Способ диагностики бактерионосительства брюшно-тифозной инфекции Советский патент 1986 года по МПК A61K39/02 

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для диагностики бактерионосительства брюшнотифозной инфекции.

Цель изобретения - повышение точ- ности диагностики путем выявления L-форм S.typhi с помощью специфической иммунной сыворотки в костном мозге носителя.

Способ осуществляют следующим образим.

Для исследований получают образцы костного мозга путем стернальной пункции. Из пунктата осторожно отделяют пробы ткани самого костного мозга (а на периферической крови) и наносят на, предметное стекло, распределяя его легким движением шлифованного стекла (аналогично приготовлению мазков крови), мазок фиксируют в 96 спирте 15 мин и высутпивагот на воздухе. Препараты обрабатывают по непрямому методу Кунса, используя стандартные специфические иммунные сыворотки к глобулинам кролика, меченные изотиоцианатом флюоресцеина СФИТЦ), и бычий альбумин, меченный родамином а также специфическую гиперт-ммуннук) кроличью сыворотку к L-форме S.typhi, При непрлмом мето- де иммунофлюоресденцни (РИФ) мазки костного мозга обрабатывшот сначала специфическими иммунньвчи сыворотками против L-форм S.Cyphi в .их рабочем разведении, инкубируют при 37 С в течение 30 мин и промывают забуференным физиологическш-i раствором с рН 7,2-7,4, Затем на препарат наносят меченную ФИТЦ ослиную антисыворотку против глобулинов кро- лика, к которой предварительно добавляют раствор бычьего альбумина, конъюгированного с родамином, используемый для контрастирования фона и освобождения от возможного неспе- цифического свечения. Затем мазки снова инкубируют во влажной камере 30 мин при , тщательно промывают забуференным физиологическим раствором с рН 7,2-7,4 и высушивают на воздухе. Реакцию учитывают с помощью люминесцентного микроскопа. Специфическое свечение антигена L-форм S,typhi, присутствующего, как правило, ,на мембранах клеток эритро- цитарного и лимфоидного ряда, а также в цитоплазме макрофагов, является диагностическим признаком и

свидетельствует о носительстве боюга- нотифозной инфекции.

Пример 1, М-ов, 45 лет, В 1975 году перенос брюшной тиф. Диагноз был подтвержден выделением гомо- и копрокультур. После перене -- сенной инфекции сформировалось хроническое бактерионосительство, при котором копрокультуру выделяли в 1980-1981 годах, В 1982 году проведен повторный курс лечения (бактериофаг, диуцефон,ампициллин), после которого как микробиологические (высев крови, костного мозга, кала мочи), так и серологические (РПГА с О- и У1 ант:игенами. реакция В ид ал я , реакция коагглютинации) исследования были отрицательными. Только в препаратах костного мозга в РИФ с сывороткой против L-форм был выявлен.антиген L-форм S.typhi. Это позволило диагностировать у данного больного латентную фазу бактерионосительства и оставить его на диспансерном, учете.

Пример 2, А-ва. 26 лет. В 1977 году перенесла брюшной тиф с атипичной клинической картиной, подтвержденный выделением гемокульту- ры EJ.typhi. После заболевания сформировалось хроническое бактерионосительство с периодическим выделением копрокультуры S.typhi. Пеоднократно полз чала лечение против хронического носительства (курс антибиотиков), после чего устанавливалась фаза латенции. Была обследована в один из таких периодов,, все попытки выявить возбудитель с помощью микробиологических (посйв крови костного мозга, желчи, кала) и серологических методов (реакция Видаля, РПГЛ, реакция коагглютинации) давали отрицательный результат. Только при использовании метода РИФ с антисьшороткой против L-форм S.typhi в препаратах костного мозга был выявлен антиген L-форм, что позволило подтвердить бактерионосительство в латентной фазе.

Пример 3. К-в 46 лет. В 1974 году перенес брюшной тиф, под- твер.жденный выделением гемокультуры S.typhi. Бактерионосительство сформировалось сразу после перенесенного заболевания; с 1974 по 1981 год в посевах кала периодически обнаруживали возбудитель. В период обследования находился в фазе латенции.

312когда факт бактерионосительства не удавалось установить ни бактериологическими (посевы крови, кала, мочи), ни серологическими исследованиями (реакция Видаля, РПГА с О- и Vi-антигенами, реакция коагглютина- ции). Только применение метода РИФ с использованием иммунной сыворотки . против L-форм S.typhi позволило выяРедактор Л.Пчелинская

Составитель М.Васильев

Техред В.Кадар Корректор В.Бутяга

Заказ 3220/7Тираж 660 - Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР

по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. А/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г.Ужгород, ул.Проектная, 4

164

вить антиген возбудителя в препаратах костного мозга, что свидетельствовало о наличии бактерионосительства.

Таким образом, предлагаемый способ позволяет повысить точность диагностики при обследовании больных в латентной фазе.