Способ определения функциональной активности фагоцитирующих клеток Советский патент 1986 года по МПК G01N33/80 

1

Изобретение относится к медицине, в частности к иммунологии.

Целью изобретения является ускорение и упрощение способа за счет использования цельной взвеси лейкоцитов.

Способ осуществляют следующим образом.

Готовят чашки Петри (40 мм) со стандартными лунками в агарозной среде, состоящей из 250 мг агарозы (ЧССР), 23,0 мл дистиллированной воды, 3,0 мл 10%-ного концентрата среды 199, 3,0 мл сыворотки человека и 0,6 мл 7,5%-ного раствора бикарбоната натрия (расчет на 10 чашек). Лейковзвесь получают спонтанным осаждением эритроцитов в растворе желатины. Готовят рабочую концентрацию лейкоцитов 5ИО кл/мл в среде 199. Клетки вносят в лунки, после чего чашки инкубируют при 37°С в увлажненной атмосфере воздуха, содержащей 5% СО, в течение 6 и 24 ч После инкубации клетки фиксируют 45%-ным раствором формал11на 15 мин, удаляют механическим путем агарозу, чашки отмывают под струей теплой воды и высушивают. Спонтанную мигрцию оценивают при микроскопии (МБС-9,56-кратное увеличение), измеряя зону миграции с помощью окуляр- микрометра.

Величину спонтанной миграции (СМ) клеток крови больных и одного из доноров сравнивают со СМ клеток второго донора, принимая миграцию клеток второго донора равной 1,0. Высчитывают индекс спонтанной миграции (ИСМ) путем деления величины СМ клеток больного на ве.тшчину СМ клеток донора.

Пример 1. Больная У, 41 года, диагноз бронхиальная астма

ор М.Циткина 4714/48

Составитель В.Решетняк Техред, И, Попович

Коррек Подпис

Тираж 778 ВНИИПИ Государственного комитета СССР

по делам изобретений и открытий 113035, Москва, , Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

543882

инфекционно-зависимая, средней степени тяжести, фаза ремиссии.

При обследовании: ИСМ гранулоди- тов 2,9, мононуклеароБ 1,5; лейко- 5 цитов (6 ч) 5,0; лейкоцитов (24 ч) 1,8.

Таким образом, как в способе- прототипе , так и Б предлагаемом способе выявлена существенная стимуля- 10 ция миграционной активности клеток крови.

Пример 2. Больная Ш, 25 лет, диагноз бронхиальная астма атопи- ческая, средней степени тяжести, 15 фаза ремиссии.

При обследовании: ИСМ гранулоци- тов 0,21, мононуклеаров 0,3; лейкоцитов 0,25 (инкубация 5,5 ч); лейкоцитов 0,4 (инкубация 23,5 ч).

Таким образом, при обследовании обеими способами выявлено угнетение миграционной активности всех видов клеток.

Пример 3. Донор К, 25 лет, практически здоровый человек.

При обследовании: ИСМ грануло- цитов 0,9, мононуклеаров 1,0, лейкоцитов 6,5 ч 1,05, лейкоцитов 24,5 ч 0,95.

Формула изобретения

20

25

30

Способ определения функциональной активности фагоцитирующих клеток путем инкубирования гранулоцитов

, и мононуклеаров крови под агарозой с последующей оценкой результатов их спонтанной миграции, отличающийся тем, что, с целью ускорения и упрощения способа, из крови

.Q вьщеляют взвесь лейкоцитов, затем инкубируют ее в течение 6+0,5 ч и определяют миграцию гранулоцитов, далее инкубируют пробу дополнительно 18±0,5 ч и определяют спонтанную миграцию мононуклеаров.

Корректор М.Максимишинец Подписное

Изобретение относится к иммунологии. Цель изобретения - ускорение и упрощение способа за счет использования цельной взвеси лейкоцитов. Готовят чашки Петри со стандартными лунками в агарозной среде. При спонтанном осаждении эритроцитов в растворе желатины получают лейковзвесь. Готовят рабочую концентрацию лейкоцитов 5«10 кл/мл в среде 199. Клетки вносят в лунки. Затем чашки инкубируют в течение 6 и 24 ч. После этого клетки фиксируют раствором формалина. Удаляют агарозу. Чашки отмывают, высушивают. Спонтанную миграцию оценивают при микроскопии, измеряя зону миграции с помощью окуляр-микрометра. Величину спонтанной микрации (СМ) клеток крови больных и первого из доноров сравнивали § со СМ клеток второго донора. Прини- 1 мают СМ клеток второго донора рав- Iwr ной 1,0. Высчитьшают индекс спонтанЧ ной миграции по отношению величины | СМ клеток больного к величине СМ 2 клеток донора-. to ел 4 QO СХ) 00