Штамм бактерий VIвRIо NaG серовара 078, используемый для изготовления диагностической сыворотки Советский патент 1991 года по МПК C12N1/20 A61K39/106 

Изобретение относится к области медицинской микробиологии, а именно к серологической идентификации патогенных вибрионов.

Целью изобретения является штамм Vibrio Nag KM-48 (1267) нового серовара 078, используемый для приготовления мо- новарной диагностической своротки для идентификации патогенных вибрионов.

Штамм Vibrio Nag KM-48 (1267) обладает всеми свойствами, характерными для рода Вибрио (табл. 1, 2).

Морфологические признаки. На плотном агаре образует гладкие с ровным краем прозрачные колонии диаметром 2-2,5 мм. В жидких средах вызывает равномерное помутнение и образует на поверхности пленку.

Физиологические свойства. Оксидазо- положительный, относится к I группе Хей- берга, ферментирует глюкозу и маннит до кислоты без газа, не ферментирует инозит и салицин, декарбоксилирует лизин и орнитин и не дигидрирует аргинин, не фосфоресцирует, вызывает гемолиз и гемагглютинацию эритроцитов барана, не растете 1 % пептон- ной воде с добавлением 7 и 10% хлорида натрия. Штамм Vibrio Nag KM-48 (1267) не агглютинируется холерными диагностическими сыворотками. Не лизируется фагами С, эльтор, ХДФ. 4, 5, ТЭПВ 3, 5, 6, 7. -Лизируется фагамиХДФ 3 в ДРТ,ТЭПВ 1 в ДРТ,ТЭПВ2.4в10 3Г

Обладает специфическим 0-антигеном. При иммунизации животных 0-антигеном данного штамма происходит образование специфических антител.

О

о

00 СА Ю

О

Изобретение иллюстрируется следующим примером.

Для приготовления моноварной диагностической сыворотки 078 серовара используют 0-антиген штамма Vibrio Nag KM-48 (1267). Культуру штамма высевают в 1 % пеп- тонную воду, рН 7,6 и выращивают при 37°С в течение 4 ч, затем пересевают на свежескошенный агар, содержащий настой сердечной мышцы, рН 7,6. Посевы инкубируют при 37°С в течение 18-20 ч. С поверхности агара культуру смывают физиологическим раствором рН 7,2. Полученную микробную взвесь кипятят при 100°С в течение 2 ч с момента закипания в 10%-ном растворе хлорида натрия. Затем взвесь дважды отмывают физиологическим раствором рН 7,2 путем центрифугирования. После контроля на специфическую стерильность микробную взвесь используют для иммунизации животных.

Кроликов породы шиншилла весом 2- 2,5 кг иммунизируюттрехкратно стрехднев- ными интервалами: первую и вторую инъекции делают подкожно по 20 млрд м.т., третью - внутривенно - по 5 млрд м.т. На седьмые сутки после последней инъекции

.кроликов обескровливают. Сыворотку консервируют путем добавления мертиолата натрия 1:10000. Титры сывороток составляют 1:3200. После адсорбции гетерологичные

антитела полностью извлекаются. За диагностический титр принято разведение 1:400.

Сыворотку применяют в реакции агглютинации с вибрионами, выделяемыми от

больных острыми кишечными заболеваниями людей. Реакцию агглютинации ставят объемным методом в пробирках в одном разведении - диагностической титре. Для разведения сывороток и приготовления

взвесей культур используют физиологический раствор рН 7,2. Положительной считают реакцию с оценкой 2-4 +.

Сыворотка против вибрионов нового 078 серовара строго специфична и высокоактивна. Положительная реакция отмечается только с вибрионами 078 серовара (табл. 2).

Формула изобретения Штамм бактерий Vibrio Nag KM-48 (1267) серовара 078, используемый для изготовления диагностической сыворотки.

Таблица 1

Изобретение относится к области медицинской микробиологии, а именно к серологической идентификации патогенных вибрионов. Цель изобретения - штамм VIBRIO NAG КМ - 48 (1267) нового серовара 078, используемый для приготовления моноварной диагностической сыворотки для идентификации патогенных вибрионов. По морфологическим, культуральным и физиологическим свойствам штамм относится к роду Вибрио. Обладает специфическим О-антигеном, при иммунизации животных образуются специфические антитела. Полученная сыворотка агглютинирует вибрионы только гомологичного серовара и не реагирует с вибрионами гетерологичных сероваров. Полученная сыворотка имеет большое практические значение при диагностике кишечных заболеваний, так как расширяет возможности дифференцирования энтеропатогенных вибрионов. 3 табл.

Таблица 2

Таблица 3