Способ получения модифицированного макропористого кремнезема Советский патент 1986 года по МПК B01J20/10 B01D15/08 

Изобретение относится к сорбентам для выделения и очистки биологически активных соединений и может быть использовано в синтезе аффинных сорбентов для получения гамма-глобулина. Цель изобретения - повышение емкости модифицированного кремнезема. П р и м е р 1. 10 г макропористого кремнезема ( 12 нм, 5цо 120 ), очищенного от ио.нов железа, сушат 2 ч в токе сухого инертного газа, а затем обрабатывают 30 мл 10%-ного раствора /3 -фенилэтилтрихлорсилана в бензоле при 80 С в течение 2 ч. Перед проведением реакции р реакционную смесь добавляют 0,23 мл триэтиламина. Непрореагировавшие реагенты удаляют с образца сухим хлоро формом. После, этого образец гидролизуют горячей водой, а затем сушат под вакуумом 6 ч при t 130 С. Хлорметилирование проводят в среде метил хлорметилового эфира в присутствии четыреххлористого олова как катализатора при 60 С в течение 2 ч. После окончания реакции образец помещают в аппарат Сокслета с диоксаком, в который подают сухой хлористый водород. После удаления четыреххлорис $1-онч-cb$i-( (CH,)

$i-OHCl

(О того олова образец отмывают от хлористого водорода диоксаном и сушат под вакуумом 5 ч при . Продукт содержит 0,37 ммоль/г хлорметильных групп. Анализ на хлор проводят модифицированным методом Фольгарда с использованием предварительной обработки пиридином (при в течение 2 ч). Затем образец обрабатывают 1%-ньм раствором имидазола в этилацетате 2 ч при t 77°С, промывают этилацетатом, 10%-ным раствором триэтиламина в хлороформе, хлороформом. Полученный образец содержит ммоль/г остатков имидазольных групп. Содержание имидазольных групп на поверхности определяют по адсорбции красителя кислотный ярко-оранжевый Ж SO.H Процесс получения модифицированного кремнезема можно представить следующей схемой;

Изобретение относится к макропористьм кремне мным сорбентам для выделения и очистки биологически активньпс соединений и позволяет повысить емкость модифицированного кремнеземного сорбента для получения jf-глобулина. 10 г макропористого кремнезема сушат 2 ч в токе сухого инертного газа, а затем обрабатывают 30 мл 10%-ного растворар-фенилэтилтрихлорсилана в бензоле при 80°С в течение 2 ч в присутствии 0,23 мл триэтиламина. Продукт промывают сухим хлороформом, гидролизуют горячей водой и сушат под вакуумом 6 ч при 130 С. Полученный образец заливают метилхлорметиловым эфиром и нагревают при 60 С в течение 2 ч в присутствии каталитических количеств четыреххлористого олова. После экстракции диоксаном в присутствии сухого хлористого водорода образец сушат под ё вакуумом 5 ч при 130 С. Затем просл дукт обрабатывают 1%-ным раствором имидазола в этипацетате 2 ч при 77с, промывают этилацетатом, 10%-ным раствором тризтиламина в хлороформе и хлороформом. Целевой продукт содержит 0,14 ммоль/г остатков имидазольных групп.

,о:: Cl

2$i-0-.. ,„ , /7Л CH oCHgCl sSi-O-.. „.

.Si-( ,&i- СН,), ОН -CHjOH 2 Ш,С1 „,C№lf f Si-lCH,),сн.сн 2

По емкости полученный продукт в два раза превосходит известный.

П р и м е р 2. Полученный модифицированный кремнезем используют в качестве сорбента для аффинной хроматографии при очистке-плацентарного гамма-глобулина человека от гемопигментов.

.СН2С1.

(3)

В хроматографическую колонку 1,5x30 см помещают 2 г сорбента, полученного предлагаемым способом, уравновешивают фосфатным буфером (рН 7,0) и наносят 1 мл 10%-ного плацентарного гамма-глобулина, содержащего 6-10 мг гемопигментов. фракции по 5 мл элюируют из кслонки (.-{ (2) он Isio SKCH.ifXgbCHrK 3 30 мл фосфатного буфера рН 7,0. Все операции проводят при 4°С. Выход очищенного от гемопигментов гаммаглобулина составляет 80%. Гаммаглобулин полностью очищен от гемопигментов. Гомогенность полученного препарата подтверждают электрофорезом в полиакриламидном геле. Регенерацию носителя проводят пр использовании 0,01 н. NaOH. Регенерированный носитель отмывают водой от NaOH до рН 7,0, уравновешивают фосфатным буфером и используют для очистки новой порции гамма-глобулин При этом выход гамма-глобулина составляет 80%, он полностью очищен от гемопигментов. После пятикратног использования модифицированного кре 054 незема в пропущенном через колонку гамма-глобулине появляются йримеси гемопигмептов (1-5%). Формула изобретения Способ получения модифицированного макропористого кремнезема, включающий последовательную обработку кремнезема кремннйорганическим модификатором, галогенсодержащим соединением и азотсодержащим лигандом, отличающийся тем, что, с целью повышения емкости продукта, в качестве модификатора используют р-фенилэтилтрихлорсилан, в качестве 1алогенсодержащего соединения - метилхлорметиловый эфир и в качестве лиганда - имидазол.