Средство для окраски катионного белка на гистологическом препарате Советский патент 1983 года по МПК G01N33/48 A61B10/00 

Изобретение относится к медицине а именно к цитохимическим исследова ниям, и предназначено для лаборатор ного определения уровня содержания катионных белков в крови, как показателя неспецифической резистентнос ти организма. Известно средство для окраски катионного белка fl , содержащее 0,1% раствор примулинового желтого в 0,05 М боратномбуфере при рН 8,2. Однако известное средство не поз воляет идентифицировать катионные белки в клетке при световой микроскопии, так кэк краситель относится к флюорохромам и при люминисценции вызывает свечение всех белков в Клетке. Известно также средство Г2 для окраски катионных белков на гистологическом препарате путем их обработки в красителе, содержащем 0,2 пигмент зеленый прочный, 50 метанол на 0,05 М трис нее буфере при рНг8,18,2. Недостатком является то, что сред ство также не обладает высокой специ фичностью к катионным белкам и неспе цифически окрашивает также эритроциты крови. Цель изобретения - повышение специфичности окраски. Поставленная цель достигается тем что средство дополнительно содержит эозин и формальдегид, а в качестве спирта - этиловый спирт и в качестве буфера 0,12-0,15 М боратный буфер при следующем соотношении компонентов, вес.%: Пигмент зеленый прочный0,1-0,2 Этиловый спирт 0,0-70,0 Эозин0,1-0,15 Формальдегид 1,0-2,0 0,12-0,15 М Боратный буфер Остальное Дополнительное введение в краситель эозина позволяет провести более четкую окраску гранул в клетках, содержащих катионные белки за счет прокрашивания их в темного оттенка, цвета, что усиливает их контрастност от окружающих структур. В то же время введение в краситель формальдегида позволяет исключить неспецифическую окраску эритроцитов за счет одновременной фиксации препарата в момент проведения окрашивания. Св.ойствэ компонентов в красителе наиболе максимально выражены в растворе 0,120,15 М боратного буфера при рН 8,1-8,2. Средство для окраски катионных белков приготавливают следующим образом. К боратному буферу добавляют этиловый спирт и формальдегид затем в полученной смеси растворяют пигмент зеленый прочный и эозин. Смесь тщательно перемешивают и через 2 ч определяют рН красителя, которое тестируется до нужного значения рН соляной кислотой или гидратом окиси натрия. П р и ме р 1 .Состав красителя, г: Пигмент зеленый прочный0,1 Этанол+1,5 Эозин0,1 Форма л ь де г ид ,О 0,12 М боратный буфер 5.3 В мл дистиллированной воды растворяют 750 мл боратной кислоты, затем добавляют 6,25 мл IN NqOH. Приливают 5 мл 1 NHCe, добавляют .5 мл 96° этилового спирта и t мл kQ% формальдегида. В полученной смеси сначала растворяют 100 мг пигмента зеленого прочного затем 100 мг эозина. Смесь тщательно перемешивают. П р и м е р 2. Состав красителя, г. Пигмент зеленый прочныйО,2 Этанол70,0 Эозин0,15 Формальдегид 2,0 0,15 М боратный буфер 2,67. В 1 мл дистиллированной воды растворяют 750 мл борной кислоты, затем добавляют 6,25 мл IN NaOH. Приливают 5 мл IN НСЕ, 73 мл 9б этилового спирта и 2 мл формальдегида. В полученной смеси растворяют сначала 20 мг пигмента зеленого прочного а затем 100 мг эозина. Смесь тщательно перемешивают. В препаратах, окрашенных предлага ым красителем, . гранулы нейтрофилов и эозинофилов, содержащих каЧионные елки, окрашиваются в темно-зеленый

310275694

|Цвет, остальные - в розовый. Эритро- розовая, ядра всех клеток крови не циты розовые| тромбоциты красного . окрашены, но четко дифференцируются цвета. Цитоплазма лимфоцитов бледно- на фоне цитоплазмы.

СРЕДСТВО ДЛЯ ОКРАСКИ КАТИОНН01Ч) БЕЛКА НА ГИСТОЛОГИЧЕСКОМ ПРЕПАРАТЕ, содержащее спирт, пигмент зеленый прочный и буфер, отличаю|Щ е е с я тем, что, с целью повышения специфичности окраски оно дополнительно содержит эозин и формальдегид, а в качестве спирта - этиловый спирт и в качестве буфера - 0,12 0,15 М боратный буфер при следующем соотношении компонентов, вес.%: Пигмент зеленый 0,1-0,2 прочный ,0-70,0 Этиловый спирт Эозин 0.,1-0,15 Формальдегид 1 ,0-2,0 0,12-0,15 М Боратный буфер Остальное