Изобретение относится к аналитической химии, а именно, к способам определения дротаверина гидрохлорида и может быть использовано в лабораториях аптечных управлений и биохимических лабораториях при исследовании фармакокинетики данного препарата. Известен способ спектрофотометри ческого количественного определения дротаверина гидрохлррида, основанный на измерении адсорбции при различных длинах волн в ультрафиолетовой области (360, 305 и 275 нм) fj . Недостаток способа состоит в . его невысокой чувствительностии- не селективности . Цель изобретения - повышение чув ствительности и селективности способа. Указанная цель достигается описываемым способом количественного определения дротаверина гидрохлорида, заключающимся в обработке анали зируемой пробы раствором пермангана та калия в присутствии концентрированной серной кислоты и перекиси водорода с последующим измерением флуоресценции полученного раствора. Максимум возбуждения флуоресценции соединения, полученного в результате взаимодействия дротаверина гидрохлорида с перманганатом калия в кислой среде в области от 320 до 420 нм, а максимум флуоресценции при 471 нм в области от 400 до 550нм. Линейная зависимость интенсивности флуоресценции от концентрации дротаверина гидрохлорида лежит: в об-. ласти от 0,01 до 20 мкг/мл (табл. 1). При содержании 2 мкг/мл в моче и крови открывается полностью (100%), т.е. компоненты крови и мочи не влияют на интенсивность флуоресценции. В лекарственных формах,, в состав которых входит дротаверин гидрохлорида, сопутствующие ингредиенты (наполнители) также не влияют на интенсивность флуоресценции. Пример. Определение 2%-ного раствора дротаверина гидрохлорида в лекарственной форме. 0,5 мл 2%-ного раствора исследуемого вещества переносят в мерную колбу на 100 мп доводят дистиллированной водой до метки и тщательно перемешивают. К 0,5 мл данного раствора прибавляют 8,5 мл дистиллированной воды , 1 мл концентрированно серной кислоты, 2 капли 3%-ного раотвора перманганата калия, энергично встряхивают и через 1 мин добавляют 1 каплю 3%-ного раствора перекиси водорода, перемешивают и измеряют интенсивность флуоресценции полученного раствора.
Содержание дротаверина гидрохлорида определяют по калибровочному графику, для чего в ряд пробирок отмеряют 0,1, 0,3, 0,5, 0,7 и 0,8 мл стандартного водного раствора дротаверина гидрохлорнда с содержанием 10 мкг/мл, доводят все растворы до 9 мл дистиллированной водой, прибавляют 1 мл концентрированной серной кислоты, 2 капли 3%-ного раствора перманганата калия, энергично встряхивают, через 1 мин добавляют 1 каплю 3%-ного раствора перекиси водорода и флуориметрируют.одновременно с растворами исследуемых образцов. По результатам этих измерений строят калибровочный график.
Результаты количественного определения дротаверина гидрохлорида представлены в табл. 2. На каждое , определение взято 0,5 мл 2%-ного ратвора дротаверина гидрохлорида.
П р и м е р 2. Определение дротаверина гидрохлорида в таблетках по 0,04 г.
Точную навеску (0,05 г) мелкоизмельченной таблетки помещают в мерную колбу емкостью 200 мл, прибавляют 50 мл дистиллированной воды и энергично встряхивают 23 мин, доводят объем колбы водой до метки. Тщательно перемешивают. К 0,5 мл данного раствора прибавляют 8,5 мл дистиллированной воды, 1 мл концентрированной серной кислоты, 2 капли 3%-ного раствора перманганата калия, энергично встряхивают и через 1 мин .прибавляют 2 капли 3%-ного раствора перекиси водорода, измеряют интенсивность флуоресценцйи.
Содержание дротаверина гидрохлорида рассчитывают по калибровочному графику, для чего в ряд пробирок отмеряют 0,1, 0,3, 0,5, 0,7 и 0,8 мл стандартного водного раствора дротаверина гидрохлорида с содержанием 10 мкг/мл, доводят все ражтворы до 9 мл дистиллированной водой, прибавляют 1 мл концентриро аннрй серной кислоты, 2 капли 3%-ного раствора перманганата калия, энергично встряхивают, через 1 мин добавляют 1 каплю 3%-ного раствора перекиси водорода и флуориметрируют одновременно с растворами исследуемых образцов. По результатам этих измерений строят Калибровочный график.
Результаты количественного определения дротаверина гидрохлорида в таблетках по 0,04 г представлены в табл. 3.
Примерз, Определение дротаверина гидрохлорида в таблетках в никошпане (0,078 г дротаверина гидрохлорида к 0,022 г никотиновой кислоты).
Точную навеску (0,05 г) мелко измельченной таблетки помешают в мерную колбу емкостью 200 мл, прибавляют 50 мл дистиллированной воды и энергично встряхивают 2-3 мин объем колбы доводят водой до метки Тщательно перемешивают. К 0,5 мл данного раствора прибавляют 8,5 мл дистиллированной воды, 1 мл концентрированной серной кислоты, 2 капли 3%-ного раствора перманганата калия, энергично встряхивают и через 1 мин измеряют интенсивность флуоресценции, предварительно разбавив полученный раствор до 20 мл и взяз на анализ 10 мл.
Содержание дротаверина гидрохлорида рассчитывают по калибровочному графику, для чего в ряд пробирок отмеряют 0,1, 0,2, 0,.3, 0,5, 0,7 и 0,8 мл стандартного раствора (водного) дротаверина гидрохлорида с содержанием 10 мкг/мл, доводят все растворы до 9 мл дистиллированнойводой, прибавляют 1 мл концентрированной серной кислоты, 2 капли 3%-ного раствора перманганата калия энергично встряхивают и через 1 мин добавляют 1 каплю 3%-ного раствора перекиси водорода и флуориметрируют одновременно с растворами исследуемых образцов..
По результатам этих измерений строят калибровочный график. Результаты количественного определения дротаверина гидрохлорида в .таблетках, никошпан представлены в табл.4.
П р и м е р 4. Определение дротаверина гидрохлорида в моче.
К 5 мл мочи прибавляют 5 мл фосфатного буферного раствора(рН 10 затем прибавляют 5 мл хлороформа и энергично встряхивают в течение 5 мин. После расслаивания хлороформный слой сливают в выпарительную чашку. Экстракцию повторяют. 5 мл хлороформа сливают в выпарительную чашку и выпаривают на водяной бане. К осадку прибавляют 9 мл дистиллированной воды, через 1 мин прибавляют 1 .мл концентрированной серной кислоты, перемешивают, прибавляют 5 капель 3%--ного раствора перманганата калия и перемешивают. Через 1 мин прибавляют 1-2 капли 3%-ного раствора перекиси водорода и флуориметрируют одновременно со стандартным раствором.
Содержание дротаверина гидрохлорида определяют по калибровочному графику, для чего в ряд пробирок отмеряют 0,1, 0,3, 0,5, 0,7 и 0,8 мл стандартного раствора (водного) дротаверина гидрохлорида с содержанием 10 мкг/мл, доводят все растворы до 9 мл дистиллированной водой, прибавляют 1 мл концентрированной серной кислоты, 5 капель 3%-ного раствора перманганата калия энергично встряхивают и через 1 мин добавляют 1 каплю 30%-ного раствора перекиси водорода и флуориметрируют одновременно с ра створом исследуемы образцов.По результатам этих измерений строят калибровочный график.
Результаты количественного определения дротаверина гидрохлорида представлены в табл. 5.
П р и м е р 5. Определение дротаверина гидрохлорида в крови.
К 1 мл плазмы крови прибавляют 5 мл фосфатного буфера (рН 8-8,5) 5 мл изоамилового спирта и встряхивают 10 мин.
Слой изоамилового спирта после. расслоения сливают в выпарительную
чашку. Экстракцию повторяют. 5 мл изоамилозого спирта сливают в выпарительную чашку и выпаривают на водяной бане. К осадку прибавляют 9 мл дистиллированной воды, 1 мл концентрированной серной кислоты,.перемешивают и приливают 4 капли раствора перманганата калия и перемешивают.- Через 1 мин прибавляют 1 каплю 30%-ного раствора перекиси водорода, перемешивают и измеряют ин0тенсивность флуоресценции полученного раствора.
Содержание дротаверина гидрохлорида определяют по стандартному рас5твору, содержащему1, 3, 5 или 10 мкг/мл. Для этого к 9 МП стандартного раствора прибавляют .1 мл концентрированной серной кислоты, 4 капли 3%-ного раствора перманганата калия и перемешивают. Через 1 мин
0 прибавляют 1 каплю 30%-ного раствора перекиси водорода, перемешивают и флуориметрируют одновременно с растворами исследуемых образцов.
Таблица 1
Продолжение табл. 2
| название | год | авторы | номер документа |
|---|---|---|---|
| Способ количественного определения гидрохлорида алкалоида 1-тетрагидропальмитина | 1979 |
|
SU857805A1 |
| Способ определения сальсолина гидрохлорида | 1981 |
|
SU957075A1 |
| Способ количественного определения глауцина гидрохлорида | 1981 |
|
SU978045A1 |
| Способ количественного определения1,2,5-ТРиМЕТил-4-пРОпиОНилОКСи-4-фЕ-Нил-пипЕРидиНА гидРОХлОРидА | 1979 |
|
SU834467A1 |
| СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПИРАЗИДОЛА | 1990 |
|
RU2006024C1 |
| Способ количественного определения 2,3-диоксибензойной кислоты | 1978 |
|
SU789750A1 |
| Способ количественного определения 1,2-диокси-9,10-метилендиокси-7н,1,2,4,5,12,12а-гексагидропирроло /3,2,1-D,е/ фенантридина гидрохлорида | 1979 |
|
SU857806A1 |
| Способ определения димедрола в биологических объектах | 1980 |
|
SU930123A1 |
| Способ определения пиразидола | 1980 |
|
SU873060A1 |
| Способ количественного определения парааминосалицилата натрия | 1978 |
|
SU717631A1 |
50
0,0200
Истинное значение определяемой величины:
Содержание дротаверина гидрохлорида в мг через
Формула изобретения
.Способ количественного определений дротаверина гидрохлорида, о т л и ч а ю чц и и с я- тем, что, с целью повышения чувствительности .и селективности способа, пробу анализируемого вещества обрабатывают перманганатом калия в присутствии концентрированной серной кислоты
Таблица 5
и перекиси водорода с последующим измерением флуоресценции полученного при этом раствора.
Ибточнйки информации, принятые во Внимание при экспертизе
