Способ получения ариламидов @ -защищенных аминокислот и пептидов Советский патент 1983 года по МПК C07K5/62 C07C231/02 

Изобретение относится к усовершенствованному способу получения а ламидов N -защищенных аминокислот пептидов, которые могут быть испол зованы в качестве хромофорных субстратов ферментов и полупродуктов для получения хромофорных субстратов ферментов. Известен способ получения арила мидов N -защищенных аминокислот и пептидов, основанный на взаимодей1ствии N -защищенной аминокислоты или пептида с ариламином в присутствии дициклогексилкарбодиимида f Однако дициклогексилкарбодиимид (Является сильным аллергеном и обл адает высокой токсичностью, что существенно затрудняет его использ вание. Наиболее близким к предлагаемом по технической сущности и достигаемому результату является способ получения ариламидов защищенных аминокислот, согласно которому кон денсацию защищенной аминокислоты с ариламином осуществляют в среде органического растворителя в присут ствии третичного амина и смешанного ангидрида нитрозамещенной бензойной кислоты и трет-бутилугольной. кислоты в качестве конденсирующего аген та. Этот процесс состоит из двух ст дий. На первой стадии проводят акти вацию м -защищенной аминокислоты вы шеуказанным смешанным ангидридом в присутствии третичного амина. При этом в качестве побочного продукта образуется соль нитрозамещенной бен зойной кислоты и третичного амина, которая выпадает-в осадок и которую необходимо удалять фильтрованием. На второй стадии после удаления осадка добавляют к реакционной смеси ариламин, перемешивают до заверш ния реакции и выделяют целевой продукт ,2 . Недостатком известного способа является его двухстадийность. Кроме того, используемые в качестве конденсирующих реагентов смешанные ангидриды сравнительно малоустойчивы и гидролизуются влагой воздуха. Цель изобретения - упрощение процесса получения ариламидов N защищенных аминокислот и пептидов. Поставленная цель достигается сп собом получения ариламидов N -защищенных аминокислот и пептидов общей формулы A-B-NH-Ar, где А - ензилоксикарбонил; N - трет-бутилоксикарбонил; В - фенилаланил, аланил, пролил, глицил-пролил; Аг - 4-метилкумарил, 2-нафтил, 4-фенилазафенил; путем взаимодействия соединения общей формулы А-В-ОН, где А и В - значения указанные выше; с .ариламином формулы в среде апротонного органического растворителя в присутствии третичного амина и конденсирующего агента, в качестве конденсирующего реагента используют диалкилпирокарбонат общей формулы (Н-ОСО}у.О где R - линейный или разветвленный алкил, содержащий 3-4 атома углерода. Осущеаствление предлагаемого способа позволяет проводить процесс получения ариламидов Ы -защищенных аминокислбт и пептидов в одну стадию. Пример 1. 4-Метилкумариламид7-Ы-бензилоксикарбонил-Ь-фенилаланина. К раствору 0,6 г N-бензилоксикарбонил-Ь-фенилаланина, 0,2 мл пиридина и 0,5 мл ди-трет-бутилпирокарбоната в 5 мл этилацетата добавляют 0,5 г 4-метил-7-аминокумарина и смесь перемешивают 5 ч, добавляют 10 мл диоксана и оставляют на 12 ч. Осадок отфильтровывают, промывают этилацетатом, сушат. Получают первую порцию продукта. Маточник разбавляют этилацетатом, промывают водой, 1 М H2SOi), водой, 1 М , водой. Выпавший в осадок продукт отфильтровывают, промывают эфиром, сушат и об7эединяют с первой порцией продукта. Сухой продукт растворяют при нагревании в 25 мл диоксана, фильтруют, источник упаривают в вакууме до объема 5-6 мл, разбавляют 10 мл эфира, выпавший осадок отфильтровывают, промывают, сушат. Выход 0,7 г (76%); т.ПЛ. 204-206 С, MD +57,7(, ДМФА). И р и м е р 2. 4-Метилкумариламид7-Ы-бензилоксикарбонил-Ь-аланина. К раствору 0,45 г N-бензилоксикарбонил-Ь-аланина, 0,14 мл пиридина и 0,5 мл ди-трет-бутилпирокарбоната в 3 мл ТГФ добавляют 0,4 г 4-метил-7-аминокумарина. Смесь перемешивают 20 ч при . Осадок отфильтровывают, промывают этилацетатом, эфиром, высушивают и получают 0,50 г (65%) целевого продукта с т.ПЛ. 227-228 C; ot 2C -32,(С-1, ДМФА). Пример 3. 4-Метилкумариламид-7-Ы-бензилоксикарбонилглицилЬ пролина. К раствору 260 мг N-бензилоксикарбонилглкцил-Ь-пролина, 200 мг 4мётил-7-аминокумарина, 0,05 мл пиридина в 2 мл ТГФ прибавляют 0,3 мл ди-трет-бутилпирокарбоната, перемешивают 20 ч, разбавляют этилацетат до объема 20 мл, промывают водой, 1 М HjSO, водой 1 М , водой, сушат над безводным сульфатом натрия и упаривают в вакууме. Остаток кристаллизуют из бензола, отфильтр Бывают, промывают эфиром и сушат в вакууме. Получают 335 мг (84,5%) целевого продукта с т.пл. 140с (с разло жением) -120,7С-( ДМФА). П р и М р р 4. 2-Нафтиламид-Ыбензилоксикарбонил-Ь-фенилаланина. а) Раствор 0,30 г N-бензилокси- карбонил-Ь-фенилаланина, 0,05 мл пиридина и 0,27 мл ди-трет-бутилпи рокарбоната в 3 мл бензола перемешивают 40 мин и добавляют раствор эти ацетата. Реакционную смесь перемешив ют 6 ч, прибавляют 10 мл петролейного эфира, выпавший осадок отфиль тровывают, промывают эфиром и сушат в вакууме. 0,26 г (61%) целевого Получают О :.пл. l80-l8l« C;Eoi °+ продукта с т, + 45,5 ( ДМФА) б) Раствор 0,60 г N-бенэилоксикарбонил-Ь-фенилаланина. 0,2 мл N-метилморфолина и 0,4 мл дй-изопропилпирокарбоната в 3 мл бензола и 1,5 мл ТГФ перемешиивают 1 ч,добавляют 0,3 г кристаллическо 2-нафтиламина, перемешивают ,3 ч. З тем разбавляют эфиром, образовавшийся осадок отфильтррвыв.ают, промы вают эфиром и сушат в вакууме. Получают 0,55 г (64,8%) целевого соединения с т.пл, 175-17бс. П р и М е р 5. 2-Нафтиламид-Ыбензилоксикарбонил-Ь-аланина. I Аналогично примеру 48 получают нафтиламид-Ы-бензилоксикарбонил-Ьаланина с выходом 64,6%, т.пл. 185187°C;W |,°:г-26,5°( ДМФА). Пример 6. 4-ФенилазоанилидЫ-Трет-бутилоксикарбонил-Ь-пролина. Раствор 1,0 г N-трет-бутилоксикарбонил-Ь-пролина, 0,1 мл пиридина, 1,0 г 4-фенилазоанилина и 1,3 мл дитрет-бутилпирокарбоната в 10 мл бензола перемешивают 10 ч. Смесь разбавляют эфирой, образовавшийся осадок отфильтровывают, промывают эфиром и сушат. Получают 1,5 г (82%) 4-фенилазоавилида-Ы-трет-бутилоксикарбонил-Ьпролина с т.пл, 205-206°С;М5° --80 ( ДМФА). П р и М е р 7. 4-ФенилазоанилидК-трет-бутилоксикарбонил-Ь-аланина. Раствор 1,0 г N-трет-бутилоксикарбонил-Ь-аланина, 0,5 мл N-метилморфолина и 1,2 мл втор-бутилпирокарбоната в 5 мл бензола .перемешивают 30 мин и добавляют раствор 1,0 г 4-фенилазоанилина в 5 мл ТГФ. Реакционную смесь перемешивают 5ч, разбавляют этилацетатом до объема 30 мл, промывают водой, 5%-ным раствором лимонной кислоты, водой, 1М.К«2СО, водой, сушат йад безводн(лм сульфатом натрия и упаривают в вакууме. Остаток перекристаллизовывают из эфира. Получают 1,3 г (66%) 4-фенилазоанилида-Ы-трет-бутилоксикарбонил-Ьаланина с т,пл. 172-173 С;М ( диоксан), . Таким образом, предлагаемый способ получения ариламидов К-згицищенных аминокислот и пептидов представляет собой простой в технологическом отношении процесс, осуществляемый в одну стадию, который позволяет выделять целевые продукты с высокой степенью чистоты без использования специальных методов очистки.

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АРИЛАМИДОВ N -ЗАЩИЩЕННЫХ АМИНОКИСЛОТ И ПКПТИДОВ общей формулы A-B-NH-Ar, где А - бензилоксикарбонил; N - трет-бутилоксикарбонил; В - фенилаланил, аланил, пролил, глицил-пролил; Аг - 4-метилкумарил, 2-нафтил, 4-фенилазафеиил; путем взаимодействия соединения общей формулы А-В-ОН, где А и В - значения,указанные зьаае; с ариламином формулы HjN-Ar, где Аг - значения, указанны.е выше; в среде апротонного органического врастворителя в присутствии третичного амина и конденсирующего реагента, отличающийся тем, что, с целью упрощения процесса, в качестСП ве конденсирующего реагента используют дигшкилпирокарбонат общей формулы (R-Ogo)jjO, где R - линейный или разветвленный алкил, содержащий 3-4 атома углерода.