2-БИС-( β -ХЛОРЭТИЛ)АМИНО-ИЛИ 2-ФЕНОКСИ-5,7-ДИМЕТИЛ -2,6-ДИОКСО-1,3-ДИАЗА -2-ФОСФААДАМАНТАНЫ, ПРОЯВЛЯЮЩИЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВУЮ АКТИВНОСТЬ Советский патент 1995 года по МПК C07F9/22 C07F9/24 A61K31/675 

Изобретение относится к химии фосфорорганических соединений, а именно к новой диазафосфатрициклической системе, представленной 2-бис-(β-хлорэтил)амино- и 2-фенокси-5,7-диметил-2,6-диоксо-1,3-ди- аза-2-фосфаадамантанами общей формулы
H₃C где R -N(CH₂CH₂Cl)₂ или ОС₆Н₅, проявляющими противоопухолевую активность, которые могут найти применение в медицине.

Указанная система может представить интерес в процесс поиска новых биологически активных соединений.

Соединения указанной формулы и их свойства в литературе не описаны.

Целью изобретения является выявление новых производных из класса азафосфаадамантанов, проявляющих противоопухолевую активность.

П р и м е р 1. Получение 2-бис-(β-хлор-этил)амино-5,7-диметил-2,6-диоксо-1,3-диа- за-2-фосфаадамантана (соединение I).

К смеси 3,4 г (0,02 моль) 1,5-диметил-9-оксо-3,7-диазабицикло[3,3,1]нонана и 5,2 г (0,02 моль) дихлорангидрида бис-(β-хлор-этил)амида фосфорной кислоты в 20 мл абсолютного бензола прибавляют по каплям при комнатной температуре в течение 30 мин 4,04 г (0,04 моль) триэтиламина. Перемешивают в течение 2 ч и фильтруют. Фильтрат упаривают в вакууме, к остатку прибавляют 10 мл воды и отфильтровывают, выход 5,1 г (71,4%), т.пл. 145-146^оС (гексан), R_f 0,71 (силуфол, пропанол вода, 7:3, проявитель нингидрин).

Найдено, С 44,00; Н 5,73; N 11,71; Cl 20,50.

C₁₃H₂₂N₃O₂PCl₂
Вычислено, C 44,07; H 6,21; N 11,86; Cl 20,06.

ИК-спектр, ν, см^-1: 1330 (Р=0); 1700 (С=0 кетон).

УФ-спектр (96%-ный этанол), λ_макс (ε), нм: 204 (1150); 238 (1240).

Спектр ПМР (CDCl₃), δ, м.д. 0,95 с (6Н, 2СН₃), 2,8-4,4 м (16Н, 8СН₂).

Масс-спектр, м/е (отн. инт. в): M⁺ 357, 355, 353 (2, 13, 20), 320 (7); 318 (27); 306 (4); 304 (14); 243 (14); 242 (100); 214 (9) 213 (14); 194 (4); 180 (6); 170 (4); 138 (11); 124 (13); 101 (11).

2-Бис- (β-хлорэтил)амино-5,7-диметил-2,6-диоксо-1,3-диаза-2-фосфадамантан представляет собой белое кристаллическое вещество без запаха, нерастворимое в воде, растворимое в спирте, хлороформе, ацетоне.

П р и м е р 2. Получение 2-фенокси-5,7-диметил-2,6-диоксо-1,3-диаза-2-фосфаада- мантана (соединение II).

Получают, как в примере 1, из 1,68 г (0,01 моль) 1,5-диметил-9-оксо-3,7-диазабицикло[3,3,1] нонана, 2,1 г (0,01 моль) дихлорангидрида фенилового эфира фосфорной кислоты и 2,02 г (0,01 моль) триэтиламина, выход 0,8 г (52,3% ), т. пл. 194-195^оС (этанол), R_f 0,60 (силуфол, пропанол вода, 1:4, проявитель нингидрин).

Найдено, С 58,84; Н 6,59; N 9,18; P 9,75.

С₁₅Н₁₉N₂O₃P
Вычислено, С 58,62; Н 6,21; N 9,15; Р 10,13.

ИК-спектр, ν, см^-1: 1280 (Р-О-С); 1330 (Р=О); 1600 (С=С аром.); 1710 (С= О кетон.).

Спектр ПМР (ацетон d₆), δ, м.д. 0,9 с (6Н, 2СН₃); 2,6-4,3 м (8Н, 4СН₂); 7,28 м (5Н, аром.).

Масс-спектр, м/е (отн. инт. в): М⁺ 306(100); 291(3); 278(3); 277(3); 263(6); 262(6); 213(9); 208(6); 184(14); 170(9); 140(6).

2-фенокси-5,7-диметил-2,6-диоксо-1,3-диаза-2-фосфаадамантан представляет собой белое вещество в виде легких хлопьев, без запаха, нерастворимое в воде, растворимое в хлороформе, ацетоне, при нагревании в спирте.

Химиотерапевтические эксперименты и оценку полученных результатов проводили по методике Чернова В.А.

Изучение токсичности соединений I и II проводили на белых беспородных мышах (массой 17-21 г) обоего пола при однократном внутрибрюшинном введении. Количественную оценку токсического действия соединений проводили по абсолютно смертельной (ЛД₁₀₀) и максимально переносимой (МПД) дозам. Животные находились под наблюдением в течение 15 сут после введения исследуемых соединений.

Противоопухолевую активность соединений I и II изучали в отношении пяти перевиваемых опухолей: саркомы 45, лейкоза Швеца (крысы), саркомы 180, асцитной карциномы Эрлиха и лейкоза La (мыши).

Исследуемые соединения вводили животным внутрибpюшинно в виде взвеси, приготовленной на 0,5%-ном растворе карбоксиметилцеллюлозы. В течение эксперимента животных содержали в обычных лабораторных условиях на смешанной диете.

Лечение животных с солидными опухолями начинали на 4-5 сутки после перевивки опухоли, а с асцитной карциномой Эрлиха, лейкозом La и лейкозом Швеца через 24 ч. Курс лечения для крыс составлял 8, для мышей 6 (для лейкоза La 5) ежедневных инъекций. Число животных в подопытной группе составляло 6-8 крыс или мышей, в контрольной 8-10 (для лейкоза La по 3). О терапевтическом эффекте судили по проценту торможения роста солидных опухолей (Т, × 100 где М_к средняя масса опухоли в контрольной группе, М_о то же в опытной группе) и по способности продлевать жизнь (СПЖ) подопытных животных по сравнению с контролем. По данным массы тела подопытных животных за вычетом массы опухоли в конце опыта определяли степень общетоксического действия соединений (К_р,). Полученные данные приведены в табл.1 и 2.

Результаты экспериментов обработаны статистически по методу Стьюдента-Фишера, данные достоверны при α ≥ 0,95.

Установлено, что соединения I и II являются малотоксичными веществами (см. табл. 1). При однократном введении белым мышам предлагаемые соединения проявляют значительно меньшую токсичность, чем известный противоопухолевый антиметаболит 5-фторурацил. Гибель мышей от токсических доз соединения I наступает в первые сутки, а соединения II на 3-4 сутки опыта.

В результате экспериментального исследования (см.табл.2) установлено, что по отношению к саркоме 45 сравнительно высокую противоопухолевую активность проявляет соединение II, которое подавляет рост данной опухоли на 52,5% и не оказывает токсического воздействия на организм подопытных животных. Соединение II подавляет рост опухоли саркома 180 на 42% На этом штамме эффективность соединения I составляет 33,6% При этом оба соединения не вызывают развития общетоксических явлений в виде резкого падения массы подопытных животных. Оба соединения не активны по отношению к асцитной карциноме Эрлиха и лейкозу La (мыши С₅₇/Bl).

По сравнению с известным противоопухолевым препаратом 5-фторурацилом описываемые соединения выгодно отличаются меньшей токсичностью. Соединения I и II в 5 и 12,5 раз менее токсичны, чем 5-фторурацил, ЛД₁₀₀ которого равна 200 мг/кг, а МПД 75 мг/кг. По действию на саркому 45 и 180 соединение I проявляет равную с 5-фторурацилом активность. Соединение II оказывает более сильное угнетающее действие на рост саркомы 45, чем 5-фторурацил, и имеет равную с последним активность в отношении саркомы 180.

Таким образом, 2-бис-(β-хлорэтил)амино- и 2-фенокси-5,7-диметил-2,6-диоксо-1,3-диаза-2-фосфаадамантаны являются представителями нового класса химических соединений и отличаются от известных новым сочетанием известных связей. Предлагаемые соединения раскрывают широкие возможности в синтезе новых химических соединений, обладающих биологической активностью, в частности противоопухолевой.

Изобретение касается химии фосфороорганических соединений, в частности 2-бис( b хлорэтил)амино-I или 2-фенокси-5,7-диметил-2,6-диоксо-1,3-диаза-2-фосфаадамантанов (II), проявляющих противоопухолевую активность, которые могут найти применение в медицине. Для выявления производных среди азафосфаадамантанов, проявляющих указанную активность, получены новые соединения I и II. Синтез соединения 1 или II ведут из 1,5 диметил-9-оксо-3,7-диазабицикло[3,3,1] нонана и дихлорангидрида бис-( b -хлорэтил)амида или фенилового эфира фосфорной кислоты в среде абсолютного бензола в присутствии триэтиламина при перемешивании в течение 2 ч с последующим упариванием и осаждением из остатка водой целевого соединения I или II. Выход, т. пл. °С: I 71,4; 145-146; II 52,3; 194-195. Испытания показывают, что соединения I и II проявляют противоопухолевую активность в отношении саркомы, лейкоза и имеют терапевтический эффект (% торможения опухоли), равный для I 33,6-35 и для II 42,0-52,5 (у известного 5-фторурацила 25-49). Смертельная доза ЛД₁₀₀ и максимально переносимая доза МПД у соединений I и II соответственно равны 1000 и 850; 2500 и 2000 (у 5-фторурацила 200 и 75). 2 табл.

2-Бис-( β -хлорэтил)амино- или 2-фенокси-5,7-диметил-2,6-диоксо-1,3-диаза-2-фосфаадамантаны общей формулы

где R N (CH₂CH₂CI)₂ или OC₆H₅,
проявляющие противоопухолевую активность.