Способ анализа аминосахаров Советский патент 1986 года по МПК G01N30/36 

Изобретение относится к аналитической химии, в частности к высокоэффективной жидкостной хроматографии, и может использоваться в химических лабораториях при определении аминосахаров в биологических и других объектах.

Цель изобретения - повышение селективности анализа.

На фиг. 1 показана хроматограмма разделения аминосахаров на колонке (25 смкАаб мм) ультрасфер ip 5 мкм) элюент состава, мас.%; метанол 71,5 додецилсульфат натрия 1,4; дигидро- фосфат натрия 0,11; ортофосфорная .кислота 0,0004; вода остальное, расход элюента мл/мин, давление 200 атм: -п-диметилбензальдегид, 2 ,3-маннозамин, 4,5-глюкозамин,- 6-галактозамин, 7-этаноламин.

На фиг, 2 показана хроматограмма разделения аминосахаров с элюентом состава, мас.%: метанол 66,0.: додецилсульфат натрия 1, дигидрофос- фат натрия 0,09; ортофосфорная кислота 0,0004; вода остальное (обозначения как на фиг. 1).

На фиг. 3 представлена хроматограмма разделения аминосахаров с элюентом состава, мас.%: метанол 77jO; додецилсульфат натрия 1,7; дигидрофосфат натрия 0,14; ортофосфорная кислота 0,0004; вода остальное (обозначения как на фиг. I).

Анализ проводят следующим образомНавеску п-диметиламинобензальдеги да (п-ДМБА) 10 мг растворяют в I мл метанола. Анализируемую пробу или отдельные навески аминосахаров ман- нозаг-шна, .глюкозамина, галактозами- на и этаноламина (по 2 мг) смешивают и растворяют в 1 мл метанола. К 1 мл смеси добавляют 1 мл раствора в метаноле, выдерживают 20 ми при в термостате, после чего оулаждают до комнатной температуры.

Смесь п-ДМБА - производных амино- сахаров и этаноламина разводят в 10 раз элюентом и вводят в хроматограф, проводят разделение на колонке ультрасфер ip, длина колонки 25 см, внутренний диаметр 4,6 мм, зернение сорбента 5 мкм, привитая фаза амино- пропил-силан, температура комнатная, давление 200 кг/см с элюектом, имею щим состав, мас.%: метанол 66,0-77,0 додецилсульфат натрия 1,11-1,7; дигидрофосфат натрия (,) 0,09

0,14; ортофосфорная кислота 0,0004; вода остальное. Элюент имеет ,0- 5,5, расход элюента 1 мл/мин. Детектирование разделенных компонентов осуществляют при длине волны 390 нм. Время анализа 18 мин.

Пример 1. Анализ проводят, используя в качестве злюента следующий состав, мас.%: метанол 71,50; додецилсульфат натрия 1-1,40; дигидрофосфат натрия (NaH РО ) 0,11; вода остальное.

Элюирование ведут при рН 5-5,5.

Хроматограмма представ,лена на фиг. 1, из которой следует, что происходит полное и четкое разделение компонентов анализируемой смеси.

П р и м е р 2. Анализ проводят с элюентом следующего состава, мас.%: метанол 66,0; додецилсульфат натрия 1,4; 0,11; вода остальное.

Элюирование ведут при рН 5-5,5. ,На фиг. 2 приведена хроматограмма разделения аминосахаров и этаноламина.

П р и м е р 3. Способ осуществля- ется также, как в примере 1, но состав элюента следующий, мас.% (мак- симальное соотношение компонентов элюента): метанол 77,0; додецилсульфат натрия 1,7; NaH,,РО( , 0,14; вод остальное.

Злюирование ведут при рН 5-5,5. На фиг. 3 приведена хроматограмма разделения.

П р и м е р 4. Способ осуществляется также, как и в примере 1, но элюент имеет или состав, мас.% (верхнее запредельное соотношение компонентов элюента): метанол 78,0; додецилсульфат натрия 1,8; 0,15; вода остальное, или метанол 65,0; додецилсульфат натрия 1,0; NaH,POj 0,08, вода остальное.

Селективного разделения компонентов смеси в зтог случае не происходит.

Формула изобретения

Способ анализа аминосахаров путем обработки анализируемой пробы ароматическим альдегидом с пост дующим элюированием полученной смеси на хроматографической колонке, заполненной силикагелем с модифицированной поверхностью, в потоке элюен- та, отл.и чающийся тем, что, с целью повышения селективности способа, в качестве ароматического альдегида используют ь-диметилами- нобензальдегид, в качестве элюента используют следующий составj мас.%:

66,0-77,0 1,1-1,7

0,09-0,14 Остальное

и элюирование ведут при рН 5-5,5,

Изобре;тение относится к области аналитической химии, а именно к способу анализа аминосахаров. Цель способа - повышение его селективности. Способ осуществляют обработкой анализируемой пробы- h-диметйламино- бензальдегидом элюированием полученной смеси на хроматографической колонке, заполненной сипикагелем с модифицированной поверхностью. Элюи- рование ведут при рН 5-5,5. В качестве элюента используют следующий состав, мас.%: метанол 66,0-77,0, додецилсульфат натрия 1,1-1,7, ди- гидрофосфат натрия 0,09-0,14, вода остальное. 3 ил. (Л

№ If

20

//

-Ж-

Фив-2

w

t t I I Ij-L

J1-L

ro

Фаг. Э

Составитель В. Резников Редактор В. Ковтун Техред в.Кадар Корректоре. Луговая

Заказ 2283/45 Тираж 778Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР

по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

r f, I-I-I-L

IS