ДИГИДРОХЛОРИД 3-(2-МОРФОЛИНОЭТИЛТИО)-1,2,4-ТРИАЗИНО [5,6-B]ИНДОЛИЛ-5-АЦЕТАМИДА, УСКОРЯЮЩИЙ ПРОЦЕССЫ ВОССТАНОВЛЕНИЯ ПОСЛЕ ФИЗИЧЕСКИХ НАГРУЗОК, ПОВЫШАЮЩИЙ УСТОЙЧИВОСТЬ К ГИПЕРТЕРМИИ, ОБЛАДАЮЩИЙ ПРОТИВОГИПОКСИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТЬЮ Советский патент 1996 года по МПК C07D487/04 A61K31/53 

Изобретение относится к производным триазиноиндола, конкретно к дигидрохлориду 3-(2-морфолиноэтилтио)-1,2,4-триазино [5,6-b]индолил-5-ацетамида формулы 1

ускоряющему процессы восстановления после физических нагрузок, повышающему устойчивость к гипертермии, обладающему противогипоксической активностью.

Целью изобретения является новое производное триазиноиндола, обладающее более высокой восстановительной активностью в ранние сроки после физических нагрузок по сравнению со структурным аналогом - 8-бром-3-(2-диэтиламиноэтилтио)-1,2,4-триазино [5,6-b] индолом (2), а также лучше повышающее устойчивость организма к гипертермии по сравнению со структурным аналогом дигидрохлоридом 8-метокси-3-(2-диэтиламиноэтилтио)-1,2,4-триазино[5,6-b] индола (3) и не уступающее структурному аналогу (3) по уровню противогипоксической активности.

Пример. Получение соединения 1.

Смешивают 10 г (31,7 ммоль) 3-(2-морфолиноэтилтио)-1,2,4-триазино[5,6] индола с раствором этилата натрия (0,8 г, 34,8 мг-атом в 44 мл безводного спирта) и полученный оранжево-красный раствор выпаривают под вакуумом досуха при нагревании на водяной бане (не выше 35^oC). Вязкий сиропообразный осадок сушат в вакууме над едким кали и получают 11 г натриевой соли 3-(2-морфолиноэтилтио)-1,2,4-триазино(5,6)индола. 9 г (26,68 ммоль) указанной натриевой соли растворяют в 40 мл безводного диметилформамида и постепенно прибавляют при перемешивании 2,5 г (26,73 ммоль) хлорацетамида. Вначале все вещество переходит в раствор, но уже через несколько минут образуется осадок продукта реакции. Суспензию оставляют на ночь, прибавляют 100 мл воды, фильтруют, осадок промывают водой до отсутствия сильнощелочной реакции на универсальную индикаторную бумагу и сушат при 100^oС. Получают основание 3-(2-морфолиноэтилтио)-1,2,4-триазино[5,6-b]индолил-5-ацетамида в виде белого кристаллического порошка с бледно-желтым оттенком, выход 8 г (80,6%), т.пл. 244^oC.

Смешивают 7,5 г (20,4 ммоль) указанного основания, 68 мл изопропилового спирта, 5,1 мл конц. HCl, 20 мл воды, нагревают до кипения и фильтруют в горячем состоянии от незначительного количества нерастворимой примеси. Осадок, выпавший из фильтрата после охлаждения, отфильтровывают, промывают 2 раза изопропиловым спиртом (2х25 мл), эфиром (2х25 мл) и сушат при 100^oC. Получают 7,4 г дигидрохлорида 3-(2-морфолиноэтилтио)-1,2,4-триазино[5,6-b]индолил-5-ацетамида. Вещество очищают перекристаллизацией из смеси изопропиловый спирт конц. HCl вода (14,2:1:2,83), 12 мл/г, выход при перекристаллизации 84% Вещество выделяют в виде легких лимонно-желтых кристаллов, т.пл. 186^oC.

Вещество растворимо в воде, устойчиво при хранении негигроскопично, однородно по данным ТСХ.

Строение вещества 1 подтверждается элементным анализом, УФи ПМР-спектрами, а также данными потенциометрического титрования щелочью в воде.

Найдено, С 45,75; H 4,90; Cl 15,75; N 18,80.

C₁₇H₂₀N₆O₂•2HCl.

Вычислено, С 45,84; H 4,98; Cl 15,92; N 18,87.

УФ-спектр в воде, λ_макс, нм (lg ε): 221 (4,22), 268 (4,50), 345 (4,01).

Спектр ПМР в ДМСО-d₆, 100 МГц, d, м.д. 11,83 с (1Н, NH⁺); 8,26; 8,34 д (1Н, Ar); 8,04 с, 7,68 7,50 (2Н, NH, наложение Ar); 7,68 7,50 м (3Н, Ar); 5,16 c (2H, NCH₂CO; 4,42 3,49 м (12H, CH₂).

Результаты исследования биологической активности и токсичности соединения 1 следующие.

Влияние соединения 1 на восстановление физической работоспособности. Опыты выполнены на крысах. Определяли влияние соединения 1 на процессы восстановления работоспособности после максимальных физических нагрузок. Крысы совершали бег на третбане до отказа, после чего им вводили изучаемые вещества 1 и 2 внутрибрюшинно в дозах 20 мг/кг. Контрольная группа получала физиологический раствор. Затем животные повторно совершали бег на третбане до отказа через 1 и 2 ч после исходного пробега, причем каждый временной интервал тестировали на отдельной группе животных. Показано отчетливое положительное влияние соединения 1 на процессы восстановления работоспособности после физических нагрузок, при этом он превосходит по активности препарат-аналог 2 (табл. 1).

Исследование влияния соединения 1 на устойчивость организма к гипертермии. Условия перегревающего микроклимата (40^oC, 30% влажности) создавали в термокамере. Опыты выполнены на мышах-самцах. Исследуемые препараты соединение 1 и структурный аналог 3 в сравнении с препаратом бемитил вводили животным внутрибрюшинно за 1 ч до помещения их в термокамеру в дозах 10 мг/кг. Контрольные животные получали физиологический раствор. Результаты исследования представлены в табл. 2.

Полученные данные свидетельствуют, что соединение 1 повышает устойчивость к гипертермии, в чем существенно превосходит структурный аналог 3.

Исследование противогипоксической активности. Оценку противогипоксической активности соединения 1 проводили на модели гипоксической гипобарической гипоксии в сравнении с препаратом гутимином (гуанилтиомочевиной) и структурным аналогом 3.

Гипоксия воспроизводилась "подъемом" белых мышей в барокамере. Регистрировали выживаемость животных после 45-минутной экспозиции на высоте 11000 м. Коэффициент защиты (КЗ) определяли по формуле , где "a" и "c" число выживших животных в опыте и соответствующем контроле; "b" и "d" - число животных, взятых в опыт (табл. 3).

Гутимин был исследован в одной дозе, так как в меньших дозах он неэффективен. Соединение 1 не уступает в активности аналогам и превосходит их по терапевтической широте (табл. 4).

Таким образом, соединение 1 по своей противогипоксической активности не уступает структурному аналогу и гутимину, однако обладает намного большим терапевтическим индексом, что делает его более безопасным при применении.

Изобретение касается производных гетероциклических веществ, в частности дигидрохлорида 3-(2-морфолиноэтилтио)-1,2,4-триазино[5,6-b] индолил-5-ацетамида, ускоряющего процессы восстановления после физических нагрузок, повышающего устойчивость к гипертермии, обладающего противогипоксической активностью. Цель - создание более активного вещества указанного класса. Синтез ведут реакцией Na-соли 3-(2-морфолиноэтилтио)-1,2,4-триазино[5,6-b] индола и формамида. Выход 80,6%; брутто ф-ла C₁₇H₂₂Cl₂N₆O₂S; т.пл. 186^oC. Коэффициент защиты нового соединения против гипоксии 1,4; против гипертермии степень защиты животных 53% против 30% для бемитила, а степень восстановления после физических нагрузок в сравнении с контролем возрастает на 142%. 4 табл.

Дигидрохлорид-3-(2-морфолиноэтилтио)-1,2,4-триазино(5,6-b)индолил-5- ацетамида формулы

ускоряющий процессы восстановления после физических нагрузок, повышающий устойчивость к гипертермии, обладающий противогипоксической активностью.