Способ определения ацетилсалициловой кислоты Советский патент 1986 года по МПК G01N21/64 

Изобретение относится к медицине и фармации, а именно к способам определения ацетилсалициловой кислоты и может быть применено для качестве ного и количественного анализа этого соединения в биохимических, токс кохимических и фармацевтических исследованиях. Цель изобретения - повышение чув ствительности и изибрательности определения и сокращение времени анал за. Способ осуществляют следующим об разом. Анализируемуя пробу растворяют в этиловом спирте 96 град, к 1 мл полу ченного раствора добавляют 3 мл про пилового спирта и 1 мл 5%-ной борной кислоты в концентрированной серной кислоте, а затем измеряют интенсивность флуоресценции полученного при этом раствора в ультрафиолетовом св те, спектр возбуждения флуоресценци лежит от 310 до 390 нм с максимумом возбуждения 345 нм, а спектр излуче ния флуоресценции лежит от 380 до 520 нм с максимумом 440 нм. Прямолинейная зависимость между интенсивностью флуоресценции и кон.центрадией ацетилсалициловой кислоты лежит от 0,1 до 45 мкг/мл (табл.1 Зависимость интенсивности флуоресценции от количества пропилого спирта (концентрация ацетилсалициловой кислоты 10 мкг/мл) приведена в табл. 2. Зависимость интенсивности флуоресценции от концентрации борной кислоты (концентрация ацетилсалициловой кислоты 10 мкг/мл, пропилового спирта 3 мл) приведена в табл. 3. Зависимость интенсивности флуоресценции от количества 5%-ной борной кислоты в концентрированной серной кислоте (концентрация ацетилсалициловой кислоты 10 мкг/мл, пропилового спирта- 3 мл) приведе;на в табл. 4. Чувствительность предлагаемого способа равна 0,01 мкг/мл. Пример 1. Качественное определение ацетилсалициловой кислоты. К 1-2 иг препарата мелкоизмельченных таблеток прибавляют 1 мл этилового спирта 96 град, затем 3 мл пропилового спирта, 1 мл 5%-ного раствора борной кислоты в концентриро, ванной серной кислоте и 5мл концент рированной серной кислоты, перемешивают, выдерживают 10-15 мин и измеряют интенсивность флуоресценции, и ультрафиолетовом свейте со светофильтром УФС-3 наблюдают голубую флуоресценцию. Пример.. Количественное определение ацетилсалициловой кислоты в таблетках по 0,5 г. Точную навеску (0,01 г) мелкоизмельченных таблеток помещают в мерную колбу на 100 мл. Добавляют 7080 мл этилового спирта 96 град, тщательно встряхивают и доводят до мет- ки этиловым спиртом. 10 мл полученного раствора переносят в колбу на 100 мл и доводят до метки 96 град этиловым.спиртом. К 1 мл данного раствора прибавляют 3 мл пропилового спирта, 1 мл 5%-ной борной кислоты в концентрированной серной кислоте и 5 мл ко-нцентрированной серной кислоты. Перемешивают раствор, выдерживают 10-15 мин и измеряют интенсивность флуоресценции по отношению к стандартному раствору с содержанием ацетилсалициловой кислоты 10 мкг/мл. Результаты кол15чественного определения ацетилсалии1иловой кислоты в таблетках по 0,5 г представлены в табл. 5. Пример 3. Количественное определение ацетилсалициловой кислоты в лекарственном препарате Аскофен, содержащем в одной таблетке, г: кислота ацетилсалициловая 0,2; фенацетин 0,2; кофеин 0,04. Точную навеску (0,С2 г) мелкоизмельченных таблеток помещают в мерную колбу на 100 мл. Добавляют 7080 мл этилового спирта 96 град, тщательно встряхивают и доводят до метки 96 град этиловым спиртом. 10 мл полученного раствора переносят в колбу на 100 мл и доводят до метки. 96 град этиловым спиртом. К 1 мл данного раствора прибавляют 3 мл пропилового спирта, 1 мл 5%-ного раствора борной кислоты в концентрированной серной кислоте и 5 мл концентрированной серной кислоты. Перемешивают раствор, выдерживают 10-15 мин и измеряют интенсивность флуоресценции по отношению к стандратному раствору с содержанием ацетилсалициловой кислоты 10 мкг/мл. Результаты количественного определения ацетилсалициловой кислоты в таблетках Аскофен представлены в табл. 6.

И р и м е р А, Количественное определение, ацетилсалициловой кислоты в лекарственном препарате Цитрамон содержащем в одной таблетке, г: ацетилсалициловая кислота 0,24; фенацетин 0,18; кофеин 0,03; какао 0,03; лимонная кислота 0,02; сахар 0,5.

Точную навеску (0,02 г) мелкоизмельченных таблеток помещают в мерную колбу на 100 мл. Добавляют 7080 МП этилового спирта 96 град, тщательно встряхивают и доводят до метки 96 град этиловым спиртом. 10 мл полученного раствора переносят в колбу на 100 мл и доводят до метки 96 град этиловым спиртом. К 1 мл данного раствора прибавляют 3 мл пропилового спирта, 1 мл 5%-ного раствора борной кислоты в концентрированной серной кислоте и 5 мл концентрированной серной кислоты. Перемешивают раствор, выдерживают 10-15 мин и измеряют интенсивность флуоресценции . по отношению к стандартному раствору с содержанием ацетилсалициловой кислоты 10 мкг/мп.

Результагы количественного определения ацетилсалициловой кислоты в таблетках Цитрамон представлены в табл. 7.

П р и м е р 5. Количественное определение ацетилсалициловой кислоты в биологическом материале (моча).

К 1 мл мочи прибавляют 5 мл дистиллированной воды, 0,1 мл данного раствора наносят на хроматографическую пластинку Силуфоль-254. Высушивают на воздухе 5-10 мин. Затем помещают в камеру со смесью растворителей ксилол:бутанол (6:1) и хроматографируют восходящим методом. Когда фронт растворителей доходит до конца пластинки, ее вынимают из камеры, сушат на воздухе в течение 10 мин, в ультрафиолетовом свете с длиной волны 254 нм устанавливают локализацию пятна ацетилсалициловой кислоты и пятно с R 0,55, отмеченное по стандарту ацетилсалициловой кислоты, количественно переносят в пробирку, прибавляют 3 мл пропилового спирта, 1 кп 5%-ного раствора борной кислоты в концентрированной серной кислоте, 6 мл концентрированной серной кислоты, перемешивают., выдерживают 10-15 мин и флуориметрируют относительно стандартного раствора с содержанием 0,5; 1,0; 5,0; 10 мкг/мл.

Предлагаемьй флуориметрический способ определения ацетилсалициловой кислоты в 70 раз чувствительнее известного, а высокая избирательность этого способа позволяет использовать его в фармацевтических и контрольноаналитических лабораториях для качественного и количественного анализа в субстанции и примеси его в лекарственных препаратах, центральных заводских лабораториях для контроля производства данного препарата и в санитарно-гигиенических исследованиях для обнаружения ацетилсалициловой кислоты в воздухе производственных помещений и при биофармацевтических, фармакокинетических исследованиях, при разработке оптимальных лекарственных форм, дозы и ритма назначения для оптимизации и ускорения лечения больных.

Подобной реакции не дают и не мешают определению близкие по структуре соединения (бензойная кислота, винная кислота, глютаминовая кислота, никотиновая кислота, фолиевая кислота, аскорбиновая кислота, дегидрохолиевая кислота, амидопирин, аминазин, анальгин, анестезин, антипирин, апрофен, барбамил, бемегрид, бензилпенициллин, бутадиен, викасол, глюкоза, гризеофульвин, декалин, диазо- ЛИН, дикаин, имизин, келлин, кардиамин, крахмал, ксероформ, лактат кальция, левомицетин, мезатън, метацин метионин, молочный сахар, неодикумарин, никотинамид, новокаин, новокаинамид, папаверин, пиридоксин, прегнин, промедол, саркализин, сульфацил, сульфадимезин, уросульфан,

фенолфталеин, хингамин, цнтизин,

этазол), что говорит о высокой избирательности способа.

Предлагаемый способ более экспрессен по сравнению с известным способом. На его осуществление требуется времени в 7,5 раз меньше, чем известным способом, так анализ предлагаемым способом осуществляют за 20 мин в то время как известным - 2,5 ч.

Таблица

Изобретение относится к области аналитической химии, в частности к способу определения ацетилсалициловой кислоты в лекарственных формах и биологических жидкостях. Целью изобретения является повышение избирательности, чувствительности и экспрессности определения. Для этого анализируемую пробу растворяют в этаноле и обрабатьшают 5%-ным раствором борной кислоты в концентрированной серной кислоте в присутствии пропанола. Объемное соотношение анализируемый раствор: пропанол состав(Л ляет 1:3-3,5. Затем добавляют концентрированную серную кислоту и измеряют относительную интенсивность флуоресценции полученного окрашенного раствора. 7 табл.

Таблица 2

Таблица 3

40 51 60 79 80 78 67 67 60 56

1

2 3 4 5 6 7 8 9 10 15 32

Количество 5%-ной борной кислоты в концентрированной серной Кислоте, мл

80 60 70 72 74 76 74 70 68

1

2 3 4 5 6 7 8 9

Таблица 5

10

15

20

25