Способ количественного определенияНиКОТиНАМидА Советский патент 1981 года по МПК G01N21/64 

(54) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ НИКОТИНАМИДЛ

1

Изобретение относится к аналитической химии, а именно к способам количественного определения никотинамида .

Известен способ количественного определения никотинамида, путем титрования анализируемой пробы, растворенной в уксусной безводной кислоте раствором хлорной кислоты в присутствии индикатора 13.

Недостаток способа - низкая избирательность определения.

Наиболее близким к описываемому изобретению по технической сущности и достигаемому результату является способ количественного определения 1€икотинамида путем обработки анализируемой пробы в щелочной среде смесью раствора синильной кислоты и хлорамина Т с последующим измерением флуоресценции полученного при этом раствора 2.

Недостаток способа состоит в низкой чувствительности (50мкг/мл),

Цель изобретения - повышение чувствительности определения.

Поставленная цель достигается тем, что в способе количественного определения никотинамида обработку анализируемой пробы в щелочной среде проводят хлоральгид)атрм при 99 с последующим измерением флурресценции полученного раствора.

При излучении оптимальных условий реакции найдена линейная зависимость интенсивности флуоресценции от концентрации препарата, которая лежит в интервале 0,7-50 мкг/мл и приведена в табл. 1. ,

Т а б л и ц а 1

Чувствительность реакции, описываемой в изобретении составляет 0,7 мкг/мл, что позволяет проводить определение препаратав лекарственных смесях.

Определение проводится на отечественном электронном флуориметОптимальными концентрациями реактивов являются-5%-ный раствор едкого натра и 5%-ный раствор хло альгидрата по 5 мл на обработку одной анализируемой пробы объемом 1 мл. Определено оптимальное время кипя тенкя исследуемых растворов н кипящей водяной бане. Зависимость относительной йнтен сившости флуоресценции от времени кипячения на водяной бане,приведе в табл. 3. Таблица Время кипячения, мин 0,20,5 1 2 3 Относительная интенсивность флуоресценции,% 1 7 27 62 60 6

8344684

Продолжение табл. 1

ре ЭФ-ЗМА с фильтрами ФК-1 и Bi - 2.

При изучении оптимальных условий 2Q проведения флуоресцентной реакции на никотинамид найдены оптимальные концентрации едкого натра и хлоральгидрата, которые приведены в табл. 2.

Таблица2 Время обработки анализируемой пробы на кипящей водяной бане составляет 0,2-10 мин. Оптимальные значения этого интервала 2-10 мин. ПрИ определении использовалось время кипячения равное 5 мин. Определению никотинамида в лекарственньгх смесях не мешают цианкобаламин, тиамин, фолиевая кислота, аскорбиновая кислота. Никотиновая кислота обработанная по методике не дает флуоресценции характерной для никотинамида. Пример 1. Определение никотинамида в инъекционном 1%-ном растворе. 1 мл 1%-ного раствора из ампулы переносят в мерную колбу на 100 мл, доводят водой до метки и перемешивают. К 1 мл полученного раствора прибавляют поочередно 2 мл 5%-ного

раствора едкого натра и 2 мл 5%-ногораствора хлоральгидрата. Анализируемую пробу помещают на водяную кипящую баню на 5 мин. После охлаждения раствор переносят в кювету и флуориметрируют. Содержание никотинамида определяют по стандартному раствору, для приготовления которого к 1 мл стандартного водного раствора никотинамида с содержанием препарата

Пример 2. Определение никотинамида в таблетках по 0,015 г.

0,1 г (точная навеска) мелкоизмельченных таблеток никотинамида помещают, в колбу на 100 мл, доводят до метки дистиллированной водой и перемешивают. К 1 мл полученного раствора приливают поочередно 2 мл 5%-ного раствора едкого натра и 2 мл 5%-ного раствора хлоральгидрата. Пробу помещают на водяную кипящую баню на 5 мин. После охлаждения раствор переносят в кювету и флуориметрируют. Содержание никотинамида в таблетках рассчитывают

0,09619,3

0,096 - 18,6

100 мкг/мл приливают поочередно 2 мл 5%-ного раствора едкого натра и 2 мл 5%-ного раствора хлоральгидрата. Полученный раствор помещают на 5 мин на кипящую водяную баню и после охлаждения флуориметрируют одновременно с растворами исследуемых образцов.

Результаты.флуориметрического определения никотинамида в 1%-ном раствора приведены в табл. 4.

Таблица4

по стандартному раствору, для приготовления которого к 1 мл стандартного водного раствора никотинамида с содержанием препарата 100 мкг/мл поочередно прибавляют 2 мл 5%-ного раствора едкого натра и 2 мл 5%-ного раствора хлоральгидрата. Стандартный образец помещают на кипящую водяную баню на 5 мин и после охлаждения раствор флуориметруруют одновременно с исследуемыми образцами.

Результаты определения никотинамида в таблетках представлены в табл. 5.

Таблица .5

0,01458

О ,01404к 0,0139 Пример 3, Определение никотинамида в драже Декамевит-2, 0,08 г (точная навеска) мелкоизмельченных драже переносят в мерную колбу на 50 мл, растворяют в дистиллированной воде и доводят до метки. Полученный pScTBOp фильтруют через . бумажный фильтр. К 1 мл фильтрата добавляют поочередно 2 мл 5%-ного раствора едкого натра и 2 мл 5%-ного раствора хлоральгидрата. Пробирку помещают на водяную кипящую баню, где проба находится 5 мин. После охлаждения раствор переносят в кювету и флуориметрируют одновременно со станПродолжение табл. 5 дартными образцами. Количество никотинамида в исследуемом растворе рас-, считывают по калибровочному графику, для построения которого в пробирку .вносят 1,0; 0,5; О,,25 мл стандартного водного раствора никотинамида с концентрацией препарата 100 мкг/мл, доливают поочередно 0,0/ 0,5 и 0,75мл дистиллированной воды, в каждую пробирку приливают реактивы как указано выше и флуориметрируют одновременно с растворами исследуемых образцов, Данные по определению, никотинамида в драже Декамевит-2 представлены в табл. б. Таблица б Пример 4. Определение никотинамида в драже Пентонит. 0,075 г (точная навеска) мелкоизмельченных драже переносят в мерну колбу на 50 мл, растворяют в дистиллированной воде и доводят водой до метки. К 1 мл полученного раствора добавляют поочередно по 2 мл 5%-ного раствора едкого натра и 5%-ного раст вора хлоральгидрата, перемешивают, псмлецают пробу на водяную кипящую нимъацсиих по. uvjnnnyt4 лиилщуы банюна5мин. После охлаждения растТаблицавор переносят в кювету и флуориметрируют одновременно со стандартными образцс1ми. Количество никотинамида в исследуемом растворе рассчитывают по калибровочному графику, для построения которого готовят стандартные образцы с содержанием никотинамида 5; 10 и 20 мкг/мл по описанной выше методике. Данные по определению никотинамида в драже Пентонит представлены в «f табл.7.