Способ количественного определения сульфаниламидных лекарственных препаратов Советский патент 1984 года по МПК G01N21/78 

S

СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ СУЛЬФАНИЛАМИДНЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ путем Обработки анализируемой пробы растворг1ми соляной кислоты, нитрита натрия с последующим фотометрированием полученного раствора, отличающийся тем, что, с целью повышения чувствительности и точности, анализируемую пробу дополнительно обрабатывают раствором 3-(oL, /j-дикарбоксиэтил) роданина в присутствии боратного буферного раствора с рН 12.

ел

со Изобретение относится к фармацев тическому анализу, касается количест венного определения сульфаниламидных препаратов, например норсульфазола, сульфамонометоксина, стрептоцида в фармакопейных препаратах, лекарственных формах и биологических средах крови и моче, и может быть использовано в центральных заводских лабораториях, контрольно-аналитических лабораториях аптекоуправлений, научно-исследовательских лабораториях для количественного определения суль фаниламидных препаратов в исследуемых объектах и изучения их метаболиз ма. Известен способ определения сульфаниламидных лекарственных препаратов путем титрования раствора пробы анализируемого вещества нитритом натрия в присутствии индикатора l Недостатками данного способа являются его малая чувствительность (для одного анализа требуется 0,25 г вещества) и невысокая точность (А + 3,5-4,5%) . Наиболее близким к предлагаемому по технической сущности и достигаемому результату является способ коли чественного определения сульфаниламидных лекарственных препаратов путем последовательной обработки анализируемой пробы растворами соляной кислоты, нитрита натрия, мочевины, тимола и щелочи с последующим фотометрированием полученного раствора Г2 . Недостатками известного способа являются относительно невысокая чувствительность и малая его точность ,(А 10,5%). Цель изобретения - повышение чувствительности .и точности способа. Поставленная цель достигается тем, что согласно способу количественного определения.сульфаниламидных лекарственных препаратов путем обработки анализируемой пробы растворами соляной кислоты, нитрита натрия с последующим фотометрированием полученного раствора анализируемую пробу дополнительно обрабатывают раствором 3-(о,-дикарбоксиэтил) роданина в присутствии боратного буферного раствора с рН 12. 3-(ot, р-дикарбоксиэтил) роданин представляет собой светло-желтый кристаллический порошок, легко, растворяющийся в ацетоне, диоксане, спир те, в воде он малорастворим. Т.пл. 140°С. Пример 1. Количественное определение сульфаниламидов в фармакот пейных препаратах. Точную навеску 0,01 г исследуемого вещества (норсульфазола, стрептоцида или сульфамонометоксина) раство ряют в 1 н растворе соляной кислоты в мерной колбе на 25 мл. 0,1 мл полученного раствора помещают в другую мерную колбу на 25 мл, затем прибавляют 0,8 мл 1 н раствора хлоридной кислоты, 1 мл 1%-ного раствора нитрита натрия и 1 мл О,1%-ного водного раствора реагента. Смесь хорощо взбалтывают и объем в колбе доводят до метки раствором боратного буфера и гидроксида натрия, при этом контролируют рН среды с помощью индикаторной бумаги, устанавливают рН 12. (способ приготовления боратного буфера описан ниже). Окрашенный в красный цвет раствор колориметрируют на фотоэлектроколориметре с зеленым светофильтром при А 500 им, используют кювету с толщиной слоя 10,0 мм. Кювету сравнения заполняют раствором, состоящим из всех компонентов кроме исследуемого вещества. Содержание препарата в процентах рассчитывают по следующим формулам: D - 0,005 100 -25 10 1,6165 навеска(мг) D - 0,004 100-25-10 2,036 навеска(мг) D - 0,002 100 2510 сульфамон .1,8122 .навеска(мг) где D - оптическая плотность (числа 0,005; 1,6165; 0,004; 2,036; 0,002; 1,8122 получены в результате математической обработки калибровочной кривой). Для построения калибровочной кривой готовят стандартный раствор путем растворения .точной навески препарата (0,01. г) в. 25,0 мл 1 н раствора соляной кислоты. 1 мл стандартного раствора содержит 0,4 мг препарата. Исходя из стандартного раствора готовят серию растворов с содержанием исследуемого вещества от 0,008 до 0,2 мг. Для этого в четыре колбы емкостью на 25 мл каждая помещают соответственно 0,02; 0,04; 0,06; 0,5 мл стандартного раствора. Для проведения реакции азосочетания к ним последовательно прибавляют 0,8 мл 1 н раствора соляной кислоты, 1,0 мл 1%-ного раствора нитрита натрия и 1,0 мл О,1%-ного раствора реагента. Содержимое каждой колбочки хорошо взбалтывают и доводят до метки, используя смесь боратного буфера и гидроксида натрия. Для приготовления буферного раствора берут 12,367 г борной кислоты,растворяют ее в 100 мл 1 н раствора гидроксида натрия, доводят объем раствора до

100,0 мл дистиллированной водой. К полученному раствору прибавляют 200 мл 0,1 и раствора гидроксида натрия.

Окрашенный в красный цвет раствор колориметрируют на фотоэлектроколориметре ФЕК-М с зеленым светофильтПодчинение светопоглощения закону Бугера-Ламберта Бера сохраняется в пределах концентраций 0,008 О,2 мг/мл для всех исследуемых лекарственных, препаратов. П р и м е р 2. Количественное определение сульфаниламидов в таблетках. Точную навеску порошка таблеток норсульфазола, стрептоцида или суль фамонометоксина с содержанием препа рата около 0,01 г растворяют в 1 н растворе соляной кислоты в мерной колбе на 25 мл. Спустя 30 мин смесь фильтруют через бумажный фильтр, отбрасывают первые 5 мл фильтрата. Из последующей порции отмеривают 0,1 мл и вносят в колбу на 25 мл. Дальнейший анализ проводят аналогично примеру 1 ... Содержание препарата рассчитывают по формулам. D - 0,005 25-10-100 (т, ... 1,6165 навеска препарата(м D - 0,004 25-10-100 навеска препарата(м D - 0,002 25- lOaOO , - 1,8122 навеска препарата(M

ром при Л 500 нм, исп-ользуют кювету с толщиной слоя 10,0 мм. Кювету сравнения заполняют раствором, состоящим из всех компонентов кроме исследуемого вещества.

Результаты для построения калибровочного графика приведены в табл.1,

Таблица 1 Результаты количественного определения представлены в табл. 2. Пример 3. Количественное определение сульфаниламидов в крови. Точный объем О,5 мл сыворотки крови, содержащей 0,1-0,05 мг исследуемого препарата, помещают в пробирку с притертой пробкой и прибавляют 0,8 мл 1 н раствора соляной кислоты, 1 мл 1%-ного раствора нитрита натрия и 1 мл О,1%-ного раствора реагента. Смесь хорошо взбалтывают и доводят ее объем до 25 мл боратно-буферным раствором, при этом контролируют рН с помощью универсальной индикато4 ной бумаги, устанавливают рН 12. Окрашенный в красный цвет раствор колориметрируют на фотоэлектроколориметре ФЕК-М аналогично примеру 1. Содержание препарата в крови рассчитывают по формулам D - 0,005 1,6165.V D - 0,004 2,036-V D - 0,002 m ,8122. V где V - объем сыворотки/ мл; I Результаты количественного определения представлены в табл. 2. Пример 4. Количественное определение сульфаниламидов в крови животных. В желудок животных (крыс) предва рительно вводят 0,5 г стрептоцида или норсульфазола с помощью зонда. Кровь от животных берут спустя 1,5 после приема препарата. Точный объем 1,0 мл сыворотки кр ви смешивают с 9,0 мл дистиллирован ной воды. В колбу на 25 мл вносят 0,1 мл сыворотки, полученной при разбавлеНИИ, и проводят анализ аналогично примеру 3. Результаты определения представлены в табл. 2. П р и м е р 5. Количественное определение сульфаниламидных препаратов в моче. Для анализа используют точный ем О,1.мл мочи.с содержанием преата 0,08-0,04 мг и помещают в.проку с притертой пробкой, . Дальнейший анализ проводят аналоно примеру 1, . Содержание препарата рассчитывапо формулам D - 0,005 мг/мл; 1,61650,1 D - 0,004 мг/мл; 2,036-0,1 D - 0,002 мг/мл. льФамоН 12,8122 0,1 Результаты количественного опредеия представлены в табл, 2, Таблица 2

Продолжение таблицы 2