Штамм @ 125/121 серовара 59,используемый для получения моноспецифической диагностики сыворотки Советский патент 1986 года по МПК C12N1/12 A61K39/40 C12N1/20 C12R1/63 

S

Штамм Vibrio Nag 125/121 серовара 59, М-298 (коллекция музея живых культур Института Микроб),используемый для получения моноспецифической диагностической сыворотки.

О) 00 О) 00 О1

Изобретение относится к микробиологической промышленности, в частности, к производству сывороточных препаратов.

Целью изобретения является новый штамм Vibrio Nag 125/121 серовара 59 пригодньй для получения моноспецифической диаг ностической сыворотки.

Морфологические признаки, ПОДВРШные изогнутые палочки с одним полярно расположенным жгутиком, спор я капсул не образуют, по Граму не окрашиваются.

Культуральные признаки. На 1%-ной пептонной воды вызыва ют помутнение, на плоском агаре образуют .гладкие, круглые, плоско-выпуклые, прозрачные колонии диаметром 2-2,5 мм.

Физиологические свойства. Оксидазоположительны, ферментируют глюкозу и маннит (до кислоты без газа) не ферментируют инозит и салицин, образуют индол, декарбоксилируют лизин и орнитин и не дигидрируют аргинин, не фосфоресцируют, относятся к I группе Хейберга, дают феномен тяжа, не растут на 1%-ной .аептонной воде с 7% и 10% хлорида натрия, не агглютинируются холерными диагностическими 0-, Огава-, йнаба-, РО-, ОН-сыворотками, не лизируются холерными фагами С, Эльтор ДЦФ 3,4,5 и ТЭПВ .1,2,3,4,5,6,7.

Антигенные свойства. Обладают специфическим 0-антигеном. При иммунизации животных вызывают образование специфических агглютининов . Полученная сьшоротка агглютинирует штаммы гомологичного серовара и не агглютинирует культуры гетерологичных сероваров.

.

Дпя приготовления моноварной сыворотки используют 0-антиген штамма Vibrio Nag 125/121.

Культуру штамма Vibrio Nag 125/121 высевают на 1%-ную пептоннук) воду, рН 7,6 и выраш 1вают 4 ч при температуре 37°С, затем пересевают на агар, содержащий настой из сердечной мьш1цы с рН 7,6. Посевы инкубируют при температуре 37°С в течение 18-20 ч. С агара культуру смывают физиологическим раствором с рН 7,2. Полученную микробную массу кипятят при 100°С в течение 2 ч. Затем дважды отмывают физиологическим раствором центрифугированием. Микробную взвесь после контроля на стерильность используют для иммунизации кроликов.

Кроликов иммунизируют трехкратно с трехдневными перерьшами; первую и вторую инъекции делают подкожно по 20 млрд. микробных тел, третью внутренне 5 млрд, микробных тел. На j7 сут после третьей инъекции кроликов обескровливают. Сыворотку инактивируют мертиолатом натрия 1:10000. Титры сывороток составляют 1:6400. После адсорбции гетерологичных антител титры сывороток - 1:3200. За диагностический титр принято разведение сыворотки 1:400.

Сыворотку применяют в реакции агглютинации со штаммами вибрионов 2-58 сероваров, известных на территории СССР. Реакцию агглютинации ставят объемным методом в пробирках, сыворотку используют в одном разведении - диагностическом титре. Для разведения сывороток и приготовления взвесей культур используют физиологический раствор рН 7,2.

Положительной считают реакцию с оценкой 4-2 +.

Сыворотка против 59 серовара патогенных вибрионов строго специфична и достаточно активна. Положительная -реакция отмечалась только с гомологичным штаммом.