Способ количественного определения налидиксовой кислоты Советский патент 1983 года по МПК G01N21/64 

Изобретение относится к аналитической химии- а именно к способам количественного люминесцентного определения налидиксовой кислоты 1-этил-7-метил-4-он-1,8-нафтиридин-3-карбоновой кислоты. В СССР препарат импортируется из Венгрии и Югославии под названиями Невиграмон и Неграм соответственно, и широко используется как антибактериальное средство,, в частности, при инфекциях мочевых путей (циститы, пиэлиты), а также для про филактики инфекций при операцих на почках 1. Известно несколько способов кали чественного определения налидиксовой кислоты в лекарственных формах и биологических жидкостях: хроматография в тонком слое на пластинах с силикагелем и люминесцентная инди кация Г 2}, жидкостная хроматография под высоким давлением на колонках с обращенными фазами Гз. Известен также стектрофотометрический способ определения налидиксовой кислоты в чистых препаратах 4 Недостатки указанных способов сложное аппаратурное оформление, длительность выполнения и невысокая чувствительность определения. Наиболее близким к предлагаемому является способ количественного определения налидиксовой кислоты в жи-дкостях, тканях организма и лекар ственных форма 4, включающий приготовление анализируемой пробы, взаимодействие ее с химическим реагентом и измерение спектра Cs . Так, в частности, в ряде биологи ческих объектов проводят осаждение белков вольфраматом натрия в присут ствии H-SO, экстракцию налидиксово кислоты метанолом и спектрофотометрическое определение ее по собствен ной полосе поглощения с Л„д. 255 либо 327 им. Недостатки указанного способа невысокая чувствительность определе ния, необходимость работы в ультрафиолетовой области спектра, где возможно Наложение спектров многих органических веществ. Цель изобретения - снижение предела обнаружения налидиксовой кислоты. Поставленная цель достигается те что согласно способу количественног определения налидиксовой кислоты, включаклдему приготовление анализиру емой пробы, взаимодействие ее с хим ческим реагентом и измерение интенсивности спектра, анализируемую про бу подвергают взаимодействию со ста дартным раствором хлорида тербия пр рН среды 6,5 - 7,0 с последующим измерением интенсивности полос спек ра сенсибилизированной люминесценции тербия, по которой определяют концентрацию налидиксовой кислоты. Сенсибилизация люминесценции тербия в его соединении с налидиксовой кислотой,- обусловленная поглощением света органической частью молекулы и передачей энергии возбужденного состояния ионам тербия, приводит к понижению предела обнаружения налидиксовой кислоты на порядок величины по сравнению с прототипом при одновременном сохранении экспрессности и простоты определения. Способ осуществляют следующим образом. К анализируемому раствору добавляют стандартный раствор хлорида тербия, создают в растворе нейтральную среду (рН 6,5-7,0) с помощью уротропина, регистрируют интенсивность люминесценции при 546 нм. Содержание налидиксовой кислоты в пробе определяют по калибровочному графику либо по Методу добавок. При определении налидиксовой кислоты в биологических жидкостях и тка- нях организма выделение налидиксовой кислоты осуществляется методом, описанным в 5 . Пример. Количественное определение налидиксовой кислоты в лекарственных формах ( Невиграмон ). Точную навеску препарата Невиграмон растворяют в мерной колбе в 0,1 H.NaOH, нагревая на водяной бане. Для получения стандартного раствора хлорида тербия (1 мг/мл) точную навеску оксида тербия растворяют в соляной кислоте, выпаривают до получения остатка влажных солей и разбавляют дистиллированной водой. В пробирку помещают 0,1 мл исследуемого раствора с содержанием налидиксовой кислоты 0,1-0,01 , приливают 0,2 мл стандартного раст йора. хлорида тербия, содержащего 1 мг/мл TbCIj, 0,6 мл 40%-ного раствора уротропина, и доводят объем до 10 мл водой. Спектры люминесценции регистрируют с помощью спектрографа ИСП-51 или другого спектрофлуориметра при Л 546 нм. Люминесценцию возбуждают излучением ртутной лампы СВД-120А со светофильтром УФС-2. PacTBOjxj комплексов устойчивы во времени и способны сохранять люминесцентные свойства в течение нескольких часов. Содержание налидиксовой кислоты определяют по калибровочному графику. Определение возможно проводить и по методу добавок. По величине пиков люминесценции растворов пробы и пробы .с добавками рассчитывают содержание налидиксовой кислоты в пробе.

При малых содержаниях налидикбовой кислоты необходимо регистрировать. интенсивность люминесценции холостого опыта и вычитать ее из интенсивносfH люминесценции пробы. - Предел обнаружения налидиксовой кислоты равен 0,01 мкг/мл.

Точность и достоверность способа 6Ш1И проверены в лабораторных услоОпределение налидиксовой кислоты в препарате

виях путем статической обработки результатов анализа препарата Неяиграмон (см. таблицу).

Предлагаемый способ позволяет по сравнению с пцртотипом понизить предел обнаружения налидиксовой кйЬлоты на порядок величины, состав ляя 0,01 мкг/мп. Невиграмон(, t 2,8)

СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ НАЛИДИКСОВОЙ КИСЛОТЫ, включающий приготовление анализируемой пробы, взаимодействие ее с химическим реагентом и измерение спектра, отличающийся тем, что, с целью снижения предела обнаружения налидиксовой кислоты, анализируемую пробу подвергают взаимодействию со стандартным раствором хлорида тербия при рН среды 6,5-7,0(С последующим измерением интенсивности полос спект-. ра сенсибилизированной люминесценции тербия, по которой определяют .концентрацию нгшидиксовой кислоты. л со оо 00 li

0,0410,00120,04+0,00153,7

0,400,0020,10±0,00252,5

0,490,0120,50+0,0153,0

0,880,0160,90±0,0202,2