4-МЕТОКСИБЕНЗИЛГУАНИДИН ИЛИ ЕГО СЕРНОКИСЛАЯ СОЛЬ, ОКАЗЫВАЮЩИЕ ИНГИБИРУЮЩЕЕ ДЕЙСТВИЕ НА МОНОАМИНОКСИДАЗУ МОЗГА Советский патент 1995 года по МПК C07C279/08 A61K31/155 

Предлагается новое биологически активное соединение, а именно 4-метоксибензилгуанидин и его сернокислая соль, оказывающие ингибирующее действие на моноаминоксидазу мозга. Указанные свойства позволяют предполагать возможность их применения в медицине.

Известны производные гуанидина (гуаноксан, бензанидин, октадин и др.), которые, обладая сильными основными свойствами, плохо проникают через гематоэнцефалический барьер, и их действие ограничивается, в основном, периферической нервной системой. Известные медицине гуанидины являются симпатолитиками.

Известен также и применяется индопан антидепрессивное средство, избирательно повышающее содержание серотонина в мозге.

Целью изобретения является изыскание ингибиторов моноаминоксидазы длительного действия, способных избирательно накапливать серотонин в мозге и лишенных токсических эффектов при исследованиях на экспериментальной модели депрессии.

Полезные свойства определяются структурой 4-метоксибензилгуанидина и его сернокислой соли, которая выражается следующей структурной формулой
CH₃O CH₂- NHC-C
Это соединение получают следующим образом. 4-Метоксибензальдегид подвергают восстановительной конденсации с аммиаком при температуре 120^оС и давлении 110 атм в присутствии катализатора никеля на окиси хрома. Полученный 4-метоксибензиламин при температуре 80-85^оС в водной среде вводят во взаимодействие с сернокислой S-метилизотиомочевиной с образованием с 80%-ным выходом сернокислой соли 4-метоксибензилгуанидина, которую действием 20%-ного водного раствора гидроокиси натрия переводят в 4-метоксибензилгуанидин с 88,8%-ным выходом.

П р и м е р 1. 4-Метоксибензиламин.

В качающийся автоклав помещают 13,6 г (0,1 моль) 4-метоксибензальдегида в 60 мл 10 н.раствора аммиака в метиловом спирте и 4 г катализатора никеля на окиси хрома. Гидрирование проводят при 110 атм (давление водорода) и температуре 120^оС. Необходимое количество водорода поглощается за 4-5 ч.

По охлаждении гидрогенизат отфильтровывают, отгоняют метиловый спирт, остаток перегоняют в вакууме. Выход 4-метоксибензиламина 9,7 г (80,9%), т. кип. 107-110^оС/1 мм рт. ст. d_ч²⁰ 1,0621, n2D

С₈Н₁₁N0
Вычислено, С 70,04; Н 8,27; N 10,21.

Т.пл. гидрохлорида 230-231^оС.

П р и м е р 2. Сернокислый 4-метоксибензилгуанидин.

К 13,7 г (0,1 моль) 4-метоксибензиламина прибавляют раствор 13,9 г (0,1 моль) сернокислой S-метилизотиомочевины в 15 мл воды и нагревают на кипящей водяной бане при 80-85^оС в течение 2 ч. Выпавший осадок отфильтровывают и перекристаллизовывают из воды, выход 18,4 г (80,6%), т.пл. 234-235^оС, R_f 0,73, БХ Ватман N 1, система н-бутанол уксусная кислота вода (4:1:1), проявление парами йода или смесью равных объемов 10%-ных водных растворов нитропруссида натрия, едкого натра и красной кровяной соли.

Найдено, С 47,25; Н 6,32; N 18,11; S 7,32.

С₉Н₁₃N₃О ˙ 0,5 H₂SO₄
Вычислено, С 47,36; Н 6,18; N 18,41; S 7,02.

П р и м е р 3. 4-Метоксибензилгуанидин (1).

К раствору 5,7 г (0,025 моль) сернокислой соли 4-метоксибензилгуанидина в 30 мл воды прибавляют 20%-ный раствор гидроокиси натрия до рН 10-11. Выпавший кристаллический осадок отфильтровывают и перекристаллизовывают из этилового спирта, выход 4,0 г (88,8%), т.пл. 140-142^оС, R_f 0,75 (БХ аналогична примеру 2). Вещество быстро карбонизируется на воздухе.

Найдено, С 59,85; Н 6,80; N 22,90.

С₉Н₁₃N₃O.

Вычислено, С 60,32; Н 7,31; N 23,44.

В экспериментах на белых крысах-самцах массой 150-180 г исследовано влияние новых соединений на активность моноаминоксидазы (МАО) мозга крыс. Источником фермента служили 50% -ные гомогенаты мозга. В опытах in vitro продолжительность преинкубации соединений с ферментом 30 мин, концентрация соединений 0,1 и 1,0 мкмоль/мл пробы. В опытах in vivo соединение I и его сернокислую соль и индопан вводили подкожно в дозах 1 и 10 мг/кг за 1 и 18 ч до декапитации. Субстраты серотонин (5-ОТ), креатинина сульфат (марки Gee Lawson Chemicaly LTD) и норадреналина (НА) гидротартрат добавлены к пробам из расчета 10 и 30 мкмоль/мл пробы соответственно. Условия инкубации, фиксации проб и определении активности МАО описаны ранее. Содержание белка в гомегенатах определяли по методу Къельдаля.

С целью изучения влияния на содержание 5-ОТ и НА в мозге крыс соединение I и его сернокислую соль вводили подкожно в дозе 1 мг/кг за 1, 3, 18 и 48 ч до декапитации. Для сравнения изучен индопан в дозах 5 и 10 мг/кг. Содержание аминов в головном мозге определяли методом ионообменной хроматографии на смоле амберлит IRC-50.

Для выявления антидепрессивных свойств изучали влияние заявляемых соединений на способность резерпина потенцировать нембуталовый сон. Соединение I и его сернокислую соль вводили подкожно в дозах 1, 10 и 25 мг/кг, индопан в дозах 1 и 10 мг/кг за 1 ч до внутрибрюшинной инъекции резерпина (1,5 мг/кг). Через 1 ч после резерпина введен нембутал (20 мг/кг, внутрибрюшинно). О наступлении сна судили по исчезновению рефлекса выпрямления. Результаты исследования обработаны статистически по Стъюденту Фишеру.

В опытах на белых мышах (18-22 г) изучали острую токсичность заявляемых соединений и индопана, которые вводили внутрибрюшинно. На каждую дозу использовано 12 животных, ЛД₅₀ высчитана по методу Литчфильда-Уилкоксона.

Новые соединения в дозе 1 мг/кг повышают содержание 5-ОТ в мозге крыс. Максимальное увеличение количества амина (на 71% ) отмечено через 18 ч, восстановление исходного уровня 5-ОТ через 48 ч. Индопан лишь в дозе 10 мг/кг вызывал повышение содержания 5-ОТ на 20% в течение первого часа.

Соединение I и его сернокислая соль в дозе 1 мг/кг понижают содержание НА в мозге крыс на 18% через 1 ч после инъекции, индопан в дозе 10 мг/кг в этот срок повышает количество НА на 20% В дозе 5 мг/кг индопан не влияет на содержание 5-ОТ и НА.

Как видно из табл.1, в опытах in vitro соединение I и его сернокислая соль в концентрациях 0,1 и 1,0 мкмоль/мл угнетают активность МАО в отношении 5-ОТ и НА. ПО антимоноаминоксидазному действию в отношении 5-ОТ соединение I и его сернокислая соль напоминают индопан и превосходят его по влиянию на дезаминирование НА. Результаты угнетения активности МАО мозга крыс приведены в табл.2.

Как видно из табл.2. в опытах in vivo через 18 ч после введения в дозе 1 мг/кг сернокислая соль тормозит дезаминирование 5-ОТ и НА полностью, а соединение I на 40 и 55% соответственно. Сернокислая соль соединения I достоверно тормозит дезаминирование НА также через 1 ч после введения. Индопан, введенный в дозе 10 мг/ кг, не оказывает достоверного влияния на активность МАО через 1 ч после введения, через 18 ч тормозит дезаминирование 5-ОТ и НА слабее, чем сернокислая соль соединения I (см. табл.2).

Соединение I, как и индопан, в дозе 1 мг/кг препятствует потенцирующему влиянию резерпина на снотворный эффект нембутала. Продолжительность сна сокращается в среднем на 50% в сравнении с контролем. Индопан в дозе 10 мг/кг также препятствует потенцированию резерпином нембуталового сна, однако при этом 50% животных погибает. В отличие от индопана, соединение I даже в дозах 10 и 25 мг/кг, не оказывая токсического действия, сокращает продолжительность сна на 30%
ЛД₅₀ соединения I, его сернокислой соли и индопана приведены в табл.3.

Как видно из табл.3, разница в токсичности заявляемых соединений и индопана не существенна, если ЛД₅₀ выразить в г ˙молях вещества на 1 кг веса.

Заявляемые соединения по ЛД₅₀ близки к индопану. В опытах in vitro соединение I и его сернокислая соль близки к индопану по влиянию на дезаминирование 5-НО. В опытах in vivo оба соединения превосходят индопан по влиянию на активность МАО, тормозят дезаминирование в дозе 10 раз меньшей, чем индопана. Действие сернокислой соли соединения I, введенного в дозе 1 мг/кг, развивается через 1 ч, к 18 ч дезаминирование 5-ОТ и НА угнетено полностью. Индопан в дозе 10 мг/кг угнетает активность МАО в среднем на 60% через 18 ч.

Соединение I и его сернокислая соль повышают в мозге содержание 5-ОТ. Действие соединений продолжительное и выражено отчетливо в дозе в 10 раз меньшей, чем индопана. В отличие от индопана соединение формулы I и его сернокислая соль понижают содержание НА в мозге.

В сочетаниях с резерпином и нембуталом соединение I и его сернокислая соль подобно индопану оказывают антидепрессивное действие. В отличие от индопана в этих условиях введение заявляемых соединений в больших дозах не приводит к гибели животных.

4-Метоксибензилгуанидин или его сернокислая соль формулы

оказывающие ингибирующее действие на моноаминоксидазу мозга.