СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ СУЛЬФАМИДНЫХ ПРЕПАРАТОВ В ЛЕКАРСТВЕННЫХ ФОРМАХ Российский патент 2011 года по МПК G01N33/15 G01N21/78 

Изобретение относится к аналитической химии, может быть использовано для контроля за содержанием сульфамидных препаратов в различных объектах.

Целью изобретения является создание высокочувствительной экспресс-методики определения содержания сульфамидных препаратов в лекарственных формах. Сульфамидные препараты со свободной первичной аминогруппой легко диазотируются в кислой среде. В результате азосочетания образовавшихся диазосоединений с щелочным раствором β-нафтола в присутствии ацетата Na образуются интенсивно окрашенные азосоединения. Методика рекомендована Государственной Фармакопеей как общегрупповое испытание на подлинность лекарственных веществ, содержащих первичную ароматическую аминогруппу [Фармацевтическая химия. Под ред. проф. А.П.Арзамасцева. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2006, 640 с.] [1].

Вместе с тем, при азосочетании диазотированных сульфамидных препаратов с β-нафтолом формируются окрашенные осадки, а скорость их формирования сильно зависит от концентрации сульфамидов. Это обстоятельство является препятствием к дальнейшему использованию данной реакции.

Целью изобретения является создание высокочувствительной экспресс-методики определения содержания сульфамидных препаратов в лекарственных формах. Поставленная задача достигается тем, что диазотированные по свободной аминогруппе сульфамиды сочетают с хромотроповой кислотой, в результате чего образуются воднорастворимые окрашенные в красный цвет азосоединения с молярным коэффициентом светопоглощения 4,5·10⁴ при 530 нм. Азосоединения формируются быстро, они не меняют своих оптических характеристик во времени.

Образование соли диазония. Сульфамиды общей формулы

в солянокислой среде в присутствии нитрита натрия образуют соли диазония

В присутствии хромотроповой кислоты и соли диазония образуется азосоединение, окрашенное в яркий алый цвет (λ=530 нм).

Выполнение определения. Навеску сульфамидного препарата 0,01 г, взятого после измельчения таблетки, растворяют в HCl и доливают воду до 10 см³. Отдельно приготавливают раствор нитрита натрия (0,01 г в 10 см³ воды) и хромотроповой кислоты (0,03 г в 10 см³ воды +2 кристаллика Na₂CO₃·10 H₂O). Мелко дробят лед, помещают в стакан емкостью 100 см³ 20 г льда, вносят раствор сульфамида и нитрита натрия. Через 1 мин добавляют хромотроповую кислоту и доводят объем раствора до 50 см³ водой. Формируется азосоединение, окрашивающее раствор в алый цвет. В зависимости от интенсивности окраски отбирают в кюветы толщиной от 0,1 до 1,0 см³ полученный раствор и измеряют оптическую плотность его при 530 нм.

Градуированные графики. В серию стаканчиков отбирают разбавленный в 100 раз исходный раствор: 0; 0,05; 0,1; 0,20; 0,40; 0,60; 1,0; 2,0; 5,0 см³, вносят, как в прописи для определения лед, нитрит натрия, соляную кислоту и через 1 мин хромотроповую кислоту и доводят объем до 50 см³ водой. Измеряют оптические плотности при 530 нм в кювете толщиной 1 см относительно воды. Градуировочные графики для определения сульфамидов в индивидуальных препаратах приведены на чертеже.

Результаты определения индивидуальных сульфамидных препаратов в их растворах приведены в таблице 1.

Таблица 1.
Метрологические характеристики методики определения азосоединений сульфамидов в индивидуальных препаратах фотометрическим методом, n=6. P=0,95; t_p=2,57. Препарат Внесено в воду, мг/дм³ Найдено, мг/дм³ Данным методом По методике [1] Стрептоцид 0,01 0,01±0,005 0,01±0,01 0,10 0,10±0,01 0,10±0,05 1,00 1,00±0,15 1,00±0,25 Норсульфазол 0,01 0,01±0,005 0,01±0,01 0,10 0,10±0,01 0,10±0,05 1,00 1,00±0,10 1,00±0,30 Этазол 0,01 0,01±0,005 0,01±0,01 0,10 0,10±0,01 0,10±0,05 1,00 1,00±0,15 1,00±0,30 Сульфадимезин 0,01 0,01±0,005 0,01±0,01 0,10 0,10±0,01 0,10±0,05 1,00 1,00±0,15 1,00±0,30

Как видно из табл.1, разработанная методика по метрологическим характеристикам превосходит широко используемую.

Тонкослойная хроматография соединений. Образующиеся соединения хорошо растворимы в воде и водно-этанольных смесях до содержания этанола на уровне 60%. Соединения хорошо адсорбируются силикагелями (например, силикагелем А-60), на крахмале и целлюлозе, что обеспечивает возможность разделения их с помощью хроматографии, в том числе и тонкослойной хроматографии (ТСХ). Было проверено ТСХ разделение полученных азосоединений на пластинках Sorbfil ПТСХ-АВ-В (ТУ 26-11-17-89).

Выполнение разделения. На пластинку Sorbfil ПТСХ-АВ-В через 1 см на линии старта вносят по 0,03 см³ (1 капля) 10^-3 М раствора каждого из азопроизводных сульфамидов. Пластинку опускают в стакан, на дно которого на высоту 0,5 см налита смесь этанола, уксусной кислоты и воды в соотношении 50:1:49. Стакан накрывают колпаком. После того как подвижная фаза достигнет верхней отметки пластины (1 см от верхнего края), пластинку вынимают, подсушивают в токе воздуха (вентилятор) и измеряют расстояния, пройденные отдельными компонентами. Эти расстояния достаточно близки, однако они различаются. Рассчитывают коэффициент разделения R_f

где h₀ - расстояние, пройденное подвижной фазой, h_x - расстояние, пройденное азосоединением. Результаты разделения приведены в таблице 2.

Таблица 2.
Хроматографические характеристики (R_f) азопроизводных сульфамидных препаратов. Производные сульфамидов R_f Цвет пятна Смесь производных R_f Стрептоцид 0,65 Алый Стрептоцид, 0,65 Норсульфазол 0,45 Алый норсульфазол, этазол, 0,45 Этазол 0,55 Алый сульфадимазин пятна хорошо 0,55 Сульфадимазин 0,60 Алый разделяются и различаются 0,60

Таким образом, при диазотировании смеси сульфамидов получают смесь их азопроизводных, которые при ТСХ хроматографировании хорошо разделяются. По отдельным пятнам можно легко судить о наличии в смеси различных сульфамидов.

Изобретение относится к медицине и описывает способ количественного определения сульфамидных препаратов в таблетках путем обработки анализируемой пробы растворами соляной кислоты, нитрита натрия с последующим фотометрированием полученного раствора, причем анализируемую пробу дополнительно обрабатывают раствором хромотроповой кислоты в присутствии карбоната натрия, измеряют оптическую плотность полученного раствора при длине волны 530 нм относительно воды и определяют количество исследуемого вещества с помощью градуировочного графика. Данный способ обеспечивает высокочувствительную эксперсс-методику определения содержания сульфамидных препаратов в таблетках. 2 табл., 1 ил.

Способ количественного определения сульфамидных препаратов в таблетках путем обработки анализируемой пробы растворами соляной кислоты, нитрита натрия с последующим фотометрированием полученного раствора, отличающийся тем, что анализируемую пробу дополнительно обрабатывают раствором хромотроповой кислоты в присутствии карбоната натрия, измеряют оптическую плотность полученного раствора при длине волны 530 нм относительно воды и определяют количество исследуемого вещества с помощью градуировочного графика.