Способ диагностики скрытой патологии почек Советский патент 1985 года по МПК A61B10/00 

м

со

;О 00 Од Изобретение относится к медицине, в частности к способам диагностики заболеваний почек, а именно, выявлению мапосимптомных форм. Целью изобретения является ранняя диагностика заболевания. На чертеже изображены спектрограммы мочи здоровых доноров и больных. Способ диагностики скрытой пато логии почек предусматривает исследование кислоторастворимых компоне тов мочи путем определения спектра ультрафиолетовой (УФ ) абсорбции, у тановления отношения значений посл ней на 280 нм к 255 нм. Пробы утренней мочи больного в количестве 1,0 мл обрабатывают , 0,5 мл 10%-ным раствором, трихлоруксусной кислоты и центрифугируют со скоростью 3000 обУмин в течение 30 мин, супернатант разводят дважды В первый раз к 0,5 мл супернатанта добавляют 4,5 мл . После тщател ного перемешивания осуществляют по торное разведение при соотношении супернатанта и дистиллята 1:10. Детекцию проводят на спектрофотоме ре в ультрафиолетовой области при 255 нм и 280 нм, вычисляют соотношение показателя экстинции при 280 нм к аналогичному показателю п 255 нм. Оно составляет менее 0,9, поэтому у больного циагносцируют патологию почек, что подтверждается последующими клиническими исследова ниями. Получаемый спектр является резул тирующим суммы спектров индивидуаль ных компонентов, Ультрафиолетовый спектр кислото-растворимых компонен тов мочи здоровых доноров имеет чет кую характеристику, параметры колеб ния которой достаточно ограничены. В качестве клинически информативных выделены три показателя. Первый показатель - форма спектральной кривой, определяемая положением максимальных и минимальных значений абсорбции на шкале длин волн от 240 до 300 нм. Второй показатель - расс яние между экстремумами, выраженное в шагах ( один шаг соответствует 5 нм), третий показатель - величина коэффициента К, определяемого как отношение значений абсорбции 280 : 255 нм (фиг.), Нарушения функции почек сопровождаются отчетливым изменением выделенных показателей вплоть до полного искажения профиля спектральной кривой. Пример 1. Исследование мочи практически здоровых доноров. В пробирки 1 и 2 вносят по 1 мл мочи практически здоровых доноров С. и X. В каждую .пробирку добавляют по 0,5 мл 10%-ного раствора трихлоруксусной кислоты. Центрифугирование проводят со скоростью 3000 об/мин в течение 30 мин. По 0,5 МП надосадка, отобранного из пробирок 1 и 2, вносят в две чистые пробирки, добавляют в каждую из них по 4,5 МП дистиллята,перемешивают,вновь: отбирают по 0,5 мл смеси и вносят в новые пробирки, содержаище по 4,5 мп дистиллята. Разведение полученного в каждой пробирке раствора 1:100 по отношению к исходному. На спектрофотометре СФ-2( вдиапа- зоне волн нм проводят параллельное определение оптической плотности полученных растворов. В качестве контроля используют . Запись показателей ведут через каждые 5 нм, Полученные показатели зкстинкции , представлены в табл. 1-. Рассчитывают величины коэффициентов К и показателей ширины шага (Ш ) Величина коэффициента К, численно равная .отношению показателя экстинкции при 280 нм к аналогичному показателю при 255 нм, равна для донора С, 1,3. Величина К для донора X. 1,18. Учитывая, что величина К в группе здоровых доноров составляет 1,15+ 0,16, находим, что состав мочи доноров С. и X. по выбранному критерию отвечает норме. Величины показателя Ш, определяемого как отношение в манометрах между первым минимальным и вторым максимальным экстремумами к 5 (условная единица шага ) составляют: для донора С, 5 ед,, а для донора X, 4 ед. Указанные величины также укладываются в границы колебаний показателя в норме. Пример 2. Исследование мочи больных отделения гемодиализа и пересадки почки. В пробирки 1 и 2 вносят по 1 мп мочи больных р. и Ш. соответственно. В каждую пробирку добавляют по 0,5 МП 10%-ного раствора трикпоруксусной кислоты. Центрифугирование проводят со скоростью 3000 об/мин

31

в течение 30 мин. Осуществляют двои- вое разведение надосадка. На первом этапе разведения добавляют 0,5 мл надосадка к 4,5 мл дистиллята, на втором - 0,5 мл полученного после первого разведения раствора в пробирку, содержащую 4,5 мл . Таким образом, конечное разведение раствора в каждой, пробе составляет 1:100 от исходной концентрации надосадка.

Измерение оптической плотности в диапазоне волн 240 - 300 нм осуществляют, на спектрофотометре СФ-26. Запись показателей ведут через каждые 5 нм. В качестве контроля используют дистиллят.

Показатели, полученные при спектрометрии растворов в пробирке 1 (от больного Р ) и в пробирке 2 (от больного Ш )представлены в табл.2.

Рассчитываем величины коэффициента Ки показателей Ш. Величина коэф(|ициента К, численно равная отношению показателя зкстинции при 280 нм к аналогичному показателю при 255 HM составляет для больного Р. 0,94, а для больного Ш. 0,69. Таким образом, величины коэффициента К в обоих случаях выходят за пределы нормы-, причем у больного Ш. снижение К выражено в большей степени.

Расчет показ ателейШ, определяемо го как частное от деления расстояния в нанометрах между первым минимальным и вторым максимальным экстремумами на 5 показал, что величина Ш для больного Р. составляет 2, а для больного Ш. О, т.е. полученные показатели свидетельствуют о резком из39864

менении формы спектральной кривой и отсутствии второго максимального экстремума. 7Таким образом, по показателю Ш состав мочи больных Р. и Ш.

не укладывается в границы колебаний нормы 5-3 ед.

Спектральная характеристика мочи практически здоровых людей имеет вид кривой с двумя экстремумами: минимальным, определяемым на длине волны, равной 255 нм, и максимальным, определяемым н& длине волны, равной 280 нм. Расстояние между экстремумами на спектральном профиле мочи здоровых доноров составляет 3-4 щага, т.е. 15-20 нм. Величина коэффициента К для здоровых доноров соответствует 1,15.

В зависимости от степени выраженное

0 ти поражения почек имеют место различные варианты изменения спектра ультрафиолетовой абсорбции.

В табл.3 даны параметры спектромет рического исследования мочи здоровых

5 доноров и больных с заболеваниями почек.

Компенолрованные и малосимптомиые формы почечных заболеваний характеQ ризуются более легкими нарушениями кривой - уменьшением величины шага до 1-2 и снижением коэффициента до 0,9.-.0,8. При тяжелых формах заболеваний почек с развитием острой почечной недостаточности или хроничес кой почечной недостаточности спектр ультрафиолетовой абсорбции кислоторастворимого элюата мочи приобретает вид прямой с максимальным значением на 240 нм и минимальным на 300 нм.

Таблица 3

СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ СКРЫТОЙ ПАТОЛОГИИ ПОЧЕК путем исследования мочи, отличающийся тем, что, с целью ранней диагностики заболевания, мочу обрабатывают 10%ным раствором трихлоруксусной кислоты, центрифугируют, далее супер натант фотометрируют при 255 нм и . 280 нм, определяют соотношение между показателем экстинции при 280 нм и показателем экстинции при 255 нм и при величине этого значения 0,9 и ниже диагностируют патоло

Здоровые 0,573- 0,445 0,355 доноры ±0,30 ±0,21 ±0,17 Больные отделения 0,475 0,363 0,.297 пересадки 65 ±0,25 ±0,18 ±0,15 почек НИИТиИО МЗ tCCP Больные неф рологического отделе- 41 0,524 0,406 0,343 ±0,29 ±0,22 ±0,22 ния больницы имени С.П.Боткина

Группы исследуемых

Продолжение табл.3 0,330 0,342 ±0,15 ±0,16 ±0,17 0,270 0,257 0,258 +0,4 ±0,14 ±0,14 0,316 0,310 0,293 ±0,26 ±0,27 ±0,19