Штамм бактерий VIвRIо сноLеRае еLтоR, используемый для получения диагностических сывороток Советский патент 1991 года по МПК C12N1/00 A61K39/106 A61K39/40 

Изобретение относится к медицинской микробиологии, а именно к серологической идентификации патогенных вибрионов, и может быть использовано для получения специфической диагностической сыворотки.

Цель изобретения - получение штамма Vibrio cholerae eltor 24, используемого для получения сыворотки, агглютинирующей холерные и неагглютинирующиеся вибрионы 24 серовара.

Штамм Vibrio cholerae eltor 24 выделен из популяции Vibrio Nag 1443862 серовара при помощи способа отбора токсигенных клонов V.cholerae 01.

Штамм Vibrio cholerae eltor 24 депонирован в коллекции Всесоюзного ордена Тру- дового Красного Зна мени НИ противочумного института Микроб под Nfe КМ-32(24).

Штамм Vibrio cholerae eltor KM-32(24) обладает следующими признаками

Морфологические признаки. Подвижные изогнутые палочки с одним полярно расположенным жгутиком, спор и капсул не образует. Грамотрицательны.

Культуральные признаки. На 1%-ной пептонной воде вызывают помутнение, на плоском агаре образуют гладкие круглые полупрозрачные с голубоватым оттенком колонии диаметром 2 - 2,5 мм

Физиологические свойства. Оксидазо- положительны, ферментируют глюкозу и маннит(до кислоты без газа), не ферментируют инозит и салицин, образуют индол, декарбоксилируют лизин и орнитин и не дегидрируют аргинин, не фосфоресцируют, относится к I группе Хейберга. дает феномен тяжа, не растет на 1 %-ной пептонной воде с 7 до 10% хлорида натрия, агглютиниО 00 Јь CJ

со

N

руются холерными диагностическими О, Инаба, ОН сыворотками, не агглютинируются Огава, РО сыворотками, не лизи- руются холерными фагами, С ХДФ лизируются холерными фагами эльтор.

Антигенные свойства. Обладает холерным Оантигеном. При иммунизации животных вызывает образование холерных агглютининов.

Полученная сыворотка агглютинирует холерные вибрионы и исходную купьтуру (вибрионы 18 серовара), но не агглютинирует штаммы 2-56 сероваров,

П р и м е р 1. Получение сыворотки. Культуру штамма Vibrio cholerae eltor 24 вы- севают на 1 %-ную пептонную воду (рН 7,6) и выращивают 4 ч при 37°С, затем высевают на мясопептонный агар(рН 7,6). Посевы инкубируют при 37°С в течение 18 - 20 ч. Культуру смывают физиологическим раство- ром (рН 7,2). Полученную микробную массу кипятят при 100°С в течение 2 ч, дважды отмывают физиологическим раствором при центрифугировании. Микробную взвесь после контроля на стерильность используют для иммунизации кроликов.

Кроликов иммунизируют трехкратно с трехдневными перерывами: первую и вторую инъекции делают подкожно по 20 млрд м.т., третью внутривенно 5 млрд м.т. На 7 сутки после третьей инъекции кроликов обескровливают. Сыворотку инактивируют мертиолятом натрия 1:10000. Титры сывороток составляют 1:1600. 1:3200 (для холерных вибрионов) и 1:200 - 1:400 с исходным штаммом. Сыворотку применяют в реакции агглютинации с холерными штаммами, а также вибрионов 2 -56 сероваров. Реакцию агглютинации ставят в пробирках объемным методом, Для разведения сывороток и приготовления взвесей культур используют физиологический раствор (рН 7,2). Сыворотка против Vibrio cholerae eltor KM-32(24) агглютинирует как холерные вибрионы эльтор, так и Vibrio Nag 1438-62 серовара 24 (см.таблицу).

Штамм Vibrio cholerae eltor KM-32(24) имеет большое практическое значение, так как позволяет получить специфическую сы- вэротку для диагностики кишечных заболеваний, вызываемых патогенными вибрионами.

Формула изобретения Штамм бактерий Vibrio cholerae eltor КМ-32(24), используемый для получения диагностических сывороток.

Изобретение относится к медицинской микробиологии, а именно к серологической идентификации патогенных вибрионов. Целью изобретения является штамм Vibrio cholerae eltor 24, используемый для получения сыворотки, агглютинирующей холерные и неагглютинирующиеся вибрионы 24 серовара. Штамм Vibrio cholerae eltor 24 выделен из популяции Vibrio Nag 1443862 24 серовара при помощи способа отбора токсигенных культур Vibrio cholerae 01 и депонирован в коллекции музея живых культур Всесоюзного научно-исследовательского противочумного института Микроб под номером КМ-32 (24). При использовании штамма Vibrio cholerae eltor KM-32(24) возможно получение сыворотки для диагностики кишечных заболеваний, вызываемых патогенными вибрионами. 1 табл. fe