оо
о
оо ю
Изобретение относится к получению сорбентов для очистки биологических жидкостей от гемопигментов и может Gtiiib использовано в медицинской и микробиологической промышленности для приготовления биопрепаратов.
Известен способ получения сорбета, включающий обработку декстранового геля бромцианом с последующей обработкой полученного продукта 0,1-гистидином Cl3.
. сорбент, получае1Ф1й согласно этому способу, имеет низкую механическую прочность, Кроме того сорбент подвержен микробиологической атаке, мало устойчив к воздействию органических растворителей, что ограничивает его применение ка в лабораторных, так и в промышленных условиях.
Наиболее близким к изобретению по технической сущности и достигаемому результату является способ получения сорбента, включаю1ций обраб ку кремнезема г иотаровым альдегидсм и ароматическим диамином при рН 1-2 с последукяцим диаэотировани и азосоч:етанием с D, L-гистидином Г23.
Недостатками известного способа являются сложность, многостадийность, а 7акже малая сорбционрая емкость noJWHaeMoro сорбента.
цель изобретения - упреядение спсоба и повышение сорбционной емкости-. . .
{{оставленная цель достигается предлагаемым способом, включающим о&работку кремнезема 0,1-гистидином.в присутствии формальдегида при рН 2-5.
В соотеетствии с предлагаемым способом сорбент получают в одну стадию обЕ аботкой кремнеэ««а D, LгистидиноМ в присутствии формальдегида. При этом идет реакция поликонденсации между формальдегидом и О,L-гистидином 9 на пове рхности кремнезема возникает полимерное пок{Х9 Тйе, состоящее из остатков фО 4альдегида и аминокислоты &,1.-гистидииа, являющегося селектиным лигандом tio оти1Еийению к гемопиг1маятам. Процесс поликондеисацйи лимитирован кислой средой, где формальдегид присутствует в виде протонированной форъо.
Получаемвлй сорбент имеет на единицу поверхности большее число молекул ОЛ-гистидина по сравнению с сорбентом, получаемым по известному способу, что обеспечивает повышение сорбционной емкости по гемопигмен-там и снижение неспецифической сорбции очмцаемых белков.
Пример 1. В колбу на 300 мл помещают 10 г высокодисперсного кремнезема-аэросила и приливают 150 мл ацетатного буфера с рН 4,0. Смесь при постоянном перемешивании выдерживают при комнатной температуре в течение 15 мин. Затем к ней добавляют О,5 мл 40%-ного фольмешьдегида и 30 мл .ацетатного буфера, содержгидего
Q 0,2 г 0,1-гистидина. Затем полученную смесь перемешивают 1 ч, надосадочную жидкость сливают, а модифицированный носитель дважды по 300 мл промывают дистиллированной водой.
5 Количество связанного 0,1-гистидина с аэросилом 17 мг на 1 г носителя.
Пример 2. В колбу на 300 мл помещают 10 г пористого кремнезема-аэросилогеля и приливают 150 мл ацетатного буфера с рН 3,0. Смесь выдерживают, перемешивая в течение 15 мин. Далее к ней добавляют 0,5 мл 40%-ного формальдегида и 30 мл ацетатного буфера, содержащего 0,5 г D,L-гистидина. Далее получение носителя осуществляют так же, как в примере 1. Количество связанного В,1-гистидйна с аэросилогелем 20 мг на
0 1 г носителя.
Пример 3. В колбу на 300 мл помещают 10 г пористого кремнезема-силикагеля и приливают
5 150 мл ацетатного буфера с рН 2,0. Смесь выдерживают, перемешивая в течение 15 мин. Далее к ней добавляют 0,5 мл 40%-ного формальдегида и 30 мл ацетатного буфера, содержащего 0,50 г ОД-гистидина.
Далее получение носителя осуществляют так же, как в примере 1. Количество связайного 0,1-гистидина с силикагелем 16 мг на 1 г носителя.
5 П р и м е р 4. В колбу на
300 мл помещают 10 г высокодисперсного кремнезема-аэросила и приливают 150 мл ацетатного буфера с рН 5,0. Смесь при постоянном пере0 мешиваник выдерживают при комйатной температуре в течение 15 мин. Затем к ней добавляют 1,0 мл 40%-ного формальдегида и 30 мл ацетатного буфера, содержаще го
5 0,1 г О,L-гистидина. Далее полученную смесь перемешивают 1 ч до образования однородной массы, которую выливают в кюветы для застудневания в упругий гель и высушивания.
В таблице представлены сравнительные дднные по применению сорбентов для очистки плацентарной от гемопигментов.
30
Известный Предла га емый
70
30
название | год | авторы | номер документа |
---|---|---|---|
Сорбент для очистки сыворотки крови от гемопигментов | 1980 |
|
SU936985A1 |
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СОРБЕНТА | 2004 |
|
RU2257951C1 |
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИММУНОСОРБЕНТА | 2017 |
|
RU2665165C1 |
Способ получения иммобилизован-НОй -АМилАзы | 1978 |
|
SU810719A1 |
Способ получения модифицированного макропористого кремнезема | 1985 |
|
SU1261705A1 |
Способ иммобилизации ферментов | 1975 |
|
SU536192A1 |
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СОРБЕНТА | 2011 |
|
RU2452562C1 |
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИММОБИЛИЗОВАННОЙ ПЕРОКСИДАЗЫ | 1990 |
|
RU2005784C1 |
Способ очистки протеолитических ферментов | 1978 |
|
SU942427A1 |
СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЖЕЛЕЗА (II) | 2008 |
|
RU2374639C1 |
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СОРБЕНТА, вктоочанмций обработку кремнезема В,1-гистидином, о т л и ю ц и йр я тем, что, с .целью упрощения рпособа и повышения сорбционной ёмкости, обработку D,L-гистидином провидят в присутствии формальдегида при рН 2-5. СЛ С
Из таблищл видно, что предлагаемый способ обеспечивает получение сорбента, имеющего более высокую сорбционную емкость по сравнению с сорбентом, получаемым согласно из, вестному способу. Кроме того, сор- бент f получаемой согласно предлагаемому способу, обладает меньшей не специфической сорб11ией,чтопозволя25 ет увеличить выходочищаемо го белка.
Печь для непрерывного получения сернистого натрия | 1921 |
|
SU1A1 |
Васильев Л.Е | |||
и Шишканова Л.С | |||
Лигандообменная хроматография гемина и его производных | |||
Органиче |
Авторы
Даты
1983-07-23—Публикация
1982-02-10—Подача