Способ определения фентоламина гидрохлорида Советский патент 1985 года по МПК G01N21/64 

1 Изобретение относится к аналитической химии, а именно к способам количественного определения фентоламч.на гидрохлорида (гидрохлорид 2- к-п-толш1-М-(м-оксифенил) аминометил имидазолина), и может быть использовано в клинических лабораториях, контрольно-аналитических лабораториях аптекоуправлений, заводских и судебно-химических лабора ториях. Целью изобретения является повышение чувствительности и избиратель ности определения. Способ осуществляется следующим образом. Качественное определение фентоламина гидрохлорида. К крупинке порошка или мелкоизмельченных таблеток фентоламина гид рохлорида прибавляют 1 мл уксусной кислоты, встряхивают, затем к полученному раствору прибавляют 1 мл. ук сусного ангидрида, 0,1 мл .30%-ной хлорной кислоты, в результате чего при облучении ультрафиолетовым светом с длиной волны 365 нм появляетс интенсивная зеленая флуоресценция. Количественное определение фенто амина гидрохлорида. 0,1 г (точная навеска) порошка фентоламина гидрохлорида переносят мерную колбу на 100 мл, прибавляют 80-90 мл уксусной кислоты, растворяют фентоламин гидрохлорид и доводят объем уксусной кислотой до метки, 5 мл полученного раствора переносят в мерную колбу на 100 мл и до водят объем уксусной кислотой до метки. К 1 мл полученного раствора прибавляют 1,0 мл уксусного ангидрида, 0,1 мл 30%-ной хлорной кислоты, встряхивают и добавляют 7,9 мл уксу ной кислоты. Раствор тщательно перемешивают и измеряют относительную интенсивность флуоресценции. Параллельно проводят опыт со стандартным раствором фентоламина гидрохлорида и контрольный опыт. Б. качестве стандартного берут раствор концентрацией 5 мкг/мл. Контрольный опыт проводят с чистой уксусной кислотой, уксусным ангидридом и 30%-ной хлорной кислотой Концентрацию измеряемого раствора рассчитывают по с - - .. Н„ - Н С - концентрация исследуемого раствора фентоламина гидрохлорида;С,- концентрация стандартного раствора фентоламина гидрохлорида ; Н.- показатель электрофлуориметра для исследуемого раствора;Н - показатель электрофлуориметра для контрольного опыта; Hg- показатель электрофлуориметра для стандартного раствора. Результаты определения фентоламигидрохлорида в порошке приведены абл.1. . Таблица 1 Определение фентоламина гидрохлоа в таблетка.х по 0,025. 0,1 г (точная навеска) мелко изьченных таблеток переносят в ную колбу емкостью 100 мл, приляют 80-90 мл уксусной кислоты, творяют,. доводят объем уксусной лотой до метки и перемешивают. 50 мл данного раствора переносят ерную колбу на 100 мл и доводят ем до метки уксусной кислотой. К 1,0 мл исследуемого раствора парата прибавляют 1,0 мл уксусо ангидрида и 0,1 мл 30%-ной рной кислоты, встряхивают, приляют 7,9 мл уксусной кислоты и еряют относительную флуоресценна электрофлуориметре. Приготовляют стандартный раствор 5,0 мкг/мл и измеряют относительную интенсивность флуоресценции. Концентрацию фентоламина гидрохлорида определяют по указанной фор- 5 муле. Определение фентоламина гидрохлорида в моче (искусственная смесь). К 2 мл мочи, содержащей 100 мкг/мл препарата, добавляют 2,0 мл 0,2 М 10 универсального буфера (рН 11,0) и экстрагируют 8 мл хлороформа три раза в течение 5 мин. Хлороформный слой сливают в выпарительную чашку и выпаривают на водяной бане до 0,05- ti 0,1 мл. Полученный раствор наносят на хроматографическую пластинку Силуфол УФ-254. На пластинку наносят раствор фен- толамина в метаноле в концентрации 20 50 мкг/мл (свидетель). Пластинку с нанесенными пятнами высушивают в воздухе в течение 5 мин и помещают в хроматографическую камеру со смесью растворителей гексан:ацетон:аммиак 25. 25% в соотношении 5:20:2 и хроматографируют восходящим методом. Когда фронт растворителей пройдет 10 см, пластинку вынимают из камеры и сушат на воздухе в течение 5 мин. Локализацию пятен определяют в УФ свете с длиной волны 254 нм по гашению флуоресцентного индикатора. R 0,32. Пятно препарата количественно переносят в центрифужную пробирку, прибавляют 1 мл уксусной кислоты, 1,0 мл уксусного ангидрида и 0,1 мл 30%-ной хлорной кислоты. Встряхивают, прибавляют 7,9 мл уксусной кислоты, центрифугируют при 3000 об/мин в те- о чение 10, мин. Прозрачный раствор сливают в кювету и измеряют относительную флуоресценцию стандартного раствора концентрацией 20 мкг/мл и контрольного раствора. Концентрацию фентоламина гидро- хлорида определяют по указанной формуле. Результаты определения фентоламина гидрохлорида в моче (искусственная смесь) приведены в-табл. 2. Таблица 2 рид (ис в м объ (рН рас объ сло вып 0,1 кон мет на ная Прим Продолжени табл.2 Определение фентоламина гидрохлоа в крови. 2,0 мл крови, содержащей 500 мкг/мл кусственная смесь), переносят ерную колбу на 25 мл и доводят ем до метки универсальным буфером 11). Аликвотную часть полученного твора (5 мл) экстрагируют двойным емом этилацетата. Этилацетатньй й сливают в выпарительную чашку и аривают на водяной бане до 0,05- мл, хроматографируют и определяют центрацию аналогично предыдущей одике. Результаты олределения фентоламигидрохлорида в крови (искусственсмесь) приведены в табл.3. Таблица 3 Найдено, % Метрологические ер характеристики 94,7X 93,62 94,3S 0,79 93,3Sp 0,8 92.7 Sjf 0,32 92,9S;, 0,32 93.8А 93,62

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФЕНТОЛАМИНА ГИДРОХЛОРИДА путем обработки анализируемой пробы химическими реагентами в среде органического растворителя с последующим анализом полученного раствора, отличающийся тем, что, с целью повышения чувствительности и избирательности определения, обработку ведут последовательно уксусным ангидридом и 30%-ной хлорной кислотой в качестве органического растворителя используют уксусную кислоту, и анализ проводят измерением относительной интенсивности флуоресценции. (Л С

Результаты поиска оптимальной концентрации кислоты и ее количества, а также количества -уксусного ангидрида представлены в табл.4.

20 10 30 20 35 35 50 15 50

1

2 3 4 5 6 7 8 9 Примечание. X,Х„ Х У Интенсивность флуоресценции не изменяется в течение 24 ч. Зависимость интенсивности флуоресценции от времени (С 5 мкг/мл) приведена в табл.5. Таблица5 Q

Таблица 4

0

0,5

0 0,1

40 1.0

Оптим.

6 1.0

36 1,5

32 2.0

30 2,0

25 1,2

30 2,0 концентрация хлорной кислоты, %; количество хлорной кислоты, мл; количество уксусного ангидрида, мл; флуоресценция, %. Продолжение табл.5

Таблица 6