Питательная среда для выращивания @ @ Советский патент 1984 года по МПК C12N1/20 

I

Изобретение относится к микробиологической промьшшенностй к хасается производства бифидум бактерин

Известна гштатепХНая среда Томареллы для выращивания BacteriuiE: bifidum, содержащая ГЛЁОКОЗУ ,, пептон смесь й -шнокислот, пуриновые и пиримидиновые основаш-тя, витам-гш:, натрий уксуснокксльш г.гннеральные соли г агар и воду pf.

Однако такая среда не обеЬпечива высокого выхода биомассы, хотя и яв ляется дешевой Средой,

Известна также питательная среда для выраЕЦИвания Bacterium bifi-dumjC держащая источник азота (печеночнб Й бульон и пентон,, источник углерода (лактозу 1, аминокислоту (цнстеин/„ соль натрия, агар и воду 2.

Известная среда является производственной, обеспечивает высокий выход биомассы,, но является дорогойЦель изобретения - удешевлехше среды при сохранении высокого выхода биомассы .

Указанная цель достигается тем что питательная среда для выращивания Bacterium bifidura содержащая источник азота, источник углерода.; аг-1ино5шслоту, соль натрия, агар и воду„ дополнительно содержит витамины, лимоннзло кислоту, сорбит, глицерин, в качестве источника азота она содержит панкреатический гидролизат РНК, в качестве источника углерода глюкозу, в качестве амикокислоты - метионин, в качестве соли натрия - натрий уксуснокислый при следуюгцем соотноше1ети компонентов, г/л воды;

Панкреатический гидрапизат казеина 8,0-12 Щелочной гндроли- эат РНК 0,3-0,5 Глюкоза 15,0-25,0 Метионин0,08-0,12 Вит аминыО ,3 Натрий уксуснокислый8,0-12,0 Лимонная кислота0,2-054 Сорбит0,8,2 Глицерин0,,2 Агар0,,8-1,2 ВодаДо I л

Среду готовят следуюащм образом.

Все компоненты кроме витаминов и глюкозы смешивают в указанных пропорциях. Смесь нагревают до пол2055I

кого растворения агара и атьтруют через ватно-марлеа)1й фильтр.

В профильтрованную смесь добавля ют необходимое количество витами- ков. При этом витамины включают в липоевую кислоту, кальция пантотенат, никотиновую кислоту, пиридоксина гидрохлорид, биртин, кислоту фолевую, рибофлавин, диамиц на гидрозшорид. После тщательного перемешивания горячую среду разбивают в соответствзгкяцую посуду и стерилизу1от при 1 5-}20 С в течение J520 NWH. После стерилизации в состав j, средь вводят глюкозу.

Пример . Готовят среду следующего состава, г/л Глюкоза15,0

Панкреатиновый гидролизат казеина 8,0 Щелочной гидролизат РНК Витамины 0,1 Натрий уксусно8,0 кислый

Агар0,8

Лимонная кислота0,2

Сорбит0,8

Глицерин0,8

Метионин0,08

ВодаДо i л

Этаг1оннь й штамм Bacterium bifidum,

полученный на модифицированной среде Влаурокка растворяют в 5 мл физиологического раствора, разводят последним (0 -10 )ипо1мп каждого разведения засевают в регенерированmie кипячением в водяной бане испытуемые сре,цы. Посевы выращивают при 37°С в течение 72 ч.

Оценку среды по повьшению выхода биомассы проводят путем сравнения между собой числа выживших на них микробных тел.

Количество целевого продукта при разведении 10 составляет 51з8±1,5,. «а среде Етаурокка 43,0±6,3.

Пример 2. Выращивание осуществляют как в примере 1, используя .среду следующего состава, г/л воды:

Глюкоза.20

Панкреативный гидролизат казеина10,0 Щелочной гидролизат РНК0,4

ВиТа№:(НЬ10,2

Натрий уксуснокислый10,0 АгарI,О Лимонная кислота0,3 Сорбит1 ,0 Глицерин1,0 Метионин0,1 ВодаДо I л

Количество колоний при разведении составляет 59,8+1,5.

Пример 3. Выращивание осществляют как в примере 1, используя среду следующего состава, г/л воды:

Глюкоза25,0

Панкреативный гидролиз ат казеина12,0 Щелочной гидролизат

РНК0,5

Витамины0,5

Натрий уксуснокислый12,0

Агар1,2

Лимонная кислота0,4

Сорбит1,2

Глицерин1,2

ВодаДо 1 л

Количество колоний составляет 54.7+1,5.

Морфологическая проверка показывает, что Bacterium bifidum, выращенный на данной среде, удовлетворяет предъявляемаШ требованиям: в мазках представляет собой бесспоровые грамположительные палочки, характерным признаком которых является раздвоение концов.

Использование питательной среды указанного состава позволяет удешевить среду (49,92 руб, прототип 208,83 руб при сохранении высокого выхода целевого продукта.

ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ВЫРАЩИВАНИЯ BACTERIUM BIFIDUM, содержащая источник азота, источник углерода, аминокислоту, соль натрия, агар и воду, отличающая ся тем, что, с целью удешевления среды, она дополнительно содержит витамины. лимонную кислоту, сорбит, глицерин, в качестве источника азота она содержит панкреатический гидролизат казеина и щелочной гидролизат РНК, в качестве источника углерода - глюкозу, в качестве аминокислоты - метионин, в качестве сОли натрия - натрий уксуснокислый при следующем соотношении компонентов, г/л воды: Панкреатический гидролизат казеина8,,0 Щелочной гидролизат РНК0,3-0,5 Глюкоза15,0-25,0 Метионин0,08-0,12 Витамины0,1-0,3 Натрий уксуснокислый8,0-12,0 Лимонная кислота0,2-0,4 Сорбит0,8-1,2 Глицерин0,8-1,2 Агар0,8-1,2 ВодаДо 1 л