Индикатор для определения аскорбиновой кислоты Советский патент 1983 года по МПК G01N21/78 

сл

00

ее

4;

Изобретение касается стойкого быстрого индикатора, служащего для полуколичественного определения аскорбиновой кислоты в напитках и жидкостях организма.Известен индикатор для определения аскорбиновой кислоты, состоящий из смеси соли фосформолибденовой кислоты нейтрального нитрата и малоновой кислоты 1. Недостатком известного индикатора является невысокая стабильность при хранении, связанная с тем, что малоновая кислота при,хранении сублимируется, что уменьшает точность анализа аскорбиновой кисло.ты.

Цель изобретения - повышение ста бильности при хранении и увеличение точности определения.

Поставленная цель достигается тем что индикатор для определения аскор:биновой кислоты в качестве соли фосформолибденовой кислоты содержит соль щелочного металла 2,18-фосформолибденовой кислоты, хлорат щелочного металла, лимонную или яблочную, или винную кислоту, или смесь указанных кислот с их солями щелочных металлов при следующем соотношении компонентов, водного или водно-ме.танольного раствора:

Соль щелочного -метгипла 2,18-фосформолибденовой кислоты3-9

Хлорат щелочного

металла1 б

Лимонная или яблочная, или винная кислота, или смесь указанных кислот с их солями Щелочного

металла / 10-90 Полоски индикаторной бумаги изготавливают следующим образом.

Соль щелочного металла 2,18-фосформолибденовой кислоты ,в концентрации 3,0-9,0 г/л растворяют в воде вместе с 1,0-6,0 г/л хлората щелочного металла и 10-90 г/л алифатической гидроксикарбоновой кислоты с добавлением в раствор любого органического растворителя или спирта низшего порядка, который пе емешйвают с водой, или без этой добавки. При помощи едкой щелочи, например гидроокиси лития или натрия и т.д., устанавливают рН раствора от 2,5 до 5,0.

Применяют также смесь гидроксикарбоновой кислоты с соответствукяцей солью щелочного металла, причем соотношение компонентов смеси выбираю таким образом, чтобы значение водородного показателя рН получилось, равным 2,5-5,0. Применяют также смеси органических кислот. Такими пропиточными растворами обычным образом пропитывают фильтровальную . После сушки приготовленную реактивную бумагу режут и далее подвергают дальнейшей обработке для получения отдельных или комбинированных индикаторных полосок, например, путем наклеивания на пластмассовый или пленочный держатель или смачивания. При помощи индикаторных полосок,.изготовленных таким образом, опреде- ляют содержание аскорбиновой кислоты в жидкостях либо вручную, сравнивая окраску пластинок, либо.способом яркостной фотометрии.

Пример. 7г натриевой соли 2,18-фосформолибденовой кислоты,,4 г хлората натрия, 40 г лимонной кислоты и 13,5 трилитийцитрата растворяют в смеси из 600 млметанола и 380 мл воды. Этим раствором, рН которого равно 3,7, импрегнируют фильтровальную бумагу и далее ее Сушат 1 ч при . Из реактивной бумаги, приготовленной таким образом, нарезгиот куски размером 6x6 мм, которые затем запечатывают между пластмассовым держателем и тонкой нейлоновой сеткой. Эти индикаторные полоски очень хорош окрашиваются в цвета от светло-зеленвато-голубого до темно-сине-фиолетового при наличии в моче аскорбиновой кислоты в интервале очень важных концентраций от О до 40 мг/л.

индикатор, изготовленный таким способом, пригоден также для полуколичественного определения аскорбиновой Кислоты в фруктовых соках или в других напитках, причем перед окончательным определением в данном случае необходимо разбавлять водой, Объективную оценку реакционной окраски устанавливают при помощи.фотометра.

В табл. 1 представлены значения яркости, измеренные при помощи спектрального фотометра ДМК 21 с насадко :ZR21 фирмы Zeiss, и характер окраски определяемой глазами.

П р и м е р 2. 6,5 г натриевой соли 2,18-фосфОЕ олибденовой кислоты 4 г хлората натрия и 45 г яблочной кислоты или винной кислоты растворяют в воде и с помощью 10 н едкой щелочи устанавливают рН раствора в интервале 2,5-5,0.Дальнейшую обработку для получения индикаторных полосок производят также, как в примере 1. Функции и свойства индикаторны полосок соответствуют функциям и Ьвойствам описанным в примере Ч.

П р и м е р 3. Реактивную бумагу, соответствующую .примеру 1 или 2, объдиняют в многослойные индикаторные полоски вместе с реактивными бумагами, предназначенными для определения нитрата, рН, глюкозы и кетоновых тел, которые изготавливают по известному способу. Эти многослойные полоски несколько недель хранят в закрытых трубках. Для проведения сравнительного опы та изготавливают реактивные бумажные полоски по примеру 1, состав ком понентов которых изменен так, что вместо лимонной кислоты и литийцитра та вводят равные количества янтарной кислоты или малоновой кислоты и гидроокись лития.для получения рН равно го 3,6. Эти реактивные полоски бумаг обрабатывают также, как описано выше для изготовления многослойных полосо и равным, образом хранят несколько не дель. Если опыт проводят с применением многослойных полосок, состав которых соответствует изобретению, то получают истинное значение величины рН, например для мочи. Если опыт проводя с многослойными полосками, которые содержат индикатор аскорбиновой кислоты, изготовленный с янтарной кис лотой, то значение рН получают ошибочным. Такое же отрицательное влияние на рН-ийдикатор можно наблюдать, есл бумагу пропитывают солью фосфорномолибденовой кислоты и малоновой кислотой, и хранят несколько недель При|лер4. Зг калиевой соли г,18-фосфО1 1олибденовой кислоты, 1 г хлората калия и 10 г винной кислоты растворяют в воде и рН раствора регулируют Юн. натронным щелоком на 2,5-5,0. Дальнейшую переработку для теста производят как в приметЛе 1. Действие и свойства опытных полосок изучают путем помещения в аскробиновую кислоту с концентрацией 0-100 мг/100 мл.Избыточную жидкость удаляют с края сосуда и окрашивание определяют через 1-2 мин реакционного времени. Обработанные таким образом опытные полоски вводят для

Концентрация аск орби нов ой кислоты, мг/ЮО МП

Яркость при , 640 нм, %

Цвет окраски количественного определения в ремиссионный фотометр и ремиссию определяют при 640 нм-максимальной.ИНТЕНСИВНОСТИ образующегося синего красителя по сравнению с бельм стандартом (см. табл. 2), Субъективные определения в силу хорошей градации полуколичественно определяют на глаз. Концентрацию аскорбиновой кислоты неизвестных растворов измеряют аналогичным образом и определяют калибровочной кривой или субъективным сопоставлением. ПримерБ. 9г литиевой соли 2,18-фосформолибденовой кислоты, 6 г хлората натрия, 45 г лимонной, кислоты и 45 г цитрата натрия растворяют в воде. рН раствора- устанавли.вают 10 н. натронным щелоком на2,5-. 5,0. Дальнейшеую переработку осуществляют аналогично описанной в примере 1. Исследуют функцию и свойства опытной полоски. Для этого ее погружают в аскорбиновую кислоту концентрацией 0-100 мг/мл. Избыточную жидкость сбрасывают с края сосуда и окраску определяют спустя 1-2 мин реакционного времени. Количественное определение п оизводят погружением обработанной таким образом опытной полоски, используя ремиссионный фотометр. Ремиссию определяют при Д. 640 нм-максимально интенсивном синем цвете в сравнении с белым эталоном (см. табл.3). Субъективную оценку обеспечивает полуколичественно, .благодаря хорошей градации, визуальное определение . Концентрация аскорбиновой кислоты неизвестных растворов измеряется аналогичным образом путем сравнения с калибровочной кривой или путем субъективной оценки при сравнении со сравнительными цветами. Таблица 1

О

5

10

20

40

100

Бледно-желтая

Светло-зеленая

Зелено -голу бая

Голубая

Сине-фиолетовая

Темно-сине-фиолетовая