Способ извлечения иммуноглобулинов из биологических жидкостей Советский патент 1984 года по МПК G01N33/50 A61K47/00 

Изобретение относится к медицине, а именно, к сорбционным процессам извлечения токсичных компоненто (иммуноглобулинов) из крови и других биологических жидкостей,

Использование способа основано на том, что в крови больньпс с аутоиммунными заболеваниями повьппается концентрация иммуноглобулинов, особенно иммуноглобулинов класса Q.

Известен способ извлечения иммунглобулинов КЗ сыворотки крови человека с помощью им у обилизованного на сефарозе ЧВ белка А йз Staphylococcus aureus j,

Недостатками указанного способа являются сложность получения сорбен та, невозможность извлечения с его помощью различных иммуноглобулинов (сорбируется толькоЗ э но не Irf и Jtf.A), а также неудовлетворительные характеристики сорбента при проведении гемосррбции (низкая механическая прочность, неустойчивость к действию микроорганизмов, сложность стерилизации), Наиболее близким к предлагаемому по технической сушности и достигаемому положительному эффекту является способ извлечения иммуноглобулинов из биологических жидкостей |путем их пропускания через сорбент активированньй уголь 1.2 ,

Недостатками известного способа являются низкая избирательность сорбции им1-туноглобулинов (около 1% от общего количества адсорбирован™ ного белка) и малая емкость углей в отношении Ш1муноглобулннбв.

Цель изобретения - повышение избирательности и эффективности сорбции иммуноглобулинов.

Поставленная цель достигается согласно способу извлечения иммуноглобулинов из биологических жидкоетей путем их пропускания через сорбент, причем в качестве сорбента используют макропористый сополимер стирола и дивинилбензола, содержащий группы несимметричных диметилэтилен-бис-аммониевьгх оснований следующей структуры:

-Ш-СН

Гп1 +

::: LGHj--jQ(CH3)j-;CH2-CH2 N{CH3)2

Сущность изобретения заключается в использовании указанного вьпне специфического сорбента, отличительными характеристиками которого яе-ляется макропористость и наличие групп несимметричных диметилэтиленбис-аммониевых основанМ Полученный сорбент обладает пригодными для гемосорбции свойствами и в то же время эффективно и избирательно сорбирует иммyнoглo6yjiины,

Пример1, 1г макропористого сополимера стирола и дивинилбензола (в расчете на сухой вес,), содержание дивинилбензола 15%, с группами несимметричных диметилэтилен-бис-аммониевых оснований заливают 5 мл сыворотки донорской крови,выдерживают при 36 С и перемешивании в течение 2 ч. Затем сорбент отделяют, промывают физиологическим раствором и проводят элюирование сорбированных белков с последующим иммунохимическим анализом. Емкость сорбента по белкам (на 1 г) составляет, мг/г: общий белок 8,2, иммуноглобулин Q 1,92, иммуноглобулин М 0,08, иммуноглобулин А 0,64 Доля иммуноглобулинов от всего сорбированного белка составляет 32%.

Пример2„ 1,8 г макропористого сополимера стирола и дивинилбензола (содержание дивинилбензола 15 мас,%) с группами несимметричных диметилэтилен-бис-амиониевых оснований загружают в- колонку объемом S мл и перфузируют через нее лимфу человека со скоростью 0,5 мл/мин в течение 20 мин. Затем сорбент промывают физиологическим раствором и проводят элюирование сорбированных белков с последующим анализом. Емкость сорбента составляет: по общеьгу белку 5,9 мг/г по иммуноглобулину Q 1,64 мг/г. Доля иммуноглобулина G от всего сорбированного

белка составляет 28%. I

ПримерЗ. 1,8 г макропористого сополимера стирола и дивинилбензола (содержание дининилбензола 15 мас.%) с группами несимметричных диметилэтилен-бис-аммониевых основа.ний загружают в колонку объемом 5 м и перфузируют через нее нативную человеческую кровь со скоростью 0,3 мл/мин в течение 30 мин. Затем сорбент промьгоают физиологическим раствором и проводят элюирование собированных белков с последующим анализом. Емеость сорбента составляет: I по общему белку 10,1 мг/г, по иммуно глобулину Q 2,08 мг/г, по имкуно- глобулину М 0,08 мг/г, по иммуноглобулину А 0,72 мг/г. Доля иммуноглобулинов от всего сорбированного белка составляет 28%. Сравнение результатов, полученнбк по известному и предлагаемому способам, дано в таблице. Таким образом, использование пред лагаемого способа извлечения иммуноглобулинов из биологических жидкос19тей по сравнению с известным обеспечивает уменьшение общего количества извлекаемых из биологических жидкостей белков в результате большей избирательности сорбции иммуноглобулинов, возможность достижения .необходимой степени очистки биологических жидкостей от иммуноглобулинов при использовании небольших колонок вследствие увеличения емкости сорбента; возможность извлечения иммуноглобулинов всех классов.

СПОСОБ ИЗВЛЕЧЕНИЯ ИММУНО, ГЛОБУЛИНОВ ИЗ БИОЛОГИЧЕСКИХ ЩЦКОСТЕЙ путем их пропускания через. сорбенты, отличающийся тем, что, с целью повьшения избирательности и эффективности сорбции иммуноглобулинов , в качестве сорбента используют макропористый сополимер стирола и дивинилбензола, содержащий группы несимметричных диметилэтилен-бисаммониеЬых оснований следующей структуры : -Ш-СН2+ С1СН2-И(СНз)г-СН2-СН2-11(СНз)2 9

6,2 0,04

0,08

8,2 1,92

0,8

. 0,01

32

0,64