Штамм бактерий VIвRIо сноLеRае еLтоR, используемый для получения диагностических сывороток Советский патент 1991 года по МПК C12N1/00 A61K39/40 A61K39/106 

Изобретение относится к медицинской микробиологии, а именно к серологической индентификации патогенных вибрионов, и может быть использовано для получения специфической диагностической сыворотки.

Целью изобретения является штамм Vibrio cholerae eltor 27, используемый для получения сыворотки, агглютинирующей холерные и неагглютинирующиеся вибрионы 27 серовара.

Штамм V.cholerae eltor 27 выделен из популяции 1043-62 27 серовара при помощи способа отбора токсигенных клонов V.cholerae 01.

Штамм Vibrio cholerae eltor 27 депонирован в коллекции Всесоюзного научно-исследовательского противочумного института Микроб под Мг КМ-34(27). Штамм КМ-34(27) обладает следующими признаками.

Морфологические признаки. Подвижные изогнутые палочки с одним полярно расположенным жгутиком, спор и капсул не образует. Грамотрицательный.

Культуральные признаки. На 1%-ной пептонной воде вызывает помутнение, на плоском агаре образует гладкие круглые полупрозрачные с голубоватым оттенком колонии диаметром 2 - 2,5 мм.

Физиологические свойства. Оксид-положителен, ферментирует глюкозу и маннит (до кислоты без газа), не ферментирует инозит и салицин, образует индол, декарбокси- лирует лизин и орнитин и не дегидрирует аргинин, не фосфоресцирует, относится к I группе Хейберга, дает феномен тяжа, не растет на 1%-ной пептоновой водес7и 10% хлорида натрия, агглютинируется холерными диагностическими О, ОН и Инаба сыворотками, не агглютинируется Огава, RO- сыворотками, не лизируется холерны(

00

Јь

00 00 CJ

ми фагами С. Лизируется холерными фагами эльтор и ХДФз-5.

Антигенные свойства. Обладает холерными 0-антигенами. При иммунизации животных вызывает образование холерных агглютининов. Полученная сыворотка агглютинирует холерные вибрионы и исходную культуру (вибрион 27 серовара), но не агглютинирует штаммы 2-26, 28-56 сероваров.

П р и м е р 1. Получение сыворотки. Культуру штамма Vibrio cholerae eltor 27 высевают на 1 %-ную пептонную воду рН 7,6 и выращивают 4 ч при 37°С, затем пересеивают на мясопептонный агар рН 7,6. Посевы инкубируют при 37°С в течение 18 - 20 ч. С агара культуру смывают физиологическим раствором рН 7,2. Микробную массу кипятят при 110°С в течение 2 ч, дважды отмывают физиологическим раствором центрифугированием. Микробную взвесь после контроля на стерильность используют для иммунизации кроликов.

Кроликов иммунизируют трехкратно с трехдневными перерывами: первую и вторую инъекции делают подкожно по 20 млрд м.т., третью - внутривенно 5 млрд м.т. На 7 сутки после третьей инъекции кроликов обескровливают. Сыворотку инактивируют мертиолятом натрия 1:10000.

Титры сывороток составляют 1:1600 - 1:3200 Сцля холерных вибрионов) и 1:200 1:400 с исходным штаммом. Сыворотку применяют в реакции агглютинации с холерными штаммами, а также вибрионами 2-56 сероваров. Реакцию агглютинации ставят в пробирках объемным методом. Для разведения сыворотки и приготовления взвесей культур используют физиологический раствор рН 7,2.

Сыворотка против V.chrjlerae eltor 27 агглютинирует как холерные вибрионы эльтор, так и Vibrio Nag 1043-62 27 серовара. Данные приведены в таблице.

Штамм Vibrio cholerae eltor KM-34(27) имеет большое практическое значение, так как позволяет получить специфическую сыворотку для диагностики кишечных заболеваний, вызываемых патогенными вибрионами.

Формула изобретения Штамм бактерий Vibrio cholerae eltor

КМ-34(27), используемый для получения диагностических сывороток.

Изобретение относится к медицинской микробиологии, а именно к серологической идентификации патогенных вибрионов. Целью изобретения является штамм Vibrio cholerae eltor 27, используемый для получения сывороток и агглютинирующий холерные и неагглютинирующиеся вибрионы 27 серовара. Штамм Vibrio cholerae eltor 27 выделен из популяции 1043-62 27 серовара при помощи способа отбора токсигенных субкультур Vibrio cholerae eltor 01 и депонирован в колл екции музея живых культур Всесоюзного научно-исследовательского противочумного института Микроб под номером КМ-34(27). При использовании штамма Vibrio cholerae eltor 27 возможно получение сыворотки для диагностики кишечных заболеваний, вызываемых патогенными вибрионами. 1 табл.