Штамм @ @ 19131 серовара 58,используемый для получения моноспецифической диагностической сыворотки Советский патент 1986 года по МПК C12N1/20 A61K39/395 C12N1/20 C12R1/63 

Ю

Од

1 1

Изобретение относится к микро- , биологической промьгашенности, в астности к производству вакцинносывороточных iipenapaTOB,

Цель изобретения - выявление штам а Vibrio Nag, неизвестного ранее серовара 58, пригодного для получения соответствующей диагностической сыворотки.

Морфологические признаки. Подвижные изогнутые палочки с одним поярно расположенным жгутиком, спор и капсул не образуют, по Граму не Окрашиваются.

Культуральные признаки.. На 1%-ной пептонной воде вызывают помутнение, на плотном агаре , образуют гладкие, круглые, ппосковыпуклые, прозрачные колонии диаметром 2-2,5 мм.

Физиологические свойства. Оксиазоположительны, ферментируют глюкозу и маннит (до кислоты без газа), не ферментируют инозит и салицин, образуют индел, декарбоксилируют лизин и орнитин и не дигидрируют ргинин, не фосфоресцируют, относятся к 1 группе Хейберга, дают феномен тяжа, не растут на 1%-ной пептонной воде с 7% и 1P% хлорида, натрия,, не агглютинируются холерными диагностическими 0-, Огава-, Инаба-, RO-, ОН-сьшоротками, не лизируются холерными фагами С, Эльтор, ХДФ 3, 4, 5 и ТЭПВ 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7.

Антигенные свойства. Обладают специфическим 0-антигеном„ При иммунизации животных вызьгеают образование специфических агглютининов. Полученная сьшоротка агглютинирует штаммы гомологичного серовара и не агглютинирует культуры гетерологичных сероваров.

Для приготовления моноварной сыворотки используют 0-антиген штамма Vibrio Nag 19131.

722602

Культуру штамма Vibrio Nag 1.9131 серовара, М-297 высевают-на 1%-ную пептонную воду рН 7,6 и выращивают 4 ч при , затем пересеивают на 5 агар, содержащий настой,из сердечной мышцы рН 7,6, Посевы инкубируют при в течение 18-20.ч. С агара культуру смывают физиологическим раствором рН 7,2. Полученную микроб0 ную массу при 100°С кипятят 2 ч. Затем дважды отмывают физиологическим раствором центрифугированием. Микробную взвесь после контроля на стерильность используют для иммунизации кроликов.

Кроликов иммунизируют трехкратно ; с трехдневными перерывами: первую и вторую делают подкожно по 20 млрд М.Т., третью - внутривенно 5 млрд

20 м.т. На 7 сутки после третьей инъекции кроликов обескровливают. Сыворотку инактивируют мертиолатом натрия 1:10000. Титры сьшороток составляют 1:6400. После адсорбции гетеро25 логических антител титры сьшороток 1:3200. За диагностический титр. принято разведение сыворотки 1:400,

Сыворотку применяют.в реакции агглютинации с вибрионами 2-57 сероваров, известных на территории СССР.

Реакцию агглютинации ставят , объемным методом в пробирках, сыворотку используют в одном разведении - диагностическомтитре. Для разведения сывороток и приготовления взвесей культур используют физиологический раствор рН 7,2.

Положительной считают реакцию с оценкой 4-2 +.

Сыворотка против 58 серовара патогенных вибрионов строго специфична и достаточно активна. Положительная реакция отмечалась только с гомологичным штаммом.

Штамм Vibrio Nag 19131, М-297 (коллекция музея живы:( культур института Микроб), используемый для получения моноспецифической диагностической сыворотки.