i
(Л
| название | год | авторы | номер документа |
|---|---|---|---|
| Способ получения эритроцитарного диагностикума | 1983 |
|
SU1124975A1 |
| Способ определения дозы сенситина,необходимой для получения эритропитарного диагностикума | 1983 |
|
SU1124229A1 |
| СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ДИАГНОСТИКУМА ЭРИТРОЦИТАРНОГО СИБИРЕЯЗВЕННОГО АНТИГЕННОГО ДЛЯ ОБНАРУЖЕНИЯ АНТИТЕЛ К ПРОТЕКТИВНОМУ АНТИГЕНУ | 2009 |
|
RU2410699C1 |
| Способ получения эритроцитарного диагностикума | 1991 |
|
SU1774872A3 |
| Способ отбора сырья для получения антилептоспирозной плазмы | 1990 |
|
SU1792709A1 |
| Способ получения бруцеллезного полистирольного латексного диагностикума | 2022 |
|
RU2798124C1 |
| СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЭРИТРОЦИТАРНОГО ДИАГНОСТИКУМА ДЛЯ РЕАКЦИИ НЕПРЯМОЙ ГЕМАГГЛЮТИНАЦИИ (РНГА) ПРИ МИКРОПЛАЗМОЗЕ СВИНЕЙ | 2007 |
|
RU2361218C1 |
| СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АНТИРОТАВИРУСНОГО ИММУНОГЛОБУЛИНА | 1998 |
|
RU2129017C1 |
| СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЭРИТРОЦИТАРНОГО АНТИГЕНА ДЛЯ РЕАКЦИИ НЕПРЯМОЙ ГЕМАГГЛЮТИНАЦИИ ПРИ БРУЦЕЛЛЕЗЕ | 2005 |
|
RU2283498C1 |
| СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЭРИТРОЦИТАРНОГО ДИАГНОСТИКУМА ДЛЯ РЕАКЦИИ НЕПРЯМОЙ ГЕМАГГЛЮТИНАЦИИ (РНГА) ПРИ МИКОПЛАЗМОЗЕ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА | 2007 |
|
RU2342155C1 |
Jim СО Ч
а:
Изобретение относится к вакцинно-сывороточному делу и может быть использовано, в технологии получения эритроцитарных диагностикумов медицинского.и. ветеринарного назначения.
В патентной и научно-технической литературе не известны способы отбора эритроцитов для получения эритроцитарного диагностикума.
Целью изобретения является созДс ние способа отбора эритроцитов для получения эритроцитарного диагностикума .
Поставленная цель достигается те что согласно способу отбора эритроцитов для получения эритроцитарного диагностикума, заключающемуся в том, что эритроциты выделяют из донорской крови, фиксируют, далее определяют заряд фиксированных эритроцитов и в качестве исходного сырья используют эритроциты с зарядом 4,12-10 - 3, Кл.
Способ осуществляется следующим образом. После получения цельной крови (например, бараньей) из нее выделяют эритроциты, затем их фиксируют формалином и подвергают аналитическому или препаративному клеточному электрофорезу, определяют заряд, а в качестве частицтносителей антигенов в дальнейшем производстве диагностикумов из всей популяции используют эритроциты с зарядом 4,1210 - 3, Кл.
При технической реализации предглагаемого сйособа для отбора эритроцитов предварительно устанавливают граничное значение величины заряда, при снижении которой у фиксированных эритроцитов ведут выбраховку эритроцитов. Граничные значения можно определить однократным определением заряда фиксированных эритроцитов; при параллельном контроле диагностикумов, изготовленных на этих эритроцитах. Согласно Регламенту производства контроль качества диагностикума осуществляется в реакции РИГА с гипериммунными сыворотками животных и сыворотками здоровых доноров, т.е. путем градуировки, как проиллюстрировано в примере. Причем по техническим ус.повиям Регламента производства диагностикум считается специфичным если титр его с сывороткой здорЪвых доноров в реакции РИГА менее чем 1/100.
Пример. Отбор фиксированных эритроцитов 1 мл формализированных эритроцитов барана, содержащихся в физиологическом растворе, осаждают центрифугированием при 350 в течение 5 мин с последующей двухкратной отмывкой и ресуспензированием в измерительной среде с параметрами: ионная сила (u 0,02; рИ 7,3; . Концентрацию эритроцитов в пробе доводят разбавлением ее измерительной средой до 5-10 5-10 клеток на 1 мл. Величину поверхностного заряда эритроцита рассчитывают по формуле g 3-lG 4.(i5 CG5E а US Кл, где измеряемой величиной является U электрофоретическая подвижность (ЭФП) , мкм С -вязкость (для используемых растворов равна 10 п) ; те -величина, обратная толщине двойного электрического слоя, которая для водных растворов одновалентных солей,(концентрации. См) равна-эег см/З.оьюсм : см ; S- площадь поверхности эрроцита, среднее значение которой равно 1, 65-ICT см.
ЭФП измеряют методом микроэлектрофореза на.приборе Пармоквант-2 (Карл Цейсе, Йена) в автоматическом режиме. Используемый прибор обеспечивает получение средних значений ЭФП и статистическу ю обработку данных. Сопоставительные данные полученных ЭФП эритроцитов в сравнении с определением специфичности препаратов (изготовленных на этих эритроцитах) по реакции РИГА даны в табл.
Из приведенных данных контроля ЭФП восьми партий формализированных эритроцитов (колонка 1) в сопоставлении с титрами РИГА диагностикумов изготовленных на этих эритроцитах (колонки- 2 и 3), первые четыре партии и жидких, и сухих препаратов , имеют титры больше, чем 1/100, т.е. по техническим условиям Регламента производства их надо забраковать. У всех этих партий эритроцитов ЭФр меньше 2 мкм С В см. Препараты партий, 5-8 имеют титр меньше 1/100, т.е. соответствуют ТУ. ЭФП этих партий больше 2 мкм В см. Причем препарат , эритроциты которого имеют ЭФП 1,93 мкм см, имеют титр 1/150 и 1/300, т.е. являются плохим а препарат, ЭФП которого 2,02 мкм см имеют титр 1/50, т.е. являются хорошими. Таким образом, нижняя граница значений ЭФП, при которой необходимо проводить отбра ковку эритроцитов, равна 2 мкм С- В см или 3,3-10 Кл.
Верхняя граница значений ЭФП фиксированных эритроцитов определяется природой поверхности нативных эритроцитов барана.Это значение оказалось равным 2,5 мкм Свсм или
4-1210 Кл.
Визуальный контроль спонтанной
агглютинации не позволяет выявить плохие эритроциты и диагностикумы бракуют после их изготовления, а , использование предлагаемого способа предотвращает выпуск неспецифического диагностикума. Кроме того, предлагаемый способ позволяет проводить отбраковку эритроцитов быстро, сразу после их фиксации, т.е. отпадает необходимость длительного изготовления диагностикумов на этих эритроцитах и постановки РИГА с донорскими сыворотками.
