Способ получения клинического декстрана Советский патент 1959 года по МПК C12P19/08 

Изобретение относится к способам получения клинического декстрана путем микробиологического синтеза.

Предлагаемый /способ позволяет повысить выход указанного препарата.

Отличительная особенность способа заключается в том, что к среде, содержащей первичный декстран, добавляется живая культура активного штамма Zenconostoc mesenteroides, выращенная на питательной среде, содержащей необходимые для развития культуры органические кислоты и низшие спирты и не содержащей инициаторов синтеза декстрана (особенно Сахаров мальтозного и изомальтозного ряда).

Способ позволяет, перепрививая указанную живую культуру на синтетическую среду с сахарозой и добавлением иницирующих агентов или без них, обеспечивать синтез декстрана желаемого молекулярного веса.

Пример 1. Берется агарная питательная среда, поросшая Zenconostoc mesenteroides (5% сахарозы; 0,5% Na2HPO4 12Н2О; 0,1% КС1, 0,1% пептона; 1% автолизата дрожжей; дистиллированной воды до 100; рН 7). Бактериальные-клетки отмываются физиологическим раствором поваренной соли и отгоняются на центрифуге. Затем производится декантация, и клетки обрабатываются вновь физиологическим раствором поваренной соли- Эта процедура отмывки повторяется до тех пор. пока в клеточной взвеси не остается О;саждаемый декстран. Как правило, достаточны две промывки.

Затем клеточная взвесь прививается питательному прививочному раствору следующего состава: 1% лимонной кислоты, 0,5% Na2HPO4 12Н2О, 0,1% КС1, 0,1% пептона, 1.0% автолизата дрожжей. рН 7 дистиллированной воды до 100.

№ 121908- 2 -

После того, как достигнута максимальная мутность, этот прививочный раствор добавляется в соотношении 1 : 10 к синтетическому раствору следующего состава: 10% сахарозы, 2% первичного декстрана (молекулярный вес 20.000). q,5% Na2HPO4 12Н2О, 0,1% KCl, 0,1% пептона, 1,0% автолизата дрожжей, рН 7, дигстиллированной воды до 100.

Когда значение рН снизится до 3,9, синтез можно считать законченным. Дальнейшая обработка декстрана производится по известным методам.

Пример 2- Берется небольшое количество слизи, содержаш,ееся в культуре Zenconostoc mesenteroides, и наносится на питательную среду, налитую на дно вертикальной колбы.

Состав питательной среды: 3% агара, 0,5% фруктозы, 0,5% Na2HPO.f 12Н2О, 0,1% KCl, 0,1% пептона, 1,0% автолизата дрожжей, дистиллированной воды до 100.

После интенсивного развития колоний добавляется питательный (прививочный) раствор следуюш,его . Состава: 0,5% пропанола, 0,5% Na2HPO4 12Н2О, 0,1% KCl, 0,1% пептона, 1,0% автолизата дрожжей, рН 7, дистиллированной воды до 100.

Когда достигнуто максимальное замутнение, этот раствор добавляется в соотношении 1 : 100 к синтетическому раствору (см. пример 1).

Когда значение рН снизится до 3,9, |Синтез завершен.

Дальнейшая обработка декстрана производится по известным методам.

Пример 3. Управляемый синтез декстрана.

Прививочные растворы изготовляются в соответствии с примерами 1 и 2- Названные углеродные источники (лимонная кислота, фруктоза, пропанол) могут быть заменены другими подходяш,ими соединениями, как, например, эталон, уксусная кислота, винная кислота и молочная кислота. Прививочные растворы доба1вляются в соотношении 1 : 10.

1)Синтез декстрана желаемого мол. веса 40000. Синтетический раствор: 20% сахарозы, 2,5% первичного декстрана

(мол. вес 10000) q,5% NaaHPDi 12Н2О, 0,1% KCl, 0,1% пептона, 1,0% автолизата дрожжей, рН 7, дистилированной воды до 100Выход равен в среднем 80% расчетных теоретических показателей (мол. вес 40000).

2)Синтез декстрана с расчетом на мол. вес 75 000 (клинический декстран).

Си нтетический раствор: 10% сахарозы, 2Vo первичного декстрана (остальные примеси как в первом случае).

Выход равен в среднем 90% расчетных теоретических показателей (мол. вес 75000).

3)Синтез декстрана с расчетом на мол. вес 150000. Синтетический раствор: 10% сахарозы, 1% первичного декстрана,

(мол. вес 20000) (остальные примеси, как во втором случае).

Выход равен в среднем 85% расчетных теоретических показателей (мол. вес 150000).

4)Синтез декстрана желаемого мол. веса 300000Синтетический раствор: 10% сахарозы, 1,3% первичного декстрана

(мол. вес 75000) (остальные примеси, как во втором случае).

Выход равен в среднем 75% расчетных теоретических показателей (мол. вес 300000).

5)Синтез декстрана ведется с расчетом на оптимальный молекулярный вес (технический декзтран).