Способ определения фолиевой кислоты Советский патент 1983 года по МПК G01N21/78 

4

00

со

00 Изобретение относится к анализу органических химических соединений, а именно.к способам количественного определения.фолиевой кислоты, используемым для контроля качества продукции выпускаемой фармацевтическими производствами и изготавливаемой в аптеках. Фолиевая кислота представляет собой N- 4-{2-амино-4-окси-6-птеридил) -метил-амино -бензоил-L(+)-глютаминовую кислоту и является одним из витаминов группы В(. Известен способ определения фолие вой кислоты путем окисления анализируемого вещества перманганатомкатля с последующим флуориметрическим определением в УФ-свете ij . Недостатком этого способа является его сложность и невысокая точност определения. Наиболее близким по технической .сущности и достигаемым результатам является способ определения фолиевой кислоты путем последовательной обработки анализируемого вещества перманганатом калия, нитритом натрия, соляной кислотой, сульфаминовой кислотой, -(l-нафтил)-этилендиа мином с последующим фотометрированием полученного раствора 2 . Недостатком способа является его сложность.. цель, изобретения - упрощение опре деления. Поставленная цель достигается тем что согласно способу определения фолиевой кислоты, включающему фотометрирование, анализируемое рещество сначала обрабатывают раствором нитра та серебра в аммиачной среде с пр cлeдующим фотометрированием полу-, ченного раствора., . . Последовательное осуществление описанных, стадий составляет отличительную особенность способа. Пример. Количественное определение фолиевой кислоты в растворе для инъекций, содержащем 0,5 г фолиевой кислоты и 0,35%-ного раство ра карбоната натрия, до 100 мл.. 1 мл исследуемого раствора помещают в мерную колбу емкостью 50 мл;, приливают 5 мл 1%-ного раствора аммиака, 20 мл дистиллированной воды,. 10 мл 0,1 н раствора нитрата серебра, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают. Определяют оптическую плотность полученного рас твора на фотоэлектроколориметрв при светофильтре 3 (400 им) или йа спектрофотометре при длине волны ..: 420 нм в кювете с толщиной слоя 1 см используя в качестве раствора сравнения дистиллированную воду. Параллельно в тех же условиях проводят определение с 10 мл стандарт- кого раствора фолиевой кислоты, содержащего 0,005 г фолиевой кислоты в 1 .мл раствора. Содержание фолиевой кислоты в 1 мл исследуемого раствора в граммах Х) вьтчисляют по формуле X - D 0.00 50 0„ . 1 . где D - оптическая плотность исследуемого раствора DO - оптическая плотность стан. дартного раствораJ 0,0001- содержание фолиевой кислоты . в 1 мл разбавленного станг дартного раствора, г. Приготовление стандартного раствора фолиевой кисл.оты О,0500 г фолиевой кислоты растворяют в мерной колбе емкостью 100 мл в смеси 50 мл воды и 2 мл концентрированного раствора аммиака .и доводят объем раствора водой до метки, перемешивают. Прибавляют несколько капель раствора толуола. Этот раствор при условии хранения в прохладном, темном месте годен в течение месяца. Точность анализа фолиевой кислоты проверялась .на искусственных смрсях с точным содержанием фолиевой кислотыи на 3 серияхампулированных растворов заводского приготовления (результаты анализа представлены в табл. -1 и З) , В табл. 1 приведены результаты сравнительного анализа -искусственiHo.fПриготовленных растворов фолиевой кислоты для инъекций ло предлф гаемому и. известному 2J способам. В табл. 3 -приведены результаты количественного определения фолиевой кислоты в растворах для инъекций заводского производства. . П р и м е р 2. Смесь 1. Кис.лота Фолиевая О г 001 Сахар 0,2 (внутриаптечная заготовка) либо Смесь П. Кислота Фолиевая 0,005. Глюкоза 0,3 (внутриаптечная заготовка). Как показали исследования, наполнители сахар или глюкоза, входящие в состав порошковых лекарственных форм, в условиях эксперимента не ме-тают количественному определению фолиевой кислоты по данной методике: около 0,5. г смеси Г или 0,15 г смеси И (точные навески) помещают в мерную колбу емкостью 50 мл, приливают. 5 мл 1%-ного раствора аммиака и взбалтывают до растворения, затем приливают 20 мл дистиллированной воды, 10 мл 0,1 н. раствора нитрата серебра и доводят объем раствора водой до метки, перемешивают. Параллельно определяют оптическую плотность стандартного раствора. Для этого 5 мл стандартного раствора помещают в мерную колбу емкостью 50 приливают 2,5 мл 1%-ного раствора аммиака, 20 мл дистиллированной во 10 мл 0,1-н. раствора нитрата сере ра и доводят объем раствора водой до метки. Определяют оптическую плотность растворов аналогично примеру 1. Содержание фолиевой кислоты в анализируемых порошковых рмесях в rpciMMax (х) вычисляют по формуле .. D-0,00005-50 Ь л - Го.а ; . где 0,00005 - содержание фолиевой кислоты в 1 мл разбав ленного стандартного раствора, г/ а - навеска порошковой смеси, г, Ь - масса йорошка по про писи рецепта. Значения Д и Д та же, что и в примере 1. В табл. 2 приведены результаты количественного определения фолиевой кислоты в искусственных порошковых лекарственных смесях. Таким образом, предлагаемый спо- соб позволяет упростить способ определения фолиевой кислоты.

Таблица 2

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФОЛИЕВбЙ КИСЛОТЫт включающий фотометрирование, отличают, ийся ,твм, что, с целью упрощения определения анализируемое веществЬ сначала обрабатывают раствором нитрата серебра в аммиачной среде с последующим фотометрированием полученного раствора. (Л с

- ДСислота фолиевая сО,001

1,234 Саха 0,2

Кислота фолиевая

0,001

1,549

Глюкоза 0,2

Кислота фолиевая

0,OOS

2,S37

Глюкоза 0,3 Кислота фолиевая 0,02 3,083 Кальция глюконата 0,2 Кислота фолиевая 0,005 Кислота никотиновая 0,01 Тналтка бромид 0,02 2,4$б Глюкоза 0,2 Прим е ч. а н и .., . .

+2,99

102,99

1,271

+1,68

Ij575 101,68

-4,38

2,426 95,.62 е: Приведенные в табл. 2 результаты являются средншлй из рех определений/ .;. - .,.,-/., . .. . . . , , Та-б л и ц-а 3 -0,19 3,07799,81 +1,86 2,512101,86