Способ диагностики туберкулеза Советский патент 1986 года по МПК A61K39/00 A61B10/00 

Изобретение отнрсится к медицине и может быть использовано для серологической диагностики туберкулеза.

Цель изобретения - упрощение

способа и повышение его точности За счет фиксирования на стекле 0,05%- ной взвеси эритроцитов, сенсибилизированных туберкулезным антигеном.

Способ осуществляется следуницим образом.

Для проведения реакции непрямой иммунофлуоресценции эритроцитарный антигенный туберкулезный диагности- кум разводят физиологическим раствором до получения 0,05%-ной взвеси Для каждой пробы на стекло наносят по 0,1 мл этой взвеси, которую высушивают и фиксируют в сухожаро- вом шкафу при 60°С в течение 50 мин На фиксированный диагностикум наносят по 0,1 мл сыворотки крови обследуемых в разведении 1:4 и инкубируют в течение 30 мин при 37 С и относительной влажности 80-100%.

Полученные препараты отмьшают от непрореагировавшей сыворотки сначала физраствором, а затем водопроводной водой по 10-15 мин, после чего их высушивают при комнатной температуре.

Пример 1. Больной Б., 45 лет. В детстве перенес туберкулез внутригрудных лимфатических узлов. В течение месяца отмечал общую слабость, сухой кашель, боли в левой половине грудной клетки. При флюорографическом обследовании обнаружены изменения в легких.

Госпитализирован с диагнозом: диссеминированный туберкулез легких 5 левосторонняя пневмония При рентгенотомографйческом обследовани выявлена ячеистая деформация легочного рисунка с инфильтрацией по ход сосудов и бронхов в основании верхней доли справа и сливная очаговая инфильтрация в Cg и у корня легкого, слева. После курса противопневмо нической терапии отмечен частичньй положительный рентгенологический эффект.

В целях дифференциации туберкулеза и- пневмонии больной был обследован предлагаемым способом. Для этог эритроцитарный антигенный туберкулезный диагностикум разводят физиологическим раствором до получения

174172

Ос05%-ной взвеси, которую наносят на стекло в количестве 0,1 мл, высушивают и фиксируют в сухожаровом шкафу при в течение 50 мин.

5 На фиксированный диагностикум наносят О,1 мл сьшоротки крови обследуемого в разведении 1:4 и инкубируют в течение 30 мин при З7 с и относительной влажности 80-100%.

10 Полученный препарат промывают физраствором и водопроводной-водой до 10- 15 мин и высушивают при комнатной температуре. Далее препарат обрабатывают антиглобулиновой антивидо15 вой люминесцирующей сывороткой

0,1 мл в разведении 1:16, термоста- тируют при.37°С в течение 30 мин при относительной влажности 80- 100% и тщательно промывают физиоло;Ю гическим раствором и водой. На высушенный препарат наносят забуферен- ный раствор глицерина и покрьшают покровным стеклом.

При просмотре мазка в люминес25 центном микроскопе при увеличении 2250 отметили специфическую люминесценцию антигена в виде светящихся точек на поверхности эритроцитов. Специфичность реакции контролируют

30 путем просмотра мазков, не обработанных сывороткой исследуемого, и препаратов из нормальных эритроцитов барана, обработанных двух- ступенчатьм методом. В контрольных

j,j препаратах отмечали отсутствие спе- цифического свечения. На основании результатов исследования сделали заключение о туберкулезной этиологии заболевания. В дальнейшем выд. явление бактериологическим методом микробактерий туберкулеза в промывных водах бронхов подтвердило диагноз: диссеминированный туберкулез легких в фазе инфильтрации, БК+.

В дайном случае предлагаемым спо собом была проведена дифференциальная диагностика туберкулеза и неспецифического воспалительного заболевания легких.

П р и м е р 2. Больной К.., 47 лет.

Перенес в 1980 году очаговьш туберкулез верхней доли правого легкого. Прошел курс лечения с положительным эффектом. Последние 2 года туберкулезный процесс расценивался как неактивный. При контрольном .флюорографическом обследовании выявлено незначительное нарастание изменений в легких. Госпитализирован

цля определения активности туберкулезного процесса.При рентгенотомогра )ическом обследовании в верхней доле правого легкого - скопление очерченных интенсивных очагов. Проведенные исследования и клинический анализ крови больного были в пределах нормы. Активность туберкулеза была сомнительной.

В целях определения активности туберкулезного процесса больной был обследован предлагаемым способом аналогично примеру 1. В полученном препарате наблюдали специфическое свечение, на основании чего было сделано заключение о наличии активного туберкулеза. В дальнейшем диагноз: очаговый туберкулез верхней доли правого легкого в фазе инфильтрации, БК- (обострение) был подтверж ден положительным эффектом от противотуберкулезного лечения.

В данном случае предлагаемым способом было проведено определение активности туберкулезного процесса.

П р и м е р 3. Вольная М., 59 лет При профилактическом флюорографическом обследовании выявлены изменения в Cg правого легкого. Госпитализирована с диагнозом: инфильтративный туберкулез Cg правого легкого, БК-. При рентгенотомографическом исследовании в Cg правого легкого обнаружено неоднородное затемнение 3x4 см с бугристыми контурами. Природа патологического образования была неясна.

В целях дифференциации туберкулеза и злокачественной опухоли больСоставитель П.Бонарцев Редактор М.Дьшын Техред А.Бабинец Корректор Е. Сиромах

Заказ 1025/8 Тираж 659Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР

по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП Патент, г.Ужгород, ул.Проектная, 4

217417

пая была обследована предлагаемым способом. В препарате, полученном аналогично примеру 1, специфического свечения не наблюдалось. 5 На основании этого было сделано заключение о нетуберкулезной зтио- логии заболевания. Исходя из результатов обследования больной предлагаемым способом и данных клинико- рентгенологического обследования, выставлен окончательый диагноз: рак нижнедолевого бронха правого легкого. Впоследствии больная была проопери- оована. диагноз был подтвержден гистологически.

В данном случае предлагаемым способом была проведена дифференциальная диагностика между туберкулезом и онкозаболеванием легкого.

10

15

20

25

30

35

Достоверность обследования предлагаемым способом на 10% выше, чем известным (88,6-78,6 10,0%) при уровне значимости р 0,05. При этом достигнуто также упрощение способа за счет изъятия операции пригртовле- ния мазков из предварительно выращенных микробактерий туберкулеза, что позволяет повысить технику безопасности. Кроме того| достигается экономия расхода сьшрротки больного (предлагаемый способ по существу является микрометодом, так как .на 1 анализ достаточно 0,025 мл сыворотки крови, что позволяет брать кровь из пальца, тогда как для постановки РИГА необходимо 2-3 мл крови, из которой получают 0,5 мл сыворотки, поэтому был необходим забор крови из вены).