ГИДРОХЛОРИД 5,6-ДИФЕНИЛ-3-(2-МОРФОЛИНОЭТИЛТИО)-1,2,4-ТРИАЗИНА, ОБЛАДАЮЩИЙ СТРЕСС-ПРОТЕКТИВНОЙ АКТИВНОСТЬЮ Советский патент 1996 года по МПК C07D413/12 A61K31/51 A61K31/535 C07D253/06 C07D295/08 

Изобретение относится к органической химии, а именно к новому биологически активному соединению гидрохлориду 5,6-дифенил-3-(2-морфолиноэтилтио)-1,2,4-триазина, обладающему стресс-протективной активностью, которое может найти применение в медицине.

Целью изобретения является усиление стресс-протективной активности в ряду 1,2,4-триазина.

П р и м е р. Получение гидрохлорида 5,6-дифенил-3-(2-морфолиноэтилтио)-1,2,4-триазина.

К 2,65 г (10 ммоль) 5,6-дифенил-3-меркапто-1,2,4-триазина прибавляют 24 мл 1 н. водного раствора едкого натра и 20 мл спирта и перемешивают до полного растворения. При добавлении водного раствора щелочи вещество в первый момент полностью растворяется, но уже через несколько секунд полученный раствор превращается в густую кашу бледно-желтых кристаллов. После добавления спирта вещество снова переходит в раствор. К полученному раствору при непрерывном перемешивании добавляют раствор 2,91 г (10,59 ммоль) гидробромида 2-морфолиноэтилбромида в 8 мл воды и продолжают перемешивание в течение 10 мин. Продукт реакции выделяется в виде желтой смолы, которая при выдерживании в течение 12 ч кристаллизуется. Твердое вещество растирают в ступке, суспензию фильтруют, осадок промывают водой (3 х 2 мл) и сушат в вакуум-эксикаторе над фосфорным ангидридом. Получают основание 5,6-дифенил-3-(2-морфолиноэтилтио)-1,2,4-триазина в виде желтого кристаллического порошка, выход 3,3 г (87,3%).

К полученному веществу прибавляют 10 мл эфира и затем при перемешивании добавляют по каплям 2 мл концентрированной соляной кислоты. Гидрохлорид выделяется из раствора в виде оранжевой смолы. Жидкость отделяют декантацией и отбрасывают. Для получения кристаллической затравки пробу смолы отбирают в пробирку, прибавляют несколько капель изопропилового спирта, растирают и прибавляют эфир. Жидкость удаляют декантацией и отбрасывают, а остаток смолы в пробирке снова обрабатывают так же. После нескольких операций смола в пробе затвердевает с образованием бледно-желтых, почти бесцветных кристаллов. К основному количеству смолы приливают 5 мл изопропилового спирта, перемешивают до растворения, добавляют 45 мл эфира, затравку и растирают. Вещество превращается в бледно-желтые кристаллы. Затем фильтруют, осадок промывают эфиром (3% 5 мл) и сушат на воздухе. Получают гидрохлорид 5,6-дифенил-3-(2-морфолиноэтилтио)-1,2,4-триазина. Выход 3,21 г (88,9% по отношению к основанию). 3,1 г вещества очищают перекристаллизацией из смеси 10 мл и изопропилового спирта и 15 мл этилацетата. Фильтрат после остывания до комнатной температуры выдерживают в холодильнике при -17^oС. После этого фильтруют, осадок промывают смесью изопропилового спирта и этилацетата (2:1 по объему; 2х4 мл) и сушат при 110^oС. Получают однородный (по данным ТСХ) гидрохлорид 5,6-дифенил-3-(2-морфолиноэтилтио)-1,2,4-триазина. Выход при перекристаллизации 2,3 г (74,2%), бледно-желтые кристаллы, т.пл. 195-196^oС.

Найдено, C 60,34, 60,46; H 5,51, 5,55; Cl 8,24, 8,32; N 13,48, 13,51; S 7,79, 7,51.

C₂₁H₂₃ClN₄OS.

Вычислено, C 60,78; H 5,59; Cl 8,55; N 13,50; S 7,65.

УФ-спектр в воде, λ_макснм(lg ε: 275 (4,318), 344 (3,704).

Исследование стресс-протективной активности гидрохлорида 5,6-дифенил-3-(2-морфолиноэтилтио)-1,2,4-триазина.

В качестве модели длительного стресса была использована методика лишения мышей сна, пищи и воды в медленно вращающемся барабане (0,2 км/ч). Опыты были выполнены на 50 мышах-самцах. Одновременно исследовали две группы животных. После суточного пребывания в барабане животным предоставляли суточный отдых, пищу и воду, после чего их снова помещали в барабан. Указанную последовательность событий сохраняли до гибели большинства животных контрольной группы. Исследуемый препарат вводили на протяжении всего эксперимента два раза в сутки подкожно в дозе 10 мг/кг. Контрольные животные получали в те же сроки физиологический раствор. Результаты опытов приведены в таблице. Статистическую обработку результатов производили по точному критерию Фишера.

Полученные данные свидетельствуют о том, что профилактическое введение препарата в условиях длительного стресса достоверно увеличивает выживаемость животных в этих условиях (р ≅ 0,05).

Влияние препарата на показатели функциональной активности ЦНС исследовали с помощью методики "открытого поля", по совокупности всех поведенческих проявлений (горизонтальной и вертикальной двигательной активности, норкового рефлекса и груминга). Установлено, что введение препарата в стресс-протективной дозе 10 мг/кг подкожно не оказывает достоверного влияния на показатели функциональной активности ЦНС.

Так, общая поведенческая активность животных в обычных условиях (средняя для 10 животных) составляет, балл: в опыте 40,8±4,1, в контроле 41,8±3,0.

Острую токсичность вещества определяли на мышах. Препарат вводили внутрибpюшинно. Статистическую обработку полученных данных проводили по методу Беренса. Найдено, что ЛД₅₀ препарата равно 840 мг/кг массы животного. Эти данные указывают на относительно низкую токсичность и достаточную фармакологическую широту предлагаемого соединения.

Гидхлорид 5,6-дифенил-3-(2-морфолиноэтилтио)-1,2,4-триазина формулы

обладающий стресс-протективной активностью. 1 табл.

Гидрохлорид 5,6-дифенил-3-(2-морфолиноэтилтио)-1,2,4-триазина формулы

обладающий стресс-протективной активностью.