоким сродством, чем с человеческим IL4R. В некоторых вариантах осуществления IL4R-связывающий домен связывается с кошачьим IL4R.
[0053] В контексте настоящего описания термин «сигнальная функция IL4/IL13» относится к любому клеточному эффекту, который возникает, когда IL4 связывается с IL4R, спаренным с IL13R или рецептором Gamma C, или когда IL13 связывается с IL4R, спаренным с IL13R. Клеточные эффекты могут включать фосфорилирование STAT6, дифференцировку Т-хелперных клеток в Th2-клетки, активацию пролиферации В-клеток и/или Т-клеток и/или индукцию переключения класса В-клеток на IgE.
[0054] В контексте настоящего описания термин «эпитоп» относится к участку на молекуле-мишени (например, антигене, таком как белок, нуклеиновая кислота, углевод или липид), с которым связывается антигенсвязывающая молекула (например, (антитело, фрагмент антитела или каркасный белок, содержащий связывающие области антитела). Эпитопы часто включают химически активные поверхностные группы молекул, такие как аминокислоты, полипептиды или боковые сахарные цепи, и имеют определенные трехмерные структурные характеристики, а также специфические характеристики заряда. Эпитопы могут быть образованы как из смежных, так и из расположенных рядом несмежных остатков (например, аминокислот, нуклеотидов, сахаров, липидной части) молекулы-мишени. Эпитопы, образованные из смежных остатков (например, аминокислот, нуклеотидов, сахаров, липидной части), обычно сохраняются при воздействии денатурирующих растворителей, тогда как эпитопы, образованные в результате третичной укладки, обычно теряются при обработке денатурирующими растворителями. Эпитоп может включать, без ограничения, по меньшей мере 3, по меньшей мере 5 или 8-10 остатков (например, аминокислотных или нуклеотидных). В некоторых примерах эпитоп имеет длину менее 20 остатков (например, аминокислот или нуклеотидов), менее 15 остатков или менее 12 остатков. Два антитела могут связываться с одним и тем же эпитопом внутри антигена, если они демонстрируют конкурентное связывание с этим антигеном. В некоторых вариантах осуществления эпитоп можно идентифицировать по определенному минимальному расстоянию до остатка CDR на антигенсвязывающей молекуле. В некоторых вариантах осуществления эпитоп может быть идентифицирован по указанному выше расстоянию и дополнительно ограничен теми остатками, которые участвуют в образовании связи (например, водородной связи) между остатком антитела и остатком антигена. Эпитоп также можно идентифицировать путем различных методов сканирования, например сканирование аланина или аргинина может указать на один или более остатков, с которыми может взаимодействовать антигенсвязывающая молекула. Если в явном виде не указано иное, набор остатков в качестве эпитопа не исключает того, что другие остатки являются частью эпитопа для конкретного антитела. Скорее, наличие такого набора означает минимальную последовательность (или набор последовательностей) эпитопов. Таким образом, в некоторых вариантах осуществления набор остатков, идентифицированных как эпитоп, означает минимальный эпитоп, релевантный для антигена, а не исключительный список остатков для эпитопа на антигене.
[0055] В некоторых вариантах осуществления эпитоп находится в пределах L41 и T50 ECD собачьего IL4R (SEQ ID NO:99) или ECD кошачьего IL4R (SEQ ID NO:100), например, в пределах R36 и N55. Например, эпитоп может содержать аминокислотную последовательность SEQ ID NO:88, SEQ ID NO:89, SEQ ID NO:91 или SEQ ID NO:92. В некоторых вариантах осуществления эпитоп содержит аминокислотную последовательность LX10FMGSENX11T, где X10 представляет собой D или N, и X11 представляет собой H или R (SEQ ID NO:85). В некоторых вариантах осуществления эпитоп содержит аминокислотную последовательность RLSYQLX10FMGSENX11TCVPEN, где X10 представляет собой D или N, и X11 представляет собой H или R (SEQ ID NO:86).
[0056] В некоторых вариантах осуществления эпитоп находится в пределах аминокислот S64 и Q85 ECD собачьего IL4R (SEQ ID NO:99) или ECD кошачьего IL4R (SEQ ID NO:100). Например, эпитоп может содержать аминокислотную последовательность SEQ ID NO:90 или SEQ ID NO:93. В некоторых вариантах осуществления эпитоп содержит аминокислотную последовательность SMX12X13DDX14VEADVYQLX15LWAGXQ, где X12 представляет собой P или L, X13 представляет собой I или M, X14 представляет собой A или F, X15 представляет собой D или H, и X16 представляет собой Q или T (SEQ ID NO:87).
[0057] В некоторых вариантах осуществления эпитоп находится в пределах аминокислот D65 и N78 ECD собачьего IL4R (SEQ ID NO:99). Например, эпитоп может содержать аминокислотную последовательность SEQ ID NO:354.
[0058] В некоторых вариантах осуществления изобретения первый эпитоп находится в пределах аминокислот G24 и A56 ECD собачьего IL4R (SEQ ID NO:99), и второй эпитоп находится в пределах аминокислот R79 и I90 ECD собачьего IL4R. Например, первый эпитоп может содержать аминокислотную последовательность SEQ ID NO:355, и второй эпитоп может содержать аминокислотную последовательность SEQ ID NO:356.
[0059] В некоторых вариантах осуществления эпитоп находится в пределах аминокислот R79 и V98 ECD собачьего IL4R (SEQ ID NO:99). Например, эпитоп может содержать аминокислотную последовательность SEQ ID NO:357.
[0060] Термин «CDR» означает определяющую комплементарность область, определенную по меньшей мере одним способом идентификации, известным специалисту в данной области. В некоторых вариантах осуществления CDR могут быть определены в соответствии с любой из схем: схемы нумерации Чотиа (Chothia), схемы нумерации Кабат (Kabat), комбинации Кабат и Чотиа, определения AbM, определения согласно контактному методу или комбинации Кабат, Чотиа, AbM или определения согласно контактному методу. Различные CDR в антителе могут быть обозначены соответствующим им номером и типом цепи, включая, без ограничения, CDR-H1, CDR-H2, CDR-HC3, CDR-L1, CDR-L2 и CDR-L3. Используемый в настоящем описании термин «CDR» также охватывает «гипервариабельный участок» или HVR, включая гипервариабельные петли.
[0061] В некоторых вариантах осуществления анти-IL4R антитело содержит тяжелую цепь, содержащую (а) CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:1, SEQ ID NO:7 или SEQ ID NO:29; (b) CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:2, SEQ ID NO:268, SEQ ID NO:8, SEQ ID NO:269, SEQ ID NO:30, SEQ ID NO:271 или SEQ ID NO:272; или (c) CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:9 или SEQ ID NO:31. В некоторых вариантах осуществления анти-IL4R антитело содержит легкую цепь, содержащую (а) CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:14 или SEQ ID NO:36; (b) CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:5, SEQ ID NO:15 или SEQ ID NO:37; или (c) CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:6, SEQ ID NO:16 или SEQ ID NO:38.
[0062] В некоторых вариантах осуществления анти-IL4R антитело содержит тяжелую цепь, содержащую (а) последовательность CDR-H1, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95% или по меньшей мере 98% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:1, SEQ ID NO:7 или SEQ ID NO:29; (b) последовательность CDR-H2, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95% или по меньшей мере 98% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:2, SEQ ID NO:268, SEQ ID NO:8, SEQ ID NO:269, SEQ ID NO:30, SEQ ID NO:271 или SEQ ID NO:272; или (c) последовательность CDR-H3, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95% или по меньшей мере 98% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:9, или SEQ ID NO:31. В некоторых вариантах осуществления анти-IL4R антитело содержит легкую цепь, содержащую (а) последовательность CDR-L1, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95% или по меньшей мере 98% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:14 или SEQ ID NO:36; (b) последовательность CDR-L2, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95% или по меньшей мере 98% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:5, SEQ ID NO:15 или SEQ ID NO:37; или (c) последовательность CDR-L3, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95% или по меньшей мере 98% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:6, SEQ ID NO:16, или SEQ ID NO:38.
[0063] В некоторых вариантах осуществления анти-IL4R антитело содержит тяжелую цепь, содержащую: а) последовательность CDR-H1, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:278; b) последовательность CDR-H2, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:279; и c) последовательность CDR-H3, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:280. В некоторых вариантах осуществления анти-IL4R антитело содержит легкую цепь, содержащую: а) последовательность CDR-L1, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:285; b) последовательность CDR-L2, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:286; и c) последовательность CDR-L3, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:287.
[0064] В некоторых вариантах осуществления анти-IL4R антитело содержит тяжелую цепь, содержащую: а) последовательность CDR-H1, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:310; b) последовательность CDR-H2, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:311; и c) последовательность CDR-H3, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:312. В некоторых вариантах осуществления анти-IL4R антитело содержит легкую цепь, содержащую: а) последовательность CDR-L1, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:317; b) последовательность CDR-L2, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:318; и c) последовательность CDR-L3, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:319.
[0065] В некоторых вариантах осуществления анти-IL4R антитело содержит тяжелую цепь, содержащую: а) последовательность CDR-H1, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:326; b) последовательность CDR-H2, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:327; и c) последовательность CDR-H3, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:328. В некоторых вариантах осуществления анти-IL4R антитело содержит легкую цепь, содержащую а) последовательность CDR-L1, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:333; b) последовательность CDR-L2, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:334; и c) последовательность CDR-L3, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:335.
[0066] В некоторых вариантах осуществления анти-IL4R антитело содержит тяжелую цепь, содержащую: а) последовательность CDR-H1, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:294; b) последовательность CDR-H2, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:295; и c) последовательность CDR-H3, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:296. В некоторых вариантах осуществления анти-IL4R антитело содержит легкую цепь, содержащую: а) последовательность CDR-L1, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:301; b) последовательность CDR-L2, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:302; и c) последовательность CDR-L3, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:303.
[0067] Термин «вариабельная область» в контексте настоящего описания относится к области, содержащей по меньшей мере три CDR. В некоторых вариантах осуществления вариабельная область включает три CDR и по меньшей мере одну каркасную область («FR»). Термины «вариабельная область тяжелой цепи» или «вариабельная тяжелая цепь» используются взаимозаменяемо для обозначения области, содержащей по меньшей мере три CDR тяжелой цепи. Термины «вариабельная область легкой цепи» или «вариабельная легкая цепь» используются взаимозаменяемо для обозначения области, содержащей по меньшей мере три CDR легкой цепи. В некоторых вариантах осуществления вариабельная тяжелая цепь или вариабельная легкая цепь содержат по меньшей мере одну каркасную область. В некоторых вариантах осуществления антитело содержит по меньшей мере одну каркасную область тяжелой цепи, выбранную из HC-FR1, HC-FR2, HC-FR3 и HC-FR4. В некоторых вариантах осуществления антитело содержит по меньшей мере одну каркасную область легкой цепи, выбранную из LC-FR1, LC-FR2, LC-FR3 и LC-FR4. Каркасные области могут быть расположены смежно между CDR легкой цепи или между CDR тяжелой цепи. Например, антитело может содержать вариабельную тяжелую цепь, имеющую следующую структуру: (HC-FR1)-(HC-CDR1)-(HC-FR2)-(HC-CDR2)-(HC-FR3)-(HC-CDR3)-(HC-FR4). Антитело может содержать вариабельную тяжелую цепь, имеющую следующую структуру: (HC-CDR1)-(HC-FR2)-(HC-CDR2)-(HC-FR3)-(HC-CDR3). Антитело может также содержать вариабельную легкую цепь, имеющую следующую структуру: (LC FR1)-(LC-CDR1)-(LC-FR2)-(LC-CDR2)-(LC-FR3)-(LC-CDR3)-(LC-FR4). Антитело также может содержать вариабельную легкую цепь, имеющую следующую структуру: (LC-CDR1)-(LC-FR2)-(LC-CDR2)-(LC-FR3)-(LC-CDR3).
[0068] В некоторых вариантах осуществления изобретения анти-IL4R антитело содержит одно или более из: (а) последовательности каркасной области 1 вариабельной области тяжелой цепи (HC-FR1) SEQ ID NO:10 или SEQ ID NO:32, (b) последовательности HC-FR2 SEQ ID NO:11 или SEQ ID NO:33, (c) последовательности HC-FR3 SEQ ID NO:12, SEQ ID NO:270, SEQ ID NO:34, SEQ ID NO:273, (d) последовательности HC-FR4 SEQ ID NO:13 или SEQ ID NO:35, (e) последовательности каркасной области 1 вариабельной области легкой цепи (LC-FR1) SEQ ID NO:17 или SEQ ID NO:39, (f) последовательности LC-FR2 SEQ ID NO:SEQ ID NO:18 или SEQ ID NO:40, (g) последовательности LC-FR3 SEQ ID NO:19 или SEQ ID NO:41, или (h) последовательности LC-FR4 SEQ ID NO:20 или SEQ ID NO:42.
[0069] В некоторых вариантах осуществления анти-IL4R антитело содержит:
а. (i) последовательность вариабельной тяжелой цепи, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:21 или SEQ ID NO:43; (ii) последовательность вариабельной легкой цепи, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:22 или SEQ ID NO:44; или (iii) последовательность вариабельной тяжелой цепи, аналогичную (i), и последовательность вариабельной легкой цепи, аналогичную (ii); или
b. (i) последовательность вариабельной тяжелой цепи, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:59, SEQ ID NO:60, SEQ ID NO:63, или SEQ ID NO:64, или SEQ ID NO:274; (ii) последовательность вариабельной легкой цепи, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:61, SEQ ID NO:62, SEQ ID NO:65 или SEQ ID NO:66, SEQ ID NO:275; или (iii) последовательность вариабельной тяжелой цепи, аналогичную (i), и последовательность вариабельной легкой цепи, аналогичную (ii); или
c. (i) последовательность вариабельной тяжелой цепи, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:67 или SEQ ID NO:69; (ii) последовательность вариабельной легкой цепи, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:68 или SEQ ID NO:70; или (iii) последовательность вариабельной тяжелой цепи, аналогичную (i), и последовательность вариабельной легкой цепи, аналогичную (ii).
[0070] В некоторых вариантах осуществления анти-IL4R антитело содержит последовательность вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO:21, SEQ ID NO:43, SEQ ID NO:59, SEQ ID NO:60, SEQ ID NO:63, SEQ ID NO:64, SEQ ID NO:274, SEQ ID NO:67 или SEQ ID NO:69 и/или последовательность вариабельной области легкой цепи (а) SEQ ID NO:22, SEQ ID NO:44, SEQ ID NO:61, SEQ ID NO:62, SEQ ID NO:65, SEQ ID NO:66, SEQ ID NO:275, SEQ ID NO:68 или SEQ ID NO:70.
[0071] В некоторых вариантах осуществления анти-IL4R антитело содержит последовательность тяжелой цепи SEQ ID NO:25, SEQ ID NO:47, SEQ ID NO:51, SEQ ID NO:53, SEQ ID NO:55, SEQ ID NO:71, SEQ ID NO:72, SEQ ID NO:73, SEQ ID NO:74, SEQ ID NO:79, SEQ ID NO:80, SEQ ID NO:82 или SEQ ID NO:83 и/или последовательность легкой цепи SEQ ID NO:26, SEQ ID NO:48, SEQ ID NO:52, SEQ ID NO:54, SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:73, SEQ ID NO:74, SEQ ID NO:77, SEQ ID NO:78, SEQ ID NO:277, SEQ ID NO:81 или SEQ ID NO:84.
[0072] В некоторых вариантах осуществления анти-IL4R антитело содержит:
а. (i) последовательность вариабельной тяжелой цепи, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:292; (ii) последовательность вариабельной легкой цепи, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:293; или (iii) последовательность вариабельной тяжелой цепи, аналогичную (i), и последовательность вариабельной легкой цепи, налогичную (ii); или же
b. (i) последовательность вариабельной тяжелой цепи, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:342 или SEQID NO: 343; (ii) последовательность вариабельной легкой цепи, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:344; или (iii) последовательность вариабельной тяжелой цепи, аналогичную (i), и последовательность вариабельной легкой цепи, аналогичную (ii).
[0073] В некоторых вариантах осуществления анти-IL4R антитело содержит:
а) последовательность вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:292, и последовательность вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:293; или
b) последовательность вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:342 или SEQ ID NO:343, и последовательность вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:344.
[0074] В некоторых вариантах осуществления анти-IL4R антитело содержит последовательность вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO:292, SEQ ID NO:342 или SEQ ID NO:343 и/или последовательность вариабельной области легкой цепи (а) SEQ ID NO:293 или SEQ ID NO:344.
[0075] В некоторых вариантах осуществления анти-IL4R антитело содержит последовательность тяжелой цепи SEQ ID NO:SEQ ID NO:348 или SEQ ID NO:349 и/или последовательность легкой цепи SEQ ID NO:350.
[0076] В некоторых вариантах осуществления анти-IL4R антитело содержит: (a) последовательность вариабельной области тяжелой цепи, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:324; (b) последовательность вариабельной области легкой цепи, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:325; или (c) последовательность вариабельной тяжелой цепи, аналогичную (а), и последовательность вариабельной легкой цепи, аналогичную (b).
[0077] В некоторых вариантах осуществления анти-IL4R антитело содержит последовательность вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO:324 и/или последовательность вариабельной области легкой цепи (а) SEQ ID NO:325.
[0078] В некоторых вариантах осуществления анти-IL4R антитело содержит последовательность тяжелой цепи SEQ ID NO:348 или SEQ ID NO:349 и/или последовательность легкой цепи SEQ ID NO:350.
[0079] В некоторых вариантах осуществления анти-IL4R антитело содержит:
а. (i) последовательность вариабельной тяжелой цепи, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:340; (ii) последовательность вариабельной легкой цепи, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:341; или (iii) последовательность вариабельной тяжелой цепи, аналогичную (i), и последовательность вариабельной легкой цепи, аналогичную (ii); или
b. (i) последовательность вариабельной тяжелой цепи, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:345 или SEQID NO: 346; (ii) последовательность вариабельной легкой цепи, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:347; или (iii) последовательность вариабельной тяжелой цепи, аналогичную (i), и последовательность вариабельной легкой цепи, аналогичную (ii).
[0080] В некоторых вариантах осуществления изобретения анти-IL4R антитело содержит последовательность вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO:340, SEQ ID NO:345 или SEQ ID NO:346 и/или последовательность вариабельной области легкой цепи (а) SEQ ID NO:341 или SEQ ID NO:347.
[0081] В некоторых вариантах осуществления анти-IL4R антитело содержит последовательность тяжелой цепи SEQ ID NO:348 или SEQ ID NO:349 и/или последовательность легкой цепи SEQ ID NO:350.
[0082] В некоторых вариантах осуществления изобретения анти-IL4R антитело включает: выделенное антитело по любому из пп. 75-85, где антитело содержит: (а) последовательность вариабельной области тяжелой цепи, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:308; (b) последовательность вариабельной легкой цепи, имеющую по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или 100% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:309; или (c) последовательность вариабельной тяжелой цепи, аналогичную (а), и последовательность вариабельной легкой цепи, аналогичную (b).
[0083] В некоторых вариантах осуществления анти-IL4R антитело содержит последовательность вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO:308 и/или последовательность вариабельной области легкой цепи (а) SEQ ID NO:341 или SEQ ID NO:309.
[0084] Термин «константная область» в контексте настоящего описания относится к области, содержащей по меньшей мере три константных домена. Термины «константная область тяжелой цепи» или «константная тяжелая цепь» используются взаимозаменяемо для обозначения области, содержащей по меньшей мере три константных домена тяжелой цепи, CH1, CH2 и CH3. Неограничивающие иллюстративные константные области тяжелой цепи включают γ, δ, α, ε и μ. Каждая константная область тяжелой цепи соответствует изотипу антитела. Например, антитело, содержащее константную область γ, представляет собой антитело IgG, антитело, содержащее константную область δ, представляет собой антитело IgD, антитело, содержащее константную область α, представляет собой антитело IgA, антитело, содержащее константную область μ, представляет собой антитело IgM, и антитело, содержащее константную область ε, представляет собой антитело IgE. Некоторые изотипы можно подразделить на подклассы. Например, антитела IgG включают, без ограничения, антитела IgG1 (содержащие константную область γ1), IgG2 (содержащие константную область γ2), IgG3 (содержащие константную область γ3) и IgG4 (содержащие константную область γ4); антитела IgA включают, без ограничения, антитела IgA1 (содержащие константную область α1) и IgA2 (содержащие константную область α2); и антитела IgM включают, без ограничения, IgM1 и IgM2. Термины «константная область легкой цепи» или «константная легкая цепь» используются взаимозаменяемо для обозначения области, содержащей константный домен легкой цепи, CL. Неограничивающие иллюстративные константные области легкой цепи включают λ и κ (например, SEQ ID NO:235 или 241). Не изменяющие функцию делеции и изменения внутри доменов входят в объем термина «константная область», если не указано иное. Собаки, кошки и лошади имеют классы антител, такие как IgG, IgA, IgD, IgE и IgM. К классу антител IgG собаки относятся IgG-A, IgG-B, IgG-C и IgG-D. К классу антител IgG кошек относятся IgG1a, IgG1b и IgG2. К классу антител IgG лошади относятся IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgG5, IgG6 и IgG7.
[0085] «Полипептид кристаллизуемого фрагмента» или «Fc полипептид» представляет собой часть молекулы антитела, которая взаимодействует с эффекторными молекулами и клетками. Он включает С-концевые части тяжелых цепей иммуноглобулина. В контексте настоящего описания Fc полипептид включает фрагменты Fc-домена, обладающие одной или более биологическими активностями полноразмерного полипептида Fc. В некоторых вариантах осуществления биологическая активность полипептида Fc представляет собой его способность связываться с FcRn. В некоторых вариантах осуществления биологическая активность полипептида Fc представляет собой его способность связываться с C1q. В некоторых вариантах осуществления биологическая активность полипептида Fc представляет собой его способность связываться с CD16. В некоторых вариантах осуществления биологическая активность полипептида Fc представляет собой его способность связываться с белком A. «Эффекторная функция» полипептида Fc представляет собой действие или активность, которая проявляется полностью или частично любым антителом в ответ на стимул, и может включать фиксацию комплемента и/или индукцию ADCC (антителозависимую клеточную цитотоксичность).
[0086] Термин «Fc IgX» означает, что Fc-область происходит от определенного изотипа антитела (например, IgG, IgA, IgD, IgE, IgM и т.д.), где «X» обозначает изотип антитела. Таким образом, «IgG Fc» обозначает Fc-область γ-цепи, «Fc IgA» обозначает Fc-область α-цепи, «Fc IgD» обозначает Fc-область δ-цепи, «Fc IgE» обозначает Fc-область ε-цепи, «Fc IgM» обозначает Fc-область μ-цепи и т.д. В некоторых вариантах осуществления Fc-область IgG включает CH1, шарнир, CH2, CH3 и CL1. «IgX-N-Fc» означает, что Fc-область происходит от конкретного подкласса изотипа антител (такого как собачий IgG подкласса A, B, C или D; подкласса кошачьего IgG 1, 2a или 2b; или подкласса лошадиного IgG IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgG5, IgG6 или IgG7 и т.д.), где «N» обозначает подкласс.
[0087] В некоторых вариантах осуществления полипептид Fc IgX или полипептид IgX-N-Fc происходит от животного-компаньона, такого как собака, кошка или лошадь. В некоторых вариантах осуществления полипептиды Fc IgG выделены из собачьих тяжелых цепей γ, таких как IgG-A, IgG-B, IgG-C или IgG-D. В некоторых случаях полипептиды Fc IgG выделяют из тяжелых цепей γ кошки, таких как IgG1, IgG2a или IgG2b. В других случаях полипептиды Fc IgG выделены из тяжелых цепей γ лошади, таких как IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgG5, IgG6 или IgG7.
[0088] Термины «Fc IgX» и «полипептид Fc IgX» включают полипептиды Fc дикого типа IgX и варианты полипептида Fc IgX, если не указано иное.
[0089] «Дикий тип» относится к немутантной версии полипептида, встречающегося в природе, или его фрагменту. Полипептид дикого типа может быть получен рекомбинантным способом.
[0090] В некоторых вариантах осуществления полипептид Fc дикого типа IgG содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO:162, SEQ ID NO:163, SEQ ID NO:164, SEQ ID NO:165, SEQ ID NO:166, SEQ ID NO:167, SEQ ID NO:203, SEQ ID NO:204, SEQ ID NO:205, SEQ ID NO:206, SEQ ID NO:207, SEQ ID NO:247, SEQ ID NO:248, SEQ ID NO:249, SEQ ID NO:250, SEQ ID NO:251, SEQ ID NO:252 или SEQ ID NO:253.
[0091] «Вариант» представляет собой полипептид, который отличается от эталонного полипептида одной или более заменами, делециями и/или добавлениями ненативных аминокислот. В некоторых вариантах осуществления вариант сохраняет по меньшей мере одну биологическую активность эталонного полипептида (например, полипептида дикого типа).
[0092] «Вариант полипептида Fc IgG» в контексте настоящего описания представляет собой полипептид Fc IgG, который отличается от эталонного полипептида Fc IgG одной или более аминокислотными заменами, делециями и/или добавлениями и по существу сохраняет по меньшей мере одну биологическую активность эталонного полипептида Fc IgG.
[0093] В некоторых вариантах осуществления вариант полипептида Fc IgG включает вариант полипептида Fc IgG представителя вида животного-компаньона. В некоторых вариантах осуществления вариант полипептида Fc IgG включает вариант полипептида Fc собачьего IgG, вариант полипептида Fc лошадиного IgG или вариант полипептида Fc кошачьего IgG. В некоторых вариантах осуществления вариант полипептида Fc IgG (например, вариант полипептида Fc собачьего IgG-A, вариант полипептида Fc собачьего IgG-C, вариант полипептида Fc собачьего IgG-D, вариант полипептида Fc кошачьего IgG1a, вариант полипептида Fc кошачьего IgG1b или вариант полипептида Fc кошачьего IgG2) обладает активностью, которая по существу отсутствует у эталонного полипептида (например, полипептида дикого типа). Например, в некоторых вариантах осуществления вариант полипептида Fc собачьего IgG-A, вариант полипептида Fc собачьего IgG-C или вариант полипептида Fc собачьего IgG-D связывается с белком А.
[0094] В некоторых вариантах осуществления вариант полипептида Fc IgG имеет модифицированное сродство связывания с белком А. В некоторых вариантах осуществления вариант полипептида Fc IgG имеет повышенное сродство связывания с белком А. В некоторых вариантах осуществления вариант полипептида Fc IgG можно очистить с помощью колоночной хроматографии с белком А. В некоторых вариантах осуществления вариант полипептида Fc IgG имеет модифицированное сродство связывания с CD16. В некоторых вариантах осуществления вариант полипептида Fc IgG имеет пониженное сродство связывания с CD16. В некоторых вариантах осуществления вариант Fc IgG может иметь сниженный иммунный ответ ADCC. В некоторых вариантах осуществления вариант полипептида Fc IgG имеет модифицированное сродство связывания с C1q. В некоторых вариантах осуществления вариант полипептида Fc IgG имеет пониженное сродство связывания с C1q. В некоторых вариантах осуществления вариант полипептида Fc IgG может иметь пониженную фиксацию комплемента. В некоторых вариантах осуществления вариант Fc IgG может иметь сниженный комплемент-опосредованный иммунный ответ.
[0095] «Шарнир» относится к любой части полипептида Fc или варианта полипептида Fc, который богат пролином, содержит по меньшей мере один остаток цистеина и расположен между СН1 и СН2 константной области тяжелой цепи.
[0096] В некоторых вариантах осуществления в шарнирной области может образовываться дисульфидная связь внутри одной и той же шарнирной области, внутри одного и того же полипептида Fc, с шарнирной областью отдельного полипептида Fc или с отдельным полипептидом Fc. В некоторых вариантах осуществления шарнирная область содержит по меньшей мере один, по меньшей мере два, по меньшей мере три, по меньшей мере четыре, по меньшей мере пять, по меньшей мере шесть, по меньшей мере семь, по меньшей мере восемь, по меньшей мере девять или по меньшей мере десять остатков пролина.
[0097] В некоторых вариантах осуществления вариант полипептида Fc кошачьего IgG имеет по меньшей мере одну дополнительную межцепочечную дисульфидную связь относительно полипептида Fc дикого типа кошачьего IgG, например, в шарнирной области. В некоторых вариантах осуществления вариант полипептида Fc кошачьего IgG2 с по меньшей мере одной дополнительной межцепочечной дисульфидной связью имеет повышенную межцепочечную стабильность по сравнению с полипептидом Fc дикого типа кошачьего IgG. В некоторых вариантах осуществления вариант полипептида IgG имеет по меньшей мере одну аминокислотную модификацию шарнирной области относительно полипептида Fc дикого типа IgG, такого как полипептид Fc дикого типа кошачьего IgG.
[0098] В некоторых вариантах осуществления вариант полипептида Fc IgG содержит шарнирную область или часть шарнирной области полипептида Fc IgG другого изотипа. В некоторых вариантах осуществления вариант полипептида Fc IgG, такой как полипептид Fc собачьего IgG2, содержит шарнирную область полипептида Fc кошачьего IgG1a или Fc дикого типа кошачьего IgG1b. В некоторых вариантах осуществления вариант полипептида Fc IgG имеет повышенное рекомбинантное продуцирование и/или повышенное образование дисульфидных связей в шарнирной области по сравнению с полипептидом Fc дикого типа IgG. В некоторых вариантах осуществления повышенное рекомбинантное продуцирование и/или повышенное образование дисульфидных связей в шарнирной области можно определить с помощью анализа SDS-PAGE в денатурирующих и/или неденатурирующих условиях.
[0099] В некоторых вариантах осуществления вариант полипептида Fc IgG включает: а) по меньшей мере одну аминокислотную замену в положении, соответствующем положению 21, 23, 25, 80, 205 и/или 207 в SEQ ID NO:162; b) по меньшей мере одну аминокислотную замену в положении, соответствующем положению 5, 38, 39, 94, 97 и/или 98 в SEQ ID NO:163; c) по меньшей мере одну аминокислотную замену в положении, соответствующем положению 5, 21, 23, 24, 38, 39, 93, 97 и/или 98 в SEQ ID NO:165; d) по меньшей мере одну аминокислотную замену в положении, соответствующем положению 21, 23, 25, 80 и/или 207 в SEQ ID NO:167; e) по меньшей мере одну аминокислотную замену в положении, соответствующем положению 16 и/или 198 в SEQ ID NO:203, SEQ ID NO:204, SEQ ID NO:205 или SEQ ID NO:206; и/или f) по меньшей мере одну аминокислотную замену в положении, соответствующем положению 14 и/или 16 в SEQ ID NO:207.
[00100] В некоторых вариантах осуществления вариант полипептида Fc IgG содержит: a) по меньшей мере одну аминокислотную замену в положении 21, 23, 25, 80, 205 и/или 207 в SEQ ID NO:162; b) по меньшей мере одну аминокислотную замену в положении 5, 38, 39, 94, 97 и/или 98 в SEQ ID NO:163; c) по меньшей мере одну аминокислотную замену в положении 5, 21, 23, 24, 38, 39, 93, 97 и/или 98 в SEQ ID NO:164; d) по меньшей мере одну аминокислотную замену в положении 21, 23, 25, 80 и/или 207 в SEQ ID NO:165; e) по меньшей мере одну аминокислотную замену в положении 16 и/или 198 в SEQ ID NO:203, SEQ ID NO:204, SEQ ID NO:205 или SEQ ID NO:206; и/или f) по меньшей мере одну аминокислотную замену в положении 14 и/или 16 в SEQ ID NO:207.
[00101] В некоторых вариантах осуществления вариант полипептида Fc IgG включает:
а) треонин в положении, соответствующем положению 21, лейцин в положении, соответствующем положению 23, аланин в положении, соответствующем положению 25, глицин в положении, соответствующем положению 80, аланин в положении, соответствующем положению 205, и/или гистидин в положении, соответствующем положению 207 в SEQ ID NO:162;
b) пролин в положении, соответствующем положению 5, глицин в положении, соответствующем положению 38, аргинин в положении, соответствующем положению 39, аргинин в положении, соответствующем положению 93, изолейцин в положении, соответствующем положению 97, и/или глицин в положении, соответствующем положению 98 в SEQ ID NO:163;
c) пролин в положении, соответствующем положению 5, треонин в положении, соответствующем положению 21, лейцин в положении, соответствующем положению 23, изолейцин в положении, соответствующем положению 24, глицин в положении, соответствующем положению 38, аргинин в положении, соответствующем положению 39, аргинин в положении, соответствующем положению 93, изолейцин в положении, соответствующем положению 97, и/или глицин в положении, соответствующем положению 98 в SEQ ID NO:164;
г) треонин в положении, соответствующем положению 21, лейцин в положении, соответствующем положению 23, аланин в положении, соответствующем положению 25, глицин в положении, соответствующем положению 80, и/или гистидин в положении соответствующем положению 207 в SEQ ID NO:165;
e) пролин в положении, соответствующем положению 16, и/или аланин в положении, соответствующем положению 198 в SEQ ID NO:203, SEQ ID NO:204, SEQ ID NO:205 или SEQ ID NO:206; и/или
f) цистеин в положении, соответствующем положению 14, и/или пролин в положении, соответствующем положению 16 в SEQ ID NO:207.
[00102] В некоторых вариантах осуществления вариант полипептида Fc IgG содержит:
а) треонин в положении 21, лейцин в положении 23, аланин в положении 25, глицин в положении 80, аланин в положении 205 и/или гистидин в положении 207 в SEQ ID NO:162;
b) пролин в положении 5, глицин в положении 38, аргинин в положении 39, аргинин в положении 93, изолейцин в положении 97 и/или глицин в положении 98 в SEQ ID NO:163;
c) пролин в положении 5, треонин в положении 21, лейцин в положении 23, изолейцин в положении 24, глицин в положении 38, аргинин в положении 39, аргинин в положении 93, изолейцин в положении 97 и/или глицин в положении 98 в SEQ ID NO:164;
d) треонин в положении 21, лейцин в положении 23, аланин в положении 25, глицин в положении 80 и/или гистидин в положении 207 в SEQ ID NO:165;
e) пролин в положении 16 и/или аланин в положении 198 в SEQ ID NO:203, SEQ ID NO:204, SEQ ID NO:205 или SEQ ID NO:206; и/или
f) цистеин в положении 14 и/или пролин в положении 16 в SEQ ID NO:207.
[00103] В некоторых вариантах осуществления вариант полипептида Fc IgG содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO:168, 169, 170, 171, 172, 173, 174, 175, 176, 177, 178, 179, 180, 181, 182, 183, 184, 185, 186, 187, 188, 189, 190, 191, 192, 193, 194, 208, 209, 210, 211, 212, 213, 214, 215 или 216.
[00104] Биспецифическое антитело имеет специфичность связывания по отношению к двум разным эпитопам или молекулам-мишеням. В некоторых вариантах осуществления биспецифическое антитело связывается с двумя разными эпитопами одной и той же молекулы-мишени. Биспецифические антитела могут быть полноразмерными антителами или фрагментами антител.
[00105] В некоторых вариантах осуществления изобретения антитело содержит первый вариант полипептида Fc IgG, содержащий мутацию «выступ», и второй вариант полипептида Fc IgG, содержащий мутацию «впадина». Неограничивающие иллюстративные мутации «выступ» и «впадина» описаны, например, в Merchant, A.M. et al. An efficient route to human bispecific IgG. Nat Biotechnol, 16(7):677-81 (1998).
[00106] В некоторых вариантах осуществления вариант полипептида Fc IgG содержит мутацию «выступ». В некоторых вариантах осуществления вариант полипептида Fc IgG содержит аминокислотную замену в положении, соответствующем положению 138 в SEQ ID NO:162; положению 137 в SEQ ID NO:163, положению 137 в SEQ ID NO:165; положению 138 в SEQ ID NO:167; положению 154 в SEQ ID NO:203, SEQ ID NO:204, SEQ ID NO:205, SEQ ID NO:206 или SEQ ID NO:207; или положению 130 в SEQ ID NO:247, SEQ ID NO:248, SEQ ID NO:249, SEQ ID NO:250, SEQ ID NO:251, SEQ ID NO:252 или SEQ ID NO:253. В некоторых вариантах осуществления вариант полипептида Fc IgG содержит аминокислотную замену в положении 138 в SEQ ID NO:162; положении 137 в SEQ ID NO:163; положении 137 в SEQ ID NO:165; положении 138 в SEQ ID NO:167; положении 154 в SEQ ID NO:203, SEQ ID NO:204, SEQ ID NO:205, SEQ ID NO:206 или SEQ ID NO:207; или положении 130 в SEQ ID NO:247, SEQ ID NO:248, SEQ ID NO:249, SEQ ID NO:250, SEQ ID NO:251, SEQ ID NO:252 или SEQ ID NO:253. В некоторых вариантах осуществления вариант полипептида Fc IgG содержит триптофан в положении, соответствующем положению 138 в SEQ ID NO:162; положению 137 в SEQ ID NO:163; положению 137 в SEQ ID NO:165; положению 138 в SEQ ID NO:167 или положению 154 в SEQ ID NO:203, SEQ ID NO:204, SEQ ID NO:205, SEQ ID NO:206 или SEQ ID NO:207; или положению 130 в SEQ ID NO:247, SEQ ID NO:248, SEQ ID NO:249, SEQ ID NO:250, SEQ ID NO:251, SEQ ID NO:252 или SEQ ID NO:253. В некоторых вариантах осуществления вариант полипептида Fc IgG содержит триптофан в положении 138 в SEQ ID NO:162; положении 137 в SEQ ID NO:163; положении 137 в SEQ ID NO:165; положении 138 в SEQ ID NO:167; положении 154 в SEQ ID NO:203, SEQ ID NO:204, SEQ ID NO:205, SEQ ID NO:206 или SEQ ID NO:207; или положении 130 в SEQ ID NO:247, SEQ ID NO:248, SEQ ID NO:249, SEQ ID NO:250, SEQ ID NO:251, SEQ ID NO:252 или SEQ ID NO:253. В некоторых вариантах осуществления вариант полипептида Fc IgG содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO:195, 196, 197, 198, 217, 218, 219, 220, 221, 254, 255, 256, 257, 258, 259 или 260.
[00107] В некоторых вариантах осуществления вариант полипептида Fc IgG содержит мутацию «впадина». В некоторых вариантах осуществления вариант полипептида Fc IgG содержит аминокислотную замену в положении, соответствующем положению 138 и/или положению 140 в SEQ ID NO:162; положению 137 и/или положению 139 в SEQ ID NO:163; положению 137 и/или положению 139 в SEQ ID NO:165; положению 138 и/или положению 140 в SEQ ID NO:167; положению 154 и/или положению 156 в SEQ ID NO:203, SEQ ID NO:204, SEQ ID NO:205, SEQ ID NO:206 или SEQ ID NO:207; и/или положению 130 и/или положению 132 в SEQ ID NO:247, SEQ ID NO:248, SEQ ID NO:249, SEQ ID NO:250, SEQ ID NO:251, SEQ ID NO:252 или SEQ ID NO:253. В некоторых вариантах осуществления вариант полипептида Fc IgG содержит аминокислотную замену в положении 138 и/или положении 140 в SEQ ID NO:162; положении 137 и/или положении 139 в SEQ ID NO:163; положении 137 и/или положении 139 в SEQ ID NO:165; положении 138 и/или положении 140 в SEQ ID NO:167; положении 154 и/или положении 156 в SEQ ID NO:203, SEQ ID NO:204, SEQ ID NO:205, SEQ ID NO:206 или SEQ ID NO:207; или положении 130 и/или положении 132 в SEQ ID NO:247, SEQ ID NO:248, SEQ ID NO:249, SEQ ID NO:250, SEQ ID NO:251, SEQ ID NO:252 или SEQ ID NO:253. В некоторых вариантах осуществления вариант полипептида Fc IgG содержит серин в положении, соответствующем положению 138, и/или аланин в положении, соответствующем положению 140 в SEQ ID NO:162; серин в положении, соответствующем положению 137, и/или аланин в положении, соответствующем положению 139 в SEQ ID NO:163; серин в положении, соответствующем положению 137, и/или аланин в положении, соответствующем положению 139 в SEQ ID NO:165; серин в положении, соответствующем положению 138, и/или аланин в положении, соответствующем положению 140 в SEQ ID NO:167; серин в положении, соответствующем положению 154, и/или аланин в положении, соответствующем положению 156 в SEQ ID NO:203, SEQ ID NO:204, SEQ ID NO:205, SEQ ID NO:206 или SEQ ID NO:207; или серин в положении, соответствующем положению 130, и/или аланин в положении, соответствующем положению 132 в SEQ ID NO:247, SEQ ID NO:248, SEQ ID NO:249, SEQ ID NO:250, SEQ ID NO:251, SEQ ID NO:252 или SEQ ID NO:253. В некоторых вариантах осуществления вариант полипептид Fc IgG содержит серин в положении 138 и/или аланин в положении 140 в SEQ ID NO:162; серин в положении 137 и/или аланин в положении 139 в SEQ ID NO:163; серин в положении 137 и/или аланин в положении 139 в SEQ ID NO:165; серин в положении 138 и/или аланин в положении 140 в SEQ ID NO:167; серин в положении 154 и/или аланин в положении 156 в SEQ ID NO:203, SEQ ID NO:204, SEQ ID NO:205, SEQ ID NO:206 или SEQ ID NO:207; или серин в положении 130 и/или аланин в положении 132 в SEQ ID NO:247, SEQ ID NO:248, SEQ ID NO:249, SEQ ID NO:250, SEQ ID NO:251, SEQ ID NO:252 или SEQ ID NO:253. В некоторых вариантах осуществления вариант полипептида Fc IgG содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO:199, 200, 201, 202, 222, 223, 224, 225, 226, 261, 262, 263, 264, 265, 266 или 267.
[00108] Кроме того, для облегчения специфического спаривания тяжелой цепи с предполагаемой легкой цепью, интерфейсные аминокислоты между CH1 и легкой цепью могут быть подвергнуты мутациям с тем, чтобы обеспечить комплементарность по форме и взаимодействию заряд-заряд.
[00109] В некоторых вариантах осуществления вариант полипептида Fc IgG содержит участок CH1, содержащий по меньшей мере одну аминокислотную замену в положении, соответствующем положению 24 и/или положению 30 в SEQ ID NO:227, SEQ ID NO:228, SEQ ID NO:229, SEQ ID NO:230 или SEQ ID NO:237; или по меньшей мере одну аминокислотную замену в положении, соответствующем положению 24 и/или положению 29 в SEQ ID NO:238. В некоторых вариантах осуществления вариант полипептида Fc IgG содержит участок CH1, содержащий по меньшей мере одну аминокислотную замену в положении 24 и/или положении 30 в SEQ ID NO:227, SEQ ID NO:228, SEQ ID NO:229, SEQ ID NO:230 или SEQ ID NO:237; или по меньшей мере одну аминокислотную замену в положении 24 и/или положении 29 в SEQ ID NO:238. В некоторых вариантах осуществления вариант полипептида Fc IgG содержит участок CH1, содержащий лейцин в положении, соответствующем положению 24, и/или аспарагин в положении, соответствующем положению 30 в SEQ ID NO:227, SEQ ID NO:228, SEQ ID NO:229, SEQ ID NO:230 или SEQ ID NO:237; или лейцин в положении, соответствующем положению 24, и/или аспарагин в положении, соответствующем положению 29 в SEQ ID NO:238. В некоторых вариантах осуществления вариант полипептида Fc IgG содержит участок CH1, содержащий лейцин в положении 24 и/или аспарагин в положении 30 в SEQ ID NO:227, SEQ ID NO:228, SEQ ID NO:229, SEQ ID NO:230 или SEQ ID NO:237; или лейцин в положении 24 и/или аспарагин в положении 29 в SEQ ID NO:238. В некоторых вариантах осуществления вариант полипептида Fc IgG содержит участок CH1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:231, 232, 233, 234, 239 или 240.
[00110] В некоторых вариантах осуществления комплементарный вариант константной области легкой цепи содержит по меньшей мере одну аминокислотную замену в положении, соответствующем положению 11 и/или положению 22 в SEQ ID NO:235 или SEQ ID NO:241. В некоторых вариантах осуществления вариант константной области легкой цепи содержит по меньшей мере одну аминокислотную замену в положении 11 и/или положении 22 в SEQ ID NO:235 или SEQ ID NO:241. В некоторых вариантах осуществления вариант константной области легкой цепи содержит аланин в положении, соответствующем положению 11, и/или аргинин в положении, соответствующем положению 22 в SEQ ID NO:235 или SEQ ID NO:241. В некоторых вариантах осуществления вариант константной области легкой цепи содержит аланин в положении 11 и/или аргинин в положении 22 в SEQ ID NO:235 или SEQ ID NO:241. В некоторых вариантах осуществления вариант константной области легкой цепи содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO:236 или 242.
[00111] Термин «химерное антитело» или «химерный» относится к антителу, в котором часть тяжелой цепи или легкой цепи происходит из определенного источника или вида, в то время как по меньшей мере часть остатка тяжелой цепи или легкой цепи происходит из другого источника или другого вида. В некоторых вариантах осуществления химерное антитело относится к антителу, содержащему по меньшей мере одну вариабельную область от первого вида (например, мыши, крысы, яванского макака и т.д.) и по меньшей мере одну константную область от второго вида (например, человека, собаки, кошки, лошади и т.д.). В некоторых вариантах осуществления химерное антитело содержит по меньшей мере одну вариабельную область мыши и по меньшей мере одну константную область собаки. В некоторых вариантах осуществления химерное антитело содержит по меньшей мере одну вариабельную область мыши и по меньшей мере одну константную область кошки. В некоторых вариантах осуществления все вариабельные области химерного антитела относятся к первому виду, а все константные области химерного антитела относятся ко второму виду. В некоторых вариантах осуществления химерное антитело содержит константную область тяжелой цепи или константную область легкой цепи животного-компаньона. В некоторых вариантах осуществления химерное антитело содержит вариабельные тяжелые и легкие цепи мыши и константные тяжелые и легкие цепи животного-компаньона. Например, химерное антитело может содержать вариабельные тяжелые и легкие цепи мыши и константные тяжелые и легкие цепи собаки; химерное антитело может содержать вариабельные тяжелые и легкие цепи мыши и константные тяжелые и легкие цепи кошки; или химерное антитело может содержать вариабельные тяжелые и легкие цепи мыши и константные тяжелые и легкие цепи лошади.
[00112] «Химерное собачье» или «химерное собачье антитело» относится к химерному антителу, имеющему по меньшей мере часть тяжелой цепи или часть легкой цепи, полученную от собаки. «Химерное кошачье» или «химерное кошачье антитело» относится к химерному антителу, имеющему по меньшей мере часть тяжелой цепи или часть легкой цепи, полученную от кошки. В некоторых вариантах осуществления химерное собачье антитело содержит вариабельные тяжелые и легкие цепи мыши и константные тяжелые и легкие цепи собаки. В некоторых вариантах осуществления химерное кошачье антитело содержит вариабельные тяжелые и легкие цепи мыши и константные тяжелые и легкие цепи кошки. В некоторых вариантах осуществления антитело представляет собой химерное антитело, содержащее каркасные области вариабельной тяжелой цепи мыши или каркасные области вариабельной легкой цепи мыши.
[00113] В некоторых вариантах осуществления анти-IL4R антитело включает химерное антитело, содержащее: (i) аминокислотную последовательность тяжелой цепи SEQ ID NO:51 или SEQ ID NO:55; (ii) аминокислотную последовательность легкой цепи SEQ ID NO:52 или SEQ ID NO:56; или (iii) аминокислотную последовательность тяжелой цепи, аналогичную (i), и последовательность легкой цепи, аналогичную (ii).
[00114] «Собачье антитело» в контексте настоящего описания охватывает антитела, продуцируемые в организме представителя семейства псовых; антитела, продуцируемые у животных, отличных от представителей семейства псовых, которые содержат гены собачьих иммуноглобулинов или содержат пептиды собачьих иммуноглобулинов; или антитела, выбранные с помощью методов in vitro, таких как фаговый дисплей, где репертуар антител основан на последовательности собачьего иммуноглобулина. Термин «собачье антитело» обозначает род последовательностей, которые представляют собой последовательности представителей мпсовых. Таким образом, термин обозначает не процесс создания антитела, а род релевантных последовательностей.
[00115] «Канинизированное антитело» означает антитело, в котором по меньшей мере одна аминокислота в части вариабельной области, не относящейся к представителю семейства псовых, заменена соответствующей аминокислотой из вариабельной области представителя семейства псовых. В некоторых вариантах осуществления канинизированное антитело содержит по меньшей мере одну собачью константную область (например, константную область γ, константную область α, константную область δ, константную область ε, константную область μ и т.д.) или ее фрагмент. В некоторых вариантах осуществления канинизированное антитело представляет собой фрагмент антитела, такой как Fab, scFv, (Fab')2 и т.д. Термин «канинизированный» также обозначает формы не относящихся к собачьим (например, мышиных) антител, которые являются химерными иммуноглобулинами, цепи иммуноглобулина или их фрагменты (такие как Fv, Fab, Fab', F(ab')2 или другие антигенсвязывающие последовательности антител), которые содержат минимальную последовательность не относящегося к собачьему иммуноглобулина. Канинизированные антитела могут включать собачьи иммуноглобулины (реципиентные антитела), в которых остатки реципиентной CDR заменены остатками из CDR вида, не относящегося к семейству псовым (донорское антитело), такого как мышь, крыса или кролик, имеющего требуемую специфичность, сродство и емкость. В некоторых случаях остатки каркасной области (FR) Fv собачьего иммуноглобулина заменяют соответствующими остатками, не содержащимися у представителей семейства псовых. Кроме того, канинизированное антитело может содержать остатки, которые не обнаружены ни в антителе-реципиенте, ни в импортированных последовательностях CDR или каркасной области, но включены для дальнейшего уточнения и оптимизации характеристик антитела.
[00116] В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере один аминокислотный остаток в части вариабельной тяжелой цепи мыши или вариабельной легкой цепи мыши заменен соответствующей аминокислотой из вариабельной области собаки. В некоторых вариантах осуществления модифицированная цепь слита с константной тяжелой цепью собаки или константной легкой цепью собаки. В некоторых вариантах осуществления анти-IL4R антитело представляет собой канинизированное антитело, содержащее аминокислотную последовательность вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO:59, 60, 63 или 64 и/или аминокислотную последовательность вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO:61, 62, 65 или 66.
[00117] В некоторых вариантах осуществления изобретения анти-IL4R антитело содержит константную область тяжелой цепи собаки, выбранную из константной области IgG-A, IgG-B, IgG-C и IgG-D. В некоторых вариантах осуществления анти-IL4R антитело содержит полипептид Fc дикого типа собачьего IgG-A, IgG-B, IgG-C или IgG-D или его вариант, как раскрыто в настоящем описании. В некоторых вариантах осуществления анти-IL4R антитело содержит полипептид Fc собачьего IgG-A, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:162; полипептид Fc собачьего IgG-B, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:163 или 164; (c) полипептид Fc собачьего IgG-C, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:165 или 166; или (d) полипептид Fc собачьего IgG-D, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:167. В некоторых вариантах осуществления анти-IL4R антитело содержит вариант полипептида Fc собачьего IgG-A, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:168, 169, 195 или 199; вариант полипептида Fc собачьего IgG-B, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:170, 171, 172, 173, 174, 175, 176, 177, 178, 179, 196 или 200; (c) вариант полипептида Fc собачьего IgG-C, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:180, 181, 182, 183, 184, 185, 186, 187, 188, 189, 190, 191, 192, 197 или 201; или (d) вариант полипептида Fc собачьего IgG-D, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:194, 198 или 202.
[00118] В некоторых вариантах осуществления изобретения анти-IL4R антитело содержит константную область легкой цепи собаки, такую как константная область κ легкой цепи собаки. В некоторых вариантах осуществления изобретения анти-IL4R антитело содержит константную область κ дикого типа легкой цепи собаки (например, SEQ ID NO:235) или вариант константной области κ легкой цепи собаки (например, SEQ ID NO:236).
[00119] В некоторых вариантах осуществления изобретения анти-IL4R антитело содержит канинизированный вариабельный фрагмент тяжелой цепи клона B, клона I, M3, M5, M8 или M9 и вариант полипептида Fc собачьего IgG, такой как SEQ ID NO:71, 72, 75, 76, 276, 348, 349, 351 или 352. В некоторых вариантах осуществления анти-IL4R антитело содержит канинизированную вариабельную легкую цепь клона B, клона I, M3, M5, M8 или M9 и константную области κ дикого типа легкой цепи собаки, такую как SEQ ID NO:73, 74, 77, 78, 277, 350 или 352.
[00120] Термин «кошачье антитело» в контексте настоящего описания включает антитела, продуцируемые представителем семейства кошачьих; антитела, продуцируемые у животных, отличных от представителей семейства кошачьих, которые содержат гены иммуноглобулинов кошки или содержат пептиды иммуноглобулинов кошки; или антитела, выбранные с помощью методов in vitro, таких как фаговый дисплей, где репертуар антител основан на последовательности иммуноглобулина кошки. Термин «кошачье антитело» обозначает род последовательностей, которые представляют собой последовательности кошачьих. Таким образом, термин обозначает не процесс создания антитела, а род релевантных последовательностей.
[00121] «Фелинизированное антитело» означает антитело, в котором по меньшей мере одна аминокислота в части вариабельной области, не относящейся к кошачьим, заменена соответствующей аминокислотой из кошачьей вариабельной области. В некоторых вариантах осуществления фелинизированное антитело содержит по меньшей мере одну кошачью константную область (например, константную область γ, константную область α, константную область δ, константную область ε, константную область μ и т.д.) или ее фрагмент. В некоторых вариантах осуществления фелинизированное антитело представляет собой фрагмент антитела, такой как Fab, scFv, (Fab')2 и т.д. Термин «фелинизированный» также обозначает формы не относящихся к кошачьим (например, мышиных) антител, которые являются химерными иммуноглобулинами, цепи иммуноглобулина или их фрагменты (такие как Fv, Fab, Fab', F(ab')2 или другие антигенсвязывающие последовательности антител), которые содержат минимальную последовательность не относящегося к кошачьему иммуноглобулина. Фелинизированные антитела могут включать кошачьи иммуноглобулины (реципиентные антитела), в которых остатки реципиентной CDR заменены остатками из CDR не относящихся к кошачьим видов (донорское антитело), таких как мышь, крыса или кролик, обладающих требуемой специфичностью, сродством и емкостью. В некоторых случаях остатки каркасной области (FR) Fv иммуноглобулина кошки заменяют соответствующими остатками, не содержащимися у представителей семейства кошачьих. Кроме того, фелинизированное антитело может содержать остатки, которые не обнаружены ни в антителе-реципиенте, ни в импортированных последовательностях CDR или каркасной области, но включены для дальнейшего уточнения и оптимизации характеристик антитела.
[00122] В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере один аминокислотный остаток в части вариабельной тяжелой цепи мыши или вариабельной легкой цепи мыши заменен соответствующей аминокислотой из вариабельной области кошки. В некоторых вариантах осуществления модифицированная цепь слита с константной тяжелой цепью кошки или константной легкой цепью кошки. В некоторых вариантах осуществления анти-IL4R антитело представляет собой фелинизированное антитело, содержащее аминокислотную последовательность вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO:67 или 69 и/или аминокислотную последовательность вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO:68 или 70.
[00123] В некоторых вариантах осуществления изобретения анти-IL4R антитело содержит константную область тяжелой цепи кошки, выбранную из константной области IgG1a, IgG1b и IgG2. В некоторых вариантах осуществления изобретения анти-IL4R антитело содержит полипептид Fc дикого типа кошачьего IgG1a, IgG1b или IgG2 ли его вариант, раскрытый в настоящем описании. В некоторых вариантах осуществления анти-IL4R антитело включает полипептид Fc кошачьего IgG1a, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:203 или 204; полипептид Fc кошачьего IgG1b, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:205 или 206; или (c) полипептид Fc кошачьего IgG2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:207. В некоторых вариантах осуществления анти-IL4R антитело содержит вариант полипептида Fc кошачьего IgG1a, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:208, 209, 210, 217, 218, 222 или 223; вариант полипептида Fc кошачьего IgG1b, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:211, 212, 213, 219, 220, 224 или 225; или (c) вариант полипептида Fc кошачьего IgG2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:214, 215, 216, 221 или 226.
[00124] В некоторых вариантах осуществления изобретения анти-IL4R антитело содержит константную область легкой цепи кошки, такую как константная область κ легкой цепи кошки. В некоторых вариантах осуществления анти-IL4R антитело содержит константную область κ дикого типа легкой цепи кошки (например, SEQ ID NO:241) или вариант константной области κ легкой цепи кошки (например, SEQ ID NO:242).
[00125] В некоторых вариантах осуществления изобретения анти-IL4R антитело содержит фелинизированную вариабельную тяжелую цепь клона B или клона I и вариант полипептида Fc кошачьего IgG, такой как SEQ ID NO:79, 80, 82 или 83. В некоторых вариантах осуществления анти-IL4R антитело содержит фелинизированную вариабельную легкую цепь клона B или клона I и константную область κ легкой цепи кошки, такую как SEQ ID NO:81 или 84.
[00126] В некоторых вариантах осуществления анти-IL4R антитело представляет собой биспецифическое антитело, обладающее специфичностью связывания по отношению к IL4R и другой молекуле-мишени, такой как IL17, IL31, TNFα, CD20, CD19, CD25, IL4, IL13, IL23, IgE, CD11α, IL6R, α4-интергрин, IL12, IL1β или BlyS. В некоторых вариантах осуществления биспецифическое антитело содержит канинизированную или фелинизированную вариабельную тяжелую цепь клона B или клона I и вариант полипептида Fc собачьего или кошачьего IgG, который может спариваться с вариантом константной области κ (например, SEQ ID NO:243). В некоторых вариантах осуществления биспецифическое антитело содержит вариабельную тяжелую цепь, направленную на другую целевую молекулу (например, собачьего или кошачьего IL31), и вариант полипептида Fc типа «впадина» собачьего или кошачьего IgG (например, SEQ ID NO:245). В некоторых вариантах осуществления биспецифическое антитело содержит канинизированную или фелинизированную вариабельную легкую цепь клона B или клона I и вариабельную константную область κ, которая может спариваться с полипептидом Fc типа «выступ» (например, SEQ ID NO:244). В некоторых вариантах осуществления биспецифическое антитело содержит вариабельную легкую цепь, направленную на другую молекулу-мишень (например, собачий или кошачий IL31), и константную область κ дикого типа, которая может спариваться с полипептидом Fc типа «впадина» (например, SEQ ID NO:246).
[00127] Могут быть получены другие конфигурации биспецифических антител. Например, в некоторых вариантах осуществления биспецифическое антитело содержит канинизированную или фелинизированную вариабельную тяжелую цепь клона B или клона I и вариант полипептида Fc типа «впадина» собачьего или кошачьего IgG, который может спариваться с вариантом константной области κ. В некоторых вариантах осуществления биспецифическое антитело содержит вариабельную тяжелую цепь, направленную на другую целевую молекулу (например, собачий или кошачий IL31), и вариант полипептида Fc собачьего или кошачьего IgG. В некоторых вариантах осуществления биспецифическое антитело содержит канинизированную или фелинизированную вариабельную легкую цепь клона B или клона I и вариабельную константную область κ, которая может спариваться с полипептидом Fc типа «впадина». В некоторых вариантах осуществления биспецифическое антитело содержит вариабельную легкую цепь, направленную на другую молекулу-мишень (например, собачий или кошачий IL31), и константную область κ дикого типа, которая может спариваться с полипептидом Fc типа «выступ».
[00128] Термин «сродство» означает силу суммарных нековалентных взаимодействий между одним участком связывания молекулы (например, антитела) и ее партнером по связыванию (например, антигеном). Сродство молекулы X к ее партнеру Y обычно можно представить константой диссоциации (KD). Сродство можно измерить обычными методами, известными в данной области, такими как, например, иммуноблоттинг, ELISA KD, KinEx A, биослойная интерферометрия (BLI) или устройства поверхностного плазмонного резонанса.
[00129] Термины «KD», «Kd», «Kd» или «значение Kd» используются взаимозаменяемо для обозначения константы равновесной диссоциации взаимодействия антитело-антиген. В некоторых вариантах осуществления Kd антитела измеряют методом биослойной интерферометрии с помощью биосенсора, такого как система Octet® (Pall ForteBio LLC, Fremont, CA), в соответствии с инструкциями поставщика. Вкратце, биотинилированный антиген связывают с наконечником сенсора, и ассоциацию антитела отслеживают в течение девяноста секунд, а диссоциацию отслеживают в течение 600 секунд. Буфер для стадий разведения и связывания представляет собой 20 мМ фосфат, 150 мМ NaCl, pH 7,2. Пустую кривую только для буфера вычитают для корректировки любого дрейфа. Данные подгоняют под модель связывания 2:1 с помощью программного обеспечения для анализа данных ForteBio для определения константы скорости ассоциации (kon), константы скорости диссоциации (koff) и Kd. Константа равновесной диссоциации (Kd) рассчитывается как отношение koff/kon. Термин «kon» относится к константе скорости ассоциации антитела с антигеном, а термин «koff» относится к константе скорости диссоциации антитела из комплекса антитело/антиген.
[00130] Термин «связывается» с антигеном или эпитопом является термином, хорошо известным в данной области, и способы определения такого связывания также хорошо известны в данной области. Говорят, что молекула проявляет «связывание», если она реагирует, связывается или имеет сродство к конкретной клетке или веществу, и реакцию, ассоциацию или сродство обнаруживают с помощью одного или более методов, известных в данной области, таких как, например, иммуноблот, ELISA KD, KinEx A, биослойная интерферометрия (BLI), устройства поверхностного плазмонного резонанса и т.д.
[00131] «Поверхностный плазмонный резонанс» обозначает оптическое явление, которое позволяет анализировать биоспецифические взаимодействия в реальном времени путем обнаружения изменений концентраций белка в матрице биосенсора, например, с помощью системы BIAcoreТМ (BIAcore International AB, a GE Healthcare company, Uppsala, Sweden and Piscataway, N.J). Дополнительное описание см. В Jonsson et al. (1993) Ann. Biol. Clin. 51:19-26.
[00132] «Биослойная интерферометрия» относится к оптическому аналитическому методу, который позволяет анализировать интерференционную картину света, отраженного от слоя иммобилизованного белка на наконечнике биосенсора и внутреннего эталонного слоя. Изменения количества молекул, связанных с наконечником биосенсора, вызывают сдвиги в интерференционной картине, которые можно измерить в режиме реального времени. Неограничивающим примером устройства для биослойной интерферометрии является система Octet® (Pall ForteBio LLC). См., например, Abdiche et al., 2008, Anal. Biochem. 377:209-277.
[00133] В некоторых вариантах осуществления анти-IL4R антитело связывается с собачьим IL4R или кошачьим IL4R с константой диссоциации (Kd) менее 5×10-6 M, менее 1×10-6 M, менее 5×10-7 M, менее 1×10-7 M, менее 5×10-8 M, менее 1×10-8 M, менее 5×10-9 M, менее 1×10-9 M, менее 5×10-10 M, менее 1×10-10 M, менее 5×10-11 M, менее 1×10-11 M, менее 5×10-12 M или менее 1×10-12 M, согласно данным биослойной интерферометрии. В некоторых вариантах осуществления анти-IL4R антитело связывается с собачьим IL4R или кошачьим IL4R с Kd от 5×10-6 M до 1×10-6 M, от 5×10-6 M до 5×10-7 M, от 5×10-6 M до 1×10-7 M, от 5×10-6 M до 5×10-8 M, от 5×10-6 M до 1×10-8 M, от 5×10-6 M до 5×10-9 M, от 5×10-6 M до 1×10-9 M, от 5×10-6 M до 5×10-10 M, от 5×10-6 M до 1×10-10 M, от 5×10-6 M до 5×10-11 M, от 5×10-6 M до 1×10-11 M, от 5×10-6 M до 5×10-12 M, от 5×10-6 M до 1×10-12 M, от 1×10-6 M до 5×10-7 M, от 1×10-6 M до 1×10-7 M, от 1×10-6 M до 5×10-8 M, от 1×10-6 M до 1×10-8 M, от 1×10-6 M до 5×10-9 M, от 1×10-6 M до 1×10-9 M, от 1×10-6 M до 5×10-10 M, от 1×10-6 M до 1×10-10 M, от 1×10-6 M до 5×10-11 M, от 1×10-6 M до 1×10-11 M, от 1×10-6 M до 5×10-12 M, от 1×10-6 M до 1×10-12 M, от 5×10-7 M до 1х10-7 M, от 5×10-7 M до 5×10-8 M, от 5×10-7 M до 1×10-8 M, от 5×10-7 M до 5×10-9 M, от 5×10-7 M до 1×10-9 M, от 5×10-7 M до 5×10-10 M, от 5×10-7 M до 1×10-10 M, от 5×10-7 M до 5×10-11 M, от 5×10-7 M до 1×10-11 M, от 5×10-7 M до 5×10-12 M, от 5×10-7 M до 1×10-12 M, от 1×10-7 M до 5×10-8 M, от 1×10-7 M до 1×10-8 M, от 1×10-7 M до 5×10-9 M, от 1×10-7 М до 1×10-9 М, от 1×10-7 М до 5×10-10 М, от 1×10-7 М до 1×10-10 М, от 1×10-7 М до 5×10-11 М, от 1×10-7 М до 1×10-11 М, от 1×10-7 М до 5×10-12 М, от 1×10-7 М до 1×10-12 М, от 5×10-8 M до 1×10-8 M, от 5×10-8 M до 5×10-9 M, от 5×10-8 M до 1×10-9 M, от 5×10-8 M до 5×10-10 M, от 5×10-8 M до 1×10-10 M, от 5×10-8 M до 5×10-11 M, от 5×10-8 M до 1×10-11 M, от 5×10-8 M до 5×10-12 M, от 5×10-8 M до 1×10-12 M, 1×10-8 M до 5×10-9 M, от 1×10-8 M до 1×10-9 M, от 1×10-8 M до 5×10-10 M, от 1×10-8 M до 1×10-10 M, от 1×10-8 M до 5×10-11 M, от 1×10-8 M до 1×10-11 M, от 1×10-8 M до 5×10-12 M, от 1×10-8 M до 1×10-12 M, от 5×10-9 M до 1×10-9 M, от 5×10-9 M до 5×10-10 M, от 5×10-9 M до 1×10-10 M, от 5×10-9 M до 5×10-11 M, от 5×10-9 M до 1×10-11 M, от 5×10-9 M до 5×10-12 M, от 5×10-9 M до 1×10-12 M, от 1×10-9 M до 5×10-10 M, от 1×10-9 M до 1×10-10 M, от 1×10-9 M до 5×10-11 M, от 1×10-9 M до 1×10-11 M, от 1×10-9 M до 5×10-12 M, от 1×10-9 M до 1×10-12 M, от 5×10-10 M до 1×10-10 M, от 5×10-10 M до 5×10-11 M, от 1×10-10 M до 5×10-11 M, от 1×10-10 M до 1×10-11 M, от 1×10-10 M до 5×10-12 M, от 1×10-10 М до 1×10-12 М, от 5×10-11 М до 1×10-12 M, от 5×10-11 M до 5×10-12 M, от 5×10-11 M до 1×10-12 M, от 1×10-11 M до 5×10-12 M или от 1×10-11 М до 1×10-12 М, согласно данным биослойной интерферометрией. В некоторых вариантах осуществления анти-IL4R антитело связывается с собачьим IL4R или кошачьим IL4R, согласно данным иммуноблот анализа.
[00134] В некоторых вариантах осуществления предложено анти-IL4R антитело, которое конкурирует с анти-IL4R антителом, раскрытым в настоящем описании (таким как клон B или клон I), за связывание с IL4R. В некоторых вариантах осуществления может быть получено или использовано антитело, которое конкурирует за связывание с любым из представленных в настоящем описании антител. В некоторых вариантах осуществления предложено анти-IL4R антитело, которое конкурирует с моноклональным антителом клона B или клона I за связывание с собачьим IL4R или кошачьим IL4R.
[00135] Термин «вектор» используется для описания полинуклеотида, который может быть сконструирован таким образом, чтобы он содержал клонированный полинуклеотид или полинуклеотиды, которые могут размножаться в клетке-хозяине. Вектор может включать один или более из следующих элементов: точку начала репликации, одну или более регуляторных последовательностей (таких как, например, промоторы или энхансеры), которые регулируют экспрессию представляющего интерес полипептида, или один или более генов селективных маркеров (таких как, например, гены устойчивости к антибиотикам и гены, которые можно использовать в колориметрических анализах, например, β-галактозидаза). Термин «вектор экспрессии» относится к вектору, который используется для экспрессии представляющего интерес полипептида в клетке-хозяине.
[00136] «Клетка-хозяин» относится к клетке, которая может быть или была реципиентом вектора или выделенного полинуклеотида. Клетки-хозяева могут быть прокариотическими клетками или эукариотическими клетками. Примеры эукариотических клеток включают клетки млекопитающих, такие как клетки животных приматов или неприматов; клетки грибов, таких как дрожжи; клетки растений; и клетки насекомых. Неограничивающие примеры клеток млекопитающих включают, без ограничения, клетки NS0, клетки PER.C6® (Crucell), клетки 293 и клетки CHO и их производные, такие как клетки 293-6E, DG44, CHO-S и CHO-K. Клетки-хозяева включают потомство одной клетки-хозяина, и это потомство не обязательно может быть полностью идентичным (по морфологии или комплементарной геномной ДНК) исходной родительской клетке вследствие естественной, случайной или преднамеренной мутации. Клетка-хозяин включает клетки, трансфицированные in vivo полинуклеотидом(ами), кодирующим аминокислотную последовательность(и), представленную в настоящем описании.
[00137] Термин «выделенный» в контексте настоящего описания относится к молекуле, которая была отделена от по меньшей мере некоторых компонентов, с которыми она обычно встречается в природе или продуцируется. Например, полипептид называют «выделенным», когда он отделен от по меньшей мере некоторых компонентов клетки, в которой был продуцирован. Когда полипептид секретируется клеткой после экспрессии, физическое отделение супернатанта, содержащего полипептид, от клетки, которая его продуцирует, считается «выделением» полипептида. Точно так же полинуклеотид называют «выделенным», если он не является частью более крупного полинуклеотида (такого как, например, геномная ДНК или митохондриальная ДНК, в случае ДНК полинуклеотида), в котором он обычно встречается в природе, или отделен по меньшей мере от некоторых компонентов клетки, в которой он был продуцирован, например, в случае РНК-полинуклеотида. Таким образом, ДНК-полинуклеотид, который содержится в векторе внутри клетки-хозяина, можно назвать «выделенным». В некоторых вариантах осуществления анти-IL4R антитело очищают с помощью хроматографии, такой как эксклюзионная хроматография, ионообменная хроматография, колоночная хроматография с белком A, хроматография гидрофобного взаимодействия и хроматография CHT.
[00138] Термин «виды животных-компаньонов» относится к животному, подходящему в качестве компаньона для людей. В некоторых вариантах осуществления вид домашнего животного-компаньона представляет собой небольшое млекопитающее, такое как представитель семейства псовых, представитель семейства кошачьих, собака, кошка, лошадь, кролик, хорек, морская свинка, грызун и т.д. В некоторых вариантах осуществления вид домашнего животного-компаньона представляет собой сельскохозяйственное животное, например, лошадь, корову, свинью и т.д.
[00139] «Уменьшать» или «ингибировать» означает уменьшать, ослаблять или купировать активность, функцию или количество по сравнению с эталоном. В некоторых вариантах осуществления под «уменьшение» или «ингибированием» подразумевается способность вызывать общее уменьшение на 20% или более. В некоторых вариантах осуществления под «уменьшением» или «ингибированием» подразумевается способность вызывать общее уменьшение на 50% или более. В некоторых вариантах осуществления под «уменьшением» или «ингибированием» подразумевается способность вызывать общее уменьшение на 75%, 85%, 90%, 95% или более. В некоторых вариантах осуществления указанное выше количество ингибируется или уменьшается в течение определенного периода времени по сравнению с контрольной дозой (например, плацебо) в течение того же периода времени. Используемый в настоящем описании термин «эталон» относится к любому образцу, стандарту или уровню, который используется для целей сравнения. Эталон может быть получен из здорового или не имеющего заболевания образца. В некоторых примерах эталон получают из образца здорового или не болеющего животного-компаньона. В некоторых примерах эталон получают от одного или более здоровых животных определенного вида, которые не являются животными, которых тестируют или лечат.
[00140] В контексте настоящего описания термин «существенно уменьшенный» обозначает достаточно высокую степень уменьшения числового значения относительно эталонного числового значения, настолько, что специалист в данной области техники может рассматривать эту разницу между двумя значениями статистически значимой в контексте биологической характеристики, измеряемой указанными значениями. В некоторых вариантах осуществления существенно уменьшенные числовые значения уменьшены на более чем примерно любое из 10%, 15% 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90% или 100% по сравнению с эталонным значением.
[00141] Термины «фармацевтический состав» и «фармацевтическая композиция» относятся к препарату, который находится в такой форме, которая делает эффективной биологическую активность активного ингредиента(ов) и которая не содержит дополнительных компонентов, являющихся неприемлемо токсичными для субъекта, которому будет введен этот состав.
[00142] «Фармацевтически приемлемый носитель» относится к нетоксичному твердому, полутвердому или жидкому наполнителю, разбавителю, инкапсулирующему материалу, вспомогательному составу или носителю, обычно используемому в данной области с терапевтическим агентом, которые вместе составляют «фармацевтическую композицию», предназначенную для введения субъекту. Фармацевтически приемлемый носитель является нетоксичным для реципиентов в используемых дозировках и концентрациях и совместим с другими ингредиентами препарата. Фармацевтически приемлемый носитель подходит для используемого препарата. Примеры фармацевтически приемлемых носителей включают оксид алюминия; стеарат алюминия; лецитин; сывороточные белки, такие как человеческий сывороточный альбумин, собачий или другой животный альбумин; буферы, такие как фосфатный, цитратный, трометамин или буферы HEPES; глицин; сорбиновая кислота; сорбат калия; смеси моноглицеридов насыщенных жирных кислот растительного происхождения; воду; соли или электролиты, такие как сульфат протамина, гидрофосфат динатрия, гидрофосфат калия, хлорид натрия, соли цинка, коллоидный диоксид кремния или трисиликат магния; поливинилпирролидон, вещества на основе целлюлозы; полиэтиленгликоль; сахарозу; маннит; или аминокислоты, включая, без ограничения, аргинин.
[00143] Фармацевтическая композиция может храниться в лиофилизированной форме. Таким образом, в некоторых вариантах осуществления процесс приготовления включает стадию лиофилизации. Затем перед введением состав лиофилизированной композиции может быть преобразован, обычно в водную композицию, подходящую для парентерального введения собаке, кошке или лошади. В других вариантах осуществления, особенно когда антитело является высокостабильным к термической и окислительной денатурации, фармацевтическая композиция может храниться в виде жидкости, т.е. в виде водной композиции, которую можно вводить непосредственно или после соответствующего разбавления собаке, кошке, или лошади. Лиофилизированная композиция может быть восстановлена с помощью стерильной воды для инъекций (WFI). Могут быть включены бактериостатические реагенты, такие как бензиловый спирт. Таким образом, изобретение относится к фармацевтическим композициям в твердой или жидкой форме.
[00144] При введении значение pH фармацевтических композиций может находиться в диапазоне от примерно pH 5 до примерно pH 8. Композиции по изобретению стерильны, если их предполагается использовать в терапевтических целях. Стерильность может быть достигнута любым из нескольких способов, известных в данной области, включая фильтрацию через стерильные фильтрующие мембраны (например, мембраны 0,2 мкм). Стерильность можно поддерживать с помощью антибактериальных агентов или без них.
[00145] Антитела или фармацевтические композиции, содержащие антитела по изобретению, могут быть полезны для лечения IL4/IL13-индуцированного состояния. В контексте настоящего описания «IL4/IL13-индуцированное состояние» означает заболевание, связанное, вызванное или характеризующееся повышенными уровнями или измененными градиентами концентрации IL4/IL13. Такие IL4/IL13-индуцированные состояния включают, без ограничения, зуд или аллергическое заболевание. В некоторых вариантах осуществления IL4/IL13 индуцированное состояние представляет собой атопический дерматит, аллергический дерматит, зуд, астму, псориаз, склеродермию или экзему. IL4/IL13-индуцированное состояние может проявляться у домашнего животного, включая, без ограничения, представителей семейства псовых или кошачьих.
[00146] Используемый в настоящем описании термин «лечение» представляет собой подход для получения полезных или требуемых клинических результатов. Используемый в настоящем описании термин «лечение» охватывает любое введение или применение терапевтического средства для лечения заболевания у млекопитающего, включая животное-компаньон. Для целей настоящего раскрытия полезные или желаемые клинические результаты включают, помимо прочего, любое одно или более из следующего: облегчение одного или более симптомов, уменьшение степени заболевания, предотвращение или замедление распространения заболевания, предотвращение или отсрочка рецидива заболевания, задержка или замедление прогрессирования заболевания, облегчение болезненного состояния, ингибирование заболевания или егопрогрессирования заболевания, ингибирование или замедление заболевания или его прогрессирования, остановка развития заболевания и ремиссия (частичная или полная). Термин «лечение» также включает уменьшение патологических последствий пролиферативного заболевания. Способы, представленные в настоящем описании, предусматривают любой один или более из этих аспектов лечения. В соответствии с вышеизложенным, термин «лечение» не требует полного устранения всех аспектов расстройства.
[00147] В некоторых вариантах осуществления анти-IL4R антитело или фармацевтическая композиция, содержащая анти-IL4R антитело, может использоваться в соответствии со способами, раскрытыми в настоящем описании, для лечения IL4/IL13-индуцированных состояний. В некоторых вариантах осуществления анти-IL4R антитело или фармацевтическую композицию, содержащую анти-IL4R антитело, вводят животному-компаньону, такому как представитель семейства псовых или кошачьих, для лечения IL4/IL13-индуцированного состояния.
[00148] «Терапевтически эффективное количество» вещества/молекулы, агониста или антагониста может меняться в зависимости от таких факторов, как тип заболевания, подлежащего лечению, болезненное состояние, тяжесть и течение заболевания, тип терапевтического назначения, любая предыдущая терапия, история болезни, реакция на предыдущее лечение, усмотрение лечащего ветеринара, возраст, пол и вес животного, и способность вещества/молекулы, агониста или антагониста вызывать требуемый ответ у животного. Терапевтически эффективным количеством также является такое количество, при котором терапевтически полезные эффекты перевешивают любые токсические или вредные эффекты вещества/молекулы, агониста или антагониста. Терапевтически эффективное количество может быть доставлено за одно или несколько введений. Терапевтически эффективное количество относится к количеству, эффективному в дозах и в течение периодов времени, необходимых для достижения требуемого терапевтического или профилактического результата.
[00149] В некоторых вариантах осуществления анти-IL4R антитело или фармацевтическую композицию, содержащую анти-IL4R антитело, вводят парентерально, путем подкожного введения, путем внутривенной инфузии или внутримышечной инъекции. В некоторых вариантах осуществления анти-IL4R антитело или фармацевтическую композицию, содержащую анти-IL4R антитело, вводят в виде болюсной инъекции или путем непрерывной инфузии в течение определенного периода времени. В некоторых вариантах осуществления анти-IL4R антитело или фармацевтическую композицию, содержащую анти-IL4R антитело, вводят внутримышечно, внутрибрюшинно, интрацереброспинально, подкожно, внутриартериально, интрасиновиально, интратекально или путем ингаляции.
[00150] Анти-IL4R антитела, раскрытые в настоящем описании, можно вводить в количестве от 0,1 мг/кг массы тела до 100 мг/кг массы тела на дозу. В некоторых вариантах осуществления анти-IL4R антитела можно вводить в количестве от 0,5 мг/кг массы тела до 50 мг/кг массы тела на дозу. В некоторых вариантах осуществления анти-IL4R антитела можно вводить в количестве от 1 мг/кг массы тела до 10 мг/кг массы тела на дозу. В некоторых вариантах осуществления анти-IL4R антитела можно вводить в количестве в диапазоне от 0,5 мг/кг массы тела до 100 мг/кг тела, в диапазоне от 1 мг/кг массы тела до 100 мг/кг массы тела, в диапазон от 5 мг/кг массы тела до 100 мг/кг массы тела, в диапазоне от 10 мг/кг массы тела до 100 мг/кг массы тела, в диапазоне от 20 мг/кг массы тела до 100 мг/кг масса тела в диапазоне от 50 мг/кг массы тела до 100 мг/кг массы тела, в диапазоне от 1 мг/кг массы тела до 10 мг/кг массы тела, в диапазоне от 5 мг/кг массы тела до 10 мг/кг массы тела, в диапазоне от 0,5 мг/кг массы тела до 10 мг/кг массы тела или в диапазоне от 5 мг/кг массы тела до 50 мг/кг массы тела.
[00151] Анти-IL4R антитело или фармацевтическую композицию, содержащую анти-IL4R антитело, можно вводить домашнему животному за один раз или в течение нескольких обработок. Например, анти-IL4R антитело или фармацевтическую композицию, содержащую анти-IL4R антитело, можно вводить по меньшей мере один раз, более одного раза, по меньшей мере два раза, по меньшей мере три раза, по меньшей мере четыре раза или по меньшей мере пять раз.
[00152] В некоторых вариантах осуществления дозу вводят один раз в неделю в течение по меньшей мере двух или трех последовательных недель, и в некоторых вариантах осуществления этот цикл лечения повторяют два или более раз, необязательно чередуя с одной или более неделями без лечения. В других вариантах осуществления терапевтически эффективную дозу вводят один раз в сутки в течение двух-пяти последовательных дней, и в некоторых вариантах осуществления этот цикл лечения повторяют два или более раз, необязательно с перерывами на один или несколько дней или недель без лечения.
[00153] Введение «в комбинации с» одним или более дополнительными терапевтическими агентами включает одновременное (параллельное) и последующее или последовательное введение в любом порядке. Термин «одновременно» используется в настоящем описании для обозначения введения двух или более терапевтических агентов, когда по меньшей мере часть введения перекрывается по времени или когда введение одного терапевтического агента попадает на короткий отрезок времени введения другого терапевтического агента. Например, два или более терапевтических агента вводят с интервалом не более примерно определенного количества минут. Термин «последовательно» используется в настоящем описании для обозначения введения двух или более терапевтических агентов, когда введение одного или более агентов продолжается после прекращения введения одного или более других агентов, или когда введение одного или более агентов начинается до введения одного или более других агентов. Например, введение двух или более терапевтических агентов осуществляется с интервалом более примерно определенного количества минут. В контексте настоящего описания «в сочетании с» относится к введению одного лечебного средства дополнительно к другому терапевтическому средству. Таким образом, «в сочетании с» относится к введению одного лечебного средства до, во время или после введения животному другого терапевтического средства.
[00154] В некоторых вариантах осуществления способ включает введение анти-IL4R антитела или фармацевтической композиции, содержащей анти-IL4R антитело, в комбинации с ингибитором Jak, ингибитором Tyk2, ингибитором PI3K, ингибитором ERK. В некоторых вариантах осуществления способ включает введение анти-IL4R антитела или фармацевтической композицией, содержащей анти-IL4R антитело, в комбинации с анти-IL31 антителом, анти-IL17 антителом, анти-TNFα антителом, анти-CD20 антителом, анти-CD19 антителом, анти-CD25 антителом, анти-IL4 антителом, анти-IL13 антителом, анти-IL23 антителом, анти-IgE антителом, анти-CD11α антителом, анти-IL6R антителом, антителом к α4-интергрину, анти-IL12 антителом, анти-IL1β антителом или анти-BlyS антителом.
[00155] В настоящем описании представлены способы воздействия анти-IL4R антитела или фармацевтической композиции, содержащей анти-IL4R антитело, на клетку в условиях, допускающих связывание антитела с IL4R. В некоторых вариантах осуществления клетка представляет собой клетку собаки, клетку кошки или клетку лошади. В некоторых вариантах осуществления клетка представляет собой клетку DH82 собаки. В некоторых вариантах осуществления клетка подвергается действию антитела или фармацевтической композиции ex vivo. В некоторых вариантах осуществления клетка подвергается действию антитела или фармацевтической композиции in vivo. В некоторых вариантах осуществления на клетку воздействуют анти-IL4R антителом. В некоторых вариантах осуществления на клетку воздействуют анти-IL4R антителом или фармацевтической композицией в условиях, допускающих связывание антитела с внеклеточным IL4R. В некоторых вариантах осуществления клетка может подвергаться воздействию анти-IL4R антитела или фармацевтической композиции in vivo любым одним или более способами введения, раскрытыми в настоящем описании, включая, без ограничения, внутрибрюшинную, внутримышечную, внутривенную инъекцию субъекту. В некоторых вариантах осуществления клетка может подвергаться воздействию анти-IL4R антитела или фармацевтической композиции ex vivo путем воздействия на клетку культуральной среды, содержащей антитело или фармацевтическую композицию. В некоторых вариантах осуществления на проницаемость клеточной мембраны можно воздействовать, используя любое количество методов, известных специалистам в данной области (таких как электропорация клеток или воздействие на клетки раствора, содержащего хлорид кальция) до того, как клетка будет подвержена воздействию культуральной среды, содержащей антитело или фармацевтическую композицию.
[00156] В настоящем описании представлены способы применения анти-IL4R антител, полипептидов и полинуклеотидов для детектирования, диагностики и мониторинга IL4R-индуцированного состояния. В настоящем описании представлены способы определения того, будет ли животное-компаньон отвечать на терапию анти-IL4R антителами. В некоторых вариантах осуществления способ включает определение путем использования анти-IL4R антитела наличия у животного клеток, экспрессирующих IL4R. В некоторых вариантах осуществления способ детектирования включает контактирование образца с антителом, полипептидом или полинуклеотидом и определение того, отличается ли уровень связывания от уровня связывания эталонного образца или образца сравнения (такого как контроль). В некоторых вариантах осуществления способ может быть полезен для определения, являются ли антитела или полипептиды, раскрытые в настоящем описании, подходящими для лечения данного животного.
[00157] В некоторых вариантах осуществления образец представляет собой биологический образец. Термин «биологический образец» означает количество вещества, полученного от живого или ранее живого существа. В некоторых вариантах осуществления биологический образец представляет собой клетку или лизат клеток/ткани. В некоторых вариантах осуществления биологический образец включает, помимо прочего, кровь (например, цельную кровь), плазму, сыворотку, мочу, синовиальную жидкость и эпителиальные клетки.
[00158] В некоторых вариантах осуществления клетки или лизат клеток/ткани приводят в контакт с анти-IL4R антителом и определяют связывание между антителом и клеткой. Когда тестируемые клетки демонстрируют связывающую активность относительно контрольных клеток того же типа ткани, это может указывать на то, что субъекту будет полезно лечение анти-IL4R антителом. В некоторых вариантах осуществления тестируемые клетки получают из ткани животного-компаньона.
[00159] Для обнаружения специфического связывания антитело-антиген можно использовать различные методы, известные в данной области. Примеры иммуноанализов, которые могут быть выполнены, включают иммуноферментный флуоресцентный поляризационный анализ (FPIA), флуоресцентный иммуноанализ (FIA), иммуноферментный анализ (EIA), нефелометрический иммуноанализ ингибирования (NIA), твердофазный иммуноферментный анализ (ELISA) и радиоиммуноанализ (RIA). Индикаторный фрагмент или группа-метка может быть присоединена с рассматриваемым антителам и выбрана таким образом, чтобы она удовлетворяла требованиям различных схем применения метода, которые часто определяются доступностью аналитического оборудования и совместимых процедур иммуноанализа. Соответствующие метки включают, без ограничения, радионуклиды (например, 125I, 131I, 35S, 3H или 32P), ферменты (например, щелочную фосфатазу, пероксидазу хрена, люциферазу или β-галактозидазу), флуоресцентные фрагменты или белки (например, флуоресцеин, родамин, фикоэритрин, GFP или BFP) или люминесцентные составляющие (например, наночастицы QdotТМ, поставляемые Quantum Dot Corporation, Palo Alto, Calif). Общие методы, которые следует использовать при выполнении различных иммуноанализов, указанных выше, известны специалистам в данной области.
[00160] В целях диагностики полипептид, включающий антитела, может быть меченным детектируемым фрагментом, включая, без ограничения, радиоизотопы, флуоресцентные метки и различные фермент-субстратные метки, известные в данной области. Способы конъюгирования меток с антителом известны в данной области. В некоторых вариантах осуществления анти-IL4R антитела не нуждаются в метке, и их присутствие может быть обнаружено с помощью второго меченого антитела, которое связывается с первым анти-IL4R антителом. В некоторых вариантах осуществления анти-IL4R антитело можно использовать в любом известном методе анализа, таком как анализы конкурентного связывания, прямые и непрямые сэндвич-анализы и анализы иммунопреципитации. Zola, Monoclonal Antibodies: A Manual of Techniques, pp. 147-158 (CRC Press, Inc. 1987). Анти-IL4R антитела и полипептиды также можно использовать для диагностических анализов in vivo, таких как in vivo визуализация. Обычно антитело или полипептид метят радионуклидом (таким как 111In, 99Tc, 14C, 131I, 125I, 3H или любой другой радионуклидной меткой, включая указанные в настоящем описании) для возможности локализации представляющих интерес клеток или ткани с помощью иммуноцинтиографии. Антитело также можно использовать при патологии в качестве окрашивающего реагента с помощью методов, хорошо известных в данной области.
[00161] В некоторых вариантах осуществления первое антитело используется для диагностики, а второе антитело используется в качестве терапевтического. В некоторых вариантах осуществления первое и второе антитела отличаются друг от друга. В некоторых вариантах осуществления первое и второе антитела могут связываться с антигеном одновременно, связываясь с отдельными эпитопами.
[00162] В настоящем описании представлены способы скрининга молекулы, которая ингибирует сигнальную функцию IL4 и/или IL13, включающие воздействие молекулы на клетку DH82 собаки и определение, уменьшается ли фосфорилирование STAT6. В некоторых вариантах осуществления молекула содержит анти-IL4R антитело или низкомолекулярный антагонист IL4R. В некоторых вариантах осуществления молекула содержит анти-IL4R антитело или низкомолекулярный антагонист IL13R. В некоторых вариантах осуществления молекула содержит анти-IL4R антитело или низкомолекулярный антагонист IL4. В некоторых вариантах осуществления молекула содержит анти-IL4R антитело или низкомолекулярный антагонист IL13.
[00163] Приведенные ниже примеры иллюстрируют конкретные аспекты изобретения и никоим образом не предназначены для его ограничения.
ПРИМЕРЫ
Пример 1
Приготовление реагентов ECD IL4 и IL4R
[00164] Нуклеотидные последовательности, кодирующие слитые белки, содержащие (1) любое из: полноразмерного собачьего IL4R (SEQ ID NO:94), ECD IL4R собаки, кошки, лошади, мыши или человека (SEQ ID NO:99, 100, 101, 102 или 103) и IL4 собаки, кошки или лошади (SEQ ID NO:121, 122 или 123), (2) одно или более из His6-метки, человеческого Fc и/или FLAG, (3) одну или более линкерных последовательностей и (4) лидерную последовательность, синтезировали и клонировали в отдельные экспрессионные плазмиды млекопитающих. Плазмиды отдельно трансфицировали в клетки 293, культивировали, и супернатанты, содержащие секретированные полипептиды ECD IL4R или слитые полипептиды IL4, отдельно собирали и фильтровали. Поли-His слитые белки подвергали аффинной очистке с помощью колонки Ni NTA (GE Healthcare Life Sciences), а слитые белки Fc человека подвергали аффинной очистке с помощью аффинной смолы CaptivA® с белком A (Repligen). Очищенные слитые белки подтверждали анализом SDS-PAGE (данные не показаны). Слитые белки (до и после обработки) приведены в таблице 3 ниже.
[00165] Таблица 3.
Пример 2
Идентификация мышиных моноклональных антител, которые связываются с собачьим IL4R
[00166] Мышиные моноклональные антитела идентифицировали после стандартной иммунизации очищенным собачьим IL4R-ECD_C-His6 (SEQ ID NO:107) в качестве иммуногена. Во время иммунизации использовали различные адъюванты (Akesobio, Inc., China), и моноклональные антитела получали с помощью стандартной гибридомной технологии.
[00167] Для скрининга клонов, которые продуцируют IL4R-связывающие антитела, был разработан иммуноферментный анализ (ELISA). Сначала в лунки, покрытые стрептавидином, вводили биотинилированный IL4R-ECD_C-His6 (SEQ ID NO:107). Затем в лунки добавляли иммунизированную сыворотку с последующей промывкой и детектированием с помощью конъюгированных с HRP антимышиных антител. Присутствие собачьих IL4R-связывающих антител, давало положительный сигнал. Было идентифицировано более 121 ведущего ELISA-положительного клона.
[00168] 121 клон антител подвергали скринингу на способность блокировать взаимодействие между собачьим IL4 и собачьим IL4R ECD с помощью ELISA. Собачий IL4R-ECD_C-HuFc_His6 (SEQ ID NO:109) иммобилизовали в лунках, покрытых античеловеческим Fc. Добавляли супернатант гибридомы, затем биотинилированный собачий IL4_C-His6 (SEQ ID NO:127) и затем стрептавидин-HRP. Уменьшение сигнала указывало на уменьшение взаимодействий между собачьим IL4R ECD и собачьим IL4. Было идентифицировано одиннадцать клонов, которые обозначены как клоны A, B, C, D, E, F, G, H, I, J и K. Каждый из клонов дополнительно культивировали, и полученные IgG антитела очищали с помощью стандартной аффинной хроматографии с белком A.
[00169] Связывание каждого клона с ECD собачьего IL4R подтверждали с помощью биосенсорного анализа (Forte Bio Octet). Сначала биотинилированный собачий IL4R-ECD_C-His6 (SEQ ID NO:107) связывали с покрытыми стрептавидином наконечниками сенсора. Затем оценивали связывание каждого из одиннадцати клонов антител с наконечником сенсора, связанным с собачьим IL4R-ECD.
Пример 3
Антитела клонов B и I блокируют связывание IL4 с собачьим IL4R
[00170] Одиннадцать антител оценивали с помощью биосенсорного анализа (Forte Bio Octet) на способность комплекса антитело-ECD IL4R уменьшать связывание лиганда собачьего IL4. Биотинилированный собачий IL4R-ECD_C-His6 (SEQ ID NO:107) захватывали с помощью покрытых стрептавидом наконечников сенсора. Наконечники, связанные с ECD IL4R, подвергали воздействию каждого из одиннадцати мышиных антител (клоны A, B, C, D, E, F, G, H, I, J и K) по отдельности при концентрации 20 мкг/мл с образованием бинарных комплексов IL4R ECD-антитело. Затем связанные с комплексом наконечники подвергали воздействию собачьего IL4_C-His6 (SEQ ID NO:127) в высокой концентрации (240 мкг/мл). Комплексы собачий IL4R ECD-антитело клонов B и I не могли связываться с собачьим IL4, что позволяет предположить, что оба клона B и I являются нейтрализующими антителами.
Пример 4
Идентификация последовательностей ДНК, кодирующих VH и VL моноклональных антител
[00171] Гибридомные клоны B и I осаждали, и экстрагировали общую РНК. Олигонуклеотидные праймеры для амплификации вариабельных доменов мышиного иммуноглобулина (Ig) использовали для получения кДНК с помощью стандартных методов. Тяжелую и легкую цепи каждого клона секвенировали и анализировали путем выравнивания последовательностей (фиг. 1A и фиг. 1B, соответственно). Типичные последовательности CDR клона B идентифицировали как SEQ ID NO:7-9 и 14-16, а клона I идентифицировали как SEQ ID NO:29-31 и 36-38. Типичные консенсусные последовательности CDR идентифицировали как CDR-H1: GYTFTSYVMH (SEQ ID NO:1), CDR-H2: YINPX1NDGTFYNGX2X3X4G (SEQ ID NO:2), где X1 представляет собой K или A, X2 представляет собой K или A, X3 представляет собой F или V, и X4 представляет собой K или Q, или YINPX1NDGT, где X1 представляет собой K или A (SEQ ID NO:268); CDR-H3: FX5YGX6AY (SEQ ID NO:3), где X5 представляет собой N или Y, и X6 представляет собой I или F, CDR-L1: RASQEISGYLS (SEQ ID NO:4); CDR-L2: AASX7X8DX9 (SEQ ID NO:5), где X7 представляет собой T или N, X8 представляет собой R или L, и X9 представляет собой S или T; и CDR-L3: VQYASYPWT (SEQ ID NO:6).
Пример 5
Экспрессия и очистка анти-IL4R-mAb клонов B и I
[00172] Нуклеотидные последовательности, кодирующие полноразмерные полипептиды тяжелой и легкой цепи клонов B и I с лидерными последовательностями (SEQ ID NOs 27, 28, 49 и 50), химически синтезировали и клонировали в отдельные векторы экспрессии, подходящие для трансфекции клетки-хозяина CHO. Векторы клона B и клона I трансфицировали в отдельные клетки-хозяева СНО и культивировали. Антитела клона B и клона I очищали из культуральной среды одностадийной хроматографией на колонке с белком А.
[00173] Термостабильность антител клонов B и I как функцию pH измеряли с помощью дифференциальной сканирующей флуориметрии (DSF). Температура плавления (Tm) каждого антитела при различных значениях pH указана в таблице 4 ниже. Буфер и 12 мкг антитела смешивали вместе с красителем 1X Protein thermal shift dye (Applied Biosystem, кат. № 4461146). Кривую плавления получали с помощью системы одностадийной ПЦР в реальном времени (Applied Biosystem, кат. № 4376357). Температуру повышали с 25°C до 99°C со скоростью изменения 1% в соответствии с инструкциями производителя. Данные анализировали с помощью программного обеспечения Protein Thermal ShiftTM v1.0 (Applied Biosystem, кат. № 4466038) для определения Tm, которую вычисляли как наивысшее значение, полученное при вычислении первой производной кривой плавления белка.
[00174] Таблица 4.
Пример 6
Демонстрация активности связывания собачьего IL4R
[00175] Каждое из антител клона B и I проявляло сродство к собачьему IL4R с кинетикой, потенциально достаточной для терапевтической активности. Анализ связывания выполняли с помощью Octet Biosensor следующим образом. Вкратце, собачий IL4R-ECD_C-His6 (SEQ ID NO:107) биотинилировали с помощью аминов. Свободный непрореагировавший биотин удаляли экстенсивным диализом. Биотинилированный собачий IL4R-ECD_C-His6 захватывали покрытыми стрептавидином наконечниками сенсора. Связь антитела либо клона B, либо I и собачьего IL4R-ECD_C-His6 (25 мкг/мл) отслеживали в течение 600 секунд. За диссоциацией наблюдали в течение 600 секунд. Пустую кривую только для буфера вычитали для корректировки любого дрейфа. Данные подгоняли к модели связывания 1:1 с помощью программного обеспечения для анализа данных ForteBioТМ для определения kon, koff и Kd. Буфер для разведения и всех стадий связывания представлял собой 20 мМ фосфат, 150 мМ NaCl, pH 7,2. Значение Kd для антитела клона B и собачьего IL4R-ECD_C-His6 составило 2,03×10-9 М, и для антитела клона I и собачьего IL4R-ECD_C-His6 составило 1,79×10-9 М.
[00176] Альтернативный анализ связывания выполняли аналогично с помощью Octet Biosensor. Собачий IL4R-ECD_C-HuFc_His6 (SEQ ID NO:109) захватывали наконечниками сенсоров, связанными с античеловеческими Fc. Связь антитела либо клона B, либо I и собачьего IL4R-ECD_C-HuFc_His6 отслеживали в течение 600 секунд. За диссоциацией наблюдали в течение 600 секунд. Буфер для разведения и всех стадий связывания представлял собой 20 мМ фосфат, 150 мМ NaCl, pH 7,2. Значение Kd для антитела клона B и собачьего IL4R-ECD_C-HuFc_His6 составило примерно 10-10 мкМ, и для антитела клона I и собачьего IL4R-ECD_C-HuFc_His6 составило 2,75×10-10 М. Повышенное сродство, наблюдаемое во втором анализе, может быть связано с увеличением авидности антител клонов B и I к собачьему IL4R-ECD_C-HuFc_His6 по сравнению с собачьим IL4R-ECD_C-His6. Кроме того, на сродство связывания собачьего IL4R-ECD_C-His6 с антителами клонов B и I может влиять конъюгация с амином.
Пример 7
Антитела клонов B и I конкурируют за одну и ту же группу эпитопа IL4R
[00177] Анализ связывания эпитопа выполняли с помощью Octet Biosensor. Собачий IL4R-ECD_C-HuFc_His6 (SEQ ID NO:109) захватывали наконечниками сенсоров, связанных с антителом к человеческому Fc-фрагменту. Связь антитела клона B (50 мкг/мл) и собачьего IL4R-ECD_C-HuFc_His6 отслеживали в течение 600 секунд. Связанные с комплексом наконечники быстро промывали и затем подвергали воздействию антитела клона I (50 мкг/мл). После этапа промывки и воздействия антитела клона I не наблюдали никакой дальнейшей ассоциации собачьего IL4R-ECD_C-HuFc_His6 (фиг. 2A), что позволяет предположить, что антитела клонов B и I связываются с одной и той же группой эпитопа. Также был проведен противоположный анализ связывания. Связь между антителом клона I (50 мкг/мл) и собачьим IL4R-ECD_C-HuFc_His6, захваченным на наконечниках сенсоров, связанных с антителом к человеческому Fc-фрагменту, отслеживали в течение 600 секунд. Связанные с комплексом наконечники быстро промывали и затем подвергали воздействию антитела клона B (50 мкг/мл). После этапа промывки и воздействия антитела клона B не наблюдали никакой дальнейшей ассоциации собачьего IL4R-ECD_C-HuFc_His6 (фиг. 2B), что снова указывает на то, что антитела клона B и клона I связываются с одной и той же группой эпитопа.
Пример 8
Антитела клонов B и I блокируют связывание IL4 и IL13 с IL4R
[00178] Различные анализы связывания лигандов клона B, клона I, собачьего IL4 и собачьего IL13 с собачьим IL4R выполняли с помощью биосенсора Octet. Собачий IL4R-ECD_C-HuFc_His6 (SEQ ID NO:109) захватывали наконечниками сенсоров, связанными с антителом к человеческому Fc-фрагменту. Связь антитела клона B или клона I (25 мкг/мл) и собачьего IL4R-ECD_C-HuFc_His6 отслеживали в течение 600 секунд. Связанные с комплексом наконечники быстро промывали и затем подвергали действию собачьего IL4_C-His6 (SEQ ID NO:127; 50 мкг/мл) или собачьего IL13_C-His6 (SEQ ID NO:157; 50 мкг/мл) и наблюдали в течение 600 секунд. Связывание собачьего IL4 (фиг. 3A) или собачьего IL-13 (фиг. 3B) практически не наблюдалось, что позволяет предположить, что антитела клонов B и I блокируют связывание собачьего IL4 и собачьего IL13 с собачьим IL4R.
[00179] Также выполняли противоположный анализ связывания. Связь между собачьим IL4_C-His6 (SEQ ID NO:127; 50 мкг/мл) или собачьим IL13_C-His6 (SEQ ID NO:157; 50 мкг/мл) и собачьим IL4R-ECD_C-HuFc_His6, захваченными наконечниками сенсоров, связанными с антителом к человеческому Fc-фрагменту, отслеживали в течение 600 секунд. Связанные с комплексом наконечники быстро промывали и затем подвергали воздействию антитела клона B (50 мкг/мл) или антитела клона I (50 мкг/мл) и наблюдали в течение 600 секунд. После связывания IL4 и IL13 с IL4R (фиг. 3C и фиг. 3D, соответственно) наблюдали дополнительное связывание с клоном B или клоном I. Эти результаты предполагают, что как клон B, так и клон I имеют более высокое сродство к IL4R, чем собачий IL4 или собачий IL13.
Пример 9
Иммунореактивность антител клонов B и I к IL4R по данным вестерн-блот анализа
[00180] С помощью вестерн-блот анализа изучали способность антител клонов B и I распознавать собачий IL4R-ECD_C-HuFc_His6 (SEQ ID NO:109). Очищенный собачий IL4R-ECD_C-HuFc_His6 разделяли с помощью SDS-PAGE в денатурирующих условиях (в присутствии DTT) или неденатурирующих условиях (в отсутствие DTT). Белки переносили на PVDF-мембрану и исследовали с помощью антитела либо клона B, либо I, а затем козьего антимышиного IgG-HRP. Иммунореактивные положительные сигналы с антителами клонов B и I наблюдали только с образцами в неденатурирующих условиях, что позволяет предположить, что связывание дисульфидов может быть важным для поддержания конформации эпитопа, и что эпитоп для антител клонов B и I может быть прерывистым или конформационным.
[00181] Также исследовали перекрестную реактивность антитела клона I в отношении IL4R кошек, лошадей, мышей и человека. Каждый из собачьего IL4R-ECD_C-HuFc_His6 (SEQ ID NO:109), кошачьего IL4R-ECD_C-HuFc_His6 (SEQ ID NO:111), лошадиного IL4R-ECD_C-HuFc_His6 (SEQ ID NO:113), мышиного IL4R-ECD_C-HuFc_His (SEQ ID NO:113), мышиного IL4R-ECD_C-HuFc_His (SEQ ID NO:115) и человеческого IL4R-ECD_C-HuFc_His6 (SEQ ID NO:117) (0,1 мкг/дорожку) разделяли с помощью SDS-PAGE в денатурирующих (+DTT) или неденатурирующих (-DTT) условиях. Белки переносили на PVDF-мембраны, и блоты зондировали антителом клона I (0,3 мкг/мл) и визуализировали с помощью козьего антимышиного IgG-HRP (фиг. 4A). В качестве контроля блот очищали и зондировали с помощью козьего антитела к Fc-HRP человеческого IgG для визуализации наличия белков IL4R-ECD (фиг. 4B). Антитело клона I демонстрировало иммуннологическую реакцию против собачьего IL4R-ECD_C-HuFc_His6 и, в меньшей степени, против кошачьего IL4R-ECD_C-HuFc_His6 в неденатурирующих условиях (фиг. 4A, дорожки 5 и 1, соответственно). Низкая фоновая реактивность наблюдалась в отношении слитых полипептидов IL4R-ECD_C-HuFc_His6 лошади, мыши и человека (фиг. 4A, дорожки 2, 3 и 4 соответственно).
Пример 10
Сродство связывания по отношению к кошачьему IL4R
[00182] Иммуноблот анализ позволил обнаружить незначительное уменьшение связывания между клоном I и кошачьим IL4R-ECD_C-HuFc_His6 по сравнению со связыванием между клоном I и собачьим IL4R-ECD_C-HuFc_His6. Этот результат согласуется со сродством связывания in vitro, измеренным с помощью биосенсора Octet. Биотинилированный кошачий IL4R-ECD_C-HuFc_His6 (SEQ ID NO:111) захватывали покрытыми стрептавидином наконечниками сенсоров. Связь антитела клона I (25 мкг/мл) и кошачьего IL4R-ECD_C-HuFc_His6 отслеживали в течение 600 секунд. За диссоциацией наблюдали в течение 600 секунд. Пустую кривую только для буфера вычитали для корректировки любого дрейфа. Данные подгоняли к модели связывания 1:1 с помощью программного обеспечения для анализа данных ForteBioТМ для определения kon, koff и Kd. Буфер для разведения и всех стадий связывания представлял собой 20 мМ фосфат, 150 мМ NaCl, pH 7,2. Kd антитела клона I и кошачьего IL4R-ECD_C-HuFc_His6 составляет 1,1×10-9 М.
Пример 11
Идентификация связывающего собачий IL4R эпитопа для антитела клона I.
[00183] Исследовали эпитоп собачьего IL4R, который распознается антителом клона I (и, предположительно, также антителом клона B). Поскольку антитело клона I проявляло низкий фон перекрестной реактивности с человеческим IL4R-ECD, многочисленные гибридные белки ECD собачьего IL4R (SEQ ID NO:99) и ECD человеческого IL4R (SEQ ID NO:103) конструировали с лидерной последовательностью (SEQ ID NO:132) и C-концевой меткой человеческий Fc-His6 для облегчения картирования эпитопа собачьего IL4R. Последовательности ECD собаки и человека разделяли на три сегмента (A, B и C), и на основе этих сегментов получали в порядке от A до C шесть различных гибридных полипептидных конструкций (см. Фиг. 5A и таблицу 5 ниже).
[00184] Таблица 5.
(G1-N55, T110-H209)
[00185] Плазмидные конструкции, содержащие нуклеотидные последовательности, кодирующие каждый из гибридных полипептидов 1-6, временно трансфицировали в клетки 293, и супернатанты концентрировали в 3 раза. Каждый гибридный полипептид разделяли с помощью SDS-PAGE в неденатурирующих (-DTT) условиях, и белки переносили на PVDF-мембрану. Блот исследовали с помощью антитела клона I (фиг. 5B) или антитела к человеческому Fc-фрагменту в качестве контроля (фиг. 5C). Присутствие обоих сегментов A и B ECD собачьего IL4R давало самый сильный сигнал (гибрид 4, фиг. 5B, дорожка 6). Сегмент A ECD собачьего IL4R сам по себе (гибрид 1, фиг. 5B, дорожка 3) или с сегментом C (гибрид 6, фиг. 5B, дорожка 8) давал заметный сигнал, что позволяет предположить, что сегмент A может содержать главный эпитоп. Поскольку сегмент B сам по себе (гибрид 2, фиг. 5B, дорожка 4) или с сегментом C (гибрид 5, фиг. 5B, дорожка 7) давал более слабый сигнал, это позволяло предположить, что сегмент B может содержать дополнительный (или минорный) эпитоп.
[00186] На основе этой информации были сконструированы дополнительные гибридные белки ECD собачьего IL4R (SEQ ID NO:99) и ECD человеческого IL4R (SEQ ID NO:103) с лидерной последовательностью (SEQ ID NO:132) и C-концевой меткой человеческий Fc-His6 для дальнейшей локализации эпитопа(ов) собачьего IL4R. Сегменты A и B последовательностей ECD собаки и человека дополнительно разделяли, и получали дополнительные восемь гибридных полипептидных конструкций (гибриды 7-14) на основе увеличения количества аминокислотных остатков последовательностей собак или человека (см. фиг. 6A и таблицу 6, ниже).
[00187] Таблица 6.
[00188] Плазмидные конструкции, содержащие нуклеотидные последовательности, кодирующие каждый из гибридных полипептидов 7-14, временно трансфицировали в клетки 293, и супернатанты концентрировали в 3 раза. Каждый гибридный полипептид разделяли с помощью SDS-PAGE в неденатурирующих (-DTT) условиях, и белки переносили на PVDF-мембрану. Блот исследовали с помощью антитела клона I (фиг. 6B) или антитела к человеческому Fc-фрагменту в качестве контроля (фиг. 6C). Присутствие как C-концевой половины сегмента A, так и центральной части сегмента B давало самые сильные сигналы (фиг. 6B; гибриды 7, 11 и 13; дорожки 3, 7 и 9, соответственно).
[00189] Для дальнейшей идентификации аминокислотных остатков эпитопов собачьего IL4R, распознаваемых клоном I, было сконструировано несколько мутантных последовательностей ECD собачьего IL4, несущих мутации аланина, на основе SEQ ID NO:99 с лидерной последовательностью (SEQ ID NO:132) и C-концевой меткой человеческий Fc-His6, которые экспрессировали в клетках 293. Супернатанты клеток концентрировали в 3 раза, разделяли с помощью SDS-PAGE в неденатурирующих (-DTT) условиях и переносили на PVDF-мембрану. Блот исследовали с помощью антитела клона I (фиг. 7B) или антитела к человеческому Fc-фрагменту в качестве контроля (фиг. 7C). Результаты тонкого картирования эпитопа приведены в Таблице 7 ниже. Результаты предполагают, что в связывании эпитопа участвуют аминокислоты M44 и G45 ECD собачьего IL4R (SEQ ID NO:95).
[00190] Таблица 7.
[00191] Конструировали трехмерную модель комплекса собачьего IL4 (SEQ ID NO:121), ECD собачьего IL4R (SEQ ID NO:99) и ECD собачьего IL13R (SEQ ID NO:161) (фиг. 8). Эпитоп 1 собачьего IL4R идентифицирован на фиг. 8. Анализ результатов описанного выше исследования и анализ трехмерного моделирования белков позволяют предположить, что клоны B и I связываются с первым эпитопом, расположенным в пределах L41 и T50 ECD собачьего IL4R (SEQ ID NO:99) или ECD кошачьего IL4R (SEQ ID NO:100), например, между R36 и N55. Например, первый эпитоп может содержать аминокислотную последовательность SEQ ID NO:88, SEQ ID NO:89, SEQ ID NO:91 или SEQ ID NO:92. В некоторых вариантах осуществления первый эпитоп содержит аминокислотную последовательность LX10FMGSENX11T, где X10 представляет собой D или N, и X11 представляет собой H или R (SEQ ID NO:85). В некоторых вариантах осуществления первый эпитоп содержит аминокислотную последовательность RLSYQLX10FMGSENX11TCVPEN, где X10 представляет собой D или N, и X11 представляет собой H или R (SEQ ID NO:86).
[00192] Анализ результатов исследования и трехмерное моделирование белков также позволяют предположить, что клоны B и I связываются со вторым эпитопом в пределах аминокислот S64 и Q85 ECD собачьего IL4R (SEQ ID NO:99) или ECD кошачьего IL4R (SEQ ID NO:100). Например, второй эпитоп может содержать аминокислотную последовательность SEQ ID NO:90 или SEQ ID NO:93. В некоторых вариантах осуществления второй эпитоп содержит аминокислотную последовательность SMX12X13DDX14VEADVYQLX15LWAGXQ, где X12 представляет собой P или L, X13 представляет собой I или M, X14 представляет собой A или F, X15 представляет собой D или H, и X16 представляет собой Q или T (SEQ ID NO:87).
Пример 12
Экспрессия и очистка химерных, канинизированных и фелинизированных антител
[00193] Полипептиды вариабельной тяжелой цепи клона B или I могут быть слиты с константной областью тяжелой цепи различных видов животных, таких как полипептид Fc дикого типа собачьего IgG A, IgG-B, IgG-C или IgG-D или кошачьего IgG-1a, IgG-1b или IgG-2 (например, полипептиды Fc IgG, содержащие SEQ ID NO:162, 163, 164, 165, 166, 167, 203, 204, 205, 206, 207, 227, 228, 229, 230, 237, 238, 239 или 240), или вариантами таких полипептидов Fc IgG (например, вариантами полипептидов Fc IgG, содержащими SEQ ID NO:168, 169, 170, 171, 172, 173, 174, 175, 176, 177, 178, 179, 180, 181, 182, 183, 184, 185, 186, 187, 188, 189, 190, 191, 192, 193, 194, 195, 196, 197, 198, 199, 200, 201, 202, 208, 209, 210, 211, 212, 213, 214, 215, 216, 217, 218, 219, 220, 221, 222, 223, 224, 225, 226, 231, 232, 233, 234, 239 или 240). Примеры аминокислотных последовательностей химерных тяжелых цепей включают SEQ ID NO:51 (вариабельная область HC клона B и собачий IgG-B) и SEQ ID NO:55 (вариабельная область HC клона I и собачий IgG-B). Кроме того, полипептиды вариабельной легкой цепи клона B или I могут быть слиты с константной областью легкой цепи вида животного-компаньона, такой как константная область дикого типа собачьей или кошачьей легкой цепи (например, SEQ ID NO:235 или 241) или вариантами таких полипептидов (например, SEQ ID NO:236 или 242). Примеры аминокислотных последовательностей химерных легких цепей включают SEQ ID NO:52 (вариабельная область LC клона B и константная область κ легкой цепи собаки) и SEQ ID NO:56 (вариабельная область LC клона I и константная область κ легкой цепи собаки).
[00194] Вариабельные тяжелые и вариабельные легкие цепи клонов B и I канинизировали и фелинизировали путем поиска и подбора подходящих аминокислотных последовательностей зародышевых линий для антител собак и кошек в качестве матрицы для трансплантации CDR. Последовательности дополнительно оптимизировали путем трехмерного структурного моделирования. Примеры канинизированных и фелинизированных вариантов полипептидов вариабельной области тяжелой и вариабельной области легкой цепей клонов B и I, которые были сконструированы, включают SEQ ID NO 59, SEQ ID NO:60, SEQ ID NO:61, SEQ ID NO:62, SEQ ID NO:63, SEQ ID NO:64, SEQ ID NO:274, SEQ ID NO:65, SEQ ID NO:66, SEQ ID NO:275, SEQ ID NO:67, SEQ ID NO:68, SEQ ID NO:69 и SEQ ID NO:70.
[00195] Канинизированные или фелинизированные полипептиды тяжелой цепи могут быть слиты с константной областью дикого типа тяжелой цепи собачьего IgG A, IgG-B, IgG-C или IgG-D или полипептидом Fc дикого типа кошачьего IgG-1a, IgG-1b или IgG-2 (например, полипептидами Fc IgG, содержащими SEQ ID NO:162, 163, 164, 165, 166, 167, 203, 204, 205, 206, 207, 227, 228, 229, 230, 237, 238, 239 или 240) или вариантами таких полипептидов Fc IgG (например, вариантами полипептида Fc IgG, содержащими SEQ ID NO:168, 169, 170, 171, 172, 173, 174, 175, 176, 177, 178, 179, 180, 181, 182, 183, 184, 185, 186, 187, 188, 189, 190, 191, 192, 193, 194, 195, 196, 197, 198, 199, 200, 201, 202, 208, 209, 210, 211, 212, 213, 214, 215, 216, 217, 218, 219, 220, 221, 222, 223, 224, 225, 226, 231, 232, 233, 234, 239 или 240). Примеры аминокислотных последовательностей канинизированной или фелинизированной вариабельной тяжелой цепи и варианта полипептида Fc IgG включают SEQ ID NO:71, 72, 75, 76, 79, 80, 82 и 83.
[00196] Канинизированные или фелинизированные полипептиды легкой цепи могут быть слиты с константной областью легкой цепи вида животного-компаньона, такой как константная область дикого типа собачьей или кошачьей легкой цепи (например, SEQ ID NO:235 или 241), или вариантами таких полипептидов (например, SEQ ID NO:236 или 242). Примеры аминокислотных последовательностей канинизированной или фелинизированной вариабельной легкой цепи и константной области κ легкой цепи включают SEQ ID NO:73, 74, 77, 78, 81 и 84.
[00197] Синтезировали нуклеотидные последовательности, кодирующие химерные полипептиды вариабельной тяжелой цепи клонов B и I, слитые с собачьим или кошачьим IgG, и вариабельную легкую цепь клонов B и I, слитую с константной областью легкой цепи собаки или кошки, и клонировали в векторы экспрессии, подходящие для трансфекции клетки-хозяина СНО. Нуклеотидные последовательности, кодирующие канинизированные и фелинизированные полипептиды клона I, также синтезировали и клонировали в векторы экспрессии. Каждую пару нуклеотидных последовательностей HC и LC трансфицировали в клетку-хозяина CHO. Клетки культивировали, и антитела клона В, клона I, химерные антитела клона В и клона I очищали из культуральной среды с помощью колоночной хроматографии с белком А.
[00198] Векторы также можно использовать для проведения пилотной трансфекции клеток CHO-S с помощью реагента для трансфекции FreestyleMaxТМ (Life Technologies). Супернатант собирали путем осветления кондиционированной среды. Антитела можно очистить с помощью одноэтапной хроматографии с белком А и использовать для дальнейших исследований.
[00199] Очищенные препараты антител могут быть смешаны с одним или более фармацевтически приемлемыми наполнителями и стерилизованы фильтрацией для получения фармацевтической композиции по настоящему изобретению. Типичные препараты антител или фармацевтические композиции можно вводить собаке или кошке с IL4R-индуцированным состоянием, таким как атопический дерматит, аллергический дерматит, зуд, астма, псориаз, склеродермия или экзема, в терапевтически эффективном количестве.
Пример 13
Варианты полипептида Fc собачьего IgG для повышенного связывания с белком А и/или пониженного связывания с комплементом и/или пониженного связывания с CD16
[00200] Очистка антител на основе сродства к белку A является хорошо разработанным процессом. Однако из четырех подтипов собачьего IgG только Fc IgG-B (например, SEQ ID NO:163 или SEQ ID NO:164) обладает сродством связывания с белком A. Fc IgG-A (например, SEQ ID NO:162), Fc IgG-C (например, SEQ ID NO:165 или SEQ ID NO:166) и Fc IgG-D (например, SEQ ID NO:167) собаки имеют слабое или не поддающееся измерению сродство связывания с белком А. Для измененного связывания с белком A были сконструированы варианты полипептидов Fc IgG-A, Fc IgG-C и Fc IgG-D.
[00201] Кроме того, собачьи Fc IgG-B и Fc IgG-C обладают активностью комплемента и связываются с C1q, тогда как собачьи Fc IgG-A и Fc IgG-D имеют слабое или не поддающееся измерению сродство связывания с C1q. Чтобы потенциально снизить связывание с C1q и/или потенциально снизить опосредованные комплементом иммунные ответы, были сконструированы варианты полипептидов Fc IgG-B и Fc IgG-C собки.
[00202] Кроме того, Fc IgG-B и Fc IgG-C собаки обладают CD16-связывающей активностью. Чтобы потенциально снизить связывание CD16 с Fc IgG-B и Fc IgG-C и/или потенциально снизить ADCC, были сконструированы варианты полипептидов Fc IgG-В и Fc IgG-C собаки.
[00203] В приведенной ниже таблице 8 суммированы характеристики связывания подтипов Fc собачьего IgG с белком A и C1q. Примечательно, что связывание с C1q не отсутствует ни у одного из подтипов Fc дикого типа собачьего IgG одновременно со связыванием белка A.
[00204] Таблица 8.
(-) обозначает низкую активность связывания или ее отсутствие.
[00205] Для конструирования вариантов полипептидов Fc собачьих IgG-A, IgG-C и IgG-D для получения повышенного связывания с белком А использовали два подхода. В первом подходе варианты полипептидов Fc собачьих IgG-A, IgG-C и IgG-D конструировали таким образом, чтобы они имели такие же последовательности мотивов связывания белка A, что и Fc собачьего IgG-B (например, SEQ ID NO:163, SEQ ID NO:165 и SEQ ID NO:167, соответственно). Во втором подходе вариант Fc I(21)T/Q(207)H собачьего IgG-A (SEQ ID NO:169), вариант Fc I(21)T собачьего IgG-C (SEQ ID NO:181) и вариант Fc I(21)T/Q(207)H собачьего IgG-D (SEQ ID NO:194) конструировали с одной или двумя аминокислотными заменами в связывающей области белка А таким образом, чтобы они соответствовали последовательности Fc собачьего IgG-B.
[00206] Кроме того, могут быть получены варианты полипептидов Fc IgG-A, Fc IgG-C и Fc IgG-D собаки с повышенным связыванием с белком А, имеющие одну или более аминокислотных замен, перечисленных в таблице 9.
[00207] Таблица 9.
(SEQ ID NO:162)
(SEQ ID NO:165)
(SEQ ID NO:167)
* Перечисленные положения аминокислот относятся к последовательности с указанным SEQ ID NO.
[00208] Чтобы потенциально снизить связывание Fc IgG-B и Fc IgG-C с C1q и/или потенциально снизить опосредованные комплементом иммунные ответы, можно получить варианты полипептидов Fc IgG-B и Fc IgG-C собаки, имеющие замену аминокислоты Lys на любую аминокислоту, кроме Lys, в положении аминокислоты, соответствующем положению 93 в SEQ ID NO:163 или SEQ ID NO:165, соответственно. Эти аминокислотные замены были идентифицированы после анализа последовательности белка и моделирования трехмерной структуры Fc IgG-B и Fc IgG-C относительно Fc IgG A и Fc IgG-D, которые, как предполагается, не проявляют активности комплемента. Например, можно получить вариант Fc K(93)R собачьего IgG-B (SEQ ID NO:170) и вариант Fc K(93)R собачьего IgG-C (SEQ ID NO:182). Наблюдали пониженное связывание между человеческим C1q и слитым белком, содержащим вариант Fc K(93)R собачьего IgG-B, по сравнению со слитым белком, содержащим Fc дикого типа собаки собачьего IgG-B.
[00209] Чтобы потенциально снизить связывание Fc IgG-B и Fc IgG-C с CD16 и/или потенциально снизить ADCC, можно получить варианты полипептидов Fc IgG-B и Fc IgG-C, содержащие одну или более аминокислотных замен, перечисленных в таблице 10. Аминокислотные замены были идентифицированы после анализа последовательности белка и моделирования трехмерной структуры IgG B и IgG-C собаки в сравнении с IgG-A и IgG D, которые, как предполагается, не проявляют активность ADCC.
[00210] Таблица 10.
(SEQ ID NO:163)
(SEQ ID NO:165)
* Перечисленные положения аминокислот относятся к указанной SEQ ID NO.
[00211] Поскольку Fc дикого типа собачьего IgG-C не демонстрирует связывание с белком A и связывается с C1q, дважды измененный (двойной вариант) Fc собачьего IgG-C, который связывается с белком A и имеет пониженное связывание с C1q, может быть получен путем объединения одного или более аминокислотных замен, перечисленных в таблице 9, с заменой K(93)R или заменой K(93)X, где X представляет собой любую аминокислоту, кроме Lys. Двойной вариант Fc собачьего IgG-B или двойной вариант Fc собачьего IgG-C с пониженным связыванием с C1q и пониженным связыванием с CD16 может быть получен путем объединения одной или более аминокислотных замен, перечисленных в таблице 10, с заменой K(93)R или заменой K(93)X, где X представляет собой любую аминокислоту, кроме Lys. Тройной вариант Fc собачьего IgG-C, который связывается с белком A и имеет пониженное связывание с C1q и CD16, может быть получен путем объединения одной или более аминокислотных замен, перечисленных в таблице 9, и одной или более аминокислотных замен, перечисленных в таблице 10 с заменой K(93)R или K(93)X, где X представляет собой любую аминокислоту, кроме Lys.
[00212] Связывание любого варианта Fc собачьего IgG с белком A, CD16 и/или C1q может быть определено и сравнено со связыванием другого Fc IgG с белком A, CD16 и/или C1q (например, соответствующего Fc дикого типа собачьего IgG, другого Fc дикого типа собачьего IgG или его варианта или Fc дикого типа IgG другого животного-компаньона или его варианта и т.д.).
[00213] Анализ связывания можно выполнять с помощью биосенсора Octet. Вкратце, целевая молекула (например, белок A, C1q, CD16 и т.д.) может быть биотинилирована, и свободный непрореагировавший биотин может быть удален (например, путем диализа). Биотинилированную молекулу-мишень захватывают с помощью покрытого стрептавидином наконечника сенсора. Связь целевой молекулы с различными концентрациями (например, 10 мкг/мл) полипептида Fc IgG отслеживают в течение определенного времени или до достижения равновесного состояния. Диссоциацию отслеживают в течение определенного времени или до достижения равновесного состояния. Пустую кривую только для буфера можно вычесть для корректировки любого дрейфа. Данные подгоняют под модель связывания 1:1 с помощью программного обеспечения для анализа данных ForteBioTM для определения kon, koff и Kd.
[00214] Иллюстративные варианты полипептидов собачьего IgG для увеличения связывания с белком A (например, для простоты очистки), уменьшения связывания с C1q (например, для уменьшения опосредованных комплементом иммунных ответов), уменьшения связывания с CD16 (например, снижения антителозависимой клеточной цитотоксичности) и/или повышения стабильности включают SEQ ID NO:169, 170, 171, 172, 173, 174, 175, 176, 177, 178, 179, 180, 181, 182, 183, 184, 185, 186, 187, 188, 189, 190, 191, 192, 193 и 194. Такие варианты полипептидов собачьего IgG могут быть включены с последовательностями вариабельной тяжелой цепи клона B или I, канинизированными последовательностями вариабельной тяжелой цепи клона B или I или последовательностями CDR, описанными в приведенных выше примерах.
Пример 14
Варианты полипептидов Fc кошачьего IgG для уменьшения связывания комплемента и/или повышенного образования дисульфидных связей в шарнирной области и/или повышенного рекомбинантного продуцирования
[00215] Каждый из трех подтипов кошачьего IgG, Fc IgG1a (SEQ ID NO:203 или SEQ ID NO:204), Fc IgG1b (SEQ ID NO:205 или SEQ ID NO:206) и Fc IgG2 (SEQ ID NO:207) обладают сродством связывания с белком А. Однако только Fc кошачьего IgG2 имеет слабое или не поддающееся измерению сродство связывания с C1q, в то время как Fc кошачьего IgG1a и Fc кошачьего IgG1b связываются с C1q. Чтобы потенциально снизить связывание с C1q и/или потенциально снизить опосредованные комплементом иммунные ответы, были сконструированы варианты полипептида Fc IgG1a и Fc IgG1b кошки.
[00216] В приведенной ниже таблице 11 суммированы характеристики связывания подтипов Fc кошачьего IgG с белком A и C1q. Примечательно, что связывание с C1q не отсутствует ни у одного из подтипов Fc дикого типа лошадиного IgG одновременно со связыванием белка A.
[00217] Таблица 11.
(-) означает низкую активность связывания или ее отсутствие.
[00218] Чтобы потенциально снизить связывание Fc IgG1a и Fc IgG1b кошки с C1q и/или потенциально снизить опосредованные комплементом иммунные ответы, можно получить варианты полипептидов Fc кошачьего IgG1a и IgG1b, содержащие замену аминокислоты Pro на любую аминокислоту, за исключением аминокислоты Pro, в аминокислотном положении, соответствующем положению 198 в SEQ ID NO:203, SEQ ID NO:204, SEQ ID NO:205 или SEQ ID NO:206. Эти аминокислотные замены были идентифицированы после анализа последовательности белка и моделирования трехмерной структуры Fc IgG1a и Fc IgG1b кошки относительно Fc кошачьего IgG2, который, как предполагается, не проявляет активности комплемента. Например, могут быть получены варианты полипептида Fc P(198)A кошачьего IgG1 (SEQ ID NO:209, 210, 212 и 213).
[00219] Связывание любого варианта Fc кошачьего IgG с C1q может быть определено и сравнено со связыванием другого Fc IgG с C1q (например, соответствующего Fc дикого типа кошачьего IgG, другого Fc дикого типа кошачьего IgG или его варианта, или Fc дикого типа IgG другого животного-компаньона или его варианта и т.д.). Можно использовать анализ связывания, описанный в примере 13.
[00220] Для модификации шарнирных областей кошачьего IgG для усиления образования дисульфидных связей использовали трехмерный анализ моделирования белков нескольких ортологичных шарнирных структур. Чтобы усилить образование дисульфидных связей в шарнирной области кошачьего IgG, шарнирная последовательность может быть модифицирована путем замены лизина пролином в положении, соответствующем положению 16 кошачьего IgG1a (SEQ ID NO:203 или SEQ ID NO:204) (например, K16P), кошачьего IgG1b (SEQ ID NO:205 или SEQ ID NO:206) или кошачьего IgG2 (SEQ ID NO:207) (например, K(16)P). Примеры аминокислотных последовательностей вариантов полипептидов кошачьего IgG, имеющих модифицированную шарнирнуюобласть, включают SEQ ID NO:208, SEQ ID NO:211 и SEQ ID NO:215.
[00221] Для увеличения образования дисульфидных связей в шарнирной области кошачьего IgG2 шарнирная последовательность может быть модифицирована путем замены аминокислоты цистеином. Например, вариант Fc кошачьего IgG2 (SEQ ID NO:214), имеющий модифицированный шарнир, получали путем замены Gly на Cys в аминокислотном положении, соответствующем положению 14 в SEQ ID NO:207.
[00222] Для повышенного рекомбинантного продуцирования и улучшенного образования дисульфидных связей в шарнирной области использовали трехмерное моделирование белка для конструирования вариантов полипептида Fc кошачьего IgG, содержащих последовательности шарнирной области из другого изотипа IgG. Могут быть получены варианты полипептида Fc кошачьего IgG2, которые содержат последовательности из шарнирной области IgG1a или IgG1b кошки (например, SEQ ID NO:216). Уровни продуцирования рекомбинантных вариантов полипептида Fc IgG и/или уровни образования дисульфидных связей в шарнирной области можно определить и сравнить с уровнем другого Fc IgG с помощью SDS-PAGE анализа в денатурирующих и неденатурирующих условиях (например, соответствующим Fc дикого типа IgG того же или другого изотипа, или Fc дикого типа IgG другого животного-компаньона или его варианта и т.д.).
[00223] Иллюстративные варианты полипептида кошачьего IgG для уменьшения связывания с C1q (например, для уменьшения опосредованных комплементом иммунных ответов) и/или увеличения образования дисульфидных связей в шарнирной области и/или повышения рекомбинантного продуцирования включают SEQ ID NO:208, 209, 210, 211, 212, 213, 214, 215 и 216. Такие варианты полипептида кошачьего IgG могут быть включены с последовательностями вариабельной тяжелой цепи клона B или I, фелинизированными последовательностями вариабельной тяжелой цепи клона B или I или последовательностями CDR, описанными в приведенных выше примерах.
Пример 15
Варианты полипептидов Fc IgG собаки, кошки и лошади для биспецифических антител
[00224] Для возможности получения биспецифического собачьего, кошачьего или лошадиного антитела с помощью подхода гетеродимеризации «выступ-во-впадину», изучили спаривание вариантов полипептида Fc собачьего IgG, вариантов полипептида Fc кошачьего IgG и вариантов полипептида Fc лошадиного IgG. Биспецифические антитела объединяют специфичности двух антител, направленные на две разные мишени. Во-первых, добивались спаривания тяжелых цепей путем введения мутаций в области контакта (интерфейсе) CH3 так, чтобы одна цепь содержала объемную аминокислоту («выступ»), а другая цепь содержала в том же месте аминокислоты меньшего размера («впадину»). Кроме того, для облегчения специфического спаривания тяжелой цепи с предполагаемой легкой цепью, аминокислоты, находящиеся в области контакта (интерфейсе) между CH1 и легкой цепью, могут быть мутированы для обеспечения комплементарности по форме и взаимодействию заряд-заряд.
[00225] Аминокислотная замена триптофана на тирозин в положении, соответствующем положению 138 собачьего IgG-A (SEQ ID NO:162), в положении, соответствующем положению 137 Fc собачьего IgG-B (SEQ ID NO:163), в положении, соответствующем положению 137 Fc собачьего IgG-C (SEQ ID NO:165), или в положении, соответствующем положению 138 Fc собачьего IgG D (SEQ ID NO:167) (T138W или T137W), может быть введена в качестве «выступа». Примерами аминокислотных последовательностей первого варианта Fc IgG-A, Fc IgG-B, Fc IgG-C и Fc IgG-D собаки являются SEQ ID NO:195, SEQ ID NO:196, SEQ ID NO:197 и SEQ ID NO:198, соответственно.
[00226] Аминокислотная замена треонина на серин в положении, соответствующем положению 138, и лейцина на аланин в положении, соответствующем положению 140 IgG-A (SEQ ID NO:162) или IgG-D собаки (SEQ ID NO:167) (T138S, L140A), или замена треонина на серин в положении, соответствующем положению 137, и лейцина на аланин в положении, соответствующему положению 139 Fc IgG-B (SEQ ID NO:163) или IgG-C собаки (SEQ ID NO:165) (T137S, L139A) может быть введена в качестве «впадины». Примерами аминокислотных последовательностей второго варианта Fc IgG-A, Fc IgG-B, Fc IgG-C и Fc IgG-D собаки являются SEQ ID NO:199, SEQ ID NO:200, SEQ ID NO:201 и SEQ ID NO:202.
[00227] Может быть введена аминокислотная замена аланина на лейцин в положении, соответствующем положению 24, и серина на аспарагин в положении, соответствующем положению 30 в CH1 собачьего IgG-A (SEQ ID NO:227), CH1 собачьего IgG B (SEQ ID NO:228), CH1 собачьего IgG-C (SEQ ID NO:229) или CH1 собачьего IgG-D (SEQ ID NO:230) (A24L, S30D). Примерами аминокислотных последовательностей вариантов CH1 собачьего IgG-A, CH1 IgG-B, CH1 IgG-C и CH1 IgG-D являются SEQ ID NO:231, SEQ ID NO:232, SEQ ID NO:233 и SEQ ID NO:234.
[00228] Может быть введена аминокислотная замена фенилаланина на аланин в положении, соответствующем положению 11, и серина на аргинин в положении, соответствующем положению 22 в константной области κ собаки (SEQ ID NO:235) (F11A, S22R). Примером аминокислотной последовательности варианта константной области κ собаки является SEQ ID NO:236.
[00229] Аминокислотная замена треонина на триптофан в положении, соответствующем положению 154 Fc кошачьего IgG1a (SEQ ID NO:203 или SEQ ID NO:204), Fc кошачьего IgG1b (SEQ ID NO:205 или SEQ ID NO:206) или кошачьего IgG2 (SEQ ID NO:207) (T154W) может быть введена в качестве «выступа». Примерами аминокислотных последовательностей первого варианта Fc кошачьего IgG2, Fc кошачьего IgG1a и Fc кошачьего IgG1b являются SEQ ID NO:217, SEQ ID NO:218, SEQ ID NO:219, SEQ ID NO:220 и SEQ ID NO:221.
[00230] Аминокислотная замена треонина на серин в положении, соответствующем положению 154, и лейцина на аланин в положении, соответствующем положению 156 кошачьего IgG1a (SEQ ID NO:203 или SEQ ID NO:204), Fc кошачьего IgG-b (SEQ ID NO:205 или SEQ ID NO:206) или Fc кошачьего IgG2 (SEQ ID NO:207) (T154S, L156A) может быть введена в качестве «впадины». Примерами аминокислотных последовательностей второго варианта Fc кошачьего IgG2, Fc кошачьего IgG1a и Fc кошачьего IgG1b являются SEQ ID NO:222, SEQ ID NO:223, SEQ ID NO:224, SEQ ID NO:225 и SEQ ID NO:226.
[00231] Может быть введена аминокислотная замена аланина на лейцин в положении, соответствующем положению 24, и замена серина на аспарагин в положении, соответствующем положению 30 CH1 кошачьего IgG1 (SEQ ID NO:237), или аминокислотная замена аланина на лейцин в положении, соответствующем положению 24, и серина на аспарагин в положении, соответствующем положению 29 CH1 кошачьего IgG2 (SEQ ID NO:238). Примерами аминокислотных последовательностей вариантов CH1 кошачьего IgG1 и CH1 кошачьего IgG2 являются SEQ ID NO:239 и SEQ ID NO:240.
[00232] Может быть введена аминокислотная замена фенилаланина на аланин в положении, соответствующем положению 11, и серина на аргинин в положении, соответствующем положению 22 константной области κ кошки (SEQ ID NO:241) (F11A, S22R). Примером аминокислотной последовательности варианта константной области κ кошки является SEQ ID NO:242.
[00233] Аминокислотная замена треонина на триптофан в положении, соответствующем положению 130 Fc IgG1 лошади (SEQ ID NO:247), Fc IgG2 лошади (SEQ ID NO:248), Fc IgG3 лошади (SEQ ID NO:249), Fc IgG4 лошади (SEQ ID NO:250), Fc IgG5 лошади (SEQ ID NO:251), Fc IgG6 лошади (SEQ ID NO:252) или Fc IgG7 лошади (SEQ ID NO:253) (T130W) может введена в качестве «выступа». Примерами аминокислотных последовательностей первого варианта Fc IgG1, Fc IgG2, Fc IgG3, Fc IgG4, Fc IgG5, Fc IgG6 и Fc IgG7 лошади являются SEQ ID NO:254, SEQ ID NO:255, SEQ ID NO:256, SEQ ID NO:257, SEQ ID NO:258, SEQ ID NO:259 и SEQ ID NO:260, соответственно.
[00234] Аминокислотная замена треонина на серин в положении, соответствующем положению 130, и лейцина на аланин в положении, соответствующем положению 132 Fc IgG1 лошади (SEQ ID NO:247), Fc IgG2 лошади (SEQ ID NO:248), Fc IgG3 лошади (SEQ ID NO:249), Fc IgG4 лошади (SEQ ID NO:250), Fc IgG5 лошади (SEQ ID NO:251), Fc IgG6 лошади (SEQ ID NO:252) или Fc IgG7 лошади (SEQ ID NO:253) (T130W) может быть введена в качестве «впадины». Примеры аминокислотных последовательностей второго варианта Fc IgG1, Fc IgG2, Fc IgG3, Fc IgG4, Fc IgG5, Fc IgG6 и Fc IgG7 лошади являются SEQ ID NO:261, SEQ ID NO:262, SEQ ID NO:263, SEQ ID NO:264, SEQ ID NO:265, SEQ ID NO:266 и SEQ ID NO:267, соответственно.
[00235] Вышеописанный подход может быть использован для получения биспецифических антител к IL4R и другим мишеням, таким как IL17, IL31, TNFα, CD20, CD19, CD25, IL4, IL13, IL23, IgE, CD11α, IL6R, α4-интергрин, IL12, IL1β или BlyS. Например, биспецифическое антитело к собачьему IL4R и собачьему IL31 может быть получено с аминокислотными последовательностями SEQ ID NO:243 (канинизированная вариабельная область v2 HC клона I и вариант Fc C1q-, CD16- IgG-B с биспецифическим «выступом»), SEQ ID NO:244 (канинизированная вариабельная область v2 LC клона I и вариабельная константная область κ собаки), SEQ ID NO:245 (канинизированный клон M14 к собачьему IL31 с вариабельной HC и вариант Fc собачьего IgG-B C1q-, CD16- с биспецифической «впадиной») и SEQ ID NO:246 (вариабельная LC клона M14 к собачьему IL31 и константная область κ собаки).
Пример 16
Идентификация дополнительных мышиных моноклональных антител, которые связываются с собачьим IL4R
[00236] Мышиные моноклональные антитела идентифицировали путем стандартной иммунизации, используя в качестве иммуногена внеклеточные домены собачьего IL4R, продуцируемые клетками 293. Во время иммунизации использовали различные адъюванты (Antibody Solutions, Sunnyvale, CA), и моноклональные антитела получали с помощью стандартной гибридомной технологии. Для скрининга клонов, продуцирующих собачьи IL4R-связывающие антитела, разработали иммуноферментный анализ (ELISA). Сначала собачий IL4R биотинилировали, и затем вносили его в лунки, покрытые стрептавидином. После этого в лунки добавляли иммунизированную сыворотку с последующей промывкой и детектированием с помощью HRP-конъюгированных антимышиных антител. Присутствие собачьих IL4R-связывающих антител дает положительный сигнал. Идентифицировали более 100 положительных по ELISA клонов с высокими сигналами связывания.
[00237] Кроме того, выполняли нейтрализацию (блокирование собачьего IL4) с помощью ELISA. Было идентифицировано четыре клона, связывание которых с собачьим IL4R может быть ингибировано собачьим IL4. Связывание собачьего IL4 с собачьим IL4R ингибировалось четырьмя клонами: M3, M5, M8 и M9.
[00238] Четыре мышиных антитела очищали из гибридомных клеточных культур, и их сродство к собачьему IL4R измеряли с помощью биосенсора (ForteBio OctetRed). Биотинилированный собачий IL4R связывали с покрытым стрептавидином наконечником сенсора. Kd всех 4 кандидатов были менее 10 нМ.
Пример 17
Идентификация последовательностей VH и VL M3, M5, M8 и M9
[00239] Клетки гибридомы, продуцирующие M3, M5, M8 и M9, осаждали. РНК экстрагировали, и олигонуклеотидные праймеры для амплификации вариабельных доменов мышиного иммуноглобулина (Ig) использовали для получения кДНК с помощью стандартных методов. Определяли вариабельную область тяжелой цепи (VH) и вариабельную область легкой цепи (VL) каждого из четырех клонов (SEQ ID NO:292 (VH M3), SEQ ID NO:293 (VL M3), SEQ ID NO:308 (VH M5), SEQ ID NO:309 (VL M5), SEQ ID NO:324 (VH M8), SEQ ID NO:325 (VL M8), SEQ ID NO:340 (VH M9), SEQ ID NO:341 (VL M9).
Пример 18
Экспрессия и очистка химерных мышиных/собачьих антител из клеток CHO
[00240] Последовательности ДНК, кодирующие химерное антитело, конструировали для слияния мышиного VH и мышиного VL с константной тяжелой цепью собачьего IgG-B и константной легкой цепью (каппа) собаки. Нуклеотидные последовательности синтезировали химическим путем и вставляли в вектор экспрессии, подходящий для трансфекции клетки-хозяина СНО. После трансфекции клетки СНО белок легкой цепи или тяжелой цепи или оба белка секретировались из клетки. Все четыре химерных собачьих IgG-B очищали одностадийной очисткой с помощью колоночной хроматографией с белком А. Их сродство к собачьему IL4R подтверждали с помощью биосенсора (ForteBio OctetRed), которое было <10 нМ.
Пример 19
Канинизация и экспрессия в клетках СНО
[00241] VH и VL мыши (M3, M9) канинизировали путем поиска и отбора соответствующих последовательностей антител зародышевой линии собаки в качестве матрицы для трансплантации CDR с последующим моделированием белка. Канинизированный вариабельный участок легкой цепи M3 (SEQ ID NO:344) и канинизированный вариабельный участок легкой цепи M9 (SEQ ID NO:347) сливали с CL каппа собаки (с получением SEQ ID NO:350 и 353, соответственно). Канинизированные вариабельные тяжелые цепи M3 (SEQ ID NO:342 и SEQ ID NO:343) и канинизированные вариабельные тяжелые цепи M9 (SEQ ID NO:344 и SEQ ID NO:345) сливали с вариантом собачьего IgG B, что дало SEQ ID NO:348, SEQ ID NO:349, SEQ ID NO:351 и SEQ ID NO:352, соответственно. Тяжелые и легкие цепи сразу экспрессировали и очищали за одну стадию на колонке с белком А.
[00242] Собачьи антитела хорошо экспрессировались и сохраняли сродство связывания с собачьим IL4R на уровне ≤1 нМ.
Пример 20
Разработка анализа передачи сигналов собачьего IL4R в клетках
[00243] Клетки DH82 собаки линии макрофагоподобных клеток собак, полученной из злокачественного гистиоцитоза, приобретали в АТСС (CRL10389), высевали из расчета 10e5 клеток/лунка в 96-луночные планшеты и инкубирована при 37°C в условиях 5% CO2 в течение ночи (в 15% FBS D-MEM, как рекомендовано ATCC). Инкубацию в бессывороточной среде и предварительную инкубацию клеток с антителами выполняли путем замены среды в каждой лунке серийно разведенными препаратами анти-IL4R или супернатанта гибридомы в D-MEM без FBS в течение 1 часа при 5% CO2, 37°C. Затем в каждую лунку на 15 мин добавляли собачий цитокин IL4 (RnD AF754) в концентрации 1 нг/мл (конечная концентрация) при 5% CO2, 37°C. В каждую лунку добавляли двадцать микролитров стоп-раствора (M-per Thermo Fisher #78501). IL4-индуцируемое фосфорилирование STAT6 в каждой лунке анализировали с помощью вестерн-блоттинга с анти-фосфо-STAT6 (RnD MAB3717).
[00244] Согласно данным вестерн-блот анализа с анти-фосфо-STAT6, мышиные антитела M3, M8 и M9 ингибировали фосфорилирование STAT6.
Пример 21
Идентификация IL4R-связывающих эпитопов собаки с помощью M3, M8 и M9
[00245] Поскольку согласно результатам вестерн-блот анализа M3, M8 и M9 не распознают человеческий IL4R, но сильно реагируют на собачий IL4R, создавали и экспрессировали комбинации химерных слитых молекул IL4R собаки/человека для идентификации минимального собачьего сегмента(ов), с которым связывается каждое антитело.
[00246] На Фиг. 9A показаны гибридные полипептиды ECD IL4R собаки/человека, используемые для анализов картирования эпитопа собачьего IL4R (те же гибридные конструкции, которые использовались при картировании эпитопа в примере 11 выше). На фиг. 9B суммированы результаты вестерн-блот анализ, в котором ECD собачьего IL4R, ECD человеческого IL4R и различные гибридные полипептиды ECD IL4R собаки/человека зондировали с помощью антител M3, M8 и M9. NR в таблице означает, что антитело не реагировало с гибридным ECD IL4R в соответствующем вестерн-блот анализе, что указывает на то, что последовательности собачьего IL4R, замененные последовательностями человеческого IL4R, важны для связывания антител (эпитопов).
[00247] Было определено, что M3 связывается с эпитопом, имеющим последовательность DFMGSENHTCVPEN (SEQ ID NO:354). Было определено, что M8 связывается с первым эпитопом, имеющим последовательность GSVKVLHEPSCFSDYISTSVCQWKMDHPTNCSA (SEQ ID NO:355), и вторым эпитопом, имеющим последовательность REDSVCVCSMPI (SEQ ID NO:356). Было определено, что M9 связывается с эпитопом, имеющим последовательность REDSVCVCSMPIDDAVEADV (SEQ ID NO:357).
--->
СПИСКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ
<110> КИНДРЕД БАЙОСАЙЕНСИЗ, ИНК.
<120> АНТИТЕЛА К РЕЦЕПТОРУ IL4 ДЛЯ ПРИМЕНЕНИЯ В ВЕТЕРЕИНАРИИ
<130> 01157-0016-00PCT
<150> US 62/731,633
<151> 2018-09-14
<160> 357
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 10
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: CDR-H1
<400> 1
Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Val Met His
1 5 10
<210> 2
<211> 17
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: CDR-H2
<220>
<221> misc_feature
<222> (5)..(5)
<223> X представляет собой K или A
<220>
<221> misc_feature
<222> (14)..(14)
<223> X представляет собой K или A
<220>
<221> misc_feature
<222> (15)..(15)
<223> X представляет собой F или V
<220>
<221> misc_feature
<222> (16)..(16)
<223> X представляет собой K или Q
<400> 2
Tyr Ile Asn Pro Xaa Asn Asp Gly Thr Phe Tyr Asn Gly Xaa Xaa Xaa
1 5 10 15
Gly
<210> 3
<211> 7
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: CDR-H3
<220>
<221> misc_feature
<222> (2)..(2)
<223> X представляет собой N или Y
<220>
<221> misc_feature
<222> (5)..(5)
<223> X представляет собой I или F
<400> 3
Phe Xaa Tyr Gly Xaa Ala Tyr
1 5
<210> 4
<211> 11
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: CDR-L1
<400> 4
Arg Ala Ser Gln Glu Ile Ser Gly Tyr Leu Ser
1 5 10
<210> 5
<211> 7
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: CDR-L2
<220>
<221> misc_feature
<222> (4)..(4)
<223> X представляет собой T или N
<220>
<221> misc_feature
<222> (5)..(5)
<223> X представляет собой R или L
<220>
<221> misc_feature
<222> (7)..(7)
<223> X представляет собой S или T
<400> 5
Ala Ala Ser Xaa Xaa Asp Xaa
1 5
<210> 6
<211> 9
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: CDR-L3
<400> 6
Val Gln Tyr Ala Ser Tyr Pro Trp Thr
1 5
<210> 7
<211> 10
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: клона B CDR-H1
<400> 7
Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Val Met His
1 5 10
<210> 8
<211> 17
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: CDR-H2 клона B
<400> 8
Tyr Ile Asn Pro Lys Asn Asp Gly Thr Phe Tyr Asn Gly Lys Phe Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 9
<211> 7
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: CDR-H3 клона B
<400> 9
Phe Asn Tyr Gly Ile Ala Tyr
1 5
<210> 10
<211> 25
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: HC-FR1 клона B
<400> 10
Glu Val Lys Leu Glu Glu Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser
20 25
<210> 11
<211> 14
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: HC-FR2 клона B
<400> 11
Trp Val Lys Gln Lys Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile Gly
1 5 10
<210> 12
<211> 32
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: HC-FR3 клона B
<400> 12
Lys Ala Thr Leu Thr Ser Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr Met Glu
1 5 10 15
Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Ala
20 25 30
<210> 13
<211> 11
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: HC-FR4 клона B
<400> 13
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
1 5 10
<210> 14
<211> 11
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: CDR-L1 клона B
<400> 14
Arg Ala Ser Gln Glu Ile Ser Gly Tyr Leu Ser
1 5 10
<210> 15
<211> 7
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: CDR-L2 клона B
<400> 15
Ala Ala Ser Thr Leu Asp Ser
1 5
<210> 16
<211> 9
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: CDR-L3 клона B
<400> 16
Val Gln Tyr Ala Ser Tyr Pro Trp Thr
1 5
<210> 17
<211> 26
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: LC-FR1 клона B
<400> 17
Asp Ile Val Leu Thr Gln Thr Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly
1 5 10 15
Glu Arg Val Ser Leu Thr Cys Arg Ala Ser
20 25
<210> 18
<211> 15
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: LC-FR2 клона B
<400> 18
Trp Leu Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr Ile Lys Arg Leu Ile Tyr
1 5 10 15
<210> 19
<211> 32
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: LC-FR3 клона B
<400> 19
Gly Val Pro Lys Arg Phe Ser Gly Ser Arg Ser Gly Ser Asp Phe Ser
1 5 10 15
Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Ser Glu Asp Phe Ala Asp Tyr Tyr Cys
20 25 30
<210> 20
<211> 10
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: LC-FR4 клона B
<400> 20
Phe Gly Gly Gly Ala Arg Leu Glu Ile Lys
1 5 10
<210> 21
<211> 116
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: вариабельная HC клона B
<400> 21
Glu Val Lys Leu Glu Glu Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Val Met His Trp Val Lys Gln Lys Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Tyr Ile Asn Pro Lys Asn Asp Gly Thr Phe Tyr Asn Gly Lys Phe
50 55 60
Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ser Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Phe Asn Tyr Gly Ile Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser
115
<210> 22
<211> 106
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: вариабельная LC клона B
<400> 22
Ile Val Leu Thr Gln Thr Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly Glu
1 5 10 15
Arg Val Ser Leu Thr Cys Arg Ala Ser Gln Glu Ile Ser Gly Tyr Leu
20 25 30
Ser Trp Leu Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr Ile Lys Arg Leu Ile Tyr
35 40 45
Ala Ala Ser Thr Leu Asp Ser Gly Val Pro Lys Arg Phe Ser Gly Ser
50 55 60
Arg Ser Gly Ser Asp Phe Ser Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Ser Glu
65 70 75 80
Asp Phe Ala Asp Tyr Tyr Cys Val Gln Tyr Ala Ser Tyr Pro Trp Thr
85 90 95
Phe Gly Gly Gly Ala Arg Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 23
<211> 135
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: вариабельная HC клона B с лидерной последовательностью
<400> 23
Met Ala Val Leu Gly Leu Leu Leu Cys Leu Val Thr Phe Pro Ser Cys
1 5 10 15
Val Leu Ser Glu Val Lys Leu Glu Glu Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys
20 25 30
Pro Gly Ala Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe
35 40 45
Thr Ser Tyr Val Met His Trp Val Lys Gln Lys Pro Gly Gln Gly Leu
50 55 60
Glu Trp Ile Gly Tyr Ile Asn Pro Lys Asn Asp Gly Thr Phe Tyr Asn
65 70 75 80
Gly Lys Phe Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ser Asp Lys Ser Ser Ser
85 90 95
Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val
100 105 110
Tyr Tyr Cys Ala Ala Phe Asn Tyr Gly Ile Ala Tyr Trp Gly Gln Gly
115 120 125
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
130 135
<210> 24
<211> 126
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: вариабельная LC клона B с лидерной последовательностью
<400> 24
Met Glu Thr Asp Thr Leu Leu Leu Trp Val Leu Leu Leu Trp Val Pro
1 5 10 15
Gly Ser Thr Gly Ile Val Leu Thr Gln Thr Pro Ser Ser Leu Ser Ala
20 25 30
Ser Leu Gly Glu Arg Val Ser Leu Thr Cys Arg Ala Ser Gln Glu Ile
35 40 45
Ser Gly Tyr Leu Ser Trp Leu Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr Ile Lys
50 55 60
Arg Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Thr Leu Asp Ser Gly Val Pro Lys Arg
65 70 75 80
Phe Ser Gly Ser Arg Ser Gly Ser Asp Phe Ser Leu Thr Ile Ser Ser
85 90 95
Leu Glu Ser Glu Asp Phe Ala Asp Tyr Tyr Cys Val Gln Tyr Ala Ser
100 105 110
Tyr Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Ala Arg Leu Glu Ile Lys
115 120 125
<210> 25
<211> 440
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: HC клона B
<400> 25
Glu Val Lys Leu Glu Glu Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Val Met His Trp Val Lys Gln Lys Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Tyr Ile Asn Pro Lys Asn Asp Gly Thr Phe Tyr Asn Gly Lys Phe
50 55 60
Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ser Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Phe Asn Tyr Gly Ile Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser Ala Lys Thr Thr Pro Pro Ser Val Tyr Pro Leu Ala
115 120 125
Pro Gly Ser Ala Ala Gln Thr Asn Ser Met Val Thr Leu Gly Cys Leu
130 135 140
Val Lys Gly Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Thr Trp Asn Ser Gly
145 150 155 160
Ser Leu Ser Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Asp
165 170 175
Leu Tyr Thr Leu Ser Ser Ser Val Thr Val Pro Ser Ser Pro Arg Pro
180 185 190
Ser Glu Thr Val Thr Cys Asn Val Ala His Pro Ala Ser Ser Thr Lys
195 200 205
Val Asp Lys Lys Ile Val Pro Arg Asp Cys Gly Cys Lys Pro Cys Ile
210 215 220
Cys Thr Val Pro Glu Val Ser Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Pro
225 230 235 240
Lys Asp Val Leu Thr Ile Thr Leu Thr Pro Lys Val Thr Cys Val Val
245 250 255
Val Asp Ile Ser Lys Asp Asp Pro Glu Val Gln Phe Ser Trp Phe Val
260 265 270
Asp Asp Val Glu Val His Thr Ala Gln Thr Gln Pro Arg Glu Glu Gln
275 280 285
Phe Asn Ser Thr Phe Arg Ser Val Ser Glu Leu Pro Ile Met His Gln
290 295 300
Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Phe Lys Cys Arg Val Asn Ser Ala Ala
305 310 315 320
Phe Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Arg Pro
325 330 335
Lys Ala Pro Gln Val Tyr Thr Ile Pro Pro Pro Lys Glu Gln Met Ala
340 345 350
Lys Asp Lys Val Ser Leu Thr Cys Met Ile Thr Asp Phe Phe Pro Glu
355 360 365
Asp Ile Thr Val Glu Trp Gln Trp Asn Gly Gln Pro Ala Glu Asn Tyr
370 375 380
Lys Asn Thr Gln Pro Ile Met Asn Thr Asn Gly Ser Tyr Phe Val Tyr
385 390 395 400
Ser Lys Leu Asn Val Gln Lys Ser Asn Trp Glu Ala Gly Asn Thr Phe
405 410 415
Thr Cys Ser Val Leu His Glu Gly Leu His Asn His His Thr Glu Lys
420 425 430
Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Lys
435 440
<210> 26
<211> 213
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: LC клона B
<400> 26
Ile Val Leu Thr Gln Thr Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly Glu
1 5 10 15
Arg Val Ser Leu Thr Cys Arg Ala Ser Gln Glu Ile Ser Gly Tyr Leu
20 25 30
Ser Trp Leu Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr Ile Lys Arg Leu Ile Tyr
35 40 45
Ala Ala Ser Thr Leu Asp Ser Gly Val Pro Lys Arg Phe Ser Gly Ser
50 55 60
Arg Ser Gly Ser Asp Phe Ser Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Ser Glu
65 70 75 80
Asp Phe Ala Asp Tyr Tyr Cys Val Gln Tyr Ala Ser Tyr Pro Trp Thr
85 90 95
Phe Gly Gly Gly Ala Arg Leu Glu Ile Lys Arg Ala Asp Ala Ala Pro
100 105 110
Thr Val Ser Ile Phe Pro Pro Ser Ser Glu Gln Leu Thr Ser Gly Gly
115 120 125
Ala Ser Val Val Cys Phe Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Lys Asp Ile Asn
130 135 140
Val Lys Trp Lys Ile Asp Gly Ser Glu Arg Gln Asn Gly Val Leu Asn
145 150 155 160
Ser Trp Thr Asp Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Met Ser Ser
165 170 175
Thr Leu Thr Leu Thr Lys Asp Glu Tyr Glu Arg His Asn Ser Tyr Thr
180 185 190
Cys Glu Ala Thr His Lys Thr Ser Thr Ser Pro Ile Val Lys Ser Phe
195 200 205
Asn Arg Asn Glu Cys
210
<210> 27
<211> 459
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: HC клона B с лидерной последовательностью
<400> 27
Met Ala Val Leu Gly Leu Leu Leu Cys Leu Val Thr Phe Pro Ser Cys
1 5 10 15
Val Leu Ser Glu Val Lys Leu Glu Glu Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys
20 25 30
Pro Gly Ala Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe
35 40 45
Thr Ser Tyr Val Met His Trp Val Lys Gln Lys Pro Gly Gln Gly Leu
50 55 60
Glu Trp Ile Gly Tyr Ile Asn Pro Lys Asn Asp Gly Thr Phe Tyr Asn
65 70 75 80
Gly Lys Phe Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ser Asp Lys Ser Ser Ser
85 90 95
Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val
100 105 110
Tyr Tyr Cys Ala Ala Phe Asn Tyr Gly Ile Ala Tyr Trp Gly Gln Gly
115 120 125
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Lys Thr Thr Pro Pro Ser Val Tyr
130 135 140
Pro Leu Ala Pro Gly Ser Ala Ala Gln Thr Asn Ser Met Val Thr Leu
145 150 155 160
Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Thr Trp
165 170 175
Asn Ser Gly Ser Leu Ser Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu
180 185 190
Gln Ser Asp Leu Tyr Thr Leu Ser Ser Ser Val Thr Val Pro Ser Ser
195 200 205
Pro Arg Pro Ser Glu Thr Val Thr Cys Asn Val Ala His Pro Ala Ser
210 215 220
Ser Thr Lys Val Asp Lys Lys Ile Val Pro Arg Asp Cys Gly Cys Lys
225 230 235 240
Pro Cys Ile Cys Thr Val Pro Glu Val Ser Ser Val Phe Ile Phe Pro
245 250 255
Pro Lys Pro Lys Asp Val Leu Thr Ile Thr Leu Thr Pro Lys Val Thr
260 265 270
Cys Val Val Val Asp Ile Ser Lys Asp Asp Pro Glu Val Gln Phe Ser
275 280 285
Trp Phe Val Asp Asp Val Glu Val His Thr Ala Gln Thr Gln Pro Arg
290 295 300
Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Ser Val Ser Glu Leu Pro Ile
305 310 315 320
Met His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Phe Lys Cys Arg Val Asn
325 330 335
Ser Ala Ala Phe Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys
340 345 350
Gly Arg Pro Lys Ala Pro Gln Val Tyr Thr Ile Pro Pro Pro Lys Glu
355 360 365
Gln Met Ala Lys Asp Lys Val Ser Leu Thr Cys Met Ile Thr Asp Phe
370 375 380
Phe Pro Glu Asp Ile Thr Val Glu Trp Gln Trp Asn Gly Gln Pro Ala
385 390 395 400
Glu Asn Tyr Lys Asn Thr Gln Pro Ile Met Asn Thr Asn Gly Ser Tyr
405 410 415
Phe Val Tyr Ser Lys Leu Asn Val Gln Lys Ser Asn Trp Glu Ala Gly
420 425 430
Asn Thr Phe Thr Cys Ser Val Leu His Glu Gly Leu His Asn His His
435 440 445
Thr Glu Lys Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Lys
450 455
<210> 28
<211> 233
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: LC клона B с лидерной последовательностью
<400> 28
Met Glu Thr Asp Thr Leu Leu Leu Trp Val Leu Leu Leu Trp Val Pro
1 5 10 15
Gly Ser Thr Gly Ile Val Leu Thr Gln Thr Pro Ser Ser Leu Ser Ala
20 25 30
Ser Leu Gly Glu Arg Val Ser Leu Thr Cys Arg Ala Ser Gln Glu Ile
35 40 45
Ser Gly Tyr Leu Ser Trp Leu Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr Ile Lys
50 55 60
Arg Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Thr Leu Asp Ser Gly Val Pro Lys Arg
65 70 75 80
Phe Ser Gly Ser Arg Ser Gly Ser Asp Phe Ser Leu Thr Ile Ser Ser
85 90 95
Leu Glu Ser Glu Asp Phe Ala Asp Tyr Tyr Cys Val Gln Tyr Ala Ser
100 105 110
Tyr Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Ala Arg Leu Glu Ile Lys Arg Ala
115 120 125
Asp Ala Ala Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro Pro Ser Ser Glu Gln Leu
130 135 140
Thr Ser Gly Gly Ala Ser Val Val Cys Phe Leu Asn Asn Phe Tyr Pro
145 150 155 160
Lys Asp Ile Asn Val Lys Trp Lys Ile Asp Gly Ser Glu Arg Gln Asn
165 170 175
Gly Val Leu Asn Ser Trp Thr Asp Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr
180 185 190
Ser Met Ser Ser Thr Leu Thr Leu Thr Lys Asp Glu Tyr Glu Arg His
195 200 205
Asn Ser Tyr Thr Cys Glu Ala Thr His Lys Thr Ser Thr Ser Pro Ile
210 215 220
Val Lys Ser Phe Asn Arg Asn Glu Cys
225 230
<210> 29
<211> 10
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: CDR-H1 клона I
<400> 29
Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Val Met His
1 5 10
<210> 30
<211> 17
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: CDR-H2 клона I
<400> 30
Tyr Ile Asn Pro Asn Asn Asp Gly Thr Phe Tyr Asn Gly Lys Phe Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 31
<211> 7
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: CDR-H3 клона I
<400> 31
Phe Tyr Tyr Gly Phe Ala Tyr
1 5
<210> 32
<211> 25
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: HC-FR1 клона I
<400> 32
Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser
20 25
<210> 33
<211> 14
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: HC-FR2 клона I
<400> 33
Trp Val Lys Gln Lys Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile Gly
1 5 10
<210> 34
<211> 32
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: HC-FR3 клона I
<400> 34
Lys Ala Thr Leu Thr Ser Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr Met Glu
1 5 10 15
Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Ala
20 25 30
<210> 35
<211> 11
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: HC-FR4 клона I
<400> 35
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ala
1 5 10
<210> 36
<211> 11
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: CDR-L1 клона I
<400> 36
Arg Ala Ser Gln Glu Ile Ser Gly Tyr Leu Ser
1 5 10
<210> 37
<211> 7
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: CDR-L2 клона I
<400> 37
Ala Ala Ser Thr Leu Asp Ser
1 5
<210> 38
<211> 9
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: CDR-L3 клона I
<400> 38
Leu Gln Tyr Ala Ser Tyr Pro Trp Thr
1 5
<210> 39
<211> 26
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: LC-FR1 клона I
<400> 39
Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly
1 5 10 15
Glu Arg Val Ser Leu Thr Cys Arg Ala Ser
20 25
<210> 40
<211> 15
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: LC-FR2 клона I
<400> 40
Trp Leu Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr Ile Lys Arg Leu Ile Tyr
1 5 10 15
<210> 41
<211> 32
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: LC-FR3 клона I
<400> 41
Gly Val Pro Lys Arg Phe Ser Gly Ser Arg Ser Gly Ser Asp Phe Ser
1 5 10 15
Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Ser Glu Asp Phe Ala Asp Tyr Tyr Cys
20 25 30
<210> 42
<211> 10
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: LC-FR4 клона I
<400> 42
Phe Gly Gly Gly Ala Lys Leu Glu Ile Lys
1 5 10
<210> 43
<211> 116
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: вариабельная HC клона I
<400> 43
Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Val Met His Trp Val Lys Gln Lys Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Tyr Ile Asn Pro Asn Asn Asp Gly Thr Phe Tyr Asn Gly Lys Phe
50 55 60
Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ser Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Phe Tyr Tyr Gly Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
100 105 110
Thr Val Ser Ala
115
<210> 44
<211> 107
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: вариабельная LC клона I
<400> 44
Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly
1 5 10 15
Glu Arg Val Ser Leu Thr Cys Arg Ala Ser Gln Glu Ile Ser Gly Tyr
20 25 30
Leu Ser Trp Leu Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr Ile Lys Arg Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Thr Leu Asp Ser Gly Val Pro Lys Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Arg Ser Gly Ser Asp Phe Ser Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Ser
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Asp Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Ala Ser Tyr Pro Trp
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Ala Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 45
<211> 135
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: вариабельная HC клона I с лидерной последовательностью
<400> 45
Met Ala Val Leu Gly Leu Leu Leu Cys Leu Val Thr Phe Pro Ser Cys
1 5 10 15
Val Leu Ser Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys
20 25 30
Pro Gly Ala Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe
35 40 45
Thr Ser Tyr Val Met His Trp Val Lys Gln Lys Pro Gly Gln Gly Leu
50 55 60
Glu Trp Ile Gly Tyr Ile Asn Pro Asn Asn Asp Gly Thr Phe Tyr Asn
65 70 75 80
Gly Lys Phe Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ser Asp Lys Ser Ser Ser
85 90 95
Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val
100 105 110
Tyr Tyr Cys Ala Ala Phe Tyr Tyr Gly Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly
115 120 125
Thr Leu Val Thr Val Ser Ala
130 135
<210> 46
<211> 127
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: вариабельная LC клона I с лидерной последовательностью
<400> 46
Met Glu Thr Asp Thr Leu Leu Leu Trp Val Leu Leu Leu Trp Val Pro
1 5 10 15
Gly Ser Thr Gly Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser
20 25 30
Ala Ser Leu Gly Glu Arg Val Ser Leu Thr Cys Arg Ala Ser Gln Glu
35 40 45
Ile Ser Gly Tyr Leu Ser Trp Leu Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr Ile
50 55 60
Lys Arg Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Thr Leu Asp Ser Gly Val Pro Lys
65 70 75 80
Arg Phe Ser Gly Ser Arg Ser Gly Ser Asp Phe Ser Leu Thr Ile Ser
85 90 95
Ser Leu Glu Ser Glu Asp Phe Ala Asp Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Ala
100 105 110
Ser Tyr Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Ala Lys Leu Glu Ile Lys
115 120 125
<210> 47
<211> 440
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: HC клона I
<400> 47
Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Val Met His Trp Val Lys Gln Lys Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Tyr Ile Asn Pro Asn Asn Asp Gly Thr Phe Tyr Asn Gly Lys Phe
50 55 60
Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ser Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Phe Tyr Tyr Gly Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
100 105 110
Thr Val Ser Ala Ala Lys Thr Thr Pro Pro Ser Val Tyr Pro Leu Ala
115 120 125
Pro Gly Ser Ala Ala Gln Thr Asn Ser Met Val Thr Leu Gly Cys Leu
130 135 140
Val Lys Gly Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Thr Trp Asn Ser Gly
145 150 155 160
Ser Leu Ser Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Asp
165 170 175
Leu Tyr Thr Leu Ser Ser Ser Val Thr Val Pro Ser Ser Pro Arg Pro
180 185 190
Ser Glu Thr Val Thr Cys Asn Val Ala His Pro Ala Ser Ser Thr Lys
195 200 205
Val Asp Lys Lys Ile Val Pro Arg Asp Cys Gly Cys Lys Pro Cys Ile
210 215 220
Cys Thr Val Pro Glu Val Ser Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Pro
225 230 235 240
Lys Asp Val Leu Thr Ile Thr Leu Thr Pro Lys Val Thr Cys Val Val
245 250 255
Val Asp Ile Ser Lys Asp Asp Pro Glu Val Gln Phe Ser Trp Phe Val
260 265 270
Asp Asp Val Glu Val His Thr Ala Gln Thr Gln Pro Arg Glu Glu Gln
275 280 285
Phe Asn Ser Thr Phe Arg Ser Val Ser Glu Leu Pro Ile Met His Gln
290 295 300
Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Phe Lys Cys Arg Val Asn Ser Ala Ala
305 310 315 320
Phe Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Arg Pro
325 330 335
Lys Ala Pro Gln Val Tyr Thr Ile Pro Pro Pro Lys Glu Gln Met Ala
340 345 350
Lys Asp Lys Val Ser Leu Thr Cys Met Ile Thr Asp Phe Phe Pro Glu
355 360 365
Asp Ile Thr Val Glu Trp Gln Trp Asn Gly Gln Pro Ala Glu Asn Tyr
370 375 380
Lys Asn Thr Gln Pro Ile Met Asn Thr Asn Gly Ser Tyr Phe Val Tyr
385 390 395 400
Ser Lys Leu Asn Val Gln Lys Ser Asn Trp Glu Ala Gly Asn Thr Phe
405 410 415
Thr Cys Ser Val Leu His Glu Gly Leu His Asn His His Thr Glu Lys
420 425 430
Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Lys
435 440
<210> 48
<211> 214
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: LC клона I
<400> 48
Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly
1 5 10 15
Glu Arg Val Ser Leu Thr Cys Arg Ala Ser Gln Glu Ile Ser Gly Tyr
20 25 30
Leu Ser Trp Leu Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr Ile Lys Arg Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Thr Leu Asp Ser Gly Val Pro Lys Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Arg Ser Gly Ser Asp Phe Ser Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Ser
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Asp Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Ala Ser Tyr Pro Trp
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Ala Lys Leu Glu Ile Lys Arg Ala Asp Ala Ala
100 105 110
Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro Pro Ser Ser Glu Gln Leu Thr Ser Gly
115 120 125
Gly Ala Ser Val Val Cys Phe Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Lys Asp Ile
130 135 140
Asn Val Lys Trp Lys Ile Asp Gly Ser Glu Arg Gln Asn Gly Val Leu
145 150 155 160
Asn Ser Trp Thr Asp Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Met Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Thr Lys Asp Glu Tyr Glu Arg His Asn Ser Tyr
180 185 190
Thr Cys Glu Ala Thr His Lys Thr Ser Thr Ser Pro Ile Val Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Asn Glu Cys
210
<210> 49
<211> 459
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: HC клона I с лидерной последовательностью
<400> 49
Met Ala Val Leu Gly Leu Leu Leu Cys Leu Val Thr Phe Pro Ser Cys
1 5 10 15
Val Leu Ser Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys
20 25 30
Pro Gly Ala Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe
35 40 45
Thr Ser Tyr Val Met His Trp Val Lys Gln Lys Pro Gly Gln Gly Leu
50 55 60
Glu Trp Ile Gly Tyr Ile Asn Pro Asn Asn Asp Gly Thr Phe Tyr Asn
65 70 75 80
Gly Lys Phe Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ser Asp Lys Ser Ser Ser
85 90 95
Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val
100 105 110
Tyr Tyr Cys Ala Ala Phe Tyr Tyr Gly Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly
115 120 125
Thr Leu Val Thr Val Ser Ala Ala Lys Thr Thr Pro Pro Ser Val Tyr
130 135 140
Pro Leu Ala Pro Gly Ser Ala Ala Gln Thr Asn Ser Met Val Thr Leu
145 150 155 160
Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Thr Trp
165 170 175
Asn Ser Gly Ser Leu Ser Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu
180 185 190
Gln Ser Asp Leu Tyr Thr Leu Ser Ser Ser Val Thr Val Pro Ser Ser
195 200 205
Pro Arg Pro Ser Glu Thr Val Thr Cys Asn Val Ala His Pro Ala Ser
210 215 220
Ser Thr Lys Val Asp Lys Lys Ile Val Pro Arg Asp Cys Gly Cys Lys
225 230 235 240
Pro Cys Ile Cys Thr Val Pro Glu Val Ser Ser Val Phe Ile Phe Pro
245 250 255
Pro Lys Pro Lys Asp Val Leu Thr Ile Thr Leu Thr Pro Lys Val Thr
260 265 270
Cys Val Val Val Asp Ile Ser Lys Asp Asp Pro Glu Val Gln Phe Ser
275 280 285
Trp Phe Val Asp Asp Val Glu Val His Thr Ala Gln Thr Gln Pro Arg
290 295 300
Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Ser Val Ser Glu Leu Pro Ile
305 310 315 320
Met His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Phe Lys Cys Arg Val Asn
325 330 335
Ser Ala Ala Phe Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys
340 345 350
Gly Arg Pro Lys Ala Pro Gln Val Tyr Thr Ile Pro Pro Pro Lys Glu
355 360 365
Gln Met Ala Lys Asp Lys Val Ser Leu Thr Cys Met Ile Thr Asp Phe
370 375 380
Phe Pro Glu Asp Ile Thr Val Glu Trp Gln Trp Asn Gly Gln Pro Ala
385 390 395 400
Glu Asn Tyr Lys Asn Thr Gln Pro Ile Met Asn Thr Asn Gly Ser Tyr
405 410 415
Phe Val Tyr Ser Lys Leu Asn Val Gln Lys Ser Asn Trp Glu Ala Gly
420 425 430
Asn Thr Phe Thr Cys Ser Val Leu His Glu Gly Leu His Asn His His
435 440 445
Thr Glu Lys Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Lys
450 455
<210> 50
<211> 234
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: LC клона I с лидерной последовательностью
<400> 50
Met Glu Thr Asp Thr Leu Leu Leu Trp Val Leu Leu Leu Trp Val Pro
1 5 10 15
Gly Ser Thr Gly Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser
20 25 30
Ala Ser Leu Gly Glu Arg Val Ser Leu Thr Cys Arg Ala Ser Gln Glu
35 40 45
Ile Ser Gly Tyr Leu Ser Trp Leu Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr Ile
50 55 60
Lys Arg Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Thr Leu Asp Ser Gly Val Pro Lys
65 70 75 80
Arg Phe Ser Gly Ser Arg Ser Gly Ser Asp Phe Ser Leu Thr Ile Ser
85 90 95
Ser Leu Glu Ser Glu Asp Phe Ala Asp Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Ala
100 105 110
Ser Tyr Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Ala Lys Leu Glu Ile Lys Arg
115 120 125
Ala Asp Ala Ala Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro Pro Ser Ser Glu Gln
130 135 140
Leu Thr Ser Gly Gly Ala Ser Val Val Cys Phe Leu Asn Asn Phe Tyr
145 150 155 160
Pro Lys Asp Ile Asn Val Lys Trp Lys Ile Asp Gly Ser Glu Arg Gln
165 170 175
Asn Gly Val Leu Asn Ser Trp Thr Asp Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr
180 185 190
Tyr Ser Met Ser Ser Thr Leu Thr Leu Thr Lys Asp Glu Tyr Glu Arg
195 200 205
His Asn Ser Tyr Thr Cys Glu Ala Thr His Lys Thr Ser Thr Ser Pro
210 215 220
Ile Val Lys Ser Phe Asn Arg Asn Glu Cys
225 230
<210> 51
<211> 451
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Химерная вариабельная HC клона B и IgG-B собаки
(Химерная B HC)
<400> 51
Glu Val Lys Leu Glu Glu Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Val Met His Trp Val Lys Gln Lys Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Tyr Ile Asn Pro Lys Asn Asp Gly Thr Phe Tyr Asn Gly Lys Phe
50 55 60
Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ser Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Phe Asn Tyr Gly Ile Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Thr Ala Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala
115 120 125
Pro Ser Cys Gly Ser Thr Ser Gly Ser Thr Val Ala Leu Ala Cys Leu
130 135 140
Val Ser Gly Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly
145 150 155 160
Ser Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ser Val Leu Gln Ser Ser
165 170 175
Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Met Val Thr Val Pro Ser Ser Arg Trp
180 185 190
Pro Ser Glu Thr Phe Thr Cys Asn Val Ala His Pro Ala Ser Lys Thr
195 200 205
Lys Val Asp Lys Pro Val Pro Lys Arg Glu Asn Gly Arg Val Pro Arg
210 215 220
Pro Pro Asp Cys Pro Lys Cys Pro Ala Pro Glu Met Leu Gly Gly Pro
225 230 235 240
Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Leu Ile Ala
245 250 255
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Leu Asp Pro Glu Asp
260 265 270
Pro Glu Val Gln Ile Ser Trp Phe Val Asp Gly Lys Gln Met Gln Thr
275 280 285
Ala Lys Thr Gln Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Gly Thr Tyr Arg Val
290 295 300
Val Ser Val Leu Pro Ile Gly His Gln Asp Trp Leu Lys Gly Lys Gln
305 310 315 320
Phe Thr Cys Lys Val Asn Asn Lys Ala Leu Pro Ser Pro Ile Glu Arg
325 330 335
Thr Ile Ser Lys Ala Arg Gly Gln Ala His Gln Pro Ser Val Tyr Val
340 345 350
Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Leu Ser Lys Asn Thr Val Ser Leu Thr
355 360 365
Cys Leu Ile Lys Asp Phe Phe Pro Pro Asp Ile Asp Val Glu Trp Gln
370 375 380
Ser Asn Gly Gln Gln Glu Pro Glu Ser Lys Tyr Arg Thr Thr Pro Pro
385 390 395 400
Gln Leu Asp Glu Asp Gly Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Ser Val
405 410 415
Asp Lys Ser Arg Trp Gln Arg Gly Asp Thr Phe Ile Cys Ala Val Met
420 425 430
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Glu Ser Leu Ser His Ser
435 440 445
Pro Gly Lys
450
<210> 52
<211> 216
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Химерная вариабельная LC клона B и константная
область κ легкой цепи собаки (Химерная B LC)
<400> 52
Ile Val Leu Thr Gln Thr Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly Glu
1 5 10 15
Arg Val Ser Leu Thr Cys Arg Ala Ser Gln Glu Ile Ser Gly Tyr Leu
20 25 30
Ser Trp Leu Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr Ile Lys Arg Leu Ile Tyr
35 40 45
Ala Ala Ser Thr Leu Asp Ser Gly Val Pro Lys Arg Phe Ser Gly Ser
50 55 60
Arg Ser Gly Ser Asp Phe Ser Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Ser Glu
65 70 75 80
Asp Phe Ala Asp Tyr Tyr Cys Val Gln Tyr Ala Ser Tyr Pro Trp Thr
85 90 95
Phe Gly Gly Gly Ala Arg Leu Glu Ile Lys Arg Asn Asp Ala Gln Pro
100 105 110
Ala Val Tyr Leu Phe Gln Pro Ser Pro Asp Gln Leu His Thr Gly Ser
115 120 125
Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Ser Phe Tyr Pro Lys Asp Ile Asn
130 135 140
Val Lys Trp Lys Val Asp Gly Val Ile Gln Asp Thr Gly Ile Gln Glu
145 150 155 160
Ser Val Thr Glu Gln Asp Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr
165 170 175
Leu Thr Met Ser Ser Thr Glu Tyr Leu Ser His Glu Leu Tyr Ser Cys
180 185 190
Glu Ile Thr His Lys Ser Leu Pro Ser Thr Leu Ile Lys Ser Phe Gln
195 200 205
Arg Ser Glu Cys Gln Arg Val Asp
210 215
<210> 53
<211> 470
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Химерная вариабельная HC клона B и IgG-B собаки с
лидерной последовательностью
<400> 53
Met Ala Val Leu Gly Leu Leu Leu Cys Leu Val Thr Phe Pro Ser Cys
1 5 10 15
Val Leu Ser Glu Val Lys Leu Glu Glu Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys
20 25 30
Pro Gly Ala Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe
35 40 45
Thr Ser Tyr Val Met His Trp Val Lys Gln Lys Pro Gly Gln Gly Leu
50 55 60
Glu Trp Ile Gly Tyr Ile Asn Pro Lys Asn Asp Gly Thr Phe Tyr Asn
65 70 75 80
Gly Lys Phe Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ser Asp Lys Ser Ser Ser
85 90 95
Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val
100 105 110
Tyr Tyr Cys Ala Ala Phe Asn Tyr Gly Ile Ala Tyr Trp Gly Gln Gly
115 120 125
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Thr Ala Pro Ser Val Phe
130 135 140
Pro Leu Ala Pro Ser Cys Gly Ser Thr Ser Gly Ser Thr Val Ala Leu
145 150 155 160
Ala Cys Leu Val Ser Gly Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp
165 170 175
Asn Ser Gly Ser Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ser Val Leu
180 185 190
Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Met Val Thr Val Pro Ser
195 200 205
Ser Arg Trp Pro Ser Glu Thr Phe Thr Cys Asn Val Ala His Pro Ala
210 215 220
Ser Lys Thr Lys Val Asp Lys Pro Val Pro Lys Arg Glu Asn Gly Arg
225 230 235 240
Val Pro Arg Pro Pro Asp Cys Pro Lys Cys Pro Ala Pro Glu Met Leu
245 250 255
Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu
260 265 270
Leu Ile Ala Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Leu Asp
275 280 285
Pro Glu Asp Pro Glu Val Gln Ile Ser Trp Phe Val Asp Gly Lys Gln
290 295 300
Met Gln Thr Ala Lys Thr Gln Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Gly Thr
305 310 315 320
Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Gly His Gln Asp Trp Leu Lys
325 330 335
Gly Lys Gln Phe Thr Cys Lys Val Asn Asn Lys Ala Leu Pro Ser Pro
340 345 350
Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Ala Arg Gly Gln Ala His Gln Pro Ser
355 360 365
Val Tyr Val Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Leu Ser Lys Asn Thr Val
370 375 380
Ser Leu Thr Cys Leu Ile Lys Asp Phe Phe Pro Pro Asp Ile Asp Val
385 390 395 400
Glu Trp Gln Ser Asn Gly Gln Gln Glu Pro Glu Ser Lys Tyr Arg Thr
405 410 415
Thr Pro Pro Gln Leu Asp Glu Asp Gly Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys
420 425 430
Leu Ser Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Arg Gly Asp Thr Phe Ile Cys
435 440 445
Ala Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Glu Ser Leu
450 455 460
Ser His Ser Pro Gly Lys
465 470
<210> 54
<211> 236
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Химерная клона B вариабельная LC и константная
область κ легкой цепи собаки с лидерной последовательностью
<400> 54
Met Glu Thr Asp Thr Leu Leu Leu Trp Val Leu Leu Leu Trp Val Pro
1 5 10 15
Gly Ser Thr Gly Ile Val Leu Thr Gln Thr Pro Ser Ser Leu Ser Ala
20 25 30
Ser Leu Gly Glu Arg Val Ser Leu Thr Cys Arg Ala Ser Gln Glu Ile
35 40 45
Ser Gly Tyr Leu Ser Trp Leu Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr Ile Lys
50 55 60
Arg Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Thr Leu Asp Ser Gly Val Pro Lys Arg
65 70 75 80
Phe Ser Gly Ser Arg Ser Gly Ser Asp Phe Ser Leu Thr Ile Ser Ser
85 90 95
Leu Glu Ser Glu Asp Phe Ala Asp Tyr Tyr Cys Val Gln Tyr Ala Ser
100 105 110
Tyr Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Ala Arg Leu Glu Ile Lys Arg Asn
115 120 125
Asp Ala Gln Pro Ala Val Tyr Leu Phe Gln Pro Ser Pro Asp Gln Leu
130 135 140
His Thr Gly Ser Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Ser Phe Tyr Pro
145 150 155 160
Lys Asp Ile Asn Val Lys Trp Lys Val Asp Gly Val Ile Gln Asp Thr
165 170 175
Gly Ile Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Lys Asp Ser Thr Tyr Ser
180 185 190
Leu Ser Ser Thr Leu Thr Met Ser Ser Thr Glu Tyr Leu Ser His Glu
195 200 205
Leu Tyr Ser Cys Glu Ile Thr His Lys Ser Leu Pro Ser Thr Leu Ile
210 215 220
Lys Ser Phe Gln Arg Ser Glu Cys Gln Arg Val Asp
225 230 235
<210> 55
<211> 451
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Химерная вариабельная HC клона I и IgG-B собаки
(Химерная I HC)
<400> 55
Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Val Met His Trp Val Lys Gln Lys Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Tyr Ile Asn Pro Asn Asn Asp Gly Thr Phe Tyr Asn Gly Lys Phe
50 55 60
Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ser Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Phe Tyr Tyr Gly Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
100 105 110
Thr Val Ser Ala Ala Ser Thr Thr Ala Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala
115 120 125
Pro Ser Cys Gly Ser Thr Ser Gly Ser Thr Val Ala Leu Ala Cys Leu
130 135 140
Val Ser Gly Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly
145 150 155 160
Ser Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ser Val Leu Gln Ser Ser
165 170 175
Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Met Val Thr Val Pro Ser Ser Arg Trp
180 185 190
Pro Ser Glu Thr Phe Thr Cys Asn Val Ala His Pro Ala Ser Lys Thr
195 200 205
Lys Val Asp Lys Pro Val Pro Lys Arg Glu Asn Gly Arg Val Pro Arg
210 215 220
Pro Pro Asp Cys Pro Lys Cys Pro Ala Pro Glu Met Leu Gly Gly Pro
225 230 235 240
Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Leu Ile Ala
245 250 255
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Leu Asp Pro Glu Asp
260 265 270
Pro Glu Val Gln Ile Ser Trp Phe Val Asp Gly Lys Gln Met Gln Thr
275 280 285
Ala Lys Thr Gln Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Gly Thr Tyr Arg Val
290 295 300
Val Ser Val Leu Pro Ile Gly His Gln Asp Trp Leu Lys Gly Lys Gln
305 310 315 320
Phe Thr Cys Lys Val Asn Asn Lys Ala Leu Pro Ser Pro Ile Glu Arg
325 330 335
Thr Ile Ser Lys Ala Arg Gly Gln Ala His Gln Pro Ser Val Tyr Val
340 345 350
Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Leu Ser Lys Asn Thr Val Ser Leu Thr
355 360 365
Cys Leu Ile Lys Asp Phe Phe Pro Pro Asp Ile Asp Val Glu Trp Gln
370 375 380
Ser Asn Gly Gln Gln Glu Pro Glu Ser Lys Tyr Arg Thr Thr Pro Pro
385 390 395 400
Gln Leu Asp Glu Asp Gly Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Ser Val
405 410 415
Asp Lys Ser Arg Trp Gln Arg Gly Asp Thr Phe Ile Cys Ala Val Met
420 425 430
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Glu Ser Leu Ser His Ser
435 440 445
Pro Gly Lys
450
<210> 56
<211> 217
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Химерная вариабельная LC клона I и константная
область κ легкой цепи собаки (Химерная I LC)
<400> 56
Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly
1 5 10 15
Glu Arg Val Ser Leu Thr Cys Arg Ala Ser Gln Glu Ile Ser Gly Tyr
20 25 30
Leu Ser Trp Leu Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr Ile Lys Arg Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Thr Leu Asp Ser Gly Val Pro Lys Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Arg Ser Gly Ser Asp Phe Ser Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Ser
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Asp Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Ala Ser Tyr Pro Trp
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Ala Lys Leu Glu Ile Lys Arg Asn Asp Ala Gln
100 105 110
Pro Ala Val Tyr Leu Phe Gln Pro Ser Pro Asp Gln Leu His Thr Gly
115 120 125
Ser Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Ser Phe Tyr Pro Lys Asp Ile
130 135 140
Asn Val Lys Trp Lys Val Asp Gly Val Ile Gln Asp Thr Gly Ile Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser
165 170 175
Thr Leu Thr Met Ser Ser Thr Glu Tyr Leu Ser His Glu Leu Tyr Ser
180 185 190
Cys Glu Ile Thr His Lys Ser Leu Pro Ser Thr Leu Ile Lys Ser Phe
195 200 205
Gln Arg Ser Glu Cys Gln Arg Val Asp
210 215
<210> 57
<211> 470
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Химерная вариабельная HC клона I и IgG-B собаки с
лидерной последовательностью
<400> 57
Met Ala Val Leu Gly Leu Leu Leu Cys Leu Val Thr Phe Pro Ser Cys
1 5 10 15
Val Leu Ser Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys
20 25 30
Pro Gly Ala Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe
35 40 45
Thr Ser Tyr Val Met His Trp Val Lys Gln Lys Pro Gly Gln Gly Leu
50 55 60
Glu Trp Ile Gly Tyr Ile Asn Pro Asn Asn Asp Gly Thr Phe Tyr Asn
65 70 75 80
Gly Lys Phe Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ser Asp Lys Ser Ser Ser
85 90 95
Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val
100 105 110
Tyr Tyr Cys Ala Ala Phe Tyr Tyr Gly Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly
115 120 125
Thr Leu Val Thr Val Ser Ala Ala Ser Thr Thr Ala Pro Ser Val Phe
130 135 140
Pro Leu Ala Pro Ser Cys Gly Ser Thr Ser Gly Ser Thr Val Ala Leu
145 150 155 160
Ala Cys Leu Val Ser Gly Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp
165 170 175
Asn Ser Gly Ser Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ser Val Leu
180 185 190
Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Met Val Thr Val Pro Ser
195 200 205
Ser Arg Trp Pro Ser Glu Thr Phe Thr Cys Asn Val Ala His Pro Ala
210 215 220
Ser Lys Thr Lys Val Asp Lys Pro Val Pro Lys Arg Glu Asn Gly Arg
225 230 235 240
Val Pro Arg Pro Pro Asp Cys Pro Lys Cys Pro Ala Pro Glu Met Leu
245 250 255
Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu
260 265 270
Leu Ile Ala Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Leu Asp
275 280 285
Pro Glu Asp Pro Glu Val Gln Ile Ser Trp Phe Val Asp Gly Lys Gln
290 295 300
Met Gln Thr Ala Lys Thr Gln Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Gly Thr
305 310 315 320
Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Gly His Gln Asp Trp Leu Lys
325 330 335
Gly Lys Gln Phe Thr Cys Lys Val Asn Asn Lys Ala Leu Pro Ser Pro
340 345 350
Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Ala Arg Gly Gln Ala His Gln Pro Ser
355 360 365
Val Tyr Val Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Leu Ser Lys Asn Thr Val
370 375 380
Ser Leu Thr Cys Leu Ile Lys Asp Phe Phe Pro Pro Asp Ile Asp Val
385 390 395 400
Glu Trp Gln Ser Asn Gly Gln Gln Glu Pro Glu Ser Lys Tyr Arg Thr
405 410 415
Thr Pro Pro Gln Leu Asp Glu Asp Gly Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys
420 425 430
Leu Ser Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Arg Gly Asp Thr Phe Ile Cys
435 440 445
Ala Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Glu Ser Leu
450 455 460
Ser His Ser Pro Gly Lys
465 470
<210> 58
<211> 237
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Химерная вариабельная LC клона I и константной
областью κ легкой цепи собаки с лидерной последовательностью
<400> 58
Met Glu Thr Asp Thr Leu Leu Leu Trp Val Leu Leu Leu Trp Val Pro
1 5 10 15
Gly Ser Thr Gly Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser
20 25 30
Ala Ser Leu Gly Glu Arg Val Ser Leu Thr Cys Arg Ala Ser Gln Glu
35 40 45
Ile Ser Gly Tyr Leu Ser Trp Leu Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr Ile
50 55 60
Lys Arg Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Thr Leu Asp Ser Gly Val Pro Lys
65 70 75 80
Arg Phe Ser Gly Ser Arg Ser Gly Ser Asp Phe Ser Leu Thr Ile Ser
85 90 95
Ser Leu Glu Ser Glu Asp Phe Ala Asp Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Ala
100 105 110
Ser Tyr Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Ala Lys Leu Glu Ile Lys Arg
115 120 125
Asn Asp Ala Gln Pro Ala Val Tyr Leu Phe Gln Pro Ser Pro Asp Gln
130 135 140
Leu His Thr Gly Ser Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Ser Phe Tyr
145 150 155 160
Pro Lys Asp Ile Asn Val Lys Trp Lys Val Asp Gly Val Ile Gln Asp
165 170 175
Thr Gly Ile Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Lys Asp Ser Thr Tyr
180 185 190
Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Met Ser Ser Thr Glu Tyr Leu Ser His
195 200 205
Glu Leu Tyr Ser Cys Glu Ile Thr His Lys Ser Leu Pro Ser Thr Leu
210 215 220
Ile Lys Ser Phe Gln Arg Ser Glu Cys Gln Arg Val Asp
225 230 235
<210> 59
<211> 116
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Канинизированная вариабельная HC v1 клона B
<400> 59
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Asp Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Val Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Tyr Ile Asn Pro Lys Asn Asp Gly Thr Phe Tyr Asn Gly Ala Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Arg Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Phe Asn Tyr Gly Ile Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser
115
<210> 60
<211> 116
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Канинизированная вариабельная HC v2 клона B
<400> 60
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Val Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Tyr Ile Asn Pro Lys Asn Asp Gly Thr Phe Tyr Asn Gly Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Leu Thr Ala Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ala Gly Asp Ile Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Phe Asn Tyr Gly Ile Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser
115
<210> 61
<211> 107
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Канинизированная вариабельная LC v1 клона B
<400> 61
Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ser Leu Ser Gln Glu
1 5 10 15
Glu Lys Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Glu Ile Ser Gly Tyr
20 25 30
Leu Ser Trp Leu Gln Gln Lys Pro Gly Gly Thr Ile Lys Arg Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Asn Arg Asp Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Ser Phe Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro
65 70 75 80
Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Val Gln Tyr Ala Ser Tyr Pro Trp
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Ala Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 62
<211> 107
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Канинизированная вариабельная LC v2 клона B
<400> 62
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser Val Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Thr Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ala Ser Gln Glu Ile Ser Gly Tyr
20 25 30
Leu Ser Trp Leu Gln Gln Lys Pro Gly Gly Thr Ile Lys Arg Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Asn Arg Asp Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Arg Ile Ser Arg Val Glu Ala
65 70 75 80
Asp Asp Thr Gly Val Tyr Tyr Cys Val Gln Tyr Ala Ser Tyr Pro Trp
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Leu Lys
100 105
<210> 63
<211> 116
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Канинизированная вариабельная HC v1 клона I
<400> 63
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Asp Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Val Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Tyr Ile Asn Pro Asn Asn Asp Gly Thr Phe Tyr Asn Gly Ala Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Arg Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Phe Tyr Tyr Gly Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser
115
<210> 64
<211> 116
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Канинизированная вариабельная HC v2 клона I
<400> 64
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Val Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Tyr Ile Asn Pro Asn Asn Asp Gly Thr Phe Tyr Asn Gly Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Leu Thr Ala Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ala Gly Asp Ile Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Phe Tyr Tyr Gly Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser
115
<210> 65
<211> 107
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Канинизированная вариабельная LC v1 клона I
<400> 65
Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ser Leu Ser Gln Glu
1 5 10 15
Glu Lys Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Glu Ile Ser Gly Tyr
20 25 30
Leu Ser Trp Leu Gln Gln Lys Pro Gly Gly Thr Ile Lys Arg Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Asn Arg Asp Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Ser Phe Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro
65 70 75 80
Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Ala Ser Tyr Pro Trp
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Ala Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 66
<211> 107
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Канинизированная вариабельная LC v2 клона I
<400> 66
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser Val Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Thr Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ala Ser Gln Glu Ile Ser Gly Tyr
20 25 30
Leu Ser Trp Leu Gln Gln Lys Pro Gly Gly Thr Ile Lys Arg Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Asn Arg Asp Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Arg Ile Ser Arg Val Glu Ala
65 70 75 80
Asp Asp Thr Gly Val Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Ala Ser Tyr Pro Trp
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Leu Lys
100 105
<210> 67
<211> 116
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Фелинизированная вариабельная HC клона B
<400> 67
Gln Val Leu Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Arg Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Ile Phe Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Val Met His Trp Leu Arg Gln Ala Pro Ala Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Tyr Ile Asn Pro Lys Asn Asp Gly Thr Phe Tyr Asn Gly Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Leu Thr Leu Thr Ala Asp Thr Ser Thr Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Phe Asn Tyr Gly Ile Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser
115
<210> 68
<211> 107
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Фелинизированная вариабельная LC клона B
<400> 68
Asp Ile Thr Met Thr Gln Ser Pro Gly Ser Leu Ala Gly Ser Pro Gly
1 5 10 15
Gln Gln Val Thr Met Asn Cys Arg Ala Ser Gln Glu Ile Ser Gly Tyr
20 25 30
Leu Ser Trp Leu Gln Gln Lys Pro Gly Gly Thr Ile Lys Arg Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Thr Leu Asp Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Asn Leu Gln Ala
65 70 75 80
Glu Asp Val Ala Ser Tyr Tyr Cys Val Gln Tyr Ala Ser Tyr Pro Trp
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 69
<211> 116
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Фелинизированная вариабельная HC клона I
<400> 69
Gln Val Leu Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Arg Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Ile Phe Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Val Met His Trp Leu Arg Gln Ala Pro Ala Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Tyr Ile Asn Pro Asn Asn Asp Gly Thr Phe Tyr Asn Gly Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Leu Thr Leu Thr Ala Asp Thr Ser Thr Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Phe Tyr Tyr Gly Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser
115
<210> 70
<211> 107
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Фелинизированная вариабельная LC клона I
<400> 70
Asp Ile Thr Met Thr Gln Ser Pro Gly Ser Leu Ala Gly Ser Pro Gly
1 5 10 15
Gln Gln Val Thr Met Asn Cys Arg Ala Ser Gln Glu Ile Ser Gly Tyr
20 25 30
Leu Ser Trp Leu Gln Gln Lys Pro Gly Gly Thr Ile Lys Arg Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Thr Leu Asp Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Asn Leu Gln Ala
65 70 75 80
Glu Asp Val Ala Ser Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Ala Ser Tyr Pro Trp
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 71
<211> 451
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Канинизированная вариабельная HC v1 клона B и
вариант IgG-B C1q, CD16 собаки
<400> 71
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Asp Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Val Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Tyr Ile Asn Pro Lys Asn Asp Gly Thr Phe Tyr Asn Gly Ala Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Arg Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Phe Asn Tyr Gly Ile Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Thr Ala Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala
115 120 125
Pro Ser Cys Gly Ser Thr Ser Gly Ser Thr Val Ala Leu Ala Cys Leu
130 135 140
Val Ser Gly Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly
145 150 155 160
Ser Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ser Val Leu Gln Ser Ser
165 170 175
Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Met Val Thr Val Pro Ser Ser Arg Trp
180 185 190
Pro Ser Glu Thr Phe Thr Cys Asn Val Ala His Pro Ala Ser Lys Thr
195 200 205
Lys Val Asp Lys Pro Val Pro Lys Arg Glu Asn Gly Arg Val Pro Arg
210 215 220
Pro Pro Asp Cys Pro Lys Cys Pro Ala Pro Glu Pro Leu Gly Gly Pro
225 230 235 240
Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Leu Ile Ala
245 250 255
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Leu Asp Arg Glu Asp
260 265 270
Pro Glu Val Gln Ile Ser Trp Phe Val Asp Gly Lys Gln Met Gln Thr
275 280 285
Ala Lys Thr Gln Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Gly Thr Tyr Arg Val
290 295 300
Val Ser Val Leu Pro Ile Gly His Gln Asp Trp Leu Lys Gly Lys Gln
305 310 315 320
Phe Thr Cys Arg Val Asn Asn Lys Ala Leu Pro Ser Pro Ile Glu Arg
325 330 335
Thr Ile Ser Lys Ala Arg Gly Gln Ala His Gln Pro Ser Val Tyr Val
340 345 350
Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Leu Ser Lys Asn Thr Val Ser Leu Thr
355 360 365
Cys Leu Ile Lys Asp Phe Phe Pro Pro Asp Ile Asp Val Glu Trp Gln
370 375 380
Ser Asn Gly Gln Gln Glu Pro Glu Ser Lys Tyr Arg Thr Thr Pro Pro
385 390 395 400
Gln Leu Asp Glu Asp Gly Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Ser Val
405 410 415
Asp Lys Ser Arg Trp Gln Arg Gly Asp Thr Phe Ile Cys Ala Val Met
420 425 430
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Glu Ser Leu Ser His Ser
435 440 445
Pro Gly Lys
450
<210> 72
<211> 451
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Канинизированная вариабельная HC v2 клона B и
вариант IgG-B C1q, CD16 собаки
<400> 72
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Val Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Tyr Ile Asn Pro Lys Asn Asp Gly Thr Phe Tyr Asn Gly Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Leu Thr Ala Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ala Gly Asp Ile Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Phe Asn Tyr Gly Ile Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Thr Ala Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala
115 120 125
Pro Ser Cys Gly Ser Thr Ser Gly Ser Thr Val Ala Leu Ala Cys Leu
130 135 140
Val Ser Gly Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly
145 150 155 160
Ser Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ser Val Leu Gln Ser Ser
165 170 175
Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Met Val Thr Val Pro Ser Ser Arg Trp
180 185 190
Pro Ser Glu Thr Phe Thr Cys Asn Val Ala His Pro Ala Ser Lys Thr
195 200 205
Lys Val Asp Lys Pro Val Pro Lys Arg Glu Asn Gly Arg Val Pro Arg
210 215 220
Pro Pro Asp Cys Pro Lys Cys Pro Ala Pro Glu Pro Leu Gly Gly Pro
225 230 235 240
Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Leu Ile Ala
245 250 255
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Leu Asp Arg Glu Asp
260 265 270
Pro Glu Val Gln Ile Ser Trp Phe Val Asp Gly Lys Gln Met Gln Thr
275 280 285
Ala Lys Thr Gln Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Gly Thr Tyr Arg Val
290 295 300
Val Ser Val Leu Pro Ile Gly His Gln Asp Trp Leu Lys Gly Lys Gln
305 310 315 320
Phe Thr Cys Arg Val Asn Asn Lys Ala Leu Pro Ser Pro Ile Glu Arg
325 330 335
Thr Ile Ser Lys Ala Arg Gly Gln Ala His Gln Pro Ser Val Tyr Val
340 345 350
Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Leu Ser Lys Asn Thr Val Ser Leu Thr
355 360 365
Cys Leu Ile Lys Asp Phe Phe Pro Pro Asp Ile Asp Val Glu Trp Gln
370 375 380
Ser Asn Gly Gln Gln Glu Pro Glu Ser Lys Tyr Arg Thr Thr Pro Pro
385 390 395 400
Gln Leu Asp Glu Asp Gly Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Ser Val
405 410 415
Asp Lys Ser Arg Trp Gln Arg Gly Asp Thr Phe Ile Cys Ala Val Met
420 425 430
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Glu Ser Leu Ser His Ser
435 440 445
Pro Gly Lys
450
<210> 73
<211> 217
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Канинизированная вариабельная LC v1 клона B и
константная область κ легкой цепи собаки
<400> 73
Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ser Leu Ser Gln Glu
1 5 10 15
Glu Lys Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Glu Ile Ser Gly Tyr
20 25 30
Leu Ser Trp Leu Gln Gln Lys Pro Gly Gly Thr Ile Lys Arg Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Asn Arg Asp Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Ser Phe Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro
65 70 75 80
Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Val Gln Tyr Ala Ser Tyr Pro Trp
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Ala Lys Leu Glu Ile Lys Arg Asn Asp Ala Gln
100 105 110
Pro Ala Val Tyr Leu Phe Gln Pro Ser Pro Asp Gln Leu His Thr Gly
115 120 125
Ser Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Ser Phe Tyr Pro Lys Asp Ile
130 135 140
Asn Val Lys Trp Lys Val Asp Gly Val Ile Gln Asp Thr Gly Ile Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser
165 170 175
Thr Leu Thr Met Ser Ser Thr Glu Tyr Leu Ser His Glu Leu Tyr Ser
180 185 190
Cys Glu Ile Thr His Lys Ser Leu Pro Ser Thr Leu Ile Lys Ser Phe
195 200 205
Gln Arg Ser Glu Cys Gln Arg Val Asp
210 215
<210> 74
<211> 217
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Канинизированная вариабельная LC v2 клона B и
константная область κ легкой цепи собаки
<400> 74
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser Val Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Thr Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ala Ser Gln Glu Ile Ser Gly Tyr
20 25 30
Leu Ser Trp Leu Gln Gln Lys Pro Gly Gly Thr Ile Lys Arg Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Asn Arg Asp Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Arg Ile Ser Arg Val Glu Ala
65 70 75 80
Asp Asp Thr Gly Val Tyr Tyr Cys Val Gln Tyr Ala Ser Tyr Pro Trp
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Leu Lys Arg Asn Asp Ala Gln
100 105 110
Pro Ala Val Tyr Leu Phe Gln Pro Ser Pro Asp Gln Leu His Thr Gly
115 120 125
Ser Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Ser Phe Tyr Pro Lys Asp Ile
130 135 140
Asn Val Lys Trp Lys Val Asp Gly Val Ile Gln Asp Thr Gly Ile Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser
165 170 175
Thr Leu Thr Met Ser Ser Thr Glu Tyr Leu Ser His Glu Leu Tyr Ser
180 185 190
Cys Glu Ile Thr His Lys Ser Leu Pro Ser Thr Leu Ile Lys Ser Phe
195 200 205
Gln Arg Ser Glu Cys Gln Arg Val Asp
210 215
<210> 75
<211> 451
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Канинизированная вариабельная HC v1 клона I и
вариант IgG-B C1q, CD16 собаки
<400> 75
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Asp Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Val Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Tyr Ile Asn Pro Asn Asn Asp Gly Thr Phe Tyr Asn Gly Ala Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Arg Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Phe Tyr Tyr Gly Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Thr Ala Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala
115 120 125
Pro Ser Cys Gly Ser Thr Ser Gly Ser Thr Val Ala Leu Ala Cys Leu
130 135 140
Val Ser Gly Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly
145 150 155 160
Ser Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ser Val Leu Gln Ser Ser
165 170 175
Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Met Val Thr Val Pro Ser Ser Arg Trp
180 185 190
Pro Ser Glu Thr Phe Thr Cys Asn Val Ala His Pro Ala Ser Lys Thr
195 200 205
Lys Val Asp Lys Pro Val Pro Lys Arg Glu Asn Gly Arg Val Pro Arg
210 215 220
Pro Pro Asp Cys Pro Lys Cys Pro Ala Pro Glu Pro Leu Gly Gly Pro
225 230 235 240
Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Leu Ile Ala
245 250 255
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Leu Asp Arg Glu Asp
260 265 270
Pro Glu Val Gln Ile Ser Trp Phe Val Asp Gly Lys Gln Met Gln Thr
275 280 285
Ala Lys Thr Gln Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Gly Thr Tyr Arg Val
290 295 300
Val Ser Val Leu Pro Ile Gly His Gln Asp Trp Leu Lys Gly Lys Gln
305 310 315 320
Phe Thr Cys Arg Val Asn Asn Lys Ala Leu Pro Ser Pro Ile Glu Arg
325 330 335
Thr Ile Ser Lys Ala Arg Gly Gln Ala His Gln Pro Ser Val Tyr Val
340 345 350
Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Leu Ser Lys Asn Thr Val Ser Leu Thr
355 360 365
Cys Leu Ile Lys Asp Phe Phe Pro Pro Asp Ile Asp Val Glu Trp Gln
370 375 380
Ser Asn Gly Gln Gln Glu Pro Glu Ser Lys Tyr Arg Thr Thr Pro Pro
385 390 395 400
Gln Leu Asp Glu Asp Gly Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Ser Val
405 410 415
Asp Lys Ser Arg Trp Gln Arg Gly Asp Thr Phe Ile Cys Ala Val Met
420 425 430
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Glu Ser Leu Ser His Ser
435 440 445
Pro Gly Lys
450
<210> 76
<211> 451
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Канинизированная вариабельная HC v2 клона I и
Вариант IgG-B C1q, CD16 собаки
<400> 76
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Val Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Tyr Ile Asn Pro Asn Asn Asp Gly Thr Phe Tyr Asn Gly Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Leu Thr Ala Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ala Gly Asp Ile Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Phe Tyr Tyr Gly Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Thr Ala Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala
115 120 125
Pro Ser Cys Gly Ser Thr Ser Gly Ser Thr Val Ala Leu Ala Cys Leu
130 135 140
Val Ser Gly Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly
145 150 155 160
Ser Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ser Val Leu Gln Ser Ser
165 170 175
Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Met Val Thr Val Pro Ser Ser Arg Trp
180 185 190
Pro Ser Glu Thr Phe Thr Cys Asn Val Ala His Pro Ala Ser Lys Thr
195 200 205
Lys Val Asp Lys Pro Val Pro Lys Arg Glu Asn Gly Arg Val Pro Arg
210 215 220
Pro Pro Asp Cys Pro Lys Cys Pro Ala Pro Glu Pro Leu Gly Gly Pro
225 230 235 240
Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Leu Ile Ala
245 250 255
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Leu Asp Arg Glu Asp
260 265 270
Pro Glu Val Gln Ile Ser Trp Phe Val Asp Gly Lys Gln Met Gln Thr
275 280 285
Ala Lys Thr Gln Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Gly Thr Tyr Arg Val
290 295 300
Val Ser Val Leu Pro Ile Gly His Gln Asp Trp Leu Lys Gly Lys Gln
305 310 315 320
Phe Thr Cys Arg Val Asn Asn Lys Ala Leu Pro Ser Pro Ile Glu Arg
325 330 335
Thr Ile Ser Lys Ala Arg Gly Gln Ala His Gln Pro Ser Val Tyr Val
340 345 350
Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Leu Ser Lys Asn Thr Val Ser Leu Thr
355 360 365
Cys Leu Ile Lys Asp Phe Phe Pro Pro Asp Ile Asp Val Glu Trp Gln
370 375 380
Ser Asn Gly Gln Gln Glu Pro Glu Ser Lys Tyr Arg Thr Thr Pro Pro
385 390 395 400
Gln Leu Asp Glu Asp Gly Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Ser Val
405 410 415
Asp Lys Ser Arg Trp Gln Arg Gly Asp Thr Phe Ile Cys Ala Val Met
420 425 430
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Glu Ser Leu Ser His Ser
435 440 445
Pro Gly Lys
450
<210> 77
<211> 217
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Канинизированная вариабельная LC v1 клона I и
константная область κ легкой цепи собаки
<400> 77
Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ser Leu Ser Gln Glu
1 5 10 15
Glu Lys Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Glu Ile Ser Gly Tyr
20 25 30
Leu Ser Trp Leu Gln Gln Lys Pro Gly Gly Thr Ile Lys Arg Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Asn Arg Asp Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Ser Phe Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro
65 70 75 80
Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Ala Ser Tyr Pro Trp
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Ala Lys Leu Glu Ile Lys Arg Asn Asp Ala Gln
100 105 110
Pro Ala Val Tyr Leu Phe Gln Pro Ser Pro Asp Gln Leu His Thr Gly
115 120 125
Ser Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Ser Phe Tyr Pro Lys Asp Ile
130 135 140
Asn Val Lys Trp Lys Val Asp Gly Val Ile Gln Asp Thr Gly Ile Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser
165 170 175
Thr Leu Thr Met Ser Ser Thr Glu Tyr Leu Ser His Glu Leu Tyr Ser
180 185 190
Cys Glu Ile Thr His Lys Ser Leu Pro Ser Thr Leu Ile Lys Ser Phe
195 200 205
Gln Arg Ser Glu Cys Gln Arg Val Asp
210 215
<210> 78
<211> 217
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Канинизированная вариабельная LC v2 клона I и
константная область κ легкой цепи собаки
<400> 78
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser Val Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Thr Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ala Ser Gln Glu Ile Ser Gly Tyr
20 25 30
Leu Ser Trp Leu Gln Gln Lys Pro Gly Gly Thr Ile Lys Arg Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Asn Arg Asp Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Arg Ile Ser Arg Val Glu Ala
65 70 75 80
Asp Asp Thr Gly Val Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Ala Ser Tyr Pro Trp
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Leu Lys Arg Asn Asp Ala Gln
100 105 110
Pro Ala Val Tyr Leu Phe Gln Pro Ser Pro Asp Gln Leu His Thr Gly
115 120 125
Ser Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Ser Phe Tyr Pro Lys Asp Ile
130 135 140
Asn Val Lys Trp Lys Val Asp Gly Val Ile Gln Asp Thr Gly Ile Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser
165 170 175
Thr Leu Thr Met Ser Ser Thr Glu Tyr Leu Ser His Glu Leu Tyr Ser
180 185 190
Cys Glu Ile Thr His Lys Ser Leu Pro Ser Thr Leu Ile Lys Ser Phe
195 200 205
Gln Arg Ser Glu Cys Gln Arg Val Asp
210 215
<210> 79
<211> 451
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Фелинизированная вариабельная HC клона B и
вариант IgG2 кошки с Cys модификацией в шарнирной области
<400> 79
Gln Val Leu Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Arg Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Ile Phe Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Val Met His Trp Leu Arg Gln Ala Pro Ala Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Tyr Ile Asn Pro Lys Asn Asp Gly Thr Phe Tyr Asn Gly Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Leu Thr Leu Thr Ala Asp Thr Ser Thr Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Phe Asn Tyr Gly Ile Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Thr Ala Ser Ser Val Phe Pro Leu Ala
115 120 125
Pro Ser Cys Gly Thr Thr Ser Gly Ala Thr Val Ala Leu Ala Cys Leu
130 135 140
Val Leu Gly Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly
145 150 155 160
Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ser Val Leu Gln Ala Ser
165 170 175
Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Met Val Thr Val Pro Ser Ser Arg Trp
180 185 190
Leu Ser Asp Thr Phe Thr Cys Asn Val Ala His Arg Pro Ser Ser Thr
195 200 205
Lys Val Asp Lys Thr Val Pro Lys Thr Ala Ser Thr Ile Glu Ser Lys
210 215 220
Thr Gly Glu Cys Pro Lys Cys Pro Val Pro Glu Ile Pro Gly Ala Pro
225 230 235 240
Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Ser Ile Ser
245 250 255
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Leu Val Val Asp Leu Gly Pro Asp Asp
260 265 270
Ser Asn Val Gln Ile Thr Trp Phe Val Asp Asn Thr Glu Met His Thr
275 280 285
Ala Lys Thr Arg Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val
290 295 300
Val Ser Val Leu Pro Ile Leu His Gln Asp Trp Leu Lys Gly Lys Glu
305 310 315 320
Phe Lys Cys Lys Val Asn Ser Lys Ser Leu Pro Ser Ala Met Glu Arg
325 330 335
Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro His Glu Pro Gln Val Tyr Val
340 345 350
Leu Pro Pro Thr Gln Glu Glu Leu Ser Glu Asn Lys Val Ser Val Thr
355 360 365
Cys Leu Ile Lys Gly Phe His Pro Pro Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu
370 375 380
Ile Thr Gly Gln Pro Glu Pro Glu Asn Asn Tyr Gln Thr Thr Pro Pro
385 390 395 400
Gln Leu Asp Ser Asp Gly Thr Tyr Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Ser Val
405 410 415
Asp Arg Ser His Trp Gln Arg Gly Asn Thr Tyr Thr Cys Ser Val Ser
420 425 430
His Glu Ala Leu His Ser His His Thr Gln Lys Ser Leu Thr Gln Ser
435 440 445
Pro Gly Lys
450
<210> 80
<211> 451
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Фелинизированная вариабельная HC клона B и
вариант IgG2 кошки с IgG1 шарнирной областью кошки
<400> 80
Gln Val Leu Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Arg Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Ile Phe Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Val Met His Trp Leu Arg Gln Ala Pro Ala Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Tyr Ile Asn Pro Lys Asn Asp Gly Thr Phe Tyr Asn Gly Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Leu Thr Leu Thr Ala Asp Thr Ser Thr Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Phe Asn Tyr Gly Ile Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Thr Ala Ser Ser Val Phe Pro Leu Ala
115 120 125
Pro Ser Cys Gly Thr Thr Ser Gly Ala Thr Val Ala Leu Ala Cys Leu
130 135 140
Val Leu Gly Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly
145 150 155 160
Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ser Val Leu Gln Ala Ser
165 170 175
Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Met Val Thr Val Pro Ser Ser Arg Trp
180 185 190
Leu Ser Asp Thr Phe Thr Cys Asn Val Ala His Arg Pro Ser Ser Thr
195 200 205
Lys Val Asp Lys Thr Val Arg Lys Thr Asp His Pro Pro Gly Pro Lys
210 215 220
Pro Cys Asp Cys Pro Lys Cys Pro Pro Pro Glu Met Leu Gly Gly Pro
225 230 235 240
Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Ser Ile Ser
245 250 255
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Leu Val Val Asp Leu Gly Pro Asp Asp
260 265 270
Ser Asn Val Gln Ile Thr Trp Phe Val Asp Asn Thr Glu Met His Thr
275 280 285
Ala Lys Thr Arg Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val
290 295 300
Val Ser Val Leu Pro Ile Leu His Gln Asp Trp Leu Lys Gly Lys Glu
305 310 315 320
Phe Lys Cys Lys Val Asn Ser Lys Ser Leu Pro Ser Ala Met Glu Arg
325 330 335
Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro His Glu Pro Gln Val Tyr Val
340 345 350
Leu Pro Pro Thr Gln Glu Glu Leu Ser Glu Asn Lys Val Ser Val Thr
355 360 365
Cys Leu Ile Lys Gly Phe His Pro Pro Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu
370 375 380
Ile Thr Gly Gln Pro Glu Pro Glu Asn Asn Tyr Gln Thr Thr Pro Pro
385 390 395 400
Gln Leu Asp Ser Asp Gly Thr Tyr Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Ser Val
405 410 415
Asp Arg Ser His Trp Gln Arg Gly Asn Thr Tyr Thr Cys Ser Val Ser
420 425 430
His Glu Ala Leu His Ser His His Thr Gln Lys Ser Leu Thr Gln Ser
435 440 445
Pro Gly Lys
450
<210> 81
<211> 217
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Фелинизированная вариабельная LC клона B и
константная область κ легкой цепи кошки
<400> 81
Asp Ile Thr Met Thr Gln Ser Pro Gly Ser Leu Ala Gly Ser Pro Gly
1 5 10 15
Gln Gln Val Thr Met Asn Cys Arg Ala Ser Gln Glu Ile Ser Gly Tyr
20 25 30
Leu Ser Trp Leu Gln Gln Lys Pro Gly Gly Thr Ile Lys Arg Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Thr Leu Asp Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Asn Leu Gln Ala
65 70 75 80
Glu Asp Val Ala Ser Tyr Tyr Cys Val Gln Tyr Ala Ser Tyr Pro Trp
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Ser Asp Ala Gln
100 105 110
Pro Ser Val Phe Leu Phe Gln Pro Ser Leu Asp Glu Leu His Thr Gly
115 120 125
Ser Ala Ser Ile Val Cys Ile Leu Asn Asp Phe Tyr Pro Lys Glu Val
130 135 140
Asn Val Lys Trp Lys Val Asp Gly Val Val Gln Asn Lys Gly Ile Gln
145 150 155 160
Glu Ser Thr Thr Glu Gln Asn Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Met Ser Ser Thr Glu Tyr Gln Ser His Glu Lys Phe
180 185 190
Ser Cys Glu Val Thr His Lys Ser Leu Ala Ser Thr Leu Val Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Ser Glu Cys Gln Arg Glu
210 215
<210> 82
<211> 451
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Фелинизированная вариабельная HC клона I и
вариант IgG2 кошки с Cys модификацией в шарнирной области
<400> 82
Gln Val Leu Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Arg Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Ile Phe Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Val Met His Trp Leu Arg Gln Ala Pro Ala Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Tyr Ile Asn Pro Asn Asn Asp Gly Thr Phe Tyr Asn Gly Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Leu Thr Leu Thr Ala Asp Thr Ser Thr Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Phe Tyr Tyr Gly Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Thr Ala Ser Ser Val Phe Pro Leu Ala
115 120 125
Pro Ser Cys Gly Thr Thr Ser Gly Ala Thr Val Ala Leu Ala Cys Leu
130 135 140
Val Leu Gly Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly
145 150 155 160
Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ser Val Leu Gln Ala Ser
165 170 175
Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Met Val Thr Val Pro Ser Ser Arg Trp
180 185 190
Leu Ser Asp Thr Phe Thr Cys Asn Val Ala His Arg Pro Ser Ser Thr
195 200 205
Lys Val Asp Lys Thr Val Pro Lys Thr Ala Ser Thr Ile Glu Ser Lys
210 215 220
Thr Gly Glu Cys Pro Lys Cys Pro Val Pro Glu Ile Pro Gly Ala Pro
225 230 235 240
Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Ser Ile Ser
245 250 255
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Leu Val Val Asp Leu Gly Pro Asp Asp
260 265 270
Ser Asn Val Gln Ile Thr Trp Phe Val Asp Asn Thr Glu Met His Thr
275 280 285
Ala Lys Thr Arg Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val
290 295 300
Val Ser Val Leu Pro Ile Leu His Gln Asp Trp Leu Lys Gly Lys Glu
305 310 315 320
Phe Lys Cys Lys Val Asn Ser Lys Ser Leu Pro Ser Ala Met Glu Arg
325 330 335
Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro His Glu Pro Gln Val Tyr Val
340 345 350
Leu Pro Pro Thr Gln Glu Glu Leu Ser Glu Asn Lys Val Ser Val Thr
355 360 365
Cys Leu Ile Lys Gly Phe His Pro Pro Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu
370 375 380
Ile Thr Gly Gln Pro Glu Pro Glu Asn Asn Tyr Gln Thr Thr Pro Pro
385 390 395 400
Gln Leu Asp Ser Asp Gly Thr Tyr Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Ser Val
405 410 415
Asp Arg Ser His Trp Gln Arg Gly Asn Thr Tyr Thr Cys Ser Val Ser
420 425 430
His Glu Ala Leu His Ser His His Thr Gln Lys Ser Leu Thr Gln Ser
435 440 445
Pro Gly Lys
450
<210> 83
<211> 451
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Фелинизированная вариабельная HC клона I и
вариант IgG2 кошки с IgG1 шарнирной областью кошки
<400> 83
Gln Val Leu Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Arg Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Ile Phe Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Val Met His Trp Leu Arg Gln Ala Pro Ala Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Tyr Ile Asn Pro Asn Asn Asp Gly Thr Phe Tyr Asn Gly Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Leu Thr Leu Thr Ala Asp Thr Ser Thr Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Phe Tyr Tyr Gly Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Thr Ala Ser Ser Val Phe Pro Leu Ala
115 120 125
Pro Ser Cys Gly Thr Thr Ser Gly Ala Thr Val Ala Leu Ala Cys Leu
130 135 140
Val Leu Gly Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly
145 150 155 160
Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ser Val Leu Gln Ala Ser
165 170 175
Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Met Val Thr Val Pro Ser Ser Arg Trp
180 185 190
Leu Ser Asp Thr Phe Thr Cys Asn Val Ala His Arg Pro Ser Ser Thr
195 200 205
Lys Val Asp Lys Thr Val Arg Lys Thr Asp His Pro Pro Gly Pro Lys
210 215 220
Pro Cys Asp Cys Pro Lys Cys Pro Pro Pro Glu Met Leu Gly Gly Pro
225 230 235 240
Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Ser Ile Ser
245 250 255
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Leu Val Val Asp Leu Gly Pro Asp Asp
260 265 270
Ser Asn Val Gln Ile Thr Trp Phe Val Asp Asn Thr Glu Met His Thr
275 280 285
Ala Lys Thr Arg Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val
290 295 300
Val Ser Val Leu Pro Ile Leu His Gln Asp Trp Leu Lys Gly Lys Glu
305 310 315 320
Phe Lys Cys Lys Val Asn Ser Lys Ser Leu Pro Ser Ala Met Glu Arg
325 330 335
Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro His Glu Pro Gln Val Tyr Val
340 345 350
Leu Pro Pro Thr Gln Glu Glu Leu Ser Glu Asn Lys Val Ser Val Thr
355 360 365
Cys Leu Ile Lys Gly Phe His Pro Pro Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu
370 375 380
Ile Thr Gly Gln Pro Glu Pro Glu Asn Asn Tyr Gln Thr Thr Pro Pro
385 390 395 400
Gln Leu Asp Ser Asp Gly Thr Tyr Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Ser Val
405 410 415
Asp Arg Ser His Trp Gln Arg Gly Asn Thr Tyr Thr Cys Ser Val Ser
420 425 430
His Glu Ala Leu His Ser His His Thr Gln Lys Ser Leu Thr Gln Ser
435 440 445
Pro Gly Lys
450
<210> 84
<211> 217
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Фелинизированная вариабельная LC клона I и
константная область κ легкой цепи кошки
<400> 84
Asp Ile Thr Met Thr Gln Ser Pro Gly Ser Leu Ala Gly Ser Pro Gly
1 5 10 15
Gln Gln Val Thr Met Asn Cys Arg Ala Ser Gln Glu Ile Ser Gly Tyr
20 25 30
Leu Ser Trp Leu Gln Gln Lys Pro Gly Gly Thr Ile Lys Arg Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Thr Leu Asp Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Asn Leu Gln Ala
65 70 75 80
Glu Asp Val Ala Ser Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Ala Ser Tyr Pro Trp
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Ser Asp Ala Gln
100 105 110
Pro Ser Val Phe Leu Phe Gln Pro Ser Leu Asp Glu Leu His Thr Gly
115 120 125
Ser Ala Ser Ile Val Cys Ile Leu Asn Asp Phe Tyr Pro Lys Glu Val
130 135 140
Asn Val Lys Trp Lys Val Asp Gly Val Val Gln Asn Lys Gly Ile Gln
145 150 155 160
Glu Ser Thr Thr Glu Gln Asn Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Met Ser Ser Thr Glu Tyr Gln Ser His Glu Lys Phe
180 185 190
Ser Cys Glu Val Thr His Lys Ser Leu Ala Ser Thr Leu Val Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Ser Glu Cys Gln Arg Glu
210 215
<210> 85
<211> 10
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: эпитоп 1 IL4R (минимальная последовательность)
<220>
<221> misc_feature
<222> (2)..(2)
<223> X представляет собой D или N
<220>
<221> misc_feature
<222> (9)..(9)
<223> X представляет собой H или R
<400> 85
Leu Xaa Phe Met Gly Ser Glu Asn Xaa Thr
1 5 10
<210> 86
<211> 20
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: эпитоп 1 IL4R (расширенная последовательность)
<220>
<221> misc_feature
<222> (7)..(7)
<223> X представляет собой D или N
<220>
<221> misc_feature
<222> (14)..(14)
<223> X представляет собой H или R
<400> 86
Arg Leu Ser Tyr Gln Leu Xaa Phe Met Gly Ser Glu Asn Xaa Thr Cys
1 5 10 15
Val Pro Glu Asn
20
<210> 87
<211> 22
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: эпитоп 2 IL4R
<220>
<221> misc_feature
<222> (3)..(3)
<223> X представляет собой P или L
<220>
<221> misc_feature
<222> (4)..(4)
<223> X представляет собой I или M
<220>
<221> misc_feature
<222> (7)..(7)
<223> X представляет собой A или F
<220>
<221> misc_feature
<222> (16)..(16)
<223> X представляет собой D или H
<220>
<221> misc_feature
<222> (21)..(21)
<223> X представляет собой Q или T
<400> 87
Ser Met Xaa Xaa Asp Asp Xaa Val Glu Ala Asp Val Tyr Gln Leu Xaa
1 5 10 15
Leu Trp Ala Gly Xaa Gln
20
<210> 88
<211> 10
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: эпитоп 1 IL4R собаки (минимальная последовательность)
<400> 88
Leu Asp Phe Met Gly Ser Glu Asn His Thr
1 5 10
<210> 89
<211> 20
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: эпитоп 1 IL4R собаки (расширенная
последовательность)
<400> 89
Arg Leu Ser Tyr Gln Leu Asp Phe Met Gly Ser Glu Asn His Thr Cys
1 5 10 15
Val Pro Glu Asn
20
<210> 90
<211> 22
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: эпитоп 2 IL4R собаки
<400> 90
Ser Met Pro Ile Asp Asp Ala Val Glu Ala Asp Val Tyr Gln Leu Asp
1 5 10 15
Leu Trp Ala Gly Gln Gln
20
<210> 91
<211> 10
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: эпитоп 1 IL4R кошки (минимальная
последовательность)
<400> 91
Leu Asn Phe Met Gly Ser Glu Asn Arg Thr
1 5 10
<210> 92
<211> 20
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: эпитоп 1 IL4R кошки (расширенная
последовательность)
<400> 92
Arg Leu Ser Tyr Gln Leu Asn Phe Met Gly Ser Glu Asn Arg Thr Cys
1 5 10 15
Val Pro Glu Asn
20
<210> 93
<211> 22
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: эпитоп 2 IL4R кошки
<400> 93
Ser Met Leu Met Asp Asp Phe Val Glu Ala Asp Val Tyr Gln Leu His
1 5 10 15
Leu Trp Ala Gly Thr Gln
20
<210> 94
<211> 823
<212> Белок
<213> Canis lupus familiaris
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(823)
<223> IL4R собаки
<400> 94
Met Gly Arg Leu Cys Ser Gly Leu Thr Phe Pro Val Ser Cys Leu Val
1 5 10 15
Leu Val Trp Val Ala Ser Ser Gly Ser Val Lys Val Leu His Glu Pro
20 25 30
Ser Cys Phe Ser Asp Tyr Ile Ser Thr Ser Val Cys Gln Trp Lys Met
35 40 45
Asp His Pro Thr Asn Cys Ser Ala Glu Leu Arg Leu Ser Tyr Gln Leu
50 55 60
Asp Phe Met Gly Ser Glu Asn His Thr Cys Val Pro Glu Asn Arg Glu
65 70 75 80
Asp Ser Val Cys Val Cys Ser Met Pro Ile Asp Asp Ala Val Glu Ala
85 90 95
Asp Val Tyr Gln Leu Asp Leu Trp Ala Gly Gln Gln Leu Leu Trp Ser
100 105 110
Gly Ser Phe Gln Pro Ser Lys His Val Lys Pro Arg Thr Pro Gly Asn
115 120 125
Leu Thr Val His Pro Asn Ile Ser His Thr Trp Leu Leu Met Trp Thr
130 135 140
Asn Pro Tyr Pro Thr Glu Asn His Leu His Ser Glu Leu Thr Tyr Met
145 150 155 160
Val Asn Val Ser Asn Asp Asn Asp Pro Glu Asp Phe Lys Val Tyr Asn
165 170 175
Val Thr Tyr Met Gly Pro Thr Leu Arg Leu Ala Ala Ser Thr Leu Lys
180 185 190
Ser Gly Ala Ser Tyr Ser Ala Arg Val Arg Ala Trp Ala Gln Thr Tyr
195 200 205
Asn Ser Thr Trp Ser Asp Trp Ser Pro Ser Thr Thr Trp Leu Asn Tyr
210 215 220
Tyr Glu Pro Trp Glu Gln His Leu Pro Leu Gly Val Ser Ile Ser Cys
225 230 235 240
Leu Val Ile Leu Ala Ile Cys Leu Ser Cys Tyr Phe Ser Ile Ile Lys
245 250 255
Ile Lys Lys Gly Trp Trp Asp Gln Ile Pro Asn Pro Ala His Ser Pro
260 265 270
Leu Val Ala Ile Val Ile Gln Asp Ser Gln Val Ser Leu Trp Gly Lys
275 280 285
Arg Ser Arg Gly Gln Glu Pro Ala Lys Cys Pro His Trp Lys Thr Cys
290 295 300
Leu Thr Lys Leu Leu Pro Cys Leu Leu Glu His Gly Leu Gly Arg Glu
305 310 315 320
Glu Glu Ser Pro Lys Thr Ala Lys Asn Gly Pro Leu Gln Gly Pro Gly
325 330 335
Lys Pro Ala Trp Cys Pro Val Glu Val Ser Lys Thr Ile Leu Trp Pro
340 345 350
Glu Ser Ile Ser Val Val Gln Cys Val Glu Leu Ser Glu Ala Pro Val
355 360 365
Asp Asn Glu Glu Glu Glu Glu Val Glu Glu Asp Lys Arg Ser Leu Cys
370 375 380
Pro Ser Leu Glu Gly Ser Gly Gly Ser Phe Gln Glu Gly Arg Glu Gly
385 390 395 400
Ile Val Ala Arg Leu Thr Glu Ser Leu Phe Leu Asp Leu Leu Gly Gly
405 410 415
Glu Asn Gly Gly Phe Cys Pro Gln Gly Leu Glu Glu Ser Cys Leu Pro
420 425 430
Pro Pro Ser Gly Ser Val Gly Ala Gln Met Pro Trp Ala Gln Phe Pro
435 440 445
Arg Ala Gly Pro Arg Ala Ala Pro Glu Gly Pro Glu Gln Pro Arg Arg
450 455 460
Pro Glu Ser Ala Leu Gln Ala Ser Pro Thr Gln Ser Ala Gly Ser Ser
465 470 475 480
Ala Phe Pro Glu Pro Pro Pro Val Val Thr Asp Asn Pro Ala Tyr Arg
485 490 495
Ser Phe Gly Ser Phe Leu Gly Gln Ser Ser Asp Pro Gly Asp Gly Asp
500 505 510
Ser Asp Pro Glu Leu Ala Asp Arg Pro Gly Glu Ala Asp Pro Gly Ile
515 520 525
Pro Ser Ala Pro Gln Pro Pro Glu Pro Pro Ala Ala Leu Gln Pro Glu
530 535 540
Pro Glu Ser Trp Glu Gln Ile Leu Arg Gln Ser Val Leu Gln His Arg
545 550 555 560
Ala Ala Pro Ala Pro Gly Pro Gly Pro Gly Ser Gly Tyr Arg Glu Phe
565 570 575
Thr Cys Ala Val Lys Gln Gly Ser Ala Pro Asp Ala Gly Gly Pro Gly
580 585 590
Phe Gly Pro Ser Gly Glu Ala Gly Tyr Lys Ala Phe Cys Ser Leu Leu
595 600 605
Pro Gly Gly Ala Thr Cys Pro Gly Thr Ser Gly Gly Glu Ala Gly Ser
610 615 620
Gly Glu Gly Gly Tyr Lys Pro Phe Gln Ser Leu Thr Pro Gly Cys Pro
625 630 635 640
Gly Ala Pro Thr Pro Val Pro Val Pro Leu Phe Thr Phe Gly Leu Asp
645 650 655
Thr Glu Pro Pro Gly Ser Pro Gln Asp Ser Leu Gly Ala Gly Ser Ser
660 665 670
Pro Glu His Leu Gly Val Glu Pro Ala Gly Lys Glu Glu Asp Ser Arg
675 680 685
Lys Thr Leu Leu Ala Pro Glu Gln Ala Thr Asp Pro Leu Arg Asp Asp
690 695 700
Leu Ala Ser Ser Ile Val Tyr Ser Ala Leu Thr Cys His Leu Cys Gly
705 710 715 720
His Leu Lys Gln Trp His Asp Gln Glu Glu Arg Gly Lys Ala His Ile
725 730 735
Val Pro Ser Pro Cys Cys Gly Cys Cys Cys Gly Asp Arg Ser Ser Leu
740 745 750
Leu Leu Ser Pro Leu Arg Ala Pro Asn Val Leu Pro Gly Gly Val Leu
755 760 765
Leu Glu Ala Ser Leu Ser Pro Ala Ser Leu Val Pro Ser Gly Val Ser
770 775 780
Lys Glu Gly Lys Ser Ser Pro Phe Ser Gln Pro Ala Ser Ser Ser Ala
785 790 795 800
Gln Ser Ser Ser Gln Thr Pro Lys Lys Leu Ala Val Leu Ser Thr Glu
805 810 815
Pro Thr Cys Met Ser Ala Ser
820
<210> 95
<211> 818
<212> Белок
<213> Felis catus
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(818)
<223> IL4R кошки
<400> 95
Met Gly Arg Leu Cys Ser Gly Leu Thr Phe Pro Val Ser Cys Leu Ile
1 5 10 15
Leu Met Trp Ala Ala Gly Ser Gly Ser Val Lys Val Leu Arg Ala Pro
20 25 30
Thr Cys Phe Ser Asp Tyr Phe Ser Thr Ser Val Cys Gln Trp Asn Met
35 40 45
Asp Ala Pro Thr Asn Cys Ser Ala Glu Leu Arg Leu Ser Tyr Gln Leu
50 55 60
Asn Phe Met Gly Ser Glu Asn Arg Thr Cys Val Pro Glu Asn Gly Glu
65 70 75 80
Gly Ala Ala Cys Ala Cys Ser Met Leu Met Asp Asp Phe Val Glu Ala
85 90 95
Asp Val Tyr Gln Leu His Leu Trp Ala Gly Thr Gln Leu Leu Trp Ser
100 105 110
Gly Ser Phe Lys Pro Ser Ser His Val Lys Pro Arg Ala Pro Gly Asn
115 120 125
Leu Thr Val His Pro Asn Val Ser His Thr Trp Leu Leu Arg Trp Ser
130 135 140
Asn Pro Tyr Pro Pro Glu Asn His Leu His Ala Glu Leu Thr Tyr Met
145 150 155 160
Val Asn Ile Ser Ser Glu Asp Asp Pro Thr Asp Ser Arg Ile Tyr Asn
165 170 175
Val Thr Tyr Met Gly Pro Thr Leu Arg Val Ala Ala Ser Thr Leu Thr
180 185 190
Ser Gly Ala Ser Tyr Ser Ala Arg Val Arg Ala Trp Ala Gln Ser Tyr
195 200 205
Asn Ser Thr Trp Ser Glu Trp Ser Pro Ser Thr Lys Trp Leu Asn His
210 215 220
Tyr Glu Pro Trp Glu Gln His Leu Pro Leu Gly Val Ser Ile Ser Cys
225 230 235 240
Leu Val Ile Leu Ala Val Cys Leu Ser Cys Tyr Leu Ser Val Ile Lys
245 250 255
Ile Lys Lys Glu Trp Trp Asp Gln Ile Pro Asn Pro Ala His Ser His
260 265 270
Leu Val Ala Ile Val Ile Gln Asp Pro Gln Val Ser Leu Trp Gly Lys
275 280 285
Arg Ser Arg Gly Gln Glu Pro Ala Lys Cys Ser His Trp Lys Thr Cys
290 295 300
Leu Arg Lys Leu Leu Pro Cys Leu Leu Glu His Gly Met Glu Arg Lys
305 310 315 320
Glu Asp Pro Ser Lys Ile Ala Arg Asn Gly Pro Ser Gln Gly Ser Gly
325 330 335
Lys Ser Ala Trp Cys Pro Val Glu Val Ser Lys Thr Ile Leu Trp Pro
340 345 350
Glu Ser Ile Ser Val Val Arg Cys Val Glu Leu Leu Glu Ala Pro Val
355 360 365
Glu Ser Glu Glu Glu Glu Glu Glu Glu Glu Glu Asp Lys Gly Ser Phe
370 375 380
Cys Pro Ser Pro Val Asn Leu Glu Asp Ser Phe Gln Glu Gly Arg Glu
385 390 395 400
Gly Ile Ala Ala Arg Leu Thr Glu Ser Leu Phe Met Asp Leu Leu Gly
405 410 415
Val Glu Lys Gly Gly Phe Gly Pro Gln Gly Ser Leu Glu Ser Trp Phe
420 425 430
Pro Pro Pro Ser Gly Ser Ala Gly Ala Gln Met Pro Trp Ala Glu Phe
435 440 445
Pro Gly Pro Gly Pro Gln Glu Ala Ser Pro Gln Gly Lys Glu Gln Pro
450 455 460
Phe Asp Pro Arg Ser Asp Pro Leu Ala Thr Leu Pro Gln Ser Pro Ala
465 470 475 480
Ser Pro Thr Phe Pro Glu Thr Pro Pro Val Val Thr Asp Asn Pro Ala
485 490 495
Tyr Arg Ser Phe Gly Thr Phe Gln Gly Arg Ser Ser Gly Pro Gly Glu
500 505 510
Cys Asp Ser Gly Pro Glu Leu Ala Gly Arg Leu Gly Glu Ala Asp Pro
515 520 525
Gly Ile Pro Ala Ala Pro Gln Pro Ser Glu Pro Pro Ser Ala Leu Gln
530 535 540
Pro Glu Ala Glu Thr Trp Glu Gln Ile Leu Arg Gln Arg Val Leu Gln
545 550 555 560
His Arg Gly Ala Pro Ala Pro Ala Pro Gly Ser Gly Tyr Arg Glu Phe
565 570 575
Val Cys Ala Val Arg Gln Gly Ser Thr Gln Asp Ser Arg Val Gly Asp
580 585 590
Phe Gly Pro Ser Glu Glu Ala Gly Tyr Lys Ala Phe Ser Ser Leu Leu
595 600 605
Thr Ser Gly Ala Val Cys Pro Glu Thr Ser Gly Gly Glu Ala Gly Ser
610 615 620
Gly Asp Gly Gly Tyr Lys Pro Phe Gln Ser Leu Thr Pro Gly Cys Pro
625 630 635 640
Gly Ala Pro Ala Pro Val Pro Val Pro Leu Phe Thr Phe Gly Leu Asp
645 650 655
Ala Glu Pro Pro His Cys Pro Gln Asp Ser Pro Leu Pro Gly Ser Ser
660 665 670
Pro Glu Pro Ala Gly Lys Ala Gln Asp Ser His Lys Thr Pro Pro Ala
675 680 685
Pro Glu Gln Ala Ala Asp Pro Leu Arg Asp Asp Leu Ala Ser Gly Ile
690 695 700
Val Tyr Ser Ala Leu Thr Cys His Leu Cys Gly His Leu Lys Gln Cys
705 710 715 720
His Gly Gln Glu Glu Gly Gly Glu Ala His Pro Val Ala Ser Pro Cys
725 730 735
Cys Gly Cys Cys Cys Gly Asp Arg Ser Ser Pro Leu Val Ser Pro Leu
740 745 750
Arg Ala Pro Asp Pro Leu Pro Gly Gly Val Pro Leu Glu Ala Ser Leu
755 760 765
Ser Pro Ala Ser Pro Ala Pro Leu Ala Val Ser Glu Glu Gly Pro Pro
770 775 780
Ser Leu Cys Phe Gln Pro Ala Leu Ser His Ala His Ser Ser Ser Gln
785 790 795 800
Thr Pro Lys Lys Val Ala Met Leu Ser Pro Glu Pro Thr Cys Thr Met
805 810 815
Ala Ser
<210> 96
<211> 809
<212> Белок
<213> Equus caballus
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(809)
<223> IL4R лошади
<400> 96
Met Gly Cys Leu Cys Pro Gly Leu Thr Leu Pro Val Ser Cys Leu Ile
1 5 10 15
Leu Val Trp Ala Ala Gly Ser Gly Ser Val Lys Val Leu Arg Leu Thr
20 25 30
Ala Cys Phe Ser Asp Tyr Ile Ser Ala Ser Thr Cys Glu Trp Lys Met
35 40 45
Asp Arg Pro Thr Asn Cys Ser Ala Gln Leu Arg Leu Ser Tyr Gln Leu
50 55 60
Asn Asp Glu Phe Ser Asp Asn Leu Thr Cys Ile Pro Glu Asn Arg Glu
65 70 75 80
Asp Glu Val Cys Val Cys Arg Met Leu Met Asp Asn Ile Val Ser Glu
85 90 95
Asp Val Tyr Glu Leu Asp Leu Trp Ala Gly Asn Gln Leu Leu Trp Asn
100 105 110
Ser Ser Phe Lys Pro Ser Arg His Val Lys Pro Arg Ala Pro Gln Asn
115 120 125
Leu Thr Val His Ala Ile Ser His Thr Trp Leu Leu Thr Trp Ser Asn
130 135 140
Pro Tyr Pro Leu Lys Asn His Leu Trp Ser Glu Leu Thr Tyr Leu Val
145 150 155 160
Asn Ile Ser Lys Glu Asp Asp Pro Thr Asp Phe Lys Ile Tyr Asn Val
165 170 175
Thr Tyr Met Asp Pro Thr Leu Arg Val Thr Ala Ser Thr Leu Lys Ser
180 185 190
Arg Ala Thr Tyr Ser Ala Arg Val Lys Ala Arg Ala Gln Asn Tyr Asn
195 200 205
Ser Thr Trp Ser Glu Trp Ser Pro Ser Thr Thr Trp His Asn Tyr Tyr
210 215 220
Glu Gln Pro Leu Glu Gln Arg Leu Pro Leu Gly Val Ser Ile Ser Cys
225 230 235 240
Val Val Ile Leu Ala Ile Cys Leu Ser Cys Tyr Phe Ser Ile Ile Lys
245 250 255
Ile Lys Lys Glu Trp Trp Asp Gln Ile Pro Asn Pro Ala His Ser Pro
260 265 270
Leu Val Ala Ile Val Leu Gln Asp Ser Gln Val Ser Leu Trp Gly Lys
275 280 285
Gln Ser Arg Gly Gln Glu Pro Ala Lys Cys Pro Arg Trp Lys Thr Cys
290 295 300
Leu Thr Lys Leu Leu Pro Cys Leu Leu Glu His Gly Leu Gln Lys Glu
305 310 315 320
Glu Asp Ser Ser Lys Thr Val Arg Asn Gly Pro Phe Gln Ser Pro Gly
325 330 335
Lys Ser Ala Trp His Thr Val Glu Val Asn His Thr Ile Leu Arg Pro
340 345 350
Glu Ile Ile Ser Val Val Pro Cys Val Glu Leu Cys Glu Ala Gln Val
355 360 365
Glu Ser Glu Glu Glu Glu Val Glu Glu Asp Arg Gly Ser Phe Cys Pro
370 375 380
Ser Pro Glu Ser Ser Gly Ser Gly Phe Gln Glu Gly Arg Glu Gly Val
385 390 395 400
Ala Ala Arg Leu Thr Glu Ser Leu Phe Leu Gly Leu Leu Gly Ala Glu
405 410 415
Asn Gly Ala Leu Gly Glu Ser Cys Leu Leu Pro Pro Leu Gly Ser Ala
420 425 430
His Met Pro Trp Ala Arg Ile Ser Ser Ala Gly Pro Gln Glu Ala Ala
435 440 445
Ser Gln Gly Glu Glu Gln Pro Leu Asn Pro Glu Ser Asn Pro Leu Ala
450 455 460
Thr Leu Thr Gln Ser Pro Gly Ser Leu Ala Phe Thr Glu Ala Pro Ala
465 470 475 480
Val Val Ala Asp Asn Pro Ala Tyr Arg Ser Phe Ser Asn Ser Leu Ser
485 490 495
Gln Pro Arg Gly Pro Gly Glu Leu Asp Ser Asp Pro Gln Leu Ala Glu
500 505 510
His Leu Gly Gln Val Asp Pro Ser Ile Pro Ser Ala Pro Gln Pro Ser
515 520 525
Glu Pro Pro Thr Ala Leu Gln Pro Glu Pro Glu Thr Trp Glu Gln Met
530 535 540
Leu Arg Gln Ser Val Leu Gln Gln Gly Ala Ala Pro Ala Pro Ala Ser
545 550 555 560
Ala Pro Thr Gly Gly Tyr Arg Glu Phe Ala Gln Val Val Lys Gln Gly
565 570 575
Gly Gly Ala Ala Gly Ser Gly Pro Ser Gly Glu Ala Gly Tyr Lys Ala
580 585 590
Phe Ser Ser Leu Leu Ala Gly Ser Ala Val Cys Pro Gly Gln Ser Gly
595 600 605
Val Glu Ala Ser Ser Gly Glu Gly Gly Tyr Arg Pro Tyr Glu Ser Pro
610 615 620
Asp Pro Gly Ala Pro Ala Pro Val Pro Val Pro Leu Phe Thr Phe Gly
625 630 635 640
Leu Asp Val Glu Pro Pro His Ser Pro Gln Asn Ser Leu Leu Pro Gly
645 650 655
Gly Ser Pro Glu Leu Pro Gly Pro Glu Pro Thr Val Lys Gly Glu Asp
660 665 670
Pro Arg Lys Pro Leu Leu Ser Ala Gln Gln Ala Thr Asp Ser Leu Arg
675 680 685
Asp Asp Leu Gly Ser Gly Ile Val Tyr Ser Ala Leu Thr Cys His Leu
690 695 700
Cys Gly His Leu Lys Gln Cys His Gly Gln Glu Glu His Gly Glu Ala
705 710 715 720
His Thr Val Ala Ser Pro Cys Cys Gly Cys Cys Cys Gly Asp Arg Ser
725 730 735
Ser Pro Pro Val Ser Pro Val Arg Ala Leu Asp Pro Pro Pro Gly Gly
740 745 750
Val Pro Leu Glu Ala Gly Leu Ser Leu Ala Ser Leu Gly Ser Leu Gly
755 760 765
Leu Ser Glu Glu Arg Lys Pro Ser Leu Phe Phe Gln Pro Ala Pro Gly
770 775 780
Asn Ala Gln Ser Ser Ser Gln Thr Pro Leu Thr Val Ala Met Leu Ser
785 790 795 800
Thr Gly Pro Thr Cys Thr Ser Ala Ser
805
<210> 97
<211> 810
<212> Белок
<213> Mus musculus
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(810)
<223> IL4R мыши
<400> 97
Met Gly Arg Leu Cys Thr Lys Phe Leu Thr Ser Val Gly Cys Leu Ile
1 5 10 15
Leu Leu Leu Val Thr Gly Ser Gly Ser Ile Lys Val Leu Gly Glu Pro
20 25 30
Thr Cys Phe Ser Asp Tyr Ile Arg Thr Ser Thr Cys Glu Trp Phe Leu
35 40 45
Asp Ser Ala Val Asp Cys Ser Ser Gln Leu Cys Leu His Tyr Arg Leu
50 55 60
Met Phe Phe Glu Phe Ser Glu Asn Leu Thr Cys Ile Pro Arg Asn Ser
65 70 75 80
Ala Ser Thr Val Cys Val Cys His Met Glu Met Asn Arg Pro Val Gln
85 90 95
Ser Asp Arg Tyr Gln Met Glu Leu Trp Ala Glu His Arg Gln Leu Trp
100 105 110
Gln Gly Ser Phe Ser Pro Ser Gly Asn Val Lys Pro Leu Ala Pro Asp
115 120 125
Asn Leu Thr Leu His Thr Asn Val Ser Asp Glu Trp Leu Leu Thr Trp
130 135 140
Asn Asn Leu Tyr Pro Ser Asn Asn Leu Leu Tyr Lys Asp Leu Ile Ser
145 150 155 160
Met Val Asn Ile Ser Arg Glu Asp Asn Pro Ala Glu Phe Ile Val Tyr
165 170 175
Asn Val Thr Tyr Lys Glu Pro Arg Leu Ser Phe Pro Ile Asn Ile Leu
180 185 190
Met Ser Gly Val Tyr Tyr Thr Ala Arg Val Arg Val Arg Ser Gln Ile
195 200 205
Leu Thr Gly Thr Trp Ser Glu Trp Ser Pro Ser Ile Thr Trp Tyr Asn
210 215 220
His Phe Gln Leu Pro Leu Ile Gln Arg Leu Pro Leu Gly Val Thr Ile
225 230 235 240
Ser Cys Leu Cys Ile Pro Leu Phe Cys Leu Phe Cys Tyr Phe Ser Ile
245 250 255
Thr Lys Ile Lys Lys Ile Trp Trp Asp Gln Ile Pro Thr Pro Ala Arg
260 265 270
Ser Pro Leu Val Ala Ile Ile Ile Gln Asp Ala Gln Val Pro Leu Trp
275 280 285
Asp Lys Gln Thr Arg Ser Gln Glu Ser Thr Lys Tyr Pro His Trp Lys
290 295 300
Thr Cys Leu Asp Lys Leu Leu Pro Cys Leu Leu Lys His Arg Val Lys
305 310 315 320
Lys Lys Thr Asp Phe Pro Lys Ala Ala Pro Thr Lys Ser Leu Gln Ser
325 330 335
Pro Gly Lys Ala Gly Trp Cys Pro Met Glu Val Ser Arg Thr Val Leu
340 345 350
Trp Pro Glu Asn Val Ser Val Ser Val Val Arg Cys Met Glu Leu Phe
355 360 365
Glu Ala Pro Val Gln Asn Val Glu Glu Glu Glu Asp Glu Ile Val Lys
370 375 380
Glu Asp Leu Ser Met Ser Pro Glu Asn Ser Gly Gly Cys Gly Phe Gln
385 390 395 400
Glu Ser Gln Ala Asp Ile Met Ala Arg Leu Thr Glu Asn Leu Phe Ser
405 410 415
Asp Leu Leu Glu Ala Glu Asn Gly Gly Leu Gly Gln Ser Ala Leu Ala
420 425 430
Glu Ser Cys Ser Pro Leu Pro Ser Gly Ser Gly Gln Ala Ser Val Ser
435 440 445
Trp Ala Cys Leu Pro Met Gly Pro Ser Glu Glu Ala Thr Cys Gln Val
450 455 460
Thr Glu Gln Pro Ser His Pro Gly Pro Leu Ser Gly Ser Pro Ala Gln
465 470 475 480
Ser Ala Pro Thr Leu Ala Cys Thr Gln Val Pro Leu Val Leu Ala Asp
485 490 495
Asn Pro Ala Tyr Arg Ser Phe Ser Asp Cys Cys Ser Pro Ala Pro Asn
500 505 510
Pro Gly Glu Leu Ala Pro Glu Gln Gln Gln Ala Asp His Leu Glu Glu
515 520 525
Glu Glu Pro Pro Ser Pro Ala Asp Pro His Ser Ser Gly Pro Pro Met
530 535 540
Gln Pro Val Glu Ser Trp Glu Gln Ile Leu His Met Ser Val Leu Gln
545 550 555 560
His Gly Ala Ala Ala Gly Ser Thr Pro Ala Pro Ala Gly Gly Tyr Gln
565 570 575
Glu Phe Val Gln Ala Val Lys Gln Gly Ala Ala Gln Asp Pro Gly Val
580 585 590
Pro Gly Val Arg Pro Ser Gly Asp Pro Gly Tyr Lys Ala Phe Ser Ser
595 600 605
Leu Leu Ser Ser Asn Gly Ile Arg Gly Asp Thr Ala Ala Ala Gly Thr
610 615 620
Asp Asp Gly His Gly Gly Tyr Lys Pro Phe Gln Asn Pro Val Pro Asn
625 630 635 640
Gln Ser Pro Ser Ser Val Pro Leu Phe Thr Phe Gly Leu Asp Thr Glu
645 650 655
Leu Ser Pro Ser Pro Leu Asn Ser Asp Pro Pro Lys Ser Pro Pro Glu
660 665 670
Cys Leu Gly Leu Glu Leu Gly Leu Lys Gly Gly Asp Trp Val Lys Ala
675 680 685
Pro Pro Pro Ala Asp Gln Val Pro Lys Pro Phe Gly Asp Asp Leu Gly
690 695 700
Phe Gly Ile Val Tyr Ser Ser Leu Thr Cys His Leu Cys Gly His Leu
705 710 715 720
Lys Gln His His Ser Gln Glu Glu Gly Gly Gln Ser Pro Ile Val Ala
725 730 735
Ser Pro Gly Cys Gly Cys Cys Tyr Asp Asp Arg Ser Pro Ser Leu Gly
740 745 750
Ser Leu Ser Gly Ala Leu Glu Ser Cys Pro Glu Gly Ile Pro Pro Glu
755 760 765
Ala Asn Leu Met Ser Ala Pro Lys Thr Pro Ser Asn Leu Ser Gly Glu
770 775 780
Gly Lys Gly Pro Gly His Ser Pro Val Pro Ser Gln Thr Thr Glu Val
785 790 795 800
Pro Val Gly Ala Leu Gly Ile Ala Val Ser
805 810
<210> 98
<211> 825
<212> Белок
<213> Homo sapiens
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(825)
<223> IL4R человека
<400> 98
Met Gly Trp Leu Cys Ser Gly Leu Leu Phe Pro Val Ser Cys Leu Val
1 5 10 15
Leu Leu Gln Val Ala Ser Ser Gly Asn Met Lys Val Leu Gln Glu Pro
20 25 30
Thr Cys Val Ser Asp Tyr Met Ser Ile Ser Thr Cys Glu Trp Lys Met
35 40 45
Asn Gly Pro Thr Asn Cys Ser Thr Glu Leu Arg Leu Leu Tyr Gln Leu
50 55 60
Val Phe Leu Leu Ser Glu Ala His Thr Cys Ile Pro Glu Asn Asn Gly
65 70 75 80
Gly Ala Gly Cys Val Cys His Leu Leu Met Asp Asp Val Val Ser Ala
85 90 95
Asp Asn Tyr Thr Leu Asp Leu Trp Ala Gly Gln Gln Leu Leu Trp Lys
100 105 110
Gly Ser Phe Lys Pro Ser Glu His Val Lys Pro Arg Ala Pro Gly Asn
115 120 125
Leu Thr Val His Thr Asn Val Ser Asp Thr Leu Leu Leu Thr Trp Ser
130 135 140
Asn Pro Tyr Pro Pro Asp Asn Tyr Leu Tyr Asn His Leu Thr Tyr Ala
145 150 155 160
Val Asn Ile Trp Ser Glu Asn Asp Pro Ala Asp Phe Arg Ile Tyr Asn
165 170 175
Val Thr Tyr Leu Glu Pro Ser Leu Arg Ile Ala Ala Ser Thr Leu Lys
180 185 190
Ser Gly Ile Ser Tyr Arg Ala Arg Val Arg Ala Trp Ala Gln Cys Tyr
195 200 205
Asn Thr Thr Trp Ser Glu Trp Ser Pro Ser Thr Lys Trp His Asn Ser
210 215 220
Tyr Arg Glu Pro Phe Glu Gln His Leu Leu Leu Gly Val Ser Val Ser
225 230 235 240
Cys Ile Val Ile Leu Ala Val Cys Leu Leu Cys Tyr Val Ser Ile Thr
245 250 255
Lys Ile Lys Lys Glu Trp Trp Asp Gln Ile Pro Asn Pro Ala Arg Ser
260 265 270
Arg Leu Val Ala Ile Ile Ile Gln Asp Ala Gln Gly Ser Gln Trp Glu
275 280 285
Lys Arg Ser Arg Gly Gln Glu Pro Ala Lys Cys Pro His Trp Lys Asn
290 295 300
Cys Leu Thr Lys Leu Leu Pro Cys Phe Leu Glu His Asn Met Lys Arg
305 310 315 320
Asp Glu Asp Pro His Lys Ala Ala Lys Glu Met Pro Phe Gln Gly Ser
325 330 335
Gly Lys Ser Ala Trp Cys Pro Val Glu Ile Ser Lys Thr Val Leu Trp
340 345 350
Pro Glu Ser Ile Ser Val Val Arg Cys Val Glu Leu Phe Glu Ala Pro
355 360 365
Val Glu Cys Glu Glu Glu Glu Glu Val Glu Glu Glu Lys Gly Ser Phe
370 375 380
Cys Ala Ser Pro Glu Ser Ser Arg Asp Asp Phe Gln Glu Gly Arg Glu
385 390 395 400
Gly Ile Val Ala Arg Leu Thr Glu Ser Leu Phe Leu Asp Leu Leu Gly
405 410 415
Glu Glu Asn Gly Gly Phe Cys Gln Gln Asp Met Gly Glu Ser Cys Leu
420 425 430
Leu Pro Pro Ser Gly Ser Thr Ser Ala His Met Pro Trp Asp Glu Phe
435 440 445
Pro Ser Ala Gly Pro Lys Glu Ala Pro Pro Trp Gly Lys Glu Gln Pro
450 455 460
Leu His Leu Glu Pro Ser Pro Pro Ala Ser Pro Thr Gln Ser Pro Asp
465 470 475 480
Asn Leu Thr Cys Thr Glu Thr Pro Leu Val Ile Ala Gly Asn Pro Ala
485 490 495
Tyr Arg Ser Phe Ser Asn Ser Leu Ser Gln Ser Pro Cys Pro Arg Glu
500 505 510
Leu Gly Pro Asp Pro Leu Leu Ala Arg His Leu Glu Glu Val Glu Pro
515 520 525
Glu Met Pro Cys Val Pro Gln Leu Ser Glu Pro Thr Thr Val Pro Gln
530 535 540
Pro Glu Pro Glu Thr Trp Glu Gln Ile Leu Arg Arg Asn Val Leu Gln
545 550 555 560
His Gly Ala Ala Ala Ala Pro Val Ser Ala Pro Thr Ser Gly Tyr Gln
565 570 575
Glu Phe Val His Ala Val Glu Gln Gly Gly Thr Gln Ala Ser Ala Val
580 585 590
Val Gly Leu Gly Pro Pro Gly Glu Ala Gly Tyr Lys Ala Phe Ser Ser
595 600 605
Leu Leu Ala Ser Ser Ala Val Ser Pro Glu Lys Cys Gly Phe Gly Ala
610 615 620
Ser Ser Gly Glu Glu Gly Tyr Lys Pro Phe Gln Asp Leu Ile Pro Gly
625 630 635 640
Cys Pro Gly Asp Pro Ala Pro Val Pro Val Pro Leu Phe Thr Phe Gly
645 650 655
Leu Asp Arg Glu Pro Pro Arg Ser Pro Gln Ser Ser His Leu Pro Ser
660 665 670
Ser Ser Pro Glu His Leu Gly Leu Glu Pro Gly Glu Lys Val Glu Asp
675 680 685
Met Pro Lys Pro Pro Leu Pro Gln Glu Gln Ala Thr Asp Pro Leu Val
690 695 700
Asp Ser Leu Gly Ser Gly Ile Val Tyr Ser Ala Leu Thr Cys His Leu
705 710 715 720
Cys Gly His Leu Lys Gln Cys His Gly Gln Glu Asp Gly Gly Gln Thr
725 730 735
Pro Val Met Ala Ser Pro Cys Cys Gly Cys Cys Cys Gly Asp Arg Ser
740 745 750
Ser Pro Pro Thr Thr Pro Leu Arg Ala Pro Asp Pro Ser Pro Gly Gly
755 760 765
Val Pro Leu Glu Ala Ser Leu Cys Pro Ala Ser Leu Ala Pro Ser Gly
770 775 780
Ile Ser Glu Lys Ser Lys Ser Ser Ser Ser Phe His Pro Ala Pro Gly
785 790 795 800
Asn Ala Gln Ser Ser Ser Gln Thr Pro Lys Ile Val Asn Phe Val Ser
805 810 815
Val Gly Pro Thr Tyr Met Arg Val Ser
820 825
<210> 99
<211> 203
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: IL4R_ECD собаки
<400> 99
Gly Ser Val Lys Val Leu His Glu Pro Ser Cys Phe Ser Asp Tyr Ile
1 5 10 15
Ser Thr Ser Val Cys Gln Trp Lys Met Asp His Pro Thr Asn Cys Ser
20 25 30
Ala Glu Leu Arg Leu Ser Tyr Gln Leu Asp Phe Met Gly Ser Glu Asn
35 40 45
His Thr Cys Val Pro Glu Asn Arg Glu Asp Ser Val Cys Val Cys Ser
50 55 60
Met Pro Ile Asp Asp Ala Val Glu Ala Asp Val Tyr Gln Leu Asp Leu
65 70 75 80
Trp Ala Gly Gln Gln Leu Leu Trp Ser Gly Ser Phe Gln Pro Ser Lys
85 90 95
His Val Lys Pro Arg Thr Pro Gly Asn Leu Thr Val His Pro Asn Ile
100 105 110
Ser His Thr Trp Leu Leu Met Trp Thr Asn Pro Tyr Pro Thr Glu Asn
115 120 125
His Leu His Ser Glu Leu Thr Tyr Met Val Asn Val Ser Asn Asp Asn
130 135 140
Asp Pro Glu Asp Phe Lys Val Tyr Asn Val Thr Tyr Met Gly Pro Thr
145 150 155 160
Leu Arg Leu Ala Ala Ser Thr Leu Lys Ser Gly Ala Ser Tyr Ser Ala
165 170 175
Arg Val Arg Ala Trp Ala Gln Thr Tyr Asn Ser Thr Trp Ser Asp Trp
180 185 190
Ser Pro Ser Thr Thr Trp Leu Asn Tyr Tyr Glu
195 200
<210> 100
<211> 203
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: IL4R_ECD кошки
<400> 100
Gly Ser Val Lys Val Leu Arg Ala Pro Thr Cys Phe Ser Asp Tyr Phe
1 5 10 15
Ser Thr Ser Val Cys Gln Trp Asn Met Asp Ala Pro Thr Asn Cys Ser
20 25 30
Ala Glu Leu Arg Leu Ser Tyr Gln Leu Asn Phe Met Gly Ser Glu Asn
35 40 45
Arg Thr Cys Val Pro Glu Asn Gly Glu Gly Ala Ala Cys Ala Cys Ser
50 55 60
Met Leu Met Asp Asp Phe Val Glu Ala Asp Val Tyr Gln Leu His Leu
65 70 75 80
Trp Ala Gly Thr Gln Leu Leu Trp Ser Gly Ser Phe Lys Pro Ser Ser
85 90 95
His Val Lys Pro Arg Ala Pro Gly Asn Leu Thr Val His Pro Asn Val
100 105 110
Ser His Thr Trp Leu Leu Arg Trp Ser Asn Pro Tyr Pro Pro Glu Asn
115 120 125
His Leu His Ala Glu Leu Thr Tyr Met Val Asn Ile Ser Ser Glu Asp
130 135 140
Asp Pro Thr Asp Ser Arg Ile Tyr Asn Val Thr Tyr Met Gly Pro Thr
145 150 155 160
Leu Arg Val Ala Ala Ser Thr Leu Thr Ser Gly Ala Ser Tyr Ser Ala
165 170 175
Arg Val Arg Ala Trp Ala Gln Ser Tyr Asn Ser Thr Trp Ser Glu Trp
180 185 190
Ser Pro Ser Thr Lys Trp Leu Asn His Tyr Glu
195 200
<210> 101
<211> 206
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: IL4R_ECD лошади
<400> 101
Val Lys Val Leu Arg Leu Thr Ala Cys Phe Ser Asp Tyr Ile Ser Ala
1 5 10 15
Ser Thr Cys Glu Trp Lys Met Asp Arg Pro Thr Asn Cys Ser Ala Gln
20 25 30
Leu Arg Leu Ser Tyr Gln Leu Asn Asp Glu Phe Ser Asp Asn Leu Thr
35 40 45
Cys Ile Pro Glu Asn Arg Glu Asp Glu Val Cys Val Cys Arg Met Leu
50 55 60
Met Asp Asn Ile Val Ser Glu Asp Val Tyr Glu Leu Asp Leu Trp Ala
65 70 75 80
Gly Asn Gln Leu Leu Trp Asn Ser Ser Phe Lys Pro Ser Arg His Val
85 90 95
Lys Pro Arg Ala Pro Gln Asn Leu Thr Val His Ala Ile Ser His Thr
100 105 110
Trp Leu Leu Thr Trp Ser Asn Pro Tyr Pro Leu Lys Asn His Leu Trp
115 120 125
Ser Glu Leu Thr Tyr Leu Val Asn Ile Ser Lys Glu Asp Asp Pro Thr
130 135 140
Asp Phe Lys Ile Tyr Asn Val Thr Tyr Met Asp Pro Thr Leu Arg Val
145 150 155 160
Thr Ala Ser Thr Leu Lys Ser Arg Ala Thr Tyr Ser Ala Arg Val Lys
165 170 175
Ala Arg Ala Gln Asn Tyr Asn Ser Thr Trp Ser Glu Trp Ser Pro Ser
180 185 190
Thr Thr Trp His Asn Tyr Tyr Glu Gln Pro Leu Glu Gln Arg
195 200 205
<210> 102
<211> 238
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: IL4R_ECD мыши
<400> 102
Ile Lys Val Leu Gly Glu Pro Thr Cys Phe Ser Asp Tyr Ile Arg Thr
1 5 10 15
Ser Thr Cys Glu Trp Phe Leu Asp Ser Ala Val Asp Cys Ser Ser Gln
20 25 30
Leu Cys Leu His Tyr Arg Leu Met Phe Phe Glu Phe Ser Glu Asn Leu
35 40 45
Thr Cys Ile Pro Arg Asn Ser Ala Ser Thr Val Cys Val Cys His Met
50 55 60
Glu Met Asn Arg Pro Val Gln Ser Asp Arg Tyr Gln Met Glu Leu Trp
65 70 75 80
Ala Glu His Arg Gln Leu Trp Gln Gly Ser Phe Ser Pro Ser Gly Asn
85 90 95
Val Lys Pro Leu Ala Pro Asp Asn Leu Thr Leu His Thr Asn Val Ser
100 105 110
Asp Glu Trp Leu Leu Thr Trp Asn Asn Leu Tyr Pro Ser Asn Asn Leu
115 120 125
Leu Tyr Lys Asp Leu Ile Ser Met Val Asn Ile Ser Arg Glu Asp Asn
130 135 140
Pro Ala Glu Phe Ile Val Tyr Asn Val Thr Tyr Lys Glu Pro Arg Leu
145 150 155 160
Ser Phe Pro Ile Asn Ile Leu Met Ser Gly Val Tyr Tyr Thr Ala Arg
165 170 175
Val Arg Val Arg Ser Gln Ile Leu Thr Gly Thr Trp Ser Glu Trp Ser
180 185 190
Pro Ser Ile Thr Trp Tyr Asn His Phe Gln Leu Pro Leu Ile Gln Arg
195 200 205
Leu Pro Leu Gly Val Thr Ile Ser Cys Leu Cys Ile Pro Leu Phe Cys
210 215 220
Leu Phe Cys Tyr Phe Ser Ile Thr Lys Ile Lys Lys Ile Trp
225 230 235
<210> 103
<211> 209
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: IL4R_ECD человека
<400> 103
Gly Asn Met Lys Val Leu Gln Glu Pro Thr Cys Val Ser Asp Tyr Met
1 5 10 15
Ser Ile Ser Thr Cys Glu Trp Lys Met Asn Gly Pro Thr Asn Cys Ser
20 25 30
Thr Glu Leu Arg Leu Leu Tyr Gln Leu Val Phe Leu Leu Ser Glu Ala
35 40 45
His Thr Cys Ile Pro Glu Asn Asn Gly Gly Ala Gly Cys Val Cys His
50 55 60
Leu Leu Met Asp Asp Val Val Ser Ala Asp Asn Tyr Thr Leu Asp Leu
65 70 75 80
Trp Ala Gly Gln Gln Leu Leu Trp Lys Gly Ser Phe Lys Pro Ser Glu
85 90 95
His Val Lys Pro Arg Ala Pro Gly Asn Leu Thr Val His Thr Asn Val
100 105 110
Ser Asp Thr Leu Leu Leu Thr Trp Ser Asn Pro Tyr Pro Pro Asp Asn
115 120 125
Tyr Leu Tyr Asn His Leu Thr Tyr Ala Val Asn Ile Trp Ser Glu Asn
130 135 140
Asp Pro Ala Asp Phe Arg Ile Tyr Asn Val Thr Tyr Leu Glu Pro Ser
145 150 155 160
Leu Arg Ile Ala Ala Ser Thr Leu Lys Ser Gly Ile Ser Tyr Arg Ala
165 170 175
Arg Val Arg Ala Trp Ala Gln Cys Tyr Asn Thr Thr Trp Ser Glu Trp
180 185 190
Ser Pro Ser Thr Lys Trp His Asn Ser Tyr Arg Glu Pro Phe Glu Gln
195 200 205
His
<210> 104
<211> 835
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: собачий IL4R_C-FLAG с лидерной последовательностью
<400> 104
Met Gly Arg Leu Cys Ser Gly Leu Thr Phe Pro Val Ser Cys Leu Val
1 5 10 15
Leu Val Trp Val Ala Ser Ser Gly Ser Val Lys Val Leu His Glu Pro
20 25 30
Ser Cys Phe Ser Asp Tyr Ile Ser Thr Ser Val Cys Gln Trp Lys Met
35 40 45
Asp His Pro Thr Asn Cys Ser Ala Glu Leu Arg Leu Ser Tyr Gln Leu
50 55 60
Asp Phe Met Gly Ser Glu Asn His Thr Cys Val Pro Glu Asn Arg Glu
65 70 75 80
Asp Ser Val Cys Val Cys Ser Met Pro Ile Asp Asp Ala Val Glu Ala
85 90 95
Asp Val Tyr Gln Leu Asp Leu Trp Ala Gly Gln Gln Leu Leu Trp Ser
100 105 110
Gly Ser Phe Gln Pro Ser Lys His Val Lys Pro Arg Thr Pro Gly Asn
115 120 125
Leu Thr Val His Pro Asn Ile Ser His Thr Trp Leu Leu Met Trp Thr
130 135 140
Asn Pro Tyr Pro Thr Glu Asn His Leu His Ser Glu Leu Thr Tyr Met
145 150 155 160
Val Asn Val Ser Asn Asp Asn Asp Pro Glu Asp Phe Lys Val Tyr Asn
165 170 175
Val Thr Tyr Met Gly Pro Thr Leu Arg Leu Ala Ala Ser Thr Leu Lys
180 185 190
Ser Gly Ala Ser Tyr Ser Ala Arg Val Arg Ala Trp Ala Gln Thr Tyr
195 200 205
Asn Ser Thr Trp Ser Asp Trp Ser Pro Ser Thr Thr Trp Leu Asn Tyr
210 215 220
Tyr Glu Pro Trp Glu Gln His Leu Pro Leu Gly Val Ser Ile Ser Cys
225 230 235 240
Leu Val Ile Leu Ala Ile Cys Leu Ser Cys Tyr Phe Ser Ile Ile Lys
245 250 255
Ile Lys Lys Gly Trp Trp Asp Gln Ile Pro Asn Pro Ala His Ser Pro
260 265 270
Leu Val Ala Ile Val Ile Gln Asp Ser Gln Val Ser Leu Trp Gly Lys
275 280 285
Arg Ser Arg Gly Gln Glu Pro Ala Lys Cys Pro His Trp Lys Thr Cys
290 295 300
Leu Thr Lys Leu Leu Pro Cys Leu Leu Glu His Gly Leu Gly Arg Glu
305 310 315 320
Glu Glu Ser Pro Lys Thr Ala Lys Asn Gly Pro Leu Gln Gly Pro Gly
325 330 335
Lys Pro Ala Trp Cys Pro Val Glu Val Ser Lys Thr Ile Leu Trp Pro
340 345 350
Glu Ser Ile Ser Val Val Gln Cys Val Glu Leu Ser Glu Ala Pro Val
355 360 365
Asp Asn Glu Glu Glu Glu Glu Val Glu Glu Asp Lys Arg Ser Leu Cys
370 375 380
Pro Ser Leu Glu Gly Ser Gly Gly Ser Phe Gln Glu Gly Arg Glu Gly
385 390 395 400
Ile Val Ala Arg Leu Thr Glu Ser Leu Phe Leu Asp Leu Leu Gly Gly
405 410 415
Glu Asn Gly Gly Phe Cys Pro Gln Gly Leu Glu Glu Ser Cys Leu Pro
420 425 430
Pro Pro Ser Gly Ser Val Gly Ala Gln Met Pro Trp Ala Gln Phe Pro
435 440 445
Arg Ala Gly Pro Arg Ala Ala Pro Glu Gly Pro Glu Gln Pro Arg Arg
450 455 460
Pro Glu Ser Ala Leu Gln Ala Ser Pro Thr Gln Ser Ala Gly Ser Ser
465 470 475 480
Ala Phe Pro Glu Pro Pro Pro Val Val Thr Asp Asn Pro Ala Tyr Arg
485 490 495
Ser Phe Gly Ser Phe Leu Gly Gln Ser Ser Asp Pro Gly Asp Gly Asp
500 505 510
Ser Asp Pro Glu Leu Ala Asp Arg Pro Gly Glu Ala Asp Pro Gly Ile
515 520 525
Pro Ser Ala Pro Gln Pro Pro Glu Pro Pro Ala Ala Leu Gln Pro Glu
530 535 540
Pro Glu Ser Trp Glu Gln Ile Leu Arg Gln Ser Val Leu Gln His Arg
545 550 555 560
Ala Ala Pro Ala Pro Gly Pro Gly Pro Gly Ser Gly Tyr Arg Glu Phe
565 570 575
Thr Cys Ala Val Lys Gln Gly Ser Ala Pro Asp Ala Gly Gly Pro Gly
580 585 590
Phe Gly Pro Ser Gly Glu Ala Gly Tyr Lys Ala Phe Cys Ser Leu Leu
595 600 605
Pro Gly Gly Ala Thr Cys Pro Gly Thr Ser Gly Gly Glu Ala Gly Ser
610 615 620
Gly Glu Gly Gly Tyr Lys Pro Phe Gln Ser Leu Thr Pro Gly Cys Pro
625 630 635 640
Gly Ala Pro Thr Pro Val Pro Val Pro Leu Phe Thr Phe Gly Leu Asp
645 650 655
Thr Glu Pro Pro Gly Ser Pro Gln Asp Ser Leu Gly Ala Gly Ser Ser
660 665 670
Pro Glu His Leu Gly Val Glu Pro Ala Gly Lys Glu Glu Asp Ser Arg
675 680 685
Lys Thr Leu Leu Ala Pro Glu Gln Ala Thr Asp Pro Leu Arg Asp Asp
690 695 700
Leu Ala Ser Ser Ile Val Tyr Ser Ala Leu Thr Cys His Leu Cys Gly
705 710 715 720
His Leu Lys Gln Trp His Asp Gln Glu Glu Arg Gly Lys Ala His Ile
725 730 735
Val Pro Ser Pro Cys Cys Gly Cys Cys Cys Gly Asp Arg Ser Ser Leu
740 745 750
Leu Leu Ser Pro Leu Arg Ala Pro Asn Val Leu Pro Gly Gly Val Leu
755 760 765
Leu Glu Ala Ser Leu Ser Pro Ala Ser Leu Val Pro Ser Gly Val Ser
770 775 780
Lys Glu Gly Lys Ser Ser Pro Phe Ser Gln Pro Ala Ser Ser Ser Ala
785 790 795 800
Gln Ser Ser Ser Gln Thr Pro Lys Lys Leu Ala Val Leu Ser Thr Glu
805 810 815
Pro Thr Cys Met Ser Ala Ser Gly Ser Gly Ser Asp Tyr Lys Asp Asp
820 825 830
Asp Asp Lys
835
<210> 105
<211> 812
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: собачий IL4R_C-FLAG
<400> 105
Gly Ser Val Lys Val Leu His Glu Pro Ser Cys Phe Ser Asp Tyr Ile
1 5 10 15
Ser Thr Ser Val Cys Gln Trp Lys Met Asp His Pro Thr Asn Cys Ser
20 25 30
Ala Glu Leu Arg Leu Ser Tyr Gln Leu Asp Phe Met Gly Ser Glu Asn
35 40 45
His Thr Cys Val Pro Glu Asn Arg Glu Asp Ser Val Cys Val Cys Ser
50 55 60
Met Pro Ile Asp Asp Ala Val Glu Ala Asp Val Tyr Gln Leu Asp Leu
65 70 75 80
Trp Ala Gly Gln Gln Leu Leu Trp Ser Gly Ser Phe Gln Pro Ser Lys
85 90 95
His Val Lys Pro Arg Thr Pro Gly Asn Leu Thr Val His Pro Asn Ile
100 105 110
Ser His Thr Trp Leu Leu Met Trp Thr Asn Pro Tyr Pro Thr Glu Asn
115 120 125
His Leu His Ser Glu Leu Thr Tyr Met Val Asn Val Ser Asn Asp Asn
130 135 140
Asp Pro Glu Asp Phe Lys Val Tyr Asn Val Thr Tyr Met Gly Pro Thr
145 150 155 160
Leu Arg Leu Ala Ala Ser Thr Leu Lys Ser Gly Ala Ser Tyr Ser Ala
165 170 175
Arg Val Arg Ala Trp Ala Gln Thr Tyr Asn Ser Thr Trp Ser Asp Trp
180 185 190
Ser Pro Ser Thr Thr Trp Leu Asn Tyr Tyr Glu Pro Trp Glu Gln His
195 200 205
Leu Pro Leu Gly Val Ser Ile Ser Cys Leu Val Ile Leu Ala Ile Cys
210 215 220
Leu Ser Cys Tyr Phe Ser Ile Ile Lys Ile Lys Lys Gly Trp Trp Asp
225 230 235 240
Gln Ile Pro Asn Pro Ala His Ser Pro Leu Val Ala Ile Val Ile Gln
245 250 255
Asp Ser Gln Val Ser Leu Trp Gly Lys Arg Ser Arg Gly Gln Glu Pro
260 265 270
Ala Lys Cys Pro His Trp Lys Thr Cys Leu Thr Lys Leu Leu Pro Cys
275 280 285
Leu Leu Glu His Gly Leu Gly Arg Glu Glu Glu Ser Pro Lys Thr Ala
290 295 300
Lys Asn Gly Pro Leu Gln Gly Pro Gly Lys Pro Ala Trp Cys Pro Val
305 310 315 320
Glu Val Ser Lys Thr Ile Leu Trp Pro Glu Ser Ile Ser Val Val Gln
325 330 335
Cys Val Glu Leu Ser Glu Ala Pro Val Asp Asn Glu Glu Glu Glu Glu
340 345 350
Val Glu Glu Asp Lys Arg Ser Leu Cys Pro Ser Leu Glu Gly Ser Gly
355 360 365
Gly Ser Phe Gln Glu Gly Arg Glu Gly Ile Val Ala Arg Leu Thr Glu
370 375 380
Ser Leu Phe Leu Asp Leu Leu Gly Gly Glu Asn Gly Gly Phe Cys Pro
385 390 395 400
Gln Gly Leu Glu Glu Ser Cys Leu Pro Pro Pro Ser Gly Ser Val Gly
405 410 415
Ala Gln Met Pro Trp Ala Gln Phe Pro Arg Ala Gly Pro Arg Ala Ala
420 425 430
Pro Glu Gly Pro Glu Gln Pro Arg Arg Pro Glu Ser Ala Leu Gln Ala
435 440 445
Ser Pro Thr Gln Ser Ala Gly Ser Ser Ala Phe Pro Glu Pro Pro Pro
450 455 460
Val Val Thr Asp Asn Pro Ala Tyr Arg Ser Phe Gly Ser Phe Leu Gly
465 470 475 480
Gln Ser Ser Asp Pro Gly Asp Gly Asp Ser Asp Pro Glu Leu Ala Asp
485 490 495
Arg Pro Gly Glu Ala Asp Pro Gly Ile Pro Ser Ala Pro Gln Pro Pro
500 505 510
Glu Pro Pro Ala Ala Leu Gln Pro Glu Pro Glu Ser Trp Glu Gln Ile
515 520 525
Leu Arg Gln Ser Val Leu Gln His Arg Ala Ala Pro Ala Pro Gly Pro
530 535 540
Gly Pro Gly Ser Gly Tyr Arg Glu Phe Thr Cys Ala Val Lys Gln Gly
545 550 555 560
Ser Ala Pro Asp Ala Gly Gly Pro Gly Phe Gly Pro Ser Gly Glu Ala
565 570 575
Gly Tyr Lys Ala Phe Cys Ser Leu Leu Pro Gly Gly Ala Thr Cys Pro
580 585 590
Gly Thr Ser Gly Gly Glu Ala Gly Ser Gly Glu Gly Gly Tyr Lys Pro
595 600 605
Phe Gln Ser Leu Thr Pro Gly Cys Pro Gly Ala Pro Thr Pro Val Pro
610 615 620
Val Pro Leu Phe Thr Phe Gly Leu Asp Thr Glu Pro Pro Gly Ser Pro
625 630 635 640
Gln Asp Ser Leu Gly Ala Gly Ser Ser Pro Glu His Leu Gly Val Glu
645 650 655
Pro Ala Gly Lys Glu Glu Asp Ser Arg Lys Thr Leu Leu Ala Pro Glu
660 665 670
Gln Ala Thr Asp Pro Leu Arg Asp Asp Leu Ala Ser Ser Ile Val Tyr
675 680 685
Ser Ala Leu Thr Cys His Leu Cys Gly His Leu Lys Gln Trp His Asp
690 695 700
Gln Glu Glu Arg Gly Lys Ala His Ile Val Pro Ser Pro Cys Cys Gly
705 710 715 720
Cys Cys Cys Gly Asp Arg Ser Ser Leu Leu Leu Ser Pro Leu Arg Ala
725 730 735
Pro Asn Val Leu Pro Gly Gly Val Leu Leu Glu Ala Ser Leu Ser Pro
740 745 750
Ala Ser Leu Val Pro Ser Gly Val Ser Lys Glu Gly Lys Ser Ser Pro
755 760 765
Phe Ser Gln Pro Ala Ser Ser Ser Ala Gln Ser Ser Ser Gln Thr Pro
770 775 780
Lys Lys Leu Ala Val Leu Ser Thr Glu Pro Thr Cys Met Ser Ala Ser
785 790 795 800
Gly Ser Gly Ser Asp Tyr Lys Asp Asp Asp Asp Lys
805 810
<210> 106
<211> 237
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: собачий IL4R-ECD_C-His6 с лидерной
последовательностью
<400> 106
Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp
1 5 10 15
Leu Arg Gly Ala Arg Cys Ser Gly Ser Val Lys Val Leu His Glu Pro
20 25 30
Ser Cys Phe Ser Asp Tyr Ile Ser Thr Ser Val Cys Gln Trp Lys Met
35 40 45
Asp His Pro Thr Asn Cys Ser Ala Glu Leu Arg Leu Ser Tyr Gln Leu
50 55 60
Asp Phe Met Gly Ser Glu Asn His Thr Cys Val Pro Glu Asn Arg Glu
65 70 75 80
Asp Ser Val Cys Val Cys Ser Met Pro Ile Asp Asp Ala Val Glu Ala
85 90 95
Asp Val Tyr Gln Leu Asp Leu Trp Ala Gly Gln Gln Leu Leu Trp Ser
100 105 110
Gly Ser Phe Gln Pro Ser Lys His Val Lys Pro Arg Thr Pro Gly Asn
115 120 125
Leu Thr Val His Pro Asn Ile Ser His Thr Trp Leu Leu Met Trp Thr
130 135 140
Asn Pro Tyr Pro Thr Glu Asn His Leu His Ser Glu Leu Thr Tyr Met
145 150 155 160
Val Asn Val Ser Asn Asp Asn Asp Pro Glu Asp Phe Lys Val Tyr Asn
165 170 175
Val Thr Tyr Met Gly Pro Thr Leu Arg Leu Ala Ala Ser Thr Leu Lys
180 185 190
Ser Gly Ala Ser Tyr Ser Ala Arg Val Arg Ala Trp Ala Gln Thr Tyr
195 200 205
Asn Ser Thr Trp Ser Asp Trp Ser Pro Ser Thr Thr Trp Leu Asn Tyr
210 215 220
Tyr Glu Pro Gly Ser Gly Ser His His His His His His
225 230 235
<210> 107
<211> 214
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: собачий IL4R-ECD_C-His6
<400> 107
Gly Ser Val Lys Val Leu His Glu Pro Ser Cys Phe Ser Asp Tyr Ile
1 5 10 15
Ser Thr Ser Val Cys Gln Trp Lys Met Asp His Pro Thr Asn Cys Ser
20 25 30
Ala Glu Leu Arg Leu Ser Tyr Gln Leu Asp Phe Met Gly Ser Glu Asn
35 40 45
His Thr Cys Val Pro Glu Asn Arg Glu Asp Ser Val Cys Val Cys Ser
50 55 60
Met Pro Ile Asp Asp Ala Val Glu Ala Asp Val Tyr Gln Leu Asp Leu
65 70 75 80
Trp Ala Gly Gln Gln Leu Leu Trp Ser Gly Ser Phe Gln Pro Ser Lys
85 90 95
His Val Lys Pro Arg Thr Pro Gly Asn Leu Thr Val His Pro Asn Ile
100 105 110
Ser His Thr Trp Leu Leu Met Trp Thr Asn Pro Tyr Pro Thr Glu Asn
115 120 125
His Leu His Ser Glu Leu Thr Tyr Met Val Asn Val Ser Asn Asp Asn
130 135 140
Asp Pro Glu Asp Phe Lys Val Tyr Asn Val Thr Tyr Met Gly Pro Thr
145 150 155 160
Leu Arg Leu Ala Ala Ser Thr Leu Lys Ser Gly Ala Ser Tyr Ser Ala
165 170 175
Arg Val Arg Ala Trp Ala Gln Thr Tyr Asn Ser Thr Trp Ser Asp Trp
180 185 190
Ser Pro Ser Thr Thr Trp Leu Asn Tyr Tyr Glu Pro Gly Ser Gly Ser
195 200 205
His His His His His His
210
<210> 108
<211> 473
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: собачий IL4R-ECD_C-HuFc_His6 с лидерной
последовательностью
<400> 108
Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp
1 5 10 15
Leu Arg Gly Ala Arg Cys Ser Gly Ser Val Lys Val Leu His Glu Pro
20 25 30
Ser Cys Phe Ser Asp Tyr Ile Ser Thr Ser Val Cys Gln Trp Lys Met
35 40 45
Asp His Pro Thr Asn Cys Ser Ala Glu Leu Arg Leu Ser Tyr Gln Leu
50 55 60
Asp Phe Met Gly Ser Glu Asn His Thr Cys Val Pro Glu Asn Arg Glu
65 70 75 80
Asp Ser Val Cys Val Cys Ser Met Pro Ile Asp Asp Ala Val Glu Ala
85 90 95
Asp Val Tyr Gln Leu Asp Leu Trp Ala Gly Gln Gln Leu Leu Trp Ser
100 105 110
Gly Ser Phe Gln Pro Ser Lys His Val Lys Pro Arg Thr Pro Gly Asn
115 120 125
Leu Thr Val His Pro Asn Ile Ser His Thr Trp Leu Leu Met Trp Thr
130 135 140
Asn Pro Tyr Pro Thr Glu Asn His Leu His Ser Glu Leu Thr Tyr Met
145 150 155 160
Val Asn Val Ser Asn Asp Asn Asp Pro Glu Asp Phe Lys Val Tyr Asn
165 170 175
Val Thr Tyr Met Gly Pro Thr Leu Arg Leu Ala Ala Ser Thr Leu Lys
180 185 190
Ser Gly Ala Ser Tyr Ser Ala Arg Val Arg Ala Trp Ala Gln Thr Tyr
195 200 205
Asn Ser Thr Trp Ser Asp Trp Ser Pro Ser Thr Thr Trp Leu Asn Tyr
210 215 220
Tyr Glu Pro Gly Ser Glu Asn Leu Tyr Phe Gln Gly Pro Lys Ser Cys
225 230 235 240
Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly
245 250 255
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
260 265 270
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His
275 280 285
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
290 295 300
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr
305 310 315 320
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
325 330 335
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
340 345 350
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
355 360 365
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser
370 375 380
Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
385 390 395 400
Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
405 410 415
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
420 425 430
Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met
435 440 445
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
450 455 460
Pro Gly Lys His His His His His His
465 470
<210> 109
<211> 450
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: собачий IL4R-ECD_C-HuFc_His6
<400> 109
Gly Ser Val Lys Val Leu His Glu Pro Ser Cys Phe Ser Asp Tyr Ile
1 5 10 15
Ser Thr Ser Val Cys Gln Trp Lys Met Asp His Pro Thr Asn Cys Ser
20 25 30
Ala Glu Leu Arg Leu Ser Tyr Gln Leu Asp Phe Met Gly Ser Glu Asn
35 40 45
His Thr Cys Val Pro Glu Asn Arg Glu Asp Ser Val Cys Val Cys Ser
50 55 60
Met Pro Ile Asp Asp Ala Val Glu Ala Asp Val Tyr Gln Leu Asp Leu
65 70 75 80
Trp Ala Gly Gln Gln Leu Leu Trp Ser Gly Ser Phe Gln Pro Ser Lys
85 90 95
His Val Lys Pro Arg Thr Pro Gly Asn Leu Thr Val His Pro Asn Ile
100 105 110
Ser His Thr Trp Leu Leu Met Trp Thr Asn Pro Tyr Pro Thr Glu Asn
115 120 125
His Leu His Ser Glu Leu Thr Tyr Met Val Asn Val Ser Asn Asp Asn
130 135 140
Asp Pro Glu Asp Phe Lys Val Tyr Asn Val Thr Tyr Met Gly Pro Thr
145 150 155 160
Leu Arg Leu Ala Ala Ser Thr Leu Lys Ser Gly Ala Ser Tyr Ser Ala
165 170 175
Arg Val Arg Ala Trp Ala Gln Thr Tyr Asn Ser Thr Trp Ser Asp Trp
180 185 190
Ser Pro Ser Thr Thr Trp Leu Asn Tyr Tyr Glu Pro Gly Ser Glu Asn
195 200 205
Leu Tyr Phe Gln Gly Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro
210 215 220
Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe
225 230 235 240
Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val
245 250 255
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe
260 265 270
Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
275 280 285
Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr
290 295 300
Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
305 310 315 320
Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
325 330 335
Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg
340 345 350
Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
355 360 365
Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
370 375 380
Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
385 390 395 400
Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln
405 410 415
Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
420 425 430
Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys His His His His
435 440 445
His His
450
<210> 110
<211> 471
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: кошачий IL4R-ECD_C-HuFc_His6 с лидерной
последовательностью
<400> 110
Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp
1 5 10 15
Leu Arg Gly Ala Arg Cys Gly Ser Val Lys Val Leu Arg Ala Pro Thr
20 25 30
Cys Phe Ser Asp Tyr Phe Ser Thr Ser Val Cys Gln Trp Asn Met Asp
35 40 45
Ala Pro Thr Asn Cys Ser Ala Glu Leu Arg Leu Ser Tyr Gln Leu Asn
50 55 60
Phe Met Gly Ser Glu Asn Arg Thr Cys Val Pro Glu Asn Gly Glu Gly
65 70 75 80
Ala Ala Cys Ala Cys Ser Met Leu Met Asp Asp Phe Val Glu Ala Asp
85 90 95
Val Tyr Gln Leu His Leu Trp Ala Gly Thr Gln Leu Leu Trp Ser Gly
100 105 110
Ser Phe Lys Pro Ser Ser His Val Lys Pro Arg Ala Pro Gly Asn Leu
115 120 125
Thr Val His Pro Asn Val Ser His Thr Trp Leu Leu Arg Trp Ser Asn
130 135 140
Pro Tyr Pro Pro Glu Asn His Leu His Ala Glu Leu Thr Tyr Met Val
145 150 155 160
Asn Ile Ser Ser Glu Asp Asp Pro Thr Asp Ser Arg Ile Tyr Asn Val
165 170 175
Thr Tyr Met Gly Pro Thr Leu Arg Val Ala Ala Ser Thr Leu Thr Ser
180 185 190
Gly Ala Ser Tyr Ser Ala Arg Val Arg Ala Trp Ala Gln Ser Tyr Asn
195 200 205
Ser Thr Trp Ser Asp Trp Ser Pro Ser Thr Thr Trp Leu Asn Tyr Tyr
210 215 220
Glu Gly Ser Glu Asn Leu Tyr Phe Gln Gly Pro Lys Ser Cys Asp Lys
225 230 235 240
Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro
245 250 255
Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser
260 265 270
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp
275 280 285
Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn
290 295 300
Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val
305 310 315 320
Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu
325 330 335
Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys
340 345 350
Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr
355 360 365
Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr
370 375 380
Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu
385 390 395 400
Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu
405 410 415
Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys
420 425 430
Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu
435 440 445
Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
450 455 460
Lys His His His His His His
465 470
<210> 111
<211> 449
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: кошачий IL4R-ECD_C-HuFc_His6
<400> 111
Gly Ser Val Lys Val Leu Arg Ala Pro Thr Cys Phe Ser Asp Tyr Phe
1 5 10 15
Ser Thr Ser Val Cys Gln Trp Asn Met Asp Ala Pro Thr Asn Cys Ser
20 25 30
Ala Glu Leu Arg Leu Ser Tyr Gln Leu Asn Phe Met Gly Ser Glu Asn
35 40 45
Arg Thr Cys Val Pro Glu Asn Gly Glu Gly Ala Ala Cys Ala Cys Ser
50 55 60
Met Leu Met Asp Asp Phe Val Glu Ala Asp Val Tyr Gln Leu His Leu
65 70 75 80
Trp Ala Gly Thr Gln Leu Leu Trp Ser Gly Ser Phe Lys Pro Ser Ser
85 90 95
His Val Lys Pro Arg Ala Pro Gly Asn Leu Thr Val His Pro Asn Val
100 105 110
Ser His Thr Trp Leu Leu Arg Trp Ser Asn Pro Tyr Pro Pro Glu Asn
115 120 125
His Leu His Ala Glu Leu Thr Tyr Met Val Asn Ile Ser Ser Glu Asp
130 135 140
Asp Pro Thr Asp Ser Arg Ile Tyr Asn Val Thr Tyr Met Gly Pro Thr
145 150 155 160
Leu Arg Val Ala Ala Ser Thr Leu Thr Ser Gly Ala Ser Tyr Ser Ala
165 170 175
Arg Val Arg Ala Trp Ala Gln Ser Tyr Asn Ser Thr Trp Ser Asp Trp
180 185 190
Ser Pro Ser Thr Thr Trp Leu Asn Tyr Tyr Glu Gly Ser Glu Asn Leu
195 200 205
Tyr Phe Gln Gly Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro
210 215 220
Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro
225 230 235 240
Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr
245 250 255
Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn
260 265 270
Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg
275 280 285
Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val
290 295 300
Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser
305 310 315 320
Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys
325 330 335
Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp
340 345 350
Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe
355 360 365
Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu
370 375 380
Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe
385 390 395 400
Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly
405 410 415
Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr
420 425 430
Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys His His His His His
435 440 445
His
<210> 112
<211> 482
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: лошадиный IL4R-ECD_C-HuFc_His6 с лидерной
последовательностью
<400> 112
Met Pro Ser Ser Val Ser Trp Gly Ile Leu Leu Leu Ala Gly Leu Cys
1 5 10 15
Cys Leu Val Pro Val Ser Leu Ala Val Lys Val Leu Arg Leu Thr Ala
20 25 30
Cys Phe Ser Asp Tyr Ile Ser Ala Ser Thr Cys Glu Trp Lys Met Asp
35 40 45
Arg Pro Thr Asn Cys Ser Ala Gln Leu Arg Leu Ser Tyr Gln Leu Asn
50 55 60
Asp Glu Phe Ser Asp Asn Leu Thr Cys Ile Pro Glu Asn Arg Glu Asp
65 70 75 80
Glu Val Cys Val Cys Arg Met Leu Met Asp Asn Ile Val Ser Glu Asp
85 90 95
Val Tyr Glu Leu Asp Leu Trp Ala Gly Asn Gln Leu Leu Trp Asn Ser
100 105 110
Ser Phe Lys Pro Ser Arg His Val Lys Pro Arg Ala Pro Gln Asn Leu
115 120 125
Thr Val His Ala Ile Ser His Thr Trp Leu Leu Thr Trp Ser Asn Pro
130 135 140
Tyr Pro Leu Lys Asn His Leu Trp Ser Glu Leu Thr Tyr Leu Val Asn
145 150 155 160
Ile Ser Lys Glu Asp Asp Pro Thr Asp Phe Lys Ile Tyr Asn Val Thr
165 170 175
Tyr Met Asp Pro Thr Leu Arg Val Thr Ala Ser Thr Leu Lys Ser Arg
180 185 190
Ala Thr Tyr Ser Ala Arg Val Lys Ala Arg Ala Gln Asn Tyr Asn Ser
195 200 205
Thr Trp Ser Glu Trp Ser Pro Ser Thr Thr Trp His Asn Tyr Tyr Glu
210 215 220
Gln Pro Leu Glu Gln Arg Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser Glu Asn
225 230 235 240
Leu Tyr Phe Gln Gly Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro
245 250 255
Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe
260 265 270
Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val
275 280 285
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe
290 295 300
Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
305 310 315 320
Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr
325 330 335
Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
340 345 350
Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
355 360 365
Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg
370 375 380
Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
385 390 395 400
Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
405 410 415
Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
420 425 430
Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln
435 440 445
Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
450 455 460
Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys His His His His
465 470 475 480
His His
<210> 113
<211> 458
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: лошадиный IL4R-ECD_C-HuFc_His6
<400> 113
Val Lys Val Leu Arg Leu Thr Ala Cys Phe Ser Asp Tyr Ile Ser Ala
1 5 10 15
Ser Thr Cys Glu Trp Lys Met Asp Arg Pro Thr Asn Cys Ser Ala Gln
20 25 30
Leu Arg Leu Ser Tyr Gln Leu Asn Asp Glu Phe Ser Asp Asn Leu Thr
35 40 45
Cys Ile Pro Glu Asn Arg Glu Asp Glu Val Cys Val Cys Arg Met Leu
50 55 60
Met Asp Asn Ile Val Ser Glu Asp Val Tyr Glu Leu Asp Leu Trp Ala
65 70 75 80
Gly Asn Gln Leu Leu Trp Asn Ser Ser Phe Lys Pro Ser Arg His Val
85 90 95
Lys Pro Arg Ala Pro Gln Asn Leu Thr Val His Ala Ile Ser His Thr
100 105 110
Trp Leu Leu Thr Trp Ser Asn Pro Tyr Pro Leu Lys Asn His Leu Trp
115 120 125
Ser Glu Leu Thr Tyr Leu Val Asn Ile Ser Lys Glu Asp Asp Pro Thr
130 135 140
Asp Phe Lys Ile Tyr Asn Val Thr Tyr Met Asp Pro Thr Leu Arg Val
145 150 155 160
Thr Ala Ser Thr Leu Lys Ser Arg Ala Thr Tyr Ser Ala Arg Val Lys
165 170 175
Ala Arg Ala Gln Asn Tyr Asn Ser Thr Trp Ser Glu Trp Ser Pro Ser
180 185 190
Thr Thr Trp His Asn Tyr Tyr Glu Gln Pro Leu Glu Gln Arg Gly Gly
195 200 205
Gly Ser Gly Gly Gly Ser Glu Asn Leu Tyr Phe Gln Gly Pro Lys Ser
210 215 220
Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu
225 230 235 240
Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu
245 250 255
Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser
260 265 270
His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu
275 280 285
Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr
290 295 300
Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn
305 310 315 320
Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro
325 330 335
Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln
340 345 350
Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val
355 360 365
Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val
370 375 380
Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro
385 390 395 400
Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr
405 410 415
Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val
420 425 430
Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu
435 440 445
Ser Pro Gly Lys His His His His His His
450 455
<210> 114
<211> 507
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: мышиный IL4R-ECD_C-HuFc_His6 с лидерной
последовательностью
<400> 114
Met Gly Trp Leu Cys Ser Gly Leu Leu Phe Pro Val Ser Cys Leu Val
1 5 10 15
Leu Leu Gln Val Ala Ser Ser Ile Lys Val Leu Gly Glu Pro Thr Cys
20 25 30
Phe Ser Asp Tyr Ile Arg Thr Ser Thr Cys Glu Trp Phe Leu Asp Ser
35 40 45
Ala Val Asp Cys Ser Ser Gln Leu Cys Leu His Tyr Arg Leu Met Phe
50 55 60
Phe Glu Phe Ser Glu Asn Leu Thr Cys Ile Pro Arg Asn Ser Ala Ser
65 70 75 80
Thr Val Cys Val Cys His Met Glu Met Asn Arg Pro Val Gln Ser Asp
85 90 95
Arg Tyr Gln Met Glu Leu Trp Ala Glu His Arg Gln Leu Trp Gln Gly
100 105 110
Ser Phe Ser Pro Ser Gly Asn Val Lys Pro Leu Ala Pro Asp Asn Leu
115 120 125
Thr Leu His Thr Asn Val Ser Asp Glu Trp Leu Leu Thr Trp Asn Asn
130 135 140
Leu Tyr Pro Ser Asn Asn Leu Leu Tyr Lys Asp Leu Ile Ser Met Val
145 150 155 160
Asn Ile Ser Arg Glu Asp Asn Pro Ala Glu Phe Ile Val Tyr Asn Val
165 170 175
Thr Tyr Lys Glu Pro Arg Leu Ser Phe Pro Ile Asn Ile Leu Met Ser
180 185 190
Gly Val Tyr Tyr Thr Ala Arg Val Arg Val Arg Ser Gln Ile Leu Thr
195 200 205
Gly Thr Trp Ser Glu Trp Ser Pro Ser Ile Thr Trp Tyr Asn His Phe
210 215 220
Gln Leu Pro Leu Ile Gln Arg Leu Pro Leu Gly Val Thr Ile Ser Cys
225 230 235 240
Leu Cys Ile Pro Leu Phe Cys Leu Phe Cys Tyr Phe Ser Ile Thr Lys
245 250 255
Ile Lys Lys Ile Trp Gly Ser Glu Asn Leu Tyr Phe Gln Gly Pro Lys
260 265 270
Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu
275 280 285
Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr
290 295 300
Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val
305 310 315 320
Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val
325 330 335
Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser
340 345 350
Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu
355 360 365
Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala
370 375 380
Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro
385 390 395 400
Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln
405 410 415
Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala
420 425 430
Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr
435 440 445
Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu
450 455 460
Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser
465 470 475 480
Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser
485 490 495
Leu Ser Pro Gly Lys His His His His His His
500 505
<210> 115
<211> 484
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: мышиный IL4R-ECD_C-HuFc_His6
<400> 115
Ile Lys Val Leu Gly Glu Pro Thr Cys Phe Ser Asp Tyr Ile Arg Thr
1 5 10 15
Ser Thr Cys Glu Trp Phe Leu Asp Ser Ala Val Asp Cys Ser Ser Gln
20 25 30
Leu Cys Leu His Tyr Arg Leu Met Phe Phe Glu Phe Ser Glu Asn Leu
35 40 45
Thr Cys Ile Pro Arg Asn Ser Ala Ser Thr Val Cys Val Cys His Met
50 55 60
Glu Met Asn Arg Pro Val Gln Ser Asp Arg Tyr Gln Met Glu Leu Trp
65 70 75 80
Ala Glu His Arg Gln Leu Trp Gln Gly Ser Phe Ser Pro Ser Gly Asn
85 90 95
Val Lys Pro Leu Ala Pro Asp Asn Leu Thr Leu His Thr Asn Val Ser
100 105 110
Asp Glu Trp Leu Leu Thr Trp Asn Asn Leu Tyr Pro Ser Asn Asn Leu
115 120 125
Leu Tyr Lys Asp Leu Ile Ser Met Val Asn Ile Ser Arg Glu Asp Asn
130 135 140
Pro Ala Glu Phe Ile Val Tyr Asn Val Thr Tyr Lys Glu Pro Arg Leu
145 150 155 160
Ser Phe Pro Ile Asn Ile Leu Met Ser Gly Val Tyr Tyr Thr Ala Arg
165 170 175
Val Arg Val Arg Ser Gln Ile Leu Thr Gly Thr Trp Ser Glu Trp Ser
180 185 190
Pro Ser Ile Thr Trp Tyr Asn His Phe Gln Leu Pro Leu Ile Gln Arg
195 200 205
Leu Pro Leu Gly Val Thr Ile Ser Cys Leu Cys Ile Pro Leu Phe Cys
210 215 220
Leu Phe Cys Tyr Phe Ser Ile Thr Lys Ile Lys Lys Ile Trp Gly Ser
225 230 235 240
Glu Asn Leu Tyr Phe Gln Gly Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr
245 250 255
Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe
260 265 270
Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro
275 280 285
Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val
290 295 300
Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr
305 310 315 320
Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val
325 330 335
Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys
340 345 350
Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser
355 360 365
Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro
370 375 380
Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val
385 390 395 400
Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly
405 410 415
Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp
420 425 430
Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp
435 440 445
Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His
450 455 460
Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys His His
465 470 475 480
His His His His
<210> 116
<211> 478
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: человеческий IL4R-ECD_C-HuFc_His6 с лидерной
последовательностью
<400> 116
Met Gly Trp Leu Cys Ser Gly Leu Leu Phe Pro Val Ser Cys Leu Val
1 5 10 15
Leu Leu Gln Val Ala Ser Ser Gly Asn Met Lys Val Leu Gln Glu Pro
20 25 30
Thr Cys Val Ser Asp Tyr Met Ser Ile Ser Thr Cys Glu Trp Lys Met
35 40 45
Asn Gly Pro Thr Asn Cys Ser Thr Glu Leu Arg Leu Leu Tyr Gln Leu
50 55 60
Val Phe Leu Leu Ser Glu Ala His Thr Cys Ile Pro Glu Asn Asn Gly
65 70 75 80
Gly Ala Gly Cys Val Cys His Leu Leu Met Asp Asp Val Val Ser Ala
85 90 95
Asp Asn Tyr Thr Leu Asp Leu Trp Ala Gly Gln Gln Leu Leu Trp Lys
100 105 110
Gly Ser Phe Lys Pro Ser Glu His Val Lys Pro Arg Ala Pro Gly Asn
115 120 125
Leu Thr Val His Thr Asn Val Ser Asp Thr Leu Leu Leu Thr Trp Ser
130 135 140
Asn Pro Tyr Pro Pro Asp Asn Tyr Leu Tyr Asn His Leu Thr Tyr Ala
145 150 155 160
Val Asn Ile Trp Ser Glu Asn Asp Pro Ala Asp Phe Arg Ile Tyr Asn
165 170 175
Val Thr Tyr Leu Glu Pro Ser Leu Arg Ile Ala Ala Ser Thr Leu Lys
180 185 190
Ser Gly Ile Ser Tyr Arg Ala Arg Val Arg Ala Trp Ala Gln Cys Tyr
195 200 205
Asn Thr Thr Trp Ser Glu Trp Ser Pro Ser Thr Lys Trp His Asn Ser
210 215 220
Tyr Arg Glu Pro Phe Glu Gln His Gly Ser Glu Asn Leu Tyr Phe Gln
225 230 235 240
Gly Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala
245 250 255
Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro
260 265 270
Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val
275 280 285
Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val
290 295 300
Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln
305 310 315 320
Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln
325 330 335
Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala
340 345 350
Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro
355 360 365
Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr
370 375 380
Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser
385 390 395 400
Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr
405 410 415
Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr
420 425 430
Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe
435 440 445
Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys
450 455 460
Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys His His His His His His
465 470 475
<210> 117
<211> 455
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: человеческий IL4R-ECD_C-HuFc_His6
<400> 117
Gly Asn Met Lys Val Leu Gln Glu Pro Thr Cys Val Ser Asp Tyr Met
1 5 10 15
Ser Ile Ser Thr Cys Glu Trp Lys Met Asn Gly Pro Thr Asn Cys Ser
20 25 30
Thr Glu Leu Arg Leu Leu Tyr Gln Leu Val Phe Leu Leu Ser Glu Ala
35 40 45
His Thr Cys Ile Pro Glu Asn Asn Gly Gly Ala Gly Cys Val Cys His
50 55 60
Leu Leu Met Asp Asp Val Val Ser Ala Asp Asn Tyr Thr Leu Asp Leu
65 70 75 80
Trp Ala Gly Gln Gln Leu Leu Trp Lys Gly Ser Phe Lys Pro Ser Glu
85 90 95
His Val Lys Pro Arg Ala Pro Gly Asn Leu Thr Val His Thr Asn Val
100 105 110
Ser Asp Thr Leu Leu Leu Thr Trp Ser Asn Pro Tyr Pro Pro Asp Asn
115 120 125
Tyr Leu Tyr Asn His Leu Thr Tyr Ala Val Asn Ile Trp Ser Glu Asn
130 135 140
Asp Pro Ala Asp Phe Arg Ile Tyr Asn Val Thr Tyr Leu Glu Pro Ser
145 150 155 160
Leu Arg Ile Ala Ala Ser Thr Leu Lys Ser Gly Ile Ser Tyr Arg Ala
165 170 175
Arg Val Arg Ala Trp Ala Gln Cys Tyr Asn Thr Thr Trp Ser Glu Trp
180 185 190
Ser Pro Ser Thr Lys Trp His Asn Ser Tyr Arg Glu Pro Phe Glu Gln
195 200 205
His Gly Ser Glu Asn Leu Tyr Phe Gln Gly Pro Lys Ser Cys Asp Lys
210 215 220
Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro
225 230 235 240
Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser
245 250 255
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp
260 265 270
Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn
275 280 285
Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val
290 295 300
Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu
305 310 315 320
Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys
325 330 335
Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr
340 345 350
Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr
355 360 365
Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu
370 375 380
Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu
385 390 395 400
Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys
405 410 415
Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu
420 425 430
Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
435 440 445
Lys His His His His His His
450 455
<210> 118
<211> 132
<212> Белок
<213> Canis lupus familiaris
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(132)
<223> Предшественник IL4 собаки
<400> 118
Met Gly Leu Thr Ser Gln Leu Ile Pro Thr Leu Val Cys Leu Leu Ala
1 5 10 15
Leu Thr Ser Thr Phe Val His Gly His Asn Phe Asn Ile Thr Ile Lys
20 25 30
Glu Ile Ile Lys Met Leu Asn Ile Leu Thr Ala Arg Asn Asp Ser Cys
35 40 45
Met Glu Leu Thr Val Lys Asp Val Phe Thr Ala Pro Lys Asn Thr Ser
50 55 60
Asp Lys Glu Ile Phe Cys Arg Ala Ala Thr Val Leu Arg Gln Ile Tyr
65 70 75 80
Thr His Asn Cys Ser Asn Arg Tyr Leu Arg Gly Leu Tyr Arg Asn Leu
85 90 95
Ser Ser Met Ala Asn Lys Thr Cys Ser Met Asn Glu Ile Lys Lys Ser
100 105 110
Thr Leu Lys Asp Phe Leu Glu Arg Leu Lys Val Ile Met Gln Lys Lys
115 120 125
Tyr Tyr Arg His
130
<210> 119
<211> 133
<212> Белок
<213> Felis silvestris catus
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(133)
<223> Предшественник IL4 кошки
<400> 119
Met Gly Leu Thr Tyr Gln Leu Ile Pro Ala Leu Val Cys Leu Leu Ala
1 5 10 15
Phe Thr Ser Thr Phe Val His Gly Gln Asn Phe Asn Asn Thr Leu Lys
20 25 30
Glu Ile Ile Lys Thr Leu Asn Ile Leu Thr Ala Arg Asn Asp Ser Cys
35 40 45
Met Glu Leu Thr Val Met Asp Val Leu Ala Ala Pro Lys Asn Thr Ser
50 55 60
Asp Lys Glu Ile Phe Cys Arg Ala Thr Thr Val Leu Arg Gln Ile Tyr
65 70 75 80
Thr His His Asn Cys Ser Thr Lys Phe Leu Lys Gly Leu Asp Arg Asn
85 90 95
Leu Ser Ser Met Ala Asn Arg Thr Cys Ser Val Asn Glu Val Lys Lys
100 105 110
Cys Thr Leu Lys Asp Phe Leu Glu Arg Leu Lys Ala Ile Met Gln Lys
115 120 125
Lys Tyr Ser Lys His
130
<210> 120
<211> 137
<212> Белок
<213> Equus caballus
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(137)
<223> Предшественник IL4 лошади
<400> 120
Met Gly Leu Thr Tyr Gln Leu Ile Pro Ala Leu Val Cys Leu Leu Ala
1 5 10 15
Cys Thr Ser Asn Phe Ile Gln Gly Cys Lys Tyr Asp Ile Thr Leu Gln
20 25 30
Glu Ile Ile Lys Thr Leu Asn Asn Leu Thr Asp Gly Lys Gly Lys Asn
35 40 45
Ser Cys Met Glu Leu Thr Val Ala Asp Ala Phe Ala Gly Pro Lys Asn
50 55 60
Thr Asp Gly Lys Glu Ile Cys Arg Ala Ala Lys Val Leu Gln Gln Leu
65 70 75 80
Tyr Lys Arg His Asp Arg Ser Leu Ile Lys Glu Cys Leu Ser Gly Leu
85 90 95
Asp Arg Asn Leu Lys Gly Met Ala Asn Gly Thr Cys Cys Thr Val Asn
100 105 110
Glu Ala Lys Lys Ser Thr Leu Lys Asp Phe Leu Glu Arg Leu Lys Thr
115 120 125
Ile Met Lys Glu Lys Tyr Ser Lys Cys
130 135
<210> 121
<211> 132
<212> Белок
<213> Canis lupus familiaris
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(132)
<223> Предшественник IL4 собаки
<400> 121
Met Gly Leu Thr Ser Gln Leu Ile Pro Thr Leu Val Cys Leu Leu Ala
1 5 10 15
Leu Thr Ser Thr Phe Val His Gly His Asn Phe Asn Ile Thr Ile Lys
20 25 30
Glu Ile Ile Lys Met Leu Asn Ile Leu Thr Ala Arg Asn Asp Ser Cys
35 40 45
Met Glu Leu Thr Val Lys Asp Val Phe Thr Ala Pro Lys Asn Thr Ser
50 55 60
Asp Lys Glu Ile Phe Cys Arg Ala Ala Thr Val Leu Arg Gln Ile Tyr
65 70 75 80
Thr His Asn Cys Ser Asn Arg Tyr Leu Arg Gly Leu Tyr Arg Asn Leu
85 90 95
Ser Ser Met Ala Asn Lys Thr Cys Ser Met Asn Glu Ile Lys Lys Ser
100 105 110
Thr Leu Lys Asp Phe Leu Glu Arg Leu Lys Val Ile Met Gln Lys Lys
115 120 125
Tyr Tyr Arg His
130
<210> 122
<211> 133
<212> Белок
<213> Felis catus
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(133)
<223> Предшественник IL4 кошки
<400> 122
Met Asp Leu Thr Ser Gln Leu Ile Pro Ala Leu Val Cys Leu Leu Ala
1 5 10 15
Phe Thr Ser Thr Phe Val His Gly Gln Asn Phe Asn Asn Thr Leu Lys
20 25 30
Glu Ile Ile Lys Thr Leu Asn Ile Leu Thr Ala Arg Asn Asp Ser Cys
35 40 45
Met Glu Leu Thr Val Met Asp Val Leu Ala Ala Pro Lys Asn Thr Ser
50 55 60
Asp Lys Glu Ile Phe Cys Arg Ala Thr Thr Val Leu Arg Gln Ile Tyr
65 70 75 80
Thr His His Asn Cys Ser Thr Lys Phe Leu Lys Gly Leu Asp Arg Asn
85 90 95
Leu Ser Ser Met Ala Asn Arg Thr Cys Ser Val Asn Glu Val Lys Lys
100 105 110
Cys Thr Leu Lys Asp Phe Leu Glu Arg Leu Lys Ala Ile Met Gln Lys
115 120 125
Lys Tyr Ser Lys His
130
<210> 123
<211> 139
<212> Белок
<213> Equus przewalskii
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(139)
<223> Предсказанный предшественник IL4 лошади
<400> 123
Met Gly Leu Ile Ser Gln Leu Ile Pro Ala Leu Val Cys Leu Leu Ala
1 5 10 15
Cys Thr Ser Asn Phe Ile Gln Gly Cys Lys Tyr Asp Ile Thr Leu Gln
20 25 30
Glu Ile Ile Lys Thr Leu Asn Asn Leu Thr Asp Gly Lys Gly Lys Asn
35 40 45
Ser Cys Met Glu Leu Thr Val Ala Asp Ala Phe Ala Gly Pro Lys Asn
50 55 60
Thr Asp Gly Lys Glu Ile Cys Arg Ala Ala Lys Val Leu Gln Gln Leu
65 70 75 80
Tyr Lys Arg His Asp Arg Ser Leu Ile Lys Glu Cys Leu Ser Gly Leu
85 90 95
Asp Arg Asn Leu Lys Gly Met Ala Asn Gly Thr Cys Cys Thr Val Asn
100 105 110
Glu Ala Lys Lys Ser Thr Leu Lys Asp Phe Leu Glu Arg Leu Lys Thr
115 120 125
Ile Met Lys Glu Lys Tyr Ser Lys Cys Gln Ser
130 135
<210> 124
<211> 151
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: собачий IL4_N-His6 с лидерной последовательностью
<400> 124
Met Gly Leu Thr Ser Gln Leu Ile Pro Thr Leu Val Cys Leu Leu Ala
1 5 10 15
Leu Thr Ser Thr Phe Val His Gly Ser Ser His His His His His His
20 25 30
Ser Ser Gly Leu Val Pro Arg Gly Ser His Met His Asn Phe Asn Ile
35 40 45
Thr Ile Lys Glu Ile Ile Lys Met Leu Asn Ile Leu Thr Ala Arg Asn
50 55 60
Asp Ser Cys Met Glu Leu Thr Val Lys Asp Val Phe Thr Ala Pro Lys
65 70 75 80
Asn Thr Ser Asp Lys Glu Ile Phe Cys Arg Ala Ala Thr Val Leu Arg
85 90 95
Gln Ile Tyr Thr His Asn Cys Ser Asn Arg Tyr Leu Arg Gly Leu Tyr
100 105 110
Arg Asn Leu Ser Ser Met Ala Asn Lys Thr Cys Ser Met Asn Glu Ile
115 120 125
Lys Lys Ser Thr Leu Lys Asp Phe Leu Glu Arg Leu Lys Val Ile Met
130 135 140
Gln Lys Lys Tyr Tyr Arg His
145 150
<210> 125
<211> 126
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: собачий IL4_N-His6
<400> 125
Ser His His His His His His Ser Ser Gly Leu Val Pro Arg Gly Ser
1 5 10 15
His Met His Asn Phe Asn Ile Thr Ile Lys Glu Ile Ile Lys Met Leu
20 25 30
Asn Ile Leu Thr Ala Arg Asn Asp Ser Cys Met Glu Leu Thr Val Lys
35 40 45
Asp Val Phe Thr Ala Pro Lys Asn Thr Ser Asp Lys Glu Ile Phe Cys
50 55 60
Arg Ala Ala Thr Val Leu Arg Gln Ile Tyr Thr His Asn Cys Ser Asn
65 70 75 80
Arg Tyr Leu Arg Gly Leu Tyr Arg Asn Leu Ser Ser Met Ala Asn Lys
85 90 95
Thr Cys Ser Met Asn Glu Ile Lys Lys Ser Thr Leu Lys Asp Phe Leu
100 105 110
Glu Arg Leu Lys Val Ile Met Gln Lys Lys Tyr Tyr Arg His
115 120 125
<210> 126
<211> 137
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: собачий IL4_C-His6 с лидерной последовательностью
<400> 126
Met Gly Leu Thr Ser Gln Leu Ile Pro Thr Leu Val Cys Leu Leu Ala
1 5 10 15
Leu Thr Ser Thr Phe Val His Gly His Asn Phe Asn Ile Thr Ile Lys
20 25 30
Glu Ile Ile Lys Met Leu Asn Ile Leu Thr Ala Arg Asn Asp Ser Cys
35 40 45
Met Glu Leu Thr Val Lys Asp Val Phe Thr Ala Pro Lys Asn Thr Ser
50 55 60
Asp Lys Glu Ile Phe Cys Arg Ala Ala Thr Val Leu Arg Gln Ile Tyr
65 70 75 80
Thr His Asn Cys Ser Asn Arg Tyr Leu Arg Gly Leu Tyr Arg Asn Leu
85 90 95
Ser Ser Met Ala Asn Lys Thr Cys Ser Met Asn Glu Ile Lys Lys Ser
100 105 110
Thr Leu Lys Asp Phe Leu Glu Arg Leu Lys Val Ile Met Gln Lys Lys
115 120 125
Tyr Tyr Arg His His His His His His
130 135
<210> 127
<211> 117
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: собачий IL4_C-His6
<400> 127
His Asn Phe Asn Ile Thr Ile Lys Glu Ile Ile Lys Met Leu Asn Ile
1 5 10 15
Leu Thr Ala Arg Asn Asp Ser Cys Met Glu Leu Thr Val Lys Asp Val
20 25 30
Phe Thr Ala Pro Lys Asn Thr Ser Asp Lys Glu Ile Phe Cys Arg Ala
35 40 45
Ala Thr Val Leu Arg Gln Ile Tyr Thr His Asn Cys Ser Asn Arg Tyr
50 55 60
Leu Arg Gly Leu Tyr Arg Asn Leu Ser Ser Met Ala Asn Lys Thr Cys
65 70 75 80
Ser Met Asn Glu Ile Lys Lys Ser Thr Leu Lys Asp Phe Leu Glu Arg
85 90 95
Leu Lys Val Ile Met Gln Lys Lys Tyr Tyr Arg Gly Ser Gly Ser His
100 105 110
His His His His His
115
<210> 128
<211> 143
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: кошачий IL4_C-His6 с лидерной последовательностью
<400> 128
Met Asp Leu Thr Ser Gln Leu Ile Pro Ala Leu Val Cys Leu Leu Ala
1 5 10 15
Phe Thr Ser Thr Phe Val His Gly Gln Asn Phe Asn Asn Thr Leu Lys
20 25 30
Glu Ile Ile Lys Thr Leu Asn Ile Leu Thr Ala Arg Asn Asp Ser Cys
35 40 45
Met Glu Leu Thr Val Met Asp Val Leu Ala Ala Pro Lys Asn Thr Ser
50 55 60
Asp Lys Glu Ile Phe Cys Arg Ala Thr Thr Val Leu Arg Gln Ile Tyr
65 70 75 80
Thr His His Asn Cys Ser Thr Lys Phe Leu Lys Gly Leu Asp Arg Asn
85 90 95
Leu Ser Ser Met Ala Asn Arg Thr Cys Ser Val Asn Glu Val Lys Lys
100 105 110
Cys Thr Leu Lys Asp Phe Leu Glu Arg Leu Lys Ala Ile Met Gln Lys
115 120 125
Lys Tyr Ser Lys His Gly Ser Gly Ser His His His His His His
130 135 140
<210> 129
<211> 119
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: кошачий IL4_C-His6
<400> 129
Gln Asn Phe Asn Asn Thr Leu Lys Glu Ile Ile Lys Thr Leu Asn Ile
1 5 10 15
Leu Thr Ala Arg Asn Asp Ser Cys Met Glu Leu Thr Val Met Asp Val
20 25 30
Leu Ala Ala Pro Lys Asn Thr Ser Asp Lys Glu Ile Phe Cys Arg Ala
35 40 45
Thr Thr Val Leu Arg Gln Ile Tyr Thr His His Asn Cys Ser Thr Lys
50 55 60
Phe Leu Lys Gly Leu Asp Arg Asn Leu Ser Ser Met Ala Asn Arg Thr
65 70 75 80
Cys Ser Val Asn Glu Val Lys Lys Cys Thr Leu Lys Asp Phe Leu Glu
85 90 95
Arg Leu Lys Ala Ile Met Gln Lys Lys Tyr Ser Lys His Gly Ser Gly
100 105 110
Ser His His His His His His
115
<210> 130
<211> 148
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: лошадиный IL4_C-His6 с лидерной последовательностью
<400> 130
Met Gly Leu Ile Ser Gln Leu Ile Pro Ala Leu Val Cys Leu Leu Ala
1 5 10 15
Cys Thr Ser Asn Phe Ile Gln Gly Cys Lys Tyr Asp Ile Thr Leu Gln
20 25 30
Glu Ile Ile Lys Thr Leu Asn Asn Leu Thr Asp Gly Lys Gly Lys Asn
35 40 45
Ser Cys Met Glu Leu Thr Val Ala Asp Ala Phe Ala Gly Pro Lys Asn
50 55 60
Thr Asp Gly Lys Glu Ile Cys Arg Ala Ala Lys Val Leu Gln Gln Leu
65 70 75 80
Tyr Lys Arg His Asp Arg Ser Leu Ile Lys Glu Cys Leu Ser Gly Leu
85 90 95
Asp Arg Asn Leu Lys Gly Met Ala Asn Gly Thr Cys Cys Thr Val Asn
100 105 110
Glu Ala Lys Lys Ser Thr Leu Lys Asp Phe Leu Glu Arg Leu Lys Thr
115 120 125
Ile Met Lys Glu Lys Tyr Ser Lys Cys Gln Gly Ser Gly Ser His His
130 135 140
His His His His
145
<210> 131
<211> 124
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: лошадиный IL4_C-His6
<400> 131
Cys Lys Tyr Asp Ile Thr Leu Gln Glu Ile Ile Lys Thr Leu Asn Asn
1 5 10 15
Leu Thr Asp Gly Lys Gly Lys Asn Ser Cys Met Glu Leu Thr Val Ala
20 25 30
Asp Ala Phe Ala Gly Pro Lys Asn Thr Asp Gly Lys Glu Ile Cys Arg
35 40 45
Ala Ala Lys Val Leu Gln Gln Leu Tyr Lys Arg His Asp Arg Ser Leu
50 55 60
Ile Lys Glu Cys Leu Ser Gly Leu Asp Arg Asn Leu Lys Gly Met Ala
65 70 75 80
Asn Gly Thr Cys Cys Thr Val Asn Glu Ala Lys Lys Ser Thr Leu Lys
85 90 95
Asp Phe Leu Glu Arg Leu Lys Thr Ile Met Lys Glu Lys Tyr Ser Lys
100 105 110
Cys Gln Gly Ser Gly Ser His His His His His His
115 120
<210> 132
<211> 22
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: иллюстративная лидерная последовательность
<400> 132
Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp
1 5 10 15
Leu Arg Gly Ala Arg Cys
20
<210> 133
<211> 455
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: IL4R-ECD_C-HuFc_His6_Fusion1 собаки/человека
(слитый белок 1)
<400> 133
Gly Ser Val Lys Val Leu His Glu Pro Ser Cys Phe Ser Asp Tyr Ile
1 5 10 15
Ser Thr Ser Val Cys Gln Trp Lys Met Asp His Pro Thr Asn Cys Ser
20 25 30
Ala Glu Leu Arg Leu Ser Tyr Gln Leu Asp Phe Met Gly Ser Glu Asn
35 40 45
His Thr Cys Val Pro Glu Asn Asn Gly Gly Ala Gly Cys Val Cys His
50 55 60
Leu Leu Met Asp Asp Val Val Ser Ala Asp Asn Tyr Thr Leu Asp Leu
65 70 75 80
Trp Ala Gly Gln Gln Leu Leu Trp Lys Gly Ser Phe Lys Pro Ser Glu
85 90 95
His Val Lys Pro Arg Ala Pro Gly Asn Leu Thr Val His Thr Asn Val
100 105 110
Ser Asp Thr Leu Leu Leu Thr Trp Ser Asn Pro Tyr Pro Pro Asp Asn
115 120 125
Tyr Leu Tyr Asn His Leu Thr Tyr Ala Val Asn Ile Trp Ser Glu Asn
130 135 140
Asp Pro Ala Asp Phe Arg Ile Tyr Asn Val Thr Tyr Leu Glu Pro Ser
145 150 155 160
Leu Arg Ile Ala Ala Ser Thr Leu Lys Ser Gly Ile Ser Tyr Arg Ala
165 170 175
Arg Val Arg Ala Trp Ala Gln Cys Tyr Asn Thr Thr Trp Ser Glu Trp
180 185 190
Ser Pro Ser Thr Lys Trp His Asn Ser Tyr Arg Glu Pro Phe Glu Gln
195 200 205
His Gly Ser Glu Asn Leu Tyr Phe Gln Gly Pro Lys Ser Cys Asp Lys
210 215 220
Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro
225 230 235 240
Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser
245 250 255
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp
260 265 270
Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn
275 280 285
Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val
290 295 300
Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu
305 310 315 320
Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys
325 330 335
Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr
340 345 350
Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr
355 360 365
Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu
370 375 380
Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu
385 390 395 400
Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys
405 410 415
Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu
420 425 430
Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
435 440 445
Lys His His His His His His
450 455
<210> 134
<211> 455
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: IL4R-ECD_C-HuFc_His6_Fusion2 собаки/человека
(слитый белок 2)
<400> 134
Gly Asn Met Lys Val Leu Gln Glu Pro Thr Cys Val Ser Asp Tyr Met
1 5 10 15
Ser Ile Ser Thr Cys Glu Trp Lys Met Asn Gly Pro Thr Asn Cys Ser
20 25 30
Thr Glu Leu Arg Leu Leu Tyr Gln Leu Val Phe Leu Leu Ser Glu Ala
35 40 45
His Thr Cys Ile Pro Glu Asn Arg Glu Asp Ser Val Cys Val Cys Ser
50 55 60
Met Pro Ile Asp Asp Ala Val Glu Ala Asp Val Tyr Gln Leu Asp Leu
65 70 75 80
Trp Ala Gly Gln Gln Leu Leu Trp Ser Gly Ser Phe Gln Pro Ser Lys
85 90 95
His Val Lys Pro Arg Thr Pro Gly Asn Leu Thr Val His Thr Asn Val
100 105 110
Ser Asp Thr Leu Leu Leu Thr Trp Ser Asn Pro Tyr Pro Pro Asp Asn
115 120 125
Tyr Leu Tyr Asn His Leu Thr Tyr Ala Val Asn Ile Trp Ser Glu Asn
130 135 140
Asp Pro Ala Asp Phe Arg Ile Tyr Asn Val Thr Tyr Leu Glu Pro Ser
145 150 155 160
Leu Arg Ile Ala Ala Ser Thr Leu Lys Ser Gly Ile Ser Tyr Arg Ala
165 170 175
Arg Val Arg Ala Trp Ala Gln Cys Tyr Asn Thr Thr Trp Ser Glu Trp
180 185 190
Ser Pro Ser Thr Lys Trp His Asn Ser Tyr Arg Glu Pro Phe Glu Gln
195 200 205
His Gly Ser Glu Asn Leu Tyr Phe Gln Gly Pro Lys Ser Cys Asp Lys
210 215 220
Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro
225 230 235 240
Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser
245 250 255
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp
260 265 270
Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn
275 280 285
Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val
290 295 300
Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu
305 310 315 320
Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys
325 330 335
Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr
340 345 350
Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr
355 360 365
Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu
370 375 380
Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu
385 390 395 400
Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys
405 410 415
Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu
420 425 430
Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
435 440 445
Lys His His His His His His
450 455
<210> 135
<211> 450
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: IL4R-ECD_C-HuFc_His6_Fusion3 собаки/человека
(слитый белок 3)
<400> 135
Gly Asn Met Lys Val Leu Gln Glu Pro Thr Cys Val Ser Asp Tyr Met
1 5 10 15
Ser Ile Ser Thr Cys Glu Trp Lys Met Asn Gly Pro Thr Asn Cys Ser
20 25 30
Thr Glu Leu Arg Leu Leu Tyr Gln Leu Val Phe Leu Leu Ser Glu Ala
35 40 45
His Thr Cys Ile Pro Glu Asn Asn Gly Gly Ala Gly Cys Val Cys His
50 55 60
Leu Leu Met Asp Asp Val Val Ser Ala Asp Asn Tyr Thr Leu Asp Leu
65 70 75 80
Trp Ala Gly Gln Gln Leu Leu Trp Lys Gly Ser Phe Lys Pro Ser Glu
85 90 95
His Val Lys Pro Arg Ala Pro Gly Asn Leu Thr Val His Pro Asn Ile
100 105 110
Ser His Thr Trp Leu Leu Met Trp Thr Asn Pro Tyr Pro Thr Glu Asn
115 120 125
His Leu His Ser Glu Leu Thr Tyr Met Val Asn Val Ser Asn Asp Asn
130 135 140
Asp Pro Glu Asp Phe Lys Val Tyr Asn Val Thr Tyr Met Gly Pro Thr
145 150 155 160
Leu Arg Leu Ala Ala Ser Thr Leu Lys Ser Gly Ala Ser Tyr Ser Ala
165 170 175
Arg Val Arg Ala Trp Ala Gln Thr Tyr Asn Ser Thr Trp Ser Asp Trp
180 185 190
Ser Pro Ser Thr Thr Trp Leu Asn Tyr Tyr Glu Pro Gly Ser Glu Asn
195 200 205
Leu Tyr Phe Gln Gly Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro
210 215 220
Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe
225 230 235 240
Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val
245 250 255
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe
260 265 270
Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
275 280 285
Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr
290 295 300
Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
305 310 315 320
Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
325 330 335
Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg
340 345 350
Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
355 360 365
Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
370 375 380
Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
385 390 395 400
Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln
405 410 415
Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
420 425 430
Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys His His His His
435 440 445
His His
450
<210> 136
<211> 455
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: IL4R-ECD_C-HuFc_His6_Fusion4 собаки/человека
(слитый белок 4)
<400> 136
Gly Ser Val Lys Val Leu His Glu Pro Ser Cys Phe Ser Asp Tyr Ile
1 5 10 15
Ser Thr Ser Val Cys Gln Trp Lys Met Asp His Pro Thr Asn Cys Ser
20 25 30
Ala Glu Leu Arg Leu Ser Tyr Gln Leu Asp Phe Met Gly Ser Glu Asn
35 40 45
His Thr Cys Val Pro Glu Asn Arg Glu Asp Ser Val Cys Val Cys Ser
50 55 60
Met Pro Ile Asp Asp Ala Val Glu Ala Asp Val Tyr Gln Leu Asp Leu
65 70 75 80
Trp Ala Gly Gln Gln Leu Leu Trp Ser Gly Ser Phe Gln Pro Ser Lys
85 90 95
His Val Lys Pro Arg Thr Pro Gly Asn Leu Thr Val His Thr Asn Val
100 105 110
Ser Asp Thr Leu Leu Leu Thr Trp Ser Asn Pro Tyr Pro Pro Asp Asn
115 120 125
Tyr Leu Tyr Asn His Leu Thr Tyr Ala Val Asn Ile Trp Ser Glu Asn
130 135 140
Asp Pro Ala Asp Phe Arg Ile Tyr Asn Val Thr Tyr Leu Glu Pro Ser
145 150 155 160
Leu Arg Ile Ala Ala Ser Thr Leu Lys Ser Gly Ile Ser Tyr Arg Ala
165 170 175
Arg Val Arg Ala Trp Ala Gln Cys Tyr Asn Thr Thr Trp Ser Glu Trp
180 185 190
Ser Pro Ser Thr Lys Trp His Asn Ser Tyr Arg Glu Pro Phe Glu Gln
195 200 205
His Gly Ser Glu Asn Leu Tyr Phe Gln Gly Pro Lys Ser Cys Asp Lys
210 215 220
Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro
225 230 235 240
Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser
245 250 255
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp
260 265 270
Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn
275 280 285
Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val
290 295 300
Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu
305 310 315 320
Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys
325 330 335
Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr
340 345 350
Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr
355 360 365
Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu
370 375 380
Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu
385 390 395 400
Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys
405 410 415
Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu
420 425 430
Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
435 440 445
Lys His His His His His His
450 455
<210> 137
<211> 450
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: IL4R-ECD_C-HuFc_His6_Fusion5 собаки/человека
(слитый белок 5)
<400> 137
Gly Asn Met Lys Val Leu Gln Glu Pro Thr Cys Val Ser Asp Tyr Met
1 5 10 15
Ser Ile Ser Thr Cys Glu Trp Lys Met Asn Gly Pro Thr Asn Cys Ser
20 25 30
Thr Glu Leu Arg Leu Leu Tyr Gln Leu Val Phe Leu Leu Ser Glu Ala
35 40 45
His Thr Cys Ile Pro Glu Asn Arg Glu Asp Ser Val Cys Val Cys Ser
50 55 60
Met Pro Ile Asp Asp Ala Val Glu Ala Asp Val Tyr Gln Leu Asp Leu
65 70 75 80
Trp Ala Gly Gln Gln Leu Leu Trp Ser Gly Ser Phe Gln Pro Ser Lys
85 90 95
His Val Lys Pro Arg Thr Pro Gly Asn Leu Thr Val His Pro Asn Ile
100 105 110
Ser His Thr Trp Leu Leu Met Trp Thr Asn Pro Tyr Pro Thr Glu Asn
115 120 125
His Leu His Ser Glu Leu Thr Tyr Met Val Asn Val Ser Asn Asp Asn
130 135 140
Asp Pro Glu Asp Phe Lys Val Tyr Asn Val Thr Tyr Met Gly Pro Thr
145 150 155 160
Leu Arg Leu Ala Ala Ser Thr Leu Lys Ser Gly Ala Ser Tyr Ser Ala
165 170 175
Arg Val Arg Ala Trp Ala Gln Thr Tyr Asn Ser Thr Trp Ser Asp Trp
180 185 190
Ser Pro Ser Thr Thr Trp Leu Asn Tyr Tyr Glu Pro Gly Ser Glu Asn
195 200 205
Leu Tyr Phe Gln Gly Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro
210 215 220
Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe
225 230 235 240
Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val
245 250 255
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe
260 265 270
Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
275 280 285
Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr
290 295 300
Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
305 310 315 320
Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
325 330 335
Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg
340 345 350
Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
355 360 365
Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
370 375 380
Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
385 390 395 400
Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln
405 410 415
Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
420 425 430
Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys His His His His
435 440 445
His His
450
<210> 138
<211> 450
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: IL4R-ECD_C-HuFc_His6_Fusion6 собаки/человека
(слитый белок 6)
<400> 138
Gly Ser Val Lys Val Leu His Glu Pro Ser Cys Phe Ser Asp Tyr Ile
1 5 10 15
Ser Thr Ser Val Cys Gln Trp Lys Met Asp His Pro Thr Asn Cys Ser
20 25 30
Ala Glu Leu Arg Leu Ser Tyr Gln Leu Asp Phe Met Gly Ser Glu Asn
35 40 45
His Thr Cys Val Pro Glu Asn Asn Gly Gly Ala Gly Cys Val Cys His
50 55 60
Leu Leu Met Asp Asp Val Val Ser Ala Asp Asn Tyr Thr Leu Asp Leu
65 70 75 80
Trp Ala Gly Gln Gln Leu Leu Trp Lys Gly Ser Phe Lys Pro Ser Glu
85 90 95
His Val Lys Pro Arg Ala Pro Gly Asn Leu Thr Val His Pro Asn Ile
100 105 110
Ser His Thr Trp Leu Leu Met Trp Thr Asn Pro Tyr Pro Thr Glu Asn
115 120 125
His Leu His Ser Glu Leu Thr Tyr Met Val Asn Val Ser Asn Asp Asn
130 135 140
Asp Pro Glu Asp Phe Lys Val Tyr Asn Val Thr Tyr Met Gly Pro Thr
145 150 155 160
Leu Arg Leu Ala Ala Ser Thr Leu Lys Ser Gly Ala Ser Tyr Ser Ala
165 170 175
Arg Val Arg Ala Trp Ala Gln Thr Tyr Asn Ser Thr Trp Ser Asp Trp
180 185 190
Ser Pro Ser Thr Thr Trp Leu Asn Tyr Tyr Glu Pro Gly Ser Glu Asn
195 200 205
Leu Tyr Phe Gln Gly Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro
210 215 220
Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe
225 230 235 240
Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val
245 250 255
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe
260 265 270
Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
275 280 285
Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr
290 295 300
Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
305 310 315 320
Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
325 330 335
Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg
340 345 350
Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
355 360 365
Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
370 375 380
Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
385 390 395 400
Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln
405 410 415
Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
420 425 430
Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys His His His His
435 440 445
His His
450
<210> 139
<211> 450
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: IL4R-ECD_C-HuFc_His6_Fusion7 собаки/человека
(слитый белок 7)
<400> 139
Gly Asn Met Lys Val Leu Gln Glu Pro Thr Cys Val Ser Asp Tyr Met
1 5 10 15
Ser Ile Ser Thr Cys Glu Trp Lys Met Asn Gly Pro Thr Asn Cys Ser
20 25 30
Ala Glu Leu Arg Leu Ser Tyr Gln Leu Asp Phe Met Gly Ser Glu Asn
35 40 45
His Thr Cys Val Pro Glu Asn Arg Glu Asp Ser Val Cys Val Cys Ser
50 55 60
Met Pro Ile Asp Asp Ala Val Glu Ala Asp Val Tyr Gln Leu Asp Leu
65 70 75 80
Trp Ala Gly Gln Gln Leu Leu Trp Ser Gly Ser Phe Gln Pro Ser Lys
85 90 95
His Val Lys Pro Arg Thr Pro Gly Asn Leu Thr Val His Pro Asn Ile
100 105 110
Ser His Thr Trp Leu Leu Met Trp Thr Asn Pro Tyr Pro Thr Glu Asn
115 120 125
His Leu His Ser Glu Leu Thr Tyr Met Val Asn Val Ser Asn Asp Asn
130 135 140
Asp Pro Glu Asp Phe Lys Val Tyr Asn Val Thr Tyr Met Gly Pro Thr
145 150 155 160
Leu Arg Leu Ala Ala Ser Thr Leu Lys Ser Gly Ala Ser Tyr Ser Ala
165 170 175
Arg Val Arg Ala Trp Ala Gln Thr Tyr Asn Ser Thr Trp Ser Asp Trp
180 185 190
Ser Pro Ser Thr Thr Trp Leu Asn Tyr Tyr Glu Pro Gly Ser Glu Asn
195 200 205
Leu Tyr Phe Gln Gly Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro
210 215 220
Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe
225 230 235 240
Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val
245 250 255
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe
260 265 270
Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
275 280 285
Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr
290 295 300
Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
305 310 315 320
Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
325 330 335
Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg
340 345 350
Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
355 360 365
Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
370 375 380
Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
385 390 395 400
Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln
405 410 415
Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
420 425 430
Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys His His His His
435 440 445
His His
450
<210> 140
<211> 450
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: IL4R-ECD_C-HuFc_His6_Fusion8 собаки/человека
(слитый белок 8)
<400> 140
Gly Ser Val Lys Val Leu His Glu Pro Ser Cys Phe Ser Asp Tyr Ile
1 5 10 15
Ser Thr Ser Val Cys Gln Trp Lys Met Asp His Pro Thr Asn Cys Ser
20 25 30
Thr Glu Leu Arg Leu Leu Tyr Gln Leu Val Phe Leu Leu Ser Glu Ala
35 40 45
His Thr Cys Ile Pro Glu Asn Arg Glu Asp Ser Val Cys Val Cys Ser
50 55 60
Met Pro Ile Asp Asp Ala Val Glu Ala Asp Val Tyr Gln Leu Asp Leu
65 70 75 80
Trp Ala Gly Gln Gln Leu Leu Trp Ser Gly Ser Phe Gln Pro Ser Lys
85 90 95
His Val Lys Pro Arg Thr Pro Gly Asn Leu Thr Val His Pro Asn Ile
100 105 110
Ser His Thr Trp Leu Leu Met Trp Thr Asn Pro Tyr Pro Thr Glu Asn
115 120 125
His Leu His Ser Glu Leu Thr Tyr Met Val Asn Val Ser Asn Asp Asn
130 135 140
Asp Pro Glu Asp Phe Lys Val Tyr Asn Val Thr Tyr Met Gly Pro Thr
145 150 155 160
Leu Arg Leu Ala Ala Ser Thr Leu Lys Ser Gly Ala Ser Tyr Ser Ala
165 170 175
Arg Val Arg Ala Trp Ala Gln Thr Tyr Asn Ser Thr Trp Ser Asp Trp
180 185 190
Ser Pro Ser Thr Thr Trp Leu Asn Tyr Tyr Glu Pro Gly Ser Glu Asn
195 200 205
Leu Tyr Phe Gln Gly Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro
210 215 220
Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe
225 230 235 240
Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val
245 250 255
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe
260 265 270
Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
275 280 285
Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr
290 295 300
Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
305 310 315 320
Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
325 330 335
Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg
340 345 350
Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
355 360 365
Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
370 375 380
Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
385 390 395 400
Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln
405 410 415
Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
420 425 430
Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys His His His His
435 440 445
His His
450
<210> 141
<211> 450
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: IL4R-ECD_C-HuFc_His6_Fusion9 собаки/человека
(слитый белок 9)
<400> 141
Gly Ser Val Lys Val Leu His Glu Pro Ser Cys Phe Ser Asp Tyr Ile
1 5 10 15
Ser Thr Ser Val Cys Gln Trp Lys Met Asp His Pro Thr Asn Cys Ser
20 25 30
Thr Glu Leu Arg Leu Leu Tyr Gln Leu Asp Phe Met Gly Ser Glu Asn
35 40 45
His Thr Cys Val Pro Glu Asn Arg Glu Asp Ser Val Cys Val Cys Ser
50 55 60
Met Pro Ile Asp Asp Ala Val Glu Ala Asp Val Tyr Gln Leu Asp Leu
65 70 75 80
Trp Ala Gly Gln Gln Leu Leu Trp Ser Gly Ser Phe Gln Pro Ser Lys
85 90 95
His Val Lys Pro Arg Thr Pro Gly Asn Leu Thr Val His Pro Asn Ile
100 105 110
Ser His Thr Trp Leu Leu Met Trp Thr Asn Pro Tyr Pro Thr Glu Asn
115 120 125
His Leu His Ser Glu Leu Thr Tyr Met Val Asn Val Ser Asn Asp Asn
130 135 140
Asp Pro Glu Asp Phe Lys Val Tyr Asn Val Thr Tyr Met Gly Pro Thr
145 150 155 160
Leu Arg Leu Ala Ala Ser Thr Leu Lys Ser Gly Ala Ser Tyr Ser Ala
165 170 175
Arg Val Arg Ala Trp Ala Gln Thr Tyr Asn Ser Thr Trp Ser Asp Trp
180 185 190
Ser Pro Ser Thr Thr Trp Leu Asn Tyr Tyr Glu Pro Gly Ser Glu Asn
195 200 205
Leu Tyr Phe Gln Gly Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro
210 215 220
Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe
225 230 235 240
Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val
245 250 255
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe
260 265 270
Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
275 280 285
Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr
290 295 300
Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
305 310 315 320
Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
325 330 335
Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg
340 345 350
Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
355 360 365
Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
370 375 380
Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
385 390 395 400
Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln
405 410 415
Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
420 425 430
Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys His His His His
435 440 445
His His
450
<210> 142
<211> 450
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: IL4R-ECD_C HuFc_His6_ Fusion10 собаки/человека
(слитый белок 10)
<400> 142
Gly Ser Val Lys Val Leu His Glu Pro Ser Cys Phe Ser Asp Tyr Ile
1 5 10 15
Ser Thr Ser Val Cys Gln Trp Lys Met Asp His Pro Thr Asn Cys Ser
20 25 30
Ala Glu Leu Arg Leu Ser Tyr Gln Leu Val Phe Leu Leu Ser Glu Ala
35 40 45
His Thr Cys Ile Pro Glu Asn Arg Glu Asp Ser Val Cys Val Cys Ser
50 55 60
Met Pro Ile Asp Asp Ala Val Glu Ala Asp Val Tyr Gln Leu Asp Leu
65 70 75 80
Trp Ala Gly Gln Gln Leu Leu Trp Ser Gly Ser Phe Gln Pro Ser Lys
85 90 95
His Val Lys Pro Arg Thr Pro Gly Asn Leu Thr Val His Pro Asn Ile
100 105 110
Ser His Thr Trp Leu Leu Met Trp Thr Asn Pro Tyr Pro Thr Glu Asn
115 120 125
His Leu His Ser Glu Leu Thr Tyr Met Val Asn Val Ser Asn Asp Asn
130 135 140
Asp Pro Glu Asp Phe Lys Val Tyr Asn Val Thr Tyr Met Gly Pro Thr
145 150 155 160
Leu Arg Leu Ala Ala Ser Thr Leu Lys Ser Gly Ala Ser Tyr Ser Ala
165 170 175
Arg Val Arg Ala Trp Ala Gln Thr Tyr Asn Ser Thr Trp Ser Asp Trp
180 185 190
Ser Pro Ser Thr Thr Trp Leu Asn Tyr Tyr Glu Pro Gly Ser Glu Asn
195 200 205
Leu Tyr Phe Gln Gly Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro
210 215 220
Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe
225 230 235 240
Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val
245 250 255
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe
260 265 270
Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
275 280 285
Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr
290 295 300
Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
305 310 315 320
Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
325 330 335
Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg
340 345 350
Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
355 360 365
Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
370 375 380
Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
385 390 395 400
Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln
405 410 415
Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
420 425 430
Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys His His His His
435 440 445
His His
450
<210> 143
<211> 450
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: IL4R-ECD_C-HuFc_His6_Fusion11 собаки/человека
(слитый белок 11)
<400> 143
Gly Ser Val Lys Val Leu His Glu Pro Ser Cys Phe Ser Asp Tyr Ile
1 5 10 15
Ser Thr Ser Val Cys Gln Trp Lys Met Asp His Pro Thr Asn Cys Ser
20 25 30
Ala Glu Leu Arg Leu Ser Tyr Gln Leu Asp Phe Met Gly Ser Glu Asn
35 40 45
His Thr Cys Val Pro Glu Asn Asn Gly Gly Ala Gly Cys Val Cys His
50 55 60
Leu Leu Met Asp Asp Val Val Glu Ala Asp Val Tyr Gln Leu Asp Leu
65 70 75 80
Trp Ala Gly Gln Gln Leu Leu Trp Ser Gly Ser Phe Gln Pro Ser Lys
85 90 95
His Val Lys Pro Arg Thr Pro Gly Asn Leu Thr Val His Pro Asn Ile
100 105 110
Ser His Thr Trp Leu Leu Met Trp Thr Asn Pro Tyr Pro Thr Glu Asn
115 120 125
His Leu His Ser Glu Leu Thr Tyr Met Val Asn Val Ser Asn Asp Asn
130 135 140
Asp Pro Glu Asp Phe Lys Val Tyr Asn Val Thr Tyr Met Gly Pro Thr
145 150 155 160
Leu Arg Leu Ala Ala Ser Thr Leu Lys Ser Gly Ala Ser Tyr Ser Ala
165 170 175
Arg Val Arg Ala Trp Ala Gln Thr Tyr Asn Ser Thr Trp Ser Asp Trp
180 185 190
Ser Pro Ser Thr Thr Trp Leu Asn Tyr Tyr Glu Pro Gly Ser Glu Asn
195 200 205
Leu Tyr Phe Gln Gly Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro
210 215 220
Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe
225 230 235 240
Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val
245 250 255
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe
260 265 270
Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
275 280 285
Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr
290 295 300
Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
305 310 315 320
Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
325 330 335
Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg
340 345 350
Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
355 360 365
Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
370 375 380
Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
385 390 395 400
Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln
405 410 415
Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
420 425 430
Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys His His His His
435 440 445
His His
450
<210> 144
<211> 450
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: IL4R-ECD_C-HuFc_His6_Fusion12 собаки/человека
(слитый белок 12)
<400> 144
Gly Ser Val Lys Val Leu His Glu Pro Ser Cys Phe Ser Asp Tyr Ile
1 5 10 15
Ser Thr Ser Val Cys Gln Trp Lys Met Asp His Pro Thr Asn Cys Ser
20 25 30
Ala Glu Leu Arg Leu Ser Tyr Gln Leu Asp Phe Met Gly Ser Glu Asn
35 40 45
His Thr Cys Val Pro Glu Asn Arg Glu Asp Ser Val Cys Val Cys Ser
50 55 60
Met Pro Ile Asp Asp Ala Val Ser Ala Asp Asn Tyr Thr Leu Asp Leu
65 70 75 80
Trp Ala Gly Gln Gln Leu Leu Trp Lys Gly Ser Phe Gln Pro Ser Lys
85 90 95
His Val Lys Pro Arg Thr Pro Gly Asn Leu Thr Val His Pro Asn Ile
100 105 110
Ser His Thr Trp Leu Leu Met Trp Thr Asn Pro Tyr Pro Thr Glu Asn
115 120 125
His Leu His Ser Glu Leu Thr Tyr Met Val Asn Val Ser Asn Asp Asn
130 135 140
Asp Pro Glu Asp Phe Lys Val Tyr Asn Val Thr Tyr Met Gly Pro Thr
145 150 155 160
Leu Arg Leu Ala Ala Ser Thr Leu Lys Ser Gly Ala Ser Tyr Ser Ala
165 170 175
Arg Val Arg Ala Trp Ala Gln Thr Tyr Asn Ser Thr Trp Ser Asp Trp
180 185 190
Ser Pro Ser Thr Thr Trp Leu Asn Tyr Tyr Glu Pro Gly Ser Glu Asn
195 200 205
Leu Tyr Phe Gln Gly Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro
210 215 220
Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe
225 230 235 240
Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val
245 250 255
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe
260 265 270
Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
275 280 285
Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr
290 295 300
Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
305 310 315 320
Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
325 330 335
Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg
340 345 350
Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
355 360 365
Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
370 375 380
Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
385 390 395 400
Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln
405 410 415
Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
420 425 430
Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys His His His His
435 440 445
His His
450
<210> 145
<211> 450
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: IL4R-ECD_C-HuFc_His6_Fusion13 собаки/человека
(слитый белок 13)
<400> 145
Gly Ser Val Lys Val Leu His Glu Pro Ser Cys Phe Ser Asp Tyr Ile
1 5 10 15
Ser Thr Ser Val Cys Gln Trp Lys Met Asp His Pro Thr Asn Cys Ser
20 25 30
Ala Glu Leu Arg Leu Ser Tyr Gln Leu Asp Phe Met Gly Ser Glu Asn
35 40 45
His Thr Cys Val Pro Glu Asn Arg Glu Asp Ser Val Cys Val Cys Ser
50 55 60
Met Pro Ile Asp Asp Ala Val Glu Ala Asp Val Tyr Gln Leu Asp Leu
65 70 75 80
Trp Ala Gly Gln Gln Leu Leu Trp Ser Gly Ser Phe Lys Pro Ser Glu
85 90 95
His Val Lys Pro Arg Ala Pro Gly Asn Leu Thr Val His Pro Asn Ile
100 105 110
Ser His Thr Trp Leu Leu Met Trp Thr Asn Pro Tyr Pro Thr Glu Asn
115 120 125
His Leu His Ser Glu Leu Thr Tyr Met Val Asn Val Ser Asn Asp Asn
130 135 140
Asp Pro Glu Asp Phe Lys Val Tyr Asn Val Thr Tyr Met Gly Pro Thr
145 150 155 160
Leu Arg Leu Ala Ala Ser Thr Leu Lys Ser Gly Ala Ser Tyr Ser Ala
165 170 175
Arg Val Arg Ala Trp Ala Gln Thr Tyr Asn Ser Thr Trp Ser Asp Trp
180 185 190
Ser Pro Ser Thr Thr Trp Leu Asn Tyr Tyr Glu Pro Gly Ser Glu Asn
195 200 205
Leu Tyr Phe Gln Gly Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro
210 215 220
Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe
225 230 235 240
Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val
245 250 255
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe
260 265 270
Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
275 280 285
Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr
290 295 300
Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
305 310 315 320
Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
325 330 335
Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg
340 345 350
Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
355 360 365
Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
370 375 380
Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
385 390 395 400
Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln
405 410 415
Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
420 425 430
Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys His His His His
435 440 445
His His
450
<210> 146
<211> 450
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: IL4R-ECD_C-HuFc_His6_Fusion14 собаки/человека
(слитый белок 14)
<400> 146
Gly Ser Val Lys Val Leu His Glu Pro Ser Cys Phe Ser Asp Tyr Ile
1 5 10 15
Ser Thr Ser Val Cys Gln Trp Lys Met Asp His Pro Thr Asn Cys Ser
20 25 30
Ala Glu Leu Arg Leu Ser Tyr Gln Leu Asp Phe Met Gly Ser Glu Asn
35 40 45
His Thr Cys Val Pro Glu Asn Arg Glu Asp Ser Val Cys Val Cys Ser
50 55 60
Met Pro Ile Asp Asp Val Val Ser Ala Asp Asn Tyr Thr Leu Asp Leu
65 70 75 80
Trp Ala Gly Gln Gln Leu Leu Trp Lys Gly Ser Phe Lys Pro Ser Lys
85 90 95
His Val Lys Pro Arg Thr Pro Gly Asn Leu Thr Val His Pro Asn Ile
100 105 110
Ser His Thr Trp Leu Leu Met Trp Thr Asn Pro Tyr Pro Thr Glu Asn
115 120 125
His Leu His Ser Glu Leu Thr Tyr Met Val Asn Val Ser Asn Asp Asn
130 135 140
Asp Pro Glu Asp Phe Lys Val Tyr Asn Val Thr Tyr Met Gly Pro Thr
145 150 155 160
Leu Arg Leu Ala Ala Ser Thr Leu Lys Ser Gly Ala Ser Tyr Ser Ala
165 170 175
Arg Val Arg Ala Trp Ala Gln Thr Tyr Asn Ser Thr Trp Ser Asp Trp
180 185 190
Ser Pro Ser Thr Thr Trp Leu Asn Tyr Tyr Glu Pro Gly Ser Glu Asn
195 200 205
Leu Tyr Phe Gln Gly Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro
210 215 220
Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe
225 230 235 240
Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val
245 250 255
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe
260 265 270
Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
275 280 285
Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr
290 295 300
Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
305 310 315 320
Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
325 330 335
Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg
340 345 350
Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
355 360 365
Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
370 375 380
Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
385 390 395 400
Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln
405 410 415
Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
420 425 430
Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys His His His His
435 440 445
His His
450
<210> 147
<211> 450
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: собачий IL4R-ECD_C-HuFc_His6.A33T (мутант 1)
<400> 147
Gly Ser Val Lys Val Leu His Glu Pro Ser Cys Phe Ser Asp Tyr Ile
1 5 10 15
Ser Thr Ser Val Cys Gln Trp Lys Met Asp His Pro Thr Asn Cys Ser
20 25 30
Thr Glu Leu Arg Leu Ser Tyr Gln Leu Asp Phe Met Gly Ser Glu Asn
35 40 45
His Thr Cys Val Pro Glu Asn Arg Glu Asp Ser Val Cys Val Cys Ser
50 55 60
Met Pro Ile Asp Asp Ala Val Glu Ala Asp Val Tyr Gln Leu Asp Leu
65 70 75 80
Trp Ala Gly Gln Gln Leu Leu Trp Ser Gly Ser Phe Gln Pro Ser Lys
85 90 95
His Val Lys Pro Arg Thr Pro Gly Asn Leu Thr Val His Pro Asn Ile
100 105 110
Ser His Thr Trp Leu Leu Met Trp Thr Asn Pro Tyr Pro Thr Glu Asn
115 120 125
His Leu His Ser Glu Leu Thr Tyr Met Val Asn Val Ser Asn Asp Asn
130 135 140
Asp Pro Glu Asp Phe Lys Val Tyr Asn Val Thr Tyr Met Gly Pro Thr
145 150 155 160
Leu Arg Leu Ala Ala Ser Thr Leu Lys Ser Gly Ala Ser Tyr Ser Ala
165 170 175
Arg Val Arg Ala Trp Ala Gln Thr Tyr Asn Ser Thr Trp Ser Asp Trp
180 185 190
Ser Pro Ser Thr Thr Trp Leu Asn Tyr Tyr Glu Pro Gly Ser Glu Asn
195 200 205
Leu Tyr Phe Gln Gly Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro
210 215 220
Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe
225 230 235 240
Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val
245 250 255
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe
260 265 270
Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
275 280 285
Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr
290 295 300
Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
305 310 315 320
Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
325 330 335
Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg
340 345 350
Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
355 360 365
Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
370 375 380
Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
385 390 395 400
Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln
405 410 415
Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
420 425 430
Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys His His His His
435 440 445
His His
450
<210> 148
<211> 450
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: собачий IL4R-ECD_C-HuFc_His6.M44A (мутант 2)
<400> 148
Gly Ser Val Lys Val Leu His Glu Pro Ser Cys Phe Ser Asp Tyr Ile
1 5 10 15
Ser Thr Ser Val Cys Gln Trp Lys Met Asp His Pro Thr Asn Cys Ser
20 25 30
Ala Glu Leu Arg Leu Ser Tyr Gln Leu Asp Phe Ala Gly Ser Glu Asn
35 40 45
His Thr Cys Val Pro Glu Asn Arg Glu Asp Ser Val Cys Val Cys Ser
50 55 60
Met Pro Ile Asp Asp Ala Val Glu Ala Asp Val Tyr Gln Leu Asp Leu
65 70 75 80
Trp Ala Gly Gln Gln Leu Leu Trp Ser Gly Ser Phe Gln Pro Ser Lys
85 90 95
His Val Lys Pro Arg Thr Pro Gly Asn Leu Thr Val His Pro Asn Ile
100 105 110
Ser His Thr Trp Leu Leu Met Trp Thr Asn Pro Tyr Pro Thr Glu Asn
115 120 125
His Leu His Ser Glu Leu Thr Tyr Met Val Asn Val Ser Asn Asp Asn
130 135 140
Asp Pro Glu Asp Phe Lys Val Tyr Asn Val Thr Tyr Met Gly Pro Thr
145 150 155 160
Leu Arg Leu Ala Ala Ser Thr Leu Lys Ser Gly Ala Ser Tyr Ser Ala
165 170 175
Arg Val Arg Ala Trp Ala Gln Thr Tyr Asn Ser Thr Trp Ser Asp Trp
180 185 190
Ser Pro Ser Thr Thr Trp Leu Asn Tyr Tyr Glu Pro Gly Ser Glu Asn
195 200 205
Leu Tyr Phe Gln Gly Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro
210 215 220
Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe
225 230 235 240
Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val
245 250 255
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe
260 265 270
Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
275 280 285
Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr
290 295 300
Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
305 310 315 320
Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
325 330 335
Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg
340 345 350
Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
355 360 365
Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
370 375 380
Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
385 390 395 400
Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln
405 410 415
Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
420 425 430
Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys His His His His
435 440 445
His His
450
<210> 149
<211> 450
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: собачий IL4R-ECD_C-HuFc_His6.G45A (мутант 3)
<400> 149
Gly Ser Val Lys Val Leu His Glu Pro Ser Cys Phe Ser Asp Tyr Ile
1 5 10 15
Ser Thr Ser Val Cys Gln Trp Lys Met Asp His Pro Thr Asn Cys Ser
20 25 30
Ala Glu Leu Arg Leu Ser Tyr Gln Leu Asp Phe Met Ala Ser Glu Asn
35 40 45
His Thr Cys Val Pro Glu Asn Arg Glu Asp Ser Val Cys Val Cys Ser
50 55 60
Met Pro Ile Asp Asp Ala Val Glu Ala Asp Val Tyr Gln Leu Asp Leu
65 70 75 80
Trp Ala Gly Gln Gln Leu Leu Trp Ser Gly Ser Phe Gln Pro Ser Lys
85 90 95
His Val Lys Pro Arg Thr Pro Gly Asn Leu Thr Val His Pro Asn Ile
100 105 110
Ser His Thr Trp Leu Leu Met Trp Thr Asn Pro Tyr Pro Thr Glu Asn
115 120 125
His Leu His Ser Glu Leu Thr Tyr Met Val Asn Val Ser Asn Asp Asn
130 135 140
Asp Pro Glu Asp Phe Lys Val Tyr Asn Val Thr Tyr Met Gly Pro Thr
145 150 155 160
Leu Arg Leu Ala Ala Ser Thr Leu Lys Ser Gly Ala Ser Tyr Ser Ala
165 170 175
Arg Val Arg Ala Trp Ala Gln Thr Tyr Asn Ser Thr Trp Ser Asp Trp
180 185 190
Ser Pro Ser Thr Thr Trp Leu Asn Tyr Tyr Glu Pro Gly Ser Glu Asn
195 200 205
Leu Tyr Phe Gln Gly Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro
210 215 220
Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe
225 230 235 240
Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val
245 250 255
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe
260 265 270
Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
275 280 285
Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr
290 295 300
Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
305 310 315 320
Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
325 330 335
Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg
340 345 350
Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
355 360 365
Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
370 375 380
Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
385 390 395 400
Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln
405 410 415
Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
420 425 430
Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys His His His His
435 440 445
His His
450
<210> 150
<211> 450
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: собачий IL4R-ECD_C-HuFc_His6.N48A (мутант 4)
<400> 150
Gly Ser Val Lys Val Leu His Glu Pro Ser Cys Phe Ser Asp Tyr Ile
1 5 10 15
Ser Thr Ser Val Cys Gln Trp Lys Met Asp His Pro Thr Asn Cys Ser
20 25 30
Ala Glu Leu Arg Leu Ser Tyr Gln Leu Asp Phe Met Gly Ser Glu Ala
35 40 45
His Thr Cys Val Pro Glu Asn Arg Glu Asp Ser Val Cys Val Cys Ser
50 55 60
Met Pro Ile Asp Asp Ala Val Glu Ala Asp Val Tyr Gln Leu Asp Leu
65 70 75 80
Trp Ala Gly Gln Gln Leu Leu Trp Ser Gly Ser Phe Gln Pro Ser Lys
85 90 95
His Val Lys Pro Arg Thr Pro Gly Asn Leu Thr Val His Pro Asn Ile
100 105 110
Ser His Thr Trp Leu Leu Met Trp Thr Asn Pro Tyr Pro Thr Glu Asn
115 120 125
His Leu His Ser Glu Leu Thr Tyr Met Val Asn Val Ser Asn Asp Asn
130 135 140
Asp Pro Glu Asp Phe Lys Val Tyr Asn Val Thr Tyr Met Gly Pro Thr
145 150 155 160
Leu Arg Leu Ala Ala Ser Thr Leu Lys Ser Gly Ala Ser Tyr Ser Ala
165 170 175
Arg Val Arg Ala Trp Ala Gln Thr Tyr Asn Ser Thr Trp Ser Asp Trp
180 185 190
Ser Pro Ser Thr Thr Trp Leu Asn Tyr Tyr Glu Pro Gly Ser Glu Asn
195 200 205
Leu Tyr Phe Gln Gly Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro
210 215 220
Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe
225 230 235 240
Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val
245 250 255
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe
260 265 270
Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
275 280 285
Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr
290 295 300
Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
305 310 315 320
Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
325 330 335
Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg
340 345 350
Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
355 360 365
Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
370 375 380
Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
385 390 395 400
Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln
405 410 415
Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
420 425 430
Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys His His His His
435 440 445
His His
450
<210> 151
<211> 450
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: собачий IL4R-ECD_C-HuFc_His6.S38A (мутант 5)
<400> 151
Gly Ser Val Lys Val Leu His Glu Pro Ser Cys Phe Ser Asp Tyr Ile
1 5 10 15
Ser Thr Ser Val Cys Gln Trp Lys Met Asp His Pro Thr Asn Cys Ser
20 25 30
Ala Glu Leu Arg Leu Ala Tyr Gln Leu Asp Phe Met Gly Ser Glu Asn
35 40 45
His Thr Cys Val Pro Glu Asn Arg Glu Asp Ser Val Cys Val Cys Ser
50 55 60
Met Pro Ile Asp Asp Ala Val Glu Ala Asp Val Tyr Gln Leu Asp Leu
65 70 75 80
Trp Ala Gly Gln Gln Leu Leu Trp Ser Gly Ser Phe Gln Pro Ser Lys
85 90 95
His Val Lys Pro Arg Thr Pro Gly Asn Leu Thr Val His Pro Asn Ile
100 105 110
Ser His Thr Trp Leu Leu Met Trp Thr Asn Pro Tyr Pro Thr Glu Asn
115 120 125
His Leu His Ser Glu Leu Thr Tyr Met Val Asn Val Ser Asn Asp Asn
130 135 140
Asp Pro Glu Asp Phe Lys Val Tyr Asn Val Thr Tyr Met Gly Pro Thr
145 150 155 160
Leu Arg Leu Ala Ala Ser Thr Leu Lys Ser Gly Ala Ser Tyr Ser Ala
165 170 175
Arg Val Arg Ala Trp Ala Gln Thr Tyr Asn Ser Thr Trp Ser Asp Trp
180 185 190
Ser Pro Ser Thr Thr Trp Leu Asn Tyr Tyr Glu Pro Gly Ser Glu Asn
195 200 205
Leu Tyr Phe Gln Gly Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro
210 215 220
Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe
225 230 235 240
Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val
245 250 255
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe
260 265 270
Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
275 280 285
Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr
290 295 300
Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
305 310 315 320
Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
325 330 335
Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg
340 345 350
Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
355 360 365
Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
370 375 380
Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
385 390 395 400
Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln
405 410 415
Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
420 425 430
Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys His His His His
435 440 445
His His
450
<210> 152
<211> 450
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: собачий IL4R-ECD_C-HuFc_His6.D42A (мутант 6)
<400> 152
Gly Ser Val Lys Val Leu His Glu Pro Ser Cys Phe Ser Asp Tyr Ile
1 5 10 15
Ser Thr Ser Val Cys Gln Trp Lys Met Asp His Pro Thr Asn Cys Ser
20 25 30
Ala Glu Leu Arg Leu Ser Tyr Gln Leu Ala Phe Met Gly Ser Glu Asn
35 40 45
His Thr Cys Val Pro Glu Asn Arg Glu Asp Ser Val Cys Val Cys Ser
50 55 60
Met Pro Ile Asp Asp Ala Val Glu Ala Asp Val Tyr Gln Leu Asp Leu
65 70 75 80
Trp Ala Gly Gln Gln Leu Leu Trp Ser Gly Ser Phe Gln Pro Ser Lys
85 90 95
His Val Lys Pro Arg Thr Pro Gly Asn Leu Thr Val His Pro Asn Ile
100 105 110
Ser His Thr Trp Leu Leu Met Trp Thr Asn Pro Tyr Pro Thr Glu Asn
115 120 125
His Leu His Ser Glu Leu Thr Tyr Met Val Asn Val Ser Asn Asp Asn
130 135 140
Asp Pro Glu Asp Phe Lys Val Tyr Asn Val Thr Tyr Met Gly Pro Thr
145 150 155 160
Leu Arg Leu Ala Ala Ser Thr Leu Lys Ser Gly Ala Ser Tyr Ser Ala
165 170 175
Arg Val Arg Ala Trp Ala Gln Thr Tyr Asn Ser Thr Trp Ser Asp Trp
180 185 190
Ser Pro Ser Thr Thr Trp Leu Asn Tyr Tyr Glu Pro Gly Ser Glu Asn
195 200 205
Leu Tyr Phe Gln Gly Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro
210 215 220
Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe
225 230 235 240
Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val
245 250 255
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe
260 265 270
Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
275 280 285
Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr
290 295 300
Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
305 310 315 320
Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
325 330 335
Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg
340 345 350
Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
355 360 365
Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
370 375 380
Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
385 390 395 400
Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln
405 410 415
Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
420 425 430
Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys His His His His
435 440 445
His His
450
<210> 153
<211> 450
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: собачий IL4R-ECD_C-HuFc_His6.H49A (мутант 7)
<400> 153
Gly Ser Val Lys Val Leu His Glu Pro Ser Cys Phe Ser Asp Tyr Ile
1 5 10 15
Ser Thr Ser Val Cys Gln Trp Lys Met Asp His Pro Thr Asn Cys Ser
20 25 30
Ala Glu Leu Arg Leu Ser Tyr Gln Leu Asp Phe Met Gly Ser Glu Asn
35 40 45
Ala Thr Cys Val Pro Glu Asn Arg Glu Asp Ser Val Cys Val Cys Ser
50 55 60
Met Pro Ile Asp Asp Ala Val Glu Ala Asp Val Tyr Gln Leu Asp Leu
65 70 75 80
Trp Ala Gly Gln Gln Leu Leu Trp Ser Gly Ser Phe Gln Pro Ser Lys
85 90 95
His Val Lys Pro Arg Thr Pro Gly Asn Leu Thr Val His Pro Asn Ile
100 105 110
Ser His Thr Trp Leu Leu Met Trp Thr Asn Pro Tyr Pro Thr Glu Asn
115 120 125
His Leu His Ser Glu Leu Thr Tyr Met Val Asn Val Ser Asn Asp Asn
130 135 140
Asp Pro Glu Asp Phe Lys Val Tyr Asn Val Thr Tyr Met Gly Pro Thr
145 150 155 160
Leu Arg Leu Ala Ala Ser Thr Leu Lys Ser Gly Ala Ser Tyr Ser Ala
165 170 175
Arg Val Arg Ala Trp Ala Gln Thr Tyr Asn Ser Thr Trp Ser Asp Trp
180 185 190
Ser Pro Ser Thr Thr Trp Leu Asn Tyr Tyr Glu Pro Gly Ser Glu Asn
195 200 205
Leu Tyr Phe Gln Gly Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro
210 215 220
Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe
225 230 235 240
Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val
245 250 255
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe
260 265 270
Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
275 280 285
Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr
290 295 300
Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
305 310 315 320
Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
325 330 335
Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg
340 345 350
Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
355 360 365
Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
370 375 380
Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
385 390 395 400
Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln
405 410 415
Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
420 425 430
Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys His His His His
435 440 445
His His
450
<210> 154
<211> 131
<212> Белок
<213> Canis lupus familiaris
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(131)
<223> Предшественник IL13 собаки
<400> 154
Met Ala Leu Trp Leu Thr Val Val Ile Ala Leu Thr Cys Leu Gly Gly
1 5 10 15
Leu Ala Ser Pro Ser Pro Val Thr Pro Ser Pro Thr Leu Lys Glu Leu
20 25 30
Ile Glu Glu Leu Val Asn Ile Thr Gln Asn Gln Ala Ser Leu Cys Asn
35 40 45
Gly Ser Met Val Trp Ser Val Asn Leu Thr Ala Gly Met Tyr Cys Ala
50 55 60
Ala Leu Glu Ser Leu Ile Asn Val Ser Asp Cys Ser Ala Ile Gln Arg
65 70 75 80
Thr Gln Arg Met Leu Lys Ala Leu Cys Ser Gln Lys Pro Ala Ala Gly
85 90 95
Gln Ile Ser Ser Glu Arg Ser Arg Asp Thr Lys Ile Glu Val Ile Gln
100 105 110
Leu Val Lys Asn Leu Leu Thr Tyr Val Arg Gly Val Tyr Arg His Gly
115 120 125
Asn Phe Arg
130
<210> 155
<211> 184
<212> Белок
<213> Felis catus
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(184)
<223> Предшественник IL13 кошки
<400> 155
Met Trp Phe Leu Asp Ser Thr Arg Gln Ser Gly Asp Gln Gly Gly Arg
1 5 10 15
Arg His Thr Trp Pro Ile Lys Ala Thr Ala Arg Gly Gln Gly His Lys
20 25 30
Pro Leu Ser Leu Gly Gln Pro Thr Cys Pro Leu Leu Ala Pro Pro Val
35 40 45
Leu Ala Leu Gly Ser Met Ala Leu Trp Leu Thr Val Val Ile Ala Leu
50 55 60
Thr Cys Leu Gly Gly Leu Ala Ser Pro Gly Pro His Ser Arg Arg Glu
65 70 75 80
Leu Lys Glu Leu Ile Glu Glu Leu Val Asn Ile Thr Gln Asn Gln Val
85 90 95
Ser Leu Cys Asn Gly Ser Met Val Trp Ser Val Asn Leu Thr Thr Gly
100 105 110
Met Gln Tyr Cys Ala Ala Leu Glu Ser Leu Ile Asn Val Ser Asp Cys
115 120 125
Thr Ala Ile Gln Arg Thr Gln Arg Met Leu Lys Ala Leu Cys Thr Gln
130 135 140
Lys Pro Ser Ala Gly Gln Thr Ala Ser Glu Arg Ser Arg Asp Thr Lys
145 150 155 160
Ile Glu Val Ile Gln Leu Val Lys Asn Leu Leu Asn His Leu Arg Arg
165 170 175
Asn Phe Arg His Gly Asn Phe Lys
180
<210> 156
<211> 139
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: собачий IL13_C-His6 с лидерной последовательностью
<400> 156
Met Ala Leu Trp Leu Thr Val Val Ile Ala Leu Thr Cys Leu Gly Gly
1 5 10 15
Leu Ala Ser Pro Ser Pro Val Thr Pro Ser Pro Thr Leu Lys Glu Leu
20 25 30
Ile Glu Glu Leu Val Asn Ile Thr Gln Asn Gln Ala Ser Leu Cys Asn
35 40 45
Gly Ser Met Val Trp Ser Val Asn Leu Thr Ala Gly Met Tyr Cys Ala
50 55 60
Ala Leu Glu Ser Leu Ile Asn Val Ser Asp Cys Ser Ala Ile Gln Arg
65 70 75 80
Thr Gln Arg Met Leu Lys Ala Leu Cys Ser Gln Lys Pro Ala Ala Gly
85 90 95
Gln Ile Ser Ser Glu Arg Ser Arg Asp Thr Lys Ile Glu Val Ile Gln
100 105 110
Leu Val Lys Asn Leu Leu Thr Tyr Val Arg Gly Val Tyr Arg His Gly
115 120 125
Asn Phe Arg Gly Ser His His His His His His
130 135
<210> 157
<211> 121
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: собачий IL13_C-His6
<400> 157
Ser Pro Ser Pro Val Thr Pro Ser Pro Thr Leu Lys Glu Leu Ile Glu
1 5 10 15
Glu Leu Val Asn Ile Thr Gln Asn Gln Ala Ser Leu Cys Asn Gly Ser
20 25 30
Met Val Trp Ser Val Asn Leu Thr Ala Gly Met Tyr Cys Ala Ala Leu
35 40 45
Glu Ser Leu Ile Asn Val Ser Asp Cys Ser Ala Ile Gln Arg Thr Gln
50 55 60
Arg Met Leu Lys Ala Leu Cys Ser Gln Lys Pro Ala Ala Gly Gln Ile
65 70 75 80
Ser Ser Glu Arg Ser Arg Asp Thr Lys Ile Glu Val Ile Gln Leu Val
85 90 95
Lys Asn Leu Leu Thr Tyr Val Arg Gly Val Tyr Arg His Gly Asn Phe
100 105 110
Arg Gly Ser His His His His His His
115 120
<210> 158
<211> 144
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: кошачий IL13_C-His6 с лидерной последовательностью
<400> 158
Met Ala Leu Trp Leu Thr Val Val Ile Ala Leu Thr Cys Leu Gly Gly
1 5 10 15
Leu Ala Ser Pro Gly Pro His Ser Arg Arg Glu Leu Lys Glu Leu Ile
20 25 30
Glu Glu Leu Val Asn Ile Thr Gln Asn Gln Leu Leu Gln Val Ser Leu
35 40 45
Cys Asn Gly Ser Met Val Trp Ser Val Asn Leu Thr Thr Gly Met Gln
50 55 60
Tyr Cys Ala Ala Leu Glu Ser Leu Ile Asn Val Ser Asp Cys Thr Ala
65 70 75 80
Ile Gln Arg Thr Gln Arg Met Leu Lys Ala Leu Cys Thr Gln Lys Pro
85 90 95
Ser Ala Gly Gln Thr Ala Ser Glu Arg Ser Arg Asp Thr Lys Ile Glu
100 105 110
Val Ile Gln Leu Val Lys Asn Leu Leu Asn His Leu Arg Arg Asn Phe
115 120 125
Arg His Gly Asn Phe Lys Gly Ser Gly Ser His His His His His His
130 135 140
<210> 159
<211> 126
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: кошачий IL13_C-His6
<400> 159
Ser Pro Gly Pro His Ser Arg Arg Glu Leu Lys Glu Leu Ile Glu Glu
1 5 10 15
Leu Val Asn Ile Thr Gln Asn Gln Leu Leu Gln Val Ser Leu Cys Asn
20 25 30
Gly Ser Met Val Trp Ser Val Asn Leu Thr Thr Gly Met Gln Tyr Cys
35 40 45
Ala Ala Leu Glu Ser Leu Ile Asn Val Ser Asp Cys Thr Ala Ile Gln
50 55 60
Arg Thr Gln Arg Met Leu Lys Ala Leu Cys Thr Gln Lys Pro Ser Ala
65 70 75 80
Gly Gln Thr Ala Ser Glu Arg Ser Arg Asp Thr Lys Ile Glu Val Ile
85 90 95
Gln Leu Val Lys Asn Leu Leu Asn His Leu Arg Arg Asn Phe Arg His
100 105 110
Gly Asn Phe Lys Gly Ser Gly Ser His His His His His His
115 120 125
<210> 160
<211> 427
<212> Белок
<213> Canis lupus familiaris
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(427)
<223> IL13R собаки
<400> 160
Met Glu Arg Pro Ala Arg Leu Cys Gly Leu Trp Ala Leu Leu Leu Cys
1 5 10 15
Ala Ala Gly Gly Arg Gly Gly Gly Val Ala Ala Pro Thr Glu Thr Gln
20 25 30
Pro Pro Val Thr Asn Leu Ser Val Ser Val Glu Asn Leu Cys Thr Val
35 40 45
Ile Trp Thr Trp Asp Pro Pro Glu Gly Ala Ser Pro Asn Cys Thr Leu
50 55 60
Arg Tyr Phe Ser His Phe Asp Asn Lys Gln Asp Lys Lys Ile Ala Pro
65 70 75 80
Glu Thr His Arg Ser Lys Glu Val Pro Leu Asn Glu Arg Ile Cys Leu
85 90 95
Gln Val Gly Ser Gln Cys Ser Thr Asn Glu Ser Asp Asn Pro Ser Ile
100 105 110
Leu Val Glu Lys Cys Thr Pro Pro Pro Glu Gly Asp Pro Glu Ser Ala
115 120 125
Val Thr Glu Leu Gln Cys Val Trp His Asn Leu Ser Tyr Met Lys Cys
130 135 140
Thr Trp Leu Pro Gly Arg Asn Thr Ser Pro Asp Thr Asn Tyr Thr Leu
145 150 155 160
Tyr Tyr Trp His Ser Ser Leu Gly Lys Ile Leu Gln Cys Glu Asp Ile
165 170 175
Tyr Arg Glu Gly Gln His Ile Gly Cys Ser Phe Ala Leu Thr Asn Leu
180 185 190
Lys Asp Ser Ser Phe Glu Gln His Ser Val Gln Ile Val Val Lys Asp
195 200 205
Asn Ala Gly Lys Ile Arg Pro Ser Phe Asn Ile Val Pro Leu Thr Ser
210 215 220
His Val Lys Pro Asp Pro Pro His Ile Lys Arg Leu Phe Phe Gln Asn
225 230 235 240
Gly Asn Leu Tyr Val Gln Trp Lys Asn Pro Gln Asn Phe Tyr Ser Arg
245 250 255
Cys Leu Ser Tyr Gln Val Glu Val Asn Asn Ser Gln Thr Glu Thr Asn
260 265 270
Asp Ile Phe Tyr Val Glu Glu Ala Lys Cys Gln Asn Ser Glu Phe Glu
275 280 285
Gly Asn Leu Glu Gly Thr Ile Cys Phe Met Val Pro Gly Val Leu Pro
290 295 300
Asp Thr Leu Asn Thr Val Arg Ile Arg Val Arg Thr Asn Lys Leu Cys
305 310 315 320
Tyr Glu Asp Asp Lys Leu Trp Ser Asn Trp Ser Gln Ala Met Ser Ile
325 330 335
Gly Glu Asn Thr Asp Pro Thr Phe Tyr Ile Thr Met Leu Leu Ala Thr
340 345 350
Pro Val Ile Val Ala Gly Ala Ile Ile Val Leu Leu Leu Tyr Leu Lys
355 360 365
Arg Leu Lys Ile Ile Ile Phe Pro Pro Ile Pro Asp Pro Gly Lys Ile
370 375 380
Phe Lys Glu Met Phe Gly Asp Gln Asn Asp Asp Thr Leu His Trp Arg
385 390 395 400
Lys Tyr Asp Ile Tyr Glu Lys Gln Thr Lys Glu Glu Thr Asp Ser Val
405 410 415
Val Leu Ile Glu Asn Leu Lys Lys Ala Ser Gln
420 425
<210> 161
<211> 315
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: ECD IL13R собаки
<400> 161
Thr Glu Thr Gln Pro Pro Val Thr Asn Leu Ser Val Ser Val Glu Asn
1 5 10 15
Leu Cys Thr Val Ile Trp Thr Trp Asp Pro Pro Glu Gly Ala Ser Pro
20 25 30
Asn Cys Thr Leu Arg Tyr Phe Ser His Phe Asp Asn Lys Gln Asp Lys
35 40 45
Lys Ile Ala Pro Glu Thr His Arg Ser Lys Glu Val Pro Leu Asn Glu
50 55 60
Arg Ile Cys Leu Gln Val Gly Ser Gln Cys Ser Thr Asn Glu Ser Asp
65 70 75 80
Asn Pro Ser Ile Leu Val Glu Lys Cys Thr Pro Pro Pro Glu Gly Asp
85 90 95
Pro Glu Ser Ala Val Thr Glu Leu Gln Cys Val Trp His Asn Leu Ser
100 105 110
Tyr Met Lys Cys Thr Trp Leu Pro Gly Arg Asn Thr Ser Pro Asp Thr
115 120 125
Asn Tyr Thr Leu Tyr Tyr Trp His Ser Ser Leu Gly Lys Ile Leu Gln
130 135 140
Cys Glu Asp Ile Tyr Arg Glu Gly Gln His Ile Gly Cys Ser Phe Ala
145 150 155 160
Leu Thr Asn Leu Lys Asp Ser Ser Phe Glu Gln His Ser Val Gln Ile
165 170 175
Val Val Lys Asp Asn Ala Gly Lys Ile Arg Pro Ser Phe Asn Ile Val
180 185 190
Pro Leu Thr Ser His Val Lys Pro Asp Pro Pro His Ile Lys Arg Leu
195 200 205
Phe Phe Gln Asn Gly Asn Leu Tyr Val Gln Trp Lys Asn Pro Gln Asn
210 215 220
Phe Tyr Ser Arg Cys Leu Ser Tyr Gln Val Glu Val Asn Asn Ser Gln
225 230 235 240
Thr Glu Thr Asn Asp Ile Phe Tyr Val Glu Glu Ala Lys Cys Gln Asn
245 250 255
Ser Glu Phe Glu Gly Asn Leu Glu Gly Thr Ile Cys Phe Met Val Pro
260 265 270
Gly Val Leu Pro Asp Thr Leu Asn Thr Val Arg Ile Arg Val Arg Thr
275 280 285
Asn Lys Leu Cys Tyr Glu Asp Asp Lys Leu Trp Ser Asn Trp Ser Gln
290 295 300
Ala Met Ser Ile Gly Glu Asn Thr Asp Pro Thr
305 310 315
<210> 162
<211> 221
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный Fc дикого типа IgG-A собаки,
Белок A C1q CD16
<400> 162
Pro Val Pro Glu Pro Leu Gly Gly Pro Ser Val Leu Ile Phe Pro Pro
1 5 10 15
Lys Pro Lys Asp Ile Leu Arg Ile Thr Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
20 25 30
Val Val Leu Asp Leu Gly Arg Glu Asp Pro Glu Val Gln Ile Ser Trp
35 40 45
Phe Val Asp Gly Lys Glu Val His Thr Ala Lys Thr Gln Ser Arg Glu
50 55 60
Gln Gln Phe Asn Gly Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Glu
65 70 75 80
His Gln Asp Trp Leu Thr Gly Lys Glu Phe Lys Cys Arg Val Asn His
85 90 95
Ile Asp Leu Pro Ser Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Ala Arg Gly
100 105 110
Arg Ala His Lys Pro Ser Val Tyr Val Leu Pro Pro Ser Pro Lys Glu
115 120 125
Leu Ser Ser Ser Asp Thr Val Ser Ile Thr Cys Leu Ile Lys Asp Phe
130 135 140
Tyr Pro Pro Asp Ile Asp Val Glu Trp Gln Ser Asn Gly Gln Gln Glu
145 150 155 160
Pro Glu Arg Lys His Arg Met Thr Pro Pro Gln Leu Asp Glu Asp Gly
165 170 175
Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Ser Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln
180 185 190
Gln Gly Asp Pro Phe Thr Cys Ala Val Met His Glu Thr Leu Gln Asn
195 200 205
His Tyr Thr Asp Leu Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 163
<211> 220
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный Fc дикого типа IgG-B собаки,
Белок A+ C1q+ CD16+
<400> 163
Pro Ala Pro Glu Met Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro
1 5 10 15
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Leu Ile Ala Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
20 25 30
Val Val Val Asp Leu Asp Pro Glu Asp Pro Glu Val Gln Ile Ser Trp
35 40 45
Phe Val Asp Gly Lys Gln Met Gln Thr Ala Lys Thr Gln Pro Arg Glu
50 55 60
Glu Gln Phe Asn Gly Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Gly
65 70 75 80
His Gln Asp Trp Leu Lys Gly Lys Gln Phe Thr Cys Lys Val Asn Asn
85 90 95
Lys Ala Leu Pro Ser Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Ala Arg Gly
100 105 110
Gln Ala His Gln Pro Ser Val Tyr Val Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu
115 120 125
Leu Ser Lys Asn Thr Val Ser Leu Thr Cys Leu Ile Lys Asp Phe Phe
130 135 140
Pro Pro Asp Ile Asp Val Glu Trp Gln Ser Asn Gly Gln Gln Glu Pro
145 150 155 160
Glu Ser Lys Tyr Arg Thr Thr Pro Pro Gln Leu Asp Glu Asp Gly Ser
165 170 175
Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Ser Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Arg
180 185 190
Gly Asp Thr Phe Ile Cys Ala Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
195 200 205
Tyr Thr Gln Glu Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 164
<211> 237
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный Fc дикого типа IgG-B
с шарнирной последовательностью, Белок A+ C1q+ CD16+
<400> 164
Pro Lys Arg Glu Asn Gly Arg Val Pro Arg Pro Pro Asp Cys Pro Lys
1 5 10 15
Cys Pro Ala Pro Glu Met Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro
20 25 30
Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Leu Ile Ala Arg Thr Pro Glu Val Thr
35 40 45
Cys Val Val Val Asp Leu Asp Pro Glu Asp Pro Glu Val Gln Ile Ser
50 55 60
Trp Phe Val Asp Gly Lys Gln Met Gln Thr Ala Lys Thr Gln Pro Arg
65 70 75 80
Glu Glu Gln Phe Asn Gly Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile
85 90 95
Gly His Gln Asp Trp Leu Lys Gly Lys Gln Phe Thr Cys Lys Val Asn
100 105 110
Asn Lys Ala Leu Pro Ser Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Ala Arg
115 120 125
Gly Gln Ala His Gln Pro Ser Val Tyr Val Leu Pro Pro Ser Arg Glu
130 135 140
Glu Leu Ser Lys Asn Thr Val Ser Leu Thr Cys Leu Ile Lys Asp Phe
145 150 155 160
Phe Pro Pro Asp Ile Asp Val Glu Trp Gln Ser Asn Gly Gln Gln Glu
165 170 175
Pro Glu Ser Lys Tyr Arg Thr Thr Pro Pro Gln Leu Asp Glu Asp Gly
180 185 190
Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Ser Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln
195 200 205
Arg Gly Asp Thr Phe Ile Cys Ala Val Met His Glu Ala Leu His Asn
210 215 220
His Tyr Thr Gln Glu Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Lys
225 230 235
<210> 165
<211> 220
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный Fc дикого типа IgG-C,
Белок A C1q+ CD16+
<400> 165
Pro Gly Cys Gly Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro
1 5 10 15
Lys Pro Lys Asp Ile Leu Val Thr Ala Arg Thr Pro Thr Val Thr Cys
20 25 30
Val Val Val Asp Leu Asp Pro Glu Asn Pro Glu Val Gln Ile Ser Trp
35 40 45
Phe Val Asp Ser Lys Gln Val Gln Thr Ala Asn Thr Gln Pro Arg Glu
50 55 60
Glu Gln Ser Asn Gly Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Gly
65 70 75 80
His Gln Asp Trp Leu Ser Gly Lys Gln Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn
85 90 95
Lys Ala Leu Pro Ser Pro Ile Glu Glu Ile Ile Ser Lys Thr Pro Gly
100 105 110
Gln Ala His Gln Pro Asn Val Tyr Val Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
115 120 125
Met Ser Lys Asn Thr Val Thr Leu Thr Cys Leu Val Lys Asp Phe Phe
130 135 140
Pro Pro Glu Ile Asp Val Glu Trp Gln Ser Asn Gly Gln Gln Glu Pro
145 150 155 160
Glu Ser Lys Tyr Arg Met Thr Pro Pro Gln Leu Asp Glu Asp Gly Ser
165 170 175
Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Ser Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Arg
180 185 190
Gly Asp Thr Phe Ile Cys Ala Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
195 200 205
Tyr Thr Gln Ile Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 166
<211> 235
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный Fc дикого типа IgG-C собаки с
шарнирной областью, Белок A C1q+ CD16+
<400> 166
Ala Lys Glu Cys Glu Cys Lys Cys Asn Cys Asn Asn Cys Pro Cys Pro
1 5 10 15
Gly Cys Gly Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys
20 25 30
Pro Lys Asp Ile Leu Val Thr Ala Arg Thr Pro Thr Val Thr Cys Val
35 40 45
Val Val Asp Leu Asp Pro Glu Asn Pro Glu Val Gln Ile Ser Trp Phe
50 55 60
Val Asp Ser Lys Gln Val Gln Thr Ala Asn Thr Gln Pro Arg Glu Glu
65 70 75 80
Gln Ser Asn Gly Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Gly His
85 90 95
Gln Asp Trp Leu Ser Gly Lys Gln Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn Lys
100 105 110
Ala Leu Pro Ser Pro Ile Glu Glu Ile Ile Ser Lys Thr Pro Gly Gln
115 120 125
Ala His Gln Pro Asn Val Tyr Val Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Met
130 135 140
Ser Lys Asn Thr Val Thr Leu Thr Cys Leu Val Lys Asp Phe Phe Pro
145 150 155 160
Pro Glu Ile Asp Val Glu Trp Gln Ser Asn Gly Gln Gln Glu Pro Glu
165 170 175
Ser Lys Tyr Arg Met Thr Pro Pro Gln Leu Asp Glu Asp Gly Ser Tyr
180 185 190
Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Ser Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Arg Gly
195 200 205
Asp Thr Phe Ile Cys Ala Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr
210 215 220
Thr Gln Ile Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Lys
225 230 235
<210> 167
<211> 221
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный Fc дикого типа IgG-D собаки,
Белок A C1q CD16
<400> 167
Pro Val Pro Glu Ser Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro
1 5 10 15
Lys Pro Lys Asp Ile Leu Arg Ile Thr Arg Thr Pro Glu Ile Thr Cys
20 25 30
Val Val Leu Asp Leu Gly Arg Glu Asp Pro Glu Val Gln Ile Ser Trp
35 40 45
Phe Val Asp Gly Lys Glu Val His Thr Ala Lys Thr Gln Pro Arg Glu
50 55 60
Gln Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Glu
65 70 75 80
His Gln Asp Trp Leu Thr Gly Lys Glu Phe Lys Cys Arg Val Asn His
85 90 95
Ile Gly Leu Pro Ser Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Ala Arg Gly
100 105 110
Gln Ala His Gln Pro Ser Val Tyr Val Leu Pro Pro Ser Pro Lys Glu
115 120 125
Leu Ser Ser Ser Asp Thr Val Thr Leu Thr Cys Leu Ile Lys Asp Phe
130 135 140
Phe Pro Pro Glu Ile Asp Val Glu Trp Gln Ser Asn Gly Gln Pro Glu
145 150 155 160
Pro Glu Ser Lys Tyr His Thr Thr Ala Pro Gln Leu Asp Glu Asp Gly
165 170 175
Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Ser Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln
180 185 190
Gln Gly Asp Thr Phe Thr Cys Ala Val Met His Glu Ala Leu Gln Asn
195 200 205
His Tyr Thr Asp Leu Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 168
<211> 221
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG-A собаки
C1q Белок A+ I(21)T R(23)L T(25)A E(80)G T(205)A Q(207)H
<400> 168
Pro Val Pro Glu Pro Leu Gly Gly Pro Ser Val Leu Ile Phe Pro Pro
1 5 10 15
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Leu Ile Ala Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
20 25 30
Val Val Leu Asp Leu Gly Arg Glu Asp Pro Glu Val Gln Ile Ser Trp
35 40 45
Phe Val Asp Gly Lys Glu Val His Thr Ala Lys Thr Gln Ser Arg Glu
50 55 60
Gln Gln Phe Asn Gly Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Gly
65 70 75 80
His Gln Asp Trp Leu Thr Gly Lys Glu Phe Lys Cys Arg Val Asn His
85 90 95
Ile Asp Leu Pro Ser Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Ala Arg Gly
100 105 110
Arg Ala His Lys Pro Ser Val Tyr Val Leu Pro Pro Ser Pro Lys Glu
115 120 125
Leu Ser Ser Ser Asp Thr Val Ser Ile Thr Cys Leu Ile Lys Asp Phe
130 135 140
Tyr Pro Pro Asp Ile Asp Val Glu Trp Gln Ser Asn Gly Gln Gln Glu
145 150 155 160
Pro Glu Arg Lys His Arg Met Thr Pro Pro Gln Leu Asp Glu Asp Gly
165 170 175
Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Ser Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln
180 185 190
Gln Gly Asp Pro Phe Thr Cys Ala Val Met His Glu Ala Leu His Asn
195 200 205
His Tyr Thr Asp Leu Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 169
<211> 221
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG-A собаки
C1q Белок A+ I(21)T Q(207)H
<400> 169
Pro Val Pro Glu Pro Leu Gly Gly Pro Ser Val Leu Ile Phe Pro Pro
1 5 10 15
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Arg Ile Thr Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
20 25 30
Val Val Leu Asp Leu Gly Arg Glu Asp Pro Glu Val Gln Ile Ser Trp
35 40 45
Phe Val Asp Gly Lys Glu Val His Thr Ala Lys Thr Gln Ser Arg Glu
50 55 60
Gln Gln Phe Asn Gly Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Glu
65 70 75 80
His Gln Asp Trp Leu Thr Gly Lys Glu Phe Lys Cys Arg Val Asn His
85 90 95
Ile Asp Leu Pro Ser Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Ala Arg Gly
100 105 110
Arg Ala His Lys Pro Ser Val Tyr Val Leu Pro Pro Ser Pro Lys Glu
115 120 125
Leu Ser Ser Ser Asp Thr Val Ser Ile Thr Cys Leu Ile Lys Asp Phe
130 135 140
Tyr Pro Pro Asp Ile Asp Val Glu Trp Gln Ser Asn Gly Gln Gln Glu
145 150 155 160
Pro Glu Arg Lys His Arg Met Thr Pro Pro Gln Leu Asp Glu Asp Gly
165 170 175
Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Ser Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln
180 185 190
Gln Gly Asp Pro Phe Thr Cys Ala Val Met His Glu Thr Leu His Asn
195 200 205
His Tyr Thr Asp Leu Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 170
<211> 220
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG-B собаки
C1q Белок A+ K(93)R
<400> 170
Pro Ala Pro Glu Met Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro
1 5 10 15
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Leu Ile Ala Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
20 25 30
Val Val Val Asp Leu Asp Pro Glu Asp Pro Glu Val Gln Ile Ser Trp
35 40 45
Phe Val Asp Gly Lys Gln Met Gln Thr Ala Lys Thr Gln Pro Arg Glu
50 55 60
Glu Gln Phe Asn Gly Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Gly
65 70 75 80
His Gln Asp Trp Leu Lys Gly Lys Gln Phe Thr Cys Arg Val Asn Asn
85 90 95
Lys Ala Leu Pro Ser Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Ala Arg Gly
100 105 110
Gln Ala His Gln Pro Ser Val Tyr Val Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu
115 120 125
Leu Ser Lys Asn Thr Val Ser Leu Thr Cys Leu Ile Lys Asp Phe Phe
130 135 140
Pro Pro Asp Ile Asp Val Glu Trp Gln Ser Asn Gly Gln Gln Glu Pro
145 150 155 160
Glu Ser Lys Tyr Arg Thr Thr Pro Pro Gln Leu Asp Glu Asp Gly Ser
165 170 175
Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Ser Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Arg
180 185 190
Gly Asp Thr Phe Ile Cys Ala Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
195 200 205
Tyr Thr Gln Glu Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 171
<211> 220
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG-B собаки,
Белок A+ C1q+ CD16 M(5)P
<400> 171
Pro Ala Pro Glu Pro Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro
1 5 10 15
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Leu Ile Ala Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
20 25 30
Val Val Val Asp Leu Asp Pro Glu Asp Pro Glu Val Gln Ile Ser Trp
35 40 45
Phe Val Asp Gly Lys Gln Met Gln Thr Ala Lys Thr Gln Pro Arg Glu
50 55 60
Glu Gln Phe Asn Gly Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Gly
65 70 75 80
His Gln Asp Trp Leu Lys Gly Lys Gln Phe Thr Cys Lys Val Asn Asn
85 90 95
Lys Ala Leu Pro Ser Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Ala Arg Gly
100 105 110
Gln Ala His Gln Pro Ser Val Tyr Val Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu
115 120 125
Leu Ser Lys Asn Thr Val Ser Leu Thr Cys Leu Ile Lys Asp Phe Phe
130 135 140
Pro Pro Asp Ile Asp Val Glu Trp Gln Ser Asn Gly Gln Gln Glu Pro
145 150 155 160
Glu Ser Lys Tyr Arg Thr Thr Pro Pro Gln Leu Asp Glu Asp Gly Ser
165 170 175
Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Ser Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Arg
180 185 190
Gly Asp Thr Phe Ile Cys Ala Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
195 200 205
Tyr Thr Gln Glu Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 172
<211> 220
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG-B собаки
Белок A+ C1q+ CD16 P(39)R
<400> 172
Pro Ala Pro Glu Met Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro
1 5 10 15
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Leu Ile Ala Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
20 25 30
Val Val Val Asp Leu Asp Arg Glu Asp Pro Glu Val Gln Ile Ser Trp
35 40 45
Phe Val Asp Gly Lys Gln Met Gln Thr Ala Lys Thr Gln Pro Arg Glu
50 55 60
Glu Gln Phe Asn Gly Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Gly
65 70 75 80
His Gln Asp Trp Leu Lys Gly Lys Gln Phe Thr Cys Lys Val Asn Asn
85 90 95
Lys Ala Leu Pro Ser Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Ala Arg Gly
100 105 110
Gln Ala His Gln Pro Ser Val Tyr Val Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu
115 120 125
Leu Ser Lys Asn Thr Val Ser Leu Thr Cys Leu Ile Lys Asp Phe Phe
130 135 140
Pro Pro Asp Ile Asp Val Glu Trp Gln Ser Asn Gly Gln Gln Glu Pro
145 150 155 160
Glu Ser Lys Tyr Arg Thr Thr Pro Pro Gln Leu Asp Glu Asp Gly Ser
165 170 175
Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Ser Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Arg
180 185 190
Gly Asp Thr Phe Ile Cys Ala Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
195 200 205
Tyr Thr Gln Glu Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 173
<211> 220
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG-B собаки
Белок A+ C1q+ CD16 D(38)G
<400> 173
Pro Ala Pro Glu Met Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro
1 5 10 15
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Leu Ile Ala Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
20 25 30
Val Val Val Asp Leu Gly Pro Glu Asp Pro Glu Val Gln Ile Ser Trp
35 40 45
Phe Val Asp Gly Lys Gln Met Gln Thr Ala Lys Thr Gln Pro Arg Glu
50 55 60
Glu Gln Phe Asn Gly Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Gly
65 70 75 80
His Gln Asp Trp Leu Lys Gly Lys Gln Phe Thr Cys Lys Val Asn Asn
85 90 95
Lys Ala Leu Pro Ser Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Ala Arg Gly
100 105 110
Gln Ala His Gln Pro Ser Val Tyr Val Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu
115 120 125
Leu Ser Lys Asn Thr Val Ser Leu Thr Cys Leu Ile Lys Asp Phe Phe
130 135 140
Pro Pro Asp Ile Asp Val Glu Trp Gln Ser Asn Gly Gln Gln Glu Pro
145 150 155 160
Glu Ser Lys Tyr Arg Thr Thr Pro Pro Gln Leu Asp Glu Asp Gly Ser
165 170 175
Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Ser Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Arg
180 185 190
Gly Asp Thr Phe Ile Cys Ala Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
195 200 205
Tyr Thr Gln Glu Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 174
<211> 220
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG-B собаки
Белок A+ C1q+ CD16 K(97)I
<400> 174
Pro Ala Pro Glu Met Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro
1 5 10 15
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Leu Ile Ala Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
20 25 30
Val Val Val Asp Leu Asp Pro Glu Asp Pro Glu Val Gln Ile Ser Trp
35 40 45
Phe Val Asp Gly Lys Gln Met Gln Thr Ala Lys Thr Gln Pro Arg Glu
50 55 60
Glu Gln Phe Asn Gly Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Gly
65 70 75 80
His Gln Asp Trp Leu Lys Gly Lys Gln Phe Thr Cys Lys Val Asn Asn
85 90 95
Ile Ala Leu Pro Ser Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Ala Arg Gly
100 105 110
Gln Ala His Gln Pro Ser Val Tyr Val Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu
115 120 125
Leu Ser Lys Asn Thr Val Ser Leu Thr Cys Leu Ile Lys Asp Phe Phe
130 135 140
Pro Pro Asp Ile Asp Val Glu Trp Gln Ser Asn Gly Gln Gln Glu Pro
145 150 155 160
Glu Ser Lys Tyr Arg Thr Thr Pro Pro Gln Leu Asp Glu Asp Gly Ser
165 170 175
Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Ser Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Arg
180 185 190
Gly Asp Thr Phe Ile Cys Ala Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
195 200 205
Tyr Thr Gln Glu Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 175
<211> 220
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG-B собаки
Белок A+ C1q+ CD16 A(98)G
<400> 175
Pro Ala Pro Glu Met Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro
1 5 10 15
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Leu Ile Ala Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
20 25 30
Val Val Val Asp Leu Asp Pro Glu Asp Pro Glu Val Gln Ile Ser Trp
35 40 45
Phe Val Asp Gly Lys Gln Met Gln Thr Ala Lys Thr Gln Pro Arg Glu
50 55 60
Glu Gln Phe Asn Gly Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Gly
65 70 75 80
His Gln Asp Trp Leu Lys Gly Lys Gln Phe Thr Cys Lys Val Asn Asn
85 90 95
Lys Gly Leu Pro Ser Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Ala Arg Gly
100 105 110
Gln Ala His Gln Pro Ser Val Tyr Val Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu
115 120 125
Leu Ser Lys Asn Thr Val Ser Leu Thr Cys Leu Ile Lys Asp Phe Phe
130 135 140
Pro Pro Asp Ile Asp Val Glu Trp Gln Ser Asn Gly Gln Gln Glu Pro
145 150 155 160
Glu Ser Lys Tyr Arg Thr Thr Pro Pro Gln Leu Asp Glu Asp Gly Ser
165 170 175
Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Ser Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Arg
180 185 190
Gly Asp Thr Phe Ile Cys Ala Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
195 200 205
Tyr Thr Gln Glu Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 176
<211> 220
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG-B собаки
Белок A+ C1q+ CD16 D(38)G K(97)I A(98)G
<400> 176
Pro Ala Pro Glu Met Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro
1 5 10 15
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Leu Ile Ala Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
20 25 30
Val Val Val Asp Leu Gly Pro Glu Asp Pro Glu Val Gln Ile Ser Trp
35 40 45
Phe Val Asp Gly Lys Gln Met Gln Thr Ala Lys Thr Gln Pro Arg Glu
50 55 60
Glu Gln Phe Asn Gly Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Gly
65 70 75 80
His Gln Asp Trp Leu Lys Gly Lys Gln Phe Thr Cys Lys Val Asn Asn
85 90 95
Ile Gly Leu Pro Ser Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Ala Arg Gly
100 105 110
Gln Ala His Gln Pro Ser Val Tyr Val Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu
115 120 125
Leu Ser Lys Asn Thr Val Ser Leu Thr Cys Leu Ile Lys Asp Phe Phe
130 135 140
Pro Pro Asp Ile Asp Val Glu Trp Gln Ser Asn Gly Gln Gln Glu Pro
145 150 155 160
Glu Ser Lys Tyr Arg Thr Thr Pro Pro Gln Leu Asp Glu Asp Gly Ser
165 170 175
Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Ser Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Arg
180 185 190
Gly Asp Thr Phe Ile Cys Ala Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
195 200 205
Tyr Thr Gln Glu Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 177
<211> 220
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc собаки IgG-B
Белок A+ C1q CD16 D(38)G K(93)R K(97)I A(98)G
<400> 177
Pro Ala Pro Glu Met Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro
1 5 10 15
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Leu Ile Ala Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
20 25 30
Val Val Val Asp Leu Gly Pro Glu Asp Pro Glu Val Gln Ile Ser Trp
35 40 45
Phe Val Asp Gly Lys Gln Met Gln Thr Ala Lys Thr Gln Pro Arg Glu
50 55 60
Glu Gln Phe Asn Gly Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Gly
65 70 75 80
His Gln Asp Trp Leu Lys Gly Lys Gln Phe Thr Cys Arg Val Asn Asn
85 90 95
Ile Gly Leu Pro Ser Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Ala Arg Gly
100 105 110
Gln Ala His Gln Pro Ser Val Tyr Val Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu
115 120 125
Leu Ser Lys Asn Thr Val Ser Leu Thr Cys Leu Ile Lys Asp Phe Phe
130 135 140
Pro Pro Asp Ile Asp Val Glu Trp Gln Ser Asn Gly Gln Gln Glu Pro
145 150 155 160
Glu Ser Lys Tyr Arg Thr Thr Pro Pro Gln Leu Asp Glu Asp Gly Ser
165 170 175
Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Ser Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Arg
180 185 190
Gly Asp Thr Phe Ile Cys Ala Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
195 200 205
Tyr Thr Gln Glu Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 178
<211> 220
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG-B собаки
Белок A+ C1q+ CD16 M(5)P P(39)R
<400> 178
Pro Ala Pro Glu Pro Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro
1 5 10 15
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Leu Ile Ala Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
20 25 30
Val Val Val Asp Leu Asp Arg Glu Asp Pro Glu Val Gln Ile Ser Trp
35 40 45
Phe Val Asp Gly Lys Gln Met Gln Thr Ala Lys Thr Gln Pro Arg Glu
50 55 60
Glu Gln Phe Asn Gly Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Gly
65 70 75 80
His Gln Asp Trp Leu Lys Gly Lys Gln Phe Thr Cys Lys Val Asn Asn
85 90 95
Lys Ala Leu Pro Ser Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Ala Arg Gly
100 105 110
Gln Ala His Gln Pro Ser Val Tyr Val Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu
115 120 125
Leu Ser Lys Asn Thr Val Ser Leu Thr Cys Leu Ile Lys Asp Phe Phe
130 135 140
Pro Pro Asp Ile Asp Val Glu Trp Gln Ser Asn Gly Gln Gln Glu Pro
145 150 155 160
Glu Ser Lys Tyr Arg Thr Thr Pro Pro Gln Leu Asp Glu Asp Gly Ser
165 170 175
Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Ser Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Arg
180 185 190
Gly Asp Thr Phe Ile Cys Ala Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
195 200 205
Tyr Thr Gln Glu Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 179
<211> 220
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG-B собаки
Белок A+ C1q CD16 M(5)P P(39)R K(93)R
<400> 179
Pro Ala Pro Glu Pro Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro
1 5 10 15
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Leu Ile Ala Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
20 25 30
Val Val Val Asp Leu Asp Arg Glu Asp Pro Glu Val Gln Ile Ser Trp
35 40 45
Phe Val Asp Gly Lys Gln Met Gln Thr Ala Lys Thr Gln Pro Arg Glu
50 55 60
Glu Gln Phe Asn Gly Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Gly
65 70 75 80
His Gln Asp Trp Leu Lys Gly Lys Gln Phe Thr Cys Arg Val Asn Asn
85 90 95
Lys Ala Leu Pro Ser Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Ala Arg Gly
100 105 110
Gln Ala His Gln Pro Ser Val Tyr Val Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu
115 120 125
Leu Ser Lys Asn Thr Val Ser Leu Thr Cys Leu Ile Lys Asp Phe Phe
130 135 140
Pro Pro Asp Ile Asp Val Glu Trp Gln Ser Asn Gly Gln Gln Glu Pro
145 150 155 160
Glu Ser Lys Tyr Arg Thr Thr Pro Pro Gln Leu Asp Glu Asp Gly Ser
165 170 175
Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Ser Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Arg
180 185 190
Gly Asp Thr Phe Ile Cys Ala Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
195 200 205
Tyr Thr Gln Glu Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 180
<211> 220
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG-C собаки
C1q+ Белок A+ I(21)T V(23)L T(24)I
<400> 180
Pro Gly Cys Gly Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro
1 5 10 15
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Leu Ile Ala Arg Thr Pro Thr Val Thr Cys
20 25 30
Val Val Val Asp Leu Asp Pro Glu Asn Pro Glu Val Gln Ile Ser Trp
35 40 45
Phe Val Asp Ser Lys Gln Val Gln Thr Ala Asn Thr Gln Pro Arg Glu
50 55 60
Glu Gln Ser Asn Gly Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Gly
65 70 75 80
His Gln Asp Trp Leu Ser Gly Lys Gln Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn
85 90 95
Lys Ala Leu Pro Ser Pro Ile Glu Glu Ile Ile Ser Lys Thr Pro Gly
100 105 110
Gln Ala His Gln Pro Asn Val Tyr Val Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
115 120 125
Met Ser Lys Asn Thr Val Thr Leu Thr Cys Leu Val Lys Asp Phe Phe
130 135 140
Pro Pro Glu Ile Asp Val Glu Trp Gln Ser Asn Gly Gln Gln Glu Pro
145 150 155 160
Glu Ser Lys Tyr Arg Met Thr Pro Pro Gln Leu Asp Glu Asp Gly Ser
165 170 175
Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Ser Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Arg
180 185 190
Gly Asp Thr Phe Ile Cys Ala Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
195 200 205
Tyr Thr Gln Ile Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 181
<211> 220
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG-C собаки
C1q+ Белок A+ I(21)T
<400> 181
Pro Gly Cys Gly Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro
1 5 10 15
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Val Thr Ala Arg Thr Pro Thr Val Thr Cys
20 25 30
Val Val Val Asp Leu Asp Pro Glu Asn Pro Glu Val Gln Ile Ser Trp
35 40 45
Phe Val Asp Ser Lys Gln Val Gln Thr Ala Asn Thr Gln Pro Arg Glu
50 55 60
Glu Gln Ser Asn Gly Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Gly
65 70 75 80
His Gln Asp Trp Leu Ser Gly Lys Gln Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn
85 90 95
Lys Ala Leu Pro Ser Pro Ile Glu Glu Ile Ile Ser Lys Thr Pro Gly
100 105 110
Gln Ala His Gln Pro Asn Val Tyr Val Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
115 120 125
Met Ser Lys Asn Thr Val Thr Leu Thr Cys Leu Val Lys Asp Phe Phe
130 135 140
Pro Pro Glu Ile Asp Val Glu Trp Gln Ser Asn Gly Gln Gln Glu Pro
145 150 155 160
Glu Ser Lys Tyr Arg Met Thr Pro Pro Gln Leu Asp Glu Asp Gly Ser
165 170 175
Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Ser Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Arg
180 185 190
Gly Asp Thr Phe Ile Cys Ala Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
195 200 205
Tyr Thr Gln Ile Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 182
<211> 220
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG-C собаки
Белок A C1q K(93)R
<400> 182
Pro Gly Cys Gly Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro
1 5 10 15
Lys Pro Lys Asp Ile Leu Val Thr Ala Arg Thr Pro Thr Val Thr Cys
20 25 30
Val Val Val Asp Leu Asp Pro Glu Asn Pro Glu Val Gln Ile Ser Trp
35 40 45
Phe Val Asp Ser Lys Gln Val Gln Thr Ala Asn Thr Gln Pro Arg Glu
50 55 60
Glu Gln Ser Asn Gly Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Gly
65 70 75 80
His Gln Asp Trp Leu Ser Gly Lys Gln Phe Lys Cys Arg Val Asn Asn
85 90 95
Lys Ala Leu Pro Ser Pro Ile Glu Glu Ile Ile Ser Lys Thr Pro Gly
100 105 110
Gln Ala His Gln Pro Asn Val Tyr Val Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
115 120 125
Met Ser Lys Asn Thr Val Thr Leu Thr Cys Leu Val Lys Asp Phe Phe
130 135 140
Pro Pro Glu Ile Asp Val Glu Trp Gln Ser Asn Gly Gln Gln Glu Pro
145 150 155 160
Glu Ser Lys Tyr Arg Met Thr Pro Pro Gln Leu Asp Glu Asp Gly Ser
165 170 175
Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Ser Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Arg
180 185 190
Gly Asp Thr Phe Ile Cys Ala Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
195 200 205
Tyr Thr Gln Ile Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 183
<211> 220
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG-C собаки
C1q K(93)R Белок A+ I(21)T V(23)L T(24)I
<400> 183
Pro Gly Cys Gly Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro
1 5 10 15
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Leu Ile Ala Arg Thr Pro Thr Val Thr Cys
20 25 30
Val Val Val Asp Leu Asp Pro Glu Asn Pro Glu Val Gln Ile Ser Trp
35 40 45
Phe Val Asp Ser Lys Gln Val Gln Thr Ala Asn Thr Gln Pro Arg Glu
50 55 60
Glu Gln Ser Asn Gly Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Gly
65 70 75 80
His Gln Asp Trp Leu Ser Gly Lys Gln Phe Lys Cys Arg Val Asn Asn
85 90 95
Lys Ala Leu Pro Ser Pro Ile Glu Glu Ile Ile Ser Lys Thr Pro Gly
100 105 110
Gln Ala His Gln Pro Asn Val Tyr Val Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
115 120 125
Met Ser Lys Asn Thr Val Thr Leu Thr Cys Leu Val Lys Asp Phe Phe
130 135 140
Pro Pro Glu Ile Asp Val Glu Trp Gln Ser Asn Gly Gln Gln Glu Pro
145 150 155 160
Glu Ser Lys Tyr Arg Met Thr Pro Pro Gln Leu Asp Glu Asp Gly Ser
165 170 175
Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Ser Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Arg
180 185 190
Gly Asp Thr Phe Ile Cys Ala Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
195 200 205
Tyr Thr Gln Ile Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 184
<211> 220
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG-C собаки
Белок A+ C1q+ CD16 L(5)P
<400> 184
Pro Gly Cys Gly Pro Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro
1 5 10 15
Lys Pro Lys Asp Ile Leu Val Thr Ala Arg Thr Pro Thr Val Thr Cys
20 25 30
Val Val Val Asp Leu Asp Pro Glu Asn Pro Glu Val Gln Ile Ser Trp
35 40 45
Phe Val Asp Ser Lys Gln Val Gln Thr Ala Asn Thr Gln Pro Arg Glu
50 55 60
Glu Gln Ser Asn Gly Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Gly
65 70 75 80
His Gln Asp Trp Leu Ser Gly Lys Gln Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn
85 90 95
Lys Ala Leu Pro Ser Pro Ile Glu Glu Ile Ile Ser Lys Thr Pro Gly
100 105 110
Gln Ala His Gln Pro Asn Val Tyr Val Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
115 120 125
Met Ser Lys Asn Thr Val Thr Leu Thr Cys Leu Val Lys Asp Phe Phe
130 135 140
Pro Pro Glu Ile Asp Val Glu Trp Gln Ser Asn Gly Gln Gln Glu Pro
145 150 155 160
Glu Ser Lys Tyr Arg Met Thr Pro Pro Gln Leu Asp Glu Asp Gly Ser
165 170 175
Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Ser Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Arg
180 185 190
Gly Asp Thr Phe Ile Cys Ala Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
195 200 205
Tyr Thr Gln Ile Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 185
<211> 220
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG-C собаки
Белок A+ C1q+ CD16 P(39)R
<400> 185
Pro Gly Cys Gly Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro
1 5 10 15
Lys Pro Lys Asp Ile Leu Val Thr Ala Arg Thr Pro Thr Val Thr Cys
20 25 30
Val Val Val Asp Leu Asp Arg Glu Asn Pro Glu Val Gln Ile Ser Trp
35 40 45
Phe Val Asp Ser Lys Gln Val Gln Thr Ala Asn Thr Gln Pro Arg Glu
50 55 60
Glu Gln Ser Asn Gly Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Gly
65 70 75 80
His Gln Asp Trp Leu Ser Gly Lys Gln Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn
85 90 95
Lys Ala Leu Pro Ser Pro Ile Glu Glu Ile Ile Ser Lys Thr Pro Gly
100 105 110
Gln Ala His Gln Pro Asn Val Tyr Val Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
115 120 125
Met Ser Lys Asn Thr Val Thr Leu Thr Cys Leu Val Lys Asp Phe Phe
130 135 140
Pro Pro Glu Ile Asp Val Glu Trp Gln Ser Asn Gly Gln Gln Glu Pro
145 150 155 160
Glu Ser Lys Tyr Arg Met Thr Pro Pro Gln Leu Asp Glu Asp Gly Ser
165 170 175
Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Ser Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Arg
180 185 190
Gly Asp Thr Phe Ile Cys Ala Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
195 200 205
Tyr Thr Gln Ile Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 186
<211> 220
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG-C собаки
Белок A+ C1q+ CD16 D(38)G
<400> 186
Pro Gly Cys Gly Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro
1 5 10 15
Lys Pro Lys Asp Ile Leu Val Thr Ala Arg Thr Pro Thr Val Thr Cys
20 25 30
Val Val Val Asp Leu Gly Pro Glu Asn Pro Glu Val Gln Ile Ser Trp
35 40 45
Phe Val Asp Ser Lys Gln Val Gln Thr Ala Asn Thr Gln Pro Arg Glu
50 55 60
Glu Gln Ser Asn Gly Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Gly
65 70 75 80
His Gln Asp Trp Leu Ser Gly Lys Gln Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn
85 90 95
Lys Ala Leu Pro Ser Pro Ile Glu Glu Ile Ile Ser Lys Thr Pro Gly
100 105 110
Gln Ala His Gln Pro Asn Val Tyr Val Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
115 120 125
Met Ser Lys Asn Thr Val Thr Leu Thr Cys Leu Val Lys Asp Phe Phe
130 135 140
Pro Pro Glu Ile Asp Val Glu Trp Gln Ser Asn Gly Gln Gln Glu Pro
145 150 155 160
Glu Ser Lys Tyr Arg Met Thr Pro Pro Gln Leu Asp Glu Asp Gly Ser
165 170 175
Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Ser Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Arg
180 185 190
Gly Asp Thr Phe Ile Cys Ala Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
195 200 205
Tyr Thr Gln Ile Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 187
<211> 220
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG-C собаки
Белок A+ C1q+ CD16 K(97)I
<400> 187
Pro Gly Cys Gly Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro
1 5 10 15
Lys Pro Lys Asp Ile Leu Val Thr Ala Arg Thr Pro Thr Val Thr Cys
20 25 30
Val Val Val Asp Leu Asp Pro Glu Asn Pro Glu Val Gln Ile Ser Trp
35 40 45
Phe Val Asp Ser Lys Gln Val Gln Thr Ala Asn Thr Gln Pro Arg Glu
50 55 60
Glu Gln Ser Asn Gly Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Gly
65 70 75 80
His Gln Asp Trp Leu Ser Gly Lys Gln Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn
85 90 95
Ile Ala Leu Pro Ser Pro Ile Glu Glu Ile Ile Ser Lys Thr Pro Gly
100 105 110
Gln Ala His Gln Pro Asn Val Tyr Val Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
115 120 125
Met Ser Lys Asn Thr Val Thr Leu Thr Cys Leu Val Lys Asp Phe Phe
130 135 140
Pro Pro Glu Ile Asp Val Glu Trp Gln Ser Asn Gly Gln Gln Glu Pro
145 150 155 160
Glu Ser Lys Tyr Arg Met Thr Pro Pro Gln Leu Asp Glu Asp Gly Ser
165 170 175
Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Ser Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Arg
180 185 190
Gly Asp Thr Phe Ile Cys Ala Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
195 200 205
Tyr Thr Gln Ile Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 188
<211> 220
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG-C собаки
Белок A+ C1q+ CD16 A(98)G
<400> 188
Pro Gly Cys Gly Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro
1 5 10 15
Lys Pro Lys Asp Ile Leu Val Thr Ala Arg Thr Pro Thr Val Thr Cys
20 25 30
Val Val Val Asp Leu Asp Pro Glu Asn Pro Glu Val Gln Ile Ser Trp
35 40 45
Phe Val Asp Ser Lys Gln Val Gln Thr Ala Asn Thr Gln Pro Arg Glu
50 55 60
Glu Gln Ser Asn Gly Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Gly
65 70 75 80
His Gln Asp Trp Leu Ser Gly Lys Gln Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn
85 90 95
Lys Gly Leu Pro Ser Pro Ile Glu Glu Ile Ile Ser Lys Thr Pro Gly
100 105 110
Gln Ala His Gln Pro Asn Val Tyr Val Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
115 120 125
Met Ser Lys Asn Thr Val Thr Leu Thr Cys Leu Val Lys Asp Phe Phe
130 135 140
Pro Pro Glu Ile Asp Val Glu Trp Gln Ser Asn Gly Gln Gln Glu Pro
145 150 155 160
Glu Ser Lys Tyr Arg Met Thr Pro Pro Gln Leu Asp Glu Asp Gly Ser
165 170 175
Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Ser Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Arg
180 185 190
Gly Asp Thr Phe Ile Cys Ala Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
195 200 205
Tyr Thr Gln Ile Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 189
<211> 220
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG-C собаки
Белок A+ C1q+ CD16 D(38)G K(97)I A(98)G
<400> 189
Pro Gly Cys Gly Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro
1 5 10 15
Lys Pro Lys Asp Ile Leu Val Thr Ala Arg Thr Pro Thr Val Thr Cys
20 25 30
Val Val Val Asp Leu Gly Pro Glu Asn Pro Glu Val Gln Ile Ser Trp
35 40 45
Phe Val Asp Ser Lys Gln Val Gln Thr Ala Asn Thr Gln Pro Arg Glu
50 55 60
Glu Gln Ser Asn Gly Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Gly
65 70 75 80
His Gln Asp Trp Leu Ser Gly Lys Gln Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn
85 90 95
Ile Gly Leu Pro Ser Pro Ile Glu Glu Ile Ile Ser Lys Thr Pro Gly
100 105 110
Gln Ala His Gln Pro Asn Val Tyr Val Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
115 120 125
Met Ser Lys Asn Thr Val Thr Leu Thr Cys Leu Val Lys Asp Phe Phe
130 135 140
Pro Pro Glu Ile Asp Val Glu Trp Gln Ser Asn Gly Gln Gln Glu Pro
145 150 155 160
Glu Ser Lys Tyr Arg Met Thr Pro Pro Gln Leu Asp Glu Asp Gly Ser
165 170 175
Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Ser Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Arg
180 185 190
Gly Asp Thr Phe Ile Cys Ala Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
195 200 205
Tyr Thr Gln Ile Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 190
<211> 220
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG-C собаки
Белок A+ C1q CD16 D(38)G K(93)R K(97)I A(98)G
<400> 190
Pro Gly Cys Gly Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro
1 5 10 15
Lys Pro Lys Asp Ile Leu Val Thr Ala Arg Thr Pro Thr Val Thr Cys
20 25 30
Val Val Val Asp Leu Gly Pro Glu Asn Pro Glu Val Gln Ile Ser Trp
35 40 45
Phe Val Asp Ser Lys Gln Val Gln Thr Ala Asn Thr Gln Pro Arg Glu
50 55 60
Glu Gln Ser Asn Gly Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Gly
65 70 75 80
His Gln Asp Trp Leu Ser Gly Lys Gln Phe Lys Cys Arg Val Asn Asn
85 90 95
Ile Gly Leu Pro Ser Pro Ile Glu Glu Ile Ile Ser Lys Thr Pro Gly
100 105 110
Gln Ala His Gln Pro Asn Val Tyr Val Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
115 120 125
Met Ser Lys Asn Thr Val Thr Leu Thr Cys Leu Val Lys Asp Phe Phe
130 135 140
Pro Pro Glu Ile Asp Val Glu Trp Gln Ser Asn Gly Gln Gln Glu Pro
145 150 155 160
Glu Ser Lys Tyr Arg Met Thr Pro Pro Gln Leu Asp Glu Asp Gly Ser
165 170 175
Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Ser Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Arg
180 185 190
Gly Asp Thr Phe Ile Cys Ala Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
195 200 205
Tyr Thr Gln Ile Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 191
<211> 220
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG-C собаки
Белок A+ C1q+ CD16 L(5)P P(39)R
<400> 191
Pro Gly Cys Gly Pro Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro
1 5 10 15
Lys Pro Lys Asp Ile Leu Val Thr Ala Arg Thr Pro Thr Val Thr Cys
20 25 30
Val Val Val Asp Leu Asp Arg Glu Asn Pro Glu Val Gln Ile Ser Trp
35 40 45
Phe Val Asp Ser Lys Gln Val Gln Thr Ala Asn Thr Gln Pro Arg Glu
50 55 60
Glu Gln Ser Asn Gly Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Gly
65 70 75 80
His Gln Asp Trp Leu Ser Gly Lys Gln Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn
85 90 95
Lys Ala Leu Pro Ser Pro Ile Glu Glu Ile Ile Ser Lys Thr Pro Gly
100 105 110
Gln Ala His Gln Pro Asn Val Tyr Val Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
115 120 125
Met Ser Lys Asn Thr Val Thr Leu Thr Cys Leu Val Lys Asp Phe Phe
130 135 140
Pro Pro Glu Ile Asp Val Glu Trp Gln Ser Asn Gly Gln Gln Glu Pro
145 150 155 160
Glu Ser Lys Tyr Arg Met Thr Pro Pro Gln Leu Asp Glu Asp Gly Ser
165 170 175
Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Ser Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Arg
180 185 190
Gly Asp Thr Phe Ile Cys Ala Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
195 200 205
Tyr Thr Gln Ile Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 192
<211> 220
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG-C собаки
Белок A+ C1q CD16 M(5)P P(39)R K(93)R
<400> 192
Pro Gly Cys Gly Pro Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro
1 5 10 15
Lys Pro Lys Asp Ile Leu Val Thr Ala Arg Thr Pro Thr Val Thr Cys
20 25 30
Val Val Val Asp Leu Asp Arg Glu Asn Pro Glu Val Gln Ile Ser Trp
35 40 45
Phe Val Asp Ser Lys Gln Val Gln Thr Ala Asn Thr Gln Pro Arg Glu
50 55 60
Glu Gln Ser Asn Gly Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Gly
65 70 75 80
His Gln Asp Trp Leu Ser Gly Lys Gln Phe Lys Cys Arg Val Asn Asn
85 90 95
Lys Ala Leu Pro Ser Pro Ile Glu Glu Ile Ile Ser Lys Thr Pro Gly
100 105 110
Gln Ala His Gln Pro Asn Val Tyr Val Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
115 120 125
Met Ser Lys Asn Thr Val Thr Leu Thr Cys Leu Val Lys Asp Phe Phe
130 135 140
Pro Pro Glu Ile Asp Val Glu Trp Gln Ser Asn Gly Gln Gln Glu Pro
145 150 155 160
Glu Ser Lys Tyr Arg Met Thr Pro Pro Gln Leu Asp Glu Asp Gly Ser
165 170 175
Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Ser Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Arg
180 185 190
Gly Asp Thr Phe Ile Cys Ala Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
195 200 205
Tyr Thr Gln Ile Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 193
<211> 221
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG-D собаки
C1q Белок A+ I(21)T R(23)L T(25)A E(80)G Q(207)H
<400> 193
Pro Val Pro Glu Ser Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro
1 5 10 15
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Leu Ile Ala Arg Thr Pro Glu Ile Thr Cys
20 25 30
Val Val Leu Asp Leu Gly Arg Glu Asp Pro Glu Val Gln Ile Ser Trp
35 40 45
Phe Val Asp Gly Lys Glu Val His Thr Ala Lys Thr Gln Pro Arg Glu
50 55 60
Gln Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Gly
65 70 75 80
His Gln Asp Trp Leu Thr Gly Lys Glu Phe Lys Cys Arg Val Asn His
85 90 95
Ile Gly Leu Pro Ser Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Ala Arg Gly
100 105 110
Gln Ala His Gln Pro Ser Val Tyr Val Leu Pro Pro Ser Pro Lys Glu
115 120 125
Leu Ser Ser Ser Asp Thr Val Thr Leu Thr Cys Leu Ile Lys Asp Phe
130 135 140
Phe Pro Pro Glu Ile Asp Val Glu Trp Gln Ser Asn Gly Gln Pro Glu
145 150 155 160
Pro Glu Ser Lys Tyr His Thr Thr Ala Pro Gln Leu Asp Glu Asp Gly
165 170 175
Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Ser Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln
180 185 190
Gln Gly Asp Thr Phe Thr Cys Ala Val Met His Glu Ala Leu His Asn
195 200 205
His Tyr Thr Asp Leu Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 194
<211> 221
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG-D собаки
C1q Белок A+ I(21)T Q(207)H
<400> 194
Pro Val Pro Glu Ser Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro
1 5 10 15
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Arg Ile Thr Arg Thr Pro Glu Ile Thr Cys
20 25 30
Val Val Leu Asp Leu Gly Arg Glu Asp Pro Glu Val Gln Ile Ser Trp
35 40 45
Phe Val Asp Gly Lys Glu Val His Thr Ala Lys Thr Gln Pro Arg Glu
50 55 60
Gln Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Glu
65 70 75 80
His Gln Asp Trp Leu Thr Gly Lys Glu Phe Lys Cys Arg Val Asn His
85 90 95
Ile Gly Leu Pro Ser Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Ala Arg Gly
100 105 110
Gln Ala His Gln Pro Ser Val Tyr Val Leu Pro Pro Ser Pro Lys Glu
115 120 125
Leu Ser Ser Ser Asp Thr Val Thr Leu Thr Cys Leu Ile Lys Asp Phe
130 135 140
Phe Pro Pro Glu Ile Asp Val Glu Trp Gln Ser Asn Gly Gln Pro Glu
145 150 155 160
Pro Glu Ser Lys Tyr His Thr Thr Ala Pro Gln Leu Asp Glu Asp Gly
165 170 175
Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Ser Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln
180 185 190
Gln Gly Asp Thr Phe Thr Cys Ala Val Met His Glu Ala Leu His Asn
195 200 205
His Tyr Thr Asp Leu Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 195
<211> 221
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG-A собаки
Биспецифический выступ T(138)W
<400> 195
Pro Val Pro Glu Pro Leu Gly Gly Pro Ser Val Leu Ile Phe Pro Pro
1 5 10 15
Lys Pro Lys Asp Ile Leu Arg Ile Thr Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
20 25 30
Val Val Leu Asp Leu Gly Arg Glu Asp Pro Glu Val Gln Ile Ser Trp
35 40 45
Phe Val Asp Gly Lys Glu Val His Thr Ala Lys Thr Gln Ser Arg Glu
50 55 60
Gln Gln Phe Asn Gly Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Glu
65 70 75 80
His Gln Asp Trp Leu Thr Gly Lys Glu Phe Lys Cys Arg Val Asn His
85 90 95
Ile Asp Leu Pro Ser Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Ala Arg Gly
100 105 110
Arg Ala His Lys Pro Ser Val Tyr Val Leu Pro Pro Ser Pro Lys Glu
115 120 125
Leu Ser Ser Ser Asp Thr Val Ser Ile Trp Cys Leu Ile Lys Asp Phe
130 135 140
Tyr Pro Pro Asp Ile Asp Val Glu Trp Gln Ser Asn Gly Gln Gln Glu
145 150 155 160
Pro Glu Arg Lys His Arg Met Thr Pro Pro Gln Leu Asp Glu Asp Gly
165 170 175
Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Ser Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln
180 185 190
Gln Gly Asp Pro Phe Thr Cys Ala Val Met His Glu Thr Leu Gln Asn
195 200 205
His Tyr Thr Asp Leu Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 196
<211> 220
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG-B собаки
Биспецифический выступ T(137)W
<400> 196
Pro Ala Pro Glu Met Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro
1 5 10 15
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Leu Ile Ala Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
20 25 30
Val Val Val Asp Leu Asp Pro Glu Asp Pro Glu Val Gln Ile Ser Trp
35 40 45
Phe Val Asp Gly Lys Gln Met Gln Thr Ala Lys Thr Gln Pro Arg Glu
50 55 60
Glu Gln Phe Asn Gly Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Gly
65 70 75 80
His Gln Asp Trp Leu Lys Gly Lys Gln Phe Thr Cys Lys Val Asn Asn
85 90 95
Lys Ala Leu Pro Ser Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Ala Arg Gly
100 105 110
Gln Ala His Gln Pro Ser Val Tyr Val Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu
115 120 125
Leu Ser Lys Asn Thr Val Ser Leu Trp Cys Leu Ile Lys Asp Phe Phe
130 135 140
Pro Pro Asp Ile Asp Val Glu Trp Gln Ser Asn Gly Gln Gln Glu Pro
145 150 155 160
Glu Ser Lys Tyr Arg Thr Thr Pro Pro Gln Leu Asp Glu Asp Gly Ser
165 170 175
Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Ser Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Arg
180 185 190
Gly Asp Thr Phe Ile Cys Ala Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
195 200 205
Tyr Thr Gln Glu Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 197
<211> 220
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG-C собаки
Биспецифический выступ T(137)W
<400> 197
Pro Gly Cys Gly Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro
1 5 10 15
Lys Pro Lys Asp Ile Leu Val Thr Ala Arg Thr Pro Thr Val Thr Cys
20 25 30
Val Val Val Asp Leu Asp Pro Glu Asn Pro Glu Val Gln Ile Ser Trp
35 40 45
Phe Val Asp Ser Lys Gln Val Gln Thr Ala Asn Thr Gln Pro Arg Glu
50 55 60
Glu Gln Ser Asn Gly Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Gly
65 70 75 80
His Gln Asp Trp Leu Ser Gly Lys Gln Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn
85 90 95
Lys Ala Leu Pro Ser Pro Ile Glu Glu Ile Ile Ser Lys Thr Pro Gly
100 105 110
Gln Ala His Gln Pro Asn Val Tyr Val Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
115 120 125
Met Ser Lys Asn Thr Val Thr Leu Trp Cys Leu Val Lys Asp Phe Phe
130 135 140
Pro Pro Glu Ile Asp Val Glu Trp Gln Ser Asn Gly Gln Gln Glu Pro
145 150 155 160
Glu Ser Lys Tyr Arg Met Thr Pro Pro Gln Leu Asp Glu Asp Gly Ser
165 170 175
Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Ser Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Arg
180 185 190
Gly Asp Thr Phe Ile Cys Ala Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
195 200 205
Tyr Thr Gln Ile Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 198
<211> 221
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG-D собаки
Биспецифический выступ T(138)W
<400> 198
Pro Val Pro Glu Ser Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro
1 5 10 15
Lys Pro Lys Asp Ile Leu Arg Ile Thr Arg Thr Pro Glu Ile Thr Cys
20 25 30
Val Val Leu Asp Leu Gly Arg Glu Asp Pro Glu Val Gln Ile Ser Trp
35 40 45
Phe Val Asp Gly Lys Glu Val His Thr Ala Lys Thr Gln Pro Arg Glu
50 55 60
Gln Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Glu
65 70 75 80
His Gln Asp Trp Leu Thr Gly Lys Glu Phe Lys Cys Arg Val Asn His
85 90 95
Ile Gly Leu Pro Ser Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Ala Arg Gly
100 105 110
Gln Ala His Gln Pro Ser Val Tyr Val Leu Pro Pro Ser Pro Lys Glu
115 120 125
Leu Ser Ser Ser Asp Thr Val Thr Leu Trp Cys Leu Ile Lys Asp Phe
130 135 140
Phe Pro Pro Glu Ile Asp Val Glu Trp Gln Ser Asn Gly Gln Pro Glu
145 150 155 160
Pro Glu Ser Lys Tyr His Thr Thr Ala Pro Gln Leu Asp Glu Asp Gly
165 170 175
Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Ser Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln
180 185 190
Gln Gly Asp Thr Phe Thr Cys Ala Val Met His Glu Ala Leu Gln Asn
195 200 205
His Tyr Thr Asp Leu Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 199
<211> 221
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG-A собаки
Биспецифическая впадина T(138)S L(140)A
<400> 199
Pro Val Pro Glu Pro Leu Gly Gly Pro Ser Val Leu Ile Phe Pro Pro
1 5 10 15
Lys Pro Lys Asp Ile Leu Arg Ile Thr Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
20 25 30
Val Val Leu Asp Leu Gly Arg Glu Asp Pro Glu Val Gln Ile Ser Trp
35 40 45
Phe Val Asp Gly Lys Glu Val His Thr Ala Lys Thr Gln Ser Arg Glu
50 55 60
Gln Gln Phe Asn Gly Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Glu
65 70 75 80
His Gln Asp Trp Leu Thr Gly Lys Glu Phe Lys Cys Arg Val Asn His
85 90 95
Ile Asp Leu Pro Ser Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Ala Arg Gly
100 105 110
Arg Ala His Lys Pro Ser Val Tyr Val Leu Pro Pro Ser Pro Lys Glu
115 120 125
Leu Ser Ser Ser Asp Thr Val Ser Ile Ser Cys Ala Ile Lys Asp Phe
130 135 140
Tyr Pro Pro Asp Ile Asp Val Glu Trp Gln Ser Asn Gly Gln Gln Glu
145 150 155 160
Pro Glu Arg Lys His Arg Met Thr Pro Pro Gln Leu Asp Glu Asp Gly
165 170 175
Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Ser Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln
180 185 190
Gln Gly Asp Pro Phe Thr Cys Ala Val Met His Glu Thr Leu Gln Asn
195 200 205
His Tyr Thr Asp Leu Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 200
<211> 220
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG-B собаки
Биспецифическая впадина T(137)S L(139)A
<400> 200
Pro Ala Pro Glu Met Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro
1 5 10 15
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Leu Ile Ala Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
20 25 30
Val Val Val Asp Leu Asp Pro Glu Asp Pro Glu Val Gln Ile Ser Trp
35 40 45
Phe Val Asp Gly Lys Gln Met Gln Thr Ala Lys Thr Gln Pro Arg Glu
50 55 60
Glu Gln Phe Asn Gly Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Gly
65 70 75 80
His Gln Asp Trp Leu Lys Gly Lys Gln Phe Thr Cys Lys Val Asn Asn
85 90 95
Lys Ala Leu Pro Ser Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Ala Arg Gly
100 105 110
Gln Ala His Gln Pro Ser Val Tyr Val Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu
115 120 125
Leu Ser Lys Asn Thr Val Ser Leu Ser Cys Ala Ile Lys Asp Phe Phe
130 135 140
Pro Pro Asp Ile Asp Val Glu Trp Gln Ser Asn Gly Gln Gln Glu Pro
145 150 155 160
Glu Ser Lys Tyr Arg Thr Thr Pro Pro Gln Leu Asp Glu Asp Gly Ser
165 170 175
Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Ser Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Arg
180 185 190
Gly Asp Thr Phe Ile Cys Ala Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
195 200 205
Tyr Thr Gln Glu Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 201
<211> 220
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG-C собаки
Биспецифическая впадина T(137)S L(139)A
<400> 201
Pro Gly Cys Gly Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro
1 5 10 15
Lys Pro Lys Asp Ile Leu Val Thr Ala Arg Thr Pro Thr Val Thr Cys
20 25 30
Val Val Val Asp Leu Asp Pro Glu Asn Pro Glu Val Gln Ile Ser Trp
35 40 45
Phe Val Asp Ser Lys Gln Val Gln Thr Ala Asn Thr Gln Pro Arg Glu
50 55 60
Glu Gln Ser Asn Gly Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Gly
65 70 75 80
His Gln Asp Trp Leu Ser Gly Lys Gln Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn
85 90 95
Lys Ala Leu Pro Ser Pro Ile Glu Glu Ile Ile Ser Lys Thr Pro Gly
100 105 110
Gln Ala His Gln Pro Asn Val Tyr Val Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
115 120 125
Met Ser Lys Asn Thr Val Thr Leu Ser Cys Ala Val Lys Asp Phe Phe
130 135 140
Pro Pro Glu Ile Asp Val Glu Trp Gln Ser Asn Gly Gln Gln Glu Pro
145 150 155 160
Glu Ser Lys Tyr Arg Met Thr Pro Pro Gln Leu Asp Glu Asp Gly Ser
165 170 175
Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Ser Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Arg
180 185 190
Gly Asp Thr Phe Ile Cys Ala Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
195 200 205
Tyr Thr Gln Ile Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 202
<211> 221
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG-D собаки
Биспецифическая впадина T(138)S L(140)A
<400> 202
Pro Val Pro Glu Ser Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro
1 5 10 15
Lys Pro Lys Asp Ile Leu Arg Ile Thr Arg Thr Pro Glu Ile Thr Cys
20 25 30
Val Val Leu Asp Leu Gly Arg Glu Asp Pro Glu Val Gln Ile Ser Trp
35 40 45
Phe Val Asp Gly Lys Glu Val His Thr Ala Lys Thr Gln Pro Arg Glu
50 55 60
Gln Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Glu
65 70 75 80
His Gln Asp Trp Leu Thr Gly Lys Glu Phe Lys Cys Arg Val Asn His
85 90 95
Ile Gly Leu Pro Ser Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Ala Arg Gly
100 105 110
Gln Ala His Gln Pro Ser Val Tyr Val Leu Pro Pro Ser Pro Lys Glu
115 120 125
Leu Ser Ser Ser Asp Thr Val Thr Leu Ser Cys Ala Ile Lys Asp Phe
130 135 140
Phe Pro Pro Glu Ile Asp Val Glu Trp Gln Ser Asn Gly Gln Pro Glu
145 150 155 160
Pro Glu Ser Lys Tyr His Thr Thr Ala Pro Gln Leu Asp Glu Asp Gly
165 170 175
Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Ser Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln
180 185 190
Gln Gly Asp Thr Phe Thr Cys Ala Val Met His Glu Ala Leu Gln Asn
195 200 205
His Tyr Thr Asp Leu Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 203
<211> 237
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный Fc дикого типа IgG1a кошки
Белок A+ C1q+
<400> 203
Arg Lys Thr Asp His Pro Pro Gly Pro Lys Pro Cys Asp Cys Pro Lys
1 5 10 15
Cys Pro Pro Pro Glu Met Leu Gly Gly Pro Ser Ile Phe Ile Phe Pro
20 25 30
Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Ser Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr
35 40 45
Cys Leu Val Val Asp Leu Gly Pro Asp Asp Ser Asp Val Gln Ile Thr
50 55 60
Trp Phe Val Asp Asn Thr Gln Val Tyr Thr Ala Lys Thr Ser Pro Arg
65 70 75 80
Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile
85 90 95
Leu His Gln Asp Trp Leu Lys Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn
100 105 110
Ser Lys Ser Leu Pro Ser Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Ala Lys
115 120 125
Gly Gln Pro His Glu Pro Gln Val Tyr Val Leu Pro Pro Ala Gln Glu
130 135 140
Glu Leu Ser Glu Asn Lys Val Ser Val Thr Cys Leu Ile Lys Ser Phe
145 150 155 160
His Pro Pro Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ile Thr Gly Gln Pro Glu
165 170 175
Pro Glu Asn Asn Tyr Arg Thr Thr Pro Pro Gln Leu Asp Ser Asp Gly
180 185 190
Thr Tyr Phe Val Tyr Ser Lys Leu Ser Val Asp Arg Ser His Trp Gln
195 200 205
Arg Gly Asn Thr Tyr Thr Cys Ser Val Ser His Glu Ala Leu His Ser
210 215 220
His His Thr Gln Lys Ser Leu Thr Gln Ser Pro Gly Lys
225 230 235
<210> 204
<211> 237
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный Fc дикого типа IgG1a кошки
Белок A+ C1q+
<400> 204
Arg Lys Thr Asp His Pro Pro Gly Pro Lys Thr Gly Glu Gly Pro Lys
1 5 10 15
Cys Pro Pro Pro Glu Met Leu Gly Gly Pro Ser Ile Phe Ile Phe Pro
20 25 30
Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Ser Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr
35 40 45
Cys Leu Val Val Asp Leu Gly Pro Asp Asp Ser Asp Val Gln Ile Thr
50 55 60
Trp Phe Val Asp Asn Thr Gln Val Tyr Thr Ala Lys Thr Ser Pro Arg
65 70 75 80
Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile
85 90 95
Leu His Gln Asp Trp Leu Lys Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn
100 105 110
Ser Lys Ser Leu Pro Ser Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Ala Lys
115 120 125
Gly Gln Pro His Glu Pro Gln Val Tyr Val Leu Pro Pro Ala Gln Glu
130 135 140
Glu Leu Ser Glu Asn Lys Val Ser Val Thr Cys Leu Ile Lys Ser Phe
145 150 155 160
His Pro Pro Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ile Thr Gly Gln Pro Glu
165 170 175
Pro Glu Asn Asn Tyr Arg Thr Thr Pro Pro Gln Leu Asp Ser Asp Gly
180 185 190
Thr Tyr Phe Val Tyr Ser Lys Leu Ser Val Asp Arg Ser His Trp Gln
195 200 205
Arg Gly Asn Thr Tyr Thr Cys Ser Val Ser His Glu Ala Leu His Ser
210 215 220
His His Thr Gln Lys Ser Leu Thr Gln Ser Pro Gly Lys
225 230 235
<210> 205
<211> 237
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный Fc дикого типа IgG1b кошки
Белок A+ C1q+
<400> 205
Arg Lys Thr Asp His Pro Pro Gly Pro Lys Pro Cys Asp Cys Pro Lys
1 5 10 15
Cys Pro Pro Pro Glu Met Leu Gly Gly Pro Ser Ile Phe Ile Phe Pro
20 25 30
Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Ser Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr
35 40 45
Cys Leu Val Val Asp Leu Gly Pro Asp Asp Ser Asp Val Gln Ile Thr
50 55 60
Trp Phe Val Asp Asn Thr Gln Val Tyr Thr Ala Lys Thr Ser Pro Arg
65 70 75 80
Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile
85 90 95
Leu His Gln Asp Trp Leu Lys Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn
100 105 110
Ser Lys Ser Leu Pro Ser Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Asp Lys
115 120 125
Gly Gln Pro His Glu Pro Gln Val Tyr Val Leu Pro Pro Ala Gln Glu
130 135 140
Glu Leu Ser Glu Asn Lys Val Ser Val Thr Cys Leu Ile Glu Gly Phe
145 150 155 160
Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ile Thr Gly Gln Pro Glu
165 170 175
Pro Glu Asn Asn Tyr Arg Thr Thr Pro Pro Gln Leu Asp Ser Asp Gly
180 185 190
Thr Tyr Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Ser Val Asp Arg Ser Arg Trp Gln
195 200 205
Arg Gly Asn Thr Tyr Thr Cys Ser Val Ser His Glu Ala Leu His Ser
210 215 220
His His Thr Gln Lys Ser Leu Thr Gln Ser Pro Gly Lys
225 230 235
<210> 206
<211> 237
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный Fc дикого типа IgG1b кошки
Белок A+ C1q+
<400> 206
Arg Lys Thr Asp His Pro Pro Gly Pro Lys Thr Gly Glu Gly Pro Lys
1 5 10 15
Cys Pro Pro Pro Glu Met Leu Gly Gly Pro Ser Ile Phe Ile Phe Pro
20 25 30
Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Ser Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr
35 40 45
Cys Leu Val Val Asp Leu Gly Pro Asp Asp Ser Asp Val Gln Ile Thr
50 55 60
Trp Phe Val Asp Asn Thr Gln Val Tyr Thr Ala Lys Thr Ser Pro Arg
65 70 75 80
Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile
85 90 95
Leu His Gln Asp Trp Leu Lys Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn
100 105 110
Ser Lys Ser Leu Pro Ser Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Asp Lys
115 120 125
Gly Gln Pro His Glu Pro Gln Val Tyr Val Leu Pro Pro Ala Gln Glu
130 135 140
Glu Leu Ser Glu Asn Lys Val Ser Val Thr Cys Leu Ile Glu Gly Phe
145 150 155 160
Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ile Thr Gly Gln Pro Glu
165 170 175
Pro Glu Asn Asn Tyr Arg Thr Thr Pro Pro Gln Leu Asp Ser Asp Gly
180 185 190
Thr Tyr Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Ser Val Asp Arg Ser Arg Trp Gln
195 200 205
Arg Gly Asn Thr Tyr Thr Cys Ser Val Ser His Glu Ala Leu His Ser
210 215 220
His His Thr Gln Lys Ser Leu Thr Gln Ser Pro Gly Lys
225 230 235
<210> 207
<211> 237
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный Fc дикого типа IgG2 кошки
Белок A+ C1q
<400> 207
Pro Lys Thr Ala Ser Thr Ile Glu Ser Lys Thr Gly Glu Gly Pro Lys
1 5 10 15
Cys Pro Val Pro Glu Ile Pro Gly Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro
20 25 30
Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Ser Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr
35 40 45
Cys Leu Val Val Asp Leu Gly Pro Asp Asp Ser Asn Val Gln Ile Thr
50 55 60
Trp Phe Val Asp Asn Thr Glu Met His Thr Ala Lys Thr Arg Pro Arg
65 70 75 80
Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile
85 90 95
Leu His Gln Asp Trp Leu Lys Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn
100 105 110
Ser Lys Ser Leu Pro Ser Ala Met Glu Arg Thr Ile Ser Lys Ala Lys
115 120 125
Gly Gln Pro His Glu Pro Gln Val Tyr Val Leu Pro Pro Thr Gln Glu
130 135 140
Glu Leu Ser Glu Asn Lys Val Ser Val Thr Cys Leu Ile Lys Gly Phe
145 150 155 160
His Pro Pro Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ile Thr Gly Gln Pro Glu
165 170 175
Pro Glu Asn Asn Tyr Gln Thr Thr Pro Pro Gln Leu Asp Ser Asp Gly
180 185 190
Thr Tyr Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Ser Val Asp Arg Ser His Trp Gln
195 200 205
Arg Gly Asn Thr Tyr Thr Cys Ser Val Ser His Glu Ala Leu His Ser
210 215 220
His His Thr Gln Lys Ser Leu Thr Gln Ser Pro Gly Lys
225 230 235
<210> 208
<211> 237
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG1a кошки
с модифицированной шарнирной областью K(16)P
<400> 208
Arg Lys Thr Asp His Pro Pro Gly Pro Lys Pro Cys Asp Cys Pro Pro
1 5 10 15
Cys Pro Pro Pro Glu Met Leu Gly Gly Pro Ser Ile Phe Ile Phe Pro
20 25 30
Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Ser Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr
35 40 45
Cys Leu Val Val Asp Leu Gly Pro Asp Asp Ser Asp Val Gln Ile Thr
50 55 60
Trp Phe Val Asp Asn Thr Gln Val Tyr Thr Ala Lys Thr Ser Pro Arg
65 70 75 80
Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile
85 90 95
Leu His Gln Asp Trp Leu Lys Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn
100 105 110
Ser Lys Ser Leu Pro Ser Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Ala Lys
115 120 125
Gly Gln Pro His Glu Pro Gln Val Tyr Val Leu Pro Pro Ala Gln Glu
130 135 140
Glu Leu Ser Glu Asn Lys Val Ser Val Thr Cys Leu Ile Lys Ser Phe
145 150 155 160
His Pro Pro Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ile Thr Gly Gln Pro Glu
165 170 175
Pro Glu Asn Asn Tyr Arg Thr Thr Pro Pro Gln Leu Asp Ser Asp Gly
180 185 190
Thr Tyr Phe Val Tyr Ser Lys Leu Ser Val Asp Arg Ser His Trp Gln
195 200 205
Arg Gly Asn Thr Tyr Thr Cys Ser Val Ser His Glu Ala Leu His Ser
210 215 220
His His Thr Gln Lys Ser Leu Thr Gln Ser Pro Gly Lys
225 230 235
<210> 209
<211> 237
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG1a кошки
Белок A+ C1q P(198)A
<400> 209
Arg Lys Thr Asp His Pro Pro Gly Pro Lys Pro Cys Asp Cys Pro Lys
1 5 10 15
Cys Pro Pro Pro Glu Met Leu Gly Gly Pro Ser Ile Phe Ile Phe Pro
20 25 30
Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Ser Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr
35 40 45
Cys Leu Val Val Asp Leu Gly Pro Asp Asp Ser Asp Val Gln Ile Thr
50 55 60
Trp Phe Val Asp Asn Thr Gln Val Tyr Thr Ala Lys Thr Ser Pro Arg
65 70 75 80
Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile
85 90 95
Leu His Gln Asp Trp Leu Lys Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn
100 105 110
Ser Lys Ser Leu Pro Ser Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Ala Lys
115 120 125
Gly Gln Pro His Glu Pro Gln Val Tyr Val Leu Pro Pro Ala Gln Glu
130 135 140
Glu Leu Ser Glu Asn Lys Val Ser Val Thr Cys Leu Ile Lys Ser Phe
145 150 155 160
His Pro Pro Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ile Thr Gly Gln Pro Glu
165 170 175
Pro Glu Asn Asn Tyr Arg Thr Thr Pro Pro Gln Leu Asp Ser Asp Gly
180 185 190
Thr Tyr Phe Val Tyr Ser Lys Leu Ser Val Asp Arg Ser His Trp Gln
195 200 205
Arg Gly Asn Thr Tyr Thr Cys Ser Val Ser His Glu Ala Leu His Ser
210 215 220
His His Thr Gln Lys Ser Leu Thr Gln Ser Pro Gly Lys
225 230 235
<210> 210
<211> 237
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG1a кошки
Белок A+ C1q P(198)A
<400> 210
Arg Lys Thr Asp His Pro Pro Gly Pro Lys Thr Gly Glu Gly Pro Lys
1 5 10 15
Cys Pro Pro Pro Glu Met Leu Gly Gly Pro Ser Ile Phe Ile Phe Pro
20 25 30
Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Ser Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr
35 40 45
Cys Leu Val Val Asp Leu Gly Pro Asp Asp Ser Asp Val Gln Ile Thr
50 55 60
Trp Phe Val Asp Asn Thr Gln Val Tyr Thr Ala Lys Thr Ser Pro Arg
65 70 75 80
Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile
85 90 95
Leu His Gln Asp Trp Leu Lys Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn
100 105 110
Ser Lys Ser Leu Pro Ser Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Ala Lys
115 120 125
Gly Gln Pro His Glu Pro Gln Val Tyr Val Leu Pro Pro Ala Gln Glu
130 135 140
Glu Leu Ser Glu Asn Lys Val Ser Val Thr Cys Leu Ile Lys Ser Phe
145 150 155 160
His Pro Pro Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ile Thr Gly Gln Pro Glu
165 170 175
Pro Glu Asn Asn Tyr Arg Thr Thr Pro Pro Gln Leu Asp Ser Asp Gly
180 185 190
Thr Tyr Phe Val Tyr Ser Lys Leu Ser Val Asp Arg Ser His Trp Gln
195 200 205
Arg Gly Asn Thr Tyr Thr Cys Ser Val Ser His Glu Ala Leu His Ser
210 215 220
His His Thr Gln Lys Ser Leu Thr Gln Ser Pro Gly Lys
225 230 235
<210> 211
<211> 237
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG1b кошки
с модифицированной шарнирной областью K(16)P
<400> 211
Arg Lys Thr Asp His Pro Pro Gly Pro Lys Pro Cys Asp Cys Pro Pro
1 5 10 15
Cys Pro Pro Pro Glu Met Leu Gly Gly Pro Ser Ile Phe Ile Phe Pro
20 25 30
Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Ser Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr
35 40 45
Cys Leu Val Val Asp Leu Gly Pro Asp Asp Ser Asp Val Gln Ile Thr
50 55 60
Trp Phe Val Asp Asn Thr Gln Val Tyr Thr Ala Lys Thr Ser Pro Arg
65 70 75 80
Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile
85 90 95
Leu His Gln Asp Trp Leu Lys Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn
100 105 110
Ser Lys Ser Leu Pro Ser Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Asp Lys
115 120 125
Gly Gln Pro His Glu Pro Gln Val Tyr Val Leu Pro Pro Ala Gln Glu
130 135 140
Glu Leu Ser Glu Asn Lys Val Ser Val Thr Cys Leu Ile Glu Gly Phe
145 150 155 160
Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ile Thr Gly Gln Pro Glu
165 170 175
Pro Glu Asn Asn Tyr Arg Thr Thr Pro Pro Gln Leu Asp Ser Asp Gly
180 185 190
Thr Tyr Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Ser Val Asp Arg Ser Arg Trp Gln
195 200 205
Arg Gly Asn Thr Tyr Thr Cys Ser Val Ser His Glu Ala Leu His Ser
210 215 220
His His Thr Gln Lys Ser Leu Thr Gln Ser Pro Gly Lys
225 230 235
<210> 212
<211> 237
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG1b кошки
Белок A+ C1q P(198)A
<400> 212
Arg Lys Thr Asp His Pro Pro Gly Pro Lys Pro Cys Asp Cys Pro Lys
1 5 10 15
Cys Pro Pro Pro Glu Met Leu Gly Gly Pro Ser Ile Phe Ile Phe Pro
20 25 30
Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Ser Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr
35 40 45
Cys Leu Val Val Asp Leu Gly Pro Asp Asp Ser Asp Val Gln Ile Thr
50 55 60
Trp Phe Val Asp Asn Thr Gln Val Tyr Thr Ala Lys Thr Ser Pro Arg
65 70 75 80
Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile
85 90 95
Leu His Gln Asp Trp Leu Lys Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn
100 105 110
Ser Lys Ser Leu Pro Ser Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Asp Lys
115 120 125
Gly Gln Pro His Glu Pro Gln Val Tyr Val Leu Pro Pro Ala Gln Glu
130 135 140
Glu Leu Ser Glu Asn Lys Val Ser Val Thr Cys Leu Ile Glu Gly Phe
145 150 155 160
Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ile Thr Gly Gln Pro Glu
165 170 175
Pro Glu Asn Asn Tyr Arg Thr Thr Pro Pro Gln Leu Asp Ser Asp Gly
180 185 190
Thr Tyr Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Ser Val Asp Arg Ser Arg Trp Gln
195 200 205
Arg Gly Asn Thr Tyr Thr Cys Ser Val Ser His Glu Ala Leu His Ser
210 215 220
His His Thr Gln Lys Ser Leu Thr Gln Ser Pro Gly Lys
225 230 235
<210> 213
<211> 237
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG1b кошки
Белок A+ C1q P(198)A
<400> 213
Arg Lys Thr Asp His Pro Pro Gly Pro Lys Thr Gly Glu Gly Pro Lys
1 5 10 15
Cys Pro Pro Pro Glu Met Leu Gly Gly Pro Ser Ile Phe Ile Phe Pro
20 25 30
Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Ser Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr
35 40 45
Cys Leu Val Val Asp Leu Gly Pro Asp Asp Ser Asp Val Gln Ile Thr
50 55 60
Trp Phe Val Asp Asn Thr Gln Val Tyr Thr Ala Lys Thr Ser Pro Arg
65 70 75 80
Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile
85 90 95
Leu His Gln Asp Trp Leu Lys Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn
100 105 110
Ser Lys Ser Leu Pro Ser Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Asp Lys
115 120 125
Gly Gln Pro His Glu Pro Gln Val Tyr Val Leu Pro Pro Ala Gln Glu
130 135 140
Glu Leu Ser Glu Asn Lys Val Ser Val Thr Cys Leu Ile Glu Gly Phe
145 150 155 160
Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ile Thr Gly Gln Pro Glu
165 170 175
Pro Glu Asn Asn Tyr Arg Thr Thr Pro Pro Gln Leu Asp Ser Asp Gly
180 185 190
Thr Tyr Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Ser Val Asp Arg Ser Arg Trp Gln
195 200 205
Arg Gly Asn Thr Tyr Thr Cys Ser Val Ser His Glu Ala Leu His Ser
210 215 220
His His Thr Gln Lys Ser Leu Thr Gln Ser Pro Gly Lys
225 230 235
<210> 214
<211> 237
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG2 кошки с
Cys модифицированной шарнирной областью G(14)C
<400> 214
Pro Lys Thr Ala Ser Thr Ile Glu Ser Lys Thr Gly Glu Cys Pro Lys
1 5 10 15
Cys Pro Val Pro Glu Ile Pro Gly Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro
20 25 30
Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Ser Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr
35 40 45
Cys Leu Val Val Asp Leu Gly Pro Asp Asp Ser Asn Val Gln Ile Thr
50 55 60
Trp Phe Val Asp Asn Thr Glu Met His Thr Ala Lys Thr Arg Pro Arg
65 70 75 80
Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile
85 90 95
Leu His Gln Asp Trp Leu Lys Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn
100 105 110
Ser Lys Ser Leu Pro Ser Ala Met Glu Arg Thr Ile Ser Lys Ala Lys
115 120 125
Gly Gln Pro His Glu Pro Gln Val Tyr Val Leu Pro Pro Thr Gln Glu
130 135 140
Glu Leu Ser Glu Asn Lys Val Ser Val Thr Cys Leu Ile Lys Gly Phe
145 150 155 160
His Pro Pro Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ile Thr Gly Gln Pro Glu
165 170 175
Pro Glu Asn Asn Tyr Gln Thr Thr Pro Pro Gln Leu Asp Ser Asp Gly
180 185 190
Thr Tyr Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Ser Val Asp Arg Ser His Trp Gln
195 200 205
Arg Gly Asn Thr Tyr Thr Cys Ser Val Ser His Glu Ala Leu His Ser
210 215 220
His His Thr Gln Lys Ser Leu Thr Gln Ser Pro Gly Lys
225 230 235
<210> 215
<211> 237
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG2 кошки с
модифицированной шарнирной областью K(16)P
<400> 215
Pro Lys Thr Ala Ser Thr Ile Glu Ser Lys Thr Gly Glu Gly Pro Pro
1 5 10 15
Cys Pro Val Pro Glu Ile Pro Gly Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro
20 25 30
Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Ser Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr
35 40 45
Cys Leu Val Val Asp Leu Gly Pro Asp Asp Ser Asn Val Gln Ile Thr
50 55 60
Trp Phe Val Asp Asn Thr Glu Met His Thr Ala Lys Thr Arg Pro Arg
65 70 75 80
Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile
85 90 95
Leu His Gln Asp Trp Leu Lys Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn
100 105 110
Ser Lys Ser Leu Pro Ser Ala Met Glu Arg Thr Ile Ser Lys Ala Lys
115 120 125
Gly Gln Pro His Glu Pro Gln Val Tyr Val Leu Pro Pro Thr Gln Glu
130 135 140
Glu Leu Ser Glu Asn Lys Val Ser Val Thr Cys Leu Ile Lys Gly Phe
145 150 155 160
His Pro Pro Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ile Thr Gly Gln Pro Glu
165 170 175
Pro Glu Asn Asn Tyr Gln Thr Thr Pro Pro Gln Leu Asp Ser Asp Gly
180 185 190
Thr Tyr Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Ser Val Asp Arg Ser His Trp Gln
195 200 205
Arg Gly Asn Thr Tyr Thr Cys Ser Val Ser His Glu Ala Leu His Ser
210 215 220
His His Thr Gln Lys Ser Leu Thr Gln Ser Pro Gly Lys
225 230 235
<210> 216
<211> 237
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG2 кошки с IgG1
шарнирной областью кошки
<400> 216
Arg Lys Thr Asp His Pro Pro Gly Pro Lys Pro Cys Asp Cys Pro Lys
1 5 10 15
Cys Pro Pro Pro Glu Met Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro
20 25 30
Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Ser Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr
35 40 45
Cys Leu Val Val Asp Leu Gly Pro Asp Asp Ser Asn Val Gln Ile Thr
50 55 60
Trp Phe Val Asp Asn Thr Glu Met His Thr Ala Lys Thr Arg Pro Arg
65 70 75 80
Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile
85 90 95
Leu His Gln Asp Trp Leu Lys Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn
100 105 110
Ser Lys Ser Leu Pro Ser Ala Met Glu Arg Thr Ile Ser Lys Ala Lys
115 120 125
Gly Gln Pro His Glu Pro Gln Val Tyr Val Leu Pro Pro Thr Gln Glu
130 135 140
Glu Leu Ser Glu Asn Lys Val Ser Val Thr Cys Leu Ile Lys Gly Phe
145 150 155 160
His Pro Pro Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ile Thr Gly Gln Pro Glu
165 170 175
Pro Glu Asn Asn Tyr Gln Thr Thr Pro Pro Gln Leu Asp Ser Asp Gly
180 185 190
Thr Tyr Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Ser Val Asp Arg Ser His Trp Gln
195 200 205
Arg Gly Asn Thr Tyr Thr Cys Ser Val Ser His Glu Ala Leu His Ser
210 215 220
His His Thr Gln Lys Ser Leu Thr Gln Ser Pro Gly Lys
225 230 235
<210> 217
<211> 237
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG1a кошки
Биспецифический выступ T(154)W
<400> 217
Arg Lys Thr Asp His Pro Pro Gly Pro Lys Pro Cys Asp Cys Pro Lys
1 5 10 15
Cys Pro Pro Pro Glu Met Leu Gly Gly Pro Ser Ile Phe Ile Phe Pro
20 25 30
Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Ser Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr
35 40 45
Cys Leu Val Val Asp Leu Gly Pro Asp Asp Ser Asp Val Gln Ile Thr
50 55 60
Trp Phe Val Asp Asn Thr Gln Val Tyr Thr Ala Lys Thr Ser Pro Arg
65 70 75 80
Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile
85 90 95
Leu His Gln Asp Trp Leu Lys Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn
100 105 110
Ser Lys Ser Leu Pro Ser Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Ala Lys
115 120 125
Gly Gln Pro His Glu Pro Gln Val Tyr Val Leu Pro Pro Ala Gln Glu
130 135 140
Glu Leu Ser Glu Asn Lys Val Ser Val Trp Cys Leu Ile Lys Ser Phe
145 150 155 160
His Pro Pro Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ile Thr Gly Gln Pro Glu
165 170 175
Pro Glu Asn Asn Tyr Arg Thr Thr Pro Pro Gln Leu Asp Ser Asp Gly
180 185 190
Thr Tyr Phe Val Tyr Ser Lys Leu Ser Val Asp Arg Ser His Trp Gln
195 200 205
Arg Gly Asn Thr Tyr Thr Cys Ser Val Ser His Glu Ala Leu His Ser
210 215 220
His His Thr Gln Lys Ser Leu Thr Gln Ser Pro Gly Lys
225 230 235
<210> 218
<211> 237
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG1a кошки
Биспецифический выступ T(154)W
<400> 218
Arg Lys Thr Asp His Pro Pro Gly Pro Lys Thr Gly Glu Gly Pro Lys
1 5 10 15
Cys Pro Pro Pro Glu Met Leu Gly Gly Pro Ser Ile Phe Ile Phe Pro
20 25 30
Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Ser Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr
35 40 45
Cys Leu Val Val Asp Leu Gly Pro Asp Asp Ser Asp Val Gln Ile Thr
50 55 60
Trp Phe Val Asp Asn Thr Gln Val Tyr Thr Ala Lys Thr Ser Pro Arg
65 70 75 80
Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile
85 90 95
Leu His Gln Asp Trp Leu Lys Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn
100 105 110
Ser Lys Ser Leu Pro Ser Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Ala Lys
115 120 125
Gly Gln Pro His Glu Pro Gln Val Tyr Val Leu Pro Pro Ala Gln Glu
130 135 140
Glu Leu Ser Glu Asn Lys Val Ser Val Trp Cys Leu Ile Lys Ser Phe
145 150 155 160
His Pro Pro Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ile Thr Gly Gln Pro Glu
165 170 175
Pro Glu Asn Asn Tyr Arg Thr Thr Pro Pro Gln Leu Asp Ser Asp Gly
180 185 190
Thr Tyr Phe Val Tyr Ser Lys Leu Ser Val Asp Arg Ser His Trp Gln
195 200 205
Arg Gly Asn Thr Tyr Thr Cys Ser Val Ser His Glu Ala Leu His Ser
210 215 220
His His Thr Gln Lys Ser Leu Thr Gln Ser Pro Gly Lys
225 230 235
<210> 219
<211> 237
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG1b кошки
Биспецифический выступ T(154)W
<400> 219
Arg Lys Thr Asp His Pro Pro Gly Pro Lys Pro Cys Asp Cys Pro Lys
1 5 10 15
Cys Pro Pro Pro Glu Met Leu Gly Gly Pro Ser Ile Phe Ile Phe Pro
20 25 30
Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Ser Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr
35 40 45
Cys Leu Val Val Asp Leu Gly Pro Asp Asp Ser Asp Val Gln Ile Thr
50 55 60
Trp Phe Val Asp Asn Thr Gln Val Tyr Thr Ala Lys Thr Ser Pro Arg
65 70 75 80
Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile
85 90 95
Leu His Gln Asp Trp Leu Lys Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn
100 105 110
Ser Lys Ser Leu Pro Ser Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Asp Lys
115 120 125
Gly Gln Pro His Glu Pro Gln Val Tyr Val Leu Pro Pro Ala Gln Glu
130 135 140
Glu Leu Ser Glu Asn Lys Val Ser Val Trp Cys Leu Ile Glu Gly Phe
145 150 155 160
Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ile Thr Gly Gln Pro Glu
165 170 175
Pro Glu Asn Asn Tyr Arg Thr Thr Pro Pro Gln Leu Asp Ser Asp Gly
180 185 190
Thr Tyr Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Ser Val Asp Arg Ser Arg Trp Gln
195 200 205
Arg Gly Asn Thr Tyr Thr Cys Ser Val Ser His Glu Ala Leu His Ser
210 215 220
His His Thr Gln Lys Ser Leu Thr Gln Ser Pro Gly Lys
225 230 235
<210> 220
<211> 237
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG1b кошки
Биспецифический выступ T(154)W
<400> 220
Arg Lys Thr Asp His Pro Pro Gly Pro Lys Thr Gly Glu Gly Pro Lys
1 5 10 15
Cys Pro Pro Pro Glu Met Leu Gly Gly Pro Ser Ile Phe Ile Phe Pro
20 25 30
Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Ser Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr
35 40 45
Cys Leu Val Val Asp Leu Gly Pro Asp Asp Ser Asp Val Gln Ile Thr
50 55 60
Trp Phe Val Asp Asn Thr Gln Val Tyr Thr Ala Lys Thr Ser Pro Arg
65 70 75 80
Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile
85 90 95
Leu His Gln Asp Trp Leu Lys Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn
100 105 110
Ser Lys Ser Leu Pro Ser Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Asp Lys
115 120 125
Gly Gln Pro His Glu Pro Gln Val Tyr Val Leu Pro Pro Ala Gln Glu
130 135 140
Glu Leu Ser Glu Asn Lys Val Ser Val Trp Cys Leu Ile Glu Gly Phe
145 150 155 160
Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ile Thr Gly Gln Pro Glu
165 170 175
Pro Glu Asn Asn Tyr Arg Thr Thr Pro Pro Gln Leu Asp Ser Asp Gly
180 185 190
Thr Tyr Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Ser Val Asp Arg Ser Arg Trp Gln
195 200 205
Arg Gly Asn Thr Tyr Thr Cys Ser Val Ser His Glu Ala Leu His Ser
210 215 220
His His Thr Gln Lys Ser Leu Thr Gln Ser Pro Gly Lys
225 230 235
<210> 221
<211> 237
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG2 кошки
Биспецифический выступ T(154)W
<400> 221
Pro Lys Thr Ala Ser Thr Ile Glu Ser Lys Thr Gly Glu Gly Pro Lys
1 5 10 15
Cys Pro Val Pro Glu Ile Pro Gly Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro
20 25 30
Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Ser Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr
35 40 45
Cys Leu Val Val Asp Leu Gly Pro Asp Asp Ser Asn Val Gln Ile Thr
50 55 60
Trp Phe Val Asp Asn Thr Glu Met His Thr Ala Lys Thr Arg Pro Arg
65 70 75 80
Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile
85 90 95
Leu His Gln Asp Trp Leu Lys Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn
100 105 110
Ser Lys Ser Leu Pro Ser Ala Met Glu Arg Thr Ile Ser Lys Ala Lys
115 120 125
Gly Gln Pro His Glu Pro Gln Val Tyr Val Leu Pro Pro Thr Gln Glu
130 135 140
Glu Leu Ser Glu Asn Lys Val Ser Val Trp Cys Leu Ile Lys Gly Phe
145 150 155 160
His Pro Pro Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ile Thr Gly Gln Pro Glu
165 170 175
Pro Glu Asn Asn Tyr Gln Thr Thr Pro Pro Gln Leu Asp Ser Asp Gly
180 185 190
Thr Tyr Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Ser Val Asp Arg Ser His Trp Gln
195 200 205
Arg Gly Asn Thr Tyr Thr Cys Ser Val Ser His Glu Ala Leu His Ser
210 215 220
His His Thr Gln Lys Ser Leu Thr Gln Ser Pro Gly Lys
225 230 235
<210> 222
<211> 237
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG1a кошки
Биспецифическая впадина T(154)S, L(156)A
<400> 222
Arg Lys Thr Asp His Pro Pro Gly Pro Lys Pro Cys Asp Cys Pro Lys
1 5 10 15
Cys Pro Pro Pro Glu Met Leu Gly Gly Pro Ser Ile Phe Ile Phe Pro
20 25 30
Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Ser Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr
35 40 45
Cys Leu Val Val Asp Leu Gly Pro Asp Asp Ser Asp Val Gln Ile Thr
50 55 60
Trp Phe Val Asp Asn Thr Gln Val Tyr Thr Ala Lys Thr Ser Pro Arg
65 70 75 80
Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile
85 90 95
Leu His Gln Asp Trp Leu Lys Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn
100 105 110
Ser Lys Ser Leu Pro Ser Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Ala Lys
115 120 125
Gly Gln Pro His Glu Pro Gln Val Tyr Val Leu Pro Pro Ala Gln Glu
130 135 140
Glu Leu Ser Glu Asn Lys Val Ser Val Ser Cys Ala Ile Lys Ser Phe
145 150 155 160
His Pro Pro Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ile Thr Gly Gln Pro Glu
165 170 175
Pro Glu Asn Asn Tyr Arg Thr Thr Pro Pro Gln Leu Asp Ser Asp Gly
180 185 190
Thr Tyr Phe Val Tyr Ser Lys Leu Ser Val Asp Arg Ser His Trp Gln
195 200 205
Arg Gly Asn Thr Tyr Thr Cys Ser Val Ser His Glu Ala Leu His Ser
210 215 220
His His Thr Gln Lys Ser Leu Thr Gln Ser Pro Gly Lys
225 230 235
<210> 223
<211> 237
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG1a кошки
Биспецифическая впадина T(154)S, L(156)A
<400> 223
Arg Lys Thr Asp His Pro Pro Gly Pro Lys Thr Gly Glu Gly Pro Lys
1 5 10 15
Cys Pro Pro Pro Glu Met Leu Gly Gly Pro Ser Ile Phe Ile Phe Pro
20 25 30
Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Ser Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr
35 40 45
Cys Leu Val Val Asp Leu Gly Pro Asp Asp Ser Asp Val Gln Ile Thr
50 55 60
Trp Phe Val Asp Asn Thr Gln Val Tyr Thr Ala Lys Thr Ser Pro Arg
65 70 75 80
Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile
85 90 95
Leu His Gln Asp Trp Leu Lys Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn
100 105 110
Ser Lys Ser Leu Pro Ser Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Ala Lys
115 120 125
Gly Gln Pro His Glu Pro Gln Val Tyr Val Leu Pro Pro Ala Gln Glu
130 135 140
Glu Leu Ser Glu Asn Lys Val Ser Val Ser Cys Ala Ile Lys Ser Phe
145 150 155 160
His Pro Pro Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ile Thr Gly Gln Pro Glu
165 170 175
Pro Glu Asn Asn Tyr Arg Thr Thr Pro Pro Gln Leu Asp Ser Asp Gly
180 185 190
Thr Tyr Phe Val Tyr Ser Lys Leu Ser Val Asp Arg Ser His Trp Gln
195 200 205
Arg Gly Asn Thr Tyr Thr Cys Ser Val Ser His Glu Ala Leu His Ser
210 215 220
His His Thr Gln Lys Ser Leu Thr Gln Ser Pro Gly Lys
225 230 235
<210> 224
<211> 237
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG1b кошки
Биспецифическая впадина T(154)S, L(156)A
<400> 224
Arg Lys Thr Asp His Pro Pro Gly Pro Lys Pro Cys Asp Cys Pro Lys
1 5 10 15
Cys Pro Pro Pro Glu Met Leu Gly Gly Pro Ser Ile Phe Ile Phe Pro
20 25 30
Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Ser Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr
35 40 45
Cys Leu Val Val Asp Leu Gly Pro Asp Asp Ser Asp Val Gln Ile Thr
50 55 60
Trp Phe Val Asp Asn Thr Gln Val Tyr Thr Ala Lys Thr Ser Pro Arg
65 70 75 80
Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile
85 90 95
Leu His Gln Asp Trp Leu Lys Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn
100 105 110
Ser Lys Ser Leu Pro Ser Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Asp Lys
115 120 125
Gly Gln Pro His Glu Pro Gln Val Tyr Val Leu Pro Pro Ala Gln Glu
130 135 140
Glu Leu Ser Glu Asn Lys Val Ser Val Ser Cys Ala Ile Glu Gly Phe
145 150 155 160
Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ile Thr Gly Gln Pro Glu
165 170 175
Pro Glu Asn Asn Tyr Arg Thr Thr Pro Pro Gln Leu Asp Ser Asp Gly
180 185 190
Thr Tyr Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Ser Val Asp Arg Ser Arg Trp Gln
195 200 205
Arg Gly Asn Thr Tyr Thr Cys Ser Val Ser His Glu Ala Leu His Ser
210 215 220
His His Thr Gln Lys Ser Leu Thr Gln Ser Pro Gly Lys
225 230 235
<210> 225
<211> 237
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG1b кошки
Биспецифическая впадина T(154)S, L(156)A
<400> 225
Arg Lys Thr Asp His Pro Pro Gly Pro Lys Thr Gly Glu Gly Pro Lys
1 5 10 15
Cys Pro Pro Pro Glu Met Leu Gly Gly Pro Ser Ile Phe Ile Phe Pro
20 25 30
Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Ser Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr
35 40 45
Cys Leu Val Val Asp Leu Gly Pro Asp Asp Ser Asp Val Gln Ile Thr
50 55 60
Trp Phe Val Asp Asn Thr Gln Val Tyr Thr Ala Lys Thr Ser Pro Arg
65 70 75 80
Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile
85 90 95
Leu His Gln Asp Trp Leu Lys Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn
100 105 110
Ser Lys Ser Leu Pro Ser Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Asp Lys
115 120 125
Gly Gln Pro His Glu Pro Gln Val Tyr Val Leu Pro Pro Ala Gln Glu
130 135 140
Glu Leu Ser Glu Asn Lys Val Ser Val Ser Cys Ala Ile Glu Gly Phe
145 150 155 160
Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ile Thr Gly Gln Pro Glu
165 170 175
Pro Glu Asn Asn Tyr Arg Thr Thr Pro Pro Gln Leu Asp Ser Asp Gly
180 185 190
Thr Tyr Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Ser Val Asp Arg Ser Arg Trp Gln
195 200 205
Arg Gly Asn Thr Tyr Thr Cys Ser Val Ser His Glu Ala Leu His Ser
210 215 220
His His Thr Gln Lys Ser Leu Thr Gln Ser Pro Gly Lys
225 230 235
<210> 226
<211> 237
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG2 кошки
Биспецифическая впадина T(154)S, L(156)A
<400> 226
Pro Lys Thr Ala Ser Thr Ile Glu Ser Lys Thr Gly Glu Gly Pro Lys
1 5 10 15
Cys Pro Val Pro Glu Ile Pro Gly Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro
20 25 30
Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Ser Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr
35 40 45
Cys Leu Val Val Asp Leu Gly Pro Asp Asp Ser Asn Val Gln Ile Thr
50 55 60
Trp Phe Val Asp Asn Thr Glu Met His Thr Ala Lys Thr Arg Pro Arg
65 70 75 80
Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile
85 90 95
Leu His Gln Asp Trp Leu Lys Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn
100 105 110
Ser Lys Ser Leu Pro Ser Ala Met Glu Arg Thr Ile Ser Lys Ala Lys
115 120 125
Gly Gln Pro His Glu Pro Gln Val Tyr Val Leu Pro Pro Thr Gln Glu
130 135 140
Glu Leu Ser Glu Asn Lys Val Ser Val Ser Cys Ala Ile Lys Gly Phe
145 150 155 160
His Pro Pro Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ile Thr Gly Gln Pro Glu
165 170 175
Pro Glu Asn Asn Tyr Gln Thr Thr Pro Pro Gln Leu Asp Ser Asp Gly
180 185 190
Thr Tyr Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Ser Val Asp Arg Ser His Trp Gln
195 200 205
Arg Gly Asn Thr Tyr Thr Cys Ser Val Ser His Glu Ala Leu His Ser
210 215 220
His His Thr Gln Lys Ser Leu Thr Gln Ser Pro Gly Lys
225 230 235
<210> 227
<211> 98
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: CH1 дикого типа IgG-A собаки
<400> 227
Ala Ser Thr Thr Ala Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Cys Gly
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Ser Thr Val Ala Leu Ala Cys Leu Val Ser Gly Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ser Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ser Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu His Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Met Val Thr Val Pro Ser Ser Arg Trp Pro Ser Glu Thr
65 70 75 80
Phe Thr Cys Asn Val Val His Pro Ala Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Pro Val
<210> 228
<211> 98
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: CH1 дикого типа IgG-B собаки
<400> 228
Ala Ser Thr Thr Ala Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Cys Gly
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Ser Thr Val Ala Leu Ala Cys Leu Val Ser Gly Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ser Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ser Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Met Val Thr Val Pro Ser Ser Arg Trp Pro Ser Glu Thr
65 70 75 80
Phe Thr Cys Asn Val Ala His Pro Ala Ser Lys Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Pro Val
<210> 229
<211> 98
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: CH1 дикого типа IgG-C собаки
<400> 229
Ala Ser Thr Thr Ala Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Cys Gly
1 5 10 15
Ser Gln Ser Gly Ser Thr Val Ala Leu Ala Cys Leu Val Ser Gly Tyr
20 25 30
Ile Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Val Ser Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ser Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Met Val Thr Val Pro Ser Ser Arg Trp Pro Ser Glu Thr
65 70 75 80
Phe Thr Cys Asn Val Ala His Pro Ala Thr Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Pro Val
<210> 230
<211> 98
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: CH1 дикого типа IgG-D собаки
<400> 230
Ala Ser Thr Thr Ala Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Cys Gly
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Ser Thr Val Ala Leu Ala Cys Leu Val Ser Gly Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ser Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ser Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Thr Val Thr Val Pro Ser Ser Arg Trp Pro Ser Glu Thr
65 70 75 80
Phe Thr Cys Asn Val Val His Pro Ala Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Pro Val
<210> 231
<211> 98
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Вариант CH1 IgG-A собаки A(24)L S(30)D
<400> 231
Ala Ser Thr Thr Ala Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Cys Gly
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Ser Thr Val Leu Leu Ala Cys Leu Val Asp Gly Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ser Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ser Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu His Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Met Val Thr Val Pro Ser Ser Arg Trp Pro Ser Glu Thr
65 70 75 80
Phe Thr Cys Asn Val Val His Pro Ala Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Pro Val
<210> 232
<211> 98
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Вариант CH1 IgG-B собаки A(24)L S(30)D
<400> 232
Ala Ser Thr Thr Ala Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Cys Gly
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Ser Thr Val Leu Leu Ala Cys Leu Val Asp Gly Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ser Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ser Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Met Val Thr Val Pro Ser Ser Arg Trp Pro Ser Glu Thr
65 70 75 80
Phe Thr Cys Asn Val Ala His Pro Ala Ser Lys Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Pro Val
<210> 233
<211> 98
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Вариант CH1 IgG-C собаки A(24)L S(30)D
<400> 233
Ala Ser Thr Thr Ala Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Cys Gly
1 5 10 15
Ser Gln Ser Gly Ser Thr Val Leu Leu Ala Cys Leu Val Asp Gly Tyr
20 25 30
Ile Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Val Ser Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ser Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Met Val Thr Val Pro Ser Ser Arg Trp Pro Ser Glu Thr
65 70 75 80
Phe Thr Cys Asn Val Ala His Pro Ala Thr Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Pro Val
<210> 234
<211> 98
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Вариант CH1 IgG-D собаки A(24)L S(30)D
<400> 234
Ala Ser Thr Thr Ala Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Cys Gly
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Ser Thr Val Leu Leu Ala Cys Leu Val Asp Gly Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ser Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ser Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Thr Val Thr Val Pro Ser Ser Arg Trp Pro Ser Glu Thr
65 70 75 80
Phe Thr Cys Asn Val Val His Pro Ala Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Pro Val
<210> 235
<211> 110
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: константная область каппа дикого типа собаки
<400> 235
Arg Asn Asp Ala Gln Pro Ala Val Tyr Leu Phe Gln Pro Ser Pro Asp
1 5 10 15
Gln Leu His Thr Gly Ser Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Ser Phe
20 25 30
Tyr Pro Lys Asp Ile Asn Val Lys Trp Lys Val Asp Gly Val Ile Gln
35 40 45
Asp Thr Gly Ile Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Lys Asp Ser Thr
50 55 60
Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Met Ser Ser Thr Glu Tyr Leu Ser
65 70 75 80
His Glu Leu Tyr Ser Cys Glu Ile Thr His Lys Ser Leu Pro Ser Thr
85 90 95
Leu Ile Lys Ser Phe Gln Arg Ser Glu Cys Gln Arg Val Asp
100 105 110
<210> 236
<211> 110
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Вариант константной области κ собаки F(11)A S(22)R
<400> 236
Arg Asn Asp Ala Gln Pro Ala Val Tyr Leu Ala Gln Pro Ser Pro Asp
1 5 10 15
Gln Leu His Thr Gly Arg Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Ser Phe
20 25 30
Tyr Pro Lys Asp Ile Asn Val Lys Trp Lys Val Asp Gly Val Ile Gln
35 40 45
Asp Thr Gly Ile Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Lys Asp Ser Thr
50 55 60
Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Met Ser Ser Thr Glu Tyr Leu Ser
65 70 75 80
His Glu Leu Tyr Ser Cys Glu Ile Thr His Lys Ser Leu Pro Ser Thr
85 90 95
Leu Ile Lys Ser Phe Gln Arg Ser Glu Cys Gln Arg Val Asp
100 105 110
<210> 237
<211> 98
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: CH1 дикого типа IgG1 кошки
<400> 237
Ala Ser Thr Thr Ala Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Cys Gly
1 5 10 15
Thr Thr Ser Gly Ala Thr Val Ala Leu Ala Cys Leu Val Ser Gly Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ala Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Met Val Thr Val Pro Ser Ser Arg Trp Leu Ser Asp Thr
65 70 75 80
Phe Thr Cys Asn Val Ala His Pro Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Thr Val
<210> 238
<211> 98
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: CH1 дикого типа IgG2 кошки
<400> 238
Ala Ser Thr Thr Ala Ser Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Cys Gly
1 5 10 15
Thr Thr Ser Gly Ala Thr Val Ala Leu Ala Cys Leu Ser Leu Gly Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ser Val Leu Gln Ala Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Met Val Thr Val Pro Ser Ser Arg Trp Leu Ser Asp Thr
65 70 75 80
Phe Thr Cys Asn Val Ala His Arg Pro Ser Ser Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Thr Val
<210> 239
<211> 98
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Вариант CH1 IgG1 кошки A(24)L S(30)D
<400> 239
Ala Ser Thr Thr Ala Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Cys Gly
1 5 10 15
Thr Thr Ser Gly Ala Thr Val Leu Leu Ala Cys Leu Val Asp Gly Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ala Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Met Val Thr Val Pro Ser Ser Arg Trp Leu Ser Asp Thr
65 70 75 80
Phe Thr Cys Asn Val Ala His Pro Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Thr Val
<210> 240
<211> 98
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Вариант CH1 IgG2 кошки A(24)L S(29)D
<400> 240
Ala Ser Thr Thr Ala Ser Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Cys Gly
1 5 10 15
Thr Thr Ser Gly Ala Thr Val Leu Leu Ala Cys Leu Asp Leu Gly Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ser Val Leu Gln Ala Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Met Val Thr Val Pro Ser Ser Arg Trp Leu Ser Asp Thr
65 70 75 80
Phe Thr Cys Asn Val Ala His Arg Pro Ser Ser Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Thr Val
<210> 241
<211> 110
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: констнтная область κ дикого типа кошки
<400> 241
Arg Ser Asp Ala Gln Pro Ser Val Phe Leu Phe Gln Pro Ser Leu Asp
1 5 10 15
Glu Leu His Thr Gly Ser Ala Ser Ile Val Cys Ile Leu Asn Asp Phe
20 25 30
Tyr Pro Lys Glu Val Asn Val Lys Trp Lys Val Asp Gly Val Val Gln
35 40 45
Asn Lys Gly Ile Gln Glu Ser Thr Thr Glu Gln Asn Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Met Ser Ser Thr Glu Tyr Gln
65 70 75 80
Ser His Glu Lys Phe Ser Cys Glu Val Thr His Lys Ser Leu Ala Ser
85 90 95
Thr Leu Val Lys Ser Phe Asn Arg Ser Glu Cys Gln Arg Glu
100 105 110
<210> 242
<211> 110
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Вариант констнтной области κ кошки F(11)A S(22)R
<400> 242
Arg Ser Asp Ala Gln Pro Ser Val Phe Leu Ala Gln Pro Ser Leu Asp
1 5 10 15
Glu Leu His Thr Gly Arg Ala Ser Ile Val Cys Ile Leu Asn Asp Phe
20 25 30
Tyr Pro Lys Glu Val Asn Val Lys Trp Lys Val Asp Gly Val Val Gln
35 40 45
Asn Lys Gly Ile Gln Glu Ser Thr Thr Glu Gln Asn Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Met Ser Ser Thr Glu Tyr Gln
65 70 75 80
Ser His Glu Lys Phe Ser Cys Glu Val Thr His Lys Ser Leu Ala Ser
85 90 95
Thr Leu Val Lys Ser Phe Asn Arg Ser Glu Cys Gln Arg Glu
100 105 110
<210> 243
<211> 451
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Канинизированная вариабельная HC v2 клона I и
вариант Fc IgG-B собаки C1q CD16 Биспецифический выступ
Вариант CH1
<400> 243
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Val Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Tyr Ile Asn Pro Asn Asn Asp Gly Thr Phe Tyr Asn Gly Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Leu Thr Ala Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ala Gly Asp Ile Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Phe Tyr Tyr Gly Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Thr Ala Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala
115 120 125
Pro Ser Cys Gly Ser Thr Ser Gly Ser Thr Val Leu Leu Ala Cys Leu
130 135 140
Val Asp Gly Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly
145 150 155 160
Ser Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ser Val Leu Gln Ser Ser
165 170 175
Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Met Val Thr Val Pro Ser Ser Arg Trp
180 185 190
Pro Ser Glu Thr Phe Thr Cys Asn Val Ala His Pro Ala Ser Lys Thr
195 200 205
Lys Val Asp Lys Pro Val Pro Lys Arg Glu Asn Gly Arg Val Pro Arg
210 215 220
Pro Pro Asp Cys Pro Lys Cys Pro Ala Pro Glu Pro Leu Gly Gly Pro
225 230 235 240
Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Leu Ile Ala
245 250 255
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Leu Asp Arg Glu Asp
260 265 270
Pro Glu Val Gln Ile Ser Trp Phe Val Asp Gly Lys Gln Met Gln Thr
275 280 285
Ala Lys Thr Gln Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Gly Thr Tyr Arg Val
290 295 300
Val Ser Val Leu Pro Ile Gly His Gln Asp Trp Leu Lys Gly Lys Gln
305 310 315 320
Phe Thr Cys Arg Val Asn Asn Lys Ala Leu Pro Ser Pro Ile Glu Arg
325 330 335
Thr Ile Ser Lys Ala Arg Gly Gln Ala His Gln Pro Ser Val Tyr Val
340 345 350
Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Leu Ser Lys Asn Thr Val Thr Leu Trp
355 360 365
Cys Leu Ile Lys Asp Phe Phe Pro Pro Asp Ile Asp Val Glu Trp Gln
370 375 380
Ser Asn Gly Gln Gln Glu Pro Glu Ser Lys Tyr Arg Thr Thr Pro Pro
385 390 395 400
Gln Leu Asp Glu Asp Gly Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Ser Val
405 410 415
Asp Lys Ser Arg Trp Gln Arg Gly Asp Thr Phe Ile Cys Ala Val Met
420 425 430
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Glu Ser Leu Ser His Ser
435 440 445
Pro Gly Lys
450
<210> 244
<211> 217
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Канинизированная вариабельная LC v2 клона I и
Вариант констнтной области κ собаки
<400> 244
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser Val Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Thr Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ala Ser Gln Glu Ile Ser Gly Tyr
20 25 30
Leu Ser Trp Leu Gln Gln Lys Pro Gly Gly Thr Ile Lys Arg Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Asn Arg Asp Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Arg Ile Ser Arg Val Glu Ala
65 70 75 80
Asp Asp Thr Gly Val Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Ala Ser Tyr Pro Trp
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Leu Lys Arg Asn Asp Ala Gln
100 105 110
Pro Ala Val Tyr Leu Ala Gln Pro Ser Pro Asp Gln Leu His Thr Gly
115 120 125
Arg Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Ser Phe Tyr Pro Lys Asp Ile
130 135 140
Asn Val Lys Trp Lys Val Asp Gly Val Ile Gln Asp Thr Gly Ile Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser
165 170 175
Thr Leu Thr Met Ser Ser Thr Glu Tyr Leu Ser His Glu Leu Tyr Ser
180 185 190
Cys Glu Ile Thr His Lys Ser Leu Pro Ser Thr Leu Ile Lys Ser Phe
195 200 205
Gln Arg Ser Glu Cys Gln Arg Val Asp
210 215
<210> 245
<211> 453
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Канинизированная вариабельная HC антитела к
собачьему IL31 клона M14 и вариант Fc IgG-B собаки C1q CD16
Биспецифическая впадина
<400> 245
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Pro Ser Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Thr Cys Ser Val Thr Gly Asp Ser Ile Thr Ser Gly
20 25 30
Tyr Trp Asn Trp Ile Arg Lys Phe Pro Gly Asn Lys Leu Glu Tyr Met
35 40 45
Gly Tyr Ile Ser Tyr Ser Gly Ile Thr Asp Tyr Asn Pro Ser Leu Lys
50 55 60
Ser Arg Ile Thr Ile Ser Arg Asp Thr Ser Lys Asn Gln Tyr Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Leu Asn Ser Val Thr Thr Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Tyr Gly Asn Tyr Gly Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Thr Ala Pro Ser Val Phe Pro
115 120 125
Leu Ala Pro Ser Cys Gly Ser Thr Ser Gly Ser Thr Val Ala Leu Ala
130 135 140
Cys Leu Val Ser Gly Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn
145 150 155 160
Ser Gly Ser Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ser Val Leu Gln
165 170 175
Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Met Val Thr Val Pro Ser Ser
180 185 190
Arg Trp Pro Ser Glu Thr Phe Thr Cys Asn Val Ala His Pro Ala Ser
195 200 205
Lys Thr Lys Val Asp Lys Pro Val Pro Lys Arg Glu Asn Gly Arg Val
210 215 220
Pro Arg Pro Pro Asp Cys Pro Lys Cys Pro Ala Pro Glu Pro Leu Gly
225 230 235 240
Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Leu
245 250 255
Ile Ala Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Leu Asp Arg
260 265 270
Glu Asp Pro Glu Val Gln Ile Ser Trp Phe Val Asp Gly Lys Gln Met
275 280 285
Gln Thr Ala Lys Thr Gln Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Gly Thr Tyr
290 295 300
Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Gly His Gln Asp Trp Leu Lys Gly
305 310 315 320
Lys Gln Phe Thr Cys Arg Val Asn Asn Lys Ala Leu Pro Ser Pro Ile
325 330 335
Glu Arg Thr Ile Ser Lys Ala Arg Gly Gln Ala His Gln Pro Ser Val
340 345 350
Tyr Val Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Leu Ser Lys Asn Thr Val Thr
355 360 365
Leu Ser Cys Ala Ile Lys Asp Phe Phe Pro Pro Asp Ile Asp Val Glu
370 375 380
Trp Gln Ser Asn Gly Gln Gln Glu Pro Glu Ser Lys Tyr Arg Thr Thr
385 390 395 400
Pro Pro Gln Leu Asp Glu Asp Gly Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu
405 410 415
Ser Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Arg Gly Asp Thr Phe Ile Cys Ala
420 425 430
Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Glu Ser Leu Ser
435 440 445
His Ser Pro Gly Lys
450
<210> 246
<211> 221
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Канинизированная вариабельная LC антитела к
собачьему IL31 клона M14 и констнтная область κ собаки
<400> 246
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ser Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Gln Arg Ala Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp Thr Tyr
20 25 30
Gly Asn Ser Phe Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro
35 40 45
Lys Leu Leu Ile Tyr Arg Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Ile Pro Ala
50 55 60
Arg Phe Gly Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Asp
65 70 75 80
Pro Val Gln Ala Asp Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Tyr
85 90 95
Glu Asp Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg
100 105 110
Asn Asp Ala Gln Pro Ala Val Tyr Leu Phe Gln Pro Ser Pro Asp Gln
115 120 125
Leu His Thr Gly Ser Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Ser Phe Tyr
130 135 140
Pro Lys Asp Ile Asn Val Lys Trp Lys Val Asp Gly Val Ile Gln Asp
145 150 155 160
Thr Gly Ile Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Lys Asp Ser Thr Tyr
165 170 175
Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Met Ser Ser Thr Glu Tyr Leu Ser His
180 185 190
Glu Leu Tyr Ser Cys Glu Ile Thr His Lys Ser Leu Pro Ser Thr Leu
195 200 205
Ile Lys Ser Phe Gln Arg Ser Glu Cys Gln Arg Val Asp
210 215 220
<210> 247
<211> 213
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный Fc дикого типа IgG1 лошади
<400> 247
Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Asn Pro Lys Asp Thr Leu Met
1 5 10 15
Ile Thr Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln
20 25 30
Glu Asn Pro Asp Val Lys Phe Asn Trp Tyr Met Asp Gly Val Glu Val
35 40 45
Arg Thr Ala Thr Thr Arg Pro Lys Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr
50 55 60
Arg Val Val Ser Val Leu Arg Ile Gln His Gln Asp Trp Leu Ser Gly
65 70 75 80
Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn Gln Ala Leu Pro Gln Pro Ile
85 90 95
Glu Arg Thr Ile Thr Lys Thr Lys Gly Arg Ser Gln Glu Pro Gln Val
100 105 110
Tyr Val Leu Ala Pro His Pro Asp Glu Leu Ser Lys Ser Lys Val Ser
115 120 125
Val Thr Cys Leu Val Lys Asp Phe Tyr Pro Pro Glu Ile Asn Ile Glu
130 135 140
Trp Gln Ser Asn Gly Gln Pro Glu Leu Glu Thr Lys Tyr Ser Thr Thr
145 150 155 160
Gln Ala Gln Gln Asp Ser Asp Gly Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu
165 170 175
Ser Val Asp Arg Asn Arg Trp Gln Gln Gly Thr Thr Phe Thr Cys Gly
180 185 190
Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Asn Val Ser
195 200 205
Lys Asn Pro Gly Lys
210
<210> 248
<211> 213
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный Fc дикого типа IgG2 лошади
<400> 248
Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Asn Pro Lys Asp Ala Leu Met
1 5 10 15
Ile Ser Arg Thr Pro Val Val Thr Cys Val Val Val Asn Leu Ser Asp
20 25 30
Gln Tyr Pro Asp Val Gln Phe Ser Trp Tyr Val Asp Asn Thr Glu Val
35 40 45
His Ser Ala Ile Thr Lys Gln Arg Glu Ala Gln Phe Asn Ser Thr Tyr
50 55 60
Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Gln His Gln Asp Trp Leu Ser Gly
65 70 75 80
Lys Glu Phe Lys Cys Ser Val Thr Asn Val Gly Val Pro Gln Pro Ile
85 90 95
Ser Arg Ala Ile Ser Arg Gly Lys Gly Pro Ser Arg Val Pro Gln Val
100 105 110
Tyr Val Leu Pro Pro His Pro Asp Glu Leu Ala Lys Ser Lys Val Ser
115 120 125
Val Thr Cys Leu Val Lys Asp Phe Tyr Pro Pro Asp Ile Ser Val Glu
130 135 140
Trp Gln Ser Asn Arg Trp Pro Glu Leu Glu Gly Lys Tyr Ser Thr Thr
145 150 155 160
Pro Ala Gln Leu Asp Gly Asp Gly Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu
165 170 175
Ser Leu Glu Thr Ser Arg Trp Gln Gln Val Glu Ser Phe Thr Cys Ala
180 185 190
Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Phe Thr Lys Thr Asp Ile Ser
195 200 205
Glu Ser Leu Gly Lys
210
<210> 249
<211> 213
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный Fc дикого типа IgG3 лошади
<400> 249
Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Val Leu Met
1 5 10 15
Ile Thr Arg Met Pro Glu Val Thr Cys Leu Val Val Asp Val Ser His
20 25 30
Asp Ser Ser Asp Val Leu Phe Thr Trp Tyr Val Asp Gly Thr Glu Val
35 40 45
Lys Thr Ala Lys Thr Met Pro Asn Glu Glu Gln Asn Asn Ser Thr Tyr
50 55 60
Arg Val Val Ser Val Leu Arg Ile Gln His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
65 70 75 80
Lys Lys Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn Gln Ala Leu Pro Ala Pro Val
85 90 95
Glu Arg Thr Ile Ser Lys Ala Thr Gly Gln Thr Arg Val Pro Gln Val
100 105 110
Tyr Val Leu Ala Pro His Pro Asp Glu Leu Ser Lys Asn Lys Val Ser
115 120 125
Val Thr Cys Leu Val Lys Asp Phe Tyr Pro Pro Asp Ile Thr Val Glu
130 135 140
Trp Gln Ser Asn Glu His Pro Glu Pro Glu Gly Lys Tyr Arg Thr Thr
145 150 155 160
Glu Ala Gln Lys Asp Ser Asp Gly Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu
165 170 175
Thr Val Glu Lys Asp Arg Trp Gln Gln Gly Thr Thr Phe Thr Cys Val
180 185 190
Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Val Met Gln Lys Asn Ile Ser
195 200 205
Lys Asn Pro Gly Lys
210
<210> 250
<211> 213
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный Fc дикого типа IgG4 лошади
<400> 250
Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Val Leu Met
1 5 10 15
Ile Ser Arg Thr Pro Thr Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Gly His
20 25 30
Asp Phe Pro Asp Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Thr
35 40 45
His Thr Ala Thr Thr Glu Pro Lys Gln Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr
50 55 60
Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Gln His Lys Asp Trp Leu Ser Gly
65 70 75 80
Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Val
85 90 95
Glu Arg Thr Ile Ser Ala Pro Thr Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
100 105 110
Tyr Val Leu Ala Pro His Arg Asp Glu Leu Ser Lys Asn Lys Val Ser
115 120 125
Val Thr Cys Leu Val Lys Asp Phe Tyr Pro Pro Asp Ile Asp Ile Glu
130 135 140
Trp Lys Ser Asn Gly Gln Pro Glu Pro Glu Thr Lys Tyr Ser Thr Thr
145 150 155 160
Pro Ala Gln Leu Asp Ser Asp Gly Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu
165 170 175
Thr Val Glu Thr Asn Arg Trp Gln Gln Gly Thr Thr Phe Thr Cys Ala
180 185 190
Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Glu Lys Ser Val Ser
195 200 205
Lys Ser Pro Gly Lys
210
<210> 251
<211> 213
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный Fc дикого типа IgG5 лошади
<400> 251
Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Val Leu Met
1 5 10 15
Ile Ser Arg Lys Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Leu Gly His
20 25 30
Asp Asp Pro Asp Val Gln Phe Thr Trp Phe Val Asp Gly Val Glu Thr
35 40 45
His Thr Ala Thr Thr Glu Pro Lys Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr
50 55 60
Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Gln His Gln Asp Trp Leu Ser Gly
65 70 75 80
Lys Glu Phe Lys Cys Ser Val Thr Ser Lys Ala Leu Pro Ala Pro Val
85 90 95
Glu Arg Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Leu Arg Val Pro Gln Val
100 105 110
Tyr Val Leu Ala Pro His Pro Asp Glu Leu Ala Lys Asn Thr Val Ser
115 120 125
Val Thr Cys Leu Val Lys Asp Phe Tyr Pro Pro Glu Ile Asp Val Glu
130 135 140
Trp Gln Ser Asn Glu His Pro Glu Pro Glu Gly Lys Tyr Ser Thr Thr
145 150 155 160
Pro Ala Gln Leu Asn Ser Asp Gly Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu
165 170 175
Ser Val Glu Thr Ser Arg Trp Lys Gln Gly Glu Ser Phe Thr Cys Gly
180 185 190
Val Met His Glu Ala Val Glu Asn His Tyr Thr Gln Lys Asn Val Ser
195 200 205
His Ser Pro Gly Lys
210
<210> 252
<211> 214
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный Fc дикого типа IgG6 лошади
<400> 252
Gly Arg Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Asn Pro Lys Asp Thr Leu
1 5 10 15
Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser
20 25 30
Gln Glu Asn Pro Asp Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu
35 40 45
Ala His Thr Ala Thr Thr Lys Ala Lys Glu Lys Gln Asp Asn Ser Thr
50 55 60
Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Gln His Gln Asp Trp Arg Arg
65 70 75 80
Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn Arg Ala Leu Pro Ala Pro
85 90 95
Val Glu Arg Thr Ile Thr Lys Ala Lys Gly Glu Leu Gln Asp Pro Lys
100 105 110
Val Tyr Ile Leu Ala Pro His Arg Glu Glu Val Thr Lys Asn Thr Val
115 120 125
Ser Val Thr Cys Leu Val Lys Asp Phe Tyr Pro Pro Asp Ile Asn Val
130 135 140
Glu Trp Gln Ser Asn Glu Glu Pro Glu Pro Glu Val Lys Tyr Ser Thr
145 150 155 160
Thr Pro Ala Gln Leu Asp Gly Asp Gly Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys
165 170 175
Leu Thr Val Glu Thr Asp Arg Trp Glu Gln Gly Glu Ser Phe Thr Cys
180 185 190
Val Val Met His Glu Ala Ile Arg His Thr Tyr Arg Gln Lys Ser Ile
195 200 205
Thr Asn Phe Pro Gly Lys
210
<210> 253
<211> 213
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный Fc дикого типа IgG7 лошади
<400> 253
Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Val Leu Met
1 5 10 15
Ile Ser Arg Thr Pro Thr Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Gly His
20 25 30
Asp Phe Pro Asp Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Thr
35 40 45
His Thr Ala Thr Thr Glu Pro Lys Gln Glu Gln Asn Asn Ser Thr Tyr
50 55 60
Arg Val Val Ser Ile Leu Ala Ile Gln His Lys Asp Trp Leu Ser Gly
65 70 75 80
Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn Gln Ala Leu Pro Ala Pro Val
85 90 95
Gln Lys Thr Ile Ser Lys Pro Thr Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
100 105 110
Tyr Val Leu Ala Pro His Pro Asp Glu Leu Ser Lys Asn Lys Val Ser
115 120 125
Val Thr Cys Leu Val Lys Asp Phe Tyr Pro Pro Asp Ile Asp Ile Glu
130 135 140
Trp Lys Ser Asn Gly Gln Pro Glu Pro Glu Thr Lys Tyr Ser Thr Thr
145 150 155 160
Pro Ala Gln Leu Asp Gly Asp Gly Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu
165 170 175
Thr Val Glu Thr Asn Arg Trp Gln Gln Gly Thr Thr Phe Thr Cys Ala
180 185 190
Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Glu Lys Ser Val Ser
195 200 205
Lys Ser Pro Gly Lys
210
<210> 254
<211> 213
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG1 лошади
Биспецифический выступ T(130)W
<400> 254
Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Asn Pro Lys Asp Thr Leu Met
1 5 10 15
Ile Thr Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln
20 25 30
Glu Asn Pro Asp Val Lys Phe Asn Trp Tyr Met Asp Gly Val Glu Val
35 40 45
Arg Thr Ala Thr Thr Arg Pro Lys Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr
50 55 60
Arg Val Val Ser Val Leu Arg Ile Gln His Gln Asp Trp Leu Ser Gly
65 70 75 80
Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn Gln Ala Leu Pro Gln Pro Ile
85 90 95
Glu Arg Thr Ile Thr Lys Thr Lys Gly Arg Ser Gln Glu Pro Gln Val
100 105 110
Tyr Val Leu Ala Pro His Pro Asp Glu Leu Ser Lys Ser Lys Val Ser
115 120 125
Val Trp Cys Leu Val Lys Asp Phe Tyr Pro Pro Glu Ile Asn Ile Glu
130 135 140
Trp Gln Ser Asn Gly Gln Pro Glu Leu Glu Thr Lys Tyr Ser Thr Thr
145 150 155 160
Gln Ala Gln Gln Asp Ser Asp Gly Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu
165 170 175
Ser Val Asp Arg Asn Arg Trp Gln Gln Gly Thr Thr Phe Thr Cys Gly
180 185 190
Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Asn Val Ser
195 200 205
Lys Asn Pro Gly Lys
210
<210> 255
<211> 213
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG2 лошади
Биспецифический выступ T(130)W
<400> 255
Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Asn Pro Lys Asp Ala Leu Met
1 5 10 15
Ile Ser Arg Thr Pro Val Val Thr Cys Val Val Val Asn Leu Ser Asp
20 25 30
Gln Tyr Pro Asp Val Gln Phe Ser Trp Tyr Val Asp Asn Thr Glu Val
35 40 45
His Ser Ala Ile Thr Lys Gln Arg Glu Ala Gln Phe Asn Ser Thr Tyr
50 55 60
Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Gln His Gln Asp Trp Leu Ser Gly
65 70 75 80
Lys Glu Phe Lys Cys Ser Val Thr Asn Val Gly Val Pro Gln Pro Ile
85 90 95
Ser Arg Ala Ile Ser Arg Gly Lys Gly Pro Ser Arg Val Pro Gln Val
100 105 110
Tyr Val Leu Pro Pro His Pro Asp Glu Leu Ala Lys Ser Lys Val Ser
115 120 125
Val Trp Cys Leu Val Lys Asp Phe Tyr Pro Pro Asp Ile Ser Val Glu
130 135 140
Trp Gln Ser Asn Arg Trp Pro Glu Leu Glu Gly Lys Tyr Ser Thr Thr
145 150 155 160
Pro Ala Gln Leu Asp Gly Asp Gly Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu
165 170 175
Ser Leu Glu Thr Ser Arg Trp Gln Gln Val Glu Ser Phe Thr Cys Ala
180 185 190
Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Phe Thr Lys Thr Asp Ile Ser
195 200 205
Glu Ser Leu Gly Lys
210
<210> 256
<211> 213
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG3 лошади
Биспецифический выступ T(130)W
<400> 256
Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Val Leu Met
1 5 10 15
Ile Thr Arg Met Pro Glu Val Thr Cys Leu Val Val Asp Val Ser His
20 25 30
Asp Ser Ser Asp Val Leu Phe Thr Trp Tyr Val Asp Gly Thr Glu Val
35 40 45
Lys Thr Ala Lys Thr Met Pro Asn Glu Glu Gln Asn Asn Ser Thr Tyr
50 55 60
Arg Val Val Ser Val Leu Arg Ile Gln His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
65 70 75 80
Lys Lys Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn Gln Ala Leu Pro Ala Pro Val
85 90 95
Glu Arg Thr Ile Ser Lys Ala Thr Gly Gln Thr Arg Val Pro Gln Val
100 105 110
Tyr Val Leu Ala Pro His Pro Asp Glu Leu Ser Lys Asn Lys Val Ser
115 120 125
Val Trp Cys Leu Val Lys Asp Phe Tyr Pro Pro Asp Ile Thr Val Glu
130 135 140
Trp Gln Ser Asn Glu His Pro Glu Pro Glu Gly Lys Tyr Arg Thr Thr
145 150 155 160
Glu Ala Gln Lys Asp Ser Asp Gly Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu
165 170 175
Thr Val Glu Lys Asp Arg Trp Gln Gln Gly Thr Thr Phe Thr Cys Val
180 185 190
Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Val Met Gln Lys Asn Ile Ser
195 200 205
Lys Asn Pro Gly Lys
210
<210> 257
<211> 213
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG4 лошади
Биспецифический выступ T(130)W
<400> 257
Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Val Leu Met
1 5 10 15
Ile Ser Arg Thr Pro Thr Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Gly His
20 25 30
Asp Phe Pro Asp Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Thr
35 40 45
His Thr Ala Thr Thr Glu Pro Lys Gln Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr
50 55 60
Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Gln His Lys Asp Trp Leu Ser Gly
65 70 75 80
Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Val
85 90 95
Glu Arg Thr Ile Ser Ala Pro Thr Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
100 105 110
Tyr Val Leu Ala Pro His Arg Asp Glu Leu Ser Lys Asn Lys Val Ser
115 120 125
Val Trp Cys Leu Val Lys Asp Phe Tyr Pro Pro Asp Ile Asp Ile Glu
130 135 140
Trp Lys Ser Asn Gly Gln Pro Glu Pro Glu Thr Lys Tyr Ser Thr Thr
145 150 155 160
Pro Ala Gln Leu Asp Ser Asp Gly Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu
165 170 175
Thr Val Glu Thr Asn Arg Trp Gln Gln Gly Thr Thr Phe Thr Cys Ala
180 185 190
Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Glu Lys Ser Val Ser
195 200 205
Lys Ser Pro Gly Lys
210
<210> 258
<211> 213
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG5 лошади
Биспецифический выступ T(130)W
<400> 258
Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Val Leu Met
1 5 10 15
Ile Ser Arg Lys Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Leu Gly His
20 25 30
Asp Asp Pro Asp Val Gln Phe Thr Trp Phe Val Asp Gly Val Glu Thr
35 40 45
His Thr Ala Thr Thr Glu Pro Lys Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr
50 55 60
Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Gln His Gln Asp Trp Leu Ser Gly
65 70 75 80
Lys Glu Phe Lys Cys Ser Val Thr Ser Lys Ala Leu Pro Ala Pro Val
85 90 95
Glu Arg Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Leu Arg Val Pro Gln Val
100 105 110
Tyr Val Leu Ala Pro His Pro Asp Glu Leu Ala Lys Asn Thr Val Ser
115 120 125
Val Trp Cys Leu Val Lys Asp Phe Tyr Pro Pro Glu Ile Asp Val Glu
130 135 140
Trp Gln Ser Asn Glu His Pro Glu Pro Glu Gly Lys Tyr Ser Thr Thr
145 150 155 160
Pro Ala Gln Leu Asn Ser Asp Gly Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu
165 170 175
Ser Val Glu Thr Ser Arg Trp Lys Gln Gly Glu Ser Phe Thr Cys Gly
180 185 190
Val Met His Glu Ala Val Glu Asn His Tyr Thr Gln Lys Asn Val Ser
195 200 205
His Ser Pro Gly Lys
210
<210> 259
<211> 213
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG6 лошади
Биспецифический выступ T(130)W
<400> 259
Arg Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Asn Pro Lys Asp Thr Leu Met
1 5 10 15
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln
20 25 30
Glu Asn Pro Asp Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Ala
35 40 45
His Thr Ala Thr Thr Lys Ala Lys Glu Lys Gln Asp Asn Ser Thr Tyr
50 55 60
Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Gln His Gln Asp Trp Arg Arg Gly
65 70 75 80
Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn Arg Ala Leu Pro Ala Pro Val
85 90 95
Glu Arg Thr Ile Thr Lys Ala Lys Gly Glu Leu Gln Asp Pro Lys Val
100 105 110
Tyr Ile Leu Ala Pro His Arg Glu Glu Val Thr Lys Asn Thr Val Ser
115 120 125
Val Trp Cys Leu Val Lys Asp Phe Tyr Pro Pro Asp Ile Asn Val Glu
130 135 140
Trp Gln Ser Asn Glu Glu Pro Glu Pro Glu Val Lys Tyr Ser Thr Thr
145 150 155 160
Pro Ala Gln Leu Asp Gly Asp Gly Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu
165 170 175
Thr Val Glu Thr Asp Arg Trp Glu Gln Gly Glu Ser Phe Thr Cys Val
180 185 190
Val Met His Glu Ala Ile Arg His Thr Tyr Arg Gln Lys Ser Ile Thr
195 200 205
Asn Phe Pro Gly Lys
210
<210> 260
<211> 213
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG7 лошади
Биспецифический выступ T(130)W
<400> 260
Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Val Leu Met
1 5 10 15
Ile Ser Arg Thr Pro Thr Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Gly His
20 25 30
Asp Phe Pro Asp Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Thr
35 40 45
His Thr Ala Thr Thr Glu Pro Lys Gln Glu Gln Asn Asn Ser Thr Tyr
50 55 60
Arg Val Val Ser Ile Leu Ala Ile Gln His Lys Asp Trp Leu Ser Gly
65 70 75 80
Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn Gln Ala Leu Pro Ala Pro Val
85 90 95
Gln Lys Thr Ile Ser Lys Pro Thr Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
100 105 110
Tyr Val Leu Ala Pro His Pro Asp Glu Leu Ser Lys Asn Lys Val Ser
115 120 125
Val Trp Cys Leu Val Lys Asp Phe Tyr Pro Pro Asp Ile Asp Ile Glu
130 135 140
Trp Lys Ser Asn Gly Gln Pro Glu Pro Glu Thr Lys Tyr Ser Thr Thr
145 150 155 160
Pro Ala Gln Leu Asp Gly Asp Gly Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu
165 170 175
Thr Val Glu Thr Asn Arg Trp Gln Gln Gly Thr Thr Phe Thr Cys Ala
180 185 190
Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Glu Lys Ser Val Ser
195 200 205
Lys Ser Pro Gly Lys
210
<210> 261
<211> 213
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG1 лошади
Биспецифическая впадина T(130)S L(132)A
<400> 261
Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Asn Pro Lys Asp Thr Leu Met
1 5 10 15
Ile Thr Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln
20 25 30
Glu Asn Pro Asp Val Lys Phe Asn Trp Tyr Met Asp Gly Val Glu Val
35 40 45
Arg Thr Ala Thr Thr Arg Pro Lys Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr
50 55 60
Arg Val Val Ser Val Leu Arg Ile Gln His Gln Asp Trp Leu Ser Gly
65 70 75 80
Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn Gln Ala Leu Pro Gln Pro Ile
85 90 95
Glu Arg Thr Ile Thr Lys Thr Lys Gly Arg Ser Gln Glu Pro Gln Val
100 105 110
Tyr Val Leu Ala Pro His Pro Asp Glu Leu Ser Lys Ser Lys Val Ser
115 120 125
Val Ser Cys Ala Val Lys Asp Phe Tyr Pro Pro Glu Ile Asn Ile Glu
130 135 140
Trp Gln Ser Asn Gly Gln Pro Glu Leu Glu Thr Lys Tyr Ser Thr Thr
145 150 155 160
Gln Ala Gln Gln Asp Ser Asp Gly Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu
165 170 175
Ser Val Asp Arg Asn Arg Trp Gln Gln Gly Thr Thr Phe Thr Cys Gly
180 185 190
Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Asn Val Ser
195 200 205
Lys Asn Pro Gly Lys
210
<210> 262
<211> 213
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG2 лошади
Биспецифическая впадина T(130)S L(132)A
<400> 262
Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Asn Pro Lys Asp Ala Leu Met
1 5 10 15
Ile Ser Arg Thr Pro Val Val Thr Cys Val Val Val Asn Leu Ser Asp
20 25 30
Gln Tyr Pro Asp Val Gln Phe Ser Trp Tyr Val Asp Asn Thr Glu Val
35 40 45
His Ser Ala Ile Thr Lys Gln Arg Glu Ala Gln Phe Asn Ser Thr Tyr
50 55 60
Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Gln His Gln Asp Trp Leu Ser Gly
65 70 75 80
Lys Glu Phe Lys Cys Ser Val Thr Asn Val Gly Val Pro Gln Pro Ile
85 90 95
Ser Arg Ala Ile Ser Arg Gly Lys Gly Pro Ser Arg Val Pro Gln Val
100 105 110
Tyr Val Leu Pro Pro His Pro Asp Glu Leu Ala Lys Ser Lys Val Ser
115 120 125
Val Ser Cys Ala Val Lys Asp Phe Tyr Pro Pro Asp Ile Ser Val Glu
130 135 140
Trp Gln Ser Asn Arg Trp Pro Glu Leu Glu Gly Lys Tyr Ser Thr Thr
145 150 155 160
Pro Ala Gln Leu Asp Gly Asp Gly Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu
165 170 175
Ser Leu Glu Thr Ser Arg Trp Gln Gln Val Glu Ser Phe Thr Cys Ala
180 185 190
Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Phe Thr Lys Thr Asp Ile Ser
195 200 205
Glu Ser Leu Gly Lys
210
<210> 263
<211> 213
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG3 лошади
Биспецифическая впадина T(130)S L(132)A
<400> 263
Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Val Leu Met
1 5 10 15
Ile Thr Arg Met Pro Glu Val Thr Cys Leu Val Val Asp Val Ser His
20 25 30
Asp Ser Ser Asp Val Leu Phe Thr Trp Tyr Val Asp Gly Thr Glu Val
35 40 45
Lys Thr Ala Lys Thr Met Pro Asn Glu Glu Gln Asn Asn Ser Thr Tyr
50 55 60
Arg Val Val Ser Val Leu Arg Ile Gln His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
65 70 75 80
Lys Lys Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn Gln Ala Leu Pro Ala Pro Val
85 90 95
Glu Arg Thr Ile Ser Lys Ala Thr Gly Gln Thr Arg Val Pro Gln Val
100 105 110
Tyr Val Leu Ala Pro His Pro Asp Glu Leu Ser Lys Asn Lys Val Ser
115 120 125
Val Ser Cys Ala Val Lys Asp Phe Tyr Pro Pro Asp Ile Thr Val Glu
130 135 140
Trp Gln Ser Asn Glu His Pro Glu Pro Glu Gly Lys Tyr Arg Thr Thr
145 150 155 160
Glu Ala Gln Lys Asp Ser Asp Gly Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu
165 170 175
Thr Val Glu Lys Asp Arg Trp Gln Gln Gly Thr Thr Phe Thr Cys Val
180 185 190
Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Val Met Gln Lys Asn Ile Ser
195 200 205
Lys Asn Pro Gly Lys
210
<210> 264
<211> 213
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG4 лошади
Биспецифическая впадина T(130)S L(132)A
<400> 264
Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Val Leu Met
1 5 10 15
Ile Ser Arg Thr Pro Thr Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Gly His
20 25 30
Asp Phe Pro Asp Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Thr
35 40 45
His Thr Ala Thr Thr Glu Pro Lys Gln Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr
50 55 60
Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Gln His Lys Asp Trp Leu Ser Gly
65 70 75 80
Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Val
85 90 95
Glu Arg Thr Ile Ser Ala Pro Thr Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
100 105 110
Tyr Val Leu Ala Pro His Arg Asp Glu Leu Ser Lys Asn Lys Val Ser
115 120 125
Val Ser Cys Ala Val Lys Asp Phe Tyr Pro Pro Asp Ile Asp Ile Glu
130 135 140
Trp Lys Ser Asn Gly Gln Pro Glu Pro Glu Thr Lys Tyr Ser Thr Thr
145 150 155 160
Pro Ala Gln Leu Asp Ser Asp Gly Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu
165 170 175
Thr Val Glu Thr Asn Arg Trp Gln Gln Gly Thr Thr Phe Thr Cys Ala
180 185 190
Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Glu Lys Ser Val Ser
195 200 205
Lys Ser Pro Gly Lys
210
<210> 265
<211> 213
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG5 лошади
Биспецифическая впадина T(130)S L(132)A
<400> 265
Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Val Leu Met
1 5 10 15
Ile Ser Arg Lys Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Leu Gly His
20 25 30
Asp Asp Pro Asp Val Gln Phe Thr Trp Phe Val Asp Gly Val Glu Thr
35 40 45
His Thr Ala Thr Thr Glu Pro Lys Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr
50 55 60
Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Gln His Gln Asp Trp Leu Ser Gly
65 70 75 80
Lys Glu Phe Lys Cys Ser Val Thr Ser Lys Ala Leu Pro Ala Pro Val
85 90 95
Glu Arg Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Leu Arg Val Pro Gln Val
100 105 110
Tyr Val Leu Ala Pro His Pro Asp Glu Leu Ala Lys Asn Thr Val Ser
115 120 125
Val Ser Cys Ala Val Lys Asp Phe Tyr Pro Pro Glu Ile Asp Val Glu
130 135 140
Trp Gln Ser Asn Glu His Pro Glu Pro Glu Gly Lys Tyr Ser Thr Thr
145 150 155 160
Pro Ala Gln Leu Asn Ser Asp Gly Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu
165 170 175
Ser Val Glu Thr Ser Arg Trp Lys Gln Gly Glu Ser Phe Thr Cys Gly
180 185 190
Val Met His Glu Ala Val Glu Asn His Tyr Thr Gln Lys Asn Val Ser
195 200 205
His Ser Pro Gly Lys
210
<210> 266
<211> 213
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG6 лошади
Биспецифическая впадина T(130)S L(132)A
<400> 266
Arg Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Asn Pro Lys Asp Thr Leu Met
1 5 10 15
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln
20 25 30
Glu Asn Pro Asp Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Ala
35 40 45
His Thr Ala Thr Thr Lys Ala Lys Glu Lys Gln Asp Asn Ser Thr Tyr
50 55 60
Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Gln His Gln Asp Trp Arg Arg Gly
65 70 75 80
Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn Arg Ala Leu Pro Ala Pro Val
85 90 95
Glu Arg Thr Ile Thr Lys Ala Lys Gly Glu Leu Gln Asp Pro Lys Val
100 105 110
Tyr Ile Leu Ala Pro His Arg Glu Glu Val Thr Lys Asn Thr Val Ser
115 120 125
Val Ser Cys Ala Val Lys Asp Phe Tyr Pro Pro Asp Ile Asn Val Glu
130 135 140
Trp Gln Ser Asn Glu Glu Pro Glu Pro Glu Val Lys Tyr Ser Thr Thr
145 150 155 160
Pro Ala Gln Leu Asp Gly Asp Gly Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu
165 170 175
Thr Val Glu Thr Asp Arg Trp Glu Gln Gly Glu Ser Phe Thr Cys Val
180 185 190
Val Met His Glu Ala Ile Arg His Thr Tyr Arg Gln Lys Ser Ile Thr
195 200 205
Asn Phe Pro Gly Lys
210
<210> 267
<211> 213
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Иллюстративный вариант Fc IgG7 лошади
Биспецифическая впадина T(130)S L(132)A
<400> 267
Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Val Leu Met
1 5 10 15
Ile Ser Arg Thr Pro Thr Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Gly His
20 25 30
Asp Phe Pro Asp Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Thr
35 40 45
His Thr Ala Thr Thr Glu Pro Lys Gln Glu Gln Asn Asn Ser Thr Tyr
50 55 60
Arg Val Val Ser Ile Leu Ala Ile Gln His Lys Asp Trp Leu Ser Gly
65 70 75 80
Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn Gln Ala Leu Pro Ala Pro Val
85 90 95
Gln Lys Thr Ile Ser Lys Pro Thr Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
100 105 110
Tyr Val Leu Ala Pro His Pro Asp Glu Leu Ser Lys Asn Lys Val Ser
115 120 125
Val Ser Cys Ala Val Lys Asp Phe Tyr Pro Pro Asp Ile Asp Ile Glu
130 135 140
Trp Lys Ser Asn Gly Gln Pro Glu Pro Glu Thr Lys Tyr Ser Thr Thr
145 150 155 160
Pro Ala Gln Leu Asp Gly Asp Gly Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu
165 170 175
Thr Val Glu Thr Asn Arg Trp Gln Gln Gly Thr Thr Phe Thr Cys Ala
180 185 190
Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Glu Lys Ser Val Ser
195 200 205
Lys Ser Pro Gly Lys
210
<210> 268
<211> 9
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Альтернативная CDR-H2
<220>
<221> misc_feature
<222> (5)..(5)
<223> X представляет собой K или A
<400> 268
Tyr Ile Asn Pro Xaa Asn Asp Gly Thr
1 5
<210> 269
<211> 9
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Альтернативная CDR-H2 клона B
<400> 269
Tyr Ile Asn Pro Lys Asn Asp Gly Thr
1 5
<210> 270
<211> 40
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Альтернативная HC-FR3 клона B
<400> 270
Phe Tyr Asn Gly Lys Phe Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ser Asp Lys
1 5 10 15
Ser Ser Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp
20 25 30
Ser Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Ala
35 40
<210> 271
<211> 17
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Альтернативная CDR-H2 клона I
<400> 271
Tyr Ile Asn Pro Asn Asn Asp Gly Thr Phe Tyr Asn Gly Lys Phe Gln
1 5 10 15
Gly
<210> 272
<211> 9
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Альтернативная CDR-H2 клона I
<400> 272
Tyr Ile Asn Pro Asn Asn Asp Gly Thr
1 5
<210> 273
<211> 40
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Альтернативная HC-FR3 клона I
<400> 273
Phe Tyr Asn Gly Lys Phe Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ser Asp Lys
1 5 10 15
Ser Ser Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp
20 25 30
Ser Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Ala
35 40
<210> 274
<211> 116
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Канинизированная вариабельная HC v3 клона I
<400> 274
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Ala Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Val Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Tyr Ile Asn Pro Asn Asn Asp Gly Thr Phe Tyr Asn Gly Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Leu Thr Ala Asp Thr Ser Thr Gly Thr Thr Tyr
65 70 75 80
Thr Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Phe Tyr Tyr Gly Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser
115
<210> 275
<211> 107
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Канинизированная вариабельная LC v3 клона I
<400> 275
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser Val Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Thr Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ala Ser Gln Glu Ile Ser Gly Tyr
20 25 30
Leu Ser Trp Leu Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr Ile Lys Arg Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Thr Leu Asp Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Arg Ile Ser Arg Val Glu Ala
65 70 75 80
Asp Asp Thr Gly Val Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Ala Ser Tyr Pro Trp
85 90 95
Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Val Glu Leu Lys
100 105
<210> 276
<211> 451
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Канинизированная вариабельная HC v3 клона I и
вариант IgG-B собаки C1q, CD16
<400> 276
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Ala Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Val Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Tyr Ile Asn Pro Asn Asn Asp Gly Thr Phe Tyr Asn Gly Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Leu Thr Ala Asp Thr Ser Thr Gly Thr Thr Tyr
65 70 75 80
Thr Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Phe Tyr Tyr Gly Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Thr Ala Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala
115 120 125
Pro Ser Cys Gly Ser Thr Ser Gly Ser Thr Val Ala Leu Ala Cys Leu
130 135 140
Val Ser Gly Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly
145 150 155 160
Ser Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ser Val Leu Gln Ser Ser
165 170 175
Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Met Val Thr Val Pro Ser Ser Arg Trp
180 185 190
Pro Ser Glu Thr Phe Thr Cys Asn Val Ala His Pro Ala Ser Lys Thr
195 200 205
Lys Val Asp Lys Pro Val Pro Lys Arg Glu Asn Gly Arg Val Pro Arg
210 215 220
Pro Pro Asp Cys Pro Lys Cys Pro Ala Pro Glu Pro Leu Gly Gly Pro
225 230 235 240
Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Leu Ile Ala
245 250 255
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Leu Asp Arg Glu Asp
260 265 270
Pro Glu Val Gln Ile Ser Trp Phe Val Asp Gly Lys Gln Met Gln Thr
275 280 285
Ala Lys Thr Gln Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Gly Thr Tyr Arg Val
290 295 300
Val Ser Val Leu Pro Ile Gly His Gln Asp Trp Leu Lys Gly Lys Gln
305 310 315 320
Phe Thr Cys Arg Val Asn Asn Lys Ala Leu Pro Ser Pro Ile Glu Arg
325 330 335
Thr Ile Ser Lys Ala Arg Gly Gln Ala His Gln Pro Ser Val Tyr Val
340 345 350
Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Leu Ser Lys Asn Thr Val Ser Leu Thr
355 360 365
Cys Leu Ile Lys Asp Phe Phe Pro Pro Asp Ile Asp Val Glu Trp Gln
370 375 380
Ser Asn Gly Gln Gln Glu Pro Glu Ser Lys Tyr Arg Thr Thr Pro Pro
385 390 395 400
Gln Leu Asp Glu Asp Gly Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Ser Val
405 410 415
Asp Lys Ser Arg Trp Gln Arg Gly Asp Thr Phe Ile Cys Ala Val Met
420 425 430
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Glu Ser Leu Ser His Ser
435 440 445
Pro Gly Lys
450
<210> 277
<211> 217
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Канинизированная вариабельная LC v3 клона I и
констнтная область κ легкой цепи собаки
<400> 277
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser Val Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Thr Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ala Ser Gln Glu Ile Ser Gly Tyr
20 25 30
Leu Ser Trp Leu Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr Ile Lys Arg Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Thr Leu Asp Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Arg Ile Ser Arg Val Glu Ala
65 70 75 80
Asp Asp Thr Gly Val Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Ala Ser Tyr Pro Trp
85 90 95
Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Val Glu Leu Lys Arg Asn Asp Ala Gln
100 105 110
Pro Ala Val Tyr Leu Phe Gln Pro Ser Pro Asp Gln Leu His Thr Gly
115 120 125
Ser Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Ser Phe Tyr Pro Lys Asp Ile
130 135 140
Asn Val Lys Trp Lys Val Asp Gly Val Ile Gln Asp Thr Gly Ile Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser
165 170 175
Thr Leu Thr Met Ser Ser Thr Glu Tyr Leu Ser His Glu Leu Tyr Ser
180 185 190
Cys Glu Ile Thr His Lys Ser Leu Pro Ser Thr Leu Ile Lys Ser Phe
195 200 205
Gln Arg Ser Glu Cys Gln Arg Val Asp
210 215
<210> 278
<211> 13
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: CDR-H1 клона M3
<400> 278
Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Ser Arg Tyr Ser Val His
1 5 10
<210> 279
<211> 9
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: CDR-H2 клона M3
<400> 279
Gly Met Ile Trp Gly Gly Gly Ser Thr
1 5
<210> 280
<211> 9
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: CDR-H3 клона M3
<400> 280
Thr Tyr Arg Gly Tyr Ala Leu Asp Tyr
1 5
<210> 281
<211> 22
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: HC-FR1 клона M3
<400> 281
Gln Val Gln Leu Lys Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Ala Pro Ser Gln
1 5 10 15
Ser Leu Ser Ile Thr Cys
20
<210> 282
<211> 13
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: HC-FR2 клона M3
<400> 282
Trp Val Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu
1 5 10
<210> 283
<211> 40
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: HC-FR3 клона M3
<400> 283
Asp Tyr Asn Ser Val Phe Lys Ser Arg Leu Ser Ile Ser Lys Asp Asn
1 5 10 15
Ser Lys Ser Gln Val Phe Leu Lys Met Asn Ser Leu Gln Thr Asp Asp
20 25 30
Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Ala Arg
35 40
<210> 284
<211> 11
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: HC-FR4 клона M3
<400> 284
Trp Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser
1 5 10
<210> 285
<211> 11
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: CDR-L1 клона M3
<400> 285
Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr Leu Asn
1 5 10
<210> 286
<211> 8
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: CDR-L2 клона M3
<400> 286
Tyr Tyr Thr Ser Arg Leu Gln Ser
1 5
<210> 287
<211> 9
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: CDR-L3 клона M3
<400> 287
Gln Gln Ala Asn Thr Leu Pro Leu Thr
1 5
<210> 288
<211> 23
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: LC-FR1 клона M3
<400> 288
Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Thr Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Ser Cys
20
<210> 289
<211> 14
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: LC-FR2 клона M3
<400> 289
Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr Val Lys Leu Leu Ile
1 5 10
<210> 290
<211> 32
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: LC-FR3 клона M3
<400> 290
Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Cys
1 5 10 15
Leu Thr Ile Ser Asn Leu Glu Gln Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys
20 25 30
<210> 291
<211> 10
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: LC-FR4 клона M3
<400> 291
Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys
1 5 10
<210> 292
<211> 117
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: вариабельная HC клона M3
<400> 292
Gln Val Gln Leu Lys Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Ala Pro Ser Gln
1 5 10 15
Ser Leu Ser Ile Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Ser Arg Tyr
20 25 30
Ser Val His Trp Val Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu
35 40 45
Gly Met Ile Trp Gly Gly Gly Ser Thr Asp Tyr Asn Ser Val Phe Lys
50 55 60
Ser Arg Leu Ser Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Phe Leu
65 70 75 80
Lys Met Asn Ser Leu Gln Thr Asp Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Thr Tyr Arg Gly Tyr Ala Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 293
<211> 107
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: вариабельная LC клона M3
<400> 293
Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Thr Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr
20 25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr Val Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Tyr Thr Ser Arg Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Cys Leu Thr Ile Ser Asn Leu Glu Gln
65 70 75 80
Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Ala Asn Thr Leu Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys
100 105
<210> 294
<211> 13
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: CDR-H1 клона M5
<400> 294
Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Ser Arg Tyr Ser Val His
1 5 10
<210> 295
<211> 9
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: CDR-H2 клона M5
<400> 295
Gly Met Ile Trp Gly Gly Gly Ser Thr
1 5
<210> 296
<211> 9
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: CDR-H3 клона M5
<400> 296
Thr Tyr Arg Gly Tyr Ala Leu Asp Tyr
1 5
<210> 297
<211> 22
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: HC-FR1 клона M5
<400> 297
Gln Val Gln Leu Lys Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Ala Pro Ser Gln
1 5 10 15
Ser Leu Ser Ile Thr Cys
20
<210> 298
<211> 13
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: HC-FR2 клона M5
<400> 298
Trp Val Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu
1 5 10
<210> 299
<211> 40
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: HC-FR3 клона M5
<400> 299
Asp Tyr Asn Ser Val Phe Lys Ser Arg Leu Ser Ile Ser Lys Asp Asn
1 5 10 15
Ser Lys Ser Gln Val Phe Leu Lys Met Asn Ser Leu Gln Thr Asp Asp
20 25 30
Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Ala Arg
35 40
<210> 300
<211> 11
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: HC-FR4 клона M5
<400> 300
Trp Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser
1 5 10
<210> 301
<211> 11
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: CDR-L1 клона M5
<400> 301
Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr Leu Asn
1 5 10
<210> 302
<211> 8
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: CDR-L2 клона M5
<400> 302
Tyr Tyr Thr Ser Arg Leu Gln Ser
1 5
<210> 303
<211> 9
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: CDR-L3 клона M5
<400> 303
Gln Gln Ala Asn Thr Leu Pro Leu Thr
1 5
<210> 304
<211> 23
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: LC-FR1 клона M5
<400> 304
Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Thr Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Ser Cys
20
<210> 305
<211> 14
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: LC-FR2 клона M5
<400> 305
Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr Val Lys Leu Leu Ile
1 5 10
<210> 306
<211> 32
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: LC-FR3 клона M5
<400> 306
Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Cys
1 5 10 15
Leu Thr Ile Ser Asn Leu Glu Gln Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys
20 25 30
<210> 307
<211> 10
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: LC-FR4 клона M5
<400> 307
Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys
1 5 10
<210> 308
<211> 117
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: вариабельная HC клона M5
<400> 308
Gln Val Gln Leu Lys Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Ala Pro Ser Gln
1 5 10 15
Ser Leu Ser Ile Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Ser Arg Tyr
20 25 30
Ser Val His Trp Val Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu
35 40 45
Gly Met Ile Trp Gly Gly Gly Ser Thr Asp Tyr Asn Ser Val Phe Lys
50 55 60
Ser Arg Leu Ser Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Phe Leu
65 70 75 80
Lys Met Asn Ser Leu Gln Thr Asp Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Thr Tyr Arg Gly Tyr Ala Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 309
<211> 107
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: вариабельная LC клона M5
<400> 309
Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Thr Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr
20 25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr Val Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Tyr Thr Ser Arg Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Cys Leu Thr Ile Ser Asn Leu Glu Gln
65 70 75 80
Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Ala Asn Thr Leu Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys
100 105
<210> 310
<211> 13
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: CDR-H1 клона M8
<400> 310
Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Asp Ile Asn
1 5 10
<210> 311
<211> 11
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: CDR-H2 клона M8
<400> 311
Gly Trp Ile Tyr Pro Gly Asp Gly Ser Thr Lys
1 5 10
<210> 312
<211> 5
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: CDR-H3 клона M8
<400> 312
Ser Ser Phe Val Val
1 5
<210> 313
<211> 22
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: HC-FR1 клона M8
<400> 313
Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Leu Val Lys Ile Ser Cys
20
<210> 314
<211> 13
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: HC-FR2 клона M8
<400> 314
Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
1 5 10
<210> 315
<211> 39
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: HC-FR3 клона M8
<400> 315
Tyr Asn Glu Lys Phe Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser
1 5 10 15
Ser Ser Thr Ala Tyr Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser
20 25 30
Ala Val Tyr Phe Cys Ala Arg
35
<210> 316
<211> 11
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: HC-FR4 клона M8
<400> 316
Trp Gly Ala Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
1 5 10
<210> 317
<211> 11
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: CDR-L1 клона M8
<400> 317
Lys Ala Ser Asp Pro Ile Asn Asn Trp Leu Ala
1 5 10
<210> 318
<211> 8
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: CDR-L2 клона M8
<400> 318
Ser Gly Ala Thr Ser Leu Glu Thr
1 5
<210> 319
<211> 9
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: CDR-L3 клона M8
<400> 319
His Gln Tyr Trp Ser Ile Pro Tyr Thr
1 5
<210> 320
<211> 23
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: LC-FR1 клона M8
<400> 320
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Ser Ser Tyr Leu Ser Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Gly Arg Val Thr Ile Thr Cys
20
<210> 321
<211> 14
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: LC-FR2 клона M8
<400> 321
Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Asn Ala Pro Arg Leu Leu Ile
1 5 10
<210> 322
<211> 32
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: LC-FR3 клона M8
<400> 322
Gly Val Pro Ser Arg Ile Ser Gly Ser Gly Ser Gly Lys Asp Tyr Ser
1 5 10 15
Leu Ser Ile Thr Ser Leu Gln Thr Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys
20 25 30
<210> 323
<211> 10
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: LC-FR4 клона M8
<400> 323
Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
1 5 10
<210> 324
<211> 114
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: вариабельная HC клона M8
<400> 324
Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Leu Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Asp Ile Asn Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Trp Ile Tyr Pro Gly Asp Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Arg Ser Ser Phe Val Val Trp Gly Ala Gly Thr Thr Val Thr Val
100 105 110
Ser Ser
<210> 325
<211> 107
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: вариабельная LC клона M8
<400> 325
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Ser Ser Tyr Leu Ser Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Gly Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Asp Pro Ile Asn Asn Trp
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Asn Ala Pro Arg Leu Leu Ile
35 40 45
Ser Gly Ala Thr Ser Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Ile Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Lys Asp Tyr Ser Leu Ser Ile Thr Ser Leu Gln Thr
65 70 75 80
Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys His Gln Tyr Trp Ser Ile Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 326
<211> 13
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: CDR-H1 клона M9
<400> 326
Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe Gly Met His
1 5 10
<210> 327
<211> 11
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: CDR-H2 клона M9
<400> 327
Ala Tyr Ile Arg Ser Asp Ser Ser Thr Ile Tyr
1 5 10
<210> 328
<211> 11
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: CDR-H3 клона M9
<400> 328
Ser Gly Tyr Tyr Gly Ser Phe Ser Leu Thr Tyr
1 5 10
<210> 329
<211> 22
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: HC-FR1 клона M9
<400> 329
Asp Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Arg Lys Leu Ser Cys
20
<210> 330
<211> 13
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: HC-FR2 клона M9
<400> 330
Trp Val Arg Gln Ala Pro Glu Lys Gly Leu Glu Trp Val
1 5 10
<210> 331
<211> 39
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: HC-FR3 клона M9
<400> 331
Tyr Ala Asp Thr Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Pro
1 5 10 15
Lys Asn Thr Leu Phe Leu Gln Met Thr Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr
20 25 30
Ala Met Tyr Tyr Cys Ala Arg
35
<210> 332
<211> 11
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: HC-FR4 клона M9
<400> 332
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ala
1 5 10
<210> 333
<211> 12
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: CDR-L1 клона M9
<400> 333
Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Ser Asn Tyr Leu His
1 5 10
<210> 334
<211> 8
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: CDR-L2 клона M9
<400> 334
Tyr Arg Thr Ser Asn Leu Pro Ser
1 5
<210> 335
<211> 8
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: CDR-L3 клона M9
<400> 335
Gln Gln Gly Ser Gly Met Leu Thr
1 5
<210> 336
<211> 23
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: LC-FR1 клона M9
<400> 336
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Thr Thr Met Ala Ala Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Lys Ile Thr Ile Thr Cys
20
<210> 337
<211> 14
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: LC-FR2 клона M9
<400> 337
Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Phe Ser Pro Lys Leu Leu Ile
1 5 10
<210> 338
<211> 32
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: LC-FR3 клона M9
<400> 338
Gly Val Pro Ala Arg Phe Phe Gly Ser Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Ser
1 5 10 15
Leu Thr Ile Gly Thr Met Glu Ala Glu Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys
20 25 30
<210> 339
<211> 10
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: LC-FR4 клона M9
<400> 339
Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys
1 5 10
<210> 340
<211> 120
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: вариабельная HC клона M9
<400> 340
Asp Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Arg Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Glu Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Tyr Ile Arg Ser Asp Ser Ser Thr Ile Tyr Tyr Ala Asp Thr Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Pro Lys Asn Thr Leu Phe
65 70 75 80
Leu Gln Met Thr Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Ser Gly Tyr Tyr Gly Ser Phe Ser Leu Thr Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ala
115 120
<210> 341
<211> 107
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: вариабельная LC клона M9
<400> 341
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Thr Thr Met Ala Ala Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Lys Ile Thr Ile Thr Cys Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Ser Asn
20 25 30
Tyr Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Phe Ser Pro Lys Leu Leu
35 40 45
Ile Tyr Arg Thr Ser Asn Leu Pro Ser Gly Val Pro Ala Arg Phe Phe
50 55 60
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Ser Leu Thr Ile Gly Thr Met Glu
65 70 75 80
Ala Glu Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Ser Gly Met Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys
100 105
<210> 342
<211> 117
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Канинизированная вариабельная HC v1 клона M3
<400> 342
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Asp Leu Val Lys Pro Ala Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Ser Arg Tyr
20 25 30
Ser Val His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu
35 40 45
Gly Met Ile Trp Gly Gly Gly Ser Thr Asp Tyr Asn Ser Val Val Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Thr Tyr Arg Gly Tyr Ala Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 343
<211> 117
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Канинизированная вариабельная HC v2 клона M3
<400> 343
Glu Leu Thr Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Ser Arg Tyr
20 25 30
Ser Val His Trp Ile Arg Gln Pro Arg Gly Arg Gly Leu Glu Leu Leu
35 40 45
Gly Met Ile Trp Gly Gly Gly Ser Thr Asp Tyr Asn Pro Ala Phe Gln
50 55 60
Gly Arg Ile Ser Ile Thr Ala Asp Thr Ala Lys Asn Gln Phe Ser Leu
65 70 75 80
Gln Leu Ser Ser Met Thr Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Thr Tyr Arg Gly Tyr Ala Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 344
<211> 107
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Канинизированная вариабельная LC v1 клона M3
<400> 344
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser Val Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr
20 25 30
Leu Asn Trp Tyr Leu Gln Lys Ala Gly Gln Ser Pro Arg Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Tyr Thr Ser Arg Leu Gln Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Arg Ile Gly Arg Val Glu Ala
65 70 75 80
Glu Asp Ala Gly Ile Tyr Phe Cys Gln Gln Ala Asn Thr Leu Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Val Arg
100 105
<210> 345
<211> 120
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Канинизированная вариабельная HC v1 клона M9
<400> 345
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Asp Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Tyr Ile Arg Ser Asp Ser Ser Thr Ile Tyr Tyr Ala Asp Ala Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Ser Gly Tyr Tyr Gly Ser Phe Ser Leu Thr Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 346
<211> 120
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Канинизированная вариабельная HC v2 клона M9
<400> 346
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Asp Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Gln Trp Val
35 40 45
Ala Tyr Ile Arg Ser Asp Ser Ser Thr Ile Tyr Tyr Ala Asp Ala Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Ser Gly Tyr Tyr Gly Ser Phe Ser Leu Thr Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 347
<211> 107
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Канинизированная вариабельная LC v1 клона M9
<400> 347
Asp Ile Met Leu Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser Val Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Ser Asn
20 25 30
Tyr Leu His Trp Tyr Leu Gln Lys Ala Gly Gln Ser Pro Arg Leu Leu
35 40 45
Ile Tyr Arg Thr Ser Asn Leu Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Arg Ile Gly Arg Val Glu
65 70 75 80
Ala Glu Asp Ala Gly Ile Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Ser Gly Met Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Val Arg
100 105
<210> 348
<211> 452
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Канинизированная вариабельная HC v1 клона M3 и
вариант IgG-B собаки C1q, CD16
<400> 348
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Asp Leu Val Lys Pro Ala Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Ser Arg Tyr
20 25 30
Ser Val His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu
35 40 45
Gly Met Ile Trp Gly Gly Gly Ser Thr Asp Tyr Asn Ser Val Val Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Thr Tyr Arg Gly Tyr Ala Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Thr Ala Pro Ser Val Phe Pro Leu
115 120 125
Ala Pro Ser Cys Gly Ser Thr Ser Gly Ser Thr Val Ala Leu Ala Cys
130 135 140
Leu Val Ser Gly Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser
145 150 155 160
Gly Ser Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ser Val Leu Gln Ser
165 170 175
Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Met Val Thr Val Pro Ser Ser Arg
180 185 190
Trp Pro Ser Glu Thr Phe Thr Cys Asn Val Ala His Pro Ala Ser Lys
195 200 205
Thr Lys Val Asp Lys Pro Val Pro Lys Arg Glu Asn Gly Arg Val Pro
210 215 220
Arg Pro Pro Asp Cys Pro Lys Cys Pro Ala Pro Glu Pro Leu Gly Gly
225 230 235 240
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Leu Ile
245 250 255
Ala Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Leu Asp Arg Glu
260 265 270
Asp Pro Glu Val Gln Ile Ser Trp Phe Val Asp Gly Lys Gln Met Gln
275 280 285
Thr Ala Lys Thr Gln Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Gly Thr Tyr Arg
290 295 300
Val Val Ser Val Leu Pro Ile Gly His Gln Asp Trp Leu Lys Gly Lys
305 310 315 320
Gln Phe Thr Cys Arg Val Asn Asn Lys Ala Leu Pro Ser Pro Ile Glu
325 330 335
Arg Thr Ile Ser Lys Ala Arg Gly Gln Ala His Gln Pro Ser Val Tyr
340 345 350
Val Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Leu Ser Lys Asn Thr Val Ser Leu
355 360 365
Thr Cys Leu Ile Lys Asp Phe Phe Pro Pro Asp Ile Asp Val Glu Trp
370 375 380
Gln Ser Asn Gly Gln Gln Glu Pro Glu Ser Lys Tyr Arg Thr Thr Pro
385 390 395 400
Pro Gln Leu Asp Glu Asp Gly Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Ser
405 410 415
Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Arg Gly Asp Thr Phe Ile Cys Ala Val
420 425 430
Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Glu Ser Leu Ser His
435 440 445
Ser Pro Gly Lys
450
<210> 349
<211> 452
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Канинизированная вариабельная HC v2 клона M3 и
вариант IgG-B собаки C1q, CD16
<400> 349
Glu Leu Thr Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Ser Arg Tyr
20 25 30
Ser Val His Trp Ile Arg Gln Pro Arg Gly Arg Gly Leu Glu Leu Leu
35 40 45
Gly Met Ile Trp Gly Gly Gly Ser Thr Asp Tyr Asn Pro Ala Phe Gln
50 55 60
Gly Arg Ile Ser Ile Thr Ala Asp Thr Ala Lys Asn Gln Phe Ser Leu
65 70 75 80
Gln Leu Ser Ser Met Thr Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Thr Tyr Arg Gly Tyr Ala Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Thr Ala Pro Ser Val Phe Pro Leu
115 120 125
Ala Pro Ser Cys Gly Ser Thr Ser Gly Ser Thr Val Ala Leu Ala Cys
130 135 140
Leu Val Ser Gly Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser
145 150 155 160
Gly Ser Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ser Val Leu Gln Ser
165 170 175
Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Met Val Thr Val Pro Ser Ser Arg
180 185 190
Trp Pro Ser Glu Thr Phe Thr Cys Asn Val Ala His Pro Ala Ser Lys
195 200 205
Thr Lys Val Asp Lys Pro Val Pro Lys Arg Glu Asn Gly Arg Val Pro
210 215 220
Arg Pro Pro Asp Cys Pro Lys Cys Pro Ala Pro Glu Pro Leu Gly Gly
225 230 235 240
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Leu Ile
245 250 255
Ala Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Leu Asp Arg Glu
260 265 270
Asp Pro Glu Val Gln Ile Ser Trp Phe Val Asp Gly Lys Gln Met Gln
275 280 285
Thr Ala Lys Thr Gln Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Gly Thr Tyr Arg
290 295 300
Val Val Ser Val Leu Pro Ile Gly His Gln Asp Trp Leu Lys Gly Lys
305 310 315 320
Gln Phe Thr Cys Arg Val Asn Asn Lys Ala Leu Pro Ser Pro Ile Glu
325 330 335
Arg Thr Ile Ser Lys Ala Arg Gly Gln Ala His Gln Pro Ser Val Tyr
340 345 350
Val Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Leu Ser Lys Asn Thr Val Ser Leu
355 360 365
Thr Cys Leu Ile Lys Asp Phe Phe Pro Pro Asp Ile Asp Val Glu Trp
370 375 380
Gln Ser Asn Gly Gln Gln Glu Pro Glu Ser Lys Tyr Arg Thr Thr Pro
385 390 395 400
Pro Gln Leu Asp Glu Asp Gly Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Ser
405 410 415
Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Arg Gly Asp Thr Phe Ile Cys Ala Val
420 425 430
Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Glu Ser Leu Ser His
435 440 445
Ser Pro Gly Lys
450
<210> 350
<211> 217
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Канинизированная вариабельная LC v1 клона M3 и
констнтная область κ легкой цепи собаки
<400> 350
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser Val Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr
20 25 30
Leu Asn Trp Tyr Leu Gln Lys Ala Gly Gln Ser Pro Arg Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Tyr Thr Ser Arg Leu Gln Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Arg Ile Gly Arg Val Glu Ala
65 70 75 80
Glu Asp Ala Gly Ile Tyr Phe Cys Gln Gln Ala Asn Thr Leu Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Val Arg Arg Asn Asp Ala Gln
100 105 110
Pro Ala Val Tyr Leu Phe Gln Pro Ser Pro Asp Gln Leu His Thr Gly
115 120 125
Ser Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Ser Phe Tyr Pro Lys Asp Ile
130 135 140
Asn Val Lys Trp Lys Val Asp Gly Val Ile Gln Asp Thr Gly Ile Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser
165 170 175
Thr Leu Thr Met Ser Ser Thr Glu Tyr Leu Ser His Glu Leu Tyr Ser
180 185 190
Cys Glu Ile Thr His Lys Ser Leu Pro Ser Thr Leu Ile Lys Ser Phe
195 200 205
Gln Arg Ser Glu Cys Gln Arg Val Asp
210 215
<210> 351
<211> 455
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Канинизированная вариабельная HC v1 клона M9 и
вариант IgG-B собаки C1q, CD16
<400> 351
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Asp Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Tyr Ile Arg Ser Asp Ser Ser Thr Ile Tyr Tyr Ala Asp Ala Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Ser Gly Tyr Tyr Gly Ser Phe Ser Leu Thr Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Thr Ala Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Ser Cys Gly Ser Thr Ser Gly Ser Thr Val Ala
130 135 140
Leu Ala Cys Leu Val Ser Gly Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ser Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ser Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Met Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Arg Trp Pro Ser Glu Thr Phe Thr Cys Asn Val Ala His Pro
195 200 205
Ala Ser Lys Thr Lys Val Asp Lys Pro Val Pro Lys Arg Glu Asn Gly
210 215 220
Arg Val Pro Arg Pro Pro Asp Cys Pro Lys Cys Pro Ala Pro Glu Pro
225 230 235 240
Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr
245 250 255
Leu Leu Ile Ala Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Leu
260 265 270
Asp Arg Glu Asp Pro Glu Val Gln Ile Ser Trp Phe Val Asp Gly Lys
275 280 285
Gln Met Gln Thr Ala Lys Thr Gln Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Gly
290 295 300
Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Gly His Gln Asp Trp Leu
305 310 315 320
Lys Gly Lys Gln Phe Thr Cys Arg Val Asn Asn Lys Ala Leu Pro Ser
325 330 335
Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Ala Arg Gly Gln Ala His Gln Pro
340 345 350
Ser Val Tyr Val Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Leu Ser Lys Asn Thr
355 360 365
Val Ser Leu Thr Cys Leu Ile Lys Asp Phe Phe Pro Pro Asp Ile Asp
370 375 380
Val Glu Trp Gln Ser Asn Gly Gln Gln Glu Pro Glu Ser Lys Tyr Arg
385 390 395 400
Thr Thr Pro Pro Gln Leu Asp Glu Asp Gly Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser
405 410 415
Lys Leu Ser Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Arg Gly Asp Thr Phe Ile
420 425 430
Cys Ala Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Glu Ser
435 440 445
Leu Ser His Ser Pro Gly Lys
450 455
<210> 352
<211> 455
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Канинизированная вариабельная HC v2 клона M9 и
вариант IgG-B собаки C1q, CD16
<400> 352
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Asp Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Gln Trp Val
35 40 45
Ala Tyr Ile Arg Ser Asp Ser Ser Thr Ile Tyr Tyr Ala Asp Ala Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Ser Gly Tyr Tyr Gly Ser Phe Ser Leu Thr Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Thr Ala Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Ser Cys Gly Ser Thr Ser Gly Ser Thr Val Ala
130 135 140
Leu Ala Cys Leu Val Ser Gly Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ser Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ser Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Met Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Arg Trp Pro Ser Glu Thr Phe Thr Cys Asn Val Ala His Pro
195 200 205
Ala Ser Lys Thr Lys Val Asp Lys Pro Val Pro Lys Arg Glu Asn Gly
210 215 220
Arg Val Pro Arg Pro Pro Asp Cys Pro Lys Cys Pro Ala Pro Glu Pro
225 230 235 240
Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr
245 250 255
Leu Leu Ile Ala Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Leu
260 265 270
Asp Arg Glu Asp Pro Glu Val Gln Ile Ser Trp Phe Val Asp Gly Lys
275 280 285
Gln Met Gln Thr Ala Lys Thr Gln Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Gly
290 295 300
Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Gly His Gln Asp Trp Leu
305 310 315 320
Lys Gly Lys Gln Phe Thr Cys Arg Val Asn Asn Lys Ala Leu Pro Ser
325 330 335
Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Ala Arg Gly Gln Ala His Gln Pro
340 345 350
Ser Val Tyr Val Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Leu Ser Lys Asn Thr
355 360 365
Val Ser Leu Thr Cys Leu Ile Lys Asp Phe Phe Pro Pro Asp Ile Asp
370 375 380
Val Glu Trp Gln Ser Asn Gly Gln Gln Glu Pro Glu Ser Lys Tyr Arg
385 390 395 400
Thr Thr Pro Pro Gln Leu Asp Glu Asp Gly Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser
405 410 415
Lys Leu Ser Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Arg Gly Asp Thr Phe Ile
420 425 430
Cys Ala Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Glu Ser
435 440 445
Leu Ser His Ser Pro Gly Lys
450 455
<210> 353
<211> 217
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Канинизированная вариабельная LC v1 клона M9 и
констнтная область κ легкой цепи собаки
<400> 353
Asp Ile Met Leu Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser Val Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Ser Asn
20 25 30
Tyr Leu His Trp Tyr Leu Gln Lys Ala Gly Gln Ser Pro Arg Leu Leu
35 40 45
Ile Tyr Arg Thr Ser Asn Leu Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Arg Ile Gly Arg Val Glu
65 70 75 80
Ala Glu Asp Ala Gly Ile Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Ser Gly Met Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Val Arg Arg Asn Asp Ala Gln
100 105 110
Pro Ala Val Tyr Leu Phe Gln Pro Ser Pro Asp Gln Leu His Thr Gly
115 120 125
Ser Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Ser Phe Tyr Pro Lys Asp Ile
130 135 140
Asn Val Lys Trp Lys Val Asp Gly Val Ile Gln Asp Thr Gly Ile Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser
165 170 175
Thr Leu Thr Met Ser Ser Thr Glu Tyr Leu Ser His Glu Leu Tyr Ser
180 185 190
Cys Glu Ile Thr His Lys Ser Leu Pro Ser Thr Leu Ile Lys Ser Phe
195 200 205
Gln Arg Ser Glu Cys Gln Arg Val Asp
210 215
<210> 354
<211> 14
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: эпитоп IL4R собаки M3
<400> 354
Asp Phe Met Gly Ser Glu Asn His Thr Cys Val Pro Glu Asn
1 5 10
<210> 355
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: эпитоп 1 M8 IL4R собаки
<400> 355
Gly Ser Val Lys Val Leu His Glu Pro Ser Cys Phe Ser Asp Tyr Ile
1 5 10 15
Ser Thr Ser Val Cys Gln Trp Lys Met Asp His Pro Thr Asn Cys Ser
20 25 30
Ala
<210> 356
<211> 12
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: эпитоп 2 M8 IL4R собаки
<400> 356
Arg Glu Asp Ser Val Cys Val Cys Ser Met Pro Ile
1 5 10
<210> 357
<211> 20
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: эпитоп M9 IL4R собаки
<400> 357
Arg Glu Asp Ser Val Cys Val Cys Ser Met Pro Ile Asp Asp Ala Val
1 5 10 15
Glu Ala Asp Val
20
<---
| название | год | авторы | номер документа |
|---|---|---|---|
| МОЛЕКУЛА РЕЦЕПТОРА IL4/IL13 ДЛЯ ВЕТЕРИНАРНОГО ПРИМЕНЕНИЯ | 2018 |
|
RU2795591C2 |
| ВАРИАНТЫ FC-ОБЛАСТИ С ИЗМЕНЕННЫМ СВЯЗЫВАНИЕМ С НЕОНАТАЛЬНЫМ FC-РЕЦЕПТОРОМ (FCRN) ДЛЯ ПРИМЕНЕНИЯ В ВЕТЕРИНАРИИ | 2019 |
|
RU2830231C2 |
| ВАРИАНТЫ IgG-FC ДЛЯ ПРИМЕНЕНИЯ В ВЕТЕРИНАРИИ | 2018 |
|
RU2814952C2 |
| АНТИ-IL31 АНТИТЕЛА ДЛЯ ПРИМЕНЕНИЯ В ВЕТЕРИНАРИИ | 2020 |
|
RU2835543C1 |
| СОБАЧЬИ АНТИТЕЛА С МОДИФИЦИРОВАННЫМИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЯМИ CH2-CH3 | 2014 |
|
RU2815059C2 |
| СОБАЧЬИ АНТИТЕЛА С МОДИФИЦИРОВАННЫМИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЯМИ CH2-CH3 | 2014 |
|
RU2801209C2 |
| КАНИНИЗИРОВАННЫЕ АНТИТЕЛА ПРОТИВ ЧЕЛОВЕЧЕСКОГО CTLA-4 | 2020 |
|
RU2822460C2 |
| АНТИТЕЛА К СОБАЧЬЕМУ АЛЬФА-РЕЦЕПТОРУ ИНТЕРЛЕЙКИНА-4 | 2020 |
|
RU2840044C1 |
| АНТИТЕЛА К ПАРВОВИРУСУ ДЛЯ ПРИМЕНЕНИЯ В ВЕТЕРИНАРИИ | 2020 |
|
RU2830441C2 |
| АНТИТЕЛА К СОБАЧЬЕМУ АЛЬФА-РЕЦЕПТОРУ ИНТЕРЛЕЙКИНА-4 | 2020 |
|
RU2838943C1 |
Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к антителу, способному связываться с собачьим IL4R и кошачьим IL4R, и его антигенсвязывающему фрагменту, а также к биспецифическому антителу, его содержащему. Также раскрыта выделенная нуклеиновая кислота, кодирующая вышеуказанное антитело. Изобретение также относится к способу детектирования IL4R в образце, полученном от представителя вида животного-компаньона, предусматривающего использование вышеуказанного антитела. Изобретение эффективно для применения в способе лечения представителя вида животного-компаньона, имеющего IL4/IL13-индуцированное состояние. 5 н. и 19 з.п. ф-лы, 9 ил., 11 табл., 21 пр.
1. Антитело, способное связываться с собачьим IL4R и кошачьим IL4R, или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащее:
(i) CDR-H1 с последовательностью, которая на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO:1;
(ii) CDR-H2 с последовательностью, которая на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO:271 или SEQ ID NO:272;
(iii) CDR-H3 с последовательностью, которая на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO:31;
(iv) CDR-L1 с последовательностью, которая на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO:4;
(v) CDR-L2 с последовательностью, которая на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO:37; и
(vi) CDR-L3 с последовательностью, которая на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO:38;
где антитело дополнительно содержит одно или более из:
(а) каркасную область 1 вариабельной области тяжелой цепи (HC-FR1) с последовательностью SEQ ID NO:10 или SEQ ID NO:32;
(b) HC-FR2 с последовательностью SEQ ID NO:11 или SEQ ID NO:33;
(c) HC-FR3 с последовательностью SEQ ID NO:12, SEQ ID NO:270, SEQ ID NO:34 или SEQ ID NO:273;
(d) HC-FR4 с последовательностью SEQ ID NO:13 или SEQ ID NO:35;
(e) каркасную область 1 вариабельной области легкой цепи (LC-FR1) с последовательностью SEQ ID NO:17 или SEQ ID NO:39;
(f) LC-FR2 с последовательностью SEQ ID NO:18 или SEQ ID NO:40;
(g) LC-FR3 с последовательностью SEQ ID NO:19 или SEQ ID NO:41; или
(h) LC-FR4 с последовательностью SEQ ID NO:20 или SEQ ID NO:42.
2. Антитело по п.1, где антитело связывается с собачьим IL4R или кошачьим IL4R с константой диссоциации (Kd), равной менее 5×10-6 М, менее 1×10-6 М, менее 5×10-7 M, менее 1×10-7 M,
менее 5×10-8 M, менее 1×10-8 M, менее 5×10-9 M, менее 1×10-9 M,
менее 5×10-10 M, менее 1×10-10 M, менее 5×10-11 M, менее 1×10-11 M,
менее 5×10-12 M или менее 1×10-12 M, как измерено биослойной интерферометрии.
3. Антитело по любому из предшествующих пунктов, где антитело связывается с собачьим IL4R или кошачьим IL4R, как определено анализом иммуноблот или биослойной интерферометрией.
4. Антитело по любому из предшествующих пунктов, где антитело уменьшает связывание собачьего и/или кошачьего полипептида IL4 и/или собачьего и/или кошачьего полипептида IL-13 с собачьим IL4R и/или кошачьим IL4R, как измерено биослойной интерферометрией.
5. Антитело по любому из предшествующих пунктов,
где антитело представляет собой моноклональное антитело,
необязательно, где антитело представляет собой канинизированное, фелинизированное или химерное антитело,
необязательно, где химерное антитело содержит одну или более мышиных каркасных областей вариабельной области тяжелой цепи или одну, или более мышиных каркасных областей вариабельной области легкой цепи.
6. Антитело по любому из предшествующих пунктов, где антитело содержит полипептид Fc дикого типа собачьего или кошачьего IgG или его вариант.
7. Антитело по любому из предшествующих пунктов, где антигенсвязывающий фрагмент представляет собой Fv, scFv, Fab, Fab’, F(ab’)2 или Fab’-SH.
8. Биспецифическое антитело, обладающее связывающей специфичностью в отношении IL4R и в отношении другой мишеневой молекулы, где антитело содержит антигенсвязывающий фрагмент антитела по любому из предшествующих пунктов и антигенсвязывающий фрагмент антитела, которое связывается с антигеном, выбранным из IL17, IL31, TNFα, CD20, CD19, CD25, IL4, IL13, IL23, IgE, CD11α, IL6R, α4-интергрина, IL12, IL1β или BlyS.
9. Выделенная нуклеиновая кислота, кодирующая антитело по любому из пп.1-7.
10. Антитело по любому из пп.1-7 для применения в способе лечения представителя вида животного-компаньона, имеющего IL4/IL13-индуцированное состояние,
необязательно, где представитель вида животного-компаньона представляет собой представителя семейства псовых или кошачьих,
необязательно, где антитело находится в количестве от 0,1 мг/кг до 100 мг/кг массы тела на дозу,
необязательно, где антитело вводят парентерально,
необязательно, где антитело вводят внутримышечным путем, внутрибрюшинным путем, интрацереброспинальным путем, подкожным путем, внутриартериальным путем, интрасиновиальным путем, интратекальным путем или путем ингаляции.
11. Антитело по п.10,
где IL4/IL13-индуцированное состояние представляет собой зуд или аллергическое состояние, или
где IL4/IL13-индуцированное состояние выбрано из атопического дерматита, аллергического дерматита, зуда, астмы, псориаза, склеродермии и экземы.
12. Антитело по п.11, где способ включает введение антитела в комбинации с ингибитором Jak, ингибитором PI3K, ингибитором ERK, и/или с одним или более антителами, выбранными из анти-IL17 антитела, анти-IL31 антитела, анти-TNFα антитела, анти-CD20 антитела, анти-CD19 антитела, анти-CD25 антитела, анти-IL4 антитела, анти-IL13 антитела, анти-IL23 антитела, анти-IgE антитела, анти-CD11α антитела, анти-IL6R антитела, антитела к α4-интергрину, анти-IL12 антитела, анти-IL1β антитела и анти-BlyS антитела.
13. Способ детектирования IL4R в образце, полученном от представителя вида животного-компаньона, включающий
приведение образца в контакт с антителом по любому из пп.1-7 или биспецифическим антитело по п.8 в условиях, допускающих связывание антитела с IL4R, и
определение того, отличается ли уровень связывания от уровня связывания эталонного или сравнительного образца,
необязательно, где представителем вида животное-компаньон является собака или кошка.
14. Антитело, способное связываться с собачьим IL4R и кошачьим IL4R, содержащее:
(i) CDR-H1 с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:1;
(ii) CDR-H2 с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:271 или SEQ ID NO:272;
(iii) CDR-H3 c аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:31;
(iv) CDR-L1 с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:4;
(v) CDR-L2 с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:37; и
(vi) CDR-L3 с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 38.
15. Антитело по пп.1-8 или 14, где антитело связывается с эпитопом, содержащим аминокислотную последовательность LX10FMGSENX11T (SEQ ID NO:85), где
X10 представляет собой D или N, и
X11 представляет собой H или R.
16. Антитело по пп.1-8 или 14, где антитело связывается с эпитопом, содержащим аминокислотную последовательность RLSYQLX10FMGSENX11TCVPEN (SEQ ID NO:86), где
X10 представляет собой D или N, и
X11 представляет собой H или R.
17. Антитело по пп.1-8 или 14, где антитело связывается с эпитопом, содержащим аминокислотную последовательность SEQ ID NO:88 или SEQ ID NO:91.
18. Антитело по пп.1-8 или 14, где антитело связывается с эпитопом, содержащим аминокислотную последовательность SEQ ID NO:89 или SEQ ID NO:92.
19. Антитело по пп.1-8 или 14, где антитело связывается с эпитопом, содержащим аминокислотную последовательность SMX12X13DDX14VEADVYQLX15LWAGX16Q (SEQ ID NO: 87), где
X12 представляет собой P или L,
X13 представляет собой I или M,
X14 представляет собой A или F,
X15 представляет собой D или H, и
X16 представляет собой Q или T.
20. Антитело по пп.1-8 или 14, где антитело связывается с эпитопом, содержащим аминокислотную последовательность SEQ ID NO:90 или SEQ ID NO:93.
21. Антитело по пп.1-8 или 14, где антитело связывается с эпитопом, содержащим аминокислотную последовательность SEQ ID NO:354.
22. Антитело по пп.1-8 или 14, где антитело связывается с эпитопом, содержащим аминокислотную последовательность SEQ ID NO:355, и/или эпитопом, содержащим аминокислотную последовательность SEQ ID NO:356.
23. Антитело по пп.1-8 или 14, где антитело связывается с эпитопом, содержащим аминокислотную последовательность SEQ ID NO:357.
24. Антитело по п.14, где антитело содержит:
(a) вариабельную область тяжелой цепи каркаса 1 (HC FR1) с последовательностью SEQ ID NO:10 или SEQ ID NO:32;
(b) HC-FR2 с последовательностью SEQ ID NO:11 или SEQ ID NO:33;
(c) HC-FR3 с последовательностью SEQ ID NO:12, SEQ ID NO:270, SEQ ID NO:34 или SEQ ID NO:273;
(d) HC-FR4 с последовательностью SEQ ID NO:13 или SEQ ID NO:35;
(e) вариабельную область легкой цепи каркаса 1 (LC-FR1) с последовательностью SEQ ID NO:17 или SEQ ID NO:39;
(f) LC FR2 с последовательностью SEQ ID NO:18 или SEQ ID NO:40;
(g) LC FR3 с последовательностью SEQ ID NO:19 или SEQ ID NO:41; и
(h) LC-FR4 с последовательностью SEQ ID NO:20 или SEQ ID NO:42.
| WO 2016156588 A1, 06.10.2016 | |||
| WO 2014197470 A1, 11.12.2014 | |||
| WO 2014168933 A1, 16.10.2014 | |||
| BEATRICE LAUBER et al., Distinct reactivities of interleukin-4-specific antibodies with recombinant and native canine interleukin-4 in various assays, Vet Immunol Immunopathol, 2010, 137(3-4):310-316 | |||
| ЭЛЕМЕНТ, СВЯЗЫВАЮЩИЙСЯ С α-РЕЦЕПТОРОМ ИНТЕРЛЕЙКИНА-4 (IL-4Rα)-173 | 2008 |
|
RU2490278C2 |
