Изобретение касается новых химических соединений, относящихся к . классу дипиримидотиазинов, а именно производных ДИПИРИМИДО-5Н-CI.S-B) (4,5-е) (.1 ,)тиазина общей формулы I и
R
VsVtt
IV
где R -|3.-ди9тиламиноэтиламиногруппа -NH-CH2CH2N()2 или N-(N- диэтилкарбамоил).-пиперазиногруппа /-V
-нЗ -сокЮгНз)
или N-(N -метил)-пиперазиногруппа
-O-CHj
или , -диазабицикло (3,3,0) нонанил- 3 группа -.
-н
Известны производные ряда дипиримидотиазина общей формулы II
ь
Rj
метоксигруппа (lla)
и R2 где R или R;, - диметиламиио, а R метоксигруппа, или К( - метоксигруппа, а Rg диметиламиногруппа.
Наиболее близким по структуре и действию аналогом заявляемых соединений оказалось соединение Па.
Установлено, что оно обладает слабо выраженным цитостатическим и противоопухолевым действием. Антиредуктазную активность соединения На выявить не удалось в связи с его плохой растворимостью в воде.
Цель изобретения - расширение арсенала средств в ряду производных дипиримидотиазина, обладающих цитостатическим, противоопухолевым и антиредуктазным действием.
Указанные свойства определяются химической структурой заявляемых
производных дип.иримидотиазина формулы I,
Способ получения заявляемых соединений основан на известной реакции замещения галогена в галогенпроизводных гетероароматических соединений на остатки различных аминов.
Соединения формулы I получают взаимодействием соединения формулы III
15
20
HNR
Z
где R - диэтиламиноэтиламиногруппа или вместе с атомом азота N-(Nяиэтилкарбамоил)-пиперазиновый, или N-CN-метил)-пиперазиновый, или диазабицикло(3,3,0)нонанил- Зовый. радикал, в среде инертного органического растворителя при 7G-QO°C.
Исходное соединение формулы III новое и представляет собой желтое кристаллическое вещество, растворимое в горячем низшем спирте, бензоле, толуоле, ацетоне. Т.пл. 202-2G3C.
Способ получения его основан на реакции замещения 4,9-диоксидипиримидотиазина с хлорокисью фосфора в присутствии диметиланилина.
В качестве органического растворителя обычно используют бензол или толуол.
Нижеследующие примеры иллюстрируют способ получения заявляемых соединений формулы I и исходного соединения формулы III.
Пример. Получение ,9-бис(р-диэтиламиноэтил)-аминодипиримидо5Н-(,.5-в)(4,5-е)(1,4)тиазйна (la) К суспензии 3 г (Г1,5 ммоль) ,90дихлордипиримидотиазйна в 90 мл бензола прибавляют раствор 10,2 г (87 ммоль) -диэтиламиноэтиламина в 30 мл бензола, нагревают до кипения (78-80°С) и кипятят 3 ч, после чего
5 упаривают в вакууме досуха. Растирают с водой (20 мл), экстрагируют хлороформом (3x25 мл). Хлороформ отгоняют в вакууме, остаток растирают 5 с петролейным эфиром (.20 мл) , отфильтровывают затвердевшее вещество Получают 3., 6 г (76%) соединения 1а в виде кристаллов желтого цвета с т.пл. 178-l80 C (из бензола). Найдено,: С 55,6; Н 7,71; N 30,10. (М.м, ft31,6). Вычислено,%: С 55,65; И 7,70; N 30,30. ИК-спектр (), см : ЗЮО, 3220 (+-,5-,9-NH). П р и м е р 2. Получение ,9-бис N-(N-диэтилкарбамоил)-пиперазинодипиримидо-5Н-(,5-в)(,5-е)(1,) тиазина (l6). В условиях примера 1 из 1 г (3,7 ммоль) ,9-ДИхлордипиримидотиа зина и 2,7 г (1,8 ммоль) N-диэтилк бамоилпиперазина получают 2 г соединения 16 в виде желтых кристал лов, с т.пл. 136-142 С (из этилацетата). Найдено,: С 5,52; Н 7,10; N 26,79. C.jaHs N OiS (М.м. 569,7). Вычислено,: С 5,81; Н 6,90; N 27,Qk. ИК-спектр (), 1630-16 0 (СО амида), 3200 (5-NH). П р и м е р 3. Получение 4,9-бис N-(N-метил)-пиперазинодипиримидо-5 (|,5-в)(},5-е)(1,)тиазина (la). В условиях примера 1 из 1 г (3,7 ммоль) ,9-дихлордипиримидо- тиазина и 3 г (29,6 ммоль) N-метилпиперазина получают 1,3г (89,2) соединения 1в в виде кристаллов жел того цвета с т.пл. 173-17А°С (из циклогексана). Найдено,: С 5,06; Н 6,37; N 31,67; S 8,16. lasNgS (М.м. 399,5). Вычислено,%: С 5,10; Н 6,30; N 31,5; S 8,02. ИК-спектр (0), 3200 (5-NH). Прим ер 4. Получение 4,9-бис ,4-диаЗабицикло (3,3.0) нонанил 4 дипиримидо-5И-(4,5-в)(4,5-е)(1, тиазина (1г). К суспензии 1 г (3,7 ммоль) 4,9-дихлордипиримидотиазина в 45 мл бензола прибавляют 4 г (29,6 ммоль) 1,4-диазаспиробициклононана в 10 мл этанола и кипятят 8 ч. Смесь упаривают, растирают с 15 мл воды, экстра гируют хлороформом (3x25 мл). Хлороформ отгоняют в вакууме, остаток (95) t растирают со смесью этилового и петролейного эфира (1:2),оставляют для кристаллизации на 72 ч. Выпавший затвердевший осадок отфильтровывают. Получают 0,9 г (5,5%) соединения 1г в виде желтых кристаллов с т.пл. 135-137С (из этилацетата). Найдено.%: С 58,72; Н 6,25; N 27,59; S 7,. (2..)5 (М.м. А51,6). Вычислено.%: С 58,50; Н 6,АО; N 27,90; S 7,1р. ИК-спектр (С)),см : 3200 (5-NH). П р и м е р 5. Получение А,9-ДИ-. хлордипиримидо-5Н-(А,5-в) (4,5-е) (1,4)тиазина (III). а) Получение ,9-диоксидипиримидотиазина. Смесь 8 г (30,4 ммоль) соединения На с 400 мл 36%-ной НС1 нагревают на кипящей водяной бане ( С) в течение 2,5 ч. Выпавшее вещество отфильтровывают, промывают водой (50 мл). Получают 6,5 г (91) 4,9-диоксидипиримидотиазина, который после сушки направляют на получение дихлорпроизводного. б) Получение 4,9-дихлордипиримидотиазина. Смесь 1 г (4,3 ммоль) 4,9-диоксидипиримидотиазина с 20 мл хлорокиЪи фосфора и 1,1 г (4,3 ммоль). диметиланилина кипятят при С в течение 3 ч, отгоняют в вакууме приблизительно 15 мл хлорокиси фосфора, остаток смешивают осторожно при охлаждении льдом с 30 г льда. После разложения остатков хлорокиси отфильтровывают вещество, отмывают водой от кислоты, затем спиртом. Получают 0,9 г (78%) соединения III в виде желтых кристаллов с т.пл. 202-203С (из бензола). Найдено,: С 35,53; Н 1,11; N 26,2; С1 26,08; S 11,15. (М.м. 272). Вычислено,%: С 35,30; Н 1,10; N 25,8; С1 26,10; S 11,80. ИК-спектр (), 3250 (5-NH). Все заявляемые соединения формулы I проявляют цитостатическое и противоопухолевое действие. Одно соединение IB обладает, кроме вышеуказанных, и антиредуктазной активностью.
.Количественная характеристика биологической активности заявляемых соединений.
а) Цитостатическое действие.
Цитостатическое действие заявляемых соединений изучали in vitro в первичных культурах нормальной (Н) (сердце куриного эмбриона) и опухолевой (о) (саркома 5) тканей в сравнении с известным соединением На.
Оценку действия соединений производили после 72- или 96-часовой инкубации с исследуемым веществом при Индекс торможения (I-,-) вычисле по известной методике.
Результаты исследования представлены в табл.1.
Таблица
Сравнительные данные исследования цитостатического .действия заявляемых и известного соединений
Как видно из экспериментальных данных, представленных в табл.1, заявляемые соединения 1а-г в концентрации 1 и 0,1 мг/мл подавляют рост культур нормальной и опухолевой тканей на 0-100°о, причем в концентрации 0,1 мг/мл соединения 1а-1г, а соединение 1в и в концентрации 0,01 мг/мл проявляют избирательность действия на опухолевую ткань, подавляя ее рост на и 5б% соответственно.
Известное соединение На в отноЬительно высокой концентрации (1 мг/мл) проявляет лишь незначительное Цитостатическое действие на нормальную и опухолевую ткань, подавляя ее рост на 20.
Таким образом, можно сказать, что Цитостатическое действие заявляемых 25 соединений значительно выше, чем у известного структурного аналога На, и кроме того, соединения 1а и 1в обладают избирательностью действия на опухолевую ткань.
б) Противоопухолевая активность. Изучение активности соединений формулы I проведено в опытах in vivo на 31 б крысах с перевивгюмыми опухо35 лями саркомы Иенсена и М-1 крыс в сравнении с известным соединением На. Для сравнительной оценки изменения веса опухоли (Т,о) животных леченной группы по сравнению с конт40 рольной заявляемые соединения вводили per OS. в виде суспензии в подсол-,, нечном масле-или внутрибрюшинно (в/б) в виде раствора в изотоническом растворе хлорида натрия-один раз
45 в день в течение 8 дней. Результаты и--педований приведены в табл.2.
1.А,9-Бис-амйнопроизводные дипиримидо-5Н-(,5-в) (,5-е)
Результаты сравнительного изучения противоопухолевой активности и токсичности заявляемых соединений
Таблица2
